JPS58185599A - Preparation of alpha,alpha-trehalose-6,6'-fatty acid diester - Google Patents

Abstract

PURPOSE:To obtain the titled compound having anticancer action and activating action on reticuloendothelial functions easily in high yield, by reacting a fatty acid with 2,3,2',3'-tetra-O-benzyl-alpha,alpha-trehalose, and removing the benzyl groups. CONSTITUTION:2,3,2',3'-Tetra-O-benzyl-alpha,alpha-trehalose of formula I is reacted with a fatty acid of the formula RCOOH (RCO is <=30C fatty acid residue) or active derivative thereof, e.g. stearoyl chloride, in a solvent in the presence of a deacidifying agent, e.g. pyridine, to give a 2,3,2',3'-tetra-O-benzyl-alpha,alpha-trehalose-6,6'- fatty acid diester of formula II (Bn is benzyl). The benzyl groups are then removed in the presence of a reducing catalyst, e.g. palladium black, to afford the aimed compound of formula III, e.g. 6,6'-di-O-stearoyl-alpha,alpha-trehalose.

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なα、α−トレハロース−６，６′−脂肪
酸ジエステルの製造方法に関する。DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The present invention relates to a novel method for producing α,α-trehalose-6,6'-fatty acid diester.

α、α−トレハロースはグルコース２分子よりｍ成され
る所蘭二楯拳の一檜であり、自然界に広く分布する化合
物である。そしてこの化合物の酵導体も檀々合成され、
その４に埋活性が噴射されている。例えば、脂肪酸の結
合位置が異なるも橿のジエステル類の混合物が抗腫瘍作
用を有することが報告されている。α, α-Trehalose is a compound composed of two molecules of glucose, and is widely distributed in nature. Fermented derivatives of this compound were also synthesized,
4. Buried activity is injected. For example, it has been reported that a mixture of diesters having different fatty acid binding positions has an antitumor effect.

本発明者らは、α、α−トレハロースの６．６′−脂肪
酸ジエステルについて種々研究をおこなっていたが、公
知のα、α−トレハロース−６、６’−脂肪酸ジエステ
ルの製造方法は当該＠實を有利に製造する方法として満
足できるものでないとの結！ｉｃ達した。The present inventors have conducted various studies on the 6,6'-fatty acid diester of α,α-trehalose, but the known method for producing α,α-trehalose-6,6'-fatty acid diester is The conclusion is that it is not a satisfactory method for producing it advantageously! IC reached.

すなわち、従来α、α−トレハロース−６，６′−脂肪
酸ジエステル（１）　；　（以下単ｔｃＦトレハロース
脂肪酸ジエステル」という）は例えばυの方法によりｌ
ｌ！！造されていた（　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ　ｒ
（ｅｅｅａｒｃｈ。That is, the conventional α,α-trehalose-6,6'-fatty acid diester (1) (hereinafter referred to as "single tcF trehalose fatty acid diester") is prepared by, for example, the method of υ.
l! ! Carbohydrate
(eeearch.

４４．３０８（１９７５））。44.308 (1975)).

以下余白 （ＩＩ　）　　　　　　　　　　　　　　（Ｉｌｌ・）
（■′） （■′） １−１ （■′） （式中、Ｒ’Ｑ　Ｏはアシル基を示し、ＴＭ８はトリメ
チルシリル基を示す）しかしながら、この方法は、■各
工程の収率が低いため、全体としての収率が患い、■（
ＩＩＩ’）から（■′）への選択的変換が暖かしく、操
作が繁雑となる、■高価であるＴＭＢ化剤をず用するた
め、経済的に不利である等の欠点を有し、大音合成を目
的とする工業的製法としては到底採用し雌いものであっ
た。Below margin (II) (Ill・)
(■') (■') 1-1 (■') (In the formula, R'Q O represents an acyl group, and TM8 represents a trimethylsilyl group.) However, this method has a low yield in each step. Therefore, the overall yield suffers and ■(
The selective conversion from III') to (■') is warm and the operation is complicated, and the expensive TMB-forming agent is not used, which is economically disadvantageous. As an industrial manufacturing method for the purpose of sound synthesis, it was impossible to adopt this method.

そこで、本発明者らは工業的ｔｌｅ用し得るトレハロー
ス脂肪酸ジエステルの製造方法に関し駅意検討をおこな
った結果、α、α−トレハロース（１）を２．５．２’
、５’−テトラ−０−ベンジル−α。Therefore, the present inventors conducted an investigation into a method for producing trehalose fatty acid diester that can be used for industrial purposes.As a result, α, α-trehalose (1) was
, 5'-tetra-0-benzyl-α.

α−トレハロース（１１１）となし、次いでこれに脂肪
酸（ＩＶ）又はその活性訪導体を反応させて新規な中間
体２　、３　、２’　、　５’−テトラ−０−ペンシル
−α。α-trehalose (111) and then reacted with fatty acid (IV) or its active conductor to obtain a novel intermediate 2,3,2',5'-tetra-0-pencyl-α.

α−トレハロース−６、６’　−脂ａ７ｊ酸ゾエステル
■）を得、更に還元触媒を用いてこれを還元、脱ペンシ
ル化すれば有利にトレハロース脂肪酸ジエステル（Ｉ）
が得られることを見出し、本発明を完成した。If α-trehalose-6,6'-fatty a7j acid zoester (■) is obtained, and further reduced and depensylated using a reduction catalyst, trehalose fatty acid diester (I) can be obtained.
The present invention was completed based on the discovery that the following can be obtained.

本発明は、次の反応式で示される。The present invention is shown by the following reaction formula.

（１） （Ｖ） Ｈ （１） （式中、ＲＱＯは炭素１２５０以下の指訪酸残基を示Ｌ
％　　”ｎはベンジル基を示ス） 本発明方法において、式（ｉｌｌ）で表わされる２゜３
　、２’　、　５’−テトラ−０−ペンシル−α、α−
トレハロースは、常法により式（（Ｉ）で表わされるト
レハロースにベンズアルデヒドを作用せしめて４゜６　
、４’　、　６’−シー０−ベンジリデン−α、α−ト
レバロースとし、ついでペンシルクロリドで２゜５　、
２’　、　５’−テトラ−０−ベンジル体とし、ＦＥ［
酸を作用せしめることにより得られる。(1) (V) H (1) (In the formula, RQO represents a finger acid residue with carbon 1250 or less L
% "n represents a benzyl group) In the method of the present invention, 2゜3 represented by the formula (ill)
, 2', 5'-tetra-0-pencyl-α, α-
Trehalose is produced by reacting benzaldehyde with trehalose represented by the formula (I) using a conventional method.
, 4', 6'-C0-benzylidene-α,α-trevalose, and then 2°5 with pencil chloride,
2', 5'-tetra-0-benzyl body, FE[
Obtained by the action of acid.

また、化合物（ＩＩＩ）と脂肪酸（ＩＶ）又はその活性
酩導体との反応は一斂のエステル化反応の条件に従い、
通常、ビリシン、トリエチルアミン等の脱酸剤の存在下
、１モルの化合物（ＩＩＩ）に対し、好ｆしくに１．８
〜２．４モルの割合の脂肪酸（ＩＶ）又はそのｒ占性誘
導体を反応させることＫよりおこなわれる。In addition, the reaction between compound (III) and fatty acid (IV) or its active derivative is carried out according to the conditions of a single esterification reaction,
Usually, in the presence of a deoxidizing agent such as bilicin or triethylamine, f is preferably 1.8 to 1 mol of compound (III).
This is carried out by reacting K in a proportion of ~2.4 mol of fatty acid (IV) or its r-occupied derivative.

この反応は、溶媒の存在又は不存在下、水冷下〜６０℃
で１〜２４時間おこなうのが好ましい。This reaction is carried out in the presence or absence of a solvent and under water cooling at ~60°C.
It is preferable to do this for 1 to 24 hours.

ここで用いられる溶媒としては、例えば増化メチレン、
クロロホルム、ベンゼン、トルエン、エーテル、テトラ
ヒドロフラン、ジオキサン等が挙げられる。・ 斯くして得られた化合物（Ｖ）の還元的脱ペンシル反応
は、１モルの化合物（Ｖ）に対し好ましくは０．５〜１
０モルの還元触媒を用い、適当な溶媒中で接触還元する
ことによりおこなわれる。Examples of the solvent used here include enriched methylene,
Examples include chloroform, benzene, toluene, ether, tetrahydrofuran, dioxane and the like. - The reductive depensylation reaction of the compound (V) thus obtained is preferably carried out in an amount of 0.5 to 1 mol per mol of compound (V).
This is carried out by catalytic reduction in an appropriate solvent using 0 mol of a reduction catalyst.

還元触媒としては、パラジウム黒、パラジウム−炭＊、
　ラネーニッケル等があげられる。また、ここで用いる
溶媒としては、メタノール、エタノール、インプロパツ
ール等のアルコール類；クロロホルム、堪化メチレン等
のハロゲン化物及びこれらの混合溶媒が挙げられる。As a reduction catalyst, palladium black, palladium-charcoal*,
Examples include Raney nickel. In addition, examples of the solvent used here include alcohols such as methanol, ethanol, and impropatol; halides such as chloroform and methylene chloride; and mixed solvents thereof.

本発明の製造方法は、式（ｊｌ）、 Ｈ で表わされるα、α−トレハロースの水酸基がエステル
化に対し、それぞれ反応性が異なる事実を利用するもの
である。即ち、本発明は化□合物（ＩＩ）が対称形であ
り、各水酸基の反応性は６．６’＞＞２　、２’＞５　
、５’＞４　、４’の順であるから２．ｚ及び５．５′
位の水酸基を保護してエステル化反応を行λば、反応性
の最も低い４．４′位はエステル化されず、６，６′位
のみ位置選択的にエステル化が起り、伏いて２　、５　
、７　、５’位の保賎基を除去すれば目的とする６、６
′−ジエステルのみが得られるという知見に基（もので
ある。したがって本発明方法によればα、α−トレノ１
０−スー６．６’−脂肪酸ジエステルが容易に高収率で
、しかも島純度で得られる。The production method of the present invention utilizes the fact that the hydroxyl groups of α,α-trehalose represented by the formulas (jl) and H have different reactivity toward esterification. That is, in the present invention, compound (II) is symmetrical, and the reactivity of each hydroxyl group is 6.6'>>2, 2'>5
, 5'>4, 4', so 2. z and 5.5'
If the esterification reaction is carried out by protecting the hydroxyl group at the λ position, the 4,4' position, which has the lowest reactivity, will not be esterified, and esterification will occur regioselectively only at the 6,6' position, and the 2, 5
, 7, by removing the binding group at the 5' position, the desired 6, 6
This is based on the knowledge that only '-diester can be obtained. Therefore, according to the method of the present invention, α, α-threno1
O-su6.6'-fatty acid diesters are easily obtained in high yields and with high purity.

次に、本発明方法で得られるトレハロース脂肪酸ジエス
テル（１）の条理作用を示す。Next, the conditioning effect of trehalose fatty acid diester (1) obtained by the method of the present invention will be shown.

（１）トレハロースジエステル誘導体の殺ｄｉｄ作用ニ
ドレバロースジエステル酩導体の殺細胞作用の慎肘には
りコーケミアＬ−５１７８Ｙ＃ｌ胞を用い、これを１０
％牛脂児血渭を宮むＲＰＭＩ　１６４０培地中で１０”
１ｖＡ／１ＩＬｊとし、この培地中に試料を所定の一度
となるように加λた。３７−０の５％ＣＯ。(1) Cytocidal effect of trehalose diester derivatives To demonstrate the cytocidal effect of nidrevalose diester derivatives, use Corkemia L-5178Y #l cells and inject 10
% beef fat in RPMI 1640 medium
1 vA/1 ILj, and the sample was added to this medium at a predetermined time. 37-0 5% CO.

インキュベーター中で４８時間培養した後、生細胞数を
顧ｌｌｉ鏡下に計数し、対照群と比較して増噴率を求め
、対数確率紙上にプロットし、得られた直載より１ＯＳ
Ｏ瞳を求めた。試料一度は２５．５０゜１００．２００
及び４００μＩ／ＩＬｔとした。After culturing in an incubator for 48 hours, the number of living cells was counted under a Gelli microscope, the increase rate was determined by comparing it with the control group, and plotted on logarithmic probability paper.
I asked for O-pupil. Sample once is 25.50°100.200
and 400μI/ILt.

この結果を第１表に示す。The results are shown in Table 1.

［１表 （２）軸網内反糸機能に対する賦活効果：実験方法は、
所鯖、カーボンクリアランス法に依り、軸網内反糸細胞
の貧食能に対する賦活効果を測定した。４週令、体重２
０〜２５ｇのｄｄＹ雄性マウス１ｎ１０匹に、被検化合
物を滅耐生理食塙漱に懸濁して所定量を腹腔内に投与し
た。標準条としてずイモデン（Ｚｙｍｏ８ａｎ　）を同
ｍＫ投与し、対照群には滅菌生理食堪液のみを同様に投
与した。[Table 1 (2) Activation effect on shaft network varus thread function: The experimental method was as follows:
Tokoro, the activation effect on the phagocytic ability of the axolotl inversion cells was measured using the carbon clearance method. 4 weeks old, weight 2
The test compound was suspended in sterile saline and a predetermined amount was intraperitoneally administered to 10 ddY male mice weighing 0 to 25 g. Zymo8an was administered at the same mK as a standard treatment group, and sterile physiological saline alone was administered to the control group in the same manner.

破慣化合物投与２４時間後、カーボン１．６〜１０．１
耐の濃度ＶＣ２Ａ製したペリカンインク（ｃｏ　／１４
５１ａ）をマウスの尾静脈内ＫＯ，１１１ｊ／１０ｇ宛
注射し、直ちに一方の眼窩静脈叢よりプーリピペットを
用いて０．０２１４採血し、０．１憾炭酸ナトリウム水
溶液２．５Ｒｔ中に加えて溶血させた。更に正確に４分
後、他方の眼窩静獣寮より０．０２１４採血し、同様に
操作したのち、それぞれ波長ｂキロ；６００　ｎｍ［お
けルｆｉ光ＩＩ　ヲ１１１＋１　定Ｌ’、）７プサイテ
イツク　インデックスに値及びデイモデン投与群に対す
る相対的活性（Ｔ／Ｚ　）をそれぞれ丼出し、８２表に
示した。24 hours after administration of habit-breaking compound, carbon 1.6-10.1
Pelikan ink (co/14) made with VC2A resistant density.
51a) was injected into the tail vein of a mouse to KO, 111j/10g, and immediately 0.0214 blood was collected from one orbital venous plexus using a pulley pipette, and added to 0.1 aqueous sodium carbonate solution at 2.5 Rt for hemolysis. I let it happen. After exactly 4 minutes, 0.0214 blood was collected from the other orbital cavity and treated in the same manner. The values and the relative activity (T/Z) for the Deimoden administration group are shown in Table 82.

ファゴサイテイツク　インデックスに値：２−　Ｔ１ 但し、０１はカーボンインク投与直後の吸光度０１１は
　　　　　　　Ｉ　４分後　ＩＴ＠　−Ｔｌ−４（ｍｉ
ｎ）とする。Value of phagometry index: 2-T1 However, 01 is absorbance immediately after administration of carbon ink. 011 is I 4 minutes later IT@-Tl-4 (mi
n).

相対的活性（Ｔ／Ｚ）： デイモデン投与群に対する相対的活性（Ｔ／Ｚ憾）但し
、ＫＴは被検化合物投与群の平均に値Ｋｚはヂイモデン
　ｌ ＫＯは　対　照　群　の　　　　Ｉ　とする。Relative activity (T/Z): Relative activity (T/Z) with respect to the Deimoden administration group. However, KT is the average value of the test compound administration group, Kz is the Diimoden I, and KO is I of the control group.

第　２　表 以上の如くトレハロース脂肪酸ジエステルは抗癌作用及
び網内糸機程に賦活作用を有するものである。As shown in Table 2, trehalose fatty acid diester has an anticancer effect and an activating effect to the extent of reticulum.

本発明方法により製造されるトレノ・ロース脂肪酸ジエ
ステルの毒性は、例えばこれに＠似する物質であるショ
糖脂肪酸エステル類が食品添加物に指定され、無害な界
面活性剤として食品、医薬品、化粧品等圧広く使用され
ていることから明らかな如く殆んど毒性のない安全な化
合物である。The toxicity of Trenorose fatty acid diester produced by the method of the present invention is such that, for example, sucrose fatty acid esters, which are similar substances, are designated as food additives, and are used as harmless surfactants in foods, pharmaceuticals, cosmetics, etc. It is a safe compound with almost no toxicity, as evidenced by its widespread use.

また、これを医薬品、例えば免疫賦活剤として使用する
場合は、経口、非経口等の投与形態に応じた各檜剤型、
例えば錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、液剤等の経口
投与剤；皮下、筋肉若しくは静脈注射剤、輸液混合用剤
または坐剤等の非経口投与剤とすることができる。In addition, when using this as a pharmaceutical, for example, an immunostimulant, various hinoki formulations depending on the administration form such as oral or parenteral,
For example, oral preparations such as tablets, capsules, powders, granules, and liquid preparations; parenteral preparations such as subcutaneous, intramuscular or intravenous injections, infusion mixtures, or suppositories can be used.

上記製剤化は、自体公知の方法によってなし得る。すな
わち、トレハロース脂肪酸ジエステルなデンプン、乳糖
、マンニトール等の賦形剤；カルボキシメチルセルロー
スナトリウム、ヒＦロキシプロビルセルロース等の結合
剤：結晶セルロース、カルざキシメチルセルロースカル
シウム等の崩壊剤：タルク、ステアリン酸マグネシウム
等の滑沢剤；軽貴無水ケイ酸等の流動性向上剤等を通宜
組み台わぜて処方することにより錠剤、カプセル剤、散
剤又は′＠粒剤を製造することができる。また、教則、
注射剤は、植物油等にトレハロース脂肪酸ジエステルを
浴解し、油性注射剤とするか、常法によって水等に溶解
又は懸濁させてシロップ剤等とすることにより製造する
ことができる。史に坐剤とするＫは、通常用いられる基
剤、例えばカカオ膓、合成油脂等に常法により分散後固
化させることによりＭ造することができる。The above formulation can be performed by a method known per se. In other words, excipients such as trehalose fatty acid diester starch, lactose, and mannitol; binders such as sodium carboxymethylcellulose and hydroxyprobyl cellulose; disintegrants such as crystalline cellulose and calcium carboxymethylcellulose; talc and magnesium stearate. Tablets, capsules, powders, or granules can be produced by mixing and formulating lubricants such as; fluidity improvers such as light noble silicic anhydride. In addition, the instructional
Injectables can be produced by dissolving trehalose fatty acid diester in vegetable oil or the like to form an oil-based injection, or by dissolving or suspending it in water or the like using a conventional method to form a syrup or the like. K, which is used in the form of suppositories, can be made into M by dispersing it in a commonly used base, such as cacao powder, synthetic oil, etc., and then solidifying it by a conventional method.

本発明方法によるトレハロース脂肪酸ジエステルの投与
量は、その疾患の檻度によっても異なるが、通常取入に
おいて経口投与の場合には０．１〜２０００η／ゆ、非
経口投与の場合は０．０５〜１０００＃１９／ｍを１日
１回ないし数回に分けて投与するのが好ましい。The dosage of trehalose fatty acid diester according to the method of the present invention varies depending on the severity of the disease, but in general, it is 0.1 to 2000 η/y for oral administration, and 0.05 to 2000 η/y for parenteral administration. It is preferable to administer 1000 #19/m once a day or in divided doses.

次に実施例及び参考例を挙げ本発明を説明する。Next, the present invention will be explained with reference to Examples and Reference Examples.

実Ｎ？１１１ ２、’）、２’、５’−テトラ−０−ベンゾルーα。Real N? 111 2,'), 2',5'-tetra-0-benzo-α.

α−トレハロース２．ＤＩにビリシン２０１及びジクロ
ルメタン２０１Ｌ／を加えて溶かし、承句下０°Ｃにお
いて攪拌しながらステアロイルクロライド１．８ｇを温
顔した。６０分攪拌後室温において更に１時間攪拌し、
反応混合物を氷水中に注ぎ、クロロホルムで抽出した。α-trehalose2. 201 L of bilicin and 201 L of dichloromethane were added and dissolved in DI, and 1.8 g of stearoyl chloride was added to the mixture while stirring at 0°C. After stirring for 60 minutes, the mixture was further stirred at room temperature for 1 hour.
The reaction mixture was poured into ice water and extracted with chloroform.

クロロホルムを減圧上留去し、残留物をシリカデル力ラ
ムうロマトグラフイーにより精製して２．５．２’、５
’−テトラ−０−ペンシル−６，６′−シー０−ステア
ロイル−α。Chloroform was distilled off under reduced pressure, and the residue was purified by silica del column chromatography.
'-tetra-0-pencyl-6,6'-cy0-stearoyl-α.

α−トレハロース２．９９を得た。無色ロウ状物。2.99% of α-trehalose was obtained. Colorless waxy substance.

収率８５％。Yield 85%.

〔α］、＋５８．８°（０＝１．０　＋　　クロロホル
ム）ＩＲｕＫ８ｒｃｙｓ−”、　１７４０ ａｘ ＮＭＲ（６ＱＭＨｚ　、重りｏｏホルム）δｐｐｍ　　
：０．８８ｔ（６Ｈ，Ｊ＝５Ｈｚ　）　、　１．２５Ｉ
ｌｏ（６ＤＨ）　、２．叶２．５ｍ（４）ｎ、５．５−
４．３”（１２Ｉ（）、５．１４’（２Ｈ。[α], +58.8° (0 = 1.0 + chloroform) IRuK8rcys-”, 1740 ax NMR (6QMHz, weight oo form) δppm
: 0.88t (6H, J=5Hz), 1.25I
lo(6DH), 2. Leaf 2.5m (4)n, 5.5-
4.3" (12I(), 5.14'(2H.

Ｊ＝１５Ｈｚ）　、　４．６６”（４Ｍ）　、４．８６
ｄ（４Ｈ）　、７．叶７．４°’（２０Ｈ） 実施例２ ２．５．７．５’−テトラ−０−ベンツルー６゜６′−
シー０−ステアロイル−α、α−トレハロース１．２４
１１にクロロホルム２０耐を加えて浴かし、触媒として
パラジウム黒０．５９を加え、水素ガスを導入して１時
間接触還元した。反応液を沖過して触媒を除去し、Ｐ液
を減圧下に濃縮乾固した。J=15Hz), 4.66” (4M), 4.86
d(4H), 7. Leaf 7.4°' (20H) Example 2 2.5.7.5'-tetra-0-bentrue 6°6'-
C0-stearoyl-α, α-trehalose 1.24
11 was added with 20 chloroform and boiled in a bath, palladium black 0.59 was added as a catalyst, hydrogen gas was introduced, and catalytic reduction was carried out for 1 hour. The reaction solution was filtered to remove the catalyst, and the P solution was concentrated to dryness under reduced pressure.

残留物をイノプロパツールから殉結晶して６．６′−シ
ー０−ステアロイル−α、α−トレハロースの無色針状
晶０．５５１を得た。収率６６％。The residue was crystallized from inopropanol to give 0.551 kg of colorless needle crystals of 6,6'-cy0-stearoyl-α,α-trehalose. Yield 66%.

融点　１５７−１６０°Ｃ ０ 〔α〕ゎ　：　　４−８０．８０（ｃ＝１．０　、クロ
ロホルム）■Ｒ，ｘｓｒ、−１　　：　１７３５（＞Ｏ
−０−０）工 ＮＭＲ（ｉ　Ｑ　ＱＭＨｚ、　ｄ５−ピリジン）δｐｐ
ｍ　　；０．８８　ｔ（６Ｈ、Ｊ＝６．５Ｈｚ　）１．
１−１．８（６ＤＨ） ２．２−２．４（４Ｈ・Ｊ＝７Ｈｉ） ４．０−２．５°（４Ｈ） ４．５−５．２１１１（８Ｈ） ５．８４　　（２Ｈ、Ｊ−”１５Ｈｚ　）実施例１に準
じて反応を行ない第６表に示す化合物を得た。Melting point 157-160°C 0 [α]ゎ: 4-80.80 (c=1.0, chloroform) ■R, xsr, -1: 1735 (>O
-0-0) Engineering NMR (i Q QMHz, d5-pyridine) δpp
m; 0.88 t (6H, J=6.5Hz)1.
1-1.8 (6DH) 2.2-2.4 (4H・J=7Hi) 4.0-2.5° (4H) 4.5-5.2111 (8H) 5.84 (2H, J -"15 Hz) The reaction was carried out according to Example 1 to obtain the compounds shown in Table 6.

Ｉｌｌ下余白 実施例２と（ロ）様に脱ペンシル反応を行ない第２表に
示す本発明化合物を得た。The depenciling reaction was carried out in the same manner as in Example 2 (b) in the lower margin to obtain the compounds of the present invention shown in Table 2.

以下余白 ９７６− −吉例１　錠剤 常法により、下記成分・分量の錠剤１個を製造した。Margin below 976- -Good example 1 tablet One tablet with the following ingredients and quantities was manufactured by a conventional method.

トレハロース脂肪酸ジエステル（ベヘネー））　　　１
００〜Ｄ−マンニトール　　　　　　　　　１５０〜結
晶セルロース　　　　　　　　　　　５０〜デンプン　
　　　　　　　　　　　　　２８〜カルボキンメチルセ
ルロースカルシウム　　　　　１６〜タルク　　　　　
　　　　　　　　　　４　ｔｔｖｙステアリン酸マグネ
シウム　　　　　　　２〜全　　童　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　５５０〜＃考Ｎ２　カ
プセル剤 常法により、下記成分・分量の顆粒を製造し、これを５
′＋Ｅｊ力プセル１個に充填した。Trehalose fatty acid diester (Behene) 1
00~D-mannitol 150~crystalline cellulose 50~starch
28 ~ Carboquine Methylcellulose Calcium 16 ~ Talc
4 ttvy Magnesium Stearate 2~All children
550 ~ #Consideration N2 Capsules Produce granules with the following ingredients and amounts by a conventional method, and add 5
'+Ej force was filled into one cell.

トレハロース脂ｌＬ／ｉ酸ゾエステル（パルミテート）
２５〜結晶セルロース　　　　　　　　　　　１７Ｉｖ
軽漬無水ケイ酸　　　　　　　　　　　　７〜ステアリ
ン酸マグネシウム　　　　　　　１１ｎｙ＆￥ｉ；しｕ
６　注射剤 常法により、下記成分・分層から注射剤１個を製造した
。Trehalose fat 1L/i acid zoester (palmitate)
25 ~ Crystalline cellulose 17Iv
Light pickled silicic anhydride 7~Magnesium stearate 11ny&￥i;su
6. Injection One injection was manufactured from the following components and layers using a conventional method.

トレハロース自ａ／ｊｌｌジエステル（スデアレート）
　　２５〜オリーブ油をもって全１ｔ１１Ｌｔとする。Trehalose auto-a/jll diester (sudealate)
25~ Add olive oil to make a total of 1t11Lt.

参考例４　坐剤 常法により、下記成分・分ｍな俗融、攪拌後、成型固化
し、坐剤１個を＃造した。Reference Example 4 Suppositories One suppository was prepared by melting the following ingredients in a conventional manner, stirring, and then molding and solidifying.

トレハロース脂肪酸ジエステル（ミリステー））１００
〜カカオ脂　　　　　　　　　　　　　１１００〜全量
　　　　　　　１２００〜 以上 出−人　ニスニス製薬株式会社 １−一゛門 丁　Ｈ（、神　１１　　・１：（自発）昭４１１５７　
’＝１５１ｉ　２１１１４旨１１“」ｌζ［１島田春備
　殿 ＋ｔｆ′Ｌ−ｚ）（小 ｉｌ、’イ＋ｌ：ｓｒ＋＋、　　　＠　　　　軒　　　
１□１１第　６９８４１　　　　−レ２　発＃４ｏ名称 α、α−トレハ■−スー６，６′−脂肪酸ジエステルの
製造方法鴫　ｉ山１）をする名″ 士、イ゛（−９）〕　１便ｌ　（，２出　１９負　）ｋ
ＩＩ　　　・・；［東京都中央区日本橋浜町２丁目１２
番４号と１　（自　ニスニスｍ薬株式会社 り看泰道直方 １　　　代　　）１１　　　人 自　　　発 明細書の「発明の詳細な説明」の禰及び特許法第３０条
第４項に規定の証明書 ７、補正の内容 （１）明細書中、第９Ｊ、第９行 「リコーケミア」とあるを、 「リューケミア」と訂正する、 （２）明細書中、第１６負、第１３行 ｒ１５−ピリジン」とあるを、 ｒｄ、−ピリジン」と訂正する。Trehalose fatty acid diester (Myriste) 100
~Cacao butter 1100~Total amount 1200~ More than Nisnis Pharmaceutical Co., Ltd. 1-1゛Monting H (, God 11 ・1: (Voluntary) 1984 157
'=151i 21114effect11"'lζ[1Shunbi Shimada+tf'L-z) (小il,'i+l:sr++, @ken
1□11 No. 69841-Re2 Departure #4o Name α, α-Treha■-Production method of 6,6'-fatty acid diester 雫 iyama 1) I (-9)〕 1st flight l (,2 out 19 negative)k
II...; [2-12 Nihonbashihamacho, Chuo-ku, Tokyo
Nos. 4 and 1 (Nisnis M Pharmaceutical Co., Ltd. Rikan Yasutomichi Nokata 1) 11 Personal information on the “detailed description of the invention” in the invention specification and certificate 7 as stipulated in Article 30, Paragraph 4 of the Patent Law , Contents of the amendment (1) In the specification, 9J, line 9, ``Rykochemia'' is corrected to ``Leukemia.'' (2) In the specification, 16th negative, 13th line, ``r15-pyridine'' is corrected. Correct "aru, rd, -pyridine".

０）特許法第３０条第４項に規定する証明書として下記
書面を別添の通り提出する。0) Submit the following documents as attached as the certificate stipulated in Article 30, Paragraph 4 of the Patent Law.

■　日本薬学会証明書付発表刊行物 ［日本巣学会第１０２年会 ＠　、５’−Ｄｉ−０−ｆａｔｔｙａｃｙｌ−α、α−
ｔｒ＠ｂｌＬｌｏｔｊ＠丁　続　ぞ由　＋ｌ（＋’Ｆ　
（ｉ　う−一）昭和５７年９　月１０１１ １’＋１；１　”ｒ　１．：・１．−看杉和夫殿１゛Ｉ
；ｆ’ｌ　　ノ）　ノ、　小 昭＋１１５７年　特　　許　ｌ和第６９８４１“・じ２
　％−の名称 α、α−トレハロース−６、６’−ｋＤｔｌ’）エステ
ルの１１．！遊方法 ３　神」ｌを・する名゛ ・Ｉｔ　（’ｌと））関１系　　　出願穴（１所　束Ｔ
Ａ＠中央区日本機浜町２丁目１２着４号と１　称　ニス
ニス製系株式会社 代表者参道直方 １　　代　　理　　八 目　宛 ６、補正の灼象 明Ｉｋ１１１１の「発明の詳細な説明」の纏７、　補止
の内容 （１１明＃ｉｔＩ書中、絽１２負、最下行のあとに行を
換えて次又を仲人する。■ Presentation publications with certificates from the Pharmaceutical Society of Japan [102nd Annual Meeting of the Japanese Society of Nut Science, 5'-Di-0-fattyacyl-α, α-
tr@blLlotj@Ding Tsuzuki Zoyu +l(+'F
(i U-1) September 1980 1011 1'+1;1 ”r 1.:・1.-Kansugi Kazuo-dono 1゛I
; f'l ノ) ノ, Kosho+1157 patent lwa No. 69841"・ji2
%-Name of α,α-trehalose-6,6'-kDtl') ester 11. ! How to play 3 God's name for 'l' ゛・It ('l and)) Seki 1 series application hole (1 place bunch T
A @ Nippon Kihama-cho 2-chome, Chuo-ku, 12-4 No. 4 and 1 Nisnis Seikei Co., Ltd. Representative Nookata Sando 1 Deputy Director Yatsume Address 6, Amended Sakuzomei Ik1111 "Detailed Description of the Invention" Copy 7 , Contents of the supplement (11 Ming #it I, 甽 12 negative, change the line after the bottom line and intercede the next one.

ｒ　（３）　）レバロース膓肋籠ジエステルの抗癌作用
： ５適合のａ　ｔａ、−ｄｄＹ庵性マウスを各群６匹づつ
使用し、このマウス−匹宛サルコーマ１８０ａｍ胞５　
Ｘ　１０’個を腹腔内に移植した。(3)) Anticancer effect of levalose calcined diester: 6 mice in each group of 5-matched ata, -ddY heritage were used, and 5 sarcoma 180 am cells were administered to each group.
X 10' cells were implanted intraperitoneally.

２４時間後より３０％ノロピレングリコールに一陶した
被慣化合物を１日１回、１５０■／峙用菫で５１：１間
連続して腹腔内に投与した。After 24 hours, the compound to be tested dissolved in 30% noropyrene glycol was continuously administered intraperitoneally once a day at a rate of 150 ml per dose for a period of 51:1.

＃Ｉｈ＃ＩＩＩ劇移檀恢７日目に腹水を採り、腋水蓋と
細胞比ｔ＊めた。朧−生長率（Ｔ／Ｃ％は、腹水瀘と細
胞比の横であるＴＰＣＶ　（酩＃１組容積）を細い、次
の式より釆め、被検化合物の抗−活性全判定した。この
結果を第３表に示す。#Ih#III On the 7th day of the transfer, ascitic fluid was collected and the axillary operculum and cell ratio t* were determined. The growth rate (T/C% is the side of the ascitic fluid filtration and cell ratio), TPCV (volume #1), was calculated using the following formula to determine the total anti-activity of the test compound. The results are shown in Table 3.

第３表 （２）　　同、第１６ｊｊ１厳下行 「第３表に示す」とめるを １編４表に示す」と［ｆ正する。Table 3 (2) Same, 16th jj 1st descent The stop “shown in Table 3” [F Correct.

（３１ｐｉ、駆１８貞、表の上、穢外で、「第３表」と
あるを 「第４表」と引止する。(31 pi, 18th grade, on the table, on the outside, ``Table 3'' is changed to ``Table 4.''

（４）　ＩＨＩ　、第１９真、縞ｌ竹ないし第２村「第
２表に示す」とあるｔ 「第５表に示す」と釘止する。(4) IHI, No. 19, Shima Itake or 2nd village, ``shown in Table 2'' is nailed with ``shown in Table 5''.

（５Ｊ　　Ｉｍ、第２０ｍ、表の上、欄外で、「第２表
」とある倉 「第５表」と引止する。(5J Im, 20m, above the table, in the margin, there is a warehouse that says ``Table 2'', and it is stopped as ``Table 5''.

Claims (1)

【特許請求の範囲】 １、　２　、５　、２’　、　３’−テトラ−０−ベン
ゾルーα。 α−トレハロースに次の式（ＩＶ）、 ＲＯＯＯＨ（ＩＶ） （式中、ＲＯＯは炭素ａ３０以下の唸肪醗残基を示す） で表わされる脂肪酸又はその活性＃ｓ４体を作用させて
式（Ｖ＞ （式中、ＲＯＯは前記と同じ意味ケ有し、Ｂｎはベンジ
ル基を示す） で表わされる２　、　３　、２’　、　５’−テトラ−
Ｏ−ベンゾルーα、α−トレハロース−６，６′−脂１
ｆ７ｊ＃ジエステルとなし、次いでペンシル基を除去す
ること？特徴とする式（１）、 （式中、Ｒ（Ｏは前記と同じ） で表わされるα、α−トレハロース−６，６’−脂肪酸
ジエステルの製造方法。[Claims] 1, 2, 5, 2', 3'-tetra-0-benzo-α. α-Trehalose was reacted with a fatty acid represented by the following formula (IV), ROOOH (IV) (in the formula, ROO represents a fatty acid residue having carbon a30 or less) or its active #s4 form to obtain the formula (V > (wherein ROO has the same meaning as above, Bn represents a benzyl group) 2, 3, 2', 5'-tetra-
O-benzo-α, α-trehalose-6,6′-fat 1
f7j # diester and then removing the pencil group? A method for producing an α,α-trehalose-6,6′-fatty acid diester represented by the formula (1), wherein R (O is the same as above).