JPS58179497A - 発酵法によるl−ヒスチジンの製造法 - Google Patents
発酵法によるl−ヒスチジンの製造法Info
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- JPS58179497A JPS58179497A JP57059869A JP5986982A JPS58179497A JP S58179497 A JPS58179497 A JP S58179497A JP 57059869 A JP57059869 A JP 57059869A JP 5986982 A JP5986982 A JP 5986982A JP S58179497 A JPS58179497 A JP S58179497A
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- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/24—Proline; Hydroxyproline; Histidine
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- Y10S435/84—Brevibacterium
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は発酵法によるL−ヒスチジンの製造法に関する
。更に評しくは、コリネバクテリウム属ま友はプレビバ
タテリウム属に属し、RN人ポリメラーゼ阻書剤の生育
阻害に対して耐性を有するかまえはアデニン要求性を有
するL−ヒスチジン生産曹を栄養培地に培養して培養液
中にL−ヒスチジンを蓄積せしめ、咳培養液からL−ヒ
スチジンを採取することt−%倣とする発酵法によるL
−ヒスチジンの製造法に関する。
。更に評しくは、コリネバクテリウム属ま友はプレビバ
タテリウム属に属し、RN人ポリメラーゼ阻書剤の生育
阻害に対して耐性を有するかまえはアデニン要求性を有
するL−ヒスチジン生産曹を栄養培地に培養して培養液
中にL−ヒスチジンを蓄積せしめ、咳培養液からL−ヒ
スチジンを採取することt−%倣とする発酵法によるL
−ヒスチジンの製造法に関する。
その目的とするところは、食品、@薬品として有用なL
−ヒスチジンを工業的に安価に製造する方法を提供する
ことにある。
−ヒスチジンを工業的に安価に製造する方法を提供する
ことにある。
従来、コリネバクテリウム属またはプレビバクテリクム
属に属するヒスチジンアナログ耐性株が著量のL−ヒス
チジンを蓄積することはよく知られており(西ドイツ特
許出願公開第21019034号)、tたこのL−ヒス
チジン生酋舊にさらに別の性質を付与することによって
菌のL−ヒスチジン生産能を向上させる試みが行われて
いる。例えば、プリンアナログ耐性またはピリミジンア
ナログ耐性を付与する方法(時分Ws52−18798
)、フルギニy要求性、メチオニン要求性、トリプト
ファン要求性、フェニルアラニン要求性、チロシン要求
性、ロイシン要求性、リジン要求性、あるいはウラシル
要求性を付与する方法(特開昭49−41592)。
属に属するヒスチジンアナログ耐性株が著量のL−ヒス
チジンを蓄積することはよく知られており(西ドイツ特
許出願公開第21019034号)、tたこのL−ヒス
チジン生酋舊にさらに別の性質を付与することによって
菌のL−ヒスチジン生産能を向上させる試みが行われて
いる。例えば、プリンアナログ耐性またはピリミジンア
ナログ耐性を付与する方法(時分Ws52−18798
)、フルギニy要求性、メチオニン要求性、トリプト
ファン要求性、フェニルアラニン要求性、チロシン要求
性、ロイシン要求性、リジン要求性、あるいはウラシル
要求性を付与する方法(特開昭49−41592)。
ナル7ア剤耐性を付与する方法(41−昭5O−4@4
90)、5−メチルトリブトファン耐性、411411
)、スレオニ/要求性、プ四リン要求性、シキミ酸要求
性、あるいはキナンチンもしくはグアニン要求性を付与
すゐ方法(41ga1@go−s*5sz)、コバラミ
ン耐性を付与する方法(特開昭5O−70891)らが
あげられる。
90)、5−メチルトリブトファン耐性、411411
)、スレオニ/要求性、プ四リン要求性、シキミ酸要求
性、あるいはキナンチンもしくはグアニン要求性を付与
すゐ方法(41ga1@go−s*5sz)、コバラミ
ン耐性を付与する方法(特開昭5O−70891)らが
あげられる。
しかしながら、これらの方法ではまだその生成収率も低
く、安価なL−ヒスチジンの製造方法として満足すべき
ものではない。
く、安価なL−ヒスチジンの製造方法として満足すべき
ものではない。
本発明者らは、L−ヒスチジンの製造方法についてさら
に研究を進め九結釆、コリネバクテリウム属またはブレ
ビパフチリウム属に属し、RNAポリメラーゼ阻害剤の
生育阻害に耐性の性質を有するL−ヒスチジン生産菌ま
九はアデニン要求性の性質を有するL−ヒスチジン生産
菌のL−ヒスチジン生産能が、それらの性質を有しない
それぞれの親株のL−ヒスチジン生産能よ)著しく優れ
ていることを晃い出し本発明を完成した。
に研究を進め九結釆、コリネバクテリウム属またはブレ
ビパフチリウム属に属し、RNAポリメラーゼ阻害剤の
生育阻害に耐性の性質を有するL−ヒスチジン生産菌ま
九はアデニン要求性の性質を有するL−ヒスチジン生産
菌のL−ヒスチジン生産能が、それらの性質を有しない
それぞれの親株のL−ヒスチジン生産能よ)著しく優れ
ていることを晃い出し本発明を完成した。
RNAポリメラーゼ阻害剤の生1w阻害剤耐性の性質あ
るいはアデニン要求性の性質を有するL−ヒスチジン生
産菌のL−ヒスチジン生産性が優れていることはこれま
で全く知られておらず、本発明はかか、1fIfr規な
知見に基づいて完成されたものである。
るいはアデニン要求性の性質を有するL−ヒスチジン生
産菌のL−ヒスチジン生産性が優れていることはこれま
で全く知られておらず、本発明はかか、1fIfr規な
知見に基づいて完成されたものである。
次に本発明をさらに詳しく説明する。
本発明に使用する微生物は、コリネバクテリウムsit
たはブレビバクテリウム属に属するE(NAボリメラー
(阻害剤に耐性の性質を有しかつL−ヒスチジン生産性
を有する変異株、あるいはアデニン要求性を有しかつL
−ヒスチジン生産性を有する変異株である。これらの変
異株は元来し一ヒスチジン生産絽を有する変異株(例え
ばヒスチジンアナログ耐性株、サルファ剤耐性株)fD
るいはその改棗株を親株として、これにRNAポリメラ
ーゼ阻害剤(例えば、リファマイシン、ストレフ’ドパ
リシン、す7アンピシン、ストレプトリジギン、アドリ
アマイシン、クロモマイシン、ドーノマイシン、アドリ
アマイシン、プルラマイシン、カンカッ1イシン、エキ
ノマイシン、フォルTイシン等)の中から選ばれる少な
くも1つの化合物に耐性の性質を合わせて付与せしめる
か、またはアデニン要求性の性質を合わせて付与せしめ
ることによって得ることができる。tた、その逆の方法
すなわちRNAポリメラーゼ阻害剤に耐性の変異株筐九
はアデニン要求性の変異株に上記のヒスチジン生産性に
関わる性質を付与した変異株を誘導して本発明に使用す
ることも可能である。
たはブレビバクテリウム属に属するE(NAボリメラー
(阻害剤に耐性の性質を有しかつL−ヒスチジン生産性
を有する変異株、あるいはアデニン要求性を有しかつL
−ヒスチジン生産性を有する変異株である。これらの変
異株は元来し一ヒスチジン生産絽を有する変異株(例え
ばヒスチジンアナログ耐性株、サルファ剤耐性株)fD
るいはその改棗株を親株として、これにRNAポリメラ
ーゼ阻害剤(例えば、リファマイシン、ストレフ’ドパ
リシン、す7アンピシン、ストレプトリジギン、アドリ
アマイシン、クロモマイシン、ドーノマイシン、アドリ
アマイシン、プルラマイシン、カンカッ1イシン、エキ
ノマイシン、フォルTイシン等)の中から選ばれる少な
くも1つの化合物に耐性の性質を合わせて付与せしめる
か、またはアデニン要求性の性質を合わせて付与せしめ
ることによって得ることができる。tた、その逆の方法
すなわちRNAポリメラーゼ阻害剤に耐性の変異株筐九
はアデニン要求性の変異株に上記のヒスチジン生産性に
関わる性質を付与した変異株を誘導して本発明に使用す
ることも可能である。
ま九、本発明の使用菌としては、上記の性質の組食わせ
に加えて他の性質(例えば各種栄養要求性、薬剤耐性、
薬剤感受性、薬剤依存性等)を合わせて持つ変異株も轟
然使用で自る。
に加えて他の性質(例えば各種栄養要求性、薬剤耐性、
薬剤感受性、薬剤依存性等)を合わせて持つ変異株も轟
然使用で自る。
このようにして得られる菌株を培養して、L−ヒスチジ
ン生産能が各々の親株より嗣著に向上し九菌株を選択し
て本発明に使用する。
ン生産能が各々の親株より嗣著に向上し九菌株を選択し
て本発明に使用する。
このような菌株を得る異体的な操作例を;す不バクテリ
クム属の変J4株について説明すれば次のとおシである
。
クム属の変J4株について説明すれば次のとおシである
。
操作例
コリネバクテリウム・グルタミクムATCC13032
をN−メチル−IJ−ニトロ−14−二トロングアニジ
ンを用いて常法どおり変異処理し、さらに常法どおりL
−ヒスチジ/のアナログである2−チアゾールアラニン
耐性株を分離し、それらの培養試験を経てL−ヒスチジ
ン生産−例えば人TCC21g07(2−チアゾールア
ラニン耐性株)を得る。さらに、人TCC21607を
親株としてその変異処理と、L−ヒスチジン生産試験を
経て、2−チアゾールアラニン耐性、6−メルカプトグ
アニン耐性、6−アザグアニン耐性、6−アザウラシル
耐性、6−メチルプリン−W性、5−メチルトリプトフ
ァン耐性を順次付与したL−ヒスチジン生殖th!!G
AUPTr−113(微工研菌寄第1874号)を得る
(なお、本変異株の誘導方法の詳細については、特公昭
52−18798に記載がある9゜この変異株の細處懸
濁液を、RNAポリメツーゼ阻害剤であるリフアンビシ
/100μm/−を含む寒天培地(酵母エキスαsr/
d1.肉エキスα7f/di、 ヘプト71 f /d
i%NaCj (L3 f/dl。
をN−メチル−IJ−ニトロ−14−二トロングアニジ
ンを用いて常法どおり変異処理し、さらに常法どおりL
−ヒスチジ/のアナログである2−チアゾールアラニン
耐性株を分離し、それらの培養試験を経てL−ヒスチジ
ン生産−例えば人TCC21g07(2−チアゾールア
ラニン耐性株)を得る。さらに、人TCC21607を
親株としてその変異処理と、L−ヒスチジン生産試験を
経て、2−チアゾールアラニン耐性、6−メルカプトグ
アニン耐性、6−アザグアニン耐性、6−アザウラシル
耐性、6−メチルプリン−W性、5−メチルトリプトフ
ァン耐性を順次付与したL−ヒスチジン生殖th!!G
AUPTr−113(微工研菌寄第1874号)を得る
(なお、本変異株の誘導方法の詳細については、特公昭
52−18798に記載がある9゜この変異株の細處懸
濁液を、RNAポリメツーゼ阻害剤であるリフアンビシ
/100μm/−を含む寒天培地(酵母エキスαsr/
d1.肉エキスα7f/di、 ヘプト71 f /d
i%NaCj (L3 f/dl。
p H7,0、寒天zr/dI)に千板幽り10’個の
m胞をまいて30℃の温度条件下で2〜3日間培養して
、生育してくるり7アンビシン耐性細胞の集落を504
a釣菌する。次に、実施例1に示すと同様の方法でL−
ヒスチジン生産試験を行い、同時に試験する親株(GA
UPTr−113)よりL−ヒスチジン生産能の顕著に
向上した変異株を分離する。かくして得られる変異株の
代表株を2R−18と命名し九。
m胞をまいて30℃の温度条件下で2〜3日間培養して
、生育してくるり7アンビシン耐性細胞の集落を504
a釣菌する。次に、実施例1に示すと同様の方法でL−
ヒスチジン生産試験を行い、同時に試験する親株(GA
UPTr−113)よりL−ヒスチジン生産能の顕著に
向上した変異株を分離する。かくして得られる変異株の
代表株を2R−18と命名し九。
同様にしてブレビバクテリウム・スペシーズATCC1
4902から鋳導した2−フルオロヒスチジン耐性のL
−ヒスチジン生産1iB −39(徽工研菌寄第622
8)よシリファンビシン耐性変異株BR−6を得九。
4902から鋳導した2−フルオロヒスチジン耐性のL
−ヒスチジン生産1iB −39(徽工研菌寄第622
8)よシリファンビシン耐性変異株BR−6を得九。
また常法によりC)AUPTr−113株よりアデニン
要求性変異株HD人−5を得九。
要求性変異株HD人−5を得九。
上記コリネバクテリウム・グルタミクム2R−18、コ
リネバクテリウム・グルタミクムHDA−1’>よびブ
レビバクテリウム・スペシーズBR−6は工業技術院微
生物工業技術研究所にそれぞれ黴工研曹寄第 b’lV
s号、6ダ76号および6477号としてを託されてい
る。
リネバクテリウム・グルタミクムHDA−1’>よびブ
レビバクテリウム・スペシーズBR−6は工業技術院微
生物工業技術研究所にそれぞれ黴工研曹寄第 b’lV
s号、6ダ76号および6477号としてを託されてい
る。
本発明に使用する培地としては、実施例に示す如ぐ炭5
1c源、窒素源、無機物その他使用菌株の必要とする微
量の栄養素を程よく含有するものであれば、天然培地ま
たは合成培地のいずれも重用可能である。培地に使用す
る炭素源、脅嵩凍は使用菌株の利用可能なものであれば
いずれの植類を用いてもよい。すなわち、IR累源とし
てはシェフロース、7ラクトース、グルコース、マルト
ース、マンノース、殿粉、殿粉加水分解物、糖蜜等の炭
水化物;グリセリン、ンルビトール等の糖アルコール;
ギ酸、酢酸、乳酸、7マル酸、リンゴ酸等の有機酸;エ
タノール、メタノール等の低級アルコールなどが使用で
きる。これらの炭素源は単独でもまた積々の量比に混合
しても使用でき、まえ金量を培地に添加する方法や分割
して添加する方法によりても使用できる。
1c源、窒素源、無機物その他使用菌株の必要とする微
量の栄養素を程よく含有するものであれば、天然培地ま
たは合成培地のいずれも重用可能である。培地に使用す
る炭素源、脅嵩凍は使用菌株の利用可能なものであれば
いずれの植類を用いてもよい。すなわち、IR累源とし
てはシェフロース、7ラクトース、グルコース、マルト
ース、マンノース、殿粉、殿粉加水分解物、糖蜜等の炭
水化物;グリセリン、ンルビトール等の糖アルコール;
ギ酸、酢酸、乳酸、7マル酸、リンゴ酸等の有機酸;エ
タノール、メタノール等の低級アルコールなどが使用で
きる。これらの炭素源は単独でもまた積々の量比に混合
しても使用でき、まえ金量を培地に添加する方法や分割
して添加する方法によりても使用できる。
窒素源としては、塩化アン肴ニウム、アンモニア、硫酸
アンモニウム、炭酸アン4ニウム、酢酸アンモニウム、
硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等の各種無機お
よび有機アンモニウム塩類、尿素、ならびにペプトン、
肉エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分
解物、大豆粕加水分解物等の天然物由来の音素含有物等
積々のものが使用可能である。無機物質としては、リン
酸第−カリウム、リン酸第二カリウム、硫酸マグネシウ
ム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガンおよび
炭酸カルシウム等を利用する。
アンモニウム、炭酸アン4ニウム、酢酸アンモニウム、
硝酸アンモニウム、リン酸アンモニウム等の各種無機お
よび有機アンモニウム塩類、尿素、ならびにペプトン、
肉エキス、コーン・スチープ・リカー、カゼイン加水分
解物、大豆粕加水分解物等の天然物由来の音素含有物等
積々のものが使用可能である。無機物質としては、リン
酸第−カリウム、リン酸第二カリウム、硫酸マグネシウ
ム、塩化ナトリウム、硫酸第一鉄、硫酸マンガンおよび
炭酸カルシウム等を利用する。
使用菌がアミノ酸、核酸、ビタミン等の栄養物質を要求
する場合には、これらの物質を適量培地に添加する必要
がある。
する場合には、これらの物質を適量培地に添加する必要
がある。
培養温度は20〜40℃であり、振盪培養まえは通気攪
拌培養などの好気的条件下で1〜S日閾培養される。培
養後、培養液よりL−ヒスチジ/を採堆するKは公知の
イオン交換樹脂法などの方法が用いられる。
拌培養などの好気的条件下で1〜S日閾培養される。培
養後、培養液よりL−ヒスチジ/を採堆するKは公知の
イオン交換樹脂法などの方法が用いられる。
以下に実施例を示す。
夷m例1゜
種菌としてコリネバクテリウム・ゲルメンタム2R−1
8を用いる。この菌株をグルコース417di、ポリペ
プトン2 t/dt%KH,PO4Q、 15 f /
dJ、 1gHPO4(105f/dj、MfBO4
−7dsOl0If/lu、ketf7jOμt/)、
尿素a、 a y /di、酵素x キx Q、 5
t / di (p H7,M )の組成の培地で10
℃で24時間振盪培養し九種培養1dを20−の下記の
発酵培地を含む250wJ容三角フラスコに移して、3
0″Cで4日関娠盪培養したときのL−ヒスチジンの生
成葉は1α689/−xiであり九。
8を用いる。この菌株をグルコース417di、ポリペ
プトン2 t/dt%KH,PO4Q、 15 f /
dJ、 1gHPO4(105f/dj、MfBO4
−7dsOl0If/lu、ketf7jOμt/)、
尿素a、 a y /di、酵素x キx Q、 5
t / di (p H7,M )の組成の培地で10
℃で24時間振盪培養し九種培養1dを20−の下記の
発酵培地を含む250wJ容三角フラスコに移して、3
0″Cで4日関娠盪培養したときのL−ヒスチジンの生
成葉は1α689/−xiであり九。
発酵培地の組成は下記のとおり:
廃楯M(グルコース換算)7f/dj、肉エキスα5
f/di、 (NH4)、 5o44 f/dt、KH
,PO4αI I f/di、 K*HPOn Q、0
5 f/di、 MyBOa ・ya、o a@st
/di、II素(L 8 f / 47. CaC0
5l f / dJ (p H7,4) @対照として
親株であるGAUPTr−111を同様に培養し九場合
のL−ヒステジyの蓄積量は龜・q/wであり九。
f/di、 (NH4)、 5o44 f/dt、KH
,PO4αI I f/di、 K*HPOn Q、0
5 f/di、 MyBOa ・ya、o a@st
/di、II素(L 8 f / 47. CaC0
5l f / dJ (p H7,4) @対照として
親株であるGAUPTr−111を同様に培養し九場合
のL−ヒステジyの蓄積量は龜・q/wであり九。
実施例1
種菌としてプリネパクテリウム・ダルタ建タムHDA−
暮を用い、生産培地に1!10#f/mのアデニンを添
加する他は実施例1と同様にL−ヒスチジン生産試験を
行なった結果17キ/dのL−ヒスチジンが蓄積し丸。
暮を用い、生産培地に1!10#f/mのアデニンを添
加する他は実施例1と同様にL−ヒスチジン生産試験を
行なった結果17キ/dのL−ヒスチジンが蓄積し丸。
この場合対照として親株である0AUP’rr−113
を同様に培養し丸場金OL−ヒスチジン蓄積量はtyl
f/−であり九。
を同様に培養し丸場金OL−ヒスチジン蓄積量はtyl
f/−であり九。
夷細例龜
種菌として、プレビパタテリウム・スペシーズBR−6
を用い九個は実施例1と同様KIIJIIし九緒釆也s
q/−のL−ヒスチジ/が蓄積し丸、11株であるB−
11のL−ヒスチジン蓄積量線ILI岬/−であう丸。
を用い九個は実施例1と同様KIIJIIし九緒釆也s
q/−のL−ヒスチジ/が蓄積し丸、11株であるB−
11のL−ヒスチジン蓄積量線ILI岬/−であう丸。
Claims (1)
- コリネバクテリウム属またはプレビバクテリクム属に属
し、RNAポリメフーゼ組害削の生育阻害に対して耐性
を有するかまえはアデニン要求性を有するL−ヒスチジ
ン生崖曹を栄養培地に培養して培養液中にL−ヒスチジ
ンを蓄積せしめ、該培養液からL−ヒスチジンを採取す
ることを特徴とする発酵法によるL−ヒスチジンの製造
法。
Priority Applications (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP57059869A JPS58179497A (ja) | 1982-04-10 | 1982-04-10 | 発酵法によるl−ヒスチジンの製造法 |
US06/482,892 US4495283A (en) | 1982-04-10 | 1983-04-07 | Process for producing L-histidine by fermentation |
DE8383103392T DE3372786D1 (en) | 1982-04-10 | 1983-04-07 | Process for producing l-hystidine by fermentation and microorganisms therefor |
EP83103392A EP0092709B1 (en) | 1982-04-10 | 1983-04-07 | Process for producing l-hystidine by fermentation and microorganisms therefor |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP57059869A JPS58179497A (ja) | 1982-04-10 | 1982-04-10 | 発酵法によるl−ヒスチジンの製造法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS58179497A true JPS58179497A (ja) | 1983-10-20 |
JPH022598B2 JPH022598B2 (ja) | 1990-01-18 |
Family
ID=13125599
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP57059869A Granted JPS58179497A (ja) | 1982-04-10 | 1982-04-10 | 発酵法によるl−ヒスチジンの製造法 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4495283A (ja) |
EP (1) | EP0092709B1 (ja) |
JP (1) | JPS58179497A (ja) |
DE (1) | DE3372786D1 (ja) |
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