JPH11243942A - エタノールを用いた高機能性ユーグレナの製造法 - Google Patents
エタノールを用いた高機能性ユーグレナの製造法Info
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- JPH11243942A JPH11243942A JP6927598A JP6927598A JPH11243942A JP H11243942 A JPH11243942 A JP H11243942A JP 6927598 A JP6927598 A JP 6927598A JP 6927598 A JP6927598 A JP 6927598A JP H11243942 A JPH11243942 A JP H11243942A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 蛋白質、ビタミン、脂質等の栄養価の高いユ
ーグレナ細胞体を提供する。 【解決手段】 ユーグレナの培養において培地にエタノ
ールを添加するほか、エタノールとコレステロール生合
成阻害剤を添加することにより、蛋白質、ドコエキサエ
ン酸、スクアレン、総カロチン、ビタミン類（ビタミン
A 、ビタミンE 等）に富む細胞体が得られる。
ーグレナ細胞体を提供する。 【解決手段】 ユーグレナの培養において培地にエタノ
ールを添加するほか、エタノールとコレステロール生合
成阻害剤を添加することにより、蛋白質、ドコエキサエ
ン酸、スクアレン、総カロチン、ビタミン類（ビタミン
A 、ビタミンE 等）に富む細胞体が得られる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ビタミン類、ドコ
サヘキサエン酸(DHA）、スクアレン、スーパーオキシド
消去活性物質等で強化されたユーグレナ細胞体及びその
製造方法に関する。
サヘキサエン酸(DHA）、スクアレン、スーパーオキシド
消去活性物質等で強化されたユーグレナ細胞体及びその
製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】従来より、ユーグレナを培養する培地と
して、例えば、コーレン・ハットナー培地（ジャーナル
・オブ・プロトゾオロジー〔Journal of Protozoology
〕１４巻、１７頁（１９６７年））あるいはハットナ
ー培地（ジャーナル・オブ・プロトゾオロジー６巻、２
３頁（１９５９年））等が用いられ、炭素源としてグル
コース、フルクトース、でんぷん加水分解物、酢酸等が
用いられ、窒素源としてはグルタミン酸、アスパラギン
酸、アルギニン、グリシン、各種アンモニウム塩等が用
いられた。
して、例えば、コーレン・ハットナー培地（ジャーナル
・オブ・プロトゾオロジー〔Journal of Protozoology
〕１４巻、１７頁（１９６７年））あるいはハットナ
ー培地（ジャーナル・オブ・プロトゾオロジー６巻、２
３頁（１９５９年））等が用いられ、炭素源としてグル
コース、フルクトース、でんぷん加水分解物、酢酸等が
用いられ、窒素源としてはグルタミン酸、アスパラギン
酸、アルギニン、グリシン、各種アンモニウム塩等が用
いられた。
【０００３】このような培地で増殖させて得た細胞体は
栄養学的に充分とは言えず、例えば、魚類の稚魚生産に
必要なアルチミア、ワムシ等の飼料、あるいは小型の孵
化仔魚用の飼料として用いる場合には、別に調製したEP
A （エイコサペンタエン酸）、DHA あるいはビタミン類
を添加し、ユーグレナに吸着、取り込ませていた。
栄養学的に充分とは言えず、例えば、魚類の稚魚生産に
必要なアルチミア、ワムシ等の飼料、あるいは小型の孵
化仔魚用の飼料として用いる場合には、別に調製したEP
A （エイコサペンタエン酸）、DHA あるいはビタミン類
を添加し、ユーグレナに吸着、取り込ませていた。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】上述のように、稚魚用
の飼料生産のためにはユーグレナに別途調製した栄養物
を添加することが通例であったが、これは製造工程の複
雑さ、コスト面から不利であった。従って、本発明はユ
ーグレナの培養のみにより、高機能性細胞を取得する方
法、及び該方法により得られる細胞を提供するものであ
る。
の飼料生産のためにはユーグレナに別途調製した栄養物
を添加することが通例であったが、これは製造工程の複
雑さ、コスト面から不利であった。従って、本発明はユ
ーグレナの培養のみにより、高機能性細胞を取得する方
法、及び該方法により得られる細胞を提供するものであ
る。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、ユーグレ
ナの培養法について鋭意研究してきたところ、驚くべき
ことに、培養中にエタノールを適宜添加使用することに
より、細胞体中に各種高機能性物質が生産・蓄積される
ことを見出した。従って、本発明は、炭素源の一部又は
すべてがエタノールである培地中でユーグレナ（Euglen
a gracilis）を培養することを特徴とする機能強化ユー
グレナ細胞体の製造方法を提供する。
ナの培養法について鋭意研究してきたところ、驚くべき
ことに、培養中にエタノールを適宜添加使用することに
より、細胞体中に各種高機能性物質が生産・蓄積される
ことを見出した。従って、本発明は、炭素源の一部又は
すべてがエタノールである培地中でユーグレナ（Euglen
a gracilis）を培養することを特徴とする機能強化ユー
グレナ細胞体の製造方法を提供する。
【０００６】本発明はまた、ユーグレナ細胞体の機能強
化物質として、カロチン、ビタミンA 、ビタミンC 、ビ
タミンD 、ビタミンE 、ビタミンK1、ビタミンB12 、パ
ントテン酸、ドコサヘキサエン酸(DHA）、アラキドン
酸、エイコサペンタエン酸、スクアレン及び／又はスー
パーオキシド消去活性物質を含んで成る、上記方法によ
り製造されるユーグレナ細胞体を提供する。本発明によ
れば、ユーグレナを稚魚用飼料、動物飼料あるいは食品
に用いる場合に、別途調製した栄養強化剤を添加せず
に、あるいは添加物を従来技術より大いに減らして、ユ
ーグレナ細胞体を有効に用いることができる。
化物質として、カロチン、ビタミンA 、ビタミンC 、ビ
タミンD 、ビタミンE 、ビタミンK1、ビタミンB12 、パ
ントテン酸、ドコサヘキサエン酸(DHA）、アラキドン
酸、エイコサペンタエン酸、スクアレン及び／又はスー
パーオキシド消去活性物質を含んで成る、上記方法によ
り製造されるユーグレナ細胞体を提供する。本発明によ
れば、ユーグレナを稚魚用飼料、動物飼料あるいは食品
に用いる場合に、別途調製した栄養強化剤を添加せず
に、あるいは添加物を従来技術より大いに減らして、ユ
ーグレナ細胞体を有効に用いることができる。
【０００７】
【発明の具体的な態様】本発明に従うユーグレナは上記
のような特徴を有するがさらにその成分を詳述すると次
のとおりである。すなわち、エタノールを添加して培養
し取得したユーグレナ細胞体には、通常のコーレン・ハ
ットナー培地（J. Protozool., 14, Suppl., 17(1967)
）あるいはハットナー培地（Methods Enzymol, 23, 14
3-162(1971)）により培養・取得した細胞体に比較し
て、粗蛋白質、ステロール、スクアレン、カロチン、ビ
タミンA 、トコフェロール、ビタミンK1、パントテン酸
及び／又はスーパーオキシド消去活性、特にDHA 含量が
増加していた。
のような特徴を有するがさらにその成分を詳述すると次
のとおりである。すなわち、エタノールを添加して培養
し取得したユーグレナ細胞体には、通常のコーレン・ハ
ットナー培地（J. Protozool., 14, Suppl., 17(1967)
）あるいはハットナー培地（Methods Enzymol, 23, 14
3-162(1971)）により培養・取得した細胞体に比較し
て、粗蛋白質、ステロール、スクアレン、カロチン、ビ
タミンA 、トコフェロール、ビタミンK1、パントテン酸
及び／又はスーパーオキシド消去活性、特にDHA 含量が
増加していた。
【０００８】以上のように本発明に従うユーグレナは、
通常の培地によるものに比べて、栄養学的にすぐれた性
質のものであり、魚飼、動物飼料、食品分野に広範に利
用することができるであろう。本発明に従うユーグレナ
は栄養培地にエタノールを初発に添加するか、あるいは
遂次添加しながら培養することによって有効に生産しう
るが、スクアレンについては同時にステロール代謝系の
阻害剤を添加することによって、より有効に生産し得
る。
通常の培地によるものに比べて、栄養学的にすぐれた性
質のものであり、魚飼、動物飼料、食品分野に広範に利
用することができるであろう。本発明に従うユーグレナ
は栄養培地にエタノールを初発に添加するか、あるいは
遂次添加しながら培養することによって有効に生産しう
るが、スクアレンについては同時にステロール代謝系の
阻害剤を添加することによって、より有効に生産し得
る。
【０００９】本発明に用い得るユーグレナは池や沼など
の淡水中に広く分布しており、これらから分離して使用
利用してもよく、また、すでに単離されている任意のユ
ーグレナを使用してもよい。本発明のユーグレナとして
は、ユーグレナ・グラシリス、ユーグレナ・グラシリス
・クレブス、ユーグレナ・グラシリス・バルバチラス等
の種を使用しうるが、特に好ましいユーグレナ株は、ユ
ーグレナ・グラシリス（Euglena gracilis）Z 株あるい
はその変異株SM-ZK 株（葉緑体欠損株）である。このユ
ーグレナ（Euglena gracilis）Z 株（SM-ZK 株）の入手
法については、例えば北岡正三郎著「ユーグレナ、生理
と生化学」（（株）学会出版センター発行 239〜241
頁）に記載されている。
の淡水中に広く分布しており、これらから分離して使用
利用してもよく、また、すでに単離されている任意のユ
ーグレナを使用してもよい。本発明のユーグレナとして
は、ユーグレナ・グラシリス、ユーグレナ・グラシリス
・クレブス、ユーグレナ・グラシリス・バルバチラス等
の種を使用しうるが、特に好ましいユーグレナ株は、ユ
ーグレナ・グラシリス（Euglena gracilis）Z 株あるい
はその変異株SM-ZK 株（葉緑体欠損株）である。このユ
ーグレナ（Euglena gracilis）Z 株（SM-ZK 株）の入手
法については、例えば北岡正三郎著「ユーグレナ、生理
と生化学」（（株）学会出版センター発行 239〜241
頁）に記載されている。
【００１０】本ユーグレナの培養栄養培地としては、一
般の微細藻類、原生動物を増殖させることのできる炭素
源、窒素源、酵母エキス、無機塩類、ビタミンを含むい
かなる培地も用いることができる。例えば、クレーマー
−マイヤーズ（Cramer-Myers）培地（Arch, Mikrobio
l., 17, 384-402(1952) ）やハットナー（Hutner）培地
（Methods Enzymol., 23, 143-162(1971) ）、コーレン
−ハットナー（Koren -Hutner ）培地（J. Protozool.,
14, Suppl., 17(1967) ）等の公知の培地を使用するこ
とができる。通常、炭素源として糖蜜加水分解物、酢
酸、エタノール、脂肪酸（C3〜C18 ）を用いることがで
きるが、炭素源の全部又は少なくとも一部分としてエタ
ノールを含有することを特徴とする。
般の微細藻類、原生動物を増殖させることのできる炭素
源、窒素源、酵母エキス、無機塩類、ビタミンを含むい
かなる培地も用いることができる。例えば、クレーマー
−マイヤーズ（Cramer-Myers）培地（Arch, Mikrobio
l., 17, 384-402(1952) ）やハットナー（Hutner）培地
（Methods Enzymol., 23, 143-162(1971) ）、コーレン
−ハットナー（Koren -Hutner ）培地（J. Protozool.,
14, Suppl., 17(1967) ）等の公知の培地を使用するこ
とができる。通常、炭素源として糖蜜加水分解物、酢
酸、エタノール、脂肪酸（C3〜C18 ）を用いることがで
きるが、炭素源の全部又は少なくとも一部分としてエタ
ノールを含有することを特徴とする。
【００１１】エタノールは、培養の初発培地に１回のみ
添加することもでき、あるいは培養中に間欠的に、又は
連続的に添加することができる。初発培地に１回のみ添
加する場合、エタノールの添加量は培地当り０．１〜２
％が好ましい。培養中に添加する場合には、初発培地に
エタノールを添加しており、その消費と共に培養中に添
加することもでき、あるいは、培養の途中からエタノー
ルの添加を開始することもできる。初発培地のエタノー
ル添加量は０．１〜２％であり、培養中には、例えば培
地中のエタノール濃度を常法に従って、例えばガスクロ
マトグラフィーにより測定しながら消費されたエタノー
ルを間欠的に又は連続的に添加することにより補うこと
ができる。こうして培地当り合計１〜５％のエタノール
を添加することができる。
添加することもでき、あるいは培養中に間欠的に、又は
連続的に添加することができる。初発培地に１回のみ添
加する場合、エタノールの添加量は培地当り０．１〜２
％が好ましい。培養中に添加する場合には、初発培地に
エタノールを添加しており、その消費と共に培養中に添
加することもでき、あるいは、培養の途中からエタノー
ルの添加を開始することもできる。初発培地のエタノー
ル添加量は０．１〜２％であり、培養中には、例えば培
地中のエタノール濃度を常法に従って、例えばガスクロ
マトグラフィーにより測定しながら消費されたエタノー
ルを間欠的に又は連続的に添加することにより補うこと
ができる。こうして培地当り合計１〜５％のエタノール
を添加することができる。
【００１２】窒素源としては各種アンモニウム塩、グル
タミン酸、アスパラギン酸、アルギニン、グリシン等の
アミノ酸、又は酵母エキス、ペプトン、コーン・スチー
プ・リカー（C.S.L.）等の有機窒素源が使用可能であ
る。さらに金属塩（鉄、マンガン、亜鉛、コバルト、ニ
ッケル、銅、ナトリウム）、ビタミン類（B1、B12 ）等
の微量栄養素を加えることが適当である。特に、エタノ
ールを好ましい態様で添加することが有効である。グル
コースは１〜３％、アミノ酸類は０．０５〜０．４％、
アンモニウム塩は０．０２５〜０．０５％、金属塩は
０．５〜５０ppm で用いることができる。ビタミン等微
量要素を０．００５〜２．５ppm で添加することもでき
る。
タミン酸、アスパラギン酸、アルギニン、グリシン等の
アミノ酸、又は酵母エキス、ペプトン、コーン・スチー
プ・リカー（C.S.L.）等の有機窒素源が使用可能であ
る。さらに金属塩（鉄、マンガン、亜鉛、コバルト、ニ
ッケル、銅、ナトリウム）、ビタミン類（B1、B12 ）等
の微量栄養素を加えることが適当である。特に、エタノ
ールを好ましい態様で添加することが有効である。グル
コースは１〜３％、アミノ酸類は０．０５〜０．４％、
アンモニウム塩は０．０２５〜０．０５％、金属塩は
０．５〜５０ppm で用いることができる。ビタミン等微
量要素を０．００５〜２．５ppm で添加することもでき
る。
【００１３】培養はフラスコでは振とう培養、ジャーフ
ァーメンター、タンクでは深部通気撹拌等の好気条件に
より、通常１〜８日間行う。培養温度は、２０〜３０
℃、好ましくは２５〜３０℃がよく、pHは２〜８、好ま
しくは２〜５が良好である。
ァーメンター、タンクでは深部通気撹拌等の好気条件に
より、通常１〜８日間行う。培養温度は、２０〜３０
℃、好ましくは２５〜３０℃がよく、pHは２〜８、好ま
しくは２〜５が良好である。
【００１４】スクアレン自体の収率を高めるためには、
好気条件とし、エタノール等炭素源を追加すると同時に
スクアレンエポキシダーゼ阻害剤であるタルナフテート
（Talnaftate）、コレステロール合成阻害剤であるN-ラ
ウリル- ジメチルアミノ-N-オキシドおよびエルゴステ
ロール合成阻害剤であるミコナゾール（Miconazole）等
およびシュークロースエステル、モノグリセリド・オレ
イン酸ナトリウム、デオキシコール酸等の食品に用いら
れる界面活性剤等を添加してスクアレンがステロール類
へ変換されるのを抑制すればよい。培養終了後は、遠心
分離、膜炉過等により集菌、洗浄後、真空凍結乾燥、噴
霧感想、加熱真空乾燥等を行い、本発明に従うユーグレ
ナ細胞体を提供できる。
好気条件とし、エタノール等炭素源を追加すると同時に
スクアレンエポキシダーゼ阻害剤であるタルナフテート
（Talnaftate）、コレステロール合成阻害剤であるN-ラ
ウリル- ジメチルアミノ-N-オキシドおよびエルゴステ
ロール合成阻害剤であるミコナゾール（Miconazole）等
およびシュークロースエステル、モノグリセリド・オレ
イン酸ナトリウム、デオキシコール酸等の食品に用いら
れる界面活性剤等を添加してスクアレンがステロール類
へ変換されるのを抑制すればよい。培養終了後は、遠心
分離、膜炉過等により集菌、洗浄後、真空凍結乾燥、噴
霧感想、加熱真空乾燥等を行い、本発明に従うユーグレ
ナ細胞体を提供できる。
【００１５】
【実施例】本発明を実施例により、さらに詳細に説明す
る。実施例１：炭素源の影響 第１表に示すKH培地１００mlを５００ml容の坂口フラス
コに入れ、ユーグレナ・グラシリスSK-ZK 株を接種し、
３０℃で２日間振とう培養し、種母培養液とした。この
培養液１mlをKH培地およびKH培地に０．２％エタノール
を添加した培地に植菌し、３０℃、１００rpm （往復振
とう）において１２０時間培養した。培養液を遠心分離
し（５，０００rpm 、１５分間）、沈殿した細胞体をク
ロロホルム：メタノール＝２：１で振とう抽出し、ケン
化を行った。
る。実施例１：炭素源の影響 第１表に示すKH培地１００mlを５００ml容の坂口フラス
コに入れ、ユーグレナ・グラシリスSK-ZK 株を接種し、
３０℃で２日間振とう培養し、種母培養液とした。この
培養液１mlをKH培地およびKH培地に０．２％エタノール
を添加した培地に植菌し、３０℃、１００rpm （往復振
とう）において１２０時間培養した。培養液を遠心分離
し（５，０００rpm 、１５分間）、沈殿した細胞体をク
ロロホルム：メタノール＝２：１で振とう抽出し、ケン
化を行った。
【００１６】得られた不ケン化物にアセトンを加え極性
脂質を除き、炭化水素を含む非極性脂質をシリカゲルカ
ラムに充填し、ヘプタン、ベンゼン、クロロホルム、メ
タノールの順で溶出した。各々の画分を蒸発乾固したも
のを試料とし、ガスクロマトグラフィー（検出：FID 、
重点剤：SE-30 、初発温度：２４０℃、最終温度：２７
０℃、昇温速度：２℃/ 分、注入温度：２８０℃）で分
析した結果、スクアレンはヘプタレ溶出画分にあり、ス
クアレン生産量はエタノール添加KH培地では約６００μ
g/l 、対照のKH培地では２７０μg/l であった。また、
上記エタノールの代わりに他のアルコール類を添加した
場合のスクアレンの生産量を次の各アルコールの括弧内
に示した。ミリスチルアルコール（３６５μg/l ）、パ
ルミチルアルコール（３１０μg/l ）、オレイルアルコ
ール（３１５μg/l ）
脂質を除き、炭化水素を含む非極性脂質をシリカゲルカ
ラムに充填し、ヘプタン、ベンゼン、クロロホルム、メ
タノールの順で溶出した。各々の画分を蒸発乾固したも
のを試料とし、ガスクロマトグラフィー（検出：FID 、
重点剤：SE-30 、初発温度：２４０℃、最終温度：２７
０℃、昇温速度：２℃/ 分、注入温度：２８０℃）で分
析した結果、スクアレンはヘプタレ溶出画分にあり、ス
クアレン生産量はエタノール添加KH培地では約６００μ
g/l 、対照のKH培地では２７０μg/l であった。また、
上記エタノールの代わりに他のアルコール類を添加した
場合のスクアレンの生産量を次の各アルコールの括弧内
に示した。ミリスチルアルコール（３６５μg/l ）、パ
ルミチルアルコール（３１０μg/l ）、オレイルアルコ
ール（３１５μg/l ）
【００１７】
【表１】
【００１８】実施例２：培養培地による細胞成分の比較 第１表に示した液体培地１００mlを５００ml容の坂口フ
ラスコに入れ、ユーグレナ・グラシリスSM-ZK 株を接種
し、２日間培養し種母培養液とした。この培養液５mlを
次の第１表の培地１L を入れた３L 容ミニジャーファー
メンターで３０℃、１４４時間（通気培養０．５vvm ）
で培養した。培養終了後、遠心分離により細胞体を集め
真空凍結乾燥を行った。この乾燥物について、粗蛋白
質、脂質成分、ビタミンおよびスーパーオキシド消去活
性の測定を行った。
ラスコに入れ、ユーグレナ・グラシリスSM-ZK 株を接種
し、２日間培養し種母培養液とした。この培養液５mlを
次の第１表の培地１L を入れた３L 容ミニジャーファー
メンターで３０℃、１４４時間（通気培養０．５vvm ）
で培養した。培養終了後、遠心分離により細胞体を集め
真空凍結乾燥を行った。この乾燥物について、粗蛋白
質、脂質成分、ビタミンおよびスーパーオキシド消去活
性の測定を行った。
【００１９】粗蛋白質はケールダール法を用い、窒素・
蛋白質換算係数は６．２５を用いた。ドコサヘキサエン
酸、ステロール組成およびスクアレンは、ガスクロマト
グラフ法で求めた。ビタミンB12 は、Lactobacillus de
lbrueckii subsp.lactis（L.leichmannii ）ATCC７８３
０による微生物定量法、パントテン酸はLactobacillus
plantarum ATCC８０１４による微生物定量法で行った。
総アスコルビン酸はヒドラジンで誘導体化後、高速液体
クロマトグラフ法で定量した。他のビタミンは、高速液
体クロマトグラフ法で定量した。スーパーオキシド消去
活性は電子スピン共鳴（ESR ）法で決めた。J. M. McCo
rdおよびI. Fridovichが定義した単位（ジャーナル オ
ブ バイオロジカルケミストリー ２２４巻、６０４９
頁（１９６９））に相当する消去能として示した。これ
らの分析結果を第２表に示した。
蛋白質換算係数は６．２５を用いた。ドコサヘキサエン
酸、ステロール組成およびスクアレンは、ガスクロマト
グラフ法で求めた。ビタミンB12 は、Lactobacillus de
lbrueckii subsp.lactis（L.leichmannii ）ATCC７８３
０による微生物定量法、パントテン酸はLactobacillus
plantarum ATCC８０１４による微生物定量法で行った。
総アスコルビン酸はヒドラジンで誘導体化後、高速液体
クロマトグラフ法で定量した。他のビタミンは、高速液
体クロマトグラフ法で定量した。スーパーオキシド消去
活性は電子スピン共鳴（ESR ）法で決めた。J. M. McCo
rdおよびI. Fridovichが定義した単位（ジャーナル オ
ブ バイオロジカルケミストリー ２２４巻、６０４９
頁（１９６９））に相当する消去能として示した。これ
らの分析結果を第２表に示した。
【００２０】
【表２】
【００２１】この結果により、炭素源としてエタノール
を添加することにより、粗蛋白質、ドコサヘキサエン
酸、エルゴステロール、スクアレン、カロチン、ビタミ
ンA 、ビタミンD 、α- トコフェロール、ビタミンK1、
パントテン酸、スーパーオキシド消去活性が顕著に増加
していることが明らかである。
を添加することにより、粗蛋白質、ドコサヘキサエン
酸、エルゴステロール、スクアレン、カロチン、ビタミ
ンA 、ビタミンD 、α- トコフェロール、ビタミンK1、
パントテン酸、スーパーオキシド消去活性が顕著に増加
していることが明らかである。
【００２２】実施例３：グルコース培地とエタノール培
地での細胞体成分の相違 保存培地（KH培地に１．５％寒天を加えたもの）に増殖
したユーグレナ・グラシリスSK-ZK を前培養培地（KH培
地）１５０mlを入れた５００ｍｌ坂口フラスコに接種
し、２５℃、１００rpm で２日間振とう培養した。この
培養液１０mlを、８００mlのKH培地を入れた３Ｌ容ミニ
ジャーに添加し、２５℃、撹拌７０rpm 、通気量０．５
vvm で培養した。エタノール添加の場合は、７２時間培
養後（細胞数約８×１０6 個/ml ）にLDAO２４０mgを８
mlのエタノールに溶解し、全量をミニジャーに添加し、
さらに２４時間培養を続行した。培養終了後、遠心分離
によって細胞体を集め、真空乾燥を行った。
地での細胞体成分の相違 保存培地（KH培地に１．５％寒天を加えたもの）に増殖
したユーグレナ・グラシリスSK-ZK を前培養培地（KH培
地）１５０mlを入れた５００ｍｌ坂口フラスコに接種
し、２５℃、１００rpm で２日間振とう培養した。この
培養液１０mlを、８００mlのKH培地を入れた３Ｌ容ミニ
ジャーに添加し、２５℃、撹拌７０rpm 、通気量０．５
vvm で培養した。エタノール添加の場合は、７２時間培
養後（細胞数約８×１０6 個/ml ）にLDAO２４０mgを８
mlのエタノールに溶解し、全量をミニジャーに添加し、
さらに２４時間培養を続行した。培養終了後、遠心分離
によって細胞体を集め、真空乾燥を行った。
【００２３】この乾燥細胞体中のβ- カロチン、ビタミ
ンE をビタミン分析法（日本ビタミン学会編〔化学同
人〕、10-11 頁および32-34 頁）に従って分析した。そ
の結果を下記の表３に示した。
ンE をビタミン分析法（日本ビタミン学会編〔化学同
人〕、10-11 頁および32-34 頁）に従って分析した。そ
の結果を下記の表３に示した。
【００２４】
【表３】
【００２５】
【発明の効果】本発明によれば、ユーグレナの培養にお
いて培地中にエタノールあるいはエタノールとコレステ
ロール阻害剤を添加することにより、ユーグレナ細胞体
内に蛋白質、ビタミン類、脂質、脂肪酸、スーパーオキ
シド消去活性物質等の蓄積量を増すことができ、稚魚飼
料、魚飼、動物飼料、健康食品等への有効な対応が計れ
る。
いて培地中にエタノールあるいはエタノールとコレステ
ロール阻害剤を添加することにより、ユーグレナ細胞体
内に蛋白質、ビタミン類、脂質、脂肪酸、スーパーオキ
シド消去活性物質等の蓄積量を増すことができ、稚魚飼
料、魚飼、動物飼料、健康食品等への有効な対応が計れ
る。
【手続補正書】
【提出日】平成１１年４月１日
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正内容】
【特許請求の範囲】
Claims (4)
- 【請求項１】 炭素源の一部又は全てがエタノールであ
る培養培地中でユーグレナ（Euglena gracilis）を培養
することを特徴とする機能強化ユーグレナ細胞体の製造
方法。 - 【請求項２】 ユーグレナ培養の栄養培地が炭素源、窒
素源、金属塩類及びビタミン類を含んでなる請求項１に
記載のユーグレナ細胞体の製造方法。 - 【請求項３】 培養液中にステロール代謝系阻害剤及び
／又は増殖調整剤を添加することを特徴とする請求項１
又は２に記載のユーグレナ細胞体の製造方法。 - 【請求項４】 ユーグレナ細胞体の機能強化物質として
カロチン、ビタミンA 、ビタミンC 、ビタミンD 、ビタ
ミンE 、ビタミンK1、ビタミンB12 、パントテン酸、ド
コサヘキサエン酸(DHA）、アラキドン酸、エイコサペン
タエン酸、スクアレン及び／又はスーパーオキシド消去
活性物質を含んで成る、請求項１〜３のいずれか１項に
記載の方法により製造されるユーグレナ細胞体。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP6927598A JP2997767B2 (ja) | 1998-03-05 | 1998-03-05 | エタノールを用いた高機能性ユーグレナの製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11243942A true JPH11243942A (ja) | 1999-09-14 |
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Family
ID=13397955
Family Applications (1)
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|---|---|
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-
1998
- 1998-03-05 JP JP6927598A patent/JP2997767B2/ja not_active Expired - Lifetime
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| Publication number | Publication date |
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