JP3044577B2 - 高度不飽和脂肪酸含有光合成細菌の製造法 - Google Patents

高度不飽和脂肪酸含有光合成細菌の製造法

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JP3044577B2
JP3044577B2 JP3033320A JP3332091A JP3044577B2 JP 3044577 B2 JP3044577 B2 JP 3044577B2 JP 3033320 A JP3033320 A JP 3033320A JP 3332091 A JP3332091 A JP 3332091A JP 3044577 B2 JP3044577 B2 JP 3044577B2
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cells
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一良 矢澤
和郎 渡辺
聖 近藤
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Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、高度不飽和脂肪酸含有
光合成細菌を製造する方法に関する。該光合成細菌は食
品、飼料、肥料及び医薬品、農業、水産、化成品などの
分野において有用である。
【0002】
【従来の技術】光合成細菌はその菌体中に良質のタンパ
ク質を豊富に含んでおり、また細菌性葉緑素やカロチン
系色素、ビタミン含量も多く、養殖漁業において、重要
な飼料となり、既に市販もされている。更に食品、肥料
としての利用も考えられている。
【0003】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、かかる
光合成細菌が有する脂肪酸としては炭素数16〜18の
飽和脂肪酸及び/又はモノエン脂肪酸を主成分とするも
のであり、炭素数18以上かつ不飽和結合2以上の不飽
和脂肪酸(以下、高度不飽和脂肪酸と称す)、特に近年
稚仔魚の増養殖に必須とされているエイコサペンタエン
酸やドコサヘキサエン酸を全く含有していない。本発明
の目的は、高度不飽和脂肪酸含有光合成細菌を工業的に
効率良く、短時間で、容易に得ることのできる製造法を
提供することにある。
【0004】
【課題を解決するための手段】本発明を概説すれば、本
発明は高度不飽和脂肪酸含有光合成細菌の製造法に関す
る発明であって、光合成細菌を、高度不飽和脂肪酸及び
/又はその誘導体を含む油脂を添加した培地中で培養す
ることを特徴とする。
【0005】本発明者らは、上記の目的に合った製造法
を見出すために鋭意研究の結果、培地中に高度不飽和脂
肪酸及び/又はその誘導体を含む油脂を添加して培養し
た光合成細菌の脂質について、次のような知見を得た。
すなわち、光合成細菌の総脂質含有量は乾物換算で6
〜12重量%と高く、そのうち90%以上がリン脂質で
あること、リン脂質の脂肪酸組成を見ても高度不飽和
脂肪酸が10〜30重量%と高いこと、本発明で用い
る光合成細菌の増殖速度は著しく速く、多量の菌体を極
めて短時間のうちに得ることができること、等である。
本発明は、以上の知見に基づいて完成されたものであ
る。
【0006】本発明で用いる高度不飽和脂肪酸及び/又
はその誘導体を含む油脂としては、好ましくは総脂肪酸
中の高度不飽和脂肪酸の占める割合が10重量%以上の
ものが良く、このようなものの例を挙げるとイワシ、サ
バ、アジ等の青背魚より抽出した油脂、マグロやカツオ
等の大型海産魚の眼窩脂肪由来の油脂、微生物や藻類由
来の油脂、イカ等の肝臓より抽出した海産物由来の油脂
かどが好ましい例として挙げられる。
【0007】本発明で使用できる光合成細菌は、特に
属、種あるいは株などを限定するものではないが、通常
は、ロドシュードモナス(Rhodopseudomonas)属、ロド
スピリルム(Rhodospirillum)属などに分類される光合
成細菌を用いることができる。これらの光合成細菌につ
いては公的微生物寄託機関等にて容易に入手できる。例
えば上記のロドシュードモナスに属する光合成細菌の例
としてロドシュードモナス・キャプシュレイタ(Rhodop
seudomonas capsulata )FERM P−879,AT
CC−17015及びロドスピリルム・ルブルム(Rhod
ospirillumrubrum)ATCC−11170等を挙げるこ
とができる。
【0008】本発明の実施に当っては、光合成細菌を常
法により例えば培地で培養し、これを遠心分離法などで
集め、洗浄、必要に応じ乾燥して微生物粉末を得る。こ
の際の培地としては例えば下記表1に示す組成の培地を
調製することができる。%は重量%である。
【0009】
【表1】 表 1 酢酸ナトリウム 0.3% リン酸一カリウム 0.05% 塩化マグネシウム 0.02% 塩化ナトリウム 0.01% 塩化第二鉄 0.0001% 硫酸アンモニウム 0.03% 酵母エキス 0.3% ペプトン 0.3% ─────────────────────────── pH 7.0
【0010】培地中に添加する油脂としては、脂肪酸の
遊離型、エステル型、塩等の誘導体を含む油脂を用いる
ことができる。より好ましくは高度不飽和脂肪酸の塩、
例えばカリウム塩、ナトリウム塩、カルシウム塩等を含
む油脂を用いることができる。
【0011】添加する油脂は、培地に対し0.001〜
10重量%、好ましくは0.01〜1.0重量%を添加
することが、光合成細菌の増殖及び高度不飽和脂肪酸の
取込み率から見て望ましい。また光合成細菌の培養時に
乳化剤を添加しても良い。
【0012】培養終了後集菌により菌体あるいは水分を
除去した乾燥菌体を得ることができる。このような菌体
中には高度不飽和脂肪酸が含有されている。なお、菌体
に含有された高度不飽和脂肪酸の総量は、培地に添加さ
れた油脂の種類や量、培養温度や時間等により変化する
が、およそ1.0〜3.0重量%である。
【0013】また所望によりこの光合成細菌菌体から、
有機溶剤などを用いて脂質抽出を行い、脱溶剤後、アセ
トン分画を行い、アセトンに不溶な物質を集めれば、リ
ン脂質の粗分画物を得ることができる。
【0014】このようにして得られた高度不飽和脂肪酸
含有光合成細菌菌体は、シオミズツボワムシやアルテミ
ア等の稚仔魚用飼料生物のエサ、あるいは直接稚仔魚用
飼料として使用できる。更に食品や動物用飼料、土壌改
善用にも使用が可能である。一方該菌体より抽出した高
度不飽和脂肪酸リン脂質は、種々の疾病に対する医薬
品、化粧品素材、化成品原料としての利用が可能であ
る。
【0015】
【実施例】以下、本発明を実施例により更に具体的に説
明するが、本発明はこれら実施例に限定されない。な
お、例中の%は特に断らない限り重量%を意味する。
【0016】実施例1 ロドシュードモナス・キャプシュレイタ ATCC−1
7015を、表1に示した培地に、マグロ眼窩脂肪より
抽出して得られた脂肪酸カリウム塩からなる油脂(該油
脂中ドコサヘキサエン酸カリウム30%、エイコサペン
タエン酸カリウム8.4%を含有)0.1%を含有せし
め、pH7に調整した培地中で15℃にて10リットル
好気培養し、培養物を遠心分離して集め、洗浄して菌体
100gを得た。得られた菌体100gをクロロホル
ム:メタノール=2:1混合溶剤で抽出し、8gの抽出
脂質を得た。この脱溶剤後の総脂質にアセトン400m
lを加え、冷却しながらかくはんを行い、糖脂質、キノ
ンを分別ろ過によりアセトン不溶分を回収した。得られ
たアセトン不溶分をクロロホルムに溶解し、次にこの溶
液をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにかけ、クロ
ロホルム、クロロホルム:メタノール=2:1、クロロ
ホルム:メタノール=1:1及びメタノールで順次展開
した。得られた各フラクションをTLCでチェックし、
目的とするリン脂質のフラクションをいくつか見出し、
それらを回収し、脱溶剤したところ約7gのリン脂質が
得られた。得られたリン脂質の組成はTLC分析の結
果、ホスファチジルグリセロール(70%)及びホスフ
ァチジルエタノールアミン(20%)が主成分であり、
またこれらの脂質の構成高度不飽和脂肪酸はドコサヘキ
サエン酸18.5%、エイコサペンタエン酸5.6%で
あつた。
【0017】実施例2 上記実施例1に用いた菌株と同じ菌株を、添加する油脂
としてエイコサペンタエン酸0.1%を用い、上記実施
例1と同様の方法で培養して菌体64gを得た。該菌体
を実施例1と同方法にて抽出したところ、リン脂質6.
8gを得た。該リン脂質の構成高度不飽和脂肪酸はエイ
コサペンタエン酸21%であった。
【0018】実施例3 上記実施例1に用いた菌株と同じ菌株を、添加する油脂
としてエイコサペンタエン酸カリウム0.1%及びドコ
サヘキサエン酸カリウム0.1%を用い、上記実施例1
と同様の方法で培養して得た光合成細菌菌体の重量を測
定したところ66.5gであった。該光合成細菌の含有
する高度不飽和脂肪酸は、ドコサヘキサエン酸8.5
%、エイコサペンタエン酸17.2%であった。
【0019】実施例4 ロドスピリルム・ルブルム ATCC−11170を、
添加する油脂としてエイコサペンタエン酸0.1%を用
い、上記実施例1と同様の方法で培養して菌体53gを
得た。該菌体を実施例1と同方法にて抽出したところ、
リン脂質5.8gを得た。該リン脂質の構成高度不飽和
脂肪酸はエイコサペンタエン酸19%であった。
【0020】実施例5 ロドスピリウム・ルブルム ATCC−11170を、
添加する油脂としてエイコサペンタエン酸カリウム0.
1%及びドコサヘキサエン酸カリウム0.1%を用い、
上記実施例1と同様の方法で培養して得た光合成細菌菌
体の重量を測定したところ57.6gであった。該光合
成細菌の含有する高度不飽和脂肪酸は、ドコサヘキサエ
ン酸7.4%、エイコサペンタエン酸17.6%であっ
た。
【0021】
【発明の効果】以上説明したように、本発明方法によ
り、高度不飽和脂肪酸含有光合成細菌を効率良く、短時
間で且つ容易に得ることが可能となった。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特公 昭55−19920(JP,B2) 特公 昭51−15347(JP,B1) (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) C12N 1/00 - 1/38 C12P 1/00 - 41/00 BIOSIS(DIALOG) WPI(DIALOG)

Claims (1)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 光合成細菌を、高度不飽和脂肪酸及び/
    又はその誘導体を含む油脂を添加した培地中で培養する
    ことを特徴とする高度不飽和脂肪酸含有光合成細菌の製
    造法。
JP3033320A 1991-02-04 1991-02-04 高度不飽和脂肪酸含有光合成細菌の製造法 Expired - Lifetime JP3044577B2 (ja)

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WO2006041903A2 (en) * 2004-10-08 2006-04-20 Coho Hydroclean Sa A method of cultivating animals to develop a desired color and to increase their rate of growth

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