JPH05186362A - 水溶性組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【目的】持続性の医薬活性物質含有水溶性組成物を提供
する。 【構成】（イ）エリスロポエチン以外の、生体により分
泌されるペプチドもしくはその誘導体である医薬活性物
質または化学合成医薬活性物質，（ロ）水溶性ヒアルロ
ン酸および（ハ）実質的に薬理活性を示さず体液内に注
入しうる水溶性蛋白を含有してなる水溶性組成物。 【効果】医薬活性物質の生体内における持続効果が増強
され、しかも細い注射針でも投与可能であり患者の苦痛
が緩和される。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、医薬活性物質の持続性
製剤として有用な水溶性組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】医薬活性物質、とりわけ、ペプチド性医
薬品の持続性製剤の目的はペプチドの体液中濃度を持続
的に一定有効濃度範囲に保つことであるが、その薬理効
果の発現機序により、 a)薬理効果が体液中有効濃度にあまり依存せず、かつ過
剰な薬理効果が生体にとって有害とならないものと、 b)体液中有効濃度に依存して薬理効果が現れ、かつ急激
な薬理効果の発現や過剰な薬理効果の発現が生体にとっ
て有害であるために定期的に薬用量を調整する必要があ
るものがある。

【０００３】持続性製剤の基剤として種々のものが知ら
れているが、ヒアルロン酸もその一つであり、特開平２
−２１３号公報にはヒアルロン酸およびその非毒性塩を
含む生理活性ペプチドの持続性製剤に関する技術が開示
されている。該公報においてヒアルロン酸ナトリウムの
濃度を５％としたカルシトニン、またはエルカトニン持
続製剤を雄性ラットに皮下投与後の血液中カルシウム濃
度の低下が最低１２時間持続しており、また、同様にヒ
アルロン酸ナトリウム濃度を５％としたヒト成長ホルモ
ン持続性製剤を雄性ラットに投与後の血液中ヒト成長ホ
ルモン濃度は最低１２時間持続する例が開示されてい
る。これらはいずれも、比較例のヒアルロン酸ナトリウ
ムが存在しない場合に比べて明らかな持続時間の延長が
認められている。一方、本公報の別な例をみると、ヒア
ルロン酸ナトリウムの濃度を５％としたテガフール製剤
を雄性ラットに皮下投与しても持続効果は観察されてい
ない。 ところで、これらの発明は投与された部位での
ヒアルロン酸の粘性による溶液中での物質の拡散遅延を
利用しており、また、カチオン基を含む物質ではカルボ
キシル基を有するヒアルロン酸巨大分子との間でイオン
交換が起こり得、この交換が物質の拡散を一層遅くしう
る。特開平２−２１３号公報においてヒアルロン酸自身
の濃度が３〜７％がもっとも好ましいとされている。し
かしながら、その高粘度のために気泡が混入した場合に
その除去が大きな問題になり、遠心分離または減圧によ
る脱気が必要になってくる。また、同時にその高粘度の
ために太い注射針を使用する必要があり、患者に与える
苦痛は無視できないものである。また、テガフールを使
用した例のようにヒアルロン酸の濃度を高度に上げても
持続効果が得られない場合もある。一方、特開平１−２
８７０４１号公報においては１％濃度のヒアルロン酸を
用いた例が記載されている。この１％濃度のヒアルロン
酸ナトリウム関節内注射液の場合、１８〜２０Ｇ程度の
太めの注射針の使用が必要とされており、皮下投与用注
射製剤としては患者への苦痛が大きい。

【０００４】特開昭６２−１２９２２６号公報には注射
しうる製品中のヒアルロン酸濃度は約０.０５％〜４％
（重量）の範囲とすることができ、かつ製品の最終使用
に従ってより高くすることもできると記載されている
が、具体的な注射剤への適用についての記述は無い。し
かしながら、前述のごとく比較的高濃度のヒアルロン酸
を使用しなければ医薬活性物質の持続効果を得ることは
できないことは容易に推察される。即ち、高濃度のヒア
ルロン酸の粘度に依存して医薬活性物質の徐放効果が得
られる可能性はあり、また、pＨを酸性側に低下させる
ことにより（例えばpＨ２.５近辺）、ヒアルロン酸の粘
度が高まることを利用すれば同様に医薬活性物質の徐放
効果が得られる可能性はある。しかしながら、ヒアルロ
ン酸の粘度が高まれば高まるほど注射剤としては投与し
にくくなり、またヒアルロン酸の溶液のpＨが生理的pＨ
領域からはずれるほど医薬活性物質の安定性に影響を与
えたり、投与される生体組織部位にダメージを与えるこ
とが懸念される。特開平３−４７９０号公報には、バチ
ルス・リケニホルミスの産生するタンパク質分解酵素の
水溶液にタンパク質様物質及び多糖類を添加することに
より酵素を安定化する方法が記載されているが、該酵素
は生体により分泌されるペプチドではない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】上記のように医薬活性
物質を徐放製剤化する目的でヒアルロン酸を用いる試み
がなされているものの、生体に投与する際の適合性につ
いては、いまだ解決されていない問題点が残されてい
る。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記の課題
を解決するため鋭意研究をおこなったところ、医薬活性
物質に水溶性ヒアルロン酸および実質的に薬理活性を示
さず体液内に注入しうる水溶性蛋白質を含有してなる水
溶性製剤を投与することにより医薬活性物質の薬理活性
を損なわず、投与初期の薬理効果の急激な発現を抑えな
がら薬理効果を持続させることが可能になることを見い
だし、これに基づいてさらに研究した結果、本発明を完
成した。

【０００７】本発明は、（イ）エリスロポエチン以外
の、生体により分泌されるポリペプチドもしくはその誘
導体である医薬活性物質または化学合成医薬活性物質，
（ロ）水溶性ヒアルロン酸またはその非毒性塩および
（ハ）実質的に薬理活性を示さず体液内に注入しうる水
溶性蛋白質を含有してなる水溶性組成物である。

【０００８】本発明において生体により分泌されるポリ
ペプチドもしくはその誘導体である医薬活性物質、また
は化学合成医薬活性物質は、本明細書において、単に
「医薬活性物質」と略称されることがある。本発明にお
いて生体により分泌される医薬活性物質としてのポリペ
プチドとしては、生体において生産され、血流中に分泌
されるか（内分泌）、周囲の組織液中に分泌されるか
（傍分泌あるいは自家分泌）、または体外に分泌される
（外分泌）分泌ペプチドまたは分泌蛋白質が挙げられ
る。さらに、本発明において医薬活性物質としてのポリ
ペプチドとしては、生体により生産され得るものであれ
ばよく、使用に際しては生体から抽出されたものあるい
は遺伝子工学的手法によるもののいずれでもよい。

【０００９】本発明における生体としては、単一の真核
細胞から成る生体、複数の真核細胞から成る生体、該生
体から摘出された組織あるいは臓器、該生体から単離さ
れた細胞が挙げられる。該単一の真核細胞から成る生体
の例としては酵母が挙げられる。該複数の真核細胞から
成る生体の例としては脊椎動物、無脊椎動物が挙げられ
る。上述の単離された真核細胞の例としてはヒト，マウ
スから分離された癌細胞が挙げられる。該脊椎動物とし
ては、哺乳類（例、ヒト，齧歯類（例、ラット，マウ
ス），ウシ，ウマ，ヒツジ），鳥類（例、家禽類（例、
ニワトリ），魚類（例、鮭，鮪），爬虫類（例、ヘビ）
が挙げられる。該無脊椎動物としては、蛭，蜘などが挙
げられる。上述の生体として好ましくは、複数の真核細
胞から成る生体が挙げられ、さらに好ましくはヒト、
蛇、蜘，蛭が挙げられる。

【００１０】該ペプチドとしては、例えばオクタノール
／水分配比が約０.１以下の特性を有するものが好まし
く、この分配比が約０.０５以下であるものがさらに好
ましい。上記医薬活性物質がペプチドである場合、該ペ
プチドの分子量は約２００〜２０万であるものが好まし
く、約３００〜９万のものがとりわけ好ましい。該ペプ
チドとしては天然に生産されるものでもよく、遺伝子組
み替えの手法によるものでもよく、また、化学合成によ
るものでもよい。

【００１１】該ポリペプチドの例としては、例えば、サ
イトカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系
に作用する因子、細胞接着因子、中枢および末梢神経系
に作用する因子、体液電解質および血液有機物質に作用
する因子、骨および骨格に作用する因子、消化器系に作
用する因子、腎および泌尿器系に作用する因子、結合組
織および皮膚に作用する因子、感覚器官に作用する因
子、免疫系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、
生殖器系に作用する因子、および酵素が挙げられる。

【００１２】該ポリペプチドとしては、なかでも、サイ
トカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に
作用する因子、中枢および末梢神経系に作用する因子、
体液電解質および血液有機物質に作用する因子、骨およ
び骨格に作用する因子、消化器系に作用する因子、免疫
系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、生殖器系
に作用する因子、および酵素が好ましい。

【００１３】上記サイトカインの例としては、たとえば
リンホカイン，モノカイン，造血因子が挙げられる。該
リンホカインとしては、たとえばインターフェロン類
（例、インターフェロン−α，−β，−γ），インター
ロイキン類（例、インターロイキン−２〜−１１）など
が挙げられる。該モノカインとしては、たとえばインタ
ーロイキン−１，腫瘍壊死因子（例、ＴＮＦ−α，−
β），悪性白血球阻止因子（ＬＩＦ）などが挙げられ
る。造血因子の例としては、たとえば顆粒球コロニー刺
激因子（Ｇ−ＣＳＦ），顆粒球−マクロファージコロニ
ー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ），マクロファージコロニー
刺激因子（Ｍ−ＣＳＦ）などが挙げられる。該造血因子
として、さらに血小板新生（増殖）作用を持つ因子が挙
げられ、例えば、白血球増殖因子製剤（リューコプロー
ル、森永乳業）、スロンボポイエチン、血小板増殖刺激
因子および巨核球増殖（刺激）因子が挙げられる。

【００１４】骨および骨格に作用する因子の例として
は、例えば、カルシトニン、骨Ｇlaペプチド、副甲状腺
ホルモンまたはその活性フラグメント（オステオスタチ
ン、Endocrinology、１２９、３２４(１９９１)）、ヒ
ストンＨ４−関連骨形成増殖ペプチド（ＯＧＰ、The Ｅ
ＭＢＯ Journal、１１、１８６７(１９９２)）、または
これらのムテイン、またはこれらの誘導体、またはこれ
らのアナログが挙げられる。上記成長因子の例として
は、たとえば、神経成長因子類（ＮＧＦ，ＮＧＦ−２／
ＮＴ−３），上皮細胞増殖因子（ＥＧＦ），線維芽細胞
成長因子（ＦＧＦ），インスリン様成長因子（ＩＧ
Ｆ），形質転換成長因子（ＴＧＦ），血小板由来細胞成
長因子（ＰＤＧＦ）などが挙げられる。上記ペプチドホ
ルモンの例としては、たとえばインスリン，成長ホルモ
ン，黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨ−ＲＨ），副
腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ），アミリン，オキシト
シン，黄体形成ホルモンまたはこれらの誘導体、類縁
体、同族体などが挙げられる。該ＬＨ−ＲＨの類縁体の
例としては、公知のものが挙げられるが、なかでも例え
ば、米国特許第４００８２０９号公報に記載されたもの
が挙げられる。

【００１２】心臓血管系に作用する因子としては血圧お
よび動脈硬化をコントロールする因子、たとえばエンド
セリン，エンドセリンインヒビター，バソプレシン，レ
ニン，アンギオテンシンＩ，アンギオテンシンII，アン
ギオテンシンIII，アンギオテンシンＩインヒビター，
アンギオテンシンII受容体アンタゴニスト，心房ナトリ
ウム利尿ペプチド（ＡＮＰ），抗不整脈ペプチドなどが
挙げられる。上記中枢および末梢神経系に作用を持つ因
子としては、たとえば、鎮痛麻酔ペプチド（例、エンケ
フアリン，エンドルフィン，キョートルフィン），ニュ
ーロトロピックファクター（ＮＴＦ），カルシトニン遺
伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ），下垂体アデニレートサ
イクラーゼ活性化ポリペプチド（ＰＡＣＡＰ），甲状腺
ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ），ＴＲＨの塩、その誘
導体（特開昭５０−１２１２７３（米国特許 No. ３９
５９２４７），特開昭５２−１１６４６５（米国特許 N
o. ４１００１５２）），ニューロテンシンなどが挙げ
られる。

【００１６】消化器系に作用する因子としては、たとえ
ばセクレチン，ガストリンなどが挙げられる。免疫系に
作用する因子の例としては、例えば炎症や悪性新生物を
コントロールする因子や、感染性微生物を攻撃する因子
などが挙げられる。体液電解質と血液有機物に作用する
因子の例としては、例えば血液凝固、プラズマ中コレス
テロール濃度や金属イオンの濃度をコントロールする因
子などが挙げられる。これらのペプチドまたは因子は該
ポリペプチドの可溶性レセプターをその概念に含む。細
胞接着因子の例としては、例えば、ラミニンや細胞間接
着因子１（ＩＣＡＭ１）などが挙げられる。

【００１７】該ポリペプチドの例としては、天然に生産
され、あるいは化学合成または遺伝子工学の手法で生産
され抗原になりうるペプチドあるいは蛋白質、例えば杉
花粉あるいはぶたくさ花粉などが挙げられる。これらは
単独で、あるいはハプテンに結合された状態であるいは
アジュバンドとともに本発明の組成で注射剤として投与
される。該ペプチドはさらに天然由来のあるいは遺伝子
組み替え法により生産される酵素が含まれてもよく、投
与可能な酵素として例えばスーパーオキサイドディスミ
ュターゼ（ＳＯＤ）、アスパラギナーゼ、カリクレイン
などが挙げられるが、これに限定されるものではない。
これらのペプチドまたは因子はそれぞれポリエチレング
リコールのような合成ポリマー、あるいはコンドロイチ
ン、多糖類のような天然ポリマー、または非ペプチド性
物質で化学的に修飾されたものを含んでもよい。ここで
いう非ペプチド性物質はレセプターに対するリガンドで
もよいし、抗体に対する抗原でもよい。

【００１８】さらに上記のポリペプチドまたは因子は複
数のペプチドが化学的な方法または遺伝子組み替え技術
により結合されたものを含んでもよい。上述したペプチ
ドまたは因子は、アミノ酸配列や糖鎖の異なるムテイン
でもよく、糖鎖を持たない因子でもよく、またはこれら
の誘導体、類縁体（アナログ）、または同族体（ホモロ
グ）でもよく、そしてこれらの活性フラグメントでもよ
く、また、これらはアンタゴニストまたはアゴニストの
いづれの作用機構を持っていてもよい。上記ポリペプチ
ドにおいては、インターフェロン類、インターロイキン
類、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＦＧＦ、
ＴＮＦ、副甲状腺ホルモン、カルシトニン、インスリ
ン、ＬＨ−ＲＨまたはこれらのムテイン、類縁体、同族
体または活性フラグメントがより好ましい。化学合成医
薬活性物質としては、例えば、心臓血管系に作用するも
の、細胞接着に作用するもの、中枢および末梢神経系に
作用するもの、体液電解質および血液中有機物質に作用
するもの、骨および骨格に作用するもの、消化器系に作
用するもの、腎−泌尿器系に作用するもの、結合組織お
よび皮膚に作用するもの、感覚器官に作用するもの、免
疫系に作用するもの、呼吸器系に作用するもの、感染性
微生物に作用するもの、そして生殖器系に作用するもの
などが挙げられる。

【００１９】上述の化学合成医薬活性物質として、心臓
血管系に作用するもの、細胞接着に作用するもの、中枢
および末梢神経系に作用するもの、体液電解質および血
液中有機物質に作用するもの、骨および骨格に作用する
もの、消化器系に作用するもの、免疫系に作用するも
の、呼吸器系に作用するもの、感染性微生物に作用する
ものが好ましい。上述の心臓血管系に作用する化学合成
医薬活性物質の例として、カルシウム拮抗剤、アンギオ
テンシン転換酵素阻害剤、アンギオテンシンIIレセプタ
ー拮抗剤、およびカリウムチャンネルオープナーなどが
挙げられる。上述の細胞接着に作用する化学合成医薬活
性物質の例としてＲＧＤ拮抗剤が挙げられる。上述の中
枢神経および末梢神経に作用する化学合成医薬活性物質
の例として、ジアゼパムのような向精神薬あるいは抗精
神病薬、鎮吐剤、およびベンゾキノン誘導体のような抗
痴呆薬などが挙げられる。

【００２０】上述の体液電解質および血液中有機物質に
作用する化学合成医薬活性物質の例として、血液凝固
や、例えばプラバスタチンナトリウム塩のようなプラズ
マコレステロール濃度をコントロールするものなどが挙
げられる。上述の骨および骨格に作用する化学合成医薬
活性物質の例として、ビスフォスフォネート、イプリフ
ラボン、ビタミンＤ₃のような骨そしょう症治療薬、お
よび抗リューマチ薬などが挙げられる。上述の消化器系
に作用する化学合成医薬活性物質の例として、ランソプ
ラゾールのようなプロトンポンプ阻害薬やシメチジンの
ようなＨ２レセプター拮抗薬などが挙げられる。上述の
免疫系に作用する化学合成医薬活性物質の例として、イ
ンドメサシンのような抗炎症薬、アドリアマイシン、シ
スプラチンのような抗癌剤、抗アレルギー剤、および非
ペプチド性抗原物質などが挙げられる。

【００２１】上述の呼吸器系に作用する化学合成医薬活
性物質の例として、抗喘息薬などが挙げられる。上述の
感染性微生物に作用する化学合成医薬活性物質の例とし
て、抗ウイルス剤や、セファロスポリンやペニシリンの
ような抗生物質などが挙げられる。上述の生殖器系に作
用する化学合成医薬活性物質の例として、テストステロ
ンなどの性ステロイドが挙げられる。上述の化学合成医
薬活性物質の例として、さらにホルモン（例えばデキサ
メサゾン、プレドニゾロン）および非ペプチド性抗原物
質などが挙げられる。上述の化学合成医薬活性物質の例
として、無機物質および有機物質が挙げられる。さら
に、上述の化学合成医薬活性物質として、プロスタグラ
ンディン、リューコトリエン、糖類、多糖類、金属キレ
ート、またはアンチセンスＲＮＡ、ＤＮＡのような核酸
を含んでもよい。上述の化学合成された非ペプチド性抗
原物質は単独で、あるいはハプテンに結合して、あるい
はアジュバントとともに本発明の組成で注射剤として投
与される。

【００２２】本明細書におけるヒアルロン酸としては、
Ｎ−アセチルグルコサミンとグルクロン酸とから成るム
コ多糖の一種であるヒアルロン酸、これの非毒性塩が挙
げられる。また、ヒアルロン酸の誘導体あるいはこれの
非毒性塩でもよい。非毒性の塩としてはナトリウム、カ
リウム等のアルカリ金属塩、マグネシウム、カルシウム
などのアルカリ土類金属塩が挙げられる。とりわけ、ナ
トリウム塩が最も好ましく用いられる。ヒアルロン酸お
よびその非毒性塩としては分子量１万〜５００万（粘度
法：極限粘度とマークーフービング（Mark−Houvinc）
式を用いる）、好ましくは１０万〜３００万程度のもの
が好ましい。。

【００２３】本発明の組成物における実質的に薬理活性
を示さず体液内に注入しうる水溶性蛋白質（以下、「水
溶性蛋白質」と称することもある。）としては、たとえ
ば血清アルブミン、グロブリン、コラーゲン、ゼラチン
などが挙げられる。なかでも血清アルブミンが好まし
い。該水溶性蛋白質は、化学的に修飾されていないもの
が好ましい。ここでいう薬理活性とは単位投与物中に使
用される濃度の水溶性蛋白質で引き起こされる実質的な
薬理活性と定義される。

【００２４】本発明の水溶性組成物は、水溶液にしたと
き、その粘度が約５００センチポイズ（cp）以下となる
ように調整され、好ましくは約５０〜４００cpの範囲に
調整される。該粘度は、ヒアルロン酸の分子量および濃
度、水溶性蛋白質の濃度、医薬活性物質の濃度、および
食塩（後述の等張化剤として用いる）などの塩類の濃度
などによって影響され、また、水溶性組成物のpＨによ
っても、多少、影響されるので、目的とする水溶性組成
物に応じて、上記の粘度となるような条件を選択すれば
よい。

【００２５】本明細書における粘度はＥ型粘度計（東京
計器製）を用い、コーンＬＤを使用して温度２５℃で測
定した粘度をいう。本水溶性組成物におけるヒアルロン
酸および水溶性蛋白質の好ましい使用濃度を以下に挙げ
る。水溶性ヒアルロン酸の使用濃度は好ましくは約０.
０１〜３％（Ｗ／Ｖ）、さらに好ましくは、約０.０５
〜２％（Ｗ／Ｖ）である。本発明の組成物において、水
溶性蛋白質として、たとえば、血清アルブミンを用いる
場合、その使用濃度は約０.００１〜５％（Ｗ／Ｖ）、
さらに好ましくは約０.００５〜２％（Ｗ／Ｖ）であ
る。水溶性蛋白質としてグロブリンが用いられる場合に
は、その使用濃度は約０.００１〜５％（Ｗ／Ｖ）、さ
らに好ましくは約０.００５〜２％（Ｗ／Ｖ）である。
水溶性蛋白としてコラーゲンが用いられる場合には、そ
の使用濃度は約０.００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、さらに好
ましくは約０.００５〜０.２％（Ｗ／Ｖ）である。水溶
性蛋白としてゼラチンが用いられる場合には、その使用
濃度は約０.００１〜１％（Ｗ／Ｖ）、さらに好ましく
は約０.００５〜０.５％（Ｗ／Ｖ）である。

【００２６】本発明の水溶性組成物溶液のpＨは、医薬
活性物質の活性に大きな影響を与えず、注射剤として許
容される範囲内で、また溶液の粘度を大幅に変化させた
り、沈澱物などを形成させないpＨが用いられる。好ま
しくはpＨ４〜pＨ８である。さらに好ましくは、pＨ５
〜pＨ８である。医薬活性物質の配合割合としては該物
質の活性および治療上の必要量に応じて、その有効量を
含有せしめればよいが、一般に医薬活性物質対ヒアルロ
ン酸の重量比は好ましくは約０.０００１：１〜１０：
１であり、好ましくは約０.０００２：１〜５：１、よ
り好ましくは約０.０００２：１〜１：１、さらに好ま
しくは約０.０００２：１〜０．１：１である。水溶性
蛋白質の配合割合も同様に一概には決定できないが、注
射用医薬組成物に通常添加される量が添加可能であり、
水溶性蛋白質対ヒアルロン酸の重量比は約０.００１：
１〜１００：１が好ましく、さらに好ましくは約０.０
１：１〜１０：１、最も好ましくは約０.１〜１０：１
である。

【００２７】本発明の組成物は医薬活性物質、ヒアルロ
ン酸および水溶性蛋白質の３者が単位投与物中に存在す
るようにするのが好ましい。例えば、アンプルまたはバ
イアル中に滅菌水または滅菌生理食塩水に溶解または懸
濁して３者が存在するようにする。この場合、医薬活性
物質の溶液，ヒアルロン酸の溶液および水溶性蛋白質の
溶液を混合して調製しても、または医薬活性物質の溶液
にヒアルロン酸の粉末及び水溶性蛋白質の粉末を加えて
調製しても、またはその他の組み合わせによる調製法で
もよい。また、医薬活性物質とヒアルロン酸及び水溶性
蛋白質が混在する凍結乾燥または真空乾燥粉末に滅菌水
または滅菌生理食塩水を加えて調製してもよい。この単
位投与物には従来用いられている添加物例えばpＨ調節
剤（例、グリシン，塩酸，水酸化ナトリウム），局所麻
酔剤（例、塩酸キシロカイン，クロロブタノール），等
張化剤（例、食塩，マンニトール，ソルビトール），吸
着防止剤（例、Tween ８０）などを含有させてもよい。
この単位投与物には、薬学的に許容されるポリエチレン
グリコール４００やデキストランなどの添加物をさらに
含んでもよい。

【００２８】本発明の持続性製剤において、各主要成分
が混合される時には、医薬活性物質の活性が保持されか
つ混合操作中の溶液に気泡がほとんど発生しないことが
望ましい。該各主要成分は同時にあるいは適当な順番で
容器（例えば瓶あるいはドラなど。材質は医薬活性物質
の活性を損なわないものが選ばれる。）に入れられる。
各主要成分の体積の総和は好ましくは、該容器の４分の
３、より好ましくは多くて５分の３、さらに好ましくは
多くて２分の１、もっとも好ましくは多くて３分の１で
ある。該容器は緩和な条件でしんとうされるか、あるい
は好ましくは該容器の長軸を中心として回転混合され
る。該容器の回転数は、例えば該容器の容積、各主要成
分の体積の総和、ヒアルロン酸あるいはその非毒性塩の
濃度、該容器の雰囲気の温度などを考慮して決定され
る。容器の長軸を中心として回転される場合の好ましい
回転数は１０〜１０００回転／１分間であるが、これに
限定されるわけではない。該容器内の雰囲気は滅菌され
た正常な空気あるいは滅菌された清浄な窒素ガスでもよ
い。該操作により得られた溶液は小容量のバイアル瓶ま
たはアンプルなどに移されてさらに凍結乾燥の操作を受
けてもよい。

【００２９】本発明の水溶性組成物は、非経口投与製剤
とするのが好ましい。該非経口投与製剤としては、注射
製剤，経粘膜水剤，点鼻水剤，点耳水剤などが挙げられ
る。該注射製剤としては、静脈内投与用，皮下投与用，
関節腔内投与用，筋肉内投与用，眼球内投与用などが挙
げられる。本持続性製剤の粘度は約５００cp以下に調整
されているので、２５Ｇあるいは２６Ｇの注射針を用い
てアンプルあるいはバイアルから注射器内に本持続性製
剤を容易に吸引することが可能である。吸引時に生じる
気泡は単に短時間静置することにより、容易に除去可能
である。本発明の組成物は、水に溶解された状態のもの
でもよく、また、マンニトールなどの晶質物とともに凍
結乾燥されたものでもよい。凍結乾燥されたものは、滅
菌水または滅菌生理食塩水を加えて水溶液にする。 凍結乾燥された組成物の場合は、水溶液にしたときの粘
度、濃度が上記したものとなるように調整されればよ
い。

【００３０】ソフトカプセルに充填された液体状の本発
明の組成物、またはハードカプセルに充填あるいは錠剤
に成型された凍結乾燥粉末は、胃、大腸または直腸に投
与されてもよい。例えば、ポリ（乳酸−グリコール酸）
共重合体、ポリヒドロキシ酪酸、ポリ（ヒドロキシ酪酸
−グリコール酸）共重合体、またはこれらの混合物のよ
うな生分解性ポリマーの溶液に溶解あるいは分散された
液体状あるいは粉末状の本発明の組成物は、自体公知の
方法に従い、例えば、フィルム、マイクロカプセル（マ
イクロスフエアー）、ナノカプセル（ナノスフエアー）
などに成型されうる。さらに、本発明の組成物は燐脂
質、コレステロールまたはこれらの誘導体から成り、自
体公知の方法で作製されるリポソーム中に封入された
後、生理食塩水あるいは生理食塩水に溶解されたヒアル
ロン酸溶液中に分散されてもよい。さらに、液剤である
本発明の組成物は適度に粘性を持つため振動などの物理
的な撹乱に対して抵抗性が出ることにより、針付き注射
筒に予め本発明の組成物を充填してあるプレフィルドシ
リンジ( Prefilled Syringe )で患者に処方され、患者
による自己投与が可能になる。

【００３１】本発明の組成物は、通常温度または通常冷
蔵温度で保存され、好ましくは０℃〜室温（例えば約２
５℃）、さらに好ましくは＋２℃〜＋８℃で保存され
る。本発明の組成物の投与量，投与対象，投与対象疾患
などは、医薬活性物質のそれらによる。本発明の組成物
において、医薬活性物質に加えられる成分は低毒性であ
る。本発明の水溶性組成物は持続性が優れており、低濃
度のヒアルロン酸でも充分にこの効果を発揮できる。従
って、細い注射針で投与することが可能になり、患者の
苦痛は軽減される。この組成物は粘度が低く、従って気
泡の発生は大幅に抑制されうる。従って、臨床の場にお
いてもその使用は容易である。

【００３２】

【実施例】以下に実施例及び実験例を挙げて本発明をさ
らに具体的に説明するが、本発明はこれらに限定される
ものではない。 実施例１．塩基性繊維芽細胞増殖因子ミューテインの持
続製剤 リコンビナントヒト塩基性ＦＧＦムテインＣＳ２３（以
下、rhbＦＧＦムテインＣＳ２３と略称することもあ
る。）（ＥＰ公開２８１,８２２号公報）溶液（０.９６
ミリグラム蛋白質／ミリリットル）の０.３６ミリリッ
トルに注射用生理食塩水１.２６ミリリットル、ヒアル
ロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダ ルトン：
ジェンザイム社）８.１ミリグラムを加え、さらにヒト
血清アルブミン を２０％含有するアルブミンニチヤク
（日本製薬）を６マイクロリットル加えた。粘度 ３６
６cp.

【００３３】実施例２．神経細胞成長因子（ＮＧＦ）
（バイオメディカルテクノロジー社，米国）１０マイク
ログラムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血
清アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日
本製薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理
食塩水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.
１ミリリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸
ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザ
イム社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２８５c
p．

【００３４】実施例３．上皮細胞増殖因子（ＥＦＧ）
（ケミコンインターナショナル社，米国）１０マイクロ
グラムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清
アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本
製薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食
塩水１．４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.
１ミリリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸
ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザ
イム社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ３０５c
p．

【００３５】実施例４．インスリン様成長因子（ＩＧ
Ｆ）（ケミコンインターナショナル社）１０マイクログ
ラムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清ア
ルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩
水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミ
リリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナト
リウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム
社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２９８cp．

【００３６】実施例５．インターフェロンα（リーバイ
オモレキュラーリサーチラボ社，米国）１００００国際
単位を含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清ア
ルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩
水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミ
リリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナト
リウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム
社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ３１２cp．

【００３７】実施例６．インターフェロンβ（ペーゼル
社，ドイツ）１００００国際単位を含む生理食塩水０.
７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％含有する
アルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリットル
添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリットル（扶
桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにした。ま
た、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量
１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミリグラ
ムを加えた。粘度 ３２０cp．

【００３８】実施例７．インターフェロンγ（ジェンザ
イム社，米国）１００００単位を含む生理食塩水０.７
ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％含有するア
ルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリットル添
加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリットル（扶桑
薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにした。また、
この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４
７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミリグラムを
加えた。粘度 ３１１cp．

【００３９】実施例８．インターリューキン２（ＩＬ−
２）（特開昭６１−７８７９９号公報に記載の方法で製
造され特開昭６０−１１５５２８号公報記載の方法で精
製されたＮ末端にＭetを有するものと有しないものとの
混合物。）１０マイクログラムを含む生理食塩水０.７
ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％含有するア
ルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリットル添
加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリットル（扶桑
薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにした。また、
この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４
７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミリグラムを
加えた。粘度 ３２０cp．

【００４０】実施例９．形質転換成長因子（ＴＧＦ−
β）（和光純薬工業(株)製）１マイクログラムを含む生
理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２
０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイ
クロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリ
リットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットル
にした。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩
（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１
０.５ミリグラムを加えた。粘度 ３５３cp．

【００４１】実施例１０．副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）
（バッケムファインケミカルズ社，スイス）１０マイク
ログラムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血
清アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日
本製薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理
食塩水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.
１ミリリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸
ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザ
イム社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２５１c
p．

【００４２】実施例１１．顆粒球−マクロファージコロ
ニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）（ＩＣＮ バイオメディ
カルズ社，米国）５０００ユニットを含む生理食塩水
０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％含有
するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリッ
トル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリットル
（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにした。
また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子
量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミリグ
ラムを加えた。粘度 ３０１cp．

【００４３】実施例１２．マクロファージコロニー刺激
因子（Ｍ−ＣＳＦ）（ＩＣＮ バイオメデカルズ社）５
０００ユニットを含む生理食塩水０.７ミリリットルに
ヒト血清アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤ
ク（日本製薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射
用生理食塩水１.４ミリリットル(扶桑薬品)を加え全量
を２.１ミリリットルにした。また、この溶液にヒアル
ロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジ
ェンザイム社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２
９９cp.

【００４４】実施例１３．酸性繊維芽細胞増殖因子（ａ
ＦＧＦ）（東洋紡）１マイクログラムを含む生理食塩水
０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％含有
するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリッ
トル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリットル
（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにした。
また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子
量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミリグ
ラムを加えた。粘度 ２７４cp.

【００４５】実施例１４．腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）
（和光純薬工業(株)）１マイクログラムに注射用生理食
塩水０.７ミリリットル（扶桑薬品）を加えヒト血清ア
ルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩
水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミ
リリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナト
リウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム
社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２８６cp.

【００４６】実施例１５．セラチアスーパーオキシドデ
ィスミュターゼ（ＳＯＤ）（特開昭５７−２９２８５号
公報，特開昭５８−１６６８５号公報）４００ユニット
を含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブ
ミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）
を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水
１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリ
リットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリ
ウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム
社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２９１cp．

【００４７】実施例１６．バソプレシン（ケンブリッジ
リサーチバイオケミカル社，英国）１０マイクログラム
を含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブ
ミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）
を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水
１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリ
リットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリ
ウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム
社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２２０cp．

【００４８】実施例１７．ソマトスタチン（バッケムフ
ァインケミカルズ社）１０マイクログラムを含む生理食
塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％
含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロ
リットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリッ
トル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにし
た。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均
分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミ
リグラムを加えた。粘度 ２４９cp．

【００４９】実施例１８．オキシトシン（バッケムファ
インケミカルズ社）１０マイクログラムを含む生理食塩
水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％含
有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリ
ットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリット
ル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにし
た。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均
分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミ
リグラムを加えた。粘度 ２５３cp．

【００５０】実施例１９．黄体形成ホルモン放出ホルモ
ン（バッケムファインケミカルズ社）１０マイクログラ
ムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アル
ブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩
水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミ
リリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナト
リウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム
社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２４１cp．

【００５１】実施例２０．成長ホルモン放出因子（バッ
ケムファインケミカルズ社）１０マイクログラムを含む
生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを
２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マ
イクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミ
リリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリット
ルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩
（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１
０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２６５cp．

【００５２】実施例２１．成長ホルモン（ユーシービー
バイオプロダクツ社，ベルギー）１０マイクログラムを
含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミ
ンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を
４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.
４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリ
ットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウ
ム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）
１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２９３cp．

【００５３】実施例２２．カルシトシン（ユーシービー
バイオプロダクツ社）１０マイクログラムを含む生理食
塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％
含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロ
リットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリッ
トル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにし
た。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均
分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミ
リグラムを加えた。粘度 ２３８cp．

【００５４】実施例２３．カルシトニン遺伝子関連ペプ
チド（ユーシービー・バイオプロダクツ社）１０マイク
ログラムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血
清アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日
本製薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理
食塩水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.
１ミリリットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸
ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザ
イム社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２２９c
p．

【００５５】実施例２４．脳ナトリウム利尿ペプチド
（ペプチド研究所，日本）１０マイクログラムを含む生
理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２
０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイ
クロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリ
リットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットル
にした。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩
（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１
０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２４１cp．

【００５６】実施例２５．心房性ナトリウム利尿ペプチ
ド（ケンブリッジリサーチバイオケミカルズ社）１０マ
イクログラムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒ
ト血清アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク
（日本製薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用
生理食塩水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量
を２.１ミリリットルにした。また、この溶液にヒアル
ロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジ
ェンザイム社）１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２
４３cp.

【００５７】実施例２６．オステオカルシンアナログ
（アメリカンペプチド社，米国）１０マイクログラムを
含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミ
ンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を
４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.
４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリ
ットルにした。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウ
ム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）
１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２６５cp.

【００５８】実施例２７．肝細胞成長因子（ペプチド研
究所）１０マイクログラムを含む生理食塩水０.７ミリ
リットルにヒト血清アルブミンを２０％含有するアルブ
ミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリットル添加し
さらに注射用生理食塩水１.４ミリリットル（扶桑薬
品）を加え全量を２.１ミリリットルにした。また、こ
の溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４７
万ダルトン：ジェンザイム社）１０.５ミリグラムを加
えた。粘度 ２７１cp.

【００５９】実施例２８．ウロキナーゼ（日本ケミカル
リサーチ社）５０００国際ユニットを含む生理食塩水
０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％含有
するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリッ
トル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリットル
（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにした。
また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩(平均分子
量１４７万ダルトン：ジェンザイム社)１０.５ミリグラ
ムを加えた。粘度 ３１１cp.

【００６０】実施例２９．組織プラスミノーゲンアクチ
ベーター（ＴＰＡ）（バイオスコット社，英国）１０マ
イクログラムを含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒ
ト血清アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク
（日本製薬）を４マイクロリットル添加しさらに注射用
生理食塩水１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量
を２.１ミリリットルにした。また、この溶液にヒアル
ロン酸ナトリウム塩(平均分子量１４７万ダルトン：ジ
ェンザイム社)１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ３３
５cp.

【００６１】実施例３０．インターリューキン３（ＩＬ
−３）（Ｒ＆Ｄシステムズ社，米国）１マイクログラム
を含む生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブ
ミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）
を４マイクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水
１.４ミリリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリ
リットルにする。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリ
ウム塩(平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社)
１０.５ミリグラムを加えた。粘度 ２５９cp.

【００６２】実施例３１．インターリューキン４（ＩＬ
−４）（Ｒ＆Ｄシステムズ社）１マイクログラムを含む
生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを
２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マ
イクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミ
リリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリット
ルにする。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩
(平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１０.
５ミリグラムを加えた。粘度 ２６５cp.

【００６３】実施例３２．インターリューキン５（ＩＬ
−５）（アムジェン社，米国）１マイクログラムを含む
生理食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを
２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マ
イクロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミ
リリットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリット
ルにする。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩
(平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社)１０.
５ミリグラムを加えた。粘度 ２８２cp.

【００６４】実施例３３．インターリューキン６（ＩＬ
−６）（アムジェン社）１マイクログラムを含む生理食
塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０％
含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロ
リットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリッ
トル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルにす
る。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩(平均
分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社)１０.５ミリ
グラムを加えた。粘度 ２４９cp.

【００６５】実施例３４．インターリューキン７（ＩＬ
−７）（ジェンザイム社）１マイクログラムを含む生理
食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０
％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイク
ロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１.４ミリリ
ットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルに
する。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩(平
均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社)１０.５ミ
リグラムを加えた。粘度 ２５５cp.

【００６６】実施例３５．インターリューキン８（ＩＬ
−８）（ジェンザイム社）１マイクログラムを含む生理
食塩水０.７ミリリットルにヒト血清アルブミンを２０
％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイク
ロリットル添加しさらに注射用生理食塩水１．４ミリリ
ットル（扶桑薬品）を加え全量を２.１ミリリットルに
する。また、この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩(平
均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社)１０.５ミ
リグラムを加えた。粘度 ２６３cp.

【００６７】実施例３６．インスリンの持続性製剤 豚インスリン（２６.８単位／ミリグラム：ＤＩＯＳＹ
ＮＴＨ社，オランダ）３ミリグラムを０.１規定の塩酸
１.５ミリリットルに溶解し、注射用生理食塩水１.６５
ミリリットルを加え、これにヒアルロン酸ナトリウム塩
（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１
５.７５ミリグラムを加えた。得られた溶液にヒト血清
アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本
製薬）を４マイクロリットル添加した。粘度 ３８４c
p．

【００６８】実施例３７．顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ
−ＣＳＦ）の持続性製剤 １ミリリットル中にリコンビナントヒトＧ−ＣＳＦ（ア
ムジェン社）を３００マイクログラム、マンニトールを
５０ミリグラム、Tween ８０を０.００４％を含むヒト
顆粒球コロニー刺激因子製剤（ニュポジェン：アムジェ
ン社）の０.０４６６ミリリットルに注射用生理食塩水
を４.１５４ミリリットルを添加し、ヒアルロン酸ナト
リウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：ジェンザイム
社）を２１ミリグラム加えた。得られた溶液にヒト血清
アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本
製薬）を８マイクロリットル添加した。粘度 ２６４c
p.

【００６９】実施例３８． インスリンの持続性製剤 豚インスリン(２６.８単位／ミリグラム：ＤＩＯＳＹＮ
ＴＨ社)３ミリグラムを０.１規定の塩酸１.５ミリリッ
トルに溶解し、注射用生理食塩水１.６５ミリリットル
を加え、これにヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量
１４７万ダルトン：ジェンザイム社）１５.７５ミリグ
ラムを加えた。得られた溶液にヒトイミュノグロブリン
Ｇ（カッペル社）を０.５ミリグラム添加した。粘度
３２８ｃｐ．

【００７０】実施例３９．１ミリリットル中にリコンビ
ナントヒトＧ−ＣＳＦを３００マイクログラム、マンニ
トールを５０ミリグラム、Ｔｗｅｅｎ ８０を０.００
４％含むヒト顆粒球コロニー刺激因子製剤（ニュポジェ
ン：アムジェン社）の０.０２３３ミリリットルに注射
用生理食塩水を１.３７７ミリリットルを添加し、ヒト
血清アルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク
（日本製薬）を８マイクロリットル添加した。この溶液
にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダル
トン：ジェンザイム社）を１.５％（Ｗ／Ｖ）の濃度に
なるように注射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶
液０.７ミリリットルを加えた。これらの溶液が入った
ガラス製バイアル瓶（容量約５ミリリットル）を密閉
し、スリーワンモーター（ヘイドン社製）に取付けた容
量２００ミリリットルのナス型フラスコ内で長軸を中心
として約１時間回転混合（２０〜１００回転／分）させ
ることにより気泡の混入がほとんど無い持続性製剤の投
与液を作製した。

【００７１】実施例４０．１ミリリットル中にリコンビ
ナントヒトＧ−ＣＳＦを３００マイクログラム、マンニ
トールを５０ミリグラム、Tween ８０を０.００４％含
むヒト顆粒球コロニー刺激因子製剤（ニュポジェン：ア
ムジェン社）の０.０２３ミリリットルに注射用生理食
塩水を１.３７７ミリリットルを添加し、ヒト血清アル
ブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加した。この溶液にヒアル
ロン酸ナトリウム塩（平均分子量約５０万ダルトン）を
１.５％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるように注射用生理食塩
水（扶桑薬品）に溶解した溶液０.７ミリリットルを加
えた。これらの溶液が入ったガラス製バイアル瓶（容量
約５ミリリットル）を密閉し、スリーワンモーター（ヘ
イドン社製）に取付けた容量２００ミリリットルのナス
型フラスコ内で長軸を中心として約１時間回転混合（２
０〜１００回転／分）させることにより気泡の混入がほ
とんど無い持続性製剤の投与液を作製した。

【００７２】実施例４１ １ミリリットル中にリコンビナントヒトＧ−ＣＳＦを３
００マイクログラム、マンニトールを５０ミリグラム、
Tween ８０を０.００４％含むヒト顆粒球コロニー刺激
因子製剤（ニュポジェン：アムジェン社）の０.０２３
ミリリットルに注射用生理食塩水を１.０３９ミリリッ
トルを添加し、ヒト血清アルブミンを２０％含有するア
ルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリットル添
加した。この溶液に１％ヒアルロン酸ナトリウム塩（平
均分子量約８０万ダルトン〜９０万：アルツ注、生化学
工業）溶液１.０３９ミリリットルを加えた。これらの
溶液が入ったガラス製バイアル瓶（容量約５ミリリット
ル）を密閉し、スリーワンモーター（ヘイドン社製）に
取付けた容量２００ミリリットルのナス型フラスコ内で
長軸を中心として約１時間回転混合（２０〜１００回転
／分）させることにより気泡の混入がほとんど無い持続
性製剤の投与液を作製した。

【００７３】実施例４２．１ミリリットル中にリコンビ
ナントヒトＧ−ＣＳＦを３００マイクログラム、マンニ
トールを５０ミリグラム、Tween ８０を０.００４％含
むヒト顆粒球コロニー刺激因子製剤（ニュポジェン：ア
ムジェン社）の０.０２３ミリリットルに注射用生理食
塩水を１.３７７ミリリットルを添加し、ヒト血清アル
ブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加した。この溶液にヒアル
ロン酸ナトリウム塩（平均分子量約１８０万ダルトン：
ジェンザイム社）を１.２％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるよ
うに注射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶液０.
７ミリリットルを加えた。これらの溶液が入ったガラス
製バイアル瓶（容量約５ミリリットル）を密閉し、スリ
ーワンモーター（ヘイドン社製）に取付けた容量２００
ミリリットルのナス型フラスコ内で長軸を中心として約
１時間回転混合（２０〜１００回転／分）させることに
より気泡の混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を作
製した。

【００７４】実施例４３．１ミリリットル中にリコンビ
ナントヒトＧ−ＣＳＦを３００マイクログラム、マンニ
トールを５０ミリグラム、Tween ８０を０.００４％含
むヒト顆粒球コロニー刺激因子製剤（ニュポジェン：ア
ムジェン社）の０.０２３ミリリットルに注射用生理食
塩水を１.３７７ミリリットルを添加し、ヒト血清アル
ブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加した。この溶液にヒアル
ロン酸ナトリウム塩（平均分子量約２３０万ダルトン：
ジェンザイム社）を０.９％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるよ
うに注射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶液０.
７ミリリットルを加えた。これらの溶液が入ったガラス
製バイアル瓶（容量約５ミリリットル）を密閉し、スリ
ーワンモーター（ヘイドン社製）に取付けた容量２００
ミリリットルのナス型フラスコ内で長軸を中心として約
１時間回転混合（２０〜１００回転／分）させることに
より気泡の混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を作
製した。

【００７５】実施例４４．ヒト副甲状腺ホルモン（ＰＴ
Ｈ）のアミノ基末端から３４番目までのアミノ酸から成
る活性フラグメント（バッケム社）の３００マイクログ
ラムを１ミリリットルの注射用生理食塩水に溶解し、さ
らにヒト血清アルブミンを２０％含有するアルブミンニ
チヤク（日本製薬）を４マイクロリットル添加した。こ
の溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量約１８
０万ダルトン：ジェンザイム社）を１.２％（Ｗ／Ｖ）
の濃度になるように注射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶
解した溶液１.５ミリリットルを加えた。これらの溶液
が入ったガラス製バイアル瓶（容量約１０ミリリット
ル）を密閉し、スリーワンモーター（ヘイドン社製）に
取付けた容量２００ミリリットルのナス型フラスコ内で
長軸を中心として約１時間回転混合（２０〜１００回転
／分）させることにより気泡の混入がほとんど無い持続
性製剤の投与液を作製した。

【００７６】実施例４５．ヒト副甲状腺ホルモン（ＰＴ
Ｈ）（バッケム社）の３００マイクログラムを１ミリリ
ットルの注射用生理食塩水に溶解し、さらにヒト血清ア
ルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットル添加した。この溶液にヒアル
ロン酸ナトリウム塩（平均分子量約１８０万ダルトン：
ジェンザイム社）を１.２％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるよ
うに注射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶液１.
５ミリリットルを加えた。これらの溶液が入ったガラス
製バイアル瓶（容量約１０ミリリットル）を密閉し、ス
リーワンモーター（ヘイドン社製）に取付けた容量２０
０ミリリットルのナス型フラスコ内で長軸を中心として
約１時間回転混合（２０〜１００回転／分）させること
により気泡の混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を
作製した。

【００７７】実施例４６．ヒルジン( Hirudin ペニン
スララボラトリーズインク 米国）の１００ＡＴＵを含
有する溶液に注射用生理食塩水を加え全量を１.４ミリ
リットルにした後、ヒト血清アルブミンを２０％含有す
るアルブミンニチヤク（日本製薬）を４マイクロリット
ル添加する。この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平
均分子量約１８０万ダルトン：ジェンザイム社）を１.
２％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるように注 射用生理食塩水
（扶桑薬品）に溶解した溶液０.７ミリリットルを加え
る。これ らの溶液が入ったガラス製バイアル瓶（容量
約５ミリリットル）を密閉し、スリーワンモーター（ヘ
イドン社製）に取付けた容量２００ミリリットルのナス
型フラスコ内で長軸を中心として約１時間回転混合（２
０〜１００回転／分）させることにより気泡の混入がほ
とんど無い持続性製剤の投与液を作製した。

【００７８】実施例４７．甲状腺刺激ホルモン放出ホル
モン（ＴＲＨ、バッケムファインケミカルズ社、米国）
の１０ミリグラムを生理食塩水１.４ミリリットルに溶
解し、ヒト血清アルブミンを２０％含有するアルブミン
ニチヤク（日本製薬）を４マイクロリットル添加した。
この溶液にヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量約１
８０万ダルトン：ジェンザイム社）を１.２％（Ｗ／
Ｖ）の濃度になるように注射用生理食塩水（扶桑薬品）
に溶解した溶液０.７ミリリットルを加える。これらの
溶液が入ったガラス製バイアル瓶（容量約５ミリリット
ル）を密閉し、スリーワンモーター（ヘイドン社製）に
取付けた容量２００ミリリットルのナス型フラスコ内で
長軸を中心として約１時間回転混合（２０〜１００回転
／分）させることにより気泡の混入がほとんど無い持続
性製剤の投与液を作製した。

【００７９】実施例４８．塩酸セフォチアム( cefotiam
dihydrochloride：武田薬品）１０ミリグラムを生理食
塩水１.４ミリリットルに溶解し、ヒト血清アルブミン
を２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製薬）を４
マイクロリットル添加した。この溶液にヒアルロン酸ナ
トリウム塩（平均分子量約１８０万ダルトン：ジェンザ
イム社）を１.２％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるように注射
用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶液０.７ミリリ
ットルを加える。これらの溶液が入ったガラス製バイア
ル瓶（容量約５ミリリットル）を密閉し、スリーワンモ
ーター（ヘイドン社製）に取付けた容量２００ミリリッ
トルのナス型フラスコ内で長軸を中心として約１時間回
転混合（２０〜１００回転／分）させることにより気泡
の混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を作製した。

【００８０】実施例４９．インターフェロンアルファ２
ａの３００万国際単位と人血清アルブミン５ミリグラム
を含有するキャンフェロンＡ３００（武田薬品）の２バ
イアルに１本あたり蒸留水を１ミリリットル添加し溶解
した。この溶液１.４ミリリットルにヒアルロン酸ナト
リウム塩（平均分子量約１４７万ダルトン：ジェンザイ
ム社）を１.５％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるように注射用
生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶液０.７ミリリッ
トルを加えた。これらの溶液が入ったガラス製バイアル
瓶（容量約５ミリリットル）を密閉し、スリーワンモー
ター（ヘイドン社製）に取付けた容量２００ミリリット
ルのナス型フラスコ内で長軸を中心として約１時間回転
混合（２０〜１００回転／分）させることにより気泡の
混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を作製した。

【００８１】実施例５０．遺伝子組み替え塩基性ヒトＦ
ＧＦミューテインＣＳ２３（ＥＰ公開２８１,８２２号
公報）（０.９６ミリグラム蛋白質／ミリリットル）溶
液の０.４ミリリットルに注射用生理食塩水２.４ミリリ
ットルとヒト血清アルブミンを２０％含有するアルブミ
ンニチヤク（日本製薬）を１５マイクロリットル加え、
さらにヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量約１４７
万ダルトン）を１.５％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるように
注射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶液１.４ミ
リリットルを加えた。これらの溶液を含むガラス製バイ
アル瓶（容量：約１２ミリリットル）は密閉され、スリ
ーワンモーター（ヘイドン社製）に取付けた容量２００
ミリリットルのナス型フラスコ内で長軸を中心として約
１時間回転混合（２０〜１００回転／分）させることに
より気泡の混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を作
製した。

【００８２】実施例５１．３００マイクログラムの副甲
状腺ホルモン（ＰＴＨ）（バッケム社）を２ミリリット
ルの注射用生理食塩水に溶解した。この溶液が入ったガ
ラス製バイアル瓶（容量約５ミリリットル）に人血清ア
ルブミンを２０％含有するアルブミンニチヤク（日本製
薬）を４マイクロリットルとヒアルロン酸ナトリウム塩
（平均分子量約１４７万ダルトン）を１.５％（Ｗ／
Ｖ）の濃度になるように注射用生理食塩水（扶桑薬品）
に溶解した溶液１ミリリットルを加えた。これらの溶液
を含むガラス製バイアル瓶は密閉され、スリーワンモー
ター（ヘイドン社製）に取付けた容量２００ミリリット
ルのナス型フラスコ内で長軸を中心として約１時間回転
混合（２０〜１００回転／分）させることにより気泡の
混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を作製した。

【００８３】実験例１ 下記配合割合にて注射剤を調製し、実験に使用した。 比較製剤１：リコンビナントヒト塩基性ＦＧＦムテイン
ＣＳ２３（ＥＰ公開２８１,８２２号公報）溶液（０.９
６ミリグラム蛋白質／ミリリットル）の０.３５ミリリ
ットルに注射用生理食塩水１.２５５ミリリットルを加
えた。 比較製剤２：リコンビナントヒト塩基性ＦＧＦムテイン
ＣＳ２３（ＥＰ公開２８１,８２２号公報）溶液（０.９
６ミリグラム蛋白質／ミリリットル）の０.３６ミリリ
ットルに注射用生理食塩水１.２６ミリリットル、ヒア
ルロン酸ナトリウム塩（平均分子量１４７万ダルトン：
ジェンザイム社）８.１ミリグラムを加えた。８週齢の
雄性ＳＤ系ラット背部皮下に、１６０マイクログラム／
キログラムの薬用量で実施例１の注射液を投与した。対
照として比較製剤１及び比較製剤２の注射液を同様に投
与した。投与前および一定時間毎に約０.４ミリリット
ルづつ血液を採取して血清を分離した。血清中のrhbＦ
ＧＦムテインＣＳ２３濃度をＥＬＩＳＡ法で定量した。
図１にその結果を示す。図１は比較製剤３（○）、比較
製剤（□）及び実施例１（●）のrhbＦＧＦムテインＣ
Ｓ２３注射液を投与した後の血液中濃度推移を示すグラ
フである。それぞれの図におけるラットは一群５匹を用
いており、各図中の点は平均値を棒線は標準誤差（Ｓ．
Ｅ．）を示している。比較製剤１のrhbＦＧＦムテイン
ＣＳ２３溶液を投与した群においてはrhbＦＧＦムテイ
ンＣＳ２３が速やかに血液中から消失しているのに比較
して、比較製剤２のヒアルロン酸を添加した群ではヒア
ルロン酸の効果によりrhbＦＧＦムテインＣＳ２３の血
液中濃度が高く持続されていることが判明した。しか
し、実施例１のrhbＦＧＦムテインＣＳ２３にヒアルロ
ン酸及び血清アルブミンを添加した注射液を投与した群
では比較製剤２のヒアルロン酸のみを添加した群に比較
して投与後１時間目及び４時間目においてさらに高い血
液中濃度が維持されていることが判明した。

【００８４】実験例２ 下記配合割合にて注射剤を調製し、実験に使用した。 比較製剤３：豚インスリン（２６.８単位／ミリグラ
ム：ＤＩＯＳＹＮＴＨ社）３ミリグラムを０.１規定の
塩酸１.５ミリリットルに溶解し、注射用生理食塩水１.
６５ミリリットルを加え、これにヒアルロン酸ナトリウ
ム塩（平均分子量１ ４７万ダルトン：ジェンザイム
社）１５.７５ミリグラムを加えた。 比較製剤４：注射用生理食塩水 ２ミリリッ
トル ８週齢の雄性ＳＤ系ラット背部皮下に２００マイクログ
ラム／ラットの薬用量で実施例３６および比較製剤３イ
ンスリン注射液を投与した。対照として比較製剤４の注
射用生理食塩水を実施例３６および比較製剤３と同じ投
与液量になるように投与した。投与前および一定時間毎
に約０.５ミリリットルづつ採血し、血清中の血糖値を
グルコースＣテストキット（和光純薬）で測定した。
〔図２〕にその結果を示す。〔図２〕において、（○）
は比較製剤４の生理食塩水を投与した群の、（●）は比
較製剤３の豚インスリンにヒアルロン酸を加えた溶液を
投与した群の、（△）は実施例３６の豚インスリンにヒ
アルロン酸と血清アルブミンを加えた溶液を投与した群
の血清中血糖値の時間推移を示す。〔図２〕におけるラ
ットは一群５匹を使用しており各点は平均値を示してい
る。比較製剤４の生理食塩水投与群では血糖値り変化は
ほとんど無かった。比較製剤３および実施例３６におい
て投与後４時間目までは同じ程度に抑制されているが、
投与後６時間目以降は実施例３６の方が血糖値の抑制が
長時間続いており、投与後９時間目においては比較製剤
３では血糖値がほぼ正常値に復しているのに比較して、
比較製剤４の生理食塩水投与群の約２／３程度に抑制さ
れていた。このことはペプチドの持続効果をもたらすと
されているインスリンとヒアルロン酸との組み合わせよ
りも、この系にさらに血清アルブミンを添加することに
より同じ量のインスリン及びヒアルロン酸より長く薬理
効果が持続することを示している。

【００８５】実験例３ 下記配合割合にて注射剤を調製し、実験に使用した。 比較製剤５：１ミリリットル中にリコンビナントヒトＧ
−ＣＳＦを３００マイクログラム、マンニトールを５０
ミリグラム、Tween ８０を０.００４％含むヒト顆粒球
コロニー刺激因子製剤（ニュポジェン：アムジェン社）
の０.０２３３ミリリットルに注射用生理食塩水を１.３
７７ミリリットルを添加した。この溶液にヒアルロン酸
ナトリウム塩（平均分子量約１４７万ダルトン：ジェン
ザイム社）を１.５％（Ｗ／Ｖ）の濃度になるように注
射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶液０.７ミリ
リットルを加えた。これらの溶液が入ったガラス製バイ
アル瓶（容量約５ミリリットル）を密閉し、スリーワン
モーター（ヘイドン社製）に取付けた容量２００ミリリ
ットルのナス型フラスコ内で長軸を中心として約１時間
回転混合（２０〜１００回転／分）させることにより気
泡の混入がほとんど無い持続性製剤の投与液を作製し
た。 比較製剤６：１ミリリットル中にリコンビナントヒトＧ
−ＣＳＦを３００マイクログラム、マンニトールを５０
ミリグラム、Ｔｗｅｅｎ ８０を０.００４％含むヒト
顆粒球コロニー刺激因子製剤（ニュポジェン：アムジェ
ン社）の０.０２３３ミリリットルに注射用生理食塩水
を２.０７７ミリリットルを添加した。 比較製剤７：注射用生理食塩水１.４ミリリットルに、
ヒアルロン酸ナトリウム塩（平均分子量約１４７万ダル
トン：ジェンザイム社）を１.５％（Ｗ／Ｖ）の濃度に
なるように注射用生理食塩水（扶桑薬品）に溶解した溶
液０.７ミリリットルを加えた。これらの溶液が入った
ガラス製バイアル瓶（容量約５ミリリットル）を密閉
し、スリーワンモーター（ヘイドン社製）に取付けた容
量２００ミリリットルのナス型フラスコ内で長軸を中心
として約１時間回転混合（２０〜１００回転／分）させ
ることにより気泡の混入がほとんど無い持続性製剤の投
与液を作製した。８週齢の雄性ＳＤ系ラット背部皮下に
ヒトＧ−ＣＳＦを含む実施例３９、比較製剤５、比較製
剤６の各注射液を０.３ミリリットルづつ投与した。対
照として比較製剤７のヒアルロン酸ナトリウム塩注射用
生理食塩水溶液を０.３ミリリットル投与した。投与前
および所定の時間に約０.１ミリリットルづつ採血した
（抗凝固剤としてＥＤＴＡ２Ｎaを使用）。末梢白血
球、赤血球、血小板数はミクロ セルカウンターＣＣ−
１８０Ａ型（東亜医用電子）を用いて測定した。末梢好
中球、リンパ球、単球、好酸球数はギムザ染色を施した
塗抹標本を鏡検することにより白血球２００個を分類
し、それぞれの細胞の出現頻度を白血球数に乗じて算出
した。結果を〔図３〕に示す。対照として投与した比較
製剤７のヒアルロン酸水溶液投与群（○）では末梢血液
中の好中球数はほとんど変化しなかった。比較製剤６の
ヒトＧ−ＣＳＦ溶液投与群（●）では投与後１６時間目
において末梢血中の好中球数は対照群の約２倍に増加し
ているが、これにヒアルロン酸を添加した比較製剤５投
与群（△）ではさらに末梢血中の好中球数は増加した。
ヒトＧ−ＣＳＦにヒアルロン酸とヒト血清アルブミンを
添加した実施例３９の製剤を投与した群（□）では比較
製剤５投与群よりもさらに末梢血中の好中球数は増加し
ていた。また、投与後２４時間目において比較製剤５お
よび比較製剤６投与群では末梢血中の好中球数はほぼ対
照群の値と同じレベルにまで低下していたが、実施例３
９の製剤を投与した群では対照群の値のほぼ２倍の高い
値を維持していた。このようにヒト血清アルブミンを添
加することによりヒアルロン酸による薬理効果の持続を
さらに増強できることを示している。図中の各点は５匹
のラットの平均値である。

【００８６】実験例４ 下記配合割合にて注射剤を調製し、実験に使用した。 比較製剤８：インターフェロンアルファ２ａの３００万
国際単位と人血清アルブミン５ミリグラムを含有するキ
ャンフェロンＡ３００（武田薬品）の２バイアルに１本
あたり蒸留水を１ミリリットル添加し溶解した。この溶
液１.４ミリリットルに注射用生理食塩水（扶桑薬品）
０.７ミリリットルを加えた。８週齢の雄性ＳＤラット
背部皮下にインターフェロンアルファ２ａを含む実施例
４９または比較製剤８の各注射液を０.３ミリリットル
づつ投与した。投与前および所定の時間に約０.４ミリ
リットルづつ採血後血清を分離し、ＥＬＩＳＡ法により
インターフェロンアルファ２ａ濃度を決定した。結果を
〔図４〕に示す。対照として投与した比較製剤８のイン
ターフェロンアルファ２ａを含む水溶液投与群（○）で
は速やかに投与部位からのインターフェロンアルファ２
ａの吸収が起こり、インターフェロンアルファ２ａの血
清中濃度は時間ともに減少した。一方、実施例４９の製
剤のヒアルロン酸と人血清アルブミンとインターフェロ
ンアルファ２ａを含む溶液投与群（●）では投与後１時
間目以降のインターフェロンアルファ２ａの濃度は対照
群よりも高く、インターフェロンアルファ２ａにヒアル
ロン酸と人血清アルブミンを添加したことによる持続効
果は顕著である。図中の各点は５匹のラットの平均値で
ある。

【００８７】実験例５ 下記配合割合にて注射剤を調製し、実験に使用した。 比較製剤９：遺伝子組み替え塩基性人ＦＧＦミューテイ
ンＣＳ２３（ＥＰ公開２８１,８２２号公報）（０.９６
ミリグラム蛋白質／ミリリットル）溶液の０.４ミリリ
ットルに注射用生理食塩水３.６ミリリットルを加え
た。２４時間の絶食後、ペントバルビタールナトリウム
塩（ソムノペンチル、ピットマンムーア社、米国）の腹
腔内投与により軽度に麻酔された８週令のＳＤ系雄性ラ
ットに実施例５０の製剤あるいは比較製剤９の製剤を胃
内に経口投与した。投与３０分後に腹部を切開し、胃の
内容物を採取した。該胃内容物は速やかに遠心分離操作
を受け（マイクロヒュージＢ、ベックマン、米国）、上
清の５０マイクロリットルは蛋白分解酵素阻害剤（アプ
ロチニン、シグマ、米国）の１００マイクロリットルを
添加後、酵素免疫法によるＣＳ２３の濃度測定をおこな
うまで−４０℃で保存した。

【表１】ＣＳ２３濃度（pg／ml） ──────────────────── 比較製剤９の製剤投与群 １７６８ 実施例５０の製剤投与群 ８４４８ ────────────────────

【００８８】実験例６ 下記配合割合にて注射剤を調製し、実験に使用した。 比較製剤１０：３００マイクログラムの副甲状腺ホルモ
ン（バッケム社）に２ミリリットルの注射用生理食塩水
を添加した。実施例５１の製剤（●）と比較製剤１０の
製剤（○）はそれぞれ０.２ミリリットルの容量で８週
令のＳＤ系雄性ラットにの背部皮下に皮下投与された。
投与前および投与後一定時間ごとに約０.４ミリリット
ルの血液が採血され、血清を分離後ＰＴＨの濃度をラジ
オイミュノアッセイで測定した。結果を〔図５〕に示
す。投与後２時間目および３時間目の血清中ＰＴＨ濃度
は実施例５１の製剤投与群のほうが、比較製剤１０の製
剤投与群よりも有意に高かった。これらの結果はヒアル
ロン酸、人血清アルブミン、およびＰＴＨを組み合わせ
ることにより、血清中ＰＴＨ濃度を持続させることにお
いて有効であることが示している。

【００８９】

【発明の効果】医薬活性物質にヒアルロン酸および水溶
性蛋白質を添加することにより、一層の持続効果が得ら
れ、低濃度のヒアルロン酸を用いた持続性製剤が可能に
なった。この結果、細い注射針を使用することが可能に
なり、患者に与える苦痛を軽減することができる。ま
た、粘度が低いために気泡の混入が少なくなり、臨床に
おける使用が簡便になる。さらに、ヒアルロン酸単独使
用に比較して高い持続効果が得られる。

【図面の簡単な説明】

【図１】は、実験例１で得られた血清中ミューテイン薬
物濃度の時間推移を示す。

【図２】は、実験例２で得られた血清中グルコース濃度
の時間推移を示す。

【図３】は、実験例３で得られた末梢血中の好中球数の
時間推移を示す。

【図４】は、実験例４で得られた血清中薬物濃度の時間
推移を示す。

【図５】は、実験例５で得られた血清中ＰＴＨ濃度の時
間推移を示す。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 37/43 8314−4Ｃ 47/36 Ｚ 7433−4Ｃ 47/42 Ｚ 7433−4Ｃ

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】（イ）エリスロポエチン以外の、生体によ
   り分泌されるポリペプチドもしくはその誘導体である医
   薬活性物質または化学合成医薬活性物質，（ロ）水溶性
   ヒアルロン酸もしくはその非毒性塩および（ハ）実質的
   に薬理活性を示さず体液内に注入しうる水溶性蛋白質を
   含有してなる水溶性組成物。
2. 【請求項２】医薬活性物質であるポリペプチドが、サイ
   トカイン、ペプチドホルモン、成長因子、心臓血管系に
   作用する因子、中枢および末梢神経系に作用する因子、
   体液中電解質および血液中有機物質に作用する因子、骨
   および骨格に作用する因子、消化器系に作用する因子、
   免疫系に作用する因子、呼吸器系に作用する因子、生殖
   器系に作用する因子、および酵素、またはこれらのムテ
   イン、誘導体、類縁体、同族体または活性フラグメント
   である請求項１記載の水溶性組成物。
3. 【請求項３】医薬活性物質であるポリペプチドがインタ
   ーフェロン類、インターリューキン類、顆粒球コロニー
   刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球−マクロファージコロ
   ニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、マクロファージコロニ
   ー刺激因子、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、腫瘍壊死
   因子（ＴＮＦ）、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、カルシ
   トニン、インスリン、黄体形成ホルモン−放出ホルモン
   （ＬＨ−ＲＨ）、またはこれらのムテイン、誘導体、類
   縁体、同族体または活性フラグメントである請求項１記
   載の水溶性組成物。
4. 【請求項４】化学合成医薬活性物質として心臓血管系に
   作用する物質、細胞接着に作用する物質、中枢および末
   梢血管系に作用する物質、体液電解質および血液有機物
   質に作用する物質、骨および骨格に作用する物質、消化
   器系に作用する物質、免疫系に作用する物質、または感
   染性微生物に作用する物質である請求項１の水溶性組成
   物。
5. 【請求項５】医薬活性物質対ヒアルロン酸の重量比が約
   ０.０００１：１〜１０：１であり、水溶性蛋白質対ヒ
   アルロン酸の重量比が約０.００１：１〜１００：１で
   ある請求項１記載の水溶性組成物。
6. 【請求項６】水溶性蛋白質が人血清アルブミンである請
   求項１記載の水溶性組成物。
7. 【請求項７】粘度が約５００cp以下の水剤である請求項
   １記載の水溶性組成物。
8. 【請求項８】非経口投与製剤である請求項１記載の水溶
   性組成物。
9. 【請求項９】注射製剤である請求項８記載の水溶性組成
   物。