JPH045438B2

JPH045438B2 -

Info

Publication number: JPH045438B2
Application number: JP24578483A
Authority: JP
Priority date: 1983-12-28
Filing date: 1983-12-28
Publication date: 1992-01-31
Also published as: JPS60141297A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は、一般式（式中R₁はアルキル基、アラル基又はアリール
基、R₂はアルキル基、ｎは１又は２を示す）で
表わされる光学活性カルボン酸及びその対掌体エ
ステルの製造法に関する。式のカルボン酸及びその対掌体エステルは光
学活性を有する種々の生理活性物質を合成するた
めの原料として利用されている。従来、式の光
学活性カルボン酸の製造法としては、あらかじめ
有機合成的にラセミ体のカルボン酸を合成したの
ち、光学分割剤を用いて分割する方法、すなわち
物理化学的に一方の光学活性体とその対掌体とに
分別する方法が知られている（特開昭55−118455
号、同56−81557号、同57−188563号、ヨーロツ
パ特許公開第79200477号各明細書参照）。一方、
光学活性カルボン酸エステルはカルボン酸を分割
したのち、エステル化反応を行ない、光学活性エ
ステルに導く方法などがとられている。しかしこ
れらの方法では、高価な分割剤が多量に必要とさ
れること、この分割剤が不純物として製品中に混
入しやすいこと、分割工程が複雑であることなど
の欠点があり、工業的な製法としては必ずしも満
足できるものではない。本発明者らは、Ｄ体又はＬ体のカルボン酸エス
テルの混合物を不斉加水分解する方法に関して鋭
意研究を行つた結果、アグロバクテリウム属の微
生物を用いることにより、式の光学活性カルボ
ン酸及びその対掌体エステルを効率よく製造でき
ることを見い出した。本発明は、一般式（式中R₃はアルキル基を示し、R₁、R₂及びｎは
前記の意味を有する）で表わされるエステルに、
エステル結合を不斉加水分解する能力を有するア
グロバクテリウム属に属する微生物の培養液、菌
体又は菌体処理物を作用させることを特徴とす
る、一般式（式中R₁、R₂及びｎは前記の意味を有する）で
表わされる光学活性カルボン酸及びその対掌体エ
ステルの製造法である。式及び式の化合物の置換基R₁のためのア
ルキル基としては例えばメチル基、エチル基な
ど、アラルキル基としては例えばベンジル基、ア
リール基としては例えばフエニル基が挙げられ
る。本発明に用いられるエステル（）としては、
例えばＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メ
チル、Ｓ−アセチル−γ−メルカプト−α−メチ
ル−ｎ−酪酸メチル、Ｓ−ベンゾイル−β−メル
カプトイソ酪酸メチル、Ｓ−フエニルアセチル−
β−メルカプトイソ酪酸メチルなどが挙げられ
る。本発明に用いられるアグロバクテリウム属の微
生物は、前記の化合物のエステル結合を不斉加水
分解する能力を有する微生物であつて、例えばア
グロバクテリウム・ラジオバクター
（Agrobacterium radiobacter）などの微生物が
挙げられる。これらの微生物はこれを含む培養
液、分離した菌体又は菌体処理物として用いられ
る。これらの微生物の培養は、通常は液体培養で行
われるが、固体培養によつても行うことができ
る。培地としては、微生物が通常資化しうる炭素
源、窒素源、ビタミン、ミネラルなどの成分を適
宜配合したものが用いられる。微生物の加水分解
能を向上させるため、培地にエステルを少量添加
することが好ましい。培養は微生物が生育可能で
ある温度及びPHで行われるが、通常50℃以下の温
度で、PH２〜11の範囲で行われる。微生物の生育
を促進させるために通気撹拌を行つてもよい。加水分解反応を行うに際しては、培養の開始時
又は途中で培地にエステル（）を添加してもよ
く、あらかじめ微生物を培養したのち培養液にエ
ステル（）を添加してもよい。また増殖した微
生物の菌体を遠心分離等により採取し、これをエ
ステルを含む反応媒体に加えてもよい。この場合
菌体は取り扱い上の便宜から、乾燥菌体例えば凍
結乾燥菌体、噴霧乾燥菌体又は有機溶媒例えばア
セトン、トルエン等で処理した菌体、あるいは菌
体破壊物、菌体抽出物等の菌体処理物を用いるこ
ともできる。反応媒体としては例えばイオン交換
水又は緩衝液が用いられる。反応媒体又は培養液
中のエステルの濃度は0.01〜50重量％が好まし
い。エステルは水に懸濁した状態で加えることも
できる。メタノール、アセトンなどの有機溶媒を
反応液に加えてエステルの溶解性を向上させるこ
ともできる。反応液のPHは２〜11、好ましくは５
〜８の範囲である。反応が進行するに伴い生成し
たカルボン酸により反応液のPHが低下してくる
が、この場合は適当な中和剤で最適PHに維持する
ことが好ましい。反応温度は５〜50℃が好まし
い。反応液又は培養液からの生成物の分離精製は通
常の方法例えば抽出、再結晶、カラムクロマトグ
ラフイ等により行うことができる。下記実施例中の％は重量％を意味する。実施例１アグロバクテリウム・ラジオパクターIFO
12607（Agrobacterium radiobacter）を肉エキス
1.0％、NaCl 0.5％及びペプトン1.0％から成る液
体培地（PH 7.2）100mlに植菌し、30℃１日間振
盪培養を行つた。培養終了後、培養液を遠心分離
し、得られた菌体の全量をイオン交換水で洗浄し
たのち、Ｍ／10燐酸緩衝液（PH 7.0）50mlに懸
濁した。この菌体懸濁液に（±）−Ｓ−アセチル
−β−メルカプトイソ酪酸メチル2.5mlを加え、
30℃で48時間振盪して反応させた。この時のＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪
酸メチルの分解率は49％であつた。反応液をPH
7.0に調整し、Ｓ−アセチル−β−メルカプトイ
ソ酪酸メチルを酢酸エチルで抽出した。次いで水
層のPHを硫酸で2.0に下げたのち、水層中のＳ−
アセチル−β−メルカプトイソ酪酸を酢酸エチル
で抽出した。抽出液に無水硫酸ナトリウムを加え
て脱水処理したのち、溶媒を蒸発除去した。抽出
されたＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸及
びＳ−アセチル−β−メルカプトイソ酪酸メチル
の比旋光度をユニオン技研社製旋光度計
（PM101型）で測定した。結果を表１に示す。これから、光学活性カルボン酸とその対掌体エ
ステルが生成していることが判る。【表】

Claims

【特許請求の範囲】１一般式（式中R₁はアルキル基、アラルキル基又はアリ
ール基、R₂及びR₃はアルキル基、ｎは１又は２
を示す）で表されるエステルに、エステル結合を
不斉加水分解する能力を有するアグロバクテリウ
ム属に属する微生物の培養液、菌体又は菌体処理
物を作用させることを特徴とする、一般式（式中、R₂及びｎは前記の意味を有する）で表
される光学活性カルボン酸及びその対掌体エステ
ルの製造法。