JP7292588B2 - Ｃｃｒ２／ｃｃｒ５アンタゴニストとしてのヘテロシクロアルキル系化合物 - Google Patents

Description

本願は、２０１９年６月２４日に中華人民共和国の国家知識産権局に提出されたＣＮ２０１９１０５５４１７６．４号の中国発明特許出願の権利と利益を主張し、ここでその全ての内容は援用により本明細書に組み込まれる。

本発明は、一連のヘテロシクロアルキル構造を有する化合物、その異性体又はその薬学的に許容可能な塩、及びそのＣＣＲ２／ＣＣＲ５アンタゴニストに関連する疾患を治療する薬物の調製における応用に関し、具体的には、式（I）で示される化合物又はその薬学的に許容可能な塩、その異性体又はその薬学的に許容可能な塩に関する。

ケモカインは、炎症性サイトカインを分泌する小さなファミリーであり、白血球化学誘引物質の役割を果たす。それらは、血管床から炎症シグナルに応答する周辺組織への白血球の輸送を促進する。走化性はケモカインと受容体の結合（ＧＰＣＲ）から始まり、起動によって、増加するカルシウム流量、環状アデノシン産生の抑制、細胞骨格の再配列、インテグリンの活性化と細胞運動過程のシグナル伝達経路及び増加するアドヘシンの発現を増加させる。

化学誘引剤サイトカイン（即ちケモカイン）は、相対的に小さなタンパク質（８～１０ｋＤ）であり、細胞の遷移を刺激する。第一と第二の高度に保存されたシステインの間のアミノ酸残基の数に基づいて、ケモカインファミリーは４つのサブファミリーに分けられる。単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）は、ＣＣケモカインサブファミリー（ここで、ＣＣは隣接する第一と第二システインを有するサブファミリーを表す）のメンバーであり、かつ細胞表面ケモカイン受容体２（ＣＣＲ２）を結合する。ＭＣＰ－１は効果的なケモカインであり、ＣＣＲ２を結合した後に単球とリンパ球の炎症部位への遷移を媒介する（即ち走化性）。ＭＣＰ－１も心筋細胞、血管内皮細胞、線維芽細胞、軟骨細胞、平滑筋細胞、糸球体メサンギウム細胞、肺胞細胞、Ｔリンパ球、食道癌等で発現する。単球が炎症組織に入った後、ＣＣＲ５を発現するマクロファージに分化し、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、インターロイキン－１（ＩＬ－１）、ＩＬ－８ ＣＸＣケモカインサブファミリー（その中で、ＣＸＣは第一と第二システインの間の１つのアミノ酸残基を表す）、ＩＬ－１２、アラキドン酸代謝物（例えば、ＰＧＥ２及びＬＴＢ４）、酸素から誘導されたラジカル、マトリックスメタロプロテアーゼ、及び補体成分を含む幾つかの炎症促進調節剤の二次的な由来を提供する。

ＣＣＲ２（ＣＫＲ－２、ＭＣＰ－１ＲＡ又はＭＣＩＲＢとも呼ばれる）は主に単球及びマクロファージで発現し、かつマクロファージ依存性炎症にとって必要である。ＣＣＲ２は高親和力でケモカインＭＣＰファミリー（ＣＣＬ２、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８など）の幾つかのメンバーを結合するＧタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）であり、走化シグナルを誘発し、指向性受容体運搬細胞の遷移を引き起こす。慢性炎性疾患の動物モデル研究によれば、アンタゴニストがＭＣＰ－１とＣＣＲ２との間の結合を阻害して炎症反応を抑制することがすでに証明されている。

ＣＣＲ５は様々なＣＣケモカインリガンドを結合するＧタンパク共役型受容体であり、ＣＣＬ３、ＣＣＬ３Ｌ１、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ７、ＣＣＬ１１及びＣＣＬ１３を含む。ＣＣＲ２と比較して、ＣＲ５の体内機能は明確ではない。ＣＣＲ２と比較して、ＣＣＲ５は主に活性化されたＴｈ１細胞及び血液単球から分化した組織マクロファージで発現し、それに伴い、ＣＣＲ２発現がダウンレギュレーションする。ＣＣＲ５は炎症及び感染過程でマクロファージの生存に役立ち、かつ炎症組織内にマクロファージを保留する作用を果たすことができることが示されている。さらに、ＣＣＲ５はＴｈ１細胞の炎症における動員及び活性化を媒介する。ＣＣＲ５も破骨細胞で発現し、かつ破骨細胞の形成に重要である。これはＣＣＲ５のリウマチ性関節炎の病理学における寄与作用を示す。ＣＣＬ４／ＣＣＲ５が関与する血管平滑筋細胞の活性化によっても、アテローム性動脈硬化症及びＡＩＨの病理学（加速した内膜増殖）を促進することができる。

ＣＣＲ２とＣＣＲ５の相補的な細胞分布および異なる細胞機能は、２つの受容体の二重標的が標的単独受容体よりも大きな効果を有する可能性がある理論的基礎を提供する。単球／マクロファージ生物学では、ＣＣＲ２は骨髓から血液及び血液から組織への単球の遷移の媒介において重要な役割を果たし、ＣＣＲ５は主にマクロファージの炎症組織における活性化、生存及び可能な保留を調節する。さらに、ＣＣＲ５阻害は単球／マクロファージに対する影響以外にＴ細胞応答を阻害することにより二重アンタゴニストの治療可能性を改善することができる。ＣＣＲ２およびＣＣＲ５の二重標的のメリットに基づいて、ＣＣＲ２／ＣＣＲ５アンタゴニストも詳細に研究され、臨床試験に入った４つの薬物があり、例えば、Ｔｏｂｉｒａ社のＣｅｎｉｃｒｉｖｉｒｏｃ、Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ社のＢＭＳ－８１３１６０、及びファイザーのＰＦ－０４６３４８１７が挙げられる。したがって、ＣＣＲ２／ＣＣＲ５アンタゴニストは優れた薬物製造の潜在力を有し、ここで本発明者はＣＣＲ２／ＣＣＲ５アンタゴニストのヘテロシクロアルキル系化合物を特許保護する。

ＷＯ２００３０１４１０５Ａ１には、化合物Ｃｅｎｉｃｒｉｖｉｒｏｃ（ＣＶＣ）、参照物Ａが報告されている。構造は以下の通りである。

本発明は式（I）で示される化合物、その異性体又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。

ここで、
ｎは１、２、３から選択され、
Ｒ_１は４～６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記４～６員ヘテロシクロアルキル基は１、２又は３つのＲ_ａで置換されてもよく、
Ｒ_２はＣ_１－６アルキル基であり、前記Ｃ_１－６アルキル基は１、２又は３つのＲ_ｂで置換されてもよく、
Ｒ_３はＣ_１－６アルコキシ基であり、前記Ｃ_１－６アルコキシ基は１、２又は３つのＲ_ｃで置換されてもよく、
Ｘ_１はＯ、Ｓ、－ＮＨ－から選択され、
Ｌ_１は－（ＣＲＲ）_ｍ－であり、
Ｌ_２は－ＣＲＲ－であり、
ｍは１、２、３、４から選択され、
各Ｒ_ａ、Ｒ_ｂ及びＲ_ｃはそれぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＮ及びＣＨ_３から選択され、
各Ｒはそれぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＮ及びＣＨから選択され、
前記４～６員ヘテロシクロアルキル基はそれぞれ、独立して－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｓ－及びＮから選択される１、２、３又は４つのヘテロ原子又はヘテロ原子団を含み、
「＊」硫黄原子はキラル硫黄原子であり、（Ｒ）又は（Ｓ）の単一のエナンチオマーとして、又は一種のエナンチオマーに富む形で存在する。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｒ_２はＣ_１－３アルキル基であり、前記Ｃ_１－３アルキル基は１、２又は３つのＲ_ｂで置換されてもよく、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｒ_２はＣＨ_２ＣＨ_３であり、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｒ_３はＣ_４－６アルコキシ基であり、前記Ｃ_４－６アルコキシ基は１、２又は３つのＲ_ｃで置換されてもよく、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｒ_３は

であり、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｌ_１は－ＣＨ_２ＣＨ_２－であり、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記構造単位

は、

であり、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｌ_２は－ＣＨ_２－であり、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｒ_１は、オキセタン基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、ヘキサヒドロピリジニル基、モルホリニル基及び１，４－ジオキサニル基から選択され、前記オキセタン基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、ヘキサヒドロピリジニル基、モルホリニル基及び１，４－ジオキサニル基は１、２又は３つのＲ_ａで置換されてもよく、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記Ｒ_１は、

から選択され、前記

は、２又は３つのＲ_ａで置換されてもよく、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記構造単位

は、

から選択され、他の変数は本発明に定義される通りである。
本発明の幾つかの形態において、前記構造単位

は、

から選択され、他の変数は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの形態において、前記化合物又はその薬学的に許容可能な塩は、

ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｘ_１、Ｌ_１、Ｌ_２は本発明に定義される通りである。

本発明の幾つかの実施の態様は前記変数の任意の組み合わせからなるものである。
本発明はさらに、下記の式で示される化合物、その異性体又はその薬学的に許容可能な塩を提供する。

本発明の幾つかの形態において、前記化合物、その異性体又はその薬学的に許容可能な塩は、

本発明はさらに、治療有効量の前記化合物又はその薬学的に許容可能な塩を有効成分及び薬学的に許容可能なキャリアとして含む薬物組成物を提供する。

本発明はさらに、ＣＣＲ２／ＣＣＲ５アンタゴニストに関連する疾患を治療する薬物の調製における前記化合物又はその薬学的に許容可能な塩の応用を提供する。

本発明はさらに、非アルコール性脂肪性肝炎に関連する疾患を治療する薬物の調製における前記組成物の応用を提供する。

本発明の化合物はＣＣＲ２及びＣＣＲ５受容体に対する拮抗作用が顕著である。本発明の化合物は、薬物と薬物の相互作用による安全リスクを明らかに低下させ、抗体と併用して参照化合物が抗体と併用する場合よりも腫瘍抑制効果を明らかに向上させた。

＜定義と説明＞
特に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及びフレーズは以下の意味を有する。一つの特定の用語又はフレーズは、特別に定義されていない限り、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出現した場合、それは対応する商品又はその有効成分を指す。

本明細書で用いられる用語「薬学的に許容される」は、それらの化合物、材料、組成物及び／又は剤形に対するもので、これらは信頼できる医学的判断の範囲内にあり、ヒト及び動物の組織と接触して使用することに適し、過剰な毒性、刺激性、アレルギー反応又は他の問題又は合併症があまりなく、合理的な利益／リスク比に見合っている。

用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の塩を指し、本発明で見出された特定の置換基を有する化合物と比較的無毒の酸又は塩基とから製造される。本発明の化合物に比較的酸性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は適切な不活性溶媒においてこれらの化合物を十分な量の塩基と接触させることで塩基付加塩を得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アンモニウム、有機アミン又はマグネシウムの塩又は類似の塩を含む。本発明の化合物に比較的塩基性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は適切な不活性溶媒においてこれらの化合物を十分な量の酸と接触させることで酸付加塩を得ることができる。薬学的に許容される酸付加塩の例には、無機酸塩及び有機酸塩、更にアミノ酸（例えば、アルギニン等）の塩、及びグルクロン酸のような有機酸の塩を含み、前記無機酸は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸水素イオン、リン酸、リン酸一水素イオン、リン酸二水素イオン、硫酸、硫酸水素イオン、ヨウ化水素酸、亜リン酸等を含み、前記有機酸は、例えば、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸やメタンスルホン酸等の類似の酸を含む。本発明の一部の特定の化合物は、塩基性及び酸性の官能基を含有するため、任意の塩基付加塩又は酸付加塩に転換することができる。

本発明の薬学的に許容される塩は、酸基又は塩基性基を含む母体化合物から通常の方法で合成することができる。通常の場合、このような塩の製造方法は、水又は有機溶媒或いは両者の混合物において、遊離酸又は塩基の形態のこれらの化合物を化学量論の適切な塩基又は酸と反応させて製造する。

本発明の化合物は、特定の幾何又は立体異性体の形態が存在してもよい。本発明は、全てのこのような化合物を想定し、シス及びトランス異性体、（－）－及び（＋）－エナンチオマー、（Ｒ）－及び（Ｓ）－エナンチオマー、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体、及びそのラセミ混合物並びに他の混合物、例えば、エナンチオマー又はジアステレオマーを多く含有する混合物を含み、全てのこれらの混合物は本発明の範囲内に含まれる。アルキル等の置換基に他の不斉炭素原子が存在してもよい。全てのこれらの異性体及びこれらの混合物はいずれも本発明の範囲内に含まれる。

特に説明しない限り、用語「エナンチオマー」又は「光学異性体」とは互いに鏡像の関係にある立体異性体である。

特に説明しない限り、用語「シス及びトランス異性体」又は「幾何異性体」は二重結合又は環形成炭素原子単結合が自由に回転できないことにより引き起こされる。

特に説明しない限り、用語「ジアステレオマー」とは分子が二つ又は複数のキラル中心を有し、かつ分子同士は非鏡像の関係にある立体異性体である。

特に説明しない限り、「（＋）」は右旋を、「（－）」は左旋を、「（±）」はラセミを表す。
特に説明しない限り、楔形実線結合

及び楔形点線結合

で１つの立体中心の絶対配置を、棒状実線結合

及び棒状点線結合

で立体中心の相対配置を、波線

で楔形実線結合

又は楔形点線結合

を、或いは波線

で棒状実線結合

及び棒状点線結合

を表す。

特に説明しない限り、化合物に二重結合構造、例えば、炭素炭素二重結合、炭素窒素二重結合、および窒素窒素二重結合が存在し、且つ二重結合における各原子にいずれも２つの異なる置換基が連結されている場合（窒素原子を含む二重結合において、窒素原子上の１対の孤立電子はそれに連結された置換基とみなされる）、該化合物において二重結合における原子とその置換基との間が波線

で連結されている場合、該化合物の（Ｚ）型異性体、（Ｅ）型異性体、又はこの２種類の異性体の混合物を表す。例えば、下記の式（Ａ）は、該化合物が式（Ａ－１）又は式（Ａ－２）の単一異性体として存在するか、式（Ａ－１）および式（Ａ－２）の２種類の異性体の混合物として存在することを表す。下記の式（Ｂ）は、該化合物が式（Ｂ－１）又は式（Ｂ－２）の単一異性体として存在するか、式（Ｂ－１）および式（Ｂ－２）の２種類の異性体の混合物として存在することを表す。下記の式（Ｃ）は、該化合物が式（Ｃ－１）又は式（Ｃ－２）の単一異性体として存在するか、式（Ｃ－１）および式（Ｃ－２）の２種類の異性体の混合物として存在することを表す。

特に説明しない限り、用語「互変異性体」又は「互変異性体の形態」とは、室温において、異なる官能基の異性体が動的平衡にあり、かつ速やかに互いに変換できることを指す。互変異性体は可能であれば（例えば、溶液において）、互変異性体の化学平衡を達することが可能である。例えば、プロトン互変異性体（ｐｒｏｔｏｎ ｔａｕｔｏｍｅｒ）（プロトトロピー互変異性体（ｐｒｏｔｏｔｒｏｐｉｃ ｔａｕｔｏｍｅｒ）とも呼ばれる）は、プロトンの移動による相互変換、例えば、ケトン－エノール異性化やイミン－エナミン異性化を含む。原子価互変異性体（ｖａｌｅｎｃｅ ｔａｕｔｏｍｅｒ）は、一部の結合電子の再構成による相互変換を含む。ここで、ケトン－エノール互変異性化の具体的な実例は、ペンタン－２，４－ジオンと４－ヒドロキシ－３－ペンテン－２－オンの二つの互変異性体の間の相互変換である。

特に説明しない限り、用語「一つの異性体を豊富に含む」、「異性体が豊富に含まれる」、「一つのエナンチオマーを豊富に含む」又は「エナンチオマーが豊富に含まれる」とは、その中の一つの異性体又はエナンチオマーの含有量が１００％未満で、かつ当該異性体又はエナンチオマーの含有量は６０％以上、又は７０％以上、又は８０％以上、又は９０％以上、又は９５％以上、又は９６％以上、又は９７％以上、又は９８％以上、又は９９％以上、又は９９．５％以上、又は９９．６％以上、又は９９．７％以上、又は９９．８％以上、又は９９．９％以上である。

特に説明しない限り、用語「異性体の過剰量」又は「エナンチオマーの過剰量」とは、二つの異性体又は二つのエナンチオマーの間の相対百分率の差の値である。例えば、その一方の異性体又はエナンチオマーの含有量が９０％で、もう一方の異性体又はエナンチオマーの含有量が１０％である場合、異性体又はエナンチオマーの過剰量（ｅｅ値）は８０％である。

光学活性な（Ｒ）－及び（Ｓ）－異性体並びにＤ及びＬ異性体は、キラル合成又はキラル試薬又は他の通常の技術を用いて調製することができる。本発明のある化合物の一つのエナンチオマーを得るには、不斉合成又はキラル補助剤を有する誘導作用によって調製することができるが、その中で、得られたジアステレオマー混合物を分離し、かつ補助基を分解させて純粋な所望のエナンチオマーを提供する。或いは、分子に塩基性官能基（例えば、アミノ基）又は酸性官能基（例えば、カルボキシ基）が含まれる場合、適切な光学活性な酸又は塩基とジアステレオマーの塩を形成させ、更に本分野で公知の通常の方法によってジアステレオマーの分割を行った後、回収して単離されたエナンチオマーを得る。また、エナンチオマーとジアステレオマーの分離は、通常、クロマトグラフィー法によって行われ、前記クロマトグラフィー法はキラル固定相を使用し、かつ任意に化学誘導法（例えば、アミンからカルバミン酸塩を生成させる）と併用する。

本発明の化合物は、当該化合物を構成する一つ又は複数の原子に、非天然の比率の原子同位元素が含まれてもよい。例えば、三重水素（^３Ｈ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）又はＣ－１４（^１４Ｃ）のような放射性同位元素で化合物を標識することができる。また、例えば、水素を重水素で置換して重水素化薬物を形成することができ、重水素と炭素からなる結合は水素と炭素からなる結合よりも強固で、未重水素化薬物と比べ、重水素化薬物は毒性・副作用の低下、薬物の安定性の増加、治療効果の増強、薬物の生物半減期の延長等のメリットがある。本発明の化合物の全ての同位元素の構成の変換は、放射性の有無を問わず、いずれも本発明の範囲内に含まれる。「任意」又は「任意に」とは、後述する事象又は状況は可能であるが、必ずしも発生しないことを意味し、その説明は前記事象又は状況が発生する場合及び前記事象又は状況が発生しない場合を含む。

用語「置換される」とは、特定の原子における任意の一つ又は複数の水素原子が置換基で置換されることで、特定の原子の原子価状態が正常でかつ置換後の化合物が安定していれば、重水素及び水素の変形体を含んでもよい。置換基がオキソ（即ち＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されたことを意味する。酸素置換は、芳香族基では起きない。用語「任意に置換される」とは、置換されていてもよく、置換されていなくてもよいことを指し、特に定義しない限り、置換基の種類と数は化学的に実現できれば任意である。

変数（例えば、Ｒ）のいずれかが化合物の組成又は構造で１回以上現れる場合、その定義はいずれの場合においても独立である。そのため、例えば、一つの基が０～２個のＲで置換された場合、前記基は任意に２個以下のＲで置換され、かついずれの場合においてもＲが独立の選択肢を有する。また、置換基及び／又はその変形体の組み合わせは、このような組み合わせでのみに安定した化合物になる場合のみ許容される。

連結基の数が０の場合、例えば、－（ＣＲＲ）_０－は、当該連結基が単結合であることを意味する。
１つの変数が単結合から選択される場合、それに連結される２つの基が直接連結していることを示し、例えば、Ａ－Ｌ－ＺにおいてＬが単結合を表す場合、この構造は実際にＡ－Ｚであることを示す。

置換基がない場合、当該置換基が存在しないことを表し、例えば、Ａ－ＸにおけるＸがない場合、当該構造は実際にはＡであることを表す。挙げられた置換基に対してその中のどの原子が置換された基に連結されたかを明示していない場合、その置換基はいずれかの原子を介して結合され、例えば、ピリジルを置換基とする場合、ピリジン環上のいずれかの炭素原子を介して置換された基に連結されることができる。

列挙された連結基が連結方向を示していない場合、その連結方向は任意であり、例えば、

において連結基Ｌが－Ｍ－Ｗ－である場合、－Ｍ－Ｗ－は左から右への読み取り順番と同じ方向で環Ａと環Ｂを連結して

を構成してもよく、左から右への読み取り順番と反対の方向で環Ａと環Ｂを連結して

を構成してもよい。前記連結基、置換基及び／又はその変形体の組み合わせは、このような組み合わせで安定した化合物になる場合のみ許容される。

特に説明しない限り、ある基が１つの又は複数の連結可能な部位を有する場合、この基の任意の１つ又は複数の部位は化学結合により他の基と連結することができる。この化学結合の連結方式が特定されておらず、且つ連結可能な部位にＨ原子が存在する場合、化学結合を連結するとき、この部位のＨ原子の数は連結される化学結合の数とともに減少して対応する価数の基になる。前記部位と他の基とが連結された化学結合は直線実線結合

、直線点線結合

、又は波線

で表すことができる。例えば、－ＯＣＨ_３における直線実線結合は、この基における酸素原子を介して他の基と連結することを表す。

における直線点線結合は、この基における窒素原子の両端を介して他の基と連結することを表す。

の波線は、このフェニル基における１と２位の炭素原子を介して他の基と連結することを表す。

は、このピペリジニル基における任意の連結可能な部位は１つの化学結合を介して他の基と連結できることを示し、少なくとも

の４種類の連結方法を含み、たとえ－Ｎ－にＨ原子が描かれても、

は、

の連結方法の基を含むが、１つの化学結合が連結されている場合、この部位のＨは１つ減少して対応する一価のピペリジニル基になる。

特に定義しない限り、「４～６員ヘテロシクロアルキル基」という用語自体或いは他の用語と組み合わせたものは、それぞれ４～６個の環原子からなる飽和環状基を表し、１、２又は３個の環原子は独立してＯ、ＮＨおよびＮから選択されるヘテロ原子であり、残りは炭素原子であり、ここで、窒素原子は任意に四級化される。「４～６員ヘテロシクロアルキル基」という用語は単環系である。この「４～６員ヘテロシクロアルキル基」に関して、ヘテロ原子はヘテロシクロアルキル基の分子の他の部分との連結位置を占めてもよい。前記４～６員ヘテロシクロアルキル基は、４～６員、４～５員、５～６員、４員、５員、６員ヘテロシクロアルキル基などを含む。４～６員ヘテロシクロアルキル基の例には、アゼチジニル基、オキセタニル基、ピロリジル基、ピラゾリニル基、イミダゾリジニル基、テトラヒドロフリル基（テトラヒドロフラン－２－イル基等を含む）、テトラヒドロピラニル基、ピペリジル基（１－ピペリジル基、２－ピペリジル基及び３－ピペリジル基等を含む）、ピペラジル基（１－ピペラジル基及び２－ピペラジル基等を含む）、モルホリル基（３－モルホリル基及び４－モルホリル基等を含む）などが含まれるが、これらに限定されない。

特に定義しない限り、「Ｃ_１－６アルキル基」という用語は、１～６個の炭素原子を含む直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を指す。前記Ｃ_１－６アルキル基は、Ｃ_１－５、Ｃ_１－４、Ｃ_１－３、Ｃ_１－２、Ｃ_２－６、Ｃ_２－４、Ｃ_６及びＣ_５アルキル基などを含み、一価（例えば、メチル基）、二価（例えば、メチレン基）、又は多価（例えば、メチン基）であり得る。Ｃ_１－６アルキル基の例には、メチル基（Ｍｅ）、エチル基（Ｅｔ）、プロピル基（ｎ－プロピル基及びイソプロピル基を含む）、ブチル基（ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓ－ブチル基、ｔ－ブチル基を含む）、ペンチル基（ｎ－ペンチル基、イソペンチル基及びネオペンチル基を含む）、ヘキシル基などが含まれるが、これらに限定されない。

特に定義しない限り、「Ｃ_１－３アルキル基」という用語は、１～３個の炭素原子を含む直鎖又は分岐鎖の飽和炭化水素基を指す。前記Ｃ_１－３アルキル基はＣ_１－２及びＣ_２－３アルキル基などを含み、一価（例えば、メチル基）、二価（例えば、メチレン基）、又は多価（例えば、メチン基）であり得る。Ｃ_１－３アルキル基の例には、メチル基（Ｍｅ）、エチル基（Ｅｔ）、プロピル基（ｎ－プロピル基及びイソプロピル基を含む）などが含まれるが、これらに限定されない。

特に定義しない限り、「Ｃ_１－６アルコキシ基」という用語は、１つの酸素原子を介して分子の他の部分に連結する１～６個の炭素原子を含むアルキル基を指す。前記Ｃ_１－６アルコキシ基は、Ｃ_１－４、Ｃ_１－３、Ｃ_１－２、Ｃ_２－６、Ｃ_２－４、Ｃ_６、Ｃ_５、Ｃ_４及びＣ_３アルコキシ基などを含む。Ｃ_１－６アルコキシ基の例には、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基（ノルマルプロポキシ基およびイソプロポキシ基を含む）、ブトキシ基（ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基を含む）、ペントキシ基（ｎ－ペントキシ基、イソペントキシ基およびネオペントキシ基を含む）、ヘキシルオキシ基などが含まれるが、これらに限定されない。

特に定義しない限り、「Ｃ_４－６アルコキシ基」という用語は、１つの酸素原子を介して分子の他の部分に連結する４～６個の炭素原子を含むアルキル基を指す。前記Ｃ_４－６アルコキシ基は、Ｃ_４－６、Ｃ_４－５、Ｃ_６、Ｃ_５、Ｃ_４アルコキシ基などを含む。Ｃ_５－６アルコキシ基の例には、ブトキシ基（ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｓ－ブトキシ基、ｔ－ブトキシ基を含む）、ペントキシ基（ｎ－ペントキシ基、イソペントキシ基およびネオペントキシ基を含む）、ヘキシルオキシ基などが含まれるが、これらに限定されない。

用語「脱離基」とは別の官能基又は原子で置換反応（例えば、求核置換反応）によって置換された官能基又は原子を指す。例えば、代表的な脱離基は、トリフルオロメタンスルホン酸エステル、塩素、臭素、ヨウ素、例えば、メタンスルホン酸エステル、トルエンスルホン酸エステル、ｐ－ブロモベンゼンスルホン酸エステル、ｐ－トルエンスルホン酸エステル等のスルホン酸エステル基、例えば、アセチルオキシ基、トリフルオロアセチルオキシ基等のアシルオキシ基を含む。

用語「保護基」は「アミノ保護基」、「ヒドロキシ保護基」又は「メルカプト保護基」を含むが、これらに限定されない。用語「アミノ保護基」とはアミノ基の窒素の位置における副反応の防止に適する保護基を指す。代表的なアミノ保護基は、ホルミル基、アルカノイル基（例えば、アセチル基、トリクロロアセチル基又はトリフルオロアセチル基）ようなアシル基、ｔ－ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）のようなアルコキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ）及び９－フルオレニルメチルオキシカルボニル基（Ｆｍｏｃ）のようなアリールメトキシカルボニル基、ベンジル基（Ｂｎ）、トリフェニルメチル基（Ｔｒ）、１，１－ビス（４’－メトキシフェニル）メチル基のようなアリールメチル基、トリメチルシリル基（ＴＭＳ）及びｔ－ブチルジメチルシリル基（ＴＢＳ）のようなシリル基等を含むが、これらに限定されない。用語「ヒドロキシ保護基」とはヒドロキシ基の副反応の防止に適する保護基を指す。代表的なヒドロキシ保護基は、メチル基、エチル基及びｔ－ブチル基のようなアルキル基、アルカノイル基（例えば、アセチル基）のようなアシル基、ベンジル基（Ｂｎ）、ｐ－メトキシベンジル基（ＰＭＢ）、９－フルオレニルメチル基（Ｆｍ）及びジフェニルメチル基（ＤＰＭ）のようなアリールメチル基、トリメチルシリル基（ＴＭＳ）及びｔ－ブチルジメチルシリル基（ＴＢＳ）のようなシリル基等を含むが、これらに限定されない。

本発明の化合物は当業者に周知の様々な合成方法によって製造するができ、以下に挙げられた具体的な実施形態、それと他の化学合成方法と組み合わせた実施形態及び当業者に周知の同等の代替方法を含み、好適な実施形態は本発明の実施例を含むが、これらに限定されない。

本発明に使用される溶媒は市販品として入手可能である。本発明は下記の略号を使用する：ａｑは水を表し；ＨＡＴＵはＯ－（７－アザベンゾトリアゾール－１－イル）－Ｎ，Ｎ、Ｎ’、Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェートを表し；ＥＤＣはＮ－（３－ジメチルアミノプロピル）－Ｎ’－エチルカルボジイミド塩酸塩を表し；ｍ－ＣＰＢＡは３－クロロペルオキシ安息香酸を表し；ｅｑは当量、等量を表し；ＣＤＩはカルボニルジイミダゾールを表し；ＤＣＭはジクロロメタンを表し；ＰＥは石油エーテルを表し；ＤＩＡＤはアゾジカルボン酸ジイソプロピルを表し；ＤＭＦはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを表し；ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表し；ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを表し；ＥｔＯＨはエタノールを表し；ＭｅＯＨはメタノールを表し；ＣＢｚはベンジルオキシカルボニルを表し、アミン保護基であり；ＢＯＣはｔ－ブトキシカルボニルを表し、アミン保護基の一種であり；ＨＯＡｃは酢酸を表し；ＮａＣＮＢＨ_３はシアノ水素化ホウ素ナトリウムを表し；ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し；ＢｏＣ_２Ｏはジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカルボナートを表し；ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を表し；ＤＩＰＥＡはジイソプロピルエチルアミンを表し；ＳＯＣｌ_２は塩化チオニルを表し；ＣＳ_２は二硫化炭素を表し；ＴｓＯＨはｐ－トルエンスルホン酸を表し；ＮＦＳＩはＮ－フルオロ－Ｎ－（ベンゼンスルホニル）ベンゼンスルホンイミドを表し；ｎ－Ｂｕ_４ＮＦはフッ化テトラ－ｎ－ブチルアンモニウムを表し；ｉＰｒＯＨは２－プロパノールを表し；Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２は１，１’－ジ（ジフェニルホスフィノ）フェロセンパラジウム（ＩＩ）クロリドを表し；ＤＥＡはジエチルアミンを表し；ｍｐは融点を表し；ＬＤＡはリチウムジイソプロピルアミドを表し；ｒ．ｔ．は室温を表し；Ｏ／Ｎは一晩を表し；ｅｑは当量、等量を表し；ｒ／ｍｉｎは回転数の単位：１分間あたりの回転数である。

図１は、ＷＸ００１のマウスＭＣ３８結腸癌腫瘍モデルの腫瘍体積に対する影響を示す。

以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明を限定するものではない。本明細書は本発明を詳細に説明し、その具体的な実施例も開示した。本発明の精神及び範囲から逸脱しない限り、本発明の具体的な実施例に様々な変更及び改善を加えることができることは、当業者には明らかである。

ステップ１：化合物ＢＢ－１Ａ－２の合成
テトラブチルアンモニウムブロミド（８６．５８ｇ、３０２．６３ｍｍｏｌ）と水酸化カリウム（３３９．６ｇ、６．０５ｍｏｌ）をトルエン（５０００ｍＬ）に懸濁させ、この混合液を１６時間還流させ、そこにピペリジン－２－ケトン（５００．００ｇ、５．０４ｍｏｌ）とｐ－メトキシベンジルクロリド（１．０３ｋｇ、６．５６ｍｏｌ）を加えた。この混合液を１００℃に保ちながら２４時間攪拌した。反応液を室温まで冷却し、水で３回洗浄し（２０００ｍＬ×３）、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過し、濃縮した。濃縮液をクロマトグラフィーカラムにより分離して化合物ＢＢ－１Ａ－２を得た。

ステップ２：化合物ＢＢ－１Ａ－４の合成
化合物ＢＢ－１Ａ－２（４０ｇ）と水酸化ナトリウム（７．２９ｇ）の水（２００ｍＬ）溶液を８０℃で２４時間攪拌した。０℃で濃塩酸（７．３８ｍＬ）で混合物を中和してＢＢ－１Ａ－３の混合溶液を得た。室温で、この混合物に炭酸ナトリウム（６５．６６ｇ）とジメチルスルホキシド（６００ｍＬ）を加えた。次に、１００℃で混合物に５－ブロモ－２－クロロ－ベンズアルデヒド（４６．１１ｇ）を滴下した。次に、反応混合物を１００℃で４８時間還流させた。氷浴で冷却しながら塩化アンモニウム水溶液（１ｍｏｌ／Ｌ）で反応をｐＨ＝７に調整し、酢酸エチル（１Ｌ×３）で抽出した。有機層を水と塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮した。カラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２００：１～１：１）により残留物を精製した。化合物ＢＢ－１Ａ－４を得た。

ステップ３：化合物ＢＢ－１Ａ－５の合成
化合物ＢＢ－１Ａ－４（１０ｇ）及び炭酸ナトリウム（１２．６１ ｇ）のアセトニトリル（１００ｍＬ）混合物にヨウ化メチル（２２ｇ）のアセトニトリル（５０ｍＬ）溶液を加えた。窒素ガスの保護下で、反応混合物を１５～３０℃で２４時間攪拌した。反応混合物を水（３００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（４００ｍＬ×２）で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより粗製品を精製し（石油エーテル／酢酸エチル＝５０：１～２０：１～１０：１）、化合物ＢＢ－１Ａ－５を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ １０．３１（ｓ，１Ｈ）７．８９（ｄ，Ｊ＝２．５Ｈｚ，１Ｈ）７．５４（ｄｄ，Ｊ＝９．０，２．５１Ｈｚ，１Ｈ）７．０４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）６．９７（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）６．８０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ）４．２１（ｓ，２Ｈ）３．７７（ｓ，３Ｈ）３．６３（ｓ，３Ｈ）３．０７（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）２．２５（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）１．４６－１．５８（ｍ，４Ｈ）．

ステップ４：化合物ＢＢ－１Ａ－６の合成
化合物ＢＢ－１Ａ－５（１１ｇ）の炭酸ジメチル（４２．８ｇ）溶液にメタノールナトリウム（６．８４ｇ）を加えた。それを６０℃まで加熱して６０℃で３５時間攪拌した。塩化アンモニウム水溶液（１ｍｏｌ／Ｌ）でｐＨ（７～８）に調整し、反応混合物をろ過した。濾過ケーキを減圧濃縮し、化合物ＢＢ－１Ａ－６を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．７４（ｓ，１Ｈ）７．２６（ｓ，１Ｈ）７．０５－７．１１（ｍ，３Ｈ）６．８８（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，２Ｈ）６．５３（ｄ，Ｊ＝９．０３Ｈｚ，１Ｈ）４．３９（ｓ，２Ｈ）３．８０（ｄ，Ｊ＝２．０１Ｈｚ，６Ｈ）３．４８（ｔ，Ｊ＝５．０２Ｈｚ，２Ｈ）２．５８（ｔ，Ｊ＝６．０２Ｈｚ，２Ｈ）１．４７（ｄ，Ｊ＝５．５２Ｈｚ，２Ｈ）．

ステップ５：化合物ＢＢ－１Ａの合成
化合物ＢＢ－１Ａ－６（１０ｇ）のトルエン（５０ｍＬ）溶液にトリフルオロ酢酸（１００ｍＬ）を加えた。反応混合物を６０℃まで加熱して６０℃で８時間攪拌した。氷浴で冷却しながら飽和重炭酸ナトリウムで反応混合物をｐＨ＝７に中和し、酢酸エチル（２５０ｍＬ×２）で抽出した。有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮した。シリカゲルカラムにより残留物を精製し（石油エーテル／酢酸エチル＝５０：１～５：１）、化合物ＢＢ－１Ａを得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．６６（ｓ，１Ｈ）７．３９－７．０５（ｍ，１Ｈ）６．８５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）６．３６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）３．８１（ｓ，３Ｈ）３．５１（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ ２Ｈ）２．７５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ）１．４９－１．４０（ｍ，２Ｈ）．

ステップ６：化合物ＢＢ－１Ａ－７の合成
２５℃で、ＢＢ－１Ａ（７．５ｇ、２５．３２ｍｍｏｌ、１ｅｑ）及びＢＢ－２（８．９２ｇ、２７．８６ｍｍｏｌ、１．１ｅｑ）をジメチルスルホキシド（６２．５ｍＬ）と水（１２．５ｍＬ）に溶解し、次に、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（９２６．５０ｍｇ、１．２７ｍｍｏｌ、０．０５ｅｑ）及び炭酸カリウム（１０．５０ｇ、７５．９７ｍｍｏｌ、３ｅｑ）を加え、次に、８０℃で、窒素ガスの保護下で１８時間反応させた。先に溶液をろ過し、次に、ろ液に水１００ｍＬを加え、次に、酢酸エチルで３回抽出し（１００ｍＬ×３）、合わせた有機相を飽和食塩水で１回洗浄し、次に、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した後に減圧濃縮し、粗製品を得た。粗製品をカラムクロマトグラフィーにより分離して（石油エーテル：酢酸エチルＥＡ＝２０：１～８：１）化合物ＢＢ－１Ａ－７（８ｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：４１０．０（Ｍ＋１）^＋

ステップ１：化合物ＢＢ－１Ｂ－２の合成
２５℃で反応物ＢＢ－１Ｂ－１（４５ｇ）のピリジン（４５０ｍＬ）溶液にｐ－トルエンスルホニルクロリド（５５．９４ｇ）を加え、混合物を５５℃で５時間攪拌した。混合物に水（２００ｍＬ）を加えて酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮し、残留物を得た。シリカゲルカラムにより残留物を精製した（石油エーテル／酢酸エチル＝１００：１～１０：１）。ＢＢ－１Ｂ－２を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ １０．５１（ｓ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），７．６３－７．５９（ｍ，１Ｈ），７．５７－７．５２（ｍ，１Ｈ），７．２４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｓ，３Ｈ）

ステップ２：化合物ＢＢ－１Ｂ－３の合成
０℃で、ＢＢ－１Ｂ－２（５９ｇ）のＤＭＦ（２００ｍＬ）溶液に水素化ナトリウム（６．１４ｇ、６０％純度）及びＤＭＦ（５０ｍＬ）を加え、次に、混合物を２５℃で、窒素ガスの保護下で２時間攪拌した。次に、０℃で混合物にヨウ化ナトリウム（２３．０２ｇ）及び４－ブロモ酪酸エチル（３２．９５ｇ）を加えた。この混合物を８０℃で窒素ガスの保護下で１６時間攪拌した。次に、０℃で混合物に水素化ナトリウム（６．１４ｇ、６０％純度）及びＤＭＦ（５０ｍＬ）を加え、次に、混合物を８０℃で窒素ガスの保護下で１５時間攪拌した。次に、混合物に水（２００ｍＬ）を加えて酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過した。減圧濃縮して黄色油状物を得た。０℃で濃硫酸（１００ｍＬ、９８％純度）と酢酸（１５７．５ｇ）を加えた。この混合物を９０℃で２．５時間攪拌した。１２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液で混合物をｐＨ＝８に調整し、次に、酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で抽出し、飽和食塩水（３００ｍＬ）で合わせた有機層を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮して残留物を得た。シリカゲルカラムにより残留物を精製した（石油エーテル／酢酸エチル＝５０：１～５：１）。ＢＢ－１Ｂ－３を得た。

ステップ３：化合物ＢＢ－１Ｂ－４の合成
反応物ＢＢ－１Ｂ－３（６ｇ）及びＢｏｃ酸無水物（１５．１６ｇ）をテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジメチルピリジン（４．５８ｇ）を加え、混合物を７０℃で４時間攪拌した。水（１００ｍＬ）でクエンチした。酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮して残留物を得た。シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより残留物を精製して（石油エーテル／酢酸エチル＝５０：１～２０：１）ＢＢ－１Ｂ－４を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：２８３．９［Ｍ－５５］^＋
ステップ４：化合物ＢＢ－１Ｂ－５の合成
２５℃で、反応物ＢＢ－１Ｂ－４（２．６８ｇ）の炭酸ジメチル（５０ｍＬ）溶液にメタノールナトリウム（２．１３ ｇ）を加え、次に、混合物を１００℃の窒素ガスの保護下で２時間攪拌した。混合物を水（５０ｍＬ）でクエンチした。酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、飽和食塩水（１００ｍＬ）で合わせた有機層を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮し、残留物を得た。シリカゲルカラムにより残留物（石油エーテル／酢酸エチル＝５０：１～５：１）を精製して化合物ＢＢ－１Ｂ－５を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３４２．１［Ｍ－５５］^＋
ステップ５：化合物ＢＢ－１Ｂ－６の合成
－４０℃で、反応物ＢＢ－１Ｂ－５（１．７ｇ）のテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）溶液に水素化ホウ素ナトリウム（４８４．４９ｍｇ）を加え、この混合物にメタノール（１０ｍＬ）を加えた。この混合物を－１５℃で０．５時間攪拌した。水（５０ｍＬ）でクエンチした。酢酸エチル（１００ｍＬ×３）でこの混合物を抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮し、化合物ＢＢ－１Ｂ－６を得た。

ステップ６：化合物ＢＢ－１Ｂ－７の合成
反応物ＢＢ－１Ｂ－６（１．９３ｇ）及びトリエチルアミン（１．５６ｍＬ）をテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）溶液に溶解して、０℃でメタンスルホニルクロリド（１．２９ ｇ）を加え、この混合物を窒素ガスの保護下で室温で１５時間攪拌した。次に、この混合物に１，８－ジアザヘテロシクロ［５，４，０］－ウンデセン（１．１４ ｇ）を加えて室温で１時間攪拌した。水（５０ｍＬ）でクエンチした。酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮し、得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して（石油エーテル／酢酸エチル＝５０：１～５：１）化合物ＢＢ－１Ｂ－７を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３２６．０［Ｍ－５５］^＋
ステップ７：化合物ＢＢ－１Ｂ－８の合成
窒素ガスの保護下で、反応物ＢＢ－１Ｂ－７（０．３５ ｇ）、ＢＢ－２（３５１．８６ｍｇ）、及び炭酸カリウム（３７９．６４ｍｇ）のジメチルスルホキシド（１０ｍＬ）と水の溶液に、［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィン）フェロセン］二塩化パラジウムジクロロメタン錯体（７４．７７ｍｇ）を加え、次に、混合物を８０℃で窒素ガスの保護下で１６時間攪拌した。この混合物に水（５０ｍＬ）を加えて酢酸エチル（５０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮し、残留物を分取薄層クロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝５：１）により精製して化合物ＢＢ－１Ｂ－８を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．７４（ｓ，１Ｈ），７．５８（ｓ，１Ｈ），７．５１（ｂｒ ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，３Ｈ），７．４８（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．２０－４．１６（ｍ，２Ｈ），３．８５－３．８０（ｍ，５Ｈ），３．５６（ｔ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），２．９２（ｓ，２Ｈ），２．０５（ｓ，１Ｈ），１．６６－１．５８（ｍ，２Ｈ），１．５６（ｓ，９Ｈ），１．４５－１．３５（ｍ，４Ｈ），０．９４（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ）

ステップ８：化合物ＢＢ－１Ｂの合成
反応物ＢＢ－１Ｂ－８（０．２３ｇ）の酢酸エチル（１０ｍＬ）溶液に４Ｍの塩酸酢酸エチル溶液（１０ｍＬ）を加え、室温で１時間攪拌した。この反応液を飽和重炭酸ナトリウム水溶液でｐＨ＝８に調整して酢酸エチル（１００ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して減圧濃縮し、化合物ＢＢ－１Ｂを得た。ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３９６．３［Ｍ＋１］^＋

ステップ１：化合物ＢＢ－１Ｃ－２の合成
１ＭのＮａＯＨ水溶液（３８１．１８ｍＬ）にメタノール（６００ｍＬ）、６－アミノカプロン酸（５０ｇ）、４－メトキシベンズアルデヒド（５２ｇ）を加えた。この混合物にパラジウム炭素（４．５ｇ、１０％純度）を加えて反応混合物を水素ガス（２０－３０ｐｓｉ）の中で室温で２４時間攪拌した。反応混合物をろ過し、ろ液を減圧濃縮して、残留物にアセトン（３００ｍＬ）を加えて室温で３０分間攪拌し、ろ過してアセトン（５０ｍＬ）で洗浄し、濾過ケーキを真空乾燥し、化合物ＢＢ－１Ｃ－２を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：２５２．３ ［Ｍ＋Ｈ］^＋
ステップ２：化合物ＢＢ－１Ｃ－３の合成
ＢＢ－１Ｃ－２（８６ｇ、３４２．１９ｍｍｏｌ、１当量）及び５－ブロモ－２－フルオロ－ベンズアルデヒド（５５．５７ｇ）をジメチルスルホキシド（３５０ｍＬ）に溶解し、そこに炭酸ナトリウム（９０．６７ｇ）及び水（１７５ｍＬ）を加え、反応液を１００℃で１２時間攪拌した。反応液を水（１２００ｍＬ）に入れて濃塩酸でｐＨ＝３～４に調整し、酢酸エチル（５００ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過して濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～１／１）により化合物ＢＢ－１Ｃ－３を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：４３４．２ ［Ｍ＋Ｈ］^＋
ステップ３：化合物ＢＢ－１Ｃ－４の合成
ＢＢ－１Ｃ－３（５８ｇ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３００ｍＬ）溶液にヨウ化メチル（１５．４９ｍＬ）と炭酸カリウム（３６．９１ｇ）を加えた。この反応液を２５℃で４時間攪拌した。反応液を水（１０００ｍＬ）に入れ、酢酸エチル（５００ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～７／３）により化合物ＢＢ－１Ｃ－４を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ １０．３１（ｓ，１Ｈ），７．９０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），６．８１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），４．２２（ｓ，２Ｈ），３．７９（ｓ，３Ｈ），３．６５（ｓ，３Ｈ），３．０６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），２．２５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），１．５８－１．５１（ｍ，４Ｈ），１．２７－１．２５（ｍ，２Ｈ）．

ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：４４８．２ ［Ｍ＋Ｈ］^＋
ステップ４：化合物ＢＢ－１Ｃ－５の合成
ＢＢ－１Ｃ－４（１０．８ｇ）の炭酸ジエチル（５００ｍＬ）溶液にメタノールナトリウム（６．５１ｇ）を加え、反応混合物を２５℃で１２時間攪拌した。こ反応物に水（５００ｍＬ）を加えて酢酸エチル（３００ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機層を塩水（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥｔＯＡｃ＝１０／１）によりＢＢ－１Ｃ－５を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：４３０．２，４３２．２ ［Ｍ＋１，Ｍ＋３］^＋
ステップ５：化合物ＢＢ－１Ｃの合成
ＢＢ－１Ｃ－５（２．４ｇ）のトルエン（１０ｍＬ）溶液にトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加え、この反応液を６５℃で１２時間攪拌した。反応液に飽和炭酸ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＝８～９に調整し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝５／１）により精製して化合物ＢＢ－１Ｃを得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．５５（ｓ，１Ｈ），７．２９（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８４（ｓ，３Ｈ），３．７３（ｓ，１Ｈ），３．２３（ｂｒｓ，２Ｈ），２．２３－２．２０（ｍ，２Ｈ），１．７４－１．７０（ｍ，２Ｈ），１．６５－１．５９（ｍ，２Ｈ）．
ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：３１０．０ ［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ１：化合物ＢＢ－２－２の合成
化合物ＢＢ－２－１（１００ｇ、０．８４６ｍｏｌ）、ｐ－トルエンスルホニルクロリド（１４６．６７ｇ、７６９．３１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（２３３．５４ｇ、２．３１ｍｏｌ）をジクロロメタン（０．５Ｌ）に溶解し、室温で、１２時間攪拌した。室温まで冷却し、溶媒を減圧除去し、水（４００ｍＬ）を加えて残留物を溶解し、水相を酢酸エチルで３回抽出し（１．５Ｌ）、合わせた有機相を飽和食塩水で２回洗浄し（４００ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を濾過した後に溶媒を減圧除去して化合物ＢＢ－２－２を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．７３（ｄ，Ｊ＝８．２８Ｈｚ，２Ｈ）７．２７（ｄ，Ｊ＝８．０３Ｈｚ，２Ｈ）４．０５－４．１０（ｍ，２Ｈ）３．５０－３．５５（ｍ，２Ｈ）３．３０（ｔ，Ｊ＝６．５３Ｈｚ，２Ｈ）２．３７（ｓ，３Ｈ）１．３５－１．４４（ｍ，２Ｈ）１．１６－１．２７（ｍ，２Ｈ）０．８１（ｔ，Ｊ＝７．４０Ｈｚ，３Ｈ）．

ステップ２：合物ＢＢ－２の合成。
化合物ＢＢ－２－２（１７０．１０ｇ、６２４．５４ｍｍｏｌ）、ｐ－ヒドロキシフェニルボロン酸ピナコールエステル（１３７．４４ｇ、６２４．５４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．６Ｌ）に溶解し、室温で炭酸カリウム（８６．３２ｇ、６２４．５４ｍｍｏｌ）とヨウ化カリウム（１０．３７ｇ、６２．４５ｍｍｏｌ）を加えた。得られた溶液を６０℃で窒素ガスの保護下で加熱還流させて１２時間攪拌しながら反応させた。室温まで冷却した後、減圧して溶媒を除去し、水（５００ｍＬ）を加えて残留物を溶解し、水相を酢酸エチルで３回抽出し（２Ｌ×３）、合わせてから溶媒を減圧除去し、カラムクロマトグラフィーにより化合物ＢＢ－２を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．７８－７．７１（ｍ，２Ｈ），６．９５－６．８８（ｍ，２Ｈ），４．１９－４．１２（ｍ，２Ｈ），３．８３－３．７５（ｍ，２Ｈ），３．５４（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．６５－１．５７（ｍ，２Ｈ），１．４４－１．３６（ｍ，２Ｈ），１．３４（ｓ，１２Ｈ），０．９３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）。

ステップ１：化合物ＢＢ－４－２の合成
トリフェニルホスフィン（７６５．６１ｇ，１．５ｅｑ）を３．５Ｌの無水テトラヒドロフランに溶解し、氷浴で機械攪拌（２１９ｒ／ｍｉｎ）しながら、徐々にＤＩＡＤ（５６７．５４ｍＬ）を滴下した。内温を１０℃以下に制御し、１００分間かけて滴下してから回転数を４００ｒ／ｍｉｎに上げて引き続き３０分間攪拌して白色粘稠状固体になるまで十分に反応させた。引き続き氷浴で徐々に４５３．９１ｍＬの無水エタノールを滴下し、９０分間かけて滴下し（滴下反応を開始すると発熱が比較的激しいので、滴下速度に注意を要する）、固体が徐々に溶解し、溶液が最終的に清澄になってから、ＢＢ－４－１（３００ｇ）を加えた。氷浴を外し、油浴に入れて温度を３０～３５℃に制御し（温度が４０℃を超えると選択性が悪くなり、副産物が増加する）、機械攪拌２００ｒ／ｍｉｎで５時間攪拌した。反応液を減圧で４０℃でテトラヒドロフランを回転により出し、４ｍｏｌ／Ｌの塩酸水溶液（７００ｍＬ）を加えて溶液ｐＨ＝２に調整した。３０ｍｉｎよく攪拌した後、２Ｌ酢酸エチル溶液を加えて抽出した。抽出を５回繰り返した後、ＴＬＣプレート及びＬＣＭＳにより観察して洗浄したし、その後、有機相を捨て、水相に６５ｇＮａＯＨを加えて４０ｍｉｎ攪拌し、ｐＨ＝１０以上に調整した（発熱が比較的激しいので、温度に注意する）。３Ｌ酢酸エチル溶媒を加えて抽出し、抽出しを３回繰り返した後、ＴＬＣプレートにより観察して洗浄し、その後、有機相を合わせた。４０ｇ無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、ろ過した後に酢酸エチルを減圧蒸留してＢＢ－４－２を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．４６（ｓ，１Ｈ），４．４１－４．２４（ｍ，４Ｈ），２．４８（ｓ，３Ｈ），１．３９（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，６Ｈ）

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：１８２．９［Ｍ＋Ｈ］^＋
ステップ２：化合物ＢＢ－４－３の合成
テトラヒドロアルミニウムリチウム（５９．３６ｇ）を秤量し、氷浴で１Ｌの無水テトラヒドロフラン溶液を加え、回転数（２８９ｒ／ｍｉｎ）で機械攪拌した。また、化合物ＢＢ－４－２（２８５ｇ）を１Ｌ無水テトラヒドロフランに溶解し、氷浴で徐々に前記溶液に加え、温度を１０℃以下に制御し、１．５時間かけて滴加を完了した後、氷浴を外し、室温で機械攪拌回転数を維持しながら１２時間反応させた。氷浴で、機械攪拌しながら徐々に６０ｍＬ脱イオン水を滴下し、反応が完了した後、徐々に水酸化ナトリウム水溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、６０ｍＬ）を滴下して１５分間攪拌した後、１８０ｍＬの脱イオン水を加え、引き続き２０分間攪拌した。８０ｇ無水硫酸マグネシウムを加えて均一によく攪拌した後、減圧ろ過した。濾過ケーキを５Ｌジクロロメタンで繰り返し５～６回洗浄し、ろ液を合わせた後に減圧して４０℃で濃縮してＢＢ－４－３を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．５１（ｓ，１Ｈ），４．８２（ｓ，３Ｈ），４．２７（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），２．３３（ｓ，３Ｈ），１．６９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）．

ステップ３：化合物ＢＢ－４－４の合成
化合物ＢＢ－４－３（１８０ｇ）を１．５Ｌの無水ジクロロメタンに溶解し、磁気攪拌し、氷浴で徐々に塩化チオニル（１８６．３ｍＬ）を滴下し、滴下終了後、氷浴を外して油浴に交換し、４０℃に加熱して窒素ガスの保護下で６時間攪拌し、ＴＬＣプレートにより反応終了を確認した。反応液を室温に冷却し、減圧４０℃で溶媒を蒸発させた後、ジクロロメタン（１Ｌ）を加えて続けて減圧蒸留し、３回繰り返して濃縮した後、水ポンプを油ポンプに変えて、続けて４５ｍｉｎ減圧回転して赤色粘稠状固体１９０ｇの粗製品を得た。その中に３８０ｍＬのアセトニトリル溶液を加えて７０℃に加熱して２時間還流させた後に溶解し、加熱を止めて温度を室温まで下げて続けて１２時間攪拌した。攪拌する場合、混合液を徐々に３Ｌの酢酸エチルに滴下し、滴下終了後に続けて３０ｍｉｎ攪拌した。減圧吸引ろ過して化合物ＢＢ－４－４を得た。

１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δｐｐｍ ９．１９（ｓ，１Ｈ），５．０６（ｓ，２Ｈ），４．２４－４．２０（ｍ，２Ｈ），２．３４（ｓ，３Ｈ），１．４５（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）．

ステップ４：化合物ＢＢ－４－５の合成
ｐ－フルオロニトロベンゼン（９７．６４ｇ）を秤量してジメチルスルホキシド（１．１Ｌ）に溶解し、氷浴で攪拌しながら硫化ナトリウム（５９．３８ｇ）を加え、引き続き４４時間攪拌した。化合物ＢＢ－４－４（９０ｇ）をＤＭＳＯ（４５０ｍＬ）に溶解し、７時間かけて徐々に反応液に滴下した。反応液に塩酸水溶液（４Ｍ、０．５Ｌ）を加え、ｐＨを３に調整し、４Ｌ水及び４Ｌ酢酸エチルを加えて抽出し、３０分間攪拌した。分液終了、水相に固体水酸化ナトリウムを加えてｐＨを１０に調整した。酢酸エチル２Ｌ×２を加え、抽出した。２回抽出した有機相を合わせて１Ｌの飽和食塩水を加えて洗浄し、濃縮した。有機相に無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し、ろ過し、濃縮した。回転乾燥した固体を粉砕し、２ｍＬ酢酸エチル及び１００ｍＬの石油エーテルを加え、室温で１時間攪拌し、ろ過した。濾過ケーキを減圧乾燥し、ＢＢ－４－５を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ８．０７（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ）７．３７（ｓ，１Ｈ）７．３０（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ）４．１３（ｓ，２ Ｈ）３．９２（ｑ，Ｊ＝７．２８Ｈｚ，２Ｈ）２．０６（ｓ，３Ｈ）１．４０（ｔ，Ｊ＝７．２８Ｈｚ，３Ｈ）．

ステップ５：化合物ＢＢ－４－６の合成
（１Ｒ，２Ｒ）－１，２－ジフェニルエタン－１，２－ジオール（１００ｇ）のイソプロパノール（５０００ｍＬ）溶液にＢＢ－４－５（６４．７２ｇ）を加え、２５℃で１時間攪拌した。次に、この混合物に一滴ずつチタンテトライソプロポキシド（６６．３２ ｇ）を滴下して２５℃で３時間攪拌した。混合物をろ過して黄色固体（９５ｇ）を得た。得られた固体（７２ｇ）をジクロロメタン（３６０ｍＬ）に溶解し、この溶液にｔｅｒｔ－ブタノールペルオキシド（１４．１７ｍＬ、６５％純度）を加え、この混合物を窒素ガスの保護下で室温で４時間攪拌した。飽和亜硫酸ナトリウム水溶液で（２００ｍＬ）クエンチし、次に、２Ｍ塩酸水溶液でｐＨ～３に調整した。分液して有機相を捨て、水相を８Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ～８に調整した。酢酸エチル（３００ｍＬ×３）で水相を抽出した。合わせた有機相を飽和食塩水（３００ｍＬ）で洗浄し、乾燥し、ろ過して真空濃縮して、ＢＢ－４－６（粗製品）を得た。

ステップ６：化合物ＢＢ－４Ａの合成
反応物ＢＢ－４－６（１９ｇ）及び塩化アンモニウム（３４．６５ｇ）のメタノール（２５０ｍＬ）溶液に亜鉛粉末（４２．３５ｇ）を加えて２０℃で２４時間攪拌した。ろ過し、ろ液を減圧濃縮して残留物を得た。分取高速液相クロマトグラフィーにより残留物を精製して化合物ＢＢ－４Ａを得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．４１（ｓ，１Ｈ），７．１４－７．０９（ｍ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），６．７１－６．６６（ｍ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ），４．０７－３．９４（ｍ，４Ｈ），３．８４（ｄｄ，Ｊ＝１．９，７．４Ｈｚ，２Ｈ），１．６９（ｓ，３Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：２６３．７（Ｍ＋Ｈ）^＋
分割法：化合物ＢＢ－４Ａ、ＢＢ－４Ｂの合成
化合物ＢＢ－４（ＷＯ２０１８１０３７５７Ａ１における化合物ＢＢ－３Ｉの合成を参照して調製したもの）を超臨界流体クロマトグラフィー（分離条件Ｃｏｌｕｍｎ：ＣｈｉｒａｌＰａＫ ＡＤ－３ １５０＊４．６ｍｍ Ｉ．Ｄ．、３μｍ移動相：Ａ：ＣＯ_２ Ｂ：エタノール（０．０５％ＤＥＡ）、勾配：５％～４０％ Ｂ、５．５ｍｉｎ、保持４０％ ３ｍｉｎ、次に、保持５％ Ｂ １．５ｍｉｎ、流速：２．５ｍＬ／ｍｉｎ、カラム温度：４０℃、波長：２２０ｎｍ）により分離し、異性体ＢＢ－４Ａ（保持時間５．８２８ｍｉｎ）およびＢＢ－４Ｂ（保持時間６．１６３ｍｉｎ）を得た。

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．４３（ｓ，１Ｈ），７．１５－７．１０（ｍ，２Ｈ），６．７１－６．６６（ｍ，２Ｈ），４．０７－３．９５（ｍ，４Ｈ），３．８５（ｄｄ，Ｊ＝１．９，７．３Ｈｚ，２Ｈ），１．７０（ｓ，３Ｈ），１．３９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）．

ＭＳ－ＥＳＩ ｍ／ｚ：２６４．０ ［Ｍ＋Ｈ］^＋

スキーム：

ステップ１：化合物ＷＸ００１＿１の合成
２５℃で、化合物ＢＢ－１Ａ（３．８９ｇ、１３．１４ｍｍｏｌ）とＢＢ－３Ａ（３ｇ、２６．２８ｍｍｏｌ）を１，２－ジクロロエタン（５０ｍＬ）に溶解し、そこにトリアセチルボロヒドリドナトリウム（１１．１４ｇ、５２．５７ｍｍｏｌ）を加え、２５℃で５時間攪拌した。反応液を８Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨ＝８に調整し、酢酸エチルで抽出し（１００ｍＬ×３）、有機相を合わせ、１００ｍＬ飽和食塩水で１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して乾燥剤を除去し、ろ液を減圧濃縮して化合物ＷＸ００１＿１を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：３９４．２０［Ｍ＋１］^＋
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ＝７．６９（ｓ，１Ｈ），７．２４（ｓ，１Ｈ），７．２３－７．２０（ｍ，１Ｈ）， ６．６１（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ），４．００（ｄｄ，Ｊ＝４．４，１０．９Ｈｚ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．４４－３．３２（ｍ，５Ｈ），３．０７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５４－２．４８（ｍ，２Ｈ），２．０５－１．９８（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ，２Ｈ），１．４６－１．４１（ｍ，２Ｈ）。

ステップ２：化合物ＷＸ００１＿２の合成
２５℃で、化合物ＷＸ００１＿１（０．６ｇ、１．５２ｍｍｏｌ）、化合物ＢＢ－２（４８７．２９ｍｇ、１．５２ｍｍｏｌ）、及び無水炭酸カリウム（６３０．９１ｍｇ、４．５７ｍｍｏｌ）をジメチルスルホキシド（１０ｍＬ）と水（２ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、そこにＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ_２（２２２．６８ｍｇ、３０４．３４μｍｏｌ）を加え、反応液を８０℃で窒素雰囲気保護下で２０時間攪拌した。反応液を水（５０ｍＬ）に入れ、酢酸エチルで抽出し（３０ｍＬ×３）、有機相を合わせ、飽和食塩水で１回洗浄し（１００ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して乾燥剤を除去し、ろ液を減圧濃縮して粗製品を得た。粗製品をカラムクロマトグラフィーにより分離してＷＸ００１＿２（０．６０３ｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：５０８．２０［Ｍ＋１］^＋
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ＝７．８８（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８２－６．７７（ｍ，１Ｈ），４．１８－４．１４（ｍ，２Ｈ），４．０１（ｄｄ，Ｊ＝３．８，１１．０Ｈｚ，２Ｈ），３．８３－３．７８（ｍ，７Ｈ），３．５６（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），３．４８（ｂｒ ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１４（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．５８－２．５３（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，２Ｈ），１．６５－１．６０（ｍ，２Ｈ），１．５１－１．４４（ｍ，３Ｈ），１．２９－１．２６（ｍ，２Ｈ），０．９４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）。

ステップ３：化合物ＷＸ００１＿３の合成
２５℃で、化合物ＷＸ００１＿２（０．６０３ｇ、８７２μＭ）をメタノール（１０ｍＬ）と水（２ｍＬ）に溶解し、水酸化ナトリウム（５２０．５０ｍｇ、１３．０１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を５０℃に加熱して４３時間攪拌した。反応液を２Ｍ希塩酸溶液でｐＨ＝３に調整し、酢酸エチルで抽出し（３０ｍＬ×３）、有機相を合わせ、飽和食塩水で１回洗浄し（１００ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して乾燥剤を除去し、ろ液を減圧濃縮して溶媒を除去してＷＸ００１＿３（０．５３７ｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：４９４．２０［Ｍ＋１］^＋
ステップ４：化合物ＷＸ００１の合成
２５℃で、化合物ＷＸ００１＿３（０．１ｇ、２０２．５８μｍｏｌ）及び化合物ＢＢ－４Ａ（５３．３５ｍｇ、２０２．５８μｍｏｌ）をピリジン（５ｍＬ）に溶解し、そこにＥＤＣＩ（７７．６７ｍｇ、４０５．１６μｍｏｌ）を加え、反応液を６０℃まで加熱し、窒素雰囲気保護下で６時間攪拌した。反応液を水（５０ｍＬ）に入れ、酢酸エチルで抽出し（３０ｍＬ×３）、有機相を合わせ、飽和食塩水で１回洗浄し（１００ｍＬ）、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ過して乾燥剤を除去し、ろ液を減圧濃縮して溶媒を蒸発して粗製品を得て、粗製品を分取ＨＰＬＣ（アルカリ性）により分離してＷＸ００１（０．０３２ｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：７３９．９０［Ｍ＋１］^＋．
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ＝７．９２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．５４（ｓ，１Ｈ），７．４８－７．４１（ｍ，４Ｈ），７．３４（ｓ，２Ｈ），７．３２（ｓ，１Ｈ），６．９８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），６．８４（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１８－４．１４（ｍ，２Ｈ），４．０６（ｓ，２Ｈ），４．０５－３．９９（ｍ，２Ｈ），３．９２－３．８４（ｍ，２Ｈ），３．８３－３．７９（ｍ，２Ｈ），３．５９－３．５０（ｍ，４Ｈ），３．３９（ｂｒ ｔ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１７（ｂｒ ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．６１（ｂｒ ｓ，２Ｈ），２．１０（ｂｒ ｓ，１Ｈ），１．７２（ｂｒ ｓ，１Ｈ），１．６９（ｓ，４Ｈ），１．６６－１．６３（ｍ，２Ｈ），１．４６－１．４２（ｍ，２Ｈ），１．４２－１．３６（ｍ，７Ｈ），０．９４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ）．

スキーム：

ステップ１：化合物ＷＸ０１８＿１の合成
２５℃で、化合物ＢＢ－１Ｂ（２００ｍｇ、９３７．７７μｍｏｌ）をジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、化合物ＢＢ－３Ｂ（３７０．８８ｍｇ、９３７．７７μｍｏｌ）、塩化亜鉛（６３．９１ｍｇ、４６８．８８μｍｏｌ，２１．９６μＬ）及び硫酸マグネシウム（２２５．７５ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）を加え、２時間攪拌した後、酢酸水素化ホウ素ナトリウム（５９６．２５ｍｇ、２．８１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を窒素ガス保護下で１２時間攪拌した。反応液に水（５０ｍＬ）を加え、ジクロロメタン（３０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。有機相を回転乾燥し、シリカゲルカラムにより分離して精製し（シリカゲル、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～３／１）、ＷＸ０１８＿１（３６０ｍｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：６１５．４［Ｍ＋２３］^＋
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ７．７７（ｓ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝２．２６Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，２Ｈ），７．４１（ｄｄ，Ｊ＝８．７８，２．２６Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，２Ｈ），６．８８（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，１Ｈ），４．２３－４．０６（ｍ，４Ｈ），３．８４－３．８０（ｍ，５Ｈ），３．５６（ｔ，Ｊ＝６．６５Ｈｚ，２Ｈ），３．３５－３．２２（ｍ，４Ｈ），２．８２（ｂｒ ｓ，２Ｈ），２．７３－２．６０（ｍ，２Ｈ），１．８９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），１．７４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１２．０５Ｈｚ，２Ｈ），１．６６－１．５９（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ），１．４４－１．３６（ｍ，２Ｈ），１．１４（ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．５４Ｈｚ，２Ｈ），０．９４（ｔ，Ｊ＝７．４０Ｈｚ，３Ｈ）．

ステップ２：化合物ＷＸ０１８＿２の合成
化合物ＷＸ０１８＿１（３６０ｍｇ、６０７．３２μｍｏｌ）を塩酸／酢酸エチル（４Ｍ、５ｍＬ）に溶解し、２５℃で０．５時間攪拌した。飽和炭酸ナトリウム溶液で反応液をｐＨ＝８に調整し、反応液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水（２０ｍＬ）溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後にろ過し、ろ液を濃縮して化合物ＷＸ０１８＿２（３００ｍｇ）を得た。

ステップ３：化合物ＷＸ０１８＿３の合成
ホルムアルデヒド水溶液（４５．３４μＬ、濃度：３７％）を化合物ＷＸ０１８＿２（３００ｍｇ、６０８．９５μｍｏｌ）のメタノール（３ｍＬ）とジクロロメタン（３ｍＬ）溶液に加え、３０分間攪拌し、酢酸水素化ホウ素ナトリウム（１９３．５９ｍｇ、９１３．４３μｍｏｌ）を加え、２５℃で１２時間攪拌した。反応液を濃縮乾燥し、水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過し、ろ液を濃縮して化合物ＷＸ０１８＿３（２５４ｍｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：５０７．１［Ｍ＋１］^＋
ステップ４：化合物ＷＸ０１８＿４の合成
２５℃で、化合物ＷＸ０１８＿３（２５４ｍｇ、５０１．３１μｍｏｌ）のエタノール（５ｍＬ）と水（５ｍＬ）溶液に水酸化ナトリウム（８０．２０ｍｇ、２．０１ｍｍｏｌ）を加え、５０℃で４時間攪拌した。反応液を濃縮してエタノールを除去し、３ＮのＨＣｌでｐＨ＝３に調整し、水（３０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後にろ過した。ろ液を濃縮して化合物ＷＸ０１８＿４（２１２ｍｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：４９３．０［Ｍ＋１］^＋
ステップ５：化合物ＷＸ０１８の合成
２５℃で、化合物ＷＸ０１８＿４（１１３．３３ｍｇ、４３０．３３μｍｏｌ）をＢＢ－４Ａ（２１２ｍｇ、４３０．３３μｍｏｌ）のピリジン（５ｍＬ）溶液に加え、１－（３－ジメチルアミノプロピル）－３－エチルカルボジイミド塩酸塩（８２．４９ｍｇ、４３０．３３μｍｏｌ）を加え、６０℃で１２時間攪拌した。反応液に水（２０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後にろ過し、有機相を濃縮し、粗製品を分取ＨＰＬＣ（アルカリ性）により分離精製した。ＷＸ０１８（２０ｍｇ）を得た。

ＭＳ－ＥＳＩ（ｍ／ｚ）：７３８．３［Ｍ＋１］^＋
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δｐｐｍ ８．４４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ），７．３４－７．２６（ｍ，６Ｈ），７．１７－７．１３（ｄ，Ｊ＝８．７８Ｈｚ，２Ｈ），６．８３（ｍ，２Ｈ），６．７５（ｄ，Ｊ＝８．５３Ｈｚ，１Ｈ），４．０５－３．９６（ｍ，２Ｈ），３．９１－４．８１（ｍ，２Ｈ），３．７２－３．６４（ｍ，４Ｈ），３．４２（ｔ，Ｊ＝６．６５Ｈｚ，２Ｈ），３．２１（ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．３９Ｈｚ，２Ｈ），２．１３（ｓ，２Ｈ）２．８０－２．７０（ｍ，４Ｈ），２．１３（ｓ，３Ｈ），２．０３（ｂｒ ｓ，２Ｈ），１．７７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝１１．１７Ｈｚ，２Ｈ），１．６７－１．５７（ｍ，３Ｈ），１．５２－１．４５（ｍ，５Ｈ），１．１９（ｔ，Ｊ＝７．４０Ｈｚ，５Ｈ），０．８０（ｔ，Ｊ＝７．４０Ｈｚ，３Ｈ）。

実験例１：ＣＣＲ２／ＣＣＲ５体外試験
実験の目的：
ＦＬＩＰＲ Ｃａｌｃｉｕｍ ａｓｓａｙにより細胞内カルシウムシグナルの変化を測定し、化合物のＩＣ５０値を指標とし、ＣＣＲ２及びＣＣＲ５受容体に対する化合物の阻害作用を評価した。

実験の材料：
１．細胞株：細胞を接種して３７℃、５％ＣＯ_２のインキュベーターで一晩培養した。
ＣＣＲ２／ＣＣＲ５密度：１Ｍ（２０ｋ／ｗｅｌｌ）

２．試薬：Ｆｌｕｏ－４ Ｄｉｒｅｃｔ、（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｔ＃ Ｆ１０４７１）
３．装置設備：
ポリリジンでコーティングされた３８４細胞板（Ｇｒｅｉｎｅｒ ＃７８１９４６）
３８４孔化合物板（Ｇｒｅｉｎｅｒ ＃７８１２８０）
ＦＬＩＰＲ、分子装置
ＥＣＨＯ、Ｌａｂｃｙｔｅ
４．化合物：
化合物をＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭ溶液に調製し、化合物溶液を窒素ガス箱の中に置いた。

アゴニスト参照化合物：

実験ステップ及び方法：
ＦＬＩＰＲ測定緩衝液の中でプロベネシドを調製した。７７ｍｇプロベネシドに１ｍＬのＦＬＩＰＲ測定緩衝液を加え、２５０ｍＭ溶液を調製した。毎日新しく調製した。
２Ｘ（８ｕＭ）Ｆｌｕｏ－４ Ｄｉｒｅｃｔ^ＴＭローディングバッファー（１０ｍＬあたり）
Ｆｌｕｏ－４ Ｄｉｒｅｃｔ^ＴＭ晶体（Ｆ１０４７１）を１瓶解凍し、
サンプル瓶に１０ｍＬのＦＬＩＰＲ測定緩衝液を加え、
１０ｍＬあたりのＦｌｕｏ－Ｄｉｒｅｃｔに０．２ｍＬのプロベネシドを加えた。最終測定濃度は２．５ｍＭであり、
回転し、＞５分間（遮光）放置し、
毎日新しく調製した。

実験ステップ：
ａ）アゴニスト化合物の調製：
ＭＣＰ－１をＦＬＩＰＲ測定緩衝液１：２において１０段階のグラジエントで希釈し、０．５μＭ（最終的に１００ｎＭ）から開始する。ＲＡＮＴＥＳをＦＬＩＰＲ測定緩衝液１：３において１０段階のグラジエントで希釈し、０．５ｕＭ（最終的に１００ｎＭ）から開始する。化合物のＰｌａｔｅ－ｍａｐによって、２０μＬの連続的に希釈された化合物緩衝液をＤＲＣ板の各孔に入れた。
ｂ）アンタゴニスト化合物の調製：アンタゴニスト参照化合物
標準化合物をＤＭＳＯ１：３において１１点希釈し、１ｍＭから開始する。被験化合物をＤＭＳＯ１：３において１１点希釈し、２ｍＭから開始する。Ｅｃｈｏで２５０ｎＬ化合物溶液を細胞プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ＃７８１９４６）に移した。
ｃ）インキュベーターから細胞プレートを取り出し、ピペットで軽く２０μＬの２Ｘ Ｆｌｕｏ－４ Ｄｉｒｅｃｔ無洗浄ローディングバッファーを３８４孔細胞培養プレートに分配した。最終細胞プレート中は体積４０μＬであった。
ｄ）３７℃ ５％ＣＯ_２で５０分間、室温で１０分間インキュベートした。
ｅ）インキュベーターから細胞プレートを取り出し、ＦＬＩＰＲに入れた。複合プレートとチップボックスをＦＬＩＰＲに入れた。
ｆ）ＤＲＣプレートに対して、
１） ＦＬＩＰＲＴＥＴＲＡにおいてプログラムを実行し、
２） 蛍光シグナルを読み取り、
３） １０μＬの化合物をＤＲＣプレートから細胞プレートに移し、
４） 蛍光シグナルを読み取り、
５） Ｒｅａｄ ９０から最大に許容される「最大－最小」を計算した。ＦＬＩＰＲで各細胞株のＥＣ８０値を計算し、
６） アゴニスト参照化合物の５ × ＥＣ８０濃度を準備し、
ｇ）複合プレート（１－添加）に対して、
１） ＦＬＩＰＲＴＥＴＲＡにおいてプログラムを実行し、
２） １０μＬの５ × ＥＣ８０濃度のアゴニスト参照化合物を複合プレートから細胞プレートに移し、
３） 蛍光シグナルを読み取り、
４） Ｒｅａｄ ９０から最大に許容される「最大－最小」を計算し、
ｈ）Ｐｒｉｓｍでデータを分析し、化合物のＩＣ５０値を計算した。

実験結果を表１に示す。

結論：本発明の化合物のＣＣＲ２とＣＣＲ５受容体に対する拮抗作用は有意である。

実験例２ ヒト肝臓ミクロソームチトクロームＰ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６及びＣＹＰ３Ａ４）活性の阻害作用
ＣＹＰの５種類のアイソザイムの計５つの特異性プローブ基質であるフェナセチン（Ｐｈｅｎａｃｅｔｉｎ、ＣＹＰ１Ａ２）、ジクロフェナク（Ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ、ＣＹＰ２Ｃ９）、（Ｓ）－メフェニトイン（（Ｓ）－Ｍｅｐｈｅｎｙｔｏｉｎ、ＣＹＰ２Ｃ１９）、デキストロメトルファン（Ｄｅｘｔｒｏｍｅｔｈｏｒｐｈａｎ、ＣＹＰ２Ｄ６）、ミダゾラム（Ｍｉｄａｚｏｌａｍ、ＣＹＰ３Ａ４）をそれぞれヒト肝臓ミクロソーム及び測定化合物とともにインキュベートし、還元型ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドリン酸（ＮＡＤＰＨ）を加えて反応を開始し、反応終了後にサンプルを処理し、液体クロマトグラフィータンデム質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）法で特異性基質によって生成する５種類の代謝産物であるアセトアミノフェン（Ａｃｅｔａｍｉｎｏｐｈｅｎ）、４’－ヒドロキシジクロフェナク（４’－Ｈｙｄｒｏｘｙｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ）、４’－ヒドロキシメフェニトイン（４’－Ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｐｈｅｎｙｔｏｉｎ）、デキストロファン（Ｄｅｘｔｒｏｒｐｈａｎ）、１’－ヒドロキシミダゾラム（１’－Ｈｙｄｒｏｘｙｍｉｄａｚｏｌａｍ）の濃度を定量的に測定し、対応する半阻害濃度（ＩＣ_５０）を計算した。

実験結論：ＷＸ００２、ＷＸ０１１は、ヒト肝臓ミクロソームチトクロームＰ４５０アイソザイム（ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｂ６、ＣＹＰ２Ｃ８、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６及びＣＹＰ３Ａ４）の活性を阻害するリスクがなく、その中でＣＹＰ２Ｃ１９が代謝に関与する薬物は市販薬物の２％しか占めておらず、ＣＹＰ３Ａが代謝に関与する薬物は市販薬物の５０％を占め、参照化合物及び参照物ＡはＣＹＰ３Ａ４に対して強い阻害作用を示し、臨床に反映すると、ＣＹＰ３Ａ４が抑制され、ＣＹＰ３Ａ４によって代謝される他の薬物の暴露量が上昇して潜在的な安全リスク、すなわち薬物と薬物の相互作用が生じるが、ＷＸ００１は薬物代謝の主な代謝酵素ＣＹＰ３Ａ４に対して阻害作用がなく、このようなリスクの発生を回避できた。

実験例３ 本発明の化合物の体内動物腫瘍モデルにおける抗腫瘍活性試験
実験の目的：
マウス結腸癌ＭＣ３８体内腫瘍モデルにおいて、本発明の化合物とマウス抗ＰＤ－１抗体（ＲＭＰ１－１４、Ｂｉｏｘｃｅｌｌ、ロット番号ＢＰ０１４６）の併用による腫瘍抑制効果を考察した。

実験の方法：
雌のＣ５７ＢＬ／６マウスにＭＣ３８マウス結腸癌細胞株を皮下接種し、接種後体重に応じてランダムにグループ分けし、以下の説明に従って投与処理した。

第１組（対照組）：接種当日の午後から投薬し、一日２回０．１ｍＬ／１０ｇ体重の剤量で溶媒１（５％ＤＭＳＯ／９５％（１０％ＨＰ－β－ＣＤ：β－シクロデキストリン））を胃内投薬した。接種後の１１、１４及び１８日目にそれぞれ０．１ｍＬ／１０ｇ体重の剤量で溶媒２（ＤＰＢＳ：ダルベッコリン酸緩衝液）を１回腹腔内注射投与した。

第２組：接種後の１１、１４及び１８日目にそれぞれ抗マウスＰＤ－１抗体（ＲＭＰ１－１４）を１回腹腔内注射投与した。１１日目の投薬剤量は３ｍｇ／ｋｇ体重であり、１４日及び１８日目の剤量は６ｍｇ／ｋｇ体重であった。

第３組：接種当日の午後から投薬し、一日２回１００ｍｇ／ｋｇ体重の剤量でＣＶＣ（Ｃｅｎｉｃｒｉｖｉｒｏｃ）（５％ＤＭＳＯ＋９５％（１０％ＨＰ－β－ＣＤ）に溶解され、ｐＨ＝４）を胃内投薬し、同時に接種後の１１、１４及び１８日目にそれぞれ抗マウスＰＤ－１抗体（ＲＭＰ１－１４）を１回腹腔内注射投与した。１１日目の投薬剤量は３ｍｇ／ｋｇ体重であり、１４日目及び１８日目の剤量は６ｍｇ／ｋｇ体重であった。

第４組：接種当日の午後から投薬し、一日２回１００ｍｇ／ｋｇ体重の剤量でＷＸ００１（５％ＤＭＳＯ＋９５％（１０％ＨＰ－β－ＣＤ）に溶解した。ｐＨ＝４）を胃内投薬し、同時に接種後の１１、１４及び１８日目にそれぞれ抗マウスＰＤ－１抗体（ＲＭＰ１－１４）を１回腹腔内注射した。１１日目の投薬剤量は３ｍｇ／ｋｇ体重であり、１４日目及び１８日目の剤量は６ｍｇ／ｋｇ体重であった。

実験期間にマウスの体重を週３回秤量し、腫瘍が形成された後、体重とともに腫瘍体積を週３回測定し、長さ×幅^２／２の式で腫瘍体積を計算し、次式によって腫瘍増殖率および腫瘍抑制率を計算した。腫瘍増殖率＝治療組腫瘍体積／対照組腫瘍体積×１００％；腫瘍抑制率＝（対照組腫瘍体積－治療組腫瘍体積）／対照組腫瘍体積。

グループ間の統計学分析をＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ－ｔｅｓｔを用いて行った。ｐ＜０．０５であり、有意差がある。
実験の結果：

ＷＸ００１のマウスＭＣ３８結腸癌腫瘍モデル瘤体積に対する影響を明細書の図１に示す。

実験の結論：マウスＭＣ３８腫瘍のモデルにおいて、ＷＸ００１＋ＰＤ－１併用組はＰＤ－１単独使用組と比較して、顕著な薬効増強作用を有し、３１日目の腫瘍増殖率は２５．４２％であった（溶媒組と比較してｐ＜０．０１、ＣＶＣ＋ＰＤ－１併用組と比較してｐ＜０．０１であった）。

Claims (14)

1. 式（I）で示される化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩であって、
   

   

   ここで、
   ｎは１、２、３から選択され、
   Ｒ_１は４～６員ヘテロシクロアルキル基であり、前記４～６員ヘテロシクロアルキル基は１、２又は３つのＲ_ａで置換されてもよく、
   Ｒ_２はＣ _１－３アルキル基であり、前記Ｃ _１－３アルキル基は１、２又は３つのＲ_ｂで置換されてもよく、
   構造単位
   

   

   は、
   

   

   であり、
   Ｌ_２は－ＣＲＲ－であり、
   Ｒ_ａ 及びＲ_ｂはそれぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＮ及びＣＨ_３から選択され、
   各Ｒはそれぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、ＮＨ_２、ＣＮ及びＣＨ _３から選択され、
   前記４～６員ヘテロシクロアルキル基はそれぞれ、独立して－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｓ－及びＮから選択される１、２、３又は４つのヘテロ原子又はヘテロ原子団を含み、
   「＊」硫黄原子はキラル硫黄原子であり、（Ｒ）又は（Ｓ）の単一のエナンチオマーとして、又は一種のエナンチオマーに富む形で存在する、式（I）で示される化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
2. Ｒ_２はＣＨ_２ＣＨ_３である請求項１に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
3. Ｌ_２は－ＣＨ_２－である請求項１に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
4. Ｒ_１はオキセタン基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、ヘキサヒドロピリジニル基、モルホリニル基、及び１，４－ジオキサニル基から選択され、前記オキセタン基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、ヘキサヒドロピリジニル基、モルホリニル基、及び１，４－ジオキサニル基は１、２又は３つのＲ_ａで置換されてもよい請求項１に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
5. Ｒ_１は、
   

   

   から選択され、前記
   

   

   は、１、２又は３つのＲ_ａで置換されてもよい請求項４に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
6. 構造単位
   

   

   は、
   

   

   から選択される請求項１に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
7. 構造単位
   

   

   は、
   

   

   から選択される請求項６に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
8. 

   

   

   から選択される請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩であって、
   ここで、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｘ_１、Ｌ_１、Ｌ_２は請求項１～７のいずれか一項に定義される通りである、請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
9. 下式のいずれか１つで示される化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
   

   

   

   

   
10. 

    

    

    から選択される請求項９に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
11. 

    

    

    

    から選択される請求項１０に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩。
12. 有効成分としての治療有効量の請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体若しくはその薬学的に許容可能な塩、並びに薬学的に許容可能なキャリアを含む薬物組成物。
13. ＣＣＲ２／ＣＣＲ５アンタゴニストに関連する疾患を治療する薬物の調製における請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩、又は請求項１２に記載の薬物組成物の使用。
14. 非アルコール性脂肪性肝炎に関連する疾患を治療する薬物の調製における請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物、その立体異性体又はその薬学的に許容可能な塩、又は請求項１２に記載の薬物組成物の使用。

Images