JP5959617B2

JP5959617B2 - オタミキサバンの安息香酸塩

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Publication number: JP5959617B2
Application number: JP2014501569A
Authority: JP
Inventors: ナーゲル，ノルベルト; バウムガルトナー，ブルーノ; ベルヒトルト，ハラルト; エアーズ，テイモシー
Original assignee: Sanofi SA
Current assignee: Sanofi SA
Priority date: 2011-03-29
Filing date: 2012-03-27
Publication date: 2016-08-02
Anticipated expiration: 2032-03-27
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Description

本発明は、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩、および結晶形態または少なくとも部分的に結晶形態であり、式Ｉ：

に例示する構造を示す、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩、ならびにこれらの調製のための工程、第Ｘａ因子の阻害剤の投与によって改善され得る状態に罹患している被験者を治療するためにかかる塩を使用する方法に関する。

メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−ト（ＣＡＳ番号１９３１５３−０４−７）は、オタミキサバンの国際一般名称を有し、式ＩＩ：

に例示する構造を示す。

第Ｘａ因子の阻害剤の投与によって改善され得る状態に罹患しているまたは罹患しやすい患者を治療するための薬剤の調製におけるメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの使用は、ＷＯ９７／２４１１８に開示されている。

第Ｘａ因子は凝固カスケードにおける最後から２番目の酵素である。第Ｘａ因子（ｆＸａ）は、血液凝固カスケードの内因性および外因性経路の合流点に位置する重要なセリンプロテアーゼである。第Ｘａ因子は、プロトロンビナーゼ複合体によるプロトロンビンのトロンビンへの変換を触媒する。血餅形成への増強作用と相まって、トロンビン生成におけるこの特異な役割により、第Ｘａ因子は治療的介入のための魅力的な標的となっている。

遊離型第Ｘａ因子およびプロトロンビナーゼ複合体（第Ｘａ因子、第Ｖａ因子、カルシウムおよびリン脂質）に組み込まれた第Ｘａ因子の両方がオタミキサバンによって阻害される。第Ｘａ因子の阻害は、阻害剤と酵素の間での直接の複合体形成によって得られ、従って血漿補因子、アンチトロンビンＩＩＩとは無関係である。前記化合物を、第Ｘａ因子が誘導するプロトロンビンからのトロンビンの形成を防止する所望作用を達成するように、持続的静脈内注入、ボーラス静脈内投与または任意の他の非経口経路によって投与することにより、有効な第Ｘａ因子の阻害が達成される。インビボ実験は、オタミキサバンが血栓症のげっ歯動物、イヌおよびブタモデルにおいて極めて有効であることを明らかにしている。加えて、最近の臨床所見は、オタミキサバンがヒトにおいても有効であり、安全で、良好に耐容され、従って急性冠動脈症候群の治療のための大きな潜在的可能性を有することを示している（Ｋ．Ｒ．ＧｕｅｒｔｉｎａｎｄＹｏｎｇ−ＭｉＣｈｏｉ；２００７；ＣｕｒｒｅｎｔＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．１４，Ｎｏ．２３；ｐ．２４７１−２４８１）。用量範囲臨床試験における臨床所見は、オタミキサバンがプロトロンビンフラグメント１＋２を最高用量レジメンの未分画ヘパリンよりも有意に低減したことを示す（Ｃｏｈｅｎｅｔａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１１５，Ｎｏ．２０，Ｍａｙ２００７，ｐａｇｅｓ２６４２−２６５１）が、前記臨床所見は年齢または腎障害を比較したデータを示していない。さらなる臨床試験は、オタミキサバンが、通常の併用薬を服用している安定な冠動脈疾患の患者において、このうちの一部は軽度の腎障害を有するが、用量依存的で迅速な直接の第Ｘａ因子阻害を誘導することを明らかにした（Ｈｉｎｄｅｒｅｔａｌ．，ＣｌｉｎｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｖｏｌ．８０，Ｎｏ．６，２００６，ｐａｇｅｓ６９１−７０２）。

メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−ト塩酸塩の結晶形態である２−ブタノールヘミ溶媒和物がＵＳ７，０３４，１６０に開示されている。メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−ト塩酸塩の結晶形態である２−ブタノールヘミ溶媒和物は、２−ブタノールを固体医薬組成物における使用には好ましくない溶媒和物として含み、吸湿性化合物である。

吸湿性は、物質が吸収または吸着のいずれかを通して周囲環境から水分子を誘引し、保持する能力であり、吸収または吸着材料は、水分子がこの工程で材料分子の間に「懸濁」すると共に物理的に「変化」していき、材料の体積、粘度の幾分かの増大または他の物理的特徴の変化を生じる。従って、吸湿性化合物は一般に固体医薬組成物における使用には極めて不向きである。

国際公開第９７／２４１１８号米国特許第７，０３４，１６０号明細書

Ｋ．Ｒ．ＧｕｅｒｔｉｎａｎｄＹｏｎｇ−ＭｉＣｈｏｉ；２００７；ＣｕｒｒｅｎｔＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｖｏｌ．１４，Ｎｏ．２３；ｐ．２４７１−２４８１Ｃｏｈｅｎｅｔａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．１１５，Ｎｏ．２０，Ｍａｙ２００７，ｐａｇｅｓ２６４２−２６５１Ｈｉｎｄｅｒｅｔａｌ．，ＣｌｉｎｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙａｎｄＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｖｏｌ．８０，Ｎｏ．６，２００６，ｐａｇｅｓ６９１−７０２

周囲環境からの水分子の吸収または吸着が少ないメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの塩を見出すことが本発明の目的である。メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩は、周囲環境からの水分子の吸収または吸着が良好に低減されていることが認められた。

１つの実施形態では、本発明は、式Ｉ：

に例示する構造を示す、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩に関する。

別の実施形態では、本発明は、結晶形態または少なくとも部分的に結晶形態である、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩に関する。

１つの実施形態では、本発明は、式Ｉに例示する構造を示す、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩に関する。

多形性は、単一化合物が２以上の形態または結晶構造で存在する能力である。異なる多形は、同じ分子式を共有する別個の固体であり、さらに各々の多形は別個の物理的性質を有し得る。単一化合物が様々な多形形態を生じさせることがあり、これらの各々の形態は異なる別個の物理的性質、例えば異なる溶解度プロフィール、異なる熱力学的安定性、異なる結晶化挙動、異なるろ過性、異なる融点温度および／または異なるＸ線回折ピークなどを有し得る。異なる多形形態の物理的性質の相違は、固体中の隣接する分子の異なる配向および分子間相互作用から生じる。化合物の多形形態は、Ｘ線回折によっておよび赤外分光法またはラマン分光法などの他の方法によって識別することができる。

「非晶質」とは、室温でＣｕＫα_１線を用いて透過法で測定したＸ線粉末回折パターンにおいて、これらの回折角順序の特定角度２θによって互いから分離することができる２θ角度で特徴的な反射を示さない固体を意味する。

別の実施形態では、本発明は、結晶塩が、室温でＣｕＫα_１線を用いて透過法で測定したＸ線粉末回折パターンにおいて１９．８、１８．８および１７．９°２θ、各々±０．２°２θで特徴的な反射を示す、式Ｉの結晶安息香酸塩に関する。

別の実施形態では、本発明は、結晶塩が、室温でＣｕＫα_１線を用いて透過法で測定したＸ線粉末回折パターンにおいて２２．０、１９．８、１８．８、１７．９、１５．７および１３．６°２θ、各々±０．２°２θで特徴的な反射を示す、式Ｉの結晶安息香酸塩に関する。

特徴的な反射の選択は、指定角度２θにおける反射の数によって決定した。

別の実施形態では、式Ｉの結晶安息香酸塩はまた、透過モードでＣｕＫα_１線を用いて得られた、実質的に図１に示すものによるＸ線粉末回折パターンを特徴としてもよく、ここで、図に示す反射の強度ならびに上記で指定した反射の強度は必須条件ではなく、変化し得る。

式Ｉの結晶安息香酸塩はまた、この粉末パターンを指標とすることによって決定された結晶格子パラメータによっても特徴づけられ得る。式Ｉの結晶塩は、ａ＝３３．５２４Å、ｂ＝７．９２８Å、ｃ＝９．８９６Å、体積＝５９４７Å^３の斜方晶系に結晶化する。

さらに、式Ｉの結晶安息香酸塩はまた、２５℃で測定した動的蒸気吸着（ＤＶＳ）の水蒸気吸着・脱着等温線によっても特徴づけられ得る。吸着サイクルを開始する前に、式Ｉの結晶塩の試料を乾燥窒素ガスで処理する。実施例に示すように、吸着・脱着等温線はほとんど同じであり、８０％室内湿度（ＲＨ）で１．１％および９５％ＲＨで２．０％の中等度の水分取り込みが生じる。

室温でＣｕＫα_１線を用いて透過モードで測定した、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの結晶安息香酸塩のＸ線粉末回折パターン（ｘ軸：回折角２θ［°］；ｙ軸：相対強度）。

メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩は、安息香酸または安息香酸の塩を添加した水溶液もしくはアルコール水溶液または他の適切な溶媒中にメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トを溶解することによっても調製し得る。撹拌しながら、混合物を６５℃に加熱して透明な溶液を生成し、この後一晩冷却して沈殿物を得る。得られた沈殿物をろ過し、水で洗浄して、減圧下で乾燥することができる。

一般に、（以下の式Ｉの安息香酸塩の中の）本発明のメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの結晶安息香酸塩は、式Ｉの化合物の溶液または式Ｉの化合物の懸濁液または式Ｉの化合物の固体から出発して、式Ｉの化合物を結晶化または再結晶化することによって得られる。式Ｉの化合物の溶液または式Ｉの化合物の懸濁液は、式Ｉの化合物の化学合成の最後に得ていてもよく、またはあらかじめ合成した式Ｉの粗化合物を溶解または懸濁することによって得て-いてもよい。「式Ｉの粗化合物」という用語は、式Ｉの化合物の任意の形態、例えば化学合成から直接得られた物質、式Ｉの化合物の別個の結晶形態または非晶質物質を包含する。

より具体的には、本発明の式Ｉの結晶塩は、（ａ）例えば式Ｉの粗化合物をアルコール、例えばメタノール、エタノール、２−プロパノールなどの適切な溶媒に溶解するまたは懸濁することにより、式Ｉの化合物の溶液または懸濁液を提供する段階；ここで、式Ｉの化合物の溶液は一般に透明な溶液であり、場合によりろ過されていてもよい、（ｂ）かき混ぜるなどの撹拌を行いながらまたは撹拌を行わずに、溶液または懸濁液を維持し、加熱し、冷却しおよび／または濃縮して、および／または１以上のさらなる溶媒を添加して、所望の別個の結晶形態もしくは溶媒和物を形成するまたは所望の別個の結晶形態もしくは溶媒和物の形成を可能にする段階、ならびに（ｃ）式Ｉの別個の結晶塩を単離する段階によって得ることができる。

式Ｉの化合物の結晶形態および溶媒和物を調製する方法は、従来の装置を用いておよび標準的な手順に従って実施することができる。例えば、段階（ｂ）における溶液または懸濁液の濃縮は、大気圧または減圧下で溶媒を部分的にまたは完全に蒸留除去することによって実施し得る。段階（ｃ）での結晶形態または溶媒和物の単離は、ろ過または真空ろ過または遠心分離などの任意の従来の技術によって実施し得る。単離はまた、例えば高温および／または減圧を適用することにより、例えば中等度の減圧下にほぼ室温で、即ち約１８℃から約６５℃までの温度、例えば約２０℃または約６５℃で乾燥することも含み得る。

好ましい実施形態では、結晶化を促進するために段階（ａ）または段階（ｂ）で溶液または懸濁液に種結晶を入れてもよい。種結晶添加は、好ましくは既に調製された少量の式Ｉの結晶塩を用いて行う。

（以下の式Ｉの安息香酸塩の中の）本発明のメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩は、第Ｘａ因子を阻害するのに有用であり得る。従って、本発明は、第Ｘａ因子の産生を阻害することによって調節され得る病的状態の治療または予防のための方法を提供する。

本発明の式Ｉの安息香酸塩で治療され得る病的状態の例には、例えば、急性心筋梗塞（ＡＭＩ）、非ＳＴ上昇型心筋梗塞、不安定狭心症、血栓塞栓症、血栓溶解療法および経皮的冠動脈形成術（ＰＴＣＡ）に関連する急性血管閉塞症、一過性脳虚血発作、脳卒中、間欠性跛行および再狭窄が含まれる。

本明細書で述べる式Ｉの安息香酸塩は、従って、中でも特に、トロンビンではなく凝固カスケードにおける最後から２番目の酵素、第Ｘａ因子を阻害するこれらの一般能力によって血液凝固を阻害するために有用であり得る。本発明の範囲内の式Ｉの安息香酸塩は、インビボ試験およびインビトロ試験を含む、文献に記載されている試験によれば、著明な薬理学的活性を示すことができ、インビトロ試験はヒトおよび他の哺乳動物における薬理学的活性に相関すると考えられている。例えば、遊離型第Ｘａ因子およびプロトロンビナーゼ複合体（第Ｘａ因子、第Ｖａ因子、カルシウムおよびリン脂質）に組み込まれた第Ｘａ因子の両方が阻害され得る。第Ｘａ因子の阻害は、阻害剤と酵素の間での直接の複合体形成によって得られると考えられ、従って血漿補因子、アンチトロンビンＩＩＩとは無関係である。本発明による式Ｉの安息香酸塩を、第Ｘａ因子が誘導するプロトロンビンからのトロンビンの形成を防止する所望作用を達成し得るように持続的静脈内注入、ボーラス静脈内投与または任意の他の適切な経路によって投与することにより、有効な第Ｘａ因子の阻害が達成され得る。

抗凝固療法における使用に加えて、第Ｘａ因子阻害剤は、トロンビンの生成が病理学的役割を果たし得る他の疾患の治療または予防においても有用であり得る。例えば、トロンビンは、細胞表面のトロンビン受容体の特異的切断および活性化を介して多くの異なる細胞型を調節する能力により、関節炎、癌、アテローム性動脈硬化症およびアルツハイマー病などの慢性および変性疾患の罹患率および死亡率に寄与するとの説が提案されてきた。第Ｘａ因子の阻害はトロンビンの生成を有効にブロックすると考えられ、従って様々な細胞型へのトロンビンの病理学的作用を中和し得る。

本発明の方法は、好ましくは、本発明の式Ｉの安息香酸塩の医薬的有効量を、好ましくは１以上の医薬として許容される担体または賦形剤と組み合わせて、患者に投与することを含む。医薬組成物と担体および／または賦形剤の相対的比率は、例えば材料の溶解度および化学的性質、選択される投与経路ならびに標準的な製薬慣例によって決定され得る。

予防または治療のために最も適切である式Ｉの安息香酸塩の投薬量は、投与の形態、選択される化合物の特定の新規形態および治療中の特定の患者の生理学的特徴によって異なり得る。概して、最初は少量の投薬量を使用し、必要に応じて、状況下での所望効果に達するまで少量ずつ漸増させ得る。

一般的に言えば、成人では、適切な用量は、約０．０１から約１００ｍｇ／ｋｇ体重の範囲、ならびにこれらの中の範囲および特定用量のすべての組合せおよび部分的組合せにわたり得る。好ましい用量は、吸入による場合は１日当たり約０．０１から約１０ｍｇ／ｋｇ体重、経口投与による場合は１日当たり約０．０１から約１００ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．１から７０、より好ましくは０．５から１０ｍｇ／ｋｇ体重、および静脈内投与では１日当たり約０．０１から約５０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは０．０１から１０ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。各々特定の場合に、用量は、治療される被験者に特有の因子、例えば年齢、体重、全般的な健康状態および医薬品の効果に影響を及ぼし得る他の特徴などに応じて決定され得る。

本発明による式Ｉの安息香酸塩は、所望治療効果を得るために必要な頻度で投与し得る。一部の患者は、より高用量または低用量に速やかに応答し、はるかに低い維持用量で十分であることが認められ得る。別の患者については、各々の特定患者の生理学的必要条件に応じて、１日当たり約１から約４回分用量の割合で長期的な治療を受ける必要があり得る。一般に、活性な生成物を１日当たり約１から約４回経口的に投与し得る。また別の患者については、１日当たり１回または２回分以下の用量を処方する必要があり得ることは言うまでもない。

本発明の式Ｉの安息香酸塩は、経口剤形で、例えば錠剤、カプセル（これらの各々が徐放製剤または持続放出製剤を含む。）、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル、チンキ、懸濁液、シロップおよび乳剤として投与し得る。投与に適する固体剤形（医薬組成物）は、一般に投与単位当たり約１ｍｇから約１０００ｍｇの式Ｉの安息香酸塩を含有し得る。

錠剤またはカプセルなどの固体形態での経口投与のために、式Ｉの安息香酸塩を、ラクトース、デンプン、スクロース、グルコース、メチルセルロース、ステアリン酸マグネシウム、リン酸ジカルシウム、硫酸カルシウム、マンニトール、ソルビトール等のような、非毒性の医薬として許容される不活性担体と組み合わせることができる。

好ましくは、固体剤形は、有効成分に加えて、本明細書では「賦形剤」と称する多くの付加的な成分を含み得る。これらの賦形剤には、中でも特に、希釈剤、結合剤、潤滑剤、流動促進剤および崩壊剤が含まれる。着色剤も組み込まれ得る。本明細書で使用される「希釈剤」は、製剤に体積を与えて錠剤を圧縮のために実際的な大きさにし得る作用物質を指す。希釈剤の例はラクトースおよびセルロースである。本明細書で使用される「結合剤」は、錠剤が圧縮後も無傷のままであることを確実にするために粉末材料に凝集性を与えるため、ならびに粉末の自由流動性を改善するために使用され得る作用物質を指す。典型的な結合剤の例には、ラクトース、デンプンおよび様々な糖類が含まれる。本明細書で使用される「潤滑剤」は、圧縮装置への錠剤の付着を防ぐことおよび圧縮前またはカプセル化の前の顆粒の流動を改善することを含む幾つかの機能を有する。潤滑剤は、ほとんどの場合疎水性材料である。しかしながら、潤滑剤の過度の使用は、薬剤物質の崩壊度が低いおよび／または溶解が遅延した製剤を生じさせ得るので、望ましくない。本明細書で使用される「流動促進剤」は、顆粒材料の流動特性を改善し得る物質を指す。流動促進剤の例には、滑石およびコロイド状二酸化ケイ素が含まれる。本明細書で使用される「崩壊剤」は、投与後の固体剤形の分解または崩壊を促進するために製剤に添加される物質または物質の混合物を指す。崩壊剤としての機能を果たし得る材料には、デンプン、粘土、セルロース、アルギン、ガムおよび架橋ポリマーが含まれる。「超崩壊剤」と称される崩壊剤の群は、一般に固体剤形において低レベルで、典型的には投与単位の総重量に対して１重量％から１０重量％で使用される。クロスカルメロース、クロスポビドンおよびデンプングリコール酸ナトリウムは、それぞれ架橋セルロース、架橋ポリマーおよび架橋デンプンの例である。デンプングリコール酸ナトリウムは３０秒未満で７倍から１２倍に膨張し、これを含有する顆粒剤を有効に崩壊させる。

本開示の教示を参照して、当業者に明らかであるように、式Ｉの結晶安息香酸塩は、溶解した場合、結晶構造を失い、従って式Ｉの安息香酸塩の溶液であるとみなされる。しかしながら、本発明のすべての形態は、式Ｉの結晶安息香酸塩が、例えば溶解または懸濁され得る液体製剤の調製のために使用し得る。加えて、式Ｉの結晶安息香酸塩は固体製剤に組み込み得る。

以下の非限定的実施例は、本発明の式Ｉの安息香酸塩を調製し、使用するための発明人の好ましい方法を例示する。

［実施例１］
化合物（ＩＩＩ）の調製

ＴｓＯＨは、式ＣＨ_３Ｃ_６Ｈ_４ＳＯ_３を有するｐ−トルエンスルホン酸である。ＴｓＯＨは一水和物を指す。反応器に化合物（ＩＩａ）（１００．０ｇ）および無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（３２０ｇ）を充填した。生じた懸濁液を−２０±３℃に冷却し、リチウムヘキサメチルジシラジド（ＬｉＨＭＤＳ）（４７５．６ｇ、ＴＨＦ中１．３Ｍ溶液）を５５分間かけて添加して、−２０±３℃で２０分間撹拌した。次にＴＨＦ中のα−ブロモ−ｍ−トルニトリル（ＴＨＦ１８１ｇ中６５．１ｇ）を、温度を−２０±３℃に維持しながら４０分間かけて反応器に充填し、さらに３０分間撹拌した。安息香酸（１２６．６ｇ）を固体として反応器に充填した。次に水（１０００ｇ）を添加し、混合物を６５±３℃のジャケット温度および２００−２３３ｍｂａｒの真空度で蒸留した。５７℃の一定なポット温度および４５℃の一定なヘッド温度に蒸留した後、蒸留を停止した。トルエン（４３２ｇ）を熱溶液に添加し、１０±２℃まで冷却しながら撹拌した。次に生じた懸濁液をろ過し、ろ過ケーキを水（２５０ｇ）およびトルエン（４３２ｇ）で洗浄した。化合物（ＩＩＩ）を窒素流下に４５−５０℃、約３５０ｍｂａｒ真空度で、一定重量になるまで２４時間乾燥した。単離した固体の重量は７６．０ｇであった（収率６２．０％）。

［実施例２］
化合物（Ｖ）の調製

化合物（ＩＩＩ）をジクロロメタンと炭酸ナトリウム水溶液との間で分配した。有機相（（ＩＩＩ）の遊離塩基を含有する。）をさらなる炭酸ナトリウム水溶液で洗浄し、減圧下で蒸留して、溶媒をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）と交換した。この溶液を（ＩＩＩ）の重量／重量含量に関して検定した。ＤＭＦ中の（ＩＶ）（（ＩＩＩ）に対して１．０当量）の懸濁液に、２当量の４−メチルモルホリンおよび１．１当量のＯ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）を添加した。この混合物を、エステルの活性化が完了するまで周囲温度で撹拌した（約９０分間）。化合物（ＩＩＩ）（１当量）のＤＭＦ溶液を添加し、生じた溶液を一晩撹拌して、この後、ＨＰＬＣは反応が完了したことを示した。水を７５℃で添加し、混合物を冷却して生成物を結晶化させた。混合物を５℃に冷却し、ろ過して、ろ過ケーキを水で洗浄した。生成物を減圧下に７０℃で乾燥した。

［実施例３］
化合物（ＶＩ）の調製

十分に撹拌された反応器中で、ジクロロメタン４５０ｍＬ中の化合物（Ｖ）４５ｇを水４５０ｇ中のモノペルオキシフタル酸マグネシウム６１ｇ（利用可能な酸素に基づき６６．４％、１．５当量）と、反応が完了するまで少なくとも５時間反応させた。相を分離し、有機相を等容量の水、５％重炭酸ナトリウム水溶液および水で連続的に洗浄した。生じた溶液を約４０重量％溶液に濃縮し、メチルイソブチルケトン（ＭＩＢＫ）１８０ｇで希釈した。さらに蒸留して残留ジクロロメタンを除去し、適切な結晶を用いて種入れして、冷却し、生成物を結晶固体として得た。結晶をろ過し、ＭＩＢＫ３０ｇで洗浄して、減圧下に５０℃で乾燥し、化合物（ＶＩ）４１．８ｇを得た（収率８９．３％）。

［実施例４］
化合物（ＶＩＩ）の調製

２００ｍＬのジャケット付き反応フラスコに化合物（ＶＩ）（５０．０ｇ、１１６ｍｍｏｌ）およびメタノール（５０ｍＬ）を充填した。この混合物を−５℃に冷却し、部分的真空（約１００ｔｏｒｒ）を確立した後、密封した。反応温度を０℃未満に維持しながら無水ＨＣｌ（５２．２ｇ、１．４３ｍｏｌ）を添加した。反応物を閉鎖条件下に０±１℃で撹拌した。１６時間後、反応が完了した（ＨＰＬＣにより２Ａ％（ＶＩ）未満）。中間体生成物溶液に、温度を５℃未満に維持しながら無水メタノール（１００ｍＬ）を添加した。０℃未満の温度を保持しながら溶液をＮＨ_３（２７．７ｇ、１．６２ｍｏｌ）で処理した。混合物を室温に温める前に、蒸留水に溶解したアリコートのｐＨ検査を行った（８−１０のｐＨはアンモニアの十分な変化を示す。）。反応物を２０℃で一晩撹拌し、この時点で反応が完了した。

［実施例５］
溶媒添加による化合物（ＶＩＩＩ）の調製

実施例４からの塩化アンモニウムスラリーに２−ブタノール（８４０ｍＬ）を添加し、生じた混合物を７０℃に温めながら１時間撹拌した。塩化アンモニウムを熱ろ過によって除去し、ケーキを２−ブタノール１６０ｍＬ中のメタノール２０ｍＬの溶液で洗浄した。ろ液を合わせ、種結晶０．５ｇを添加した。混合物を周囲温度で一晩撹拌した。スラリーを−１５℃に冷却し、完全な結晶化を確実にするため２時間保持した。固体をろ過し、反応器およびケーキを２−ブタノール１６５ｍＬで洗浄した。固体を減圧下に４５℃から５０℃で窒素ブリードを行って乾燥し、化合物（ＶＩＩＩ）４４．３ｇ（７３．２％）をオフホワイト色結晶固体として得た。

［実施例６］
安息香酸塩の調製
実施例５で調製した化合物（一塩酸塩−ヘミ２−ブタノール溶媒和物）４ｇを熱水８０ｍｌに溶解し、固体安息香酸ナトリウム１．１１ｇを添加することによって材料を調製した。撹拌しながら、混合物を一晩冷却した。得られた沈殿物をろ過し、水で洗浄して、減圧下に４０℃で６時間乾燥した。収率は７９．４％であった。

ＮＭＲデータは、得られた塩が安息香酸とメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの１：１比率であり、以下の図式に例示する構造を示すことを確認した：

ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを意味する。

ＮＭＲ化学シフトの完全な帰属については表１参照。

または、水１００ｍＬ中の実施例４で調製した化合物５．０ｇの溶液に安息香酸ナトリウム２．２ｇを添加した。混合物を、均一になるまで蒸気浴で加熱した。炭（約２ｇ）を添加し、この混合物をセライト（登録商標）でろ過して、水２０ｍＬで洗浄した。直ちに結晶化が始まった。２時間冷却した後、固体を収集し、水で洗浄した。固体を５０℃で真空オーブンにおいて３日間乾燥した後、３．９ｇ（６７％）を収集した。^１ＨＮＭＲは、塩を安息香酸とメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの１：１比率と確認した。

［実施例７］
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
ＭｅｔｔｌｅｒＤＳＣ８２２ｅ（モジュールＤＳＣ８２２ｅ／７００／１０９／４１４９３５／００２５）を用いてＤＳＣ測定を実施した。密閉用の蓋とピンホールを備えた４０μＬアルミニウムるつぼを使用した。すべての測定は、５０ｍＬ／分の窒素ガス流中、１０°／分の加熱速度で実施した。測定したデータはＳＴＡＲｅＶ８．１０ソフトウェアによって評価した。

使用した結晶形態は実施例６で調製したものであり、２５℃から３００℃までの加熱の間に２１６．０１℃で初期ピークおよび２２１．１５℃でピークを示した。

［実施例８］
結晶形態の調製
エタノール２ｍＬ中の実施例６で調製した式Ｉの安息香酸塩０．１９０ｇの溶液を６５℃から０℃まで急速に冷却することによって結晶形態を調製した。沈殿が生じなかったので、試料を０℃で一晩放置した。沈殿物を真空ろ過によって単離し、この後減圧下に２５℃で乾燥した。

または、エタノール５．０ｍＬ中の実施例６で調製した式Ｉの安息香酸塩０．２００ｇの撹拌溶液を、１８時間で６５℃から１０℃まで制御冷却することによって結晶形態を調製した。沈殿物を真空ろ過によって単離した。

または、２−プロパノール１５ｍＬおよび水１．０ｍＬ中の実施例６で調製した式Ｉの安息香酸塩０．２０１ｇの撹拌溶液を、１８時間で６５℃から１０℃まで制御冷却することによって結晶形態を調製した。沈殿が生じなかったので、溶媒を６５℃で蒸発させた。

または、実施例６で調製した式Ｉの安息香酸塩０．２１７ｇを約６５℃でエタノール５．０ｍＬ中に溶解することによって結晶形態を調製した。次に溶媒を同じ温度で一晩撹拌溶液から蒸発させた。固体残留物を減圧下に室温で乾燥した。

または、実施例６で調製した式Ｉの安息香酸塩０．１９７ｇを約６５℃で２−プロパノール１０ｍＬおよび水１．０ｍＬに溶解することによって結晶形態を調製した。次に溶媒を同じ温度で一晩、撹拌溶液から蒸発させた。固体残留物を減圧下に室温で乾燥した。

［実施例９］
動的蒸気吸着（ＤＶＳ）
水分吸着／脱着等温線をＳｕｒｆａｃｅＭｅａｓｕｒｅｍｅｎｔＳｙｓｔｅｍｓからのＤＶＳ−１０００で記録した。２サイクルを２５℃で実施し、試料を最初に乾燥窒素ガスで処理して、次に相対湿度を０％から９５％まで段階的に上昇させ、この後再び０％に低下させて、試料の重量を測定した。両サイクルについての典型的な総測定時間は約２０から３０時間であった。

実施例８で調製したメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩についての測定データを以下の表２に示す。

「ＲＨ」は相対湿度を意味する。空気−水混合物の相対湿度は、指示温度での飽和水蒸気圧に対する混合物中の水蒸気の部分圧の比率と定義される。

ＤＶＳは、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩に関して８０％ＲＨで１．１％および９５％ＲＨで２．０％の中等度の水分取り込みを示す。

ＤＶＳ比較実験：
実施例５で調製したメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−ト一塩酸塩−ヘミ２−ブタノール溶媒和物。

実施例５で調製したメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−ト一塩酸塩−ヘミ２−ブタノール溶媒和物についての測定データを以下の表３に示す。

ＤＶＳは、メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−ト一塩酸塩−ヘミ２−ブタノール溶媒和物に関して６０％ＲＨで３．６９％、８０％ＲＨで１７．７９％、９０％ＲＨで２６．６６％および９５％ＲＨで３４．１３％の強い水分取り込みを示す。

［実施例１０］
示差走査熱量測定（ＤＳＣ）
ＭｅｔｔｌｅｒＤＳＣ８２２ｅ（モジュールＤＳＣ８２２ｅ／７００／１０９／４１４９３５／００２５）を用いてＤＳＣ測定を実施した。密閉用の蓋とピンホールを備えた４０μＬアルミニウムるつぼを使用した。すべての測定は、５０ｍＬ／分の窒素ガス流中、１０°／分の加熱速度で実施した。測定したデータはＳＴＡＲｅＶ８．１０ソフトウェアによって評価した。

使用した結晶形態は実施例８で調製したものであり、２５℃から３００℃までの加熱の間に２２５．５７℃で初期ピークおよび２２９．０２℃でピークを示した。
［実施例１１］
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）
Ｘ線粉末回折を、ＣｕＫα_１線（波長は１．５４０６０オングストロームである。）および線形位置敏感型検出器を用いてＳｔｏｅＳｔａｄｉ−Ｐ透過回折計で実施した。特に明記しない限り、Ｘ線粉末回折は室温で実施した。試料は平らな標本で検討した。測定したデータを、ＷｉｎＸＰＯＷＶ２．１２ソフトウェアを用いて評価し、プロットした。

実施例８で調製したメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩の観察されたＸ線粉末回折パターンを図１に表示する（図１）。図に示されているＸ線粉末回折パターンはバックグラウンドを差し引いている。

°（度）で表した２θ（２シータ）角度は特徴的な反射の数として特定される。°で表した２θ角度は図１において以下の値を有しており、相対強度を括弧内に示す：

Claims

メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩。
結晶形態または少なくとも部分的に結晶形態である、請求項１に記載の安息香酸塩。
前記結晶塩が、室温でＣｕＫα_１線を用いて透過法で測定したＸ線粉末回折パターンにおいて１９．８、１８．８および１７．９°２θ、各々±０．２°２θで特徴的な反射を示す、請求項２に記載の安息香酸塩。
前記結晶塩が、室温でＣｕＫα_１線を用いて透過法で測定したＸ線粉末回折パターンにおいて２２．０、１９．８、１８．８、１７．９、１５．７および１３．６°２θ、各々±０．２°２θで特徴的な反射を示す、請求項２に記載の安息香酸塩。
図１に示すものと実質的に一致するＸ線粉末回折パターンを特徴とする、請求項２に記載の安息香酸塩。
メチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トを水溶液またはアルコール水溶液中に溶解することおよび安息香酸または安息香酸ナトリウムを添加することを含む、請求項１に記載の安息香酸塩の調製方法。
薬物として使用するための、請求項１から５のいずれか一項に記載の安息香酸塩。
請求項１から５のいずれか一項に記載のメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩および医薬として許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物。
急性心筋梗塞、非ＳＴ上昇型心筋梗塞、不安定狭心症、血栓塞栓症、血栓溶解療法および経皮的冠動脈形成術に関連する急性血管閉塞症、一過性脳虚血発作、脳卒中、間欠性跛行および再狭窄の治療における使用のための、請求項１から５のいずれか一項に記載のメチル（２Ｒ，３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエ−トの安息香酸塩。