JP3017687B2 - ビフィズス菌及びその培養方法 - Google Patents
ビフィズス菌及びその培養方法Info
- Publication number
- JP3017687B2 JP3017687B2 JP8268593A JP26859396A JP3017687B2 JP 3017687 B2 JP3017687 B2 JP 3017687B2 JP 8268593 A JP8268593 A JP 8268593A JP 26859396 A JP26859396 A JP 26859396A JP 3017687 B2 JP3017687 B2 JP 3017687B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- strain
- atcc
- milk
- longum
- bifidobacterium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 title claims description 22
- 238000012136 culture method Methods 0.000 title description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 15
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 9
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 9
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 7
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 6
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 6
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 claims description 5
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 claims description 5
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000019985 fermented beverage Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000015197 apple juice Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000012970 cakes Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000015243 ice cream Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 claims 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 19
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 14
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 14
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 14
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 10
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 9
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 9
- 210000004211 gastric acid Anatomy 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 4
- 230000015784 hyperosmotic salinity response Effects 0.000 description 4
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 4
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 4
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 102220547770 Inducible T-cell costimulator_A23L_mutation Human genes 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 3
- XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N (R)-amygdalin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H](C#N)C=2C=CC=CC=2)O1 XUCIJNAGGSZNQT-JHSLDZJXSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N Indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940089837 amygdalin Drugs 0.000 description 2
- YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N amygdalin Natural products OCC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC(C#N)c3ccccc3 YZLOSXFCSIDECK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 2
- 235000020299 breve Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N eucalyptosin A Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(OC(C#N)C=2C=CC=CC=2)OC(CO)C(O)C1O YGHHWSRCTPQFFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004051 gastric juice Anatomy 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 2
- 102200004779 rs2232775 Human genes 0.000 description 2
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 2
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IJROUPFSQHMOBK-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-3-nitro-1-nitrosoguanidine 2-nitrosoguanidine Chemical compound NC(=N)NN=O.O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O IJROUPFSQHMOBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC=CC=C1C(N=[N+]1C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 PKDBCJSWQUOKDO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000286268 Bifidobacterium bifidum ATCC 29521 = JCM 1255 = DSM 20456 Species 0.000 description 1
- 241000131482 Bifidobacterium sp. Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-QWWZWVQMSA-N D-Threitol Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N D-glucopyranuronic acid Chemical compound OC1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-AQKNRBDQSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001058146 Erium Species 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010007979 Glycocholic Acid Proteins 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 1
- 235000014663 Kluyveromyces fragilis Nutrition 0.000 description 1
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 1
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 1
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- SBKRTALNRRAOJP-BWSIXKJUSA-N N-[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-4-amino-1-oxo-1-[[(3S,6S,9S,12S,15R,18R,21S)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-15-benzyl-3-[(1R)-1-hydroxyethyl]-12-(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxobutan-2-yl]-6-methylheptanamide (6S)-N-[(2S)-4-amino-1-[[(2S,3R)-1-[[(2S)-4-amino-1-oxo-1-[[(3S,6S,9S,12S,15R,18R,21S)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-15-benzyl-3-[(1R)-1-hydroxyethyl]-12-(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-hydroxy-1-oxobutan-2-yl]amino]-1-oxobutan-2-yl]-6-methyloctanamide sulfuric acid Polymers OS(O)(=O)=O.CC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](Cc2ccccc2)NC(=O)[C@@H](CCN)NC1=O)[C@@H](C)O.CC[C@H](C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](Cc2ccccc2)NC(=O)[C@@H](CCN)NC1=O)[C@@H](C)O SBKRTALNRRAOJP-BWSIXKJUSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010093965 Polymyxin B Proteins 0.000 description 1
- 230000010757 Reduction Activity Effects 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 229930003270 Vitamin B Natural products 0.000 description 1
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N aldehydo-D-xylose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 229940097043 glucuronic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960005150 glycerol Drugs 0.000 description 1
- RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N glycocholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 RFDAIACWWDREDC-FRVQLJSFSA-N 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 125000001475 halogen functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N indole Natural products CC1=CC=CC2=C1C=CN2 PZOUSPYUWWUPPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N indolenine Natural products C1=CC=C2CC=NC2=C1 RKJUIXBNRJVNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N iodoacetic acid Chemical compound OC(=O)CI JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OOYGSFOGFJDDHP-KMCOLRRFSA-N kanamycin A sulfate Chemical compound OS(O)(=O)=O.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N OOYGSFOGFJDDHP-KMCOLRRFSA-N 0.000 description 1
- 229960002064 kanamycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 1
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 229940099596 manganese sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011017 operating method Methods 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 229960003548 polymyxin b sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 102220201851 rs143406017 Human genes 0.000 description 1
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M sodium propionate Chemical compound [Na+].CCC([O-])=O JXKPEJDQGNYQSM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004324 sodium propionate Substances 0.000 description 1
- 235000010334 sodium propionate Nutrition 0.000 description 1
- 229960003212 sodium propionate Drugs 0.000 description 1
- AGDSCTQQXMDDCV-UHFFFAOYSA-M sodium;2-iodoacetate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)CI AGDSCTQQXMDDCV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C11/00—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions
- A23C11/02—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins
- A23C11/10—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins
- A23C11/103—Milk substitutes, e.g. coffee whitener compositions containing at least one non-milk component as source of fats or proteins containing or not lactose but no other milk components as source of fats, carbohydrates or proteins containing only proteins from pulses, oilseeds or nuts, e.g. nut milk
- A23C11/106—Addition of, or treatment with, microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
- A23L11/60—Drinks from legumes, e.g. lupine drinks
- A23L11/65—Soy drinks
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/51—Bifidobacterium
- A23V2400/533—Longum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Confectionery (AREA)
- Non-Alcoholic Beverages (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Description
酸素に対する耐性を同時に持つビフィズス菌と、並びに
酸素の存在する条件下において当該菌株を培養する方法
とに関するものである。
とされている。ビフィズス菌は年齢層により菌群の種類
分布や数量が異なるが、ビフィズス菌は年齢が上がるほ
ど減少する傾向にあり、臨床試験では健康との関連性が
示されている。腐敗菌や病原菌を抑制し、腸内正常菌の
バランスを維持し、毒性アミンの生成を抑制し、ビタミ
ンB群を合成し、嬰児の利用に有利なL型乳酸を生成す
るなどの生理活性を有する。
比べて嫌酸素性があり、このため菌体の培養及び製品の
包装において菌の活力を維持することが難しく、コスト
が増え、菌製品の応用において問題となっている。この
他、菌体が摂取された後、人体胃腸環境に耐えて腸で吸
着されるという特性があるため、有効菌株の選択は菌株
の胃酸、胆汁塩に対する耐性並びに分離源と地域性など
と関連性がある。このため酸素、酸及び胆汁塩に対する
耐性をもつ菌株の選択はビフィズス菌の開発において大
きな目標となっている。現在までに世界各地で百種類近
い関連製品が開発されているが、上記の条件に完全に符
合する菌株はまだない。すでに発表されたビフィズス菌
耐性菌株及び製造工程特許及び文献は日本が最も多く
(表1〜6を参照)、酸、酸素耐性菌株が主流で、胆汁
塩耐性菌株は少ない。
ィドバクテリアム(Bifidobacterium) sp. ATCC 15700、
ATCC 15696、ATCC 15697及びATCC 15707は0.3 %胆汁酸
(glycocholate)存在下において24時間培養したとこ
ろ、成長力は非常に低く、ほとんど成長していない。耐
酸性菌株も多くが菌体を酸性乳製品(pH4〜4.8)に
おいて冷蔵貯蔵した生残率に着目しており、胃酸耐性試
験を行っているものは少なく、そのpH設定も3〜3.5
又は胃液分泌初期には発生する可能性がないpH2前後と
している。
分離した1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobact
erium longum)胃酸耐性菌株及び当該分離株を出発菌株
とし、突然変異菌種から胃酸、胆汁塩及び酸素に対する
耐性を持つビフィズス菌の多特性菌株を選別することで
ある。さらにもう一つの目的は簡便な当該菌株の培養方
法を提供することである。
菌菌株1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobacter
ium longum) Y1及びY2(ATCC 55813及び55814)及
び当該菌株を原始菌株として突然変異の改良を行った後
得た突然変異株ATCC 55815 、55816 、55817 、55818
に関するものである。突然変異種の前2者は原始菌株を
ATCC 55813 としたもの、後2者は原始菌株を ATCC 55
814 としたものである。本発明の菌株の特徴は胆汁塩、
酸などを含む胃腸環境耐性があり、且つ酸素耐性も高
く、工業培養に有利である。
ティ(Budapest Treaty )によりATCC(American T
ype Culture Collection)に送られており、その送付日
と整理番号は表7に示す通りである。
及び培養基の組成などは、実施例において再度詳しく述
べる。 (3) 菌株耐性の確認 胆汁塩耐性 牛胆汁(oxgall) は培養基においてヒト腸内菌を培養す
る時に一般的に使用されており、このためその効力はヒ
トの胆汁塩に類似しており、その平均濃度を0.3%
(w/v)とする。このため本発明の菌株及び原始菌株は適
当に活性化を行い、1%の接種量を取り、(1)基本培養
基MRSに0.3%の牛胆汁を添加したもの−試験群、
(2)基本培養基−対照群に接種し、24時間の培養を行
ったあと、OD600nm 及び生菌数の測定比較を行い、胆
汁塩耐性を確認する。
4.5の範囲で異なる。平均通過時間は2時間で、試験
時はpH2を採用する。酸性の性質は塩酸に類似している
ため、塩酸を生理食塩水で調整してpH2とし、37℃で
2時間処理して生存菌数を測定し、さらにpH7の生理食
塩水で処理した菌数と比較し、耐酸性を確認する。
般のスパイラル試験管に接種し、酸素の存在する条件下
において静置培養したあと、24時間後にその成長をO
D600nm 及び生菌数で測定し、嫌気的条件下(酸素の存
在しない条件下)において培養したものと比較する。
プトン及び0.1%ゼラチンの水溶液) と混合し、適当
な希釈濃度とする。1mlの希釈液を培養皿に取り、約2
0mlのMRS固体培養基(融解温度約45℃) を加え、振
とうして均一化したあと、静置凝固させ、完全に凝固し
たあと、嫌気缶に倒置し、37℃で2〜3日間培養し、
取り出して生菌数を測定する。
る条件下において培養したところ、その他の成長促進剤
を添加する必要がなく、産業としての生産に有利であ
る。 菌株の応用 応用する場合、本発明菌株は単独で使用又はその他の乳
酸菌(例えば1Lactobacillus acidophilus, Lactococc
us lactis, Lactobacillus casei, Streptococcus ther
mophilus, Lactobacillus bulgaricus)又は酵母菌(例
えば1Candidakefyr, Saccharomyces florentinus )及
び使用可能な菌株とともに、2種又は2種以上でスター
ターとして、液体ヨーグルト、発酵乳、冷凍ヨーグル
ト、乳酸菌発酵飲料及び発酵豆乳などの製品を生産する
ことができる。本発明菌株も食品添加物とすることがで
き、原料加工時に添加したり、発酵に参加せず発酵後期
に添加したりできる。このため広く様々な製品、例えば
牛乳、濃縮牛乳、粉ミルク、アイスクリーム、ヨーグル
ト、チーズ、リンゴジュース、豆乳、ケーキ、キャンデ
ィー、ベビーフード、食事療法製品、乳酸菌発酵飲料及
び上記の発酵製品に応用できる。各種製品の添加量は1
g当たり、又は1ml当たり菌量106 〜109 cfu とする。
株自身又はこの菌株を含む上記製品の一つで冷凍又は噴
霧乾燥粉末を生成することで、1g当たりに109 個以上
の活性ビフィズス菌を含むものとする。この種の製品に
酵母粉、炭水化物又はその他の充填成分を加えて、錠剤
又はカプセルを製造し、ビフィズス菌を含む消化整腸剤
又はインスタント食品、又は食用できる菌体粉末とする
ことができる。
5813及びATCC 55814又は突然変異株をMRS培養基にて
培養する。液体培養を行う場合、嫌気型ゴム栓を持つ試
験管を容器(Bellco Glass Inc.)を使用し、Virginia P
olytechnic Institute(V.P.I.)の嫌気操作システムで菌
株の接種を行い、90%の窒素と10%の二酸化炭素の
混合気体を使用する。固体培養する場合は、菌株を固体
培養基に接種した後、嫌気缶に倒置し培養2る。その保
存方法は、菌体を10%のグリセロールを含むMRS液
体培養基において−80℃冷凍保存を行うか、又は20
%の脱脂乳において冷凍乾燥した後4℃で保存する。
thium chloride 2g/l、metronidazole 2mg/l、sodium
iodoacetate 0.025g/l 、sodium propionate3g/lを添
加) 、及びBIM(Reinforced Clostridial Agar にna
lidixic acid0.02g/l 、polymyxin B sulfate 0.0085g/
l 、kanamycin sulfate 0.05g/l 、sodium iodoacetate
0.025g/l 、2,3,5-tri-phenyltetrazolium chloride
0.025g/l を添加)の選別培養基において、194株の
1Bifidobacterium spp. を分離し、再度耐酸性、胆汁
塩耐性、酸素耐性試験を行った後、2株の耐酸性株ATCC
55813及びATCC 55814を分離した。バーゲイのマニュア
ル(Bergey's Manual )が推薦する方法で、2株は1ビ
フィドバクテリアムアロンガム(Bifidobacteriumlongu
m)であることを鑑定した。その菌特性は以下の通りで
ある。 (1) 形態学的特徴 グラム陽性菌で、顕微鏡検査では棒形桿状、Y字型、ア
ーチ型、V字型を呈し、ときには膨大現象又はノード
(node)形成が見られる。MRS固体培養基の表面にお
けるコロニー形状は円凸状、滑らかで、白色を呈し、約
1〜4mm前後である。培養基の内部におけるコロニーは
円状、ディスク状、又は星状三角形を呈し、底部のコロ
ニーは白色で、周辺部は鋸状のハロゾーン(halo zone
)代謝物で3〜8mm前後である。 (2) 培養形状の特徴 成長温度は25〜42℃で、最適温度は37〜42℃で
ある。
である。MRS液体培養基において嫌気的条件下の培養
を24時間行ったところ、生成した酢酸/乳酸比は約
1.5である。 (3) 生理性質 カタラーゼ活性 (−) 、気体生成試験 (−) 、乳凝固活
性 (+) 、ゼラチン水分解性 (−) 、硝酸塩還元活性
(−) 、インドール生成試験 (−) 、硫化水素生成試験
(−) である。 (4) 炭素源の利用性 発酵がプラス反応であったものは、キシロース(xylos
e)、メリビオース(melibiose )、ガラクトース(gal
actose )、グルコース(glucose )、アラビノース(a
rabinose )、ラクトース(lactose )、フルクトース
(fructose)、ラフィノース(raffinose )、マルトー
ス(maltose )、リボース(ribose)、スクロース(su
crose )、マンノース(mannose )、メリジトース(me
lizitose)である。マイナス反応であったものは、マン
ニトール(mannitol)、ソルビトール(sorbitol)、セ
ロビオース(cellobiose)、トレハロース(trehalose
)、イヌリン(inulin)、グリコーゲン(glycoge
n)、でんぷん(starch)、サリシン(salicin )、ア
ミグダリン(amygdalin )、ラムノース(rhamnose)、
メソエリトリトール(meso-erythritol )、グリセロー
ル(glycerol)、メソイノシトール(meso-inositol
)、グルクロン酸(glucuronic acid )である。 〔実施例3〕 菌種の改良 (1) UV突然変異 ATCC 55813及びATCC 55814をMRS培養基において37
℃で2回活性化した後、2%(v/v)菌液を10mlMRS培
養液に取り、18〜24時間培養し、菌体を集めて0.1
M硫酸マグネシウム溶液で3回洗浄した後、同じ溶液に
懸濁させる。菌液を無菌シャーレに取り、UV Strata
linkerTM 1800 (Stratagene)に置き、250erg UV剤
量を照射する。菌液を再度MRS培養基に移して一晩培
養し、これが突然変異菌体となる。0.2ml菌液を選別
培養基に塗布し、37℃で3〜4日間培養する。 (2) NTG突然変異 ATCC 55813及びATCC 55814をMRS培養基において前述
の操作方法で菌体を集めた後、0.1 Mの燐酸緩衝液(pH
7.0)で菌体を2回洗浄し、再度突然変異剤ニトロソ
グアニジン(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine)
、NTG 200μg/mlを使用し37℃で30分間作用さ
せる。遠心分離し、上記緩衝液で2回洗浄した後、残っ
たNTGを除去し、菌体をMRS培養基に懸濁させ、一
晩培養し、これが突然変異菌体となる。0.2ml突然変
異菌液を選別培養基に塗布し、37℃で3〜4日間培養
する。 (3) 選別培養基 耐酸性株選別培養基:MRS固体培養基を4M HClで
pH4〜5に調整。
基に0.3%(w/v) の牛胆汁を添加。選別された耐性を
持つ可能性のある菌株を前述の確認方法で確認し、さら
に突然変異で多耐性菌株を得た。結果を表8に示す。変
異株は胆汁塩存在下において24時間保存したところ、
108 〜109 個/mlに増えており、野生株に比べて成長が
106 〜108 倍速い。耐酸性は維持され、野生株と同程度
であった。酸処理後に菌数はlog 値が4前後減少してい
る。さらに、非嫌気的条件下の培養における成長は良好
である。
um)変異株 ATCC 55815 等を10mlのMRS液体培養基
で培養し、37℃で18〜24時間静置した。1%の接
種量を300mlMRS液体培養基が入っている500ml
三角フラスコに入れ、同様条件で18〜24時間培養し
た後菌株の耐性を測定する。耐性能力は表8に示す通
り、少量培養に比べてと同等又はやや優っていた。 〔実施例5〕 本発明の菌株の特徴 本発明の株と同種標準株1B.longum ATCC 15707 、1
B. bifidum ATCC 29521、1B.breve ATCC 15700、及
び1B.breve ATCC 15701などについて、胆汁塩及び酸
耐性に関する比較試験を行ったところ、結果は表9に示
す通り本発明の菌株は高い胆汁塩及び酸耐性を示した。
入れ、115℃で20分間殺菌した後、2%(v/v)の本
発明の株と標準株をそれぞれ接種する。37℃、酸素の
存在する条件下において静置培養し、経時的にサンプリ
ングして成長菌数とpH値を測定する。結果は表10に示
す通り。本発明の菌株1B.longum ATCC 55816 は還元
脱脂乳において、成長促進剤を加える必要がなく、22
時間の好気培養後1.14×109 cfu/mlに成長し、且つ成長
力を維持し、生存力は68時間後でも3.49×108 cfu/ml
を有した。
胃液に対して耐性があり、生存力が高い。突然変異の新
菌株は胆汁塩耐性、胃酸耐性及び酸素耐性を持つビフィ
ズス菌変異株であり、当該菌株の酸素耐性は培養方法を
簡素化することができ、嫌気装置と操作方法を使用する
必要がなく、培養時の窒素充填の必要がなくなるため、
産業応用においてコストの削減、製造工程の簡素化、貯
蔵生存力の向上などを提供することができる。さらに、
菌株の胃酸、胆汁塩耐性で食用後容易に腸内へ到達する
ことができ、製品の性能を高めることができる。
び酸素に対する耐性をもつビフィズス菌変異株及び発酵
成長の方法については、上述した発明の手順及び内容以
外の方法で行うことも可能である。
Claims (11)
- 【請求項1】 受託番号がATCC 55813であるビフィズス
菌菌株1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobacteri
um longum) Y1。 - 【請求項2】 受託番号がATCC 55814であるビフィズス
菌菌株1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobacteri
um longum) Y2。 - 【請求項3】 受託番号がATCC 55815であるビフィズス
菌菌株1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobacteri
um longum) Y1−2E−05。 - 【請求項4】 受託番号がATCC 55816であるビフィズス
菌菌株1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobacteri
um longum) Y1−4A−01。 - 【請求項5】 受託番号がATCC 55817であるビフィズス
菌菌株1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobacteri
um longum) Y2−1A−01。 - 【請求項6】 受託番号がATCC 55818であるビフィズス
菌菌株1ビフィドバクテリアムロンガム(Bifidobacteri
um longum) Y2−2B−04。 - 【請求項7】 請求項1〜6のいずれかに記載の菌株の
一つを、脱脂乳において、25〜45℃、酸素の存在す
る条件下で培養することを特徴とする菌株の培養方法。 - 【請求項8】 請求項1〜6のいずれかに記載の菌株の
一つを直接食品原料に添加して製造することを特徴とす
る食品組成物。 - 【請求項9】 牛乳、濃縮牛乳、粉ミルク、アイスクリ
ーム、ヨーグルト、チーズ、リンゴジュース、豆乳、ケ
ーキ、キャンディー、ベビーフード、食事療法製品、液
体ヨーグルト、発酵乳、冷凍ヨーグルト、乳酸菌発酵飲
料及び発酵豆乳のうち、いずれか1つを食品原料として
製造したことを特徴とする、請求項8記載の食品組成
物。 - 【請求項10】 請求項1〜6のいずれかに記載の菌株
の1つを食品を発酵させるスターターとして選ぶことを
特徴とする食品の発酵方法。 - 【請求項11】 液体ヨーグルト、発酵乳、冷凍ヨーグ
ルト、乳酸発酵飲料及び発酵豆乳のうちのいずれか1つ
を食品製品とすることを特徴とする請求項10記載の食
品の発酵方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
TW085106752A TW357191B (en) | 1996-06-04 | 1996-06-04 | Bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance and their culture method the invention relates to bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance and their culture method |
TW85106752 | 1996-06-05 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH09322762A JPH09322762A (ja) | 1997-12-16 |
JP3017687B2 true JP3017687B2 (ja) | 2000-03-13 |
Family
ID=21625274
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP8268593A Expired - Lifetime JP3017687B2 (ja) | 1996-06-04 | 1996-10-09 | ビフィズス菌及びその培養方法 |
Country Status (3)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US5711977A (ja) |
JP (1) | JP3017687B2 (ja) |
TW (1) | TW357191B (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102129586B1 (ko) * | 2018-11-15 | 2020-07-02 | 주식회사 제이제이글로벌 | 탁구 운동장치 |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR100454760B1 (ko) * | 1997-01-22 | 2005-01-13 | 후지 세이유 가부시키가이샤 | 발효두유(豆乳)제조방법 |
ID29150A (id) * | 1999-01-15 | 2001-08-02 | Entpr Ireland Cs | Penggunaan lactobacillus salivarius |
FR2789854B1 (fr) * | 1999-02-23 | 2001-05-25 | Le Sojami Soc | Procede de fabrication d'une preparation glacee a base de laits vegetaux, notamment de soja et produits obtenus |
FR2795917B1 (fr) * | 1999-07-06 | 2001-08-31 | Gervais Danone Sa | Procede de preparation d'un produit lacte immunostimulant et ses applications |
KR20020043228A (ko) * | 1999-10-28 | 2002-06-08 | 구와하라 쥰 | 비피더스균 함유 발효식품 |
EP1371735B1 (en) * | 2001-02-01 | 2011-05-04 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Method of evaluating the extent of reaching the intestine of bifidobacterium in fermented milk food or drink |
US7794763B2 (en) * | 2001-11-05 | 2010-09-14 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Bacterium of the genus bifidobacterium and fermented foods using the same |
ATE322538T1 (de) * | 2001-12-07 | 2006-04-15 | Morinaga Milk Industry Co Ltd | Bifidobacterium longum |
AU2006270824B2 (en) | 2005-07-21 | 2010-09-02 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Novel bacterium belonging to the genus bifidobacterium and utilization of the same |
JP4726129B2 (ja) * | 2006-01-17 | 2011-07-20 | 学校法人北里研究所 | ビフィズス菌増殖促進ペプチド |
ES2628378T3 (es) * | 2008-04-17 | 2017-08-02 | Anaeropharma Science, Inc. | Vector plasmídico |
JP5679255B2 (ja) * | 2009-12-28 | 2015-03-04 | 株式会社明治 | 酸素耐性が増強された微生物およびその利用 |
CN101731511B (zh) * | 2010-02-03 | 2013-04-03 | 徐赟姣 | 益生菌活性制品及其制备方法 |
MY158274A (en) | 2010-02-24 | 2016-09-30 | Yakult Honsha Kk | Method for construction novel bacterium belonging to the genus bifidobacterium |
AU2012335510A1 (en) * | 2011-11-10 | 2014-05-22 | General Mills, Inc. | Means and methods of increasing viability of rod-shaped bacteria |
CA3083711A1 (en) * | 2017-11-24 | 2019-05-31 | University College Cork, National University Of Ireland, Cork | A composition comprising a cohort of bacteria |
CN108707565B (zh) * | 2018-06-06 | 2022-05-24 | 北京博锦元生物科技有限公司 | 一种两歧双歧杆菌及其应用 |
CN110452829B (zh) * | 2019-03-24 | 2021-08-27 | 广西大学 | 长双歧杆菌菌株及其应用 |
KR20220119721A (ko) * | 2020-02-18 | 2022-08-30 | 오브 가부시키가이샤 | 신규 비피도박테리움 속 세균 및 이를 포함하는 조성물 |
CN111876352B (zh) * | 2020-07-28 | 2022-07-08 | 科兴生物制药股份有限公司 | 一种耐氧耐酸婴儿双歧杆菌及其筛选方法 |
CN115354009B (zh) * | 2022-10-20 | 2023-02-07 | 东北农业大学 | 一种具有菌毛的长双歧杆菌婴儿亚种及其应用 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5283974A (en) * | 1976-01-01 | 1977-07-13 | Yakult Honsha Kk | Incubation mixture of milk containing living cell of bifidus strain and method of producing same |
JPS5283975A (en) * | 1976-01-01 | 1977-07-13 | Yakult Honsha Kk | Method of producing fermented milk product containg living cell of bifidus strain |
JPS53121949A (en) * | 1977-03-31 | 1978-10-24 | Yakult Honsha Kk | Production of drink and food containing bifidobacterium cells |
CH663322A5 (fr) * | 1985-02-28 | 1987-12-15 | Nestle Sa | Culture de bifidobacteries resistantes a l'acide. |
JPH0779684B2 (ja) * | 1989-02-27 | 1995-08-30 | 森永乳業株式会社 | ビフィズス菌増殖促進組成物 |
JPH07106142B2 (ja) * | 1989-04-21 | 1995-11-15 | 株式会社ヤクルト本社 | IgA誘導能を有するビフィドバクテリウム・ロンガム又はビフィドバクテリウム・ブレーベ |
JPH0322971A (ja) * | 1989-06-20 | 1991-01-31 | Calpis Food Ind Co Ltd:The | ビフィズス菌増殖物質の精製法及び増殖物質 |
DE69219768T2 (de) * | 1992-07-06 | 1997-08-28 | Societe Des Produits Nestle S.A., Vevey | Milchbakterien |
US5501857A (en) * | 1992-07-24 | 1996-03-26 | Midwestern Bio-Ag Products & Services, Inc. | Oral nutritional and dietary composition |
-
1996
- 1996-06-04 TW TW085106752A patent/TW357191B/zh not_active IP Right Cessation
- 1996-10-09 JP JP8268593A patent/JP3017687B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1996-10-22 US US08/735,263 patent/US5711977A/en not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102129586B1 (ko) * | 2018-11-15 | 2020-07-02 | 주식회사 제이제이글로벌 | 탁구 운동장치 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US5711977A (en) | 1998-01-27 |
TW357191B (en) | 1999-05-01 |
JPH09322762A (ja) | 1997-12-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP3017687B2 (ja) | ビフィズス菌及びその培養方法 | |
Tamime et al. | Microbiological and technological aspects of milks fermented by bifidobacteria | |
Doleyres et al. | Technologies with free and immobilised cells for probiotic bifidobacteria production and protection | |
US4187321A (en) | Method for producing foods and drinks containing bifidobacteria | |
JP5518178B2 (ja) | ラクトバチルス・プランタラムに属する新規乳酸菌およびその利用 | |
EP2112219B1 (en) | Novel lactic acid bacteria | |
AU2011218925B2 (en) | Method for constructing novel bacterium belonging to the genus Bifidobacterium | |
JP6594911B2 (ja) | 乳酸菌、該乳酸菌由来の自然免疫活性化剤、感染症予防治療剤及び飲食品 | |
TW200406216A (en) | Novel acid-and bile salt-resistant Lactobacillus isolates having the ability to lower and assimilate cholesterol | |
JP4046389B2 (ja) | ビフィドバクテリウム・ブレーベ及びこれを用いた発酵豆乳 | |
Mollet | Genetically improved starter strains: opportunities for the dairy industry | |
JPH0687732B2 (ja) | ビフイズス菌入り発酵乳の製造法 | |
US20130189396A1 (en) | Method for producing a fermented food containing bifidobacteria | |
Alfano et al. | Lactobacillus plantarum: microfiltration experiments for the production of probiotic biomass to be used in food and nutraceutical preparations | |
US6306638B1 (en) | Mutant bifidobacteria strains with acid, bile salt and oxygen tolerance | |
NO324916B1 (no) | Bakteriestamme med evne til a overleve i tarmen, klebe til humane tarmceller og bevirke immunomodulering, fremgangsmate for fremstilling derav samt anvendelse derav. | |
Banina et al. | Characterization of natural isolate Lactobacillus acidophilus BGRA43 useful for acidophilus milk production | |
JP3875237B2 (ja) | ビフィドバクテリウム・ロンガム | |
JP4794592B2 (ja) | 新規乳酸菌 | |
WO2005001068A1 (en) | A BIFIDOBACTERIUM BREVE LMC520 STRAIN CONTAINING A PLASMID Pbc520, A METHOD FOR PREPARATION OF CONJUGATED FATTY ACIDS AND FERMENTED MILKS CONTAINING SUCH FATTY ACIDS USING THE SAME STRAIN, AND USE OF A PLASMID pBC520 | |
WO2024111464A1 (ja) | ラクチカゼイバチルス・パラカゼイの胃酸胆汁酸耐性向上方法 | |
JPS5953829B2 (ja) | ビフィドバクテリウム・ロンガムに属する新規微生物、その菌体の製造法および該微生物を含む組成物 | |
Nguyen et al. | 15 Power of Bifidobacteria in Food Applications for Health Promotion | |
KR100398063B1 (ko) | 내산성 및 내담즙산성이 우수한 비피도박테리아 롱검bo-11과 이의 이용 | |
Nguyen et al. | 15 Power of Bifidobacteria in Food Applications for Health Promotion |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20071224 Year of fee payment: 8 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081224 Year of fee payment: 9 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091224 Year of fee payment: 10 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101224 Year of fee payment: 11 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20111224 Year of fee payment: 12 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20121224 Year of fee payment: 13 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20131224 Year of fee payment: 14 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |