JP2538597B2 - 新規な環元酵素 - Google Patents
新規な環元酵素Info
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Description
【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は、例えばγ−置換アセト酢酸エステルから医
薬の合成中間体として重要な（Ｒ）−γ−置換−β−ヒ
ドロキシ酪酸エステルの製造などに利用できる新規な還
元酵素に関するものである。
薬の合成中間体として重要な（Ｒ）−γ−置換−β−ヒ
ドロキシ酪酸エステルの製造などに利用できる新規な還
元酵素に関するものである。
（従来の技術） 近年、還元型ニコチンアミド・アデニン・ジヌクレオ
チドリン酸を補酵素とする酵素的不斉還元反応による光
学活性生理活性物質およびその合成中間体の製造の重要
性が増しつつある。これまでにγ−置換アセト酢酸エス
テルに作用し、（Ｒ）−γ−置換−β−ヒドロキシ酪酸
エステルを生成する酵素としては酵母由来のＬ−β−ヒ
ドロキシ・アシルCoAデヒドロゲナーゼ〔EC1.1.1.35〕
（特開昭59−118093号公報）およびサーモアネアロビウ
ムブロキイ（Thermoanaerobium brockii）由来のアルコ
ールデヒドロゲナーゼ〔EC1.1.1.2〕（J.Am.Chem.So
c.、1985、107、4028）が知られている。
チドリン酸を補酵素とする酵素的不斉還元反応による光
学活性生理活性物質およびその合成中間体の製造の重要
性が増しつつある。これまでにγ−置換アセト酢酸エス
テルに作用し、（Ｒ）−γ−置換−β−ヒドロキシ酪酸
エステルを生成する酵素としては酵母由来のＬ−β−ヒ
ドロキシ・アシルCoAデヒドロゲナーゼ〔EC1.1.1.35〕
（特開昭59−118093号公報）およびサーモアネアロビウ
ムブロキイ（Thermoanaerobium brockii）由来のアルコ
ールデヒドロゲナーゼ〔EC1.1.1.2〕（J.Am.Chem.So
c.、1985、107、4028）が知られている。
（発明が解決しようとする問題点） しかしながら、前者は反応性と温度安定性が劣り、後
者は嫌気培養であるため菌の増殖性が劣り、また培養装
置が複雑になるという問題があつた。
者は嫌気培養であるため菌の増殖性が劣り、また培養装
置が複雑になるという問題があつた。
その他、次の既知還元酵素類についてγ−置換−アセ
ト酢酸エステルに対する活性を検討した結果、いずれも
活性は認められなかつた。
ト酢酸エステルに対する活性を検討した結果、いずれも
活性は認められなかつた。
既知還元酵素類…グリセロール・デハイドロゲナナー
ゼ〔EC1.1.1.6〕、グルタメート・デハイドロゲナーゼ
〔EC1.4.1.3〕、アルコール・デハイドロゲナーゼ〔EC
1.1.1.1〕、ベータ・ガラクトース・デハイドロゲナー
ゼ〔EC1.1.1.48〕、ラクテート・デハイドロゲナーゼ
〔EC1.1.1.27〕、グルコース・デハイドロゲナーゼ〔EC
1.1.1.47〕、ホルムアルデヒド・デハイドロゲナーゼ
〔EC1.2.1.1〕、アルフア・グリセロフオスフエート・
デハイドロゲナーゼ〔EC1.1.1.8〕。
ゼ〔EC1.1.1.6〕、グルタメート・デハイドロゲナーゼ
〔EC1.4.1.3〕、アルコール・デハイドロゲナーゼ〔EC
1.1.1.1〕、ベータ・ガラクトース・デハイドロゲナー
ゼ〔EC1.1.1.48〕、ラクテート・デハイドロゲナーゼ
〔EC1.1.1.27〕、グルコース・デハイドロゲナーゼ〔EC
1.1.1.47〕、ホルムアルデヒド・デハイドロゲナーゼ
〔EC1.2.1.1〕、アルフア・グリセロフオスフエート・
デハイドロゲナーゼ〔EC1.1.1.8〕。
この発明はγ−置換アセト酢酸エステルに作用し、
（Ｒ）−γ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルを生成
し、かつ前記欠点を改良した酵素を提供することを目的
とする。
（Ｒ）−γ−置換−β−ヒドロキシ酪酸エステルを生成
し、かつ前記欠点を改良した酵素を提供することを目的
とする。
（問題点を解決するための手段） 本発明者らは前記目的を達成するために多数の酵素の
スクリーニングを行なつた結果、スポロボロマイセス
（Sporobolomyces）属に属する菌株、たとえばスポロボ
ロマイセス・サルモニカラー（Sporobolomyces salmoni
color）IFO−1038がγ−置換アセト酢酸エステルの還元
能力が高いことを見い出し、先に特許出願した（特願昭
61−33935号）。本発明者らは、前記菌株から還元能力
を示す酵素を抽出し精製したところ、本発明の目的にか
なう新規酵素であることが明らかになり本発明を完成す
るに到つた。
スクリーニングを行なつた結果、スポロボロマイセス
（Sporobolomyces）属に属する菌株、たとえばスポロボ
ロマイセス・サルモニカラー（Sporobolomyces salmoni
color）IFO−1038がγ−置換アセト酢酸エステルの還元
能力が高いことを見い出し、先に特許出願した（特願昭
61−33935号）。本発明者らは、前記菌株から還元能力
を示す酵素を抽出し精製したところ、本発明の目的にか
なう新規酵素であることが明らかになり本発明を完成す
るに到つた。
すなわち、本発明は下記理化学的性質を有する新規な
還元酵素である。
還元酵素である。
記 イ）作用…補酵素還元型ニコチンアミド・アデニン・ジ
ヌクレオチド・リン酸（以下、これをNADPHという）の
存在下、アルデヒド類およびケトン類を還元し、これら
と等モルのアルコール類を生成する。
ヌクレオチド・リン酸（以下、これをNADPHという）の
存在下、アルデヒド類およびケトン類を還元し、これら
と等モルのアルコール類を生成する。
ロ）基質特異性…γ−置換アセト酢酸エステルを選択的
に還元し、（Ｒ）−体の相当するアルコール類を生成す
る。また、NADPHに対し活性を有するが、NADH（還元型
ニコチンアミド・アデニン・ジヌクレオチド）に対して
は活性がない。
に還元し、（Ｒ）−体の相当するアルコール類を生成す
る。また、NADPHに対し活性を有するが、NADH（還元型
ニコチンアミド・アデニン・ジヌクレオチド）に対して
は活性がない。
ハ）至適pH及び安定pH範囲…至適pHは７付近、安定pH範
囲は６〜10である。
囲は６〜10である。
ニ）至適温度…至適温度は60℃付近である。
ホ）温度による失活の条件…40℃では失活がなく、60℃
（pH7）で10分間で30％失活する。
（pH7）で10分間で30％失活する。
ヘ）阻害及び活性化…クエルセチンで阻害され、Fe3+、
Mg2+で若干阻害される。α，α′−ジピリジルで若干活
性化される。
Mg2+で若干阻害される。α，α′−ジピリジルで若干活
性化される。
ト）等電点…pH4.7である。
チ）分子量…セフアデツクスＧ−100のゲル濾過法によ
れば32000であり、SDS電気泳動法によれば36500であ
る。
れば32000であり、SDS電気泳動法によれば36500であ
る。
つぎに、本発明の新規な還元酵素の生産と精製法およ
びその諸性質につき具体的に説明する。なお、以下の％
はすべて重量％を表わす。グルコース５％およびコーン
ステイープリカー５％からなり、pHを6.0に調整した培
地でスポロボロマイセス・サルモニカラーIFO−1038を
生育させた。
びその諸性質につき具体的に説明する。なお、以下の％
はすべて重量％を表わす。グルコース５％およびコーン
ステイープリカー５％からなり、pHを6.0に調整した培
地でスポロボロマイセス・サルモニカラーIFO−1038を
生育させた。
生育したスポロボロマイセス・サルモニカラーを遠心
分離により集菌し、0.01Mリン酸緩衝液（pH7.4）で洗浄
後、ダイノミル（シンマルエンタープライズ社製）で細
胞を破砕し酵素を抽出した。破砕した細胞と酵素との混
合物を遠心分離し、得られた無細胞抽出液に硫酸アンモ
ニウム水溶液（飽和濃度の60〜80％の濃度）を加えるこ
とによつて酵素を含む画分を沈降させて集めた。
分離により集菌し、0.01Mリン酸緩衝液（pH7.4）で洗浄
後、ダイノミル（シンマルエンタープライズ社製）で細
胞を破砕し酵素を抽出した。破砕した細胞と酵素との混
合物を遠心分離し、得られた無細胞抽出液に硫酸アンモ
ニウム水溶液（飽和濃度の60〜80％の濃度）を加えるこ
とによつて酵素を含む画分を沈降させて集めた。
一晩0.01Mリン酸緩衝液（pH7.4）に対し透析を行なつ
て硫酸アンモニウムを除去したのち、DEAE−セフアセル
（フアーマシア社製）カラムに吸着させ、濃度０〜0.6M
の塩化ナトリウム水溶液による直線グラジエント溶出を
行ない活性画分を集めた。さらに、限外濾過法（アミコ
ン社製装置使用）で濃縮し、ゲル濾過クロマト処理（フ
アーマシア社製セフアデツクスＧ−100を使用）を２回
行なうことにより活性画分を集め、精製酵素液標品を得
た。得られた標品を電気泳動法で調べた結果、均一な物
質であつた。
て硫酸アンモニウムを除去したのち、DEAE−セフアセル
（フアーマシア社製）カラムに吸着させ、濃度０〜0.6M
の塩化ナトリウム水溶液による直線グラジエント溶出を
行ない活性画分を集めた。さらに、限外濾過法（アミコ
ン社製装置使用）で濃縮し、ゲル濾過クロマト処理（フ
アーマシア社製セフアデツクスＧ−100を使用）を２回
行なうことにより活性画分を集め、精製酵素液標品を得
た。得られた標品を電気泳動法で調べた結果、均一な物
質であつた。
酵素活性の測定は基質600n molとNADPH192n molを0.6
mlの酵素液（濃度0.1Mのリン酸緩衝液、pH7.0）に添加
し、温度37℃における波長340nmの吸光度を測定するこ
とによつて求めた。そして、γ−クロルアセト酢酸エチ
ルエステルから１分間に１μmolのγ−クロル−β−ハ
イドロキシ酪酸エチルエステルを生成する能力を１単位
とした。
mlの酵素液（濃度0.1Mのリン酸緩衝液、pH7.0）に添加
し、温度37℃における波長340nmの吸光度を測定するこ
とによつて求めた。そして、γ−クロルアセト酢酸エチ
ルエステルから１分間に１μmolのγ−クロル−β−ハ
イドロキシ酪酸エチルエステルを生成する能力を１単位
とした。
本発明の還元酵素の理化学的諸性質はつぎの通りであ
る。
る。
作用…補酵素NADPHの存在下、アルデヒド類および
ケトン類を基質とし、これらと等モルのアルコール類を
生成する。
ケトン類を基質とし、これらと等モルのアルコール類を
生成する。
基質特異性 （ｉ） ケトン類およびアルデヒド類に対する活性…第
１表および第２表に記すとおりである。これらの活性の
値はγ−クロルアセト酢酸エチルに対する活性を100％
として表わしたものである。
１表および第２表に記すとおりである。これらの活性の
値はγ−クロルアセト酢酸エチルに対する活性を100％
として表わしたものである。
なお、活性がゼロのケトン類は下記の通りである。２
−ケトグルタール酸、２−ケト酪酸、２−ケト吉草酸、
２−ケトカプロン酸、２−ケトアジピン酸、２−ケトイ
ソ吉草酸、２−ケトイソカプロン酸、２−ケトマロン
酸、２−ケト−３−メチル吉草酸、２−ケト−Ｄ−グル
コン酸、３−インド−ルグリオキシル酸、ピルビン酸、
フエニルピルビン酸、ベンゾイルピルビン酸、グリオキ
シレート、オキサル酸、オキシピルビン酸、ｐ−オキシ
フエニルピルビン酸、インドール−３−ピルビン酸、ケ
トパントテン酸カルシウム、ケトパントテンアミド、ケ
トパントテン酸、ケトパントラクトン、アセト酢酸、レ
ブリン酸、ジヒドロ−4,4−ジエチル−2,3−フランジオ
ン、ジヒドロ−４−メチル−４−エチル−2,3−フラン
ジオン、ジヒドロ−４−メチル−４−プロピル−2,3−
フランジオン、２−ケト−３−吉草酸エチル、２−ケト
−３−カプロン酸メチル、２−ケト−３−フエニル酪
酸、ジヒドロ−５−イソプロピル−4,4−ジメチル−2,3
−フランジオン、ジヒドロ−５−（３−ペンチル）−4,
4−ジメチル−2,3−フランジオン、ジヒドロ−５−（３
−ペンチル）−4,4−ジエチル−2,3−フランジオン、デ
ハイドロカルニチンエチルエステル、Ｓ−アセトアセチ
ル・コーエンザイムＡ、アセトイン、ベンゾイン、アセ
トール、ビタミンK3、ビタミンK5、イサチン、α−ナフ
トキノン、パラバン酸、2,5−トルキノン、クロラニ
ル、３−メチル−1,2−シクロヘキサジオン、アセナフ
テンキノン また、活性がゼロのアルデヒド類は下記の通りであ
る。
−ケトグルタール酸、２−ケト酪酸、２−ケト吉草酸、
２−ケトカプロン酸、２−ケトアジピン酸、２−ケトイ
ソ吉草酸、２−ケトイソカプロン酸、２−ケトマロン
酸、２−ケト−３−メチル吉草酸、２−ケト−Ｄ−グル
コン酸、３−インド−ルグリオキシル酸、ピルビン酸、
フエニルピルビン酸、ベンゾイルピルビン酸、グリオキ
シレート、オキサル酸、オキシピルビン酸、ｐ−オキシ
フエニルピルビン酸、インドール−３−ピルビン酸、ケ
トパントテン酸カルシウム、ケトパントテンアミド、ケ
トパントテン酸、ケトパントラクトン、アセト酢酸、レ
ブリン酸、ジヒドロ−4,4−ジエチル−2,3−フランジオ
ン、ジヒドロ−４−メチル−４−エチル−2,3−フラン
ジオン、ジヒドロ−４−メチル−４−プロピル−2,3−
フランジオン、２−ケト−３−吉草酸エチル、２−ケト
−３−カプロン酸メチル、２−ケト−３−フエニル酪
酸、ジヒドロ−５−イソプロピル−4,4−ジメチル−2,3
−フランジオン、ジヒドロ−５−（３−ペンチル）−4,
4−ジメチル−2,3−フランジオン、ジヒドロ−５−（３
−ペンチル）−4,4−ジエチル−2,3−フランジオン、デ
ハイドロカルニチンエチルエステル、Ｓ−アセトアセチ
ル・コーエンザイムＡ、アセトイン、ベンゾイン、アセ
トール、ビタミンK3、ビタミンK5、イサチン、α−ナフ
トキノン、パラバン酸、2,5−トルキノン、クロラニ
ル、３−メチル−1,2−シクロヘキサジオン、アセナフ
テンキノン また、活性がゼロのアルデヒド類は下記の通りであ
る。
ホルムアルデヒド、アセトアルデヒド、クロトンアル
デヒド、Ｄ−グリセルアルデヒド−３−ホスフエート・
ジアセチルアセタール、グリコールアルデヒド、プロピ
オンアルデヒド、サリチルアルデヒド、ベタインアルデ
ヒド、ｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド、ｐ−ヒド
ロベンズアルデヒド、無水グルタール酸、ｎ−ブチルア
ルデヒド、グルタルアルデヒド、Ｄ−グルコン酸ナトリ
ウム塩、 （ii） 補酵素 ・NADPHに対し活性有り。
デヒド、Ｄ−グリセルアルデヒド−３−ホスフエート・
ジアセチルアセタール、グリコールアルデヒド、プロピ
オンアルデヒド、サリチルアルデヒド、ベタインアルデ
ヒド、ｐ−ジメチルアミノベンズアルデヒド、ｐ−ヒド
ロベンズアルデヒド、無水グルタール酸、ｎ−ブチルア
ルデヒド、グルタルアルデヒド、Ｄ−グルコン酸ナトリ
ウム塩、 （ii） 補酵素 ・NADPHに対し活性有り。
・NADH（ニコチンアミドアデニンジヌクレオシド）に対
し作用しない。
し作用しない。
（iii） アルコール類 第３表のアルコール類に対して実質的に活性は認めら
れない。
れない。
至適pH及び安定pH範囲 至適pHは７近辺にある。また、pH6〜10で55℃、10分
間処理した場合でも80％以上の活性が残存する。
間処理した場合でも80％以上の活性が残存する。
至適温度及び安定温度範囲 至適温度は60℃付近にある。また、pH7.0で10分間の
処理では40℃で100％、60℃で70％の活性が残存する。
処理では40℃で100％、60℃で70％の活性が残存する。
添加剤（金属イオンおよび化合物）の影響…第４表
に示すとおりである。なお、活性（％）はこれらの金属
イオンまたは化合物を添加しないときを100とした相対
値である。
に示すとおりである。なお、活性（％）はこれらの金属
イオンまたは化合物を添加しないときを100とした相対
値である。
光学選択性 γ−置換アセト酢酸エステルの還元反応生成物は第５
表に示すとおりいずれも（Ｒ）−体で光学純度は97％ee
以上である。
表に示すとおりいずれも（Ｒ）−体で光学純度は97％ee
以上である。
生成物の光学純度は、（＋）−α−メトキシ−α−ト
リフルオロメチルフエニル酢酸（MTPA）とのエステルを
合成し、ジアステレオマー化合物とした後、高速液体ク
ロマトグラフイ（HPLC）により分離定量する。
リフルオロメチルフエニル酢酸（MTPA）とのエステルを
合成し、ジアステレオマー化合物とした後、高速液体ク
ロマトグラフイ（HPLC）により分離定量する。
HPLC条件 カラム:Partisil5（ワツトマン社製）（4.6
φ×250mm） 移動相：ヘキサン：テトラクロロフラン：メ
タノール＝600:100:1 速 度:2.0ml/分 検出（吸光度波長）:217nm 有機溶媒に対する安定性 第６表の有機溶媒を含むpH7.0のリン酸緩衝液中で28
℃、24時間処理した場合でも80％以上の活性を保有して
いる。
φ×250mm） 移動相：ヘキサン：テトラクロロフラン：メ
タノール＝600:100:1 速 度:2.0ml/分 検出（吸光度波長）:217nm 有機溶媒に対する安定性 第６表の有機溶媒を含むpH7.0のリン酸緩衝液中で28
℃、24時間処理した場合でも80％以上の活性を保有して
いる。
等電点 pH4.7 分子量 32,000（セフアデツクスＧ−100のゲル濾過法） 36,500〔SDS（ソジウムドデシルサルフエート）電気泳
動法〕 本発明で使用する新規還元酵素を生産するには、常法
に従つて、当該菌を培養することができる。培養に用い
られる培地は微生物の生育に必要な炭素源、窒素源、無
機物質等を含む通常の培地である。更に、ビタミン、ア
ミノ酸等の有機微量栄養素を添加すると望ましい結果が
得られる場合が多い。
動法〕 本発明で使用する新規還元酵素を生産するには、常法
に従つて、当該菌を培養することができる。培養に用い
られる培地は微生物の生育に必要な炭素源、窒素源、無
機物質等を含む通常の培地である。更に、ビタミン、ア
ミノ酸等の有機微量栄養素を添加すると望ましい結果が
得られる場合が多い。
培地は好気的条件下、pH3〜８、温度10〜40℃の任意
の範囲に制御しつつ１〜10日間行う。
の範囲に制御しつつ１〜10日間行う。
当該菌を培養して電気泳動的に均一な還元酵素を得る
には、通常の硫安分画、アフイニテイクロマトグラフ
イ、イオン交換クロマトグラフイ、ゲルろ過クロマトグ
ラフイ等が用いられる。
には、通常の硫安分画、アフイニテイクロマトグラフ
イ、イオン交換クロマトグラフイ、ゲルろ過クロマトグ
ラフイ等が用いられる。
次に、実施例によつて本発明の方法を更に詳しく説明
する。
する。
グルコース５重量％、コーン・ステイープ・リカー５
重量％からなる培地（pH6）5mlを試験管に取り、スポロ
ボロマイセス・サルモニカラー（Sporobolomyces salmo
nicolor）IFO1038を接種して28℃で48時間振とう培養を
行ない種培養液を得た。
重量％からなる培地（pH6）5mlを試験管に取り、スポロ
ボロマイセス・サルモニカラー（Sporobolomyces salmo
nicolor）IFO1038を接種して28℃で48時間振とう培養を
行ない種培養液を得た。
次に10本の２容フラスコを準備し、それぞれのフラ
スコに上記と同一組成の培地500mlと種培養5mlを添加し
て、温度28℃で３〜４日間振とう培養を行なつた。
スコに上記と同一組成の培地500mlと種培養5mlを添加し
て、温度28℃で３〜４日間振とう培養を行なつた。
ついで、５の培養液から遠心分離（28000G、20分
間）により回収した培養菌体を0.01Mリン緩衝液（pH7.
4）で洗浄したのち、ダイノミル（ビーズ直径0.25〜0.5
mm）で20分間処理し、28000Gで20分間遠心分離して、け
ん濁物質を除くことにより粗酵素液を得た。この粗酵素
液に硫酸アンモニウム水溶液（飽和濃度の60〜80％の濃
度）を加えることによつて酵素を含む画分を沈降させて
集め、酵素を含む画分を遠心分離（28000G、30分）によ
り回収し0.01Mリン酸緩衝液（pH7.0）で20時間透析して
硫酸アンモニウムを除いた。
間）により回収した培養菌体を0.01Mリン緩衝液（pH7.
4）で洗浄したのち、ダイノミル（ビーズ直径0.25〜0.5
mm）で20分間処理し、28000Gで20分間遠心分離して、け
ん濁物質を除くことにより粗酵素液を得た。この粗酵素
液に硫酸アンモニウム水溶液（飽和濃度の60〜80％の濃
度）を加えることによつて酵素を含む画分を沈降させて
集め、酵素を含む画分を遠心分離（28000G、30分）によ
り回収し0.01Mリン酸緩衝液（pH7.0）で20時間透析して
硫酸アンモニウムを除いた。
得られた酵素液をDEAE−セフアセル・カラム（カラム
の直径1.6cm、長さ30cm）に吸着させた。カラムを上記
緩衝液で洗浄したのち、０〜0.6Mの塩化ナトリウムを含
む同緩衝液により直線グラジエント溶出を行ない活性を
示す画分を集めた。
の直径1.6cm、長さ30cm）に吸着させた。カラムを上記
緩衝液で洗浄したのち、０〜0.6Mの塩化ナトリウムを含
む同緩衝液により直線グラジエント溶出を行ない活性を
示す画分を集めた。
活性画分を限外濾過（アミコン社、YM10）で濃縮し、
ゲル濾過カラム（セフアデツクスＧ−100、カラムの直
径2.0cm、長さ90cm）に供給した。0.1Mの食塩を含む上
記緩衝液でクロマトグラフを行ない、活性を示した画分
を集め、上記と同様の方法でゲル濾過クロマトグラフイ
ーを行ない精製酵素液を調製した。この精製酵素液を電
気泳動法にかけたところ単一バンドを示した。精製結果
を第７表に示す。
ゲル濾過カラム（セフアデツクスＧ−100、カラムの直
径2.0cm、長さ90cm）に供給した。0.1Mの食塩を含む上
記緩衝液でクロマトグラフを行ない、活性を示した画分
を集め、上記と同様の方法でゲル濾過クロマトグラフイ
ーを行ない精製酵素液を調製した。この精製酵素液を電
気泳動法にかけたところ単一バンドを示した。精製結果
を第７表に示す。
（発明の効果） 本発明により得られた新規な還元酵素はγ−置換アセ
ト酢酸エステルの還元能力が高いので、有機合成反応と
くに不斉合成反応における還元触媒として有用であり、
工業的価値が大きい。
ト酢酸エステルの還元能力が高いので、有機合成反応と
くに不斉合成反応における還元触媒として有用であり、
工業的価値が大きい。
Claims (1)
- 【請求項１】下記理化学的性質を有する新規な還元酵
素。 記 イ）作用…補酵素還元型ニコチンアミド・アデニン・ジ
ヌクレオチド・リン酸（以下、これをNADPHという）の
存在下、アルデヒド類およびケトン類を還元し、これら
と等モルのアルコール類を生成する。 ロ）基質特異性…γ−置換アセト酢酸エステルを選択的
に還元し、（Ｒ）−体の相当するアルコール類を生成す
る。また、NADPHに対し活性を有するが、NADH（還元型
ニコチンアミド・アデニン・ジヌクレオチド）に対して
は活性がない。 ハ）至適pH及び安定pH範囲…至適pHは７付近、安定pH範
囲は６〜10である。 ニ）至適温度…至適温度は60℃付近である。 ホ）温度による失活の条件…40℃では失活がなく、60℃
（pH7）で10分間で30％失活する。 ヘ）阻害及び活性化…クエルセチンで阻害され、Fe3+、
Mg2+で若干阻害される。α，α′−ジピリジルで若干活
性化される。 ト）等電点…pH4.7である。 チ）分子量…セフアデツクスＧ−100のゲル濾過法によ
れば32000であり、SDS電気泳動法によれば36500であ
る。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13967587A JP2538597B2 (ja) | 1987-06-05 | 1987-06-05 | 新規な環元酵素 |
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP13967587A JP2538597B2 (ja) | 1987-06-05 | 1987-06-05 | 新規な環元酵素 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63304979A JPS63304979A (ja) | 1988-12-13 |
| JP2538597B2 true JP2538597B2 (ja) | 1996-09-25 |
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ID=15250802
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
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| JP13967587A Expired - Fee Related JP2538597B2 (ja) | 1987-06-05 | 1987-06-05 | 新規な環元酵素 |
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| Country | Link |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2066788B1 (en) | 2006-10-02 | 2014-07-23 | Codexis, Inc. | Compositions and methods for producing stereoisomerically pure statins and synthetic intermediates therefor |
-
1987
- 1987-06-05 JP JP13967587A patent/JP2538597B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
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| JPS63304979A (ja) | 1988-12-13 |
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