JP2021511376A - 脂質ナノ粒子 - Google Patents
脂質ナノ粒子 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021511376A JP2021511376A JP2020560556A JP2020560556A JP2021511376A JP 2021511376 A JP2021511376 A JP 2021511376A JP 2020560556 A JP2020560556 A JP 2020560556A JP 2020560556 A JP2020560556 A JP 2020560556A JP 2021511376 A JP2021511376 A JP 2021511376A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- mol
- lnp
- mrna
- lipid
- lnps
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 title claims abstract description 95
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract description 22
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims abstract description 86
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 34
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims abstract description 27
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims abstract description 25
- 229930182558 Sterol Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 claims abstract description 23
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 10
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 43
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 38
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 38
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 38
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 24
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical group CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 12
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 claims description 11
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 10
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 10
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 claims description 9
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 claims description 9
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 9
- SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC SNKAWJBJQDLSFF-NVKMUCNASA-N 0.000 claims description 8
- 102100025221 CD70 antigen Human genes 0.000 claims description 8
- 101000934356 Homo sapiens CD70 antigen Proteins 0.000 claims description 8
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 claims description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 claims description 3
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000000431 campesterol Nutrition 0.000 claims description 3
- 150000001783 ceramides Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000005265 dialkylamine group Chemical group 0.000 claims description 3
- 150000001985 dialkylglycerols Chemical class 0.000 claims description 3
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 3
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 claims description 3
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 claims description 2
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N Campesterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N 0.000 claims description 2
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 claims description 2
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BDCFUHIWJODVNG-UHFFFAOYSA-N Desmosterol Natural products C1C=C2CC(O)C=CC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 BDCFUHIWJODVNG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N Haliclonasterol Natural products CC(C=CC(C)C(C)(C)C)C1CCC2C3=CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HRNVWBIKQMSFHI-UHFFFAOYSA-N Nicasterol Natural products CC1(C)C(CC)C1CC(C)C1C2(C)CCC3C4(C)CCC(O)CC4=CCC3C2CC1 HRNVWBIKQMSFHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N campesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N 0.000 claims description 2
- AVSXSVCZWQODGV-DPAQBDIFSA-N desmosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@@H](CCC=C(C)C)C)[C@@]1(C)CC2 AVSXSVCZWQODGV-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 claims description 2
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 claims description 2
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 claims description 2
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 claims description 2
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 claims 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 abstract description 12
- 238000010586 diagram Methods 0.000 abstract 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 30
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 23
- 239000002202 Polyethylene glycol Chemical class 0.000 description 21
- 229920001223 polyethylene glycol Chemical class 0.000 description 21
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 18
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 18
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 17
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 17
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 17
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 16
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 14
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 9
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 9
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol Substances OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZKVLEFBKBNUQHK-UHFFFAOYSA-N helium;molecular nitrogen;molecular oxygen Chemical compound [He].N#N.O=O ZKVLEFBKBNUQHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 7
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 7
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 5
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 5
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 229960004956 glycerylphosphorylcholine Drugs 0.000 description 4
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 4
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 4
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 4
- XLKQWAMTMYIQMG-SVUPRYTISA-N (2-{[(2r)-2,3-bis[(4z,7z,10z,13z,16z,19z)-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoyloxy]propyl phosphonato]oxy}ethyl)trimethylazanium Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CC XLKQWAMTMYIQMG-SVUPRYTISA-N 0.000 description 3
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 3
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 3
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 3
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 3
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 3
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 3
- LVNGJLRDBYCPGB-LDLOPFEMSA-N (R)-1,2-distearoylphosphatidylethanolamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[NH3+])OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC LVNGJLRDBYCPGB-LDLOPFEMSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 2
- XXKFQTJOJZELMD-JICBSJGISA-N 1,2-di-[(9Z,12Z,15Z)-octadecatrienoyl]-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CC XXKFQTJOJZELMD-JICBSJGISA-N 0.000 description 2
- DSNRWDQKZIEDDB-SQYFZQSCSA-N 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phospho-(1'-sn-glycerol) Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OC[C@@H](O)CO)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC DSNRWDQKZIEDDB-SQYFZQSCSA-N 0.000 description 2
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZDFHIJNHHMENY-UHFFFAOYSA-N Dimethyl dicarbonate Chemical compound COC(=O)OC(=O)OC GZDFHIJNHHMENY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WIHSZOXPODIZSW-KJIWEYRQSA-N PE(18:3(9Z,12Z,15Z)/18:3(9Z,12Z,15Z)) Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)CCCCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CC WIHSZOXPODIZSW-KJIWEYRQSA-N 0.000 description 2
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 2
- NJFCSWSRXWCWHV-USYZEHPZSA-N [(2R)-2,3-bis(octadec-1-enoxy)propyl] 2-(trimethylazaniumyl)ethyl phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC=COC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC=CCCCCCCCCCCCCCCCC NJFCSWSRXWCWHV-USYZEHPZSA-N 0.000 description 2
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 210000004507 artificial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 2
- VLBPIWYTPAXCFJ-XMMPIXPASA-N lysophosphatidylcholine O-16:0/0:0 Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C VLBPIWYTPAXCFJ-XMMPIXPASA-N 0.000 description 2
- 108700021021 mRNA Vaccine Proteins 0.000 description 2
- 229940126582 mRNA vaccine Drugs 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 2
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 1
- LGJMUZUPVCAVPU-ANOYILKDSA-N (3s,8r,9s,10s,13r,14s,17r)-17-[(2r,5s)-5-ethyl-6-methylheptan-2-yl]-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-ol Chemical class C1CC2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-ANOYILKDSA-N 0.000 description 1
- LZLVZIFMYXDKCN-QJWFYWCHSA-N 1,2-di-O-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC LZLVZIFMYXDKCN-QJWFYWCHSA-N 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-VYOBOKEXSA-N 1-hexadecanoyl-2-(9Z-octadecenoyl)-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-VYOBOKEXSA-N 0.000 description 1
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100036301 C-C chemokine receptor type 7 Human genes 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 101000716065 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 7 Proteins 0.000 description 1
- 101001019455 Homo sapiens ICOS ligand Proteins 0.000 description 1
- 102100034980 ICOS ligand Human genes 0.000 description 1
- 102100030703 Interleukin-22 Human genes 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- SUHOOTKUPISOBE-UHFFFAOYSA-N O-phosphoethanolamine Chemical compound NCCOP(O)(O)=O SUHOOTKUPISOBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042215 OX40 Ligand Proteins 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 229940022005 RNA vaccine Drugs 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 102100026890 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 4 Human genes 0.000 description 1
- 208000001455 Zika Virus Infection Diseases 0.000 description 1
- 208000035332 Zika virus disease Diseases 0.000 description 1
- 208000020329 Zika virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- SUTHKQVOHCMCCF-QZNUWAOFSA-N [(2r)-3-[2-aminoethoxy(hydroxy)phosphoryl]oxy-2-docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoyloxypropyl] docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoate Chemical compound CCCCCCCCCC=CC=CC=CC=CC=CC=CC(=O)OC[C@H](COP(O)(=O)OCCN)OC(=O)C=CC=CC=CC=CC=CC=CCCCCCCCCC SUTHKQVOHCMCCF-QZNUWAOFSA-N 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 230000004721 adaptive immunity Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N beta-D-ribose Chemical group OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-TXICZTDVSA-N 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- -1 cationic lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 239000013601 cosmid vector Substances 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- DNVPQKQSNYMLRS-APGDWVJJSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-APGDWVJJSA-N 0.000 description 1
- 150000002137 ergosterols Chemical class 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 108010074108 interleukin-21 Proteins 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 238000009126 molecular therapy Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000005257 nucleotidylation Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O phosphocholine Chemical compound C[N+](C)(C)CCOP(O)(O)=O YHHSONZFOIEMCP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 230000002516 postimmunization Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229940021993 prophylactic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 238000009163 protein therapy Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 229940083492 sitosterols Drugs 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 229940021747 therapeutic vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
- A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/10—Dispersions; Emulsions
- A61K9/127—Liposomes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/7105—Natural ribonucleic acids, i.e. containing only riboses attached to adenine, guanine, cytosine or uracil and having 3'-5' phosphodiester links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
RCOOは、ミリストイル、α-D-トコフェロールスクシノイル、リノレオイル及びオレオイルを含むリストから選択され、
Xは、
上記LNPが約10 mol%〜60 mol%の上記イオン性脂質を含む;
上記LNPが約15 mol%〜50 mol%の上記ステロールを含む;
上記LNPが約0.5 mol%〜10 mol%の上記PEG脂質を含む;及び/又は、
上記LNPが約5 mol%〜40 mol%の上記リン脂質を含む。
前記イオン性脂質、前記リン脂質、前記ステロール、前記PEG脂質及び好適なアルコール性溶媒を含む第1のアルコール性組成物を調製することと、
1つ以上の前記核酸及び水性溶媒を含む第2の水性組成物を調製することと、
前記第1及び第2の組成物をマイクロ流体混合装置内で以下の設定:
約0.5 ml/min〜約8 ml/min、好ましくは約1 ml/min〜4 ml/minの全流量(FR)、
約1/1〜5/1、好ましくは約2/1〜約3/1の流量比(FRR)、
を用いて混合することと、
を含む、方法を提供する。
RCOOは、ミリストイル、α-D-トコフェロールスクシノイル、リノレオイル及びオレオイルを含むリストから選択され、
Xは、
上記LNPが約35 mol%〜65 mol%の上記イオン性脂質を含む;
上記LNPが約15 mol%〜60 mol%の上記ステロールを含む;
上記LNPが約0.5 mol%〜2 mol%の上記PEG脂質を含む;及び/又は、
上記LNPが約5 mol%〜15 mol%の上記リン脂質を含む。
上記LNPが約10 mol%〜60 mol%の上記イオン性脂質を含む;
上記LNPが約15 mol%〜50 mol%の上記ステロールを含む;
上記LNPが約0.5 mol%〜10 mol%の上記PEG脂質を含む;及び/又は、
上記LNPが約5 mol%〜40 mol%の上記リン脂質を含む。
上記LNPが約40 mol%〜60 mol%の上記イオン性脂質を含む;
上記LNPが約20 mol%〜40 mol%の上記ステロールを含む;
上記LNPが約0.5 mol%〜5 mol%の上記PEG脂質を含む;及び/又は、
上記LNPが約5 mol%〜15 mol%の上記リン脂質を含む。
前記イオン性脂質、前記リン脂質、前記ステロール、前記PEG脂質及び好適なアルコール性溶媒を含む第1のアルコール性組成物を調製することと、
1つ以上の前記核酸及び水性溶媒を含む第2の水性組成物を調製することと、
前記第1及び第2の組成物をマイクロ流体混合装置内で以下の設定:
約0.5 ml/min〜約8 ml/min、好ましくは約1 ml/min〜4 ml/minの全流量(FR)、
約1/1〜5/1、好ましくは約2/1〜約3/1の流量比(FRR)、
を用いて混合することと、
を含む、方法を提供する。
この第1の実施例では、mRNA LNPの免疫原性に対する粒径の影響を評価した。そのために、同一組成の140 nm及び230 nmのサイズのmRNA LNPを調製した。LNPは、50 mol% α-D-トコフェロールヘミスクシノイル(イオン性脂質)、10 mol% DOPE、38.5 mol%コレステロール及び1.5 mol% DSG-PEG5000(PEG化脂質)から指定の脂質比(mol%)で構成されていた。LNPは、異なる流量(FR;ml/min)及び水/エタノール体積比(FRR)を用いてNano-Assemblrで作製した。140 nmのサイズのLNPはFR 4 ml/minで作製したが、230 nmのサイズのLNPはFR 1 ml/minで生成した。
本実施例では、マウスにおける静脈内投与後の異なるサイズ及び組成のOVA mRNA LNPの免疫原性を決定した。全てのLNPが、図2に規定されるような指定の脂質比(mol%)のα-D-トコフェロールヘミスクシノイル(イオン性脂質)、DOPE、コレステロール及びDSG-PEG5000で構成されていた。LNPは、同様に図2に規定されるような異なる流量(FR;ml/min)及び水/エタノール体積比(FRR)を用いてNano-Assemblrで作製した。OVA特異的CD8 T細胞のパーセンテージを免疫化の6日後にフローサイトメトリーによって定量化した。この場合も図2から極めて明らかなように、より大きなLNPの免疫原性は、より小さなLNPの免疫原性と比較してより高い。
本実施例では、マウスにおける単回静脈内投与後の異なるサイズ及び組成のOVA mRNA LNPの免疫原性を決定した。プロットは、OVA MHCIエピトープSIINFEKL(5 μg/ml)による脾細胞の再刺激後の脾細胞100万個当たりのIFN-γ分泌CD8+T細胞の数を示す。全てのLNPが、図3に規定されるような指定の脂質比(mol%)のα-D-トコフェロールヘミスクシノイル(イオン性脂質)、DOPE、コレステロール及びDSG-PEG5000で構成されていた。LNPは、同様に図3に規定されるような異なる流量(FR;ml/min)及び水/エタノール体積比(FRR)を用いてNano-Assemblrで作製した。OVA特異的CD8+T細胞のパーセンテージを免疫化の6日後にフローサイトメトリーによって定量化した。
次に、PEG化脂質を変化させた場合の影響を評価した。そのために、2つの異なる組成物をDSG-PEG5000又はDMG-PEG2000のいずれかを用いて作製した。OVA mRNA(10 μg)及びTriMix mRNA(15 μg)を含有する大型LNPの静脈内投与後のOVA特異的T細胞のパーセンテージを決定し、図4に示した。マウスを0日目及び20日目に免疫化した。OVA特異的T細胞の%を15日目及び39日目に血液サンプルで評価した。図4から分かるように、PEG化脂質のタイプは、LNPの免疫原性に影響を与えない。
本実施例では、140 nm及び230 nmのサイズのmRNA LNPを用いた反復免疫化後の小さな及び大きなLNPの免疫原性を評価した(図5)。LNPは、図5に規定されるような指定の脂質比(mol%)の50 mol% α-D-トコフェロールヘミスクシノイル(イオン性脂質)、10 mol% DOPE(リン脂質)、38 mol%コレステロール及び1.5 mol% DSG-PEG5000で構成されていた。LNPは、10 μgのOVA mRNA及び15 μgのTriMix mRNA(CD40L、CD70及びcaTLR4)を含有していた。OVA特異的CD8 T細胞応答のパーセンテージ(Percentages)を免疫化の5日後に測定した。
本実施例では、異なるサイズのFluc mRNA LNPを用いたマウスの静脈注射後の脾臓及び肝臓におけるmRNA発現を比較した(図6)。LNPは、50/10/38.5/1.5のそれぞれの脂質比のα-D-トコフェロールヘミスクシノイル(イオン性脂質)、DOPC、コレステロール及びDSG-PEG5000で構成されていた。異なるサイズのLNPを、異なるマイクロ流体混合の流量(FR1対FR4)を用いて生成した。in vivo生物発光(ph/s/cm2/sr)によって測定される脾臓対肝臓のFluc mRNAの発現比を図に示す。
本実施例では、配合された静脈内mRNA LNPが節内アプローチと比較して優れた免疫原性及び抗腫瘍効果を引き起こすことが実証される。
E7 mRNA、カラム精製、投与1回当たり10 μg
免疫化スケジュール:週3回
本実施例では、mRNA LNP配合物に対するT細胞応答が長続きし、ブースト可能であることが実証される。
3回目の免疫化の40日後のE7特異的T細胞の高い%による収縮期の延長
メモリー変換(Memory conversion)
驚くべきリコール応答:IV配合ワクチンをブーストすることができる
本実施例では、LNPのサイズの影響を実証する更なる実験を行った。
イオン性脂質/chol/DOPE/DMG-PEG2000の比率 − 50/38.5/10/1.5
3回のIV免疫化;0日目、7日目、14日目
mRNA:OVAをコードするmRNA、免疫化1回当たり10 μg
1回目の免疫化の5日後、12日後、19日後及び50日後のOVA特異的CD8 T細胞の%の評価
Reichmuth et al., 2016 - mRNA vaccine delivery using lipid nanoparticles - Therapeutic Delivery Vol. 7, No 5.
Li et al., 2015 - An Orthogonal Array Optimization of Lipid-like Nanoparticles for mRNA Delivery in Vivo -Nano Letters 15(12) pg. 8099-8107.
Thess et al., 2015 - Sequence-engineered mRNA without Chemical Nucleoside Modifications Enables an Effective Protein Therapy in Large Animals - Molecules Therapy Vol. 23, Issue 9 pg. 1456-1464.
Kauffman et al., 2016 - Materials for non-viral intracellular delivery of messenger RNA therapeutics - Journal of Controlled Release, Vol. 240, pg. 227-234.
Richner et al., 2017 - Modified mRNA vaccines protect against Zika virus infection - Cell, Vol. 168, Issue 6 pg. 1114-1125
Liang et al., 2017 - Efficient Targeting and Activation of Antigen-Presenting Cells In Vivo after Modified mRNA Vaccine Administration in Rhesus Macaques - Molecular Therapy, vol. 25 Issue 12 pg. 2635-2647.
Lee et al., 2011 - Microfluidic Mixing: A Review - Int. J. Mol. Sci. 12(5): pg. 3263-3287.
図1
% OVA-specific CD8+ T cells OVA特異的CD8+T細胞(%)
図2
% OVA-specific CD8+ T cells OVA特異的CD8+T細胞(%)
図3
IFN-γ secreting T cells/million 100万個当たりのIFN-γ分泌T細胞
図4
% OVA-specific CD8+ T cells OVA特異的CD8+T細胞(%)
Days post immunisation 免疫化後の日数
図5
% OVA specific CD8 T cells OVA特異的CD8 T細胞(%)
1st immunization 1回目の免疫化
2nd immunization 2回目の免疫化
図6
ratio spleen/liver expression 脾臓/肝臓の発現比
図7
T cell response T細胞応答
E7 specific CD8+ T cells E7特異的CD8+T細胞
#immunizations 免疫化の回数
No treatment 処理なし
Tumor volume 腫瘍体積
IV formulation X IV配合物X
Days 日数
IV formulation Z IV配合物Z
図8
Results update 最新結果
E7 specific CD8+ T Cells E7特異的CD8+T細胞
Days 日数
IV mRNA nanoparticle IV mRNAナノ粒子
Formulation 配合物
Effector/memory - day 55 エフェクター/メモリー − 55日目
% of E7 specific T cells E7特異的T細胞(%)
Effector エフェクター
Memory precursor メモリー前駆
Central Memory セントラルメモリー
図9
OVA specific CD8+ T Cells OVA特異的CD8+T細胞
Time (days) 時間(日数)
Claims (14)
- イオン性脂質と、
DOPE、DOPC及びそれらの混合物を含むリストから選択される、約5 mol%〜約15 mol%のリン脂質と、
ステロールと、
PEG脂質と、
1つ以上の核酸分子と、
を含む脂質ナノ粒子(LNP)であって、約140 nmの最小平均直径を有することを特徴とする、LNP。 - 前記ステロールがコレステロール、エルゴステロール、カンペステロール、オキシステロール、アントロステロール、デスモステロール、ニカステロール、シトステロール及びスチグマステロールを含むリストから選択され、又はコレステロールである、請求項1又は2に記載のLNP。
- 前記PEG脂質がPEG修飾ホスファチジルエタノールアミン、PEG修飾ホスファチジン酸、PEG修飾セラミド、PEG修飾ジアルキルアミン、PEG修飾ジアシルグリセロール、PEG修飾ジアルキルグリセロール及びそれらの混合物を含むリストから選択される、請求項1〜3のいずれか一項に記載のLNP。
- 約10 mol%〜60 mol%の前記イオン性脂質を含み、及び/又は約15 mol%〜50 mol%の前記ステロールを含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載のLNP。
- 前記1つ以上の核酸分子がmRNA及びDNAを含むリストから選択され、又はmRNAである、請求項1〜5のいずれか一項に記載のLNP。
- 前記1つ以上のmRNA分子が、免疫調節ポリペプチドをコードするmRNA及び/又は抗原をコードするmRNAの群から選択される、請求項6に記載のLNP。
- 前記免疫調節ポリペプチドをコードするmRNAがCD40L、CD70及びcaTLR4をコードするmRNA分子を含むリストから選択される(より広いリストを含む)、請求項6又は7に記載のLNP。
- 請求項1〜8のいずれか一項に記載の1つ以上のLNPと、許容可能な医薬担体とを含む、医薬組成物又はワクチン。
- 人間医学又は獣医学において使用される、請求項1〜8のいずれか一項に記載のLNP又は請求項9に記載の医薬組成物。
- 約140 nmの最小平均直径を有する核酸含有LNPを作製する方法であって、
イオン性脂質、リン脂質、ステロール、PEG脂質及び好適なアルコール性溶媒を含む第1のアルコール性組成物を調製する工程と、
適切なバッファーを添加した1つ以上の核酸及び水性溶媒を含む第2の水性組成物を調製する工程と、
前記第1及び第2の組成物をマイクロ流体混合装置内で以下の設定:
約0.5 ml/min〜約8 ml/min又は約1 ml/min〜4 ml/minの全流量(FR)、
約1/1〜5/1又は約2/1〜約3/1の流量比(FRR)、
を用いて混合する工程と、
を含む、方法。 - 前記アルコール性溶媒がエタノールであり、及び/又は前記水性溶媒が水である、請求項11に記載の方法。
- 哺乳動物において核酸にコードされる抗原に対する免疫応答を誘導するための請求項1〜8のいずれか一項に記載のLNP又は請求項9に記載の医薬組成物の使用。
- 癌又は感染性疾患の治療に使用される、請求項1〜8のいずれか一項に記載のLNP、又は請求項9に記載の医薬組成物若しくはワクチン。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP18152390.3 | 2018-01-18 | ||
EP18152390 | 2018-01-18 | ||
EP19150351 | 2019-01-04 | ||
EP19150351.5 | 2019-01-04 | ||
PCT/EP2019/051261 WO2019141814A1 (en) | 2018-01-18 | 2019-01-18 | Lipid nanoparticles |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2021511376A true JP2021511376A (ja) | 2021-05-06 |
JP7333563B2 JP7333563B2 (ja) | 2023-08-25 |
Family
ID=65138998
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020560556A Active JP7333563B2 (ja) | 2018-01-18 | 2019-01-18 | 脂質ナノ粒子 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11684577B2 (ja) |
EP (1) | EP3740241A1 (ja) |
JP (1) | JP7333563B2 (ja) |
CN (1) | CN111971066A (ja) |
CA (1) | CA3088485A1 (ja) |
WO (1) | WO2019141814A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPWO2021064998A1 (ja) * | 2019-10-04 | 2021-04-08 |
Families Citing this family (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BR112022011803A2 (pt) * | 2019-12-20 | 2022-08-30 | Curevac Ag | Nanopartículas de lipídio para entrega de ácidos nucleicos |
TW202139975A (zh) * | 2020-01-21 | 2021-11-01 | 比利時商eTheRNA免疫治療公司 | 脂質奈米顆粒 |
CN111467321A (zh) * | 2020-03-26 | 2020-07-31 | 深圳市新合生物医疗科技有限公司 | 一种mRNA核酸类药物胞内递送***、制备方法和应用 |
KR20230050313A (ko) * | 2020-06-11 | 2023-04-14 | 이더알엔에이 이뮤노테라피스 엔브이 | 지질 나노입자 |
US11771652B2 (en) | 2020-11-06 | 2023-10-03 | Sanofi | Lipid nanoparticles for delivering mRNA vaccines |
JP2023553343A (ja) | 2020-11-25 | 2023-12-21 | アカゲラ・メディスンズ,インコーポレイテッド | 核酸を送達するための脂質ナノ粒子および関連する使用方法 |
KR20230148325A (ko) * | 2020-12-23 | 2023-10-24 | 이더알엔에이 이뮤노테라피스 엔브이 | 이온화성 지질 |
CN113663089B (zh) * | 2021-06-25 | 2022-10-28 | 北京理工大学 | 可电离脂质纳米颗粒组合物、制备方法及应用 |
CN114149337B (zh) * | 2021-07-07 | 2022-04-29 | 天津键凯科技有限公司 | 一种用于核酸递送的新型可电离脂质及其lnp组合物 |
CN113941011A (zh) * | 2021-10-15 | 2022-01-18 | 浙江汇科泽华生物技术有限公司 | 一种含可离子化阳离子脂质的纳米脂质体颗粒及制备方法 |
CN115304756B (zh) * | 2022-01-30 | 2023-05-09 | 上海科技大学 | 一种五元脂质纳米颗粒及其制备方法和应用 |
WO2023178425A1 (en) * | 2022-03-23 | 2023-09-28 | Nanovation Therapeutics Inc. | High sterol-containing lipid nanoparticles |
TW202400189A (zh) * | 2022-05-20 | 2024-01-01 | 比利時商eTheRNA免疫治療公司 | 可離子化脂質 |
WO2024115353A1 (en) * | 2022-11-28 | 2024-06-06 | Eth Zurich | Analytical composition for monitoring disinfection |
CN116083463B (zh) * | 2022-12-16 | 2024-06-21 | 四川大学华西医院 | 一种用于增强免疫疗法效果的mRNA及其在制备mRNA疫苗中的用途 |
CN115998714B (zh) * | 2023-03-20 | 2023-06-30 | 威瑞生物科技(昆明)有限责任公司 | 一种脂质纳米颗粒、递送***及递送***的制备方法 |
CN116589595A (zh) * | 2023-05-10 | 2023-08-15 | 山东大学 | 靶向mrsa嵌合抗原受体、药物递送体、car-巨噬细胞及应用 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110165223A1 (en) * | 2008-01-02 | 2011-07-07 | The Johns Hopkins University | Antitumor Immunization by Liposomal Delivery of Vaccine to the Spleen |
WO2013073480A1 (ja) * | 2011-11-18 | 2013-05-23 | 日油株式会社 | 細胞内動態を改善したカチオン性脂質 |
JP2013538569A (ja) * | 2010-08-31 | 2013-10-17 | ノバルティス アーゲー | 免疫原をコードするrnaの送達のための小さなリポソーム |
JP2016537304A (ja) * | 2013-09-26 | 2016-12-01 | バイオンテック アーゲー | Rnaによるシェルを含む粒子 |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2008519042A (ja) * | 2004-11-03 | 2008-06-05 | ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス, インコーポレイテッド | インフルエンザワクチン接種 |
US20110111044A1 (en) * | 2008-07-31 | 2011-05-12 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Nanoparticle compositions for nucleic acids delivery system |
CN102712935B (zh) * | 2009-11-04 | 2017-04-26 | 不列颠哥伦比亚大学 | 含有核酸的脂质粒子及相关的方法 |
ES2795110T3 (es) * | 2011-06-08 | 2020-11-20 | Translate Bio Inc | Lípidos escindibles |
PL2717893T3 (pl) * | 2011-06-08 | 2019-12-31 | Translate Bio, Inc. | Kompozycje nanocząstek lipidowych i sposoby do dostarczania mRNA |
US20140363493A1 (en) * | 2013-06-10 | 2014-12-11 | Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University | LIPID NANOPARTICLES FOR TARGETED siRNA DELIVERY |
CA2975371C (en) * | 2015-01-30 | 2024-02-13 | Nof Corporation | Cationic lipid for nucleic acid delivery |
JP6990176B2 (ja) * | 2015-10-05 | 2022-02-03 | モデルナティエックス インコーポレイテッド | メッセンジャーリボ核酸薬物の治療投与のための方法 |
WO2017070624A1 (en) * | 2015-10-22 | 2017-04-27 | Modernatx, Inc. | Tropical disease vaccines |
WO2017192470A1 (en) * | 2016-05-03 | 2017-11-09 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Combination therapy of anti-il-10 antibody and compositions comprising lipid nanoparticles and tlr9 agonist cpg oligonucleotides |
WO2019077053A1 (en) * | 2017-10-20 | 2019-04-25 | Biontech Rna Pharmaceuticals Gmbh | PREPARATION AND STORAGE OF APPROPRIATE LIPOSOMAL RNA FORMULATIONS FOR THERAPY |
-
2019
- 2019-01-18 JP JP2020560556A patent/JP7333563B2/ja active Active
- 2019-01-18 CN CN201980015578.5A patent/CN111971066A/zh active Pending
- 2019-01-18 CA CA3088485A patent/CA3088485A1/en active Pending
- 2019-01-18 WO PCT/EP2019/051261 patent/WO2019141814A1/en unknown
- 2019-01-18 EP EP19701206.5A patent/EP3740241A1/en active Pending
- 2019-01-18 US US16/961,843 patent/US11684577B2/en active Active
-
2023
- 2023-05-11 US US18/196,235 patent/US20240016738A1/en active Pending
Patent Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20110165223A1 (en) * | 2008-01-02 | 2011-07-07 | The Johns Hopkins University | Antitumor Immunization by Liposomal Delivery of Vaccine to the Spleen |
JP2013538569A (ja) * | 2010-08-31 | 2013-10-17 | ノバルティス アーゲー | 免疫原をコードするrnaの送達のための小さなリポソーム |
WO2013073480A1 (ja) * | 2011-11-18 | 2013-05-23 | 日油株式会社 | 細胞内動態を改善したカチオン性脂質 |
JP2016537304A (ja) * | 2013-09-26 | 2016-12-01 | バイオンテック アーゲー | Rnaによるシェルを含む粒子 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
AUDE BONEHILL ET AL: "Enhancing the T-cell Stimulatory Capacity of Human Dendritic Cells by Co-electroporation With CD40L,", MOLECULAR THERAPY, vol. 16, no. 6, JPN7022005076, June 2008 (2008-06-01), pages 1170 - 1180, XP009108460, ISSN: 0004981427, DOI: 10.1038/mt.2008.77 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPWO2021064998A1 (ja) * | 2019-10-04 | 2021-04-08 | ||
JP7014469B2 (ja) | 2019-10-04 | 2022-02-01 | 国立大学法人北海道大学 | 3次元流路構造体およびこれを用いたナノ粒子の製造方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
WO2019141814A1 (en) | 2019-07-25 |
US20240016738A1 (en) | 2024-01-18 |
US11684577B2 (en) | 2023-06-27 |
CN111971066A (zh) | 2020-11-20 |
CA3088485A1 (en) | 2019-07-25 |
JP7333563B2 (ja) | 2023-08-25 |
EP3740241A1 (en) | 2020-11-25 |
US20200345641A1 (en) | 2020-11-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7333563B2 (ja) | 脂質ナノ粒子 | |
Guevara et al. | Advances in lipid nanoparticles for mRNA-based cancer immunotherapy | |
US11235069B2 (en) | Use of liposomes in a carrier comprising a continuous hydrophobic phase for delivery of polynucleotides in vivo | |
CN112384205B (zh) | 信使rna疫苗及其用途 | |
JP4535211B2 (ja) | コクリエート送達ビヒクル | |
JP6703982B2 (ja) | 脂質およびリポソームの安定な製剤 | |
JP2023517275A (ja) | 脂質ナノ粒子 | |
JP2023545886A (ja) | 脂質ナノ粒子 | |
Senti et al. | mRNA delivery systems for cancer immunotherapy: lipid nanoparticles and beyond | |
EP4322925A2 (en) | Rna compositions comprising a buffer substance and methods for preparing, storing and using the same | |
TW202304505A (zh) | 脂質奈米粒子 | |
WO2021175405A1 (en) | Composite rna particles |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20211208 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20211208 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711 Effective date: 20220805 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20220805 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20220930 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20221027 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230110 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20230206 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230525 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20230608 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20230608 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20230627 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230727 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230804 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7333563 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |