JP2021167348A - 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 - Google Patents
免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2021167348A JP2021167348A JP2021120059A JP2021120059A JP2021167348A JP 2021167348 A JP2021167348 A JP 2021167348A JP 2021120059 A JP2021120059 A JP 2021120059A JP 2021120059 A JP2021120059 A JP 2021120059A JP 2021167348 A JP2021167348 A JP 2021167348A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- spg
- complex
- antigen
- type
- oligodeoxynucleotide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 title abstract description 46
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 title abstract description 7
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 abstract description 140
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 45
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 abstract description 43
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 abstract description 26
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 abstract description 21
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 20
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 13
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 abstract description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 10
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 abstract description 7
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 abstract description 6
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 abstract description 6
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 abstract description 6
- 208000010362 Protozoan Infections Diseases 0.000 abstract description 2
- KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyadenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 0.000 abstract 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract 1
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 130
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 106
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 106
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 103
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 76
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 76
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 61
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 60
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 43
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 43
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 42
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 42
- 102100040840 C-type lectin domain family 7 member A Human genes 0.000 description 36
- 108010025838 dectin 1 Proteins 0.000 description 36
- 102100021502 Intraflagellar transport protein 122 homolog Human genes 0.000 description 34
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 28
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 27
- 239000002585 base Substances 0.000 description 26
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 24
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 24
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 23
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 23
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 22
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 22
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 22
- 229920002305 Schizophyllan Polymers 0.000 description 21
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 20
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 20
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 20
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 20
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 20
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 19
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 19
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 19
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 19
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 description 19
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 19
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 18
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 18
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 17
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 17
- 230000000240 adjuvant effect Effects 0.000 description 17
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 17
- OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N n-methyl-1-(2-naphthalen-1-ylsulfanylphenyl)methanamine Chemical compound CNCC1=CC=CC=C1SC1=CC=CC2=CC=CC=C12 OHDXDNUPVVYWOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 17
- 210000005134 plasmacytoid dendritic cell Anatomy 0.000 description 17
- WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N (2r,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-4-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-6-[[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxymethyl]oxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 WDQLRUYAYXDIFW-RWKIJVEZSA-N 0.000 description 16
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 16
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 15
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 15
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 15
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 15
- 239000012646 vaccine adjuvant Substances 0.000 description 15
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 14
- 229940124931 vaccine adjuvant Drugs 0.000 description 14
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 13
- 102000008235 Toll-Like Receptor 9 Human genes 0.000 description 13
- 108010060818 Toll-Like Receptor 9 Proteins 0.000 description 13
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 12
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 12
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 description 12
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 11
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 11
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 101500027983 Rattus norvegicus Octadecaneuropeptide Proteins 0.000 description 10
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 10
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 10
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 9
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 description 9
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 description 9
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 9
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 9
- 102100032855 Sialoadhesin Human genes 0.000 description 9
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 230000011488 interferon-alpha production Effects 0.000 description 9
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 108010029176 Sialic Acid Binding Ig-like Lectin 1 Proteins 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 8
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 8
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 8
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- FEBUJFMRSBAMES-UHFFFAOYSA-N 2-[(2-{[3,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-phosphanyloxan-4-yl]oxy}-3,5-dihydroxy-6-({[3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy}methyl)oxan-4-yl)oxy]-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl phosphinite Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(OC2C(C(OP)C(O)C(CO)O2)O)C(O)C(OC2C(C(CO)OC(P)C2O)O)O1 FEBUJFMRSBAMES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 7
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 7
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 7
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 6
- 229920002558 Curdlan Polymers 0.000 description 6
- 239000001879 Curdlan Substances 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 6
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 6
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 6
- 229940078035 curdlan Drugs 0.000 description 6
- 235000019316 curdlan Nutrition 0.000 description 6
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 6
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 6
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 6
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 6
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 6
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 5
- 230000005867 T cell response Effects 0.000 description 5
- ACSIXWWBWUQEHA-UHFFFAOYSA-N clodronic acid Chemical compound OP(O)(=O)C(Cl)(Cl)P(O)(O)=O ACSIXWWBWUQEHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229960002286 clodronic acid Drugs 0.000 description 5
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 5
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 5
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 5
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 5
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 5
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- 102100040839 C-type lectin domain family 6 member A Human genes 0.000 description 4
- 101710125370 C-type lectin domain family 6 member A Proteins 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 229920001503 Glucan Polymers 0.000 description 4
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 4
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 4
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 241000144282 Sigmodon Species 0.000 description 4
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 4
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical group NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 4
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 4
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 4
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 4
- 230000017306 interleukin-6 production Effects 0.000 description 4
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 4
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 4
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 4
- FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N (2s,3r,4s,5s,6r)-2-[(2r,4r,5r,6s)-4,5-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-[(2r,4r,5r,6s)-4,5,6-trihydroxy-2-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]oxyoxan-3-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-3,4,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1[C@@H](CO)O[C@@H](OC2[C@H](O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O FYGDTMLNYKFZSV-URKRLVJHSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 3
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 3
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 3
- 229920000392 Zymosan Polymers 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 3
- 210000004979 bone marrow derived macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 3
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 3
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 3
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 3
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 3
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 3
- 230000014828 interferon-gamma production Effects 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000011809 primate model Methods 0.000 description 3
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 229940036185 synagis Drugs 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 3
- 230000014567 type I interferon production Effects 0.000 description 3
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 3
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- DBTMGCOVALSLOR-DEVYUCJPSA-N (2s,3r,4s,5r,6r)-4-[(2s,3r,4s,5r,6r)-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)-4-[(2s,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,5-triol Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](CO)O[C@H](O)[C@@H]2O)O)O[C@H](CO)[C@H]1O DBTMGCOVALSLOR-DEVYUCJPSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100032912 CD44 antigen Human genes 0.000 description 2
- 101100024001 Caenorhabditis elegans moma-1 gene Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 241000709721 Hepatovirus A Species 0.000 description 2
- 101000868273 Homo sapiens CD44 antigen Proteins 0.000 description 2
- 101000959820 Homo sapiens Interferon alpha-1/13 Proteins 0.000 description 2
- 101000800479 Homo sapiens Toll-like receptor 9 Proteins 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- 241001500351 Influenzavirus A Species 0.000 description 2
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 2
- 229920001543 Laminarin Polymers 0.000 description 2
- 239000005717 Laminarin Substances 0.000 description 2
- 240000000599 Lentinula edodes Species 0.000 description 2
- 239000012097 Lipofectamine 2000 Substances 0.000 description 2
- 108010019759 OVA 323-339 Proteins 0.000 description 2
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- 206010061603 Respiratory syncytial virus infection Diseases 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 2
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000002983 circular dichroism Methods 0.000 description 2
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 2
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 2
- 102000045710 human TLR9 Human genes 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 2
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 2
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 description 2
- 230000004941 influx Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000018711 interleukin-13 production Effects 0.000 description 2
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 2
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 2
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000021633 leukocyte mediated immunity Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 238000004226 microchip electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 2
- INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N pibenzimol Chemical compound C1CN(C)CCN1C1=CC=C(N=C(N2)C=3C=C4NC(=NC4=CC=3)C=3C=CC(O)=CC=3)C2=C1 INAAIJLSXJJHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical class OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 2
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 1
- BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol Chemical compound FC(F)(F)C(O)C(F)(F)F BYEAHWXPCBROCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIJIUJYANDSEKG-UHFFFAOYSA-N 2,4,4-trimethylpentan-2-amine Chemical class CC(C)(C)CC(C)(C)N QIJIUJYANDSEKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MVDSFPIEJILRME-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(4-sulfophenyl)propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)(C)C1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 MVDSFPIEJILRME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-3-(3-oxo-1h-2-benzofuran-1-yl)-1h-pyrimidine-2,4-dione Chemical compound O=C1C(F)=CNC(=O)N1C1C2=CC=CC=C2C(=O)O1 LHEJDBBHZGISGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000009746 Adult T-Cell Leukemia-Lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000016683 Adult T-cell leukemia/lymphoma Diseases 0.000 description 1
- 208000035285 Allergic Seasonal Rhinitis Diseases 0.000 description 1
- 241000004176 Alphacoronavirus Species 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 1
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 description 1
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100338243 Caenorhabditis elegans hil-6 gene Proteins 0.000 description 1
- BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L Carbenoxolone sodium Chemical compound [Na+].[Na+].C([C@H]1C2=CC(=O)[C@H]34)[C@@](C)(C([O-])=O)CC[C@]1(C)CC[C@@]2(C)[C@]4(C)CC[C@@H]1[C@]3(C)CC[C@H](OC(=O)CCC([O-])=O)C1(C)C BQENDLAVTKRQMS-SBBGFIFASA-L 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 101800004637 Communis Proteins 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N Dibenzylamine Chemical class C=1C=CC=CC=1CNCC1=CC=CC=C1 BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical class C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000010772 Dog disease Diseases 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001115402 Ebolavirus Species 0.000 description 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000991587 Enterovirus C Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical class NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060002716 Exonuclease Proteins 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 101710162577 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Proteins 0.000 description 1
- 102100020715 Fms-related tyrosine kinase 3 ligand protein Human genes 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 101000932480 Homo sapiens Fms-related tyrosine kinase 3 ligand Proteins 0.000 description 1
- 241000714260 Human T-lymphotropic virus 1 Species 0.000 description 1
- 102100022297 Integrin alpha-X Human genes 0.000 description 1
- 241000710842 Japanese encephalitis virus Species 0.000 description 1
- AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N L-Ornithine Chemical class NCCC[C@H](N)C(O)=O AHLPHDHHMVZTML-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical class NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 241000222722 Leishmania <genus> Species 0.000 description 1
- 241000186781 Listeria Species 0.000 description 1
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102100028123 Macrophage colony-stimulating factor 1 Human genes 0.000 description 1
- 241000711386 Mumps virus Species 0.000 description 1
- 101001044384 Mus musculus Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 description 1
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical class CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 1
- 241001263478 Norovirus Species 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Propanedioic acid Natural products OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000222481 Schizophyllum commune Species 0.000 description 1
- 206010048908 Seasonal allergy Diseases 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 101150045565 Socs1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000058018 Suppressor of Cytokine Signaling 1 Human genes 0.000 description 1
- 108700027336 Suppressor of Cytokine Signaling 1 Proteins 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical group OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000710772 Yellow fever virus Species 0.000 description 1
- ABUBSBSOTTXVPV-UHFFFAOYSA-H [U+6].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O Chemical compound [U+6].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O.CC([O-])=O ABUBSBSOTTXVPV-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 201000006966 adult T-cell leukemia Diseases 0.000 description 1
- 238000012382 advanced drug delivery Methods 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 230000001270 agonistic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002924 anti-infective effect Effects 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 150000001483 arginine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical class [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N benzathine Chemical class C=1C=CC=CC=1CNCCNCC1=CC=CC=C1 JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001815 biotherapy Methods 0.000 description 1
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000030570 cellular localization Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229940121657 clinical drug Drugs 0.000 description 1
- 150000001868 cobalt Chemical class 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 238000004891 communication Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 150000001879 copper Chemical class 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000004665 defense response Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical class OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000005332 diethylamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K dioxido-sulfanylidene-sulfido-$l^{5}-phosphane Chemical compound [O-]P([O-])([S-])=S NAGJZTKCGNOGPW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000010218 electron microscopic analysis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004351 endosome localization Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N ethanesulfonic acid Chemical class CCS(O)(=O)=O CCIVGXIOQKPBKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 102000013165 exonuclease Human genes 0.000 description 1
- 239000013613 expression plasmid Substances 0.000 description 1
- 201000010255 female reproductive organ cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000005699 fluoropyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 150000002301 glucosamine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 150000002304 glucoses Chemical class 0.000 description 1
- 150000002306 glutamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 150000002332 glycine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000002357 guanidines Chemical class 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 150000004678 hydrides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003840 hydrochlorides Chemical class 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000004073 interleukin-2 production Effects 0.000 description 1
- 244000000056 intracellular parasite Species 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 210000004731 jugular vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000011813 knockout mouse model Methods 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-M methanesulfonate group Chemical class CS(=O)(=O)[O-] AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001000 micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 150000002780 morpholines Chemical class 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- QPUKANZXOGADOB-UHFFFAOYSA-N n-dodecyl-n-methylnitrous amide Chemical compound CCCCCCCCCCCCN(C)N=O QPUKANZXOGADOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002815 nickel Chemical class 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000001293 nucleolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 229960000402 palivizumab Drugs 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229940023041 peptide vaccine Drugs 0.000 description 1
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical class OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- NIXKBAZVOQAHGC-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonic acid Chemical compound OS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 NIXKBAZVOQAHGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 150000004885 piperazines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003495 polar organic solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 229940023143 protein vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000036647 reaction Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 108010038379 sargramostim Chemical class 0.000 description 1
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 201000004409 schistosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- WFWLQNSHRPWKFK-ZCFIWIBFSA-N tegafur Chemical compound O=C1NC(=O)C(F)=CN1[C@@H]1OCCC1 WFWLQNSHRPWKFK-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- 229960001674 tegafur Drugs 0.000 description 1
- QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N tetramethylammonium Chemical class C[N+](C)(C)C QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940044655 toll-like receptor 9 agonist Drugs 0.000 description 1
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 125000002827 triflate group Chemical class FC(S(=O)(=O)O*)(F)F 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000009777 vacuum freeze-drying Methods 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 229940051021 yellow-fever virus Drugs 0.000 description 1
- 150000003751 zinc Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/7125—Nucleic acids or oligonucleotides having modified internucleoside linkage, i.e. other than 3'-5' phosphodiesters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/155—Paramyxoviridae, e.g. parainfluenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
- A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
- A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
- A61K47/6931—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer
- A61K47/6939—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being a polysaccharide, e.g. starch, chitosan, chitin, cellulose or pectin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/117—Nucleic acids having immunomodulatory properties, e.g. containing CpG-motifs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55583—Polysaccharides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/17—Immunomodulatory nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3519—Fusion with another nucleic acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
- C12N2320/31—Combination therapy
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/18011—Paramyxoviridae
- C12N2760/18511—Pneumovirus, e.g. human respiratory syncytial virus
- C12N2760/18534—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Virology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
【解決手段】ヒト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチド及びその3’側に配置されたポリ
デオキシアデニル酸を含むオリゴヌクレオチドと、β−1,3−グルカンとを含む複合体を
含有する医薬組成物であって、
(1)ウイルス感染症、癌、アレルギー疾患、細胞内寄生性原虫又は細菌感染症の予防又は治療、あるいは
(2)免疫賦活化
のための、医薬組成物。
【選択図】なし
Description
約20塩基対)、一本鎖の合成DNA断片であって、Toll様受容体9(TLR9)の強力なアゴニ
ストであり、樹状細胞(DCs)及びB細胞を活性化して、I型インターフェロン(IFNs)
及び炎症性サイトカインを産生させ(非特許文献1、2)、細胞傷害性Tリンパ球(CTL)反応を含む、Th1型の液性及び細胞性免疫反応のアジュバントとして作用する(非特許文
献3、4)。そこで、CpG ODNは、感染症、癌、喘息及び花粉症に対して可能性のある免
疫療法剤とみなされてきた(非特許文献2、5)。
)骨格及びホスホロチオエート(PS)ポリGテイルと共に1つの回文構造のCpGモチーフを
含み、形質細胞様DCs(pDCs)を活性化して大量のIFN-αを産生させるが、pDC成熟化やB
細胞活性化を誘導できない(非特許文献7、8)。他の3つの型のODNは、PS骨格からな
る。K型(B型とも呼ばれる)CpG ODNは、典型的には、非回文構造の、複数のCpGモチーフを含有し、B細胞を強力に活性化してIL-6を産生させ、pDCsを活性化して成熟化させるが
、ほとんどIFN−αを産生しない(非特許文献8、9)。近年、開発されたC型及びP型のCpG ODNはそれぞれ1つ及び2つの回文構造CpG配列を含有しており、双方ともK型の様にB細
胞を活性化させ、D型の様にpDCsを活性化させることができるが、P型CpG ODNと比較して
、C型CpG ODNは、IFN-α産生をより弱く誘導する(非特許文献10−12)。特許文献1に、多数の優れたK型 CpG ODNが記載されている。
ン塩基対、及びシス回文構造部位とトランス回文構造部位との間のワトソン−クリック塩基対、という高次構造をそれぞれ形成することが示されており、これらはpDCsによる強力なIFN-α産生に必要である(非特許文献12−14)。このような高次構造は初期エンドソームへの局在化やTLR9を介する情報伝達に必要であるようだが、これらは産物の多型性及び沈殿の影響を受け、その結果その臨床応用を妨げている(非特許文献15)。従って、K型及びC型CpG ODNのみが、ヒト用の免疫療法剤及びワクチンアジュバントとして一般
的に利用可能である(非特許文献16及び17)。K型CpG ODNは、ヒト臨床試験において、感染症及び癌を標的とするワクチンの免疫原性を高めるが(非特許文献6、16)、最適なアジュバント効果のためには、抗原とK型CpG ODNとの間の化学的及び物理的連結が必要である。これらの結果は、4つの型(K、D、P、及びC)のCpG ODNには長所及び短所が
あることを示しており、アグリゲーションすることなく、B細胞及びpDCsの両方を活性化
する「オール・イン・ワン」CpG ODNの開発が期待されている。
0年に亘り認可されている医薬である(非特許文献18)。同様に、シイタケ由来の可溶性β−1,3−グルカンであるレンチナン(LNT)は、1985年に承認された医薬であり、手術不能および再発胃癌患者に対しフルオロピリミジン系薬剤との併用で使用されている(非特許文献19、20)。β−1,3−グルカンは、ポリデオキシアデニル酸(dA)と三
重螺旋構造の複合体を形成することが示されている(非特許文献21)。
溶性複合体の遺伝子キャリアとしての使用が開示されている。これらの文献には、該複合体を形成することにより、遺伝子のアンチセンス作用及び核酸分解酵素(ヌクレアーゼ)への耐性作用が高められることが記載されている。
剤)として用いることにより、CpG配列を含み、リン酸ジエステル結合をホスホロチオエ
ート結合又はホスホロジチオエート結合に置換した免疫刺激性オリゴヌクレオチドの作用が高められることが開示されている。
側鎖を有するβ−1,3−グルカンとからなることを特徴とする免疫刺激性複合体が記載さ
れている。
ポリ(dA)を連結させたマウス及びヒト化したCpG ODNが、サイトカイン産生を増強し、インフルエンザワクチンアジュバントやTh2細胞関連疾患の予防または治療剤として作用す
ることを示した(非特許文献22、23、特許文献7)。K型及びD型のそれぞれのCpGの5’末端にポリ(dA)を付加し、SPGと複合体を形成すると、それぞれK型及びD型の特性を
維持しつつ、その活性が増強された。しかしながら、より効果的で、費用効率が高い、前臨床及び臨床開発へ向けて、CpG-SPG複合体の高収率を達成することが困難であった。近
年、CpG ODNにホスホロチオエート結合を有するポリ(dA)を連結すると、複合体形成がほとんど100%にまで上昇することが示された(非特許文献24)。しかしながら、最適なヒト化CpG配列を同定し、4つの型のCpG ODNの「オール・イン・ワン」活性を得るための因子を最適化するための綿密な試験はなされていない。
疫賦活剤を提供することである。
型CpG ODN及びレンチナン(LNT)を含む新規の複合体K3-LNTの作製にも成功した。K3-SPG, K3-LNTはD型CpG ODN配列を有していないにも係わらず、K型CpG ODNに特有の免疫賦活活性(例えば、B細胞(好ましくは、ヒトB細胞)を活性化してIL-6を産生させる活性)と、D
型CpG ODNに特有の免疫賦活活性(例えば、形質細胞様樹状細胞を活性化してIFN-αを産
生させる活性)とを併せ持っていた。更に、K3-LNT、及びK3-SPGは強力なワクチンアジュバント活性を有しており、抗原とともに免疫接種すると、該抗原特異的な液性免疫及び細胞性免疫の両方を誘導し、実際、RSVウイルス又はインフルエンザウイルスに対し非常に
強い感染防御効果を示した。これらの知見に基づいて更に検討を進め、本発明を完成した。
[1]ヒト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチド及びポリデオキシアデニル酸を含む、オリゴデオキシヌクレオチドであって、ポリデオキシアデニル酸が、ヒト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチドの3’側に配置されている、オリゴデオキシヌクレオチド。
[2]ヒト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチドが、10ヌクレオチド以上の長さであり、且つ式:
、N5及びN6はいかなるヌクレオチドであってもよい)
で表されるヌクレオチド配列を含む、[1]に記載のオリゴデオキシヌクレオチド。
[3]ヒト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチドが、配列番号1で表されるヌクレオチド配列からなる、[1]又は[2]に記載のオリゴデオキシヌクレオチド。
[4]オリゴデオキシヌクレオチドのリン酸ジエステル結合の一部又は全てがホスホロチオエート結合で置換されている、[1]〜[3]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド。
[5]オリゴデオキシヌクレオチドのリン酸ジエステル結合の全てがホスホロチオエート結合により置換されている、[4]に記載のオリゴデオキシヌクレオチド。
[6]ポリデオキシアデニル酸の長さが、20〜60ヌクレオチド長である、[1]〜[5]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド。
[7][1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド及びβ−1, 3−グルカンを含有する複合体。
[8]β−1, 3−グルカンがレンチナン、シゾフィラン、スクレログルカン、カードラン、パーキマン、グリホラン、又はラミナランである[7]に記載の複合体。
[9]β−1, 3−グルカンがレンチナン、シゾフィラン又はスクレログルカンである[8]に記載の複合体。
[10]下記(i)に記載のオリゴデオキシヌクレオチド、及び(ii)に記載のβ−1, 3
−グルカンからなる複合体。
(i)配列番号1で表されるヌクレオチド配列からなるオリゴデオキシヌクレオチドの3’側に20〜60ヌクレオチド長のポリデオキシアデニル酸が結合し、かつリン酸ジエステル結合の全てがホスホロチオエート結合により置換されているオリゴデオキシヌクレオチド
(ii)レンチナン又はシゾフィラン
[11]三重螺旋構造状のものである、[7]〜[10]のいずれかに記載の複合体。
[12]B細胞を活性化してIL-6を産生させる活性、及び樹状細胞を活性化してIFN-αを
産生させる活性を有する、[7]〜[11]のいずれかに記載の複合体。
[13][1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[7]〜[12]のいずれかに記載の複合体を含む、医薬組成物。
[14]ウイルス感染症、癌、アレルギー疾患、細胞内寄生性原虫又は細菌感染症の予防又は治療のための、[13]に記載の医薬組成物。
[15]ウイルス感染症の予防又は治療のための、[14]に記載の医薬組成物。
[16]ウイルス感染症がRSウイルス又はインフルエンザウイルス感染症である[15]に記載の医薬組成物。
[17][7]〜[12]のいずれかに記載の複合体を含む、I型及び/又はII型インタ
ーフェロン産生誘導剤。
[18][1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[7]〜[12]のいずれかに記載の複合体を含む、免疫賦活剤。
[19]ワクチンアジュバントである、[18]の免疫賦活剤。
[20][1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[7]〜[12]のいずれかに記載の複合体を含む、ウイルス感染症、癌、アレルギー疾患、細胞内寄生性原虫又は細菌感染症の予防又は治療剤。
[21]ウイルス感染症がRSウイルス又はインフルエンザウイルス感染症である[20]に記載の予防又は治療剤。
[22]医薬組成物の製造のための、[1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[7]〜[12]のいずれかに記載の複合体の使用。
[23]医薬組成物が、ウイルス感染症、癌、アレルギー疾患、細胞内寄生性原虫又は細菌感染症の予防又は治療のための医薬組成物である、[22]に記載の使用。
[24]ウイルス感染症がRSウイルス又はインフルエンザウイルス感染症である、[23]に記載の使用。
[25][1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[7]
〜[12]のいずれかに記載の複合体の薬理的有効量を温血動物に投与することを含む、当該温血動物における疾患の治療もしくは予防のための方法。
[26]疾患が、ウイルス感染症、癌、アレルギー疾患、細胞内寄生性原虫又は細菌感染症である、[25]に記載の方法。
[27]ウイルス感染症がRSウイルス又はインフルエンザウイルス感染症である、[26]に記載の方法。
[28]温血動物がヒトである、[25]〜[27]のいずれかに記載の方法。
[29][1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[7]〜[12]のいずれかに記載の複合体の薬理的有効量を温血動物に投与することを含む、当該温血動物における防御免疫反応を誘導する方法。
[30]ウイルス感染症、癌、アレルギー疾患、細胞内寄生性原虫又は細菌感染症の治療又は予防において使用するための、[1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[7]〜[12]のいずれかに記載の複合体。
[31]ウイルス感染症がRSウイルス又はインフルエンザウイルス感染症である、[30]に記載のオリゴデオキシヌクレオチド又は複合体。
[32](a)[1]〜[6]のいずれかに記載のオリゴデオキシヌクレオチド、或いは[
7]〜[12]のいずれかに記載の複合体、及び
(b) 抗原
を含む、医薬組成物。
[33]該抗原に対する免疫反応を誘導するための、[32]に記載の組成物。
[34]抗原が病原体由来の抗原である、[33]に記載の組成物。
[35]病原体の感染症の予防又は治療用である、[34]に記載の組成物。
[36]病原体がウイルスである、[35]に記載の組成物。
[37]ウイルスがRSウイルス又はインフルエンザウイルスである、[36]に記載の組成物。
型CpG ODNに特有の免疫賦活活性とを併せ持つ。更に、本発明の複合体は強力なワクチン
アジュバント活性を有しており、本発明の複合体を抗原とともに免疫接種すると、該抗原特異的な液性免疫及び細胞性免疫の両方を刺激し、非常に強い感染防御効果を示す。従って、本発明の複合体は、免疫賦活剤やワクチンアジュバントとして有用である。
本発明は、K型CpGオリゴデオキシヌクレオチド及びポリデオキシアデニル酸(dA)を含む、オリゴデオキシヌクレオチド(以下、本発明のオリゴデオキシヌクレオチドと称する。)を提供するものである。
本発明のオリゴデオキシヌクレオチドにはリン酸ジエステル結合が修飾(例えば、一部又は全てのリン酸ジエステル結合がホスホロチオエート結合により置換)されているものを含む。
本発明のオリゴデオキシヌクレオチドは薬学的に許容可能な塩を含む。
なお、本明細書においてオリゴデオキシヌクレオチドとODNは同義である。また、「ヒ
ト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチド(CpG ODN)」と、「ヒト化K型CpGオリゴデオキ
シヌクレオチド(CpG ODN)残基」とは末尾の用語「残基」の有無に関わらず同義であり、
交換可能に用いられる。更に、ポリデオキシアデニル酸とポリデオキシアデノシン酸(残基)は同義である。用語「残基」は、より大きな分子量の化合物の部分構造を意味するが、本明細書中、「ヒト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチド(CpG ODN)」が、独立した
分子を意味するか、より大きな分子量の化合物の部分構造を意味するかは、当業者であれば、文脈から容易に理解可能である。「ポリデオキシアデニル酸」等、本発明のオリゴデオキシヌクレオチドに含まれる他の部分構造に関する用語についても、同様である。
を含有する一本鎖DNAであり、TLR9のアゴニストである。CpG ODNには、骨格配列及び免疫賦活特性がそれぞれ異なる、K型(B型とも呼ばれる)、D型(A型とも呼ばれる)、C型及
びP型の4つの型がある(Advanced drug delivery reviews 61, 195-204 (2009))。本発
明のオリゴデオキシヌクレオチドは、これらのうちK型CpG ODNを含む。
型CpG ODNに特有の免疫賦活活性(例えば、ヒトB細胞を活性化してIL-6を産生させる活性)を有する。
で表されるヌクレオチド配列を含む。
クレオチドであっても良い。
む非回文構造を含有する。更に好適に用いられるK型CpG ODNは1つまたは複数のCpGモチ
ーフを含む非回文構造からなる。
する。また、多くのケースにおいて、一つのヒト化K型CpG ODN中にこの4塩基のCpGモチ
ーフが2又は3個含まれる。従って、好ましい態様において、本発明のオリゴデオキシヌクレオチドに含まれるK型CpG ODNは、少なくとも1個、より好ましくは2以上、更に好ましくは2又は3個、TCGA又はTCGTからなる4塩基のCpGモチーフを含む。該K型CpG ODNが
2又は3個の4塩基のCpGモチーフを有する場合、これらの4塩基のCpGモチーフは同一であっても異なっていてもよい。ただし、ヒトTLR9に対するアゴニスト活性を有する限り、特に限定されない。
クレオチド長)である。K型CpG ODNの長さは、更に好ましくは30ヌクレオチド長以下(例えば、10-25ヌクレオチド長)である。K型CpG ODNの長さは、最も好ましくは、12-25ヌクレオチド長である。
ン、又はシゾフィラン)鎖とともに三重螺旋構造を形成するのに十分な長さであれば特に限定されるものではないが、安定な三重螺旋構造を形成する観点からは、通常20ヌクレオチド長以上、好ましくは40ヌクレオチド長以上、より好ましくは60ヌクレオチド長以上である。ポリdAは、長ければ長いほどβ−1,3−グルカンと安定な三重螺旋構造を形成する
ので、理論的には上限はないが、長すぎると、オリゴデオキシヌクレオチドの合成時の長さにバラつきが生じる原因となるので、通常、100ヌクレオチド長以下、好ましくは80以
下である。一方、前記安定な三重螺旋構造の形成に加え、単位量のβ−1,3−グルカンあ
たりに結合する本発明のオリゴデオキシヌクレオチド量を増大させ、且つオリゴデオキシヌクレオチドの合成時の長さのばらつきの回避、複合化効率の観点からは、ポリdAの長さは、好ましくは、20〜60ヌクレオチド長(具体的には、20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59又は60ヌクレオチド長 )、より好
ましくは、30〜50ヌクレオチド長(30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50ヌクレオチド長)、最も好ましくは、30〜45ヌクレオチド長(30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45ヌクレオチド長)である。特に、30ヌクレオチド長以上の場合、良好な複合化効率を示す。本発明のオリゴデオキシヌクレオチドは、ポリdAを含むことにより、2本のシゾフィラン鎖とと
もに三重螺旋構造を形成する活性を有する。なお、ポリデオキシアデニル酸を「ポリ(dA)」又は「poly(dA)」と表記することもある。
ることを特徴とする。この配置により、本発明の複合体(詳細は下に述べる)が、K型CpG
ODNに特有の免疫賦活活性に加えて、D型CpG ODNに特有の免疫賦活活性を有することとなる。
せる活性、及び樹状細胞を活性化してIFN-αを産生させる活性)を有する限り、特に限定
されないが、通常1〜10ヌクレオチド長、好ましくは1〜5ヌクレオチド長、より好ましくは1〜3ヌクレオチド長である。最も好ましくは、K型CpG ODNとポリdAとが、直接共有結合により連結される。
せる活性)を有する限り、特に限定されないが、通常1〜10ヌクレオチド長、好ましくは1〜5ヌクレオチド長、より好ましくは1〜3ヌクレオチド長である。
及び/又は3’末端の付加的なヌクレオチド配列を含まない。即ち、本発明のオリゴデオ
キシヌクレオチドは、好ましくは、K型CpG ODN、ポリdA及び任意的なスペーサー配列からなり、更に好ましくは、K型CpG ODN及びポリdAからなる。
体的には、例えば、配列番号1で表されるヌクレオチド配列からなるオリゴデオキシヌクレオチド)及びポリdAからなり、K型CpG ODNが該オリゴデオキシヌクレオチドの5’末端に、ポリdAが3’末端に、それぞれ位置する。具体的には、配列番号1で表されるヌクレオ
チド配列からなるオリゴデオキシヌクレオチドの3’末端に20〜60ヌクレオチド長(より
好ましくは、30〜50ヌクレオチド長(30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50ヌクレオチド長)、最も好ましくは、30〜45ヌクレオチド長(30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45ヌクレオチド長))のポリdAが結合したオリゴデオキシヌクレオチドであり、例えば、配列番号2、又は9〜12で表されるヌクレオチド配列からなるオリゴデオキシヌクレオチドである。
くは35〜100ヌクレオチド長、より好ましくは40〜80ヌクレオチド長(具体的には、40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79 又は80ヌクレオチド長)、より好ましくは、50〜70ヌクレオチド長(具体的には、50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59 , 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70ヌクレオ
チド長)、最も好ましくは、50〜65ヌクレオチド長(具体的には、50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65ヌクレオチド長)である。
換される)である。即ち、本発明のオリゴデオキシヌクレオチド中のリン酸ジエステル結合の一部又は全てが、ホスホロチオエート結合により置換されている。
チオエート結合、または、ホスホロジチオエート結合による修飾を含み、より好ましくは、該K型CpG ODNのリン酸ジエステル結合の全てが、ホスホロチオエート結合に置換される。また、本発明のオリゴデオキシヌクレオチドは、好ましくは、ポリdAにおいて、ホスホロチオエート結合、または、ホスホロジチオエート結合を含み、より好ましくは、該ポリdAのリン酸ジエステル結合の全てが、ホスホロチオエート結合に置換される。更に好ましくは、本発明のヒト化K型CpGオリゴデオキシヌクレオチド及びポリデオキシアデニル酸を含むオリゴデオキシヌクレオチドのリン酸ジエステル結合の全てが、ホスホロチオエート結合に置換される。最も好ましくは、本発明のオリゴデオキシヌクレオチドは、ヒト化K
型CpGオリゴデオキシヌクレオチド(例、配列番号1)の3’末端に20〜60ヌクレオチド長(より好ましくは、30〜50ヌクレオチド長(30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50ヌクレオチド長)、最も好ましくは、30〜45ヌクレオチド長(30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45ヌクレオチド長))のポリdAが結合したオリゴデオキシヌクレオチドであって、当該オリゴデオキシヌクレオチドに含まれる全てのリン酸ジエステル結合が、ホスホロチオエート結合に置換されている。ホスホロチオエート結合により、本発明のオリゴデオキシヌクレオチドにおいて、分解に対する抵抗性のみならず、免疫賦活活性(例えば、B細胞を活性
化させてIL-6を産生させる活性)の増強、及びCpG-β-1,3-グルカン複合体の高収率が期
待されるからである。なお、本明細書におけるホスホロチオエート結合はホスホロチオエート骨格と、リン酸ジエステル結合はリン酸骨格と同義である。
しくは、ヒトB細胞)を活性化してIL-6を産生させる活性)を有するので、免疫賦活剤等
として有用である。更に、本発明のオリゴデオキシヌクレオチドは、2本のβ−1,3−グルカン(好ましくは、レンチナン、シゾフィラン、又はスクレログルカン)とともに三重螺旋構造を形成する性質を有するので、下記の本発明の複合体の調製に有用である。
本発明は、上記本発明のオリゴデオキシヌクレオチド及びβ−1,3−グルカンを含有す
る複合体(以下、本発明の複合体と称する。)を提供するものである。
を形成することにより、D型CpG ODNの配列を要することなく、D型CpG ODNに特有の免疫賦活活性(例えば、形質細胞様樹状細胞を活性化してIFN-αを産生させる活性)を獲得する。即ち、本発明の複合体は、K型CpG ODNに特有の免疫賦活活性(例えば、B細胞(好まし
くは、ヒトB細胞)を活性化してIL-6を産生させる活性)と、D型CpG ODNに特有の免疫賦
活活性(例えば、形質細胞様樹状細胞(好ましくはヒト形質細胞様樹状細胞)を活性化してIFN-αを産生させる活性)の両方を有する。
ログルカン、カードラン、パーキマン、グリホラン、ラミナラン等を挙げることが出来る。β−1,3−グルカンは、好ましくは、レンチナン、シゾフィランまたはスクレログルカ
ンのように、1,6−グルコピラノシド分枝を多く含有する(側鎖率33〜40%)β−1,3−グルカンであり、より好ましくはレンチナン、又はシゾフィランであり、最も好ま
しくはレンチナンである。
は(C6H10O5)n、分子量は約30〜70万である。水、メタノール、エタノール(95)、又はアセトンにはほとんど溶けないが、極性有機溶媒であるDMSOや水酸化ナトリウム水溶液に溶解する。
レンチナンは活性化マクロファージ、キラーT細胞、ナチュラルキラー細胞及び抗体依
存性マクロファージ仲介性細胞障害作用(ADMC)活性の増強作用を有する(Hamuro, J., et
al.:Immunology, 39, 551-559, 1980、Hamuro, J., et al.:Int. J. Immunopharmacol., 2, 171, 1980、 Herlyn, D., et al.:Gann, 76, 37-42, 1985)。動物実験において
は同系腫瘍及び自家腫瘍に対して化学療法剤との併用投与により腫瘍増殖抑制作用ならびに延命効果が認められている。また、レンチナンの単独投与によっても腫瘍増殖抑制作用ならびに延命効果が認められている。臨床試験においては手術不能又は再発胃癌患者に対して、テガフール経口投与との併用により生存期間の延長が認められ(医薬品インタビューフォーム「レンチナン静注用1mg「味の素」」)、本邦で承認されている。レンチナン
の単独投与による効果は現在のところ確認されていない。
−グルコシル側鎖からなる(Tabata, K., Ito, W., Kojima, T., Kawabata, S. and Misaki A.,「Carbohydr. Res.」, 1981, 89, 1, p.121-135)。SPGは婦人科癌に対する免疫増強法の筋肉内注射製剤臨床薬として20年以上の使用実績があり(清水, 陳, 荷見, 増淵,「Biotherapy」, 1990, 4, p.1390長谷川,「Oncology and Chemotherapy」, 1992, 8, p
.225)、生体内での安全性が確認されている(Theresa, M. McIntire and David, A. Brant,「J. Am. Chem. Soc.」, 1998, 120, p.6909)。
上記本発明のオリゴデオキシヌクレオチド中のポリデオキシアデニル酸の鎖である。なお、当該複合体は一部に、三重螺旋構造を形成していない部分を含んでいても良い。
は、オリゴデオキシヌクレオチド中のポリデオキシアデニル酸の鎖長、及びβ−1,3−グ
ルカンの長さ等に応じて、変化しうる。例えば、β−1,3−グルカン鎖と、ポリデオキシ
アデニル酸の鎖の長さが同等の場合には、2本のβ−1,3−グルカン鎖と、1本の本発明
のオリゴデオキシヌクレオチドが会合し、三重螺旋構造を形成し得る。一般的には、β−1,3−グルカン鎖に対して、ポリデオキシアデニル酸の鎖長は短いので、2本のβ−1,3−グルカン鎖に対して、複数の本発明のオリゴデオキシヌクレオチドがポリデオキシアデニル酸を介して会合し、三重螺旋構造を形成し得る(図1参照)。
フィラン、スクレログルカン、カードラン、パーキマン、グリホラン、ラミナラン)を含有する複合体であり、好ましくは、ヒト化K型CpG ODN及びβ−1,3−グルカン(例、レン
チナン、シゾフィラン、スクレログルカン)からなる複合体である。より好ましくは、配列番号1で表されるヌクレオチド配列からなるオリゴデオキシヌクレオチドの3’側に20
〜60ヌクレオチド長(具体的には、20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59又は60ヌクレオチド長)のポリデオキシアデニル酸が結合し、かつリン酸ジエステル結合の全てがホスホロチオエート結合に置換されたオリゴデオキシヌクレオチド、及びβ−1,3−グルカン(例、レンチナン、シゾフィラン)からな
る複合体(例、K3-dA20〜60-LNT、K3-dA20〜60-SPG)であり、更に好ましくは、配列番号1で表されるヌクレオチド配列からなるオリゴデオキシヌクレオチドの3’側に30〜50ヌ
クレオチド長(具体的には、30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50ヌクレオチド長)のポリデオキシアデニル酸が結合し、かつリン酸ジエステル結合の全てがホスホロチオエート結合に置換されたオリゴデオキシヌクレオチド、及びβ−1,3−グルカン(例、レンチナン、シゾフィラン)からなる複合体
(例、K3-dA30〜50-LNT、K3-dA30〜50-SPG)であり、最も好ましくは、配列番号1で表されるヌクレオチド配列からなるオリゴデオキシヌクレオチドの3’側に30〜45ヌクレオチ
ド長(具体的には、30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45ヌクレオチド長)のポリデオキシアデニル酸が結合し、かつリン酸ジエステル結合の全てがホスホロチオエート結合に置換されたオリゴデオキシヌクレオチド、及びβ−1,3−グ
ルカン(例、レンチナン、シゾフィラン)からなる複合体(K3-dA30〜45-LNT、K3-dA30〜45-SPG)である。
に記載された条件と同様に行うことができる。すなわち、本来は、天然で三重螺旋構造として存在するβ−1,3−グルカンを非プロトン性有機極性溶媒(ジメチルスルホキシド(DMSO),アセトニトリル,アセトン等)またはアルカリ水溶液(水酸化ナトリウム、水酸
化カリウム、アンモニア、水酸化カルシウム等)に溶解して一本鎖に解く。このようにし
て得られた一本鎖のβ−1,3−グルカンの溶液と本発明のオリゴデオキシヌクレオチドの
溶液(水溶液、中性付近のpHの緩衝水溶液、又は酸性の緩衝水溶液、好ましくは、水溶液又は中性付近のpHの緩衝水溶液)とを混合し、必要に応じて再度pHを中性付近に調整後、適当時間保持する、例えば、5℃で一夜保持する。その結果、2本のβ−1,3−グルカン鎖と該オリゴデオキシヌクレオチド中のポリdA鎖が三重螺旋構造を形成することにより、本発明の複合体が形成される。生成した複合体に対して、サイズ排除クロマトグラフィーによる精製、限外濾過、透析等を行うことにより、複合体未形成のオリゴデオキシヌクレオチドを除くことができる。また、生成した複合体に対して、陰イオン交換クロマトグラフィーによる精製を行うことにより、複合体未形成のβ−1,3−グルカンを除くことができ
る。上記の方法により、複合体を適宜精製することができる。
長さ等を考慮して適宜設定することができるが、通常モル比(SPG/ODN)が0.02〜2.0、好ましくは0.1〜0.5である。更なる態様において、モル比(β−1,3−グルカン(LNT等)/ODN)が例えば0.005〜1.0、好ましくは0.020〜0.25である。
5〜2N、好ましくは0.1〜1.5Nのアルカリ水溶液(例えば、0.25N水酸化ナトリウム水溶液)に溶解させ、1℃〜40℃で10時間〜4日間放置し(例えば、室温で一晩放置する)、一本鎖のLNT水溶液(例えば、50mg/mlのLNT水溶液)を調製する。前記LNT水溶液と別途調製したCpG水溶液(例えば、100μMの CpG水溶液)をモル比(LNT/ODN)0.005〜1.0で混合し、続いて、前記LNT水溶液に酸性の緩衝水溶液(例えば、NaH2PO4)を加えて中和し、1〜40℃で6時間〜4日間(例えば、4℃で一晩)維持することで複合化を完了させる。なお、前記複合化のためにLNT水溶液を最後に加え混合しても良い。複合体の形成は、例
えば、サイズ排除クロマトグラフィーを用い、CpG ODNの高分子量側へのシフトを240〜280nm(例えば、260nm)における吸収をモニタリングすることによって確認することができる。
より形成する粒子の径と同等であり、通常平均粒子径が10-100 nm、好ましくは20-50 nm
である。該粒子径は、複合体を水に溶解し、Malvern Instruments Zeta Sizerを用いて80℃の条件で動的光散乱法により計測することができる。
含む複合体(K3-LNT)及びK型CpG ODN(例えば、配列番号2)とSPGを含む複合体(K3-SPG)は、炎症応答誘導能(pan-IFN-a、IL-6等)、ウイルス接種個体における血清中抗原特
異的IgG抗体価(Total IgG, IgG2c等)の増強作用、ウイルス接種個体における抗原特異
的サイトカイン産生能(IFN-γ,IL2等)、ウイルスに対する感染防御効果を有する。K3-LNTについてはウイルス接種個体においてTh2型サイトカイン(IL-13等)の産生増強能も有する。従って、新規ワクチンアジュバント候補として有用である。
本発明は、上記本発明のオリゴデオキシヌクレオチド又は上記本発明の複合体を含む、医薬組成物を提供するものである。本発明の医薬組成物は、上記本発明のオリゴデオキシヌクレオチド又は上記本発明の複合体を常套手段に従って製剤化することにより得ることができる。本発明の医薬組成物は、本発明のオリゴデオキシヌクレオチド又は複合体と薬理学的に許容され得る担体を含む。また、本医薬組成物は抗原を更に含んでいても良い。このような医薬組成物は、経口又は非経口投与に適する剤形として提供される。
重量%程度である。
本発明のオリゴデオキシヌクレオチド及び複合体は、優れた免疫賦活活性を有するので、本発明のオリゴデオキシヌクレオチド、複合体及び医薬組成物は、免疫賦活剤として用いることができる。本発明のオリゴデオキシヌクレオチド、複合体又は医薬組成物を哺乳動物(ヒト等の霊長類、マウス等のげっ歯類等)に投与することにより、該哺乳動物における免疫反応を惹起することができる。特に、本発明の複合体は、D型CpG ODNの活性特性を有し、末梢血単核球を刺激して、I型インターフェロン(Pan-IFN-α、IFN-α2等)及
びII型インターフェロン(IFN-γ)の両方を大量に産生させるので、I型インターフェロ
ン産生誘導剤、II型インターフェロン産生誘導剤、I型及びII型インターフェロン産生誘
導剤として有用である。I型及びII型インターフェロンの両方の産生を誘導することから
、本発明の複合体及びこれを含有する医薬組成物は、I型及びII型インターフェロンのい
ずれか一方又は両方が有効な疾患の予防又は治療に有用である。I型インターフェロンが
有効な疾患としては、ウイルス感染症(例えば、C型肝炎ウイルス(HCV)、ヘルペスウイルス、パピローマウイルス、RSウイルス、インフルエンザウイルス等)、癌等を挙げるこ
とが出来る。II型インターフェロンが有効な疾患としては、アレルギー疾患、細胞内寄生性の原虫(リーシュマニア等)や細菌(リステリア、結核菌等)等の感染症等を挙げることが出来る。RSウイルスやインフルエンザウイルスを含む急性ウイルス感染症に対しては、I型インターフェロン及びII型インターフェロン共に、ウイルス排除に関する免疫応答
を高めるので、本発明の複合体及びこれを含有する医薬組成物は、急性ウイルス感染症に対する有効性が期待できる。
、本発明のオリゴデオキシヌクレオチド、複合体、及び医薬組成物、特に本発明の複合体及びこれを含有する医薬組成物は、ワクチンアジュバントとして有用である。
本明細書において、アジュバントとは免疫応答を促す補助剤のことであり、抗原とともに生体に投与されたとき、その抗原に対する免疫応答を非特異的に増強させる物質を意味する。
認識し得る限り、特に限定されるものではなく、抗原となるあらゆる物質(タンパク質、ペプチド、核酸、脂質、糖質、ならびに前記物質の修飾体(例えば、一つ又は複数のアミノ酸の欠失、置換、及び/又は付加等(以下、変異等)を導入した修飾体など)を用いることができる。抗原としては、原虫、真菌、細菌、ウイルスなどの病原体由来の抗原、癌、または特定の疾患に関係する抗原も用いられ得る。
ポリペプチドのアミノ酸配列が、病原体Xのゲノムにコードされたタンパク質のアミノ酸
配列中に存在することを意味する。
)、B型肝炎ウイルス(HBV)、エボラウイルス、サイトメガロウイルス、アデノウイルス、ポリオウイルス、日本脳炎ウイルス、麻疹ウイルス、ムンプスウイルス、風疹ウイルス、狂犬病ウイルス、黄熱ウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、ハンタウイルス、デングウイルス、ノロウイルス、ロタウイルス、パルボウイルス、コロナウイルス、ジステンパーウイルス、成人T細胞白血病ウイルス(HTLV-1)、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)、ヘルペスウイルス、パピローマウイルス等が挙げられる。細胞内感染性バクテリアとしては、マイコプラズマ等が挙げられる。細胞内感染性原虫としては、マラリア原虫、住血吸虫等が挙げられる。細胞内感染性病原体は好ましくはウイルス(具体的には、RSウイルス、又はインフルエンザウイルス等)である。
様において、ウイルスとして、I型インターフェロン及びII型インターフェロンの両方が
有効な急性ウイルス感染症を引き起こすウイルス(例、RSウイルス、インフルエンザウイルス)が選択される。
、病原体や癌細胞の表面抗原と内部抗原のいずれを用いることも可能であり、表面抗原と内部抗原とを混合して用いることも、また望ましい。
、当該抗原に対する免疫反応を誘導するための組成物は、上記本発明の医薬組成物に準じて調製することができる。
動物及び試薬
Tlr9欠損マウス及びDectin-1欠損マウスの作成については、以前に記載した(Koyama, S., et al., Science translational medicine 2, 25ra24 (2010); Saijo, S., et al., Nature immunology 8, 39-46 (2007))。C57BL/6Jマウスは、日本クレアから購入した。
全ての動物実験は、医薬基盤研究所及び大阪大学動物施設の機関ガイドラインに従って実
施した。以下のCpG ODNsは、(株)ジーンデザインで合成された(下線はホスホロチオエート結合を示す)。
番号11)、K3-dA25(配列番号10)及び、K3-dA20(配列番号9)の合成(表2)について記載する。
に置換されていることを示す。)
持時間を示す(カラム:Waters, X-Bridge C18 2.5μm, 4.6 x 75 mm、A溶液:100 mM ヘ
キサフルオロイソプロパノール、8 mM トリエチルアミン、B溶液:メタノール、B%:5%→30%(20 min, linear gradient);60℃;1 ml/min;260 nm)。
びカードランは、SIGMAから購入した。Zymosan-DepletedはInvivogenから購入した。クロドロネートリポソームはFormuMaxから購入した。インフルエンザスプリットプロダクトワクチン、ホルマリン不活化全ウイルス(WIV)、及び精製インフルエンザウイルス(H1N1
)は、以前に記載したように調製した(Koyama, S., et al., Science translational medicine 2, 25ra24 (2010))。
7.22 mgのK3-dA40を水(3.7mL)に溶解した。SPG(三井製糖) 15 mgを0.25 N NaOH (1 mL)に溶解した。1 mLの330 mM NaH2PO4をDNA溶液に加え、次にSPG溶液をDNA/NaH2PO4溶液
に加え、4℃にて一晩維持することにより複合体化を完了した。モル比(MSPG/MDNA)は、0.27に固定した。複合体の形成は、マイクロチップ電気泳動装置(SHIMADZU:MultiNA)
によって確認した。
レンチナン(LNT:味の素株式会社、ロット番号:2D8X1)を50mg/mlとなるように、0.25N NaOHに溶解し、室温で一晩放置した。各種CpG ODN(表2,3)は100mMとなるように
、注射用水に溶解した。LNT水溶液と各種CpG水溶液(K3-dA20(配列番号9)、K3-dA25(配列番号10)、K3-dA30(配列番号11)、K3-dA35(配列番号12)、K3-dA40(配列
番号2))を表4に示す比率で混合し、続いて、添加したLNTと同体積の330 mM NaH2PO4
を加え、4℃にて一晩維持することにより複合体化を完了した。複合体の形成は、サイズ
排除クロマトグラフィーを用い、CpG ODNの高分子量側へのシフトを、260nmにおける吸収をモニタリングすることによって確認した(System:Agilent 1100series、Column:Asahipak GF7M-HQ (Shodex) 2本連結、Flow rate:0.8mL/min、Buffer: 10mM EDTA PBS, pH7.4、Temperature:40℃)。
PBMCsは、3人の健康な成人男性ボランティア(30〜40 歳)から得た。ヒトPBMCsを用
いる全ての試験は、医薬基盤研究所の施設内治験審査委員会により認可された。Ficollを用いてPBMCsを調製後、1 x 107 個/mlの濃度で播いた。PBMCsを、コンプリートRPMI(10%
FCS、ペニシリン、及びストレプトマイシンが添加されたRPMI 1640)中で維持した。PBMCsを、K3 (0.24、0.74、2.2、6.6、20 μg/mL) 、K3-dA40、K3-SPG (K3-dA40の複合体)、dA40-K3、SPG-K3(dA40-K3の複合体)、D35、CpG21798、CpG21889、CpG2395、又はM362で24時間刺激した。上清をpan-IFN-α (Mabtech)、IL-6 (R&D)、及びMilliplex (Millipore)用のELISAに付した。
染色する前に、試料をホルムバール−カーボンコートグリップ上に滴下した。陰性染色のため、2% 酢酸ウラニウム(pH 4.0)の液滴をグリップ上に載せ、風乾させた。グリップ
を電子顕微鏡(Hitachi H-7650)上で40,000倍の拡大率にて観察した。
水溶液中の平均ナノ粒子サイズを、80℃にて、Malvern Instruments Zeta Sizer上で動的光散乱法を用いて測定した。
6週齢C57BL/6Jマウス、Tlr9欠損マウス、及びDectin-1欠損マウスから、マウス脾臓を
採取した。脾細胞を懸濁後、ACK溶解緩衝液で赤血球(RBCs)を溶解し、細胞をコンプリー
トRPMI中で維持した。細胞を1 x 107cells/mLの濃度で播いた。マウス骨髄由来細胞を、
ヒトFlt3L (Peprotech) (100 ng/mL)と共に7日間培養することにより、骨髄由来DCsを
作成した。細胞を1 x 107cells/mLの濃度で播いた。マウスM-CSF (Peprotech) (20 ng/mL)と共に7日間培養することによりBMDMsを作成した。これらの細胞は、コンプリートRPMI中で維持した。
BMDMsを5 x 107 cells/mLで播き、Alexa 488-K3 (1 μM) 及びAlexa 647-K3-SPG (1 μM)、又はAlexa 488-D35 (1 μM) 及びAlexa 647-K3-SPG (1 μM)により3時間刺激した。細胞をHoechst33258で30分染色することにより核を可視化し、次に細胞を固定し、蛍光顕微鏡を用いて解析した。
6週齢のC57BL/6Jマウス、Tlr9欠損マウス、及びDectin-1欠損マウスの尾の付け根に、
OVA (0.1、1、10、又は100 μg);
OVA (0.37、1.1、3.3、又は10 μg)及びK3(538 pmol);
OVA (0.37、1.1、3.3、又は10 μg)及びK3-dA40 (538 pmol);又は
OVA (0.37、1.1、3.3、又は10 μg)及びK3-SPG (538 pmol)
を、0日目及び10日目に投与した。他の試験においては、6週齢のC57BL/6Jマウスの尾の付け根に、
スプリットワクチン(0.1 μg)単独;
スプリットワクチン及びK3 (538 pmol);又は
スプリットワクチン及びK3-SPG (538 pmol)
を、0日目及び10日目に投与した。17日目に採血し、抗原特異的血清抗体力価をELISAにより測定した(図10、15a、16、25、28a、29、43a)。17日目にマウス脾臓を採取し、脾細
胞を上述の方法で調製した。細胞を
OVA257-264 (OVA257):SIINFEKL (10 μg/mL);
OVA323-339 (OVA323):ISQAVHAAHAEINEAGR (10 μg/mL);
全OVAタンパク質 (OVA) (10 μg/mL);
NP260-283 (NP260):ARSALILRGSVAHKSCLPACVYGP (10 μg/mL);又は
スプリットワクチン (10 μg/mL)
により24又は48時間再刺激した。上清を、マウスIFN-γのためのELISAに付した(図11、15b、17、26、28b、30、43b)。テトラマーアッセイのため、脾細胞をH-2Kb OVAテトラマ
ー (MBL)、抗CD8α (KT15)、抗TCRβ(H57-597)、抗CD62L (MEL-14)、及び抗CD44 (IM7)抗体、並びに7-AADで染色した。OVAテトラマー+ CD44+CD8α+ TCRβ+細胞数をFACSにより測定した(図12、15c、27、28c、31)。
6週齢のC57BL/6Jマウスの尾の付け根に、
OVA (100 μg);
OVA及びK3 (3.3 μg);
OVA及びK3-dA40 (3.3 μg);又は
OVA及びK3-SPG (3.3 μg)
を、0日目に投与した。免疫接種後7日目に、ナイーブC57BL/6J脾細胞を、異なる濃度のCFSE(5又は0.5 μM)により、10分間、37℃にて標識した。染色した高濃度の細胞をOVA257
(10 μg/mL)で90分間、37℃にてパルスした。培地で2回洗浄後、標識した細胞を混合し
、静脈内投与により免疫したマウスへ移入した。移入から24時間後、脾細胞を採取し、CFSEで標識した細胞の割合をFACSにて測定した。
C57BL/6Jマウスを、
OVA257 (10 μg);
OVA257及びK3 (10 μg);
OVA257及びK3-dA40 (10 μg);又は
OVA257及びK3-SPG (10 μg)
で免疫した。免疫から7日後に、脾細胞を調製し、H-2Kb OVAテトラマー、抗CD8α、抗TCRβ、抗CD62L、及び抗CD44抗体で染色した。OVAテトラマー+ CD44+ CD8α+ TCRβ+細胞数をFACSにより解析した(図14左)。調製した脾細胞をインビトロにてOVA257 (10 μg/mL)及びGolgi Plugにより4時間、再刺激した。細胞を抗IFN-γ、抗CD8α、及び抗CD3e抗体
で染色し、IFN-γ+ CD8α+ CD3e+細胞数をFACSにて測定した(図14右)。
HEK293を、Lipofectamine 2000を用いて、空、Dectin-1、又はDectin-2発現プラスミドでトランスフェクトした。トランスフェクション後48時間で、細胞を、FITC-SPG (0.5 μM)、Alexa 488-labeled K3-dA40 (0.5 μM)、又はAlexa 488-labeled K3-SPG (0.5 μM)
で、37℃にて、60分間処理した。処理後、細胞を集め、SPG又はCpG ODN陽性細胞をFACSにより解析した。
C57BL/6Jマウス、Tlr9欠損マウス、又はDectin-1欠損マウスからの脾細胞及びFL-DCsをK3-SPG (0.014、0.03、0.04、0.08、0.12、0.25、0.37、0.74、1.1、2.2、3.3、6.7、10
、又は20 μg/mL)、ザイモザン (3.7、11.1、33.3、又は100 μg/mL)、カードラン、Zymosan-Depleted、又は SPGで24時間刺激した。他の試験においては、C57BL/6Jマウス又はDectin-1欠損マウスからの脾細胞を、D35 (1 μM)の存在下又は非存在下で、Zymosan-Depleted (100、33.3、又は11.1 μg/mL)又はSPG (100、33.3、又は11.1 μg/mL)で、24時間刺激した。上清をIFN-α(PBL)、IL-6 (R&D)、IL-12 p40 (R&D)、IL-12 p70 (R&D)、及びBioplex (BIO-RAD)のためのELISAに付した。
C57BL/6Jマウスの付け根に、
DQ-OVA (10 μg);
Alexa 488-K3-SPG (10 μg);
Alexa 647-K3-SPG (10 μg);又は
DQ-OVA及びAlexa647-K3-SPG (10 μg)
を投与した。iLNsを採取後、クリオスタットを用いて凍結切片を調製した。凍結切片を4%パラホルムアルデヒドで10分間固定し、抗Siglec-1 (MOMA-1)、抗MARCO(ED31)、抗CD3e (145-2C11)、又は抗CD11c (N418)抗体とインキュベートした。画像化の結果をImageJによ
り解析した。
C57BL/6Jマウス、Tlr9欠損マウス、又はDectin-1欠損マウスの尾の付け根に、DQ-OVA (10 μg)、Alexa 488-K3 (10 μg)、又はAlexa 488-K3-SPG (10 μg)を投与した。iLN採取の30分前に、マウスの尾の付け根にPE-抗MARCO抗体、又はPE-抗Siglec-1抗体を投与した
。抗原及びアジュバントの投与後1時間に、iLNsを採取し、二光子顕微鏡(Olympus)による画像解析に付した。ピアソン相関を、Volocity共局在解析を用いて計算した。
C57BL/6Jマウスの尾の付け根に、
Alexa 647-K3 (538 pmol)、
Alexa 647-K3-SPG (538 pmol)、
Alexa 488-OVA (10 μg)、
Alexa 488-OVA及びK3 (10 μg)、
Alexa 488-OVA及びK3-SPG (10 μg),
DQ-OVA (10 μg)、
DQ-OVA及びAlexa 647-K3 (538 pmol)、又は
DQ-OVA及びAlexa 647-K3-SPG (538 pmol)
を投与した。投与の24時間後に、iLNsを採取した。単一細胞懸濁液を調製するため、iLNsをコラゲナーゼD (1 mg/mL)及びDNase I (0.1 mg/mL)と37℃にて30分間インキュベートした。調製した細胞を抗B220 (RA3-6B2)、抗CD8α (56-6.7)、及び抗CD11c抗体とインキュ
ベートし、異なるDC集団を分離した。OVA及びCpG ODNsの細胞内取込みをFACSにより解析
した。
免疫接種の5日又は2日前のいずれかに、6週齢のC57BL/6Jマウスの尾の付け根に、クロ
ドロネートリポソームを投与した。0日目に、OVA及びK3-SPGにより、マウスを尾根部にて免疫した。8日目に血液及び脾臓を採取し、血清抗体力価及びT細胞反応をELISAにより測
定した。
C57BL/6Jマウス又はTlr9欠損マウスの尾の付け根に、K3 (10 μg)又はK3-SPG (10 μg)を投与した。投与から24時間後に、iLNsを上述の方法で調製した。細胞を抗CD11c、抗mPDCA-1 (JF05-1C2.4.1)、抗CD8α、及び抗CD40 (3/23) 抗体とインキュベートし、FACSにて解析した。
6週齢のC57BL/6Jマウスに、
スプリットワクチン(0.1 μg);
スプリットワクチン及びK3-SPG (10 μg);又は
WIV(0.2 μg)
を、0日目及び14日目に投与した。免疫接種から2週間後に、血清抗体力価をELISAにより
測定し(図39)、マウスに2.3 x 103 pfu (10 LD50)のインフルエンザウイルス A/PR/8/34を鼻腔内へ接種した。接種後20日間に亘り、マウスの体重及び死亡率をモニターした(
図40)。
カニクイザルの皮下へ、
インフルエンザスプリットワクチン(5 μg)及びK3 (5 nmol);又は
スプリットワクチン及びK3-SPG (5 nmol)
を、0日目及び14日目に投与した。血液試料を、-2、2、4、6、8及び110週目に採取し、血清抗体力価をELISAにより測定した。
群間の統計学的有意性(P < 0.05)は、Student’s t-test又はMann-Whitney U testを用いて決定した。
1)K3-SPGの竿状ナノサイズ粒子は、K型及びD型CpG ODNの2つの特性を獲得する。
図1に示すように、CpG ODNとSPGとの間のよりよい複合体化効率には、変性−復元手順
を通して、5’末端又は3’末端においてポリdA40のPS骨格の追加的配列を要する(Shimada, N., et al., Bioconjugate chemistry 18, 1280-1286 (2007); Minari, J., et al., Bioconjugate chemistry 22, 9-15 (2011))。ヒト化CpG ODNによる複合体形成の最適
化の過程で、本発明者らは、CpG ODNの5’末端及び3’末端の免疫賦活性への影響を調
べた。複合体化効率は同等であるにもかかわらず、SPGと複合体化した5’-K3-dA40-3’は、ヒト末梢血単核球(PBMCs)を活性化し、多量のIFN-αを産生させたが、5’-dA40-K3-3’では、そうではなかった(図2、図3)。K3、K3-dA40及びdA40-K3は、ヒトPBMCsを活性化
してIL-6のような他のサイトカインを産生させることができるが、IFN-αは産生させることが出来なかった(図2、図3)。これらの結果は、新規のTLR9アゴニストとしては、3’-CpGよりも、5’-CpGの方がより望ましいことを示す。
ODNと比較した。K3-SPGで刺激されたPBMCsは大量のIFN-α及びIFN-γを産生したが、D35(図6)、P型及びC型 CpG ODN(図7)により誘導されるそれよりも、かなり低い濃度での刺激においてIFN-αを産生した。これらのIFNsはD型特異的なサイトカインであることが知られているので(Krug, A., et al., European journal of immunology 31, 2154-2163 (2001); Verthelyi, D. et al., Journal of immunology 166, 2372-2377 (2001); Gursel, M. et al., Journal of leukocyte biology 71, 813-820 (2002))、これらの結果は、K3-SPGが、K型の特性を損なうことなく、D型CpG ODNの特性を獲得したことを示唆する。K型及びD型CpG ODNの二重機能を理解するため、本発明者らは、骨髄由来マクロファージにおけるK3-SPGの細胞内局在を解析した。K3-SPGは、C型CpG ODNのように(Guiducci, C.,
et al., The Journal of experimental medicine 203, 1999-2008 (2006))、K型CpG ODNを含有するエンドソームのみならず、D型CpG ODNを含有するエンドソームとも共局在したことから(図8、図9)、K3-SPGが、K型及びD型CpG ODNにより、エンドソーム媒介自然免疫
シグナル系を伝達した可能性が示唆された。これらの結果は、K3-SPGが、ナノサイズ化した、高次で、且つ完全に可溶化した粒子を形成し、この「オール・イン・ワン」K3-SPGが、他の型のCpG ODN及び従来知られているCpG-SPG複合体よりも強力な活性を示し、これらとは異なる特性を示すことが強く示唆された。
越したワクチンアジュバントである。
本発明者らは、マウス免疫化モデルにおける、K3、K3-dA40、及びK3-SPGのアジュバン
ト効果を比較した。野生型マウスを、OVA単独で、或いは各K3由来アジュバントと共にOVAで免疫すると、K3-SPGが、K3により誘導されるものよりも、有意に高い液性免疫反応(図10)、及びより強力なT細胞反応(図11)を誘導した。注目すべきは、K3-SPGによって、より
多数のOVA特異的CD8T細胞が誘導されることが、テトラマーアッセイにより明らかになっ
た(図12)。共有結合を何らすることなく共投与したタンパク質抗原に対するきわめて強力なインビボCTL活性も認められた(図13)。このK3-SPGによる強力なCTL誘導は、ペプチドワクチン接種によっても再現され(図14)、用量依存的であった(図15)。K3-SPGの抗原節約活性は極めて強く、同等の抗体及びCD4T細胞反応は100倍量のOVA抗原を用いることに
より達成された(図16、17)。これらの結果は、K3-SPGが、K3単独よりも、卓越したアジュバントであることを明確に示す。
Dectin-1は、ザイモザンのようなβグルカンの受容体であることが示されているので(Herre, J., et al., Blood 104, 4038-4045 (2004))、SPG及びK3-SPGの細胞取込、及び
それに引き続くSPG及びK3-SPGによる活性化におけるDectin-1の役割について調べた。フ
ローサイトメトリーを用いて、Dectin-1を発現するHEK293細胞において、ODNの存在に係
わらず、インビトロにおけるSPG又はK3-SPGの取り込みが上昇したが、Dectin-2やコント
ロールベクターでは上昇しないことを見出した(図18、19)。最近、可溶型のβ−グルカンはDectin-1シグナリングを活性化しないことが報告された(Goodridge, H.S., et al., Nature 472, 471-475 (2011))。更に、Dectin-1シグナリングは、サイトカインシグナル
抑制因子1(SOCS1)誘導を介して、TLR9媒介サイトカイン産生を抑制する(Eberle, M.E. & Dalpke, A.H., Journal of immunology 188, 5644-5654 (2012))。そこで、SPGのアゴニスト活性を調べた。脾臓細胞をZymosan-Depletedで刺激すると、用量依存的及びDectin-1依存的なTNF-α及び他のサイトカインの産生が認められたが(図20)、SPG刺激では認め
られなかった(図21)。ザイモザンおよびカードランによるサイトカイン産生は、Dectin-1非依存的であった。Zymosan-Depletedは、CpG ODNにより誘導されたIFN-αを阻害したが
、この阻害はDectin-1欠損により軽減された(図22)。対照的に、SPGはCpG ODNにより誘導されたIFN-αを阻害しなかった(図23)。これらの結果は、SPGはDectin-1のリガンドであ
るがアゴニストではないこと;従ってSPGはTLR9媒介IFN-α産生を妨げないことを示す。
K3-SPGは、CpG ODNとβ−グルカンの複合体であるので、TLR9(Hemmi, H., et al., Nature 408, 740-745 (2000))及びDectin-1(Saijo, S., et al., Nature immunology 8, 39-46 (2007))の役割を、受容体ノックアウトマウスを用いて調べた。Tlr9欠損マウス及びDectin-1欠損マウスからの脾細胞及びFlt3リガンド誘導骨髄由来DCs (FL-DCs)をK3-SPGで刺激すると、サイトカイン産生は完全にTLR9依存的であったが、Dectin-1については、そうではなかった(図24)。インビトロの結果と一致して、K3-SPG及びOVAによるTlr9欠損
マウスの免疫の結果、液性反応及びT細胞反応が減弱した(図25-27)。OVA 及び10μgのK3-SPG でマウスを免疫すると、Dectin-1欠損マウスは、野生型マウスと同等の免疫反応を示
した(図28)。Dectin-1欠損マウスをOVA及び1μgのK3-SPGで免疫すると、抗体産生及びT細胞からのサイトカイン産生については有意な変化は認められないが(図29、図30)、テトラマーアッセイにおいて減弱したCD8 T細胞反応を示した(図31)。これらの結果は、K3-SPG
のアジュバント効果はTLR9シグナリングに依存することを示唆する。SPG及びK3-SPGはDectin-1シグナリングを刺激しないが、K3-SPGの効果は、インビボにおいて、なお部分的にDectin-1に依存する。
K3-SPGは、単純な抗原混合物の免疫接種を通じて、インビボにおいて強力なアジュバント効果をもたらすので、抗原及びK3-SPGの両方を捕捉する細胞が、アジュバント効果の媒介において重要な役割を果たすと仮定した。蛍光標識OVA及びK3-SPGのインビボ分布を調
べるため、蛍光顕微鏡及び二光子顕微鏡を用いた。尾の付け根に注入後1時間以内に、抗原及びアジュバントは流入領域リンパ節(iLNs)に到達した(図32、33、35)。24時間後、いくらかのK3-SPGがCD3e+ T細胞領域に移動し、DQ-OVAと共局在した。K3-SPG及びDQ-OVA
の両方を含有する、iLNのT細胞領域におけるこれらの細胞は、CD11c+DCsであった。
。このことから、LN表面上に分布することが知られている2つの型のマクロファージである、Siglec-1 (CD169又はMOMA-1とも呼ばれる)+マクロファージ(嚢下洞マクロファージ
としても知られる)及びMARCO+ マクロファージ(Martinez-Pomares, L. & Gordon, S., Trends in immunology 33, 66-70 (2012))に焦点をあてることにした。通常の蛍光顕微
鏡を用いた組織学的解析では、全iLN表面を適切に見ることが出来なかった;更に、これ
らのマクロファージはフローサイトメトリー解析により単離することが困難であった(Aoshi, T., et al., European journal of immunology 39, 417-425 (2009); Gray, E.E. &
Cyster, J.G., Journal of innate immunity 4, 424-436 (2012))。そこで、二光子顕
微鏡イメージング解析を用いて抗原及びK3-SPGの分布をエクソビボで明らかにした。抗MARCO抗体及び抗Siglec-1抗体の投与後、特異的マクロファージが可視化された。投与後1
時間にてiLN表面を二光子顕微鏡でモニターすると、OVA及びK3-SPGがMARCO+マクロファージと共局在していたが、Siglec-1+マクロファージとはしていなかった(図33、35)。以前
の報告において、免疫複合体及び不活化インフルエンザウイルスがSiglec-1+マクロファ
ージにより捕捉され、液性免疫反応を誘導することが示唆されている(Gonzalez, S.F., et al., Nature immunology 11, 427-434 (2010); Suzuki, K. et al., The Journal of experimental medicine 206, 1485-1493 (2009))。Volocityの共局在解析による確認の
結果、分布パターンはMARCO+マクロファージのそれと完全に一致しており、Siglec-1+マ
クロファージとは共局在しなかった(図34、36)。対照的に、K3は、K3-SPGと比較すると、MARCO+領域とSiglec-1+領域の間に拡散的に分布していた(図35、36)。また、Tlr9欠損マ
ウス及びDectin-1欠損マウスの両方とも、K3-SPGと同等の局在を示した。K3-SPGのアジュバント効果に対するこれらのマクロファージの貢献を調べるため、尾の付け根にクロドロネートリポソームを注入した後のマクロファージ及びDCsの異なる回復カイネティクスを
試験した。注入後、2日目までにマクロファージは完全に枯渇した。これらの細胞は、少なくとも1週間では回復しなかったが、DCsは、以前報告されているように(Aoshi, T., et al., Immunity 29, 476-486 (2008))、5日目までにほとんど回復した。マクロファ
ージ及びDCsの両方を枯渇させたところ、免疫反応は有意に抑制された(図37; Clo -d2)
。マクロファージのみを枯渇させ、DCsを枯渇させなかった場合、免疫反応は、非処置マウスと同等であった(図37; Clo-d5)。このことは、注入後LNsにおいて、OVA及びK3-SPGの両方ともMARCO+マクロファージにより主に捕捉され、そのマクロファージが適応免疫反応を誘導したことを示唆する。言い換えると、K3-SPGのアジュバント効果はDC集団に大きく依存した。
本発明者らの知見は、ナノ微粒子K3-SPGの大部分は、注入後にiLNsにおけるMARCO+マクロファージにより取り込まれるが、アジュバント効果はDCsによりコントロールされるこ
とを示唆する。そこで、iLNsにおけるDC集団による抗原及びアジュバントの取込に焦点をあてた。投与後24時間において、DC集団による抗原及びアジュバントの取込をフローサイトメトリーにより解析した。3つのDCサブセット(pDCs、CD8α+ DCs、CD8α- DCs)におけるCpG陽性の頻度はK3-SPG注入後に、K3のときよりも有意に増加した。対照的に、OVA陽性DCの頻度は、K3注入後とK3-SPG注入後とで同等であった。抗原及びアジュバントの両方とも陽性のDCsに焦点をあてると、K3-SPGにおいてK3よりもかなりの増加が認められた。注入後24時間において、iLNs におけるpDCs及びCD8α陽性DCsの双方とも、K3-SPGに
より強力に活性化されたが、K3によってはされず、これは全体的にTLR9に依存した(図38)。これらの結果から、pDCs及びCD8α+ DCsが、成熟化のための非微粒子K3ではなく、優先的にナノ微粒子K3-SPGを捕捉し、アジュバント効果を発揮することが示された。
K3-SPGのアジュバント効果を、マウス及び非ヒト霊長類において、より臨床的に関連するインフルエンザワクチン接種モデルを用いて調べた。マウスをエーテル処理ヘムアグルチニン抗原濃縮ビリオン不含スプリットワクチン(SV)及び表示したアジュバントで免疫接種し、抗体反応及びT細胞反応を比較すると、K3-SPGは、K3よりも優れたアジュバント
効果を示した(図43)。より重要なことに、SVとK3-SPGによる免疫接種により、ビルトインアジュバントとしてウイルスRNAを含有する(Koyama, S., et al., Science translational medicine 2, 25ra24 (2010))、全(ビリオン)不活化ワクチン(WIV)(0.2 μg/マウス)を用いたワクチン接種と比較しても、100倍大きな抗体反応が生じた(図39)。SV
(0.1 μg/マウス)及びK3-SPGで免疫接種したマウスは、WIVで免疫化したマウスよりも体重の減少が少なかった(図40)。驚くべきことに、WIVワクチン接種マウスでは僅か10%
のみ生存をもたらす用量において、K3-SPGは、致死的なPR8ウイルス負荷に対して100
%防御をもたらした(図40)。これらの結果は、マウスモデルにおいて、K3-SPGがタンパク質又はタンパク質ベースのワクチンの強力なアジュバントとして機能するとの考えを強力に支持した。この知見を、カニクイザルを用いた非ヒト霊長類モデルに拡張することとした。0日目及び14日目に、各群3匹のカニクイザルをK3又はK3-SPGと共にSVで免疫接種した。血清抗体力価を8週間に亘ってモニターした。SV及びK3-SPGにより、免疫接種の2週間後に有意に高い抗体力価が誘導され、この力価は少なくとも更に6週間に亘って高いままであった(図41)。免疫接種から2年(110週)後において、K3-SPG群は、K3群よりも
高い抗体力価を示した(図42及び43)。まとめると、これらの結果から、K3-SPGが非ヒト霊長類モデルにおいても卓越したワクチンアジュバントであることが示唆された。
ヒトPBMCs(Lonza社、Cat# CC-2702、Lot# 0000396517)を用いて、K3(K3-dA30, K3-dA35, K3-dA40)単独、K3-LNT複合体(K3-dA30-LNT, K3-dA35-LNT, K3-dA40-LNT)及びK3-SPG複合体(K3-dA40-LNT)のpan-IFN-a(hIFNa)とIL-6(hIL-6)の産生誘導能を評価し
た。
結果を図44に示す。低用量の刺激において、pan-IFN-aとIL-6産生は、K3とSPGとの複合体であるK3-SPG、およびK3とLNTとの複合体であるK3-LNTにおいて、K3単独に比べて高
いことが認められた。また、dA tail長(dA30, dA35, dA40)が異なるK3-LNTによって誘
導される炎症性サイトカイン産生能は、ほぼ同等である可能性が示唆された。更に、K3-SPGとK3-LNTの炎症性サイトカイン産生能を比較すると、K3-SPGに比べて、K3-LNTによるpan-IFN-a産生誘導能が高い可能性が示唆された。一方、IL-6産生量においては、K3-SPGとK3-LNTは同等であることが認められた。
、血清中RSV F抗原特異的IgG抗体価
7週齢のC57BL/6マウスの尾根部に、一匹あたりRSV F抗原0.5 μgと各種アジュバント(K3単独(K3-dA30, K3-dA35, K3-dA40)、K3-LNT複合体(K3-dA30-LNT, K3-dA35-LNT, K3-dA40-LNT)及びK3-SPG複合体(K3-dA40-SPG)、リン酸アラム)10 μgを2週間隔で2回免
疫した。最終免疫から1週後に末梢血の回収と血清の調製を行い、評価試料とした。血清
中のRSV Fワクチン抗原に結合する抗体価は、ELISA法を用いて測定した。図45に示されるとおり、RSV F抗原特異的なTotal IgG誘導は、RSV F抗原単独接種群(F)に比べて、アジュバント添加によって増強されており、K3単独(F+K3-dA30, F+K3-dA35, F+K3-dA40)
、K3-LNT(F+K3-dA30-LNT, F+K3-dA35-LNT, F+K3-dA40-LNT)及びK3-SPG複合体(F+K3-dA40-SPG)とリン酸アラム(F+Alum)のアジュバント効果は同等である可能性が示唆された。Th2型アジュバントであるリン酸アラム(F+Alum)を接種したマウス群では、IgG1サブク
ラス誘導能がRSV F抗原単独接種群に比べて高いことが認められた。一方、IgG2cサブクラス抗体において、K3単独(F+K3-dA30, F+K3-dA35, F+K3-dA40)、K3-LNT(F+K3-dA30-LNT, F+K3-dA35-LNT, F+K3-dA40-LNT)、K3-SPG(F+K3-dA40-SPG)を接種した免疫群では、
リン酸アラム(F+Alum)に比べて高い結果が示されており、K3-LNT複合体はK3-SPGと同様のTh1型アジュバントである可能性が示唆された。
る、RSV F抗原特異的サイトカイン産生能
7週齢のC57BL/6マウスの尾根部に、一匹あたりRSV F抗原0.5 μgと各種アジュバント(K3単独(K3-dA30, K3-dA35, K3-dA40)、K3-LNT(K3-dA30-LNT, K3-dA35-LNT, K3-dA40-LNT)及びK3-SPG複合体(K3-dA40-SPG)、リン酸アラム)10 μgを2週間隔で2回免疫した
。最終免疫から1週後に脾臓を回収し、脾臓細胞を調製した。96 well培養プレートに播種した脾臓細胞を、RSV F抗原のMHC class I拘束性エピトープペプチド、MHC class II拘束性エピトープペプチド、ワクチン抗原タンパク質それぞれで刺激し、24時間もしくは48時間、培養した。RSV F抗原特異的サイトカイン産生能は、培養上清を試料とし、サイトカ
インELISA法を用いて評価した。本検討では、Th1型サイトカインであるIFN-g、活性化T細胞から産生されるIL-2、Th2型サイトカインであるIL-13の3種のサイトカインについて評
価した。
その結果、図46に示されるとおり、RSV F抗原特異的なIFN-g産生誘導とIL-2産生誘導の増強効果は、K3-LNT(F+K3-dA30-LNT, F+K3-dA35-LNT, F+K3-dA40-LNT)とK3-SPG(F+K3-dA40-SPG)で同等である可能性が示唆された。Th2型アジュバントであるリン酸アラム
アジュバント接種群(F+Alum)では、IFN-g産生はいずれの刺激においても検出限界以下
であった。一方、IL-13産生増強効果は、Th2型アジュバントであるリン酸アラム接種群で高く認められ、Th1型アジュバントであるK3-SPG接種群では低い結果となった。興味深い
ことに、K3-LNT接種群(F+K3-dA30-LNT, F+K3-dA 35-LNT, F+K3-dA 40-LNT)においては
、同じTh1型アジュバントであるK3-SPG接種群(F+K3-dA40-SPG)に比べ、高いIL-13産生
増強効果を示した。このことから、K3-LNT複合体は、K3-SPGが有する高いTh1応答増強効
果に加え、Th2応答増強能も有することが示唆された。
ける、RSV感染防御効果
6〜7週齢のコットンラットの尾根部に、一匹あたりRSV F抗原1 μgと各種アジュバント(K3-LNT(K3-dA35-LNT, K3-dA40-LNT)及びK3-SPG複合体(K3-dA40-SPG)、リン酸アラ
ム)10 μgを2週間隔で2回免疫した。最終免疫から2週後に、RSV血清型A(Long株)をコッ
トンラットに経鼻接種を用いて攻撃感染させ、その3日後に肺内ウイルス量を計測した。Synagis(palivizumab)投与群は、Synagis 2.5 mg /kgを攻撃感染一日前に筋肉内投与し
、上記と同様に感染防御能の評価を行った。中和抗体価は、攻撃感染直前に麻酔下でラット頚静脈から採血し、得られた血清を用いて検討を行った。
図47の左に肺内ウイルス量の結果を、右に中和抗体価の結果を示す。肺内ウイルス量の結果から、PBS-投与群では約105pfu/lungのウイルス量が認められるのに対し、リン酸
アラム添加RSV Fワクチンを投与した群(F+Alum)では、平均値で約100倍もの低いウイルス量に抑えられていた。一方、K3-SPG添加ワクチン投与群(F+K3-dA40-SPG)においても
、感染防御誘導能が認められた。最も良好な感染防御効果を示したのは、K3-LNT添加ワクチン群(F+K3-dA35-LNT, F+K3-dA40-LNT)であり、リン酸アラムやK3-SPGに比べて、高い感染防御能に寄与する新規ワクチンアジュバント候補である可能性が示唆された。
中和抗体誘導能においては、リン酸アラム添加ワクチン投与群(F+Alum)において、シナジスと同等の血中中和活性が認められた。一方、K3-SPG添加ワクチン投与群(F+K3-dA40-SPG)においては、4匹中3匹で中和抗体がほとんど誘導されていないことから、K3-SPG
が寄与する感染防御効果は中和抗体非依存的な機作によるものと考察された。また、K3-LNT投与群(F+K3-dA35-LNT, F+K3-dA40-LNT)においては、K3-SPGに比べて、高い中和抗体が認められていることから、K3-LNTアジュバントはK3-SPGと異なる特性、例えばTh2応答
増強能、を有している可能性が示唆された。
型CpG ODNに特有の免疫賦活活性とを併せ持つ。更に、K3-SPG及びK3-LNTは強力なワクチ
ンアジュバント活性を有しており、K3-SPG又はK3-LNTを抗原とともに免疫接種すると、該抗原特異的な液性免疫及び細胞性免疫の両方を刺激する。従って、本発明の複合体は、免疫賦活剤やワクチンアジュバントとして医薬分野において有用である。
Claims (1)
- 明細書に記載された発明。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023071978A JP2023086856A (ja) | 2013-09-20 | 2023-04-26 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2013196206 | 2013-09-20 | ||
JP2013196206 | 2013-09-20 | ||
JP2019087177A JP6993649B2 (ja) | 2013-09-20 | 2019-05-02 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019087177A Division JP6993649B2 (ja) | 2013-09-20 | 2019-05-02 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023071978A Division JP2023086856A (ja) | 2013-09-20 | 2023-04-26 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2021167348A true JP2021167348A (ja) | 2021-10-21 |
JP7278551B2 JP7278551B2 (ja) | 2023-05-22 |
Family
ID=52688965
Family Applications (4)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015537976A Active JP6525455B2 (ja) | 2013-09-20 | 2014-09-19 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
JP2019087177A Active JP6993649B2 (ja) | 2013-09-20 | 2019-05-02 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
JP2021120059A Active JP7278551B2 (ja) | 2013-09-20 | 2021-07-20 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
JP2023071978A Pending JP2023086856A (ja) | 2013-09-20 | 2023-04-26 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
Family Applications Before (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2015537976A Active JP6525455B2 (ja) | 2013-09-20 | 2014-09-19 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
JP2019087177A Active JP6993649B2 (ja) | 2013-09-20 | 2019-05-02 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023071978A Pending JP2023086856A (ja) | 2013-09-20 | 2023-04-26 | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10202606B2 (ja) |
EP (3) | EP4253546A3 (ja) |
JP (4) | JP6525455B2 (ja) |
KR (2) | KR20220068276A (ja) |
CN (3) | CN114762695A (ja) |
AU (2) | AU2014322046B2 (ja) |
BR (1) | BR112016005966B1 (ja) |
CA (1) | CA2923806C (ja) |
ES (2) | ES2960793T3 (ja) |
MX (2) | MX2016003668A (ja) |
MY (1) | MY178288A (ja) |
NZ (1) | NZ718900A (ja) |
PH (1) | PH12016500464A1 (ja) |
PL (1) | PL3048170T3 (ja) |
RU (2) | RU2723943C2 (ja) |
SG (2) | SG11201601885WA (ja) |
TW (3) | TWI798557B (ja) |
WO (1) | WO2015041318A1 (ja) |
Families Citing this family (17)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105940012B (zh) * | 2014-02-06 | 2024-06-11 | 独立行政法人科学技术振兴机构 | 肽/β-1,3-葡聚糖复合体及其制造方法以及含有它的医药组合物 |
WO2016103531A1 (ja) * | 2014-12-26 | 2016-06-30 | 国立研究開発法人医薬基盤・健康・栄養研究所 | 免疫賦活活性を有する核酸多糖複合体の抗腫瘍薬としての応用 |
TW201639583A (zh) * | 2015-03-20 | 2016-11-16 | 國立研究開發法人醫藥基盤 健康 營養研究所 | 具有免疫賦活活性之含有CpG-間隔基-寡核苷酸複合體及其用途 |
WO2016199904A1 (ja) * | 2015-06-10 | 2016-12-15 | 国立大学法人東京大学 | ワクチン用アジュバント、ワクチン、及び免疫誘導方法 |
WO2017066639A1 (en) * | 2015-10-15 | 2017-04-20 | City Of Hope | Compounds and compositions including phosphorothioated oligodeoxynucleotide, and methods of use thereof |
WO2018147265A1 (ja) * | 2017-02-07 | 2018-08-16 | 京都府公立大学法人 | 病原性グラム陰性菌に対するワクチン |
CN110520532B (zh) * | 2017-03-31 | 2024-02-13 | 学校法人爱知医科大学 | 阻碍硫酸软骨素生物合成的反义核酸 |
WO2019172419A1 (ja) * | 2018-03-09 | 2019-09-12 | 株式会社マンダム | 免疫関連疾患の指標の検出方法 |
KR102191491B1 (ko) * | 2018-06-20 | 2020-12-15 | (주)큐젠바이오텍 | 베타글루칸-펩타이드 복합체 및 항생제를 포함하는 염증성 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
TW202027786A (zh) * | 2018-09-28 | 2020-08-01 | 公立大學法人北九州市立大學 | 包含抗原肽- 佐劑核苷酸結合物之免疫誘導劑及包含其之醫藥組成物 |
KR102111039B1 (ko) * | 2018-10-30 | 2020-05-14 | 아주대학교산학협력단 | 항원특이적 면역반응 억제를 위한 커들란의 설하 투여용 조성물 |
US20230053708A1 (en) | 2019-12-25 | 2023-02-23 | Napajen Pharma, Inc. | Short-chain cpg-containing oligodeoxynucleotide with linked polydeoxyadenylic acid, complex containing said oligodeoxynucleotide, and use thereof |
CA3201815A1 (en) | 2020-11-12 | 2022-05-19 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Complex of .beta.-glucan and nucleic acid having controlled particle size |
AU2022329730A1 (en) * | 2021-08-16 | 2024-03-14 | Elicio Therapeutics, Inc. | Compositions containing polynucleotide amphiphiles and methods of use thereof |
JPWO2023068104A1 (ja) * | 2021-10-20 | 2023-04-27 | ||
WO2024084785A1 (ja) * | 2022-10-20 | 2024-04-25 | 一般財団法人阪大微生物病研究会 | Rsウイルスワクチンとしての利用に好適な組成物 |
CN116942808B (zh) * | 2023-07-21 | 2024-02-02 | 北京成大天和生物科技有限公司 | 一种重组带状疱疹疫苗组合物及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1995026204A1 (en) | 1994-03-25 | 1995-10-05 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Immune stimulation by phosphorothioate oligonucleotide analogs |
US20030026782A1 (en) * | 1995-02-07 | 2003-02-06 | Arthur M. Krieg | Immunomodulatory oligonucleotides |
EP1176966B1 (en) | 1999-04-12 | 2013-04-03 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response |
US6977245B2 (en) * | 1999-04-12 | 2005-12-20 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response |
US8017742B2 (en) | 1999-11-10 | 2011-09-13 | Japan Science And Technology Agency | Gene carrier |
WO2001034207A1 (fr) | 1999-11-10 | 2001-05-17 | Japan Science And Technology Corporation | Supports de genes |
WO2002072152A1 (fr) | 2001-03-13 | 2002-09-19 | Japan Science And Technology Corporation | Supports de gene mettant en oeuvre un polysaccharide et leur procede de production |
CA2447793A1 (en) * | 2001-05-21 | 2002-11-28 | Intercell Ag | Immunostimulatory oligodeoxynucleic molecules |
JP2004107272A (ja) | 2002-09-19 | 2004-04-08 | Japan Science & Technology Corp | 遺伝子治療剤 |
EP1625850B1 (en) | 2003-05-15 | 2012-02-29 | Japan Science and Technology Agency | Immunostimulating agents |
KR100558851B1 (ko) * | 2004-01-08 | 2006-03-10 | 학교법인연세대학교 | 면역조절능력이 증가된 CpG 올리고데옥시뉴클레오티드변형체 |
JP4712333B2 (ja) * | 2004-08-31 | 2011-06-29 | 独立行政法人科学技術振興機構 | ハイブリッド多糖系キャリアーを用いる核酸類の導入方法。 |
JP2007070307A (ja) | 2005-09-09 | 2007-03-22 | Japan Science & Technology Agency | 免疫刺激性複合体 |
JP4878915B2 (ja) | 2006-05-25 | 2012-02-15 | 独立行政法人科学技術振興機構 | 核酸/多糖/カーボンナノチューブ複合体 |
JP2008100919A (ja) | 2006-10-17 | 2008-05-01 | Japan Science & Technology Agency | Th2細胞関連疾患の予防等に用いられる核酸/多糖複合体 |
US7625555B2 (en) * | 2007-06-18 | 2009-12-01 | Novagen Holding Corporation | Recombinant human interferon-like proteins |
SI2759306T1 (sl) | 2008-12-09 | 2016-05-31 | Coley Pharmaceutical Group, Inc. | Imunostimulacijski oligonukleotidi |
US8552165B2 (en) | 2008-12-09 | 2013-10-08 | Heather Davis | Immunostimulatory oligonucleotides |
JP5035808B2 (ja) * | 2009-01-28 | 2012-09-26 | 公益財団法人北九州産業学術推進機構 | 三元複合体の製造方法 |
CN101745109A (zh) | 2010-02-01 | 2010-06-23 | 云南沃森生物技术股份有限公司 | 一种含CpG ODN和poly I:C佐剂的喷鼻型流感病毒疫苗制备方法 |
JP5884578B2 (ja) | 2012-03-16 | 2016-03-15 | 富士通株式会社 | アクセラレータ管理装置、アクセラレータ管理方法および入出力装置 |
CN202938106U (zh) | 2012-11-26 | 2013-05-15 | 甘俊辉 | 距离感应变光式led灯 |
-
2014
- 2014-09-19 ES ES19182054T patent/ES2960793T3/es active Active
- 2014-09-19 TW TW109118927A patent/TWI798557B/zh active
- 2014-09-19 ES ES14846493T patent/ES2749627T3/es active Active
- 2014-09-19 CN CN202210310954.7A patent/CN114762695A/zh active Pending
- 2014-09-19 CN CN201480051586.2A patent/CN105683372A/zh active Pending
- 2014-09-19 CN CN202210311021.XA patent/CN114652739A/zh active Pending
- 2014-09-19 RU RU2016115052A patent/RU2723943C2/ru active
- 2014-09-19 EP EP23176351.7A patent/EP4253546A3/en active Pending
- 2014-09-19 EP EP14846493.6A patent/EP3048170B1/en active Active
- 2014-09-19 MX MX2016003668A patent/MX2016003668A/es active IP Right Grant
- 2014-09-19 BR BR112016005966-2A patent/BR112016005966B1/pt active IP Right Grant
- 2014-09-19 JP JP2015537976A patent/JP6525455B2/ja active Active
- 2014-09-19 EP EP19182054.7A patent/EP3572511B1/en active Active
- 2014-09-19 SG SG11201601885WA patent/SG11201601885WA/en unknown
- 2014-09-19 CA CA2923806A patent/CA2923806C/en active Active
- 2014-09-19 AU AU2014322046A patent/AU2014322046B2/en active Active
- 2014-09-19 NZ NZ718900A patent/NZ718900A/en unknown
- 2014-09-19 KR KR1020227016729A patent/KR20220068276A/ko not_active Application Discontinuation
- 2014-09-19 TW TW103132422A patent/TWI696630B/zh active
- 2014-09-19 MY MYPI2016700971A patent/MY178288A/en unknown
- 2014-09-19 US US15/022,856 patent/US10202606B2/en active Active
- 2014-09-19 SG SG10201802199TA patent/SG10201802199TA/en unknown
- 2014-09-19 TW TW112109803A patent/TW202332452A/zh unknown
- 2014-09-19 KR KR1020167009508A patent/KR102400963B1/ko active IP Right Grant
- 2014-09-19 WO PCT/JP2014/074835 patent/WO2015041318A1/ja active Application Filing
- 2014-09-19 PL PL14846493T patent/PL3048170T3/pl unknown
- 2014-09-19 RU RU2020117033A patent/RU2020117033A/ru unknown
-
2016
- 2016-03-10 PH PH12016500464A patent/PH12016500464A1/en unknown
- 2016-03-18 MX MX2020012133A patent/MX2020012133A/es unknown
-
2018
- 2018-12-20 US US16/227,902 patent/US11015202B2/en active Active
-
2019
- 2019-05-02 JP JP2019087177A patent/JP6993649B2/ja active Active
-
2021
- 2021-04-16 AU AU2021202301A patent/AU2021202301B2/en active Active
- 2021-07-20 JP JP2021120059A patent/JP7278551B2/ja active Active
-
2023
- 2023-04-26 JP JP2023071978A patent/JP2023086856A/ja active Pending
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
宮本寛子他: "多糖β−1,3−グルカンの受容体を利用したオリゴ核酸の選択的デリバリー", CELLULOSE COMMUN., vol. 19, no. 1, JPN6014052671, 2012, pages 12 - 16, ISSN: 0005022288 * |
望月慎一他: "CpG−DNA/β−1,3−グルカン複合体の新規がんワクチンへの応用", 高分子学会予稿集, vol. 62, no. 2, JPN6014052674, 28 August 2013 (2013-08-28), pages 4825 - 4826, ISSN: 0005022289 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6993649B2 (ja) | 免疫賦活活性を有するオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 | |
JP6698069B2 (ja) | 免疫賦活活性を有するCpGスペーサーオリゴヌクレオチド含有複合体及びその用途 | |
JP6536964B2 (ja) | 免疫賦活活性を有する核酸多糖複合体の抗腫瘍薬としての応用 | |
US20230053708A1 (en) | Short-chain cpg-containing oligodeoxynucleotide with linked polydeoxyadenylic acid, complex containing said oligodeoxynucleotide, and use thereof | |
JP7048102B2 (ja) | 免疫賦活活性を有する核酸多糖複合体の抗腫瘍薬としての応用 | |
BR122020017002B1 (pt) | Usos de oligodesoxinucleotídeos na fabricação de agentes para tratamento ou profilaxia de câncer | |
TWI701047B (zh) | 具有免疫賦活活性之核酸多醣複合體作為抗腫瘤藥之應用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
RD01 | Notification of change of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7426 Effective date: 20210804 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210819 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20210804 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220712 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20220822 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20221110 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230328 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230426 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7278551 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |