JP2003146888A - 炎症性腸疾患予防治療剤 - Google Patents
炎症性腸疾患予防治療剤Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 安全な物質を有効成分とする炎症性腸疾患予
防治療剤の提供。 【解決手段】 フコイダン、またフコイダンを含有する
モズク等の海藻抽出物を炎症性腸疾患予防治療剤の有効
成分とした。
防治療剤の提供。 【解決手段】 フコイダン、またフコイダンを含有する
モズク等の海藻抽出物を炎症性腸疾患予防治療剤の有効
成分とした。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、安全な炎症性腸疾
患予防治療剤に関するものである。
患予防治療剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】潰瘍性大腸炎やクローン病などの炎症性
腸疾患（Inflammatory Bowel Disease：ＩＢＤ）は、未
だその原因が明らかにされていない消化管疾患であり、
現在様々な治療・予防方法の確立が急務とされている。
炎症性腸疾患は、長期間に亘る腸炎病変の回復と再発が
繰り返されるのがこの病変の特徴であり、現在のとこ
ろ、治療には長期間に亘る薬剤投与法に依るしかない。
腸疾患（Inflammatory Bowel Disease：ＩＢＤ）は、未
だその原因が明らかにされていない消化管疾患であり、
現在様々な治療・予防方法の確立が急務とされている。
炎症性腸疾患は、長期間に亘る腸炎病変の回復と再発が
繰り返されるのがこの病変の特徴であり、現在のとこ
ろ、治療には長期間に亘る薬剤投与法に依るしかない。
【０００３】一方、我々のこれまでの研究によって、ヒ
トＩＢＤおよび動物ＩＢＤモデルのいずれでも、病変部
の腸粘膜上皮細胞においてＳＴＡＴ（ Signal Transduc
er and Activator of Transcripution）-3リン酸化応答
が亢進してることが見いだされている。ＳＴＡＴ-3分子
のリン酸化に関わる分子としては、インターロイキン
（ＩＬ）-6、白血病増殖阻止因子（ＬＩＦ）、オンコス
タチンＭ（ＯＳＭ）等が知られている。
トＩＢＤおよび動物ＩＢＤモデルのいずれでも、病変部
の腸粘膜上皮細胞においてＳＴＡＴ（ Signal Transduc
er and Activator of Transcripution）-3リン酸化応答
が亢進してることが見いだされている。ＳＴＡＴ-3分子
のリン酸化に関わる分子としては、インターロイキン
（ＩＬ）-6、白血病増殖阻止因子（ＬＩＦ）、オンコス
タチンＭ（ＯＳＭ）等が知られている。
【０００４】また、ＩＢＤモデル動物及びヒトＩＢＤに
おいて、腸上皮細胞でのＩＬ-6産生が亢進していること
も明らかとなっている。従って、ＩＢＤモデル動物およ
びヒトＩＢＤに認められる腸上皮細胞のＳＴＡＴ-3のリ
ン酸化は、炎症に伴って腸上皮細胞において産生される
ＩＬ-6に起因している可能性が高い。
おいて、腸上皮細胞でのＩＬ-6産生が亢進していること
も明らかとなっている。従って、ＩＢＤモデル動物およ
びヒトＩＢＤに認められる腸上皮細胞のＳＴＡＴ-3のリ
ン酸化は、炎症に伴って腸上皮細胞において産生される
ＩＬ-6に起因している可能性が高い。
【０００５】ＩＬ-6は、炎症反応時、腸上皮細胞あるい
は単球、マクロファージによって分泌される可溶性ＩＬ
-6受容体（ＩＬ-6Ｒ）と複合体を形成する。非リンパ系
細胞を含めたほぼ全ての細胞に発現するＩＬ-6受容体の
シグナル伝達鎖である膜糖タンパク質のgp１３０分子
は、複合体化したＩＬ-6／ＩＬ-6Ｒと会合し、細胞内に
シグナルを伝達する。
は単球、マクロファージによって分泌される可溶性ＩＬ
-6受容体（ＩＬ-6Ｒ）と複合体を形成する。非リンパ系
細胞を含めたほぼ全ての細胞に発現するＩＬ-6受容体の
シグナル伝達鎖である膜糖タンパク質のgp１３０分子
は、複合体化したＩＬ-6／ＩＬ-6Ｒと会合し、細胞内に
シグナルを伝達する。
【０００６】従って、複合体化したＩＬ-6／ＩＬ-6Ｒ
は、gp１３０分子に結合することでＩＬ-6Ｒを発現して
いない細胞系へもシグナルを伝達し、炎症反応を誘導す
る。以上のことから、ＩＬ-6／ＳＴＡＴ-3リン酸化応答
系の制御は、種々の炎症性疾患の抑制方法として現在注
目されている。
は、gp１３０分子に結合することでＩＬ-6Ｒを発現して
いない細胞系へもシグナルを伝達し、炎症反応を誘導す
る。以上のことから、ＩＬ-6／ＳＴＡＴ-3リン酸化応答
系の制御は、種々の炎症性疾患の抑制方法として現在注
目されている。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】炎症性腸疾患におい
て、従来のような長期間に亘る薬剤投与法による治療で
は、副作用が問題となっている。そこで、副作用の少な
い安全な食品を用いた病態の抑制法の開発が炎症性腸疾
患の治療にとって非常に有益であると考えられる。
て、従来のような長期間に亘る薬剤投与法による治療で
は、副作用が問題となっている。そこで、副作用の少な
い安全な食品を用いた病態の抑制法の開発が炎症性腸疾
患の治療にとって非常に有益であると考えられる。
【０００８】また、上記の如く、炎症性腸疾患の病変部
腸上皮細胞においても亢進が見られるＳＴＡＴ-3リン酸
化応答系の制御は、炎症性腸疾患の炎症性病変の抑制も
期待でき、このＳＴＡＴ-3リン酸化応答系の制御方法と
して、ＩＬ-6産生の抑制効果が考えられる。
腸上皮細胞においても亢進が見られるＳＴＡＴ-3リン酸
化応答系の制御は、炎症性腸疾患の炎症性病変の抑制も
期待でき、このＳＴＡＴ-3リン酸化応答系の制御方法と
して、ＩＬ-6産生の抑制効果が考えられる。
【０００９】よって、ＩＬ-6産生抑制効果を有すると同
時に安全である物質を主成分とする予防・治療剤が得ら
れれば、炎症性腸疾患を効果的に且つ安全に予防あるい
は治療することも可能となる。
時に安全である物質を主成分とする予防・治療剤が得ら
れれば、炎症性腸疾患を効果的に且つ安全に予防あるい
は治療することも可能となる。
【００１０】本発明の目的は、上記問題点に鑑み、安全
な物質を有効成分とする炎症性腸疾患予防治療剤を提供
することにある。
な物質を有効成分とする炎症性腸疾患予防治療剤を提供
することにある。
【００１１】
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するた
め、請求項１に記載の発明に係る炎症性腸疾患予防治療
剤は、フコイダンを有効成分とするものである。
め、請求項１に記載の発明に係る炎症性腸疾患予防治療
剤は、フコイダンを有効成分とするものである。
【００１２】また、請求項２に記載の発明に係る炎症性
腸疾患予防治療剤は請求項１に記載の炎症性腸疾患予防
治療剤において、フコイダンを含有する海藻抽出物を有
効成分とするものである。
腸疾患予防治療剤は請求項１に記載の炎症性腸疾患予防
治療剤において、フコイダンを含有する海藻抽出物を有
効成分とするものである。
【００１３】さらに、請求項３に記載の発明に係る炎症
性腸疾患予防治療剤は、請求項２に記載の炎症性腸疾患
予防治療剤において、フコイダンを含有するモズク抽出
物を有効成分とするものである。
性腸疾患予防治療剤は、請求項２に記載の炎症性腸疾患
予防治療剤において、フコイダンを含有するモズク抽出
物を有効成分とするものである。
【００１４】リポ多糖（ＬＰＳ）は、バクテロイデス属
や大腸菌などのようなグラム陰性細菌の細胞壁成分であ
る。炎症性腸疾患患者において、腸内細菌叢中のバクテ
ロイデス菌の総数が増加していることは良く知られてお
り、バクテロイデス種の過剰増殖がトランスジェニック
ラットHLA-B27 の腸炎を憎悪することも報告されてい
る。また、細胞表面のＬＰＳ受容体（ＴＬＲ４）の遺伝
子が破壊されたマウスにおいては大腸炎が対照マウスよ
り軽度であることも報告されている。
や大腸菌などのようなグラム陰性細菌の細胞壁成分であ
る。炎症性腸疾患患者において、腸内細菌叢中のバクテ
ロイデス菌の総数が増加していることは良く知られてお
り、バクテロイデス種の過剰増殖がトランスジェニック
ラットHLA-B27 の腸炎を憎悪することも報告されてい
る。また、細胞表面のＬＰＳ受容体（ＴＬＲ４）の遺伝
子が破壊されたマウスにおいては大腸炎が対照マウスよ
り軽度であることも報告されている。
【００１５】従って、ＬＰＳシグナルは、炎症性腸疾患
の発症・憎悪化において重要な要素である。ＬＰＳのよ
うな細菌成分は腸表面に直接影響し、腸上皮細胞におけ
る免疫応答を誘発すると考えられる。即ち、ＬＰＳシグ
ナルは腸上皮細胞におけるＩＬ-6の産生を引き起こし、
大腸炎を発生させると思われる。従って、腸上皮細胞か
らのこれらシグナルの除去が腸炎の改善に寄与する可能
性は高い。
の発症・憎悪化において重要な要素である。ＬＰＳのよ
うな細菌成分は腸表面に直接影響し、腸上皮細胞におけ
る免疫応答を誘発すると考えられる。即ち、ＬＰＳシグ
ナルは腸上皮細胞におけるＩＬ-6の産生を引き起こし、
大腸炎を発生させると思われる。従って、腸上皮細胞か
らのこれらシグナルの除去が腸炎の改善に寄与する可能
性は高い。
【００１６】本発明は、本発明者らが、ヒト胃細胞系へ
のヘリコバクター・ピロリの定着妨害やある種のウイル
スのヒト細胞系への感染を防ぐ等の多くの生物学的効果
が報告されており、海藻類等から得ることができ、その
多糖に毒性や刺激の見られない安全性の高いフコイダン
に着目し、リポ多糖（ＬＰＳ：リポポリサッカライド）
刺激により大腸炎が誘発されたマウス腸上皮細胞系にお
ける種々の海藻由来フコイダンのＩＬ-6産生抑制効果を
検討したところ、前記フコイダンのなかには、ＩＬ-6産
生抑制効果を持つものがあることを見出し、さらにこれ
によって炎症性腸疾患に対する予防・治療剤の有効成分
となることを見出して本発明に至ったものである。
のヘリコバクター・ピロリの定着妨害やある種のウイル
スのヒト細胞系への感染を防ぐ等の多くの生物学的効果
が報告されており、海藻類等から得ることができ、その
多糖に毒性や刺激の見られない安全性の高いフコイダン
に着目し、リポ多糖（ＬＰＳ：リポポリサッカライド）
刺激により大腸炎が誘発されたマウス腸上皮細胞系にお
ける種々の海藻由来フコイダンのＩＬ-6産生抑制効果を
検討したところ、前記フコイダンのなかには、ＩＬ-6産
生抑制効果を持つものがあることを見出し、さらにこれ
によって炎症性腸疾患に対する予防・治療剤の有効成分
となることを見出して本発明に至ったものである。
【００１７】中でも、モズク由来のフコイダン、特にオ
キナワモズク由来のフコイダンは、他物質由来のフコイ
ダンに比べてそのＩＬ-6産生抑制効果が高く、炎症性腸
疾患予防治療剤の有効成分として望ましいものであるこ
とを見出した。
キナワモズク由来のフコイダンは、他物質由来のフコイ
ダンに比べてそのＩＬ-6産生抑制効果が高く、炎症性腸
疾患予防治療剤の有効成分として望ましいものであるこ
とを見出した。
【００１８】フコイダンは、モズクやコンブ、ワカメ等
の褐藻類やなまこ体壁などに豊富に含有されている主に
フコースからなる硫酸化多糖体である。従って、古くか
ら食されていた安全性の高い種々の食物から得ることが
でき、フコイダンあるいはフコイダンを含有する抽出物
を有効成分とした炎症性腸疾患の予防治療剤にも高い安
全性が確保できる。
の褐藻類やなまこ体壁などに豊富に含有されている主に
フコースからなる硫酸化多糖体である。従って、古くか
ら食されていた安全性の高い種々の食物から得ることが
でき、フコイダンあるいはフコイダンを含有する抽出物
を有効成分とした炎症性腸疾患の予防治療剤にも高い安
全性が確保できる。
【００１９】
【発明の実施の形態】本発明に用いられるフコイダンと
しては、褐藻類のCladoshipon okamuranus Tokida 所謂
オキナワモズク由来のフコイダン、Kjellmaniella cras
sifolia 所謂ガゴメコンブ由来のフコイダン、またHimm
anthalia elongata 由来のフコイダン、Sargassum horn
eri 由来のフコイダン、Lamanaria digtata 由来のフコ
イダン、Fucus vesiculosus 所謂ヒバマタ由来のフコイ
ダン等が挙げられる。
しては、褐藻類のCladoshipon okamuranus Tokida 所謂
オキナワモズク由来のフコイダン、Kjellmaniella cras
sifolia 所謂ガゴメコンブ由来のフコイダン、またHimm
anthalia elongata 由来のフコイダン、Sargassum horn
eri 由来のフコイダン、Lamanaria digtata 由来のフコ
イダン、Fucus vesiculosus 所謂ヒバマタ由来のフコイ
ダン等が挙げられる。
【００２０】各海藻からのフコイダンの調製法として
は、従来から用いられている方法を用いても良い。例え
ば、代表的なものとして、以下に例示する酸抽出法、
熱水抽出法がある。
は、従来から用いられている方法を用いても良い。例え
ば、代表的なものとして、以下に例示する酸抽出法、
熱水抽出法がある。
【００２１】酸抽出法
海藻をその湿重量の１〜３倍量の水に懸濁させ、酢酸水
溶液または希塩酸を加えてｐＨ２〜４，望ましくはｐＨ
２〜３に調整する。次いで約５０℃以上、望ましくは８
０〜１００℃に加熱し、フコイダンを溶出させた後、遠
心分離して沈殿物を除き、上清を水酸化ナトリウムで中
和して抽出物を得る。必要に応じて、さらに限外ろ過、
透析等を行って低分子量の不純物を除き、凍結乾燥する
ことで純度の高いフコイダンが得られる。
溶液または希塩酸を加えてｐＨ２〜４，望ましくはｐＨ
２〜３に調整する。次いで約５０℃以上、望ましくは８
０〜１００℃に加熱し、フコイダンを溶出させた後、遠
心分離して沈殿物を除き、上清を水酸化ナトリウムで中
和して抽出物を得る。必要に応じて、さらに限外ろ過、
透析等を行って低分子量の不純物を除き、凍結乾燥する
ことで純度の高いフコイダンが得られる。
【００２２】熱抽出法
海藻をその湿重量の１〜３倍量の水に懸濁させ、約１０
分〜１時間、１００℃に加熱する。次いで遠心分離して
沈殿物を除き、フコイダンを含む抽出物を得る。必要に
より、上清に塩化カルシウムまたは酢酸バリウムを加え
て沈殿するアルギン酸を除く。更に透析を行って低分子
量の不純物を除いた後、凍結乾燥すると純度の高いフコ
イダンを得ることができる。
分〜１時間、１００℃に加熱する。次いで遠心分離して
沈殿物を除き、フコイダンを含む抽出物を得る。必要に
より、上清に塩化カルシウムまたは酢酸バリウムを加え
て沈殿するアルギン酸を除く。更に透析を行って低分子
量の不純物を除いた後、凍結乾燥すると純度の高いフコ
イダンを得ることができる。
【００２３】本発明においては、炎症性腸疾患予防治療
剤の有効成分として、低分子量の不純物を除いた純度の
高いフコイダンを用いることが好ましい。また、低分子
量の不純物（水溶性成分、塩類等）を除去する任意の段
階において、イオン交換処理を施しフコイダンの硫酸エ
ステル基を遊離酸形またはアルカリ金属塩形に変換する
ことが特に好ましい。イオン交換処理は、例えば電気透
析、限外濾過膜を用いる酸洗浄、イオン交換樹脂処理、
またはこれらの処理のいずれかとそれに続く中和処理等
により行うことができる。これらの処理はいずれも定法
に従い行えばよく、またイオン交換処理後のフコイダン
をカ性ソーダ、カ性カリ等のアルカリ金属水酸化物で中
和すれば、アルカリ金属塩を得ることができる。
剤の有効成分として、低分子量の不純物を除いた純度の
高いフコイダンを用いることが好ましい。また、低分子
量の不純物（水溶性成分、塩類等）を除去する任意の段
階において、イオン交換処理を施しフコイダンの硫酸エ
ステル基を遊離酸形またはアルカリ金属塩形に変換する
ことが特に好ましい。イオン交換処理は、例えば電気透
析、限外濾過膜を用いる酸洗浄、イオン交換樹脂処理、
またはこれらの処理のいずれかとそれに続く中和処理等
により行うことができる。これらの処理はいずれも定法
に従い行えばよく、またイオン交換処理後のフコイダン
をカ性ソーダ、カ性カリ等のアルカリ金属水酸化物で中
和すれば、アルカリ金属塩を得ることができる。
【００２４】また、本発明の炎症性腸疾患予防治療剤
は、その有効成分であるフコイダンの安全性が確立され
ているため、そのまま経口投与しても問題ないが、必要
に応じて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、被覆剤、
乳化剤、分散剤、溶剤、安定化剤など、フコイダンの効
果を阻害するものでなければ適宜添加してもよく、錠
剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤などに製剤して
使用しても良い。なお、適度なフコイダンの投与量は、
おおむね50mg〜３ｇ／人／日、好ましくは 100mg〜１ｇ
／人／日である。
は、その有効成分であるフコイダンの安全性が確立され
ているため、そのまま経口投与しても問題ないが、必要
に応じて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、被覆剤、
乳化剤、分散剤、溶剤、安定化剤など、フコイダンの効
果を阻害するものでなければ適宜添加してもよく、錠
剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤などに製剤して
使用しても良い。なお、適度なフコイダンの投与量は、
おおむね50mg〜３ｇ／人／日、好ましくは 100mg〜１ｇ
／人／日である。
【００２５】また、本発明の炎症性腸疾患予防治療剤
は、治療剤としての経口投与に限らず、任意の飲食物に
添加した予防食品の形態で日常的に摂取させることもで
きる。この際、有効成分のフコイダンは、高純度なもの
だけでなく、海藻類から簡単な工程で抽出したフコイダ
ン含有抽出物を用いれば、炎症性腸疾患の予防食品をよ
り低コストで簡便に製造、提供できる。
は、治療剤としての経口投与に限らず、任意の飲食物に
添加した予防食品の形態で日常的に摂取させることもで
きる。この際、有効成分のフコイダンは、高純度なもの
だけでなく、海藻類から簡単な工程で抽出したフコイダ
ン含有抽出物を用いれば、炎症性腸疾患の予防食品をよ
り低コストで簡便に製造、提供できる。
【００２６】
【実施例】以下、実施例を挙げて本発明を詳細に説明す
るが、本発明はこれらに限定されるものではない。な
お、以降の実施例においては、上記常法により調製した
低分子量の不純物を除いた高純度のフコイダンおよびこ
れと同程度の市販フコイダンを用いるものとする。
るが、本発明はこれらに限定されるものではない。な
お、以降の実施例においては、上記常法により調製した
低分子量の不純物を除いた高純度のフコイダンおよびこ
れと同程度の市販フコイダンを用いるものとする。
【００２７】（１）材料
オキナワモズク（Cladoshipon okamuranus Tokida ）は
沖縄で養殖されたものをトロピカル・テクノセンターよ
り塩漬食品として購入し、他の海藻（ Kjellmaniella c
rassifolia，Himmanthalia elongata，Sargassum horne
ri，Lamanaria digitata）は乾物としてＳＣＥＴＩ社よ
り供与され、これら各海藻から、上記常法で高純度のフ
コイダンを抽出した。また、Fucus vesiculosus 由来の
フコイダンは、シグマ社より購入した。
沖縄で養殖されたものをトロピカル・テクノセンターよ
り塩漬食品として購入し、他の海藻（ Kjellmaniella c
rassifolia，Himmanthalia elongata，Sargassum horne
ri，Lamanaria digitata）は乾物としてＳＣＥＴＩ社よ
り供与され、これら各海藻から、上記常法で高純度のフ
コイダンを抽出した。また、Fucus vesiculosus 由来の
フコイダンは、シグマ社より購入した。
【００２８】（２）データ解析
以降の実施例で示される全てのデータは、平均値±ＳＥ
（統計誤差）として表した。また、0.05より小さいＰ数
値は、統計的に有意であるとする。
（統計誤差）として表した。また、0.05より小さいＰ数
値は、統計的に有意であるとする。
【００２９】実施例１
本実施例では、各種フコイダンのＩＬ-6産生抑制効果
を、マウス大腸癌細胞ＣＭＴ-93 をＬＰＳ刺激後のＩＬ
-6産生において調べる。なお、本実験を始めるに当たっ
て、まず、種々の濃度のＬＰＳ刺激に対する、ＣＭＴ-9
3 細胞株のＩＬ−６産生を調べた。
を、マウス大腸癌細胞ＣＭＴ-93 をＬＰＳ刺激後のＩＬ
-6産生において調べる。なお、本実験を始めるに当たっ
て、まず、種々の濃度のＬＰＳ刺激に対する、ＣＭＴ-9
3 細胞株のＩＬ−６産生を調べた。
【００３０】（Ａ）ＬＰＳ刺激ＣＭＴ−93細胞における
ＩＬ-６産生量 マウス大腸癌細胞株ＣＭＴ-93 はＡＴＣＣより購入し
た。ＬＰＳはシグマ社より購入したE.coli由来のものを
用いた。ＣＭＴ-93 細胞を、10％FCS/10mM Hepes/penic
illin-streptomycin/2-ME/non-essential aminoacid/DM
EM培養液を用いて、37℃、５％CO２ の条件下で、ＬＰ
Ｓ無添加、あるいは種々の濃度のＬＰＳ添加条件の下
で、７２時間培養した。培養後、培養液を回収し、−８
４℃で保存した。ＩＬ-6産生量は、ＢＤPharMingen社よ
り購入したマウスの抗ＩＬ-6mAbs（クローン：MP5-20F
3,MP5-32C11）を用いてＥＬＩＳＡ法により測定した。
ＩＬ-６産生量 マウス大腸癌細胞株ＣＭＴ-93 はＡＴＣＣより購入し
た。ＬＰＳはシグマ社より購入したE.coli由来のものを
用いた。ＣＭＴ-93 細胞を、10％FCS/10mM Hepes/penic
illin-streptomycin/2-ME/non-essential aminoacid/DM
EM培養液を用いて、37℃、５％CO２ の条件下で、ＬＰ
Ｓ無添加、あるいは種々の濃度のＬＰＳ添加条件の下
で、７２時間培養した。培養後、培養液を回収し、−８
４℃で保存した。ＩＬ-6産生量は、ＢＤPharMingen社よ
り購入したマウスの抗ＩＬ-6mAbs（クローン：MP5-20F
3,MP5-32C11）を用いてＥＬＩＳＡ法により測定した。
【００３１】その結果、図１に示すように、ＣＭＰ-93
細胞におけるＩＬ-6産生量はＬＰＳが５〜10μm/mlの場
合において最大に達し、10μg/mlで飽和状態であった。
細胞におけるＩＬ-6産生量はＬＰＳが５〜10μm/mlの場
合において最大に達し、10μg/mlで飽和状態であった。
【００３２】（Ｂ）ＬＰＳ刺激ＣＭＰ-93 細胞に対する
フコイダンのＩＬ-6産生抑制効果 前記各海藻由来のフコイダンについて、ＬＰＳ刺激ＣＭ
Ｐ-93 細胞におけるＩＬ-6産生を抑制することができる
かを調べた。即ち、１μg/mlの各種フコイダンを添加し
たＣＭＴ-93 細胞培養系へ１０μg/mlＬＰＳを加え、７
２時間培養した。培養後、培養液を回収し、上記と同様
にＥＬＩＳＡ法によりＩＬ-6産生量を測定した。
フコイダンのＩＬ-6産生抑制効果 前記各海藻由来のフコイダンについて、ＬＰＳ刺激ＣＭ
Ｐ-93 細胞におけるＩＬ-6産生を抑制することができる
かを調べた。即ち、１μg/mlの各種フコイダンを添加し
たＣＭＴ-93 細胞培養系へ１０μg/mlＬＰＳを加え、７
２時間培養した。培養後、培養液を回収し、上記と同様
にＥＬＩＳＡ法によりＩＬ-6産生量を測定した。
【００３３】その結果、図２（ａ）に示すように、オキ
ナワモズク（Cladoshipon okamuranus Tokida）由来の
フコイダンおよびガゴメコンブ（Kjellmaniella crassi
folia）由来のフコイダンは、ＬＰＳ刺激ＣＭＰ-93 細
胞におけるＩＬ-6産生を抑制した。しかしながら、他の
Fucus vesiculosus，Himmanthalia elongata，Sargassu
m horneri，Lamanaria digitata 由来のフコイダンはＩ
Ｌ-６産生を抑制しなかった。
ナワモズク（Cladoshipon okamuranus Tokida）由来の
フコイダンおよびガゴメコンブ（Kjellmaniella crassi
folia）由来のフコイダンは、ＬＰＳ刺激ＣＭＰ-93 細
胞におけるＩＬ-6産生を抑制した。しかしながら、他の
Fucus vesiculosus，Himmanthalia elongata，Sargassu
m horneri，Lamanaria digitata 由来のフコイダンはＩ
Ｌ-６産生を抑制しなかった。
【００３４】次に、ＩＬ-６産生を抑制することが分か
った前記オキナワモズク由来フコイダンおよびガゴメコ
ンブ由来フコイダンについて、異なるフコイダン添加濃
度におけるＬＰＳ刺激ＣＭＰ-93 細胞でのＩＬ-6産生抑
制効果を調べた。細胞培養およびＥＬＩＳＡ法によるＩ
Ｌ-6量の測定は上記と同様である。
った前記オキナワモズク由来フコイダンおよびガゴメコ
ンブ由来フコイダンについて、異なるフコイダン添加濃
度におけるＬＰＳ刺激ＣＭＰ-93 細胞でのＩＬ-6産生抑
制効果を調べた。細胞培養およびＥＬＩＳＡ法によるＩ
Ｌ-6量の測定は上記と同様である。
【００３５】その結果、図２（ｂ）に示すように、どち
らのフコイダンにおいても、その添加濃度に依存してＩ
Ｌ-6産生量が抑制された。
らのフコイダンにおいても、その添加濃度に依存してＩ
Ｌ-6産生量が抑制された。
【００３６】実施例２
本実施例では、in vivo でのマウス慢性大腸炎に対する
フコイダンの改善効果を調べた。
フコイダンの改善効果を調べた。
【００３７】（Ｃ）動物
本実施例では、雌 Balb/c マウス（８週齢）（日本クリ
ア研究所社より購入）を用いた。これらのマウスは実験
中ＳＰＦ（Specific pathogen-free）環境下で飼育され
るものである。
ア研究所社より購入）を用いた。これらのマウスは実験
中ＳＰＦ（Specific pathogen-free）環境下で飼育され
るものである。
【００３８】（Ｄ）慢性ＤＳＳ大腸炎の誘発
Balb/cマウスへの慢性大腸炎の誘発は、デキストラン硫
酸ナトリウム（ＤＳＳ）により行った。１０週齢のマウ
スに、４％ＤＳＳ（分子量４０ｋＤａ：ＩＣＮ社製）水
を７日間飲料水として投与した後、続く１０日間を休止
期とする方法を１サイクルとして、合計４サイクルで慢
性大腸炎を誘発した。
酸ナトリウム（ＤＳＳ）により行った。１０週齢のマウ
スに、４％ＤＳＳ（分子量４０ｋＤａ：ＩＣＮ社製）水
を７日間飲料水として投与した後、続く１０日間を休止
期とする方法を１サイクルとして、合計４サイクルで慢
性大腸炎を誘発した。
【００３９】（Ｅ）in vivo でのマウス慢性大腸炎にお
けるフコイダン効果 スタンダードマウス飼料（ＭＦ）およびオキナワモズク
（Cladoshipon okamuranus Tokida）由来のフコイダン
含有（0.05％w/w）ＭＦ飼料、またはヒバマタ（Fucus v
esiculosus）由来のフコイダン含有（0.05％w/w）ＭＦ
飼料、のそれぞれで飼育したBalb/cマウスに、上記の如
くＤＳＳ入り飲料水により大腸炎を誘発し、大腸炎にお
けるフコイダン効果を種々の疾患パラメータにより分析
した。
けるフコイダン効果 スタンダードマウス飼料（ＭＦ）およびオキナワモズク
（Cladoshipon okamuranus Tokida）由来のフコイダン
含有（0.05％w/w）ＭＦ飼料、またはヒバマタ（Fucus v
esiculosus）由来のフコイダン含有（0.05％w/w）ＭＦ
飼料、のそれぞれで飼育したBalb/cマウスに、上記の如
くＤＳＳ入り飲料水により大腸炎を誘発し、大腸炎にお
けるフコイダン効果を種々の疾患パラメータにより分析
した。
【００４０】(1) 腸炎疾患評価
腸炎疾患の評価は、体重、下痢、便潜血という疾患の特
徴的変化をパラメータとしてそれぞれ０〜４の段階数値
でスコア換算され、各パラメータの数値および数値総計
で、ＤＳＳ大腸炎マウスの臨床的経過における変化の反
映として確認された。
徴的変化をパラメータとしてそれぞれ０〜４の段階数値
でスコア換算され、各パラメータの数値および数値総計
で、ＤＳＳ大腸炎マウスの臨床的経過における変化の反
映として確認された。
【００４１】結果は図３（ａ）に示したように、全パラ
メータのスコアも、スタンダード飼料またはヒバマタ由
来フコイダン含有飼料が与えられた場合に対して、オキ
ナワモズクフコイダン含有飼料が与えられたBalb/cマウ
スにおいて数値が低かった。
メータのスコアも、スタンダード飼料またはヒバマタ由
来フコイダン含有飼料が与えられた場合に対して、オキ
ナワモズクフコイダン含有飼料が与えられたBalb/cマウ
スにおいて数値が低かった。
【００４２】(2) 腸組織長評価
盲腸から肛門までの大腸の長さを、ＤＳＳ大腸炎の重症
度パラメータとして測定した。
度パラメータとして測定した。
【００４３】その結果、図３（ｂ）に示すように、腸組
織長は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料が与え
られた大腸炎誘発Balb/cマウスの方がスタンダード飼料
を与えられたマウスのものより有意に長かった。また、
スタンダード飼料およびヒバマタ由来フコイダン含有飼
料を与えられた大腸炎誘発Balb/cマウスにおいては腸炎
の重症化のために大腸の長さが短くなっていた。
織長は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料が与え
られた大腸炎誘発Balb/cマウスの方がスタンダード飼料
を与えられたマウスのものより有意に長かった。また、
スタンダード飼料およびヒバマタ由来フコイダン含有飼
料を与えられた大腸炎誘発Balb/cマウスにおいては腸炎
の重症化のために大腸の長さが短くなっていた。
【００４４】(3) ミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）測
定 上記の結果を確認するため、腸組織のＭＰＯ活性を３グ
ループ間で比較した。ＭＰＯ活性の測定は、以下の手順
で行った。即ち、まず、それぞれのマウス大腸組織をヘ
キサデシルトリメチルアンモニウムブロミド（シグマ社
製）緩衝液中でポリトロンホモゲナイザーで破砕し、そ
の懸濁液を氷上で音波処理した後、１５０００ｒｐｍで
３０分間の遠心分離を行った。各上清を、0.167mg／ml
のO-ジアニシジンヒドロクロライド（シグマ社製）と
0.0005％過酸化水素を含む酵素基質緩衝液に混合し、そ
れぞれ４０５nm波長における吸光度の変化を測定し、Ｍ
ＰＯ活性（Ｕ/g proten ）を求めた。
定 上記の結果を確認するため、腸組織のＭＰＯ活性を３グ
ループ間で比較した。ＭＰＯ活性の測定は、以下の手順
で行った。即ち、まず、それぞれのマウス大腸組織をヘ
キサデシルトリメチルアンモニウムブロミド（シグマ社
製）緩衝液中でポリトロンホモゲナイザーで破砕し、そ
の懸濁液を氷上で音波処理した後、１５０００ｒｐｍで
３０分間の遠心分離を行った。各上清を、0.167mg／ml
のO-ジアニシジンヒドロクロライド（シグマ社製）と
0.0005％過酸化水素を含む酵素基質緩衝液に混合し、そ
れぞれ４０５nm波長における吸光度の変化を測定し、Ｍ
ＰＯ活性（Ｕ/g proten ）を求めた。
【００４５】その結果、図４に示すように、腸組織ＭＰ
Ｏ活性は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料を与
えられたマウスにおいて、ヒバマタ由来フコイダン含有
飼料またはスタンダード飼料を与えられたマウスより低
かった。
Ｏ活性は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料を与
えられたマウスにおいて、ヒバマタ由来フコイダン含有
飼料またはスタンダード飼料を与えられたマウスより低
かった。
【００４６】以上の結果から、オキナワモズク由来のフ
コイダンには、マウスにおける慢性大腸炎を改善する効
果を備えていることが明らかとなった。
コイダンには、マウスにおける慢性大腸炎を改善する効
果を備えていることが明らかとなった。
【００４７】実施例３
本実施例では、オキナワモズク由来フコイダンの免疫学
的特徴を調べた。
的特徴を調べた。
【００４８】（Ｆ）リンパ球産生およびフローサイトメ
トリー コントロールBalb/cマウスとＤＳＳにより誘導された大
腸炎誘発Balb/cマウスとで、大腸粘膜固有層（ IL-LPL
s）の表現型を比較した。
トリー コントロールBalb/cマウスとＤＳＳにより誘導された大
腸炎誘発Balb/cマウスとで、大腸粘膜固有層（ IL-LPL
s）の表現型を比較した。
【００４９】１cmずつにカットされた大腸片を、0.45mM
ＤＴＴおよび２mMＥＤＴＡを含むハンクスの平衡塩類液
（ＨＢＳＳ）中で３７℃、１５分間ずつ２回、振蕩しな
がらインキュベートした。デカンテイションによる液層
の除去の後、残った大腸片を、2.5％ウシ胎児血清（FC
S）と300μg/ml コラゲナーゼ（コラゲナーゼ−ヤクル
トＳ；ヤクルト本社製）、50μg/mlデオキシリボヌクレ
アーゼＩ（シグマ社製）を含むＲＰＭＩ1640培養液で、
ＣＯ２ 恒温器にて振蕩しながら、３７℃、４５分間ず
つ３回、インキュベートした。その後、細胞塊を、氷冷
した2.5％FCS/10mMHepes/RPMI 液中に懸濁し、ナイロン
カラムを通過させた。リンパ球群を、パーコール密度勾
配（シグマ社製）の４４／１００％境界から分離した。
得られた細胞は、ＴＣＲβ、ＣＤ４、ＣＤ45RB、ＣＤ69
あるいはＢ２２０に対するｍＡｂｓで染色された。染色
後の細胞は、Epics ELセルアナライザー（ベックマン社
製）によって分析された。
ＤＴＴおよび２mMＥＤＴＡを含むハンクスの平衡塩類液
（ＨＢＳＳ）中で３７℃、１５分間ずつ２回、振蕩しな
がらインキュベートした。デカンテイションによる液層
の除去の後、残った大腸片を、2.5％ウシ胎児血清（FC
S）と300μg/ml コラゲナーゼ（コラゲナーゼ−ヤクル
トＳ；ヤクルト本社製）、50μg/mlデオキシリボヌクレ
アーゼＩ（シグマ社製）を含むＲＰＭＩ1640培養液で、
ＣＯ２ 恒温器にて振蕩しながら、３７℃、４５分間ず
つ３回、インキュベートした。その後、細胞塊を、氷冷
した2.5％FCS/10mMHepes/RPMI 液中に懸濁し、ナイロン
カラムを通過させた。リンパ球群を、パーコール密度勾
配（シグマ社製）の４４／１００％境界から分離した。
得られた細胞は、ＴＣＲβ、ＣＤ４、ＣＤ45RB、ＣＤ69
あるいはＢ２２０に対するｍＡｂｓで染色された。染色
後の細胞は、Epics ELセルアナライザー（ベックマン社
製）によって分析された。
【００５０】これらの結果に基づいて、スタンダード飼
料、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料、ヒバマタ
由来フコイダン含有飼料、をそれぞれ与えられた大腸炎
誘発Balb/cマウスの３つのグループ間で IL-LPLsの表現
型を比較した。
料、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料、ヒバマタ
由来フコイダン含有飼料、をそれぞれ与えられた大腸炎
誘発Balb/cマウスの３つのグループ間で IL-LPLsの表現
型を比較した。
【００５１】その結果、図５に示すように、Ｂ220 陽性
Ｂ細胞の総数は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼
料投与マウスにおいて、他のグループのマウスより有意
に低かった。
Ｂ細胞の総数は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼
料投与マウスにおいて、他のグループのマウスより有意
に低かった。
【００５２】（Ｇ）細胞培養およびサイトカイン測定
前記３グループの各大腸炎誘発マウスからの粘膜固有層
細胞（1.0×10６cell）を、２４穴組織培養プレートを
用いて10％FCS/10mM Hepes/2-ME/RPMI培養液中で、固層
化した抗ＴＣＲβｍＡｂ（H57-597，10μg/ml）、抗Ｃ
Ｄ28ｍＡｂ（37.51，１μg/ml）の刺激の下で培養し
た。７２時間培養の後、その培養液を回収し、ＥＬＩＳ
Ａ測定に供するまで−８４℃で保存した。
細胞（1.0×10６cell）を、２４穴組織培養プレートを
用いて10％FCS/10mM Hepes/2-ME/RPMI培養液中で、固層
化した抗ＴＣＲβｍＡｂ（H57-597，10μg/ml）、抗Ｃ
Ｄ28ｍＡｂ（37.51，１μg/ml）の刺激の下で培養し
た。７２時間培養の後、その培養液を回収し、ＥＬＩＳ
Ａ測定に供するまで−８４℃で保存した。
【００５３】サイトカイン特異的ＥＬＩＳＡ測定は、次
に挙げる抗体結合を用いて行った。即ち、抗インターフ
ェロン（ＩＦＮ）-γ（クローン：XMG1.2，R4-6A2 ）、
抗インターロイキン４（ＩＬ-４）（クローン：11B11，
BVD6-24G2 ）であり、これらは全てＢＤpharMingen よ
り購入した。ＩＬ-10およびＴＧＦ-β1の測定用には、
バイオソース・インターナショナル社、Ｇｅｎｚｙｍｅ
社、よりそれぞれ購入した測定キットを用いた。
に挙げる抗体結合を用いて行った。即ち、抗インターフ
ェロン（ＩＦＮ）-γ（クローン：XMG1.2，R4-6A2 ）、
抗インターロイキン４（ＩＬ-４）（クローン：11B11，
BVD6-24G2 ）であり、これらは全てＢＤpharMingen よ
り購入した。ＩＬ-10およびＴＧＦ-β1の測定用には、
バイオソース・インターナショナル社、Ｇｅｎｚｙｍｅ
社、よりそれぞれ購入した測定キットを用いた。
【００５４】ＴＣＲβ／ＣＤ28抗原で刺激された大腸粘
膜固有層細胞（ IL-LPLs）においては、図６（ａ）
（ｂ）に示すように、ＩＦＮ（インターフェロン）-γ
やＩＬ-６のような炎症性サイトカインの産生量は、オ
キナワモズク由来フコイダン含有飼料投与大腸炎誘発マ
ウスでスタンダード飼料およびヒバマタ由来フコイダン
含有飼料投与マウスより有意に低かった。
膜固有層細胞（ IL-LPLs）においては、図６（ａ）
（ｂ）に示すように、ＩＦＮ（インターフェロン）-γ
やＩＬ-６のような炎症性サイトカインの産生量は、オ
キナワモズク由来フコイダン含有飼料投与大腸炎誘発マ
ウスでスタンダード飼料およびヒバマタ由来フコイダン
含有飼料投与マウスより有意に低かった。
【００５５】これに対して、炎症抑制性サイトカインで
あるＴＧＦ-β1の産生量は、オキナワモズク由来フコイ
ダン含有飼料投与大腸炎誘発マウスにおいてスタンダー
ド飼料およびヒバマタ由来フコイダン含有飼料投与マウ
スより有意に高かった（図６（ｅ））。同じく炎症抑制
性サイトカインであるＩＬ-10 の産生量は、オキナワモ
ズク由来フコイダン含有飼料投与大腸炎誘発マウスにお
いてスタンダード飼料投与マウスより高かった（図６
（ｄ））。なお、ＩＬ-４ の産生量はスタンダード飼料
投与マウスが最も低かった。
あるＴＧＦ-β1の産生量は、オキナワモズク由来フコイ
ダン含有飼料投与大腸炎誘発マウスにおいてスタンダー
ド飼料およびヒバマタ由来フコイダン含有飼料投与マウ
スより有意に高かった（図６（ｅ））。同じく炎症抑制
性サイトカインであるＩＬ-10 の産生量は、オキナワモ
ズク由来フコイダン含有飼料投与大腸炎誘発マウスにお
いてスタンダード飼料投与マウスより高かった（図６
（ｄ））。なお、ＩＬ-４ の産生量はスタンダード飼料
投与マウスが最も低かった。
【００５６】（Ｈ）腸片部における免疫グロブリンＧ
（IgＧ）の測定 前記３グループのマウスの大腸の破砕サンプルを上記と
同様に調製し、全IgＧ、IgG１およびIgG２の産生量を特
異的サンドイッチＥＬＩＳＡ法により測定した。
（IgＧ）の測定 前記３グループのマウスの大腸の破砕サンプルを上記と
同様に調製し、全IgＧ、IgG１およびIgG２の産生量を特
異的サンドイッチＥＬＩＳＡ法により測定した。
【００５７】前記３つの実験グループにおける大腸粘膜
でのIgＧの測定の結果、図７に示すように、IgＧ総量、
IgG１およびIgG２ａ がそれぞれスタンダード飼料、ま
たヒバマタ由来フコイダン含有飼料を与えられた大腸炎
誘発Balb/cマウスにおいて増加していた。
でのIgＧの測定の結果、図７に示すように、IgＧ総量、
IgG１およびIgG２ａ がそれぞれスタンダード飼料、ま
たヒバマタ由来フコイダン含有飼料を与えられた大腸炎
誘発Balb/cマウスにおいて増加していた。
【００５８】実施例４
本実施例では、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料
が与えられた大腸炎誘発Balb/cマウスの大腸上皮細胞上
のＩＬ-6ｍＲＮＡレベルを、大腸炎非誘発Balb/cマウス
および、スタンダード飼料が与えれた大腸炎誘発Balb/c
マウスを対照として、ＲＴ−ＰＣＲ法によって測定し
た。
が与えられた大腸炎誘発Balb/cマウスの大腸上皮細胞上
のＩＬ-6ｍＲＮＡレベルを、大腸炎非誘発Balb/cマウス
および、スタンダード飼料が与えれた大腸炎誘発Balb/c
マウスを対照として、ＲＴ−ＰＣＲ法によって測定し
た。
【００５９】大腸上皮細胞は、大腸炎非誘発Balb/cマウ
ス、またスタンダード飼料またはオキナワモズク由来フ
コイダン含有飼料を与えられた大腸炎誘発Balb/cマウス
からそれぞれ得た。
ス、またスタンダード飼料またはオキナワモズク由来フ
コイダン含有飼料を与えられた大腸炎誘発Balb/cマウス
からそれぞれ得た。
【００６０】また全ＲＮＡは、これら３つのマウスグル
ープより調製された。1.0μgの全ＲＮＡを逆転写反応
後、Ｇ３ＰＤＨ，ＩＬ-6、ＴＮＦ-α、ＴＬＲ-4 特異的
プライマーを用いてＰＣＲ反応を行った。ゲル電気泳動
の後、ＰＣＲ産生物をエチジウムブロマイドにより染色
して検出した。
ープより調製された。1.0μgの全ＲＮＡを逆転写反応
後、Ｇ３ＰＤＨ，ＩＬ-6、ＴＮＦ-α、ＴＬＲ-4 特異的
プライマーを用いてＰＣＲ反応を行った。ゲル電気泳動
の後、ＰＣＲ産生物をエチジウムブロマイドにより染色
して検出した。
【００６１】その結果、図８に示したように、ＩＬ-6ｍ
ＲＮＡは、スタンダード飼料投与ＤＳＳ大腸炎誘導Balb
/cマウスにおいて激増した。しかし、ＩＬ-6ｍＲＮＡの
誘導は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料投与Ba
lb/cマウスの大腸上皮細胞において抑制された。ＴＮＦ
（腫瘍壊死因子）-αおよびＴＬＲ-4 ｍＲＮＡも、オキ
ナワモズク由来フコイダン含有飼料投与Balb/cマウスの
大腸上皮細胞において抑制された。
ＲＮＡは、スタンダード飼料投与ＤＳＳ大腸炎誘導Balb
/cマウスにおいて激増した。しかし、ＩＬ-6ｍＲＮＡの
誘導は、オキナワモズク由来フコイダン含有飼料投与Ba
lb/cマウスの大腸上皮細胞において抑制された。ＴＮＦ
（腫瘍壊死因子）-αおよびＴＬＲ-4 ｍＲＮＡも、オキ
ナワモズク由来フコイダン含有飼料投与Balb/cマウスの
大腸上皮細胞において抑制された。
【００６２】以上の実施例において、フコイダン、特
に、オキナワモズク由来のフコイダンは、in vivo およ
びin vitroで、大腸上皮細胞におけるＩＬ-6の産生抑制
作用を示し、大腸炎病変の改善効果も示され、炎症性腸
疾患の高い予防治療効果が期待できるものである。
に、オキナワモズク由来のフコイダンは、in vivo およ
びin vitroで、大腸上皮細胞におけるＩＬ-6の産生抑制
作用を示し、大腸炎病変の改善効果も示され、炎症性腸
疾患の高い予防治療効果が期待できるものである。
【００６３】
【発明の効果】本発明によれば、有効成分であるフコイ
ダンに高い安全性が確立されており、その作用機序はＩ
Ｌ-6産生抑制作用に基づく腸炎病変改善効果が高いもの
であり、炎症性腸疾患の安全で効果的な予防治療剤の提
供が可能となる。
ダンに高い安全性が確立されており、その作用機序はＩ
Ｌ-6産生抑制作用に基づく腸炎病変改善効果が高いもの
であり、炎症性腸疾患の安全で効果的な予防治療剤の提
供が可能となる。
【図１】実施例１のＬＰＳ刺激ＣＭＴ−93細胞における
ＩＬ-６産生量の測定結果を示す棒グラフ図（横軸：IL-
6産生量pg/ml ，縦軸：LPS添加量μg/ml）。
ＩＬ-６産生量の測定結果を示す棒グラフ図（横軸：IL-
6産生量pg/ml ，縦軸：LPS添加量μg/ml）。
【図２】実施例１のＬＰＳ刺激ＣＭＰ−93 細胞のＩＬ-
６産生におけるフコイダンの効果を示す棒グラフ図であ
り、（ａ）は各種褐藻類由来のフコイダンのＩＬ-6分泌
阻害率（横軸：％）を示すものであり、（ｂ）はオキナ
ワモズク由来フコイダンおよびガゴメコンブ由来フコイ
ダンの添加量（縦軸：μg/ml）に対するＩＬ-6分泌阻害
率（横軸：％）を示すものである。
６産生におけるフコイダンの効果を示す棒グラフ図であ
り、（ａ）は各種褐藻類由来のフコイダンのＩＬ-6分泌
阻害率（横軸：％）を示すものであり、（ｂ）はオキナ
ワモズク由来フコイダンおよびガゴメコンブ由来フコイ
ダンの添加量（縦軸：μg/ml）に対するＩＬ-6分泌阻害
率（横軸：％）を示すものである。
【図３】実施例２のin vivo でのマウス慢性大腸炎にお
けるフコイダン効果測定結果を示す棒グラフ図であり、
（ａ）は腸炎病態の各パラメータ（縦軸）に対するスコ
ア（横軸：０〜４のポイント数値）を示すものであり、
（ｂ）は３つのマウスグループ（縦軸：ヒバマタ由来フ
コイダン含有飼料投与、オキナワモズク由来フコイダン
含有飼料投与、フコイダン無添加飼料投与）における大
腸組織長（横軸：ｃｍ）を示すものである。
けるフコイダン効果測定結果を示す棒グラフ図であり、
（ａ）は腸炎病態の各パラメータ（縦軸）に対するスコ
ア（横軸：０〜４のポイント数値）を示すものであり、
（ｂ）は３つのマウスグループ（縦軸：ヒバマタ由来フ
コイダン含有飼料投与、オキナワモズク由来フコイダン
含有飼料投与、フコイダン無添加飼料投与）における大
腸組織長（横軸：ｃｍ）を示すものである。
【図４】実施例２における、前記３つのマウスグループ
（横軸）の各腸組織のミエロペルオキシダーゼ（ＭＰ
Ｏ）活性の測定結果（縦軸：Ｕ／g protein ）を示すグ
ラフ図である。
（横軸）の各腸組織のミエロペルオキシダーゼ（ＭＰ
Ｏ）活性の測定結果（縦軸：Ｕ／g protein ）を示すグ
ラフ図である。
【図５】実施例３における、前記３つのマウスグループ
（縦軸）の大腸粘膜固有層細胞（Ｂ220 Ｂ細胞，ＴＣＲ
αβ型Ｔ細胞）数（横軸：細胞数、×１０６ 個）を示
す棒グラフ図である。
（縦軸）の大腸粘膜固有層細胞（Ｂ220 Ｂ細胞，ＴＣＲ
αβ型Ｔ細胞）数（横軸：細胞数、×１０６ 個）を示
す棒グラフ図である。
【図６】実施例３における、前記３つのマウスグループ
（縦軸）の大腸粘膜固有層細胞の各種サイトカインの産
生量（縦軸：pg/ml ）を示す棒グラフであり、（ａ）は
ＩＦＮ-γ、（ｂ）はＩＬ-6、（ｃ）はＩＬ-4、（ｄ）
はＩＬ-10、（ｅ）はＴＧＦ-β、の産生量をそれぞれ示
したものである。
（縦軸）の大腸粘膜固有層細胞の各種サイトカインの産
生量（縦軸：pg/ml ）を示す棒グラフであり、（ａ）は
ＩＦＮ-γ、（ｂ）はＩＬ-6、（ｃ）はＩＬ-4、（ｄ）
はＩＬ-10、（ｅ）はＴＧＦ-β、の産生量をそれぞれ示
したものである。
【図７】実施例３の、前記３つのマウスグループ（横
軸）の大腸片部におけるIgＧ（縦軸：ng/mg protein ）
の測定結果を示すグラフ図であり、（ａ）は総IgＧ量、
（ｂ）はIgＧ1 量、（ｃ）はIgＧ2a量、をそれぞれ示す
ものである。
軸）の大腸片部におけるIgＧ（縦軸：ng/mg protein ）
の測定結果を示すグラフ図であり、（ａ）は総IgＧ量、
（ｂ）はIgＧ1 量、（ｃ）はIgＧ2a量、をそれぞれ示す
ものである。
【図８】実施例４の、大腸炎非誘発マウスと、フコイダ
ン投与および非投与大腸炎誘発マウスの大腸上皮細胞上
のＩＬ-6ｍＲＮＡレベルを示すＲＴ−ＰＣＲ反応産生物
の電気泳動像である。
ン投与および非投与大腸炎誘発マウスの大腸上皮細胞上
のＩＬ-6ｍＲＮＡレベルを示すＲＴ−ＰＣＲ反応産生物
の電気泳動像である。
フロントページの続き
Ｆターム(参考） 4C086 AA01 EA24 GA17 MA01 MA04
NA14 ZA66 ZB11
4C088 AA13 AC01 BA08 CA02 CA03
MA52 NA14 ZA66 ZB11
4C090 AA09 BA97 BB08 BB34 BB54
BB63 BB95 BC06 BD41 DA23
Claims (3)
- 【請求項１】 フコイダンを有効成分とする炎症性腸疾
患予防治療剤。 - 【請求項２】 フコイダンを含有する海藻抽出物を有効
成分とする請求項１に記載の炎症性腸疾患予防治療剤。 - 【請求項３】 フコイダンを含有するモズク抽出物を有
効成分とする請求項２に記載の炎症性腸疾患予防治療
剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001348744A JP4169966B2 (ja) | 2001-11-14 | 2001-11-14 | 炎症性腸疾患予防治療剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001348744A JP4169966B2 (ja) | 2001-11-14 | 2001-11-14 | 炎症性腸疾患予防治療剤 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003146888A true JP2003146888A (ja) | 2003-05-21 |
| JP2003146888A5 JP2003146888A5 (ja) | 2005-05-19 |
| JP4169966B2 JP4169966B2 (ja) | 2008-10-22 |
Family
ID=19161521
Family Applications (1)
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