HU205209B - Testing means for detecting components in liquids - Google Patents

Testing means for detecting components in liquids Download PDF

Info

Publication number
HU205209B
HU205209B HU85748A HU74885A HU205209B HU 205209 B HU205209 B HU 205209B HU 85748 A HU85748 A HU 85748A HU 74885 A HU74885 A HU 74885A HU 205209 B HU205209 B HU 205209B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
layer
membrane
solution
carrier
microporous
Prior art date
Application number
HU85748A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT38729A (en
Inventor
Rolf Dhein
Georg Frank
Karlheinz Hildebrand
Hermann Perrey
Doehren Hans-Hagen Von
Original Assignee
Bayer Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bayer Ag filed Critical Bayer Ag
Publication of HUT38729A publication Critical patent/HUT38729A/hu
Publication of HU205209B publication Critical patent/HU205209B/hu

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
    • G01N33/521—Single-layer analytical elements
    • G01N33/523—Single-layer analytical elements the element being adapted for a specific analyte
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/805—Test papers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
  • Analysing Materials By The Use Of Radiation (AREA)
  • Automatic Analysis And Handling Materials Therefor (AREA)
  • Sampling And Sample Adjustment (AREA)
  • Testing Resistance To Weather, Investigating Materials By Mechanical Methods (AREA)
  • Testing Or Measuring Of Semiconductors Or The Like (AREA)

Description

A találmány tárgya tökéletesített vizsgálati eszköz folyadékokban, különösen testnedvekben lévő komponensek szinreakción alapuló meghatározására. A találmány szerinti vizsgálati eszköz hordozórétegből, aszimmetrikus pórusszerkezetű mikroporózus polimer-rétegből, adott esetben további rétegekből, valamint a meghatározandó komponens kimutatására szolgáló, egy vagy több rétegben elhelyezkedő reagensekből áll.
Af olyadékok egyes komponenseinek meghatározása „száraz” reagensekkel (például indikátor szalagokkal) különösen a klinikai diagnosztikában egyre nagyobb jelentőségű. így a vizelet, szérum vagy vér egyes komponenseinek (például a glükóz, bilirubin, karbamid vagy protein) kimutatása növekvő mértékben indikátor szalagokkal történik. Az ilyen analitikai módszerek a konvencionális nedves kémiai módszerekkel összehasonlítva gyorsabbak, egyszerűbbek és olcsóbbak.
A folyékony minták esetén általában alkalmazott indikátor szalagok a keresett komponens meghatározásához szükséges reagenseket megfelelő, folyadékot felvenni képes hordozó anyagban tartalmazzák. Ha a folyékony mintát ilyen hordozóra felviszik, akkor a folyadék bediffundál a hordozó belsejébe (a reakciós térbe) és a kimutató reagensek a vizsgálandó komponenssel például fajlagos, koncentrációfüggő színt adnak.
A folyadék-felvevő hordozó anyagok kezdetben egyszerű, a későbbiekben kémiailag módosított papírok voltak, amelyeket a kimutató reagenssel átitattak. A papírok a réteg keresztmetszetében és összetételük tekintetében nem eléggé homogének, és így mennyiségi meghatározásra alig alkalmasak.
Fontos előrelépést jelentett a mennyiségi indikátor szalagos diagnosztikában a megfelelő rétegzési technológiával előállított polimer hordozó anyagok alkalmazása.
A 2 332 760 sz. NSZK-beli közzétételi írat transzparens hordozóból, azaz zselatin rétegből és mikroporózus, töltőanyagot tartalmazó cellulóz-acetát rétegből felépülő többrétegű vizsgálati eszközt ír le. Azselatin réteg tartalmazza a reagenseket, és így ez a réteg a reakciós- és kimutatási zóna. A mikroporózus cellulóz-acetát réteg szerepe a minta homogén eloszlatására, a vörösvérsejtek leválasztása és a hordozó oldala felől alkalmazott mérő sugárzás reflexiója.
Előnye a zselatin réteget tartalmazó vizsgálati eszköznek, hogy az előállításánál használt rétegzési technológia a fényképészetből már ismert és műszakilag kidolgozott.
Hátránya az ilyen rendszereknek — hasonlóan más, vízben duzzadó polimert (például agarózt) tartalmazó vizsgálati eszközökhöz viszonyítva —, hogy a kimutatási reakció mellett még duzzadási folyamatok is lejátszódnak, és így a reakció csak hosszabb idő után fejeződik be. Ennek következtében a gyors meghatározás eredménye nem a végpontnak, hanem csak a reakció kinetikájának a megfigyelésén alapul. További hátránya, hogy a mennyiségi meghatározáshoz a mintát adagolni kell. A zselatin nem ideális anyag azért sem, mert a biokémiai kimutató reagensek eltarthatósága zselatinban korlátozott és a kimutatási reakciónál képződött szín stabilitása sem kielégítő (az analízis több nap utáni kiértékelése ezért nem is lehetséges). Ezen kívül a zselatin érzékeny a proteázokra, amelyek a kimutatáshoz szükséges enzimek szennyeződéseként általában előfordulnak.
A 0 064 710 sz. európai szabadalmi bejelentésben polimerbázisú, testnedvekben lévő anyagok meghatározásáraszolgáló indikátorszalag rendszertímakle. A reagens hordozójaként itt porózus polimerfilmet alkalmaznak, amelyet valamilyen latex (például vizes poli(vinil-propionát)-diszperzió) pórusképző anyag (például kovasavgél) jelenlétében történő beszárításával állítanak elő. Az elemezni kívánt folyékony mintát közvetlenül a reagens-rétegre viszik fel, amely PVCfólián helyezkedikel. Adott idő után amintafeleslegét illetve a vörösvérsejteket leöblítik, és a színreakciót a hordozóval ellentétes oldalról szemrevételezik, illetve reflektometriásan meghatározzák. Hátránya ennek a rendszernek (és általában minden olyan rendszernek, amelynél a mintátközvetlenül a reagens-rétegre viszik fel) azún.„kivérzés”.Ezazt jelenti, hogyareagens-retegből a kimutató reagensek, különösen vízoldhatók (például enzimek) a minta feleslegében oldódnak, majd az Öblítéssel a rendszerből távoznak; ez az eredmény meghamisításához vezet. Ezért fontos volna olyan indikátorszalag kifejlesztése, amely transzparens hordozón keresztül értékelhető ki, így aminta öblítése nem szükséges.
További hátránya a 0 064 710 sz. európai szabadalmi bejelentésben leírt rendszernek, hogy a reakcióidő viszonylag hosszú (például 2 perc) és a kívánt pórusméret beállítása, különösen a viszonylag nagy pórusok esetén (a pm-es tartományban) problematikus. Az ilyen nagypónlsú rendszereket mindenek előtt a nagyobb molekulájú vizsgálandó anyagokkimutatásánál lehet felhasználni. A találmány célja olyan új tesztanyag kifejlesztése, amely különösen alkalmas a vér komponenseinek teljes analízisére, egyszerűen kezelhető és lehetőleg kvantitatív eredményeket ad. Az egyszerű kezelhetőség azért fontos, mert az indikátor szalagos diagnosztikát egyre növekvő mértékben laikusok is végzik, akik számára a minta mennyiségének pontos adagolása vagy a minta feleslegének meghatározott idő utáni leöblítése problematikus.
Célul tűztük ki azt is, hogy a tesztanyag egyszerű, állandó, azonos minőségben előállítható legyen, és rendelkezzék a következő tulajdonságokkal:
--a színreakció reprodukálható legyen akimutatandó komponens koncentrációjának függvényénben; --a képződött színek intenzívek legyenek;
— a reakció gyors legyen (a végpontmeghatározás érdekében);
— a hordozó oldala felől és (öblítés után) a felviteli oldal felől legyen kiértékelhető;
—legyen lehetséges afríss teljes vér analízise;
—a képződött színek és a rendszer legyen állandó és eltartható;
HU 205209 Β — a megkívánt pórusnagyságot egyszerűen lehessen beállítani;
--a mért eredmények legyenek függetlenek a minta térfogatától;
—a polimermátrix ne duzzadjon;
—ne lépjen fel a „kivérzés” jelensége.
Meglepő módon azt találtuk, hogy ha a membránt a polimer-oldat koaguláltatásával állítjuk elő, olyan polimerréteghez jutunk, amely mintafelvitelre alkalmas és önmagában vagy egyéb elemekkel kombinálva a klinikai diagnosztika minden követelményét kielégítő vizsgálati eszköz létrehozását teszi lehetővé anélkül, hogy a fentiekben említett hiányosságok fellépnének. A membránok koagulációs módszerrel történő előállítására sokféle polimer-rendszer alkalmas, amelyeknek a legkülönfélébb kémiai jellege (például hidrofil, hidrofób, anion-vagy kationcserélő) lehet, és amelyek a specifikus elválasztásokat lehetővé teszik, valamint biológiai hatásokra nem bomlanak. Ezen felül a membránok előállítási eljárásával különböző, jól definiált pórusméretet és pórustérfogatot hozhatunk létre, ezzel zavaró komponensek elkülönítése válik lehetővé, és a rendszer önadagoló jellegű lesz.
A találmány tárgya vizsgálati eszköz folyékony mintákban, különösen testnedvekben, így vérben vagy vizeletben lévő komponensek kimutatására, amely hordozórétegből, aszimmetrikus pórusszerkezetű mikroporózus polimer-rétegből, adott esetben további rétegekből és a meghatározandó komponens kimutatására szolgáló, egy vagy több rétegben elhelyezkedő reagensekből áll. A találmány szerinti vizsgálati eszközre jellemző, hogy — az aszimmetrikus pórusszerkezetű mikroporózus polimerréteg koagulációs módszerrel készült membrán, amelynek pórusai a vizsgálati eszköz mintafelvételi oldala felé oly mértékben szűkülnek, hogy a membrán alsó oldalán és a felületén mért átlagos pórusátmérő viszonya 5:1-nél, előnyösen 10:1-nél nagyobb, továbbá — - a hordozó réteg makroszkóposán sima és a vizsgálati feltételek mellett a minta számára átjárhatatlan.
A találmány szerint különösen a teljesen szintetikus polimerekből készült mikroporózus filmek jöhetnek szóba, amelyeket jól definiált pórustérfogattal és változtatható pórusmérettel lehet előállítani. A polimerek teljes szintetikus jellege azért fontos, mert — ellentétben a természetes vagy félszintetikus termékekkel — ezek előállításánál nagy mértékű a reprodukálhatóság és egyszerű a minőség ellenőrzése.
A mikroporózus polimer filmek (membránok), amelyeket molekuláris keverékek külső nyomás alkalmazásával történő, nagyipari elválasztására használnak, már hosszabb ideje ismertek és kereskedelemben is kaphatók. Több eljárás is létezik ezeknek a membránoknak az előállítására, ezek közül a legnagyobb jelentőségű az ún. „fázis-inverziós módszer”.
Ennek a technológiának az alapjait ismerteti például a következő irodalom: H. Strathmann, „Trennungen von molekularen Mischungen mit Hilfe synthetischer
Membránén”, Steinkopfverlag Darmstadt /1979/.
A fázis-inverziós eljárásnak különböző változatai vannak. A koagulációs eljárás során elvben az alábbiak szerint járunk el. A polimer-oldatot (öntőoldatot) egyenletes vastagságban (pl. 100 |im) szilárd hordozóra kenjük, a réteggel ellátott hordozót adott esetben a polimert nem oldó oldószer (előnyösen víz) gőzével telített légkörben tartjuk az oldat részbeni vagy teljes gélesedésig, majd utána koagulációs fürdőbe merítjük, ahol szilárd, aszimmetrikus szerkezetű, mikroporózus film keletkezik. Ha a koaguláció során a membrán-film a szilárd hordozóra tapad (például speciális porózus polimer fátylak vagy fóliák alkalmazása esetén), akkor hordozóval védett membránokat kapunk. Ha a koaguláció során a membrán-film leválik a szilárd hordozóról (például üveglap alkalmazása esetén), akkor hordozómentes membránokat kapunk, A koagulációs folyadék olyan jellegű, hogy az öntő oldat oldószerével elegyedik, a polimert azonban kicsapja. Erre a változatra jellemző, hogy a koaguláció (a pórusképződés) lényegében először a koagulációs folyadékba történő bemerítéskor következik be, és hogy aszimmetrikus membrán szerkezet keletkezik. Az aszimmetria azt jelenti, hogy a pórusok a membrán alsó felétől (a hordozó felőli oldaltól) a membrán felülete felé szűkülnek.
A membrán alsó oldalán és a felületén mért átlagos pórusátmérő (amelyet például elektronmikroszkóppal készített felvételen határozhatunk meg) viszonya általában nagyobb az 5:1 aránynál, előnyösen nagyobb a 10:1 aránynál, még előnyösebben nagyobb a 30:1 aránynál. Az ilyen membránok találmányunk szerinti alkalmazása azért előnyös, mert a minta felvételekor a pórusok nem dugulhatnak el, mert „lefelé”, azaz a felülettől a hordozóig bővülnek.
A 3 607 093 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban már javasoltak aszimmetrikus pórusszerkezetű membránokat a találmány céljaira, de az ott leírt membránokat utólag hordozóra ragasztják, majd átitatják a kimutató reagensekkel.
A kereskedelemben kapható, hordozóval védett membránok azonban nem elégítik ki a gyakorlat által a reprodukálhatósággal szemben támasztott követelményeket, ugyanis ezek a membránok olyan polietilénből, polipropilénből vagy poliészterből készült, porózus hordozó fátylakon kerülnek forgalomba, amelyek makroszkopikusan nem simák. Ez a membránok rétegvastagságának és a pórustérfogatnak viszonylag nagy egyenetlenségét okozza, ami pedig a kimutatási reakciók megbízhatatlanságához, a mért értékek szórásához vezet. A hordozó fátylak porózus, folyadékfelvevő jellege a fenti problémákon felül azt eredményezi, hogy a rendszer által felvett folyadék-mennyiséget nem egyedül a membrán pórustérfogata határozza meg, hanem a porózus hordozó is, amely a kapilláris hatás következtében szívfel folyadékot.
Hordozómentes, aszimmetrikus membránokat eddig még nem alkalmaztak, nem javasoltak vizsgálati eszközök előállítására. Ezek kevésbé előnyösek, mivel nehezen kezelhetők és általában csak akkor szárítha3
HU 205209 Β tok, ha előzőleg konzerválószerekkel impregnáljuk. A vizsgálati eszközök előállításához mindenképpen bordozórakell felvinni ezeket a membránokat is, ami még egy munkaműveletet jelent. Ha ehhez ragasztó anyagokat használunk, akkor további komplikációk léphetnekfel (például amembrán oldódása, aragasztó folyadékfelvétele).
A 3 607 093 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett rendszer esetén a kimuató reagenseketa kész membránokba átitatással viszik be. Mivel általában szerves oldószerekben és vízben oldódó reagenseket is kell használni, az átitatást szerves oldószerekkel készült oldatokkal és vizes oldatokkal is elkeli végezni. Ebben az esetben tehát csak olyan membránokat lehet alkalmazni, amelyek a megfelelő szerves oldószerrel szemben ellenállóak. A kimutató reagensekkel csak átitatott rendszerek hajlamosak a „kivérzés”-re.
A membránok a fázis-inverziós eljárással történő előállításának egy másik változata azon alapul, hogy a polimert illékony, alacsony forráspontú, a polimert jól oldódó oldószer és egy kevésbé illékony, magasabb forráspontú, a polimert rosszul oldó oldószer elegyében oldják. Az így kapott polimeroldatból kenéssel filmet készítenek és a filmet melegítik. Az illékonyabb oldószer elpárolog, a polimert rosszul oldó oldószer feldúsul és végül a film koagulál. A magasabb forráspontú oldószer kimosása érdekében a membránt adott esetben még folyékony fürdőbe meríthetik. Azonban ez, ellentétben az előzőekben leírt, kicsapó fürdőben történő koagulációval, nem járul hozzá jelentősen a membrán-képződéshez.
Ezzel a módszerrel nem kapnak aszimmetrikus szerkezetet. Az előállításhoz gyakorlatilag csak olyan polimerek alkalmazhatók, amelyeknek van illékony, jó oldóképességű oldószerük. Ez az alkalmazható polimerek számát erősen behatárolja. Eddig a gyakorlatban ezzel a módszerrel csak félszintetikus cellulózszármazékokból (például cellulóz-acetát, cellulóz-nitrát) készí tettek membránokat. Illékony, jó oldóképességű oldószerként acetont alkalmaztak. A 2 332 760 sz. NSZK-beli közzétételi iratban ismertetik például a zselatin rétegre felvitt, aceton-toluol oldószer rendszerből előállított cellulóz-acetát szűrőréteg f’blushpolimerréteg”) alkalmazását.
A 2 602 975 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratban leír takszerint ezzel a módszerrel már egy rétegből álló kimutató rendszert is előállítottak úgy, hogy a reagenseket a polimer oldatba vitték be. így közvetlenül a kimutató reagenseket is tartalmazó, porózus membránok állíthatók elő. A vizsgálati eszközt a 2 602 975 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratban ismertettek szerint üveglemezen állítják elő, amelyről a membránt száradás után lehúzzák és műanyagfóliára ragasztják. Itt is fellépnek a hordozó nélküli membránokra jellemző nehézségek. A fenti közrebocsátási iratban ismertetett módszer szerint a kimutató rendszert közvetlenül a rendszer részét alkotó alapon is létre lehet hozni úgy, hogy az üveglemezt polimer-főb’ával helyettesítik. Olyan polimert használnak, amely az alkalmazott ol4 dószer-rendszerrel kémiailag vagy fizikailag reagál, és így a membrán és a hordozó fólia között tartós kötés jön létre. A módszer hátránya, hogy a folyamat nagyon kevéssé variábilis, mivel az oldószer-összetételt és az elpárolgási időt az előállítani kívánt membrán porozitása szerint kell megválasztani. A membrán porozitása szerint változik a hordozóra gyakorolt hatás is. Transzparens hordozók esetében az oldószer a fényáteresztő képességet is csökkenti, így a hordozó oldala felőli kiértékelés problematikussá válik.
Azoknál a polimer-fóliáknál, amelyeket az oldószerek megtámadnak, általában irreverzibilis változások, például duzzadás, zsugorodás, vagy egyenetlenségek lépnekfel, különösen ha, mint például a membránelőállítás ezen módjánál, a polimer-hordozó és az oldószerek közötti érintkezés viszonylag bosszú ideig tart. Ez a módszer tehát hordozóval védett, és a reagenshordozóval szemben támasztott követelmények szempontjából kielégítő mikroporózus polimerfilmek előállítására nem alkalmas.
A találmány szerinti vizsgálati eszköz membránját tehát koagulációs eljárással állítjuk elő. Az eljárás részleteire vonatkozóan számos közlemény jelent meg. Az 1110 607 sz. NSZK-beli szabadalmi leírásban például poliéterbázísú poliuretánok koaguláltatására azt javasolják, hogy pl. dimetil-formamiddal készített, higroszkópos poliuretán-oldatot 15-100% relatív páratartalmú, adott esetben cirkuláltatott levegővel kezelnek. Az oldószer higroszkópossága következtében abszorbeált víz hatására megkezdődik a poliuretán kiválása az oldatból, annak felületére, valószínűleg a mikroporózus szerkezet kezdeti kialakulása mellett.
Az így előgélesített filmet vagy bevonatot vízbe helyezik, ahol a teljes koagulálás végbemegy és a higroszkópos oldószer távozik a filmből. Némiképp eltérő eljárás az 1 444163 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratban található. A poliuretán-oldatot először kisménynyiségű kicsapó szerrel (például vízzel) a kezdődő fázisszétválás enyhén opak, diszperziószerű állapotba viszik, majd lapra kenik és közvetlenül, tehát nedves levegővel történő gélesítés nélkül, kicsapó szerbe merítéssel koaguláltatják.
A 144 165 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratban olyan eljárást adnak meg, amely szerint a polimer oldatot előgélesítés nélkül, a kicsapószer és az oldószer keverékében (például dimetil-formamid-víz 10:90 és 95:5 térfogatarányú keverékében) történő közvetett koagulációval alakítják át mikroporózus filmmé. A 624 250 sz. belga szabadalmi leírásban ismertetett eljárásváltozat alapján a polimer-oldatot olyan mennyiségű kicsapószerrel elegyítik, hogy a polimer gél formájában kiválik. Ezt a gélt alkalmas alapra kenik és kicsapó szerrel mikroporózus filmmé koaguláltatják.
A1 238 206 sz. NSZK-beli közzétételi irat szerint elasztomer oldatok koagulációjával akkor kapnak mikroporózus szerkezeteket, ha a megfelelő alapra kent réteget a folyadék forráspontjának közeiéig felmelegített fürdőben, például 95 °C hőmérsékletű vízben koaguláltatják. Jobb eredmények keletkeznek, ha az előgélesítést is magasabb hőmérsékleten végzik. A
HU 205209 Β
025 616 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat például mikroporózus sík lapok előállítására olyan eljárást ír le, amely szerint a políuretán-oldat vékonyrétegét legalább 50% relatív nedvesség-tartalmú, 65 °C-nál magasabb hőmérsékletű nedves levegővel kezelik, ezt követően az oldószer fő mennyiségét vizes koaguláltató fürdőben eltávolítják és a terméket szárítják.
A 2125 908 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat szerint a poliuretán oldatból képzett réteg fölé 101-190 °C hőmérsékletű vízgőzt vezetnek. A gőzölés addig tart, míg a réteg szerves oldószer-tartalma 50% alá csökken és ezzel szilárd, mechanikailag stabil mikroporózus lapképződménnyé alakul át. Ennek az eljárásnak lényeges előnye, hogy rövid idő alatt és egyetlen eljárási lépésben alakul át a poliuretán-oldat mikroporózus végtermékké.
Az eddig említett eljárások esetén a polimer-oldathoz meghatározott segédanyagokat is adagolhatnak a koagulálhatóság javítása érdekében. Az 1 270 276 sz. NSZK-beli közzétételi irat, valamint az 1 694 171 és az 1769 277 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratok vízgőz-áteresztő lapok előállítására eljárást ismertetnek, amely szerint adott esetben nedves levegővel előgélesített polimer-oldatot vízzel, illetve víz-oldószer eleggyel koaguláltatnak. A polimer összetétele: 90-70 tömegrész poliuretán vagy polikarbamid és 10-30 tömegrész nagymolekulájú, lényegében lineáris, kationos, 0,5-2,0 tömeg% kvatemer ammónium-nitrogénatomokat tartalmazó poliuretán. A kationos poliuretán mellett a polimer oldatok a koaguláció szabályozására még anionos cserzőanyagokat is tartalmazhatnak,
A 2 427 274 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat szerint számos esetben a koagulációt azzal lehet javítani, hogy a koagulálni kívánt poliuretán-oldathoz kationos vagy anionos poliuretán-karbamid-szuszpeűziót vagy még előnyösebben kationos és anionos poliuretán és poliuretán-karbamid sóit adagolnak. Ezzel a nehezen feldolgozható poliuretán-olda tok koagulációja is úgy szabályozható, hogy megfelelő mikroporozitású lapok keletkeznek.
Az eddig említett szabadalmi leírásban ismertetett eljárásokkal gyakorlatilag minden oldható polimerből mikroporózus membránok állíthatók elő. A különböző paraméterek (például az öntő-oldat koncentrációja, hőmérséklet, adalékanyagok, a koaguláltató folyadék fajtája) célszerű megválasztásával — esetenként néhány előkísérleí után -r-a kívánt pórusnagyság beállítható...
A találmányunk szerinti eszköz előállítása során a legtöbb esetben előnyös, ha a koagulációt minden különösebb előkezelés nélkül, közvetlenül vizes koaguláltató-f ürdőben hajtjuk végre.
A találmány szerinti vizsgálati eszköz jellemzői (a színreakcíó homogenitása és intenzitása, a kivérzés, a kimutató rendszer tárolhatósága, eltarthatósága, a vörösvérsejtek leöblíthetősége és a kimutató reakció sebessége) erősen függnek az alkalmazott polimer rendszer fajtájától. Az egyszerű gépi előállíthatóság, a defioiáltpórűstérfpgátésjá hordozó felőli oldalról történő kiértékelhetőség követelményeinek kielégítése érdekében a találmány szerinti vizsgálati eszköz előállítása során előnyösed olyan polimer oldatokat használunk, amelyekkel a membránok előállítása közvetlenül egy makroszkopikusan sima, folyadékot át nem eresztő hordozón történhet. Ha a konvencionális membránok (például cellulóz-acetát, vagy poliszulfon) öntő oldatait sima, folyadékot át nem eresztő fóliára visszük fel, a koaguláció során keletkező szilárd film a hordo10 zótól simán leválasztható, kivéve ha az oldószer a hordozót oly mértékben oldotta, hogy a membránnal összetapad. A hordozó és az oldószer kölcsönhatása következtében viszont a mérési eredmények megbízhatatlanok, A fenti probléma elkerülésére a hordozó15 val védett membránok közvetlen előállításánál az öntőoldat-hordozó fólia párt úgy kell egymáshoz illeszteni, hogy az öntő-oldat affinitása a hordozóhoz nagy legyen, de anélkül, hogy azt megtámadná vagy feloldaná. Kedvezőek az olyan polimer-rendszerek, amelyek hidrofil-hidrofób egyensúlyát változtatni, befolyásolni lehet. Ebből a szempontból az ionos csoportokat tartalmazó polimerek előnyösek, amelyek adott esetben polimerkeverékek komponensei is lehetnek. A polimer membrán hidrofil (vagy hidrofób) tulajdonsága hatással lehet a színreakcióra is (a kifejlődött színek gyakran intenzívebbek, ha a polimer ionos csoportokat tartalmaz).
A találmány szerinti vizsgálati eszköz elemeinek előállítására alkalmas öntőoldatokhoz például a követ30 kezŐ polimereket használhatjuk: poliamidokat, & Na® diszulfimid-(-SO2-N-SO2-) csoportokat tartalmazó poliamidokat (a 4 269 967 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás alapján), poli(éterkar35 bonát)-okat (például a 2 251066 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat alapján, poli-(akril-nitril)-t és poliuretánokat (például a 2 427 274 sz. NSZK-beli közrebocsátási irat szerint).
Előnyösen használható öntó'oldatokat kaphatunk, ha a fenti polimerek oldatait ismert, előnyösen ionos csoportokat tartalmazó polimerek (például polivinil vegyületek, vinil keverék polimerek, poli(sztirol-szulfonsav)-ak, poliamidok, poliuretánok) vizes diszperzióival elegyítjük. Különösen alkalmasak azok az ön45 tőoldatok, amelyek poliuretán oldatból és az Angew. Makromol. Chem. 98 (1981) 133. oldalon lévő irodalmi közlemény és a már említett 2 427 274 sz. NSZKbeli közrebocsátási iratban ismertetett poliuretán diszperziókból állnak. A poliuretán diszperziók lehet50 nek nemionosak vagy előnyösen ionosak, amely ionoscsoportok lehetnek -SO3, -COO* vagy -N+R3 csoportok.
Az ionos polimer-rendszerek különösen előnyösek, mivel jól tapadnak a hordozó fóliához és a kimutatási reakcióhoz szükséges enzimeket megkötik. Az ionos polimerekből készült, találmány szerinti kimutató rendszereket órákig öblíthetjük vízzel anélkül, hogy észrevehető kivérzést tapasztalnánk.
Az öntőoldatok előállításához a mindenkori poli60 mernek megfelelő oldószereket, például düüetíl-for5
HU 205209 Β mamidot, N-metil-pxrrolidont vagy díoxolánt alkalmazunk, amelyekhez pórusképzőként szükség esetén még az öntőoldatban oldható szervetlen sókat, például LiCl-t, CaCI2-t vagy Mg(C104)2-t adhatunk. További adalékokat is adhatunk az oldathoz, amelyek egyrészt az öntőoldatban oldhatatlan töltőanyagok, például SiO2; Ti02 (a 0 077 509 sz. publikált európai szabadalmi bejelentés szerint) BaSO4, ZnO, másrészt a biológiailag aktív anyagokat szükség esetén megkötő cellulózvagy agarőzporoklehetnek.
A találmány értelmében a hordozóval védett, mikroporózus réteget úgy állítjuk elő, hogy a fentiekben leírt öntőoldatot alkalmas hordozóra egyenletesen rákenjükkb. 50-100 pm rétegvastagságban, majd a hordozót azonnal koagulálható fürdőbe merítjük, ahol létrejön a mikroporózus, hordozóval ellátott polimerfilm. A hordozó bevonása és a koagulálható fürdőbe merítés közötti idő a lehető legrövidebb legyen (kb. néhány másodperc), így az öntőoldat oldószere nem támadja meg a hordozót. A koagulálható folyadék lehet víz vagy vizes puffer-oldat, amely szükség esetén lágyítót,-például glicerint tartalmazhat. A koaguláltató fürdő hőmérsékletével egyszerű módon változtathatjuk a pórusszerkezetet. Azonos öntő-oldatból, vízben történő kicsapatással, a hőmérséklet növelésével a membrán felületén nagyobb pórusméretet érhetünk el, amit bizonyítanak a szobahőmérsékleten, 45 °C-on és 60 ’Ck-on koaguláltatott, mikroporózus polimerfilmek REM-felvételei. Hasonló hatást érünk el akkor is, ha víz és szerves oldószer elegyével, például víz-dimetil-formamíd eleggyel koaguláltatunk.
A találmány szerinti vizsgáló eszköz hordozójaként elvileg bármely olyan makroszkopikusan sima polimer-fólia alkalmas, amelyen az alkalmazott polimerrendszer a koaguláció során és a szárítás után jól tapad és amelyet a polimer öntőoldat nem változtat eLKülönösen előnyösek a transzparens polimer-fóliák, amelyek lehetővé teszik a színreakció kiértékelését a hordozó felőli oldalról is. Legelőnyösebbek a transzparens poli(etilén-tereftalát) fóliák. A kimutatási reakcióhoz szükséges reagenseket különböző módon juttathatjuk be a mikroporózus polimer-filmekbe, belekeverhetjük az öntőoldatba, a porózus filmet utólag itathatjuk át, vagy akét eljárást kombinálva.
A találmány egy előnyös kiviteli módja szerint a vizsgálati eszközbe önmagában ismert enzimtartalmú reagensrendszereket inkoporálunk egy-egy anyag kimutatására.
A kimutató reagensekkel feltöltött, mikroporózus polimer-filmek előállítására szolgál például a következő egyszerű módszer: az alkalmazott kromogént (példul a 3,3’,5,5’-tetrametil-benzidint) az öntőoldatban feloldjuk, a koagulácíós eljárással létrehozzuk a kromogént tartalmazó mikroporózus filmet, amelyet ezután az adott esetén pufferolt enzim-rendszerrel átitatunk.
A találmány szerinti vizsgálati eszköz lehet többrétegű rendszer is. Ez akkor előnyös, ha a kimutató reagenseket el kell különítenünk. Például a hordozó fóliát egy polimer-réteggel láthatjuk el, amelyre aztán a leírt koagulácíós módszerrel aszimmetrikus membránt viszünk föl, vagy amelyre külön előállított, hordozó nélküli, kész membránt laminálunk. A hordozó és a membrán közötti polimer rétegbe az összes kimutató reagenst bejuttathatjuk, vagy eljárhatunk úgy, hogy a reagensek egy részét ebbe a rétegbe, másik részét pedig a rajta elhelyezkedő membránba juttatjuk.
A hordozó és a membrán között elhelyezkedő közbenső polimer rétegként, amely adott esetben a reagenseket is tartalmazhatja, pl. vizes diszperziókból előállított ismert fóliák jöhetnek szóba. Anyagukpolivinil-vegyület, vinil keverékpolimer, poli(sztirol-szulfonsav), poliamid vagy poliuretán lehet.
A találmány szerinti vizsgálati eszköz alkalmas folyékony minták kis- és nagy móltömegű komponenseinek mennyiségi meghatározására, különösen testnedvekben lévő anyagok (pl, bilirubin, ketonok, trigíiceridek, karbamid és hemoglobin) mennyiségi spektrofotometriás kimutatására. A találmány szerinti vizsgálati eszköz legelőnyösebb alkalmazási területe a teljes vér glükóz-tartalmának mennyiségi kimutatása, továbbá enzimek, így glükóz-oxidáz vagy koleszterináz, bilirubin és keton-testekkimutatása.
A példákban szereplő mennyiségi adatok, ha mást nem kötünk ki, tömegrészek, illetve tömegszázalékok,
1. példa
Glükóz-kimutatás
Nagy fordulatszámú keverővei (dissolver) a következő összetételű öntő-oldatot állítjuk elő:
8,02 g diszulfimid-poliamid
2,40gCaCl2
43,02g dimetil-formamid (DMF)
0,01 g aszkorbinsav
0,01 g nátrium-citrát
0,40 g citromsav
0,48 g 3,3’,5,5’-tetrametil-benzidin (TMB)
45,40 g titán-dioxid
0,13 g peroxidáz (POD, 277 egység/mg)
0,13 gglükózoxidáz (GOD, 116 egység/mg)
Ebből az öntőoldatból póli(etilén-tereftalát) fólián 100 pm vastag, egyenletes réteget hozunk létre festéklehúzó késsel. Ezt a hordozóval védett filmet 30 t%-os vizes glicerin oldatban 10 percig koaguláltat juk. A keletkezett szilárd, hordozóval védett membránt 35 ’Cos meleg levegővel szárítjuk és működőképességét friss vérrel megvizsgáljuk. A vért a membránfelületre csöpögtetjük és egy perc múlva leöblítjük. A leöblítés után kb. 30 sec. elteltével a membrán-felületen homogén zöld szín jelenik meg. A diszulfimid-poliamid-poIimert a 4 269 967 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás szerinti, egylépéses reakcióval állítjuk elő az 1/1 rajzlapon mutatottVegyületekbőI.
2. példa
Glükóz-kimutatás
Az öntőoldat összetétele:
13,73 gpoliuretán
66,37 g dimetil-fonnamid
7,24 g poliuretán diszperzió víz (DMF oldószer
HU 205 209 Β elegyben)
0,07 g nátrium-dioktil-szulfo-szukcinát
11,01 gtitán-dioxid
0,79 g 3,3’,5,5’-tetrametil-benzidin
0,79 g aszkorbinsav.
A poliuretán olyan hőre lágyuló műanyag, amelyet az alábbi vegyületek reakciójával kapunk:
rész poliészter (mól.tömeg= 2000 g), amelyet adipinsavból, 70 mól% etilén-glikoiból és 30 mól% 1,4bután-diolból állítunk elő, rész poliészter (mól.tömeg= 2250 g), amelyet adipinsavból és 1,4-bután-diolból állítunk elő, rész 1,4-bután-diol és rész difenil-metán-diizocianát.
A poliuretán diszperzió koagulációs segédanyag és az alábbi vegyületek reakciótermékének kationos, emulgeátormentes diszperziója:
200 rész poliészter (mól.tömeg= 1700 g), amelyet adipinsavból, ftálsavból és etilén-glikoiból állítunk elő, rész toluilén-diizocianát, részN-metil-dietanol-amin és rész p-xililén-diklorid.
A hordozóval védett, mikroporózus polimer membránt az 1. példában leírtak szerint állítjuk elő a következő változtatásokkal:
Hordozó: poli(etilén-teref tálát) fólia.
Koagulálható fürdő: 1%-os, vizes Na-lauril-szulfát oldat.
A szárítás után a filmet 1 percig citrát-pufferben (pH=5,5) oldott 1% POD (277 egység/mg)/GOD (116 egység/mg)-keverék oldatába merítjük és szárítjuk.
Vizsgálat friss vérrel: a minta felvitele után 10 secal a transzparens hordozón keresztül homogén, kék szín megjelenését figyelhetjük meg. Ha a mintafelesleget leöblítjük, akkor a kék szín a membrán felületén is megfigyelhető.
0,05,0,1 és 0,5%-os, vizes glükóz-oldatok hatására azonnal homogén, a növekvő glükóz koncentrációval erősödő intenzitású kék szín jön létre.
Ennek megfelelően reflektometriás kiértékeléssel a különböző glükóz koncentrációknak megfelelő reflexiós értékeket mérhetünk. A mérések azt mutatták, hogy a 0,2-0,8 g/1 tartományban az elszíneződés lineárisan változik a glükóz koncentráció függvényében, és a kimutatási reakció végpontját max, 40 sec-on belül elérjük. Összehasonlítva az ismert vizsgálati eszközökkel ez a reakciósebesség rendkívül nagy.
A jelenlegi példában leírt indikátor szalag rendszer elektronmikroszkópos (RÉM) vizsgálata azt mutatta, hogy az előállított membrán nagy pórusú és az átlagos' pórusnagyság 0,5 μΐη.
2a. példa
Bilirubin indikátor szalag
ATMB-t és az aszkorbinsavat elhagyva az öntő-oldat összetétele és a membrán előállítása azonos a 2. példában leírtakkal.
A polimer membránt az alábbi összetételű oldattal itatjuk át és szárítjuk. Az oldat összetétele:
1,68 g p-toluol-szulfonsav
0,18 g naf talin-1,5-diszulfonsav-dinátrium-sója
2,00 g 7-(2,3-dihidroxi-propil)-teofillin,
0,06 g nátrium-nitrit,
O.lOgszaponin, ml desztillált vízben.
Az átitatott membránból készített indikátor szalag különböző koncentrációjú bilirubin kontroli-szérum hatására különböző mértékben barnára színeződik.
2b. példa
Keton-test indikátor szalag
A TMB-t és az aszkorbinsavat elhagyva az öntőoldat összetétele és a membrán előállítása azonos a 2. példában leírtakkal.
A polimer membránt a g nitro-prusszid-nátriumot és
8,2 g magnézium-szulfátot ml desztillált vízben tartalmazó oldattal — pH-érték 9,4-re történő beállítása után — átitatjuk és szárítjuk. Ha a felvágott indikátor szalagot acetecetsav oldatba vagy vizeletbe merítjük, akkor a keton-test koncentrációtól függően különböző erősségű ibolya színeződés keletkezik.
3. példa
Glükóz-kimutatás
Kétrétegű rendszer.
A) A hordozóval védett reagens réteg előállítása
8,40 g vizes poliuretán diszperziót,
3,00 g poli(vinil-pirrolidon)-t (mól.tömeg= 350000 g),
0,50 g tetrametil-benzidint (1 g etil-acetátban oldva),
0,12 g glükózoxidázt (116 egység/mg),
0,12 g peroxidázt (277 egység/mg) és
0,025 g aszkorbinsavat összekeverünk, poliészter fóliára terítjük és meleg levegővel szárítjuk, így kapjuk a hordozóval védett reagens réteget.
A poliuretán diszperzió az alábbi vegyületek reakciótermékének 40%-os vizes diszperziója:
rész poliészter (mól.tömeg= 1700), amelyet adipinsavból, hexándiolból és neopentií-glikolból állítunk elő, rész hexametilén-diizocianát, rész Na-etilén-diamin-etanol-szulfonát és rész etilén-diamin.
Ez a hordozóval védett reagens réteg vizes glükóz oldatok hatására, a minta felvitelét követő 20 sec-on belül a különböző glükóz koncentrációnak megfelelő erősségű, homogén kék színt ad (lásd a 2. példát).
B) Az aszimmetrikus fém fázis-inverziós membrán felvitele a
a) Az összes kimutató reagens a reagens rétegben van.
A 3A) példában leírt hordozóval védett reagens rétegre terítjük a 2. példában leírt öntő oldatot (a tetrametil-benzidin és az aszkorbinsav nélkül) és 1%os, vizes Na-lauril-szulfát oldatban koaguláltatjuk. A meleg levegővel történő szárítás után vizes glükóz
HU 205209 Β oldattal valamint friss vérrel vizsgáljuk. A minta felvitelét követő 30 sec-on belül homogén, koncentrációfüggő, kék szín megjelenését figyelhetjük meg. b) Áreagensekkülönböző rétegekben vannak.
8,40 g vizes poliuretán diszperzióból (lásd a 3 A) példát),
3,00 g poli(vinil-pirrolidon)-ből (mól.tömeg= 350 000 g),
0,12gperoxidázból(277 egység/mg) és
0,12 g glükózoxidázból (116 egység/mg) a 3A) példában leírtak szerint hordozóval védett, enzimtartalmú réteget készítünk.
Erre a 2. példában leírt öntőoldatot terítjük, 1%-os vizes Na-Iauril-szulfát-oldatban koaguláltatjuk és szárítjuk. Friss vérrel vizsgálva a minta felvitelét követő 40 sec-on belül, á vörösvérsejtek leöblítése után, a membrán felületén homogén kék szín megjelenését figyelhetjük meg. A különböző koncentrációjú glükóz oldatok különböző erősségű kék színt adnak.
4. példa
Glükóz-kimutatás
Kétrétegű rendszer reagens réteggel
Areagens réteg öntőoldalának összetétele:
8,00 g poliuretán diszperzió a 3. példának megfelelően
1,00 gpoli(vinil-pírrolídon) (mól.tömeg= 10000 g),
0,05 g tetrametil-benzidín (10 g etil-acetátban oldva),
0,10 gglükózoxidáz (116 egység/mg) +
0,10 g peroxidáz (277 egység/mg) 2 ml vízben oldva
0,01 ml 5%-os, vizes aszkorbinsav oldat.
A fenti komponenseket összekeverjük, poli(etiléntetraftalát) fóliára terítjük és meleg levegővel szárítjuk, így kapjuk a hordozóval védett reagens réteget.
Erre a hordozóval védett reagens rétegre visszük fel a fázis-inverziós eljárással előállított poliamid membránt a következő összetételű öntő-oldatból:
8,10 g poliamid (hexametüén-diamin és izoftálsav polikondenzációs terméke a 27 43 515 számú NSZKbeli közrebocsátási iratban ismertetett eljárás szerint előállítva)
2,40gCaCl2’
43,00 g dimetil-formamid és
46,00 gTiO2.
Rétegvastagság: 100 pm.
Koaguláltató fürdő: 30%-os, vizes glicerin oldat.
Vizsgálat friss vérrel: a membrán felületére egy csepp vért adunk. A minta felvitelét követő 10 sec-on belül, a transzparens hordozón keresztül homogén, kékszmmegjelenésétfigyelhetjük meg.
A különböző koncentrációjú glükóz oldatok különböző erősségű kékszínt adnak (lásd a 2. példát).
. 5. példa
Glükóz-kimutatás
Membrán, reagens réteggel
Amembrán öntő oldata:
20,00 g poliszulfont (bíszfenol A és bisz(klór-fenilszulfon) kondenzációs terméke, Union Carbide cég
Udel P1700 márkanevű kereskedelmi terméke)
80,00 gN-metil-pirroIidonban oldunk.
Az öntő oldato t f es téklehúzó késsel üveglemezre terítjük (a réteg vastagsága 100 pm), és 10%-os, vizes glicerinoldatban koaguláltatjuk. A film leválik az üveglemezről és hordozó nélküli aszimmetrikus membránt kapunk. Szárítás Után a poUszulfon-membrán hátoldalára (amelyik az üveglemezzel érintkeztetett) a 4. példában leírt reagensrétegetvisszükfel.
Vizsgálat friss vérrel: a membrán felületére egy csepp vért adunk. A minta felvitelét követő 30 see-on belül a reagens rétegben homogén kék szín megjelenését figyelhetjük meg.
A különböző koncentrációjú glükózoldatok különböző erősségű kék színt adnak.
6. példa
Enzim-kimutatás
A 2. példában leírt membránt szárítás után 1% glükóz/POD (277 egység/mg) —keveréket tartalmazó vizesoldattal átitatjuk és szárítjuk.
Hígított GOD-oldatokkal (20 egység/ml, 40 egység/ml, 80 egység/ml, 120 egység/ml, 160 egység/ml), vizsgálva a minta felvitele után azonnal, a membrán felületén és a transzparenshordozón keresztül is megfigyelhető, homogén, kék szín jelentkezik, amelynek erőssége függ a GOD-koncentrációtól.
6a. példa
Kolinészteráz indikátor szalag kA TMB-t és az aszkorbinsavat elhagyva az öntő oldat összetétele és a membrán előállítása azonos a 2. példában leírtakkal.
A membránt 5 ml etil-acetátban oldott 40 mg indoxil-acetátból és 5 ml metanolban oldott 120 mg 2-metoxi-4-morfolino-benzoI.diazőnium-klorid,ZnCl2-ből készített oldattal, majd ezt követően trisz-HCl-pufferrel (0,4 mólos, pH= 7,5) itatjuk át, szárítjuk és indikátor szalagot készítünk belőle.
Az indikátor szalag a kolinészteráz-oldat és szérum felvitele után az enzimaktivitástól függően különböző sebességgel kékül el. Az elszíneződés reflexió-mérő készülékkel mennyiségileg kiértékelhető.

Claims (6)

1. Tökéletesített vizsgálati eszköz folyadékokban, különösen testnedvekben lévő komponensek színreakción alapuló meghatározására, amely hordozórétegből, aszimmetrikus pőrusszerkezetű mikroporózus polimer-rétegből, adott esetben további rétegekből, valamint a meghatározandó komponens kimutatására szolgáló, egy vagy több rétegben elhelyezkedő reagensekből áll, azzal jellemezve, hogy — az aszimmetrikus pórusszerkezetű mikroporózus poíimerréteg koaguláciős módszerrel készült membrán, amelynek pórusai a vizsgálati eszköz mintafelvételi oldala felé oly mértékben szűkülnek, hogy a membrán alsó oldalán és a felületén mért átlagos pórusátmérő viszonya 5:l-nél, előnyösen
HU 205209 Β
10:l-nél nagyobb, továbbá — a hordozó réteg makroszkóposán sima és a vizsgálati feltételek mellett a minta számára átjárhatat? lan.
2. Az 1. igénypont szerinti vizsgálati eszköz, azzal jellemezve, hogy a mikroporózus polimer-réteg a meghatározni kívánt komponens kimutatására szolgáló összes reagenst tartalmazza.
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti vizsgálati eszköz, azzal jellemezve, hogy a mikroporózus polimer-réteg közvetlenül a makroszkóposán sima hordozórétegen helyezkedüí el.
4. Az 1. igénypont szerinti vizsgálati eszköz, azzal jellemezve, hogy a hordozóréteg és a mikroporózus polimerréteg között polimerből álló reagens-réteg helyez5 kedik el, amely a meghatározni kívánt komponens kimutatására szolgáló reagensek egy részét vagy az öszszes reagenst tartalmazza.
5. A 4. igénypont szerinti vizsgálati eszköz, azzal jellemezve, hogy a reagens-réteg vízben oldódó vagy
10 víz hatására duzzadó polimerből áll.
HU85748A 1984-02-29 1985-02-28 Testing means for detecting components in liquids HU205209B (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19843407359 DE3407359A1 (de) 1984-02-29 1984-02-29 Testvorrichtung und methode zum nachweis einer komponente einer fluessigen probe

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HUT38729A HUT38729A (en) 1986-06-30
HU205209B true HU205209B (en) 1992-03-30

Family

ID=6229158

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU85748A HU205209B (en) 1984-02-29 1985-02-28 Testing means for detecting components in liquids

Country Status (12)

Country Link
US (1) US4824639A (hu)
EP (1) EP0154839B1 (hu)
JP (1) JPH0623745B2 (hu)
AT (1) ATE68884T1 (hu)
AU (1) AU579137B2 (hu)
CA (1) CA1255196A (hu)
DE (2) DE3407359A1 (hu)
DK (1) DK161543C (hu)
ES (1) ES8607551A1 (hu)
HU (1) HU205209B (hu)
IL (1) IL74442A (hu)
ZA (1) ZA851528B (hu)

Families Citing this family (114)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61245057A (ja) * 1985-04-23 1986-10-31 Fuji Photo Film Co Ltd 一体型多層分析要素
DE3618049A1 (de) * 1986-05-28 1987-12-03 Miles Lab Verfahren zur herstellung von reagenzschichten die hydrophobe reagenzien enthalten
US4935346A (en) 1986-08-13 1990-06-19 Lifescan, Inc. Minimum procedure system for the determination of analytes
US4797259A (en) * 1986-12-15 1989-01-10 Pall Corporation Well-type diagnostic plate device
GB2199946A (en) * 1987-01-12 1988-07-20 Pall Corp Diagnostic device,
DE3809523A1 (de) * 1988-03-22 1989-10-12 Miles Inc Verfahren zur herstellung von poroesen membranen, die damit hergestellten membranen und deren verwendung als traegermatrices in teststreifen
NL8800796A (nl) * 1988-03-29 1989-10-16 X Flow Bv Werkwijze voor de chemische analyse van bestanddelen van een lichaamsvloeistof, alsmede een testinrichting en testpakket voor een dergelijke analyse.
US5423989A (en) * 1988-05-19 1995-06-13 Chemtrack, Inc. Plasma forming device
US4994238A (en) * 1988-06-09 1991-02-19 Daffern George M Constant volume chemical analysis test device
EP0654659B1 (en) * 1988-06-09 1997-02-12 Boehringer Mannheim Corporation Defined volume test device
DE3922495A1 (de) * 1989-07-08 1991-01-17 Miles Inc Analyseverfahren fuer substanzen aus biologischen fluessigkeiten, insbesondere vollblut
AU640162B2 (en) * 1989-08-28 1993-08-19 Lifescan, Inc. Blood separation and analyte detection techniques
US5306623A (en) * 1989-08-28 1994-04-26 Lifescan, Inc. Visual blood glucose concentration test strip
US6395227B1 (en) * 1989-08-28 2002-05-28 Lifescan, Inc. Test strip for measuring analyte concentration over a broad range of sample volume
DE4009186A1 (de) * 1990-03-22 1991-09-26 Miles Inc Verwendung von polymerblendfolien als traeger fuer diagnose-teststreifen
DE4015157A1 (de) * 1990-05-11 1991-11-14 Miles Inc Asymetrische sandwich-membranen fuer diagnose-teststreifen
ATE137334T1 (de) * 1991-02-28 1996-05-15 Boehringer Mannheim Gmbh Testträger zur bestimmung eines analyten aus vollblut
GB9113211D0 (en) * 1991-06-19 1991-08-07 Hypoguard Uk Ltd Support membrane
DE4212280A1 (de) * 1992-04-11 1993-10-14 Boehringer Mannheim Gmbh Asymmetrisch poröse Membranen
GR1002549B (el) * 1992-05-12 1997-01-28 Lifescan Inc. Λωρις εξετασεως με μεταφορικο μεσο δια μεταφορα ρευστου.
CA2161338C (en) * 1994-03-04 2006-10-03 Jerome Ditter Large pore synthetic polymer membranes
DE4438381C2 (de) * 1994-10-27 2003-12-04 Sartorius Gmbh Durch eine Trägerfolie aus Polyestern unterstützte mikroporöse Membran aus Cellulosenitrat
US5962215A (en) 1996-04-05 1999-10-05 Mercury Diagnostics, Inc. Methods for testing the concentration of an analyte in a body fluid
US5824491A (en) * 1996-05-17 1998-10-20 Mercury Diagnostics, Inc. Dry reagent test strip comprising benzidine dye precursor and antipyrine compound
US20020010406A1 (en) 1996-05-17 2002-01-24 Douglas Joel S. Methods and apparatus for expressing body fluid from an incision
EP1579814A3 (en) 1996-05-17 2006-06-14 Roche Diagnostics Operations, Inc. Methods and apparatus for sampling and analyzing body fluid
WO1998019159A1 (en) * 1996-10-30 1998-05-07 Mercury Diagnostics, Inc. Synchronized analyte testing system
WO1998020348A1 (en) * 1996-11-08 1998-05-14 Mercury Diagnostics, Inc. Opaque reaction matrix for the analysis of whole blood
US5948695A (en) 1997-06-17 1999-09-07 Mercury Diagnostics, Inc. Device for determination of an analyte in a body fluid
US5891054A (en) * 1997-09-12 1999-04-06 Saint Louis University Method for determining feeding the tube location
US6036924A (en) 1997-12-04 2000-03-14 Hewlett-Packard Company Cassette of lancet cartridges for sampling blood
US6391005B1 (en) 1998-03-30 2002-05-21 Agilent Technologies, Inc. Apparatus and method for penetration with shaft having a sensor for sensing penetration depth
US6458326B1 (en) 1999-11-24 2002-10-01 Home Diagnostics, Inc. Protective test strip platform
US6629039B1 (en) * 2000-04-27 2003-09-30 Perkinelmer Instruments Llc Method and apparatus for impurity detection
US8641644B2 (en) 2000-11-21 2014-02-04 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Blood testing apparatus having a rotatable cartridge with multiple lancing elements and testing means
US6562625B2 (en) 2001-02-28 2003-05-13 Home Diagnostics, Inc. Distinguishing test types through spectral analysis
US6525330B2 (en) 2001-02-28 2003-02-25 Home Diagnostics, Inc. Method of strip insertion detection
US6541266B2 (en) 2001-02-28 2003-04-01 Home Diagnostics, Inc. Method for determining concentration of an analyte in a test strip
US7682318B2 (en) 2001-06-12 2010-03-23 Pelikan Technologies, Inc. Blood sampling apparatus and method
US9226699B2 (en) 2002-04-19 2016-01-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling module with a continuous compression tissue interface surface
JP4149911B2 (ja) 2001-06-12 2008-09-17 ペリカン テクノロジーズ インコーポレイテッド 電気式ランセットアクチュエータ
US9795747B2 (en) 2010-06-02 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Methods and apparatus for lancet actuation
AU2002315177A1 (en) 2001-06-12 2002-12-23 Pelikan Technologies, Inc. Self optimizing lancing device with adaptation means to temporal variations in cutaneous properties
US7041068B2 (en) 2001-06-12 2006-05-09 Pelikan Technologies, Inc. Sampling module device and method
WO2002100254A2 (en) 2001-06-12 2002-12-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for lancet launching device integrated onto a blood-sampling cartridge
JP4157471B2 (ja) 2001-06-12 2008-10-01 ペリカン テクノロジーズ インコーポレイテッド 多目的サンプリングモジュールを備えた一体型血液サンプル分析システム
US7981056B2 (en) 2002-04-19 2011-07-19 Pelikan Technologies, Inc. Methods and apparatus for lancet actuation
US8337419B2 (en) 2002-04-19 2012-12-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
DE60239132D1 (de) 2001-06-12 2011-03-24 Pelikan Technologies Inc Gerät zur erhöhung der erfolgsrate im hinblick auf die durch einen fingerstich erhaltene blutausbeute
US7344507B2 (en) 2002-04-19 2008-03-18 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for lancet actuation
US7344894B2 (en) 2001-10-16 2008-03-18 Agilent Technologies, Inc. Thermal regulation of fluidic samples within a diagnostic cartridge
US6837918B2 (en) 2001-12-20 2005-01-04 Aveka, Inc. Process for the manufacture of nanoparticle organic pigments
US8784335B2 (en) 2002-04-19 2014-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Body fluid sampling device with a capacitive sensor
US7901362B2 (en) 2002-04-19 2011-03-08 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7229458B2 (en) 2002-04-19 2007-06-12 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8702624B2 (en) 2006-09-29 2014-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Analyte measurement device with a single shot actuator
US7563232B2 (en) 2002-04-19 2009-07-21 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7232451B2 (en) 2002-04-19 2007-06-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7485128B2 (en) 2002-04-19 2009-02-03 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
WO2003088824A2 (en) 2002-04-19 2003-10-30 Pelikan Technologies, Inc. Device and method for variable speed lancet
US7491178B2 (en) 2002-04-19 2009-02-17 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8221334B2 (en) 2002-04-19 2012-07-17 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US7331931B2 (en) 2002-04-19 2008-02-19 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7909778B2 (en) 2002-04-19 2011-03-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7976476B2 (en) 2002-04-19 2011-07-12 Pelikan Technologies, Inc. Device and method for variable speed lancet
US7674232B2 (en) 2002-04-19 2010-03-09 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7713214B2 (en) 2002-04-19 2010-05-11 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a multi-use body fluid sampling device with optical analyte sensing
US7524293B2 (en) 2002-04-19 2009-04-28 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7582099B2 (en) 2002-04-19 2009-09-01 Pelikan Technologies, Inc Method and apparatus for penetrating tissue
US7371247B2 (en) 2002-04-19 2008-05-13 Pelikan Technologies, Inc Method and apparatus for penetrating tissue
US7374544B2 (en) 2002-04-19 2008-05-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8372016B2 (en) 2002-04-19 2013-02-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US8579831B2 (en) 2002-04-19 2013-11-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US8360992B2 (en) 2002-04-19 2013-01-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US9314194B2 (en) 2002-04-19 2016-04-19 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
US7141058B2 (en) 2002-04-19 2006-11-28 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for a body fluid sampling device using illumination
US7244265B2 (en) 2002-04-19 2007-07-17 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7297122B2 (en) 2002-04-19 2007-11-20 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7410468B2 (en) 2002-04-19 2008-08-12 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7892183B2 (en) 2002-04-19 2011-02-22 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
US7717863B2 (en) 2002-04-19 2010-05-18 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7547287B2 (en) 2002-04-19 2009-06-16 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US9795334B2 (en) 2002-04-19 2017-10-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for penetrating tissue
US7648468B2 (en) 2002-04-19 2010-01-19 Pelikon Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US7291117B2 (en) 2002-04-19 2007-11-06 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for penetrating tissue
US8267870B2 (en) 2002-04-19 2012-09-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for body fluid sampling with hybrid actuation
US7265881B2 (en) * 2002-12-20 2007-09-04 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Method and apparatus for measuring assembly and alignment errors in sensor assemblies
US8574895B2 (en) 2002-12-30 2013-11-05 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus using optical techniques to measure analyte levels
EP1628567B1 (en) 2003-05-30 2010-08-04 Pelikan Technologies Inc. Method and apparatus for fluid injection
US7850621B2 (en) 2003-06-06 2010-12-14 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing
WO2006001797A1 (en) 2004-06-14 2006-01-05 Pelikan Technologies, Inc. Low pain penetrating
EP1635700B1 (en) 2003-06-13 2016-03-09 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Apparatus for a point of care device
WO2005003787A1 (en) * 2003-07-08 2005-01-13 Inverness Medical Switzerland Gmbh Particle agglutination detection method and device
EP1671096A4 (en) 2003-09-29 2009-09-16 Pelikan Technologies Inc METHOD AND APPARATUS FOR PROVIDING IMPROVED SAMPLE CAPTURING DEVICE
US9351680B2 (en) 2003-10-14 2016-05-31 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a variable user interface
US7378451B2 (en) * 2003-10-17 2008-05-27 3M Innovative Properties Co Surfactant composition having stable hydrophilic character
WO2005065414A2 (en) 2003-12-31 2005-07-21 Pelikan Technologies, Inc. Method and apparatus for improving fluidic flow and sample capture
US7822454B1 (en) 2005-01-03 2010-10-26 Pelikan Technologies, Inc. Fluid sampling device with improved analyte detecting member configuration
US20050186110A1 (en) * 2004-02-20 2005-08-25 Fuji Photo Film Co., Ltd. Multilayer analysis element
WO2005080979A1 (ja) * 2004-02-20 2005-09-01 Fuji Photo Film Co., Ltd. 多層分析要素
US20050186109A1 (en) * 2004-02-20 2005-08-25 Fuji Photo Film Co., Ltd. Multilayer analysis element
US8828203B2 (en) 2004-05-20 2014-09-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Printable hydrogels for biosensors
US9775553B2 (en) 2004-06-03 2017-10-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a fluid sampling device
US9820684B2 (en) 2004-06-03 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for a fluid sampling device
US20080279725A1 (en) * 2004-09-30 2008-11-13 Fuji Photo Film Co., Ltd. Multilayer Analytical Element
WO2006035874A1 (ja) * 2004-09-30 2006-04-06 Fujifilm Corporation 多層分析要素
DE102004058794A1 (de) * 2004-12-07 2006-06-08 Roche Diagnostics Gmbh Verfahren zur Beschichtung von Membranen
US8652831B2 (en) 2004-12-30 2014-02-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for analyte measurement test time
JP2011506967A (ja) * 2007-12-10 2011-03-03 バイエル・ヘルスケア・エルエルシー バックグラウンド電流が低下した試薬を生成する方法およびシステム
US9386944B2 (en) 2008-04-11 2016-07-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Method and apparatus for analyte detecting device
WO2010052306A1 (de) * 2008-11-07 2010-05-14 Roche Diagnostics Gmbh Feinkörnige füllstoffe für photometrische reaktionsfilme
US9375169B2 (en) 2009-01-30 2016-06-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cam drive for managing disposable penetrating member actions with a single motor and motor and control system
US8965476B2 (en) 2010-04-16 2015-02-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Tissue penetration device
WO2013147934A1 (en) * 2012-03-27 2013-10-03 3M Innovative Properties Company Bis(glyoxime)-transition metal colorimetric moisture indicators

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3607093A (en) * 1968-02-15 1971-09-21 Schering Corp Devices for testing biological liquids
US3709774A (en) * 1970-05-13 1973-01-09 Gen Electric Preparation of asymmetric polymer membranes
US3847822A (en) * 1972-05-24 1974-11-12 Us Health Education & Welfare Asymmetric membrane of polyvinyl pyrrolidone-cellulose acetate blends for use as hemodialysis membranes
DE2332760C3 (de) * 1972-06-30 1982-03-04 Eastman Kodak Co., 14650 Rochester, N.Y. Material für die quantitative spektrophotometrische Analyse einer Flüssigkeit
US3992158A (en) * 1973-08-16 1976-11-16 Eastman Kodak Company Integral analytical element
IN141704B (hu) * 1975-01-28 1977-04-09 Miles Lab
DE3118381A1 (de) * 1981-05-09 1982-11-25 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Mehrschichtiges testmittel zum nachweis einer komponente einer fluessigen probe
DE3129745C2 (de) * 1981-07-28 1985-01-17 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Offenporig-mikroporös ausgebildeter Formkörper mit inhärenter latenter Strukturumwandelbarkeit

Also Published As

Publication number Publication date
US4824639A (en) 1989-04-25
ES540670A0 (es) 1986-05-16
AU579137B2 (en) 1988-11-17
DK161543B (da) 1991-07-15
EP0154839A3 (en) 1986-12-30
EP0154839A2 (de) 1985-09-18
EP0154839B1 (de) 1991-10-23
DK161543C (da) 1991-12-23
DE3584459D1 (de) 1991-11-28
JPH0623745B2 (ja) 1994-03-30
IL74442A (en) 1988-11-30
DK88785A (da) 1985-08-30
JPS60209174A (ja) 1985-10-21
DK88785D0 (da) 1985-02-27
HUT38729A (en) 1986-06-30
IL74442A0 (en) 1985-05-31
ZA851528B (en) 1985-11-27
ES8607551A1 (es) 1986-05-16
AU3892785A (en) 1985-09-05
DE3407359A1 (de) 1985-08-29
ATE68884T1 (de) 1991-11-15
CA1255196A (en) 1989-06-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU205209B (en) Testing means for detecting components in liquids
AU601639B2 (en) Process for the production of porous membranes, the membranes produced thereby and their use as supporting matrices in test strips
US4820489A (en) Test strips and a process for the production thereof
US4824640A (en) Transparent test strip system
US5968765A (en) Opaque reaction matrix for the analysis of the whole blood
JP3220486B2 (ja) 血液グルコース濃度用可視試験片
AU613508B2 (en) Test device and method of assaying for proteins
US5096833A (en) Method and device for determining protein using carrier matrix composed of urethane, water insouble inorganic compound and insoluble organic compound and method of making the device
US5077222A (en) Method for assaying for proteins using a dual indicator reagent composition
US4808529A (en) Enzymes immobilized on polyamides or cellulose hydrate
AU633210B2 (en) Asymmetric sandwich membrane system as diagnostic test device
US5240735A (en) Method of manufacturing a test article for the determination of protein
JPS584555B2 (ja) アスコルビン酸の検出組成物、検出方法及び検出素子
JPH02201163A (ja) 総蛋白質測定用試験方法及び試験具
EP0164960A2 (en) Analytical element and its use in whole blood hemoglobin assay
AU592771B2 (en) Device composed of polymers with a membrane structure and incorporated solids particles
JPH0625760B2 (ja) 流延法による試験片の製造方法
WO1988009824A1 (en) Improvements in diagnostic test strips
EP1806578A1 (en) Multilayered analytical element
JPS61212287A (ja) 担体―固定化蛋白質複合体及びその製造方法
JPH01302158A (ja) 検査体
JPH02189440A (ja) 試験片の製造方法
AU1802888A (en) Improvements in diagnostic test strips
JPH0972902A (ja) 全血分析用要素
JPS621220B2 (hu)