HU181497B

HU181497B - Process for preparing crystalline sodium salt of oximino-7-amino-thiazolyl-acetamido-3-acetoxymethyl-cef-3-em-4-carboxylic acid

Info

Publication number: HU181497B
Application number: HU78RO993A
Authority: HU
Inventors: Gaston Amiard; Dieter Bormann; Walter Duerckheimer; Jean Jolly
Original assignee: Roussel Uclaf
Priority date: 1977-08-17
Filing date: 1978-08-16
Publication date: 1983-07-28
Also published as: JPS6145626B2; BG33888A3; NO156168C; FR2400519A1; MX5448E; DE2860358D1; FI65433C; DK159786D0; ES472381A1; EP0001024A1; DD137588A5; GEP19960475B; DK163514C; JPS5441890A; OA06016A; NO156168B; IL55186A0; YU42166B; AT366049B; IE47230B1

Description

Feltalálók:	Szabadalmas:
Amiard, Gaston, vegyész, Noisy-Le-Sec, Franciaország Bormann, Dieter, vegyész, Kelkheim, NSZK Duerckheimer, Walter, vegyész, Hattersheim, NSZK	Roussel uclaf, Romainville, Franciaország

Jolly, Jean, vegyész, Fontenay-Sous-Bois, Franciaország

Eljárás kristályos oximino-7-amino-tiazolil-acetamido-3-acet-oxi-metil-cef-3-em-4-karbonsav-nátriumsó előállítására

A találmány tárgya új eljárás a 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazoliI)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsójának egy új hidratált kristályos formában, az úgynevezett D alakban való előállítására.

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomerének és e vegyület nátriumsójának előállítása ismeretes. Ezt korábbi szabadalmi bejelentéseinkben leírtuk.

Ezek a vegyületek figyelemreméltó antibiotikus hatással rendelkeznek, különösen hatásosak a Gram-pozitiv és még inkább a Gram negatív baktériumok ellen.

A találmány szerinti eljárással az előbb említett nátriumsót egy különleges kristályos alakban állíthatjuk elő. Ez kiváló stabilitással rendelkezik, aminek következtében igen előnyösen használható alapanyagként gyógyszerkészítésben.

A találmány szerinti eljárással a III képletü vegyület hidratált kristályos alakját, egy úgynevezett D kristályos alakú vegyületet állíthatjuk elő. E kristályos vegyületnek a réz 1,54 Angström hullámhosszú Ka sugarával készített röntgen— diffrakciós porfelvételi képének jellemző adatai:

d	I/Ii
9,3	0,95
8,8	0,09
6,5	0,07
6,46	0,06
6,10	013
5,30	0,25
5,12	0,05

5,03	0,04
4,57	0,04
4,40	0,17
4,20	0,29
3,96	0,70
3,88	0,18
3,76	0,34
3,6	1,00
3,41	0,15
3,27	0,09
3,19	0,11
3,13	0,13
3,10	0,13
3,03	0,15
2,97	0,06
2,78	0,07
2,72	0,04
2,69	0,04
2,60	0,19
2,50	0,11
2,44	0,05
2,40	0,08
2,32	0,09
2,25	0,05

ahol d a rácsállandó és I/I, a relatív intenzitás. E kristályos vegyület nujolban felvett infravörös spektrumát az 1. ábra szemlélteti.

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-7-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomerének nátriumsója más kristályos alakban korábban is ismert volt

-1181497

850 662 sz. belga szabadalmi leírás. A találmány szerinti eljárással előállítható D kristályos vegyület azonban jóval stabilabb, mint a vegyület korábban ismert kristályos alakjai.

Az új D kristályos vegyületet fehér szilárd anyag alakjában kapjuk a találmány szerinti eljárás során. A termék kevéssé higroszkópos, ezért stabilitása igen nagy.

A III képletü vegyület hidratált kristályos alakját, a D kristályos vegyületet a találmány szerint oly módon állítjuk elő, hogy

a) egy I képletü sav szín izomerének hidrátját, etanolos szolvátját vagy hangyasavas szolvátját vagy hidrátjának és etanoloe vagy hangyasavas szolvátjának keverékét egy II általános képletü nátriumsóval reagáltatjuk, ahol X egy az I képletü savval azonos erősségű vagy annál gyengébb sav anionja, és a kapott III képletü hidratált sót szükség esetén egy a nátriumsót gyakorlatilag nem oldó szerves oldószer jelenlétében kristályosítjuk, vagy

b) az I képletü sav hidrátját, etanolos szolvátját, vagy hangyasavas szolvátját vagy hidrátjának és etanolos vagy hangyasavas szolvátjának keverékéi egy szervetlen sav nátriumsójával reagáltatjuk metanolban, a III képletü kristályos nátriumsót metanolos szolvát alakjában elkülönítjük, majd a szolvátot kívánt esetben metanol-mentes III képletü termékké alakítjuk, és a III képletü vegyületet vagy annak metanolos szolvátját hidratáljuk.

Az I képletü sav, valamint e sav hangyasavas szolvátjának, illetve a hangyasavas szolvát és a hidrát keverékének előállítása a 850 662 számú belga szabadalmi leírásban van ismertetve. A vegyület etanolos szolvátját oly módon állíthatjuk elő, hogy a sav formiátját etanollal kezeljük. Az képletü sav hidrátját vagy a hidrát és az etanolos szolvát keverékét úgy készíthetjük el, hogy az I képletü savat vagy annak etanolos szolvátját nagy nedvességtartalmú levegővel érintkeztetjük. II általános képletü nátriumsóként ásványi vagy szerves savak nátriumsóit használhatjuk.

Az ásványi savakkal képzett sók közül példaként megemlítjük a nátriumhidrogénkarbonátot, a nátriumkarbonátot és a trinátrium-foszfátot.

A szerves savakkal képzett sók közül példaként megemlítjük az 1—18 szénatomos, előnyösen 2—10 szénatomos telített vagy telítetlen egyenes vagy elágazó láncú alifás karbonsavakkal képzett sókat. A sóképző sav alifás csoportjai egy vagy több oxigén vagy kén heteroatommal lehetnek megszakítva, de használhatunk olyan savakból képzett sókat is, amely savak alifás csoportjai aril-csoportokkal, például fenil-, tienil- vagy furil-csoporttal, vagy egy vagy több hidroxil-csoporttal vagy egy vagy több halogénatommal, így fluor-, klór- vagy brómatommal, előnyösen klóratommal vagy egy vagy több karboxil-csoporttal vagy rövidszénláncú alkoxikarbonil-csoporttal, előnyösen metoxikarbonil-, etoxikarbonil- vagy propiloxikarbonil-csoporttal vagy egy vagy több ariloxi-csoporttal, előnyösen fenoxi-csoporttal vannak szubsztituálva.

Használhatunk továbbá a sóképzéshez olyan aromás szerves savakat, amelyek kielégítően oldódnak, így például helyettesített benzoesavakat, előnyösen rövidszénláncú alkilcsoporttal helyettesített benzoesavat.

E szerves savakra példaként megemlítjük a hangyasavat, ecetsavat, akrilsavat, vajsavat, adipinsavat, izovajsavat, n-kapronsavat, izokapronsavat, klórpropionsavat, krotonsavat, fenilecetsavat, 2-tienil-ecetsavat, 3-tienil-ecetsavat, 4-etilfenil-ecetsavat, és a glutársavat, az adipinsav monoetilészterét, a hexánsavat, heptánsavat, dekánsavat, oleinsavat, sztearinsavat, palmitinsavat, 3-hidroxi-propionsavat, 3-metoxi-propionsavat, 3-metiltio-vaj-savat, 4-klór-vajsavat,

4-fenil-vajsavat, 3-fenoxi-vajsavat, 4-etil-vajsavat és az 1propil-benzoesavat.

Előnyösen azonban nátriumacetátot, nátrium-2-etilhexanoátot, vagy nátrium-dietilacetátot, legelőnyösebben nátriumacetátot használunk.

A fent említett szerves savakkal képzett nátriumsókat használhatjuk előre elkészítve, vagy elkészíthetjük őket magában a reakcióelegyben, amennyiben az oldhatósági viszonyok ezt lehetővé teszik.

A III képletü sókat különféle módon állíthatjuk elő.

Az a) eljárásváltozat szerint a II általános képletü sókból vizes oldatot készítünk, és az I képletü savat hozzáadjuk a vizes oldathoz. A reakció termékét egy olyan szerves oldószerjelenlétében kristályosítjuk, amelyben a cefalosporin-só gyakorlatilag oldhatatlan. Ha a só képződése befejeződött, akkor azt olyan lassan keverjük össze a kicsapó oldószerrel, hogy elkerüljük a nátriumsó amorf alakban való kiválását.

Ehhez a művelethez megfelelő oldószernek találtuk a vízzel elegyedő alkoholokat és ketonokat, például a metanolt, etanolt, n-propanolt, izopropanolt és az acetont.

Az előbb említett eljárást előnyösen úgy végezzük, hogy a II általános képletü nátriumsót szerves oldószer és víz keverékéhez adjuk, majd hozzáadjuk az I képletü savat, és ennek feloldódása után kikristályosítjuk a nátriumsót. Ez utóbbi műveletet előnyösen úgy végezzük, hogy a nátriumsót gyakorlatilag alig oldó szerves oldószer fennmaradó részét olyan lassú ütemben elegyítjük az oldattal, hogy elkerüljük a nátriumsó amorf alakban való kiválását.

A víz és a szerves oldószer aránya bizonyos mértékig változtatható, egy rész vízhez általában 5—9 rész szerves oldószert előnyös használni a kristályos termék nagy hozammal való előállításához.

A II általános képletü nátriumsót legalább sztöchiometrikus mennyiségben használjuk.

Adott esetben előnyös lehet a II általános képletü nátriumsót fölöslegben, éspedig mintegy 10—200%-os, előnyösen mintegy 20%-os fölöslegben venni.

A nátriumsót igen széles hőmérséklet-tartományban állíthatjuk elő. Ügyelni kell azonban arra, hogy elkerüljük a kívánt termék bármilyen károsodását, így például idő előtti kristályosodását. Ezért a nátriumsó képzését ajánlatos 0 °C-on vagy annál alacsonyabb hőmérsékleten végezni, a kristályosítást pedig 0 ’C fölötti hőmérsékleten, nevezetesen mintegy 10 ’C és 25'C közötti hőmérsékleten kezdeni. A nátriumsót előállíthatjuk azonban hasonló hozammal a környezet hőmérsékletén is.

AIII képletü nátriumsó találmány szerinti eljárással előállított kristályai a stabil D alakot képezik.

Ha a nátriumsó képzéséhez oldószerként vizes metanolt használunk, akkor előnyösen úgy járunk el, hogy előbb a nátriumsót, előnyösen a nátriumacetátot oldjuk a 0 ’C körüli hőmérsékleten tartott vizes metanolban, majd hozzáadjuk az I képletü savat, annak hidrátját, etanolos szolvátját, hangyasavas szolvátját vagy hidrátjának és etanolos vagy hangyasavas szolvátjának keverékét. A savat igen lassan adjuk az oldathoz, azután az oldatot 0 ’C körüli hőmérsékleten keverjük. Kívánt esetben steril szűrésnek is alávethetjük az oldatot.

A D kristályformájú tennék kristályosítását előnyösen úgy végezzük, hogy a kapott oldatot egy olyan oldószerbe öntjük, amelyben a só gyakorlatilag oldhatatlan.

Ilyen oldószerként egy vízzel elegyedő és 0,5—10% vizet tartalmazó szerves oldószert, így például n-propanolt, izopropanolt, terc-butanolt, acetont vagy előnyösen etanolt használunk.

-2181497

A b) eljárásváltozat szerint az I képletü cef-3-em-4- karbonsavat, annak nem-szolvatált alakját vagy hidrátját, vagy etanolos vagy hangyasavas szolvátját vagy hidrátjának és etanolos vagy hangyasavas szolvátjának keverékét metanolban alakítjuk át nátriumsóvá, és e művelethez egy fent említett alifás vagy aromás szerves sav nátriumsóját használjuk. A reakciót előnyösen nátriumacetáttal, nátrium-2-etil-hexanoáttal vagy n&rium-dietilacetáttal végezzük.

Ebben az eljárásváltozatban a kristályos vegyületet metanolos szolvát alakjában kapjuk. A metanolos szolvátot erőteljes szárítással, például vákuumban 30—50 °C-on való szárítással metanol-mentes termékké alakíthatjuk. Ekkor higroszkópos kristályokat kapunk.

A metanolos szolvátot, illetve a metanol-mentesített terméket hidratáljuk, amikoris stabil D kristályos vegyületet kapunk.

A hidratálást többféle módon végezhetjük. így például a vegyületet levegőn vagy valamilyen más közegben, például nitrogénben tartjuk, amely közegek igen nagy nedvességtartalmúak. Eljárhatunk azonban úgy is, hogy a metanolos szolvátot vagy a metanol-mentesített terméket egy vízzel elegyedő és 1—10% vizet tartalmazó szerves oldószerben szuszpendáljuk. Ilyen oldószerként egy ketont, például acetont, vagy egy alkoholt, például etanolt, n-propanolt, izopropanolt vagy terc-butanolt használunk. 25

Előnyösen úgy járunk el, hogy a nátriumsót mintegy 1—10% vizet tartalmazó etanolban szuszpendáljuk, és a szuszpenziót mintegy 10—30 órán át keverjük szobahőmérsékleten.

Ily módon a metanolos szolvátot, illetve a metanol-mentesitett vegyületet oly módon alakíthatjuk át, hogy úgynevezett D alakú stabil kristályos anyagot kapunk.

A D kristályforma víztartalma a közeg nedvességtartalmától függ és a kristályszerkezet változása nélkül 15%-ig emelkedhet.

A termék víztartalma szárítással, előnyösen szobahőmérsékleten vákuumban való szárítással az előnyös határok közé, mintegy 3—6%-ra csökkenthető.

A találmány szerint oly módon is előállíthatjuk a fent meghatározott hidratált kristályos vegyületet, hogy az I képletű savat, annak nem-szolvatált alakját, hidrátját, vagy etanolos vagy hangyasavas szolvátját vagy hidrátjának és etanolos vagy hangyasavas szolvátjának keverékét metanolban egy szerves sav nátriumsójával reagáltatjuk, a kapott nátri- 45 umsó kristályos metanolos szolvátját elkülönítjük, majd egy vízzel elegyedő és kis mennyiségű vizet tartalmazó oldószerrel szuszpendáljuk, a szuszpenziót állni hagyjuk, és a kívánt D kristályos alakú terméket elkülönítjük.

Az előbbi eljárást előnyösen oly módon végezzük, hogy 50 szerves nátriumsóként nátriumacetátot, nátrium-dietilacetátot vagy nátrium-etilhexanoátot használunk.

Az előbbi eljárást különösen előnyösen hajthatjuk végre, ha a metanolos szolvát szuszpendálásához kis mennyiségű vizet tartalmazó oldószerként 1—10% vizet tartalmazó eta- 55 nőit használunk.

A fenti műveletek körülményei lehetővé teszik, hogy az eljárást steril körülmények között végezzük.

A 3-acetoxi-metil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav nátriumsójának más alakjaihoz hasonlóan a D kristályforma is igen jó antibiotikus hatással rendelkezik egyrészt a Gram pozitív baktériumokkal, így Staphylococcusokkal és Streptococcusokkal, különösen a penicillin-rezisztens Staphylococcusokkal, másrészt Gram negatív baktériumokkal, különösen coliform baktériumokkal, valamint Klebsiella, Proteus és Salmonella fajokkal szemben.

E sajátságai révén a találmány szerinti eljárás terméke olyan gyógyszerek készítéséhez használható, amelyekkel az 5 e vegyületre érzékeny mikroorganizmusok által okozott betegségeket, különösen staphylococcusos fertőzéseket lehet kezelni. Az ilyen gyógyszerek alkalmasak a staphylococcusos vérmérgezés, a staphylococcusos rosszindulatú arc- és bőrfertőzés, a gennyes bőrgyulladás, a szeptikus vagy geny10 nyes sebek, a lépfene, a flegmon, az orbánc, az akut primer és influenzát követő staphylococcusos fertőzések, a bronchopneumonia és a tüdőgennyesedés kezelésére.

Használhatjuk továbbá a találmány szerinti eljárás termékét kolibacilus-fertőzések és ezzel kapcsolatos egyéb fertőzé15 sek, továbbá a Klebsiella, Proteus és Salmonella fajok által okozott fertőzések és más Gram negatív baktériumok okozta betegségek gyógyítására.

A fentiekben felsorolt biológiai hatások alkalmassá teszik a 3-acetoxi-metil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino20 -acetamido)-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsójának hidratált D kristály alakját arra, hogy e vegyületből gyógyszereket, elsősorban antibiotikus hatású gyógyszereket készítsünk.

Az ilyen gyógyászati készítmények hatóanyagként a fent meghatározott nátriumsót tartalmazzák.

Az ilyen készítményeket bukkálisan, rektálisan vagy parenterálisan juttathatjuk a szervezetbe, de alkalmazhatjuk topikálisan is a bőrön és a nyálkahártyákon.

A találmány szerinti eljárás termékének felhasználásával 30 a humán gyógyászatban szokásos folyékony vagy szilárd készítményeket, így például bevonat nélküli vagy cukorbevonatos tablettát, zselatinkapszulát, granulátumot, kúpot, injektálható készítményeket, kenőcsöt, krémet és gélt készíthetünk. Ezeket a szokásos módszerekkel készítjük el.

A hatóanyagot a gyógyszerkészítésben szokásos segédanyagokkal, igy például talkummal, arab mézgával, laktózzal, keményítővel, magnéziumsztearáttal, kakaóvajjal, vizes vagy nem vizes vivőanyagokkal, állati vagy növényi eredetű zsiradékokkal, paraffinszármazékokkal, glikolokkal, külön40 féle nedvesítő diszpergáló és emulgeáló szerekkel és/vagy tartósító szerekkel keverjük össze.

A vegyületet a betegség és a beteg természetétől, illetve a beadás módjától függő dózisban alkalmazzuk. így például a napi dózis orális beadás esetén 0,250 g és 4 g között, intramuszkuláris beadás esetén pedig háromszor 0,500 g és 1 g között változik felnőtt ember kezelése esetén.

A találmányt az alábbi példákkal világítjuk meg közelebbről az oltalmi kör korlátozása nélkül.

1. példa

3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimínoacetamido]-cef-3-em-karbonsav szín izomer nátriumsó D kristály alakban való előállítása

A) lépés 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-kar&onsat szín izomer nátriumsó kristályos metanolos szolvátja.

12 liter tiszta vízmentes metanolhoz hozzáadunk 432 g vízmentes nátriumacetátot. Ennek feloldódása után egyszerre hozzáadunk az oldathoz 3000 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimíno-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomert, amely 5% etanolt és 0,9% vizet tartalmaz A reakcióelegyet 18—20 °C-on keverjük nitrogén-3181497 atmoszférában, amikor is 5 perc múlva majdnem teljesen befejeződik az oldódás. Az így kapott oldatot 1,5—2 bar nyomású nitrogént tartalmazó reaktorba töltjük.

A 15—20 °C-on tartott oldathoz nitrogénatmoszférában igen erőteljes keverés közben 18—20 °C-on egyszerre hozzá- 5 adjuk 864 g vízmentes nátriumacetát 4,5 liter metanollal készített oldatát. Tiszta oldatot kapunk, amelyet nitrogénatmoszférában keverünk 18—20 °C-on. Az oldatból kiveszünk 10 ml-t, az edény kapargatásával kristályosítjuk, és a kapott szuszpenziót visszahelyezzük a reakcióelegybe. 10 A kristályosodás mintegy 5 perc múlva megkezdődik. A rendszert 4 órán át 18—20’C-on keverjük erőteljesen nitrogénatmoszférában. A kristályképződés egyre fokozódik. Ezután a szuszpenziót 0 és +2 ’C közötti hőmérsékletre visszük le és 2 órán át keveijük. Ezután dekantáljuk és 15 vákuumszürőn szűrjük. A szilárd anyagot háromszor 1 liter tiszta vízmentes metanollal 0 és + 2 ’C közötti hőmérsékleten elpépesítjük, majd e műveletet még egyszer megismételjük 1,5 liter metanollal. Ezután a terméket mintegy 48 órán át szárítjuk vákuumban 20—22 °C-on. 2630 g cím szerinti 20 terméket kapunk.

Víztartalma (Fischer szerint) = 1%

Metanol-tartalma gázfázisú kromatográfiával meghatározva = 8%

Az így kapott terméket szitálással homogenizáljuk. 25

B) lépés

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiiminoacetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó D kristály-alakja.

Az előbbi lépésben kapott átszitált termék 100 g-ját hoz- 30 záadjuk 800 ml etanolhoz, amely 5% vizet tartalmaz. A rendszert 15—20 órán át keverjük 20 ±2 ’C hőmérsékleten. Ezután vákuumszürőn szűrjük, a szilárd anyagot 5% vizet tartalmazó etanol 100 ml-ével mossuk, 20—25 °C-os vákuumszáritó-szekrényben megszárítjuk. Ekkor 99 g ki- 35 vánt terméket kapunk (nem korrigált súly).

Víztartalma 5,3%

Etanol-tartalma 0,2%

Metanol-tartalma 0,2%.

A termék infravörös spektruma és röntgendiffrakció 40 spektruma azonos a leírásban említettekkel.

A kiindulási vegyületként használt 3-acetoximetil-6-[2-(2amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido)-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer ismertetése a 850 662 számú belga szabadalmi leírásban található. 45

2. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino- 50 -acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó D kristályos alakban való előállítása ml 98%-os etanolt 20 °C-on, keverés közben hozzáadunk 6 g nátriumacetáthoz és 20 ml vízhez, majd a keverést folytatva 25 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil]-2- 55 -metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer etanolos szolvátot adunk a reakcióelegyhez.

A sav feloldódik, azután az oldatot 0 ’C-ra hütjük le. Keverés közben 50 ml 98%-os etanolt csepegtetünk hozzá. Ezután az oldathoz aktív szenet adunk, szűrjük, és a szürle- 60 tét 20 ’C-ra melegítjük. A kristályosodás röviddel ezután spontán megkezdődik. A kivált anyagot 16 óra múlva (a környezet hőmérsékletén való állás után) leszívatással kiszűrjük. A szilárd anyagot 1 : 7 arányú víz—etanol eleggyel, azután etanollal, végül éterrel mossuk. Színtelen, kristályos 65 anyagot kapunk. Víztartalma (Fischer szerint) 4,8%, erős vákuumban való szárítás után.

A röntgendiffrakciós spektrum és a nujolban felvett infravörös spektrum arról tanúskodik, hogy D kristály alakú terméket kaptunk.

3. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiiminoacetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó D kristály-alakban való előállítása

A 2. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy nátriumacetát helyett a 2-etil-hexánsav nátriumsóját használjuk.

Teljesen azonos körülmények között végrehajtott műveletek után kristályos terméket kapunk, amelyet erős vákuumban megszárítunk. A nujolban felvett infravörös spektrum szerint stabil D kristály-alakban kaptuk a terméket.

4. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó D kristály-alakban való előállítása

2,2 g nátrium-dietilacetát 4 ml víz és 20 ml 98%-os etanol elegyével készített oldatához hozzáadunk 5,01 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamidojcef-3-em-4-karbonsav szín izomer etanolos szolvátot. A cefem-karbonsav teljesen feloldódik. A reakcióelegyhez 0,5 g aktív szenet adunk, 5 percig keverjük és szűrjük. A szűrletet szobahőmérsékleten keverjük, mire a kristály-kiválás mintegy 1 óra múlva spontán megkezdődik.

A rendszert egy éjszakán át hagyjuk állni szobahőmérsékleten, azután a kivált kristályokat elválasztjuk. A szilárd anyagot előbb 7 : 1 arányú etanol—víz eleggyel, azután etanollal, végül éterrel mossuk. Ezután két órán át szárítjuk erős vákuumban. Ekkor a kívánt D kristály-alakú nátriumsót kapjuk. A terméket nujolban felvett infravörös spektrummal azonosítottuk.

5. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó előállítása D kristály-alakban

0,85 g nátriumhidrogénkarbonát 5 ml vízzel készített oldatához hozzáadunk 4,55 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomert. Viszkózus oldatot kapunk, amelyhez hozzácsepegtetünk 10 ml 98%-os etanolt. Ezután az oldatot szűrjük, majd szobahőmérsékleten, keverés közben 20 ml etanolt adunk hozzá.

Ezután a rendszert kristályosodni hagyjuk. A kristályképződés befejeződésekor a színtelen kristályokat elkülönítjük és 7:1 arányú etanol—víz eleggyel mossuk, majd megszárítjuk.

A röntgendiffrakciós spektrum és a nujolban felvett infravörös spektrum tanúsága szerint a termék azonos az 1. példa szerint előállított nátriumsóval.

-4181497

6. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiiminoacetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó előállítása D kristály-alakban g nátriumacetát 100 ml metanollal készített oldatában — 15 ’C-on feloldunk 15 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomert. Az oldathoz 3 g aktív szenet adunk, majd az oldatot szűrjük és 20 ’C-ra melegítjük.

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazoIil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó metanolos szolvátjának kristályait, amelyek azonosak az 1. példa A lépésében előállított kristályokkal, elválasztjuk.

A) Az így kapott kristályok egy részét erős vákuumban megszárítjuk, a metanolt eltávolítjuk, és a metanolmentes kristályokat egy éjszakán át tartjuk vízgőzzel telített térben.

Az így kapott színtelen kristályokat szobahőmérsékleten vákuumban megszárítjuk.

Ekkor 5,2% vizet (Fischer módszerével meghatározva) tartalmazó kristályokat kapunk.

A röntgendiffrakciós spektrum és a nujolban felvett infravörös spektrum szerint a kapott vegyület azonos az 1. példa termékével. A fenti eljárással tehát valóban D kristály-alakú terméket kaptunk.

B) A kristályok másik részét minden előzetes kezelés nélkül egy éjszakán át tartjuk vízgőzzel telített térben. A kristályokat elválasztjuk és 2 órán át szárítjuk vákuumban szobahőmérsékleten.

A tennék víztartalma Fischer módszerével meghatározva 4,9%. A röngtendiffrakciós spektrum és a nujolban felvett infravörös spektrum szerint a termék azonos az 1. példában kapott termékkel. Ez azt jelenti, hogy D kristály-alakú vegyületet kaptunk.

7. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó előállítása D kristály-alakban ÚJ

1,2 g nátriumacetát 10 ml vízzel és 15 ml izopropanollal készített oldatához szobahőmérsékleten hozzáadunk 5,01 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-3-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer etanolos szolvátot. Ezután az oldathoz 0,5 g aktív szenet adunk, majd az oldatot szűrjük. Ezután keverés közben 25 ml izopropanolt csepegtetünk hozzá.

öt és fél óra múlva elkülönítjük a kivált kristályokat. A szilárd anyagot izopropanol és víz elegyével mossuk, azután szobahőmérsékleten, erős vákuumban 3 óra alatt megszárítjuk.

Az infravörös spektrum szerint az így kapott kristályok azonosak az 1. példa szerinti termékkel. A termék tehát D kristály-alakú.

8. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-ammo-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido)-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó előállítása D kristály-alakban

A 7. példa szerinti módon járunk el, azzal az eltéréssel, hogy izopropanol helyett acetont használunk.

A nujolban felvett infravörös spektrum szerint a kapott kristályos anyag teljesen azonos az 1. példa szerinti termékkel. Ez azt jelenti, hogy D kristály-alakú terméket kaptunk.

·:·

9. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó 10 előállítása D kristály-alakban

175 ml tiszta vízmentes metanolt összekeverünk 25 ml ionmentesített vízzel és 21,6 g vízmentes nátriumacetáttal. Az oldatot 0 ’C és + 2 ’C közötti hőmérsékleten nitrogénatmoszférában keverjük.

A hőmérsékletet továbbra is 0 ’C és +2 ’C között tartva 8% etanolt és 0,5% vizet tartalmazó; 108,7 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomert adunk az oldathoz.

A sav feloldódása után a reakcióelegyet nitrogénatmoszfé20 rában keverjük 0 ’C és + 2 ’C közötti hőmérsékleten, azután az oldatot hőszigetelt steril szűrőn bocsátjuk át, és így egy 0 ’C és + 2 ’C közötti hőmérsékletű és nitrogént tartalmazó steril edénybe vezetjük.

A szűrőt kétszer 25 ml tiszta vízmentes metanollal átöblít25 jük. A steril oldatot nitrogénben tartjuk 0’C és +2’C közötti hőmérsékleten, és egy óra múlva nitrogénben 500 ml etanolban, amely 2% vizet tartalmaz, 18—20 ’C-on kicsapjuk a szilárd vegyületet keverés közben. A kapott szuszpenziót ezután még néhány órán át keverjük nitrogénben.

A terméket vákuumszűrőn kiszűrjük, ezután előbb 100 ml, majd 200 ml etanollal, amely 5% vizet tartalmaz, elpépesítjük. Ezután a terméket 50 ml 5% vizet tartalmazó etanollal mossuk. A kapott anyagot vákuumban 20—25 ’Con megszárítjuk. 96,5 g kívánt terméket kapunk.

Víztartalma 4%

Etanol-tartalma 0,4%.

A kapott termék infravörös spektruma a D kristályformára jellemző spektrum.

10. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó előállítása D kristály-alakban g nátriuemacetát 7,5 ml víz és 20 ml abszolút etanol elegyével készített oldatához hozzáadunk 10 g 3-acetoxime-til-7-[2(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomert, amely mintegy 7,2% etanolt tartalmaz.

A reakcióelegyet 15 percig keverjük szobahőmérsékleten, azután 1,5 g aktív szénnel derítjük és szűrjük;

A szűrön maradt aktív szenet kétszer 5 mj 9;. 1 arányú etanol-víz eleggyel mossuk.

A kapott szűrletet szobahőmérsékleten keverés közben 50 perc alatt hozzácsepegtetjük 80 ml etanolhoz. A nátriumsó kristályai kiválnak. A rendszert két órán át keverjük 0 ’Con, azután vákuumszűrőn szűrjük, a kristályokat etanollal mossuk és vákuumban megszáritjuk. Víztartalma 5,7%

11. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-rnetoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó előállítása D kristály-alakban. i

-5181497

Az előző példa szerinti módon járunk el a műveleteket az aktív szenes derítésig folytatva. Az ekkor kapott szűrletet szobahőmérsékleten, keverés közben két óra alatt hozzácsepegtetjük 80 ml izopropanolhoz. A rendszert két órán át keverjük szobahőmérsékleten, azután két órán át 0 °C hőmérsékleten, majd a kristályokat vákuumszűrőn kiszűrjük, etanollal mossuk és erős vákuumban megszáritjuk. 8,80 g kívánt terméket kapunk.

Víztartalma 0,74%

12. példa

A 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazoliI)-2-metoxiimino-acetamído]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó előállítása D kristály-alakban

3,5 g nátriumacetát 5 ml vízzel és 300 ml etanollal készített oldatához szobahőmérsékleten hozzáadunk 10 g 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav-formiát szín izomert. Az oldódás befejeződése után az oldatot szűrjük, és a szűrletet szobahőmérsékleten, keverés közben 1 óra alatt hozzácsepegtetjük 160 ml abszolút etanolhoz. A keverést 3 órán át folytatjuk szobahőmérsékleten, azután 16 órán át 0 °C-on tartjuk a szuszpenziót. Ezután a kristályos anyagot vákuumszűrőn kiszűrjük, etanollal mossuk és erős vákuumban megszárítjuk. 7,75 g kívánt terméket kapunk.

Víztartalma 0,95%

A kiindulási vegyületként használt hangyasavas szolvát ismertetése a 850 662 számú belga szabadalmi leírásban található.

13. példa

Injekciót készítünk az alábbi összetétellel:

D kristály-alakú 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó 500 mg steril vizes vivőanyag q.s. 5 ml

Zselatin kapszulát készítünk az alábbi összetétellel:

D kristály-alakú 3-acetoximetil-7-[2-(2amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó 250 mg zselatin kapszulához szükséges vivőanyag q.s. 400 mg

A találmány szerinti eljárással előállított vegyület farmakológiai sajátságait az alábbi kísérletekben vizsgáltuk.

In vitro hatás vizsgálata

Ezt a vizsgálatot az úgynevezett folyadék-hígításos módszerrel végeztük. Egy sorozat kémcsőbe azonos mennyiségű steril tápközeget mértünk be. A vizsgálandó vegyület egyre növekvő mennyiségét helyeztük el a kémcsövekben, azután minden kémcsövet inokuláltunk egy baktériumtörzzsel.

A tenyészeteket 24 órán át, illetve 48 órán át inkubáljuk 37 °C hőmérsékleten, azután átvilágítással kiértékeljük a baktériumok növekedésének gátlását. Ezzel a módszerrel határoztuk meg a minimális gátiási koncentrációt (MIC), amelyet mikrogramm/ml-ben kifejezve adunk meg az 1. táblázatban.

A stabilitás vizsgálata

Az 1. példa szerinti terméket nem steril levegőt tartalmazó palackban helyeztük el, és a palackot gumidugóval lezártuk. Időközönként megvizsgáltuk a megmaradt aktivitást. Vizsgálataink eredményét az alábbi táblázatban foglaljuk össze.

’C 50 °C

Idő: 0	160 óra	2 hét	1,5 hónap	3 hónap
97	89,5	81,5	92,5	92
		1. táblázat

Baktérium törzs	1. példa szerinti termék 24 óra	M.I.C. (ng/ml) 48 óra
Staphylococcus aureus I H 005	2	3
Staphylococcus aureus I H 38	1	2
Staphylococcus aureus I H 41	1	2
Staphylococcus aureus I H 47	2	2
Escherichia Coli 7881	0,1	0,1
Escherichia Coli T 55 4376	0,1	0,1
Escherichia Coli T 55 4076	0,05	0,05
Escherichia Coli A 223	0,1	0,1
Klebsiella Pneumoniae COc 229	0,1	0,1
Klebsiella Pneumoniae COc 238	0,2	0,2
Proteus Mirabilis 3477	0,05	0,05
Proteus Mirabilis 1816	0,05	0,05
Proteus Mirabilis 9048	0,02	0,02
Proteus Vulgáris Co 1	0,2	0,4
Proteus Vulgáris Co 4	0,6	0,6
Proteus Vulgáris Du 27	0,02	0,02
Salmonella typhimurium 6478	0,1	0,1

Az alábbiakban közöljük azoknak a vizsgálatoknak az eredményeit, amelyekkel a 850 662 számú belga szabadalmi leírás szerint előállított és a találmány szerinti eljárással előállított III képletű vegyületek stabilitását vizsgáltuk.

Az A vegyület a 850 662 számú belga szabadalmi leírás 24. példája szerint előállított kristályos 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsavas nátriumsó szín izomere.

A B vegyület az előbbi vegyület amorf alakban, amint azt a 850 662 számú belga szabadalmi leírás 25. példája szerint előállítottuk.

A C vegyület a 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsavas nátriumsó szín izomere, amelyet a 850 662 számú belga szabadalmi leírás 26. példája szerint állítottunk elő.

Az X vegyület a 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)2-metoxiimino-acetamido]-cef-3-em-4-karbonsavas nátriumsó szín izomerének a találmány szerinti eljárással előállított D kristályos alakja.

E vegyületek stabilitását úgy vizsgáltuk, hogy a mintákat 60 °C hőmérsékleten tároltuk 1 hónapig nem-steril levegőt tartalmazó, gumidugóval lezárt edényekben.

A tárolás után a termék összetételét az A, B és C vegyületek esetében vékonyrétegkromatográfiával, az X vegyület esetében pedig nagynyomású kromatográfiával határoztuk meg.

A bomlatlanul megmaradt vegyület mennyiségét százalékosan határoztuk meg egy olyan mintához viszonyítva, amelyet -20°C-on tároltunk 1 hónapig. Eredményeinket az alábbi táblázatban foglaljuk össze:

-6181497

Termék	Víztartalom %	Bomlatlan vegyület %
A	4,8	88,4
B	5	60
C	5	92,2
X	4,9	98,6
	Szabadalmi igénypontok

1. Eljárás a III képletü vegyület szín izomerének hidratált kristályos alakban, D kristály-formában való előállítására, amelynek a réz 1,54 Angström hullámhosszú Ka sugarávalfelvett röntgendiffrakciós porfelvételi képén

d	I/Ii
9,3	0,95
8,8	0,09
6,5	0,07
6,46	0,06
6,10	0,13
5,30	0,25
5,12	0,05
5,03	0,04
4,57	0,04
4,40	0,17
4,20	0,29
3,96	0,70
3,88	0,18
3,76	0,34
3,6	1,00
3,41	0,15
3,27	0,09
3,19	0,11
3,13	0,13
3,10	0,13
3,03	0,15
2,97	0,06
2,78	0,07
2,72	0,04
2,69	0,04
2,60	0,19
2,50	0,11
2,44	0,05
2,40	0,08
2,32	0,09
2,25	0,05
ahol d a rácsállandó és I/Ij	a relatív intenzitás, és amelynek
nujolban felvett infravörös spektruma az 1. ábra szerinti,

Claims

azzal jellemezve, hogy

a) egy I képletü sav szín izomerét, annak hidrátját, etanolos szolvátját, hangyasavas szolvátját vagy hidrátjának és etanolos vagy hangysavas szolvátjának keverékét egy II általános képletü nátriumsóval, ahol X jelentése egy az I képletü savval azonos erősségű vagy annál gyengébb sav anionja, reagáltatjuk, és az ekkor kapott III képletü hidratált sót kívánt esetben egy olyan szerves oldószer fölöslegében kristályosít- 55 juk, amelyben a nátriumsó gyakorlatilag oldhatatlan, vagy

b) egy I képletü savat, annak hidrátját, etanolos vagy hangyasavas szolvátját vagy hidrátjának és etanolos vagy hangyasavas szolvátjának keverékét egy szerves sav nátri- umsójával reagáltatjuk metanolban, a III képletü kristályos nátriumsót, amelyet metanolos szolvát alakjában kapunk, elkülönítjük, kívánt esetben metanolmentes termékké alakítjuk, és az így kapott terméket vagy annak metanolos szolvát5 ját hidratáljuk, (elsőbbsége: 1978. augusztus 16).

2. Az I. igénypont szerinti eljrárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy

a) egy I képletü sav szín izomerét, annak hidrátját, etanolos szolvátját vagy hidrátjának és etanolos szolvátjának ke-

10 verékét egy II általános képletü nátriumsóval, ahol X jelentése egy az I képletü savval azonos erősségű, vagy annál gyengébb sav anionja, reagáltatjuk, és a kapott III képletü hidratált sót kívánt esetben egy olyan szerves oldószerhez való hozzáadással kristályosítjuk, amelyben a nátriumsó 15 gyakorlatilag oldhatatlan, vagy

b) egy I képletü savat, annak hidrátját, etanolos szolvátját vagy hidrátjának és etanolos szolvátjának keverékét egy szerves sav nátriumsójával reagáltatjuk metanolban, a metanolos szolvát alakjában kapott III képletü kristályos nátri-

20 umsót kívánt esetben metanol-mentes III képletü vegyületté alakítjuk, és a III képletü vegyületet vagy annak metanolos szolvátjá: hidratáljuk, (elsőbbsége: 1977. augusztus 17.
3. A 2. igénypont szerinti bármelyik eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az I képletü savat vagy annak

25 hidrátját, etanolos szolvátját vagy hidrátjának és etanolos szolvátjának keverékét egy szerves sav nátriumsójával reagáltatjuk metanolban, a metanolos szolvát alakjában kapott kristályos nátriumsót elkülönítjük és egy vízzel elegyedő és kis mennyiségű vizet tartalmazó oldószerben szuszpendáljuk, 30 a szuszpenzióban állni hagyjuk, azután a kívánt D kristály alakú terméket elkülönítjük, (elsőbbsége: 1977. augusztus 17.)
4. Az 1—3. igénypontok szerinti bármelyik eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy szerves savas nátriumsóként nátriumacetátot, nátrium-etilhexanoátot vagy nátrium-dietila-

35 cetátot használunk, (elsőbbsége: 1978. augusztus 16.)
5. A 2. vagy 3. igénypont szerinti bármelyik eljárás foganatositási módja, azzal jellemezve, hogy szerves savas nátriumsóként nátriumacetátot használunk, (elsőbbsége: 1977. augusztus 17.)

40
6. A 3. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy a D kristály-forma kialakításához a metanolos szolvát szuszpendálására kis mennyiségű vizet tartalmazó oldószerként 1—10% vizet tartalmazó etanolt használunk, (elsőbbsége: 1977. augusztus 17.)

45
7. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti a) eljárás vagy a 4. vagy

5. igénypont szerinti eljárás foganatosítási módja, azzal jellemezve, hogy az I képletü savat, annak hidrátját, etanolos vagy hangysavas szolvátját vagy hidrátjának és etanolos vagy hangyasavas szolvátjának keverékét vizes metanolban 50 0 °C körüli hőmérsékleten reagáltatjuk a II általános képletü nátriumsóval, (elsőbbsége: 1978. augusztus 16.)
8. Eljárás gyógyászati készítmények előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. vagy 2. igénypont szerint előállított D kristály-alakú 3-acetoximetil-7-[2-(2-amino-4-tiazolil)-2-metoxiimino-acetainido]-cef-3-em-4-karbonsav szín izomer nátriumsó hidratált kristályait a gyógyszerkészítésben szokásos töltőanyagokkal, higitószerekkel és kívánt esetben egyéb segédanyagokkal összekeverve gyógyszerré alakítjuk, (elsőbbsége: 1977. augusztus 17.)