FI65262C - Mellanprodukter anvaendbara vid framstaellning av aminomakrolidantibiotika och ett foerfarande foer deras framstaellning - Google Patents

Description

μ7τ·- -I Tr! «ιλ KUULUTUSJULKAISU

J3a ® ^ UTLÄGGNINGSSKRIFT 65 2 62 c (45) Fa 1::.511 rny13 04 1934

Patent neddelat V T V (51) K».iiu3/»nt.ci.3 C 07 H 17/08 SUOM I — Fl N LAN D (21) Pstenttlhsketmj» —Pstentansöluilng 780355 (22) HakemltpUvi — Ansttknlngsdag 03.02-78 (23) AlkupllvS—Glltighetsdaf 03-02-78 (41) Tullut Julkiseksi — Bllvlt offentllg 05-08-78

Patentti- ja rekisterihallitus .... ...... .. . , . ,, _ • (44) NihtSviksIpanofi |t kuuLJulkaisun pvm. —

Patent-och registerstyrelsen Antökan utlagd oeh utl.jkrlften publkerad 30.12.83 (32)(33)(31) Pyydetty etuoikeus—Begird priorltet 01.02.77 USA(US) 765^86 (71) Pfizer Inc-, 235 East l»2nd Street, New York, N.Y., USA(US) (72) Frank Christian Sciavolino, East Lyme, New London, Conn., USA(US) (7U) Oy Kolster Ab (54) Aminomakrolidiantibioottien valmistuksessa käyttökelpoisia välituotteita ja menetelmä niiden valmistamiseksi - Mellanprodukter användbara vid framställning av aminomakrolidantibiotika och ett förfarande för deras framställning

Keksinnön kohteena on terapeuttisesti arvokkaiden aminomakrolidiantibioottien valmistuksessa käyttökelpoisia välituotteita, niillä on kaava I, II tai III

I'D X N (CH,) _ R1 N(CH-),

VS.YV %AXV

ro *«, .y ο/' X0X A

\ RO <",? N*° 0 γχι, Vt?;.

OCH. O ' 6 OCH3

I II

2 65262 r R, N(CH )

.X'vS

vJ K RO'j,;^ Y° """ Yl Mv V* v« o 1 m och3 joissa R ja ovat molemmat vetyjä tai kaksi tai kolme hiiliatomia sisältäviä alkanoyylejä; ja X on 0, N-OH, N-OCH^ tai n-ococh3.

Oleandomysiini, sen valmistus käymisliemistä ja sen käyttö bakteereita vastustavana aineena on ensimmäisen kerran kuvattu US-patenttijulkaisussa 2 757 123. Luonnossa esiintyvällä yhdisteellä tiedetään olevan seuraava rakenne: n N(CH-J0 8a h 3 2 0^,7 Y%· H0///,5l 0 b^|Og>0^ vk A e- 2·^γ^*4ΟΗ och3

Oleandomysiinin ja samankaltaisten yhdisteiden tavanmukaisesta hyväksytty numerointikaavio ja stereokemiallinen esitys on ilmaistu eri asemineen.

Tämän yhdisteen useita synteettisiä muunnoksia tunnetaan, erityisesti ne, joissa yksi, kaksi tai kolme asemien 21, 4" ja 11 vapaista hydroksyyliryhmistä on esteröity asetyylieste-reiksi. Lisäksi US-patenttijulkaisussa 3 022 219 on kuvattu 3 65262 samanlaisia muunnoksia, joissa asetyyli yllä mainituissa estereissä on korvattu muulla, edullisesti haarautumattomalla 3-6 hiiliatomia sisältävällä alemmalla alkanoyylillä.

Puolisynteettisillä oleandomysiineillä, joita valmistetaan lähtien keksinnön mukaisista yhdisteistä, on kaava ^_R1 N(CH^). R1 ..X YY ..A VT”

> Cl W a X

RO',./ ^ RO*,/ ",»0^0

f°V°T

0CH3 0CH3

IV V

•XVT'’’ RO un/' | \ jw°v ΠΓ V'^ 0CH3

VI

joissa R ja R^ ovat kumpikin vetyjä tai kaksi tai kolme hiiliatomia sisältäviä alkanoyylejä; R3 on vety tai metyyli; ja R3 on vety tai 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyli, edellyttäen, että kun R3 on metyyli, R3 on metyyli.

Kaavan IV mukaiset yhdisteet muodostavat edullisimman ryhmän tässä kemoterapeuttisten aineiden luokassa. Erityisen edullisia tässä ryhmässä ovat yhdisteet, joissa R3 ja R3 ovat molemmat vetyjä ja R on asetyyli. Myös kaavojen V ja VI mukaiset yhdisteet, joissa R on asetyyli, ovat edullisia.

_ - Τ' 4 65262

Edullisissa kaavan I, II tai III mukaisissa välituotteis- 0 sa X on O, N-OH tai N-0-CCH3.

Keksinnön kohteena on myös menetelmä kaavan I", II" tai III" mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, n(ch-).

JL Ac^ F(CH3}2

Tl M °^X, “f j° R0 a L 0λ0Λ vp. 'Vtx OCfiL· 0 ' J OCH-.

I" II" J

Aa N(CH3)2 °Ä,Xi ROfy,y 0

Vv.

OCH3 III" joissa R on vety tai kaksi tai kolme hiiliatomia sisältävä ai-kanoyyli; ja Ac on kaksi tai kolme hiiliatomia sisältävä alka-noyyli.

Menetelmälle on tunnusomaista, että siinä hapetetaan jokin kaavan I*, II' tai III' mukainen yhdiste 5 65262 δη ?(CH3>2 AC N(CH,),

Λ °rS' VS

v 1/ 1 i RO "’"hf O ^

A. A

CI. f T

0 OCH °H ° ^ ^0H

och3 I ' II '

Ac N(CH )

VYYS

RO v O] ro^,,^0^/ o i^oh och3 III' joissa kaavoissa R ja Ac ovat yllä määritellyn mukaiset, N-kloorisukkiini-imidillä ja dimetyylisulfidillä, yhdellä moolilla kumpaakin, reaktiolle inertissä liuottimessa noin 0. ..-25°C:n välisessä lämpötilassa, minkä jälkeen reaktioseos saatetaan kosketukseen yhden trietyyliamiinimoolin kanssa.

Mainitun menetelmä edullinen suoritusmuoto on kaavan 1' mukaisten yhdisteiden hapetus, jossa liuottimena on tolueeni.

Yhdisteet II, III, V ja VI, vaikka ne kaikki ovatkin luonnossa esiintyvästä oleandomysiinistä johdettuja, eroavat siitä rakenteeltaan asemassa 8. Luonnon aineessa sekä yhdisteissä I ja IV tämä rakenne on seuraavan kaltainen epoksidi-rengas: 6 65262

Yhdisteiden II ja V sukuiset yhdisteet sisältävät metyyliryh-män asemassa 8 siihen liittyvine stereokemiallisine rakenteineen ja ne kuvataan seuraavasti:

Kaavojen II ja V oleandomysiinimuunnokset on nimetty 8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiineiksi.

Ne kaavojen III ja VI mukaiset yhdisteet, jotka sisältävät syklopropyylirenkaan asemassa 8, on nimetty 8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-oleandomysiineiksi ja ne kuvataan seuraavasti:

Keksinnön mukaisessa menetelmässä kaavan I', II' tai III' mukaisten yhdisteiden 4"-hydroksi-ryhmä hapetetaan selektiivisesti, jolloin yhdisteet I', II' tai III' saatetaan reagoimaan N-kloorisukkinimidin ja dimetyylisulfidin kanssa, mitä seuraa tertiäärisen amiinin, kuten trietyyliamiinin lisääminen .

Käytännössä N-kloorisukkinimidi ja dimetyylisulfidi sekoitetaan toisiinsa reaktiolle inertissä liuottimessa noin 0°C:ssa. 10-20 minuutin kuluttua saadun seoksen lämpötila säädetään 0°C ja -25°C välille, ja lähtöaine lisätään säilyttäen edellä mainittu lämpötila. 2-4 tunnin reaktioajan kuluttua lisätään tertiäärinen amiini ja jäähdytyshaude poistetaan.

7 65262

Mitä tulee reagenssien määriin, kutakin kaavan I', II* tai III' mukaisen yhdisteen moolia kohden vaaditaan yksi mooli sekä N-kloorisukkiini-imidiä että dimetyylisulfidia. Edullisesti käytetään 1-20 kertainen ylimäärä sukkinimidi- ja sulfidireagenssia reaktion jouduttamiseksi. Käytetyn tertiää-risen amiinin määrän tulisi vastata käytettyä sukkinimidin moolimäärää.

Kyseisessä menetelmässä käytetyn reaktiolle inertin liuottimen tulisi olla sellainen, että se liuottaa huomattavassa määrin reagensseja, mutta ei havaittavassa määrin reagoi kummankaan reagenssin tai muodostuneiden tuotteiden kanssa. Koska reaktio suoritetaan 0°C ja -25°C välillä, on edullista, että liuottimena yllä mainittujen ominaisuuksien lisäksi olisi reaktiolämpötilaa alhaisempi jäätymispiste. Nämä kriteerit täyttäviä liuottimia ja niiden seoksia ovat tolueeni, etyyliasetaatti, kloroformi, metyleenikloridi tai tetrahydrofuraani. Liuottimia, jotka täyttävät yllä esitetyt vaatimukset, mutta joiden jäätymispiste on reaktiolämpötilaa korkempi, voidaan myös käyttää vähäisinä määrinä yhdessä yhden tai useamman edullisen liuottimen kanssa. Erityisen edullinen liuotin vaatimusten mukaisessa menetelmässä on bentseeniä sisältävä tolueeni.

Kyseinen menetelmä on katsottava ainutlaatuiseksi, sillä hapettuminen tapahtuu 4"-asemassa 11-aseman jäädessä olennaisesti koskemattomaksi, kun R on vety.

2'-asemassa olevan alkanoyyliryhmän poistaminen tapahtuu solvolyysireaktiolla, jossa 2'-alkanoyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniyhdistettä sekoitetaan yön yli ylimäärässä me-tanolia huoneen lämpötilassa. Kun metanoli on poistettu ja jäännös sitten puhdistettu, saadaan tulokseksi kaavojen I”, II" ja III" mukaiset yhdisteet, joissa on vety.

Ketonien (X = O) I", II" ja III" asemissa 11 (R = H) ja 2' (R^ = H) olevat hydroksyyliryhmät voidaan asyloida käsit telemällä mainittuja yhdisteitä kahdella moolilla pyridiiniä ja ylimäärällä alkaanianhydridiä jäähaudelämpötilassa. Käytännössä hydroksyyliryhmiä sisältävä yhdiste lisätään jäähdytettyyn alkaanoanhydridiin, minkä jälkeen lisätään pyridiini.

8 65262

Kun lisäykset on suoritettu, jäähaude poistetaan ja seosta sekoitetaan huoneen lämmössä yön yli. Tuote saadaan hydrolysoimalla reaktioseos vedellä ja uuttamalla se sitten etyyliasetaatilla. Vaihtoehtoisesti alkaanoanhydridin liikamäärä voidaan poistaa vakuumissa ja puhdistaa jäännös tavanomaisilla menetelmillä.

Kuten edellä olevasta käy ilmi, yhdisteet I, II ja III, joissa X = 0 ja R ja R^ ovat kuten edellä on määritelty, ovat käyttökelpoisia välituotteita antibakteriaalisten 4"-amino-yhdisteiden valmistamisessa. Tämän ryhmän suositeltavia välituotteita ovat 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomy-siini, 11’-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini, 4"-deok-si-4''-okso-oleandomysiini, 2 ' -asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-olean-domysiini, 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deok-si-4"-okso-oleandomysiini, 11-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-di-hydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini, 8,8a-deoksi-8,8a-di-hydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini, 2'-asetyyli-8,8a-de-oksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini, 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini , 11-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini, 8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini ja 2'-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-mety-leeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini.

4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiinijohdannaisten valmistamisessa voidaan käyttää useita menettelytapoja. Eräs niistä käsittää 4"-deoksi-4"-okso-yhdisteiden muuttamisen ensin ok-siimiksi tai oksiimijohdannaiseksi (X = N-OH, N-OCH^ tai 0 ff N-OCCH^), minkä jälkeen oksiimi tai sen johdannainen pelkistetään kaavan IV (R2' R3 = H)/ V tai VI mukaiseksi amiiniksi.

Ketonien (X = 0) oksiimit valmistetaan antamalla mainittujen ketonien reagoida hydroksyyliamiinin hydrokloridin kanssa metanoli-vesi-liuoksessa huoneen lämpötilassa. Käytännössä on syytä käyttää ylimäärin hydroksyyliamiinia ja käytettäessä kolmikertaista ylimäärää, saadaankin halutulle välituotteelle hyvä saanto. Käytettäessä huoneen lämpötilaa ja ylimäärää hydroksyyliamiinia halutun oksiimijohdannaisen valmistuk- 9 65262 sessa reaktioaika saadaan 1-2 tuntiin. Tuote erotetaan sekoittamalla reaktioseos veteen ja tekemällä se emäksiseksi niin, että pH on 9,5, ja uuttamalla se sitten veteen sekoittamattomalla liuottimena, kuten etyyliasetaatilla.

Kun O-metyylihydroksyyliamiinin hydrokloridia käytetään hydroksyyliamiinin hydrokloridin asemesta, reaktio antaa tulokseksi O-metyylioksiimijohdannaisen. Käytettäessä O-metyy-lihydroksyyliamiinia, on edullista pidentää reaktioaikaa 6-12 tuntiin. Tuotteen erottaminen suoritetaan samalla tavalla kuin edellä on oksiimijohdannaisella kuvattu.O

II

O-asetyylioksiimiyhdisteiden (X = N-OCCH^) valmistaminen tapahtuu asetyloimalla vastaava oksiimi. Kokeellisesti annetaan yhden oksiimimoolin reagoida yhden asetanhydridimoo-lin kanssa yhden moolin pyridiiniä läsnäollessa. Anhydridi-ja pyridiiniylimäärän käyttö jouduttaa reaktiota, ja on edullista käyttää kaksi-kolmikertaista ylimäärää. Reaktio on parasta suorittaa aprootissa hiilivetyliuottimessa, kuten bent-seenissä tai tolueenissa yön yli. Kun reaktio on saatettu loppuun, lisätään vettä ja tuote erotetaan hiilivetykerrokseen. Vaihtoehtoisesti O-asetyylijohdannaiset voidaan valmistaa käsittelemällä tarvittavaa ketonia O-asetyylihydroksyyliamii-nin hydrokloridilla oksiimijohdannaisten valmistuksessa käytettävissä reaktio-olosuhteissa. O

II

Ketonijohdannaisten (X = N-OH, N-OCH3 tai N-OCCH^) pelkistäminen suoritetaan katalyyttisellä hydrogenoinnilla, jossa johonkin alempaan alkanoliin, kuten isopropanoliin, liuotettua oksiimia tai sen johdannaista sekä Raney-nikkeliä, 10-%:ista palladium-hiiliseosta tai platinaoksidikatalysaat- toria ravistellaan vetykaasussa huoneen lämpötilassa yön yli 2 alkupaineen ollessa 50 naulaa neliötuumalla (noin 3,5 kg/cm ). Käytetty katalyytti suodatetaan pois, minkä jälkeen poistamalla liuotin suodoksesta, saadaan haluttu kaavan IV, V tai VI mukainen bakteereja vastustava 4"-deoksi-4"-amino-substi-tuoitu tuote eristetyksi. Jos pelkistämisessä käytetään liuottimena metanolia, tapahtuu 2'-alkanoyyliryhmän solvolyysi. Tämän osan irotamisen välttämiseksi suositellaan liuottimeksi isopropanolia.

_ Γ 10 65262

Toinen, ja suositeltavampi tapa valmistaa kaavojen I, II tai III ketoneista (X = O) kaavojen IV, V ja VI primäärisiä amiineja, käsittää mainittujen ketonien kondensoimisen alemman alkyylikarboksyylihapon ammoniumsuolalla ja edelleen in situ muodostuneen imiinin pelkistämisen. Alempien alkyyli-karboksyylihappojen ammoniumsuolojen lisäksi voidaan myös käyttää muita, kuten epäorgaanisten happojen ammoniumsuoloja.

Käytännössä ketonia I, II tai III (X = O) liuotettuna alempaan alkanoliin, kuten metanoliin, käsitellään alkaano-hapon, kuten etikkahapon ammoniumsuolalla ja jäähdytettyä reaktioseosta käsitellään pelkistävällä aineella, natriumsya-noboorihydridillä. Reaktion annetaan tapahtua huoneen lämpötilassa useiden tuntien ajan ja sen jälkeen suoritetaan hydro-lyysi ja tuote erotetaan.

Vaikka ammoniumalkanoaattia tarvitaan yksi mooli yhtä ketonimoolia kohden, on edullista lisätä sitä ylimäärin imiinin nopean muodostumisen varmistamiseksi. Niinkin suurta kuin kymmenkertaista ylimäärää voidaan käyttää heikentämättä lopullisen tuotteen laatua.

Mitä tulee käytettävän pelkistävän aineen määrään keto-nin moolimäärän suhteen, on suositeltavaa käyttää noin kaksi moolia natriumsyanoboorihydridiä yhtä ketonimoolia kohden.

Pelksityksen reaktioaika vaihtelee kahdesta kolmeen tuntiin huoneen lämpötilassa.

Kuten edellä on mainittu, edullinen liuotin on metanoli, edullisen ammoniumalkanoaatin ollessa ammoniumasetaatti. Isopropanolia voidaan myös käyttää liuottimena ja on erityisen toivottavaa silloin, kun 2’-alkanoyyliryhmän solvolyysi on vältettävä.

Erotettaessa haluttuja 4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini-johdannaisia mistä tahansa ei-emäksisistä sivutuotteita tai lähtöaineesta, käytetään hyväksi lopullisen tuotteen emäksistä luonnetta. Täten tuotteen vesiluos uutetaan asteittain kohottaen pH:ta niin, että neutraalit ja ei-emäksiset aineet uutetaan alemmilla pH-arvoilla ja tuote pH:n ollessa noin 9. Uuttamiseen käytettävät liuottimet, joko etyyliasetaatti tai di- 11 65262 etyylieetteri, pestään uuton jälkeen kyllästetyllä suolaliuoksella ja vedellä ja kuivataan natriumsulfaatilla, tuote saadaan poistamalla liuotin.

Mikäli lisäpuhdistus on tarpeellinen, se voidaan suorittaa pylväskormatografisesti silikageelillä tunnettujen menetelmien mukaisesti.

Edellä mainittu pelksitävä aminointi voidaan natriumsyano-boorihydridin käytön ohella suorittaa muissa pelkistysolosuh-teissa. Joitakin jalometallikatalysaattoreita, kuten palladium-hiiliseosta voidaan käyttää vedyn ja ammoniumalkanoaatin kanssa tehokkaasti kaavojen I, II ja III (X = O) yhdisteiden muuttamisessa kaavojen IV, V ja VI vastaaviksi yhdisteiksi.

Käytännössä sopivaa ketonia liuotettuna alempaan alkano-liin, kuten metnoliin tai isopropanoliin, käsitellään ammonium-alkanoaatilla, kuten ammoniumasetaatilla, ja 10-%:isella pal-ladiumhiiliseoksella, ja saatua suspensiota ravistellaan ve-tykaasussa lämpötilan ollessa 25-50°C, kunnes teoreettinen määrä vetyä on absorboitunut.

Mitä tulee reagenssien määrien suhteisiin, on edullista käyttää kymmenkertaista ammoniumalkanoaattiylimäärää reaktion loppuun saattamiseksi kohtuullisessa ajassa. Katalysaattorin määrä voi vaihdella kymmenestä viiteenkymmeneen prosenttiin lähtöaineena käytetyn ketonin painosta. Vedyn alkupaine ei ole kriittinen ja suositellaankin käytettäväksi yhden ilmakehän 2 ja 500 naulan/neliötuumaa (35 kg/cm ) välillä olevaa painetta reaktioajan lyhentämiseksi. Käytettäessä edellä mainittuja parametrejä, reaktioaika vaihtelee kahdesta kuuteen tuntiin.

Pelkistävän aminointireaktion päätyttyä käytetty katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan kuiviin. Tuotteen puhdistaminen suoritetaan, kuten yllä mainitussa menetelmässä, jossa natriumsyanoboorihydridiä käytettiin pelksitävä-nä aineena.

Kaavan IV mukaiset bakteereja vastustavat yhdisteet, joissa 1*2 on vety ja on yhdestä kuuteen hiiliatomia sisältävä alkyyli, voidaan mukavasti valmistaa käyttäen lähtöainee- 12 65262 na ketonia I (X = O) ja sopivaa amiinia R^NHj* sekä pelkistävänä aineena natriumsyanoboorihydridiä. pH:n pitämiseksi välillä 6-7 käytetään amiinin kanssa yhtä suuri moolimäärä alkyylikarboksyylihappoa, kuten etikkahappoa. Vaihtoehtoisesti voidaan myös käyttää alkyylikarboksyylihapon sijasta vastaava määrä kloorivetykaasua. Reagenssien määrien suhde, reak-tiolämpötila ja -aika ja pelkistävän aminoinitreaktion suorittamistapa ovat samat kuin vastaavat parametrit reaktiossa valmistettaessa yhdisteitä, joissa R2 ja R^ ovat molemmat vetyjä, ja natriumsyanoboorihydridiä käytetään pelkistävänä aineena.

Seuraavat esimerkit on annettu keksinnön kuvaamiseksi.

Esimerkki 1 2'-asetyyli-4”-deoksi-4"-okso-oleandomysiini

Dimetyylisulfidia (0,337 ml) lisätään 467 mg N-kloori-sukkiini-imidiä 20 ml:ssa tolueenia ja 6 ml:ssa bentseeniä sisältävään sameaan liuokseen, joka on jäähdytetty -5°C:seen ja jota pidetään typpikaasussa. Kun seosta on sekoitettu 0°C:ssa 20 minuuttia, se jäähdytetään -25°C:seen ja siihen lisätään 1,46 g 2'-asetyylioleandomysiiniä ja 15 ml tolueenia. Sekoitusta jatketaan kaksi tuntia -20°C:ssa, minkä jälkeen lisätään 0,46 ml trietyyliamiinia. Reaktioseosta pidetään -20°C:ssa vielä viisi minuuttia ja sen annetaan sitten lämmetä 0°C:seen. Seos kaadetaan koko ajan sekoittaen 50 ml:aan vettä ja 50 ml:aan etyyliasetaattia. Vesiseoksen pH säädetään 9,5:een lisäämällä natriumhdyroksidin vesiliuosta. Tämän jälkeen orgaaninen kerros erotetaan, kuivataan natriumsulfaa-tilla ja konsentroidaan vakuumissa valkoiseksi vaahdoksi (1,5 g). Triurointi dietyylieetterillä antaa 864 mg raakatuotetta, joka kahdesti uudelleen kiteytettynä metyleenikloridi-dietyyli-etteriseoksesta antaa 212 mg puhdasta tuotetta, sp. 183 -185,5°C.

Analyysi

Laskettu: C 61,1 H 8,5 N 1,9 Saatu: C 60,9 H 8,4 N 1,9 NMR {£, CDC13) : 5,60 (1H)m, 3,50 (3H)s, 2,73 (2H)m, 2,23 (6H)s ja 2,03 (3H)s.

65262 13

Noudattaen yllä kuvattua menetelmää ja käyttäen 2'-propionyylioleandomysiiniä lähtöaineena, saadaan 2'-propio-nyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini.

Esimerkki 2 4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini

Liuosta, joka sisältää 1,0 g 2'-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 20 ml:ssa metanolia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuos konsentroidaan vakuumissa saaden haluttu tuote valkoisena vaahtona, 937 mg.

NMR (S, CDC13): 5,60 (1H)m, 3,50 (3H)s, 2,85 (2H)m ja 2,26 (6H)s.

Esimerkki 3 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini A. Asetyloimalla 4,0 ml:aan 727 mg 2'-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä lisätään jäähauteella 0°C:seen jäähdytettyä asetan-hydridiä typpikaasun läsnäollessa. Viiden minuutin kuluttua lisätään 0,158 ml pyridiiniä ja syntynyttä sameaa suspensiota sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Syntynyt liuos sekoitetaan veteen, johon on lisätty kerrokseksi etyyliasetaattia, ja pH säädetään 7,2 :een lisäämällä kiinteää natriumbikarbonaattia ja sitten 9,5:een käyttäen 1-n natriumhydroksidi-liuosta. Orgaaninen kerros erotetaan, pestään peräkkäin vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsul-faatilla. Poistamalla liuotin alennetussa paineessa, saadaan 588 mg haluttua tuotetta.

NMR (d, CDC13): 3,48 (3H)s, 2,63 (2H)m, 2,26 (6H)s ja 2,06 (6H)s.

Toistaen tätä menetelmää ja käyttäen tarvittavaa 2'-alkanoyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja asyloivaa ainetta, voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: 11-asetyyli-2'-propionyyli-4"~deoksi-4"-okso-oleandomysiini, 11-propio-nyyli-2'-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini ja 11,2'-dipropionyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini.

14 6 5262 B. Hapettamalla

Lisätään 3,36 ml dimetyylisulfidia kuivaan, -5°C:seen jäähdytettyyn magneettisekoittajalla ja typen sisäänviennillä varustettuun kolviin, jossa on 4,5 g N-kloorisukkiini-imidiä, 50 ml bentseeniä ja 150 mla tolueenia. Sekoitetaan 0°C:ssa 20 minuuttia, minkä jälkeen kolvin sisältö jäähdytetään -25°C:seen ja siihen lisätään 5,0 g 11,2'-diasetyyli-olean-domysiini 100 mlrssa tolueenia. Jäähdytystä ja sekoitusta jatketaan kahden tunnin ajan, jonka jälkeen lisätään 4,73 ml trietyyliamiinia. Reaktioseosta sekoitetaan 0°C:ssa 15 minuuttia, minkä jälkeen se kaadetaan 500 mitään vettä. pH säädetään 9,5 teen 1-n natriumhydroksidin vesiliuoksella ja orgaaninen kerros erotetaan, pestään vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatilla. Poistamalla liuotin vakuumissa, saadaan 4,9 g haluttua, esimerkissä 3A valmistetun kanssa identtistä tuotetta vaahtona.

NMR ( «$, CDC13) t 3,48 (3H)s, 2,61 (2H)m, 2,23 (6H)s ja 2,03 (6H)s.

Esimerkki 4 11-asetyyli-4"-deoksl-4"-okso-oleandomysilni

Liuosta, joka sisältää 4,0 g 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 75 mltssa metanolia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Reaktioseos konsentroidaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan vaahtomainen tuote. Tämä jäännös liuotettuna dietyylieetteriin ja käsiteltynä heksaa-nilla antaa 2,6 g valkoista kiinteää tuotetta, sp. 112-117°C. NMR ( S, CDC13): 3,43 (3H)s, 2,60 (2H)m, 2,23 (6H)s ja 2,01 (3H)s.

Samalla tavalla käyttäen 11,2'-propionyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä tai 11-propionyyli-2'-asetyyli-4"-deok-si-4"-okso-oleandomysiiniä yllä kuvatussa menetelmässä valmistetaan 11-propionyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini.

Esimerkki 5 21-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini

Lisätään 6,0 ml dimetyylisulfidia -5°C:seen jäähdytettyyn 15 65262 kuivaan, magneettisekoittajalla ja typpikaasun sisäänvien-nillä varustettuun kolviin, joka sisältää 11,6 g N-kloori-sukkiini-imidiä, 750 ml tolueenia ja 250 ml bentseeniä ja sekoitetaan näin saatua liuosta 20 minuuttia. Lämpötilaa alennetaan edelleen -20°C:seen ja lisätään 25 g 2'-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiiniä 500 ml:ssa tolueenia. Sekoitetaan kahden tunnin ajan -20°C:ssa, minkä jälkeen lisätään 11,4 ml trietyyliamiinia ja reaktioseoksen annetaan vähitellen lämmetä 0°C:seen. Se kaadetaan sitten 1 500 ml:aan vettä ja pH säädetään 9,5 reen 1-n natriumhydroksidiliuoksella. Orgaaninen kerros erotetaan, pestään peräkkäin vedellä (3x) ja kyllästetyllä suolaliuoksella (1x) ja kuivataan natriumsul-faatilla. Poistamalla liuotin alennetussa paineessa, saadaan tulokseksi vaahto, joka kiteytettynä uudelleen dietyylieette-ristä, antaa 13 g puhdasta tuotetta, sp. 197-199°C.

NMR (cf, CDC13) : 5,11 (1H)m, 3,51 (3H)s, 2,25 (6H)s ja 2,03 (3H)s.

Esimerkki 6 8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomy- siini

Suspensiota, joka sisältää 2,0 g 2'-asetyyli-8,8a-deok-si-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 100 mlrssa metanolia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa 20 tuntia. Reak-tioseos konsentroidaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 1,8 g haluttua tuotetta valkoisena vaahtona.

NMR ( S , CDC13): 5,30 (1H)m, 3,51 (3H)s ja 2,26 (6H)s.

Esimerkki 7 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini

Lisätään 2,8 ml pyridiiniä jäähauteella jäähdytettyyn 13,0 g 2'-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-okso-oleandomysiiniä 65 mlrssa asetanhydridiä sisältävään suspensioon. Haude poistetaan sitten ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Saatu liuos lisätään sitten 500 ml:aan vettä ja 300 mlraan etyyliasetaattia. pH säädetään 7,Oraan kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja sitten 9,5reen 4-n natriumhydrok-sidin vesiliuoksella. Orgaaninen kerros erotetaan, pestään ve- 16 65262 dellä (2x) ja suolaliuoksella (1x) ja kuivataan natriumsul-faatilla. Poistamalla liuotin vakuumissa, saadaan raakatuote vaahtona.

Koska raakatuotteen koe-erän kromatografiset tulokset osoittavat että reaktio ei ole tapahtunut täydellisesti, vaah-tomainen raaktuote sekoitetaan 28 ml:aan pyridiiniä ja 79 ml:aan asetanhydridiä ja sekoitetaan huoneen lämpötilassa 72 tuntia. Reaktioseos käsitellään kuten yllä ja saadaan 12,4 g haluttua tuotetta.

NMR ( , CDC13) : 3,51 (3H)s, 2,26 (6H)s ja 2,10 (6H)s.

Esimerkki 8 11-propionyyli-2'-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4 deoksi-4"-okso-oleandomysiini

Toistetaan esimerkin 7 menettely käyttäen lähtöaineina 6,5 g 2'-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4”-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä, 40 ml propionanhydridiä ja 14 ml pyridiiniä. 72 tunnin reaktioajan kuluttua seos käsitellään, kuten esimerkissä 8 on esitetty halutun tuotteen saamiseksi.

Esimerkki 9 11-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini

Liuosta, joka sisältää 11,5 g 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 100 ml:ssa metanolia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Haihduttamalla reaktioseos kuiviin alennetussa paineessa, saadaan 10,6 g vaahtomaista raakatuotetta. Raakatuote liuotetaan kloroformiin ja liuos pannaan silikageelipylvääseen. Kun 3 1 kloroformia on virrannut pylvään läpi, tuote eluoidaan kloro-formi/metanoliseoksella (19:1). Kahdeksan sadan tipan fraktiota kootaan automaattisella fraktionkerääjällä. Fraktiot 50-56, 57-62, 63-69 ja 70-80 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jolloin saadaan 2,9 g puhdasta tuotetta.

NMR ( <5 , CDC13) : 3,55 (3H)s, 2,31 (6H)s ja 2,05 (3H)s.

Esimerkki 10 11-propionyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini 17 65262 Käyttäen lähtöaineena esimerkin 8 11-propionyyli-2'-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomy-siiniä ja noudattaen esimerkin 9 menetelmää valmistetaan haluttua tuote.

Esimerkki 11 21-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiini 5,0 g 8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiiniä 15 ml:ssa bentseeniä sisältävään liuokseen lisätään 0,73 ml asetanhydri-diä ja näin saatua reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia. Liuos kaadetaan 100 mitään vettä ja pH sää-tetään 7,5teen kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja sitten 9,5teen 1-n natriumhydroksidin vesiliuoksella. Kymmenen mii-nuutin sekoittamisen jälkeen orgaaninen kerros erotetaan ja pestään peräkkäin vedellä (2x) ja kyllästetyllä suolaliuoksella (1x) ja kuivataan sitten natriumsulfaatilla. Poistamalla liuotin alennetussa paineessa, saadaan 4,9 g haluttua tuotetta, sp. 202-204°C.

NMR ( i, CDC13)t 5,05 (lH)m, 3,40 (3H)s, 2,25 (6H)s ja 2,05 (3H)s.

Samalla tavalla, korvaamalla asetanhydridi ekvivalentti-sella määrällä propionanhydridiä valmistetaan 2'-propionyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiini.

Esimerkki 12 21 propinyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini

Liuokseen, joka sisältää 375 ml tolueenia ja 125 ml bentseeniä, lisätään 5,8 g N-kloorisukkiini-imidiä ja seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 15 minuuttia. Reaktioseos jäähdytetään -5°C:seen ja siihen lisätään 3,0 ml dimetyylisulfidia ja jatketaan sekoittamista vielä 20 minuuttia. Lämpötila alennetaan -20°C:seen, minkä jälkeen lisätään 12,8 g 2'-propionyy-li-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiiniä 250 mlrssa tolueenia. Kahden tunnin kuluttua lisätään 5,7 ml dietyyliamiinia ja jäähdytyshaude poistetaan. Kun reaktiolämpötila saavuttaa 0°C, seos kaadetaan 750 ml:aan vettä. pH säädetään 9,5:een 1-n natriumhydroksidiliuoksella ja orgaaninen kerros erotetaan.

18 65262 ]

Vedellä (3x) ja kyllästetyllä suolaliuoksella pesty orgaaninen faasi kuivataan ja konsentroidaan alennetussa paineessa halu- | tun tuotteen saamiseksi.

Esimerkki 13 11,2 '-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-! 4,,-okso-oleandomysiini

Sameaan, -5°C:seen jäähdytettyyn, 434 mg N-kloorisuk-kiini-imidiä 15 ml:ssa tolueenia ja 5 ml:ssa bentseeniä sisältävään liuokseen lisätään 0,327 ml dimetyylisulfidia. Sekoitetaan 20 minuuttia 0°C:ssa, minkä jälkeen reaktioseos jäähdytetään -25°C:seen ja siihen lisätään 500 mg 11,2'-diasetyy-li-8,8a-deoksi-8,8a-metyleenioleandomysiiniä ja 10 ml tolueenia. Sekoitusta jatketaan kaksi tuntia -20°C:ssa ja sen jälkeen lisätään 0,46 ml trietyyliamiinia ja 1 ml tolueenia. Jääh-dytyshaude poistetaan ja reaktioseoksen annetaan lämmetä 0°C:seen. Sitten se kaadetaan 50 ml:aan vettä ja 50 ml:aan etyyliasetaattia. Säädetään pH huolellisesti 9,5:een ja orgaaninen kerros erotetaan, kuivataan ja haihdutetaan kuiviin. Tällä tavalla saadaan 500 mg haluttua tuotetta hiukan kosteana valkoisena vaahtona.

NMR ( <5 , CDC13): 3,50 (3H)s, 2,30 (6H)s, 2,06 (6H)s ja 0,58 (4H)m.

Esimerkki 1 4 11-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4”-deoksi-4"-okso-oleandomysiini 400 mg 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 10 ml:ssa metanolia sisältävä liuosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli, minkä jälkeen se konsentroidaan vakuumissa, jolloin saadaan 270 mg haluttua tuotetta.

NMR (£, CDC13): 3,46 (3H)s 2,26 (6H)s, 2,03 (3H)s ja 0,56 (4H)m.

Esimerkki 15 11,2' -diasetyyli-4,'-deoksi-4"-okso-oleandomysiinioksiimi Liuokseen, joka sisältää 18,1 hydroksyyliamiinin hydro-kloridia 300 ml:ssa vettä ja 200 ml:ssa metanolia, lisätään 19 65262 50 g 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Saatu liuos lisätään veteen ja pH säädetään sitten 7,5 reen kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja sen jälkeen 9,5 reen 1-n natriumhydroksidilla. Tuote uutetaan etyyliasetaattiin ja kuivatut uutteet konsentroidaan noin 170 mlrksi. Lisätään heksaania kuumennettuun etyyliasetaattiliuokseen samentumis-pisteeseen saakka ja sameahko liuos jäähdytetään. Saostuva tuote suodatetaan ja kuivataan, 29,8 g, sp. 223,5 - 225°C.

NMR ( S , CDC13): 3,30 (3H)s, 2,65 (2H)m, 2,35 (6H)s ja 2,10 (3H)s.

Samalla tavalla käyttäen lähtöaineena O-asetyylihydrok-syyliamiinin hydrokloridia ja tarvittavaa ketonia ja noudattaen yllä olevaa menetelmää, saadaan 21-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleändomysiini-0-asetyylioksiimi.

Esimerkki 16 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiinioksiimi 500 mg 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysii-nioksiinia 100 mlrssa metanolia sisältävää liuosta sekoitetaan 72 tuntia huoneen lämpötilassa ja haihdutetaan sitten kuiviin alennetussa paineessa. Näin saatu vaahto kiteytetään uudelleen etyyliasetaatti-heksaani-seoksesta, 372 mg, sp.

184-186°C.

NMR ( S · CDC13): 3,30 (3H)s, 2,66 (2H)m, 2,36 (6H)s ja 2,10 (3H)s.

Esimerkki 17 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini-0-asetyylioksiimi

Sameaan, 20 g 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-olean-domysiinioksiimia 250 mlrssa bentseeniä sisältävään liuokseen lisätään koko ajan sekoittaen 8,21 ml pyridiiniä ja sen jälkeen 9,62 ml asetanhydridiä, ja näin saatua reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuos kaadetaan veteen ja orgaaninen kerros, peräkkäin vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella pestynä ja kuivattuna, haidutetaan kuiviin. Vaah-tomainen jäännös kiteytettynä uudelleen etyyliasetaatti-hek- 20 6 5 2 6 2 saani-seoksesta antoi 13,4 g puhdasta tuotetta, sp. 198-202°C. N MR ( S> , CDC13) : 3,38 (3H)s, 2,66 (2H)m, 2,33 (6H)s, 2,26 (3H)s ja 2,10 (6H)s.

Esimerkki 18 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini-O-metyyljoksiimi 50 mlraan vettä ja 50 ml:aan metanolia lisätään 1,25 g metoksiamiinin hydrokloridia ja 2,5 g 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja saatua reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuos sekoitetaan veteen ja pH säädetään 7,5:een kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja sitten 9,5:een 1-n natriumhydroksidin vesiliuoksella. Tuote uutetaan etyyliasetaatilla ja uute kuivataan natrumsul-faatilla. Poistettaessa liuotin vakuumissa, saadaan 2,4 g haluttua tuotetta valkoisena vaahtona.

NMR ( S , CDC13): 3,88 (3H)s, 3,26 (3H)s, 2,56 (2H)m, 2,30 (6H)s ja 2,06 (6H)s.

Esimerkki 19 11,2’-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini-O-asetyylioksiimi

Liuokseen, joka sisältää 9,9 g 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-okso-oleandomysiinioksiimia ja 4,1 ml pyridiiniä 125 ml:ssa bentseeniä, lisätään 4,81 ml asetan-hydridiä ja saatua reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Reaktioseos kaadetaan veteen ja pH säädetään 7,5reen ja 9,5 reen kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja 1-n natriumhydroksidilla, vastaavasti. Bentseenikerros erotetaan, kuivataan natriumsulfaatilla ja konsentroidaan, jolloin saadaan haluttu tuote valkoisena vaahtona.

Esimerkki 20 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini-O-metyylioksiimi

Liuosta, joka sisältää 90 mg 11,2'-diasetyyli-8,8a-deok-si-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja 45 mg metoksiamiinin hydrokloridia 2 mlrssa vettä ja 2 mlrssa metanolia, sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli. Liuos kaa- 21 65262 detaan veteen ja pH säädetään 7,5:een ja 9,5 reen kiinteällä natriumbikarbonaatilla ja 1-n natriumhydroksidilla, vastaavasti. Tuote uutetaan etyyliasetaatilla ja orgaaninen kerros kuivataan ja konsentroidaan, jolloin saadaan 89,2 mg haluttua tuotetta.

NMR ( <£ , CDC13) : 5,56 (3H)s, 3,33 (1,5H)s, 3,26 (1,5H)s, 2,28 (6H)s, 2,06 (6H)s ja 0,56 (4H)m.

Esimerkki 21 11,2' -daisetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4''-deoksi-4"-okso-oleandomysiinioksiimi

Toistamalla esimerkin 20 menettely käyttäen 10,0 g 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-olean-domysiiniä, 3,4 g hydroksyyliamiinin hydrokloridia, 50 ml me-tanolia ja 50 mla vettä, saadaan tulokseksi 9,2 g haluttua tuotetta, joka voidaan edelleen puhdistaa kiteyttämällä uudelleen etyyliasetaatista, sp. 177-180°C.

NMR (S, CDC13) : 3,35 (1,5H)s, 3,25 (1,5H)s, 2,33 (6H)s, 2,06 (6H)s ja 0,53 (4H)m.

Esimerkki 22 11,2,-dlasetyyli-8,8a-deoksi~8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4”-okso-oleandomysiini-0-asetyylioksiimi

Suspensioon, joka sisältää 1,0 g 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiinioksiimia 10 mlrssa bentseeniä, lisätään 0,18 ml pyridiiniä ja sen jälkeen 0,24 ml asetanhydridiä. Kahden tunnin sekoittamisen jälkeen huoneen lämpötilassa lisätään vielä 0,09 ml pyridiiniä ja 0,12 ml asetanhydridiä ja sekoittamista jatketaan yön yli. Reaktioseos kaadetaan veteen ja pH säädetään 7,5 reen, sitten 9,5reen lisäämällä kiinteää natriumkarbonaattia ja 1-n nat-riumhydroksidia, vastaavasti. Bentseenikerros erotetaan, kuivataan natriumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin vakuumissa, jolloin saadaan 890 mg haluttua tuotetta.

NMR [S, CDC13)r 3,31 (1,5H)s, 3,25 (1,5H)s, 2,25 (6H)s, 2,16 (3H)s, 2,01 (6H)s ja 0,55 (4H)m.

22 65262

Esimerkki 23 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini

Suspensioon, joka sisältää 10 g 10-%:ista palladium-hiiliseosta 100 ml:ssa metanolia, lisätään 21,2 g ammonium-asetaattia ja saatua suspensiota käsitellään 20 g:11a 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 100 mlrssa samaa liuotinta. Suspensiota ravistellaan vetykaasussa alkupaineen ollessa 50 naulaa/neliötuumaa (noin 3,5 kg/cm ). Katalysaattori suodatetaan pois 1,5 tunnin kuluttua ja suodos lisätään koko ajan sekoittaen 1 200 ml vettä ja 500 ml kloroformia sisältävään seokseen. Säädetään pH 6,4:stä 4,5:een ja orgaaninen kerros erotetaan. Vesikerros, kun se on vielä uutettu 500 ml:lla kloroformia, käsitellään 500 ml:lla etyyliasetaattia ja pH säädetään 9,5:een 1-n natriumhydroksidilla. Etyyliase-taattikerros erotetaan ja vesikerros uutetaan vielä kerran etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuutteet yhdistetään, kuivataan natriumsulfaatilla ja konsentroidaan keltaiseksi vaahdoksi (18,6 g), joka kiteytettynä di-isopropyylieetteristä antaa 6,85 g puhdasta tuotetta, sp. 157,5 - 160°C.

NMR (£, CDC13): 3,41 (3H)s, 2,70 (2H)m, 2,36 (6H)s ja 2,10 (3H)s.

Toinen epimeeri, jota on vaahtomaisessa raakatuotteessa aina 20-25 %:iin, saadaan erilleen emäliuosten asteittaisella konsentroinnilla ja suodattamisella.

Esimerkki 24

Esimerkin 23 menetelmää noudattamalla käyttäen lähtöaineena sopivaa 4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä valmistetaan seuraavat amiinit: (Kaava IV, R2=R3=H) R R1 NMR ( S , CDC13)

O O

CH3C- CH3C- 3,43 (3H)s, 2,70 (2H)m,2,30 (6H)s ja 2,10 (6H)s.

H- H- 5,60 (1H)m, 3,36 (3H)s, 2,83 (2H)m ja 2,30 (6H)s.

<» 23 65262

O

H- CH3C“ 5'80 3,43 (3H)s, 2,80 (2H)m, 2,30 (6H)s ja 2,10 (3H)s.

Esimerkki 25 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini

Suspensioon, joka sisältää 50 g 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja 53 g ammoniumasetaattia 500 ml:ssa -10°C metanolia, lisätään tipoittain koko ajan sekoittaen tunnin aikana. 3,7 g 85-%:ista boorisyanohydridiä liuotettuna 200 ml:aan metanolia. Sekoitetaan kaksi tuntia kylmässä ja kaadetaan reaktioseos 2,5 litraan vettä ja yhteen litraan kloroformia. Säädetään pH 7,2:sta 9,5:een lisäämällä 1-n nat-riumhydroksidia ja erotetaan orgaaninen kerros. Vesikerros pestään kerran kloroformilla, orgaaniset faasit yhdistetään. Tuotteen kloroformiliuosta käsitellään 1,5 litralla vettä pH:ssa 2,5 ja vesikerros erotetaan. Vesifaasin pH säädetään 2,5:stä 7,5:een ja sitten 8,25reen ja sen jälkeen uutetaan etyyliasetaatilla. Nämä uutteet hylätään ja pH nostetaan lopuksi 9,9:ään. Vesikerros uutetaan (2 x 825 ml) etyyliasetaatilla ja uutteet yhdistetään ja kuivataan natriumsulfaatilla. Poistettaessa liuotin alennetussa paineessa, saadaan 23,9 g vaahtomaista tuotetta.

NMR (S , CDC13): 3,41 (3H)s, 2,70 (2H)m, 2,36 (6H)s ja 2,10 (3H)s.

Esimerkki 26 4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini 20 g 2'-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä 125 ml:ssa etanolia sisältävää liuosta sekoitetaan yön yli huoneen lämpötilassa ja käsitellään sitten 21,2 g:11a ammoniumasetaattia. Saatu liuos jäähdytetään jäähauteessa ja sitä käsitellään 1,26 g:11a natriumsyanoboorihydridiä. Jäähdytyshaude poistetaan siiten ja reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa kaksi tuntia. Reaktioseos kaadetaan 600 mitään vettä ja 600 ml:aan dietyylieetteriä ja pH säädetään 8,3:sta 7,5:een.

24 6 5 2 6 2

Eetterikerros erotetaan ja vesikerros uutetaan etyyliasetaatilla. Uutteet pannaan sivuun ja vesikerroksen pH säädetään 8,25:een. Tässä pHrssa tehdyt dietyylieetteri- ja etyyliase-taattiuutteet pannaan myös sivuun ja pH nostetaan 9,9:ään.

Tässä pH:ssa tehdyt dietyylieetteri- ja etyyliasetaattiuutteet yhdistetään, pestään peräkkäin vedellä (1x) ja kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natriumsulfaatilla. Jälkimmäiset, pH:ssa 9,9 otetut uutteet konsentroidaan vaahdoksi, joka puhdistetaan kromatografisesti 160 g:11a silikageeliä käyttäen kloroformia kantoiiuottimena ja alkueluenttina. Kun on koottu 11 fraktiota, kukin määrältään 12 ml, eluentiksi vaihdetaan 5 % metanolia ja 95 % kloroformia sisältävä seos. Fraktion 370 kohdalla eluentiksi vaihdetaan 10 % metanolia ja 90 % kloroformia sisältävä seos ja fraktion 440 kohdalla käytetään seosta, joka sisältää 15 % metanolia ja 85 % kloroformia. Fraktiot 85-260 yhdistetään ja haihdutetaan kuiviin vakuumis-sa, jolloin saadaan 2,44 g haluttua tuotetta.

NMR ( <5, CDC13) : 5,56 (1H)m, 3,36 (3H)s, 2,9 (2H)m ja 2,26 (6H)s.

Esimerkki 27 4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini

Sekoitetaan huoneen lämpötilassa typpikaasun läsnäollessa yön yli liuosta, joka sisältää 300 mg 2'-asetyyli-4"-deok-si-4"-amino-oleadomysiiniä 25 ml:ssa metanolia. Reaktioseos konsentroidaan vakuumissa, jolloin saadaan haluttu tuote valkoisena vaahtona.

NMR ( f, , CDC13) : 5,56 (1H)m, 3,36 (3H)s, 2,90 (2H)m ja 2,26 (6H)s.

Esimerkki 28 11-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini

Liuosta, joka sisältää 2,15 g 11-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja 2,31 g am-moniumasetaattia 15 mlrssa 20°C:seen jäähdytettyä metanolia, käsitellään 136 mg:11a natriumsyanoboorihydridiä. Sekoitetaan sitten 45 minuuttia huoneen lämpötilassa ja kaadetaan sen jäi- 25 65262 keen reaktioseos 60 ml:aan vettä ja 60 ml:aan dietyylieetteriä ja säädetään pH 8,1:stä 7,5:een. Eetterikerros erotetaan ja hylätään, ja vesikerroksen pH nostetaan 8,9:aan. Lisätään tuoretta eetteriä, ravistellaan vesikerroksen kanssa ja hylätään eetterikerros. Säädetään pH 8,5:een ja toistetaan äskeinen menettely. Lopuksi pH säädetään 10,0:aan ja lisätään 60 ml etyyliasetaattia. Vesikerros hylätään ja etyyliasetaattikerros käsitellään 60 ml:11a uutta vettä. Vesikerroksen pH säädetään 6,0:aan 1-n kloorivetyhapolla ja etyyliasetaattikerros hylätään. Vesikerros uutetaan peräkkäin pH-arvoilla 6,5, 7,0, 7,5, 8,0 ja 8,5 etyyliasetaatilla (60 ml) ja orgaaniset uutteet pannaan sivuun. Lopuksi pH nostetaan 10,0:aan ja vesikerros uutetaan etyyliasetaatilla. Yhdistetään pH-arvoilla 8,0, 8.5 ja 10,0 kootut uutteet ja konsentroidaan ne vakuumissa, jolloin saadaan 585 mg valkoista vaahtoa, joka koostuu 4"-epi-meeriparista.

NMR (S , CDC13): 3,38 ja 3,35 (3H) 2 singlettiä, 2,31 ja 2,28 (6H) 2 singlettiä ja 2,03 (3H).

Esimerkki 29 8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4 ,,-deoksi-4 "-amino-oleandomysii-ni

Lisätään natriumsyanoboorihydridiä (126 mg) 1,86 g 8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja 2,1 g ammoniumasetaattia 10 ml:ssa metanolia sisältävään liuokseen huoneen lämpötilassa. Tunnin kuluttua reaktioseos jäähdytetään 0°C:seen ja sitä sekoitetaan 2,5 tuntia. Reaktioseos kaadetaan 60 ml:aan vettä ja 60 ml:aan dietyylieetteriä ja pH säädetään 7.5 reen. Eetterikerros hylätään ja vesikerroksen pH säädetään ensin 8,Oraan ja sitten 8,5reen uuttaen eetterillä kummankin säätämisen jälkeen. Lopuksi vesikerroksen pH säädetään 10,Oraan ja suoritetaan uutto etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuuttee-seen lisätään uutta vettä ja sen pH säädetään 6,Oraan. Etyyliasetaattikerros hylätään ja vesikerroksen pH säädetään peräkkäin arvoihin 6,5, 8,0, 8,5 ja 10,0 ja suoritetaan uutto kunkin pH-säädön jälkeen etyyliasetaatilla. Yhdistetään pH-arvoil-la 7,5, 8,0 ja 10,0 saadut etyyliasetaattiuutteet ja konsentroi- 65262 26 daan ne vaahdoksi, joka liuotetaan uudestaan etyyliasetaattiin ja uutetaan tuoreella vedellä pH:ssa 5,5. Hapan vesikerros säädetään peräkkäin, kuten edellä pH-arvoihin 6,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0 ja 10,0 ja uutetaan kunkin pH-säädön jälkeen dietyylieet-terillä. Yhdistetään pH-arvoilla 7,5, 8,0 ja 10,0 saadut uutteet ja haihdutetaan ne kuiviin vakuumissa, jolloin saadaan 166 mg haluttua tuotetta.

NMR ( £ , CDC13): 5,48 (1H)m, 3,40 (3H)s ja 2,30 (6H)s.

Esimerkki 30 11 -asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4',-amino-oleandomysiini

Lisätään 300 mg natriumsyanoboorihydridiä 20°C:seen jäähdytettyyn liuokseen, joka sisältää 5,0 g 11-asetyyli-8,8a-deok-si-8,8a-metyleeni-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä ja 5,2 g anunoniumasetaattia 30 ml:ssa metanolia. Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa tunnin ajan ja sitten se kaadetaan 120 ml:aan vettä ja 120 ml:aan dietyylieetteriä. Vesikerroksen pH säädetään peräkkäin arvoihin 7,5, 8,0, 8,5 ja 10,0 ja suoritetaan uuttaminen etyyliasetaatilla kunkin pH-säädön jälkeen. Lopulliseen orgaaniseen pH:ssa 10,0 saatuun uutteeseen lisätään vettä ja pH säädetään 6:een. Vesikerrosta käsitellään jälleen, kuten yllä ja pH säädetään arvoihin 7,0, 7,5, 8,0, 8,5 ja 10,0 suorittaen etyyliasetaatilla uutto kunkin pH:n muuttamisen jälkeen. Yhdistetään pH-arvoilla 8,0, 8,5 ja 10,0 saadut etyyli-asetaattiuutteet ja konsentroidaan ne vakuumissa, jolloin saadaan 1,5 g haluttua tuotetta.

NMR ( 6 , CDC13): 3,38 (3H)s, 2,30 (6H)s, 2,05 (3H)s ja 0,65 (4H)m.

Esimerkki 31 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4”-amino-oleandomysiini

Suspensiota, joka sisältää 1 g isopropanolilla pestyä Raney-nikkeliä ja 250 mg 11,2'-diasetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiini-O-asetyylioksiimia 25 ml:ssa isopropanolia, ravistellaan vetykaasussa alkupaineen ollessa 50 naulaa/neliötuu- 2 ma (noin 3,5 kg/cm ) huoneen lämpötilassa yön yli. Reaktioseos suodatetaan ja suodos konstroidaan alennetussa paineessa, joi- 27 65262 loin saadaan 201 mg haluttua tuotetta.

Tuotetta keitetään palautusjäähdyttäen metanolissa tunnin ajan, jolloin saadaan esimerkissä 23 valmistetun kanssa identtinen 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysiini.

Esimerkki 32 4"-deoksi-4"-etyyliamino-oleandomysiini

Seokseen, joka käsittää 4,59 g 4"-deoksi-4"-okso-olean-domysiiniä, 6,6 ml etyyliamiinin 5-moolista etanoliliuosta ja 1,89 ml etikkahappoa 25 ml:ssa metanolia, lisätään 365 mg natriumsyanoboorihydridiä 50-60 mg:n annoksina. Sekoitetaan tunnin ajan huoneen lämpötilassa ja kaadetaan reaktioseos sitten 110 ml:aan vettä ja 120 ml:aan etyyliasetaattia.

Vesikerroksen pH säädetään peräkkäin arvoihin 7,5, 8,0, 8,5 ja 10,0 ja suoritetaan uutto etyyliasetaatilla kunkin pH-säädön jälkeen. Viimeinen pH:ssa 10,0 saatu orgaaninen uute käsitellään vedellä ja pH säädetään 6:een. Vesikerros käsitellään jälleen, kuten yllä ja pH säädetään arvoihin 7,0, 7,5, 8,0, 8,5 ja 10,0 suorittaen uutto etyyliasetaatilla kunkin pH-muutoksen jälkeen. Yhdistetään pH-arvoilla 8,0, 8,5 ja 10,0 saadut etyyliasetaattiuutteet ja konsentroidaan ne vakuu-missa vaahdoksi. Tuote puhdistetaan edelleen kromatografisesti 75 g:11a silikageeliä käyttäen asetonia eluenttina. Fraktiot 62-104, kukin sisältäen 4 ml, yhdistetään ja konsentroidaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 910 mg haluttua tuotetta .

Esimerkki 33 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-etyyliamino-oleandomysiini

Esimerkin 32 kaltaisella tavalla lisätään 366 mg natriumsyanoboorihydridiä annoksittain liuokseen, joka sisältää 5,82 g 11-asetyyli-4"-deoksi-okso-oleandomysiiniä ja 16 ml etyyliamiinin 5-moolista etanoliliuosta 27,4 ml:ssa kloorivedyn 2,92-moolista etanoliliuosta. Kun reaktioseosta on sekoitettu huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia, se kaadetaan 120 ml:aan vettä ja 120 ml:aan etyyliasetaattia ja käsitellään, kuten esimerkissä 54 saaden 1,2 g haluttua tuotetta.

28 65262

Esimerkki 34 11-asetyyli-4,,-deoksi-4"-n-heksyyliamino-oleandomysiini

Noudattamalla esimerkin 32 menetelmää käyttäen lähtöaineina 4,8 g 11-asetyyli-4"-deoksi-4"-okso-oleandomysiiniä, 6,7 g n-heksyyliamiinia, 3,78 ml etikkahappoa, 302 mg natrium-syanoboorihydridiä ja 25 ml metanolia, saadaan 80 g:11a si-likageeliä kromatografisesti puhdistamalla käyttäen eluentti-na kloroformia 1,3 g haluttua tuotetta.

Esimerkki 35 11 -asetyyli-4,'-deoksi-4,,-dimetyyliamino-oleandomysiini 2 g 11-asetyyli-4',-deoksi-4,,-amino-oleandomysiiniä, 1 g 10-%:istä palladium-hiili-seosta ja 2,06 ml formaliiniliuos- ta sekoitetaan 40 ml:aan metanolia ja ravistellaan vetykaa- sussa yön yli alkupaineen ollessa 50 naulaa/neliötuuma 2 (noin 3,5 kg/cm ). Käytetty katalysaattori suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös-tuote (1,97 g) puhdistetaan kromatografisesti 40 g:lla sili-kageeliä käyttäen alkueluenttina kloroformia. 25 fraktion jälkeen, jotka käsittävät 650 tippaa kukin, eluentiksi vaihdetaan metanolin 3-%:inen kloroformiliuos. Fraktiot 36-150 yhdistetään ja konsentroidaan vakuumissa, jolloin saadaan 704 mg haluttua tuotetta valkoisena vaahtona.

NMR ( <5 , CDC13) : 3,33 (3H)s, 2,63 (2H)m, 2,30 (12H)s ja 2,10 (3H)s.

Esimerkki 36 11-asetyyli-4',-deoksi-4,,-amino-oleandomysiini dihydro- kloridi 7,28 g:aan 11-asetyyli-4M-deoksi-4"-amino-oleandomysii-niä 50 mlrssa kuivaa etyyliasetaattia lisätään 20 ml kloori-vedyn 1-n etyyliasetaattiliuosta ja näin saatu liuos haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös kiteytetään hiertämällä eetteristä ja suodatetaan halutun suolan saamiseksi .

Samanlaisella menetelmällä muutetaan kyseisen keksinnön amiiniyhdisteet di-happoadditiosuoloikseen.

65262 29

Esimerkki 37 11,2 ,-diasetyyli-4,,-deoksi-4"-amino-oleandomysiinin hyd-rokloridi

Noudatetaan esimerkin 36 mentelmää sillä poikkeuskella, että lisätään 10 ml kloorivedyn 1-n etyyliasetaattiliuosta. Liuos haihdutetaan kuiviin vakuumissa ja jäljelle jäävä mo-nohydrokloridisuola kiteytetään hiertämällä eetteristä ja suodatetaan .

Samanlaisella menetelmällä muutetaan kyseisen keksinnön amiiniyhdisteet mono-happoadiitiosuoloikseen.

Esimerkki 38 11-asetyyli-4"-deoksi-4*,-amino-oleandomysiinin asparagi- naatti 960 mgraan 11-asetyyöi-4"-deoksi-4"-amino-oleandomysii-niä 6 ml:ssa 40°C asetonia lisätään 18 ml vettä ja sitten 175 mg asparagiinihappoa. Seosta keitetään palautusjäähdyttäen, kunnes saadaan sameahko liuos. Seos suodatetaan kuumana ja kirkas suodos konsentroidaan asetonin poistamiseksi. Jäljelle jäävä liuos pakastekuivataan, jolloin jäljelle jää haluttu tuote.

Valmiste A

2’-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiini 1a. 2'-asetyyli-8,8a-deoksi-oleandomysiini

Pyöreään, 250 ml:n kolmikaulakolviin pannaan sinkkipölyä (10 g) ja elohopea(2)kloridia (1 g). Kun kiinteät aineet on sekoitettu hyvin, lisätään 1-n HC1 (25 ml) ja seosta sekoitetaan voimakkaasti 15 minuuttia. Supernatantti poistetaan veden pinnalta ja lisätään uutta HCl (25 ml) ja kolviin johdetaan hiilidioksidia. Kromitrikloridin suodatettu liuos (50 g 65 ml:ssa 1-n HCl) lisätään nopeasti sinkkiamalgaamaan. Seosta sekoitetaan hiilidioksidikaasussa tunnin ajan, jolloin syntyvä vaalean sininen väri ilmaisee kromi(2)kloridin (CrC^) läsnäolon. Sekoittaminen lopetetaan tunnin kuluttua ja sinkkiamal-gaaman annetaan lasketutua kolvin pohjalle.

21-asetyyli-oleandomysiiniä (29,2 g) liuotettuna asetoniin (200 ml) ja veteen (100 ml) pannaan yläpuolisella mekaa- 30 6 5 262 nisella sekoittajalla varustettuun pyöreään 600 ml:n kolmikau-lakolviin kiinitettyyn tiputussuppiloon. Koko ajan sekoittaen hiilidioksidin läsnäollessa, lisätään tähän kolviin 2'-ase-tyyli-oleandomysiiniliuos ja aiemmin valmistettu kromi(2x)-kloridiliuos. Liuokset lisätään yhtä aikaa siten, että kumpikin loppuu samalla hetkellä. Lisäys kestää noin 12 minuuttia. Sekoitetaan 35 minuuttia huoneen lämpötilassa ja lisätään sitten vettä (100 ml) ja etyyliasetaattia (100 ml) reaktioseokseen ja jatketaan sekoittamista 15 minuuttia. Etyyliasetaattikerros erotetaan ja pestään vedellä (80 ml). Etyyliasetaatti erotetaan ja uutevedet yhdistetään ja pestään uudella etyyliasetaatilla (100 ml). Etyyliasetaattikerros erotetaan ja pestään vedellä (100 ml). Orgaaninen faasi erotetaan ja vesifaasit yhdistetään ja käsitellään natriumkloridilla (75 g). Vielä erottuva etyyliasetaatti lapetaan pois ja yhdistetään muihin etyyliase-taattiuutteisiin. Lisätään vettä yhdistettyihin etyyliasetaat-tiuutteisiin ja säädetään pH 8,5:een natriumkarbonaatilla. Orgaaninen kerros erotetaan, pestään vedellä, kyllästetyllä natriumkloridilla ja kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla. Suodattamalla ja haihduttamalla liuottimet alennetussa paineessa, saadaan valkea kiinteä aine, joka kiteytetään etyyli-asetaatti/heptaani-seoksesta saaden tulokseksi haluttu tuote, 8,4 g, sp. 183,5 - 185°C.

Analyysi C^Hg^i gN:

Laskettu: C 62,2 H 9,0 N 2,0 Saatu: C 62,0 H 8,9 N 2,0 NMR (S, CDC13): 5,63 (1H)s, 5,58 (1H)s, 3,43 (3H)s, 2,36 (6H)s ja 2,08 (3H)s.

1b. 2 *-asetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-dihydro-oleandomysiini

Alumiinifoliota (4,0 g) leikattuna 1/4 tuuman palasiksi sekoitetaan 30-45 sekuntia 290 ml:ssa elohopea(2)kloridin vesiliuoksessa. Liuos dekantoidaan ja amalgamoitunut alumiini pestään peräkkäin vedellä (2x), isopropanolilla (1x) ja tetra-hydrofuraanilla (1x). Palasien päälle kaadetaan 45 ml tetra-hydrofuraania, 45 ml isopropanolia ja 10 ml vettä ja jäähdyte- 31 65262 tään sitten 0°C:seen jäähauteessa. Lisätään tipoittain 2,0 g tetrahydrofuraaniin, isopropanoliin ja veteen liuotettua 8,8a-deoksi-2'-asetyyli-oleandomysiiniä amalgamoituun alumiiniin siten, että lämpötila pysyy 0°C:ssa. Kun lisäys on suoritettu, poistetaan jäähaude ja seosta sekoitetaan huoneen lämmössä yön ajan. Kiinteät aineet suodatetaan pois ja suodos haihdutetaan kuiviin vakuumissa. Jäännös käsitellään etyyliasetaatti-vesi-seoksella ja pH säädetään 9,0:aan kyllästetyllä natrium-karbonaattiliuoksella. Orgaaninen faasi erotetaan, pestään vedellä ja kyllästetyllä suolaliuoksella ja kuivataan natrium-sulfaatilla. Poistamalla liuotin, saadaan 2,27 g haluttua tuotetta .

Valmiste B

2a. 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeni-olean-domysilni

Liekillä kuivattuun, tiputussuppilolla, magneettisekoit-tajalla ja typpikaasun ahtopaineaukolla varustettuun 200 ml:n kolmikaulakolviin pannaan 16,4 g trimetyylisulfoksoniumjodidia ja 3,4 g natriumhydridin 50-%:ista öljydispersiota. Kiinteät aineet sekoitetaan hyvin ja lisätään tiputussuppilon kautta 43,2 ml dimetyylisulfoksidia. Tunnin kuluttua, kun vedyn kehittyminen on lakannut, suspensio jäähdytetään 5-10°C:seen ja siihen lisätään 10 minuutin aikana 22,6 g 11,2'-diasetyyli-8,8a-deoksi-oleandomysiiniä liuotettuna 32 ml:aan tetrahydro-furaania ja 16 mitään dimetyylisulfoksidia. Suspensiota sekoitetaan huoneen lämpötilassa 90 minuutin ajan ja kaadetaan se sitten 300 mitään vettä ja uutetaan kahdella 300 ml:n erällä etyyliasetaattia. Orgaaniset uutteet pestään vedellä ja nat-riumhydroksidin kyllästetyllä liuoksella, kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla, suodatetaan ja haihdutetaan kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös kiteytetään eetteristä, jolloin saadaan 8,9 g 11,21-diasetyyli-8,8a-deoksi-8,8a-metyleeniolean-domysiiniä.

Claims (19)

1. Menetelmä kaavan I", II" tai III" mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, Ac N (CH,) _ O NQ I AC N(CH3)2 -Λεχ -AA "νχχ *vtx °σ13 0 L, I" Π" 3 AC N(CH3)2 »•AA Va III" °®3 joissa R on vety tai kaksi tai kolme hiiliatomia sisältävä alkano-yylij ja Ac on kaksi tai kolme hiiliatomia sisältävä alkanoyyli, tunnettu siitä, että siinä hapetetaan jokin kaavan I', II' tai III' mukainen yhdiste 33 65262 _"v, Ac N(CH-,)0 _ V I 3 Ac N(CH.), Va Va.. och3 o I 1' II' OCH3 A.C N(CH3)2 °r-, vS "Vtx„ 0 0CH-, III' 3 joissa kaavoissa R ja Ac ovat yllä määritellyn mukaiset, N-kloori-sukkiini-imidillä ja dimetyylisulfidillä, yhdellä moolilla kumpaakin, reaktiolle inertissä liuottimessa noin 0...-25°C:n välisessä lämpötilassa, minkä jälkeen reaktioseos saatetaan kosketukseen yhden trietyyliamiinimoolin kanssa.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että siinä reaktiolle inertti liuotin on tolueeni-bentseeni.

3 OCH, I II 3 R, N(CH,)~ K I 32 γνή R° γ-ςχ III 0CH3 joissa R ja R3 ovat molemmat vetyjä tai kaksi tai kolme hiiliatomia sisältäviä alkanoyylejä; ja X on 0, N-OH, N-0CH3 tai N-0C0CH3. 35 65262

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että sen mukaan valmistetaan kaavan I" mukainen yhdiste . η 34 65262

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että siinä H ja Ac ovat kumpikin asetyylejä.

5. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että siinä R on vety ja Ac on asetyyli.

6. Terapeuttisesti arvokkaiden 4"-aminoepimeeristen yhdisteiden valmistuksessa välituotteena käytettäviä yhdisteitä, tunnettuj a siitä, että niillä on kaava I, II tai III R, N(CH,)- O \ f 32 ^ Riv N(CH3)2 -Λ* V? ^Λ?. OCH, 0 T

7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen yhdiste, tunnet-t u siitä, että siinä X on O.

8. Patenttivaatimuksen 7 kaavan I mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R ja R^ ovat molemmat asetyylejä.

9. Patenttivaatimuksen 7 kaavan I mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R on asetyyli ja R^ on vety.

10. Patenttivaatimuksen 7 kaavan I mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R ja R^ ovat molemmat vetyjä.

11. Patenttivaatimuksen 7 kaavan I mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R on vety ja R^ on asetyyli.

12. Patenttivaatimuksen 7 kaavan II mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R ja R^ ovat molemmat asetyylejä.

13. Patenttivaatimuksen 7 kaavan II mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R on asetyyli ja R^ on vety.

14. Patenttivaatimuksen 7 kaavan II mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R ja R^ ovat molemmat vetyjä.

15. Patenttivaatimuksen 7 kaavan II mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R on vety ja R^ on asetyyli.

16. Patenttivaatimuksen 7 kaavan III mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R ja R^ ovat molemmat asetyylejä.

17. Patenttivaatimuksen 7 kaavan III mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R on asetyyli ja R^ on vety.

18. Patenttivaatimuksen 7 kaavan III mukainen yhdiste, tunnettu siitä, että siinä R ja R^ ovat molemmat vetyjä.

19. Patenttivaatimuksen 7 kaavan III mukainen yhdiste, t u n-n e t t u siitä, että siinä R on vety ja R^ on asetyyli. _______ -· TT- 36 652 62