FI116558B

FI116558B - Alfa-interferonin stabiilit vesiliuosformulaatiot

Info

Publication number: FI116558B
Application number: FI971486A
Authority: FI
Inventors: Pui-Ho C Yuen; Douglas F Kline
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 1994-10-11
Filing date: 1997-04-10
Publication date: 2005-12-30
Also published as: CA2201749C; UA42028C2; SK43997A3; PL183797B1; MX9702578A; WO1996011018A1; JP2006193536A; FI20055562A; CA2201749A1; AU708337B2; HUT77287A; NZ294464A; EP0777495A1; JPH10506912A; KR100401401B1; RU2157236C2; PT777495E; KR970706017A; DE69518084T2; NO320604B1

Description

116558

Alfa-interferonin stabiilit vesiliuosformulaatiot. -Alfa-interferons stabila vattenlösningsformulat.

Tämän keksinnön kohteena ovat stabiilit vesiliuosformulaa-5 tiot, jotka eivät sisällä ihmisen veriseerumista peräisin olevia tuotteita ja joissa alfa-tyyppisen interferonin biologinen aktiivisuus ja kemiallinen ja fyysinen stabiilisuus säilyvät korkeina kauan.

10 US-patentissa 4,496,537 on tuotu esiin alfa-interferonin biologisesti stabiileja vesiliuosformulaatioita, jotka sisältävät alfa-interferonia, ihmisseerumin albumiinia ja alaniinia tai glysiiniä, vettä ja pH-arvon välillä 6,5 -8,0 säilyttävää puskurisysteemiä. Ihmisseerumin albumiini 15 ("HSA") toimii alfa-interferonin stabilisaattorina ja estää sen, että alfa-interferonia häviää liuoksesta sitä kautta, että alfa-interferonia kerrostuu ja/tai adsorboituu astioiden, prosessilaitteiston ja säilytysastioiden teräs- ja lasipinnoille. Alfa-interferonia ja ihmisseeru-20 min albumiinia sisältävät liuosformulaatiot ovat säilyttä-t·' neet alfa-interferonin kemiallisen ja biologisen stabiili- suuden, kun tällaisia liuoksia on säilytetty 2 - 8°C:ssa ;· pitkiä aikoja, so. yli 2 vuotta.

: , 25 Maailmanlaajuinen AIDS-epidemia on äskettäin johtanut * * ’ ; i siihen, että terveysviranomaiset edellyttävät valmistajil- ’ ta, että he laittavat varoitukset sellaisiin tuotteisiin, kuten alfa-interferoniin, jotka sisältävät ihmisverestä *’·* · peräisin olevia tuotteita, kuten ihmisseerumialbumiinia.

30 * ; Siten on olemassa tarve formuloida uudelleen liuostuot- teet, jotka sisältävät alfa-tyyppistä interferonia niin, että saadaan liuosformulaatio, joka ei sisällä ihmisveres-’·* ' tä peräisin olevia tuotteita, kuten HSA: a, samalla kun *. *: 35 säilytetään alfa-tyyppisen interferonin kemiallinen, fysikaalinen ja biologinen aktiivisuus korkeina vesiliuos- 2 116558 formulaatioissa pitkien säilytysaikojen yli.

Esillä olevan keksinnön kohteena on stabiili vesiliuosfor-mulaatio, joka säilyttää alfa-tyyppisen interferonin bio-5 logisen aktiviisuuden korkeana ja joka ei sisällä ihmis-verestä peräisin olevia tuotteita, joka formulaatio sisältää: a. 0, 1 x 106 - 100 x 106 IU/ml alfa-tyyppistä interferonia; 10 b. puskurisysteemiä, joka pitää pH-arvon välillä 4,5 -7,1; c. vaikuttavan määrän kelatointlainetta; 15 d. niin suuren määrän stabilisaattoria valittuna polysor-baatti 20:stä ja polysorbaatti 80:sta, että se stabiloi alfa-tyyppisen interferonin alfa-tyyppisen interferonin hävikkiä vastaan; 20 * ·, .· e. vaikuttavan määrän toonisuusainetta; ;* f. vaikuttavan määrän antimikrobiaalista säilöntäainetta; : : ja 25 » t t t g. niin paljon injisointivettä, että edellä mainituista ainesosista voidaan valmistaa liuos, mainittu liuos ei . , sisällä mannitolimäärää, joka toimii tehokkaasti bulkkiaineena, kun stabilisaattori on polysorbaatti 20.

* I

*·;·* 30 ; : ; Esillä oleva keksintö tuo esiin stabiilin vesiliuosformu- ; laation, jossa alfa-tyyppisen interferonin biologinen aktiivisuus on korkea ja joka ei sisällä ihmisverestä • · * ; , peräisin olevia tuotteita, joka formulaatio sisältää: 35 a. 0, x 106 - 100 x 106 IU/ml alfa-tyyppistä interferonia; 3 116558 b. niin paljon puskurisysteemiä, että liuoksen pH pysyy välillä 4,5 - 7,1; c. noin 0,01 - 1 mg/ml dinatriumdivetyetyleenidiamiinitet- 5 ra-asetaattia; d. noin 0,01 - 1 mg/ml polysorbaatti 20 tai polysorbaatti 80; 10 e. noin 1-9 mg/ml natriumkloridia; f. vaikuttava määrä antimikrobiaalista säilöntäainetta valittuna m-kresolista, fenolista, metyyliparabeenistä, propyyliparabeenistä tai näiden seoksista; ja 15 g. injisointivettä q.s. ad. 1 ml.

Esillä oleva keksintö tuo hyvänä pidetyssä muodossa esiin stabiilin vesiliuosformulaation, jossa alfa-tyyppisen 20 interferonin biologinen aktiivisuus on korkea ja joka ei sisällä ihmisverestä peräisin olevia tuotteita, joka : formulaatio sisältää: •mg/ml :> 25 a. Alfa-2-interferoni 5 x 106 -

50 x 106 IU

: b. Kaksiemäksinen natriumfosfaatti, vedetön 1,8 30 ; c. Yksiemäksinen natriumfosfaatti, monohydraatti 1,3 ’ d. Dinatriumdivetyetyleenidiamiini- ’ 35 tetra-asetaatti 0,1 4 116558 e. Polysorbaatti 80 0,1 f. Metyyliparabeeni 1,2 5 g. Propyyliparabeeni 0,12 h. Natriumkloridi; 7,5 ja i. Injisointivesi q.s. ad 1 ml 10

Eräässä toisessa esillä olevan keksinnön hyvänä pidetyssä suoritusmuodossa tuodaan lisäksi esiin stabiili vesiliuos-formulaatio, jossa alfa-tyyppisen interferonin biologinen aktiviisuus on korkea ja joka ei sisällä ihmisverestä 15 peräisin olevia tuotteita, joka formulaatio sisältää: mg /ml a. Alfa-2-interferoni 5 x 106 -

20 50 x 10s IU

\ b. Kaksiemäksinen natriumfosfaatti, vedetön 1,8 ·;“! c. Yksiemäksinen natriumfosfaatti, ;”· t 25 monohydraatti 1,3 d. Dinatriumdivetyetyleenidiamiini- , , tetra-asetaatti 0,1 • · ·

» I

’*;·* 30 e. Polysorbaatti 80 0,1 : f. m-kresoli 1,5 • · · . g. Natriumkloridi; 7,5 ’· ’· 35 ja h. Injisointivesi q.s. ad 1 ml 5 116558

Esillä oleva keksintö tuo myös esiin menetelmän valmistaa stabiilia vesiliuosformulaatiota, jossa alfa-tyyppisen interferonin biologinen aktiivisuus on korkea ja joka ei sisällä ihmisverestä peräisin olevia tuotteita, jossa 5 menetelmässä sekoitetaan alfa-tyyppisen interferonin vaikuttavan määrän kanssa puskurisysteemiä, joka kykenee pitämään pH-arvon välillä 4,5 - 7,1, kelatointiainetta, polysorbaatti 20 tai polysorbaatti 80, toonisuusainetta, antimikrobiaalista säilöntäainetta ja niin paljon vettä, 10 että voidaan muodostaa liuos. Esillä olevan keksinnön eräässä hyvänä pidetyssä suoritusmuodossa valmistetaan liuos ja tämä pidetään oleellisesti liuennutta happea sisältämättömänä ja liuoksen yläpuolisessa tilassa pidetään inerttiä kaasua niin, että hapen määrä on alle 15 noin 4 tilavuus-%.

Keksinnön formulaatiot ja menetelmät eivät lisäksi sisällä mannitolia määränä, joka tehokkaasti toimii bulkkiaineena.

20 Olemme valinneet tietyt määrät tiettyjä ainesosaryhmiä, ;,· jotka ovat tehneet mahdolliseksi kehittää alfa-tyyppisen interferonin vesiliuosformulaatio, joka ei sisällä ihmis-seerumin albumiinia, mutta joka kuitenkin säilyttää alfa-,· I tyyppisen interferonin kemiallisen, biologisen ja fysikaa- , 25 lisen stabiilisuuden korkeina varastoitaessa 2 - 8°C:ssa ,··/, pitkiä aikoja, vähintään 24 kuukautta.

. , Nimitys "ei sisällä ihmisverestä peräisin olevia tuottei- ·;; · ta" tarkoittaa esillä olevan keksinnön mukaisten formulaa- » * *···' 30 tioiden yhteydessä, että esillä olevan keksinnön mukaisia ; ; : liuosformulaatioita valmistettaessa ei käytetä ihmisveres- tä peräisin olevia tuotteita, kuten ihmisseerumin albumii-.1, nia.

'· : 35 Ilmaisu "kemiallinen stabiilisuus on korkea" käytettynä alfa-tyyppisen interferonin, jota käytetään esillä olevan 6 116558 keksinnön mukaisissa formulaatioissa, yhteydessä tarkoittaa, että alfa-tyyppinen interferoni säilyttää kemiallisesta muodostaan vähintään 85 %, mieluummin 85 - 100 % säilytettäessä 2 - 8°C:ssa vähintään 24 kuukautta. Kts.

5 taulukot 1 ja 2. Kemiallinen muoto määritetään mittaamalla proteiinipitoisuus HPLC-menetelmällä, esimerkiksi menetelmällä, jonka T. L. Nagabhushan, et ai., on kuvannut artikkelissa "Characterization of Genetically Engineered ALFA-2 Interferon", sivut 79-88, julkaisussa: Interferon Research 10 Clinical Application, and Regulatory Consideration, Zoon, et al., toim. Elsevier Science Publishing Co., Inc. 1984. (Kts. tulokset taulukoissa 1-4).

Ilmaisu "biologinen stabiilisuus on korkea" tarkoittaa 15 alfa-tyyppisen interferonin, jota käytetään esillä olevan keksinnön mukaisessa formulaatiossa, yhteydessä, että alfa-tyyppinen interferoni formulaatioissa säilyttää vähintään 75 %, mieluummin vähintään 85 %, vieläkin mieluummin 90 - 100 % biologisesta aktiivisuudestaan säily-20 tettäessä 2 - 8°C:ssa vähintään 24 kuukautta (kts. tulokset taulukoissa 1-4), kun mittaus tehdään viruksen sytopaattisen vaikutuksen (CPE) inhibointimenetelmällä, '· esimerkiksi W.P. Protzman'in, et ai. esittämällä menetel- mällä, J. Clinical Microbiology, (1985), 22, 596-599.

:·. 25

Ilmaisu "fysikaalinen stabiilisuus on korkea" tarkoittaa alfa-tyyppisen interferonin, jota käytetään esillä olevan keksinnön mukaisissa formulaatioissa, yhteydessä, että ··- · esillä olevan keksinnön mukainen formulaatio pysyy kirk-

* I

’···’ 30 kaana, so. siinä ei näy samentumaa tai näkyvää hiukkas- : maista ainetta (so. hiukkasia, joiden halkaisija on suu- rempi kuin noin 60 - 70 mikronia) säilytettäessä 2 -8°C:ssa vähintään 24 kuukautta. Kts. taulukot 1, 2 ja 3.

’ Taulukoissa 1, 2 ja 3 annetut tulokset ovat siinä suhtees- ’* 35 sa yllättäviä, että useimmat, alfa-tyyppisen interferonin kaltaisia proteiinituotteita sisältävät liuosformulaatiot 7 116558 muodostavat helposti silmämääräisesti nähtävää hiukkas-maista ainetta (so. hiukkasia, joiden halkaisija on suurempi kuin 60 - 70 mikronia), kun niitä säilytetään pitkään, jopa 2 - 8°C:ssa säilytettäessä. Testimenetelmä (kts.

5 taulukot 1-4), jota käytettiin määrittämään hiukkas-mainen aine tämän keksinnön mukaisessa liuosformulaa-tiossa, on kuvattu US-Pharmacopeia:ssa (The United States Pharmacopeia/The National Formulary USP 23/NF 18, julkaisija United States Pharmacopeial Convention, In., 10 (1995), Rockville, Maryland), kts. Physical Test <788> sivuilla 1813 - 1816. Myös menetelmä, jolla määritettiin tämän keksinnön mukaisten liuosformulaatioiden visuaalinen ulkonäkö, on kuvattu USP 23:ssa, "General Requirement Test and Assays <1> Injections" sivuilla 1650 - 1652.

15

Olemme havainneet, että lisäämällä esillä olevan keksinnön mukaisiin formulaatioihin kelatointiainetta, voimme välttää näkyvän hiukkasmaisen aineen. Tyypillisiä sopivia kelatointiaineita ovat dinatriumdivetyetyleenidiamiinitet-20 ra-asetaatti (EDTA tai dinatriumedetaatti) tai sit-ruunahappo. Mieluummin käytetään dinatriumedetaattia.

:: Haluamatta sitoutua mihinkään teoriaan, uskomme, että ·*· dinatriumedetaattidinatrium kompleksoi tehokkaasti metal- ·....* likat ionien (kuten Zn2+, Fe2+, Cu2+ tai Al3+) hivenmäärät.

;·. 25 Näitä ioneja voi olla mukana apuaineissa ja pakkauskom- ponenteissa, esimerkiksi kumitulpissa tai tiivisteissä. Koska dinatriumedetaatilla on suurempi affiniteetti näihin metallikationeihin kuin alfa-tyyppisiin interferoneihin, : vältytään metallikationien ja alfa-tyyppisen interferonin 30 väliseltä keskinäisvaikutukselta, jonka seurauksena muo-; :*.* dostuisi liukenemattomia komplekseja (jotka ovat muodol- taan esimerkiksi näkyvää hiukkasmaista ainetta) ja aktii-visuuden väheneminen. Kelatoivan aineen vaikuttava määrä » i » ’ on välillä 0,01 - 1 mg/ml, kun alfa-tyyppisen interferonin *· · 35 laskentaperusteena on 0, 1 x 106 - 100 x 106 kansainvälistä yksikköä ("IU")/ml. Alfa-2-interferonin 5 x 106 - 50 x 106 8 116558 IU-aktiivisuutta kohti käytetään mieluummin 0,1 mg dinat-riumedetaattia.

Esillä olevan keksinnön mukaisiin formulaatioihin sopivia 5 puskurijärjestelmiä ovat ne, jotka pitävät vesiliuosformu-laation pH-arvon välillä 4,5 - 7,1, mieluummin 6,5 - 7,1 ja kaikkein mieluummin 6,8:ssa. Mieluummin käytetään puskurijärjestelmää, joka muodostuu kaksiemäksisestä natriumfosfaatista ja yksiemäksisestä natriumfosfaatista. 10 Formulaation, joka sisältää 0,1 x 106 - 100 x 106 IU alfa-tyyppistä interferonia ml:ssa, käytetään tavallisesti 0,005-0,1-moolista hyvänä pidettyä yksiemäksinen natrium-fosfaatti/kaksiemäksinen natriumfosfaatti-puskurijärjestelmää. Muita sopivia puskurointijärjestelmiä, jotka 15 pitävät pH-arvon halutulla välillä 4,5 - 7,1, ovat nat- riumsitraatti/sitruunahappo ja natriumasetaatti/etikkahap-po.

Esillä olevassa keksinnössä hyödyllinen toonisuusaine on 20 mikä tahansa aine, joka kykenee tekemään esillä olevan keksinnön mukaiset formulaatiot iso-osmoottisiksi ihmisen : seerumin kanssa. Tyypillisiä sopivia toonisuusaineita ovat ; natriumkloridi, mannitoli, glysiini, glukoosi ja sorbito- . : li. Toonisuusaineena käytetään mieluummin natriumkloridia.

25 Käytetty toonisuusaineen määrä on välillä 1-10 mg/ml, * I i kun esillä olevan keksinnön mukainen formulaatio sisältää , , ml:ssa 0, 1 x 106 - 100 x 106 IU alfa-tyyppistä interfero- * * · ··· : nia. Esillä olevan keksinnön mukaisissa formulaatioissa on » » ’··* 30 suositeltavaa käyttää 7,5 mg/ml natriumkloridia, kun alfa- t : tyyppisen interferonin määrä on 5 x 106 - 50 x 106 IU/ml.

i * * * i

> I

* * I

Hyödyllisiä stabilointiaineita, jotka estävät alfa-tyyp-‘ pisten interferoniproteiinien, kuten alfa-2b-interferonin r * * ’· ”> 35 adsorption laitteen, jota on käytetty alfa-tyyppisten interferonia sisältävien injisoitavien formulaatioiden 9 116558 valmistamiseen, teräs- tai lasipinnoille, ovat sorbitaani-mono-9-oktadekenoaatti-poly(oksi-1,2-etaanidiyyli)-johdannaiset kuten polysorbaatti 80 tai polysorbaatti 20. Tämän keksinnön formulaatiossa tehokas polysorbaatti 20 tai 80-5 määrä on välillä 0,01 -1,0 mg/ml, kun formulaatio sisältää 0, 1 x 106 - 100 x 106 IU/ml alfa-tyyppistä interferonia. Mieluummin käytetään polysorbaatti 80:a. Käytetty polysorbaatti 80-määrä on vieläkin mieluummin 0,1 mg/ml kaikissa esillä olevan keksinnön mukaisissa liuosformu-10 laatioissa. Kun alfa-tyyppisen interferonin, kuten alfa-2-interferonin konsentraatio on alle noin 15 x 106/ml, esimerkiksi 6 x 106 IU/ml, polysorbaatti 80:n puuttuessa alfa-interferonin absorboitumisesta johtuva aktiivisuus-tappio pienentää formulaation biologista aktiivisuutta.

15 Olemme yllättäen havainneet, että polysorbaatti 80 estää alfa-2b-interferonitappion ja mahdollistaa alfa-2b-inter-feronin systeemisen antamisen menettämättä biologista aktiivisuutta. Kehittäessämme esillä olevan keksinnön mukaista formulaatiota olemme yllättäen havainneet, että 20 polysorbaatti 80 antoi ylivoimaisen kemiallisen ja » biologisen stabiilisuuden alfa-2b-interferonille verrat-

* I

'v,· tuna muihin ei-ionillisiin pinta-aktiivisiin aineisiin, ];· esimerkiksi Pluronic F127:ään ja Pluronic F-68:aan.

* ♦ » · · » ♦ j*. 25 Esillä olevan keksinnön mukaisessa formulaatiossa hyödyl- « linen alfa-tyyppisen interferoni määrä on välillä • · * 0, 1 x 106 - 100 x 106 IU/ml, mieluummin 5 x 106 -50 x 106 IU/ml.

f 1 I

* I t # * 30 Nimityksellä "alfa-tyyppinen interferoni" tarkoitetaan : ; ; tässä yhteydessä erittäin homologisten, lajispesifisten ." , proteiinien, jotka inhiboivat virusten replikaatiota ja solujen lisääntymistä ja säätelevät immuunivastetta, per-V * hettä. Tyypillisiä sopivia alfa-tyyppisiä interferoneja · 35 ovat alfa-2a-interferoni, kuten Hoffmann-La Roche, Nutley, N.J.-yhtiöltä saatavissa olevaa ROFERON A alfa-2a-interfe- 10 116558 roni, alfa-2b-interferoni, kuten Schering Corporation, Kenilwort, N.J.-yhtiöltä saatavissa oleva INTRON A alfa-2b-interferoni, alfa-2c-interferoni, kuten Boehringer Ingelheim Pharmaceutical, Inc., Ridgefield, CT.-yhtiöltä 5 saatavissa oleva BEROFOR alfa-2c-interferoni, alfa-nl-interferoni, joka on luonnonmukaisten alfa-interferonien puhdistettu seos, kuten Sumitomo-yhtiöltä, Japani, saatavissa oleva SUMIFERON, tai Wellcome Foundation Ltd.,

London, Englanti, -yhtiöltä saatavissa oleva WELLFERON 10 alfa-nl-interferoni, tai Amgen, Inc., Newbury Park, Cali-fornia-yhtiöltä saatavissa oleva consensus-alfa-interfero-ni, tai alfa-n3-interferoni, joka on luonnonmukaisten alfa-interferonien seos ja Interferon Sciences-yhtiön valmistama ja saatavissa Purdie Frederick Co., Norwalk, 15 CT.-yhtiöltä kauppanimellä ALFERON. Mieluummin käytetään alfa-2a- tai alfa-2b-interferonia. Vieläkin mieluummin käytetään alfa-2b-interferonia.

Antimikrobiaalisiin säilöntäaineisiin, joiden on havaittu 20 olevan hyödyllisiä esillä olevassa keksinnössä, kuuluvat m-kresoli, fenoli ja metyyliparabeeni ja propyyliparabeeni ; ja edellä annettujen säilöntäaineiden seokset, esimerkiksi fenoli-metyyliparabeeni-seokset. m-kresolin esillä olevassa keksinnössä hyödylliseksi havaittu tehokas määrä on 25 välillä 0,5-2 mg/ml, kun formulaatio sisältää 0,1 x 106 -100 x 106 IU/ml alfa-tyyppistä interferonia. Kun formulaatio sisältää 5 x 106 - 50 x 106 IU/ml alfa-2b-interfero-: : nia, käytetty määrä on mieluummin 1,5 mg/ml m-kresolia.

; ,·, 30 Hyödylliseksi havaittu tehokas fenolimäärä on välillä 0,5 // - 5 mg/ml, kun liuosformulaatio sisältää 0,1 x 106 - 100 x 106 IU/ml alfa-tyyppistä interferonia.

Metyyliparabeenin vaikuttava määrä on välillä 0,6 -35 1,8 mg/ml ja propyyliparabeenin määrä on välillä 0,06 - ‘ 0,18 mg/ml, kun esillä olevan keksinnön mukainen formulaa- tio sisältää 0, 1 x 106 - 100 x 106 IU/ml alfa-tyyppistä interferonia.

11 116558

Kun esillä olevan keksinnön mukainen formulaatio sisältää 0,1 x 106 - 100 x 106 IU/ml alfa-2b-interferonia, on susoi-teltavaa käyttää yhdistelmänä 1,2 mg/ml metyyliparabeeniä ja 0,12 mg/ml propyyliparabeeniä.

5

Vieläkin mieluummin antimikrobiaalisena säilöntäaineena käytetään m-kresolia.

Vesi, jota käytetään esillä olevan keksinnön mukaisten 10 formulaatioiden valmistamiseen, on mieluummin injisointi-vettä.

Kehittäessämme esillä olevan keksinnön mukaisia vesiliuos-formulaatioita, jotka säilyttäisivät alfa-tyyppisen inter-15 feronin biologisen aktiivisuuden sekä kemiallisen että fysikaalisen stabiilisuuden korkeina pitkään säilytettäessä käyttämättä ihmisseerumin albumiinia stabilointiaineena, totesimme, että sorbitaani mono-9-oktadekenoaattipo-ly(oksi-1,2-etaanidiyyli)-johdannaisen, kuten polysorbaat-20 ti 80:n, jota tarvitaan alfa-tyyppisen interferonin stabilointiaineeksi, määrällä oli suora vaikutus siihen antiin mikrobiaalisen säilöntäaineen vaikuttavaan määrään, joka voitiin lisätä vesiliuosformulaatioon aiheuttamatta ei- toivottua samentumista. Tätä antimikrobiaalista säilöntä-25 ainetta lisätään erilaisten maailmanlaajuisten rekisteröintivaatimusten mukaisesti formulaatioon suojaamaan sitä : ” mikrobeilta.

Kun esillä olevan keksinnön formulaatioissa oli parhaana : 30 pidettyä stabilointiainetta, polysorbaatti 80:a, hyvänä pidetty vaikuttava määrä 0,1 mg/ml, hyvänä pidetyn anti-• mikrobiaalisen säilöntäaineen, esimerkiksi m-kresolin, vaikuttavan määrän, joka voitiin lisätä aiheuttamatta formulaatioon samentumista, havaittiin olevan kriittinen.

, 35 Esimerkiksi, jos m-kresolimäärä, joka lisättiin formulaa tioon esimerkissä 3, joka sisälsi 0,1 mg/ml polysorbaatti ’ · 80:a, nostettiin suuremmaksi 1,75 mg/ml, havaittiin samen tumista. Samanlainen samentumisongelma havaittiin, kun 12 116558 polysorbaatti 80:n määrää saadussa formulaatiossa muutettiin välillä 0,01 - 1 mg/ml. Mitään samentumista ei havaittu, kun formulaation, joka oli valmistettu esimerkin 3 mukaisesti ja joka sisälsi 0,1 mg/ml polysorbaatti 80:a, 5 lisättiin m-kresolia 1,75 mg/ml tai vähemmän, mieluummin noin 1,5 mg/ml. Tämä kriittisyys havaittiin myös parabee-neillä ja fenolilla, kun näitä käytettiin antimikrobiaali-sina säilöntäaineina. Esillä olevan keksinnön formulaa-tioilla, jotka sisältävät 0,01 - 1 mg/ml polysorbaatti 10 80:a, metyyliparabeenin vaikuttavan määrän tulisi olla enintään noin 1,2 mg/ml, kun sen kanssa käytetään 0,12 mg/ml propyyliparabeeniä, jotta samentuminen vältettäisiin, ja fenolin (kun sitä käytetään parabeenien asemasta) vaikuttavan määrän tulisi olla välillä 0,5 - alle noin 4 15 mg/ml samentumisen välttämiseksi.

Alfa-tyyppisen interferonin formulaatiot ovat hyödyllisiä, kun hoidetaan monia erilaisia tautitilojen, kuten munuais-solukarsinoomat, AIDS'iin liittyvä Kapos'in sarkooma, 20 krooninen ja akuutti hepatiitti B, krooninen ja akuutti non-A, non-B/C-hepatiitti. Esillä olevan keksinnön mukai-: set formulaatiot ovat hyödyllisiä hoidettaessa näitä . tautitiloja, mieluummin injisoitavina vesiliuoksina.

25 ESIMERKIT

Seuraavat ei-rajoittavat esimerkit havainnollistavat alfa-: tyyppisten interferonien vesiliuosten valmistamista.

30 Esimerkkien 1-5, jotka ovat esillä olevan keksinnön mukaisia, formulaatioiden valmistamiseen käytetään esimer-Γ kin 5 jälkeen annettuja menetelmiä.

35 13 116558 ESIMERKKI 1

Aktiivinen aine: Alfa-2b-interferoni 0,1 x 106-100 x 106 IU/ml*

5 Puskuri: Natriumfosfaatti (yksi- 0,005-0,1 M

emäksinen/kaksiemäksinen

Kelatointiaine: Dinatriumedetaatti 0,01 - 1 mg/ml

Stabilointiaine: Polysorbaatti 80 0,01 - 1 mg/ml

Toonisuuden 10 säätöaine: Natriumkloridi 1-9 mg/ml

Antimikrobiaali- nen säilöntöaine: m-kresoli 0,5-1,75 mg/ml tai fenoli 0,5 - <4 mg/ml tai metyyliparabeeni 0,6 - 1,2 mg/ml 15 propyyliparabeeni 0,06-0,12 mg/ml

Liuotin: Injisointivesi q.s. ad 1 ml * IU-kansainvälinen yksikkö ESIMERKKI 2 20

Alfa-2b-interferoni 10 x 106 IU/ml : Kaksiemäksinen natriumfosfaatti, vedetön 1,8 mg/ml : ; Yksiemäksinen natriumfosfaatti, monohydraatti 1,3 mg/ml _ ; 25 Dinatriumedetaatti 0,1 mg/ml

Polysorbaatti 80 0,1 mg/ml

Metyyliparabeeni 1,2 mg/ml ‘ Propyyliparabeeni 0,12 mg/ml

Natriumkloridi 7,5 mg/ml : : : 30 Injisointivesi q.s. ad 1 ml ESIMERKKI 3

Alfa-2b-interferoni 10 x 106 IU/ml 35 Kaksiemäksinen natriumfosfaatti, vedetön 1,8 mg/ml ,·. : Yksiemäksinen natriumfosfaatti, monohydraatti 1,3 mg/ml

Dinatriumedetaatti 0,1 mg/ml 14 116558

Polysorbaatti 80 0,1 mg/ml m-kresoli 1,5 mg/ml

Natriumkloridi 7,5 mg/ml

Injisointivesi q.s. ad 1 ml 5

Esimerkkejä 2 ja 3 koskevat stabiilisuustiedot on koottu vastaavasti taulukkoihin 1 ja 2.

ESIMERKKI 4 10

Esimerkin 3 formulaatio valmistettiin käyttämällä 6 x 106 IU/ml alfa-2b-interferonia ja jäljempänä yksityiskohtaisesti kuvattua valmistusmenetelmää. Menetelmässä liuos huuhdeltiin typellä ja kaasutilan hapen tilavuutena pidet-15 tiin enintään noin 4 %.

Pulloja, jotka sisälsivät ilmoitettuna tilavuutena 3 ml liuosta, säilytettiin 30°C:ssa, 25°C:ssa ja 4°C:ssa. Tulokset on koottu taulukkoon 3.

20 ESIMERKKI 5

Esimerkin 4 formulaatio valmistettiin jäljempänä yksityiskohtaisesti kuvatulla menetelmällä paitsi, että typpeä ei 25 ajettu liuoksen läpi eikä sitä pidetty liuoksen päällä.

Hapen tilavuus kaasutilassa oli ~20 tilavuus-%, so. kuten ympäröivässä ilmassa.

Pulloja, jotka sisälsivät ilmoitettuna tilavuutena 3 ml :! 30 liuosta, säilytettiin 30°C;ssa, 25°C:ssa ja 4°C:ssa. Tuloksi set on koottu taulukkoon 4.

» !!_ Samankaltaisia tuloksia on odotettavissa, jos alfa-2b- !’ interferoni esimerkeissä 1-5 korvataan yhtä suurella ' 35 määrällä Roferon A, Wellferon tai Sumiferon-alfa-interfe- ,1 ronituotteilla.

> 15 116558 I δ δ δ § § § g > 3ί ο’-^’-ΟΝΟΟ m ^ μ Α ω β /—si “i ’Η ^ ^•Ηΐηο η m η >«· 1» C +J «Μ τ- § ϊ .

c ^ Α - |ϊ 3.

« « J 2 •Η ^ 3 Ο <D ¢0 CM φ U, J2 3 3 Λ '«f -Τ- " ιη 1- ® 10 Μ ·Η "Jj i 1- •5 · 2 "id ä ° -^Isssssssl ό o 3 i. i; ® “ _ o O) 3 « 4-> 2 ΐ h ·η^η -13

Jj Q L? W -H fr3 ^ :3 3 e CM ·η § -S M > rH »

Zl fjjcngio^renoinin-id J1 -h o 3 ^ c\i" cm »-“ n" -m·’ 1-' oi' c

^ 2 £ « 3 ^ ^ ^ ^ ^ ^ » -H

ϋ «S ^ +J

. . 2 co e :.· Ä » ' ^ C ·Η //, ij 3 ; μ jogoooSooj

'·· ai >—!»- 1-▼-▼- r-H

, , . ιμ O

• M ' .

..... (U (0 Tj +J 3 ® . C 3 _ , · -H M Q 1

* ·» I ·Η rH M

,η ,-ι 6 o 0 o O O φ O o : ·1: 7 °' oT o <p 6' o," o .3 s töt» < s~ -s s

* 1 - — '·1—«' »H

: · s a , ’: ·. > • & > <d *;· 6 rj K Ai

...: :S q cd M

... hJ X_, :θ mH

c-ι Ai ’...' -Ä :cd i

. CM 0 ^ M

£ M o«>o>-^CMO

-H AS

•: : < w -x 16 116558 f § § § § § § s ;ί2 a ο 10 n to m co o cm Λ CM CO Τ- U) τ* β m ^

<D

•Η ^ ^ «·2.η σ> c+jcs to h- out

m « CM β *- ▼- CD CO

C * A

•H li M 2 ω Λ Ηβ M S_ w « 5° W Jx5 ^ ^

•H 3 -¾ Λ 80 a — S5 »- O tO

>J 3 ί Λ Jn y- O «-OCM

μ -H Tj » O N CM B T· 0) K o)

6 . -H

•H k, (Λ w r cd * s -s +J i -9 ”3 0 *H_c o to ia ®! ® ή 'S 2 ·§ o o oo Ncoin ^ •h •η-Π'^ — - - — a o> a :(β p o H -h 1 c jjg £ w ä " ^ <5 co e e

S ^ O E 'm °i w. « ® r. ® - -H

5 *h μ 2 ΐ1, r^. co eo o rococo +j 3 -2 ^ « to to co co co w -h 5 « 3 w -j

C rH

•H Q) o W ,¾ ... μ CO O O O OOO n >·· 3 {-50000000°

.. m Κτ- -*-»-»-·»-τ-τ- ,H

! ! ! μ v·"^ <U

0) w . +J 3 ’·* G 3 ^ tn

... -h « C O

. 1 -H b 3 ···· Ja -h S .h ΓΜ rt ^ ^ CO r-l

rt «WMOOOOOOO

<2 £$^--- ----^ 3 >5 2 ti ! ' ' +J * μ 3 ^ *

. , W

* · O Φ : * · o ^ z*'*'*'*'*'* m

* · * s o I y ,H

J °J |0 * Ä 1 3 »ti· *”· o ,·", « ^ CM ΙΛ ° ' ' Λ Jä τ- O β O) τ- r· .»

*·* ·Η M

. C w • » * tl*·» > · 116558 1 7 oocoh-coco^^ifttn^·*· σι o> σ> ω. ω ω βο ω. ω ω ο ω. ο ίϋ 1 (Ο CD Φ CD φ (0(D(D (O CO CD CD C0

Ph ^ o o o co r- « ρ «" r>- r-. o o o o m d' co cb rv oo ui cd rv to to to cd rv co O) σ>σ>σ>σ>σ>σ>σ>σ>ο>ο>σ>σ> <0 /—v

U rH

Ai e £ Oi N SN(DCD(OS(DiniAtN(0 < w ^ · :cd /-n co

CO H

•H (0 cd

Aä C -O

ω M Λ o “I p * cm_ ·*_ ·* rv to co ^ o p s -h :nj o ωβι-'Τ^ιίΐη'ίσιοίτ-τ· -H O i—I *“ O) O) 0) O O O O) O N N Oi O)

to +J

0) -H /-n fr? & O w P -H h—) O c Pn T3 -h K r-s

(1) ·Η 'v-x r—I

!p “ «5, ^ e» p in cm_ rv r*. p n p p hj- M O Oi Ui ^ "M" cd ·ν *- τ- nr V o o cd cd

3 μ a CM CMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCMCM

3 Ph wl

tfl •H

CO rH

•H

O -H

^5 rQ CO (Λ -g 5 g J ω oooooooo^ooo

£ to M 6^ o OOOOOOOOCMOOO

3 -H w *“

Cd C rH

H ·Η cd /-“n

C cd W

0 u Ph ^

M HÖH

<U > w s ;,· *Μ Tj 3 CO 00000000(0000 S c m •»r p o o o o p o o p © p o ; : ti <! « cd cd ω cd (d' <d cd (d <b in' (o <d cd , , c o

•rH »-H

1 x

( * · CN

• I

*; *' i cd -x 4H co ;< °c Β.>Β.ξι>ι>α^αξ ... 3 m i « » Ph cd i · · · § o ^ tn ^ LO h *; . e r 7 S en te , J . O -n 01 1-1

* w ‘2 >7 CO

- ti -PM

• ti tn :0

·;* H rH

.... ^ ft ί>1 ' ' ' m CM ' 1 *;· £ m ύ- η n to ^ > .»» -h as .tr s i ! «< W Γ-Ι li»*» » · 18 116558 rt tn -Η S · tn rt CO COCOCOCOCOCOCOCOCOCOCOCO « > o ooooooooöooo * 0 ο οοοοοοοοοοοο -¾ * ·Η

M rC

+J

CO :cö •γ- ε ·η 1 tn ^ ο m α> S ® f" :ta

ζ Α ο T-CMOCMi-nm'VOOOO C

^ ο ·Η ja y ι +j 3 C li E tn Η , 0) 2 ·Η»ιη »- »- to to to ί- ο 4η

μ rt <Ν CM ωτ-ΝΝΝτ-ίΜΝ^ΟΝΝ JIJ

S m Α γΗ « S α>

2 ίβ JS

• r~C* rM 6 r”1 ^ m ” eo Sinaoi^cnmooor^-T-eo °

.. .h 0 o cm “inNin^TftntDntntvjr- ,H

• « £ 0) » » rC Λ * » · ' ' t m • V] ’« o * ' * c O 2 -••ι ^ s j ;·.. t s |

* -H

11' M

J ί :c0 - >

+J

:0 β - IO 1Λ _ g ^ ^ rt

; *. .s O > j«S

) · I jj w P M

* 1—1 rt *h * · · :0 >4 : : -p

* & I

• :rt

• J CO

' * rt CM

^ ^ CO CO CD *- *«· *H Jq „ i ; <5 ^ ** I | | r * ι t i · I ; · » » » * 1 1 6558 19

m csico»-Nwwwoi25SS

W CO COOOOOCOCOCpflOCOflDOOCpCp

(C> (b(C(DV(Dtt)lob<C(DCDIC

h cnl r-l jl 0 ts-| o Ρϊ0ρ«Γ'·οοοθΓ'·,η© 2 co iioi/iifiNveeeeot μ e» σ>τ-ο>σ>σ>σ>σ>ο>σ>σ>»-ο> as s 1 ^ e g B otoncoot'v-to-r^^ee^ m '-Λ rt -^r tn p ·ν ^ :ΐβ *—s v— r— v y— *— ^»— r~ r“ ^ * T· f* (0

w K

•H M CO

AS 3 :0 S 3 ^

B -H ·§ 0 IflinrrNOIIOlBIII'I^O

•H Ο Ή o ¢¢^^#(08(0^ ri^i- 5 +j T- NN01(nSS!J)tl)0®®0) V »rl /"“N Js^ O U w -h ►j o e Cu Ό -H K r-sl 0) -H v_* r-\ •h ai e m o 'S 10 ριηρρρρ®ωρτ-ρρ 2 M 3 ib triai^rfdoitvNionn

? Pm s_H CM T-»-NNN»-WWT-t-WW

CO

•H

<r «H

•H /"sJ

O »H · as J& m tn ^ rt 3 w S m o oooooooooqtof- 0 -H O O OOOOOOOOOOCVJi-

CtJ C rH Ψ- r-r-r-r-T-r-r-i-i-·'-*-*-

H "H (Q X—S

g <e w 0 M Pm -—.

M *H u rH

« > wle Ή ·Η

H 4J JD

0) C M O OOOOOOOOOO JOO

+J <J VO o ΟΟΟΟΟΟΟΟΟΟΙΛΟ

.5 O tf) U>IBtDlt)cdlD(C(DIOIDNN

fS

n) *

»H CO

r-j O +j ^ a.^a.^CL^CLSa.Sa.^ q So , ifl ^ sfl I ui S ” w J £1 s £

►J

(d ^-\i w -¾ λ T- n n <o *- •H A5 ^ W| 20 116558 td w ,r* il 15 888888888888 ! 5 o oooooooooooo-g

« -H

M ·**

P

« E 3 • ' m 'oj C * • : <r a) S tr f*. :rt

... G Λ A ^-OO<0O^OCMOOO«-G

5 «o n •g eä «i s

"· 3 S g = _ ^ - S

... S ·η G ir O» ^ S »h

c5 cfl es BrrrrMreoiO»·# rH

·:··: a ti a m «m 1 rt ,. rt S ®

• · .* S a -H

: ·· ^3 § n o o *- m o ... 3 •g „ ^ Oj^mSN^rtNN^nT- ... £ c «- eOrtnNIfl^fflNOlNfflf * · · W >3 *- 0)

• 45 A

«« w o : *. e ° -h 3 8 dSdSdSdZoSzjS^ v : 3 2 :§

' Ph 10 +J

* Ή .:. p . :rt >

. " ‘ . P

.., :g w S oi o *

... J o I > M

: : 3 '-Ί C o «n io p ... M rtOrt-OJrt-CM^· 3

• ίΟ HH

·:··: £ , 3 m rt H-J CM u * ·* ^nw® *- ^ ^ -x

<: '—H

21 116558

Valmistusmenetelmä esimerkeille 1-5 A. Esimerkissä 2 esitetvnlaisten parabeenipitoisten vesi-liuosformulaatioiden seostaminen 5 1. Sopivaan vaipalliseen seostusastiaan, joka on varustettu sekoittimella, laitetaan noin 80 % injisointi-vedestä yli 70°C lämpötilassa.

10 2. Toiseen sopivaan astiaan laitetaan erikseen noin 30 % injisointivedestä. Jäähdytetään ja pidetään veden lämpötila välillä 20 ja 25°C. Suodatetulla typellä aletaan huuhdella vettä, jota käytetään panoksen loppu-tilavuuden säätämiseen, pitämällä typpeä myös veden 15 päällä. Tämän typen avulla liuenneen hapen pitoisuu tena pidetään 0,25 ppm tai alle.

.·. 3. Vaiheen 1 seostusastiaan lisätään metyyliparabeeni ja propyyliparabeeni ja auttamalla liukenemista ’ ; 20 sekoittamalla. Samalla liuoksen lämpötila pidetään välillä 70°C ja 80°C.

* · .* ’* 4. Vaiheen 3 liuos jäähdytetään 20°C ja 25°C väliseen V : lämpötilaan. Liuos suodatetaan typellä pitämällä myös 25 sen päällä typpeä. Liuenneen hapen pitoisuutena pide- tään 0,25 ppm tai alle.

I | t 5. Vaiheen 4 liuokseen lisätään seuraavat ainesosat, ·;;; jolloin liukenemista autetaan sekoittamalla ja '···* 30 jatketaan typellä huuhtelemista ja peittämistä: • · · • · « · «

Kaksiemäksinen natriumfosfaatti, vedetön Yksiemäksinen natriumfosfaatti, monohydraatti Dinatriumedetaatti 35 Natriumkloridi 6. Typen ajo vaiheen 5 liuoksen läpi lopetetaan. Seostus- 22 116558 astiassa pidetään seoksen päällä typpikerros.

7. Erilliseen astiaan laitetaan polysorbaatti 80:a noin 50 ml:ssa injisointivettä (panoksen koko 1 litra) ja 5 liuotetaan.. Polysorbaatti 80-liuos siirretään vaiheen 6 liuokseen.

8. Tarkistetaan liuoksen pH. Sen tulisi olla välillä 6,6 ja 7,0. Mitään pH-arvon säätöä ei tarvita.

10 9. Alfa-2b-interferonin perusliuos lisätään sekoittaen vaiheen 8 liuokseen.

10. Panos säädetään lopputilavuuteensa lisäämällä 15 injisointivettä, joka on huuhdeltu typellä (vai heesta 2). Liuosta sekoitetaan varovasti, kunnes se on homogeeninen.

11. Liuos suodatetaan aseptisesti steriloidun suodattimen • · · I 20 läpi, joka on pesty ja jonka eheys on tarkistettu.

" *. Steriloitu liuos kerätään steriloituun täyttöastiaan, * ’ jossa on steriiliä suodatettua typpeä. Suodattimen : ** eheys testataan suodatuksen jälkeen.

» · · 25 12. Vaiheen 11 täyttöastia täytetään steriilillä suodate- j '.. tulla typellä ja astia suljetaan.

• t · t » · B. Esimerkin 3 kaltaisten, m-kresolia sisältävien vesi-liuosformulaatioiden seostaminen 30 : : Valmistustapa, jota käytettiin säilöntäaineena m-kresolia *:··: sisältävien vesiliuosten valmistamiseen (kuten esimerkissä 3), on täsmälleen sama kuin mitä edellä on kuvattu paitsi, että liuoksen lämpötila vaiheessa 3 pidetään välillä 20°C 35 ja 25°C ja m-kresoli lisätään vaiheen 6 jälkeen.

23 116558 C. Ihmisseerumin albumiinia sisältämättömän alfa-interferonin vesiliuosformulaatioiden seostaminen normaalin ilman alla 5 Valmistustapa,, jota käytettiin esimerkkien 1-4 mukaisten, ihmisseerumin albumiinia sisältämättömien alfa-interferonin vesiformulaatioiden valmistamiseen, käytettiin esimerkin 5 kaltaisten formulaatioiden valmistamiseen paitsi, että kaikki vaiheet tehtiin normaalin ilman alla; 10 mitään typpeä ei ajettu liuoksen läpi tai pidetty sen päällä, vaan kaasutilassa oli tavallista ilmaa (joka normaalisti sisältää noin 20 tilavuus-% happea).

Kemiallisen, fysikaalisen ja biologisen stabiilisuuden 15 pitämiseksi korkeina on suositeltavaa, että alfa-interferonin vesiliuoksen valmistamiseen käytetty vesi sekä näin muodostettu alfa-interferonin vesiliuos eivät oleellisesti .·. sisällä liuennutta happea, ja että vesiliuos tehdään ja • ^ säilytetään niin, että kaasutilassa on inerttiä kaasua, tl» ! 20 kuten typpeä, joka sisältää happea enintään noin 4 tila- " *# vuus-%. Ilmaisulla "ei sisällä oleellisesti liuennuta j * happea" tarkoitetaan tässä yhteydessä, että happipitoisuus • ** on enintään noin 0,25 ppm, kun veden lämpötila on noin V · 20 - 25°C. Tähän hyvänä pidettyyn liuenneen hapen 0,25 ppm 25 pitoisuuteen päästään helposti ajamalla veteen, jota : käytetään vesiliuosten valmistamiseen (ja jota pidetään noin 20 - 25°C:ssa), inerttiä kaasua, esimerkiksi typpi- *. kaasua niin kauan (esimerkiksi noin 30 minuuttia), että • · · liuenneen hapen pitoisuus putoaa arvoon, joka on enintään j **; ··· 30 noin 0,25 ppm. Huuhtelua jatketaan koko valmistuksen ajan, : jotta liuenneen hapen pitoisuus pysyisi 0,25 ppmtssa.

·:··· Olemme havainneet, että esillä olevan keksinnön mukaisissa vesiformulaatioissa, joissa liuenneen hapen pitoisuus oli 1 ppm ja hapen pitoisuus kaasutilassa oli 7 tilavuus-%, 35 alfa-interferonin kemiallinen stabiilisuus sen jälkeen, kun formulaatioita oli säilytetty 3 kuukautta 25°C:ssa, oli laskenut merkitsevästi enemmän kuin samanlaisessa 24 116558 vesiformulaatiossa, jossa liuenneen hapen pitoisuus oli hyvänä pidetty 0,25 ppm ja happipitoisuus kaasutilassa oli 4 tilavuus-% ja jota oli säilytetty samoissa olosuhteissa.

5 Alfa-2b-interferoniliuoksen stabiilisuusarvojen, jotka on esitetty taulukoissa 3 ja 4, rinnalla tehty vertailu osoittaa, että esillä olevan keksinnön mukaisten vesi-liuosformulaatioiden, jotka valmistettiin esimerkissä 4 käytetyissä typpi- ja happiolosuhteissa, ja formulaatioi-10 den, jotka valmistettiin esimerkin 5 mukaisesti normaalin ilman alla, stabiilisuudessa ei ollut mitään merkitsevää eroa säilytettäessä 12 kuukautta 4°C:ssa. Sitä vastoin alfa-2b-interferonin stabiilisuuden vertailu esimerkkien 4 ja 5 liuoksissa, joita oli säilytetty korkeammissa lämpö-15 tiloissa, esimerkiksi 25°C:ssa ja 30°C:ssa, antaa tulokseksi suojaavan vaikutuksen, joka saavutetaan käyttämällä hyvänä pidetyllä (turvallisemmalla) tavalla typpihuuhte-,·, lua, jolla päästään alhaisiin liuenneen hapen pitoisuuk-

t ( I

!'! siin vesiliuoksessa ja samanaikaisesti pidetään happipi- • · · • · · ·· ·.

* ; 20 toisuus kaasutilassa enintään noin 4 tilavuus-%:ssa.

«i1 2 3 4 • « ♦ ’ Esillä olevan keksinnön mukaisia vesiliuosformulaatioita 2 a » 3 i 1" voidaan säilyttää missä tahansa sopivissa pestyissä ja ’ steriloiduissa täyttöastioissa tai säiliöissä, kuten 25 tyypin 1 2 ml tai 5 ml piilasipulloissa, jotka on suljettu harmailla butyylikumitulpilla. Esillä olevan keksinnön mukaisia vesiliuosformulaatioita voidaan myös säilyttää \ esitäytetyissä moniannosruiskuissa, kuten ruiskuissa, 4 joita voidaan käyttää sellaisten lääkeaineiden, kuten 30 insuliinin injisoitavien liuosten antamiseen. Tyypillisiä < ’ 1 1: sopivia ruiskuja ovat ruiskut, jotka muodostuvat kynätyyp- a a a piseen ruiskuun kiinnitetystä esitäytetystä pullosta, kuten Nvo Nordisk-yhtiöltä saatavissa oleva Novolet Novo Pen. Tyypillisiin sopiviin ruiskujärjestelmiin kuuluu 35 esitäytetty, kynätyyppinen ruisku, jonka käyttäjä voi helposti itse injisoida ja jossa annostus on merkitty tarkkaan ja toistettavalla tavalla.

25 116558

Esillä olevan keksinnön mukaiset vesiliuosformulaatiot, esimerkiksi esimerkeissä esitetyssä muodossa, voidaan myös lyofilisoida niin, että ne muodostavat uudelleen rekonsti-tuoitaviksi tarkoitetun jauheen. Alfa-tyyppisen interfero-5 nin lyofilisoidun jauheen voidaan olettaa säilyttävän kemiallisen ja biologisen stabiilisuutensa, kun sitä säilytetään vähintään 2 vuotta 2 - 8°C:ssa.

• ♦ * · · > · « i · ! f » 1 » I • · * * * 2 » > · * • · > * * * · · * I · ) t » * · · I > I illt * » · « * · • > · ta • ·

Claims

116558

1. Stabiili vesiformulaatio, jossa alfa-tyyppisen interferonin biologinen aktiivisuus on korkea ja joka ei sisällä 5 ihmisverestä peräisin olevia tuotteita, tunnettu siitä, että se sisältää: a. 0,1 x 106 - 100 x 10s IU/ml alfa-tyyppistä interferonia; b. puskurisysteemiä, joka pitää pH-arvon välillä 4,5 - 10 7,1; c. vaikuttavan määrän kelatointlainetta; d. stabilisaattoria, joka on valittu polysorbaatti 20:stä ja polysorbaatti 80:sta, määrän, joka riittää stabiloimaan alfa-tyyppisen interferonin hävikkiä vastaan; 15 e. vaikuttavan määrän toonisuusainetta; f. vaikuttavan määrän antimikrobiaalista säilöntäainetta; ja g. injisointivettä määrän, joka riittää edellä mainittujen ainesosien liuoksen valmistamiseen; 20 jolloin mainittu formulaatio ei sisällä mannitolimäärää, joka toimii tehokkaasti bulkkiaineena, kun stabilisaattori on polysorbaatti 20.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen seos, tunnettu siitä, että puskurijärjestelmä on kaksiemäksinen natriumfosfaatti ja yksiemäksinen natriumfosfaatti.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen seos, tunnettu siitä, 30 että kelatointiaine on dinatriumedetaatti tai sitruuna- happo .

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen seos, tunnettu siitä, että toonisuusaine on natriumkloridi. 35

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen seos, tunnettu siitä, 116558 että mainittu säilöntäaine on valittu m-kresolista, fenolista, metyyliparabeenistä, propyyliparabeenistä tai näiden seoksista.

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen seos, tunnettu siitä, että alfa-tyyppinen interferoni on alfa-2-interferoni.

7. Stabiili vesiliuosformulaatio, jossa alfa-2-interfero-nin biologinen aktiivisuus on korkea ja joka ei sisällä 10 ihmisseerumin albumiinia, tunnettu siitä, että sen koostumus on: mg/ml a. alfa-2-interferoni 5 x 106 - 50 x 106 IU 15 b. kaksiemäksinen natriumfosfaatti, vedetön 1,8 c. yksiemäksinen natriumfosfaatti, 1,3 monohydraatti d. dinatriumdivetyeetyleenidiamiini- 0,1 tetra-asetaatti 20 e. stabilisaattori valittuna polysorbaatti ; 20:stä ja polysorbaatti 80:sta 0,1 f. metyyliparabeeni 1,2 g. propyyliparabeeni 0,12 h. natriumkloridi, ja 7,5 25 i. injisointivesi q.s. ad 1 ml ·’ * 8. Stabiili vesiliuosformulaatio, jossa alfa-2-interfero- nin biologinen aktiivisuus on korkea ja joka ei sisällä • « I ihmisseerumin albumiinia, tunnettu siitä, että sen 30 koostumus on: , ,·, mg/ml ,···, a. alfa-2-interferoni 5 x 106 - "* 50 x 106 IU * b. vedetön kaksiemäksinen natriumfosfaatti 1,8 ·.’· 35 c. yksiemäksinen natriumfosfaatti, 1,3 monohydraatti 116558 d. dinatriumdivetyetyleenidiamiini- 0,1 tetra-asetaatti e. stabilisaattori valittuna polysorbaatti 20:stä ja polysorbaatti 80:sta 0,1 5 f. m-kresoli 1,5 g. natriumkloridi; ja 7,5 h. injisointivesi q.s. ad 1 ml

9. Tuote, tunnettu siitä, että se muodostuu pakkauksesta 10 ja jonkin edellä olevan patenttivaatimuksen 1-8 mukaisesta formulaatiosta, ja että pakkaus on moniannoksinen lasipullo.

10. Tuote, tunnettu siitä, että se muodostuu esitäytetystä 15 ruiskusta, joka sisältää vaikuttavan määrän jonkin patenttivaatimuksen 1-8 mukaista formulaatiota.

11. Tuote, tunnettu siitä, että se muodostuu pakkauksesta ja jonkin patenttivaatimuksen 1-8 mukaisesta formulaa- 20 tiosta, ja että pakkaus on yksiannoksinen pullo.

12. Menetelmä stabiilin vesiformulaation, jossa alfa-tyyppisen interferonin biologinen aktiivisuus on korkea ja joka ei sisällä ihmisverestä peräisin olevia tuotteita, ;·. 25 valmistamiseksi, tunnettu siitä, että sekoitetaan keske- » ,·;* nään vaikuttava määrä alfa-tyyppistä interferonia, pusku rijärjestelmää, joka kykenee pitämään pH-arvon välillä 4,5 , , - 7,1, kelatointiainetta, stabilisaattoria, joka on valit- ;;/ tu polysorbaatti 20:sta ja polysorbaatti 80:sta, tooni- i * 30 suusainetta, antimikrobiaalista säilöntäainetta ja niin : paljon vettä, että saadaan vesiliuos, jossa kun stabili- saattori on polysorbaatti 20, menetelmä suoritetaan siten, että se ei sisällä mannitolimäärää, joka on tehokas * i * ; , toimimaan bulkkiaineena. :-''i 35

13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, tunnettu 116558 siitä, että vesiliuos valmistetaan ja säilytetään oleellisesti niin, että liuennutta happea ei ole mukana.

14. Patenttivaatimuksen 13 mukainen menetelmä tunnettu 5 siitä, että liuennutta happea ei ole enempää kuin 0,25 ppm.

15. Patenttivaatimuksen 13 tai 14 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että vesiliuoksen yläpuolisessa tilassa on 10 inertti ilmakehä, joka ei sisällä happea enempää kuin 4 tilavuus-%.

16. Steriloitu täyttöastia, joka sisältää jonkin patenttivaatimuksen 12 - 15 mukaisella menetelmällä saatavaa for- 15 mulaatiota. 20

4. I * » « * » · I · * i · ) * · I I · s i a · I k II· > » » ·