ES2769648T3 - Nuevos compuestos como inhibidores duales de histona metiltransferasas y ADN metiltransferasasASAS - Google Patents

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Abstract

Un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I) o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables**Fórmula** en donde: R1 es Cy2', o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3'; en donde Cy2' está opcionalmente sustituido con: a) un Cy4; y/o b) uno o más sustituyentes Rb, y/o c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4; en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y en donde Cy3' está opcionalmente sustituido con: a) un Cy5; y/o b) uno o más sustituyentes Rb, y/o c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5; en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; R2 es un sistema anular conocido unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y seleccionado entre el grupo que consiste en: (i) fenilo; (ii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros; (iii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros; (iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros; (v) fenilo condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados; y (vi) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espirocondensados; en donde R2 está opcionalmente sustituido con: a) un Cy1 o un Cy2, y/o b) uno o más sustituyentes Rb, y/o c) uno o más sustituyentes Z1 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy1; en donde Cy1 o Cy2 están opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; R3 se selecciona entre Rc, halógeno, -NO2, -CN, -ORc', -OC(O)Rc', -OC(O)ORc', -OC(O)NRc'Rc', - NRc'Rc', -NRc'C(O)Rc', -NRc'C(O)ORc', -NRc'C(O)NRc'Rc', -NRc'S(O)2Rc', -NRcSO2NRcRc', -SRc', -S(O)Rc', - S(O)ORc', -SO2Rc', -SO2(ORc), -SO2NRc'Rc', -SC(O)NRc'Rc', -C(O)Rc', -C(O)ORc', -C(O)NRc'Rc', y -C(O)NRc'ORc', y -C(O)NRcSO2Rc'; R4 se selecciona entre -ORa y -NRaRc'; cada Ra es independientemente Cy2, o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3; en donde Cy2 está opcionalmente sustituido con: a) un Cy4; y/o b) uno o más sustituyentes Rb, y/o c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4; en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y en donde Cy3 está opcionalmente sustituido con: a) un Cy5; y/o b) uno o más sustituyentes Rb, y/o c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5; en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; cada Rb se selecciona independientemente entre halógeno, -NO2, -CN, -ORc', -OC(Y)Rc', - OC(Y)ORc', -OC(Y)NRc'Rc', -NRc'Rc', -NRc'C(Y)Rc', -NRc'C(Y)ORc', -NRc'C(Y)NRc'Rc', -NRc'S(O)2Rc', - NRc'SO2NRc'Rc', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc', -SO2Rc', -SO2(ORc'), -SO2NRc'Rc', -SC(Y)NRc'Rc', -C(Y)Rc', -C(Y)ORc', -C(Y)NRc'Rc', -C(Y)NRc'ORc', y -C(O)NRc'SO2Rc'; cada Rc' es independientemente H o Rc; cada Rc se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(C1-C6), alquenilo(C2-C6), alquinilo(C2-C6), cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces, y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, en donde cada Rc está opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno, Y es O, S o NRc'; 30 Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6 y Z7 se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(C1-C12), alquenilo(C2-C12), alquinilo(C2-C12), y cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces; Cy1, Cy4 y Cy5 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, saturado o parcialmente insaturado; y anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros; Cy2 y Cy3 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros; Cy2' y Cy3' son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros; en donde en los anillos carbocíclicos todos los miembros del anillo son átomos de carbono; y en los anillos heterocíclicos y heteroaromáticos uno o más miembros del anillo se seleccionan entre N, O y S; y en donde en todos los anillos saturados o parcialmente insaturados uno o dos miembros de los anillos son opcionalmente C(O) y/o C(NH) y/o C[Nalquil(C1-C4)].

Description

DESCRIPCIÓN
Nuevos compuestos como inhibidores duales de histona metiltransferasas y ADN metiltransferasas
La presente invención se refiere a derivados de 4-aminoquinolina, que son inhibidores duales de histona metiltransferasas y ADN metiltransferasas. También se refiere a composiciones farmacéuticas o veterinarias que los contienen, y a su uso en medicina, en particular como agentes anticancerígenos.
ANTECEDENTES EN LA TÉCNICA
En los últimos años, se ha demostrado que el cáncer es una enfermedad genética y epigenética, donde las alteraciones epigenéticas y genéticas interactúan recíprocamente para impulsar el desarrollo del cáncer. Sin embargo, a diferencia de las mutaciones genéticas, los cambios epigenéticos son reversibles y, como tales, los fármacos que restablecen el equilibrio epigenético representan emocionantes objetivos terapéuticos potenciales para el cáncer. La epigenética se refiere a los cambios heredables en los patrones de expresión génica que ocurren independientemente de alteraciones en la secuencia primaria de ADN. Los principales mecanismos epigenéticos son la metilación del ADN y las modificaciones covalentes de histonas, que desempeñan papeles importantes en la regulación de la transcripción.
G9a, también conocido como EHMT2, es una histona metiltransferasa que mono y dimetila la lisina 9 de la histona H3 (H3K9me1 y H3K9me2, respectivamente).
La expresión de G9a es alta en muchos tipos de cáncer en comparación con el tejido normal. El análisis del transcriptoma del cáncer ha revelado una alta expresión en muchos tumores incluyendo hepatocelular, colon, próstata, pulmón y carcinomas de células de transición invasivas y en leucemia de linfocitos B linfocítica crónica. En varios pacientes con carcinoma de vejiga y pulmón humanos, la expresión de G9a está regulada positivamente (Shankar SR. et al., Epigenetics, 2013. 8(1): pág. 16-22). La supresión génica de G9a en las líneas celulares de cáncer de vejiga y pulmón causó supresión del crecimiento y apoptosis. Estudios en cáncer de próstata corroboran además su papel en la carcinogénesis, donde la regulación negativa de G9a causa alteración del centrosoma, inestabilidad cromosómica, inhibición del crecimiento celular y aumento de la senescencia celular en células cancerígenas. En cáncer de pulmón agresivo, los altos niveles de G9a correlacionan con mala prognosis con aumento de migración celular e invasión in vitro y metástasis in vivo. G9a también se expresa positivamente en adenocarcinoma pancreático y la inhibición de G9a induce senescencia celular en este tipo de cáncer. En modelos de ratón de leucemia mieloide aguda, la pérdida de G9a retrasa significativamente el progreso de la enfermedad y reduce la frecuencia de células madre con leucemia.
La metilación del ADN es una modificación epigenética que modula la expresión génica sin alterar la secuencia de bases del ADN y juega un papel crucial en el cáncer al silenciar los genes supresores de tumores. Las ADN metiltransferasas (DNMT) son las enzimas que catalizan la metilación del ADN. DNMT1 codifica la metiltransferasa de mantenimiento y DNMT3A y DNMT3B codifican metiltransferasa nueva.
DNMT1 y DNMT3A/3B se sobreexpresan en diversos tipos de cáncer tales como mama, gástrico, páncreas, próstata, hepatocelular, ovario, renal, retinoblastoma, glioma o linfoma de linfocitos B macrocítico difuso. Zebularina, decitabina y azacitidina inhiben la proliferación celular e inducen apoptosis en leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloide aguda, carcinoma hepático, cáncer de pulmón, mama, gástrico o cervical entre otros (Vilas-Zornoza A. et al., PLoS ONE, 2011,6(2): p. e17012). Decitabina está aprobada en la actualidad para síndrome mielodisplásico por la Administración de alimentos y fármacos de Estados Unidos.
Sin embargo, se han realizado numerosos esfuerzos para desarrollar nuevos inhibidores no nucleósidos para superar los límites de estos azanucleósidos, tales como inestabilidad química e incorporación al ADN por actividad.
Se ha descrito una serie de derivados de quinazolina como potentes inhibidores selectivos de G9a/GLP, tales como N-(1-bencil-4-piperidil)-6,7-dimetoxi-2-(4-metil-1,4-diazepan-1-il)quinazolin-4-amina (también conocido como BIX01294), 2-ciclohexil-N-(1-isopropil-4-piperidil)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)quinazolin-4-amina (también conocido como UNC0638), y 2-(4,4-difluoro-1-piperidil)-N-(1-isopropil-4-piperidil)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)quinazolin-4-amina (también conocido como UNC0642). Sin embargo, estas moléculas presentan actividad frente a DNMT a valores de CI50 micromolares elevados como máximo. Así, para el compuesto BIX01294 se ha informado una inhibición de 35 ± 8 % frente a DNMT1 y una inhibición de 12 ± 3 % frente a DNMT3A a 100 pM, que correspondería a valores de CI50 >100 pM frente a DNMT1 y DNMT3A, respectivamente (Rotili D. et al., PLoS o N e , 2014. 9(5): p. E96941). Para el compuesto UNC0638 se ha informado un valor de CI50 de 107±6 pM frente a DNMT1 (Vedadi M. et al., Nat. Chem. Biol. 2011, 7, pág. 566-574), mientras que para el compuesto UNC0642, se ha descrito un valor in vitro de CI50 > 50 pM frente a DNMT1 (Liu F. et al., J. Med. Chem. 2013, 56(21), pág. 8931-42).
El documento WO2011054433 desvela derivados de hetarilaminoquinolina como inhibidores de la quinasa receptora TGF-beta que se pueden emplear para tratamiento de tumores. El documento WO2003055866 desvela compuestos derivados de quinazolina y quinolina como inhibidores de prolilpeptidasa, inductores de apoptosis y agentes de tratamiento de cáncer.
Todavía existe la necesidad de desarrollar compuestos que muestren una actividad mejorada en el tratamiento y/o prevención de cáncer.
RESUMEN DE LA INVENCIÓN
Los inventores han descubierto nuevos compuestos que tienen un núcleo de 4-aminoquinolina que pueden inhibir tanto la histona metiltransferasa G9a como una o más ADN metiltransferasas (DNMT, incluyendo DNMT1, DNMT3A y/o DNMT3B) como se demuestra mediante los ejemplos de la invención. Por tanto estos compuestos son inhibidores duales de G9a y DNMT y podrían ser útiles para el tratamiento y/o prevención de cáncer.
Respecto a su uso en cáncer, los compuestos de la invención tienen la ventaja de que se dirigen a dos dianas diferentes de las que, en ensayos in vitro, ensayos basados en células o en modelos animales, han probado ser útiles para el tratamiento de cáncer. El hecho de que los compuestos de la presente invención tienen un impacto en dos eventos fisiopatológicos, puede conducir a un tratamiento más efectivo.
Un primer aspecto de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I) o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables
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en donde:
R1 es Cy2', o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3';
en donde Cy2' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R2 es un sistema anular conocido unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y seleccionado entre el grupo que consiste en: (i)
(i) fenilo;
(ii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros;
(iii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(v) fenilo condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados; y
(vi) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espirocondensados;
en donde R2 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy1 o un Cy2 , y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z1 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy1 ;
en donde Cy1 o Cy2 están opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R3 se selecciona entre Rc, halógeno, -NO2 , -CN, -ORc ', -OC(O)Rc ', -OC(O)ORc ', -OC(O)NRc 'Rc ', -NRc 'Rc ', -NRc 'C(O)Rc ', -NRc 'C(O)ORc ', -NRc 'C(O)NRc 'Rc ', -NRc 'S(O)2 Rc ', -NRc 'SO2 NRc 'Rc ', -SRc ', -S(O)Rc ', -S(O)ORc ', -SO2 Rc ', -SO2(ORc'), -SO2 NRc'Rc', -SC(O)NRc'Rc', -C(O)Rc', -C(O)ORc', -C(O)NRc'Rc', y -C(O)NRc'ORc', y -C(O)NRc'SO2 Rc';
R4 se selecciona entre -ORa y -NRaRc ';
cada Ra es independientemente Cy2 , o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 ; en donde Cy2 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4 ; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4 ;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5 ; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5 ;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
cada Rb se selecciona independientemente entre halógeno, -NO2 , -CN, -ORc ', -OC(Y)Rc ', -OC(Y)ORc ', -OC(Y)NRc 'Rc ', -NRc 'Rc ', -NRc'C(Y)Rc', -NRc'C(Y)ORc', -NRc'C(Y)NRc'Rc', -NRc'S(O)2 Rc', -NRc'SO2 NRc'Rc', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc', -SO2 Rc', -SO2(ORc'), -SO2 NRc'Rc', -SC(Y)NRc'Rc', -C(Y)Rc', -C(Y)ORc', -C(Y)NRc'Rc', -C(Y)NRc'ORc', y -C(O)NRc'SO2 Rc';
cada Rc ' es independientemente H o Rc ;
cada Rc se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(C1 -C6), alquenilo(C2-C6), alquinilo(C2-C6), cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces, y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, en donde cada Rc está opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno,
Y es O, S o NRc ';
Z1 , Z2 , Z3 , Z4 , Z5 , Z6 y Z7 se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(C1 -C12 ), alquenilo(C2-C12 ), alquinilo(C2-C12 ), y cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces;
Cy1 , Cy4 y Cy5 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, saturado o parcialmente insaturado; y anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros;
Cy2 y Cy3 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
Cy2' y Cy3' son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
en donde en los anillos carbocíclicos todos los miembros del anillo son átomos de carbono; y en los anillos heterocíclicos y heteroaromáticos uno o más miembros del anillo se seleccionan entre N, O y S; y en donde en todos los anillos saturados o parcialmente insaturados uno o dos miembros de los anillos son opcionalmente C(O) y/o C(NH) y/o C[Nalquil(Ci-C4)].
Un segundo aspecto de la invención se refiere a una composición farmacéutica o veterinaria que comprende una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I) como se ha definido anteriormente, o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero del compuesto de fórmula (I) o de su sal farmacéutica o veterinariamente aceptable, junto con uno o más excipientes o vehículos farmacéutica o veterinariamente aceptables.
Un tercer aspecto de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I'), o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables
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para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por la inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde:
R1 es Cy2', o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3';
en donde Cy2' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R2' está unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y se selecciona entre el grupo que consiste en Cy6, y Z8; en donde cada Z8 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy7;
en donde Cy6 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy1 o un Cy2, y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z1 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy1;
en donde Cy1 o Cy2 están opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
en donde Cy7 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy8; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z9 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy8;
en donde Cy8 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z10 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R3 se selecciona entre H, Rc , halógeno, -NO2 , -CN, -ORc ', -OC(O)Rc ', -OC(O)ORc ', -OC(O)NRc'Rc', -NRc 'Rc ', -NRc 'C(O)Rc ', -NRc 'C(O)ORc ', -NRc 'C(O)NRc 'Rc ', -NRc 'S(O)2 Rc ', -NRc 'SO2 NRc 'Rc ', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc ', -SO2 Rc', -SO2(ORc ), -SO2 NRc'Rc', -SC(O)NRc'Rc' -C(O)Rc', -C(O)ORc', -C(O)NRc'Rc' , y -C(O)NRc'ORc', y -C(O)NRc'SO2 Rc';
R4 se selecciona entre -ORa y -NRaRc ';
cada Ra es independientemente Cy2 , o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 ; en donde Cy2 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4 ; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4 ;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5 ; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5 ;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
cada Rb se selecciona independientemente entre halógeno, -NO2 , -CN, -ORc ', -OC(Y)Rc ', -OC(Y)ORc ', -OC(Y)NRc 'Rc ', -NRc 'Rc ', -NRc'C(Y)Rc', -NRc'C(Y)ORc', -NRc'C(Y)NRc'Rc', -NRc'S(O)2 Rc', -NRc'SO2 NRc'Rc', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc', -SO2 Rc', -SO2(ORc ), -SO2 NRc'Rc', -SC(Y)NRc'Rc', -C(Y)Rc', -C(Y)ORc', -C(Y)NRc'Rc', -C(Y)NRc'ORc', y -C(O)NRc'SO2 Rc';
cada Rc ' es independientemente H o Rc;
cada Rc se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(C1 -C6), alquenilo(C2-C6), alquinilo(C2-C6), cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces, y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, en donde cada Rc está opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno,
Y es O, S o NRc';
Z1 , Z2 , Z3 , Z4 , Z5 , Z6 , Z7 , Z8 , Z9 y Z10 se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(Cr C12 ), alquenilo(C2-C12 ), alquinilo(C2-C12 ), y cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces;
Cy1, Cy4, Cy5 y Cy8 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, saturado o parcialmente insaturado; y anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros;
Cy2, Cy3 y Cy7 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espirocondensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
Cy2' y Cy3' son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
Cy6 es un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros;
(iii) anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado;
(iv) anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclicos saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(v) fenilo condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados; y
(vi) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espirocondensados;
en donde en los anillos carbocíclicos todos los miembros del anillo son átomos de carbono; y en los anillos heterocíclicos y heteroaromáticos uno o más miembros del anillo se seleccionan entre N, O y S; y en donde en todos los anillos saturados o parcialmente insaturados uno o dos miembros de los anillos son opcionalmente C(O) y/o C(NH) y/o C[Nalquil(C1-C4)].
Así, el tercer aspecto de la invención se refiere al uso de un compuesto de fórmula (I') como se ha definido anteriormente, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de cáncer; y también puede formularse como un método para el tratamiento y/o prevención de cáncer, que comprende administrar una cantidad efectiva del compuesto de fórmula (I') definido previamente, o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables, y uno o más excipientes o vehículos farmacéutica o veterinariamente aceptables, en un sujeto con necesidad del mismo, incluyendo un ser humano.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS
La Figura 1 representa la curva de supervivencia en ratones tratados con el compuesto 3-04 (línea discontinua) y en grupos de control (línea continua) en un modelo en ratón de B-ALL humana. El eje Y corresponde a la probabilidad de supervivencia (SP)%. El eje X corresponde a los días (T: tiempo) después de la inoculación de células tumorales.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
Todos los términos como se usan en la presente solicitud, a menos que se indique lo contrario, se entenderán en su significado habitual, como se conoce en la técnica. Otras definiciones más específicas para determinados términos como se usan en la presente solicitud son las que se establecen a continuación y tienen por objeto aplicarse de manera uniforme a lo largo de la memoria descriptiva y las reivindicaciones, a menos que una definición expresamente establecida proporcione una definición más amplia.
La expresión sistema anular "carbocíclico" se refiere a un sistema anular conocido en donde todos los miembros del anillo contienen átomos de carbono. La expresión sistema anular "heterocíclico" se refiere a un sistema anular conocido en donde uno o más de los miembros del anillo, preferentemente 1, 2, 3 o 4 miembros del anillo, se seleccionan entre NH, N, O y S, cuando sea químicamente posible. El resto de los miembros de anillo del anillo heterocíclico se seleccionan independientemente entre C, CH, CH2, O, N, NH, y S. A menos que se especifique de otro modo, el sistema anular "heterocíclico" puede estar unido al resto de la molécula a través de un átomo de C o N del sistema anular. Tanto los anillos carbocíclicos como los heterocíclicos pueden estar saturados o parcialmente insaturados, y pueden estar no sustituidos o sustituidos como se describe en este documento, ubicándose los sustituyentes en cualquier posición disponible.
Para los fines de la presente invención, en anillos "condensados" la condensación ocurre a través de un enlace que es común a dos anillos adyacentes; en anillos "condensados con puente" la condensación ocurre a través de una secuencia de átomos (cabeza de puente) que es común a dos anillos; y en anillos "espiro-condensados", la condensación ocurre a través de un solo átomo (átomo espiránico), preferentemente un átomo de carbono, que es común dos anillos adyacentes (incluyendo anillos con puente).
La expresión anillo "heteroaromático" se refiere a un sistema anular aromático conocido, en donde uno o más de los miembros de anillo, preferentemente 1, 2, 3 o 4 miembros del anillo, se seleccionan entre NH, N, O y S, cuando sea químicamente posible. Los miembros de anillo restantes del anillo heteroaromático se seleccionan independientemente entre C, CH, O, N, NH, y S. El anillo heteroaromático puede estar no sustituido o sustituido como se describe en este documento, ubicándose los sustituyentes en cualquier posición disponible.
La presente invención también incluye las formas tautoméricas de los compuestos de fórmula (I) o (I'). La expresión "isómeros tautoméricos" significa isómeros, cuyas estructuras difieren en la posición de un átomo, generalmente un átomo de hidrógeno, y de uno o más enlaces múltiples, y que son capaces de convertirse fácil y reversiblemente entre sí. Los tautómeros se usan indistintamente en la presente solicitud. Así, como ejemplo, un grupo hidroxifenilo ha de considerarse equivalente a su forma tautomérica: ciclohexa-2,4-dienona.
La expresión "sistema anular conocido", como se usa en el presente documento, se refiere a un sistema de anillo que es químicamente factible y es conocido en la técnica y, por tanto, tiene por objeto excluir aquellos sistemas de anillo que no son químicamente posibles.
Para los fines de la presente invención, en todos los anillos saturados o parcialmente insaturados, uno o dos miembros de los anillos son opcionalmente C(O) y/o C(NH) y/o C[Nalquil(C-i-C4)].
El término alquilo(C-i-Cn) se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada saturada que contiene de 1 a n átomos de carbono y solo enlaces sencillos. El término alquenilo(C2-Cn) se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada insaturada que comprende de 2 a n átomos de carbono y al menos uno o más dobles enlaces. El término alquinilo(C2-Cn) se refiere a una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada saturada que comprende de 2 a n átomos de carbono y al menos uno o más triples enlaces. Para los fines de la invención, la cadena de hidrocarburo(C2-Cn) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces es una cadena de hidrocarburo lineal o ramificada que contiene de 2 a n átomos de carbono. Además, en cualquiera de las cadenas de hidrocarburo definidas anteriormente, uno o dos miembros de cadena seleccionados entre CH2 o CH pueden estar opcionalmente reemplazados por miembros de cadena seleccionados independientemente entre N, NR, O, C(O), C(O)NR, NRC(O) y S; en donde R es H o alquilo(C-i-C6 ) opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno.
Un sustituyente halógeno significa fluoro, cloro, bromo o yodo.
En las realizaciones de la invención que se refieren a los compuestos de fórmula (I) o fórmula (I'), donde la sustitución o no sustitución de cierto grupo no se especifica, por ejemplo indicando cierta sustitución para ese grupo o indicando que el grupo está no sustituido, se ha de entender que la posible sustitución de este grupo es como en la definición de la fórmula (I) o fórmula (I'). Además, la expresión "sustituido como se define en este documento", "sustituido como se ha definido previamente" o cualquier expresión equivalente se ha de entender que la posible sustitución de este grupo es como en la definición de la fórmula (I) o fórmula (I').
"Grupo protector" (PG) se refiere a una agrupación de átomos que cuando está unida a un grupo reactivo en una molécula enmascara, reduce o previene esa actividad.
La expresión "sustituido con uno o más" significa que un grupo puede estar sustituido con uno o más, preferentemente con 1, 2, 3 o 4 sustituyentes, siempre que este grupo tenga suficientes posiciones susceptibles de sustituirse.
Para los fines de la invención, temperatura ambiente es 20-25 °C.
En algunas de las realizaciones relacionadas con compuestos de fórmula (I'), el compuesto de la invención es distinto del listado en la Tabla 1:
Tabla 1
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continuación
Figure imgf000010_0001
continuación
Figure imgf000011_0001
continuación
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Como se puede ver en la tabla anterior, los compuestos citados son productos comerciales sin referencias bibliográficas asociadas o se describen en las referencias EP1088818 A1 (bloqueadores selectivos de los subtipos de receptores NMDA(N-metil-D-aspartato)); Giardina G. et al., "Discovery of a Novel Class of Selective Non-Peptide Antagonists for the Human Neurokinin-3 Receptor 1. Identification of the 4-Quinolinecarboxamide Framework", Journal of Medicinal Chemistry 1997, 40(12), 1794-1807; y Drake N. et al., "Synthetic Antimalarials. The Preparation of Certain 4-Aminoquinolines", Journal of the American Chemical Society 1946, 68, 1208-13. Ninguno de estos documentos describe la capacidad de estos compuestos para inhibir tanto la histona metiltransferasa G9a como las ADN metiltransferasas (DNMT1,DNMT3A o DNMT3B), ni su uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer.
No hay limitación sobre el tipo de sal de los compuestos de la invención que se puede usar, siempre que estos sean farmacéutica o veterinariamente aceptables cuando se usan con fines terapéuticos. La expresión "sales farmacéutica o veterinariamente aceptables", incluye sales utilizadas habitualmente para formar sales de metales alcalinos y para formar sales de adición de ácidos libres o bases libres.
La preparación de sales farmacéutica o veterinariamente aceptables de los compuestos de fórmula (I) o de fórmula (I') puede realizarse por métodos conocidos en la técnica. Por ejemplo, pueden preparase a partir del compuesto precursor, que contiene un resto básico o ácido, por métodos químicos convencionales. En general, tales sales se preparan, por ejemplo, haciendo reaccionar las formas de ácido o base libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido farmacéutica o veterinariamente aceptable en agua o en un disolvente orgánico o en una mezcla de ellos. Los compuestos de fórmula (I) de fórmula (I') y sus sales pueden diferir en algunas propiedades físicas pero son equivalentes para los fines de la presente invención.
Los compuestos de la invención pueden estar en forma cristalina como compuestos sin solvatación o como solvatos (por ejemplo, hidratos) y se pretende que ambas formas estén dentro del alcance de la presente invención. Los métodos de solvatación generalmente son conocidos en la técnica. En general, las formas solvatadas con disolventes farmacéutica o veterinariamente aceptables tales como agua, etanol y similares son equivalentes a la forma no solvatada para los fines de la invención.
Algunos compuestos de la invención pueden tener centros quirales que pueden dar lugar a varios estereoisómeros. Como se usa en este documento, el término "estereoisómero" se refiere a todos los isómeros de compuestos individuales que difieren solo en la orientación de sus átomos en el espacio. El término estereoisómero incluye isómeros de imagen especular (enantiómeros), mezclas de isómeros de imagen especular (racematos, mezclas racémicas), isómeros geométricos (cis/trans o syn/anti o E/Z), e isómeros de compuestos con más de un centro quiral que no son imágenes especulares entre sí (diaestereoisómeros). La presente invención se refiere a cada uno de estos estereoisómeros y también a sus mezclas.
Los diaestereoisómeros y enantiómeros pueden separarse mediante técnicas convencionales tales como cromatografía o cristalización fraccionada. Los isómeros ópticos pueden resolverse mediante técnicas estándar de resolución óptica para dar isómeros ópticamente puros. Esta resolución puede realizarse en cualquier intermediario sintético quiral o en compuestos de la invención. Los isómeros ópticamente puros también pueden obtenerse individualmente mediante síntesis enantioespecífica.
En todas las realizaciones de la invención referidas a los compuestos de fórmula (I) o fórmula (I'), las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos y los estereoisómeros de cualquiera de los compuestos de fórmula (I) o fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéuticamente aceptables siempre se contemplan incluso si no se menciona específicamente.
En una realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R2 es distinto de fenilo no sustituido, 4-metilfenilo, 4-clorofenilo, 2-clorofenilo, 3,4-diclorofenilo, 4-fluorofenilo y 4-metoxifenilo.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R3 se selecciona entre halógeno, -CN y -ORc ', más particularmente, R3 se selecciona entre halógeno y -ORc '.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R3 es -ORc '; más particularmente, Rc ' es H o Rc; en donde Rc es alquilo(Ci -C6 ) opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R4 es ORa. Más particularmente, Ra en R4 es Z3 opcionalmente sustituido como se ha definido previamente.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R4 es ORa con la condición de que Ra contiene al menos un átomo de nitrógeno.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R4 es OCy2 u OZ3 como se ha definido previamente, en donde Cy2 está opcionalmente sustituido como se ha definido previamente y Z3 está sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 , como se ha definido previamente. Más particularmente, R4 es OCy2 como se ha definido previamente o R4 es OZ3 , en donde Z3 es alquilo(Ci -C6 ) sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 , como se ha definido previamente. Aún más particularmente, R4 es OCy2 como se ha definido previamente o R4 es OZ3 , en donde Z3 es alquilo(C-i-C6 ) sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 , como se ha definido previamente con la condición de que Z3 contiene al menos un átomo de nitrógeno.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R2 es un sistema anular conocido unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(iii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros; y
(iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
en donde R2 está opcionalmente sustituido como se ha definido previamente.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I) como se ha descrito previamente, en donde R2 está unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y es fenilo o anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros, estando ambos grupos opcionalmente sustituidos como se ha definido previamente. Más particularmente, R2 es anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido como se ha definido previamente, aún más particularmente, R2 se selecciona entre el grupo que consiste en 2-tiofeno, 2-pirrol, 3-pirrol, 2-furano y 3-furano.
Como se ha mencionado anteriormente la invención también se refiere a un compuesto de fórmula (I'), o sus sales, o sus estereoisómeros o mezclas, del compuesto de fórmula (I') o de sus sales para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B.
En una realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R2 ' está unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y es Cy6 , y Cy6 es un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros;
(iii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(v) fenilo condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados; y
(vi) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados;
en donde R2 ' está opcionalmente sustituido como se ha definido previamente; con la condición de que el compuesto de fórmula (I') sea distinto de los listados en la tabla 1.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R2 ' es distinto de fenilo no sustituido, 4-metilfenilo, 4-clorofenilo, 2-clorofenilo, 3,4-diclorofenilo, 4-fluorofenilo y 4-metoxifenilo.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R3 se selecciona entre halógeno, -CN y -ORc '; más particularmente, R3 se selecciona entre halógeno y -ORc '.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R3 es -ORc '; más particularmente, Rc ' es H o Rc ; en donde Rc es alquilo(Ci -C6 ) opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R4 es ORa. Más particularmente, Ra en R4 es Z3 opcionalmente sustituido como se ha definido previamente.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R4 es ORa con la condición de que Ra contiene al menos un átomo de nitrógeno.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en Dn Mt I, DNMT3A y DNMT3B, en donde R4 es OCy2 u OZ3 como se ha definido previamente, en donde Cy2 está opcionalmente sustituido como se ha definido previamente y Z3 está sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 , como se ha definido previamente. Más particularmente, R4 es OCy2 como se ha definido previamente o R4 es OZ3 , en donde Z3 es alquilo(Ci -C6) sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 , como se ha definido previamente. Aún más particularmente, R4 es OCy2 como se ha definido previamente o R4 es OZ3 , en donde Z3 es alquilo(Ci -C6 ) sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3 , como se ha definido previamente con la condición de que Z3 contiene al menos un átomo de nitrógeno.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R2 ' está unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y es Cy6 , y Cy6 es un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(iii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros; y
(iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
en donde R2' está opcionalmente sustituido como se ha definido previamente.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde R2' está unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y es fenilo o anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros, estando ambos grupos opcionalmente sustituidos como se ha definido previamente. Más particularmente, R2' es anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido como se ha definido previamente, aún más particularmente, R2' se selecciona entre el grupo que consiste en 2-tiofeno, 2-pirrol, 3-pirrol, 2-furano y 3-furano.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, en el compuesto de fórmula (I) o (I') como se ha descrito previamente:
a) Cy2' y Cy3' en R1 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros; y
b) R2 o R2' está unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y es fenilo o anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros; más particularmente, R2 o R2' es anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y opcionalmente sustituido como se ha definido previamente; e incluso más particularmente, R2 o R2' se selecciona entre el grupo que consiste en 2-tiofeno, 2­ pirrol, 3-pirrol, 2-furano y 3-furano.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, en el compuesto de fórmula (I) o (I') como se ha descrito previamente:
a) Cy2 y Cy3 en R! son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros; y
b) R4 es ORa con la condición de que Ra contiene al menos un átomo de nitrógeno, o como alternativa R4 es OCy2 u OZ3 como se ha definido previamente, en donde Cy2 está opcionalmente sustituido como se ha definido previamente y Z3 está sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3, como se ha definido previamente. Más particularmente, R4 es OCy2 como se ha definido previamente o R4 es OZ3,
en donde Z3 es alquilo(Ci-C6) sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3, como se ha definido previamente. Aún más particularmente, R4 es OCy2 como se ha definido previamente o R4 es OZ3, en donde Z3 es alquilo(Ci-C6) sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3, como se ha definido previamente con la condición de que Z3 contiene al menos un átomo de nitrógeno.
Además, todas las realizaciones de la invención referentes a los compuestos de fórmula (I) también se aplican al compuesto de fórmula (I') cuando se usa en el tratamiento y/o prevención de cáncer.
También forma parte de la invención una célula madre mesenquimal pretratada con un compuesto de fórmula (I'), o sus sales, o sus estereoisómeros o mezclas, del compuesto de fórmula (I') o de sus sales, para uso en el tratamiento y/o prevención de enfermedades relacionadas con inmunidad. Alternativamente, este aspecto puede formularse como el uso de una célula madre mesenquimal pretratada con un compuesto de fórmula (I'), o sus sales, o sus estereoisómeros o mezclas, del compuesto de fórmula (I') o de sus sales, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de enfermedades relacionadas con inmunidad; y también puede formularse como un método para el tratamiento y/o prevención de enfermedades relacionadas con inmunidad, que comprende administrar una cantidad efectiva de una célula madre mesenquimal pretratada con un compuesto de fórmula (I'), o sus sales, o sus estereoisómeros o mezclas, del compuesto de fórmula (I') o de sus sales, en un sujeto con necesidad del mismo, incluyendo un ser humano.
También forma parte de la invención un método para obtener una célula madre mesenquimal pretratada por cultivo en un medio apropiado de una célula madre mesenquimal aislada junto con un compuesto de fórmula (I'), o sus sales, o sus estereoisómeros o mezclas, del compuesto de fórmula (I') o de sus sales.
En otra realización de la invención, el compuesto de fórmula (I) se selecciona entre el grupo que consiste en:
Ċ
Figure imgf000018_0001
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Ċ
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En otra realización de la invención, el compuesto de fórmula (I') se selecciona entre el grupo que consiste en:
Figure imgf000023_0002
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En otra realización de la invención, el compuesto de fórmula (I') se selecciona entre el grupo que consiste en: 3-02, 3­ 03, 3-04, 3-05, 3-06, 3-07, 3-08, 3-09 (compuesto de referencia), 3-10, 3-11, 3-12, 3-13 (compuesto de referencia), 3­ 14, 3-15, 3-16, 3-17, 3-18, 3-19, 3-20, 3-21 (compuesto de referencia), 3-25, 3-26, 3-27, 3-28, 3-29, 3-30, 3-31, 3-32, 3-33, 3-34, 3-35, 3-36, 3-37, 3-38, 3-39, 3-40, 3-41, 3-42, 3-43, 3-44, 3-45, 3-46, 3-47, 3-48, 3-49, 3-50, 3-51, 3-52, 3­ 53, 3-54, 3-55, 3-56, 4-01, 4-02, 4-03, 5-01, 5-02, 5-03, 5-04, 5-05, 5-06, 5-07, 8-01, 8-02, 9-01, 10-01, 11-01, 11-02, 11-03, 11-04, 11-05, 11-06, 11-07, 11-08, 11-09, 11-10, 11-11, 11-12, 11-13, 12-01, 12-02, 12-03, 12-04, 12-05, 12­ 06, 13-01, 14-01, 16-01, 16-02, 17-01, 17-02, 18-01, 18-02, 19-01, 19-02, 19-03, 1-01, 1-02, 2-01, 3-01, 3-22, 3-23, 3­ 24, 6-01, 6-02, 7-01, 7-02, 7-04, 7-05 y 15-01.
Los procedimientos para la preparación del compuesto de fórmula (I') también son parte de la invención así como los intermedios usados en estos procedimientos.
Así, los compuestos de fórmula (I') pueden obtenerse acoplando un compuesto de fórmula (II) con un compuesto de fórmula (III):
Figure imgf000025_0001
en donde R1 , R2 ', R3 y R4 son como se han definido anteriormente, y X es un átomo de halógeno, preferentemente cloro. Esta conversión puede realizarse en presencia de un catalizador de paladio, tal como, por ejemplo, Tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (Pd2(dba)3 ), un compuesto de organofósforo, tal como por ejemplo Bifenil-2-ildiciclohexil-fosfano, (2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil) (BINAP) o 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (Xantphos), y una base, tal como por ejemplo Cs2CO3 , ferc-butóxido sódico o K3 PO4. La reacción se realiza en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo dimetil éter (DME), tolueno o dioxano, a una temperatura adecuada, preferentemente calentando.
Un compuesto de fórmula (II) puede obtenerse haciendo reaccionar una anilina de fórmula (V) con un compuesto de fórmula (VI) y posteriormente convirtiendo el compuesto obtenido de fórmula (IV) en un compuesto de fórmula (II) como se muestra en el siguiente esquema:
Figure imgf000025_0002
en donde X, R2 ', R3 y R4 son como se han definido anteriormente, y R' representa alquilo(C-i-C6). La primera conversión puede realizarse en presencia de un agente de halogenación, tal como por ejemplo POCh, a una temperatura adecuada, preferentemente calentando, y la segunda conversión puede realizarse en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo ácido polifosfórico (PPA), a una temperatura adecuada, preferentemente calentando.
Los compuestos de fórmula (I') en donde R2 ' representa ORa (es decir compuestos de fórmula (I'a)), NRaRc (es decir compuestos de fórmula (I'b)), Cy6 (es decir compuestos de fórmula (I'c)), o Z8 (es decir compuestos de fórmula (I'd)) pueden obtenerse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula (VII) con un compuesto de fórmula (VIII), (IX), (X) o (XI), respectivamente, como se muestra en el siguiente esquema, y posteriormente convirtiendo el compuesto resultante de fórmula (IIa), (IIb), (IIc) o (IId) en los respectivos compuestos de fórmula (I') como se ha descrito anteriormente:
Figure imgf000026_0001
en donde Ri, Ra, Rc, Cy6, Z8, R3 y R4 son como se han definido anteriormente, X es un átomo de halógeno, preferentemente cloro, M es un metal alcalino, preferentemente sodio, y R es H, alquilo(C1-C6) o en el caso de un derivado borónico, dos grupos R juntos con el átomo de B al que están unidos pueden formar un ciclo.
En el caso de un compuesto de fórmula (I'a) la primera conversión puede realizarse sin disolvente, a una temperatura adecuada, preferentemente temperatura ambiente. En el caso de un compuesto de fórmula (I'b) la primera conversión puede realizarse en las mismas condiciones que las descritas anteriormente para la conversión de un compuesto de fórmula (II) en un compuesto de fórmula (I'). En el caso de un compuesto de fórmula (I'c) o fórmula (I'd) la primera conversión puede realizarse con un derivado borónico en presencia de un catalizador de paladio, tal como por ejemplo Tetrakis(trifenil-fosfina)paladio(0) (Pd(PPh3)4) y una base, tal como por ejemplo K2CO3, en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo dioxano opcionalmente mezclado con agua, a una temperatura adecuada, preferentemente calentando. Alternativamente, esta conversión puede realizarse con un derivado de estannato en presencia de un catalizador de paladio, tal como por ejemplo dicloruro de Bis(trifenilfosfina)paladio(II) (Pd(PPh3)Ch) en un disolvente adecuado, tal como por ejemplo dimetilformamida, a una temperatura adecuada, preferentemente calentando.
El compuesto de fórmula (VII) puede obtenerse a partir de un compuesto de fórmula (XIII), que se reduce a una anilina de fórmula (V) y posteriormente reacciona con un compuesto de fórmula (XIV) para dar el compuesto de fórmula (VII):
Figure imgf000027_0001
La reducción del compuesto de fórmula (XIII) puede realizarse por hidrogenación mientras que la conversión de un compuesto de fórmula (V) en un compuesto de fórmula (VII) se realiza en presencia de un agente de halogenación, tal como por ejemplo POCh, a una temperatura adecuada, preferentemente calentando.
Alternativamente, las reacciones descritas anteriormente pueden realizarse en un orden diferente. Los compuestos de fórmula (I') pueden convertirse en otros compuestos de fórmula (I'). Los compuestos de fórmulas (III), (VI), (VIII) a (XIV) están disponibles en el mercado o pueden obtenerse mediante procedimientos sintéticos convencionales.
La presente invención también se refiere a una composición farmacéutica o veterinaria que comprende una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula (I) como se ha definido anteriormente, o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero del compuesto de fórmula (I) o de su sal farmacéutica o veterinariamente aceptable, junto con excipientes o vehículos farmacéutica o veterinariamente aceptables.
La expresión "cantidad terapéuticamente efectiva", como se usa en este documento, se refiere a la cantidad de un compuesto que, cuando se administra, es suficiente para evitar el desarrollo de, o aliviar en cierta medida, uno o más de los síntomas de la enfermedad a la que se dirige. La dosis específica del compuesto de la invención para obtener un beneficio terapéutico puede variar según las circunstancias particulares del paciente individual, incluyendo, entre otros, tamaño, peso, edad y sexo del paciente, la naturaleza y estado de la enfermedad, la agresividad de la enfermedad, y la ruta de administración. Por ejemplo, puede usarse una dosis de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 300 mg/kg.
La expresión "excipientes o vehículos farmacéutica o veterinariamente aceptables" se refiere a materiales, composiciones o vehículos farmacéutica o veterinariamente aceptables. Cada componente debe ser farmacéutica o veterinariamente aceptable en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la composición farmacéutica o veterinaria. También debe ser adecuado para su uso en contacto con el tejido u órgano de seres humanos y animales sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica, inmunogenicidad u otros problemas o complicaciones, proporcional con una relación beneficio/riesgo razonable.
La elección de la formulación farmacéutica o veterinaria dependerá de la naturaleza del compuesto activo y su rota de administración. Puede usarse cualquier ruta de administración, por ejemplo oral, parenteral y tópica.
Por ejemplo, la composición farmacéutica o veterinaria puede formularse para administración oral y puede contener uno o más vehículos o excipientes fisiológicamente compatibles, en forma sólida o líquida. Estas preparaciones pueden contener ingredientes convencionales tales como agentes aglutinantes, cargas, lubricantes, y agentes humectantes aceptables.
La composición farmacéutica o veterinaria puede formularse para la administración parenteral junto con vehículos líquidos inyectables convencionales, tales como agua o alcoholes adecuados. Excipientes farmacéuticos o veterinarios convencionales para inyección, tales como agentes estabilizantes, agentes solubilizantes, y tampones, pueden incluirse en tales composiciones. Estas composiciones farmacéuticas o veterinarias pueden inyectarse por vía intramuscular, intraperitoneal o intravenosa.
La composición farmacéutica puede formularse para administración tópica. Las formulaciones incluyen cremas, lociones, geles, polvos, soluciones y parches en donde el compuesto está disperso o disuelto en excipientes adecuados.
Las composiciones farmacéuticas pueden estar en cualquier forma, incluyendo, entre otros, comprimidos, miniesferas, cápsulas, soluciones acuosas u aceitosas, suspensiones, emulsiones, o formas secas en polvo adecuadas para reconstitución con agua u otro medio líquido adecuado antes de su uso, para liberación inmediata o retardada.
Los excipientes y/o vehículos apropiados y sus cantidades, pueden determinarse fácilmente por los expertos en la materia de acuerdo con el tipo de formulación que se esté preparando.
Como se ha mencionado anteriormente, los compuestos de la invención que tienen el núcleo de quinolina y que están sustituidos como se ha definido previamente, en particular con el grupo R2 ' en la posición 2, el grupo amino en la posición 4, y el grupo R4 en la posición 7, son inhibidores duales de G9a y DNMT. Para los fines de la invención, esto significa que los compuestos que se han definido anteriormente pueden inhibir G9a con un valor CI50 < 10 pM, preferentemente < 1 pM, más preferentemente < 500 nM, y también pueden inhibir una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B con un valor CI50 < 10 pM, preferentemente < 1 pM, más preferentemente < 500 nM, cuando la inhibición de G9a y DNMT se mide en ensayos enzimáticos como los descritos en la presente invención.
Como inhibidores duales de G9a y DNMT, los compuestos de la invención pueden usarse en el tratamiento y/o prevención de cáncer.
Para los fines de la invención, el término "tratamiento" de la enfermedad se refiere a detener o retrasar el progreso de la enfermedad, cuando el fármaco se usa en el sujeto que exhibe síntomas del inicio de la enfermedad. El término "prevención" se refiere a detener o retrasar los síntomas del inicio de la enfermedad, cuando el fármaco se usa en un sujeto que no exhibe ningún síntoma de inicio de la enfermedad pero presenta alto riesgo de inicio de la enfermedad.
En una realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, el cáncer se selecciona entre el grupo que consiste en un cáncer hematológico y un tumor sólido. Más particularmente, el cáncer hematológico se selecciona entre el grupo que consiste en leucemia, linfoma y mieloma múltiple; y el tumor sólido se selecciona entre el grupo que consiste en cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, glioblastoma, hepatocarcinoma, cáncer de pulmón, melanoma, cáncer de páncreas, cáncer de próstata y cáncer renal.
Los compuestos de fórmula (I') pueden ser eficaces al combinarse sinérgicamente con otros agentes de tratamiento de cáncer. Así, en una realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, la invención se refiere al compuesto de fórmula (I') o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables, para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por la inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde el tratamiento comprende administrar a un sujeto simultáneamente, secuencialmente o separadamente el compuesto de fórmula (I') o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables, y uno o más compuestos de tratamiento de cáncer distintos. Alternativamente, la realización anterior puede formularse como el uso de un compuesto de fórmula (I'), o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de cáncer; en donde el tratamiento comprende administrar a un sujeto simultáneamente, secuencialmente o separadamente el compuesto de fórmula (I') o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables, y uno o más compuestos de tratamiento de cáncer distintos.
Alternativamente, la realización anterior puede formularse como un método para el tratamiento y/o prevención de cáncer, que comprende administrar una cantidad efectiva del compuesto definido previamente de fórmula (I'), o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables, y uno o más excipientes o vehículos farmacéutica o veterinariamente aceptables, en un sujeto con necesidad del mismo, incluyendo un ser humano; en donde el tratamiento comprende administrar a un sujeto simultáneamente, secuencialmente o separadamente el compuesto de fórmula (I') o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables, y uno o más compuestos de tratamiento de cáncer distintos.
Ejemplos de otros compuestos de tratamiento de cáncer incluyen, sin limitación:
- Inhibidores del proteosoma; por ejemplo Bortezomib, Calzirfomid, etc.
- Moduladores inmunes (IMID); por ejemplo Revlimid, Talidomida, Pomalidomida, Lenalidomida, etc.
- Anticuerpos monoclonales; por ejemplo Rituximab, SAR650984, Daratumumab, Ipilimumab, Nivolumab, Cetuximab, Panitumumab, Bevacizumab, Pertuzumab, Aflibercept, Ramucirumab, Herceptina, Lambrolizumab, etc.
- Inhibidores de quinasas; por ejemplo Imatinib, Ibrutinib, Erlotinib, Sunitinib, Sorafenib, Lapatinib, Regorafenib, Pazopanib, Axitinib, Cabozantinib, Afatinib, Gefitinib, Dacomitinib, Crizotinib, Ceritinib, Dabrafenib, etc.
- Inhibidores de histona desacetilasa; por ejemplo Vorinostat, Panobinostat, Rocilinostat, etc.
En otra realización, opcionalmente en combinación con una o más características de las diversas realizaciones descritas anteriormente o que se describen a continuación, el cáncer se selecciona entre el grupo que consiste en leucemia linfocítica aguda (ALL), linfoma de linfocitos B macrocítico difuso (DLBCL), cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, glioblastoma, hepatocarcinoma, melanoma, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer renal, cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, leucemia mieloide aguda, linfoma de células del manto y mieloma múltiple.
En la descripción y reivindicaciones la palabra "comprende" y las variaciones de la misma, no tiene por objeto excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o etapas. Además, la palabra "comprende" incluye el caso de "que consiste en". Objetos adicionales, ventajas y características de la invención serán evidentes para los expertos en la materia al examinar la descripción o pueden aprenderse mediante la práctica de la invención. Los siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustración y no tienen por objeto ser limitantes de esta invención. Además, la presente invención incluye todas las posibles combinaciones de realizaciones particulares y preferentes descritas en este documento.
Ejemplos
Procedimiento General para método de purificación por HPLC preparativa:
La medición de HPLC se realizó usando bomba Gilson 281 de 233 (binaria), un automuestrador, y un detector UV. Las fracciones se detectaron por LC-MS. El detector MS se configuró con una fuente de ionización por electronebulización. La temperatura de fuente se mantuvo a 300-350 °C.
Métodos de HPLC (métodos de purificación):
Método 1: Se realizó HPLC de fase inversa en Luna C18 (100x30 mm; 4 um). Disolvente A: agua con 0,075 % de ácido trifluoroacético; Disolvente B: acetonitrilo con 0,075 % de ácido trifluoroacético. Gradiente: A temperatura ambiente, 20 % de B a 40 % de B en 6 min a 25 ml/min; entonces 40 % B a 25 ml/min durante 2 min, detector UV.
Método 2: Se realizó HPLC de fase inversa en luna (100 x 30 mm; 5 um). Disolvente A: agua con 0,075 % de TFA; Disolvente B: acetonitrilo con 0,075 % de TFA. Gradiente: A 25 °C, 13 % de B a 33 % de B en 10 min; entonces 33 % B durante 4 min, Caudal: 25 ml/min. PDA.
Método 3: Se realizó HPLC de fase inversa en Luna C18 (100x30 mm; 4 um). Disolvente A: agua con 0,075 % de ácido trifluoroacético; Disolvente B: acetonitrilo con 0,075 % de ácido trifluoroacético. Gradiente: A temperatura ambiente, 20 % de B a 45 % de B en 6 min a 25 ml/min; entonces 40 % B a 25 ml/min durante 3 min, detector UV.
Método 4: Se realizó HPLC de fase inversa en luna (100 x 30 mm; 5 um). Disolvente A: agua con 0,075 % de TFA; Disolvente B: acetonitrilo con 0,075 % de TFA. Gradiente: A 25 °C, 10 % de B a 30 % de B en 10 min; entonces 30 % B durante 5 min, Caudal: 20 ml/min. PDA.
Método 5: Purificado por HPLC de fase inversa HPLC preparativa se realizó en luna (100 x 30 mm; 5 um). Disolvente A: agua con 0,075 % de TFA; Disolvente B: acetonitrilo con 0,075 % de TFA. Gradiente: A 25 °C, 3 % de B a 23 % de B en 6 min; entonces 23 % B durante 4 min, Caudal: 25 ml/min. PDA.
Método 6: Se realizó HPLC de fase inversa en Luna C18 (100x30 mm; 4 um). Disolvente A: agua con 0,075 % de TFA; Disolvente B: acetonitrilo con 0,075 % de TFA. Gradiente: A 25 °C, 25 % de B a 45 % de B en 6 min a 20 ml/min; entonces 40 % B a 25 ml/min durante 3 min, detector UV.
Las siguientes abreviaturas se usan en los ejemplos:
HPLC: cromatografía líquida de alto rendimiento; TLC: cromatografía de capa fina; MW: microondas; calc.: calculado; conc.: concentrado; TA: temperatura ambiente; Tr: Tiempo de retención; Boc: ferc-butoxicarbonilo; DMAP: 4-Dimetilaminopiridina; DCM: diclorometano; DIAD: azodicarboxilato de diisopropilo; DMF: dimetilformamida; DMSO: dimetilsulfóxido; EA: acetato de etilo; EDC.HCl: clorhidrato de 1-etil-3-(3-dimetilamino-propil)carbodiimida; eq: equivalente; ESI-MS: ionización por electronebulización espectrometría de masas; Et3N: trietilamina; HOBt: Hidroxibenzotriazol; LDA: diisopropilamida de litio; NMM: N-metilmorfolina; PE: éter de petróleo; TFA: ácido trifluoroacético; THF: tetrahidrofurano; THP: tetrahidropirano; DEAD: dietilazodicarboxilato; BINAP: 2,2'bis(difenilfosfinio)-1,1'-binaftilo; X-Phos: 2-Diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo; PPA: ácido polifosfórico; DME: 1,2-dimetoxietano.
Preparación del reactivo R-05b: tributil-(5-et¡l-2-fur¡l)estannano
A una solución de 2-etilfurano comercialmente disponible (1,92 g, 20 mmol) en THF (100 ml), se añadió lentamente n-BuLi (8,8 ml, 22 mmol) a -78 °C, entonces se agitó a -25 °C durante 2 h. Entonces, se añadió tributilcloroestannano (6,89 g, 20 mol) a -78 °C. La mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con AcOEt. La capa orgánica se concentró al vacío para dar el reactivo deseado R-05b (1 g, 13 %). ESI-MS (M+1): 387,1 calc. para CisH34OSn: 386,1.
Ruta sintética 1
Figure imgf000030_0001
Condiciones: a) R-01 (1,3 equiv.), PPh3 (2 equiv.), DEAD (2 equiv.) en THF, TA durante 1 h; b) Pd/C en MeOH, atmósfera de H2 , tA durante 3 h; c) Ácido malónico (1,1 equiv.) en POCI3, TA. durante 4h entonces durante una noche a 90 °C; d) 4,4,4-trifluoro-3-oxobutanoato de etilo (1 equiv.) en PPA a 120 °C durante 1 h; e) POCI3, 110 °C durante 2 h.
En el esquema anterior R3 es H, Cl, OCF3 u Oalquilo(C-i-C6) y Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno y/u oxígeno.
Preparación del intermedio I-02a: 1-r3-(2-metoxi-5-nitro-fenoxi)propil1-pirrolidina
A una solución de 2-metoxi-5-nitro-fenol comercialmente disponible: I-01a (19,6 g, 0,12 mol) en THF (200 ml), PPh3 (61 g, 0,23 mol), 3-pirrolidin-1-il-propan-1-ol comercialmente disponible: se añadieron R-01a (15 g, 0,16 mol) y DEAD (40 g. 0,23 mol) a 0 °C, la solución se agitó a TA durante 5 h. La mezcla de reacción se concentró y se extrajo con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y concentraron para dar el producto en bruto que se purificó por cromatografía en columna (gradiente de eluyente PE:EA=1:0 a 3:1) para dar intermedio I-02a (14 g, 44 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 281 calc. para C14H20N2O4: 280,1.
Preparación del intermedio I-02b: 1-r3-(3-nitrofenoxi)propil1pirrolidina
Intermedio I-02b se obtuvo de una manera análoga a I-02a partiendo de 3-nitrofenol comercialmente disponible: I-01b.
37 % de rendimiento, ESI-MS (M+1): 251 calc. para C13H18N2O3: 250,1.
Preparación del intermedio I-03a: 4-metox¡-3-(3-p¡rrolid¡n-1-¡lpropox¡)an¡l¡na
A una solución de intermedio I-02a (14 g, 0,05 mol) en MeOH (200 ml) se añadió Pd/C (3 g). La solución se agitó a TA durante 3 h, en atmósfera de H2. La solución se filtró y concentró para dar intermedio I-03a (12 g, 96 %) en forma de un aceite de color amarillo. ESI-MS (M+1): 251 calc. para C14H22N2O2: 250,1.
Preparación del intermedio I-03b: 3-(3-p¡rrolid¡n-1-¡lpropox¡)an¡l¡na
Intermedio I-03b se obtuvo de una manera análoga a I-03a partiendo de intermedio I-02b. 96 % de rendimiento, ESI-MS (M+1): 221 calc. para C13H20N2O: 220,1.
Preparación del intermedio I-04a: 2.4-dicloro-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)quinolona
A una solución de intermedio I-03a (12.4 g. 0.049 mol) en POCl3 (200 ml) se añadió ácido malónico comercialmente disponible (5.67. 0.055 mol) a TA Después de agitar a TA durante 4 h, la solución se calentó a 90 °C durante una noche; la solución se concentró y vertió en hielo-agua. entonces se extrajo con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera. se secaron sobre Na2SO4 anhidro. se filtraron y concentraron para dar intermedio I-04a (10 g. 66 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. ESI-MS (M+1): 355 calc. para Ci7H20Cl2N2O2: 354.1.
Preparación del intermedio I-04b: 2.4-d¡cloro-7-(3-p¡rrol¡din-1-¡lpropox¡)qu¡nolona
Intermedio I-04b se obtuvo de una manera análoga a I-04a partiendo de intermedio I-03b. 34 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 325 calc. para C ^H -iaC ^O : 324.1.
Preparación del intermedio I-04c: 2.4-d¡cloro-6.7-dimetox¡-qu¡nol¡na 3.4-dimetoxianilina
Intermedio I-04c se obtuvo de una manera análoga a I-04a partiendo de 3.4-dimetoxianilina comercialmente disponible: I-03c. 59 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 258 calc. para 59 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. ESI-MS (M+1): 258 calc. para C -n H g C y ^ : 257.0.
Siguiendo la misma ruta sintética para intermedio I-04a partiendo de compuesto I-01 (3 etapas) indicado en la siguiente Tabla y usando los reactivos también indicados. se obtuvieron los siguientes intermedios:
Figure imgf000031_0001
Preparación del intermedio I-05a: 6-metox¡-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)-2-(trifluoromet¡l)qu¡nol¡n-4-ol
PPA (50 ml) se calentó a 80 °C con agitación en un matraz de fondo redondo. entonces se añadió intermedio I-03a (5 g. 0.02 mol) a 80-100 °C. Después de la adición. se añadió entonces 4.4.4-trifluoro-3-oxobutanoato de etilo comercialmente disponible (3.68 g. 0.02 mol) a la mezcla de reacción durante 15-20 min. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 120 °C durante 12 horas. Entonces. la mezcla se vertió en hielo-agua y se ajustó el pH a 8 mediante la adición de Na2CO3. entonces se concentró al vacío y extrajo con DCM:MeOH (3:1). La capa orgánica combinada se concentró al vacío para dar intermedio I-05a (2.5 g. 32 %). ESI-MS (M+1): 371 calc. para C18H21F3N2O3: 370.1.
Preparación del intermedio I-06a: 4-cloro-6-metox¡-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropoxi)-2-(tr¡fluoromet¡l)qu¡nolona Intermedio I-05a (370 mg. 1 mmol) se disolvió en POCh (30 ml). entonces se agitó a 110 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío. entonces se inactivó con hielo-agua y se extrajo con AcOEt. la fase orgánica se secó con Na2SO4. se filtró y se concentró al vacío para dar el intermedio deseado I-06a (200 mg). ESI-MS (M+1): 389 calc. para C18H20C F3N2O2: 388.1.
Ruta sintética 2
Figure imgf000032_0001
Condiciones: a) R-02 (1,5 equiv.), Pd2(dba)3 (0,1 equiv.), CS2CO3P equiv.), BINAP (0,1 equiv.), en dioxano, durante una noche a 110 °C; b) R-03 (5 equiv.), Pd2(dba)3 (0,2 equiv.), Cs2CO3(5 equiv.) en dioxano, mw, 1 h. a 120 °C; c) NaOR (25 %), durante una noche a TA.
El esquema anterior R1 es un ciclo (Cy) o una cadena de hidrocarburo, que opcionalmente contiene átomos de nitrógeno, oxígeno y/o flúor, donde Cy es un arilo, heteroarilo, carbociclo o anillo heterocíclico; R3 es Oalquilo(C1 -C6); Ra y Rc son independientemente una cadena de hidrocarburo, que opcionalmente contiene átomos de nitrógeno.
Preparación del intermedio I-07a: 4-cloro-6.7-d¡metoxi-2-(4-met¡l-p¡peraz¡n-1-¡l)qu¡nolona
A una solución de intermedio I-04c (3 g, 0,01 mol) en dioxano (30 ml) se añadió Cs2CO3 (6,52 g, 0,02 mol), BINAP (0,62 g, 0,001 mol), Pd2(dba)3 (0,92 g, 0,001 mol) y R-02a: 1-Metil-piperazina (3,5 g, 0,035 mol). La mezcla se calentó a 110 °C durante una noche. La solución se concentró y se extrajo con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1), para dar intermedio I-07a (1 g, 27 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 322 calc. para C-i6H20ClN3O2 : 321,1.
Preparación del intermedio I-07b: 4-cloro-6-metox¡-2-(4-met¡lp¡peraz¡n-1-¡l)-7-(3-p¡rrol¡din-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡na
Intermedio I-07b se obtuvo de una manera análoga a I-07a partiendo de intermedio I-04a. 18 % de rendimiento, ESI-MS (M+1): 419 calc. para C22H3-i ClN4O2 : 418,2.
Preparación del intermedio I-08a: 4-cloro-2.6-d¡metox¡-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡na
Intermedio I-04a (1,5 g, 4,24 mmol) se disolvió en NaOMe (25 ml, 25 %), entonces se agitó a TA durante una noche. La mezcla de reacción se inactivó añadiendo agua. La fase orgánica se separó, se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1), para dar el intermedio deseado I-08a (0,5 g, 34 %) ESI-MS (M+1): 351 calc. para C - ^ aC l^ O a: 350,1.
Preparación del compuesto 1-01: 6.7-d¡metox¡-2-(4-met¡lp¡peraz¡n-1-¡l)-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2 ,2 ,2-trifluoroacético
A una solución de intermedio I-07a (2,5 g, 7,8 mmol) en dioxano (50 ml) se añadió Cs2CO3 (5,08 g, 5,6 mmol), BINAP (0,48 g, 0,78 mol), Pd2(dba)3 (0,7 g, 0,78 mol) y R-03a: 1 -Metil-piperidin-4-ilamina (1,77 g, 15,6 mmol). La mezcla se calentó a 110 °C durante una noche. La solución se concentró y se extrajo con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1) para dar el compuesto 1-01 como sal de TFA (0,02 g, 1 %). ESI-MS (M+1): 400,3 calc. para C22H33N5O2 C2 HF3O2: 513,2; Tr es 1,79.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 1-01 usando los mismos reactivos e intermedios a menos que se indique otra cosa en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000032_0002
Ruta sintética 3a
Figure imgf000033_0001
Condiciones: a) R-04 (1,06 equiv.), Pd(Ph3)4 (0,1 equiv.), K2CO3 (2 equiv.) en dioxano, durante una noche a 120 °C o m w 2 h a 110°C; b) R-05 (1 equiv.), Pd(PPh3)CI2 (0,1 equiv.) en DMF, 12 h a 110°C; c) R-03 (5 equiv.), Pd2(dba)3 (0,15 equiv.), Bifenil-2-il-diciclohexil-fosfano (0,15 equiv.), K3PO4 (3 equiv.) en DME, mw, 3 h a 110 °C; d) R-03 (3 equiv.), Pd2(dba)3 (0,3 equiv.), Xantphos (0,3 equiv.), NaOBu-t (3 equiv.) en tolueno, mw, 3 h a 100 °C; e) R-03 (3 equiv.), Pd2(dba)3 (0,3 equiv.), B iNAP (0,3 equiv.), Cs2CO3 (3 equiv.) en dioxano, mw, 3 h a 110 °C.
En el esquema anterior R1 es ciclo (Cy) o una cadena de hidrocarburo, que opcionalmente contiene átomos de nitrógeno, oxígeno y/o flúor, donde Cy es un arilo, heteroarilo, carbociclo o anillo heterocíclico; R2 es arilo o heteroarilo; R3 es H, Cl, OCF3 u Oalquilo(C1-C6); Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno y/u oxígeno.
Preparación del intermedio I-09a: 4-cloro-6,7-d¡metox¡-2-met¡l-qu¡nol¡na
A una solución de intermedio I-04c (4 g, 0,016 mol) en dioxano (60 ml) se añadió ácido metilborónico (R-04a) (1,02 g, 0,017 mol), K2CO3 (4,3 g, 0,0312 mol), Pd(Ph3)4 (1,8 g, 0,0016 mol), la solución se calentó a 120 °C durante una noche. La mezcla de reacción se concentró y se extrajo con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y concentraron para dar el producto en bruto que se purificó por cromatografía en columna (gradiente de eluyente PE:EA=1:0 a 3:1) para dar intermedio I-09a (0,7 g, 18% de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 238 calc. para C-i2H-i2ClNO2: 237,0.
Siguiendo la misma ruta sintética para intermedio I-09a y usando los mismos reactivos e intermedios a menos que se indique otra cosa en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes intermedios:
Figure imgf000033_0002
continuación
Figure imgf000034_0001
Preparación del intermedio I-09s: 4-cloro-2-(2-fur¡l)-6-metox¡-7-(3-p¡rrol¡din-1-¡lpropox¡)qu¡nolona
A una solución de intermedio I-04a (708 mg, 2 mmol) en DMF (15 ml) se añadió tributil(2-furil)estannano comercialmente disponible (R-05a) (716 mg, 2 mmol) y Pd(PPh3)Ch (87,7 mg, catalizador). La solución se calentó a 110 °C durante 12 h. La mezcla se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1), para dar intermedio I-09s (400 mg, 52 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 387,2 calc. para C21H23ON2O3: 386,1.
Siguiendo la misma ruta sintética para intermedio I-09s y usando los mismos reactivos e intermedios a menos que se indique otra cosa en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes intermedios:
Figure imgf000034_0002
Preparación del compuesto 3-01: 6.7-d¡metox¡-2-met¡l-N-(1-met¡l-4-p¡perid¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2,2,2­ trifluoroacético
A una solución del intermedio I-09a (100 mg, 0,42 mmol) en DME (5 ml) se añadió K3PO4 (0,26 g, 1,26 mmol), Bifenil-2-il-diciclohexil-fosfano (0,022 g, 0,063 mmol), Pd2(dba)3 (0,57,0,063 mmol), 1-metilpiperidin-4-amina (R-03a) (0,24 g, 2,1 mmol), la mezcla se calentó a 110 °C durante 3 h al microondas. La solución se concentró y se extrajo con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1) para dar el compuesto 3-01 como sal de TFA (0,02 g, 0,15 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 316,2 calc. para C18H25N3O2. C2HF3O2: 429,2; Tr es 1,54.
Preparación del compuesto 3-02: 6.7-d¡metox¡-2-(5-met¡l-2-fur¡l)-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2,2,2-trifluoroacético
Compuesto 3-02 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 3-01 partiendo de intermedio I-09b. Purificado por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1). Y: 10 %, como sal de TFA. ESI-MS (M+1): 382,3 calc. para C22H27N3O3. C2HF3O2: 495,2; Tr es 1,84.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 3-02 usando los mismos reactivos a menos que se indique otra cosa en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000034_0003
Preparación del compuesto 3-04: 6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-N-(1-metil-4-piperidil)-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)quinolin-4-amina: ácido 2,2,2-trifluoroacético
Compuesto 3-04 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 3-01 partiendo de intermedio I-09d. Purificado por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1). Y: 20 %, como sal de TFA ESI-MS (M+1): 479 calc. para C28H38N4O3. C2HF3O2: 592,3; Tr es 1,47.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 3-04 usando los mismos reactivos e intermedios a menos que se indique otra cosa en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000035_0001
Preparación del compuesto 3-43: 2-(5-met¡l-2-fur¡l)-4-r(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)am¡nol-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-6-ol; ácido 2.2.2-trifluoroacético
A una solución de compuesto 3-04 (50 mg. 0.101 mmol) en DCM (10 ml) se añadió BBr3 (254.26 mg. 1.01 mmol) lentamente a 0 °C. la solución se agitó a 0 °C durante 2 h en atmósfera de N2. Entonces. la solución se inactivó con agua y concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (General Método 3) para dar el compuesto 3-43 (11 mg. 23 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 465.3 calc. para C27H36N4O3.C2HF3O2: 578,2; Tr es 1,6.
Preparación del compuesto 3-44: 2-(5-met¡l-2-fur¡l)-4-[(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)met¡lam¡nol-7-(3-p¡rrol¡din-1-ilpropox¡)qu¡nolin-6-ol; ácido 2.2.2-trifluoroacético
Compuesto 3-44 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 3-43 partiendo de compuesto 3-07. Purificado por HPLC prep. (Procedimiento general. Método 3). Y: 21 %, como sal de TFA ESI-m S (M+1): 479.3 calc. para C28H38N4O3.C2HF3O2 : 592,3; Tr es 1,74.
Ruta sintética 3 b
Figure imgf000036_0001
Condiciones: a) R-06 (1 equiv.), Pd2(dba)3 (0,1 equiv.), BINAP (0,1 equiv.), Cs2CO3 (2 equiv.) en dioxano, mw, 5 h a 130 °C; b) HCI/MeOH (4 N), 5 h a Ta ; c) R-07 (3 equiv.) en MeOH, 1 h a TA, entonces NaBH(OAc)3 (3 equiv.), durante una noche a TA.
En el esquema anterior R2 es arilo o heteroarilo; R3 es H, Cl, OCF3 u Oalquilo(C1-C6); R5 es H o alquilo(C-i-C6) y Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno y/u oxígeno.
Preparación del intermedio I-10a: 3-[[6-metox¡-2-(5-met¡l-2-fur¡l)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)-4-qu¡nol¡llaminol-7-azaesp¡ro[3.5lnonano-7-carboxilato de tere-butilo
A una solución de intermedio I-09d (400 mg, 1 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) Cs2CO3 (650 mg, 2 mmol), BINAP (70 mg), Pd2(dba)3 (100 mg), y R-06a comercialmente disponible: 3-amino-7-azaespiro[3.5]nonano-7-carbox¡lato de tere-butilo (224 mg 1 mmol) se añadieron. La mezcla de reacción se calentó a 130 °C durante 5 h al microondas. La solución se concentró y se extrajo con AcOEt. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4anhidro, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 3), para dar intermedio I-10a (200 mg, 17 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 605,3 calc. para C35H43N4O5: 604,3.
Preparación del intermedio I-10b: 2-[[6-metox¡-2-(5-met¡l-1H-p¡rrol-2-¡l)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropoxi)-4-qu¡nol¡llam¡nol-7-azaesp¡ro[3.5lnonano-7-carboxilato de tere-butilo
A una solución de intermedio I-09l (200 mg, 0,5 mmol) en 1,4-dioxano (10 ml) Cs2CO3 (325 mg, 1 mmol), BINAP (35 mg, catalizador), Pd2(dba)3 (50 mg) y R-06b comercialmente disponible: 2-amino-7-azaespiro[3.5lnonano-7-carboxilato de tere-butilo (180 mg, 0,75 mmol) se añadieron. La mezcla de reacción se calentó a 120 °C durante 12 h. La solución se concentró y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 3), para dar intermedio I-10b (80 mg, 17 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 604,3 calc. para C35H49N5O4: 603,3.
Preparación del intermedio I-10c: 2-[[2-(5-et¡l-2-fur¡l)-6-metox¡-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropoxi)-4-qu¡nol¡llam¡nol-7-azaesp¡ro[3.5lnonano-7-carboxilato de tere-butilo
Intermedio I-10c se obtuvo partiendo de I-09t de una manera análoga a intermedio I-10b. 44 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 619,3 calc. para C36H50N4O5
Preparación del intermedio I-10d: 3-[[2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-4-quinolil1amino1-7-azaespiro[3.51nonano-7-carboxilato de tere-butilo
Intermedio I-10d se obtuvo partiendo de I-09t de una manera análoga a intermedio I-10a. 24 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 619,4 calc. para C36H50N4O5
Preparación del compuesto 4-01: N-(7-azaespiro[3.51nonan-3-il)-6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2.2.2-trifluoroacético
A una solución de intermedio I-10a (60.4 mg. 0.1 mmol) en MeOH (10 ml) se añadió HCl/MeOH (5 ml. 4 M). la solución se agitó a TA durante 5 h. La solución se concentró para dar el compuesto 4-01 como sal de TFA (49 mg. 97 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 505.3 calc. para C30H40N4O3 C2HF3O2: 618.3; Tr es 2.29.
Preparación del compuesto 4-02: N-(7-azaespiro[3.51nonan-2-il)-6-metoxi-2-(5-metil-1H-pirrol-2-il)-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-4 amina: clorhidrato
Compuesto 4-02 se obtuvo como sal de HCl partiendo de I-10b de una manera análoga a compuesto 4-01. 92 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 504.3 calc. para C30H4-iN5O2.ClH: 539.3; Tr es 1.89
Preparación del compuesto 4-03: N-(7-azaespiro[3.51nonan-2-il)-2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2.2.2-trifluoroacético
Compuesto 4-03 se obtuvo como sal de TFA partiendo de I-10c de una manera análoga a compuesto 4-01. Purificación por HPLC prep. (Procedimiento general. Método 3). 34 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 519.4 calc. para C31H42N4O3. C2HF3O2: 632.3; Tr es 1.85.
Preparación del compuesto 4-04: N-(7-azaespiro[3.51nonan-3-il)-2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-4-am¡na: clorhidrato
Compuesto 4-04 se obtuvo como sal de HCl partiendo de I-10d de una manera análoga a compuesto 4-01. 89 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 519.4 calc. para C31H42N4O3. HCl: 554.3.
Preparación del compuesto 5-01: 6-metoxi-N-(7-metil-7-azaespiro[3.51nonan-3-il)-2-(5-metil-2-furil)-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2.2.2-trifluoroacético
A una solución de compuesto 4-01 (50.5 mg. 0.1 mmol) en MeOH (10 ml) se añadió R-07a: (HCHO)n (9 mg. 0.3 mmol). La solución se agitó a t.a. durante 1 h. entonces se añadió NaBH(OAc)3 (25 mg. 0.3 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante una noche. La capa orgánica se lavó con salmuera. se secó sobre Na2SO4 anhidro. se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general. Método 3). para dar el compuesto 5-01 como sal de TFA (25 mg. 48 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 519.3 calc. para C31H42N4O3.C2HF3O2: 632.3; Tr es 2.29.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 5-01 usando los mismos reactivos a menos que se indique otra cosa en la tabla siguiente. se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000037_0001
Preparación del compuesto 5-05: 6-metoxi-N-(7-metil-7-azaespiro[3.51nonan-2-il)-2-(5-metil-1H-pirrol-2-il)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2.2.2-trifluoroacético
Compuesto 5-05 se obtuvo partiendo de 4-02 de una manera análoga a compuesto 5-01. Purificación por HPLC prep. (Procedimiento general. Método 3). 35% de rendimiento. ESI-MS (M+1): 518.4 calc. para C31H43N5O2. C2HF3O2: 631.3; Tr es 1.83.
Preparación del compuesto 5-06: 2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-N-(7-metil-7-azaespiro[3.51nonan-2-il)-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2.2.2-trifluoroacético
Compuesto 5-06 se obtuvo partiendo de 4-03 de una manera análoga a compuesto 5-01. Purificación por HPLC prep.
(Procedimiento general, Método 6), 19% de rendimiento. ESI-MS (M+1): 533,4 calc. para C32H44N4O3. C2HF3O2: 646,3; Tr es 1,88.
Preparación del compuesto 5-07: 2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-N-(7-metil-7-azaespiror3.51nonan-3-il)-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na; ácido 2.2.2-trifluoroacético
Compuesto 5-07 se obtuvo partiendo de 4-04 de una manera análoga a compuesto 5-01. Purificación por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6), 96% de rendimiento. ESI-MS (M+1): 533,5 calc. para C32H44N4O3. C2HF3O2: 646,3; Tr es 1,90.
Ruta sintética 4
Figure imgf000038_0001
Condiciones: a) R-04 (1 equiv.), Pd(Ph3)4 (0,3 equiv.), K2CO3 (2 equiv.), en dioxano/agua (5/1), mw, 1 h a 120 °C; b) R-03 (3 equiv.), Pd2(dba)3 (0,3 equiv.), BlNAP (0,3 equiv.), Cs2CO3 (4 equiv.), en 1,4-dioxano, mw, 1 h. a 110 °C; c) H2, Pd/C en EtoH, durante una noche a TA.
En el esquema anterior R1 es ciclo (Cy) o una cadena de hidrocarburo, que opcionalmente contiene átomos de nitrógeno, oxígeno y/o flúor, donde Cy es un arilo, heteroarilo, carbociclo o anillo heterocíclico; R3 es Oalquilo(C-i-C6); Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno y X es átomo de carbono u oxígeno.
Preparación del intermedio I-11a: 4-cloro-2-(c¡clohexen-1-¡l)-6-metox¡-7-(3-p¡rrol¡din-1-¡lpropox¡)qu¡nolona
A una solución de intermedio I-04a (708 mg, 2 mmol) en dioxano/agua (5/1 ml) se añadieron K2CO3 (27 mg, 0,20 mmol), Pd(PPh3)4 (233 mg, 30 %), 2-(ciclohex-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (R-04¡) (416 mg, 2 mmol), la solución se calentó a 120 °C al MW durante 1 h, y entonces la mezcla se concentró y se extrajo con AcOEt. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron para dar el producto en bruto que se purificó por cromatografía en columna (gradiente de eluyente PE:EA=1:0 a 3:1) para dar intermedio I-11 a (0,4 g, 50 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 401 calc. para C23H2gClN2O2 : 400,2.
Preparación del compuesto 6-01: 2-(ciclohexen-1-il)-6-metoxi-N-(1-metil-4-piperidil)-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)quinolin-4-amina; ácido 2,2,2-trifluoroacético
Compuesto 6-01 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 1-01 partiendo de intermedio I-11a. Purificado por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 5).Y: 20%, como sal de TFA. ESI-MS (M+1): 479,6 calc. para C29H42N4O2C2HF3O2: 592,3; Tr es 1,48.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 6-01 y usando los reactivos indicados en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000038_0002
Preparación del compuesto 6-03: 4-rí2-(c¡clohexen-1-¡l)-6-metoxi-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)-4qu¡nol¡l1am¡no1p¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de tere-butilo
A una soluc¡ón de ¡ntermed¡o I-11a (150 mg, 374,12 umol) y 4-am¡nop¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de tere-but¡lo (R-03x) (374,6 mg, 1,87 mmol) en d¡oxano (30 ml) se añad¡eron suces¡vamente Pd2(dba)3 (68,5 mg, 74,82 umol), BINAP (93,2 mg, 149,65 umol) y CS2CO3 (304,8 mg, 935,30 umol). La mezcla resultante se ag¡tó a 130 °C durante 36 h en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla se d¡luyó con agua (50 ml), y se extrajo con EtOAc (2x40 ml). La fase orgán¡ca comb¡nada se lavó con salmuera (80 ml), se secó con Na2SO4, concentró y pur¡f¡có por TLC prep. (DCM:MeOH = 10:1) para dar compuesto 6-03 (156 mg 73,83 % de rend¡m¡ento) en forma de un sól¡do de color amar¡llo. ESI-MS (M+1): 565,4 calc. para C33H48N4O4.
Preparac¡ón del compuesto 7-01: 2-c¡clohex¡l-6-metox¡-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na; ác¡do 2,2.2-tr¡fluoroacét¡co
A una soluc¡ón de compuesto 6-01 (47,8 mg, 0,1 mmol) en EtOH (10 ml) se añad¡ó Pd/C (15 mg) en atmósfera de H2. La soluc¡ón se ag¡tó a t.a. durante una noche. La mezcla de reacc¡ón se f¡ltró, el f¡ltrado se concentró para dar el compuesto producto deseado 7-01 como sal de TFA (0,048 g, 95 % de rend¡m¡ento), ESI-MS (M+1): 481 calc. para C29H44N4O2.C2HF3O2: 594,3; Tr es 1,54.
Preparac¡ón del compuesto 7-02: 6-metox¡-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)-2-tetrah¡drop¡ran-4-¡lqu¡nol¡n-4-am¡na; ác¡do 2.2.2-tr¡fluoroacét¡co
Compuesto 7-02 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 7-01 part¡endo de compuesto 6-02. 63,5 % de rend¡m¡ento, como sal de TFA. ESI-MS (M+1): 483,3 calc. para C23H42N4O3C2HF3O2: 596,3; Tr es 2,44.
Preparac¡ón del compuesto 7-03: 4-rí2-c¡clohex¡l-6-metox¡-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)-4-qu¡nol¡l1am¡no1p¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de tere-but¡lo
Compuesto 7-03 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 7-01 part¡endo de compuesto 6-03. 99 % de rend¡m¡ento. ESI-MS (M+1): 567,5 calc. para C33H50N4O4
Preparac¡ón del compuesto 7-04: 2-c¡clohex¡l-6-metox¡-N-(4-p¡per¡d¡l)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na; ác¡do 2.2.2-tr¡fluoroacét¡co
Una soluc¡ón de compuesto 7-03 (65,00 mg, 114,68 umol) en HCl/EtOAc (1,0 M, 20,00 ml) se ag¡tó a 16 °C durante 4 horas. Entonces, la mezcla de reacc¡ón se concentró y pur¡f¡có por HPLC prep. (Proced¡m¡ento general, Método 1) para proporc¡onar el producto deseado 7-04 como sal de TFA (40,3 mg, 60,5 % de rend¡m¡ento) en forma de un sól¡do de color amar¡llo. ESI-MS (M+1): 467,4 calc. para C28H42N4O2C2HF3O2: 580,3; Tr es 1,73.
Preparac¡ón del compuesto 7-05: 2-c¡clohex¡l-N-(1-¡soprop¡l-4-p¡per¡d¡l)-6-metox¡-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na; ác¡do 2.2.2-tr¡fluoroacét¡co
A una mezcla de compuesto 7-04 (90 mg, 178,88 umol) y acetona (62,4 mg, 1,07 mmol) en THF (30 ml) se añad¡eron AcOH (64,5 mg, 1,07 mmol) y NaBH3CN (67,5 mg, 1,07 mmol) en una porc¡ón a 16 °C en atmósfera de N2. La mezcla se ag¡tó a 50 °C durante 15 horas. Entonces, la mezcla se enfr¡ó a 16 °C, se f¡ltró y se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có por HPLC prep. (Proced¡m¡ento general, Método 1) para proporc¡onar el producto deseado 7-05 como sal de TFA (38 mg, 33 % de rend¡m¡ento) en forma de un sól¡do de color amar¡llo. ESI-MS (M+1): 509,5 calc. para C31H48N4O2 C2HF3O2: 622,3; Tr es 1,81.
Ruta s¡ntét¡ca 5
Figure imgf000040_0001
Condiciones: a) R-04k (0,9 equiv.), Pd(Ph3)4 (0,1 equiv.), Na2CO3(3 equiv.), en dioxano/agua (5/1), mw, 2 h a 110 °C; b) R-02 (3 equiv.), NaBH3CN (5 equiv.) en MeOH, 12 h a TA; c) R-03 (5 equiv.), Pd2(dba)3 (0,3 equiv.), x-Phos (0,2 equiv.), t-BuOK (1,5 equiv.), en tolueno, mw, 2 h. a 130 °C; d) dicloruro fenilfosfónico (2 equiv.), piridina (4 equiv.), NH2OH.HCI (1 equiv.), en MeOH/DCM (1/4), 15 h a TA, entonces, NaBH3CN (9 equiv.), 12 h a TA.
En el esquema anterior R3, Ra y Rc son como se han definido anteriormente y R1 es ciclo (Cy) o una cadena de hidrocarburo, que opcionalmente contiene átomos de nitrógeno, oxígeno y/o flúor, donde Cy es un arilo, heteroarilo, carbociclo o anillo heterocíclico; R3 es Oalquilo(C-i-C6) y Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno.
Preparación del intermedio I-12a: 5-r4-cloro-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-2-quinolil1furan-2-carbaldehído
A una solución de intermedio I-04a (1 g, 2,8 mmol) en 1,4-dioxano/H2O (15/3 ml) se añadieron Na2CO3 (890 mg, 8,4 mmol), Pd(PPh3)4 (323 mg, 0,28 mmol) y ácido (5-formil-2-furil)borónico (R-04k) (347 mg, 2,52 mmol). La solución se calentó a 110 °C durante 2 h. al microondas. La mezcla se concentró y se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y concentraron para dar el producto en bruto que se purificó por TLC prep. para dar intermedio I-12a (0,5 g, 47 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo pálido. ESI-MS (M+1): 415 calc. C22H23ClN2O4: 414,1.
Preparación del intermedio I-13a: 1-r5-r4-cloro-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-2-quinolil1-2-furil-N,N-dimetilmetanamina
A una solución de intermedio I-12a (180 mg, 0,43 mmol) en MeOH (5 ml) se añadió dimetilamina (R-02b) (105 mg, 1,30 mmol), La solución se agitó a t.a. durante 1,5 h, entonces, se añadió NaBHaCN (135 mg, 2,15 mol) a la solución, La solución se agitó a t.a. durante 12 h. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con AcOEt. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1) para obtener intermedio I-13a puro (100 mg, 52 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 444 calc. para C24H3üClN3O3: 443,2.
Preparación del compuesto 8-01: 2-[5-[(d¡met¡lam¡no)met¡l1-2-fur¡l1-6-metox¡-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-4-am¡na; ácido 2,2,2-trifluoroacético
A una solución de intermedio I-13a (80 mg, 0,18 mmol) en tolueno (5 ml) se añadieron t-BuOK (0,27 ml, 0,27 mmol), x-Phos (17 mg, 0,036 mmol), Pd2(dba)3 (49 mg, 0,054 mmol) y R-03a: 1-metilpiperidin-4-amina (119 mg, 0,9 mmol). La solución se calentó a 130 °C durante 2 h al microondas. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con AcOEt. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó (Procedimiento general, Método 1) para obtener compuesto 8-01 puro como sal de TFA (20,7 mg, 22 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 522,3 calc. para C30H43N5O3C2HF3O2: 635,3; Tr es 1,93.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 8-01 y usando los reactivos indicados en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000041_0001
Preparación del intermedio I-14a: r5-r4-cloro-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-2-quinolil1-2-furil1metanol
A una solución de intermedio I-12a (200 mg, 0,48 mmol) en MeOH (5 ml, se añadió NaBH4 (91,2 mg, 2,4 mmol). La solución se agitó a TA durante 2 h. La mezcla se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por TLC prep. para dar intermedio I-14a (0,1 g, 49 %) en forma de un sólido de color amarillo pálido. ESI-MS (M+1): 417 calc. C22H25ClN2O4: 416,1.
Preparación del compuesto 9-01: r5-r6-metoxi-4-r(1-metil-4-piperidil)amino1-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-2-quinolil1-2-furillmetanol: ácido 2 ,2 ,2-trifluoroacético
A una solución de intermedio I-14a (90 mg, 0,21 mmol) en 1,4-dioxano (4 ml) se añadió Cs2CO3 (0,21 g, 0,65 mmol), BINAP (0,027 g, 0,043 mmol), Pd2(dba)3 (0,059 g, 0,065 mmol) y 1-metilpiperidin-4-amina (0,086 g, 0,65 mmol). La solución se calentó a 120 °C durante 5 h al microondas. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con AcOEt. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 3) para obtener compuesto 9-01 como sal de TFA (10 mg, 8 %). ESI-MS (M+1): 495 calc. para C28H38N4O4C2HF3O2: 608,2; Tr es 2,43.
Preparación del intermedio I-15a: 5-r4-cloro-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-2-quinolil1furan-2-carbonitrilo A una solución de intermedio I-12a (100 mg, 0,24 mmol) en MeOH/DCM (1/4 ml), se añadió dicloruro fenilfosfónico (94 mg, 0,48 mmol), piridina (76 mg, 0,96 mmol) y NH2o H.HCI (16,7 mg, 0,24 mmol), La mezcla se agitó a TA durante 15 h. Entonces, se añadió NaBHaCN (135 mg, 2,15 mol), La mezcla de reacción se agitó a TA durante 12 h. La mezcla se concentró y se extrajo con AcOEt/agua. La capa orgánica se separó, se lavó con NaHCO3 salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía en columna para dar intermedio I-15a (50 mg, 51 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-Ms (M+1 ): 412 calc. Para C22H22ClN3O3:411,1. Preparación del compuesto 10-01: 5-r6-metoxi-4-r(1-metil-4-piperidil)-amino1-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-2-quinol¡l1furan-2-carbon¡tr¡lo: ácido 2 ,2 ,2-trifluoroacético
Compuesto 10-01 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 9-01 partiendo de intermedio I-15a. Purificado por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1), 10 % de rendimiento, como sal de TFA. ESI-MS (M+1): 490 calc. para C28H35N5O3C2HF3O2: 603,2; Tr es 1,91.
Ruta sintética 6
Figure imgf000042_0001
Condiciones: a) Pd/C en MeOH, atmósfera de H2, TA durante 24 h; b) Ácido malónico (1,1 equiv.) en POCI3, a 95 °C durante 12 h; c) R-04 (1,1 equiv.), Pd(Ph3)4 (0,1 equiv.), en dioxano, K2CO3 (1,5 equiv.) en agua a 120 °C durante 12 h; d) R-08 (1,2 equiv.), Ph3P (2 equiv.), DIAD (2 equiv.) a 0 °C durante 8 h; e) R-03 o R-06 (2 equiv.), Pd2(dba)3 (0,1 equiv.), BINAP (0,1 equiv.), Cs2CO3 (2 equiv.) en dioxano, 120 °C durante 12 h; f) HCI/ AcOEt, TA durante 3 h; g) R-07 (3 equiv.), NaBH(OAc)3 (3 equiv.), HCOOH (1 equiv.) en dioxano, a 100 °C durante 2 h.
En el esquema anterior R1, R2 y R3 son como se han definido anteriormente; n es 0 a 3, R5 es H o alquilo(C1-C6), Q es nitrógeno y PG es un grupo protector.
Preparación del intermedio I-16a: 5-amino-2-metoxi-fenol
A una solución de 2-metoxi-5-nitro-fenol comercialmente disponible: I-01a (40 g, 236,5 mmol) en MeOH (300 ml) se añadió Pd/C (3 g) en atmósfera de Ar. La suspensión se desgasificó al vacío y se purgó con H2 varias veces. La mezcla de reacción se agitó en atmósfera de H2 (40 psi) a TA durante 24 h. Entonces, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró para dar intermedio I-16a (25 g, 76 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 140,1 calc. para C7H9NO2: 139,06.
Preparación del intermedio I-17a: 2.4-d¡cloro-6-metoxi-qu¡nol¡n-7-ol
A una mezcla de intermedio I-16a (4,91 g, 35,29 mmol) y ácido malónico (7,34 g, 70,57 mmol) se añadió POCh (70 ml) en una porción a TA en atmósfera de N2. La mezcla se agitó a TA durante 10 min, entonces se calentó a 95 °C y agitó durante 12 h. Entonces, la mezcla se enfrió a TA y concentró a presión reducida a 60 °C, para retirar POCl3. El residuo se vertió en agua y se agitó durante 20 min. La fase acuosa se extrajo con AcOEt. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (PE/ EtOAc =2/1) para proporcionar intermedio I-17a (2,10 g, 24 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 244,0 calc. para C2aH27ClN2Oa: 242,9.
Preparación del intermedio I-18a: 4-cloro-6-metox¡-2-(5-met¡l-2-fur¡l)qu¡nol¡n-7-ol
A una mezcla de intermedio I-17a (6 g, 24,58 mmol), R-04b:4,4,5,5-tetrametil-2-(5-metil-2-furil)-1,3,2-dioxaborolano (5,63 g, 27,04 mmol) y Pd(PPh3)4 (2,86 g, 2,46 mmol) en 1,6-dioxano (90 ml) se añadió K2CO3 (3,40 g, 36,87 mmol) en H2O (30 ml) en una porción a TA en atmósfera de N2. La mezcla de reacción se agitó a 120 °C durante 12 h. La mezcla se enfrió a TA y se extrajo con AcOEt. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (PE/ EtOAc =2/1) para proporcionar intermedio I-18a (2,1 g, 29 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 290,1 calc. para C-^H-^ClNOa: 289,05.
Preparación del intermedio I-19a: 4-rr4-cloro-6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-7-quinolil1oximetil1piperidina-1-carboxilato de tere-butilo
A una mezcla de intermedio I-18a (650 mg, 2,24 mmol), R-08a: 4-(hidroximetil)piperidina-1-carboxilato de tere-butilo (540,3 mg, 2,69 mmol) y PPh3 (1,18 g, 4,48 mmol) en THF (50 ml), se añadió DIAD (907,34 mg, 4,48 mmol) en una porción a 0 °C en atmósfera de N2. La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 8 h. Entonces, la mezcla se enfrió a TA y se concentró. Se añadieron agua y AcOEt. La fase orgánica se separó, se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 anhidro, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (PE/ EtOAc =2/1) para proporcionar intermedio I-19a (700 mg, 64 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 487,3 calc. para C26H31ClN2O5: 486,2.
Siguiendo la misma ruta sintética para intermedio I-19a partiendo de I-17a y usando los reactivos indicados en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes intermedios:
Figure imgf000043_0001
Preparación del intermedio I-20a: 4-íí6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-4-í(1-metil-4-p¡peridil)amino1-7 qu¡nol¡l1oximet¡l1p¡per¡d¡na-1-carbox¡lato de tere-butilo
A una mezcla de intermedio I-19a (250 mg, 0,528 mmol) y R-03a comercialmente disponible: 1-metilpiperidin-4-amina (120,7 mg, 1,06 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml), se añadieron Cs2CO3 (344,28 mg, 1,06 mmol) y Pd(dba)2 (30,38 mg, 0,52 mmol) en una porción a TA en atmósfera de N2. La mezcla de reacción se agitó a 120 °C durante 12 h. La mezcla se enfrió a 25 °C y se concentró. El residuo se purificó por gel de sílice (DCM/MeOH=10/1) para proporcionar intermedio I-20a (100 mg, 33 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo.
Siguiendo la misma ruta sintética para intermedio I-20a y usando los reactivos indicados en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes intermedios:
Figure imgf000043_0002
Preparación del compuesto 11-01: 6-metox¡-2-(5-met¡l-2-fur¡l)-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)-7-(4-p¡perid¡lmetox¡)qu¡nol¡n-4-amina; ácido 2,2,2-trifluoroacético
A una solución de intermedio I-20a (160 mg, 0,283 mmol) en EtOAc (10 ml), se añadió HCl/EtOAc (10 ml) en una porción a 25 °C en atmósfera de N2. La reacción se agitó a 25 °C durante 3 h. Entonces, la mezcla se concentró a presión reducida a 45 °C. El residuo se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 3) para proporcionar el compuesto 11-01 como sal de TFA (100 mg, 76 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 465,3 calc. para C27H36N4O3.C2HF3O2: 578,2; Tr es 1,65.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 11-01 partiendo del intermedio indicado en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000043_0003
continuación
Figure imgf000044_0003
Preparación_____del compuesto_____12-01:_____6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-N-(1-metil-4-piperidil)-7-[(1-metil-4-p¡perid¡l)metox¡1qu¡nol¡n-4-am¡na; ácido 2,2,2-trifluoroacético
A una solución de compuesto 11-01 (80 mg, 0,172 mmol) en 1,4-dioxano (5 ml) se añadió R-07a: (HCHO)n (46,53 mg, 0,516 mmol) NaBH(oAc)3 (109,49 mg, 0,516 mmol) y HCOOH (8,27 mg, 0,172 mmol) en una porción a t.a. en atmósfera de N2. La mezcla se agitó a TA durante 10 min. Entonces se agitó a 100 °C y durante 2 h. El producto en bruto se purificó HPLC prep. (Procedimiento general, Método 3) para proporcionar el compuesto 12-01 como sal de TFA (15 mg, 14 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 479,4 calc. para C28H38N4O3.C2HF3O2: 592,2; Tr es 1,66.
Siguiendo la misma ruta sintética para compuesto 12-01 partiendo del compuesto indicado en la tabla siguiente, se obtuvieron los siguientes compuestos:
Figure imgf000044_0002
Ruta sintética 7
Figure imgf000044_0001
Condiciones: a) BBr3 (1 equiv.), DCM, 0 °C, 2 h; b) CF3CH2I (2 equiv.), DMF, 110 °C, 12 h; c)
DIEA (2 equiv.), PhN(OTf)2 (1,5 equiv.), DMF, 0 °C, 2 h, entonces, 25 °C, 12 h; d) Zn(CN)2 (2
equiv.), Pd(PPh3)4 (cat), DMF, 110 °C, 12 h.
En el esquema anterior R1 es como se ha definido anteriormente; R2 es arilo o heteroarilo; R3 es OCH3 y Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno y/u oxígeno
Preparación del compuesto 13-01: 2-(5-metil-2-furil)-N-(1-metil-4-piperidil)-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)-6-(2,2,2-tr¡fluoroetoxi)qu¡nol¡n-4-am¡na; ácido 2,2,2-trifluoroacético
A una solución de compuesto I-21a (100 mg, 0,215 mmol, 3-43) en DMF (3 ml) se añadió CF3CH2I (113 mg, 0,540 mmol), la solución se calentó a 110 °C durante 12 horas. Entonces, la solución se purificó por HPLC prep.
(Procedimiento general, Método 6) para dar el compuesto 13-01 como sal de TFA (4mg, 3,41 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 547,3 calc. para C29H37F3N4O3.C2HF3O2: 660,2; Tr es 1,78.
Preparación del intermedio I-22a: hidroxi(2-(5-metilfuran-2-il)-4-((1-metilpiperidin-4-il)amino)-7-(3-(pirrolidin-1-il)propoxi)quinolin-6-il)(trifluorometil)-A7-sulfanodiona; ácido 2,2,2-trifluoroacético
A una solución de compuesto I-21a (232 mg, 0,5 mmol, 3-43) en DMF (5 ml) se añadió DIEA (202 mg, 1 mmol) y PhN(OTf)2 (270 mg, 0,75 mmol) a 0 °C. La solución se agitó a 0 °C durante 2 horas y se agitó a 25 °C durante 12 horas. La mezcla se concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6) para dar el intermedio I-22a como sal de TFA (180 mg, 60,4 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 597,3 calc. para C23H35F3N4O5S.C2HF3O2: 660,2.
Preparación del compuesto 14-01: 2-(5-metil-2-furil)-4-[(1-metil-4-piperidil)amino1-7-(3-pirrolidin-1-ilpropoxi)quinolina-6-carbonitrilo; ácido 2 ,2 ,2-trifluoroacético
A una solución de intermedio I-22a (100 mg, 0,168 mmol) en DMF (5 ml) se añadió Zn(CN)2 (39 mg, 0,336 mmol) y Pd(PPh3)4 (20 mg, Catalizador) y la solución se calentó a 110 °C durante 12 horas. Entonces, la solución se concentró y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4 anhidro y concentró para dar el producto en bruto que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6) para dar 14-01 como sal de TFA (58 mg, 72,5 %) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 474,2 calc. para C23H35F3N5O2.C2HF3O2: 587,2; Tr es 1,68.
Ruta sintética 8
Figure imgf000045_0001
Condiciones: a) Et3N (2 equiv.), 3-cloro-3-oxo-propanoato de etilo (1,1 equiv.), DCM, 0 °C, entonces 25 °C, 12 h; b) LiOH-HzO (1,5 equiv.), THF/MeOH/H2O (3:3:2), 25 °C, 16 h; c) POCI3 (20 equiv.), 90 °C, 2 h; d) R-04 (1,05 equiv.), K2CO3 (1,5 equiv.), Pd(PPh3)4 (0,1 equiv.), dioxano, 100 °C, 16 h; e) R-03 (2 equiv.), Pd2(dba)3 (0,1 equiv.), Binap (0,1 equiv.), Cs2CO3 (2 equiv.), dioxano, 110-120 °C, 16 h; f) Pd/C, H2 (50 Psi), MeOH, 50 °C, 16 h; g) R-09 (1,2 equiv.), Cs2CO3 (2 equiv.), DMF, 100 °C, 16 h; h) Pd/C, H2 (50 Psi), MeOH, 25 °C, 16 h; i) R-10 (1,2 equiv.), Cs2CO3 (2 equiv.), DMF, 100 °C, 16 h; j) HCI/EtOAc, 25 °C, 2 h; k) R-07 (3 equiv.), NaBH(OAc)3 (3 equiv.), HCOOH (1 equiv.), MeOH, 50-70 °C, 16 h; I) POCI3 (20 equiv.), 105 °C, 4 h; m) 1,3-dibromopropano (1,2 equiv.), K2CO3 (2,5 equiv.), CH3CN, 60 °C, 88 h; n) R-11 (1,5 equiv.), K2CO3 (2 equiv.), CH3CN, 50 °C, 16-72 h.
En el esquema anterior R1 es como se ha definido anteriormente; R2 es arilo o heteroarilo; R3 es H, Cl, OCF3 u OalquNo(C-i-C6); Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno y/u oxígeno y R5 es H o alquilo(C1-C6).
Preparación del intermedio I-24a: 3-(3-benc¡lox¡-4-metoxi-an¡l¡no)-3-oxo-propanoato de etilo
A la mezcla de I-23a: 3-benciloxi-4-metoxi-anilina (35 g, 0,153 mol) y TEA (30,87 g, 0,306 mol) en DCM (1 l) se añadió gota a gota 3-cloro-3-oxo-propanoato de etilo (25,245 g, 0,168 mol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 12 horas, se vertió en agua (2 l) y se extrajo con DCM 2 veces. La fase orgánica combinada se secó con Na2SO4 y se concentró a sequedad para proporcionar I-24a (40 g, 76,3 %). ESI-MS (M+1): 344,2 calc. para C19H21NO5: 343,1.
Preparación del intermedio I-25a: ácido 3-(3-benc¡lox¡-4-metox¡-an¡l¡no)-3-oxo-propano¡co
A una mezcla de intermedio I-24a (20,40 g, 59,41 mmol) en THF (100 ml), MeOH (100 ml) y H2O (67 ml) se añadió L iO H ^ O (3,74 g, 89,12 mmol) en una porción a 25 °C. La mezcla se agitó a 25 °C durante 16 horas. LCMS mostró que la reacción se completó. El disolvente orgánico se retiró por evaporación rotatoria al vacío a 45 °C. El residuo se vertió en hielo-agua (p/p = 1/1) (200 ml) y se agitó durante 10 min. La suspensión resultante se filtró y la torta de filtro se secó al vacío para proporcionar I-25a (19,30 g, 61,21 mmol, en bruto) en forma de un sólido de color blanco. ESI-MS (M+1): 316,2 calc. para C17H17NO5315,1.
Preparación del intermedio I-26a: 7-benc¡lox¡-2.4-d¡cloro-6-metox¡-qu¡nol¡na
Intermedio I-25a (7,00 g, 22,20 mmol) se suspendió en POCh (68,08 g, 443,99 mmol) en un matraz de fondo redondo de boca única de 500 ml. La mezcla se agitó a 90 °C durante 2 horas en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla de reacción se enfrió a 25 °C y concentró para retirar POCh. El residuo se purificó adicionalmente por cromatografía en columna sobre gel de sílice (gradiente de eluyente PE:EtOAc = 50:1 a 10:1) para dar I-26a (2,50 g, 33,69 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 334,2 calc. para C-i7H13ChNO2: 333,0
Preparación del intermedio I-27a: 7-benc¡lox¡-4-cloro-6-metox¡-2-(5-met¡l-2-fur¡l)qu¡nol¡na
Una solución de intermedio I-26a (900,00 mg, 2,69 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(5-metil-2-furil)-1,3,2-dioxaborolano (R-04b) (588,32 mg, 2,83 mmol), K2CO3 (558,30 mg, 4,04 mmol) y Pd(PPh3)4 (311,19 mg, 269,30 umol) en dioxano (10 ml) se desgasificó y después se calentó a 100 °C durante 16 horas en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla de reacción se vertió en H2O (50 ml). La mezcla se extrajo con acetato de etilo (40 mlX3). La fase orgánica se lavó con solución salina saturada (40 ml), secó sobre Na2SO4 anhidro, concentró al vacío para dar un residuo, que se purificó por cromatografía en columna (gradiente de eluyente PE:EtOAc = 30:1 a 5:1) para proporcionar I-27a (500,00 mg, 48,93 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 380,1 calc. para C22H22ClNO3: 379,1.
Preparación del intermedio I-28a: 7-benc¡lox¡-6-metox¡-2-(5-met¡l-2-fur¡l)-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na
Una solución de I-27a (500,00 mg, 1,32 mmol), 1 -metil-piperidin-4-ilamina (R-03a) (300,63 mg, 2,63 mmol), Pd2(dba)3 (120,54 mg, 131,63 umol), BINAP (81,96 mg, 131,63 umol) y Cs2CO3 (857,78 mg, 2,63 mmol) en DIOXANO (10 ml) se desgasificó y después se calentó a 110 °C durante 16 horas en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla de reacción se purificó por cromatografía en columna (DCM:MeOH=10:1) para proporcionar I-28a (400,00 mg, 66,23 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 458,2 calc. para C28H31N3O3: 4572.
Preparación del intermedio I-29a: 6-metoxi-4-r(1-metil-4-piperidil)aminol-2-(5-metiltetrahidrofurano-2-il)quinolin-7-ol
Una mezcla de I-28a (400,00 mg, 874,20 umol) y Pd/C (100,00 mg) en MeOH (20,00 ml) se agitó a 50 °C en atmósfera de H2 (50 Psi) durante 16 horas. Entonces, el catalizador se retiró por filtración y el filtrado se concentró a sequedad para dar intermedio I-29a (300 mg, 92,38 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 372,3 calc. para C21H29N3O3: 371,2.
Preparación del compuesto 15-01: 6-metox¡-N-(1-met¡l-4-p¡per¡d¡l)-2-(5-met¡ltetrah¡drofurano-2-¡l)-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2,2.2-trifluoroacético
Una mezcla de I-29a (200,00 mg, 538,40 umol), 1-(3-doropropil)pirrolidina (R-09a) (95,39 mg, 646,08 umol) y CS2CO3 (350,84 mg, 1,08 mmol) en DMF (5,00 ml) se desgasificó y purgó con N2 durante 3 veces, y entonces la mezcla se agitó a 100 °C durante 16 horas en atmósfera de N2. La mezcla se concentró para dar un residuo que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1) para dar el compuesto 15-01 como sal de TFA (50,00 mg, 19,24 % de rendimiento) en forma de un aceite de color amarillo. ESI-MS (M+1): 483,4 calc. para C23H42N4O3.C2HF3O2: 596,3, Tr es 1,57.
Preparación del intermedio I-30a: 6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-4-[(1-metil-4-piperidil)amino1quinolin-7-ol
A una solución de I-28a (457,00 mg, 998,78 umol) en MeOH (50 ml) se añadió Pd/C (119,85 mg, 998,78 umol) en atmósfera de N2. La suspensión se desgasificó al vacío y se purgó con H2 varias veces. La mezcla se agitó en atmósfera de H2 (50 psi) a 25 °C durante 16 horas. Entonces, la mezcla de reacción se filtró y el filtro se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice eluyendo con éter de petróleo/acetato de etilo = 5:1 para dar I-30a (350,00 mg, 95,37 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 368,2 calc. para C21H25N3O3: 367,2.
Preparación del intermedio I-31a: 6-[[6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-4-[(1-metil-4-piperidil)amino1-7-quinolil1ox¡1-2-azaespiro[3.31heptano-2-carboxilato de tere-butilo
A una mezcla de I-30a (100,00 mg, 272,15 umol) y 6-metilsulfoniloxi-2-azaespiro[3.31heptano-2-carboxilato de terebutilo (R-10a) (95,15 mg, 326,58 umol) en DMF (5,00 ml) se añadió Cs2CO3 (177,35 mg, 544,31 umol) en una porción a 25 °C en atmósfera de N2. La mezcla se agitó a 100 °C durante 16 horas. Entonces, la mezcla se concentró y se purificó por TLC prep. para dar I-31a (60,00 mg, 39,18 % de rendimiento). ESI-MS (M+1): 563,3 calc. para C32H42N4O5: 562,3.
Preparación del intermedio I-31b: 2-[[6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-4-[(1-metil-4-piperidil)amino1-7-quinolil1ox¡1-7-azaesp¡ro[3.51nonano-7-carboxilato de tere-butilo
Intermedio I-31b se obtuvo de una manera análoga a intermedio I-31a usando 2-metilsulfoniloxi-7-azaespiro[3.51nonano-7-carboxilato de tere-butilo (R-10b). 19% de rendimiento. ESI-MS (M+1): 591,3 calc. para C34H46N4O5: 590,3.
Preparación del compuesto 16-01: 7-(2-azaesp¡ro[3.31heptan-6-ilox¡)-6-metox¡-2-(5-met¡l-2-fur¡l)-N-(1-met¡l-4-p¡perid¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2,2,2-trifluoroacético
I-31a (20,00 mg, 35,54 umol) se disolvió en HCl/EtOAc (5,00 ml) en un matraz de fondo redondo de boca única de 50 ml. La mezcla se agitó a 25 °C durante 2 horas en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla se concentró, purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6) para dar 16-01 como sal de TFA (12,00 mg, 73 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 463,3 calc. para C27H34N4O3.C2HF3O2: 576,2, Tr es 1,97.
Preparación del compuesto 16-02: 7-(7-azaespiro[3.51nonan-2-iloxi)-6-metoxi-2-(5-metil-2-furil)-N-(1-metil-4-p¡perid¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2,2,2-trifluoroacético
Compuesto 16-02 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 16-01 partiendo de I-31b. Purificación por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6), 72 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 491,3 calc. para C29H38N4O3.C2HF3O2: 604,3: Tr es 2,03.
Preparación del compuesto 17-01: 6-metox¡-7-[(2-met¡l-2-azaesp¡ro[3.31heptan-6-il)ox¡1-2-(5-met¡l-2-fur¡l)-N-(1-met¡l-4-p¡perid¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2,2,2-trifluoroacético Una mezcla de 16-01 (37,00 mg, 81,53 umol), (HCHO)n (R-07a) (22,03 mg, 244,58 umol), NaBH(OAc)3 (51,84 mg, 244,58 umol) y HCOOH (3,92 mg, 81,53 umol) en MeOH (5,00 ml) se desgasificó y purgó con N2 durante 3 veces. La mezcla se agitó a 70 °C durante 16 horas en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla se concentró al vacío para dar un residuo que se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1) para dar 17-01 como sal de TFA (9,00 mg, 23 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 477,4 calc. para C23H36N4O3.C2HF3O2: 590,2; Tr es 1,64.
Preparación del compuesto 17-02: 6-metoxi-7-[(7-metil-7-azaespiro[3.51nonan-2-il)oxi1-2-(5-metil-2-furil)-N-(1-metil-4-p¡perid¡l)qu¡nol¡n-4-am¡na: ácido 2,2,2-trifluoroacético
Compuesto 17-02 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 17-01 partiendo de 16-02. Purificación por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 1), 15 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 505,4 calc. para C30H40N4O3.C2HF3O2: 618,3; Tr es 1,72.
Preparación del intermedio I-32a: 2.4-d¡cloro-6-metoxi-qu¡nol¡n-7-ol
Intermedio I-25a (7,00 g, 22,2 mmol) se suspendió en POCI3 (58,35 g, 380,57 mmol) en un matraz de fondo redondo de boca única de 500 ml. La mezcla se agitó a 105 °C durante 4 horas en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla de reacción se enfrió a 25 °C y concentró para retirar POCh. El residuo se purificó adicionalmente por cromatografía en columna sobre gel de sílice (gradiente de eluyente PE:EtOAc = 50:1 a 10:1) para dar I-32a (1,40 g, 27,4% de rendimiento). ESI-MS (M+1): 244,1 calc. para ^ ^ ^ 0 2 : 242,99.
Preparación del intermedio I-33a: 7-(3-bromopropox¡)-2.4-dicloro-6-metox¡-qu¡nol¡na
A una solución de I-32a (3 g, 12,29 mmol) y 1,3-dibromopropano (2,98 g, 14,75 mmol) en MeCN (60 ml) se añadió K2CO3 (4,25 g, 30,73 mmol). La mezcla se agitó a 60 °C durante 88 horas. Entonces, la mezcla de reacción se concentró al vacío para dar un residuo que se diluyó con 100 ml de agua y se filtró. La torta de filtro se concentró al vacío y purificó adicionalmente por cromatografía en columna sobre gel de sílice (se eluyó con PE:EtOAc = 30:1~ MeOH puro) para dar intermedio I-33a (1 g, 22,29 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. ESI-MS (M+1): 364,1 calc. para C13H12BrChN02: 362,94.
Preparación del intermedio I-34a: 2,4-dicloro-7-r3-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)propoxi1-6-metoxi-quinolina
A una solución de I-33a (500 mg, 1,37 mmol) y 3,3-difluoropirrolidina (R-11a) (220 mg, 2,06 mmol) en MeCN (50 ml) se añadió K2CO3 (378 mg, 2,74 mmol). La mezcla se agitó a 50 °C durante 88 horas. Entonces, la mezcla de reacción se concentró al vacío para dar un residuo que se repartió entre 100 ml de DCM y 100 ml de agua. La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con DCM (100 mlx3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para dar intermedio I-34a crudo (600 mg, crudo) en forma de un sólido de color gris que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. ESI-MS (M+1): 391,2 calc. para C17H1sCl2F2N2O2: 390,1.
Preparación del intermedio I-34b: 2,4-dicloro-7-r3-(4,4-difluoro-1-piperidil)propoxi1-6-metoxi-quinolina
Intermedio I-34b se obtuvo de una manera análoga a intermedio I-34a usando 4,4-difluoropiperidina (R-11b). ESI-MS (M+1): 405,2 calc. para ^ ^ 0^ 2 ^ 02 : 404,09.
Preparación del intermedio I-35a: 4-cloro-7-r3-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)propoxi1-2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-quinolina
Una mezcla de I-34a (600 mg, 1,53 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(5-etil-2-furil)-1,3,2-dioxaborolano (R-04r) (408 mg, 1,84 mmol), K2CO3 (529 mg, 3,83 mmol), Pd(PPh3)4 (177 mg, 153,00 umol) en dioxano (10 ml) y H2O (10 ml) se desgasificó y purgó con N2 durante 3 veces, y la mezcla se agitó a 110 °C durante 16 h en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla de reacción se extrajo con DCM (50 mlx3). La fase orgánica combinada se secó sobre Na2S04, se filtró y se concentró al vacío para dar un residuo que se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (se eluyó con PE:Et0Ac = 10:1- MeOH puro) para dar intermedio I-35a (400 mg, 57,98 % de rendimiento) en forma de un sólido de color pardo. ESI-MS (M+1): 451,3 calc. para C23H25C F2N2O3: 450,15.
Preparación del intermedio I-35b: 4-cloro-7-r3-(4,4-difluoro-1-piperidil)propoxi1-2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-quinolina
Intermedio I-35b se obtuvo de una manera análoga a intermedio I-35a. 35 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 465,3 calc. para C24H27C F2N2O3: 464,17.
Preparación del compuesto 18-01: 7-r3-(3,3-difluoropirrolidin-1-il)propoxi1-2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-N-(1-metil-4-piperidil)quinolin-4-amina: ácido 2.2.2-tr¡fluoroacét¡co
Una mezcla de I-35a (200 mg, 443,55 umol), 1 -metil-piperidin-4-ilamina (R-03a) (101 mg, 887,10 umol), Pd2(dba)3 (41 mg, 44,36 umol), BINAP (28 mg, 44,36 umol) y Cs2C03 (289 mg, 887,10 umol) en dioxano (10 ml) se desgasificó y purgó 3 veces con N2, y entonces la mezcla se agitó a 120 °C durante 16 h en atmósfera de N2. Entonces, la mezcla de reacción se concentró al vacío para dar un residuo que se purificó sucesivamente por TLC prep. (DCM:Me0H = 10:1) y HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6) para dar el compuesto 18-01 como sal de TFA (11 mg, 3,56 %) en forma de un sólido de color blanco. ESI-MS (M+1): 529,4 calc. para C29H38F2N4O3.C2HF3O2: 642,2; Tr es 1,80.
Preparación del compuesto 18-02: 7-r3-(4,4-difluoro-1-piperidil)propoxi1-2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-N-(1-metil-4-piperidil)quinolin-4-amina: ácido 2.2.2-tr¡fluoroacét¡co
Compuesto 18-02 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 18-01 partiendo de I-35b. Purificación por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6), 6,6 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 543,4 calc. para C30H40F2N4O3.C2HF3O2: 656,3; Tr es 1,80.
Ruta sintética 9
Figure imgf000049_0001
Condiciones: a) (l-etoxicidopropoxi)-trimetil-silano (6 equiv.), NaBH3CN (6 equiv.), AcOH (6 equiv.), MeOH, 60 °C, 16 h.
En el esquema anterior R2 es arilo o heteroarilo; R3 es H, Cl, OCF3 u Oalquilo(C1-C6) y Ra es una cadena de hidrocarburo, que contiene átomos de nitrógeno y/u oxígeno.
Preparación del compuesto 19-01: N-(7-ciclopropil-7-azaespiror3.51nonan-2-il)-2-(5-etil-2-furil)-6-metoxi-7-(3-pirrolidin-1-¡lpropox¡)qu¡nol¡n-4-am¡na; ácido 2.2.2-trifluoroacético
A una solución de compuesto 4-03 (20,00 mg, 38,56 umol) en MeOH (10,00 ml) se añadieron (1-etoxiciclopropoxi)-trimetil-silano (40,3 mg, 231,26 umol), NaBH3CN (14,54 mg, 231,36 umol) y AcOH (13,89 mg, 231,36 umol). La mezcla se agitó a 60 °C durante 16 horas. Entonces, la mezcla se concentró y el residuo se purificó por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6) para dar compuesto 19-01 puro como sal de TFA (4,00 mg, 18,57 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillo. ESI-MS (M+1): 559,4 calc. para C34H46N4O3.C2HF3O2: 672,3; Tr es 1,95.
Preparación del compuesto 19-02: N-(7-c¡cloprop¡l-7-azaesp¡ro[3.51nonan-3-¡l)-2-(5-et¡l-2-fur¡l)-6-metoxi-7-(3-p¡rrol¡d¡n-1-¡lpropoxi)qu¡nol¡n-4-am¡na; ácido 2,2,2-trifluoroacético
Compuesto 19-02 se obtuvo de una manera análoga a compuesto 19-01 partiendo de 4-04. Purificación por HPLC prep. (Procedimiento general, Método 6), 54 % de rendimiento. ESI-MS (M+1): 559,5 calc. para C34H46N4O3.C2HF3O2: 672,3; Tr es 1,91.
Ensayos biológicos
Ensayo de actividad enzimática de G9a
El ensayo bioquímico para medir la actividad enzimática de G9a se basa en transferencia de energía de fluorescencia resuelta en el tiempo (TR-FRET) entre criptato de europio (donante) y XL665 (aceptor). TR-FRET se observa cuando se incuba el péptido monometil-H3K9 histona biotinado con anticuerpo anti-dimetil-histona H3K9 marcado con criptato (CisBio n.° Cat 61KB2KAE) y estreptoavidina XL665 (CisBio n.° Cat 610SAXLA), después de reacción enzimática de G9a.
La enzima G9a humana expresada en un sistema de expresión de células Sf9 infectadas con baculovirus se obtuvo de BPS Biosciences (n.° Cat. 51001). El ensayo de actividad enzimática se realizó en una placa blanca de 384 pocillos en un volumen final de 20 pl, como sigue:
• 4 pl de vehículo o compuesto estudiado concentrado 2,5 x preparado en tampón de ensayo (Tris-HCl 50 mM, NaCl 10 mM, DTT 4 mM, 0,01 % Tween-20 pH 9). El porcentaje final de DMSO fue 0,5 %.
• 2 pl de enzima G9a 1 nM diluida en tampón de ensayo. La concentración final fue 0,2 nM.
• Iniciar la reacción añadiendo 4 pl de mezcla de sustrato que contiene S-adenosilmetionina 20 pM y péptido biotinado monometil-H3K9 histona 40 nM.
• La reacción se realizó durante 1 hora a temperatura ambiente.
• La actividad enzimática se detuvo añadiendo 5 pl de anticuerpo anti-dimetil-histona H3K9 marcado con criptato. Concentración final 150 nM.
• Entonces, añadir 5 pl de perlas de estreptoavidina XL665. Concentración final de 16 pM.
• Leer la placa después de 1 hora de incubación a temperatura ambiente.
Para cada pocillo, se midió fluorescencia a 620 nm y 665 nm. Después se calculó una relación (665 nm/620 nm) para minimizar interferencias del medio. El control positivo se obtuvo en presencia del vehículo de los compuestos. El control negativo se obtuvo en ausencia de actividad enzimática de G9a. Se determinaron valores de CI50 calculados usando GraphPrism usando curva de inhibición de 4 parámetros.
Ensayo de actividad enzimática de DNMT1
El ensayo bioquímico para medir la actividad enzimática de DNMT1 se basa en transferencia de energía de fluorescencia resuelta en el tiempo (TR-FRET) entre lumi4-Tb (donante) y d2 (aceptor) utilizando el ensayo de metiltransferasa EPIgeneous (CisBio n.° Cat 62SAHPEB). TR-FRET se observa cuando el anticuerpo específico para S-adenosilhomocisteína marcada con Lumi4-Tb se incuba con S-adenosilhomocisteína marcada con d2. La señal TR-FRET es inversamente proporcional a la concentración de SAH, producto de la actividad enzimática de DNMT1, en la muestra. DNMT1 humano se obtuvo en Reaction Biology Corp. (n.° Cat DMT-21-124).
El ensayo de actividad enzimática se realizó en una placa blanca de 384 pocillos en un volumen final de 20 pl, como sigue:
• 4 pl de vehículo o compuesto estudiado concentrado 2,5 x preparado en tampón de ensayo (Tris-HCl 50 mM, EDTA 1 mM, DTT 1 mM, 0,1 % Triton X-100, 5 % glicerol pH 7,5). El porcentaje final de DMSO fue 0,5 %.
• 2 pl de enzima DNMT1 1 nM diluida en tampón de ensayo. La concentración final fue 20 nM.
• Iniciar la reacción añadiendo 4 pl de mezcla de sustrato que contiene S-adenosilmetionina 1 pM y poli-desoxi inosina poli-desoxi citosina (pdl-pdC) ADN 1 pM.
• La reacción se realizó durante 15 minutos a 37 °C.
• La actividad enzimática se detuvo añadiendo 2 pl del tampón uno de ensayo de metiltransferasa EPIgeneous. • Después de 10 minutos a temperatura ambiente, se añadieron 4 pl de anticuerpo específico para S-adenosilmetionina marcado con Lumi4-Tb diluido 50 x en tampón dos de ensayo de metiltransferasa EPIgeneous.
• Añadir 4 pl de S-adenosilmetionina marcada con d2 diluida 31 x en tampón dos de ensayo de metiltransferasa EPIgeneous.
• Leer la placa después de 1 hora de incubación a temperatura ambiente.
Para cada pocillo, se midió fluorescencia a 620 nm y 665 nm. Después se calculó una relación (665 nm/620 nm) para minimizar interferencias del medio. El control positivo se obtuvo en presencia del vehículo de los compuestos. El control negativo se obtuvo en ausencia de actividad enzimática de G9a. Se determinaron valores de CI50 calculados usando GraphPrism usando curva de inhibición de 4 parámetros.
Ensayo de actividad enzimática de DNMT3A y DNMT3B
Los ensayos de actividad enzimática de DNMT3A y DNMT3B se realizaron con el kit de ensayo universal de quimioluminiscencia BPS DNMT (BPS n.° 52035) usando una tira de placa de 96 pocillos revestida previamente con sustrato de DNMT.
El protocolo de ensayo de actividad enzimática es como sigue:
- Rehidratar los pocillos añadiendo 150 pl de tampón TBST (1x Tris-tamponado salino (TBS), pH 8,0, que contiene 0,05 % Tween-20) a cada pocillo. Incubar 15 minutos a temperatura ambiente.
- diluir cada DNMT purificado [DNMT3A/3L (BPS n.° 51106) o DNMT3B/3L (BPS n.° 51109)] en tampón de ensayo 2 1XDNMT (BPS n.° 52201) hasta 5-10 ng/pl. Mantener la enzima diluida en hielo hasta su uso.
- Preparar 50 pl de mezcla de reacción que consiste en 20 pl de DNMT (5-10 ng/pl), 12,5 pl de tampón de ensayo 2 DNMT 4x (BPS n.° 52201), 2,5 pl de S-adenosilmetionina 400 pM, compuesto de ensayo a concentraciones variables de 3 nM a 10 pM y H2O hasta 50 pl.
- Añadir la mezcla de reacción completa a los pocillos revestidos de sustrato. Incubar a 37 °C durante 120 minutos. - Lavar los pocillos tres veces con tampón TBST.
- Añadir 100 pl de tampón bloqueante (BPS n.° 52100) a cada pocillo. Agitar en una plataforma rotatoria durante 10 min. Retirar sobrenadante.
- Diluir el primer anticuerpo frente a 5-metilcitosina (Anti-5-metilcitosina de BPS) 400 veces con tampón bloqueante y añadir 100 pl por pocillo. Incubar 1 hora a temperatura ambiente con agitación lenta.
- Lavar la placa tres veces con tampón TBST e incubar en tampón bloqueante agitando con una plataforma rotatoria durante 10 min. Retirar sobrenadante.
- Diluir el anticuerpo secundario (anticuerpo secundario 1 marcado con HRP (BPS n.° 52130H)) 1000 veces con tampón bloqueante y añadir 100 pl por pocillo. Incubar durante 30 min a temperatura ambiente con agitación lenta. - Lavar la placa tres veces con tampón TBST e incubar en tampón bloqueante agitando con una plataforma rotatoria durante 10 min. Retirar sobrenadante.
- justo antes de su uso, mezclar en hielo 50 pl de sustrato A quimioluminiscente HRP (BPS) y 50 pl de sustrato B quimioluminiscente HRP (BPS) y añadir 100 pl por pocillo. Leer inmediatamente la luminiscencia usando un lector de microplaca BioTek Synergy™ 2.
Los datos de intensidad de quimioluminiscencia se analizaron y compararon. El control positivo se obtuvo en ausencia de los compuestos. El control negativo se obtuvo en ausencia de enzimas DNMT. Los valores calculados de CI50 se determinaron mediante un análisis de regresión no lineal de curva dosis-respuesta sigmoidal generada con una curva de inhibición de cuatro parámetros.
La Tabla 2 muestra los valores de inhibición para G9a y DNMT (CI50) para compuestos seleccionados; donde 1 pM < CI50 á 10 pM (+), 500 nM á CI50 < 1 |jM (++), 100 nM á CI50 < 500 nM (+++) y CI50 <100 nM (++++).
Tabla 2
Figure imgf000051_0001
continuación
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Los compuestos en la Tabla 2 pueden inhibir G9a así como una o más DNMT, seleccionadas entre el grupo DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, con valores CI50 ^ 10 pM.
Ensayo de proliferación celular
La proliferación celular se analizó después de 48 horas de tratamiento in vitro utilizando el ensayo de proliferación celular CellTiter 96 Aqueous One Solution (Promega, Madison, W). Este es un método colorimétrico para determinar el número de células viables en proliferación.
Para el ensayo, se cultivaron células en suspensión por triplicado a una densidad de 1x106 células/ ml en placas de 96 pocillos (100.000 células/pocillo, 100 pl/pocillo), excepto para líneas celulares OCILY-3 y OCILY-10 que se cultivaron a una densidad de 0,5x106 células/ ml (50.000 células/pocillo, 100 pl/pocillo) y para líneas celulares HepG2, Hep3B y PLC/PRF/5 que se cultivaron a una densidad de 3000 células/pocillo, 100 pl/pocillo). Se obtuvieron células adherentes de matraces 80-90 % confluentes y se sembraron 100 pl de células a una densidad de 5000 células/pocillo en placas de 96 pocillos por triplicado. Antes de añadir los compuestos, se dejaron adherir las células adherentes al fondo de los pocillos durante 12 horas. En todos los casos, solo se usaron los 60 pocillos interiores para evitar cualquier efecto frontera.
Después de 48 horas de tratamiento, las placas con células en suspensión se centrifugaron a 800 g durante 10 minutos y se retiró el medio. Las placas con células adherentes se movieron para retirar el medio. Entonces, las células se incubaron con 100 ul/pocillo de medio y 20 ul/pocillo de reactivo CelITiter 96 Aqueous One Solution. Después de 1-3 horas de incubación a 37 °C, se midió la absorbancia a 490 nm en un lector de placas de 96 pocillos. La absorbancia de fondo se midió en pocillos con solo medio de línea celular y reactivo de solución. Los datos se calcularon como porcentaje de absorbancia total de la célula tratada/absorbancia de células no tratadas.
La Tabla 3 muestra la respuesta funcional de compuestos seleccionados en líneas celulares establecidas y cultivos primarios (GI50); donde, GI50 >10 pM (+), 1 pM < GI50 < 10 pM (++),100 nM < GI50 < 1 pM (+++) y GI50 < 100 nM (++++). Estas líneas celulares de cáncer y cultivos primarios corresponden a leucemia linfocítica aguda (ALL), CEMO-1 y LAL-CUN-2, a linfoma de linfocitos B macrocítico difuso de tipo linfocitos B activados (ABC-DLBCL), OCI-Ly3 y OCI-Ly10 y a células de carcinoma hepatocelular (HCC), HepG2, Hep3B y PLC/PRF/5.
Tabla 3
Figure imgf000053_0001
Los compuestos en la Tabla 3 inhiben la proliferación de leucemia linfocítica aguda (ALL), linfoma de linfocitos B macrocítico difuso de tipo linfocitos B activados (ABC-DLBCL) y hepatocarcinoma (HCC).
Los compuestos 3-04 y 3-07 se ensayaron frente a diferentes líneas celulares de tumores sólidos y oncohematológicas usando el protocolo de proliferación celular descrito anteriormente.
La Tabla 4 (donde GC-DLBCL representa linfoma de linfocitos B macrocítico difuso de tipo linfocitos B de centro germinal, AML representa leucemia mieloide aguda, MCL representa linfoma de células del manto y MM representa mieloma múltiple, muestra la respuesta funcional en diferentes líneas celulares (GI50) para los compuestos 3-04 y 3­ 07; donde, GI50 > 10 |jM (+), 1 |jM < GI50 á 10 |jM (++), 100 nM < GI50 á 1 jiM (+++) y GI50 á 100 nM (++++).
Tabla 4
Figure imgf000054_0002
Los compuestos en la Tabla 4 inhiben la proliferación de diferentes líneas celulares de tumores sólidos y oncohematológicas.
La Tabla 5 muestra la comparación de compuestos seleccionados (dual G9a - DNMT) con G9a selectiva (BIX12094 y UNC0638) e inhibidores de DNMT (5-azacitidina y decitabina) en líneas celulares establecidas y cultivos primarios (GI50); donde, GI50 >10 jiM (+), 1 jiM á GI50 < 10 jiM (++), 100 nM á GI50 < 1 jiM (+++) y GI50 < 100 nM (++++). Estas líneas celulares de cáncer y cultivos primarios corresponden a leucemia linfocítica aguda (ALL), CEMO-1 y LAL-CUN-2, a leucemia mieloide aguda (AML): OCI-AML-2 y MV4-11 y a mieloma múltiple (MM): JJN3 y U266.
Tabla 5
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Los compuestos duales 3-04 y 3-07 son inhibidores más potentes de la proliferación celular que los inhibidores de G9a selectivos (BIX12094 y UNC0638) y los inhibidores de DNMT (5-azacitidina y decitabina).
Evaluación de la actividad terapéutica in vivo en modelo de ratón preclínico de B-ALL humana con la línea celular CEMO-1
Para examinar la actividad in vivo, se usó un modelo preclínico de B-ALL humana con ratón RAG2. se adquirieron ratones hembra BALB/cA-Rag2'/'YC/' de seis a ocho semanas de edad en The Netherlands Cancer Institute y se mantuvieron en jaulas de aislamiento libres de patógenos. Los ratones RAG2 se inyectaron por vía intravenosa (i.v.) con 10*10® células CEMO-1 en la vena de la cola para generar el modelo de ratón de B-ALL humana. Los animales en grupos de seis se trataron a partir del día tres después de la inoculación de células. El primer grupo sirvió como control y recibió placebo (solución salina) diariamente durante 28 días consecutivos, a través de inyección i.v.
Resultados con compuesto 3-04:
El segundo grupo se trató con 3-04 (2,5 mg/kg) diariamente durante 28 días consecutivos vía i.v. Los animales se monitorizaron semanalmente para detectar pérdida de peso y signos de carga tumoral mediante citometría de flujo de células humanas. La mediana de supervivencia para los ratones tratados con 3-04 (N = 6) fue de 91 días (SD: ±5,72) comparada con 57 días (SD: ±10,52) para ratones de control (N=6) después de inoculación celular. El tratamiento prolongó significativamente la supervivencia de este grupo en comparación con el control (P = 0,0009), según lo determinado por el método de Kaplan-Meier con el ensayo de log-rank calculado con el software estadístico MedCalc (Figura 1).
REFERENCIAS CITADAS EN LA SOLICITUD
Shankar SR. et al., "G9a, a multipotent regulator of gene expression". Epigenetics, 2013. 8(1): pág. 16-22.
Vilas-Zornoza A. et al., "Frequent and Simultaneous Epigenetic Inactivation of TP53 Pathway Genes in Acute Lymphoblastic Leukemia" PLoS ONE, 2011.6(2): pág. e17012.
Rotili D. et al., "Properly Substituted Analogues of BIX-01294 Lose Inhibition of G9a Histone Methyltransferase and Gain Selective Anti-DNA Methyltransferase 3A Activity", PLoS ONE, 2014. 9(5): pág. E96941.
Vedadi M. et al., "A chemical probe selectively inhibits G9a and GLP methyltransferase activity in cells", Nat. Chem. Biol. 2011, 7, pág. 566-574. Liu F. et al., "Discovery of an in vivo chemical probe of the lysine methyltransferases G9a and GLP", J. Med. Chem. 2013, 56(21), pág. 8931-42.
Giardina G. et al., "Discovery of a Novel Class of Selective Non-Peptide Antagonists for the Human Neurokinin-3 Receptor 1. Identification of the 4-Quinolinecarboxamide Framework", Journal of Medicinal Chemistry 1997, 40(12), pág. 1794-1807.
Drake N. et al., "Synthetic Antimalarials. The Preparation of Certain 4-Aminoquinolines", Journal of the American Chemical Society 1946, 68, pág. 1208-13.
Tiscornia G. et al., "Production and purification of lentiviral vectors". Nat Protoc. 2006, 1(1), pág. 241-5.

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I) o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables
Figure imgf000056_0001
en donde:
R1 es Cy2', o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3';
en donde Cy2' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R2 es un sistema anular conocido unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros;
(iii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(v) fenilo condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados; y
(vi) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espirocondensados;
en donde R2 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy1 o un Cy2, y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z1 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy1;
en donde Cy1 o Cy2 están opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R3 se selecciona entre Rc, halógeno, -NO2, -CN, O Rc', -OC(O)Rc', -OC(O)ORc', -OC(O)NRc'Rc', -NRc'Rc', -NRc'C(O)Rc', -NRc'C(O)ORc', -NRc'C(O)NRc'Rc', -NRc'S(O)2Rc', -NRcSO2NRcRc', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc', -SO2Rc', -SO2(ORc), -SO2NRc'Rc', -SC(O)NRc'Rc', -C(O)Rc', -C(O)ORc', -C(O)NRc'Rc' , y -C(O)NRc'ORc', y -C(O)NRcSO2Rc';
R4 se selecciona entre -ORa y -NRaRc';
cada Ra es independientemente Cy2, o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3; en donde Cy2 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
cada Rb se selecciona independientemente entre halógeno, -NO2, -CN, -ORc', -OC(Y)Rc', -OC(Y)ORc', -OC(Y)NRc'Rc', -NRc'Rc', -NRc'C(Y)Rc', -NRc'C(Y)ORc', -NRc'C(Y)NRc'Rc', -NRc'S(O)2Rc', -NRc'SO2NRc'Rc', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc', -SO2Rc', -SO2(ORc'), -SO2NRc'Rc', -SC(Y)NRc'Rc', -C(Y)Rc', -C(Y)ORc', -C(Y)NRc'Rc', -C(Y)NRc'ORc', y -C(O)NRc'SO2Rc';
cada Rc' es independientemente H o Rc;
cada Rc se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(Ci-C6), alquenilo(C2-C6), alquinilo(C2-C6), cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces, y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, en donde cada Rc está opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno,
Y es O, S o NRc';
Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6 y Z7 se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(Ci-Ci2), alquenilo(C2-C i2), alquinilo(C2-C i2), y cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces;
Cyi , Cy4 y Cy5 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, saturado o parcialmente insaturado; y anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros;
Cy2 y Cy3 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
Cy2' y Cy3' son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
en donde en los anillos carbocíclicos todos los miembros del anillo son átomos de carbono; y en los anillos heterocíclicos y heteroaromáticos uno o más miembros del anillo se seleccionan entre N, O y S; y en donde en todos los anillos saturados o parcialmente insaturados uno o dos miembros de los anillos son opcionalmente C(O) y/o C(NH) y/o C[Nalquil(Ci-C4)].
2. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación i, en donde R2 es distinto de fenilo no sustituidono sustituido, 4-metilfenilo, 4-clorofenilo, 2-clorofenilo, 3,4-diclorofenilo, 4-fluorofenilo y 4-metoxifenilo.
3. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones i-2, en donde R3 se selecciona entre halógeno, -CN y -ORc'.
4. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 3, en donde R3 es -ORc'.
5. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones i-4, en donde R4 es ORa.
6. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 5, en donde Ra en R4 es Z3 opcionalmente sustituido como se define en la reivindicación i.
7. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 5-6, en donde R4 es ORa con la condición de que Ra contiene al menos un átomo de nitrógeno.
8. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde R2 es un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros;
(iii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros; y
(iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
en donde R2 está opcionalmente sustituido como se define en la reivindicación 1.
9. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 8, en donde R2 es fenilo o anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros, estando ambos grupos opcionalmente sustituidos como se define en la reivindicación 1.
10. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 9, en donde R2 es anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros opcionalmente sustituido como se define en la reivindicación 1.
11. Una composición farmacéutica o veterinaria que comprende una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula (I) como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-10, o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero del compuesto de fórmula (I) o de su sal farmacéutica o veterinariamente aceptable, junto con uno o más excipientes o vehículos farmacéutica o veterinariamente aceptables.
12. Un compuesto de fórmula (I'), o una sal farmacéutica o veterinariamente aceptable del mismo, o cualquier estereoisómero o mezclas de los mismos, o bien del compuesto de fórmula (I') o de cualquiera de sus sales farmacéutica o veterinariamente aceptables
Figure imgf000058_0001
para uso en el tratamiento y/o prevención de cáncer mediado por la inhibición de histona metiltransferasa G9a y de una o más DNMT seleccionadas entre el grupo que consiste en DNMT1, DNMT3A y DNMT3B, en donde:
R1 es Cy2', o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3';
en donde Cy2' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3' está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R2' está unido a la quinolina a través de un átomo de carbono y se selecciona entre el grupo que consiste en Cy6, y Z8; en donde cada Z8 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy7;
en donde Cy6 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy1 o un Cy2, y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z1 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy1;
en donde Cy1 o Cy2 están opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z2 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
en donde Cy7 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy8; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z9 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy8;
en donde Cy8 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z10 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
R3 se selecciona entre H, Rc, halógeno, -NO2, -Cn , -ORc', -OC(O)Rc', -OC(O)ORc', -OC(O)NRc'Rc', -NRc'Rc', -NRc'C(O)Rc', -NRc'C(O)ORc', -NRc'C(O)NRc'Rc', -NRc'S(O)2Rc', -NRc'SO2NRc'Rc', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc', -SO2Rc', -SO2(ORc'), -SO2NRc'Rc', -SC(O)NRc'Rc', -C(O)Rc', -C(O)ORc', -C(O)NRc'Rc', y -C(O)NRc'ORc', y -C(O)NRcSO2Rc';
R4 se selecciona entre -ORa y -NRaRc';
cada Ra es independientemente Cy2, o Z3 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy3; en donde Cy2 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy4; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z4 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy4;
en donde Cy4 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb; y
en donde Cy3 está opcionalmente sustituido con:
a) un Cy5; y/o
b) uno o más sustituyentes Rb, y/o
c) uno o más sustituyentes Z6 opcionalmente sustituidos con uno o más sustituyentes Rb y/o un Cy5;
en donde Cy5 está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados independientemente entre Rb, y Z7 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes Rb;
cada Rb se selecciona independientemente entre halógeno, -NO2, -CN, -ORc', -OC(Y)Rc', -OC(Y)ORc', -OC(Y)NRc'Rc', -NRc'Rc', -NRc'C(Y)Rc', -NRc'C(Y)ORc', -NRc'C(Y)NRc'Rc', -NRc'S(O)2Rc', -NRc'SO2NRc'Rc', -SRc', -S(O)Rc', -S(O)ORc', -SO2Rc', -SO2(ORc'), -SO2NRc'Rc', -SC(Y)NRc'Rc', -C(Y)Rc', -C(Y)ORc', -C(Y)NRc'Rc', -C(Y)NRc'ORc', y -C(O)NRc'SO2Rc';
cada Rc' es independientemente H o Rc;
cada Rc se selecciona independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(C1-C6), alquenilo(C2-C6), alquinilo(C2-C6), cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces, y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, en donde cada Rc está opcionalmente sustituido con uno o más átomos de halógeno,
Y es O, S o NRc';
Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, Z6, Z7, Z8, Z9 y Z10 se seleccionan independientemente entre el grupo que consiste en alquilo(C1-C12), alquenilo(C2-C12), alquinilo(C2-C12), y cadena de hidrocarburo(C2-C6) que tiene uno o más dobles enlaces y uno o más triples enlaces;
Cy1, Cy4, Cy5 y Cy8 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, saturado o parcialmente insaturado; y anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros;
Cy2, Cy3 y Cy7 son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en fenilo; anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros; anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espirocondensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
Cy2' y Cy3' son independientemente un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado; y un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
Cy6 es un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) anillo heteroaromático de 5 o 6 miembros;
(iii) anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico de 3 a 7 miembros, que está saturado o parcialmente insaturado;
(iv) anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclicos saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros, que está condensado, condensado con puente o espiro-condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(v) fenilo condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados; y
(vi) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espirocondensados;
en donde en los anillos carbocíclicos todos los miembros del anillo son átomos de carbono; y en los anillos heterocíclicos y heteroaromáticos uno o más miembros del anillo se seleccionan entre N, O y S; y en donde en todos los anillos saturados o parcialmente insaturados uno o dos miembros de los anillos son opcionalmente C(O) y/o C(NH) y/o C[Nalquil(Ci-C4)].
13. El compuesto de fórmula (I') para su uso de acuerdo con la reivindicación 12, en donde R2' es Cy6, y Cy6 es un sistema anular conocido seleccionado entre el grupo que consiste en:
(i) fenilo;
(ii) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros;
(iii) fenilo condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(iv) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo monocíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado o aromático de 3 a 7 miembros;
(v) fenilo condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados; y
(vi) anillo heteroaromático de 5 a 6 miembros condensado a un anillo bicíclico carbocíclico o heterocíclico saturado o parcialmente insaturado de 6 a 14 miembros, en donde los anillos del anillo bicíclico están espiro-condensados;
en donde R2' está opcionalmente sustituido como se define en la reivindicación 12 ;
con la condición de que el compuesto de fórmula (I') es distinto de:
2-[(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]etanol;
sal de clorhidrato de 2-[(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]etanol;
1- [[2-(4-clorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]-3-(metilamino)propan-2-ol;
sal de clorhidrato de 1-[[2-(4-clorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]-3-(metilamino)propan-2-ol;
2- [[2-(4-clorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]etanol;
sal de clorhidrato de 2-[[2-(4-clorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]etanol;
1- amino-3-[(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]propan-2-ol;
sal de clorhidrato de 1-amino-3-[(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]propan-2-ol;
2- [[2-(3,4-diclorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]etanol;
sal de clorhidrato de 2-[[2-(3,4-diclorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]etanol;
(2S)-1-[(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]propan-2-ol;
sal de clorhidrato de (2S)-1-[(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]propan-2-ol;
1-[[7-metoxi-2-(p-tolil)-4-quinolil]amino]-3-(metilamino)propan-2-ol;
sal de clorhidrato de 1-[[7-metoxi-2-(p-tolil)-4-quinolil]amino]-3-(metilamino)propan-2-ol;
1- amino-3-[[2-(3,4-diclorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
sal de clorhidrato de 1-amino-3-[[2-(3,4-diclorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
2- [[7-metoxi-2-(p-tolil)-4-quinolil]amino]etanol;
sal de clorhidrato de 2-[[7-metoxi-2-(p-tolil)-4-quinolil]amino]etanol;
3- [(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]propano-1;2-diol;
sal de clorhidrato de 3-[(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)amino]propano-1;2-diol;
1-amino-3-[[2-(4-clorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
sal de clorhidrato de 1-amino-3-[[2-(4-clorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
1-amino-3-[[7-metoxi-2-(p-tolil)-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
sal de clorhidrato de 1-amino-3-[[7-metoxi-2-(p-tolil)-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
1- amino-3-[[7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
sal de clorhidrato de 1-amino-3-[[7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-4-quinolil]amino]propan-2-ol;
2- [[7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-4-quinolil]amino]etanol;
sal de clorhidrato de 2-[[7-metoxi-2-(4-metoxifenil)-4-quinolil]amino]etanol;
5-[[[2-(4-dorofenil)-7-metoxi-4-quinolil]amino]metil]oxazolidin-2-ona;
5-[[[7-metoxi-2-(p-tolil)-4-quinolil]amino]metil]oxazolidin-2-ona;
Bencil-N-(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)carbamato;
N1,N1-dietil-N4-(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)pentano-1,4-diamina; y
sal de trifosfato de N1,N1-dietil-N4-(7-metoxi-2-fenil-4-quinolil)pentano-1,4-diamina.
14. El compuesto de fórmula (I') para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 12-13, en donde R4 es ORa; y/o R2' es fenilo o anillo monocíclico heteroaromático de 5 a 6 miembros, estando ambos grupos opcionalmente sustituidos como se define en la reivindicación 12.
15. El compuesto de fórmula (I') para su uso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 12-14, en donde el cáncer se selecciona entre el grupo que consiste en leucemia linfocítica aguda (ALL), linfoma de linfocitos B macrocítico difuso (DLBCL), cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer de cuello uterino, cáncer colorrectal, glioblastoma, hepatocarcinoma, melanoma, cáncer de páncreas, cáncer de próstata, cáncer renal, cáncer de pulmón microcítico, cáncer de pulmón no microcítico, leucemia mieloide aguda, linfoma de células del manto y mieloma múltiple.
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