ES2712732T3

ES2712732T3 - Métodos y kits para el diagnóstico de cáncer y la predicción de valor terapéutico

Info

Publication number: ES2712732T3
Application number: ES10705709T
Authority: ES
Inventors: Neil Bander; Joseph Osborne; Stanley Goldsmith; Shankar Vallabhajosula
Original assignee: Cornell Research Foundation Inc
Current assignee: Cornell Research Foundation Inc
Priority date: 2009-02-17
Filing date: 2010-02-17
Publication date: 2019-05-14
Anticipated expiration: 2030-02-17
Also published as: CA2752510C; EP2398504A1; JP5906090B2; CA2752510A1; US20220323618A1; US20200282085A1; US20100209343A1; EP3495000A1; EP2398504B1; WO2010096486A1; US10517969B2; JP2012518187A

Abstract

Método in vitro para identificar a un paciente que presenta cáncer metastásico que sea adecuado para la terapia dirigida contra el cáncer comprendiendo: proporcionar un primer agente aglutinante capaz de unirse al antígeno prostático específico de membrana (PSMA); calificar a un paciente analizando la cantidad del primer agente aglutinante en un tejido, células o fluido corporal en un paciente; e identificar a un paciente adecuado para la terapia dirigida contra el cáncer, donde dicha terapia comprende una dosis terapéutica de un segundo agente aglutinante capaz de ligar el antígeno prostático específico de membrana (PSMA), donde el paciente se identifica únicamente si la calificación es superior a un umbral predeterminado, donde la calificación superior al umbral indica cáncer susceptible para la terapia dirigida contra el cáncer y donde el umbral predeterminado es superior a la cantidad del primer agente aglutinante en una muestra de control sana.

Description

DESCRIPCION

Metodos y kits para el diagnostico de cancer y la prediccion de valor terapeutico

CAMPO DE LA INVENCION

[0001] La invencion se refiere, por lo general, a metodos para identificar y/o seleccionar a un paciente para el tratamiento de cancer. Mas espedficamente, la invencion se refiere al uso de imagenes cuantitativas o semicuantitativas para predecir el valor terapeutico de diversos tratamientos de cancer.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION

[0002] El cancer de prostata es una de las causas mas comunes de muertes por cancer en hombres estadounidenses. En 2007, se espera que se diagnostiquen aproximadamente 219000 nuevos casos, asf como que se registren 27000 muertes a causa de esta enfermedad (datos del SEER del NCI; Cancer Facts and Figures, American Cancer Society). Actualmente, existen opciones de tratamiento muy limitadas para pacientes con cancer de prostata una vez el cancer ha producido metastasis (se ha extendido mas alla de la prostata). La terapia sistemica se limita principalmente a diversas formas de privacion de androgenos (hormonas masculinas). A pesar de que la mayona de pacientes mostraran una mejona clmica inicial, resulta practicamente inevitable que se desarrollen celulas independientes de androgenos. Por lo tanto, la terapia endocrina es paliativa, no curativa (Eisenberger M. A., et al. (1998) NEJM 339:1036-42). La media de supervivencia general de estos pacientes en los que se han desarrollado celulas independientes de androgenos fue de 28-52 meses desde el comienzo del tratamiento hormonal (Eisenberger M. A., et al. (1998) supra). Tras el desarrollo de la independencia de androgenos, unicamente la quimioterapia con taxanos (esto es, docetaxel) parece haber aportado un beneficio de supervivencia, con una supervivencia media de 19 meses. En el momento en que los pacientes no logran responder al docetaxel, la supervivencia media es de 12 meses.

[0003] Cuando el cancer de prostata esta localizado y la esperanza de vida del paciente es de 10 anos o mas, la prostatectoirna radical brinda la mejor oportunidad para la erradicacion de la enfermedad. Tradicionalmente, el inconveniente de este proceso consiste en que muchos canceres se habfan extendido mas alla de los lfmites de la operacion en el momento en que se detectaron los canceres. No obstante, el uso de la prueba de antfgeno prostatico espedfico (PSA) ha permitido la deteccion precoz de cancer de prostata. Como consecuencia, la cirugfa es menos extensa y presenta menos complicaciones. Resulta menos probable que los pacientes con tumores voluminosos y de alto grado sean tratados con exito mediante prostatectom^a radical. La radioterapia ha sido ampliamente utilizada tambien como alternativa a la prostatectom^a radical. Los pacientes que se tratan, por lo general, con radioterapia son los que son mas mayores y estan menos sanos, asf como aquellos que presentan tumores de mayor grado y mas avanzados desde el punto de vista clmico. Sin embargo, si, tras la cirugfa o radioterapia, se encuentran concentraciones detectables de PSA en suero, se indica cancer persistente. En muchos casos, las concentraciones de PSA se pueden reducir mediante tratamiento con radiacion. No obstante, esta concentracion de PSA aumenta de nuevo, a menudo, al cabo de dos anos, siendo un smtoma de la recurrencia de la enfermedad.

[0004] Para el tratamiento de pacientes con enfermedad localmente avanzada, se ha empleado terapia hormonal antes o despues de la prostatectom^a radical o radioterapia. La orquiectomfa (extirpacion de los testfculos) reduce las concentraciones de testosterona serica, mientras que el tratamiento con estrogenos produce un efecto similar.

[0005] El antfgeno prostatico espedfico de membrana (PSMA) esta presente en la superficie celular de algunas celulas prostaticas epiteliales normales, celulas tubulares renales proximales normales, el intestino delgado proximal y algunos astrocitos (hallados en el cerebro). El PSMA esta altamente regulado al alza/sobreexpresado en celulas de cancer de prostata (Pca). Los niveles de expresion de PSMA aumentan al mismo tiempo que progresa el cancer de prostata, y unos mayores niveles de PSMA en Pca de etapa temprana pronostican una mayor probabilidad de recurrencia. Por otro lado, practicamente todos los tumores solidos expresan PSMA en su neovasculatura tumoral, mientras que el endotelio vascular normal es PSMA-negativo.

Se han desarrollado anticuerpos monoclonales que reconocen PSMA, incluyendo 7E11, que se une al dominio intracelular (Horoszewicz et al. (1987) Anticancer Res. 7:927-936; documentos de patentes americanas n.os 5,162,504; 6,107,090; US 6,150,508; y 7,045,605), y otros anticuerpos anti-PSMA que se unen al dominio extracelular. Se han desarrollado tambien anticuerpos modificados, y fragmentos de union al antfgeno de los mismos, que reconocen PSMA, pese a ser menos inmunogenicos, como se describe en el documento WO 2004/098525. En el documento W^o2004/098525 se describe ademas un metodo de tratamiento de cancer de prostata mediante la administracion al sujeto de dos a veinticuatro dosis de un anticuerpo o fragmento de union al antfgeno de este que se une al dominio extracelular de antfgeno prostatico espedfico de membrana (PSMA), y que se acopla a DM1, donde cada dosis comprende aproximadamente de 10 a 500 mg/m del anticuerpo o fragmento de union al antfgeno de este, para tratar de este modo al sujeto.

[0006] Los tratamientos contra el cancer incluyen a menudo la administracion de agentes terapeuticos que presentan efectos secundarios adversos o inconvenientes de otro tipo, incluida la toxicidad. Ademas, el efecto de un tratamiento determinado en el cancer de un paciente concreto es variable. En algunos pacientes, el tratamiento recibido puede resultar muy efectivo, mientras que, en otros, puede tener un efecto muy pequeno o no tener efecto alguno en el cancer. Por otro lado, debido a los resultados impredecibles y variables del tratamiento, los ensayos clmicos han de ser muy amplios para que sean estadfsticamente significativos. Los ensayos clmicos amplios pueden llegar a ser excesivamente caros o impracticables de otro modo. Por consiguiente, se necesitan tratamientos mejorados que reduzcan la toxicidad, mejoren la probabilidad de obtener un resultado favorable, y faciliten los ensayos clmicos.

SUMARIO DE LA INVENCION

[0007] La invencion incluye metodos y kits para el diagnostico y el tratamiento de cancer. En algunos aspectos, la invencion esta relacionada con metodos para identificar a un paciente o sujeto para terapia contra el cancer. Los metodos comprenden proporcionar un primer agente aglutinante capaz de unirse a una primera diana molecular, donde la presencia de la primera diana molecular esta relacionada con el cancer o es indicativa de cancer. Por lo tanto, se puede examinar la presencia del primer agente aglutinante en un tejido, celula(s) o fluido corporal. Preferiblemente, el primer agente aglutinante comprende una fraccion de marcaje. En algunos aspectos, se evalua la presencia del primer agente aglutinante mediante sistemas de imagenes in vivo, o bien se puede analizar la presencia del primer agente aglutinante en una muestra biologica obtenida del paciente. La presencia del primer agente aglutinante se puede analizar cualitativamente (p. ej., visualmente), semicuantitativamente o cuantitativamente. Cuando sea apropiado, los metodos incluiran ademas la administracion al paciente de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante que pueda unirse a una diana molecular o celular.

[0008] En algunos aspectos de la invencion, los metodos incluyen la administracion a un paciente de una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable. El primer agente aglutinante marcado de manera detectable es capaz de unirse a una diana molecular asociada al cancer (p. ej., una celula cancerosa o una celula relacionada, tal como la neovasculatura de un tumor solido). Cuando sea apropiado, los metodos incluyen ademas la administracion al paciente de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante que puede unirse a una diana molecular o celular. El paciente o pacientes se selecciona(n) para la terapia en funcion de un resultado de administracion de la dosis diagnostica (p. ej., un diagnostico in vivo no invasivo). Los resultados pueden incluir, por ejemplo, la cuantificacion por imagenes o de otro modo de un nivel y/o localizacion del primer agente aglutinante en el paciente. Los pacientes que no se espera que se beneficien de una terapia concreta pueden identificarse, por lo tanto, antes de la terapia y ahorrarse la terapia y/o dirigirse a una terapia alternativa. En una forma de realizacion, el segundo agente aglutinante se puede unir a la misma molecula diana que el primer agente aglutinante. De manera alternativa, el segundo agente terapeutico aglutinante puede dirigirse a una molecula distinta. Asimismo, el primer y el segundo agente aglutinante pueden dirigirse a moleculas relacionadas desde el punto de vista funcional. Por ejemplo, la primera y segunda diana molecular pueden formar parte de una via comun.

[0009] En un ejemplo, los metodos descritos para identificar a un paciente para terapia contra el cancer comprenden (i) proporcionar un primer agente aglutinante capaz de unirse a una primera diana molecular, donde la primera diana molecular se selecciona de una via relacionada con el cancer; (ii) evaluar la presencia del primer agente aglutinante en un tejido, celulas o fluido corporal en un paciente; y (iii) seleccionar a un paciente para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una segunda diana molecular, donde el paciente se selecciona si el primer agente aglutinante esta presente.

[0010] Se describen tambien metodos para identificar a un paciente para la terapia contra el cancer que comprenden (i) seleccionar una primera y una segunda diana molecular de una via relacionada con el cancer; (ii) proporcionar un primer agente aglutinante capaz de unirse a una primera diana molecular; (iii) calificar a un paciente evaluando la cantidad del primer agente aglutinante en un tejido, celulas o fluido corporal de un paciente; (iv) seleccionar a un paciente para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una segunda diana molecular, donde el paciente se selecciona si la calificacion supera un umbral y donde la calificacion superior a un umbral es indicativa de cancer.

[0011] En un aspecto, se describe un metodo para la identificacion de un paciente para terapia contra el cancer que incluye la administracion a un paciente de una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable. El primer agente aglutinante marcado de manera detectable puede unirse a una diana celular o molecular (p. ej., una porcion extracelular de una diana de superficie celular, p. ej., PSMA). El metodo incluye ademas la seleccion de un paciente para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una diana celular, donde el paciente seleccionado presenta una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable.

[0012] En otro aspecto, se describe un metodo para tratar el cancer de prostata que incluye la administracion a un paciente de una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable. El primer agente aglutinante marcado de manera detectable es capaz de unirse a una diana celular o molecular (p. ej., una porcion extracelular de una diana de superficie celular, p. ej., PSMA). El metodo incluye ademas la administracion a un paciente seleccionado de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una diana celular, donde el paciente seleccionado presenta una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable.

[0013] Se describen tambien metodos para tratar el cancer, que incluyen proporcionar instrucciones para administrar a un paciente una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable que sea capaz de unirse a una diana celular y/o proporcionar instrucciones para evaluar el nivel de expresion de marcador tumoral o molecula diana en una muestra biologica. En algunas formas de realizacion, se recogen celulas tumorales de muestra de sangre o de muestras de otro fluido corporal y se analizan para determinar la presencia y el nivel de expresion de la molecula diana. Los metodos incluyen ademas proporcionar instrucciones para administrar una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una diana celular a un paciente seleccionado en funcion del nivel de primer agente aglutinante en el paciente o en una muestra biologica obtenida del paciente.

[0014] En algunos aspectos, se describen metodos para mejorar la significacion estadfstica de un ensayo clmico. En un aspecto, se describen metodos para reducir un numero necesario de pacientes para un ensayo clmico. Los metodos pueden incluir la administracion a una pluralidad de pacientes de una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable. El primer agente aglutinante marcado de manera detectable es capaz de unirse a una diana celular. El paciente o pacientes se selecciona(n) en funcion del nivel de primer agente aglutinante en el paciente o en una muestra biologica obtenida del paciente. No se seleccionan ciertos pacientes a los que se les ha administrado la dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable y, por consiguiente, no se les administra la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante. El metodo incluye ademas la administracion a los pacientes seleccionados de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una diana celular. Mediante la seleccion de un paciente o pacientes con una mayor probabilidad de respuesta a la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante, y la no seleccion o exclusion de pacientes que presentan una probabilidad de respuesta favorable menor o nula al segundo agente aglutinante terapeutico, se mejora, de este modo, la capacidad del ensayo para lograr significacion estadfstica en un numero mas reducido de pacientes tratados.

[0015] En otro aspecto, se describen kits para seleccionar a un paciente para la terapia contra el cancer. Los kits pueden incluir instrucciones para la administracion de una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable que es capaz de unirse a una diana celular y/o instrucciones para la evaluacion del nivel de expresion de marcador tumoral o molecula diana en una muestra biologica. Los kits incluyen ademas instrucciones para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante a un paciente seleccionado.

[0016] Los kits pueden incluir tambien instrucciones para evaluar una muestra biologica con un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, siendo capaz el agente aglutinante marcado de manera detectable de unirse a una diana molecular, e instrucciones para seleccionar a un paciente para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una segunda diana molecular, donde el paciente seleccionado muestra una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable. El paciente o pacientes se selecciona(n) en funcion del nivel de primer agente aglutinante en el paciente o en una muestra biologica obtenida del paciente.

[0017] Asimismo, se describen metodos para seleccionar a un paciente para la terapia contra el cancer, donde el paciente se selecciona sin administrar un agente terapeutico toxico al paciente. En algunos aspectos, los metodos incluyen la administracion a un paciente de un agente aglutinante marcado de manera detectable. El agente aglutinante marcado de manera detectable es capaz de unirse a una diana celular. Los metodos incluyen ademas la seleccion de un paciente para el tratamiento con un conjugado terapeutico que comprende el agente aglutinante y un agente terapeutico citotoxico o citostatico. El paciente se selecciona en funcion del nivel de primer agente aglutinante en el paciente o en una muestra biologica obtenida del paciente.

[0018] En otro aspecto, se describen metodos para seleccionar a un grupo de pacientes de tratamiento, donde los pacientes se seleccionan sin la administracion de un agente terapeutico toxico a los pacientes. En algunos aspectos, los metodos incluyen la administracion de un agente aglutinante a un primer grupo de pacientes, donde el agente aglutinante esta marcado de manera detectable y es capaz de unirse a una diana celular, y donde el primer grupo de pacientes presenta o se sospecha que presenta una afeccion.

[0019] Los metodos incluyen tambien la seleccion de pacientes para el tratamiento de la afeccion con un conjugado terapeutico que comprende el agente aglutinante y un agente terapeutico citotoxico o citostatico. Los pacientes se seleccionan en funcion del nivel de primer agente aglutinante en un paciente determinado o en una muestra biologica obtenida de un paciente determinado.

[0020] En otro aspecto mas de la invencion, se describen kits para la terapia contra el cancer. Los kits incluyen una dosis diagnostica para un paciente de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, siendo capaz el agente aglutinante marcado de manera detectable de unirse a una diana molecular. Los kits incluyen ademas instrucciones para seleccionar a un paciente para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una diana molecular, donde el paciente seleccionado muestra una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable. En otros aspectos, los kits incluyen un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, siendo capaz el agente aglutinante marcado de manera detectable de unirse a una diana molecular, e instrucciones para seleccionar a un paciente para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una segunda diana molecular, donde el paciente seleccionado muestra una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable.

[0021] En otros aspectos, el metodo o kit descrito en el presente documento puede incluir una o mas de las siguientes caracteffsticas.

[0022] La diana puede ser una diana intracelular o una diana de superficie celular. En diversas formas de realizacion, la afeccion o cancer es cancer de prostata y la diana de superficie celular es anffgeno prostatico espedfico de membrana (PSMA). De manera alternativa, el cancer no es cancer de prostata, y la diana de superficie celular es un marcador que se sabe que esta presente en las celulas del tipo concreto de cancer. En un ejemplo, el cancer que no es cancer de prostata puede incluir un tumor solido asociado a la neovasculatura que expresa PSMA, y la diana de superficie celular puede ser el PSMA en las celulas neovasculares.

[0023] En un aspecto preferido, la seleccion de un paciente incluye la deteccion de la diana molecular o celular utilizando un primer agente aglutinante. La seleccion de un paciente puede incluir la cuantificacion de una cantidad de la diana molecular o celular en el paciente, o bien puede incluir un ensayo cualitativo de la diana celular en el paciente. Segun se ha descrito en el presente documento, el nivel de expresion de la diana celular o terapeutica se puede medir in vitro (p. ej., ensayo diagnostico) o in vivo (p. ej., diagnostico por imagenes in vivo) utilizando un primer agente aglutinante marcado de manera detectable que es capaz de unirse a la diana. Con frecuencia, se llevan a cabo pruebas diagnosticas en muestras biologicas extrafdas de pacientes. Preferiblemente, estas muestras se obtienen de un modo mmimamente invasivo, por ejemplo, con muestras de suero o de orina. Las tecnologfas de diagnostico por imagenes in vivo ofrecen metodos no invasivos para determinar el estado de una enfermedad concreta en el cuerpo humano. Entre las tecnicas convencionales de diagnostico por imagenes se incluyen, aunque sin caracter limitativo, imagenes por resonancia magnetica, exploracion por tomograffa computarizada, PET, SPECT y similares.

[0024] En algunas formas de realizacion, el nivel de expresion de la diana celular o terapeutica se mide in vitro en una muestra biologica. Normalmente, el nivel del marcador en una muestra biologica obtenida del paciente es distinto (esto es, ha aumentado o disminuido) del nivel del mismo marcador en una muestra similar obtenida de un individuo sano. La muestra puede derivar de cualquier fuente biologica, como tejidos, extractos, o cultivos celulares, incluyendo celulas (p. ej., celulas tumorales), lisados celulares y fluidos fisiologicos, tales como, por ejemplo, sangre entera, plasma, suero, saliva, fluido del cristalino, lfquido cefalorraqmdeo, sudor, orina, leche, lfquido asdtico, lfquido sinovial, lfquido peritoneal, etc. La muestra se puede tratar antes de su uso, por ejemplo, preparando plasma a partir de sangre, diluyendo fluidos viscosos, etc. Por ejemplo, las celulas o el fluido corporal que contiene celulas obtenidas de un sujeto se pueden poner en contacto con un primer agente aglutinante in vitro marcado radiactivamente, o detectable y/o mensurable de otro modo. En otros aspectos, se administra a un paciente un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, y se observa el nivel de marcador detectable in situ. El metodo puede ser un metodo no invasivo in vivo o ex vivo.

[0025] Cualquiera de los metodos diagnosticos (p. ej., identificacion o seleccion) puede incluir tambien la administracion al paciente de una dosis terapeutica del segundo agente aglutinante. El primer y/o segundo agente aglutinante puede ser un anticuerpo o una porcion de union al anffgeno o derivado de este. El anticuerpo o porcion de union al anffgeno o derivado de este puede ser capaz de unirse al dominio extracelular de PSMA.

[0026] En algunas formas de realizacion, el marcador detectable incluye un isotopo seleccionado del grupo que consiste en 177Lu, 111 Indio, 67Cu, 18F, 99mTc, 124I, 125I, y 131I. El marcador detectable puede ser un agente de tomograffa por emision de positrones (PET) incluyendo, aunque sin caracter limitativo, 124I, 89Zr, etc. En ciertas formas de realizacion, el primer y/o segundo anticuerpo o porcion de union al anffgeno o derivado de este esta marcado radiactivamente. El marcador radiactivo puede ser al menos uno de 177Lu, 111Indio, 67Cu, 18F, 99mTc, 124I, 125I, 131I, y 99mTc. En otras formas de realizacion, el primer agente aglutinante puede estar marcado con un colorante o con cualquier otro agente detectable conocido por los expertos en la materia.

[0027] En diversas formas de realizacion, el anticuerpo o porcion de union al anffgeno o derivado de este es un anticuerpo monoclonal o porcion de union al anffgeno o derivado de este producido por un hibridoma seleccionado del grupo que consiste en un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12101, un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12109, un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12127, y un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12126. El primer y/o segundo agente aglutinante presenta una afinidad de al menos aproximadamente 10-9 M para la diana (p. ej., diana de superficie celular). El primer agente aglutinante y el segundo agente aglutinante pueden ser sustancialmente el mismo.

[0028] En algunos aspectos, el hecho de seleccionar a un paciente incluye cuantificar una cantidad de la diana (p. ej., diana de superficie celular) en los sitios del tumor del paciente. Para la cuantificacion, se puede utilizar un metodo cuantitativo o semicuantitativo. La seleccion de un paciente puede incluir imagenes in vivo del primer agente aglutinante marcado de manera detectable. La seleccion de un paciente puede incluir un analisis cualitativo de la diana (p. ej., diana de superficie celular) en el paciente. El metodo puede incluir la administracion de un agente de contraste de imagenes junto con la dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable. Puede incluir tambien otras formas de modalidades de visualizacion de imagenes anatomicas (p. ej., TC y/o IRM) que se pueden combinar con las imagenes del primer agente aglutinante (p. ej., PET-TC, Sp EcT-TC, RM de imagenes planares, etc.).

[0029] En ciertos aspectos, la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante se administra al paciente seleccionado sin ninguna restriccion en cuanto al intervalo de tiempo entre el primer agente aglutinante de diagnostico y el segundo agente terapeutico. Preferiblemente, el intervalo debena ser inferior o igual a 3 meses, o inferior o igual a 1 mes o inferior o igual a 2 semanas.

[0030] En diversos aspectos, un kit puede incluir (p. ej., en una dosis diagnostica y/o terapeutica) un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, un segundo agente aglutinante y/o un agente de contraste de imagenes. El primer agente aglutinante y el segundo agente aglutinante pueden ser sustancialmente el mismo.

[0031] Las diversas formas de realizacion descritas en el presente documento pueden ser complementarias, y se pueden combinar o utilizar juntas de un modo que conozcan los expertos en la materia a tenor de la descripcion contenida en el presente documento. Otros aspectos de la invencion se desprenderan de los dibujos y la descripcion expuestos a continuacion, los cuales ilustran principios de la invencion unicamente a modo de ejemplo.

BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS

[0032] La patente y la solicitud presentada contienen al menos un dibujo realizado a color. La Oficina proporcionara copias de la publicacion de la patente o de la solicitud de patente con dibujos a color previa solicitud y tras abonar la tasa necesaria.

La figura 1 muestra imagenes de cuerpo entero del mismo paciente tomadas tras la administracion de 99mTc-MDP para una gammagraffa osea y 177Lu-J591 mAb (las dos imagenes de la izquierda y las dos imagenes de la derecha, respectivamente).

La figura 2 muestra un grafico de concentracion de PSA en sangre a lo largo del tiempo del paciente observado en la figura 1. El dfa 0 representa la fecha del tratamiento.

La figura 3 muestra un grafico de cantidad de PSA a lo largo del tiempo en un paciente. El dfa 0 representa la fecha del tratamiento.

La figura 4 muestra un grafico de cantidad de PSA a lo largo del tiempo en un paciente. El dfa 0 representa la fecha del tratamiento.

La figura 5 muestra imagenes de cuerpo entero de escaneres tomadas tras la administracion de 99mTc-MDP (gammagraffa osea) y 177Lu-J591 mAb (las dos imagenes de la izquierda y las dos imagenes de la derecha, respectivamente).

La figura 6 muestra un grafico de concentracion de PSA a lo largo del tiempo del paciente observado en la figura 5. El dfa 0 representa la fecha del tratamiento.

La figura 7 muestra imagenes de cuerpo entero de escaneres tomadas tras la administracion de 99mTc-MDP (gammagraffa osea) y 177Lu-J591 mAb (las dos imagenes de la izquierda y las dos imagenes de la derecha, respectivamente).

Las figuras 8A y 8B muestran graficos semilogantmico y aritmetico de concentracion de PSA a lo largo del tiempo del paciente observado en la figura 7. El dfa 0 representa la fecha del tratamiento.

La figura 9 muestra imagenes de cuerpo entero de escaneres tomadas tras la administracion de 99mTc-MDP y 177Lu-J591 mAb (las dos imagenes de la izquierda y las dos imagenes de la derecha, respectivamente). Las figuras 10A y 10B muestran graficos semilogantmico y aritmetico de concentracion de PSA a lo largo del tiempo del paciente observado en la figura 9. El dfa 0 representa la fecha del tratamiento.

La figura 11 muestra un grafico de respuesta a PSA tras el tratamiento frente a la calificacion de imagenes J591 (0-3+).

La figura 12 muestra un grafico que ilustra la relacion entre la calificacion de imagenes J591 (0-3+) y la respuesta a PSA.

Las figuras 13A y 13B muestran ejemplos de imagenes cuantificadas utilizando el metodo del mdice de direccion tumoral (tumor targeting index, TTI, por sus siglas en ingles).

DESCRIPCION DETALLADA DE LA INVENCION

[0033] En el presente documento, se dan a conocer metodos de identificacion de un paciente o pacientes adecuado(s) para una terapia, tal como una terapia contra el cancer. Los aspectos de la invencion se dirigen a metodos y kits para diagnosticar la presencia de cancer en un paciente o sujeto, y para seleccionar al paciente o sujeto con cancer para la terapia. Se pueden utilizar aspectos de la invencion con una amplia variedad de tipos de cancer. Entre los tipos de cancer se incluyen, aunque sin caracter limitativo, el cancer pancreatico, melanomas, cancer de mama, cancer de pulmon, cancer de bronquios, cancer colorrectal, cancer de prostata, cancer de pancreas, cancer estomacal, cancer de ovario, cancer de vejiga, cancer cerebral o del sistema nervioso central, cancer del sistema nervioso periferico, cancer de esofago, cancer de cuello uterino, cancer de utero o de endometrio, cancer de la cavidad oral o faringe, cancer de Idgado, cancer de rinon, cancer testicular, cancer de las vfas biliares, cancer de intestino delgado o de apendice, cancer de glandulas salivales, cancer de tiroides, cancer de glandulas suprarrenales, osteosarcoma, condrosarcoma, cancer de tejidos hematologicos, glioma, linfoma y similares.

[0034] Algunos aspectos se dirigen a un metodo para diagnosticar cancer detectando la presencia y el nivel de expresion de una diana molecular, donde la diana molecular es de una via concreta relacionada con el cancer. En algunas formas de realizacion, los metodos comprenden el hecho de calificar la presencia, abundancia o nivel de expresion como superior a cierto umbral, siendo la calificacion indicativa de cancer. Se pueden utilizar los metodos para diagnosticar cancer y para predecir si un paciente o sujeto se beneficiara de la terapia contra el cancer. Los metodos se pueden utilizar como estrategia de diagnostico y de tratamiento para un paciente que se cree que presenta cancer. Las dianas moleculares pueden provenir de cualquier via asociada al cancer, tal como, por ejemplo, una via implicada en la regulacion del cancer. En algunos aspectos, los metodos comprenden la evaluacion del nivel de expresion de un marcador tumoral o diana en un paciente utilizando imagenes in vivo y/o una prueba diagnostica o muestra biologica. Un «marcador» es un acido nucleico o protema que puede estar alterado, donde dicha alteracion esta relacionada con el cancer. La alteracion puede poseer una cantidad, estructura y/o actividad en un tejido canceroso o celula cancerosa, en comparacion con su cantidad, estructura y/o actividad, en una celula o tejido normal o sano (p. ej., un control), y esta asociada a un estado patologico, tal como cancer. Entre las moleculas marcadoras producidas por canceres se incluyen inmunoglobulinas monoclonales, hormonas, protemas sericas secretadas, antfgenos, enzimas e isoenzimas, marcadores de superficie celular, glucoprotemas y carbohidratos, protemas de la matriz extracelular, mucinas y acidos nucleicos (p. ej., ARNm, ADN, microARN). En algunos aspectos, se puede emplear la deteccion del estado de metilacion de uno o varios gen(es) diana. Los marcadores de cancer se pueden considerar marcadores solubles, que aparecen en fluidos corporales tales como sangre, plasma, suero, efusiones y orina. Otros marcadores de cancer son protemas y acidos nucleicos asociados a celulas que, de forma caractenstica, no se liberan al suero ni a otros fluidos corporales en cantidades significativas. Los marcadores tumorales asociados a celulas o a tejidos se pueden detectar en muestras de tejidos que contengan celulas cancerosas, o en muestras biologicas que contengan tales celulas. Segun se utiliza en el presente documento, el termino «marcador tumoral» se utiliza como un indicador de la presencia, o la extension, de un crecimiento canceroso o tumor. Entre los ejemplos de marcadores tumorales se incluye, aunque sin caracter limitativo, PSA para el cancer de prostata, CA 125 para el cancer de ovario, CA 195 para canceres gastrointestinales. Los marcadores tumorales pueden ser marcadores espedficos de cancer (p. ej., CA19-9, CA 125, CEA) o marcadores espedficos de tejido (p. ej., PSA para el cancer de prostata, CA15-3 para el cancer de mama).

[0035] En algunos aspectos, el paciente o la muestra biologica obtenida del paciente se evalua para determinar la presencia de la diana molecular espedfica. Segun se utiliza en el presente documento, el termino «evaluar» incluye cualquier forma de medicion, e incluye determinar si una molecula se encuentra presente o no. Los terminos «determinar», «medir», «analizar», «evaluar» y «examinar» se utilizan indistintamente, e incluyen determinaciones cuantitativas, cualitativas y de imagenes que establecen la presencia o ausencia de una diana asociada al cancer. La evaluacion puede ser relativa o absoluta. En algunos aspectos, los metodos comprenden la calificacion o cuantificacion del nivel de una primera diana molecular. En algunas formas de realizacion, los metodos comprenden determinar si el nivel es superior o inferior en comparacion con una muestra de referencia (p. ej., un sujeto sano o una muestra biologica obtenida de un sujeto sano), ya sea de manera cuantitativa, semicuantitativa o cualitativa. De manera alternativa, los metodos comprenden determinar un mdice de direccion tumoral (TTI) cuantitativo.

[0036] En algunos aspectos, los metodos incluyen la administracion a un paciente de una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable. El primer agente aglutinante marcado de manera detectable es capaz de unirse, por ejemplo, a una diana celular o molecular. En algunos aspectos, la diana celular, tambien denominada en el presente documento diana terapeutica, es una porcion extracelular de una diana de superficie celular. Se seleccionan uno o mas pacientes para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una diana molecular o celular (p. ej., la porcion extracelular de la diana de superficie celular). El paciente o pacientes se selecciona(n) en funcion del nivel de primer agente aglutinante en el paciente o en una muestra biologica obtenida del paciente. La invencion incluye, asimismo, kits para su uso en la identificacion y/o el tratamiento de pacientes conforme a los metodos expuestos en el presente documento.

[0037] En diversos aspectos, los metodos pueden incluir: (i) identificar a un primer grupo de uno o mas pacientes que esten desarrollando, presenten o se crea que presentan un cancer; (ii) administrar a cada paciente del primer grupo una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, donde el primer agente aglutinante marcado de manera detectable es capaz de unirse a una diana molecular o celular para el cancer; (iii) observar el nivel del primer agente aglutinante marcado de manera detectable en cada paciente del primer grupo (p. ej., midiendo la diana de manera cuantitativa o cualitativa); (iv) seleccionar un segundo grupo de pacientes del primer grupo para una terapia contra el cancer, en funcion del nivel observado en el paciente de primer agente aglutinante marcado de manera detectable; y (v) administrar una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante a uno o mas pacientes del segundo grupo. En algunos de los metodos ofrecidos en el presente documento, se administra una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable a uno o mas pacientes. A continuacion, se administra una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante a pacientes seleccionados a los que se les habfa administrado el primer agente aglutinante marcado de manera detectable.

[0038] Asimismo, se describen metodos que incluyen (i) identificar un primer grupo de uno o mas pacientes que esten desarrollando, presenten o se crea que presentan un cancer; (ii) obtener una muestra biologica para cada paciente del primer grupo (iii) analizar la muestra biologica para determinar la presencia de un primer agente aglutinante en cada paciente del primer grupo, donde el primer agente aglutinante es capaz de unirse a una diana molecular o celular para el cancer; (iv) evaluar el nivel del primer agente aglutinante en cada muestra biologica (p. ej., midiendo la diana de manera cuantitativa o semicuantitativa); (v) seleccionar un segundo grupo de pacientes del primer grupo para una terapia contra el cancer, en funcion del nivel de primer agente aglutinante observado en el paciente; y (vi) administrar una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante a uno o mas pacientes del segundo grupo. En algunos aspectos, el primer agente aglutinante comprende una fraccion de marcaje (p. ej., marcada de manera detectable). La muestra biologica puede ser sangre u otro fluido corporal, tal como orina, lfquido cefalorraqmdeo, semen, etc.

[0039] En diversas formas de realizacion, incluyendo kits y metodos, el primer agente aglutinante y el segundo agente aglutinante o porciones de union a la diana terapeutica de este son, o pueden ser, sustancialmente el mismo. De manera alternativa, el segundo agente aglutinante terapeutico se puede unir a una diana molecular o celular distinta del primer agente aglutinante, donde las dos dianas distintas estan relacionadas desde el punto de vista funcional. En algunos aspectos, el primer agente aglutinante puede reconocer a un miembro o miembros de un distintivo genomico, proteomico, metabolomico o epigenomico asociado a una enfermedad espedfica. Los distintivos incluyen, por ejemplo, la presencia y/o niveles y/o modificacion postraduccional de una protema o conjunto de protemas; la presencia y/o el nivel de un acido nucleico; y el estado de integridad o de metilacion u otro parametro de un acido nucleico. En un ejemplo, el primer agente aglutinante puede identificar el nivel de un metabolito determinado o de otro gen o producto genico en una via funcional, via de senalizacion o via reguladora.

[0040] El segundo agente terapeutico se puede destinar a la misma molecula o a una distinta en la via. Por ejemplo, el primer agente aglutinante puede identificar el nivel del receptor androgenico (RA), mientras que el segundo agente terapeutico puede actuar en cualquier punto de la via de senalizacion androgenica. En otro aspecto, el primer agente aglutinante puede reconocer a un miembro o miembros de un distintivo genomico, proteomico, metabolomico o epigenomico asociado a un metodo preferible de tratamiento o terapia dirigida. Por ejemplo, se puede utilizar el primer agente aglutinante, imagenes in vivo o una prueba diagnostica para reflejar la presencia de un distintivo genomico, proteomico, metabolomico o epigenomico pertinente, y para dirigir de este modo la seleccion del enfoque terapeutico para el paciente. En algunos aspectos, la via distintiva se puede dirigir a la combinacion de terapias utilizando multiples compuestos que se dirigen a multiples vfas. En algunos aspectos, el nivel del primer agente aglutinante puede demostrar ser predictivo de la respuesta al segundo agente aglutinante terapeutico.

[0041] En algunos aspectos, el primer agente aglutinante marcado de manera detectable y el segundo agente aglutinante son capaces de unirse a una diana terapeutica. La diana terapeutica puede estar asociada, directa o indirectamente, a una afeccion, tal como un cancer. Entre las dianas terapeuticas adecuadas se incluye cualquier molecula o estructura extracelular o intracelular. En algunos aspectos de la descripcion, la diana terapeutica es un antfgeno. La diana terapeutica puede ser, por ejemplo, una porcion extracelular de una molecula de superficie celular (p. ej., PSMA). En otros aspectos, las dianas terapeuticas son enzimas que participan en la transduccion de senales (p. ej., tirosina quinasas).

[0042] El primer y/o segundo agente aglutinante puede(n) incluir un miembro de un par de union, tal como receptor/ligando, anticuerpo/antfgeno, enzima/sustrato, pequena molecula/ligando, etc. El primer y/o segundo agente aglutinante puede(n) incluir un peptido o un aptamero disenado y/o seleccionado para unir la diana diagnostica y/o la diana terapeutica. Los aptameros incluyen acidos nucleicos (p. ej., ADN o ARN) o aptameros peptfdicos. En algunos aspectos, el primer y/o segundo agente aglutinante es un ligando para un receptor de superficie celular, o un sustrato para una molecula asociada a la celula, o un anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este que es capaz de unirse a la diana terapeutica. En un aspecto ilustrativo, el primer y/o segundo agente aglutinante son anticuerpos o derivados de estos. En otros aspectos, el primer y/o segundo agente aglutinante son pequenas moleculas o derivados de estas. Las moleculas pequenas presentan la ventaja de atravesar membranas y de alcanzar dianas dentro de las celulas. Por ejemplo, el primer y/o segundo agente aglutinante puede incluir un inhibidor de tirosina quinasa reversible (p. ej., gefitinib o Iressa®) o irreversible. Los inhibidores de tirosina quinasa se unen a los sitios de union a ATP en el receptor de tirosina quinasa, impidiendo la activacion del receptor y la transduccion de senales desde el receptor. Entre los ejemplos de moleculas pequenas se incluyen, aunque sin caracter limitativo, Imatinib o Gleevec®, que se une al sitio de union a ATP de bcr-abl, Gefitinib o Iressa®, que es un inhibidor selectivo del dominio tirosina quinasa del receptor del factor de crecimiento epidermico (EGFR, por sus siglas en ingles), Erlotinib o Tarceva®, que se une de manera reversible al sitio de union al trifosfato de adenosina (ATP) de la tirosina quinasa del receptor del factor de crecimiento epidermico (EGFR), bortezomib o Velcade®, que es un tripeptido que bloquea la union al sitio catafftico del proteasoma 26S o de cualquier otra molecula pequena (p. ej., sintetizada por un diseno racional). En algunos aspectos, el primer y/o segundo agente aglutinante puede ser una hormona, tal como testosterona (p. ej., dihidrotestosterona). Por ejemplo, un primer agente aglutinante marcado de manera detectable puede estar conjugado con dihidrotestosterona para un agente de imagenes, tal como un agente de imagenes PET.

[0043] En algunos aspectos, el primer y/o segundo agente aglutinante puede presentar una afinidad a al menos una porcion de la diana terapeutica, siendo la afinidad mas fuerte que aproximadamente 10-7, 10-8, 10-9 o 10-10 M. El segundo agente aglutinante puede incluir un agente aglutinante desnudo o un agente aglutinante conjugado, derivado o marcado (p. ej., un agente aglutinante acoplado a un agente terapeutico y/o marcador).

[0044] La diana terapeutica puede estar localizada dentro de la celula, en lugar de en el exterior de la celula. En algunos aspectos, se selecciona el primer agente aglutinante de tal manera que es capaz de atravesar la membrana celular mediante difusion pasiva o transporte activo a traves de la membrana celular. En algunos aspectos, el primer agente aglutinante es una molecula pequena. En un aspecto preferido, se marca el primer agente aglutinante y, posteriormente, se visualiza al paciente. Una absorcion escasa o nula indica la presencia reducida o la ausencia de la diana; una absorcion moderada o elevada del primer agente aglutinante marcado indica una mayor presencia de la diana. La seleccion de pacientes con una mayor presencia de la diana en lugar de pacientes con una escasa o nula presencia de la diana pronosticana una mayor probabilidad de respuesta a los segundos agentes aglutinantes terapeuticos.

[0045] El marcador detectable del primer agente aglutinante marcado puede ser practicamente cualquier agente capaz de detectarse o medirse de manera cualitativa, semicuantitativa o cuantitativa. El marcador detectable puede ser cualquier agente adecuado para la visualizacion de imagenes in vivo. En algunos aspectos, el marcador detectable puede ser cualquier agente adecuado para la visualizacion de imagenes in vitro y/o in vivo. Las imagenes pueden incluir cualesquiera de: imagenes planares con radionuclidos, tomograffa por emision de positrones (PET), imagenes ecoplanares (EPI), tomograffa computarizada por emision de foton unico (SPECT), ecograffas (p. ej., sin radiacion, espedficas del contraste, de alta frecuencia, bidimensionales), imagenes por resonancia magnetica (IRM, tambien denominada tomograffa por resonancia magnetica o TRM), rayos X, tomograffas computarizadas (TC), imagenes fluorescentes, imagenes de infrarrojo cercano y otras tecnicas de imagenes utiles o adaptables desde el punto de vista medico.

[0046] El marcador detectable puede ser un agente adecuado para el metodo de imagenes seleccionado. Por ejemplo, un radiomarcador puede ser al menos uno de 177Lu, 99mTc, 111In, 67Cu, 18F, 124I, 131I y 89Zr, cualquiera de los radiomarcadores descritos mas adelante en relacion con reactivos marcados, o cualquier otro radiomarcador util o adaptable desde el punto de vista medico. En algunos aspectos, el marcador detectable tiene un efecto terapeutico cuando se administra una dosis suficiente. Sin embargo, no es necesario que el marcador detectable o el primer agente aglutinante tenga ningun efecto terapeutico independiente (p. ej., que destruya o extirpe celulas cancerosas). En otros aspectos, las marcas detectables adecuadas pueden incluir, por ejemplo, un marcador fluorescente, un marcador de infrarrojo cercano, un marcador enzimatico biologicamente activo, un marcador luminiscente o un cromoforo.

[0047] En algunos aspectos, el marcador detectable del primer agente aglutinante marcado y el agente terapeutico del segundo agente aglutinante conjugado son el mismo. En algunos aspectos, el marcador detectable del primer agente aglutinante marcado y el agente terapeutico del segundo agente aglutinante conjugado son 177Lu. 177Lu es un radionuclido que presenta una baja emision de energfa p (p. ej., aproximadamente 0,497 MeV) con un margen terapeutico relativamente estrecho y una emision ^y(p. ej., aproximadamente 0,113 y 0,208 MeV) que permite la formacion de imagenes. En algunos casos, se puede utilizar 177Lu (incluso en dosis relativamente altas) sin toxicidad significativa en la medula osea. En algunos casos, 177Lu resulta adecuado para tratar pequenos tumores (p. ej., de aproximadamente 2-3 mm).

[0048] En diversas formas de realizacion, la afeccion o cancer es cancer de prostata y la diana de superficie celular es anffgeno prostatico espedfico de membrana (PSMA). En otros aspectos de la descripcion, el cancer no es cancer de prostata, y la diana de superficie celular es un marcador que se sabe que esta presente en las celulas del tipo concreto de cancer. En un ejemplo, el cancer que no es cancer de prostata puede incluir un tumor solido asociado a la neovasculatura que expresa PSMA, y la diana de superficie celular puede ser el PSMA en las celulas de la neovasculatura.

[0049] En una forma de realizacion, tras administrar al paciente la dosis diagnostica del primer agente aglutinante marcado de manera detectable, se observa el nivel de primer agente aglutinante marcado de manera detectable presente en el paciente utilizando un ensayo o metodo de deteccion adecuado para el marcador detectable. Se puede observar el nivel de marcador detectable, por ejemplo, sometiendo al paciente a un metodo adecuado de visualizacion de imagenes. En otra forma de realizacion, tras analizar una muestra biologica obtenida del paciente utilizando un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, el nivel de primer agente aglutinante marcado de manera detectable presente en la muestra se evalua utilizando un ensayo o metodo de deteccion adecuado.

[0050] Se puede observar el nivel de expresion o cantidad de la diana celular detectando el nivel de primer agente aglutinante marcado de manera detectable en el paciente o en una muestra biologica obtenida del paciente. Como se ha expuesto en el presente documento, se muestra que el nivel de primer agente aglutinante que se une o se dirige a la diana terapeutica in vivo predice y guarda relacion con el efecto del tratamiento utilizando un segundo agente aglutinante. Esto permite seleccionar a un paciente o a una poblacion de pacientes con una mayor probabilidad de respuesta al tratamiento dirigido a la diana terapeutica. La correlacion entre el nivel de primer agente aglutinante detectado (efecto de diagnostico) y el efecto del tratamiento resulto inesperada debido a diversos motivos. En primer lugar, se habfa informado de que el 100 % de los canceres de prostata eran PSMA-positivos [Bostwick, D.G., et al., Cancer 82:2256-2261, 1998], que el 98-100 % de todos los Pca metastasicos se visualizaban con mAb para PSMA [Bander et al., J. Clin. Oncol. 2005, 23:4591-4601; Bander, N.H., et al., J. Urol. 2003, 170: 1717-1721], y que, como norma general, todos los Pca metastasicos expresaban niveles mas altos de PSMA que las lesiones localizadas [Wright, G.L. et al., Urol. Oncol. 1995, 1: 18-28; Wright, G.L., et al., Urology 48:326-334, 1996; Sweat, S.D. et al., Urol., 52:637-640, 1998]. Vease tambien Horoszewicz, JS, et al., Anticancer Res. 1987. 7:927-936; Silver D.A. et al., Clin Can Res 1997. 3: 81-85; Chang S.S. et al., Urology, 2001. 57: 1179-83; Bostwick, DG, et al., Cancer 1998. 82: 2256-2261; Ross, JS, et al., Clin Can Res 2003. 9:6357-6362; Mannweiler, S, et al., Pathol. Oncol. Res. 2009. 15:167-172; y Ananias, Hildo J.K. et al., The Prostate 2009 10:1101-1108. Esto es muy coherente con los datos de imagenes en 137 pacientes en ensayos clmicos que recibieron mAb J591 espedfico para PSMA, ninguno de los cuales fue sometido a analisis para determinar la expresion de PSMA como un criterio de entrada (Bander N.H. et al., J. Urol., 2003. 170:1717-1721; Milowsky M.I. et al., J. Clin. Onc., 2004; 22:2522-2531; Bander N.H. et al., J. Clin. Onc., 2005; 23:4591-4601; Scott T. et al., ASCO Proceedings, 2008). En esos pacientes, el mdice de exito de la formacion de imagenes era de “ 95 %. Practicamente en cada paciente, todas las lesiones observadas en gammagraffa osea convencional, TC y/o IRM se observaron en un escaner J591. Este cuerpo de datos in vitro e in vivo de varios grupos indico que no habfa subconjuntos de pacientes identificables en funcion de la expresion de PSMA. Asimismo, debido a la extrema heterogeneidad biologica del cancer de prostata (que oscila desde pacientes que presentan una enfermedad subclmica detectada unicamente en la autopsia hasta el otro extremo, en el que los pacientes mueren rapidamente como consecuencia de su enfermedad metastasica) y a la variabilidad intrmseca de los canceres en general, y del cancer de prostata en concreto, para responder a una terapia determinada, no se esperaba que un estudio diagnostico para la expresion de PSMA (ya sea in vitro o in vivo mediante imagenes) permitiera una seleccion de pretratamiento de los pacientes con mayor (o menor) probabilidad de respuesta a las terapias dirigidas a PSMA. Ademas, se pensaba que la respuesta a un agente terapeutico dirigido (radiomarcado u otras citotoxinas) dependena de muchos factores, incluyendo, aunque sin caracter limitativo, la capacidad del agente aglutinante para alcanzar la diana terapeutica, la capacidad del agente aglutinante terapeutico para penetrar en el tumor, la depuracion del agente aglutinante desde las celulas tumorales, la depuracion del agente aglutinante desde el organismo, asf como la sensibilidad intrmseca relativa o la resistencia del cancer al marcador radiactivo respectivo o a otras citotoxinas. Asimismo, no se esperana predecir la sensibilidad relativa del tumor al marcador radiactivo o a otras citotoxinas mediante la deteccion del nivel de agente dirigido en el tumor o en el organismo. Ademas, anteriormente, los resultados de terapias contra el cancer no han demostrado poder predecirse en funcion de la evaluacion de estudios por imagenes de pretratamiento o del ensayo de union en una muestra biologica.

[0051] En el caso de canceres no prostaticos, se expuso que la neovasculatura que expresa PSMA estaba presente en el 95 % de los casos [Liu H. et al., Cancer Res. 1997, 57(17):3629-34; Chang, S.S. et al., Cancer Res., 59:3192-3198, 1999; Chang S.S. et al., Clin. Cancer Res. 1999, 5(10):2674-81] y Morris, M. et al. [Clin. Can. Res. 2007; 13:2707-2713] descubrieron que un anticuerpo radiomarcado con PSMA era capaz de dirigirse in vivo al 95 % de pacientes no seleccionados con tumores solidos metastasicos. Mas recientemente, se ha descubierto que aproximadamente el 65 % de canceres gastricos metastasicos y el 85 % de canceres colorrectales metastasicos contienen neovasculatura que expresa PSMA [Haffner, M et al., Hum. Pathol., 40:1754-1761, 2009] y se obtuvieron resultados similares en canceres de mama, de ovario y de endometrio; es decir, un subconjunto variable de pacientes con tumores que no son Pca presentan neovasculatura PSMA-positiva. Como consecuencia, se puede seleccionar una subpoblacion de pacientes que presenta tumores PSMA-positivos que no son Pca (tal como refleja un estudio de imagenes no invasivo o un analisis de la muestra biologica) para que sea tratada utilizando una terapia dirigida a PSMA, y es mas probable que respondan favorablemente a que lo hagan los pacientes cuyos tumores sean PSMA-negativos.

[0052] La observacion del nivel de una diana terapeutica in vivo utilizando un primer agente aglutinante marcado de manera detectable se puede emplear para seleccionar pacientes que se pronostique que puedan beneficiarse de la terapia y para excluir a pacientes que no se pronostique que puedan beneficiarse de la terapia. Los pacientes que no se pronostique que puedan beneficiarse de la terapia pueden beneficiarse, aun asf, de la invencion debido a que pueden quedar exentos de los potenciales efectos secundarios de la terapia que no es probable que sean beneficiosos, y previamente se pueden dirigir a tratamientos alternativos de los cuales puedan beneficiarse. Los pacientes que se prevea que se pueden beneficiar de la terapia pueden someterse a la terapia.

Ademas, los pacientes que se prevea que se puedan beneficiar de la terapia se pueden incluir en un ensayo clmico. En concreto, el hecho de visualizar imagenes o de leer el primer agente aglutinante marcado de manera detectable puede segregar pacientes identificando, por ejemplo, niveles variables de expresion del antigeno diana (p. ej., calificando el nivel o cantidad de la diana). Se puede definir un umbral predeterminado de la diana en funcion de una relacion hipotetica o empmca entre el nivel de diana y la capacidad de respuesta esperada a la terapia (p. ej., la expresion de PSMA por encima de un umbral indica que un paciente puede ser seleccionado para la terapia). Del mismo modo, los pacientes se pueden beneficiar de la invencion debido a que, en diversas formas de realizacion, esta incluye metodos de diagnostico in vivo que no precisan una biopsia de tejido (p. ej., al contrario que ensayos in vitro, tales como inmunohistoqmmica, FISH, PCR, y similares, que se pueden emplear para seleccionar pacientes para tratamientos dirigidos, como trastuzumab y/o anti-EGFr). Otra ventaja se basa en que la invencion ofrece informacion acerca de la totalidad de las lesiones de un paciente en lugar de solo de una unica lesion que se someta a una biopsia invasiva y potencialmente peligrosa. La invencion beneficia ademas a pacientes que no presentan una lesion accesible para la biopsia. Otra ventaja es la capacidad para seleccionar a un paciente para una quimioterapia anterior y/o un agente o regimen quimioterapeutico mas agresivo. Otra ventaja mas es la capacidad para proporcionar un tratamiento conocido de cancer de prostata dirigido a PSMA a pacientes que presenten un cancer que no sea de prostata asociado a la expresion de PSMA (p. ej., en la neovasculatura de tumores solidos).

[0053] En diversos aspectos descritos en el presente documento, la seleccion de pacientes adecuados para una terapia se puede distinguir de la seleccion de una dosis apropiada para una terapia (p. ej., la radioinmunoterapia utilizando agentes terapeuticos de anticuerpos, tales como Yodo-131 Tositumomab, tambien conocido como BEXXAR®, se limita a determinar una dosis apropiada, y no determina si se debe tratar o no a un paciente ni predice como respondera un paciente a un tratamiento).

[0054] En diversos aspectos, cualquiera de los metodos diagnosticos (p. ej., identificacion o seleccion) puede incluir tambien la administracion al paciente de una dosis terapeutica del segundo agente aglutinante. El primer y/o segundo agente aglutinante puede ser un anticuerpo o una porcion de union al antfgeno o derivado de este. El anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este puede ser capaz de unirse al dominio extracelular de PSMA.

[0055] Debena ser evidente que se pueden aplicar los mismos procedimientos cuando la diana este presente en las celulas endoteliales neovasculares y/o en las celulas de tejido conectivo adyacentes a las celulas tumorales. Del mismo, se puede utilizar el primer agente aglutinante marcado para determinar la presencia y la cantidad relativa o absoluta de la molecula diana en un tumor de un paciente concreto, y emplearlo como criterio para seleccionar pacientes con niveles mas elevados de la diana para que se sometan a tratamiento con el segundo agente aglutinante terapeutico, ya que sena mas probable que este subconjunto de pacientes respondiera al segundo agente aglutinante terapeutico.

[0056] En algunas formas de realizacion, el marcador detectable incluye un isotopo seleccionado del grupo que consiste en 177Lu, 111 Indio, 67Cu, 18F, 99mTc, 124I, 125I, y 131I. El marcador detectable puede ser un agente de tomograffa por emision de positrones (PET), incluyendo, sin caracter limitativo, 124I, 89Zr, etc.

[0057] En ciertas formas de realizacion, el primer y/o segundo anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este esta radiomarcado. El marcador radiactivo puede ser al menos uno de 177Lu, 111Indio, 67Cu, 18F, 99mTc, 124I, 125I, 131I, y 99mTc. De manera alternativa, el primer agente aglutinante puede estar marcado con un colorante o con cualquier otro agente detectable conocido por los expertos en la materia.

[0058] En diversas formas de realizacion, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este es un anticuerpo monoclonal o porcion de union al antfgeno o derivado de este producido por un hibridoma seleccionado del grupo que consiste en un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12101, un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12109, un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12127, y un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12126. El primer y/o segundo agente aglutinante presenta una afinidad de al menos aproximadamente 10-9 M para la diana (p. ej., diana de superficie celular). El primer agente aglutinante y el segundo agente aglutinante pueden ser sustancialmente el mismo.

[0059] En algunos aspectos, el hecho de seleccionar a un paciente incluye la cuantificacion de una cantidad de la diana (p. ej., diana de superficie celular) en los sitios del tumor del paciente. Para la cuantificacion, se puede utilizar un metodo cuantitativo o semicuantitativo. La seleccion de un paciente puede incluir imagenes in vivo del primer agente aglutinante marcado de manera detectable. La seleccion de un paciente puede incluir un analisis cualitativo de la diana (p. ej., diana de superficie celular) en el paciente. El metodo puede incluir la administracion de un agente de contraste de imagenes junto con la dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable. Ademas, puede incluir otras formas de modalidades de visualizacion de imagenes anatomicas (p. ej., TC y/o IRM) que se pueden combinar con la visualizacion de imagenes del primer agente aglutinante (p. ej., PET-Tc , SPECT-TC, RM de imagenes planares, etc.).

[0060] En diversos aspectos, puede ser necesario un margen de tiempo entre la administracion de la dosis diagnostica del primer agente aglutinante marcado de manera detectable y la observacion del nivel del primer agente aglutinante marcado de manera detectable en el paciente. El tiempo comprendido entre la administracion del primer agente aglutinante marcado de manera detectable y la observacion del nivel del primer agente aglutinante marcado de manera detectable en el paciente puede ser determinado por un experto en la materia en funcion de la naturaleza del primer agente aglutinante y/o del marcador detectable. Por ejemplo, se puede determinar una cantidad adecuada de tiempo para observar el nivel mediante factores, incluyendo la localizacion del primer agente aglutinante marcado de manera detectable, la cantidad de ruido de fondo asociado a la senal del primer agente aglutinante marcado de manera detectable, la afinidad del primer agente aglutinante marcado de manera detectable por el agente terapeutico, el metabolismo del primer agente aglutinante marcado de manera detectable, y el tamano del primer agente aglutinante marcado de manera detectable. La cantidad adecuada de tiempo puede ser de horas a semanas (p. ej., aproximadamente 1 o 2 horas, varios dfas o semanas).

[0061] En algunos aspectos, se describe que se observa el nivel de marcador detectable en el paciente y se asigna una calificacion cualitativa al paciente en funcion de la cantidad relativa de marcador que se considere que esta presente. Por ejemplo, cuando se utilice un metodo de visualizacion de imagenes para observar el marcador detectable en el paciente, la imagen obtenida se puede calificar como 0, 1+, 2+ o 3+, donde 3+ se les asigna a los niveles mas altos detectados de marcador, y 0 se asigna a imagenes de pacientes que no mostraron una direccionalidad visible de la(s) lesion(es). En algunos aspectos, las imagenes se califican de manera visual (p. ej., por un profesional medico, tal como un radiologo u oncologo). En otros aspectos, las imagenes se califican de manera automatica (p. ej., mediante programas informaticos). En un aspecto (por ejemplo, 111In-J591 o 177Lu-J591), las imagenes de pacientes las califica de manera visual un medico del modo siguiente: 0 = tumor no detectable, 1+ = ligera o debil captacion tumoral detectable, 2+ = captacion tumoral moderada (p. ej., menor que el hugado), 3+ = captacion tumoral fuerte (p. ej., equivalente al hugado).

[0062] En funcion del nivel de marcador detectable en el paciente, se selecciona a un paciente para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse a una diana extracelular o intracelular. En algunos aspectos, el segundo agente aglutinante es capaz de unirse a una porcion extracelular de la diana de superficie celular. En concreto, cuando el paciente seleccionado muestra una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable, el paciente se selecciona para la administracion de una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante. En diversos aspectos, la lectura positiva puede ser una respuesta predefinida (p. ej., una calificacion superior a cierto umbral). La respuesta positiva puede ser emprnca (p. ej., una calificacion superior a la cual un paciente presenta una probabilidad razonable de respuesta al tratamiento). En ciertos aspectos, una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable puede incluir un ensayo cuantitativo (p. ej., una cantidad o nivel predeterminado de la diana). En algunos aspectos, una lectura positiva para el primer agente aglutinante marcado de manera detectable puede incluir un ensayo cualitativo (p. ej., presencia o ausencia de la diana). Un experto en la materia puede determinar el umbral, por ejemplo, comparando lecturas en una serie de pacientes obtenidas a partir del primer agente aglutinante y comparando esas lecturas con la respuesta derivada de la terapia con el segundo agente aglutinante terapeutico. De este modo, se puede definir y/o ajustar el umbral hasta el punto por debajo del cual la probabilidad de respuesta minimiza el valor de administracion del segundo agente aglutinante terapeutico. Tras seleccionar a un paciente en funcion del nivel observado de marcador detectable, se puede administrar una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante.

[0063] En diversos aspectos, se permite que transcurra un penodo de tiempo entre la administracion de la dosis terapeutica y la posterior seleccion del paciente. El tiempo transcurrido entre la seleccion del paciente y la administracion de la dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante lo puede determinar un experto en la materia, por ejemplo, en funcion de la afeccion del paciente, la naturaliza del primer agente aglutinante y/o la naturaleza del segundo agente aglutinante, incluyendo cualquier agente terapeutico asociado al segundo agente aglutinante. En un aspecto, la dosis terapeutica se puede administrar inmediatamente despues de observar el nivel del marcador detectable en el paciente. Esta eleccion puede incluir un tratamiento rapido del cancer y una posibilidad de reduccion de costes (p. ej., menos desplazamientos al hospital o clmica, y menos tiempo empleado por el medico y el paciente). En algunos aspectos, es posible administrar la dosis diagnostica y la dosis terapeutica durante una unica visita al hospital o clmica. En otro aspecto, puede existir una separacion de dfas, semanas o meses entre la administracion de la dosis terapeutica y el penodo de observacion del nivel de marcador detectable. En ciertas situaciones, dicha separacion puede resultar deseable (p. ej., durante la espera de un paciente hasta ser un mejor candidato para la terapia o, por ejemplo, durante la recuperacion de la anemia o de otra afeccion ffsica).

[0064] La dosis terapeutica del segundo agente aglutinante se puede administrar a un paciente (tambien denominado en el presente documento sujeto) en una unica dosis o en multiples dosis para tratar o para prevenir el avance de una enfermedad prostatica o cancerosa. La o las dosis o se puede(n) elegir en funcion de distintos parametros; en concreto, en funcion del modo de administracion empleado y el estado del sujeto. Otros factores incluyen el penodo de tratamiento deseado, y si se estan administrando o utilizando al mismo tiempo otras formas de tratamiento junto con la dosis terapeutica.

[0065] En algunos aspectos, la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante se administra en una cantidad suficiente como para inhibir el crecimiento de las celulas cancerosas o para destruir las celulas cancerosas. Por lo general, cuando el segundo agente aglutinante es un anticuerpo o una porcion de este de union al antigeno, una dosis terapeutica puede oscilar entre aproximadamente 1 y aproximadamente 1000 mg. En algunos aspectos, se administra un anticuerpo al paciente en una cantidad suficiente como para alcanzar una concentracion serica de al menos aproximadamente 0,005-5 pg/ml de anticuerpo en el sujeto. En algunos aspectos, el anticuerpo o la porcion de union al antfgeno o derivado de este se administra en una cantidad suficiente como para alcanzar una concentracion serica de 10, 25, 50, 100 o 200 pg/ml. En algunos aspectos, un anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este es una porcion de union al antfgeno de un anticuerpo, tal como un (Fab')², y se administra al paciente en una cantidad suficiente como para alcanzar una concentracion serica de entre al menos aproximadamente 0,003 y al menos aproximadamente 3,3 pg/ml de la porcion de union al antfgeno o derivado de este en el sujeto. En algunos aspectos, el (Fab')²se administra para alcanzar una concentracion serica de 6,6, 10, 20, 40 u 80 pg/ml. En algunos aspectos, el anticuerpo o la porcion de union al antfgeno de este se administra con una cantidad y frecuencia suficientes como para alcanzar una concentracion serica constante de la cantidad deseada.

[0066] El segundo agente aglutinante se puede administrar al sujeto de tal manera que el nivel serico del segundo agente aglutinante sea constante durante el penodo de tiempo deseado. El nivel serico deseado se puede basar en la cantidad del segundo agente aglutinante que se puede medir en una muestra de sangre, suero o plasma, o se puede basar, por ejemplo, en un resultado deseado, como la inhibicion del crecimiento de las celulas cancerosas (p. ej., efecto citostatico) o la destruccion de las celulas cancerosas (p. ej., efecto citotoxico). Un experto en la materia puede ajustar la dosis del segundo agente aglutinante, por ejemplo, en funcion del tamano del agente aglutinante, y de la afinidad de union del agente aglutinante y la diana. Se puede mantener un nivel adecuado de agente aglutinante en el suero mediante una dosificacion repetida.

[0067] En algunos aspectos, el punto mmimo de suero y/o los niveles maximos de agente aglutinante se pueden determinar con anterioridad a la administracion de la siguiente dosis de agente aglutinante. El punto mmimo y/o los niveles maximos de suero se pueden determinar utilizando tecnicas convencionales conocidas en la tecnica. El punto mmimo y/o los niveles maximos de suero se pueden utilizar para ajustar la dosis prescrita de agente aglutinante en pacientes concretos o grupos de pacientes.

[0068] Se pueden utilizar diversas vfas para administrar el primer o segundo agente aglutinante. El modo concreto seleccionado dependera del medicamento concreto elegido, de la gravedad del estado patologico que se este tratando y de la dosis diagnostica y terapeutica que se precise. Los metodos de la presente invencion, por lo general, se pueden poner en practica utilizando cualquier modo de administracion que sea medicamente aceptable, es decir, cualquier modo que produzca niveles efectivos de los compuestos activos sin provocar efectos secundarios inaceptables desde el punto de vista clmico. Entre tales modos de administracion se incluye la via oral, rectal, sublingual, topica, nasal, transdermica o parenteral. El termino «parenteral» incluye la via subcutanea, intravenosa, intramuscular, intraperitoneal o infusion intravenosa.

La dosis terapeutica del segundo agente aglutinante se puede administrar una vez, de manera continuada, por ejemplo, mediante un bombeo continuo, o a intervalos periodicos. El intervalo periodico puede ser semanal, bisemanal, trisemanal o mensual. La dosificacion puede tener lugar durante el penodo de un mes, dos meses, tres meses o mas para obtener una respuesta terapeutica apropiada. Los intervalos de tiempo deseados para dosis multiples de una composicion concreta se pueden determinar sin experimentacion indebida por parte de un experto en la materia.

[0069] En algunos aspectos, se describe que el primer y/o segundo agente aglutinante puede(n) estar conjugado(s) o conectado(s) (p. ej., por medio de un conector escindible o un conector no escindible) con otra entidad molecular, normalmente un marcador detectable o un agente terapeutico (p. ej., citotoxico o citostatico). El primer y/o segundo agente aglutinante puede(n) estar conectado(s) de manera funcional (p. ej., mediante acoplamiento qmmico, fusion genetica, asociacion no covalente o de otro modo) a una o mas entidades moleculares distintas (p. ej., de diagnostico o terapeuticas). El uso de un conector escindible permite la liberacion del agente terapeutico en el citoplasma intracelular tras la asimilacion del segundo agente aglutinante conjugado. Un conector no escindible permitina la liberacion tras la digestion del segundo agente aglutinante conjugado, o se puede utilizar con un agente que no necesite ser liberado del segundo agente aglutinante.

[0070] En algunos aspectos, el segundo agente aglutinante comprende un agente terapeutico toxico. El agente terapeutico puede ser cualquier compuesto que resulte adecuado para tratar la afeccion, por ejemplo, inhibiendo el crecimiento de las celulas cancerosas, o bien destruyendo las celulas cancerosas. Entre los agentes terapeuticos adecuados se incluye, por ejemplo, una fraccion citotoxica, tal como un medicamento terapeutico, un radioisotopo, moleculas de origen vegetal, fungico o bacteriano, o protemas biologicas (p. ej., toxinas proteicas) o partmulas biologicas (p. ej., nanopartmulas o partmulas vmcas recombinantes, como una protema vmica de la cubierta), o mezclas de estos. El agente terapeutico puede ser un medicamente u otro agente activo a nivel intracelular, tales como emisores de radiacion de corto alcance, incluyendo, por ejemplo, emisores a de alta energfa y de corto alcance, segun se describe en el presente documento. Entre los radioisotopos adecuados se incluye un emisor a, p o y, o un emisor p y y. Entre los radioisotopos que resultan utiles como agentes terapeuticos se incluye el itrio (90Y), lutecio (177Lu), actinio (225Ac), astato (211At), renio (186Re), bismuto (212Bi o 213Bi) y rodio (188Rh). Entre los radioisotopos utiles como marcadores (p. ej., para su uso en diagnosticos) se incluye el yodo (131I, 124I o 125I), indio (111In), tecnecio (99mTc), fosforo (32P), carbono (14C), tritio (3H) y circonio (074 *89Zr), o uno de los isotopos radiactivos listados anteriormente. En algunos aspectos, el segundo agente aglutinante puede estar acoplado a una molecula de origen vegetal, bacteriano o fungico (o derivado de la misma), tal como un maitansinoide (p. ej., maitansinol o el maitansinoide DM1), un taxano, una calicheamicina o una duocarmicina. Si el segundo agente aglutinante es un anticuerpo o una porcion de este de union al antfgeno, el segundo agente aglutinante puede estar conectado a otro anticuerpo o porcion de este de union al antfgeno para formar, por ejemplo, un anticuerpo biespedfico o multiespedfico.

[0071] En algunos aspectos, el segundo agente aglutinante esta acoplado (p. ej., mediante enlace covalente) a un inhibidor de proteosoma o a un inhibidor de topoisomerasa. El acido [(1R)-3-metiM-[[(2S)-1-oxo-3-fenil-2-[(3-mercaptoacetil) amino]propil]amino]butil] boronico es un inhibidor de proteosoma adecuado. N,N'-bis[2-(9-metilfenazina-1-carboxamido)etil]-1,2-etanodiamina es un inhibidor de topoisomerasa adecuado. En algunos aspectos, el segundo agente aglutinante se puede utilizar en combinacion con otras terapias.

[0072] En algunos aspectos, otras terapias incluyen la administracion de un agente citotoxico o quimioterapeutico al sujeto. Entre los ejemplos de agentes citotoxicos se incluyen agentes antimicrotubulares, inhibidores de topoisomerasa, antimetabolitos, inhibidores mitoticos, agentes alquilantes, agentes intercalantes, agentes capaces de interferir con una via de transduccion de senales, agentes que estimulan la apoptosis, agentes que interfieren en el metabolismo del folato y radiacion. En algunos aspectos, el agente citotoxico puede ser taxol, taxotere, citocalasina B, gramicidina D, bromuro de etidio, emetina, mitomicina, etoposido, teniposido, vincristina, vinblastina, colchicina, doxorrubicina, daunorrubicina, dihidroxiantracindiona, metotrexato, mitoxantrona, mitramicina, actinomicina D, 1-dihidrotestosterona, glucocorticoides, procama, tetracama, lidocama, propranolol, puromicina, un maitansinoide, tal como maitansinol (vease el documento de patente estadounidense n.° 5,208,020), CC-1065 (veanse los documentos de patente estadounidense n.os 5,475,092, 5,585,499, 5,846,545) y/o analogos u homologos de los mismos.

[0073] En caso de que los metodos y composiciones dados a conocer en el presente documento se utilicen para tratar pacientes que presenten trastornos prostaticos, como cancer de prostata, el segundo agente aglutinante puede ser un anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este que sea capaz de unirse a un dominio extracelular de PSMA, y se puede utilizar en combinacion con modalidades terapeuticas ya existentes, tales como prostatectoirna (focal, parcial o radical), radioterapia, terapia de ablacion prostatica (p. ej., terapia hormonal, criocirugfa, ablacion laser, ultrasonido focalizado de alta intensidad, y similares) y quimioterapia citotoxica, segun se han descrito anteriormente. Normalmente, la terapia hormonal actua para reducir los niveles de androgenos en un paciente, y puede implicar la administracion de un analogo o agonista (p. ej., Lupron®, Zoladex®, leuprolide, buserelina o goserelina) de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH, por sus siglas en ingles), asf como antagonistas (p. ej., Abarelix). En la terapia hormonal, se pueden utilizar tambien antiandrogenos no esteroideos, incluyendo flutamida, bicalutamida o nilutamida, asf como antiandrogenos esteroideos (p. ej., acetato de ciproterona o acetato de megestrol), estrogenos (p. ej., dietilestilbestrol), castracion quirurgica, manipulaciones hormonales secundarias o terciarias (por ejemplo, que impliquen el uso de corticosteroides (p. ej., hidrocortisona, prednisona o dexametasona), ketoconazol, abiraterona, MDV3100 y/o aminoglutetimida), inhibidores de 5a-reductasa (p. ej., finasteride, dutasterida), preparados vegetales, hipofisectomfa y adrenalectomfa. Ademas, la terapia hormonal se puede llevar a cabo de manera continua, intermitente o empleando combinaciones de cualquiera de los tratamientos expuestos anteriormente (p. ej., uso combinado de leuprolida y bicalutamida).

[0074] Los metodos de tratamiento del cancer dados a conocer en el presente documento se pueden emplear para tratar cualquier cancer, tal como cancer de prostata o tumores solidos que comprendan al menos algunas celulas que expresen PSMA en sus superficies celulares. En humanos, el PSMA se expresa en la superficie de celulas epiteliales prostaticas hiperplasicas normales y benignas (p. ej., epitelio acinar de secrecion prostatica benigna), celulas epiteliales prostaticas cancerosas (p. ej., neoplasia intraepitelial prostatica y adenocarcinoma de prostata), y celulas endoteliales vasculares proximas a ciertas celulas cancerosas. Entre estos tipos de cancer que contienen vasculatura PSMA-positiva se incluyen (aunque sin caracter limitativo), por ejemplo, celulas cancerosas renales, uroteliales (p. ej., de vejiga), testiculares, de colon, rectales, pulmonares (p. ej., carcinoma pulmonar de celulas no pequenas), de mama, hepaticas, neurales (p. ej., neuroendocrinas), gliales (p. ej., de glioblastoma), pancreaticas (p. ej., de ducto pancreatico), ovaricas, endometriales, de melanoma (p. ej., melanoma maligno), o de sarcoma de tejidos blandos. Entre los ejemplos de trastornos prostaticos que se pueden tratar o prevenir se incluye, aunque sin caracter limitativo, la inflamacion genitourinaria (p. ej., prostatitis), agrandamiento benigno, por ejemplo, hiperplasia nodular (hipertrofia o hiperplasia benigna de prostata); y cancer (p. ej., adenocarcinoma o carcinoma) de los tumores de prostata y/o de testfculos, incluyendo el cancer de prostata recurrente. La «recurrencia» o un cancer de prostata «recurrente» se refiere a un incremento de los niveles de PSA tras un tratamiento anticanceroso (p. ej., prostatectom^a y/o radiacion) de mas de 0,4 ng/dl (o niveles de PSA inferiores a 0,4 ng/dl, si se utilizan ensayos mas sensibles) en dos pruebas consecutivas separadas por un penodo de un mes. La recurrencia del cancer puede tener lugar en un penodo breve de tiempo desde el tratamiento anticanceroso (p. ej., inmediatamente, unas cuantas semanas o meses despues del tratamiento, o puede tener lugar varios anos despues de un tratamiento anticanceroso). Por ejemplo, en pacientes con cancer de prostata, la recurrencia se puede dar varios anos despues de un tratamiento anticanceroso (p. ej., hasta aproximadamente 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 15 o mas anos despues del tratamiento). La recurrencia se puede clasificar como «recurrencia local», «recurrencia regional» o «recurrencia distante». La «recurrencia local» se refiere a canceres que reaparecen en tejido u organos adyacentes o proximos al tejido u organo canceroso primario. Por ejemplo, en sujetos que presenten cancer de prostata, la recurrencia local se puede producir en tejido cercano a la prostata, la fosa prostatica, en las vesmulas seminales, los musculos cercanos a la prostata, y/o la pared rectal. La recurrencia regional podna implicar a los ganglios linfaticos circundantes en la pelvis y/o en las paredes de la pelvis. La «recurrencia distante» se refiere a canceres que reaparecen lejos del tejido u organo canceroso. Por ejemplo, en sujetos que presentan cancer de prostata, la recurrencia distante incluye canceres que se propagan a los huesos o a otros organos a cierta distancia del sitio primario. El termino «cancer» incluye todos los tipos de crecimientos cancerosos o procesos oncogenicos, tejidos metastasicos o celulas, tejidos u organos que hayan experimentado una transformacion maligna, sin tener en cuenta el tipo histopatologico o la etapa de invasividad. En algunos aspectos, las celulas cancerosas o las celulas proximas a las celulas cancerosas (tales como las celulas vasculares endoteliales) expresan el PSMA en su superficie celular.

[0075] Los metodos para tratar el cancer expuestos en el presente documento se pueden utilizar para tratar cancer no prostatico. Entre los ejemplos de trastornos cancerosos no prostaticos se incluyen, aunque sin caracter limitativo, tumores solidos, tumores de tejidos blandos y lesiones metastasicas. Entre los ejemplos de tumores solidos se incluyen tumores malignos, tales como sarcomas, adenocarcinomas y carcinomas, de los diversos sistemas de organos, tales como los que afectan al pulmon, pecho, tracto linfatico, tracto gastrointestinal (p. ej., colon) y tracto genitourinario (p. ej., celulas renales, uroteliales), faringe, etc. Los adenocarcinomas incluyen tumores malignos, tales como canceres de colon, cancer rectal, carcinoma de celulas renales, cancer de Idgado, carcinoma pulmonar de celulas no pequenas, cancer de intestino delgado y cancer de esofago. Las lesiones metastasicas de los canceres mencionados anteriormente se pueden tratar o prevenirtambien utilizando los metodos y composiciones dados a conocer en el presente documento.

[0076] El termino «anticuerpo» incluye una protema que comprende al menos una, y preferiblemente dos, regiones variables de cadena pesada (H) de la inmunoglobulina (abreviadas en el presente documento como VH), y al menos una, y preferiblemente dos, regiones variables de cadena ligera (L) de la inmunoglobulina (abreviadas en el presente documento como VL) que son capaces de unirse de manera espedfica a un antfgeno determinado. Segun se utiliza en el presente documento, un «derivado» significa que se modifica uno o mas atomos o porciones de la molecula con respecto a la estructura de referencia. Segun se utiliza en el presente documento, el hecho de «unirse de manera espedfica» hace referencia a la propiedad del anticuerpo para unirse a un antfgeno (p. ej., PSMA) con una afinidad de al menos 107 M-1. En algunos aspectos, la union espedfica se refiere a la capacidad para unirse a un antfgeno espedfico (p. ej., protema PSMA humana) con una afinidad que es de al menos el doble, 10 veces mas, 50 veces mas, 100 veces mas, 1000 veces mas, o mas que su afinidad para unirse a un antfgeno independiente que no sea el antfgeno espedfico o que sea ajeno al antfgeno espedfico. Por consiguiente, en algunos aspectos, la union espedfica a PSMA se refiere a la capacidad para unirse a un PSMA espedfico (p. ej., protema PSMA humana) con una afinidad que es de al menos el doble, 10 veces mas, 50 veces mas, 100 veces mas, 1000 veces mas, o mas que su afinidad para unirse a un antfgeno independiente que no sea PSMA o que sea ajeno a PSMA (p. ej., BSA, casema, etc.).

[0077] Las regiones VH y VL se pueden subdividir, ademas, en regiones hipervariables, denominadas «regiones determinantes de complementariedad» («CDR»), intercaladas con regiones que estan mas conservadas, denominadas «regiones marco» (FR). La extension de la region marco y las CDR se han definido de manera precisa (vease, Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of proteins of Immunological Interest, 5.a edicion, Departamento de Salud y Servicios Humanos de Estados Unidos, publicacion de NIH n.° 91-3242, y Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917). En algunos aspectos, cada VH y VL se compone de tres CDR y cuatro FR, dispuestas de aminoterminal a carboxiterminal en el siguiente orden: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.

[0078] La cadena VH o VL del anticuerpo puede incluir, ademas, la totalidad o parte de las regiones constantes de cadena pesada o ligera de la inmunoglobulina. En un aspecto, el anticuerpo es un tetramero de dos cadenas pesadas de la inmunoglobulina y dos cadenas ligeras de la inmunoglobulina. En algunos aspectos, las cadenas pesada y ligera estan interconectadas mediante enlaces disulfuro. En algunos aspectos, la region constante de cadena pesada consta de tres dominios, CH1, CH2 y CH3. En algunos aspectos, la region constante de cadena ligera consta de un dominio, CL. La region variable de las cadenas pesada y ligera contiene un dominio de union que interactua con un antfgeno, tal como la porcion extracelular de PSMA o una porcion de este. En algunos aspectos, las regiones constantes de los anticuerpos median en la union del anticuerpo con tejidos o factores del hospedador, incluyendo diversas celulas del sistema inmune (p. ej., celulas efectoras) y el primer componente (Clq) del sistema de complemento clasico. De esta manera, el anticuerpo puede provocar una respuesta citotoxica celular dependiente del anticuerpo y/o una citotoxicidad mediada por complemento. El termino «anticuerpo» incluye inmunoglobulinas intactas de los tipos IgA, IgG, IgE, IgD, IgM (asf como subtipos de las mismas), donde las cadenas ligeras de la inmunoglobulina pueden ser de los tipos kappa o lambda.

[0079] El termino «porcion de union al antfgeno o derivado de este» incluye cualquier porcion de una molecula de anticuerpo que se une espedficamente al antfgeno (tal como PSMA o una porcion extracelular de PSMA). Por ejemplo, una porcion de union al antigeno de un anticuerpo incluye moleculas en las que una o mas cadenas de la inmunoglobulina no es de longitud completa, pero es capaz de unirse de manera espedfica al antigeno. Entre los ejemplos de porciones de union abarcadas en el termino «porcion de union al antigeno o derivado de este» se incluye, por ejemplo, (i) un fragmento Fab, tal como un fragmento monovalente consistente en los dominios VL, VH, CL y CH1; (ii) un fragmento F(ab')², un fragmento bivalente que comprenda dos fragmentos Fab conectados mediante un puente disulfuro en la region bisagra; (iii) un fragmento Fd que consista en los dominios VH y CH1; (iv) un fragmento Fv que consista en los dominios VL y VH de un solo brazo de un anticuerpo, (v) un fragmento dAb (Ward et al., (1989) Nature 341:544-546) que consista en un dominio VH; y (vi) una region determinante de complementariedad (CDR) aislada que presente un marco suficiente capaz de unirse de manera espedfica al antfgeno o a una porcion de union al antfgeno de una region variable. Una porcion de union al antfgeno de una region variable de cadena ligera y una porcion de union al antfgeno de una region variable de cadena pesada, tales como los dos dominios del fragmento Fv, VL y VH, se pueden unir empleando metodos recombinantes, mediante un conector sintetico que les permita formarse como una unica cadena proteica, en la que las regiones VL y VH se emparejen para formar moleculas monovalentes (conocidas como Fv de cadena simple (scFv); vease, por ejemplo, Bird et al. (1988) Science 242:423-426; y Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883). Se pretende que tales anticuerpos de cadena simple queden abarcados tambien en el termino «porcion de union al antfgeno de este». Tambien dentro del termino «porcion de union al antfgeno o derivado de este», se incluyen variantes estructurales realizadas a partir de anticuerpos, o derivadas de anticuerpos, tales como diacuerpos, minicuerpos, anticuerpos de cadena simple, etc. Segun se utiliza en el presente documento, el termino «minicuerpo» se refiere a un anticuerpo recombinante en el cual las regiones variables de cadena pesada y ligera forman parte de la misma cadena polipeptfdica, que incluye tambien la region bisagra de cadena pesada y un dominio constante de cadena pesada. La cadena simple puede estar dimerizada, por ejemplo, mediante enlaces disulfuro. Segun se utiliza en el presente documento, el termino «diacuerpo» se refiere a un anticuerpo recombinante que comprende las regiones variables de cadena pesada y ligera, unidas mediante un conector peptfdico flexible, siendo el conector lo suficientemente largo como para permitir la separacion de los dominios, de modo que dos de los polipeptidos se puedan ensamblar en un dfmero, provocando que el anticuerpo sea divalente. Estos fragmentos de anticuerpos y/o variantes estructurales de anticuerpos se obtienen utilizando tecnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia, y los fragmentos y variantes estructurales se analizan y se seleccionan por su capacidad de union al antfgeno respectivo (p. ej., PSMA).

[0080] Muchos tipos de anticuerpos, o porciones de union al antfgeno o derivados de este, resultan utiles en los metodos y composiciones dados a conocer en el presente documento. Los anticuerpos pueden ser de los diversos isotopos, incluyendo: IgG (p. ej., IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), IgM, IgA1, IgA2, IgD o IgE. Preferiblemente, el anticuerpo es un isotopo IgG (p. ej., IgG1). Las moleculas de anticuerpo pueden ser de longitud completa (p. ej., un anticuerpo IgG1 o IgG4), o pueden incluir unicamente una porcion de union al antfgeno (p. ej., un fragmento Fab, F(ab')², Fv o Fv de cadena simple). Entre estos, se incluyen anticuerpos monoclonales, anticuerpos recombinantes, anticuerpos quimericos, anticuerpos humanizados, anticuerpos desinmunizados, y anticuerpos humanos, asf como porciones de union al antfgeno de los anteriores. Preferiblemente, los anticuerpos monoclonales o porciones de union al antfgeno o derivados de estos se unen al dominio extracelular de PSMA o a una porcion de este (p. ej., un epftopo de PSMA situado en el exterior de una membrana celular). Entre los ejemplos de anticuerpos monoclonales preferidos que son capaces de unirse a PSMA se incluye J415, que es producido por la lmea celular de hibridoma que posee un numero de acceso ATCC HB-12101, y J591, que es producido por la lmea celular de hibridoma que posee un numero de acceso ATCC HB-12126.

[0081] El anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este puede humanizarse mediante metodos conocidos en la tecnica. Una vez obtenidos los anticuerpos murinos, se pueden secuenciar las regiones variables. Puede determinarse la ubicacion de las CDR y los residuos del marco (vease Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5.a edicion, Departamento de Salud y Servicios Humanos de Estados Unidos, publicacion de NIH n.° 91-3242, y Chothia, C. et al. (1987) J. Mol. Biol. 196:901-917). Las regiones variables de cadena ligera y pesada pueden estar ligadas, de manera opcional, a las regiones constantes correspondientes.

[0082] El anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este puede modificarse, ademas, para delecionar epftopos de linfocitos T humanos espedficos (a los que tambien se hace referencia en el presente documento como "desinmunizados"). Se exponen metodos adecuados para desinmunizar anticuerpos, por ejemplo, en los documentos WO 98/52976 y WO 00/34317. En resumen, pueden analizarse las regiones variables de cadena ligera y pesada del anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este (por ejemplo, un anticuerpo murino o porcion de union al antfgeno o derivado de este) para determinar la presencia de peptidos que se unan a CMH de clase II; estos peptidos representan epftopos de linfocitos T potenciales (tal como se define en los documentos WO 98/52976 y WO 00/34317). Para la deteccion de epftopos de linfocitos T potenciales, se puede aplicar un enfoque de modelado computarizado, y ademas se puede buscar una base de datos de peptidos de union a CMH de clase II humanos para hallar motivos presentes en las secuencias murinas V^hy V^l. Estos motivos se unen a cualquiera de los 18 alotipos DR principales de CMH de clase II y, por lo tanto, constituyen epftopos de linfocitos T potenciales. Cualquier epftopo de linfocito T potencial detectado puede eliminarse sustituyendo residuos de aminoacidos en las regiones variables o mediante sustituciones de aminoacidos simples. En la medida en que se realizan posibles sustituciones conservadoras, con frecuencia, aunque no exclusivamente, se puede utilizar un aminoacido comun en esta posicion en secuencias de anticuerpos de la lmea germinal humana. Se exponen secuencias de la lmea germinal humana en Tomlinson, I. A. et al. (1992) J. Mol. Biol. 227:776-798; Cook, G. P. et al. (1995) Immunol. Today Vol. 16 (5): 237-242; Chothia, D. et al. (1992) J. Mol. Bio. 227:799-817. El directorio V BASE ofrece un amplio directorio de secuencias de regiones variables de inmunoglobulina humana (recopilado por Tomlinson, I. A. et al. MRC Centre for Protein Engineering, Cambridge, Reino Unido). Tras formarse las secuencias V^hy V^ldesinmunizadas, la secuencia variable mutagenizada puede fusionarse, de manera opcional, con una region constante humana.

[0083] En otros aspectos, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno de este puede presentar al menos una, dos, y, preferiblemente, tres CDR de la region variable de cadena ligera o pesada del anticuerpo J591 producidas por la lmea celular que posee un numero de acceso ATCC HB-12126 o el anticuerpo j 591 desinmunizado (deJ591) producido por la lmea celular que posee un numero de acceso ATCC PTA-3709.

[0084] En otros aspectos, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno de este puede presentar al menos una, dos, y, preferiblemente, tres CDR de la region variable de cadena ligera o pesada del anticuerpo J415 producidas por la lmea celular que posee un numero de acceso ATCC HB-12109 o el J415 desinmunizado producido por una lmea celular que posee un numero de acceso ATCC PTA-4174.

En otros aspectos adicionales, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno de este puede presentar al menos una, dos y, preferiblemente, tres CDR de la region variable de cadena ligera o pesada del anticuerpo J533 producidas por la lmea celular que posee un numero de acceso ATCC HB-12127 o el anticuerpo E99 producido por una lmea celular que posee un numero de acceso ATCC HB-12101.

[0085] En algunos aspectos, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este se une a la totalidad o a parte del epftopo de un anticuerpo descrito en el presente documento incluyendo J591 (producido por el hibridoma HB-12126 depositado en el ATCC), E99 (producido por el hibridoma HB-12101 depositado en el ATCC), J415 (producido por el hibridoma HB-12107 depositado en el ATCC) y J533 (producido por el hibridoma HB-12127 depositado en el ATCC). El anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este puede inhibir (por ejemplo, inhibir de manera competitiva) la union de un anticuerpo descrito en el presente documento, como J591, E99, J415 y J533, al PSMA humano. En algunos aspectos, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este se une al epftopo reconocido por J415. En algunos aspectos, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este se une al epftopo reconocido por J591. En algunos aspectos, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este se une al epftopo de E99. En algunos aspectos, el anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este se une al epftopo reconocido por J533.

[0086] Se puede determinar si dos anticuerpos o porciones de union al antfgeno o derivados de este son capaces de unirse espedficamente a los mismos o a epftopos solapados utilizando el analisis Scatchard y/o ensayos de union competitiva. La "union espedfica" de un anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este implica que el anticuerpo muestra una suficiente afinidad a un antfgeno o a un epftopo preferido y, preferiblemente, no exhibe una reactividad cruzada significativa. La "union espedfica" incluye union a anticuerpos, por ejemplo, con una afinidad de al menos 107, 108, 109, o 1010 M-1. Un anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este que no muestre una reactividad cruzada significativa es uno que no se unira de manera evidente a una entidad no deseada (por ejemplo, una entidad protefnica no deseada) en condiciones adecuadas para medir la especificidad del anticuerpo. Por ejemplo, un anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este que se una de manera espedfica al PSMA se unira de manera evidente al PSMA, pero no reaccionara significativamente con peptidos o protemas que no sean de PSMA. Un anticuerpo de una porcion de union al antfgeno o derivado del mismo espedfico para un epftopo preferido, por ejemplo, no producira, de manera significativa, reaccion cruzada ni inhibira de manera competitiva la union a epftopos remotos en la misma protema o peptido. Los anticuerpos o porciones de union al antfgeno o derivados de los mismos que reconocen al mismo epftopo se pueden identificar en un inmunoensayo simple que muestre la capacidad de un anticuerpo para bloquear la union de otro anticuerpo a un antfgeno diana (por ejemplo, un ensayo de union competitiva). La union competitiva se determina en un ensayo en el que el anticuerpo sometido a ensayo inhibe la union espedfica de un anticuerpo de referencia a un antfgeno comun, como el PSMA. Se conocen numerosos tipos de ensayos de union competitiva, por ejemplo: radioinmunoensayo (RIA, por sus siglas en ingles) indirecto o directo de fase solida, inmunoensayo enzimatico (EIA, por sus siglas en ingles) indirecto o directo de fase solida, ensayos competitivos de tipo sandwich (vease Stahli et al., Methods in Enzymology 9:242 (1983), vease tambien Kim, et al., Infect. Immun. 57:944 (1989)); EIA directo con avidina-biotina de fase solida (vease Kirkland et al., J. Immunol. 137:3614 (1986)); ensayos marcados directos de fase solida, ensayos marcados directos de tipo sandwich de fase solida (vease, Harlow y Lane, Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Press (1988) pp. 567-569 y 583); RIA marcado directo de fase solida utilizando un marcador 1-125 (vease Morel et al., Mol. Immunol. 25(1):7 (1988)); EIA directo con avidina-biotina de fase solida (Cheung et al., Virology 176:546 (1990)); RIA marcado directo (Moldenhauer et al., Scand. J. Immunol. 32:77 (1990); y (Belanger L. et al. Clin. Chim. Acta., 48:15-18 (1973)). Normalmente, dicho ensayo implica el uso de un antfgeno purificado unido a una superficie solida o celulas portadoras del antfgeno, una inmunoglobulina de prueba no marcada y una inmunoglobulina de referencia marcada. La inhibicion competitiva se mide al determinar la cantidad de marcador unido al anffgeno en presencia del anticuerpo de ensayo en relacion con la cantidad de marcador unido al anffgeno en ausencia del anticuerpo de ensayo.

EJEMPLOS EJEMPLO 1

[0087] Se seleccionaron treinta y dos pacientes para este estudio. Se les administro a los pacientes 99mTc-MDP para una gammagraffa osea convencional, y 177Lu-J591 en distintos dfas. El estudio se dividio en dos cohortes. La cohorte 1 (n = 15) recibio una dosis de 177Lu-J591 de 65 mCi/m2 La cohorte 2 (n = 17) recibio una dosis de 177Lu-J591 de 70 mCi/m2 (p. ej., aproximadamente, la dosis maxima tolerada). Aproximadamente 3 horas despues de la administracion de 99mTc-MDP por via intravenosa para una gammagraffa osea convencional, se sometio a los pacientes a un diagnostico por imagenes planares con radionuclidos en una gammacamara planar. Los procedimientos de diagnostico oseo por imagenes planares con radionuclidos resultan conocidos en la medicina nuclear y para los expertos en la materia.

[0088] Se obtuvieron imagenes de cuerpo completo de 177Lu-J591 y 99mTc-MDP para cada paciente. Ademas, los pacientes se sometieron a una tomograffa axial computarizada y/o a una RM para visualizar los tejidos blandos que no se observan en la gammagraffa osea. Las imagenes y/o escaneres con 177Lu-J591 de cada paciente se calificaron/anotaron a ciegas para que el marcador radiactivo se dirija a los sitios de tumor 5-8 dfas tras el tratamiento. El sistema de calificacion de imagenes midio la intensidad de union o absorcion del agente 177Lu-J591 dirigido. Las imagenes se calificaron a ciegas como: 0+ para ninguna focalizacion; 1+ para un diagnostico por imagenes debil de las lesiones; 2+ para un diagnostico por imagenes moderado de las lesiones; y 3+ para un diagnostico por imagenes fuerte/excelente de las lesiones. Los niveles de PSA tambien se obtuvieron de cada paciente antes de la administracion de 177Lu-J591 y 99mTc-MDP, y durante el transcurso del estudio. Tras la calificacion a ciegas, cada calificacion de los pacientes se comparo con la respectiva respuesta al PSA de los pacientes tras el tratamiento (por ejemplo, el cambio en el nivel de PSA en funcion de tiempo). El progreso de la enfermedad se definio como un aumento en el PSA de al menos un 25 % del PSA desde el nadir (al menos 5 ng/ml) o una progresion radiografica (1 nueva lesion en gammagraffa osea o >20 % mediante RECIST (Criterios de Evaluacion de Respuesta en Tumores Solidos) en un diametro de una lesion de tejido blando o en la aparicion de una(s) nueva(s) lesion(es).

[0089] Tal como se muestra en las figuras 1-10, los pacientes representaron un amplio espectro de respuesta a la terapia (por ejemplo, la respuesta antitumoral a 177Lu-J591) que vaffa entre una respuesta nula (por ejemplo, una progresion continua de la enfermedad) y aproximadamente un descenso del 90 % en el PSA.

[0090] La figura 1 representa a un paciente con un escaner J591 de grado 1+ (es decir, un diagnostico por imagenes debil). Tal como se muestra en la gammagraffa osea con 99mTc-MDP y en el escaner con mAb 177Lu-J591, este paciente presenta una gran lesion en el lado derecho de la pelvis y varias lesiones adicionales en la gammagraffa osea posterior (columna, costillas, pelvis) que unicamente se captan levemente en el escaner J591. El tratamiento (por ejemplo, la dosis terapeutica de segundo agente aglutinante) se administro en el dfa 0. La respuesta del paciente al tratamiento, medida como el cambio en el PSA (ng/ml), se muestra en la figura 2. Tal como se muestra en las figuras 1 y 2, el paciente practicamente no respondio al tratamiento (es decir, la trayectoria en el PSA no se vio afectada).

[0091] Las figuras 3 y 4 ilustran los resultados del PSA de dos pacientes adicionales con escaneres J591 de grado 1+ que no respondieron al tratamiento, medidos mediante el cambio o la progresion en el PSA.

[0092] La figura 5 muestra a un paciente con un escaner J591 de grado 2+ (es decir, un diagnostico por imagenes moderado). Tal como se muestra en la gammagraffa osea con 99mTc-MDP y en el escaner con mAb 177Lu-J591, este paciente presenta una gran lesion en el lado derecho de la cadera en la gammagraffa osea (indicado con un gran *) y una lesion mas pequena en el lado izquierdo de la cadera (* pequeno), mostrando ambos una intensidad de imagen moderada. El tratamiento (por ejemplo, la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante) se administro en el dfa 0. La respuesta del paciente al tratamiento, medida como el cambio en el PSA, se muestra en la figura 6. Tal como se muestra en las figuras 5 y 6, el paciente mostro una buena respuesta al tratamiento (es decir, la concentracion de PSA dejo de aumentar en el dfa 0, coincidiendo con la administracion de la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante).

[0093] La figura 7 ilustra otro paciente con un escaner J591 de grado 2+. Tal como se muestra en la gammagraffa osea con 99mTc-MDP y en el escaner con 177Lu-J591 mAb, se visualizaron dos lesiones distintas en la pelvis. El tratamiento (por ejemplo, la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante) se administro en el dfa 0. La respuesta del paciente al tratamiento, medida como el cambio en el PSA, tambien se muestra en graficos semilogafftmico (figura 8A) y aritmetico (figura 8B). El paciente mostro una buena respuesta al tratamiento (es decir, el PSA disminuyo aproximadamente un 58 %).

[0094] La figura 9 representa a un paciente con un escaner J591 de grado 3+ (es decir, un diagnostico por imagenes fuerte/excelente). Tal como se muestra en la gammagraffa osea con 99mTc-MDP y en el escaner con 177Lu-J591 mAb, aparecen multiples lesiones intensas distintas bien marcadas con J591. El tratamiento (por ejemplo, la dosis terapeutica del segundo agente aglutinante) se administro en el dfa 0. La respuesta del paciente al tratamiento, medida como el cambio en el PSA, se muestra tanto en graficos semilogaritmico (figura 10A) como aritmetico (figura 10A). El paciente mostro una respuesta excelente al tratamiento (es decir, el PSA disminuyo aproximadamente un 90 %).

[0095] La figura 11 ilustra una relacion entre la calificacion de imagenes J591 y la respuesta tras el tratamiento (reflejada por el cambio en PSA), que permite predecir una respuesta al tratamiento en funcion de la calificacion del escaner J591. La figura 12 tambien ilustra una relacion entre la calificacion de imagenes J591 y la respuesta al PSA tras el tratamiento, que permite predecir una respuesta al tratamiento en funcion de la calificacion del escaner J591 (la respuesta al PSA tras el tratamiento mostrado en el eje ^yy la calificacion mostrada en el eje x). En concreto, los pacientes con un escaner J591 de grado 1+ presentaron una progresion de la enfermedad (por ejemplo, un incremento del PSA, figura 12, 1201) a pesar del tratamiento, y los pacientes con un escaner de grado 2+ o 3+ muestran respuestas significativas al tratamiento (por ejemplo, una disminucion del PSA, figura 12, 1202).

EJEMPLO 2

[0096] Un ejemplo de una alternativa a la escala de calificacion semicuantitativa de 0-3+ es calcular un mdice de direction tumoral (TTI) cuantitativo. Esto puede llevarse a cabo en un escaner J591 de un paciente midiendo la densidad del conteo en la(s) lesion(es) tumoral(es) mas prominente(s) dividida por el area de pixeles de esas respectivas lesiones. A continuation, se corrige la densidad del conteo de la lesion para la densidad del conteo de fondo realizando los mismos calculos (densidad de conteo dividida por area de pixeles en la region de interes (ROI, por sus siglas en ingles) utilizando una zona negativa de lesion generalmente en la cara anterior del muslo derecho). La densidad del cuerpo completo se define como la media geometrica de los conteos de imagenes anteriores y posteriores por pixel. TTI = (densidad de conteo de la ROI de la lesion - densidad de conteo de fondo) / (densidad de conteo corporal total). Los conteos de tumores se calculan para un tumor determinado, sobre el area del tumor:

Los conteos de fondo (BG) se calculan para una region determinada, sobre el area de la region:

Los conteos corporales se calculan para el anterior y el posterior

[0097] Los valores semicuantitativos del mdice de direccion tumoral (TTI) se midieron en un total de 64 lesiones y se determino la respuesta del paciente a la terapia (reduction o estabilizacion del PSA). La figura 13A muestra un ejemplo de buena focalizacion del tumor (el mismo paciente de la figura 9 y la figura 10), que corresponde a un escaner de grado 3 (calificado tal como se ha indicado anteriormente) y un valor de TTI de 9,8 (calculado tal como se ha indicado anteriormente). La figura 13B muestra un ejemplo de mala focalizacion del tumor, correspondiente a un escaner de grado 1+ y un valor de TTI de 2,4.

[0098] La reduccion o estabilizacion del PSA tuvo lugar en el 64 % de los pacientes estudiados. Los sujetos que respondieron presentaban un nadir medio de PSA de 67 ± 24 % del punto de referencia. La mayor reduccion de PSA fue del 87%. De los 13 pacientes cuyos escaneres se calificaron con <2, 7 (54%) presentaron una reduccion en el PSA, 3 (23 %) mostraron estabilizacion, tal como se muestra en la Tabla 1. De los 9 pacientes cuyos escaneres se calificaron con <2, 2 (22 %) presentaron una reduccion en el PSA, 2 (22 %) mostraron estabilizacion, tal como se muestra en la Tabla 1. La relacion entre valores de TTI de las 64 lesiones y la respuesta al tratamiento (cambios en los valores de PSA) se muestra en la Tabla 2.

Tabla 1: Focalizacion con 177Lu-J591, medida mediante escaneres calificados, frente a respuesta clmica.

Tabla 2: Focalizacion con 177Lu-J591, medida mediante TTI, frente a respuesta clmica.

EJEMPLO 3: Uso de tomograffa por emision de positrones (PET) para el diagnostico por imagenes

[0099] De manera similar al uso del diagnostico por imagenes planares descrito anteriormente, o imagenes SPECT (tomograffa computarizada por emision de foton unico), tambien se podna utilizar la tomograffa por emision de positrones (PET) para el diagnostico por imagenes. El diagnostico por imagenes PET proporciona datos cuantitativos y directos que reflejan la captacion del primer agente aglutinante. El diagnostico por imagenes PET se puede llevar a cabo con un agente emisor de positrones, como 124Yodo, 89zirconio, 86itrio, u otros agentes emisores de positrones conocidos por los expertos en la materia, unidos al primer agente aglutinante. Al igual que se ha descrito anteriormente, los "valores estandar de captacion" (SUV) cuantitativos derivados de PET permiten la identificacion de pacientes cuyas lesiones muestran una captacion mas elevada, frente a aquellas con una captacion menor o nula. Se podna predecir que los pacientes con lesiones que muestren SUV mas altos muestran una captacion mas elevada del segundo agente aglutinante terapeutico, seguido, a su vez, por un aumento de la probabilidad de aportar un beneficio terapeutico. El uso de una modalidad de diagnostico por imagenes directamente cuantitativo, como PET, obvia la necesidad de calificar visualmente la captacion (por ejemplo, 0-3+) o de calcular el TTI tal como se ha descrito anteriormente. Al comparar los SUV de pacientes que no responden ni se benefician del segundo agente terapeutico dirigido con los SUV de pacientes que sf responden o se benefician del segundo agente terapeutico dirigido, un experto en la materia puede determinar un umbral por debajo del cual el tratamiento con el segundo agente terapeutico tiene poco valor en comparacion con los pacientes con SUV por encima del umbral.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Metodo in vitro para identificar a un paciente que presenta cancer metastasico que sea adecuado para la terapia dirigida contra el cancer comprendiendo:

proporcionar un primer agente aglutinante capaz de unirse al antigeno prostatico espedfico de membrana (PSMA);

calificar a un paciente analizando la cantidad del primer agente aglutinante en un tejido, celulas o fluido corporal en un paciente; e

identificar a un paciente adecuado para la terapia dirigida contra el cancer, donde dicha terapia comprende una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de ligar el antigeno prostatico espedfico de membrana (PSMA), donde el paciente se identifica unicamente si la calificacion es superior a un umbral predeterminado, donde la calificacion superior al umbral indica cancer susceptible para la terapia dirigida contra el cancer y donde el umbral predeterminado es superior a la cantidad del primer agente aglutinante en una muestra de control sana.

2. Metodo de acuerdo con la reivindicacion 1, donde el primer agente aglutinante comprende un marcador detectable.

3. Metodo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, donde el cancer es cancer de prostata.

4. Metodo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde al menos un agente aglutinante es capaz de ligarse a un dominio extracelular de PSMA, preferiblemente donde el primer agente aglutinante marcado de manera detectable es capaz de ligarse a un dominio extracelular de PSMA en la neovasculatura de un tumor solido.

5. Metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion anterior, donde el primer o segundo agente aglutinante comprende un marcador radiactivo, preferiblemente donde el marcador radiactivo es al menos uno de entre 177Lu, 111Indio, 67Cu, 18F, 99mTc, 124I, 125I, 131|, 89Zr, y 99mTc.

6. Metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion anterior, donde el primer o segundo agente aglutinante comprende un anticuerpo o porcion de union al antfgeno o derivado de este, un ligando, aptamero, molecula pequena o peptido capaz de unirse a PSMA.

7. Metodo de acuerdo con la reivindicacion 6, donde el anticuerpo o la porcion de union al antfgeno o derivado de este comprende un anticuerpo monoclonal o porcion de union al antfgeno o derivado de este producido por un hibridoma seleccionado del grupo que consiste en un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12101, un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12109, un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12127, y un hibridoma depositado con el numero de acceso al deposito ATCC HB-12126.

8. Metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion anterior, donde el primer o segundo agente aglutinante presenta una afinidad a PSMA de al menos aproximadamente 10-9 M.

9. Metodo de acuerdo con la reivindicacion 1, donde la etapa de calificacion de un paciente por medio del analisis de la cantidad del primer agente aglutinante comprende cuantificar una cantidad de PSMA.

10. Metodo de acuerdo con cualquier reivindicacion anterior, donde el umbral predeterminado es superior a la cantidad del primer agente aglutinante en una muestra procedente de un paciente con cancer no metastasico.

11. Metodo segun cualquier reivindicacion anterior, donde el umbral predeterminado es superior a la cantidad del primer agente aglutinante en una muestra procedente de un paciente con cancer metastasico no adecuado para dicha terapia dirigida contra el cancer.

12. Kit para su uso en la identificacion de un paciente que presenta cancer metastasico que es adecuado para la terapia dirigida contra el cancer comprendiendo:

una dosis diagnostica de un primer agente aglutinante marcado de manera detectable, siendo capaz el agente aglutinante marcado de manera detectable de unirse al PSMA; e

instrucciones para identificar a un paciente que presenta cancer metastasico que resulte adecuado para la terapia dirigida de cancer, donde dicha terapia comprende una dosis terapeutica de un segundo agente aglutinante capaz de unirse al PSMA, donde dichas instrucciones para identificar a un paciente comprenden la identificacion de un paciente unicamente si la calificacion es superior a un umbral predeterminado, donde la calificacion superior al umbral indica cancer metastasico que resulta adecuado para la terapia dirigida contra el cancer y donde el umbral predeterminado es superior a la cantidad del primer agente aglutinante en una muestra de control sana.

13. Kit para su uso de acuerdo con la reivindicacion 12, comprendiendo ademas una dosis terapeutica del segundo agente aglutinante.