ES2602877B1 - Procedimiento de obtención de un concentrado de proantocianidinas poliméricas con un contenido superior al 90% mediante tratamientos enzimáticos y sin utilización de disolventes orgánicos - Google Patents

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Abstract

Procedimiento de obtención de un concentrado de proantocianidinas poliméricas con un contenido superior al 90% mediante tratamientos enzimáticos y sin utilización de disolventes orgánicos.#Procedimiento de obtención de un concentrado de proantocianidinas poliméricas con un contenido superior al 90%, caracterizado por la utilización de tratamientos enzimáticos y por la ausencia de disolventes orgánicos y/o extracción con disolventes orgánicos. Este concentrado es útil como ingrediente funcional, complemento alimenticio, como producto cosmético y como producto farmacéutico.

Description

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Procedimiento de obtencion de un concentrado de proantocianidinas polimericas con un contenido superior al 90% mediante tratamientos enzimaticos y sin utilizacion de disolventes organicos
DESCRIPCION
La presente invention se refiere a un procedimiento para la obtencion de un concentrado de proantocianidinas polimericas con un contenido superior al 90% mediante sucesivos tratamientos enzimaticos y sin emplear disolventes organicos. Asimismo, la invencion se refiere al concentrado obtenido por el procedimiento mencionado y a su uso complemento alimenticio, ingrediente funcional, producto farmaceutico o cosmetico.
ESTADO DE LA TECNICA
Las proantocianidinas (proanthocyanidins) son un tipo de compuestos polifenolicos constituidos por flavan-3 ols y flavan-3,4 diols y que se encuentran en determinados vegetales, incluyendo algunos comestibles.
Tradicionalmente el interes cientifico y tecnologico en las proantocianidinas se ha centrado en la astringencia y aroma que aportan a alimentos y bebidas. No obstante, en las dos ultimas decadas se ha evidenciado que estos compuestos son biodisponibles y tienen una importante actividad biologica, presentando un gran potencial para la preparation de ingredientes funcionales, suplementos dieteticos y farmacos en base a sus propiedades antiinflamatorias, de reduction de riesgo cardiovascular, de cancer colorectal y neuroprotectoras.
Las proantocianidinas presentes en vegetales lo estan en forma de oligomeros y polimeros. Existe amplia information bibliografica sobre la composition y contenido de oligomeros en distintos vegetales, recogidas en bases de datos internacionales como la "USDA Database for the Proanthocyanidin Content of Selected Food".
Las proantocianidinas se obtienen de material vegetal diverso por metodos de extraccion con diversos disolventes, complementados con procedimientos de purification para obtener concentrados con contenidos de proantocianidinas de hasta el 25% (generalmente oligomericas), quedando en el residuo desechado cantidades significativas de proantocianidinas mayoritariamente polimericas Por tanto, seria
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deseable disponer de un metodo capaz de obtener proantocianidinas polimericas con un contenido superior al 90%, evitando los procesos de extraction con disolventes organicos y aprovechando al maximo la materia vegetal original.
DESCRIPCION DE LA INVENCION
Un primer aspecto de la presente invention se refiere a un procedimiento de obtencion de un concentrado de proantocianidinas polimericas con una concentration en peso de al menos el 90%, caracterizado porque comprende sucesivas etapas de tratamiento con enzimas. Otra caracteristica de la presente invencion es la no utilization de disolventes organicos en ninguna etapa ni uso de extraccion con los mismos.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere a un concentrado de proantocianidinas polimericas con una concentracion en peso de al menos el 90% obtenidas por el procedimiento descrito anteriormente.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere al uso del concentrado de proantocianidinas polimericas con una concentracion de al menos el 90% tal y como se ha descrito anteriormente, como complemento alimenticio, ingrediente funcional, producto farmaceutico o cosmetico.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere a una composition farmaceutica que contenga concentrado de proantocianidinas polimericas obtenidas por el procedimiento definido anteriormente o a una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables.
Otro aspecto de la presente invencion se refiere al uso de la composicion farmaceutica definida anteriormente para la fabrication de un producto farmaceutico dirigido a salud gastrointestinal, incluyendo la inhibition de polipos intestinales y criptas aberrantes como elementos de prevention y tratamiento de cancer de colon. Asi mismo, el uso en productos farmaceuticos para la reduction de factores de riesgo cardiovascular, principalmente colesterol total, LDL, trigliceridos y porcentaje de grasa corporal.
Asi, la invencion se refiere al procedimiento de obtencion de un concentrado de proantocianidinas polimericas con una concentracion en peso de al menos el 90%, tal
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y como se ha mencionado anteriormente, que comprende sucesivas etapas de tratamiento con enzimas sin utilization de disolventes organicos.
En otra realization la invention se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde las proantocianidinas polimericas estan constituidas por monomeros de (epi)catequina, (epi)galocatequina y (epi)catequin-3-O-galato.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde las proantocianidinas polimericas son de formula I:
imagen1
Formula I
donde n representa un numero entero entre 11 y 150.
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En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde las enzimas se seleccionan de proteasas, hemicelulasas y celulasas.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde el uso de las enzimas es por action secuencial, y preferiblemente donde el uso de las enzimas es por accion secuencial mediante un primer tratamiento con proteasas y un tratamiento posterior con hemicelulasas y celulalas.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde:
las enzimas se seleccionan de proteasas, hemicelulasas y celulasas; y
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su uso es por accion secuencial, y preferiblemente donde el uso de las enzimas es por accion secuencial mediante un primer tratamiento con proteasas y un tratamiento posterior con hemicelulasas y celulalas.
En otra realization la invention se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde las proteasas se seleccionan de proteasas de tipo VIII de Bacillus licheniformis.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, caracterizado por obtenerse a partir material vegetal.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde el material vegetal se selecciona de caqui y algarroba.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, caracterizado porque el material vegetal se trata previamente con medio acuoso para obtener un sobrenadante (conteniendo azucares y compuestos de bajo peso molecular) que se elimina, obteniendo asi un residuo solido que contiene proantocianidinas polimericas. Por medio de los tratamientos enzimaticos sobre este residuo se eliminan polimeros de carbohidratos y proteinas y otros compuestos, obteniendo un concentrado de proantocianidinas polimericas que presenta caracteristicas diferenciales respecto a los extractos de proantocianidinas actualmente existentes: mayor peso molecular de las proantocianidinas, ausencia de disolventes organicos en la obtencion, y mayor aprovechamiento de la materia vegetal original.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde el residuo resultante del tratamiento enzimatico se somete a una etapa de secado.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde el secado se realiza por liofilizacion o secado a vado.
En otra realizacion la invencion se refiere al procedimiento descrito anteriormente, donde el concentrado de proantocianidinas polimericas obtenido se somete a una molienda para obtener un tamano de particula desde nanometros hasta 250 mm.
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La presente invention se refiere a un ingrediente alimentario que comprende el producto de la invencion y uno o mas aditivos alimentarios de uso tecnologico aceptables, esto es, que siendo compatibles con el producto de la invencion y sin ser perjudiciales para quien tome dicho producto, anadan mejoras funcionales, sensoriales, de estabilidad, o tecnologicos. Este ingrediente se podra incorporar a distintas dosis a diferentes matrices alimentarias (bebidas, productos de panaderia, preparados carnicos y de pescado, productos untables, productos lacteos, etc.), dando lugar a un nuevo producto.
La presente invencion tambien se refiere a un producto cosmetico que comprende el producto de la invencion y uno o mas excipientes cosmeticos aceptables, esto es, que siendo compatibles con el producto de la invencion y sin ser perjudiciales para quien tome dicho producto, anadan mejoras funcionales, sensoriales, de estabilidad, o tecnologicos. Este producto cosmetico podra tener cualquiera de las formas habituales de presentation de estos productos: crema, pomada, locion, etc.
La presente invencion tambien se refiere a un complemento alimenticio que comprende el producto de la invencion y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables, esto es, que siendo compatibles con el producto de la invencion y sin ser perjudiciales para quien tome dicho complemento, anadan mejoras funcionales, sensoriales, de estabilidad, o tecnologicos. Este complemento alimenticio podra tener cualquiera de las formas habituales de presentacion de estos productos: sobres, comprimidos, capsulas, etc.
La presente invencion tambien se refiere a una composition farmaceutica que comprende el compuesto de la invencion solo o junto con otros compuestos activos (o una sal o solvato farmaceuticamente aceptable del mismo) y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables. Los excipientes deben ser “aceptables” en el sentido de ser compatibles con los demas ingredientes de la composicion y de no ser perjudiciales para quien tome dicha composicion.
A lo largo de la invencion, el termino “action secuencial” se refiere al uso de las enzimas del procedimiento de la invencion de forma consecutiva. Preferiblemente de forma que inicialmente se lleva a cabo un tratamiento con proteasas y posteriormente un tratamiento con hemicelulalas y celulasas.
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Los compuestos de la presente invention pueden ser administrados en forma de cualquier formulation farmaceutica, la naturaleza de la cual, como es bien sabido, dependera de la naturaleza del principio activo y de su via de administration. En principio se puede utilizar cualquier via de administracion, por ejemplo oral, parenteral, nasal, ocular, rectal, y topica.
Las composiciones solidas para la administracion oral incluyen comprimidos, granulados y capsulas. En cualquier caso el metodo de fabrication esta basado en una mezcla simple, granulation seca o granulation humeda del principio activo con excipientes. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes tales como lactosa, celulosa microcristalina, manitol o hidrogenofosfato calcico; agentes aglutinantes como por ejemplo almidon, gelatina o polivinilpirrolidona; disgregantes como carboximetilalmidon sodico o croscarmelosa sodica; y agentes lubricantes como por ejemplo estearato magnesico, acido estearico o talco. Los comprimidos pueden ser ademas recubiertos con excipientes adecuados y mediante tecnicas conocidas con el objeto de retrasar su disgregacion y absorcion en el tracto gastrointestinal y asi conseguir una action sostenida durante un mayor periodo de tiempo, o simplemente para mejorar sus propiedades organolepticas o su estabilidad. El principio activo puede tambien ser incorporado por recubrimiento sobre pellets inertes mediante el uso de polimeros filmogenos naturales o sinteticos. Tambien es posible la realization de capsulas de gelatina blanda, en las que el principio activo se mezcla con agua o con medio oleoso, por ejemplo aceite de coco, parafina liquida o aceite de oliva.
Se pueden obtener polvos y granulados para la preparation de suspensiones orales mediante la adicion de agua, mezclando el principio activo con agentes dispersantes o humectantes; suspensantes y conservantes. Tambien pueden anadirse otros excipientes, por ejemplo edulcorantes, aromatizantes y colorantes.
Como formas liquidas para la administracion oral se pueden incluir emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires que contienen diluyentes inertes comunmente utilizados, tales como agua destilada, etanol, sorbitol, glicerol, polietilenglicoles (macrogoles) y propilenglicol. Dichas composiciones pueden tambien contener coadyuvantes como agentes humectantes, suspensantes, edulcorantes, aromatizantes, conservantes y reguladores de pH.
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Preparaciones inyectables, de acuerdo con la presente invention, para la administration parenteral, comprenden soluciones, suspensiones o emulsiones esteriles, en un solvente acuoso o no acuoso como propilenglicol, polietilenglicol o aceites vegetales. Estas composiciones pueden tambien contener coadyuvantes, como humectantes, emulsionantes, dispersantes y conservantes. Podrian ser esterilizadas por cualquiera de los metodos conocidos o preparadas como composiciones solidas esteriles que seran disueltas en agua o cualquier otro medio inyectable esteril inmediatamente antes de uso. Tambien es posible partir de materias primas esteriles y mantenerlas en estas condiciones durante todo el proceso de fabrication.
Para la administracion rectal, el principio activo puede ser formulado preferentemente como supositorio en una base oleosa, como por ejemplo aceites vegetales o gliceridos semisinteticos solidos, o en una base hidrofila como polietilenglicoles (macrogol).
Los compuestos de la invencion pueden tambien ser formulados para su aplicacion topica para el tratamiento de patologias en zonas u organos accesibles por esta via, como ojos, piel y tracto intestinal. Formulaciones incluyen cremas, lociones, geles, polvos, soluciones y parches en las que el compuesto se encuentra dispersado o disuelto en excipientes adecuados.
Para la administracion nasal o por inhalation, el compuesto puede presentarse formulado en forma de aerosol de donde es convenientemente liberado con el empleo de propelentes adecuados.
La dosificacion y la frecuencia de las dosis variaran en funcion de la naturaleza y gravedad de la enfermedad a tratar, la edad, la condition general y el peso del paciente, asi como tambien del compuesto particular administrado y la via de administracion, entre otros factores. A ritulo de ejemplo, un rango adecuado de dosificacion oscila entre alrededor de 0,01 mg/Kg y alrededor de 100 mg/Kg por dia, que pueden administrarse como dosis unica o en varias tomas.
A lo largo de la description y las reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no pretenden excluir otras caracteristicas tecnicas, aditivos, componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos, ventajas y caracteristicas de la invencion se desprenderan en parte de la descripcion y en parte de la practica de la
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invention. Los siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustracion, y no se pretende que sean limitativos de la presente invencion.
EJEMPLOS
A continuation se ilustrara la invencion mediante unos ensayos realizados por los inventores, que pone de manifiesto la efectividad del producto de la invencion.
Los tratamientos enzimaticos y sus condiciones experimentales se han seleccionado despues de muchos ensayos con distintos tipos de enzimas y combinaciones de los mismos.
De esta manera, las siguientes enzimas han sido descartadas para su uso en el procedimiento de la presente invencion:
1) Pepsina. Se utilizo pepsina de mucosa gastrica porcina (P700 Sigma-Aldrich), se llevo a cabo este procedimiento: anadir 10 L de tampon HCl-KCl (tampon HCl-KCl 0,2M: Preparar 14,91 g de KCl/ 1000 ml agua destilada. Por otro lado, 15,56g HCl 37%/ 1000 ml de agua destilada. Mezclar 250 ml de KCL con 150 ml de HCL y anadir 500 de agua destilada. Ajustar pH a 1,5 y enrasar a 1 litro) y ajustar pH a 1,5. Anadir 200 mL de pepsina (300mg/ml tampon HCl-KCl), e incubar 1 h a 40°C.
2) Pancreatina. Se utilizo pancreatina de pancreas porcino (P7545 Sigma-Aldrich): anadir 4,5 L de tampon fosfato pH 7,5 (Tampon fosfato 0,1M: Preparar 13,8 g de fosfato sodico en 700 ml de agua destilada. Por otro lado, 20,41g de NaOH en500ml de agua destilada. Anadir 70 ml NaOH 1N, ajustar pH a 7,5 y enrasar a 1 litro) y ajustar la muestra a ese pH. Anadir 1 L de pancreatina (5mg/ml tampon fosfato pH7,5), e incubar 6 h a 37°C.
3) Viscozyme. Se utilizo un complejo enzimatico celulrtico de Aspergillus sp. (V2010, Sigma-Aldrich) se anadieron 10 L de tampon acetato 0,1M (tampon acetato 0,1M: mezclar 3,33 g acetato sodico, 0,360 mL acido acetico y 900 mL de agua destilada. Ajustar pH a 4,6 y enrasar a 1L con agua destilada), ajustar pH a 4,6 y adicionando 20 mL de Viscozyme (solution comercial) e incubando 12 h a 50°C
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4) Xilanasa. Se utilizo xilanasa procedente de Thermomyces lanuginosus (X2753, Sigma-Aldrich). Anadir 10 L de tampon acetato 0,1 M, ajustar pH a 4,6, anadir 1 L de xilanasa (6 mg/mL tampon acetato 0,1M) e incubar 16 h a 75°C.
As^ se ha descartado el uso de estos tres enzimas en los ensayos llevados a cabo para la invention por presentar una concentration de proantocianidinas polimericas del orden de un 40% inferior (en el caso de viscozyme y xilanasa) y de un 50% inferior (en el caso de pepsina y pancreatina) al conseguido con las enzimas seleccionadas para llevar a cabo la invencion y que se detallan a continuation.
Ejemplo 1: obtencion del concentrado de proantocianidinas polimericas.
Obtencion a partir de algarroba (carob pod).
1) Preparation de material vegetal.
Se parte de las vainas de algarroba. En primer lugar se extraen y descartan las semillas (que actualmente se utilizan para obtencion industrial de goma de garrofin- locust bean gum-) y se procede al molido de las vainas resultando una harina de algarroba (en adelante, harina original).
La harina se homogeneiza en medio acuoso con un Polytron (o equipo equivalente) empleando una proportion adecuada de agua (15 L agua/kg harina original). El homogeneizado se somete a agitation (30 minutos a temperatura inferior a 60°C) con objeto de disolver azucares y otros solidos solubles. A continuacion, se centrifuga (10 minutos a 3000 g), se descarta el sobrenadante y el residuo solido resultante es el material de partida para la obtencion del concentrado de proantocianidinas polimericas.
2) Obtencion del concentrado de proantocianidinas polimericas.
Requiere sucesivos tratamientos enzimaticos que tienen por objetivo eliminar los compuestos insolubles y polimericos distintos a las proantocianidinas polimericas que contiene el residuo procedente de la centrifugation.
2.1 Tratamiento con proteasa
Al residuo procedente de 1) se le anade una solution acuosa de NaOH 0,275 M (10 L/kg harina original), se ajusta el pH a 7,5 y se homogeneiza de forma similar a lo descrito en 1). Se anaden 100 mL de proteasa de Bacillus licheniformis (solucion en
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tampon fosfato 0,08M pH 6,0). Se incuba 35 min a 60°C con agitacion constante. Se centrifuga (10 minutos a 3000 g), se descarta el sobrenadante y el residuo se utiliza en la siguiente etapa.
2.2 Tratamiento combinado con celulasa y hemicelulasa
Al residuo procedente de 2.1 se le anade tampon acetato pH 4,6 0,1M (5L/kg harina original), se ajusta el pH a 4,6 y se homogeneiza. Se anaden 500 mL de celulasa (actividad 2 u/mg) y 500 mL de hemicelulasa (actividad 0,3 u/mg), ambas en la solucion del tampon pH 4,6. Se incuba 16 h a 43°C con agitacion constante. Se centrifuga (10 minutos a 3000 g), se descarta el sobrenadante y el residuo se utiliza en la siguiente etapa.
2.3 Secado y molienda
El residuo procedente de 2.2 se seca a baja temperatura (<60°C) utilizando tecnologia habitual (liofilizacion o secado a vado o spray-drying, etc.). A continuation se somete a una molienda para obtener un tamano de particula adecuado segun aplicabilidad prevista, utilizando tambien tecnologia habitual (molino centrifugo u otros, micronizador, formation de nanoparticulas, etc.).
3) Producto resultante
Se trata de un polvo seco, con un contenido superior al 90% de proantocianidinas polimericas.
El contenido se determina segun el procedimiento descrito por Zurita (ver Int. J. Food Sci. Nutr., "Improved procedure to determine non-extractable polymeric
proanthocyanidins in plant foods”, 63, 936-39).
Obtencion a partir de caqui (persimmon).
Se utiliza el mismo procedimiento que en el caso de la algarroba, pero en este caso el material vegetal utilizado es la pulpa y piel del caqui (caqui deshuesado), que se homogeneiza de forma similar.
Ejemplo 2: Uso de las proantocianidinas polimericas como complemento alimenticio o ingrediente funcional
En un trabajo previo se proporciono un producto de uva conteniendo un 15% de proantocianidinas polimericas, a traves de sobres monodosis (7,5 g de producto), cuyo contenido se disolvia en agua para su consumo. Tras el consumo diario de este
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producto durante 16 semanas, se observaron resultados positivos en sujetos hipercolesterolemicos en diferentes parametros: colesterol total, colesterol LDL, trigiceridos, % de grasa corporal, presion sangumea (Perez-Jimenez et al., Nutr., 24, 2008, 646-53). Numerosos estudios en animales con proantocianidinas de uva tambien han observado estos efectos y han elucidado los mecanismos moleculares implicados (Blade et al., Molec. Nutr. Food Res., 54, 2010, 37-59; Decorde et al., Molec. Nutr. Food Res., 53, 2009, 659-66; Kruger et al., Food Res. Int., 59, 2014, 4152); igualmente, estos efectos se han observado para proantocianidinas de alto peso molecular de caqui (Zou et al., Food Res. Intl., 48, 2012, 970-77). Igualmente, las proantocianidinas de uva han mostrado, en distintos modelos animales, efectos positivos en relacion con el metabolismo de carbohidratos, incluyendo glucemia, insulinemia y otros marcadores relacionados (Castell-Auvi et al., J. Nutr. Biochem., 23, 2012, 1565-72; Mesproom et al., Br. J. Nutr., 106, 2011, 1173-81). Cabe esperar que el concentrado cuya obtencion se describe en esta invencion, con un contenido muy superior de proantocianidinas polimericas, produzca resultados mas acusados y/o con menores dosis.
Ejemplo 3: Uso de las proantocianidinas polimericas como producto cosmetico
Se ha descrito que las proantocianidinas de uva son capaces de inhibir la oxidacion causada por rayos UV en cultivos celulares de epidermis (queratinocitos) (Mantena et al. Free Radical Biol. Med., 40, 2006, 1603-14). Efectos similares se observaron en ratones irradiados con UVB, tras la aplicacion topica de un extracto de proantocianidinas de uva (Filip et al. Food Chemical Toxicol., 2013). Cabe esperar que el concentrado cuya obtencion se describe en esta invencion, con un contenido muy superior de proantocianidinas polimericas, produzca resultados mas acusados y/o con menores dosis.
Ejemplo 4: Composicion farmaceutica que contiene proantocianidinas polimericas para la prevencion del riesgo cardiometabolico.
Como se ha indicado en el Ejemplo 2, el consumo prolongado de proantocianidinas polimericas ha dado lugar a efectos beneficiosos en distintos marcadores de riesgo cardiometabolico. Esto se deben a distintas propiedades de las proantocianidinas, entre ellas, sus conocidos efectos antiinflamatorios (Kruger et al., Food Res. Int.., 59, 2014, 41-52; Mena et al., IUBMB Life, 66, 2014, 745-58). Cabe esperar que la mayor concentration de estos compuestos en el producto de la presente invencion, permitan alcanzar esos efectos a menores dosis y podria por tanto ser incorporado en
formulaciones farmaceuticas, solo o en combination con otros compuestos activos incorporados a la practica clmica habitual.
Ejemplo 5: Uso de la composition farmaceutica para la salud gastrointestinal, 5 incluyendo la inhibition de polipos intestinales y criptas aberrantes como elementos de prevention y tratamiento de cancer de colon
Trabajos previos han mostrado que las proantocianidinas de distintos productos derivados de la uva presentan efectos beneficiosos en relation a distintos parametros de salud gastrointestinal: efectos reguladores en colitis ulcerosa (Wang et al., Intl. 10 Inmunopharmacol., 10,2011, 1620-27), aumento de capacidad antioxidante cecal (Goni and Serrano, J Sci Food Agric 85,1877-1881), descenso de oxidation lipidica en mucosa colonica (Lopez-Oliva et al., Br J Nutr 14, 2013, 4-16), sobreexpresion de enzimas detoxificantes (Lopez-Oliva et al. Nutr. Res., 26, 2006, 653-68; Lopez-Oliva et al., Br J Nutr 14, 2013, 4-16), estimulacion del crecimiento de Lactobacillus (Pozuelo 15 et al., J Food Sci 77, 2012, 59-6). Es especialmente destacable que estos compuestos han mostrado capacidad para reducir las criptas intestinales en ratas sanas (Lopez- Oliva et al. Nutr. Res., 26, 2006, 653-68), asi como el numero y tamano de los polipos intestinales en un modelo animal validado de cancer de colon, los ratones ApcMin+/" (Sanchez-Tena et al. Carcinog., 34, 2013, 1881-88; Velmuragan et al., Neoplasia, 12, 20 2010, 95-102), habiendose identificado algunos de los mecanismos moleculares
responsables de estos efectos (Kaur et al., Mol. Carcinog., 50, 2011, 553-62; Roy e tal., Neoplasia, 7, 2005, 24-36). Cabe esperar que el concentrado cuya obtencion se describe en esta invencion, con un contenido muy superior de proantocianidinas polimericas, produzca resultados mas acusados y/o con menores dosis.

Claims (17)

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    REIVINDICACIONES
    1. Procedimiento de obtencion de un concentrado de proantocianidinas polimericas con una concentration en peso de al menos el 90%, caracterizado por que comprende sucesivas etapas de tratamiento con enzimas.
  2. 2. El procedimiento segun la reivindicacion 1, donde las proantocianidinas polimericas estan constituidas por flavanoles.
  3. 3. El procedimiento segun la reivindicacion 2, donde los monomeros de flavanoles se seleccionan de (epi)catequina, (epi)galocatequina y (epi)catequm-3-O-galato
  4. 4. El procedimiento segun la reivindicacion 1, donde las proantocianidinas polimericas son de formula I:
    imagen1
    donde n representa un numero entero entre 11 y 150.
  5. 5. El procedimiento segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, donde las enzimas se seleccionan de proteasas, hemicelulasas y celulasas.
  6. 6. El procedimiento segun la reivindicacion 5, donde las proteasas se seleccionan de proteasas de tipo VIII de Bacillus licheniformis.
  7. 7. El procedimiento segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado por obtenerse a partir material vegetal.
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  8. 8. El procedimiento segun la reivindicacion 7, donde el material vegetal se selecciona de caqui y algarroba.
  9. 9. El procedimiento segun cualquiera de las reivindicaciones 7 u 8, caracterizado por que el material vegetal se trata previamente en medio acuoso que se centrifuga y decanta para obtener un residuo solido que contiene el concentrado de proantocianidinas.
  10. 10. El procedimiento segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, donde el residuo resultante del tratamiento enzimatico se somete a una etapa de secado.
  11. 11. El procedimiento segun la reivindicacion 10, donde el secado se realiza por liofilizacion o secado a vado.
  12. 12. El procedimiento segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, donde el concentrado de proantocianidinas polimericas obtenido se somete a una molienda para obtener un tamano de particula desde nanometros hasta 250 mm.
  13. 13. Concentrado de proantocianidinas polimericas con una concentration en peso de al menos el 90% obtenidas por el procedimiento descrito en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12.
  14. 14. Uso del concentrado de proantocianidinas polimericas tal y como se ha definido en la reivindicacion 13, como complemento alimenticio, ingrediente funcional o producto cosmetico.
  15. 15. Composition farmaceutica que contiene el concentrado de proantocianidinas polimericas tal y como se ha definido en la reivindicacion 13, solo o como parte de una formulation con otros compuestos activos, o a una sal farmaceuticamente aceptable del mismo y uno o mas excipientes farmaceuticamente aceptables.
  16. 16. Uso de la composicion tal y como se han definido en la reivindicacion 15, para la fabrication de un producto farmaceutico para la salud gastrointestinal, incluyendo la inhibition de polipos intestinales y criptas aberrantes como elementos de prevention y tratamiento de cancer de colon.
  17. 17. Uso de la composition tal y como se han definido en la revindication 15, para la fabrication de un preparado farmaceutico para la reduction de factores de riesgo cardiovascular, como colesterol total, LDL, trigliceridos y porcentaje de grasa corporal, entre otros.
    5
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