ES2245610B1 - Producto de origen vegetal y su procedimiento de obtencion. - Google Patents
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Abstract
Producto de origen vegetal y su procedimiento de obtención. Producto de origen vegetal con un alto porcentaje de proantocianidinas de peso molecular superior a 6.000 daltons, de las cuales un porcentaje muy elevado tiene un peso molecular superior a 30.000 daltons, lo que produce un gran efecto hipocolesterolémico a dosis aceptables para el consumo humano y con bajos efectos astrigentes y antinutriclonales. El producto de origen vegetal puede presentarse como medicamento, composición farmacéutica, complemento dietético o preparado alimentario. Se proporciona un procedimiento industrial para su obtención a partir de dicotiledóneas.
Description
Producto de origen vegetal y su procedimiento de
obtención.
Esta invención se relaciona con el campo de la
industria farmacéutica, dietética y alimentaria, y en particular
con productos relacionados con el control de factores de riesgo de
enfermedades cardiovasculares.
El nivel elevado de colesterol en sangre es un
factor de riesgo de las enfermedades cardiovasculares. Diferentes
estudios han demostrado que poblaciones que ingieren dietas altas
en fibra tienen menores cantidades de colesterol y LDL en sangre en
comparación con poblaciones que consumen menos fibra (cfr. M.H.
Davidson et al., J. Am. Coll. Cardiol. 1998, vol. 31
suppl. pp. 1114-5). También son conocidos los
efectos beneficiosos de la fibra en la protección de la integridad
de la barrera intestinal y en la prevención del cáncer de
colon.
No obstante, en la actualidad, la aplicación
terapéutica de los suplementos de fibra dietética que existen en el
mercado es en la práctica muy problemática debido, principalmente,
a que estas fibras naturales son mezclas de sustancias con una
composición química variable y muy heterogénea cuya única propiedad
común es que se trata de una parte de los alimentos no atacable por
los enzimas digestivos humanos. Por este motivo es difícil definir
sus principios activos y cuantificar su dosificación.
Las fibras dietéticas contienen compuestos con
actividad farmacológica aunque de forma mayoritaria contienen
productos de escasa o nula actividad, como celulosas o
hemicelulosas. Un componente minoritario de la fibra dietética son
los polifenoles. El término polifenol engloba un número elevado de
metabolitos secundarios de los vegetales, que estructuralmente se
caracterizan por poseer anillos aromáticos con grupos hidroxilo. En
la planta pueden encontrarse libres o unidos a componentes de la
pared celular. Esta localización junto con su peso molecular,
permite diferenciarlos entre polifenoles solubles e insolubles. Los
polifenoles insolubles tienen un peso molecular mayor y se les
atribuye los efectos beneficiosos sobre la salud antes
indicados.
Sin embargo, los compuestos polifenólicos
insolubles se encuentran en muy pequeña cantidad en la fibra de los
vegetales que habitualmente consumimos y en los suplementos
dietéticos comerciales de fibra. Además, la mayor parte de estos
polifenoles insolubles en estado natural no son utilizables a las
dosis necesarias en un tratamiento crónico de enfermedades
degenerativas porque poseen un fuerte efecto astringente y
antinutricional, al presentar una actividad inhibitoria de los
enzimas digestivos al formar complejos con las proteínas.
Una de las fibras dietéticas con más contenido
en polifenoles es la fibra de algarroba, procedente del fruto del
algarrobo (Ceratonia Siliqua). La primera fibra comercial con un
alto contenido en polifenoles es la que lleva por nombre "carob
fiber", de C.G.A. S.A. (cfr. ES 2.060.543). Otra fibra de
algarroba es la que se describe en el documento de patente ES
2.204.301. Ambas fibras tienen un contenido de polifenoles
aproximadamente del 50% del peso en seco. Estas fibras reducen los
niveles de colesterol en ratas pero la extrapolación a humanos de
las dosis empleadas en los estudios en animales supondrían
cantidades entre 25 y 50 g/día, dosis muy elevadas para su
empleo
terapéutico.
terapéutico.
Se ha intentado aumentar el contenido de
polifenoles insolubles en una fibra dietética. El ejemplo más
destacado es una fibra de algarroba que contiene alrededor de un
90% de polifenoles insolubles que han sido modificados térmicamente
para eliminar sus efectos astringentes y antinutricionales (cfr. ES
2.187.356).
Es deseable proporcionar fibras dietéticas con
un elevado porcentaje de polifenoles insolubles con el fin de
producir un efecto hipocolesterolémico máximo a dosis aceptables
para el consumo humano y con bajos efectos astrigentes y
antinutricionales. También es deseable proporcionar procedimientos
para su obtención que sean viables industrialmente.
En este sentido, la invención proporciona un
nuevo producto con un elevado porcentaje de polifenoles de alto
peso molecular. La invención también proporciona procedimientos
industriales para su obtención.
En un primer aspecto la invención proporciona un
producto de origen vegetal que comprende un porcentaje en peso de
65-97% de proantocianidinas de peso molecular
superior a 6.000 daltons, de las cuales un porcentaje en peso de
más del 50% tiene un peso molecular superior a 30.000 daltons. En
una realización particular de la invención, el porcentaje en peso
de las proantocianidinas de peso molecular superior a 6.000 daltons
es de 90-97%. Más particularmente, el porcentaje en
peso de las proantocianidinas de peso molecular superior a 30.000
daltons respecto a las proantocianidinas de peso molecular superior
a 6.000 daltons es mayor del 60%.
Aunque existen ciertas diferencias, en esta
descripción el término proantocianidina se considera sinónimo al
término tanino condensado, siendo ambos químicamente derivados
polimerizados de flavonoides, principalmente de
flavan-3-ol. Son pues un tipo de
polifenoles de alto peso molecular.
En otra realización particular de la invención y
con el fin de disminuir los posibles efectos astringentes y
antinutricionales, el producto de origen vegetal antes indicado
además comprende un porcentaje en peso de 0-2% de
polifenoles solubles en agua fría, y en particular de
0-1%.
La composición del producto de origen vegetal,
dependiendo de la variedad vegetal utilizada y de las condiciones
específicas del procedimiento de obtención es la siguiente:
- Humedad: 0-10%
- Minerales: 2-10%.
- Proantocianidinas de peso molecular superior a
6000: 65-97% (proantocianidinas de peso molecular
superior a 30.000: más del 50% de las proantocianidinas
anteriores)
- Polifenoles solubles en agua:
0-2%.
- Celulosas y
hemicelulosas:0-5%.
- Lignina: 0-10%.
- Oligosacáridos: 0-5%.
- Proteínas: 0-5%.
El producto de origen vegetal de la presente
invención es un polvo amorfo de color marrón. Es muy poco soluble
en agua y en alcoholes de bajo peso molecular a temperatura
ambiente. La solubilidad aumenta cuando se acerca a la temperatura
de ebullición del disolvente o mezcla de disolventes. Sus
disoluciones dan reacción positiva de polifenoles con reactivo de
Folin-Ciocalteau y precipitación con sales de plomo.
El producto de origen vegetal de la invención es un producto
mayoritariamente no digerible ni absorbible en el tracto
intestinal.
Por la estructura química de las
proantocianidinas presentes en el producto de la invención,
producen una interacción de tipo hidrofóbico con el colesterol y
las sales biliares, que son así eliminados en las heces en forma de
complejo con dichas proantocianidinas. De esta manera se interrumpe
el ciclo enterohepático del colesterol y sales biliares y como
consecuencia disminuye el colesterol en el organismo. Debido al
enriquecimiento en proantocianidinas de alto peso molecular, el
producto de de origen vegetal de la invención produce un efecto
hipocolesterolémico máximo a dosis aceptables para el consumo
humano, utilizables ya en una forma farmacéutica, y con bajos
efectos astrigentes y antinutricionales.
En una realización particular de la invención,
el producto se obtiene a partir de dicotiledóneas. Puede obtenerse
de la planta entera o de partes de ella, incluyendo los frutos en
estado de maduración y de preferencia en estado seco. Las plantas y
sus frutos se recogen en estado de maduración, en general a finales
de verano y se dejan secar a la sombra y a temperatura ambiente y
en condiciones de humedad relativa baja. Ejemplos de variedades
vegetales adecuadas a ser utilizadas en la obtención del producto de
la invención son la alfalfa (Medicago sativa), el cardo
corredor (Eryngium campestre), la corteza de encina
(Quercus ilex), la granada (Punica granatum) y el
quebracho (Aspindosperma quebracho-bianco).
Ejemplos de frutos que pueden utilizarse son el fruto de la
algarroba (Ceratonia siliqua), del nogal (Juglans
regia), la aceituna (Otea europea), el arándano
(Vaccinuium myrtillus), la granada (Punica granatum) y
la manzana (Pyrus malus). Preferiblemente, el producto de la
invención se obtiene a partir de granada o pulpa de algarroba.
En un segundo aspecto, la invención proporciona
un procedimiento de obtención del producto de origen vegetal antes
descrito, que comprende los pasos de: (a) realizar un lavado del
material vegetal triturado con un líquido seleccionado del grupo que
consiste en agua entre temperatura ambiente y 60ºC; una mezcla de
agua y un alcohol C_{1}-C_{3} entre 20:80 y 5:95
(v/v) a temperatura ambiente; y una mezcla de agua y acetona entre
20:80 y 40:60 (v/v) a temperatura ambiente; y separar el sólido y
el líquido resultantes del lavado, repitiendo el proceso a partir
del sólido resultante, tantas veces como sea necesario hasta
conseguir que el líquido de lavado arrastre menos de 50 g de
material por litro de líquido de lavado; (b) realizar una extracción
a partir del sólido obtenido en el paso (a) a presión atmosférica o
presurizada, en condiciones seleccionadas del grupo que consiste en
agua entre 80ºC y su puento de ebullición; un alcohol
C_{1}-C_{3} entre 40ºC y su punto de ebullición;
una mezcla de agua y un glicol entre 80ºC y su punto de ebullición;
dimetilformamida (DMF) entre 80ºC y su punto de ebullición; y
dimetilsulfóxido (DMSO) entre 80-150ºC, y separar el
sólido y el líquido resultantes de la extracción manteniendo una
temperatura superior a 40ºC; (c) enfriar el líquido obtenido en el
paso (b) y recoger el precipitado resultante, opcionalmente
evaporando parte del disolvente antes de enfriar; (d) secar el
precipitado obtenido en el paso (c) hasta un contenido en
disolvente inferior al 10% en peso; (e) someter el producto obtenido
en el paso (d) a 120-180ºC al menos durante 3
minutos; y (f) enfriar el producto obtenido en el paso (e).
Preferiblemente, el material vegetal de partida
para este procedimiento está en forma de pulpa comercial
deshidratada y triturada. En el caso de la algarroba, será
preferible la pulpa sin semillas pero según el fruto o la variedad
vegetal, podrá incluir las semillas. Si se parte de material vegetal
no comercial, antes del procedimiento de extracción debe limpiarse
mediante ducha de agua y secarse en comente de aire. Se tritura el
vegetal seco mediante un paso por un molino de martillos para
trocearlo hasta un tamaño inferior a 3 cm.
El procedimiento de lavado del material vegetal
triturado se realiza en recipientes difusores o en cubas de
agitación con agua entre temperatura ambiente y 60ºC. La proporción
de material vegetal respecto al agua es preferiblemente entre 1:4 y
1:10 (p/p). Como alternativa el lavado se realiza con una mezcla de
agua y un alcohol C_{1}-C_{3}, entre 20:80 y
5:95 (v/v) a temperatura ambiente. El alcohol es preferiblemente
metano) o etanol y más preferiblemente metanol y la proporción de
material vegetal respecto a la mezcla de agua y metanol es de 1:4
(p/p). El lavado también se puede realizar con una mezcla de agua y
acetona entre 20:80 y 40:60 (v/v) a temperatura ambiente. En una
realización particular, la proporción agua:acetona es de 30:70
(v/v) y la proporción de material vegetal respecto a la mezcla de
agua y acetona es entre 1:2 y 1:3 (p/p).
Se separa el sólido y el líquido resultantes del
lavado por centrifugación, filtración o decantación, repitiendo el
proceso a partir del sólido resultante tantas veces como sea
necesario hasta conseguir que el líquido de lavado arrastre menos
de 50 g de material por litro de líquido de lavado, y
preferiblemente menos de 10 g de material por litro de líquido de
lavado.
En el caso de productos vegetales muy ricos en
celulosas conviene, para aumentar el rendimiento de la extracción,
utilizar una operación previa de fermentación. El residuo vegetal,
del que ya se han eliminado los compuestos solubles en agua, se
sumerge en un tanque con agua a una temperatura de 37ºC (entre 1 y
3 kg de agua por kg de residuo húmedo). En este tanque con agua se
añade el residuo, se reequilibra el pH a 5 y se añade una enzima, en
particular, beta-glucosidasa (celulasa), entre 1 y
25 g por kg de residuo húmedo, según la magnitud de la hidrólisis
de celulosas buscada, y se mantiene a 37ºC entre 2 y 4 horas con
agitación. Posteriormente, se decanta o centrifuga el contenido del
baño de hidrólisis, se desecha el sobrenadante donde irán los
azúcares procedentes de la hidrólisis de las celulosas y el residuo
se lava con agua a 50ºC (4 kg de agua por kg de residuo húmedo), se
centrifuga de nuevo y se elimina el sobrenadante.
A partir del sólido obtenido en el paso de
lavado, tanto si se ha utilizado el proceso intermedio de
fermentación como si no es necesario, se realiza una extracción en
recipientes difusores o en cubas de agitación. La extracción se
puede realizar con agua entre 80ºC y su punto de ebullición en
condiciones de presión atmosférica o presurizada. La proporción de
sólido respecto al agua es entre 1:2 y 1:3 (p/p). De manera
alternativa, la extracción se realiza con un alcohol
C_{1}-C_{3} a una temperatura entre 40ºC y su
punto de ebullición, preferiblemente metano) entre entre 40ºC y su
punto de ebullición, y con una proporción sólido:metanol entre 1:4 y
1:6 (p/p). La extracción también se puede realizar con una mezcla
de agua y un glicol, preferiblemente propilenglicol, a una
temperatura entre 80ºC y su punto de ebullición. Por último, la
extracción también se puede realizar con dimetilformamida entre 80ºC
y su punto de ebullición o dimetilsulfóxido entre
80-150ºC. En una realización particular de la
invención, la extracción dura de 1 a 4 horas, y más preferiblemente
de 3 a 4 horas. Se separa el sólido y el líquido resultantes de la
extracción manteniendo una temperatura superior a 40ºC por cualquier
método adecuado como una decantación, una filtración o una
centrifugación.
A continuación se deja enfriar el líquido oscuro
obtenido en el paso anterior, normalmente en tanques de
decantación. El tiempo de reposo puede oscilar entre 4 y 10 horas.
Se forma durante este proceso un precipitado de color marrón oscuro
que corresponde a la fracción del tipo de proantocianidinas
buscadas contenidas en el producto vegetal. En caso de que no se
forme el precipitado conviene concentrar el extracto obtenido por
evaporación del disolvente a baja temperatura y con presión
reducida en condiciones de 50 o 60ºC y 0,8 a 0,9 kg de presión
absoluta. En el caso de utilizar disolventes universales como DMSO,
DMF o glicoles conviene por el contrario diluirlos con agua fría o
con algún alcohol como etanol, propanol, isopropanol o similares,
que permite la precipitación de las proantocianidinas condensadas
poco solubles. Se recoge el precipitado resultante por métodos
habituales como la decantación, filtración o centrifugación.
Se seca el precipitado obtenido en el paso
anterior preferentemente mediante corriente de aire caliente en
bandejas hasta un contenido en disolvente inferior al 10% en peso.
En una realización particular, el precipitado se seca a
80-90ºC. A continuación se somete el producto
obtenido a 120-180ºC al menos durante 3 minutos. De
esta forma, al eliminar previamente el agua, se consigue una
elevación homogénea y regulada de la temperatura del producto y una
polimerización elevada a una temperatura muy alta sin riesgo de
sobrecalentamiento en las zonas deshidratadas que se producen en
tratamientos de polimerización más largos con el producto húmedo.
Así, se consigue elevar el grado de polimerización frente a otros
tipos de tratamiento de desnaturalización.
Finalmente se enfría el producto. Se obtiene así
un producto final con aspecto vítreo, de color marrón, que se rompe
fácilmente. Una vez frío, se muele en molinos de martillos con una
malla inferior a 0,5 mm hasta un tamaño inferior a 180 \mum. Se
pasa por un tamiz de malla de 180 \mum y se recupera el sólido de
color marrón.
Con el procedimiento de la invención se obtiene
entre 1 y 20 g de producto de origen vegetal por kg de vegetal seco
procesado, dependiendo de la variedad agronómica y de las
condiciones de extracción.
En otro aspecto, la invención proporciona una
composición farmacéutica que comprende una cantidad
terapéuticamente efectiva del producto de origen vegetal definido
anteriormente, junto con excipientes farmacéuticamente aceptables.
La invención proporciona también un complemento dietético que
comprende una cantidad efectiva del producto de origen vegetal
definido anteriormente junto con cantidades adecuadas de
excipientes. Asimismo se proporciona un preparado alimentario que
comprende una cantidad nutracéuticamente efectiva del producto de
origen vegetal definido junto con cantidades adecuadas de otros
ingredientes comestibles.
Las formas de presentación más comunes para el
producto farmacéutico y el complemento dietético son suspensiones,
cápsulas, comprimidos, polvos o granulados, pero no se excluyen
otras formas que el experto en la materia encuentre viables para la
administración del producto de la invención. El preparado
alimentario puede estar, sin que se trate de una exclusión, en
forma de galletas o similares, o en forma de pasta para untar.
En un último aspecto, la invención se relaciona
con el uso del producto de origen vegetal para la preparación de un
medicamento, una composición farmacéutica, un complemento dietético
o un preparado alimentario para el tratamiento y/o la prevención de
la hipercolesterolemia y/o las enfermedades cardiovasculares en un
mamífero, incluido un humano.
A lo largo de la descripción y las
reivindicaciones la palabra "comprende" y sus variantes no
pretenden excluir otras características técnicas, aditivos,
componentes o pasos. Para los expertos en la materia, otros objetos,
ventajas y características de la invención se desprenderán en parte
de la descripción y en parte de la práctica de la invención. Los
siguientes ejemplos se proporcionan a modo de ilustración, y no se
pretende que sean limitativos de la presente invención.
Se parte de 1000 kg de pulpa molida del fruto de
granado. El contenido en humedad no debe ser superior al 10% (p/p)
y el tamaño debe ser menor de 3 cm. La pulpa molida de granada se
trata con agua a temperatura ambiente en proporción 1:10 durante 4
horas. Se elimina el agua de lavado con los productos solubilizados
pasándolo por tamiz de 100 \mum y se recoge todo el sólido y se
reúne con el resto de sólidos. Se repite el proceso de lavado
anterior otras dos veces para eliminar las moléculas solubles en
agua. La temperatura del último lavado se eleva hasta 60ºC para
extraer mejor los restos de productos solubles. Conviene tener
cuidado de recuperar todos los sólidos que quedan en el tamiz de
100 \mum. El residuo sólido se trata con una mezcla de
propilenglicol y agua en proporción de 75:25 (v/v) a 95ºC en
depósito con reflujo durante 4 horas para solubilizar las
proantocianidinas. Se filtra o centrifuga el líquido en caliente
(> 80ºC) para obtener una solución marrón oscura que contiene
las proantocianidinas. Se concentra bajo vacío a temperatura del
orden de 60ºC hasta eliminar el agua. El líquido obtenido se deja
enfriar hasta temperatura ambiente (mínimo 24 horas). Se recupera el
precipitado marrón por centrifugación y se obtiene una pasta húmeda
de color marrón. El residuo líquido anterior se diluye con agua
fría con una dilución de 1 volumen de residuo líquido con 9
volúmenes de agua. Se deja reposar durante 24 horas y se recupera
el sólido formado por centrifugación. Se junta con el sólido
obtenido en la etapa anterior. Se extiende la pasta cremosa
obtenida sobre bandejas con un espesor no mayor de 0,5 cm y se deja
en un horno de secado a baja temperatura, no superior a
80-90ºC, hasta reducir la humedad hasta un 10%. Se
eleva la temperatura del horno hasta 150ºC y se mantiene durante 15
min. El producto que se obtiene tiene el aspecto vítreo de color
marrón oscuro. Se muele hasta conseguir un tamaño de partícula
inferior a 170 \mum y se pasa por un tamiz de 100 \mum. El
rendimiento es de 1-4% a partir del fruto molido de
granado.
Se parte de pulpa de algarroba sin semilla
limpia y seca. Se trituran 100 kg de pulpa de algarroba mediante un
paso por un molino de martillos para trocearlo hasta un tamaño
inferior a 3 cm. El producto triturado se introduce en cubas con
agitación, en 400 kg de una mezcla agua: metanol 20:80 (v/v) a
temperatura ambiente durante 2 horas. Se desecha el líquido de
lavado repitiendo el proceso varias veces hasta conseguir una
eliminación de material de menos de 10 g por litro. Posteriormente
se separa la fase sólida por decantación. Con la fase sólida se
repite el tratamiento de difusión a temperatura ambiente con una
mezcla de agua: acetona 30:70 (v/v) (2 kg de agua por kg de residuo
húmedo) durante 3 horas. Posteriormente se separa el líquido
extractivo por filtración y se desecha. El residuo se evapora de
disolvente en estufas de vacío, extendiéndolo en bandejas con un
espesor de entre 1 y 1,5 cm y calentándolo a 45ºC durante 5 horas.
El sólido obtenido se somete a un tratamiento de difusión con
agitación mediante agua (2 kg de agua por kg de residuo húmedo), a
100ºC durante 3 horas. Posteriormente se separa el líquido
extractivo del material insoluble por filtración en caliente y se
desecha el residuo sólido. Este líquido se deja enfriar en tanques
de decantación hasta alcanzar una temperatura comprendida entre 15
y 20ºC, manteniéndolo así durante 6 horas. Se recoge el precipitado
por decantación o centrifugación. La cantidad recogida oscila
dependiendo del estado del fruto entre 0,2 y 2 kg de peso seco. Se
procede a la evaporación del agua del residuo extendiéndolo en
bandejas con un espesor de producto entre 1 y 1,5 cm, por secado en
estufa 12 horas a 0,2 atmósferas de presión y 85ºC, hasta un
contenido en agua inferior al 10%. Por último, cuando el residuo no
contiene más del 10% de agua, se somete el producto desecado a una
temperatura de 180ºC en corriente de aire durante 3 minutos, seguido
de un enfriado a temperatura ambiente. Se obtiene así un producto
que ya frío, se muele en molinos de martillos con una malla
inferior a 0,5 mm hasta un tamaño inferior a 180 \mum. Se pasa
por un tamiz de malla de 180 \mum y se obtiene el producto
terminado.
\newpage
Se estudió la influencia en ratas sobre la
colesterolemia de tres tipos de fibra dietaria y del producto de
origen vegetal de la invención: celulosa microcristalina (CEL)
Avicel®, carob fiber (CF) de la C.G.A. S.A., polifenoles
modificados (PM) según el documento de patente ES 2.187.356 y el
producto de origen vegetal (POV) de la presente invención. Se
incorporaron las fibras a cuatro dietas semisintéticas isocalóricas
ajustadas a las necesidades nutricionales de las ratas. La dieta
base utilizada fue AIN 93-G # 110113 Purified Diet
(Dyets Inc., Pennsylvania), y la única variable fue el tipo de fibra
alimentaria, siempre a una proporción del 5% de la dieta. Se
utilizaron ratas "Wistar" macho, procedentes del Servicio de
Animales del Centro Mixto Departamento de Nutrición y Bromatología
1 y del Instituto de Nutrición CSIC-UCM (Facultad
de Farmacia U.C.M.), seleccionadas de una misma carnada. Se
utilizaron 40 ratas jóvenes a las que se les provocó una
hipercolesterolemia experimental consumiendo durante 15 días, junto
con su dieta de mantenimiento, colesterol 8 g/kg de dieta y bilis
bovina 2 g/kg de dieta, ambos de Farmitalia-Carlo
Erba, Madrid. Durante el período experimental los animales
estuvieron alojados en células individuales de metabolismo. Las
células de metabolismo se mantuvieron en una habitación a 22 \pm
2ºC, con un control automático luz-oscuridad (12:12)
horas y constante recirculación de aire.
Las ratas se dividieron en 4 grupos de 10 ratas
hipercolesterolémicas (colesterol sérico 250 \pm 37 mg/dl) que
consumieron durante otros 20 días las dietas suplementadas con
colesterol, en las mismas condiciones, pero ingiriendo con ellas
cada una de las fibras ensayadas al nivel del 5%. El período
experimental fue de 20 días durante los cuales los animales
estuvieron alimentados "a la par". El colesterol sérico inicial
se determinó extrayendo sangre de la vena de la cola del animal por
punción, previa vasodilatación en un baño a 37ºC. Se recogió la
sangre en un capilar heparinizado y se cuantificó inmediatamente el
colesterol mediante un autoanalizador. El colesterol a los 20 días
se determinó en suero, tras anestesiar a los animales, por
canulación de la vena yugular.
Se encontró (cfr. Tabla 1) que la celulosa no
tuvo efecto en la colesterolemia, sino que el colesterol sérico
siguió aumentando en los animales que la consumieron. Por el
contrario, el resto de las fibras disminuyeron el colesterol
respecto al valor inicial. No obstante, el POV produjo una mayor
reducción en las cifras de colesterol sérico de los animales, por
lo que los polifenoles insolubles del POV tienen un efecto reductor
del colesterol sérico muy superior a la CF, o a los PM, producto que
posee el mayor efecto descrito hasta ahora en una fibra alimentaria
sobre la colesterolemia (cfr. L. Pérez-011eros
et al., J Sci Food Agric 1999, vol. 79, pp.
173-8; H.J. Zunft et al., Adv Ther
2001, vol. 18, pp. 230-6; B.
Ruiz-Roso et al., Schironia, vol. 2,
pp. 5-9). Este efecto parece estar mediado por el
secuestro de sales biliares producidos por los polifenoles
insolubles, con la consecuencia de la rotura del ciclo
enterohepático del colesterol.
La Tabla 1 muestra la evolución de la
colesterolemia de ratas con hipercolesterolemia experimental que
tomaron dietas con celulosa microcristalina (CEL), carob fiber
(CF), polifenoles modificados (PM) y el producto de origen vegetal
de la invención (POV). Una (a) indica que es significativamente
diferente p < 0,05 frente al lote CEL; una (b) indica que es
significativamente diferente p < 0,05 frente a la
hipercolesterolemia basal y, una (c) indica que es
significativamente diferente p < 0,05 frente al lote PM.
Claims (24)
1. Producto de origen vegetal que comprende un
porcentaje en peso de 65-97% de proantocianidinas
de peso molecular superior a 6.000 daltons, de las cuales un
porcentaje en peso de más del 50% tiene un peso molecular superior
a 30.000 daltons.
2. Producto de origen vegetal según la
reivindicación 1, donde el porcentaje en peso de las
proantocianidinas de peso molecular superior a 6.000 daltons es de
90-97%.
3. Producto de origen vegetal según cualquiera
de las reivindicaciones 1-2, donde el porcentaje en
peso de las proantocianidinas de peso molecular superior a 30.000
daltons respecto a las proantocianidinas de peso molecular superior
a 6.000 daltons es mayor del 60%.
4. Producto de origen vegetal según cualquiera
de las reivindicaciones 1-3, que además comprende
un porcentaje en peso de 0-2% de polifenoles
solubles en agua fría.
5. Producto de origen vegetal según la
reivindicación 4, donde el porcentaje en peso de los polifenoles
solubles en agua fría es de 0-1%.
6. Producto de origen vegetal según cualquiera
de las reivindicaciones 1-5, que se obtiene a
partir de dicotiledóneas.
7. Producto de origen vegetal según la
reivindicación 6, que se obtiene a partir de fruto del granado.
8. Producto de origen vegetal según la
reivindicación 6, que se obtiene a partir de la pulpa de la
algarroba.
9. Procedimiento de obtención del producto de
origen vegetal según cualquiera de las reivindicaciones
1-8, que comprende los pasos de:
(a) realizar un lavado del material vegetal
triturado con un líquido seleccionado del grupo que consiste en
agua entre temperatura ambiente y 60ºC; una mezcla de agua y un
alcohol C_{1}-C_{3} entre 20:80 y 5:95 (v/v) a
temperatura ambiente; y una mezcla de agua y acetona entre 20:80 y
40:60 (v/v) a temperatura ambiente; y separar el sólido y el
líquido resultantes del lavado, repitiendo el proceso a partir del
sólido resultante, tantas veces como sea necesario hasta conseguir
que el líquido de lavado arrastre menos de 50 g de material por
litro de líquido de lavado;
(b) realizar una extracción a partir del sólido
obtenido en el paso (a) a presión atmosférica o presurizada, en
condiciones seleccionadas del grupo que consiste en agua entre 80ºC
y su punto de ebullición; un alcohol C_{1}-C_{3}
entre 40ºC y su punto de ebullición; una mezcla de agua y un glicol
entre 80ºC y su punto de ebullición; dimetilformamida entre 80ºC y
su punto de ebullición; y dimetilsulfóxido entre
80-150ºC, y separar el sólido y el líquido
resultantes de la extracción manteniendo una temperatura superior a
40ºC;
(c) enfriar el líquido obtenido en el paso (b) y
recoger el precipitado resultante, opcionalmente evaporando parte
del disolvente antes de enfriar;
(d) secar el precipitado obtenido en el paso (c)
hasta un contenido de disolvente inferior al 10% en peso;
(e) someter el producto obtenido en el paso (d)
a 120-180ºC al menos durante 3 minutos; y
(f) enfriar el producto obtenido en el paso
(e).
10. Procedimiento según la reivindicación 9,
donde en el paso (a) el líquido seleccionado es agua entre
temperatura ambiente y 60ºC y la proporción de material vegetal
respecto al agua es entre 1:4 y 1:10 (p/p).
11. Procedimiento según la reivindicación 9,
donde en el paso (a) el líquido seleccionado es una mezcla de agua
y metanol entre 20:80 y 5:95 (v/v) a temperatura ambiente y la
proporción de material vegetal respecto a la mezcla de agua y
metanol es de 1:4 (p/p).
12. Procedimiento según la reivindicación 9,
donde en el paso (a) el líquido seleccionado es una mezcla de agua
y acetona 30:70 (v/v) a temperatura ambiente y la proporción de
material vegetal respecto a la mezcla de agua y acetona es entre
1:2 y 1:3 (p/p).
13. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 9-12, donde en el paso (b) el
líquido seleccionado es agua a una temperatura entre 80ºC y su
punto de ebullición y la proporción de sólido obtenido en el paso
(a) respecto al agua añadida es entre 1:2 y 1:3 (p/p).
14. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 9-12, donde en el paso (b) el
líquido seleccionado es metano) entre 40ºC y su punto de ebullición
y la proporción de sólido obtenido en el paso (a) respecto al
líquido es entre 1:4 y 1:6 (p/p).
15. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 9-14, donde en el paso (b) la
extracción dura de 1 a 4 horas.
16. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 9-15, donde en el paso (d) el
precipitado se seca a 80-90ºC.
17. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 9-16, donde entre el paso (a) y el
paso (b) se realiza una fermentación del material.
18. Composición farmacéutica que comprende una
cantidad terapéuticamente efectiva del producto de origen vegetal
definido en cualquiera de las reivindicaciones 1-8,
junto con excipientes farmacéuticamente aceptables.
19. Complemento dietético que comprende el
producto de origen vegetal definido en cualquiera de las
reivindicaciones 1-8, junto con cantidades
adecuadas de excipientes.
20. Preparado alimentario que comprende una
cantidad nutracéuticamente efectiva del producto de origen vegetal
definido en cualquiera de las reivindicaciones 1-8,
junto con cantidades adecuadas de otros ingredientes
comestibles.
21. Uso del producto de origen vegetal definido
en cualquiera de las reivindicaciones 1-8, para la
preparación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención
de la hipercolesterolemia y/o las enfermedades cardiovasculares en
un mamífero, incluido un humano.
22. Uso del producto de origen vegetal definido
en cualquiera de las reivindicaciones 1-8, para la
preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento y/o
la prevención de la hipercolesterolemia y/o las enfermedades
cardiovasculares en un mamífero, incluido un humano.
23. Uso del producto de origen vegetal definido
en cualquiera de las reivindicaciones 1-8, para la
preparación de un complemento dietético para el para el tratamiento
y/o la prevención de la hipercolesterolemia y/o las enfermedades
cardiovasculares en un mamífero, incluido un humano.
24. Uso del producto de origen vegetal definido
en cualquiera de las reivindicaciones 1-8, para la
preparación de un preparado alimentario para el para el tratamiento
y/o la prevención de la hipercolesterolemia y/o las enfermedades
cardiovasculares en un mamífero, incluido un humano.
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