ES2602227T3 - Procedimiento para la preparación de estetrol - Google Patents

Abstract

Procedimiento para la preparación de estra-1,3,5(10) trien-3,15α, 16α, 17ß-tetraol I, que comprende las etapas de:**Fórmula** (1) conversión de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y B es -Si(R2)3; (2) conversión de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV, donde A es un grupo protector; (3) reducción del grupo 17-ceto de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV para formar 3-A-oxi-estra- 1,3,5(10),15-tetraen-17ß-ol V, donde A es un grupo protector; (4) protección del grupo 17-OH de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10)15-tetraen-17ß-ol V para formar 3-A-oxi-17-C-oxiestra- 1,3,5(10),15-tetraeno VI, donde A y C son grupos protectores; (5) oxidación del doble enlace carbono-carbono del anillo D de 3-A-oxi-17-C-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraeno VI para formar estetrol protegido VII, donde A y C son grupos protectores; y (6) eliminación de los grupos protectores A y C para formar estetrol I; donde: A es un grupo protector seleccionado del grupo constituido por un grupo alquilo C1-C5, un grupo bencílico C7- C12 y un grupo -Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12; B es -Si(R2)3, donde R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C6 y un grupo arilo C6-C12; donde alquilo incluye también ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, metilciclobutilo y ciclohexilo; y C es un grupo protector seleccionado del grupo constituido por grupos protectores monofuncionales que son adecuados para la protección de un grupo hidroxilo alifático; y donde la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de una especie de yodo (V); o donde la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de un compuesto de metal de transición, y donde el compuesto de metal de transición está presente en una cantidad de 0,1% en moles a 50% en moles con respecto al compuesto III.

Description

5

10

15

20

25

DESCRIPCION

Procedimiento para la preparacion de estetrol Campo tecnico de la invencion

La presente invencion se refiere a un procedimiento para la preparacion de estra-1,3,5(10)-trien-3,15a,16a,17p- tetraol (estetrol), a partir de estrona. La invencion se refiere ademas a un procedimiento para la preparacion de 3-A- oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona, a partir de estrona, a traves del correspondiente sililenoleter 17-B-oxi-3-A-oxi- estra-1,3,5(10),16-tetraeno, en el que A es un grupo protector y B es -Si(R2)3.

Antecedentes de la invencion

Las sustancias estrogenicas son comunmente usadas en metodos de Terapia de Reemplazo Hormonal (HRT, por sus siglas en ingles) y metodos para la anticoncepcion femenina. Estas sustancias estrogenicas se pueden dividir en estrogenos naturales y estrogenos sinteticos. Ejemplos de estrogenos naturales que han encontrado aplicacion farmaceutica incluyen estradiol, estrona, estriol y estrogenos equinos conjugados. Ejemplos de estrogenos sinteticos, que ofrecen la ventaja de una alta biodisponibilidad oral, incluyen etinilestradiol y mestranol.

El estetrol ha resultado ser eficaz como sustancia estrogenica para uso en terapia de reemplazo hormonal, segun se describe en el documento WO 02/094276. El estetrol es un estrogeno biogenico producido de manera endogena por el hfgado fetal durante el embarazo humano. Otras importantes aplicaciones del estetrol estan en los campos de la anticoncepcion, la terapia de enfermedades autoinmunes, la prevencion y la terapia de tumores de mama y de colon, la estimulacion de la libido, el cuidado de la piel y la cicatrizacion de heridas segun se describe en los documentos WO 02/094276, WO 02/094279, WO 02/094278, WO 02/094275, WO 03/041718 y WO 03/018026.

La formula estructural del estetrol [estra-1,3,5(10)-trien-3,15a,16a,17p-tetraol] se muestra a continuation. En esta description se aplican las recomendaciones de la IUPAC para nombrar los anillos y numerar los atomos de esteroides y derivados de esteroides, como se muestra a continuacion.

imagen1

La sfntesis de estetrol a escala de laboratorio se describe, por ejemplo en Fishman et al., J. Org. Chem. 1968, 33, 3133- 3135, en donde se sintetiza estetrol a partir de un derivado de estrona III como se muestra en el Esquema 1 (numeration de acuerdo a Fishman et al.).

imagen2

Fishman et al. preparo derivado de estrona III de acuerdo con el procedimiento descrito por Cantrall et al., J. Org. Chem. 1964, 29, 214 - 217 y Johnson et al, J. Am. Chem. Soc. 1957, 79, 2005 - 2009, segun describe en detalle a 5 continuacion. El rendimiento global del proceso de 3 etapas que se muestra en el Esquema 1, a partir de derivado de estrona III, es de alrededor del 7%.

Otra sintesis de estetrol en el que la estrona es el material de partida se describe en Nambara et al., Steroids 1976, 27, 111 - 121. Esta sintesis se muestra en el Esquema 2 (numeracion de acuerdo con Nambara et al.). El grupo carbonilo de estrona I se protege primero mediante tratamiento con etilenglicol e hidrocloruro de piridina seguido por 10 la acetilacion del grupo hidroxilo en C3. La siguiente secuencia de pasos conlleva una bromacion/deshidrobromacion catalizada por base que da como resultado la formacion de 17,17-etilendioxiestra-1,3,5(10),15-tetraeno-3-ol (compuesto IVa). Este compuesto IVa fue posteriormente acetilado, lo que produjo 17,17-etilendioxiestra- 1,3,5(10),15-tetraeno-3-ol-3-acetato (compuesto IVb). En un siguiente paso, el grupo dioxolano del compuesto IVb se hidrolizo mediante el uso de acido sulfonico p-tolueno para el compuesto Vb, seguido posteriormente por 15 reduccion del grupo carbonilo en C17 (compuesto Vc) y la oxidacion del doble enlace de anillo D formando de este modo estra-1,3,5 (10) trieno 3,15a, 16a, 17p-tetraol-3,17-diacetato (compuesto VIb).

imagen3

Suzuki et al, Steroids 1995, 60, 277 - 284 tambien divulga la sintesis de estetrol mediante el uso de compuesto Vb de Nambara et al. como material de partida. El grupo carbonilo en C17 de este compuesto fue primero reducido, 5 seguido por acetilacion produciendo estra-1,3,5(10),15-tetraeno-3,17-diol-3,17-diacetato (compuesto 2b). Este ultimo fue sometido a oxidacion con OsO4, lo que proporciono estra-1,3,5(10)-trieno-3,15a,16a,17p-tetraol-3,17-diacetato (compuesto 3b) con un rendimiento del 46%.

De acuerdo con Nambara et al. y Suzuki et al., la sintesis de estetrol se puede realizar con un rendimiento de aproximadamente el 8%, a partir de estrona.

10 La sintesis del derivado de estrona VI a partir de estrona se da a conocer por Cantrall et al., J. Org. Chem. 1964, 29, 214-217 y 64-68, y por Johnson et al., J. Am. Chem. Soc. 1957, 79 20O5 - 2009 y se muestra en el Esquema 3 (numeracion de acuerdo con Johnson et al.).

imagen4

Esquema 3

5 La via de sintesis representada en el Esquema 3 tambien fue aplicada por Poirier et al, Tetrahedron 1991,47, 7751 - 7766 para la sintesis de un analogo del compuesto VI en el que un eter bencilico esta presente en la posicion 3 en lugar del eter de metilo en VI.

Otro metodo para preparar derivado de estrona VI del Esquema 3, en el que el grupo hidroxilo en la posicion 3 de 10 estrona esta protegido como eter de metilo, se describe en Li et al, Steroids 2010, 75, 859 - 869, y se muestra en el Esquema 4 (numeracion de acuerdo con Li et al.). Despues de la proteccion del grupo 3-OH de estrona 39 como el eter de metilo para formar 40, la funcion ceto en C17 se convierte en trimetilsilil enol eter 41. El compuesto 41 se convierte entonces en 42 (que corresponde a derivado de estrona VI del Esquema 3) en presencia de 1 equivalente de acetato de paladio (II), Pd(OAc)2. De acuerdo con Li et al. 42 se obtiene en tres etapas con un rendimiento de 15 aproximadamente el 60%, a partir de estrona.

5

10

15

20

25

imagen5

Esquema 4

El metodo mostrado en el Esquema 4 para la preparacion de 42 en presencia de 1 equivalente de Pd(OAc)2 tambien se describe en Smith et al., Org. Lett. 2006, 8, 2167 - 2170, Smith et al., J Org. Chem. 2007, 72, 4611 - 4620 y Bull et al., J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1,2000, 1003-1013.

Dicho metodo no se aplica en una sintesis total de estetrol I.

Con el fin de obtener una alta conversion y un rendimiento aceptable de 42, es necesario utilizar un equivalente de Pd(OAc)2, con respecto a 41. Debido al alto coste del paladio, la aplicacion de este metodo no es deseable por lo tanto para un proceso que se ejecute a escala industrial.

Un metodo para la preparacion de enonas utilizando especies de yodo hipervalente (V) es descrito por Nicolaou et al., Angew. Chem. 2002, 114, 1038 - 1042. Varias cetonas se convierten en a,p-enonas insaturadas a traves de la oxidacion de los correspondientes trimetilsilil enol eteres, inducidos por acido o-yodoxibenzoico (IBX) o IBX complejado a un ligando de N-oxido tal como 4-metoxipiridina-N-oxido (IBX • MPO).

Uno de los ejemplos con una molecula mas compleja que ha sido descrito por Nicolaou et al. es la conversion de derivado de esteroide 27 en a,p-insaturados 28 con un rendimiento del 62% (Esquema 5, numeracion de acuerdo con Nicolaou et al.)

imagen6

Esquema 5

El metodo descrito por Nicolaou et al. no se emplea en la preparacion de derivados de estrona tales como el

6

5

10

15

20

25

30

35

compuesto III del Esquema 1, el compuesto Vb del Esquema 2, el compuesto VI del Esquema 3 o el compuesto 42 del Esquema 4, ni en la preparacion de estetrol I.

Otras especies de yodo (V), acido 2-yodoxibencenosulfonico (IBS) fueron divulgadas recientemente en el documento EP 2085373 y en Yamada et al., Spec. Chem. Mag. 2011, 31, 18 - 20. La estructura de IBX e IBS se muestra a continuacion.

imagen7

Yamada et al. describe el uso de IBS, en una cantidad catalitica, para la conversion de varios alcoholes ciclicos con una estructura relativamente simple, como ciclopentanol y ciclohexanol (opcionalmente sustituido) en enonas a,p- insaturadas.

El uso de IBS para la conversion de moleculas complejas, tales como esteroides, en derivados de enona a,p- insaturados no se describe en Yamada et al. ni en EP 2085373.

Un procedimiento para la preparacion de estetrol que es adecuado para la preparacion de estetrol a escala industrial se da a conocer en el documento WO 2004/041839. Este proceso se muestra en el Esquema 6 (numeracion de acuerdo con el documento WO 2004/041839), y comprende las siguientes etapas:

(1) conversion de estrona (7) en 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (6), donde A es un grupo protector;

(2) reduccion del grupo 17-ceto de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (6) a 3-A-oxi-estra- 1,3,5(10),15tetraen-17p-ol (5);

(3) proteccion del grupo 17-OH de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17p-ol (5) a 3-A-oxi-17-C-oxi- estra-1,3,5(10),15-tetraeno (4), en el que C es un grupo protector;

(4) oxidacion del doble enlace carbono-carbono del anillo D de 3-A-oxi-17-C-oxi-estra-1,3,5(10),15- tetraeno (4) a estetrol protegido (3); y

(5) eliminacion de los grupos protectores, donde preferiblemente el grupo protector A se elimina en primer lugar para formar estetrol protegido 17-OC (2) y, posteriormente se elimina el grupo protector C para formar estetrol (1);

donde el grupo protector A se selecciona de un grupo alquilo en C1-C5 o un grupo bencilico en C7-C12 y el grupo protector C se selecciona de entre grupos protectores monofucionales de hidroxilo alifatico.

5

10

15

20

imagen8

La etapa (1) de este proceso, la preparacion de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (6) a partir de estrona (7), se muestra en el Esquema 7 y comprende las siguientes etapas:

(la) conversion del grupo 3-OH de estrona (7) en un grupo 3-AO para formar 3-A-oxi-estra-1,3,5(10)-trien- 17-ona (8);

(lb) conversion del grupo 17-ceto de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10)-trien-17-ona (8) en un grupo ceto protegido para formar 3-A-oxi-17-D-estra-1,3,5(10)-trieno (9);

(lc) halogenacion de C16 de 3-A-oxi-17-D-estra-1,3,5(10)-trieno (9) para formar 3-A-oxi-16-X-17-D-estra- 1,3,5(10)-trieno (10) en donde X es un atomo de halogeno seleccionado de entre el grupo de cloruro, bromuro y yoduro y donde X es preferiblemente bromuro;

(ld) deshalogenacion de 3-A-oxi-16-X-17-D-estra-1,3,5(10)-trieno (10) a 3-A-oxi-17-D-estra-1,3,5(10),15- tetraeno (11); y

(le) desproteccion del grupo ceto protegido de 3-A-oxi-17-D-estra-1,3,5(10),15-tetraeno (11) para formar 3- A-oxyestra-1,3,5 (10), 15-tetraen-17-ona (6),

donde A se selecciona de un grupo alquilo C1-C5, preferiblemente un grupo metilo, o un grupo bencflico C7-C12, preferiblemente un grupo bencilo, y donde D es etilendioxi.

5

10

15

20

25

30

35

imagen9

Con el metodo segun se describe en el documento WO 2004/041839 y mostrado en los Esquemas 6 y 7 anteriores, se obtiene estetrol con un rendimiento global de 10,8% a partir de estrona.

Aunque el procedimiento descrito en el documento WO 2004/041839 es adecuado para una preparacion a escala industrial de estetrol 1, y aunque se obtiene estetrol con un rendimiento global razonable, el proceso todavia adolece de varias desventajas. Por ejemplo, la conversion de 7 en 6 se lleva a cabo en un total de 5 etapas. El aislamiento y la purificacion de cada producto intermediario resultan inevitablemente en una perdida de rendimiento, lo que reduce el rendimiento global del estetrol. Por otra parte, la conversion de 7 en 6 conlleva una halogenacion (etapa 1 c) y una etapa de deshalogenacion (etapa 1d), tipicamente una etapa de bromacion y una etapa de desbromacion. En particular, durante dichas reacciones de halogenacion y deshalogenacion, se producen varios productos secundarios. Ya que estos productos secundarios deben ser eliminados de los productos intermedios, se requiere una gran cantidad de purificacion de los productos intermedios, lo que resulta en una perdida sustancial de rendimiento de los productos intermedios, y por lo tanto, en ultima instancia, una perdida sustancial del rendimiento global del estetrol.

Es un objeto de la presente invencion proporcionar un procedimiento para la preparacion de estetrol que sea adecuado para la produccion de estetrol a escala industrial, en el que se obtenga preferiblemente estetrol con una alta pureza y con un buen rendimiento. Ademas, existe la necesidad de un procedimiento para la preparacion de estetrol en el que la formacion de productos secundarios sea minima, es decir, tan baja como sea posible. En particular, existe la necesidad de un procedimiento para la preparacion de estetrol en el que se omitan las reacciones de halogenacion y posterior deshalogenacion del procedimiento segun se describe en el documento WO 2004/041839.

Resumen de la invencion

La presente invencion se refiere a un procedimiento para la preparacion de estra-1,3,5(10)-trien-3,15a,16a,17p- tetraol I que comprende las etapas de: 1 2 3 4 5

(1) conversion de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y B es -Si(R2)3;

(2) conversion de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10), 16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen- 17-ona IV, donde A es un grupo protector;

(3) reduccion del grupo 17-ceto de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV para formar 3-A-oxi-estra- 1,3,5(10),15-tetraen-17p-ol V, donde A es un grupo protector;

(4) proteccion del grupo 17-OH de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17p-ol V para formar 3-A-oxi-17-C- oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraeno (VI), donde A y C son grupos protectores;

(5) oxidacion del doble enlace carbono-carbono del anillo D de 3-A-oxi-17-C-oxi-estra-1,3,5(10),15- tetraeno (VI) para formar estetrol protegido VII, donde A y C son grupos protectores; y

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

(6) eliminacion de los grupos protectores A y C para formar estetrol I;

donde:

A es un grupo protector seleccionado del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C5, un grupo bencflico C7-C12 y un grupo -Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12;

B es -Si(R2)3, donde R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12; y

C es un grupo protector seleccionado del grupo que consiste en grupos protectores monofuncionales de hidroxilo alifatico y donde la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de especies de yodo (V); o donde la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de un compuesto de metal de transicion, y en el que el compuesto de metal de transicion esta presente en una cantidad de 0,1% moles a 50% moles con respecto al compuesto II.

Este procedimiento se muestra a continuacion en el Esquema 8.

La invencion se refiere ademas a un procedimiento para la sfntesis de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV, donde A es un grupo protector, el cual comprende las etapas de:

(1) conversion de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y B es -Si(R2)3; y

(2) conversion de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17- ona IV, donde A es un grupo protector, donde dicha conversion de III en IV se lleva a cabo en presencia de una especie de yodo (V) y donde la especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de aproximadamente 0,1% moles o mas con respecto al compuesto III;

donde:

A es un grupo protector seleccionado del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C5, un grupo bencflico C7-C12 y un grupo -Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste de un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12; y

B es -Si(R2)3, donde R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12.

Este procedimiento se muestra a continuacion en el Esquema 11.

Descripcion detallada de la invencion

El verbo “comprender” y sus conjugaciones tal y como se utiliza en esta descripcion y en las reivindicaciones, en sentido no limitativo, significa que los artfculos siguientes a la palabra se incluyen, pero sin que esten excluidos los artfculos que no se mencionan especfficamente.

Ademas, la referencia a un elemento por el artfculo indefinido “un” o “una” no excluye la posibilidad de que mas de uno de los elementos este presente, a menos que el contexto requiera claramente que exista uno y solo uno de los elementos. Por tanto, el artfculo indefinido “un” o “una” significa generalmente “al menos uno” o “al menos una”.

En esta solicitud de patente, el termino “alquilo” incluye grupos alquilo lineales, ramificados y cfclicos, tales como, por ejemplo, metilo, etilo, n-propilo, /-propilo, ciclopropilo, n-butilo, s-butilo, t-butilo, ciclobutilo, n-pentilo, s-pentilo, t- pentilo, ciclopentilo, metilciclobutilo y ciclohexilo.

Un grupo bencilo se define como un grupo -CH2(C6H5).

Un grupo bencflico C7 - C12 se define como un grupo bencilo, es decir, un grupo -CH2(C6H5) como se define anteriormente, o un grupo bencilo sustituido por uno o mas sustituyentes en la posicion orto, meta y/o para del nucleo aromatico, donde los sustituyentes son grupos alifaticos opcionalmente sustituidos por uno o mas heteroatomos y/o atomos de halogeno que no interfieren negativamente en el proceso de srntesis. Ejemplos de un grupo bencilo sustituido incluyen -CH2(C6H4Me) o -CH2(C6H3Me2), donde Me se define como un grupo metilo (-CH3).

Un grupo arilo C6 - C12 se define como una estructura monocfclica, bicfclica o policfclica que comprende de 6 a 12 atomos de carbono. Opcionalmente, los grupos arilo pueden estar sustituidos por uno o mas sustituyentes en la posicion orto, meta y/o para del nucleo aromatico, donde los sustituyentes son grupos alifaticos, opcionalmente sustituidos por uno o mas heteroatomos y/o atomos de halogeno que no interfieran negativamente en el proceso sintetico. Ejemplos de un grupo arilo incluyen fenilo, p-tolilo, mesitilo y naftilo.

Como es evidente para un experto en la tecnica, los grupos bencflico y alquilo y los grupos -Si(R1)3 se utilizan como grupo protector y, por tanto, estos grupos deben ser relativamente faciles de anadir y de eliminar en condiciones que

5

10

15

20

25

30

35

no tengan sustancialmente ningun efecto adverso en la estructura molecular de las moleculas de esteroides derivadas de estrona.

La presente invencion se refiere a un procedimiento para la preparacion de estra-1,3,5(10)trien-3,15a,16a,17p- tetraol I (estetrol), que comprende las etapas de:

(1) conversion de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y B es -Si(R2)3;

(2) conversion de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17- ona IV, donde A es un grupo protector;

(3) reduccion del grupo 17-ceto de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV para formar 3-A-oxi-estra- 1,3,5(10),15-tetraen-17p-ol V, donde A es un grupo protector;

(4) proteccion del grupo 17-OH de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17p-ol V para formar 3-A-oxi-17-C-oxi- estra-1,3,5(10),15-tetraeno VI, donde A y C son grupos protectores;

(5) oxidacion del doble enlace carbono-carbono del anillo D de 3-A-oxi-17-C-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraeno VI para formar estetrol protegido VII, donde A y C son grupos protectores; y

(6) eliminacion de los grupos protectores A y C para formar estetrol I;

donde A es un grupo protector seleccionado del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C5, un grupo bencilico C7-C12 y un grupo -Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12; B es -Si(R2)3, donde R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12; y C es un grupo protector seleccionado del grupo que consiste en grupos protectores monofuncionales de hidroxilo alifatico, es decir, un grupo protector monofuncional que es adecuado para la proteccion de un grupo hidroxilo alifatico. El procedimiento de acuerdo con la invencion se representa en el Esquema 8.

imagen10

Etapa (1): Conversion de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y B es -Si(R2)3

La etapa 1 del proceso comprende las etapas de (1a) proteccion del grupo hidroxilo en la posicion 3 de estrona II con un grupo protector A, y (1b) conversion de la funcionalidad ceto en la posicion 17 en el correspondiente sililenoleter.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

En una realizacion preferida, la etapa (1a) se ejecuta primero, seguida de la etapa (1b), en otras palabras, el grupo 3-hidroxilo de estrona II se protege primero con un grupo protector A, seguido de la conversion de la estrona 3 protegida asi obtenida en el correspondiente sililenoleter 3 protegido III, segun se muestra en el Esquema 9. Alternativamente, y mas preferiblemente, la etapa (1a) y (1b) pueden ser ejecutadas simultaneamente, o en un procedimiento de “dos-reacciones-un-solo-recipiente”

!»

imagen11

imagen12

etapa

etapa

II

III

Esquema 9

Etapa (1a): Proteccion del grupo 3-OH

La etapa (1a) se refiere a la proteccion del grupo 3-hidroxilo de estrona II con un grupo protector A. El grupo protector A se selecciona del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C5, un grupo bencilico C7-C12 y un grupo - Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12.

Cuando el grupo protector A es un grupo alquilo C1-C5, A puede ser por ejemplo metilo, etilo, propilo, iso-propilo (i- propilo), butilo, iso-butilo (i-butilo) o terbutilo (t- butilo). Preferiblemente, si A es un grupo alquilo C1-C5, A es metilo.

Cuando A es un grupo bencilico C7-C12, se prefiere que A sea un grupo bencilo,-CH2(C6H5). Sin embargo, el grupo bencilico C7-C12 tambien puede ser un grupo bencilo sustituido, tal como, por ejemplo -CH2(C6H3Me2). Mas preferiblemente, A es un grupo bencilo.

Cuando A es un grupo -Si(R1)3,cada grupo R1 se selecciona independientemente, en otras palabras, cada uno de los tres grupos R1 dentro de un grupo - Si(R1)3 puede ser diferente de los demas. Preferiblemente, R1 se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, propilo, i-propilo, butilo, i-butilo, t-butilo, fenilo, p-tolilo y mesitilo. Ejemplos de grupos -Si(R1)3 adecuados incluyen trimetilsililo (TMS), trietilsililo (TES), dietilisopropilsililo (DEIPS), isopropildimetilsililo (IPDMS), triisopropilsililo (TIPS), t-butildimetilsililo (TbDmS) y t-butildifenilsililo (TBDPS) . Preferiblemente, cuando A es un grupo -Si(R1)3, el grupo -Si(R1)3 es un grupo -Si(R1)3 estericamente impedido (“voluminoso”), tal como por ejemplo un grupo DElPS , IpDmS, TIPS, TBDMS o TbDPS.

La proteccion del grupo hidroxilo en C3 por alquilacion se lleva a cabo generalmente haciendo reaccionar estrona con un componente seleccionado de un reactivo de alquilacion, preferentemente un halogenuro de alquilo C1-C5, preferiblemente un halogenuro de metilo, o un halogenuro bencilico C7-C12, preferiblemente bencil halogenuro. Preferiblemente, el atomo de halogeno del agente alquilante es bromuro, cloruro o yoduro, mas preferiblemente bromuro o yoduro. Segun la presente invencion, el agente alquilante mas preferido es bromuro de bencilo o yoduro de metilo, siendo mas preferido el bromuro de bencilo que el yoduro de metilo. Sin embargo, tambien es posible utilizar un sulfato de dialquilo en lugar de un halogenuro de alquilo C1-C5, en el que los grupos alquilo contienen de 1 a 5 atomos de carbono y en el que los grupos alquilo son preferiblemente metilo (es decir, el sulfato de dialquilo preferido es, pues, dimetil sulfato).

La proteccion del grupo 3-OH por sililacion se lleva a cabo generalmente mediante la reaccion de estrona con un reactivo de sililacion, tal como por ejemplo un cloruro de sililo, un yoduro de sililo o un triflato de sililo, en presencia de una base, por ejemplo una base de amina.

La proteccion del grupo 3-OH se ejecuta normalmente en presencia de una base. Las bases adecuadas son conocidas por un experto en la tecnica, e incluyen, por ejemplo, bases de potasio tales como carbonato de potasio (K2CO3), t-butoxido de potasio (KOfBu), hexametildisilazida de potasio (KHMDS) o hidruro de potasio (KH), bases de sodio, tales como metoxido de sodio (NaOMe), t-butoxido de sodio (NaOfBu), hexametildisilazida de sodio (NaHMDS) o hidruro de sodio (NaH), bases de litio, tales como diisopropilamida de litio (LDA), tetrametilpiperidida de litio (LiTMP) o hexametildisilazida de litio (LiHMDS), bases de amina tales como trietilamina (Et3N), tetrametiletilendiamina (TMEDA), 1,8-diazabiciclo [5.4.0] undec-7-eno (DBU), 1,5-diazabiciclo [4.3.0] non-5-eno (DBN), imidazol y 2,6-lutidina, y similares.

Como sera evidente para un experto en la tecnica, el tipo de base que se prefiere en una reaccion especifica depende en gran medida del tipo de reactivo de alquilacion o sililacion utilizado en dicha reaccion. Cuando por

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

ejemplo el grupo 3-OH esta protegido por medio de una reaccion de alquilacion, por ejemplo, con bromuro de bencilo como reactivo de alquilacion, entonces el uso de una base de amina en esa reaccion es menos preferido. Cuando el grupo 3-OH esta protegido por medio de una reaccion de sililacion, entonces el uso de un pequeno alcoxido, tal como por ejemplo NaOMe, como base es menos preferido.

Disolventes adecuados para la reaccion de proteccion son conocidos por una persona experta en la tecnica, e incluyen, por ejemplo dimetilformamida (DMF), diclorometano (DCM), acetato de etilo (EtOAc), tolueno, acetonitrilo (MeCN), sulfoxido de dimetilo (DMSO), dimetilacetamida, carbonato de dimetilo (DMC), tetrahidrofurano (THF) y otros eteres, tales como por ejemplo 1,4-dioxano, 2-metiltetrahidrofurano (2-MeTHF), eter metil terbutilico (MTBE), 1,2-dimetoxietano (DME) y ciclopentil metil eter, mezclas de dos o mas de estos disolventes, y mezclas de estos disolventes con diferentes disolventes, tales como por ejemplo metanol (MeOH).

La reaccion puede ser ejecutada a temperatura ambiente, a una temperatura elevada (por ejemplo, reflujo), o a baja temperatura.

Como sera evidente para un experto en la tecnica, las condiciones de reaccion preferidas, tales como el disolvente y la temperatura de reaccion dependen en gran medida de la naturaleza de la reaccion especifica, en particular, del reactivo de alquilacion o sililacion y/o del tipo de base utilizada en dicha reaccion. Cuando se utiliza, por ejemplo, bromuro de bencilo como reactivo de alquilacion, K2CO3 puede ser utilizada como base y la reaccion puede ser ejecutada en una mezcla de DCM y MeOH (por ejemplo, una mezcla 1:1) a temperatura elevada (reflujo). Alternativamente, tambien con bromuro de bencilo como reactivo de alquilacion, NaOMe se puede utilizar como base y la reaccion se puede realizar en una mezcla de 2-metiltetrahidrofurano y metanol a una temperatura elevada de alrededor de 60 0C. Cuando el yoduro de metilo se utiliza como reactivo de alquilacion, por ejemplo puede utilizarse como base K2CO3 y la reaccion puede llevarse a cabo en DMF, manteniendo la temperatura en alrededor de 20 0C.

No es necesaria una gran purificacion del producto de la etapa (1a), el derivado de estrona 3-protegida obtenido, antes de la etapa de conversion (1b). En una realizacion preferida, el derivado crudo de estrona 3-protegida, es decir, el derivado de estrona 3-protegida que no se ha sometido a una purificacion extensa, se utiliza como material de partida para la conversion en sililenoleter 3-protegido III.

Como se ha descrito anteriormente, en una realizacion preferida, las etapas (1a) y (1b) pueden ser ejecutadas de forma simultanea o en un procedimiento “dos- reacciones-un-solo-recipiente”, por ejemplo, por reaccion de estrona II con al menos dos equivalentes de una base seguida de la reaccion con al menos dos equivalentes de reactivo de sililacion (tales como por ejemplo cloruro de trimetilsililo o cloruro de trietilsililo) con el fin de introducir A y B, o, alternativamente, por reaccion de estrona II con al menos dos equivalentes de una base (tal como por ejemplo LDA), seguida de reaccion con un equivalente de un agente de sililacion (tal como por ejemplo cloruro de trimetilsililo) a fin de introducir B, seguida de reaccion con un equivalente de agente de alquilacion (como por ejemplo bromuro de bencilo) con el fin de introducir A.

Etapa (1b): Conversion del grupo 17-ceto

La etapa (1b) se refiere a la conversion de la funcionalidad ceto en C17 en el correspondiente sililenoleter para formar el 3-protegido 17-sililenoleter 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3, 5(10),16-tetraeno III.

B es un grupo -Si(R2)3, en donde cada R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12. Como se ha explicado anteriormente para -Si(R1)3, cada grupo R2 en -Si(R2)3 se selecciona independientemente, en otras palabras, cada uno de los tres grupos R2 dentro de un grupo - Si(R2)3 puede ser diferente de los demas. Preferiblemente, R2 se selecciona del grupo que consiste en metilo, etilo, propilo, i-propilo, butilo, i-butilo, t-butilo, fenilo, p-tolilo y mesitilo. Mas preferiblemente, B es un grupo trimetilsililo (TMS) o un grupo trietilsililo (TES). Mas preferiblemente, B es un grupo tMs.

La formacion de sililenoleter III se lleva a cabo generalmente haciendo reaccionar la estrona 3-protegida con un reactivo de sililacion, tal como por ejemplo un cloruro de sililo o un triflato de sililo, en presencia de una base. Preferiblemente, el reactivo de sililacion es cloruro de trimetilsililo (TMSC1), yoduro de trimetilsililo (TMSI) o triflato de trimetilsililo (TMSOTf).

Bases adecuadas son conocidas para un experto en la tecnica, e incluyen, por ejemplo, bases de potasio tales como K2CO3 o KH, bases de sodio, tales como NaH o NaOMe, bases de litio, tales como LiAlH4, LDA, LiTMP o LiHMDS, bases de amina tales como Et3N, imidazol y 2,6-lutidina, TMEDA, DBU y similares. En una realizacion preferida, la base es LDA o Et3N.

Disolventes adecuados para la conversion del sililenoleter son conocidos por la persona experta en la tecnica, e incluyen, por ejemplo dimetilformamida (DMF), diclorometano (DCM), tolueno, tetrahidrofurano (THF) y otros eteres, tales como por ejemplo 1, 4-dioxano, 2-metiltetrahidrofurano (2-MeTHF), eter metil terbutilico (MTBE), 1,2- dimetoxietano (DME) y metileter ciclopentilo, o mezclas de los mismos.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Como sera evidente para un experto en la tecnica, las condiciones de reaccion preferidas, tales como el disolvente y la temperatura de reaccion dependen en gran medida de la naturaleza de la reaccion especffica, en particular, del reactivo de sililacion y/o del tipo de base utilizada en dicha reaccion. Cuando, por ejemplo, A es bencilo y B es trimetilsililo (TMS), la reaccion puede ser ejecutada a temperatura ambiente con TMSOTf como reactivo de sililacion, Et3N como base y en tolueno o DCM como disolvente.

No es necesaria una gran purificacion de sililenoleter III antes de someterlo a la siguiente etapa del proceso. En una realizacion preferida, se utiliza como material de partida para la etapa (2) crudo III, es decir, III que no ha sido sometido a purificacion extensa.

Etapa (2): Conversion de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5 (10), 16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5 (10 ), 15- tetraen-17-ona IV, donde A es un grupo protector

La etapa (2) se refiere a la conversion de sililenoleter III en enona a, p-insaturada IV. Hay varios metodos para ejecutar esta oxidacion.

Metodo (a): en presencia de una especie de yodo (V)

En una realizacion de la presente invencion, la etapa (2) del procedimiento, es decir, la conversion de III en IV, se lleva a cabo en presencia de una especie de yodo (V). Preferiblemente, tal especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de aproximadamente 0,001% en moles o mas, por ejemplo en una cantidad de aproximadamente 0,1% en moles o mas, o en una cantidad de aproximadamente 0,5% en moles, con respecto al compuesto III.

En una realizacion, la especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de aproximadamente 100 a aproximadamente 500% en moles (alrededor de 1 a 5 equivalentes), mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 100 a aproximadamente 300% en moles (alrededor de 1 a 3 equivalentes), mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 100 a aproximadamente 150% en moles (alrededor de 1 a 1,5 equivalentes), incluso mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 100 a aproximadamente 130% en moles (alrededor de 1 a 1,3 equivalentes), y mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 100% en moles (aproximadamente 1 equivalente), con respecto al compuesto III.

En otra realizacion mas preferida, la especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de aproximadamente 100% en moles o menos, preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 75% en moles o menos, mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 50% en moles o menos, incluso mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 30% en moles o menos, e incluso mas preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 20% en moles o menos, todos con respecto a la cantidad de III. Mas preferiblemente, la especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de aproximadamente 15% en moles o menos, preferiblemente de aproximadamente 10% en moles o menos, mas preferiblemente de aproximadamente 5% en moles o menos, con respecto a la cantidad de III.

En una realizacion preferida, la especie de yodo (V) comprende acido 2-yodoxibenzoico (IBX), acido 2- yodoxibencenosulfonico (IBS) y/ o un derivado de los mismos. La especie de yodo (V) se puede generar in situ. Como es conocido para un experto en la tecnica, por ejemplo IBX puede ser generado in situ a partir de acido 2- yodobenzoico y Oxone (2KHSO5-KHSO4-K2SO4), y el IBS puede, por ejemplo, ser generado in situ a partir de acido 2-yodoxibencenosulfonico y Oxone.

Un ejemplo de un derivado de IBX es el “IBX estabilizado” (SIBX), una formulacion que comprende IBX, acido isoftalico y acido benzoico descrita por Ozanne et al., Org. Lett. 2003, 5, 2903-2906, que se incorpora por referencia. En una realizacion preferida, la especie de yodo (V) comprende IBX estabilizado.

Otros ejemplos de derivados de IBX son, entre otros, 2,3,4,5-tetrafluoro-6-acido yodoxibenzoico (FIBX), descrito por Richardson et al., Angew. Chem. Int. Ed. 2007, 46, 6529-6532, incorporado por referencia, y 5-metoxi-3-metil-2- acido yodoxibenzoico, descrito por Moorthy et al., Tetrahedron Lett. 2008, 49, 80-84, incorporado por referencia. Un ejemplo de un derivado de IBS es 5-metil-2-acido yodoxibencenosulfonico (5-Me-IBS), descrito por Yamada, Spec. Chem. Mag. 2011, 31, 18 - 20, incorporado por referencia. El 5-Me-IBS puede, por ejemplo ser generado in situ a partir de sal de potasio de acido 5-metil-2-yodoxibencenosulfonico y Oxone.

En una realizacion preferida, la especie de yodo (V) comprende un derivado formado por la formacion de complejos de IBX, IBS y/o un derivado de los mismos con un ligando, en particular con dimetil sulfoxido (DMSO) o con un N- oxido. Ejemplos de N-oxidos adecuados son N-oxido de N-metilmorfolina (NMO), N-oxido de 4-metoxipiridina (MPO), N-oxido de trimetilamina, N-oxido de 2-picolina y N-oxido de 4-fenilpiridina. Preferiblemente, el ligando se selecciona de DMSO, NMO, MPO, o una combinacion de dos o mas de estos ligandos.

Dichos derivados pueden formarse por ejemplo por agitacion de una solucion de tales IBX, IBS y/o derivado de los mismos con dicho ligando, opcionalmente a una temperatura elevada.

En una realizacion alternativa, la especie de yodo (V) comprende una especie formada por la activacion de I2O5 y/o

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

HIO3 en DMSO. En otra realizacion alternativa, la especie de yodo (V) comprende una especie formada por complejacion de I2O5 y/o HIO3 con un ligando, en particular con un N-oxido, como se describe anteriormente.

En otra realizacion especifica, la especie de yodo (V) comprende acido 2-yodoxibencenosulfonico (IBS) y/o un derivado del mismo, como descrito anteriormente. El IBS y/o el derivado del mismo esta entonces preferiblemente presente en una cantidad de menos de 100% en moles (1 equivalente), por ejemplo en una cantidad de aproximadamente 0,001 a aproximadamente 50% en moles, preferiblemente de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 40% en moles, mas preferiblemente de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 30% en moles, incluso mas preferiblemente de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 20% en moles y mas preferiblemente de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 % en moles, todos ellos con respecto al compuesto III.

Los disolventes adecuados para la conversion de III en IV en la presencia de una especie de yodo (V) son conocidos por la persona experta en la tecnica, e incluyen, por ejemplo sulfoxido de dimetilo (DMSO), dimetilformamida (DMF), dimetilacetamida (DMA), N-metilpirrolidona (NMP), acetonitrilo, acetato de etilo, acetona, o una mezcla de los mismos. Alternativamente, se puede utilizar una mezcla de dichos disolventes con otros disolventes organicos, tales como por ejemplo diclorometano (DCM), cloroformo o fluorobenceno. En una realizacion preferida, el disolvente se selecciona del grupo que consiste en DMSO, DMF, DMA, NMP, una combinacion de los mismos, y una combinacion de DMSO, DMF, DMA y/o NMP con uno o mas disolventes organicos, tales como por ejemplo DCM, cloroformo o fluorobenceno. En otra realizacion preferida, la reaccion se ejecuta en DMSO, o en una mezcla de DMSO con uno o mas disolventes organicos, tales como por ejemplo DCM, cloroformo o fluorobenceno. En otra realizacion preferida, la reaccion se ejecuta en DMF, o en una mezcla de DMF con uno o mas disolventes organicos, tales como por ejemplo DCM, cloroformo o fluorobenceno.

La reaccion puede ser ejecutada a temperatura ambiente o a temperatura elevada.

Como sera evidente para un experto en la tecnica, las condiciones de reaccion preferidas, tales como el disolvente y la temperatura de reaccion dependen en gran medida de la naturaleza de la reaccion especifica, en particular, del tipo de especie de yodo (V) que se utilice en la reaccion.

La conversion de III en IV en presencia de una especie de yodo (V), en particular en presencia de IBX, IBS y/o un derivado de los mismos, procede de una forma muy limpia, con una minima formacion de producto secundario, si es que se produce alguno. Se obtiene el compuesto IV con un buen rendimiento y pureza.

Metodo (b): en presencia de un metal de transicion

En otra realizacion de la presente invencion, la etapa (2) del procedimiento, es decir, la conversion de III en IV, se lleva a cabo en presencia de un compuesto de metal de transicion, y en donde el compuesto de metal de transicion esta presente en una cantidad de 0,1 a 50% en moles con respecto al compuesto III.

Preferiblemente, el compuesto de metal de transicion comprende un compuesto de paladio (Pd), y mas preferiblemente, el metal de transicion es un compuesto de paladio. Ejemplos de compuestos de paladio son negro de paladio, Pd(OH)2 sobre carbono (Pd(OH)2/C, tambien conocido como catalizador de Pearlman), Pd (dba)2 o Pd (OAc)2. El compuesto de paladio puede ser tambien un compuesto de paladio estabilizado por ligando, en el que el paladio se estabiliza por ejemplo con un ligando bidentado de nitrogeno o carbeno, tal como por ejemplo paladio estabilizado con 1,10-fenantrolina, 2,9-dimetil-1, 10 fenantrolina (neocuproina), 2,2'-bipiridina, etc. El compuesto de paladio puede ser un compuesto de paladio (0) o un compuesto de paladio (II). En una realizacion preferida, el compuesto de paladio comprende un compuesto de paladio (II), tal como por ejemplo acetato de paladio (II), Pd(OAc)2. Mas preferiblemente, el compuesto de metal de transicion es acetato de paladio (II).

El compuesto de metal de transicion puede estar presente en una cantidad de 0,1 a aproximadamente 50% en moles, o en una cantidad de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 30% en moles, aproximadamente 0,5 a aproximadamente 20% en moles, aproximadamente 1 a aproximadamente 15% en moles, o aproximadamente 3 a aproximadamente 10% en moles, con relacion a al compuesto III. Mas preferiblemente, el compuesto de metal de transicion esta presente en una cantidad de aproximadamente 1 a aproximadamente 5% en moles en relacion con III.

La reaccion tambien puede llevarse a cabo en presencia de un agente de oxidacion (un oxidante) a fin de facilitar la reoxidacion del metal de transicion. La presencia de un oxidante es particularmente preferida cuando el compuesto de metal de transicion es un compuesto de paladio (0), o cuando un compuesto de paladio (II) esta presente en una cantidad inferior a la estequiometrica, es decir, en una cantidad de menos de 1 equivalente, con respecto al compuesto III.

Cuando la reaccion se realiza en presencia de un oxidante, el oxidante esta presente preferiblemente en una cantidad de aproximadamente 1 equivalente (aproximadamente 100% en moles) o mas, en relacion con el compuesto III. La cantidad de oxidante presente puede oscilar por ejemplo de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 equivalentes, preferiblemente de aproximadamente 1 a aproximadamente 2 equivalentes y mas preferiblemente de aproximadamente 1 a aproximadamente 1,5 equivalentes, con respecto a la cantidad de III.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Oxidantes adecuados son conocidos para un experto en la tecnica, e incluyen, por ejemplo, oxigeno molecular (O2), acetato de cobre (II) (Cu(OAc)2), carbonato de metil alilo, f-butilhidroperoxido (TBHP), N-oxido de N-metilmorfolina (NMO) y N-oxidos similares, benzoquinona, y similares. En una realizacion preferida, el oxidante es acetato de cobre (II). En otra realizacion preferida, el oxidante es carbonato de metil alilo. En otra realizacion preferida, el oxidante es

O2.

Por ejemplo, la reaccion puede realizarse en un atmosfera O2. Se prefiere entonces que la reaccion se ejecute a la presion atmosferica (aproximadamente 1 bar). No obstante, la ejecucion de la reaccion en una atmosfera O2 a presion elevada tambien es posible. Alternativamente, la reaccion puede llevarse a cabo utilizando el O2 del aire como oxidante. La reaccion se ejecuta entonces, en una atmosfera de aire, ya sea a presion atmosferica o a una presion elevada. Ademas, la reaccion puede realizarse en “aire diluido” como, por ejemplo, 8% de O2 en nitrogeno (N2) a presion elevada (por ejemplo, a una presion de aproximadamente 10 bares o mas).

Disolventes adecuados para la conversion de III en IV en presencia de un compuesto de metal de transicion, en particular un compuesto de paladio, son conocidos por los expertos en la tecnica, e incluyen, por ejemplo, dimetil sulfoxido (DMSO), sulfolano, etc. Adicionalmente, tambien se puede utilizar una mezcla de dichos disolventes con, por ejemplo, DCM o cloroformo. En una realizacion preferida, la reaccion se ejecuta en DMSO, o en una mezcla de DMSO con uno o mas disolventes organicos, tales como por ejemplo DCM o cloroformo.

La reaccion puede ser ejecutada a temperatura ambiente o a temperatura elevada.

La conversion de III en IV en presencia de metal de transicion, en particular en presencia de un compuesto de paladio, en particular Pd(OAc)2, procede de una forma muy limpia, con una minima formacion de producto secundario, si es que se produce alguno. Se obtiene el compuesto IV con un buen rendimiento y pureza.

Etapa (3): Reduccion del grupo 17-ceto de 3-A-oxi-estra-1,3,5 (10),15-tetraen-17-ona IV para formar 3-A-oxi- estra-1,3,5(10),15-tetraen-17p-ol, V donde A es un grupo protector

La etapa (3) se refiere a la reduccion de la funcionalidad 17-ceto para formar V, y dicha reduccion del grupo 17-ceto se puede realizar segun se describe en el documento WO 2004/041839. Dicha reduccion se lleva a cabo preferiblemente por reaccion de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV con un agente reductor seleccionado de entre el grupo de compuestos de hidruro de metal, comprendiendo dicho grupo de compuestos de hidruro de metal preferiblemente LiAlH4, AlH3, NaBH4, NaBH(OAc)3, ZnBH4, y NaBH4/CeCl3. Mas preferiblemente, el compuesto de hidruro de metal es NaBH4/CeCl3. Los agentes reductores mas preferidos para su uso en la presente etapa son aquellos que proporcionaran una reduccion quimio y estereo selectiva del grupo 17-ceto en favor de la posicion p. Por esa razon, el agente reductor quimio y estereo selectivo mas preferido para uso en esta etapa es NaBH4 en combinacion con hidrato CeCl3, preferiblemente heptahidrato.

En particular, se prefiere suspender 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV y heptahidrato CeCb en una mezcla de un disolvente protico, preferiblemente MeOH y THF, y agitar la mezcla a temperatura ambiente, preferiblemente durante aproximadamente 1 h. Una relacion en volumen preferida de MeOH a tHf es de 2:1 a 4:1. A continuacion, la mezcla se enfria, preferiblemente a 0° - 5 0C, y se anade NaBH4 en pequenas porciones manteniendo la temperatura por debajo de 8 ° C. Despues de un periodo de tiempo, preferiblemente 2 horas, se anaden 1 N de NaOH y DCM. Despues de 30 minutos de agitacion, las capas se separan y la capa acuosa se extrae con DCM. Los extractos organicos combinados se secan con sulfato de sodio y se concentran para obtener el producto como un solido blanco.

Sin embargo, es aun mas preferido inactivar la mezcla de reaccion con un acido, preferiblemente 2 N HCl, eliminar los disolventes por destilacion al vacio de aproximadamente 30 ° C a aproximadamente 40 ° C y anadir tolueno. Preferiblemente, la temperatura se eleva entonces a aproximadamente 70 ° C para inducir la separacion de fases. La fase organica entonces se separa, se lava con una solucion acuosa de Na2CO3 y agua. La fase organica final se seca por destilacion azeotropica, se enfria a aproximadamente 50 0C y se utiliza para el siguiente paso.

Etapa (4): Proteccion del grupo 17-OH de 3-A-oxi-estra-1,3,5 (10),15-tetraen-17p-ol V para formar 3-A-oxi-17- C-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraeno VI, donde A y C son grupos protectores

La etapa (4) del procedimiento se refiere a la proteccion del grupo hidroxilo en la posicion 17 de V con un grupo protector C, donde C es un grupo protector seleccionado del grupo que consta de grupos protectores monofuncionales de hidroxilo alifatico, es decir, grupos protectores monofuncionales que son adecuados para la proteccion de un grupo hidroxilo alifatico. Estos grupos protectores son conocidos por un experto en la tecnica, y se describen en, por ejemplo, P. J. Kocienski, “Protecting Groups”, 3a ed., Georg Thieme Verlag, New York 2005, y T.W. Greene et al., “Protective Groups in Organic Synthesis”, 3a ed., John Wiley & Sons, Nueva York, 1991.

La etapa (4) puede ser, por ejemplo, ejecutada como se describe en el documento WO 2004/041839.

En una realizacion preferida, C es un grupo protector acetilo. El grupo 17-OH se protege preferiblemente por acetilacion utilizando un reactivo seleccionado a partir de anhidrido acetico o cloruro de acetilo. Preferiblemente, se

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

utiliza anhidrido acetico.

En particular, se prefiere tratar una solucion del compuesto en piridina con anhidrido acetico y 4-dimetilaminopiridina. La mezcla se agita durante un periodo de tiempo. Preferentemente despues de 2 horas a temperatura ambiente se eliminan los volatiles. El residuo se disuelve en acetato de etilo (EtOAc) y la solucion resultante se lava con agua y salmuera. La solucion se seca con sulfato de sodio y se concentra para dar el producto crudo. La recristalizacion en una mezcla de disolventes organicos, preferiblemente acetato de etilo, heptano y etanol da el producto como un solido blanco.

Alternativamente, la reaccion puede realizarse con una trialquilamina, preferiblemente trietilamina, y un haluro de acetilo (aproximadamente dos equivalentes), preferiblemente cloruro de acetilo (aproximadamente 1,5 equivalente) en tolueno a entre aproximadamente 25 0C y 60 0C, preferiblemente entre aproximadamente 40 0C y 50 0C. El trabajo se lleva a cabo despues mediante un lavado con agua, acido acuoso y una base acuosa. La purificacion del producto se consigue entonces por cristalizacion, es decir, eliminando el tolueno por destilacion, disolviendo el producto crudo en acetato de etilo y calentando esta solucion a entre aproximadamente 70 0C y 80 0C. A esta solucion calentada, se anaden pequenas porciones de etanol para inducir la cristalizacion (la relacion preferida de acetato de etilo a etanol es de aproximadamente 1 a aproximadamente 8).

Etapa (5): Oxidacion del doble enlace carbono-carbono del anillo D de 3-A-oxi-17-C-oxi-estra-1,3,5(10),15- tetraeno VI para formar estetrol protegido VII, donde A y C son grupos protectores

La etapa (5) se refiere a la oxidacion del doble enlace carbono-carbono del anillo D para formar estetrol protegido VII, y se ejecuta preferiblemente como se describe en el documento WO 2004/041839.

La oxidacion del doble enlace carbono-carbono en el anillo D se lleva a cabo con un agente oxidante que proporciona c/s-hidroxilacion selectiva del doble enlace carbono-carbono. Preferiblemente, el agente oxidante es tetroxido de osmio (OsO4) y mas preferiblemente el agente oxidante es tetroxido de osmio inmovilizado sobre PVP (OsO4-PVP) que se utiliza en una cantidad catalitica (cf. G. Cainelli et al., Synthesis 1989, 45-47) en combinacion con un co-oxidante seleccionado de N-oxido de trimetilamina, N-oxido de N-metil morfolina o peroxido de hidrogeno, preferiblemente N-oxido de trimetilamina. Mas preferiblemente, OsO4-PVP y N-oxido de trimetilamina se utilizan con THF como disolvente.

En particular, se prefiere anadir OsO4-PVP a una solucion calentada del compuesto preparado en la etapa anterior en THF. Preferiblemente, la adicion se realiza a 50 0C seguida de la adicion de N-oxido de trimetilamina. Preferiblemente, la adicion de N-oxido de trimetilamina se realiza en porciones durante 1 hora. La mezcla se agita a esta temperatura durante un periodo de tiempo. Preferiblemente, despues de 12 horas la mezcla se enfria a temperatura ambiente y se filtra. Los volatiles se eliminan y el residuo se disuelve en acetato de etilo y se anade agua. La capa acuosa se acidifica y se separan las capas. La capa acuosa se extrae con acetato de etilo. Los extractos combinados se secan con sulfato sodico y se concentran. El residuo resultante se tritura con heptano y acetato de etilo para dar el producto como un precipitado blanco que se separa por filtracion. El producto se purifica por recristalizacion en una mezcla de disolventes organicos, preferiblemente acetato de etilo, heptano y etanol para dar el producto como un solido blanco.

Etapa 6: Eliminacion de los grupos protectores A y C para formar estetrol I

La etapa (6) del procedimiento se refiere a la eliminacion de los grupos protectores A y C para formar estetrol I, y se realiza preferiblemente como se describe en el documento WO 2004/041839. WO 2004/041839 da a conocer que no todos los grupos protectores se pueden eliminar sin efectos adversos sobre el producto obtenido.

Cuando A es un grupo alquilo C1-C5, la eliminacion del grupo protector se lleva a cabo preferiblemente usando BBr3. Cuando A es un grupo bencilico C7-C12, la eliminacion del grupo protector se lleva a cabo preferiblemente usando condiciones de hidrogenacion catalitica, por ejemplo Pd/H2, como es bien conocido para la persona experta en la tecnica.

En particular, se prefiere disolver el estetrol protegido VII en un disolvente protico, preferiblemente metanol. La conversion se ejecuta despues a temperatura ambiente en presencia de una cantidad catalitica de Pd/C (por ejemplo, 10%) sobre carbon (por ejemplo, como una suspension preformada en metanol) en una atmosfera de hidrogeno, preferiblemente a 1 atmosfera.

La eliminacion del grupo protector C es eficaz usando un disolvente protico tal como metanol y una base, preferiblemente K2CO3, para producir estetrol.

Como alternativa, el orden de las dos etapas de desproteccion anteriores puede invertirse. Por lo tanto, la desproteccion completa se puede lograr mediante la eliminacion en primer lugar del grupo protector C, seguida de hidrogenacion catalitica para eliminar el grupo protector A, donde A es un grupo protector bencilico C7-C12. Los procedimientos son identicos a los descritos anteriormente. Sin embargo, se prefiere eliminar primero el grupo protector A y posteriormente el grupo protector C.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

Por lo tanto, en una realizacion preferida de la etapa (6), el grupo protector A es eliminado primero para formar 17- OC estetrol protegido VIII, y posteriormente se elimina el grupo protector C para formar estetrol I, como se representa en el Esquema 10.

imagen13

VII VIII I

Esquema 10

De acuerdo con una realizacion mas preferida de la etapa (6), las reacciones de desproteccion, es decir, la eliminacion de A y C, se llevan a cabo en un solo paso si A es un grupo protector bencilico C7-C12. Preferiblemente, el compuesto VII se disuelve en un alcohol alquilo C1-C3, preferiblemente metanol, y se somete a hidrogenacion a temperatura ambiente. A partir de ahi, la solucion del compuesto VIII se utiliza preferiblemente en la etapa subsiguiente, es decir, en la eliminacion de C como se describe anteriormente.

Proceso para la sintesis de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV

En un segundo aspecto de la invencion, la invencion se refiere a un procedimiento para la sintesis de 3-A-oxi-estra- 1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV, donde A es un grupo protector, que comprende las etapas de:

(1) conversion de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y B es -Si(R2)3; y

(2) conversion de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5 (10),15 -tetraen-17- ona IV, donde A es un grupo protector, donde dicha conversion de III en IV se lleva a cabo en presencia de una especie de yodo (V), y donde la especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de aproximadamente 0,1% en moles o mas con respecto al compuesto III;

donde A es un grupo protector seleccionado del grupo constituido por un grupo alquilo C1-C5, un un grupo bencilico C7-C12 y un grupo -Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12; y B es -Si(R2)3, donde R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12; y

Dicho proceso se muestra en el Esquema 11.

imagen14

imagen15

imagen16

Esquema 11

En una realizacion preferida, la especie de yodo (V) comprende acido 2-yodoxibenzoico (IBX), acido 2- yodoxibenzoico estabilizado (SIBX), acido 2-yodoxibencenosulfonico (IBS), y/o un derivado de los mismos. En la etapa (1) y la etapa (2) del procedimiento para la sintesis de estetrol se ha realizado anteriormente una descripcion detallada de este procedimiento de acuerdo con la invencion.

Ejemplos

General

Se usaron los siguientes metodos y materiales para la determinacion. Los espectros de 1H-NMR se registraron en

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

un aparato Varian 200 MHz en CD3OD o CDCI3. El DSC se midio usando un aparato Mettler Toledo DSC822.

La HPLC-MS se realizo utilizando una Hewlett Packard serie 1100 (columna: Discovery C18 (150 x 4,6 mm) Supelco; fase movil: Solucion A/Solucion B = 70/30 (5 min) ^ (10 min) ^ 10/90 (5 min), flujo 1 ml/min, UV: 280 nm; T = 22°C; MS: API-ES negativo; Solucion A: 9,65 g NH4oAc, 2250 ml de H2O, 150 ml de MeOH, 100 ml de CH3CN; Solucion B: 9,65 g de NH4OAc, 250 ml de H2O, 1350 ml de MeOH, 900 ml de CH3CN).

La HPLC de fase inversa se realizo usando deteccion UV a 230 nm, utilizando tres diferentes metodos isocraticos, todos a un flujo de 1 ml/min y a temperatura ambiente. El Metodo A utilizo una columna Supelcosil LC-ABZ de 250 x 4,6 mm (polaridad media) y metanol /20 mM tampon de fosfato acuoso pH 3,8, en una relacion 80/20. El metodo B utilizo una columna Nucleosil C-18 de 250 x 4 mm y H2O/MeOH/acetonitrilo en una relacion 15/50/35, que contenia 50 mM de acetato de amonio. El metodo C utilizo una columna Nucleosil C-18 de 250 x 4 mm y metanol/20 mM tampon de fosfato acuoso pH 3,8 en una relacion 80/20.

Ejemplo 1:3-benciloxi-estra-1,3,5(10)-trien-17-ona (estrona 3-protegida, A es bencilo)

A una suspension de estrona (II, 100 g, 0,370 moles) y K2CO3 (160 g, 1,16 moles) en DCM/MeOH (800 ml, relacion 1:1 v/v) a temperatura ambiente (TA) se anadio bencil bromuro (132 ml, 1,10 moles) en una porcion. La mezcla resultante se sometio a reflujo durante 16 h (50% de conversion despues de 4 h segun TLC). La mezcla de reaccion se enfrio a TA y los solidos se separaron por filtracion. La torta de filtracion se lavo con MeOH. La solucion se concentro (hasta un volumen total de aproximadamente 300 ml). El precipitado que se habia formado se recolecto por filtracion y se lavo con heptanos para dar un solido blanco. El filtrado se concentro adicionalmente (hasta un volumen total de 100 ml) y se trituro con heptano. El precipitado resultante se separo por filtracion y se combino con el primer lote de producto. El producto (153 g, max. 0,370 moles) contenia aun restos de bromuro de bencilo pero se uso sin purificacion adicional. El producto puede purificarse por recristalizacion en DCM/MeOH (1/2).

TLC: Rf = 0,5 (heptanos/acetato de etilo = 4/1); HPLC-MS: 91%; 1H-NMR (200 MHz, CDCl3 5 7.60-7.24 (m, 5H), 7.49 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.87 (dd, 1H, J1 = 2.6 Hz, J2 = 8.4 Hz), 6.82 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 5.12 (s, 2H), 3.05-2.90 (m, 2H), 2.66 - 2.01 (m, 5H), 1.77 - 1.47 (m, 8H), 0.99 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 2:3-benciloxi-17-trimetilsililoxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno(compuesto III, A es bencilo, B es trietilsililo)

Se disolvio 3-benciloxi-estra-1,3,5 (10)-trien-17-ona (estrona 3-protegida, A es bencilo; 238 mg, 0,660 mmol) en DCM (10 ml). Se anadieron Et3N (0.166 ml, 1.188 mmol) y TMS-OTf (0.143 ml, 0.792 mmol) y la solucion se agito a temperatura ambiente durante 1 h. Segun TLC (alumina, heptano/acetato de etilo 4/1 mas Et3N). Se transfirio todo el contenido del matraz a una pequena columna de alumina basica (tipo II) y se eluyo con heptano/acetato de etilo 4/1 mas Et3N. El producto se obtuvo en forma de un solido blanco (248 mg, 87%).

Ejemplo 3:3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (compuesto IV, A es bencilo)

Se anadieron IBX no estabilizado (1.0 g, 3.6 mmol), una cantidad catalitica de N-oxido de trimetilamina (40 mg, 10% en moles) y tamices moleculares 3A (100 mg) a 10 ml de DMSO seco.

Se anadio una solucion de fluorobenceno que contenia aproximadamente 2.8 mmoles (94% GC) de bencilestrona- trimetilsililenol eter III (4.5 ml, correspondiente a 1.0 g de cetona) en bruto, dando una solidificacion repentina de la mezcla de reaccion debido al sustrato precipitado. Para la disolucion fue necesario un calentamiento suave a 40- 450C. Despues de 1 hora, el HPLC mostro una conversion limpia del enol eter a la enona con cierta cetona presente debido a hidrolisis ventajosa.

Ejemplo 4:3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (compuesto IV, A es bencilo)

Se disolvio acido 2-yodoxibenzoico estabilizado (SIBX, 0.5 g, 0.8 mmol de oxidante) en 4 ml de DMSO anhidro que contenia 0.8 mmol de cocatalizador de N-oxido de amina-. Estas mezclas se preincubaron durante 30 minutos a temperatura ambiente. A esta solucion se le anadio una solucion de bencilestrona-trimetilsililenol eter III (0.215 g, 0.5 mmol) en 1 ml de fluorobenceno anhidro. Las mezclas solidificadas se calentaron ligeramente a 30-35°C para permitir la mezcla. Despues de 20-30 minutos, las mezclas de reaccion se hicieron homogeneas. El analisis por HPLC mostro una conversion limpia del enol eter a la enona, con cierta cetona presente en algunos casos debido a la hidrolisis. Los resultados se resumen en la Tabla 1.

Tabla 1: Deshidrogenacion mediada por SIBX de TMS enol eter, en presencia de cocatalizador.

Entrada

Co-catalizador Tiempo (h) Conversion (%) Selectividad enona (%)

1

N-oxido de 4-Metoxipiridina 1 94 75

2

N-oxido de 4-Metoxipiridina 3 V CD CD 80

3

N-oxido de trimetilamina 2 1 100 68

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

4

N-oxido de trimetilamina 3 1 100 63

5

N-oxido de 4-Metoxipiridina 4 1 >99 72

1 19% cetona presente debido a la hidrolisis 2 N-oxido de anhidro 4-metoxipiridina 3 Dihidrato de N-oxido de metoxipiridina 4 N-oxido de anhidro 4-metoxipiridina

Ejemplo 5:3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (compuesto IV, A es bencilo)

Se disolvio acido 2-yodoxibenzoico estabilizado (SIBX, 0.5 g, 0.8 mmol de oxidante) en 4 ml de dimetilformamida anhidra (DMF) que contema 0.8 mmol de cocatalizador de N-oxido de N-metilmorfolina. Estas mezclas se preincubaron durante 30 minutos a temperatura ambiente. A esta solucion se le anadio bencilestrona—trimetilsililenol eter solido III (0.215 g, 0.5 mmol). La mezcla de reaccion se agito durante 1 hora a temperatura ambiente y despues se calento adicionalmente a 40°C. El tiempo de reaccion total fue de 2 horas. Los resultados se resumen en la Tabla 2.

Tabla 2: Deshidrogenacion mediada por SIBX de TMS enol eter en DMF.

Entrada

Disolvente Tiempo (h) Conversion (%) Selectividad enona (%)

1

dimetilformamida (DMF) 0.5 83 86

2

dimetilformamida (DMF) 1 99 86

3

dimetilformamida (DMF) 2 V CD CD 85

1 14% hidrolisis.

Ejemplo 6:3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (compuesto IV, A es bencilo)

Se cargo un vial de 8 ml equipado con una barra de agitacion bajo aire con el compuesto III (A es bencilo, B es trimetilsililo; 50 mg, 0.116 mmol), acetato de paladio (2.6 mg, 0.116 mmol) y DMSO (0.9 ml, seco ), cloroformo (0.1 ml). El vial se purgo con gas oxfgeno puro y se mantuvo bajo una atmosfera de oxfgeno con un balon. La mezcla se agito a 35°C durante una noche. La conversion completa se obtuvo segun TLC (Si, n-heptano/acetato de etilo 4/1). La conversion limpia en el producto deseado se obtuvo de acuerdo con HPLC.

Se cargo un vial de 8 ml equipado con una barra de agitacion bajo aire con el compuesto III (A es bencilo, B es trimetilsililo; 100 mg, 0.231 mmol), acetato de paladio (5.19 mg, 0.023 mmol) y DMSO (0.9 ml, seco ), DCM (0.1 ml). El vial se purgo con gas oxfgeno puro y se mantuvo bajo una atmosfera de oxfgeno con un balon. La mezcla se agito a 35°C durante una noche. La conversion completa se obtuvo segun TLC (Si, n-heptano/acetato de etilo 4/1). La conversion limpia en el producto deseado IV se obtuvo de acuerdo con HPLC.

Ejemplo 7:3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona (compuesto IV, A es bencilo)

Se mezclaron bencilestrona-trimetilsililenol eter III (0.20/0.215 g, 0.5 mmol) y alilmetilcarbonato (0.115 ml, 1.0 mmol) con 4.5 ml de acetonitrilo anhidro. Se anadio solucion madre de acetato de paladio (0.25 ml, 5 pmol, 1% en moles) en acetonitrilo y la mezcla se agito en una atmosfera de argon a 75°C. El analisis por HPLC despues de 67 horas mostro una conversion completa del enol eter con una selectividad del 51 % a enona IV.

Ejemplo 8:3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ol (compuesto V, A es bencilo)

A una solucion de 3-bencil-deshidroestrona (compuesto IV; A = bencilo; 58 g, 162 mmol) en una mezcla de MeOH (900 ml) y THF (200 ml) a temperatura ambiente se le anadio heptahidrato de CeCl3 (66.4 g, 178 mmol). Despues de agitar durante 1 h, la mezcla se enfrio a 0-5 0C usando un bano de hielo/agua. Despues se anadio NaBH4 (12.2 g, 324 mmol) en pequenas porciones manteniendo una temperatura por debajo de 8°C. Despues de agitar durante 2 h a 0 - 5 0C (la TLC mostro que la reaccion estaba completa) se anadieron 1 N NaOH (300 ml) y DCM (1 1) y la mezcla se agito durante 1/2 h a temperatura ambiente. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con DCM (200 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron (Na2SO4) y se concentraron al vacfo dando un solido blanquecino (55.0 g, 152.8 mmol, 94%).

TLC: Rf = 0.25 (heptanos/acetato de etilo = 4:1); HPLC-MS: 93% de isomero p, 2% de isomero a; DSC: Mp. 149.70C, pureza 96.6%; 1H NMR (200 MHz, CDCls) 5 7.48 (m, 5H), 7.27 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.85 (dd, 1H, J1 = 2.8 Hz J2 = 8.6 Hz), 6.81 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 6.10 (d, 1H, J = 5.8 Hz), 5.79 (dd, 1H, J1 = 1.8 Hz, J2 = 3.4 Hz), 5.11 (s, 2H), 4.48 (d, 1H, J = 7.6), 2.96 (m, 2H), 2.46 - 1.64 (m, 9H), 0.93 (s, 3H) ppm.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

Ejemplo 9: 17-acetiloxi-3-benciloxi-estra-1,3,5 (10),15-tetraeno (compuesto VI, A es bencilo, C es acetilo)

Una solucion de 3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15- tetraen-17-ol (compuesto V, A = bencilo; 55.0 g, max. 153 mmol) en piridina (400 ml) se trato con Ac2O (50 ml, 0.53 moles) y 4-dimetilaminopiridina (1.5 g, 12.3 mmol). La mezcla se agito durante 2 h a temperatura ambiente (la TLC mostro que la reaccion estaba completa). El residuo se disolvio en EtOAc (400 ml), se lavo con agua (200 ml) y salmuera (150 ml), se seco (Na2SO4) y se concentro al vacio para dar un solido amarillo (54.0 g, 49.8 mmol, 88%). El producto se purifico por recristalizacion en heptanos/EtoAc/EtOH (1:0, 5:1) para dar un solido blanco (45.0 g, 112 mmol, 73%).

TLC: Rf = 0.6 (heptanos/acetato de etilo = 4/1); HPLC-MS: 98% de isomero p, 1% de isomero a, 1,3% de p-estradiol; DSC: Mp. 122.80C, pureza 99.8%; 1H NMR (200 MHz, CDCls) 5 7.44 (m, 5H), 7.27 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.86 (dd, 1H, J1 = 2.6 Hz J2 = 8.4 Hz), 6.80 (d, 1H, J = 2.6 Hz), 6.17 (d, 1H, J = 5.8 Hz), 5.78 (dd, 1H, J1 = 1.4 Hz, J2 = 3.2 Hz), 5.45 (m, 1H), 5.11 (s, 2H), 2.96 (m, 2H), 2.40 - 1.54 (m, 10H), 2.18 (s, 3H), 0.93 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 10: 17-acetil-3-bencil estetrol (compuesto VII, A es bencilo, C es acetilo)

OsO4: sobre PVP (9 g, ~5% p/p de OsO4 sobre PVP, preparado segun Cainelli et al. Synthesis1989, 45 - 47 se anadio a una solucion de 17-acetiloxi-3-benciloxi-estra-1,3,5(10),15-tetraeno (compuesto VI; A = bencilo, C = acetilo; 45 g, 112 mmol) en THF (450 mL) y la mezcla se calento a 50 0C. Dihidrato de N-oxido de trimetilamina (24.9 g, 224 mmol) se anadio porcion a porcion durante 2 h. Despues de agitar durante 36 h a 50 0C (la TLC mostro que la reaccion estaba completa), la mezcla de reaccion se enfrio a temperatura ambiente. Se separaron los solidos por filtracion, se lavaron con THF (100 ml) y el filtrado se concentro. El residuo se recogio en EtOAc (250 ml) y se anadio agua (250 ml) La capa acuosa se acidifico con 1 N HCl (aproximadamente 10 ml). Se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (150 ml). Las capas organicas se combinaron, se secaron (Na2SO4) y se concentraron al vacio. El residuo se trituro con heptanos/EtOAc (1:1, 100 ml), agitado durante 2 h y el precipitado blanco resultante se separo por filtracion para dar el producto como un solido blanco (41 g, 94 mmol, 84%). El producto se purifico por recristalizacion en heptanos/acetato de etilo/EtOH (2:1:1) tres veces para dar un solido blanco (21 g, 48.2 mmol, 43%).

HPLC-MS: 99,5% de isomero paa; DSC: Mp. 159.30C, pureza 98.7%; 1H NMR (200 MHz, CDCls) 5 7.49 (m, 5H), 7.27 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 6.84 (dd, 1H, J1 = 2.6 Hz, J2 = 8.4 Hz), 6.81 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 5.11 (s, 2H), 4.45 (d, 1H, J = 4.4), 4.11 (m, 3H), 3.12 (m, 1H) 2.95 (m, 2H), 2.46 - 1.64 (m, 10H), 2.24 (s, 3H), 0.93 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 11: 17-acetil estetrol (compuesto VIII, C es acetilo)

A una solucion de 17-acetil-3-bencil estetrol (compuesto VII: A = bencilo, C = acetilo; 21 g, 48.2 mmol) en MeOH (600 ml, grado HPLC) se le anadio una suspension preformada de 10% Paladio sobre carbon activado (2 g) en metanol (50 ml). La mezcla se coloco en una atmosfera de H2 a 1 atm y se agito durante 24 h (la TLC mostro que la reaccion estaba completa) a temperatura ambiente. Se filtro sobre Celite® y la torta de filtracion se lavo con MeOH (200 ml). El filtrado se concentro al vacio para dar 17-acetil estetrol en forma de un solido blanco (15 g, 43.4 mmol, 90%).

TLC: Rf = 0.2 (heptanos/acetato de etilo = 1/1); HPLC - MS: 99.2%, DSC: Mp. 212.20C, pureza 98.9%; 1H NMR (200 MHz, CD3OD) 5 7.14 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 6.60 (dd, 1H, J1 = 2.6 Hz, J2 = 8.8 Hz), 6.56 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 4.81 (dd, 1H, J1 = 3.4 Hz, J2 = 6.4 Hz), 4.07 (m, 3H), 3.12 (m, 1H), 2.85 (m, 2H), 2.37 - 1.37 (m, 10H), 2.18 (s, 3H), 0.91 (s, 3H) ppm.

Ejemplo 12: Estetrol

Se suspendieron 17-acetil-estetrol (compuesto VIII; C = acetilo, 15 g, 43.4 mmol) y K2CO3 (6 g, 43.4 mmol) en MeOH (500 ml, grado HPLC) y se agito durante 4 h a temperatura ambiente (la tLc mostro que la reaccion estaba completa). Los disolventes se evaporaron al vacio. Se anadio agua (200 ml) y CHCl3 (70 ml) y la mezcla se agito y neutralizo con 0.1 N HCl (50 ml). El producto se recogio por filtracion, se lavo con agua (100 ml) y CHCl3 (100 ml) para dar estetrol en forma de un solido blanco (12.2 g, 40.1 mmol, 92.5%) despues de secar a 40°C en un horno ventilado. TLC: Rf = 0.05 (heptanos/acetato de etilo = 1/1); HPLC - MS: 99.1%, DSC: Mp. 243.7°C, pureza 99.5%; 1H NMR (200 MHz, CD3OD) 5 7.14 (d, 1H, J = 8.6 Hz), 6.61 (dd, 1H, J1 = 2.6 Hz, J2 = 8.4 Hz), 6.56 (d, 1H, J = 2.4 Hz), 4.83 (m, 1H), 3.93 (m, 3H), 3.50 (d, 1H, J = 5.2), 3.38 (m, 2H), 2.84 (m, 2H), 2.32 (m, 3H), 1.97 (m, 1H), 1.68 - 1.24 (m, 5H), 0.86 (s, 3H) ppm.

Claims (16)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   Reivindicaciones

   1. Procedimiento para la preparation de estra-1,3,5(10) trien-3,15a, 16a, 17p-tetraol I, que comprende las etapas de:

   imagen1

   (1) conversion de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y

   B es -Si(R2 3 4 5 6)3;

   (2) conversion de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV, donde A es un grupo protector;

   (3) reduccion del grupo 17-ceto de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV para formar 3-A-oxi-estra- 1,3,5(10),15-tetraen-17p-ol V, donde A es un grupo protector;

   (4) protection del grupo 17-OH de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10)15-tetraen-17p-ol V para formar 3-A-oxi-17-C-oxi- estra-1,3,5(10),15-tetraeno VI, donde A y C son grupos protectores;

   (5) oxidation del doble enlace carbono-carbono del anillo D de 3-A-oxi-17-C-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraeno VI para formar estetrol protegido VII, donde A y C son grupos protectores; y

   (6) eliminacion de los grupos protectores A y C para formar estetrol I;

   donde:

   A es un grupo protector seleccionado del grupo constituido por un grupo alquilo C1-C5, un grupo bencilico C7- C12 y un grupo -Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1- C6 y un grupo arilo C6-C12;

   B es -Si(R2)3, donde R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C6 y un grupo arilo C6-C12; donde alquilo incluye tambien ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, metilciclobutilo y ciclohexilo; y

   C es un grupo protector seleccionado del grupo constituido por grupos protectores monofuncionales que son adecuados para la proteccion de un grupo hidroxilo alifatico; y

   donde la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de una especie de yodo (V); o

   donde la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de un compuesto de metal de transition, y

   5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   45

   50

   55

   60

   65

   donde el compuesto de metal de transicion esta presente en una cantidad de 0,1% en moles a 50% en moles con respecto al compuesto III.
2. 2. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 1, caracterizado porque la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de una especie de yodo (V), y porque la especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de 0,1% en moles o mas con respecto al compuesto III.
3. 3. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 2, caracterizado porque la especie de yodo (V) comprende acido 2-yodoxibenzoico (IBX), acido 2-yodoxibenzoico estabilizado (SIBX), acido 2-yodoxibencenosulfonico (IBS), 2,3,4,5-tetrafluoro-6-acido yodoxibenzoico (FIBX), acido 5-metoxi-3-metil-2-yodoxibenzoico o acido 5-metil-2- yodoxibencenosulfonico (5-Me-IBS).
4. 4. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 2 o 3, caracterizado porque la especie de yodo (V) comprende una especie formada por complejacion de IBX o IBS con un ligando, en particular con DMSO o con un N- oxido.
5. 5. Procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, caracterizado porque la especie de yodo (V) comprende acido 2-yodoxibencenosulfonico (IBS), y porque el IBS esta presente en una cantidad de 0,1% en moles a 50% en moles con respecto al compuesto III.
6. 6. Procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2 a 5, caracterizado porque el disolvente en la etapa (2) se selecciona del grupo que consiste en DMSO, DMF, DMA, NMP, una combinacion de los mismos, y una combinacion de DMSO, DMF, DMA y/o NMP con uno o mas disolventes organicos.
7. 7. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 1, caracterizado porque la etapa (2) del procedimiento se lleva a cabo en presencia de un compuesto de metal de transicion, y porque el compuesto de metal de transicion es un compuesto de paladio.
8. 8. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 7, caracterizado porque el compuesto de paladio es un compuesto de paladio (II).
9. 9. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 7 o la reivindicacion 8, caracterizado porque el compuesto de metal de transicion comprende acetato de paladio (II) (Pd(OAc)2).
10. 10. Procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, caracterizado porque esta presente ademas un oxidante.
11. 11. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 10, caracterizado porque el oxidante esta presente en una cantidad de 1 a 3 equivalentes, con respecto a la cantidad de III.
12. 12. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 10 o la reivindicacion 11, caracterizado porque el oxidante es oxigeno molecular (O2), carbonato de metil alilo y/o acetato de cobre (II).
13. 13. Procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque el disolvente en la etapa (2) se selecciona del grupo que consiste en DMSO, o una combinacion de DMSO con uno o mas disolventes organicos.
14. 14. Procedimiento de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, caracterizado porque B es un grupo trimetilsililo o trietilsililo.
15. 15. Procedimiento para la sintesis de 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV, caracterizado porque A es un grupo protector, y porque comprende las etapas de:

    10

    15

    20

    imagen2

    (1) conversion de estrona II en 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III, donde A es un grupo protector y B es -Si(R2)3; y

    (2) conversion de 17-B-oxi-3-A-oxi-estra-1,3,5(10),16-tetraeno III en 3-A-oxi-estra-1,3,5(10),15-tetraen-17-ona IV, donde A es un grupo protector, donde dicha conversion de III en IV se lleva a cabo en presencia de una especie de yodo (V), y donde la especie de yodo (V) esta presente en una cantidad de 0,1% en moles o mas con respecto al compuesto III;

    donde:

    A es un grupo protector seleccionado del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C5, un grupo bencilico C7- C12 y un grupo -Si(R1)3, donde R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en un grupo alquilo C1-C6 y un grupo arilo C6-C12; y

    B es -Si(R2)3, en el que R2 se selecciona independientemente del grupo que consiste de un grupo alquilo C1-C6 y un grupo arilo C6-C12; donde alquilo incluye tambien ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, metilciclobutilo y ciclohexilo.
16. 16. Procedimiento de acuerdo con la reivindicacion 15, caracterizado porque la especie de yodo (V) comprende acido 2-yodoxibenzoico (IBX), acido 2-yodoxibencenosulfonico (IBS) o acido 2-yodoxibenzoico estabilizado (SIBX).