ES2338702T3 - Procedimiento para la preparacion de cultivos bacterianos probioticos analergicos y uso relacionado. - Google Patents
Procedimiento para la preparacion de cultivos bacterianos probioticos analergicos y uso relacionado. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2338702T3 ES2338702T3 ES06780602T ES06780602T ES2338702T3 ES 2338702 T3 ES2338702 T3 ES 2338702T3 ES 06780602 T ES06780602 T ES 06780602T ES 06780602 T ES06780602 T ES 06780602T ES 2338702 T3 ES2338702 T3 ES 2338702T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- analgesic
- peptone
- accordance
- culture
- group
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
- C12R2001/23—Lactobacillus acidophilus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
- C12R2001/245—Lactobacillus casei
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
- C12R2001/25—Lactobacillus plantarum
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/44—Staphylococcus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/46—Streptococcus ; Enterococcus; Lactococcus
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Virology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
Uso de al menos un cultivo bacteriano probiótico analérgico para la preparación de un producto alimenticio o una formulación farmacéutica concebida para personas particularmente sensibles a las sustancias alergizantes, en el que dicho cultivo bacteriano se obtiene por un procedimiento que incluye al menos una etapa en la que las bacterias están en contacto con un medio de cultivo analérgico.
Description
Procedimiento para la preparación de cultivos
bacterianos probióticos analérgicos y uso relacionado.
El objetivo de la presente invención es un
procedimiento para la preparación de cultivos bacterianos
probióticos analérgicos.
Se sabe que el tracto gastrointestinal (GI)
humano contiene una comunidad microbiana compleja, llamada
microbiota, que consta principalmente de bacterias estrictamente
anaeróbicas capaces de desempeñar diferentes acciones con efectos
que afectan a nivel gastrointestinal local e indirectamente a nivel
sistémico general, que implican casi todo los órganos y las
funciones del huésped.
La microflora intestinal, que consta de una gran
diversidad de diferentes especies (400-500) capaces
de colonizar tanto la mucosa intestinal como las partículas de
alimento ingerido, es entonces capaz de condicionar en gran medida
la salud del individuo.
La composición de la microflora intestinal puede
alterarse por varios factores, tales como la edad, el estado
fisiológico del individuo, la presencia de diferentes patologías, el
estrés y por encima de todo la dieta.
Como consecuencia de factores negativos
endógenos y exógenos, hay una disminución de las bacterias útiles
(típicamente bacterias que pertenecen al grupo ácido lácticas en el
intestino delgado y bifidobacterias en el intestino grueso) y un
aumento de las enterobacterias, estreptococos y clostridios
patógenos.
La administración de probióticos específicos a
través de especialidades medicinales, dietéticos, integradores y
por encima de todo el alimento (los llamados alimentos
"funcionales" o "nutracéuticos") permite
re-equilibrar la microflora del huésped,
restaurando una funcionalidad intestinal óptima.
El término "probiótico" se refiere
habitualmente a microorganismos vivos, seleccionados entre la
microflora intestinal de individuos sanos, que una vez
administrados en cantidades oportunas y durante un tiempo adecuado,
son capaces de colonizar, también en casos solamente temporales, los
diferentes tractos del intestino y de conferir un efecto
beneficioso a la salud del organismo huésped.
Pertenecen a los probióticos principalmente
algunas especies de los géneros Lactobacillus, Bifidobacterium,
Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus, Propionibacterium,
Leuconostoc y, en menor medida, Saccharomyces, Bacillus
y Enterococcus.
Entre los efectos saludables y beneficiosos,
mostrados por rigurosos ensayos clínicos realizados en todo el
mundo e inducidos en el consumidor por la ingesta de probióticos
pueden mencionarse:
1. Estimulación del sistema inmune;
2. Inducción de efectos antimutagénicos y
antigenotóxicos;
3. Acción antitumoral y antimetastásica que se
refiere, por ejemplo, a:
- -
- carcinoma de intestino grueso
- -
- carcinoma de mama
- -
- cáncer de vejiga
4. Mejora de la absorción de nutrientes;
5. Disminución de los síntomas de intolerancia a
la lactosa;
6. Mejora de la motilidad intestinal debido a la
disminución del pH y disminución del estreñimiento;
7. Disminución de la absorción de colesterol y
grasas;
8. Actividades anti-diarréicas,
anti-hipertensivas, anti-diabéticas
que inhiben infecciones del sistema urogenital femenino;
9. Actividad de prevención de patologías
geriátricas.
\vskip1.000000\baselineskip
Los probióticos para uso oral deben
caracterizarse por los siguientes requisitos generales y
funcionales:
i) origen intestinal humano; de individuos en
buen estado de salud;
ii) bio-seguridad; no deben
causar efectos secundarios especialmente en personas debilitadas o
inmunodeprimidas;
iii) resistencia y viabilidad; deben tener
características de resistencia para ser capaces de sobrevivir al
jugo gástrico, las secreciones pancreáticas y biliares de modo que
alcancen el íleo y el colon de forma intacta y aún perfectamente
viables.
\vskip1.000000\baselineskip
La competición que comienza entre los
microorganismos probióticos y la microflora patógena solamente puede
suceder si, una vez ingeridos, los microorganismos probióticos son
capaces de alcanzar el tracto intestinal y por lo tanto de
sobrevivir a la acidez gástrica y la elevada concentración de sales
biliares. Generalmente, una vez han alcanzado el tracto intestinal,
se dice que empiezan a través de mecanismos de adhesión que implican
proteínas y/o carbohidratos con funcionalidades de adhesión
específica a las vellosidades intestinales.
A nivel industrial, los probióticos se producen
en forma de cultivos bacterianos liofilizados, concretamente se
determina el crecimiento de las células en un medio apropiado
(fermentación) y después, tras la concentración y purificación de
la biomasa, se realiza la deshidratación de la misma por
liofilización. Dicho procedimiento es necesario para permitir que
las bacterias se reproduzcan por sí mismas en una cantidad adecuada
(etapa fermentativa) y para conservarse a sí mismas durante un
largo tiempo (etapa de liofilización).
Para que el procedimiento fermentativo se
realice satisfactoriamente y con rendimientos adecuados, es
necesario proporcionar a las células fuentes de carbono y
nitrógeno, oligoelementos y bioactivadores en cantidades
oportunas.
Tradicionalmente, en el tratamiento con las
habitualmente llamadas bacterias "lácticas", los sustratos
seleccionados usados como fuente de nitrógeno son suero, proteínas
séricas de la leche, hidrolizados y peptonas de caseína,
caseinatos, etc., mientras que como fuente de carbono, habitualmente
se emplea lactosa y glucosa, ya que se pueden metabolizar
fácilmente por casi todos los organismos vivos.
La Solicitud de Patente Europea EP 1852498 A1,
describe un procedimiento para preparar bacterias ácido lácticas
que tienen una elevada actividad anti-alérgica que
comprende cultivar las bacterias ácido lácticas en un medio que
contiene hidrolizado de caseína.
La Solicitud WO2005/010170 A2 describe un medio
de fermentación que comprende un sustrato proteico altamente
hidrolizado, estando dicho sustrato caracterizado porque
consta de péptidos de bajo peso molecular y un elevado porcentaje de
aminoácidos libres.
La Solicitud de Patente US 2005/214270
proporciona un agente anti-alérgico que contiene,
como ingrediente activo, bacterias ácido lácticas seleccionadas
entre el grupo constituido por bacterias ácido lácticas de las
especies Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum,
y combinaciones de las mismas. El agente
anti-alérgico es capaz de mejorar la diátesis
alérgica reduciendo el nivel de IgE, que contribuye al desarrollo
de alergia de Tipo I, y es fácil de tomar y muy seguro.
En los últimos años, también probablemente a
causa de una dieta muy poco variada y demasiado rica en proteína y
lípidos, en países de Europa y países occidentales se ha registrado
un sensible aumento de la cantidad de personas que padecen
patologías de tipo alérgicas.
Las reacciones inmunes de tipo IV o mediadas por
IgE se llaman "alérgicas", durante las cuales, después de un
primer contacto de sensibilización (que puede suceder en cualquier
momento de la vida, también en un momento intrauterino) se producen
IgE específicas con un mecanismo mediado por histamina.
Dichas reacciones también pueden estar causadas
por dosis extremadamente reducidas de moléculas llamadas
"alergenos", con consecuencias clínicas que pueden cambiar
desde simples reacciones cutáneas ligeras a choque anafiláctico y
muerte.
Debido a la peligrosidad de estas sustancias
para algunas personas, la Comunidad Europea ha adoptado una norma
de modo que tiene que mostrarse claramente "el uso en la
producción y la presencia en el alimento" en la etiqueta de
alimentos que pertenecen a las siguientes clases (Anexo III bis del
anterior mandamiento) (art. 6 sub. 10, mandamiento 2000/13/EC por
tanto modificado por el mandamiento 2003/89/EC):
- \quad
- cereales que contienen gluten (es decir trigo, centeno, cebada, avena, escanda, kamut o sus cepas hibridadas) y productos derivados; crustáceos y productos basados en crustáceos; huevos y productos basados en huevos; pescado y productos basados en pescado; cacahuetes y productos basados en cacahuetes; soja y productos basados en soja; leche y productos basados en leche (incluyendo la lactosa); frutos con cáscara, es decir, almendras (Amigdalus communis L.), avellanas (Corylus avellana), nueces comunes (Juglans regia), anacardos (Western Anacardium), pacanas [Carya illinoiesis (Wangenh) K. Koch], nueces de Brasil (Bertholletia excelsa), pistachos (Pistacia vera), macadamias (Macadamia ternifolia) y productos derivados; apio y productos basados en apio; mostaza y productos basados en mostaza; semillas de sésamo y productos basados en semillas de sésamo; dióxido de azufre y sulfitos en concentraciones mayores de 10 mg/kg o 10 mg/l expresadas como SO_{2}.
Como, típicamente para la producción de
probióticos, se usan derivados de sustratos basados en leche (como
fuente de nitrógeno) y glucosa (como fuente de carbono), que se
origina habitualmente a partir del almidón (también almidón de
trigo), los probióticos pueden considerarse peligrosos si se
administran a sujetos particularmente sensibles, incluso si, como
mucho, pudieran contener realmente sólo pequeñas trazas de alergenos
(por lo tanto derivados de la leche y/o gluten).
En el caso de la leche, pueden distinguirse dos
causas de reacción adversa a este alimento; la alergia a las
proteínas de la leche de vaca (APLV) y la intolerancia a la
lactosa.
La leche, junto con el huevo, es el alimento más
alergizante; esta característica del mismo se determina por las
sustancias proteicas contenidas por el mismo, que es principalmente
alfa-lactoalbúmina,
beta-lactoglobulina y caseínas.
La alergia a las proteínas de la leche de vaca
es una patología relativamente frecuente en el primer año de vida.
La sintomatología es, en el 50-70% de los casos, de
tipo gastroentérico, aunque en el 50-70% de los
casos hay trastornos cutáneos, en el 20-30%
trastornos respiratorios y en el 5-9% trastornos
sistémicos (anafilaxis).
La APLV tiende a atenuarse por sí misma después
del primer año de vida y a desaparecer hacia los 10 años y es
inusual en los adultos.
La intolerancia a la lactosa tiene un transcurso
opuesto, que es muy inusual en el primer año de vida y muy
frecuente en el adulto, en particular en algunas poblaciones
(africanas, asiáticas, indias americanas).
La leche es un alimento fundamental desde el
nacimiento y el recién nacido ya produce la enzima necesaria para
la descomposición del azúcar de la leche, la lactosa, en sus
componentes simples glucosa y galactosa. Después del primer año de
vida, le leche llega a ser un alimento menos importante y la lactasa
se reduce espontáneamente, de modo que muchos adultos llegan a ser
intolerantes (no alérgicos) a la leche.
La enfermedad celíaca es una enfermedad
inflamatoria enteropática, crónica, mediada por el sistema inmune,
que surge por la ingestión de gluten, una proteína de
"almacenamiento" contenida de forma natural en algunos
cereales.
Esta intolerancia a alimentos afecta a personas
genéticamente predispuestas, que tienen un sistema inmune que
responde de un modo anormal a la ingestión de fracciones proteicas
típicas del gluten del trigo, escanda (un tipo de trigo), kamut y
espelta (un tipo de trigo), cebada, centeno, triticale (un cruce
entre trigo y centeno) y sus derivados. Algunos individuos también
presentan intolerancia a las proteínas de la avena.
Técnicamente, el término "gluten" se aplica
a la combinación de las proteínas simples prolamínicas (ricas en
prolina), llamadas "gliadinas", y glutelínicas (ricas en
glutamina), llamadas "gluteninas", de los cereales mencionados
anteriormente.
En el contexto de la enfermedad celíaca, el
término "gluten" se usa a menudo con referencia a todos los
tipos de proteínas contenidas en los cereales, aunque entre las
diferentes fracciones proteicas que forman el gluten, la gliadina
parece ser la más perjudicial.
En la gente afectada por la enfermedad celíaca,
se supone que el gluten, también en pequeñas cantidades, es capaz
de causar la respuesta anormal del sistema inmune: la
transglutaminasa, una enzima que existe en el tejido mucoso
intestinal, se une a la gliadina y a través de desamidación la
transforma en una molécula capaz de activar las células T (células
del sistema inmune capaces de mediar todas las respuestas inmunes
hacia antígenos proteicos), con una producción consecuente de
inmunoglobulinas IgG e IgA anti-transglutaminasa e
IgA anti-endomisio.
En una primera fase, sucede un aumento de las
células T activadas intestinales intraepiteliales, aunque con el
progreso de la enfermedad el aumento se refiere tanto a los
linfocitos como a las células plasmáticas infiltradas de la lámina
propia, con una producción de metaloproteinasas responsables del
acortamiento de las vellosidades y por lo tanto el daño a la mucosa
intestinal.
Hasta ahora no existe la posibilidad de prevenir
el desarrollo o tratar la enfermedad celíaca, por lo tanto una
diete libre en gluten, realizada estrictamente durante toda la vida
es la única terapia capaz de asegurar a la gente afectada por la
enfermedad celíaca una salud perfecta.
Las personas celíacas deben eliminar también las
trazas más pequeñas de la harina de los cereales peligrosos, porque
la ingesta de gluten, también en cantidades mínimas, puede
desencadenar la respuesta autoinmune.
Como la proporción de la cantidad de gluten
ingerido al efecto tóxico inducido a nivel intestinal aún no se ha
definido, el término "trazas" tiene una importancia práctica
fundamental en el tratamiento de la enfermedad celíaca y las
implicaciones en el plan de legislación de alimentos, porque se
refiere al límite máximo de gluten "aceptable" (umbral) en los
productos adecuados para la dieta de una persona celíaca. Todos los
especialistas en la técnica están de acuerdo en que una dosis de
100 mg por día de gliadina, igual a 200 mg de gluten, es decir,
aproximadamente 3 g de pan, es suficiente para causar, en la mayoría
de las personas celíacas, el aumento de los linfocitos
intraepiteliales intestinales, un signo prematuro de inflamación
intestinal persistente.
Con referencia al umbral mínimo, los pocos
trabajos científicos realizados hasta ahora parecen mostrar que la
ingestión de hasta 10 miligramos por día de gliadina (igual a 20
partes por millón de gluten) no es capaz de dañar sensiblemente la
mucosa intestinal, pero puede determinar, en una minoría de los
casos, la aparición de síntomas gastroentéricos.
A nivel legislativo internacional, la antigua
norma "Norma del Codex para Alimentos Libres de Gluten",
aún en vigor, muestra, como contenido máximo de gluten en los
productos terapéuticos de la dieta, 0,05 de nitrógeno por 100 g de
producto seco (con referencia al almidón de trigo), que corresponde
a una fracción de gluten igual a aproximadamente 500 ppm.
Sin embargo, está teniendo lugar una revisión
correcta y apropiada de las directrices mencionadas anteriormente,
que parece prever que los alimentos libres de gluten resultantes de
ingredientes libres de gluten de forma natural no tienen que
contener más de 20 ppm de gluten, mientras que los alimentos libres
de gluten, derivados de cereales con gluten, pueden tener un límite
máximo de 200 ppm de gluten.
En Francia, Gran Bretaña y los Países Bajos,
esperando la revisión de las directrices mencionadas anteriormente,
consideran, como límite máximo para los productos libres de gluten,
200 ppm.
En el ámbito nacional, la norma actual parece
ser más precautoria que la de la comunidad y la internacional, de
hecho se establece un límite de "20 partes por millón",
tanto para los alimentos fabricados con materias primas libres de
forma natural de gluten como para los alimentos purificados de dicha
sustancia.
La norma prevé que: si en la composición del
producto alimenticio o en la de uno o más ingredientes
(aromatizantes, aditivos o co-adyuvantes) que
forman el mismo, están presentes cereales que contienen gluten o
sustancias derivadas de los mismos y/o si del procedimiento de
producción puede obtenerse una cantidad de gluten en el producto
final, determinada analíticamente como mayor de 20 partes por
millón, dicho producto tendrá que mostrar en la etiqueta, en el pie
de la lista de ingredientes y de un modo bien visible, las palabras
"producto que contiene gluten".
La exclusión completa del gluten de la dieta,
sin embargo, no es fácil de realizar, considerando que pueden
suceder fenómenos de contaminación cruzada de cereales y derivados
(almidones, harinas, harina de almidón, etc.) libres de forma
natural de gluten, ya a nivel de la industria harinera.
Dichos productos después se usan por la
industria alimentaria en la preparación de alimentos complejos
basados en múltiples ingredientes tecnológicos, aditivos y
co-adyuvantes de diferente origen y naturaleza. Una
investigación reciente ha mostrado que hasta el 6% de los productos
"teóricamente" libres de gluten, en base a los ingredientes
presentados, realmente contienen más de 30 mg de gliadina por 100 g
de producto final, igual a 600 ppm de gluten.
Para el propósito de excluir una posible
contaminación con gluten, por lo tanto es necesario considerar, para
cada producto alimenticio comercializado, no solamente todos los
ingredientes usados y el procesamiento, sino también la cadena de
producción de cada ingrediente individual.
Por lo tanto, sigue existiendo la necesidad de
ser capaces de producir cultivos bacterianos probióticos libres de
sustancias alergizantes debido al uso de sustratos de fermentación
basados en leche o cereales o, como alternativa, debido a
contaminaciones no intencionadas o cruzadas. De hecho, no obstante
es posible que, debido a contaminaciones cruzadas, no intencionadas
y accidentales, algunos compuestos usados en el procedimiento de
producción lleven trazas de alergenos.
Por lo tanto, sigue existiendo la necesidad de
ser capaces de proporcionar un procedimiento para la preparación de
cultivos bacterianos probióticos que prevea, en cada etapa del
procedimiento de producción, incluyendo la fermentación, el uso de
sustancias analérgicas. En particular, es deseable localizar y
seleccionar sustratos de fermentación, diferentes de la leche y sus
derivados y los cereales que contienen gluten, que representen una
buena fuente de nitrógeno y carbono.
Por lo tanto, todos los operarios del sector
están de acuerdo en que, hasta ahora, sigue existiendo una necesidad
muy importante de proporcionar un procedimiento para la preparación
de cultivos bacterianos probióticos capaz de usar sustratos
alternativos a los usados hasta hoy y, simultáneamente, capaz de
reducir las contaminaciones cruzadas, no intencionadas y
accidentales, si suceden.
En particular, sigue existiendo la necesidad de
proporcionar un procedimiento para la preparación de cultivos
bacterianos probióticos que prevea un doble nivel de seguridad en
relación a la ausencia de sustancias alergizantes.
Un objetivo de la presente invención es
proporcionar un procedimiento para la preparación de medios de
cultivo capaces de superar los límites de la técnica conocida.
Otro objetivo de la presente invención es
proporcionar una metodología para la producción de cultivos
bacterianos probióticos seguros para administrarlos a toda la
población, también a la gente afectada por alergias.
Estos y otros objetivos, que resultarán
evidentes a partir de la siguiente descripción detallada, los ha
logrado el solicitante, que ha mejorado una metodología que incluye
un doble nivel de seguridad con relación a la ausencia de alergenos
en los procedimientos de producción de cultivos bacterianos
probióticos.
En particular, el solicitante ha establecido una
metodología de producción en la que se usan sustratos de
fermentación analérgicos seleccionados (materias primas
analérgicas), capaces de asegurar una fuente apropiada de nitrógeno
y carbono a los cultivos probióticos.
El uso de al menos un cultivo bacteriano
probiótico analérgico para la preparación de un producto alimenticio
o una composición farmacéutica pretendida para personas
particularmente sensibles a las sustancias alergizantes, en el que
dicho cultivo bacteriano se obtiene por un procedimiento que incluye
al menos una etapa en la que las bacterias están en contacto con un
medio de cultivo analérgico, forma la materia de la presente
invención, que tiene las características definidas en las
reivindicaciones adjuntas.
En una realización de la invención, las cepas de
dicho cultivo bacteriano pertenecen a los géneros: Lactobacillus,
Bifidobacterium, Streptococcus, Pediococcus, Lactococcus,
Propionibacterium, Bacillus, Saccharomyces, Enterococcus,
Leuconostoc.
Preferiblemente, del género Lactobacillus, han
encontrado uso las siguientes especies: L. pentosus, L.
plantarum, L. casei, L. casei ssp. paracasei, L. casei ssp.
rhamnosus, L. acidophilus, L. delbrueckii ssp. bulgaricus, L.
fermentum, L. gasseri.
Se presentan ejemplos de las cepas usadas de
dichas especies en la Tabla 1 adjunta. Preferiblemente, del género
Bifidobacterium, han encontrado uso las siguientes especies:
B. longum. B. breve, B. lactis, B. adolescentis y B.
pseudocatenulatum.
Se presentan ejemplos de las cepas usadas de
dichas especies en la Tabla 1 adjunta. Preferiblemente, del género
Lactococcus han encontrado uso las siguientes especies: L.
lactis y L. lactis ssp. lactis.
Se presentan ejemplos de las cepas usadas de
dichas especies en la Tabla 1 adjunta. Preferiblemente, del género
Streptococcus han encontrado uso las siguientes especies:
S. thermophilus.
Se presentan ejemplos de las cepas usadas de
dichas especies en la Tabla 1 adjunta.
En una realización particularmente preferida de
la invención, las bacterias de dicho cultivo bacteriano se
seleccionan entre el grupo que incluye las cepas bacterianas
probióticas presentadas en la Tabla 1 adjunta.
El solicitante ha encontrado útil seleccionar y
emplear materias primas analérgicas particulares. En particular, el
solicitante ha encontrado, como fuente de nitrógeno, peptonas y/o
hidrolizados proteicos de origen vegetal y/o animal, libres de
forma natural de gluten y alergenos de origen lácteo y, como fuente
de carbono, glucosa y/o otros mono- o di-sacáridos
derivados de la hidrólisis de polisacáridos más complejos típicos de
especies vegetales libres de forma natural de gluten y alergenos de
origen lácteo.
Las peptonas de origen vegetal se seleccionan
entre el grupo que incluye: arroz, patata, maíz, castañas, tapioca,
mandioca, guisantes, habas y sus mezclas, sin embargo, capaces de
promover el crecimiento bacteriano de fermentación, pero sin
producir alergenos, ni de la leche ni de tipo gluten.
En una primera realización preferida, el
procedimiento objeto de la presente invención prevé el uso, como
fuente de nitrógeno, de una o más peptonas y/o hidrolizados
proteicos analérgicos y, como fuente de carbono, glucosa y/o otros
mono- o di-sacáridos derivados de la hidrólisis de
polisacáridos complejos (materias primas analérgicas).
En una segunda realización preferida, el
procedimiento objeto de la presente invención prevé un
pre-tratamiento de las materias primas con enzimas
adecuadas para la eliminación de trazas, si las hay, de alergenos
derivados de la contaminación cruzada que sucede a lo largo de la
cadena de producción y/o distribución.
En el contexto de la presente invención, el
sustrato de cultivo es un sustrato de cultivo analérgico de origen
vegetal y/o animal, libre de forma natural de gluten, alergenos de
origen lácteo y todas las sustancias que pertenecen a la lista del
anexo III bis de los mandamientos (materias primas analérgicas)
mencionados anteriormente.
El uso de las materias primas analérgicas
mencionadas anteriormente permite obtener probióticos certificables
para su uso en personas alérgicas, ya que se puede asegurar el no
uso de sustancias que pertenecen a la lista del anexo III bis de
los mandamientos de la comunidad mencionados anteriormente y el uso
de ingredientes certificados por el proveedor como libres de dichas
sustancias.
Entonces, en virtud del hecho de que la ausencia
de cualquier sustancia química en una muestra dada no es
científicamente demostrable, pero uno puede determinar de forma
simple que la cantidad posiblemente existente es inferior al límite
de detección del procedimiento analítico usado (incluso si se usó el
procedimiento más sensible y delicado conocido en la técnica),
también el uso de un pre-tratamiento enzimático
resulta ser una fuente de garantía adicional.
Simplemente a modo de ejemplo, a continuación se
presentan algunas formulaciones analérgicas de medio para el
crecimiento de cultivos bacterianos probióticos.
Los componentes de un medio de cultivo deben
proporcionar fuentes de nitrógeno (en este caso peptonas y/o
hidrolizados proteicos), fuentes de carbono (en este caso, la
glucosa y/o otros mono- o di-sacáridos derivados de
la hidrólisis de polisacáridos complejos), bioactivadores del
crecimiento y vitaminas (en este caso de extracto de levadura) y
sales minerales.
Por ejemplo, un medio de cultivo puede
contener:
- glucosa preferiblemente seleccionada entre:
almidón de maíz, patata, sacarosa de remolacha o sacarosa de
caña;
- peptona preferiblemente seleccionada entre:
arroz, patata, maíz, castaña, tapioca, mandioca, guisantes, habas,
judías o generalmente legumbres y sus mezclas;
- peptona preferiblemente seleccionada entre:
carne;
- extracto de levadura; sales minerales (tal
como, simplemente a modo de ejemplo: acetatos, carbonatos, fosfatos,
hidrogenofosfatos, cloruros, citratos, sulfatos y otros); adyuvante
(si es necesario, tal como: Tween, lecitinas y otros) y agua
potable.
\vskip1.000000\baselineskip
Una formulación adecuada para el cultivo de
cepas de los géneros Lactobacillus y Bifidobacterium
podría incluir preferiblemente los siguientes ingredientes:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Un ejemplo preferido de un medio para cultivos
bacterianos probióticos analérgicos podría ser el siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
La fermentación se realiza de acuerdo con las
enseñanzas conocidas para los especialistas en la técnica y en las
condiciones experimentales de uso habitual.
El solicitante ha verificado la presencia, o no,
de trazas de alergeno en un cultivo probiótico que ha crecido sobre
las materias primas objeto de la presente invención.
Por ejemplo, en el caso de alergenos derivados
de la leche, la investigación por medios analíticos de
\beta-lactoglobulina y lactosa en los productos,
con metodologías específicas y sensibles confirmadas (análisis con
kit ELISA específico para la \beta-lactoglobulina
del tipo "kit de cuantificación por ELISA de
\beta-lactoglobulinas bovinas - Bethyl
Laboratories", con un límite umbral de 0,05 ppm y análisis con
kit quimioenzimático y detección UV-vis para la
lactosa del tipo "lactosa/D-glucosa - Boehringer
Mannheim, cod. 10986119", con un límite umbral de 7 ppm) da un
resultado negativo y, por lo tanto, estas sustancias, si las hay,
deben estar ciertamente por debajo del umbral de detección.
Al mismo tiempo, la investigación del gluten
realizada con la metodología más delicada y, hasta ahora, más
sensible (kit de gliadina ELISA RIDASCREEN® -
R-Biopharm A, Darmstadt, Alemania, con una
sensibilidad igual a 3 ppm) permite confirmar la ausencia de
gluten. Se entiende que, incluso si estuviera presente el gluten,
su concentración debería estar en cualquier caso por debajo del
umbral de detección, concretamente inferior a 3 ppm.
El pre-tratamiento enzimático
sobre las materias primas, a realizar o no en función de los
requisitos, es capaz de hidrolizar las trazas de leche y derivados
y el gluten y derivados que existan accidentalmente en el medio de
cul-
tivo.
tivo.
Dicho tratamiento confiere el nivel de seguridad
más elevado para su uso también para personas alérgicas y
particularmente sensibles.
Esta estrategia de fabricación es adecuada para
la producción de probióticos con un grado de seguridad analérgica
llamado DSS - Sistema de Doble Seguridad (del inglés Double Safety
System).
El pre-tratamiento enzimático
prevé el uso de al menos una enzima proteolítica y/o el uso de al
menos una enzima glucosidasa.
En el contexto de la presente invención, la
enzima proteolítica es capaz de realizar una proteolisis. La enzima
proteolítica se selecciona entre el grupo que incluye las proteasas
y/o las peptidasas. Las proteasas y las peptidasas se seleccionan
entre el grupo que incluye: tripsina, quimiotripsina, pancreatina,
pepsina, papaína y bromelaína. Preferiblemente, las proteasas y las
peptidasas se seleccionan entre pepsina y/o bromelaína.
En el contexto de la presente invención, la
enzima glucosidasa es capaz de realizar una escisión hidrolítica de
un glucósido. La enzima glucosidasa se selecciona entre el grupo que
incluye: alfa-glucosidasa y
beta-glucosidasa,
alfa-galactosidasa y
beta-galactosidasa.
De forma ventajosa, el tratamiento enzimático de
las materias primas que forman el caldo de cultivo para los
probióticos se realiza con proteasas (alcalasas y bromelaína) y con
las glucosidasas.
Las glucosidasas se seleccionan entre el grupo
que incluye: lactasa (o \beta-galactosidasa). En
una realización preferida, el pre-tratamiento de
las materias primas prevé el uso en una secuencia que incluye tres
enzimas: alcalasa, lactasa y bromelaína.
En una realización preferida, la selección de
las enzimas y su secuencia es la siguiente:
- alcalasa, que hidroliza prácticamente todas
las proteínas y particularmente las de la leche;
- lactasa, que hidroliza la lactosa;
- bromelaína, que hidroliza el gluten.
\vskip1.000000\baselineskip
La secuencia mostrada es una función del pH de
hidrólisis óptimo en un gradiente de básico a ácido; de este modo,
el medio conserva las propiedades nutritivas.
La alcalasa, activa hacia la
\beta-lactoglobulina, la
\alpha-lactoalbúmina y las caseínas, permiten
eliminar los residuos alergénicos, si los hay, derivados de
contaminaciones cruzadas fortuitas y no intencionadas con derivados
de la leche.
Dicho tratamiento prevé la adición a las
materias primas disueltas en agua de una cantidad de enzima que
varía entre 0,0025 y 0,0500 g/l, correspondiente a
0,001-0,020 UA/l (Unidades Anson por litro).
La solución después se lleva a una temperatura
entre 45 y 55ºC durante 15-60 minutos, con un pH
entre 7 y 8; preferiblemente, un pH controlado de
7,50\pm0,20.
La lactasa, también conocida como
\beta-galactosidasa, se carga para la hidrólisis
del enlace glucósido entre la glucosa y la galactosa en el
disacárido lactosa.
El tratamiento con lactasa se realiza después de
la hidrólisis con proteínas alcalasa tras haber llevado el pH del
caldo de cultivo a un valor entre 6 y 7; preferiblemente, un valor
de 6,50\pm0,20 con ácidos orgánicos (preferiblemente ácido
láctico) añadiendo 250-2.000 ULN/l (Unidades de
Lactasa Neutra por litro), correspondiente 0,05 - 0,40 ml de una
solución enzimática titulada a 5.000 ULN/g.
La solución se mantiene a 37\pm5ºC durante un
periodo variable de 2-6 horas. Finalmente, la
bromelaína es una enzima proteolítica contenida de forma natural en
la piña, capaz de hidrolizar de forma eficaz la gliadina en
fragmentos no reconocidos por el sistema inmune y por lo tanto no
alergénicos.
El tratamiento se realiza añadiendo el medio de
fermentación con la enzima a la cantidad de
0,005-0,010 g/l (igual a 110 - 220 UDG/l, Unidades
Digestivas de Gelatina por litro), después de la corrección del pH a
valores de 5,0-6,0 con ácidos orgánicos
(preferiblemente ácido láctico). La temperatura de trabajo debe
mantenerse a 37\pm5ºC durante un tiempo entre 1 y 6 horas.
Después de los tres tratamientos enzimáticos, es
necesario restaurar el pH al valor óptimo para la fermentación de
las cepas individuales (preferiblemente con NaOH 5 N para basificar,
o con ácido láctico para acidificar).
Después, se realiza un tratamiento con calor
para la purificación del medio (realizado a temperaturas entre 90 y
145ºC durante tiempos que varían de unos pocos segundos a 45
minutos), que sin embargo desnaturalizará e inactivará las enzimas
añadidas, sin riesgos adicionales para el producto final y la gente
destinataria, que deriven de los residuos de la enzima usada.
Un diseño de producción industrial típico, por
lo tanto, prevé las siguientes etapas:
a. la selección de las materias primas
analérgicas
b. la disolución de las materias primas en
agua
c. la corrección del pH y la temperatura a
valores apropiados para el uso de la enzima proteolítica,
preferiblemente alcalasa
d. la adición de la enzima y su acción durante
el tiempo requerido
e. la corrección del pH y la temperatura a
valores apropiados para el uso de la enzima glucolítica,
preferiblemente lactasa
f. la adición de la enzima y su acción durante
el tiempo requerido
g. la corrección del pH y la temperatura a
valores apropiados para el uso de la enzima proteolítica,
preferiblemente bromelaína
h. la adición de la enzima y su acción durante
el tiempo requerido
i. la corrección del pH hasta valores adecuados
para la fermentación
j. la purificación a través de pasteurización
y/o esterilización del medio de cultivo
k. la refrigeración a la temperatura de inóculo
típica de la cepa probiótica en producción (37\pm2ºC).
l. la inoculación de la cepa
m. la fermentación
n. la separación de la biomasa y
crioprotección
o. la liofilización.
La presente invención entonces permite producir
cepas probióticas analérgicas y en particular con absoluta ausencia
de alergenos, más preferiblemente de derivados de la leche y el
gluten, con una amplia seguridad de uso para todas las clases de
poblaciones.
De forma ventajosa, los cultivos bacterianos
probióticos analérgicos preparados de acuerdo con los contenidos de
la presente invención pueden usarse de forma eficaz para la
preparación de formulaciones farmacéuticas.
En vista de la elevada cantidad de personas
alérgicas a la leche (el 3-5% de la población con
una edad por debajo de los 2 años) y de personas celíacas (el 1% de
la población total) es útil intentar desarrollar bacterias
probióticas que puedan administrarse también a estas clases de
población.
La presente invención entonces es útil:
\bullet para los consumidores, para los que la
transparencia en el etiquetado es fundamental;
\bullet para los productores, que de este modo
pueden contar con un producto con una garantía total de sus
propiedades analérgicas, por lo tanto, que se puede proponer a la
población completa que compra.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
Claims (25)
1. Uso de al menos un cultivo bacteriano
probiótico analérgico para la preparación de un producto alimenticio
o una formulación farmacéutica concebida para personas
particularmente sensibles a las sustancias alergizantes, en el que
dicho cultivo bacteriano se obtiene por un procedimiento que incluye
al menos una etapa en la que las bacterias están en contacto con un
medio de cultivo analérgico.
2. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en
el que dicha sustancia alergizante es de tipo gluten y/o
lácteo.
3. El uso de acuerdo con la reivindicación 1, en
el que dichas personas sensibles son gente afectada por la
enfermedad celíaca.
4. El uso de acuerdo con una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, en el que en dicha al menos una etapa, las
bacterias de dicho cultivo, seleccionadas entre el grupo que incluye
el género Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus,
Pediococcus, Lactococcus, Propionibacterium, Bacillus,
Saccharomyces, Enterococcus, Leuconostoc, se producen a través
de un desarrollo en un sustrato analérgico.
5. El uso de acuerdo con la reivindicación 4, en
el que las bacterias de dicho cultivo se seleccionan entre el grupo
que comprende las siguientes especies bacterianas: L. pentosus,
L. plantarum, L. casei, L. casei ssp. paracasei, L. casei ssp.
rhamnosus, L. acidophilus, L. delbrueckii ssp. bulgaricus, L.
fermentum, L. gasseri, B. longum. B. breve, B. lactis, B.
adolescentis y B. pseudocatenulatum, L. lactis y L. lactis
ssp. lactis, S. thermophilus; preferiblemente, dichas bacterias
se seleccionan entre el grupo que incluye las siguientes cepas
bacterianas probióticas:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
6. El uso de acuerdo con una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, en el que el sustrato de cultivo analérgico
incluye al menos una peptona y/o un hidrolizado proteico,
seleccionándose la peptona y/o el hidrolizado proteico
preferiblemente entre el grupo que incluye peptona y/o hidrolizado
proteico de origen vegetal y/o animal.
7. El uso de acuerdo con la reivindicación 6, en
el que la peptona de origen vegetal se selecciona entre el grupo
que incluye: arroz, patata, maíz, castañas, tapioca, mandioca,
guisantes, habas, legumbres y/o sus mezclas, y la peptona de origen
animal se selecciona entre las peptonas de carne.
8. El uso de acuerdo con una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, en el que el sustrato de cultivo analérgico
incluye al menos una sustancia seleccionada entre: glucosa y/o mono-
o di-sacárido derivado de la hidrólisis de
polisacárido complejo, obteniéndose la glucosa de almidón de maíz,
almidón de patata o de sacarosa de remolacha o caña.
9. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones precedentes, en el que el sustrato de cultivo
analérgico incluye: glucosa de acuerdo con la reivindicación 8, al
menos una peptona de carne de acuerdo con la reivindicación 7 y al
menos una peptona de origen vegetal de acuerdo con la reivindicación
7; preferiblemente peptona de
arroz.
arroz.
10. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones precedentes, en el que dichas bacterias en contacto
con dicho sustrato de cultivo analérgico se someterte a una etapa
de fermentación y posterior liofilización.
11. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones precedentes, en el que los cultivos bacterianos
probióticos obtenidos son cultivos bacterianos probióticos
analérgicos que contienen una cantidad de alergenos por debajo del
límite de detección: 3 ppm para el gluten, 7 ppm para la lactosa y
0,05 ppm para las lactoglobulinas.
12. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones precedentes, en el que dicho cultivo se obtiene
por un procedimiento que incluye al menos una etapa en la que las
bacterias se producen con un sustrato de cultivo analérgico
previamente sometido a un pre-tratamiento enzimático
para eliminar las trazas de alergenos existentes por contaminación
cruzada o no intencionada.
13. El uso de acuerdo con la reivindicación 12,
en el que dicho pre-tratamiento enzimático prevé el
uso de al menos una enzima proteolítica y/o al menos una enzima de
glucósidos; preferiblemente, la enzima proteolítica se selecciona
entre el grupo que incluye proteasas y/o peptidasas, y la enzima de
glucósidos se selecciona entre el grupo que incluye
alfa-glucosidasa y beta-glucosidasa,
alfa-galactosidasa y
beta-galactosidasa.
14. El uso de acuerdo con la reivindicación 13,
en el que las proteasas y/o peptidasas se seleccionan entre el
grupo que incluye: tripsina, quimiotripsina, pancreatina, pepsina,
papaína y bromelaína; preferiblemente entre pepsina y/o
bromelaína.
15. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 14, en el que el
pre-tratamiento enzimático incluye el uso de al
menos un proteasa y al menos una glucosidasa.
16. El uso de acuerdo con la reivindicación 15,
en el que la proteasa se selecciona entre alcalasa y bromelaína y
la glucosidasa se selecciona entre lactasa o
beta-galactosidasa.
17. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 16, en el que el
pre-tratamiento enzimático incluye el uso
sucesivamente de: una alcalasa, una lactasa y la bromelaína.
18. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 17, en el que:
- la alcalasa y dicho sustrato analérgico se
tratan a una temperatura entre 45ºC y 55ºC, durante un tiempo entre
15 y 60 minutos a un pH incluido entre 7 y 8; preferiblemente,
7,5\pm0,20;
- la lactasa y dicho sustrato de cultivo
analérgico se tratan a una temperatura entre 30ºC y 40ºC, durante
un tiempo entre 2 y 6 horas a un pH incluido entre 6 y 7;
preferiblemente, 6,5\pm0,20;
- la bromelaína y dicho sustrato de cultivo
analérgico se tratan a una temperatura entre 30ºC y 40ºC, durante
un tiempo entre 1 y 6 horas a un pH incluido entre 5 y 6.
19. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 18, en el que al final del
pre-tratamiento enzimático, se prevén una etapa en
la que se restaura el pH a valores adecuados para la fermentación de
las cepas individuales, una etapa de tratamiento con calor a una
temperatura incluida entre 90ºC y 145ºC para desnaturalizar e
inactivar las enzimas usadas en dicho
pre-tratamiento enzimático y una etapa de
fermentación de dichas cepas seleccionadas entre las descritas en
cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5.
20. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 19, en el que el sustrato de cultivo
analérgico incluye al menos una peptona y/o un hidrolizado
proteico, seleccionándose la peptona y/o el hidrolizado proteico
preferiblemente entre el grupo que incluye peptona y/o hidrolizado
proteico de origen vegetal y/o animal.
21. El uso de acuerdo con la reivindicación 20,
en el que la peptona de origen vegetal se selecciona entre el grupo
que incluye: arroz, patata, maíz, castañas, tapioca, mandioca,
guisantes, habas y sus mezclas, y la peptona de origen animal se
selecciona entre peptonas de carne.
22. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 21, en el que el sustrato de cultivo
analérgico incluye al menos una sustancia seleccionada entre:
glucosa y/o mono- o di-sacárido derivado de la
hidrólisis de polisacáridos complejos, glucosa que se obtiene de
almidón de maíz, patata o sacarosa de remolacha o caña.
23. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 22, en el que el sustrato de cultivo
analérgico incluye: glucosa de acuerdo con la reivindicación 22, al
menos una peptona de carne de acuerdo con la reivindicación 21 y al
menos una peptona de origen vegetal de acuerdo con la reivindicación
21; preferiblemente peptona de arroz.
24. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 23, en el que dichas bacterias en contacto
con dicho sustrato de cultivo analérgico se someten a una
fermentación y a etapas posteriores de liofilización.
25. El uso de acuerdo con una o más de las
reivindicaciones 12 a 24, en el que los cultivos bacterianos
probióticos obtenidos son cultivos bacterianos probióticos
analérgicos que contienen una cantidad de alergenos por debajo del
límite de detección: 3 ppm para el gluten, 7 ppm para la lactosa y
0,05 ppm para las beta-lactoglobulinas.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ITMI20051910 ITMI20051910A1 (it) | 2005-10-11 | 2005-10-11 | Metodo per la preparazione di colture batteriche probiotiche anallergiche e relativo impiego |
| ITMI05A1910 | 2005-10-11 | ||
| ITMI06A1212 | 2006-06-23 | ||
| ITMI20061212 ITMI20061212A1 (it) | 2006-06-23 | 2006-06-23 | Metodo per la preparazione di colture batteriche probiotiche anallergiche e relativo impiego |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2338702T3 true ES2338702T3 (es) | 2010-05-11 |
Family
ID=37591835
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES09180335.3T Active ES2463724T3 (es) | 2005-10-11 | 2006-07-26 | Procedimiento de preparación de cultivos bacterianos probióticos analérgicos y uso relacionado |
| ES06780602T Active ES2338702T3 (es) | 2005-10-11 | 2006-07-26 | Procedimiento para la preparacion de cultivos bacterianos probioticos analergicos y uso relacionado. |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES09180335.3T Active ES2463724T3 (es) | 2005-10-11 | 2006-07-26 | Procedimiento de preparación de cultivos bacterianos probióticos analérgicos y uso relacionado |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US10428395B2 (es) |
| EP (2) | EP2169050B1 (es) |
| JP (3) | JP2009511041A (es) |
| KR (2) | KR101530055B1 (es) |
| AT (1) | ATE454443T1 (es) |
| BR (1) | BRPI0617318B8 (es) |
| CA (1) | CA2624580C (es) |
| DE (1) | DE602006011590D1 (es) |
| DK (2) | DK1869161T3 (es) |
| ES (2) | ES2463724T3 (es) |
| PL (2) | PL2169050T3 (es) |
| RU (1) | RU2410423C2 (es) |
| SI (2) | SI1869161T1 (es) |
| WO (1) | WO2007054989A1 (es) |
Families Citing this family (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8168171B2 (en) * | 2004-08-05 | 2012-05-01 | Probiotical S.P.A. | Folic acid producing bifidobacterium bacterial strains, formulations and use thereof |
| EP2169050B1 (en) | 2005-10-11 | 2014-04-09 | Probiotical S.p.a. | Method for the preparation of anallergic probiotic bacterial cultures and related use |
| EP2269465A1 (en) * | 2006-05-03 | 2011-01-05 | Probiotical S.p.a. | Compositions comprising Bifidobacterium adolescentis |
| PL2164349T3 (pl) * | 2006-08-04 | 2015-03-31 | Shs Int Ltd | Bezproteinowa mieszanka dla niemowląt |
| JP5128183B2 (ja) * | 2007-05-31 | 2013-01-23 | カゴメ株式会社 | 新規乳酸菌株、発酵飲食品および発酵飲食品の製造方法 |
| US8192771B2 (en) * | 2007-05-31 | 2012-06-05 | Kagome Co., Ltd. | Fermented food or drink product, and method for producing the same |
| WO2009056979A1 (en) * | 2007-10-30 | 2009-05-07 | Danisco A/S | Growth medium for lactic acid bacteria |
| ITMI20080306A1 (it) * | 2008-02-26 | 2009-08-27 | Anidral Srl | Un latte di soia fermentato e un procedimento per migliorare le proprieta' organolettiche di un latte di soia fermentato |
| WO2009107380A1 (ja) * | 2008-02-29 | 2009-09-03 | 明治乳業株式会社 | 抗アレルギー剤 |
| KR100978415B1 (ko) | 2008-03-21 | 2010-08-26 | 매일유업주식회사 | α―갈락토시다제 및 β―글루코시다제의 활성이 높은류코노스톡 슈도메센트로이데스 Ｋ―ＡＰ３ 및 이를 이용한이소플라본 농축물 |
| KR101246871B1 (ko) * | 2009-10-21 | 2013-03-28 | 주식회사 마크프로 | 대두분말이 포함된 락토바실러스 속 박테리아 배지 조성물 |
| EE05721B1 (et) * | 2011-02-25 | 2014-08-15 | OÜ Tervisliku Piima Biotehnoloogiate Arenduskeskus | Isoleeritud mikroorganismi tüvi L. plantarum MCC1 DSM 23881 ja selle kasutamine |
| ITRM20110475A1 (it) * | 2011-09-09 | 2013-03-10 | Probiotical Spa | Ceppi di batteri lattici e/o bifido batteri, opzionalmente addizionati di n-acetilcisteina e/o lisozima microincapsulato gastroprotetto, aventi attivita' di inibizione/riduzione della crescita di differenti biotipi di e.coli, incluso e.coli o157:h7 e |
| KR101324212B1 (ko) * | 2011-11-02 | 2013-11-06 | 강원대학교산학협력단 | 쌀 단백질을 포함하는 세피아프테린 생산용 배지 및 이를 이용한 세피아프테린의 생산방법 |
| ITMI20121328A1 (it) * | 2012-07-30 | 2014-01-31 | Probiotical Spa | Composizione per dispositivo medico comprendente ceppi di batteri produttori di esopolisaccaridi in associazione con gomme e/o gelatine. |
| US11179427B2 (en) | 2013-01-21 | 2021-11-23 | Eth Zurich | Baby food composition comprising viable propionic acid-producing bacteria |
| EP3222281B1 (en) * | 2014-11-19 | 2020-01-08 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Preventive and therapeutic agent for celiac disease |
| WO2016148562A1 (en) * | 2015-03-18 | 2016-09-22 | N.V. Nutricia | Method for inducing oral tolerance via administration of beta-lactoglobulin derived peptide in combination with probiotic |
| WO2016183535A1 (en) | 2015-05-14 | 2016-11-17 | University Of Puerto Rico | Methods for restoring microbiota of newborns |
| AU2016287453A1 (en) * | 2015-06-30 | 2017-09-28 | Société des Produits Nestlé S.A. | Composition suitable for protecting microorganisms |
| JP6746091B2 (ja) * | 2015-11-17 | 2020-08-26 | ヤヱガキ醗酵技研株式会社 | 皮膚外用剤 |
| WO2017117142A1 (en) | 2015-12-28 | 2017-07-06 | New York University | Device and method of restoring microbiota of newborns |
| RU2674763C1 (ru) * | 2017-10-05 | 2018-12-13 | федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский университет) | Способ получения лекарственного средства для лечения целиакии и лекарственное средство, полученное этим способом |
| KR102230571B1 (ko) * | 2018-03-22 | 2021-03-22 | 한국식품연구원 | 비형광성 최종당화산물 억제용 조성물 및 이의 용도 |
| RU2713273C1 (ru) * | 2018-12-11 | 2020-02-04 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Российский химико-технологический университет имени Д.И. Менделеева" (РХТУ им. Д.И. Менделеева) | Способ получения питательных сред для культивирования бифидо- и лактобактерий |
Family Cites Families (28)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2000615A (en) * | 1935-03-04 | 1935-05-07 | Chester H Roth | Hosiery |
| US2838443A (en) * | 1955-07-28 | 1958-06-10 | Rutgers Res And Educational Fo | Concentration of lactobacilli |
| US3891773A (en) * | 1971-02-26 | 1975-06-24 | Us Agriculture | Culture of sour dough bacteria |
| JP2700542B2 (ja) | 1986-04-30 | 1998-01-21 | 日研フ−ド本社株式会社 | 天然ミネラルを豊富に含む乳酸菌の製造法 |
| SE463796B (sv) * | 1988-03-09 | 1991-01-28 | Carl Erik Albertsson | Foerfarande foer framstaellning av en naeringskomposition och daervid framstaelld naeringskomposition |
| KR930005199B1 (ko) * | 1991-02-20 | 1993-06-16 | 한국식품개발연구원 | 곡립형태의 쌀을 이용한 고농도 젖산 발효제품 제조방법 및 발효시 2차 효소처리에 의한 품질향상방법 |
| JP3092870B2 (ja) | 1991-10-18 | 2000-09-25 | 雪印乳業株式会社 | 牛乳ホエータンパク加水分解物の製造方法 |
| JP3112597B2 (ja) | 1993-03-16 | 2000-11-27 | 雪印乳業株式会社 | 低アレルゲン性乳蛋白質の製造法 |
| DK0684307T3 (da) | 1994-05-27 | 2000-05-15 | Agrano Ag | Fremgangsmåde til fremstilling af næringssubstrater, der kan anvendes til individuel dyrkning af gærarter og mælkesyrebakte |
| US5614501A (en) * | 1994-07-21 | 1997-03-25 | The University Of Montana | Compositions and methods for animal husbandry and for treating gastrointestinal disorders |
| JP3470441B2 (ja) | 1995-03-03 | 2003-11-25 | 不二製油株式会社 | 醗酵促進剤及び醗酵促進剤の製造方法 |
| EP2267113B1 (en) * | 1997-05-28 | 2013-07-17 | Novartis AG | Culture medium for Neisseria meningitidis with soy bean extract as amino acid source and no protein complexes of animal origin |
| US6841149B1 (en) * | 1998-05-29 | 2005-01-11 | Agri-King, Inc. | Probiotic mixture intended for monogastric animals to control intestinal flora populations |
| US6558926B1 (en) * | 1999-07-16 | 2003-05-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Method for production of tetanus toxin using media substantially free of animal products |
| JP4334698B2 (ja) | 1999-08-31 | 2009-09-30 | 太陽化学株式会社 | 蛋白酵素分解物 |
| JP2004521653A (ja) | 2001-07-18 | 2004-07-22 | デーエスエム イーペー アセッツ ベスローテン フェンノートシャップ | ミルクタンパク質の加水分解の方法 |
| JP2003219866A (ja) * | 2002-01-31 | 2003-08-05 | Kyoritsu Seiyaku Kk | イヌ腎由来浮遊性培養細胞株およびこれを用いたワクチンまたは感染診断用病原微生物の生産方法 |
| JP4212838B2 (ja) * | 2002-06-26 | 2009-01-21 | カルピス株式会社 | 抗アレルギー剤 |
| JP4115181B2 (ja) | 2002-07-12 | 2008-07-09 | コンビ株式会社 | 乳酸菌の免疫賦活効果増強方法 |
| US7179460B2 (en) * | 2002-12-05 | 2007-02-20 | Danisco A/S | Bacterial composition and its use |
| ITMI20031528A1 (it) * | 2003-07-25 | 2005-01-26 | Ct Sperimentale Del Latte S P A | Terreno di fermentazione a base di un substrato proteico altamente idrolizzato |
| US20050100559A1 (en) | 2003-11-07 | 2005-05-12 | The Procter & Gamble Company | Stabilized compositions comprising a probiotic |
| WO2005060937A1 (en) * | 2003-12-23 | 2005-07-07 | Chr. Hansen A/S | Compressed tablets comprising viable probiotic microorganisms |
| US8168171B2 (en) * | 2004-08-05 | 2012-05-01 | Probiotical S.P.A. | Folic acid producing bifidobacterium bacterial strains, formulations and use thereof |
| WO2006042542A2 (en) * | 2004-10-19 | 2006-04-27 | Statens Serum Institut | Production of tetanus, diphtheria, and pertussis toxins and toxoids using fermentation media containing no components of animal or soy origin |
| TW200637908A (en) | 2005-01-04 | 2006-11-01 | Calpis Co Ltd | Method for preparation of lactic acid bacterium having anti-allergic activity |
| NL1029059C2 (nl) | 2005-05-17 | 2006-11-20 | Noord Nl Oliemolen Holding B V | Peptidenpreparaat voor het groeien en/of kweken van micro-organismen en/of cellen. |
| EP2169050B1 (en) | 2005-10-11 | 2014-04-09 | Probiotical S.p.a. | Method for the preparation of anallergic probiotic bacterial cultures and related use |
-
2006
- 2006-07-26 EP EP09180335.3A patent/EP2169050B1/en active Active
- 2006-07-26 AT AT06780602T patent/ATE454443T1/de active
- 2006-07-26 DK DK06780602.6T patent/DK1869161T3/da active
- 2006-07-26 ES ES09180335.3T patent/ES2463724T3/es active Active
- 2006-07-26 DE DE602006011590T patent/DE602006011590D1/de active Active
- 2006-07-26 BR BRPI0617318A patent/BRPI0617318B8/pt active IP Right Grant
- 2006-07-26 EP EP06780602A patent/EP1869161B1/en active Active
- 2006-07-26 PL PL09180335T patent/PL2169050T3/pl unknown
- 2006-07-26 KR KR1020087011448A patent/KR101530055B1/ko active IP Right Grant
- 2006-07-26 ES ES06780602T patent/ES2338702T3/es active Active
- 2006-07-26 SI SI200630606T patent/SI1869161T1/sl unknown
- 2006-07-26 KR KR1020137025480A patent/KR101393718B1/ko active IP Right Grant
- 2006-07-26 PL PL06780602T patent/PL1869161T3/pl unknown
- 2006-07-26 JP JP2008535199A patent/JP2009511041A/ja active Pending
- 2006-07-26 WO PCT/IT2006/000574 patent/WO2007054989A1/en active Application Filing
- 2006-07-26 DK DK09180335.3T patent/DK2169050T3/da active
- 2006-07-26 RU RU2008110695/10A patent/RU2410423C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-07-26 CA CA2624580A patent/CA2624580C/en active Active
- 2006-07-26 US US12/089,618 patent/US10428395B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-07-26 SI SI200631778T patent/SI2169050T1/sl unknown
-
2013
- 2013-08-02 JP JP2013161899A patent/JP5853000B2/ja active Active
- 2013-08-02 JP JP2013161792A patent/JP2013252141A/ja active Pending
-
2019
- 2019-08-19 US US16/544,504 patent/US11130938B2/en active Active
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2338702T3 (es) | Procedimiento para la preparacion de cultivos bacterianos probioticos analergicos y uso relacionado. | |
| ES2402183T3 (es) | Microorganismos para mejorar el estado de salud de individuos con trastornos relacionados con la ingesta de gluten | |
| TWI359668B (es) | ||
| ES2660813T3 (es) | Nueva bacteria de ácido láctico, fármaco, producto alimenticio o bebida, y pienso que contienen la nueva bacteria de ácido láctico | |
| CN103619343A (zh) | 双歧杆菌cect7765及其在预防和/或治疗超重、肥胖和相关病理中的用途 | |
| CN100455203C (zh) | 包含至少两种能定居在胃肠道中以及具有肠存活特性,肠结合特性,感染保护特性和纤维发酵特性的乳酸菌株的益生菌组合物 | |
| CN104717890A (zh) | 含有不可消化寡糖的发酵婴儿配方 | |
| TW201902499A (zh) | 用於類鐸受體２活性化之組成物 | |
| BR122022016606B1 (pt) | Lactobacillus paracasei mortos pelo aquecimento, medicamento, alimento ou bebida, ração, agente promotor da produção de il-12 e uso | |
| Wang et al. | Evaluation of peanut flour fermented with lactic acid bacteria as a probiotic food | |
| Ibeagha‐Awemu et al. | Bioactive components in yogurt products | |
| CN101356262B (zh) | 用于制备非变应性益生菌培养物的方法和相关的用途 | |
| Sankova et al. | SARS-CoV-2 and microbiome: pathology, implications and therapeutic options | |
| Biscola et al. | Lactic Acid Bacteria Application to Decrease Food Allergies | |
| CN117731008A (zh) | 用于改善肠道屏障的组合物 | |
| AR et al. | Probiotic: a rational approach to use Probiotic as medicine |