ES2266797T3 - Separacion mejorada. - Google Patents

Separacion mejorada. Download PDF

Info

Publication number
ES2266797T3
ES2266797T3 ES03713168T ES03713168T ES2266797T3 ES 2266797 T3 ES2266797 T3 ES 2266797T3 ES 03713168 T ES03713168 T ES 03713168T ES 03713168 T ES03713168 T ES 03713168T ES 2266797 T3 ES2266797 T3 ES 2266797T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
matrix
separation
microns
group
porous
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES03713168T
Other languages
English (en)
Inventor
Bo Johnson
Lennart Ljunggren
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Alteco Medical AB
Original Assignee
Alteco Medical AB
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Alteco Medical AB filed Critical Alteco Medical AB
Application granted granted Critical
Publication of ES2266797T3 publication Critical patent/ES2266797T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/28Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties
    • B01J20/28054Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof characterised by their form or physical properties characterised by their surface properties or porosity
    • B01J20/28078Pore diameter
    • B01J20/28085Pore diameter being more than 50 nm, i.e. macropores
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/38Other non-alcoholic beverages
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61MDEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/34Filtering material out of the blood by passing it through a membrane, i.e. hemofiltration or diafiltration
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61MDEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M1/00Suction or pumping devices for medical purposes; Devices for carrying-off, for treatment of, or for carrying-over, body-liquids; Drainage systems
    • A61M1/36Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits
    • A61M1/3679Other treatment of blood in a by-pass of the natural circulatory system, e.g. temperature adaptation, irradiation ; Extra-corporeal blood circuits by absorption
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04Antibacterial agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01DSEPARATION
    • B01D39/00Filtering material for liquid or gaseous fluids
    • B01D39/14Other self-supporting filtering material ; Other filtering material
    • B01D39/16Other self-supporting filtering material ; Other filtering material of organic material, e.g. synthetic fibres
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01DSEPARATION
    • B01D39/00Filtering material for liquid or gaseous fluids
    • B01D39/14Other self-supporting filtering material ; Other filtering material
    • B01D39/20Other self-supporting filtering material ; Other filtering material of inorganic material, e.g. asbestos paper, metallic filtering material of non-woven wires
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3204Inorganic carriers, supports or substrates
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3206Organic carriers, supports or substrates
    • B01J20/3208Polymeric carriers, supports or substrates
    • B01J20/321Polymeric carriers, supports or substrates consisting of a polymer obtained by reactions involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3206Organic carriers, supports or substrates
    • B01J20/3208Polymeric carriers, supports or substrates
    • B01J20/3212Polymeric carriers, supports or substrates consisting of a polymer obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3214Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the method for obtaining this coating or impregnating
    • B01J20/3217Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond
    • B01J20/3219Resulting in a chemical bond between the coating or impregnating layer and the carrier, support or substrate, e.g. a covalent bond involving a particular spacer or linking group, e.g. for attaching an active group
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3251Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising at least two different types of heteroatoms selected from nitrogen, oxygen or sulphur
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3244Non-macromolecular compounds
    • B01J20/3246Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure
    • B01J20/3248Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such
    • B01J20/3255Non-macromolecular compounds having a well defined chemical structure the functional group or the linking, spacer or anchoring group as a whole comprising at least one type of heteroatom selected from a nitrogen, oxygen or sulfur, these atoms not being part of the carrier as such comprising a cyclic structure containing at least one of the heteroatoms nitrogen, oxygen or sulfur, e.g. heterocyclic or heteroaromatic structures
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268Macromolecular compounds
    • B01J20/3272Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01JCHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268Macromolecular compounds
    • B01J20/3272Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B01J20/3274Proteins, nucleic acids, polysaccharides, antibodies or antigens
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C02TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02FTREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F1/00Treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F1/38Treatment of water, waste water, or sewage by centrifugal separation

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Geology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Mechanical Engineering (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • External Artificial Organs (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Abstract

Un método para enlazar selectivamente y separar por lo menos un componente de un fluido corporal, el cual comprende: hacer pasar un fluido corporal, tal como sangre entera, a través de una matriz rígida integral de separación sin estar excluido por dicha matriz, teniendo dicha matriz una estructura porosa con un tamaño de poro que abarca desde 5 micrones hasta 500 micrones así como también una superficie activa que abarca desde 0, 5 cm2 hasta 10 m2, enlazando por lo menos un componente de fluido corporal por al menos un grupo funcional dispuesto en dicha matriz, por lo cual dicha matriz se obtiene mediante un proceso seleccionado del grupo que comprende los procesos de sinterizar, moldear y espumar.

Description

Separación mejorada.
La presente invención se refiere a mejoras en la remoción de componentes de sangre entera o de un fluido corporal. Más específicamente, la invención se refiere a un método en el cual se permite pasar sangre o fluido corporal a través de una matriz rígida de separación integral sin excluirse de la misma.
Los procesos inflamatorios tales como la sepsis son la mayor causa de morbilidad y mortalidad en humanos. Se estima que anualmente de 400.000 a 500.000 episodios de sepsis dan lugar a 100.000 hasta 175.000 muertes humanas sólo en los Estados Unidos. En Alemania se han notado tasas de sepsis de hasta 19% de pacientes ubicados en las unidades de cuidado intensivo. La sepsis también se ha vuelto la causa que conlleva a la muerte en las unidades de cuidado intensivo entre pacientes con enfermedades no traumáticas. A pesar de los avances importantes de las últimas décadas en el tratamiento de infecciones graves, la incidencia y mortalidad debido a la sepsis continúa aumentando.
Existen tres tipos principales de sepsis caracterizados por el tipo de organismo infectante. La sepsis Gram-negativa es la más común. La mayoría de estas infecciones es causada por Esherichia coli, klebsiella pneumoniae y pseudomonas aeruginosa. Los patógenos Gram-positivos, tales como los estafilococos y los estreptococos, son la segunda causa principal de sepsis. El tercer grupo en importancia incluye los hongos. Las infecciones por hongos constituyen un porcentaje relativamente pequeño de casos de sepsis, pero éstos dan lugar a una tasa alta de mortalidad.
Un mecanismo bien establecido en sepsis se relaciona con los componentes tóxicos de bacterias gram-negativas, es decir la estructura de pared celular lipopolisacárida (LPS, endotoxina), que se compone de un grupo ácido graso, un grupo fosfato y una cadena de carbohidratos.
Se han identificado varias de las respuestas de huésped a las endotoxinas, tales como la liberación de citoquinas que se producen localmente. En caso de una estimulación extensiva, sin embargo, existe un vertimiento sobre la sangre periférica y se obtienen efectos potenciales dañinos, tales como disfunción inducida de órganos.
Los mediadores clave de choque séptico son el Factor de Necrosis Tumorales (TNF-\alpha), interleuquina 1 (II-1) e interleuquina 17 (II-17), que se liberan mediante monocitos y macrófagos. Estos actúan de manera sinérgica causando una cascada de cambios fisiológicos que conducen a un colapso de circulación y fallo multiorgánico. En realidad, las altas concentraciones de TNF-\alpha pueden imitar los síntomas y resultados de la sepsis.
Normalmente, las endotoxinas se mantienen dentro del lumen del intestino. Por ejemplo, durante la desviación (by-pass) cardio-pulmonar la presencia de isquemia esplácnica o disoxia da lugar a disrupción o rompimiento de la barrera mucosa y la translocación (es decir, el transporte de endotoxinas del intestino al sistema circulatorio) de endotoxinas del lumen de la víscera al portal de circulación.
Los antibióticos de tipos variantes son ampliamente usados para prevenir y tratar infecciones. Sin embargo, para muchos antibióticos usados comúnmente se desarrolla una resistencia a antibióticos entre diversas especies de bacterias. Esto es particularmente cierto para la flora microbiana residente en hospitales, donde los organismos están bajo presión constante selectiva para desarrollar resistencia.
Por otra parte, en el hospital la alta densidad de pacientes potencialmente infectados y el contacto extenso de personal con personal y de personal con paciente facilita la difusión de organismos resistentes a antibióticos. Los antibióticos usados son los más económicos, los más seguros y los más fáciles de administrar y pueden no tener un espectro lo suficientemente amplio para suprimir ciertas infecciones.
Los antibióticos pueden tener una toxicidad de niveles variados causando alergias, interacciones con otras drogas y causando daños directos a los órganos principales (por ejemplo, hígado, riñón). Muchos antibióticos cambian también la flora intestinal normal que causan diarrea y una mala absorción nutricional.
Se conocen ciertos antibióticos para neutralizar la acción de endotoxinas, tales como la polimixina B. Este antibiótico se enlaza con la parte A lipídica de la endotoxina y neutraliza su actividad. La polimixina no se usa rutinariamente debido a su toxicidad. Solo se da a pacientes bajo supervisión constante y monitoreando su función renal.
Por otra parte, para superar algunas de las limitaciones inherentes a la inmunización activa contra componentes bacteriales, se han usado diversas técnicas para producir anticuerpos que enlazan la endotoxina. Se ha preparado un número grande de anticuerpos mediante inmunización de humanos con bacterias. Para desarrollar preparaciones más consistentes de anticuerpos terapéuticos, se han desarrollado numerosos anticuerpos monoclonales reactivos a LPS. Desafortunadamente, los estudios clínicos no han dado lugar a beneficios. Sin embargo, se debe notar que estos intentos se llevaron a cabo en humanos después del principio de los síntomas de sepsis. Se cree ampliamente que un tratamiento de anticuerpo anti-endotoxina, administrado después de la sepsis puede dar poco beneficio debido a que estos anticuerpos no pueden reversar la cascada inflamatoria iniciada por la endotoxina.
En JP 06022633 se muestra un adsorbente para anticuerpos antilipídicos que comprende un compuesto con un grupo funcional aniónico inmovilizado en un material poroso insoluble en agua. El material poroso puede ser agarosa, celulosa, dextran, poliacrilamida, vidrio, gel de sílice o un polímero duro hecho de un copolímero de estireno-divinilbenceno, y el material poroso se empaca como un lecho de partículas separadas en un dispositivo de separación.
Han sido preparados diferentes materiales absorbentes con la intención de retirar componentes de la sangre. En WO 01/23413 se muestra un adsorbente para retirar endotoxina el cual comprende un ligando inmovilizado sobre un medio soporte de fase sólida. Un medio de soporte preferido se encuentra en forma de perlas. Cuando está empacado en un dispositivo de separación, el medio soporte de fase sólida es lo suficientemente poroso como para permitir el paso de células de sangre entre las perlas.
En WO 00/62836 el material adsorbente tiene un tamaño y una estructura adaptados para retirar \beta-2 microglobulina de la sangre. El material adsorbente de este documento puede ser un polímero sintético macroporoso con una superficie de perlas y de poros modificada de tal manera que prevenga adsorción de proteína y plaquetas. Sin embargo, las perlas esféricas individuales del polímero se destruyeron mecánicamente a una carga de alrededor de 500 g, lo cual se obtiene en, por ejemplo, una columna empacada con las perlas. Una carga así da lugar a una baja de presión en la
columna.
Para reducir la baja de presión se ha preparado un absorbente en EP 464872, el cual comprende partículas de gel duro poroso insoluble en agua que tienen un límite de exclusión de 10^{6}-10^{9} Dalton, El lecho de gel se usa para remoción selectiva de lipoproteínas de sangre o plasma en tratamiento de circulación extracorpóreo.
De manera similar, en WO 01/23413 el material poroso de soporte para retirar la endotoxina son perlas con las que se puede llenar un contenedor y que tienen un tamaño suficiente para suministrar el espacio requerido entre las perlas empacadas en una columna o lecho de filtro. El material poroso de soporte pueden también ser fibras huecas de microfiltración o membranas planas laminadas para minimizar caídas de presión.
En EP 424698 se muestra un adsorbente para eliminar biomacro-moléculas, el cual consiste en un vehículo de partículas porosas esféricas que tienen un tamaño de partícula de 50-150 micrones y un límite de exclusión de por lo menos 105 Dalton. La polimixina B se acopla a las partículas con las que se llena un cartucho a usarse en un sistema para remoción extracorpórea de endotoxina de la sangre entera.
En estos sistemas tradicionales para retiro extracorpóreo de componentes tóxicos de la sangre, se llena primero un contenedor o cartucho con un líquido y las perlas porosas adsorbentes se introducen después. En US 6,408,894 se muestra un método que proporciona una distribución más uniforme y un empaque más denso de las perlas. El método involucra suministrar forzadamente una mezcla de líquidos y perlas en un contenedor de tal manera que el líquido haya sido exprimido de la mezcla y fuera del contenedor.
Así, una eliminación de células de sangre facilita el retiro de componentes presentes en plasma tal como se describe arriba, por ejemplo en WO 00/62836 ó WO 01/23413. Sin embargo, una técnica así involucra dos pasos de separación que podrían contribuir a un riesgo aumentado de activación celular adversa debido a bioincompatibilidad.
El propósito de la presente invención es suministrar un método nuevo para enlazar de manera selectiva y separar por lo menos un componente de la sangre entera o de los fluidos corporales, mediante el cual se eliminan los problemas arriba mencionados en conexión con procesos inflamatorios.
Otro propósito es suministrar un método así, mediante el cual el enlazamiento selectivo y la separación se pueden realizar sobre la sangre entera sin la necesidad de separar la sangre en plasma y células sanguíneas.
Otro propósito de la invención es suministrar un método que no sea dependiente del tamaño, es decir, los componentes de la sangre no se separan por medio de exclusión.
Un objetivo más de la invención es suministrar un método, mediante el cual se pueden obtener altas tasas de flujo en un dispositivo de separación sin caídas significativas de presión en el tiempo.
Otro propósito más es suministrar un método tal que no se someta la sangre a fuerzas de corte en un dispositivo de separación incluso a tasas altas de flujo mientras se mantienen una línea baja de presión para evitar daño a los vasos sanguíneos.
Estos objetivos se logran mediante la presente invención que tiene los rasgos característicos de la reivindicación 1. Otras ventajas de la invención se volverán aparentes de la reivindicación 24 y de las sub-reivindicaciones.
De acuerdo con la invención, se proporciona un método para enlazar y separar selectivamente por lo menos un componente de sangre entera o un fluido corporal. Se deja pasar la sangre o fluido corporal por una matriz rígida íntegra de separación sin ser excluida de allí, teniendo la matriz una estructura porosa con un tamaño de poro que abarque desde 5 micrones hasta 500 micrones y una superficie activa que abarca desde 0.5 cm^{2} hasta 10 m^{2}, enlazando por lo menos un componente de fluido corporal mediante por lo menos un grupo funcional dispuesto en dicha matriz, por lo cual dicha matriz se obtiene mediante un proceso seleccionado de un grupo que comprende: proceso de sinterizar, moldear y espumar.
En una realización preferida de la invención la matriz además comprende por lo menos un grupo funcional que ha sido introducido por medio de revestimiento y/o modificación de superficie de la estructura porosa. Esto da lugar a que la superficie activa obtenida, sola o en combinación con regiones no funcionarizadas de la misma, es capaz de enlazar selectivamente por lo menos un componente de sangre entera o fluido corporal. Los componentes a ser retirados pueden ser naturales así como no naturales, es decir un ligando específico, tal como un anticuerpo que se pega al componente.
Por otra parte, los grupos funcionales, obtenidos por medio de conversión selectiva directa o indirecta de la superficie de la estructura porosa, han sido usados además para inmovilización de ligandos. Sin embargo, los grupos funcionales de la estructura porosa se pueden utilizar tal como se usan en el método inventivo.
El tamaño de poro así como la superficie de la estructura porosa semejante a un esqueleto han sido adaptados para usarse en la matriz de separación del método inventivo en conexión con la purificación de sangre entera. Sin embargo, el método de acuerdo con la invención también se puede usar para retirar componentes de otros fluidos corporales así como también de soluciones acuosas. Es un aspecto importante de la invención que no se excluya de la matriz ningún componente ni ningún solvente durante un procedimiento de separación.
De acuerdo con la invención, la matriz integral rígida debe tener una superficie disponible de 0.5 cm^{2} hasta 10 m^{2}, y la densidad de la estructura de la matriz no es limitante para llevar a cabo el método inventivo.
En este contexto, el término "rígido" significa que la matriz no es flexible, no se flexiona o cede, pero es capaz de resistir una presión de por lo menos 0,5 bar. El término "integral" significa que la matriz con gran superficie de área es una entidad entera.
La estructura porosa de la matriz en el método de la invención está hecha de metal, óxido inorgánico, carbono, vidrio, cerámica, polímero sintético y/o polímero natural, o mezclas de los mismos. Las estructuras porosas sólidas de metal con tamaños de poro bien y grandes áreas de superficie bien definidos se pueden fabricar usando procesos de sinterización controlados estrictamente produciendo poros de tamaño uniforme.
Se han producido diferentes polímeros como un material poroso moldeado o extrudido con una estructura porosa que tiene el tamaño de poro deseado así como también un área grande de superficie para la matriz. Ellos también se han producido en calidad de espuma. Por ejemplo, los poliuretanos preparados a partir de isocianatos y otros compuestos orgánicos diversos tienen átomos activos de hidrógeno que han sido usados para producir productos de poliadición. Este hidrógeno activo puede provenir de compuestos bifuncionales o polifuncionales, tales como polialcoholes, poliaminas. Las reacciones con agua ocasionan aminas primarias que se han usado para inmovilización covalente de ligandos específicos.
Se ha usado una amplia variedad de metales y aleaciones, tales como acero inoxidable, níquel, titanio, monel, inconel, hastelloy y otros materiales especiales de metal. Los óxidos inorgánicos de gran área de superficie, especialmente alúmina y circonio, también se han utilizado con las mismas técnicas para producir materiales cerámicos con estructuras de poro definido. Similarmente, se pueden adquirir tales cerámicas así como vidrio sinterizado, que tienen tamaños de poro adecuado.
También se han usado otros materiales naturales rígidos, tales como sílice amorfa, por ejemplo zeolitas y roca de lava.
Materiales naturales e híbridos de los mismos, que se pueden usar como un material de matriz en el método de la invención son los polisacáridos, tales como la celulosa y otros materiales poliméricos de carbohidratos. Otros materiales poliméricos naturales apropiados son los poliaminoácidos, también aquellos que involucran aminoácidos sintéticos, ácido poliláctico, ácido poliglicólico y sus copolímeros con ácido láctico.
En este contexto el término híbrido abarca derivados de materiales naturales como por ejemplo diacetato de celulosa que es un derivado preferido polisacárido.
Los polímeros sintéticos adecuados para la matriz a ser utilizada en la presente invención son poliolefinas, tales como el polietileno, polipropileno, el polibutileno, el polimetilpenteno y copolímeros de acetato de etileno vinilo; polímeros vinílicos, tales como alcohol polivinílico, acetales polivinílico y polivinilpirrolidona; polímeros que contienen flúor, tal como politetrafluoretileno, copolímero fluorado de etileno-propileno, policlorofluoroetileno, polivinilfluoruro y fluoruro de polivinilideno; poliacrilatos, tales como polimetilmetacrilato, cianoacrilato, polyacrilonitrilo, y polimetacrilatos; poliamidas, tales como poliacrilamida; poliimidas, tales como polietileniminas; polistyreno y sus copolímeros, tales como poliestireno y polímeros de acrilonitrilo-butadieno-estireno; gomas de silicona; poliésteres/éteres; policarbonatos; poliuretanos; polisulfonatos; poliglicoles; polialquideoxidos tales como polietilenóxido, polipropilenóxido; y copolímeros o híbridos de los mismos.
En la realización preferida, por lo menos un grupo funcional se ha introducido en una estructura porosa de la matriz rígida de separación. Los grupos funcionales pueden ser de diferente tipo, es decir, de tipo aniónico, catiónico o no iónico. Los grupos funcionales de la estructura porosa se han usado para enlazar covalentemente substancias como péptidos/proteínas y ácidos biliares (por ejemplo, ácido deoxicólico), anticuerpos y fragmentos de los mismos así como también otras moléculas y substancias que tienen la habilidad de enlazar selectivamente endotoxinas y/o mediadores pro-inflamatorios.
Una modificación superficial, es decir, una funcionalización de superficie de una manera directa, se llevó a cabo mediante electrodeposición, electro-evaporación, deposición química de plasma, deposición de un flujo de plasma iónico o deposición de vapor químico (por ejemplo polimerización de plasma, deposición de polímero con superficie aumentada por plasma). Los métodos de modificación de superficie son conocidos per se y se encuentran en "Modificación de superficie por plasma y polimerización por plasma" por N. Inagaki, 1996, Technomic Publishing, Lancaster, Estados Unidos de América. Por medio de estos métodos han sido tratados diferentes estructuras tridimensionales de matriz alcanzándose una modificación muy homogénea de la superficie activa.
Polimerización de monómeros bifuncionales de dobles enlaces acrílico o alílicos con grupos polares como OH, NH_{2}, CN y COOH han sido usados para producir polímeros de plasma con alta densidad de los grupos funcionales. Por ejemplo, se ha llevado a cabo una funcionalización de superficie de las superficies inorgánicas y orgánicas en un medio de plasma de compuestos alílicos, tales como la alilamina.
Se han hecho también posibles las superficies poliméricas en medios de plasma de NH_{3}, O_{2} ó CO_{2}, las cuales ocasionan cualquiera de los grupos funcionales =NH, -NH_{2}, =CN, -OH, o -COOH. Otros ejemplos de gases usados son bien conocidos en el arte.
Un procesamiento plasma-químico se ha combinado también con la síntesis química clásica, aumentándose significativamente la selectividad de modificaciones de superficie para polímeros. Un enfoque ha sido aplicar una funcionalización específica de superficie por gas de plasma inmediatamente seguida por una unificación química de los grupos funcionales de plasma coexistentes.
Otra forma de introducir los grupos funcionales es por medio de una funcionalización directa, es decir, revistiendo la superficie con un material polimérico. En este contexto el polímero sintético o natural se ha revestido sobre un metal de gran superficie, óxido inorgánico, carbón, vidrio, cerámica, así como también otro polímero sintético adecuado y/o polímero natural o mezclas de los mismos.
Muchos de los polímeros mencionados arriba, especialmente aquellos sin grupos funcionales, tales como el polietileno, polipropileno, politetrafluoretileno, etc. necesitan más tratamiento para alterar sus propiedades de superficie. Así, un tratamiento de plasma o corona, como se menciona arriba, de la superficie polimérica generará un grupo funcional muy único, como el grupo hidroxilo, el carbonilo, el carboxilo, el amino y el imino, etc, los cuales están pegados covalentemente a la superficie.
El revestimiento también se ha llevado a cabo por medio de adhesión o adsorción de una substancia polimérica que tiene grupos funcionales. Ejemplos de tales substancias son la polilisina, poliarginina y la polietilenimina.
Por ejemplo, usando una técnica de plasma, se obtuvieron substancias similares a polietilenimina sobre la superficie porosa. Cuando se usa una matriz de separación en el método de acuerdo con la invención para enlazar selectivamente y separar por lo menos un componente de sangre entera o de un fluid corporal, tanto las regiones hidrofílicas como las hidrofóbicas de los componentes proteínicos de la sangre pueden interactuar con la superficie procesada para retirar los componentes deseados. Después de la funcionalización cuando la superficie de la matriz para enlace y separación selectivos comprende una poliolefina, por ejemplo un polietileno o polipropileno, las cargas positivas de los grupos amino se usan de manera similar para interacciones electrostáticas y las regiones hidrofóbicas se usan para interacciones hidrofóbicas. Este enfoque se usa en el método de la invención para el enlace selectivo de regiones diferentes de lipopolisacáridos, por ejemplo.
Se pueden funcionalizar polímeros y metales que tienen hidroxilos reactivos, por ejemplo, por medio de la silanización.
Por consiguiente, diversos grupos funcionales diferentes se han acoplado covalentemente a una estructura de matriz porosa de gran superficie. Después de una funcionalización directa o indirecta, la estructura porosa puede tener tanto regiones hidrofílicas como hidrofóbicas, las cuales pueden interactuar con los diferentes componentes de la sangre. Así, las propiedades características de una substancia de interés se utilizan al preparar la superficie a ser usada en el método de acuerdo con la invención.
Preferiblemente, los grupos funcionales de la superficie activa son sulfihidrilos, carboxilatos, aminas, aldehídos, cetonas, hidroxilos, halógenos, hidrazidas e hidrógeno activo.
En otra realización preferida se ha acoplado un ligando a por lo menos un grupo funcional de la estructura porosa de gran superficie de una manera covalente. En este contexto, un ligando es una substancia con alta afinidad por el componente que se va a retirar de la sangre entera o de un fluido corporal. Así, el ligando se usa para aumentar las propiedades de adsorción y la eficacia de enlazamiento.
El ligando puede ser una proteína, preferiblemente una proteína recombinante, un péptido, un anticuerpo o un fragmento del mismo, un carbohidrato, por ejemplo un polisacárido, una hormona, un antioxidante, una glicoproteína, una lipoproteína, un lípido, una vitamina soluble en grasa, por ejemplo vitamina E, un ácido biliar, un colorante reactivo, alantoina, ácido úrico o polimixina o combinaciones de los mismos.
Un ácido biliar adecuado es ácido deoxicólico que es una substancia hidrofóbica endógena. Un ácido biliar así puede acoplarse ya sea directamente con los grupos funcionales, por medio de un espaciador, o acoplarse por medio de una molécula grande y se usa luego para retirar endotoxinas de la sangre, fluidos corporales y soluciones acuosas como en el método de acuerdo con la invención.
En este contexto un espaciador es una molécula, grande o pequeña, la cual conecta al ligando con la superficie de la estructura porosa.
Por ejemplo, si en el método de la invención la estructura porosa de la matriz de separación comprende una poliolefina que tiene un grupo amino añadido, este grupo puede tener una albúmina acoplada al mismo y a su vez por lo menos una fracción de ácido biliar acoplada a esta molécula grande.
De esa manera, la invención también se refiere a un nuevo uso de una fracción de ácido biliar inmovilizada sobre un soporte para eliminar un componente de una solución acuosa que comprende la misma. Preferiblemente, la fracción de ácido biliar es una fracción de ácido deoxicólico.
Por consiguiente, un soporte sólido adecuado para la inmovilización de la fracción de ácido biliar es una matriz rígida integral de separación que tiene una estructura porosa con un tamaño de poro que abarca desde 5 micrones hasta 500 micrones, preferiblemente desde 70 micrones hasta 170 micrones y una superficie activa que abarca desde 0,5 cm^{2} hasta 10 m^{2}.
También se prefiere que el ligando de la matriz en el método inventivo sea albúmina o una albúmina producida por medio de tecnología recombinante, que se puede usar en lugar de albúmina de suero, polimixina B (es decir, grupos cargados sobre una estructura hidrofóbica) o ácido deoxicólico.
Así, un ligando también puede actuar como un espaciador en el método de acuerdo con la invención. Por ejemplo, también ha sido posible primero pegar covalentemente una proteína humana recombinante u otra molécula grande (por ejemplo, ácido hialurónico) a la estructura porosa, que permite un enlazamiento consiguiente del ligando específico para el componente que va a ser retirado.
Si es necesario, se acopla un reticulador entre por lo menos un grupo funcional y el ligando de una manera covalente. En este contexto, un reticulador es un elemento que enlaza covalentemente el ligando con la estructura porosa de soporte, siendo el elemento un separador al ligar el ligando a una distancia de la misma estructura porosa. Tales separadores moleculares se conocen en el arte. Se han introducido para incrementar la afinidad por el componente a enlazarse y separarse de sangre entera o de fluidos corporales suministrando una mejor disponibilidad a los ligandos. La biocompatibilidad de la superficie de la estructura porosa de la matriz también se incrementa por la introducción de estos separadores moleculares.
Un reticulador/separador puede comprender un reticulador de longitud cero, solo o en combinación con un reticulador de intermedio, estando el complejo final obtenido enlazado en virtud de substancias químicas que añaden estructuras a la substancia reticulada. Estos reticuladores intermedios pueden ser del tipo homobifuncional.(por ejemplo, dialdehidos), heterobifuncional (por ejemplo aminoácidos) o del tipo reticulador trifuncional.
El principal propósito del separador es incrementar la biodisponibilidad del ligando específico utilizado.
El separador puede ser por ejemplo un silano, un diisocianato, un glicolato, un polietilenglicol, un reactivo de succinimidilo, una dihidrazina, ácido adipídico, una diamina, un amino ácido, un poli u oligoaminoácido, un poliaminoácido, un péptido o una proteína. La proteína es preferiblemente una proteína humana recombinante.
Los grupos funcionales del reticulador se diseñan para reaccionar con grupos amino (Lys, Arg), con sulfihidrilos (Cys), o con carboxilos (Asp, Glu), para citar algunos ejemplos.
En conexión con la química de grupos reactivos, se hace referencia a las Técnicas Bioconjugadas (Bioconjugate Techniques), Greg T Hermanson, Academic Press, USA 1996.
Así, la superficie de la matriz activa porosa es capaz, en el método inventivo, de retirar endoxinas, por ejemplo, solas o en combinación en regiones no funcionarizadas de la superficie disponible de la estructura porosa. La superficie activa también se puede usar como una herramienta para inmovilización covalente de químicos, tales como biomoléculas como aminoácidos, polipéptidos y anticuerpos para elevar selectivamente la eliminación de tales componentes específicos.
Una matriz de separación destinada a retirar selectivamente por lo menos un componente de sangre entera o de fluidos corporales se puede producir con una estructura porosa de un cierto tamaño de poro y/o cierto rango de tamaño de poro en dependencia de la aplicación destinada. Preferiblemente, la estructura de poro debe permitir el paso de células sanguíneas. Por consiguiente, ciertos tipos de células sanguíneas también se pueden retirar de sangre entera por medio del método de la invención. Tales células enfermas o células con receptores de superficie específicos, como por ejemplo células fagocitantes activadas.
La estructura de metal puede ser magnética para aplicaciones especiales. Una matriz magnética se puede obtener por ejemplo mediante revestimiento de magnetita sinterizada con un polímero, por ejemplo polietileno. Una remoción eficiente de células se puede llevar a cabo permitiendo que los anticuerpos, con una etiqueta de hierro magnético dextran, se peguen a células específicas en la sangre.
El tamaño de poro debe estar dentro del rango desde 5 micrones hasta 5000 micrones, preferiblemente desde 70 micrones hasta 170 micrones, más preferiblemente desde 80 micrones hasta 100 micrones para que se mantengan latas tasas de flujo sin daño celular o exclusión celular. Así, la separación realizada con el método de acuerdo con la invención no se basa en una distribución de tamaños de los componentes. Virtualmente todos los componentes de sangre entera o de un fluido corporal pueden ser eliminados por medio del método inventivo.
Después de retirar uno o más de los causantes tóxicos primarios, es decir una endotoxina, otros causantes tóxicos secundarios se pueden retirar. Los causantes secundarios pueden ser citoquinas (por ejemplo, TNF-\alpha), interleuquinas (por ejemplo, II-1), oxígeno reactivo y radicales nirogenados, etc.
Al llevar a cabo el método de acuerdo con la invención, una o más matrices de separación se protegen dentro de una carcasa, que puede tener diversas formas y diferentes y/o variables entradas y salidas dependiendo de la aplicación. Un dispositivo así puede entonces usarse para retirar endotoxina y/o citoquina y/o neutralizar citoquina. Esto se lleva a cabo haciendo pasar sangre u otros fluidos corporales a través del dispositivo, aplicado de manera intra-, para- o extra-corporalmente, sin excluir al líquido de la matriz rígida íntegra de separación, el cual está allí. La superficie activa de la estructura porosa, los grupos funcionales y/o los ligandos específicos sobre ella enlazan entonces selectivamente y separan por lo menos un componente del líquido. El dispositivo puede ventajosamente usarse también para retirar endotoxinas de soluciones acuosas.
Un rasgo importante del método inventivo es que se pueden cubrir todos los aspectos del choque séptico, es decir tanto los causantes tóxicos primarios como los secundarios se pueden retirar por medio del método inventivo.
Se hace referencia a la figura 1 en conexión con la realización del método de acuerdo con la invención. Un dispositivo 1 comprende una carcasa 2, estando la carcasa (o cartucho) del dispositivo integrado en una circulación cerrada, en la cual la sangre entera o los fluidos corporales se hacen circular por medio de una bomba. En la carcasa 2 está dispuesta por lo menos una matriz de separación 5a, 5b, ..., cada una destinada a retirar selectivamente un componente de sangre entera o de fluidos corporales. La carcasa 2 se provee de una entrada 3 y una salida 4, los sitios de las cuales no son de importancia mientras se obtenga un flujo adecuado dentro de una o más matrices de separación y la carcasa. La bomba se dispone preferiblemente corriente arriba de la entrada 3.
De esta manera se obtiene un dispositivo que puede mantener tasas de flujo desde 5 ml/h hasta 6 000 ml/min sin una caída significativa de presión. Al aplicarse extracorporalmente se obtiene una presión en la línea de no más de 300 mm de Hg desde la bomba hasta la cánula incluso a tasas de flujo muy altas.
La matriz rígida integral de separación se puede producir en diferentes formas a ser usadas en el método inventivo. Se puede diseñar por ejemplo como un disco, una barra, un cilindro, un anillo, una esfera, un tubo, un tubo hueco, una lámina plana u otras formas moldeadas.
Puesto que el flujo dentro de cada matriz de separación es dependiente de su porosidad, se puede controlar el tiempo de contacto de los componentes en sangre o en un fluido corporal con la superficie de contacto. Por otra parte, se puede crear un gradiente de flujo deseado dentro de un dispositivo de separación cambiando la porosidad y configuración de las matrices individuales de separación que allí se encuentran.
En las figuras 2 y 3 se muestran diferentes realizaciones esquemáticas de dispositivos, que se pueden usar al realizar el método de acuerdo con la invención. Las flechas indican el flujo de sangre o fluido corporal dentro de las matrices individuales de separación y las carcasas para ellas; las flechas grandes indican una tasa mayor de flujo que las flechas pequeñas. En estos ejemplos de configuraciones diferentes, las matrices de separación pueden tener las mismas porosidades o diferentes porosidades, con o sin el mismo tipo o diferente tipo de grupos funcionales o ligandos para retirar uno o varios componentes de sangre o de un fluido corporal.
Las matrices de separación se integran preferiblemente con las carcasas (que tienen cada una entrada 3 y una salida 4) para asegurar que no se impida entrar a líquido o componentes allí presentes a la matriz o matrices, es decir que sean excluidos de allí. En la figura 2 (a) y (b) se dan ejemplos de una matriz de separación 5 dentro de una carcasa 2, siendo la matriz de diferentes configuraciones. En la figura 2 (c) y (d) se muestran ejemplos de dos matrices de separación 5a y 5b dentro de una carcasa 2. En el dispositivo de la figura 2 (c) un revestimiento impermeable 6, tal como una piel aplicada, en la periferia externa de la matriz de separación 5a asegura que todo el material suministrado al dispositivo pasará por esta matriz entera. En el dispositivo de la figura 2 (d), por otra parte, algo del material suministrado tendrá un tiempo más corto de residencia en la matriz de separación 5a que en la matriz de separación 5b, y
viceversa.
En la figura 3 cada dispositivo comprende varias matrices de separación 5a-5g. En la figura 3 (a) una pared de tabique 7 asegura un flujo a través de todas las matrices. Las matrices de separación se pueden posicionar lateralmente o transversalmente en relación con su dirección longitudinal, tal como en la s figuras 3 (b) y (c), respectivamente. En la figura 3 (d) el dispositivo comprende matrices de separación de diferentes tamaños.
En conclusión, el método inventivo se puede usar con un dispositivo aplicado intra- para- o extra-corporalmente o puesto solo, el cual de esa manera es capaz de reducir la circulación de endotoxinas y mediadores potencialmente dañinos por inflamatorios, especialmente TNF-\alpha, IL-1 e IL-17, preferiblemente en sangre. También es posible retirar selectivamente endotoxinas de otras soluciones acuosas. Se considera que los componentes se enlazan con la superficie activa de la matriz rígida integral de separación por medio de la adhesión.
Ejemplos
Ahora la invención seguirá describiéndose e ilustrándose por referencia a los siguientes ejemplos, que han sido seleccionados cuidadosamente para abarcar la invención. Por consiguiente, estos ejemplos no deben ser interpretados de ninguna manera como limitantes de la invención.
Modificaciones de superficie Ejemplo 1
La superficie de una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 350 micrones y una superficie activa de 10 cm^{2}, fue modificada por medio de deposición de vapor químico aumentada con plasma usando O_{2} (Plasma Science, Estados Unidos de América, Tipo PS 0350 Plasma Surface Treatment System (Sistema de tratamiento de superficie con plasma)).
La formación de grupos hidroxilo sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se ensayó con la prueba de Dye, confirmándose su hidrofilicidad.
Ejemplo 2
La superficie de una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 100 micrones y una superficie activa de 20 cm^{2}, se modificó por medio de deposición de vapor químico aumentada con plasma usando O_{2} (Plasma Science, Estados Unidos de América, Tipo PS 0350 Plasma Surface Treatment System (Sistema de tratamiento de superficie con plasma)).
La formación de grupos carboxílicos y la cantidad sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó mediante conversión hacia ácidos hidroxámicos. En este contexto todos los ácidos hidroxámicos dan un color rojo o violeta con cloruro férrico en solución ácida, tal como se describe en Feigel et al.; Microchemie 15:18, 1934.
Ejemplo 3
La superficie de una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 170 micrones y una superficie activa de 0,04 m^{2}, se modificó por medio de polimerización en plasma usando alilamino (Plasma Science, Estados Unidos de América, Tipo PS 0350 Sistema de tratamiento de superficie con plasma).
La cantidad de aminas primarias sobre la estructura porosa de la matriz obtenida se determinó por medio de ensayo con ácido sulfónico de trinitro benceno (TNBS).
Ejemplo 4
La superficie de una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 70 micrones y una superficie activa de 0,26 m^{2}, fue modificada por medio de polimerización con plasma usando ácido acrílico (Plasma Science, EE.UU, Tipo PS 0350 Sistema de tratamiento de superficie con plasma).
La cantidad de grupos hidroxilo sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se ensayó como se describe en el ejemplo 2.
Ejemplo 5
La superficie de una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 5 micrones y una superficie activa de 0,9 m^{2}, se modificó por medio de polimerización en plasma usando NH_{3} (Plasma Science, USA, Tipo PS 0350 Sistema de tratamiento de superficie con plasma).
La cantidad de aminas primarias de la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se ensayó como se describe en el ejemplo 3.
Ejemplo 6
La superficie de una matriz de politetrafluoroetileno, PTFE (W.L. Gore & Associates Inc., USA), que tiene una porosidad de 10 micrones y una superficie activa de 100 cm^{2}, fue modificada por medio de deposición de vapor químico aumentada con plasma usando NH_{3} (Plasma Science, USA, Tipo PS 0350 Sistema de tratamiento de superficie con plasma).
La cantidad de aminas primarias sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida fue ensayada como se describe en el ejemplo 3.
Ejemplo 7
La superficie de una matriz de poliestireno poroso (Dow Chemical, Estados Unidos), que tiene una porosidad de 10 micrones y una superficie activa de 300 cm^{2} fue modificada por medio de deposición de vapor químico aumentada con plasma usando CO_{2} (Plasma Science, USA, Tipo PS 0350 Sistema de tratamiento de superficie con
plasma).
La cantidad de grupos carboxílicos sobre la estructura porosa de la matriz obtenida se ensayó como se describe en el ejemplo 2.
Ejemplo 8
La superficie de una matriz de poliuretano poroso (Polymers Unlimited, Suecia), que tiene una porosidad de 80 micrones y una superficie activa de 100 cm^{2}, fue modificada por medio de una solución al 2% de un silano alcoxi aldehídico, (Art No. PSX 1050, United Chemical Technologies Inc., Estados Unidos) en 95% de etanol. El pH de la solución se ajustó a pH 5,5 con ácido acético y la solución se difunde a través de la matriz, la cual se incubó por una noche a temperatura ambiente y luego se lavó con suero fisiológico al 0,9%.
La funcionalidad de aldehído de la matriz obtenida se evaluó usando una aceleración catalítica de la oxidación de p-fenilendiamina con peróxido de hidrógeno, siendo oxidad la p-fenilendiamina por el peróxido de hidrógeno en una solución ácida, conocida como la base de Bandrowski.
Ejemplo 9
La superficie de una matriz de un silicona porosa (Nusil, Francia), que tiene una porosidad de 200 micrones y una superficie active de 0,5 m^{2}, se modificó por medio de una solución al 2% de una amino-silano (Art No. 0750, United Chemical Technologies Inc., Estados Unidos) en etanol al 95%. La solución se difundió a través de la matriz, la cual se incubó por una noche a temperatura ambiente y se lavó finalmente con suero fisiológico al 0,9%.
La cantidad de aminas primarias en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida fue ensayada como se describe en el ejemplo 3.
Revestimiento por medio de enlace covalente Ejemplo 10
Se disolvió poli-lisina (200 mg) en 10 ml de una solución de carbonato de sodio de 50 mM y se sumergió en la solución una matriz de policarbonato poroso con una porosidad de 100 micrones (MicroPore Plastics, USA) y se mantuvo a 4°C por 24 horas para obtener un enlace covalente entre la poli-lisina y la matriz de policarbonato. Esta matriz porosa se lavó finalmente con agua destilada en exceso.
La cantidad de aminas primarias sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se ensayó como se describe en el ejemplo 3.
Ejemplo 11
La matriz de polietileno poroso obtenida de acuerdo con el ejemplo 4 se difundió con una solución acuosa de 1-ciclohexil-3-(2-morfolinoetil)carbodiimida meto-p-toluenesulfonato (WCCM) (Aldrich) a una tasa de flujo de 5 ml/min en un circuito cerrado a temperatura ambiente por 6 h. Luego se enjuagó con agua y finalmente se adicionó una solución de polietilenimina (Sigma) (10 mg/ml, pH 7.0) y se incubó la matriz por una noche.
La cantidad de aminas primarias sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se ensayó como se describe en el ejemplo 3.
Ejemplo 12
La matriz de polietileno porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 3 se conjugó usando glutardialdehído al 1,0% en un buffer de fosfatote 0,2M, pH 7,5 y difundido a una tasa de flujo de 1 ml/min por 6 horas a temperatura ambiente. La matriz se lavó luego con buffer antes de la incubación con solución de ácido hialurónico (2 mg/ml) por 16 horas a temperatura ambiente. Se retiró finalmente el exceso de ácido hialurónico.
El contenido de ácido hialurónico sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se verificó y determinó con Alcian Blue (Sigma)
Revestimiento por medio de adhesión Ejemplo 13
Una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 70 micrones y una superficie activa de 0,18 m^{2}, fue difundida a una tasa de flujo de 1 ml/min e un circuito cerrado por 16 horas a temperatura ambiente con solución de ácido hialurónico de 2 mg/ml (BioHyos, Sweden, 12 106 Da) a un pH 3,3, el cual se ajustó con HCl de 0,1 M.
El contenido de ácido hialurónico en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se verificó tal como en el ejemplo 12.
Ejemplo 14
Una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 70 micrones y una superficie activa de 7.0 m^{2}, fue colocada en un tubo de vidrio. El tubo, con la matriz porosa allí, se lleno con una solución de poli-lisina al 0,13% (Sigma) en 350 ml de agua y se ajustó el pH a pH 3,3 con HCl de 0,1 M. Entonces la solución de polilisina se recirculó a través de tubo con su matriz de filtro por 16 horas a temperatura ambiente a una tasa de flujo de <5 ml/min. La matriz porosa finalmente se enjuagó con agua de ósmosis inversa.
La cantidad de aminas primarias sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida fue ensayada como se describe en el ejemplo 3.
Ejemplo 15
Una matriz de polietileno poroso (Porex Technologies, Alemania), que tiene una porosidad de 70 micrones y una superficie active de 3,4 m^{2}, fue colocada en un tubo de vidrio. El tubo con la matriz porosa allí se llenó con una solución de Recombumin™ (Albúmina de Suero Humano Recombinante, Hoechst-Pharma, USA) al 0.2% en 350 ml de agua de ósmosis inversa y después ajustada a pH 3,3 con HCl de 0,1 M.
Luego, la solución de Recombumin™ se recirculó a través del tubo con su matriz de filtro por 16 horas a temperatura ambiente usando una bomba a una tasa de flujo de < 5 ml/min. La matriz porosa se enjuagó finalmente con agua de ósmosis inversa.
El contenido de proteína de superficie sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó usando Coomassie Brilliant Blue (BioRad, USA).
Ejemplo 16
La matriz de polietileno poroso obtenida de acuerdo con el ejemplo 4 se hace pernear con una solución de polietilenimina (Sigma), 10 mg/ml, por una noche a una tasa de flujo de 5 ml/min en un circuito cerrado. Luego, la matriz porosa se enjuagó con agua.
La cantidad de aminas primarias en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se ensayó como se describe en el ejemplo 3.
Conjugación directa de ligandos Ejemplo 17
La matriz de polietileno poroso obtenida de acuerdo con el ejemplo 5 se conjugó con deoxicolato (DOC) usando una solución acuosa de WCCM. Se adicionó una solución de 300 ml de dimetilformamida (DMF) (Sigma) al 40% en agua, la cual contenía 1 mmol de deoxicolato de sodio, al policarbonato poroso revolviendo mientras se ajustaba el pH con HCl de 0,3 M a un pH 4,8. Una solución de WCCM de 6 mM en DMF:agua (1:1,8) se adicionó luego por un período de 10 minutos. La suspensión se mantuvo a un pH 4,8 por 3 horas mediante la adición de HCl de
0,3 M.
El contenido de DOC sobre la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó usando un Kit de ácido biliar (Sigma).
\newpage
Ejemplo 18
La matriz de polietileno porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 3 se conjugó usando glutardialdehído al 12% en búfer de fosfato de 0,15 M, pH 7.0 por 24 horas a temperatura ambiente. La matriz se lavó entonces con búfer de fosfato de 0,15 M y luego se adicionaron anticuerpos anti CD14 (DAKO Dinamarca) a una concentración de 1 mg/ml e incubado a 8°C por 24 horas. La reducción siguiente con cianoborohidruro de sodio se realizó para producir enlaces estables de amina secundaria.
El contenido de anticuerpo en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó directamente por medio de espectroscopia UV de la solución de búfer anticuerpo antes y después de la incubación con la matriz porosa.
Ejemplo 19
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 8 se lavó con búfer de fosfato de 0,15 M y luego se adicionó un receptor IL-1 recombinante (Kineret, Amgen, USA) a una concentración de 1 mg/ml y se incubó a 8°C por 24 horas. La reducción siguiente con cianoborohidruro de sodio se realizó para producir enlaces estables de amina secundaria.
El contenido de receptor IL-1 en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó indirectamente por medio de espectroscopia UV de la solución de búfer receptor IL-1 antes y después de la incubación con la matriz porosa.
Ejemplo 20
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 5 se conjugó usando glutardialdehído al 1,0% y búfer de fosfato de 0,2 M, pH 7,5. La matriz se incubó con esta solución por 3 horas. Después de lavar con búfer de fosfato la matriz se incubó en una solución de Polimyxina B sulfato (Sigma), 1 mg/ml, por una noche bajo circulación. La matriz se lavó finalmente con un búfer de fosfato de 0,1 M, pH 7,4.
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 2 se conjugó con un receptor recombinante TNF-\alpha(Enbrel, Wyeth, Reino Unido) a una concentración de 5 mg/ml en búfer de ácido 2-(N-morfolino)etanosulfónico (MES) de 0.1 M, (Sigma), pH 4.8. Treinta mg/ml de una solución acuosa de WCCM se adicionaron y la matriz se incubó por una noche a 8°C. La matriz finalmente se lavó con búfer fosfato de 0,1 M, pH 7,4.
El contenido de receptor TNF-\alpha en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida de determinó indirectamente por medio de espectroscopia UV de la solución de búfer de receptor TNF-\alpha antes y después de la incubación con la matriz porosa.
Ejemplo 22
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 3 conjugó con un anticuerpo antihumano
TNF-\alpha (Sigma) usando un glutardialdehído al 1.0% en un búfer de fosfato de 0,2 M, pH 7,5. La matriz se incubó con la solución búfer de anticuerpo TNF-\alpha por 3 horas. Después de lavar la matriz porosa con búfer de fosfato, se adiciona anticuerpo antihumano TNF-\alpha (1 mg/ml) en búfer de fosfato y se incuba a temperatura ambiente por 6 horas bajo recirculación a una tasa de flujo de 1 ml/min. La matriz se lavó finalmente con búfer de fosfato de 0,1 M,
pH 7,4.
El contenido de anticuerpo TNF-\alpha en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó indirectamente por medio de espectroscopia UV de la solución de búfer de anticuerpo TNF-\alpha antes y después de la incubación con la matriz porosa.
Ejemplo 23
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 5 se conjugó con proteína humana bactericida de permeabilidad incrementada (BPI) (Wieslab, Sweden) a una concentración de 2 mg/ml en un búfer de MES de 0,1 M, pH 4,8. Se adicionó una solución acuosa de WCCM a esta matriz a una concentración de 15 mg/ml y se incubó la matriz por una noche a 8°C. La matriz se lavó finalmente con búfer de fosfato de 0,1 M, pH 7,4.
El contenido de BPI en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó indirectamente por medio de espectroscopia UV de la solución búfer de BPI antes y después de la incubación con la matriz porosa.
Ejemplo 24
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 15 se incubó en una solución de DOC en búfer MES de 0,1 M, pH 4,8, a una concentración de 1 mg/ml. Luego se adicionó una solución acuosa de WCCM y la matriz se incubó por una noche a 8°C. La matriz se lavó finalmente con búfer de fosfato de 0,1 M, pH 7,4.
El contenido DOC en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó tal como en el ejemplo 17.
Conjugación de ligandos con el separador Ejemplo 25
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 3 se activó con glutardialdehído al 1,2% en búfer de fosfato de 0,2 M, pH 7,0 por 24 horas a temperatura ambiente. La matriz se lavó con búfer y posteriormente se incubó por 24 horas en 1,6-diaminohexano (DAH) (Sigma), 50 mg/ml, en búfer de fosfato de 0.2 M, pH 7.0. Después se adicionó cianoborohidruro de sodio (Sigma) de 10 mg/ml a la solución. La matriz porosa se lavó con búfer de fosfato de 0,1 M y luego se incubó en una solución de DOC (1 mg/ml) en búfer MES de 0,1 M, pH 4,8. Luego se adicionó una solución acuosa de WCCM y se incubó la matriz por una noche a 8°C. La matriz se lavó finalmente con búfer de fosfato de 0,1 M, pH 7,4.
El contenido de DOC en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó tal como en el ejemplo 17.
Ejemplo 26
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 5 se activó por 24 horas a temperatura ambiente con glutaraldehído al 1,2% en búfer de fosfato de 0,2 M, pH 7,0. La matriz se lavó con búfer y se incubó por 24 horas con dihidrazida atípica (Aldrich) a una concentración de 10 mg/ml en búfer de fosfato de 0,2 M, pH 7,4. Luego se adicionaron 10 mg/ml de cianoborohidruro de sodio (Sigma) a la solución.
La matriz porosa se lavó con búfer de fosfato de 0,1 M y se incubó luego con una solución de DOC a una concentración de 1 mg/ml en búfer MES de 0,1 M, pH 4,8. Luego se adicionó una solución de WCCM y se incubó la matriz por una noche a 8°C. La matriz se lavó finalmente con búfer fosfato de 0,1 M, pH 7,4.
El contenido de DOC en la superficie de la estructura porosa de la matriz obtenida se determinó tal como en el ejemplo 17.
Ejemplo 27
La matriz obtenida de acuerdo con el ejemplo 10 se conjugó con DOC usando una solución acuosa de WCCM. A la matriz porosa de policarbonato se adicionó revolviendo una solución de agua de 300 ml de DMF al 40% (Sigma) que contiene 1 mmol de deoxicolato de sodio. El pH de la solución se ajustó a 4,8 con HCl de 0,3 M. Una solución de 6 mM de WCCM en DMF:agua (1:1,8) se adicionó por un período de 10 minutos y se mantuvo la suspensión a un pH 4,8 por 3 horas mediante adición periódica de 0,3 M de HCl. Luego se mantuvo a temperatura ambiente por 24 horas.
El contenido de DOC en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó tal como en el ejemplo 17.
Ejemplo 28
La matriz obtenida de acuerdo con el ejemplo 14 se activó por 10 horas a temperatura ambiente con glutardialdehído al 1,2% en búfer fosfato de 0,2 M, pH 7,0, y luego se enjuagó con cantidades excesivas de búfer. Se introdujo en la matriz porosa polietilenimina (Sigma) a una concentración de 10 mg/ml en búfer de bicarbonato de 0,1 M, pH 8,0; y la matriz se incubó con la solución por 16 horas.
Luego se lavó la matriz con búfer y se conjugó con DOC usando una solución acuosa de WCCM. Se adicionó revolviendo una solución de 300 ml 40% de DMF en agua que contiene 1 mmol de deoxilato de sodio a la matriz porosa. El pH se ajustó a 4,8 con HCl de 0,3 M. Se adicionó luego una solución de 6 mM de WCCM en DMF:agua (1:1,8) por un período de 10 minutos. La suspensión se mantuvo en pH 4,8 por 3 horas mediante la adición periódica de HCl de 0,3 M. Luego se mantuvo a temperatura ambiente por 24 horas.
El contenido de DOC en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó tal como en el ejemplo 17.
Ejemplo 29
La matriz polietilénica porosa obtenida de acuerdo con el ejemplo 3 se activó por 24 horas a temperatura ambiente con glutardialdehído al 1,2% en búfer fosfato de 0,2 M, pH 7,0. La matriz se lavó luego con el búfer y se incubó por 24 horas con 1,6-diaminohexano (DAH) (Sigma) a una concentración de 50 mg/ml en búfer fosfato de 0,2 M, pH 7,0. La matriz porosa se lavó luego con búfer fosfato de 0,1 M y se incubó por 12 horas a 8°C como una suspensión en una solución del receptor de TNF-\alpha (Enbrel, Wyeth, UK) a una concentración de 10 mg/ml en búfer fosfato de 0,1 M, pH 7,4. Luego a la suspensión se adicionó una solución de cianoborohidruro de sodio (Sigma) a una concentración de 10 mg/ml. La matriz finalmente se lavó con búfer fosfato de 0,1 M, pH 7,4.
El contenido de receptor TNF-\alpha en la superficie de estructura porosa de la matriz obtenida se determinó indirectamente por medio de espectroscopia UV de la solución búfer del receptor TNF-\alpha antes y después de la incubación con la matriz porosa.
Enlazamiento selectivo y separación de los componentes de la sangre
Las separaciones de célula se llevaron a cabo permitiendo que la sangre entera pase por un filtro de una matriz con forma de disco que tiene una superficie activa de 0,02 m^{2}.
La remoción de las endotoxinas y citoquinas se realizó con el sistema de prueba mostrado en la figura 4. Se conectó un contenedor 8, lleno con hasta 2 L de sangre entera o plasma, con una bomba 9, un monitor de presión 10 y un dispositivo de filtro 1 con hasta 40 platos de matriz; es decir, suministrándose una superficie activa de hasta 7 m^{2}, la cual tiene una porosidad entre 70 y 130 micrones.
Separación celular Ejemplo 30
Una matriz magnética porosa que comprende una mezcla de polietileno y ferrite magnética (80% FeO, 20% BaO2, Porex Technologies, Alemania), que tenía una porosidad de 10º micrones, se usó para separar leucocitos de sangre entera usando anticuerpos anti CD45+ específicamente etiquetados (MACS Microperlas Anticuerpos; Miltenyi Biotec, Alemania). Después de un etiquetado magnético de los leucocitos con tales anticuerpos, se permitió que la sangre pasara por la matriz porosa.
El conteo de células de leucocitos se llevó a cabo usando un Contador de Células automático, el cual después de la separación mostró una reducción del contenido de leucocito en la sangre de 90%.
Ejemplo 31
La superficie de una matriz de diacetato de celulosa poroso (Tenite, Eastman Chemicals, USA), que tiene una porosidad de 200 micrones y una superficie active de 0,2 m^{2} fue usada para separación de células fagocitantes de sangre humana tales como neutrofilos y monocitos. Se recolectó sangre humana entera en tubos vacutainer de EDTA (B&D, UK) y se permitió a la sangre pasar por la matriz porosa.
La reducción en el número de neutrofilos y monocitos en la sangre recogida fue de 50% y 35%, respectivamente, tal como se determinó por microscopía por conteo diferencial de células en una cámara Bürkner usando Reactivo Türks.
Remoción de Citoquina Ejemplo 32
La matriz obtenida de acuerdo con el ejemplo 22, que había sido revestida con grupos de remoción de endotoxinas, se usó como discos porosos en el sistema de prueba mostrado en la figura 4.
La eliminación de TNF-\alpha de la sangre entera se investigó después de inmovilizar anticuerpos policlonales contra TNF-\alpha con glutardialdehído sobre los grupos aminas en la estructura polimérica porosa. Se indujo la producción de TNF-\alpha mediante la adición de LPS a la sangre y la sangre entera activada se vertió difundiéndose por el filtro inmovilizado en el dispositivo.
Las cantidades de TNF-\alpha en la sangre entera (figura 5) se determinaron pre (\blacklozenge) y post (\sqbullet) el dispositivo mediante un inmunoensayo de enzima (Enzymimmuno-ensayo, Milenia Biotec GmbH, Alemania) para estudiar la captación de TNF-\alpha por parte de los discos de filtro.
Tal como se ve, se podría obtener una reducción considerable de las concentraciones patológicas de TNF-\alpha en sangre entera.
Remoción de Endotoxina Ejemplo 33
La matriz obtenida de acuerdo con el ejemplo 25, es decir una matriz polietilénica modificada con plasma, que tiene DOC en ella, fue inmovilizada por medio de un espaciador o separador de diaminohexano, que primero había sido acoplado a la matriz por el glutardialdehído y luego al deoxicolato usando carbodiimida. La matriz obtenida se usó como discos porosos en el dispositivo de filtro del sistema mostrado en la figura 4.
La eliminación de LPS de plasma se llevó a cabo de una manera similar a la del ejemplo 32.
La cantidad de LPS en plasma se determinó mediante un ensayo de Lisado de Limulus Amebocita (Endochrome-K, Charles River Laboratories Inc. USA) en masa en diferentes intervalos de tiempo durante la recirculación a través del dispositivo de filtro.
En la figura 6 se muestra la reducción de la cantidad de endotoxina (pg/ml) con el tiempo. Después de una recirculación de 3 h la carga de endotoxina se redujo desde 75 pg/ml, al inicio, hasta 15 pg/ml que es el límite de detección.
Ejemplo 34
Las matrices obtenidas de acuerdo con el ejemplo 3 (grupos aminos no inmovilizados) y el ejemplo 17 (DOC inmovilizado), respectivamente, se usaron como discos porosos y se compararon con referencia a su habilidad de eliminar LPS. Se llevó a cabo un estudio de recirculación similar al del ejemplo 33 con la diferencia de que se disolvió LPS en agua destilada.
La eliminación de LPS de la solución de agua se determinó tal como se muestra en la figura 4 mientras se recirculaba a una tasa de flujo de 0,22 ml/min a través de cada filtro en un dispositivo de 10 ml.
En la tabla 1 de abajo se dan los valores para eliminación de LPS mediante dos matrices del ejemplo 3 y del ejemplo 17, respectivamente, como porcentaje de la concentración inicial de LPS después de una recirculación de 120 minutos.
\vskip1.000000\baselineskip
TABLA 1
Ejemplo 3 Ejemplo 17
Eliminación de LPS (%) 81 96
\vskip1.000000\baselineskip
La diferencia en el grado de eliminación entre el plasma (ejemplo 34) y agua (ejemplo 35) se puede explicar mediante interacciones competitivas de proteínas, LPS y el ligando.
Remoción combinada Ejemplo 35
Las matrices obtenidas de acuerdo con el ejemplo 19 y el ejemplo 29 se usaron para la remoción combinada de TNF-\alpha e IL-1, respectivamente.
Las dos matrices de especificidad diferente se conectaron en serie en un sistema de prueba de bucle cerrado de dos dispositivos de filtro, tal como se muestra en la figura 4. La sangre entera en un contenedor se mantuvo a 37°C, se activó mediante la adición de LPS y se introdujo al sistema. El muestreo se llevó a cabo en diferentes intervalos de tiempo simultáneamente del contenedor y de las salidas del filtro para análisis de citoquinas.
Para ambas matrices los resultados mostraron un decrecimiento en las concentraciones de citoquina de 70% y 55% para TNF-\alpha e IL-1\beta, respectivamente.
La tabla 2 de abajo muestra un resumen de la aplicabilidad versátil y la eficacia considerable del método inventivo para un enlazamiento selectivo y separación de diferentes componentes de la sangre entera o de un fluido corporal. Para este propósito se han usado diferentes matrices porosas como soporte para la conexión de ligandos con o sin separador o espaciador. De esta manera, se han llevado a cabo métodos de inmovilización con glutardialdehído usando dos terminales -NH_{2} y con 1-etil-3(3-dimetilaminopropil)carbodiimida con un terminal -NH_{2} y un terminal -OH o -COOH, respectivamente. También se ha usado silanización a través de aldehído o reactivos funcionales de acoplamiento de amino silano para enlazamiento específico de grupos amino, anticuerpos, enzimas, péptidos, proteínas; grupos de aldehído que reaccionan espontáneamente conaminas, péptidos y proteínas.
TABLA 2
1
2

Claims (32)

1. Un método para enlazar selectivamente y separar por lo menos un componente de un fluido corporal, el cual comprende: hacer pasar un fluido corporal, tal como sangre entera, a través de una matriz rígida integral de separación sin estar excluido por dicha matriz, teniendo dicha matriz una estructura porosa con un tamaño de poro que abarca desde 5 micrones hasta 500 micrones así como también una superficie activa que abarca desde 0,5 cm^{2} hasta 10 m^{2}, enlazando por lo menos un componente de fluido corporal por al menos un grupo funcional dispuesto en dicha matriz, por lo cual dicha matriz se obtiene mediante un proceso seleccionado del grupo que comprende los procesos de sinterizar, moldear y espumar.
2. El método tal como se reivindica en la reivindicación 1, que comprende: revestir o modificar la superficie de dicha estructura porosa de dicha matriz para colocar dicho, por lo menos uno, grupo funcional en dicha estructura porosa, mediante lo cual dicho, por lo menos uno, grupo funcional solo o en combinación con regiones no funcionarizadas de dicha estructura porosa es capaz de enlazar dicho, al menos uno, componente.
3. El método tal como se reivindica en la reivindicación 1 en el cual dicha matriz está hecha de un material seleccionado del grupo que comprende: metal, óxido inorgánico, carbón, vidrio, cerámica, polímero sintético y un polímero natural y las combinaciones de los mismos.
4. El método tal como en la reivindicación 3, en el cual dicha matriz se hace de un metal ferromagnético.
5. El método tal como en las reivindicaciones 3 ó 4 en el cual dicho material se reviste de un polímero sintético o natural.
6. El método tal como en las reivindicaciones 3 ó 5, en el cual dicho polímero sintético se selecciona del grupo que comprende: una poliolefina, un polímero vinílico, un polímero que contiene flúor, un poliacrilato, una poliamida, una poliimida, una poliimina, un poliestireno y sus copolímeros, una goma de silicona, un poliéster, un policarbonato, un poliuretano, un polisulfonato, un poliglicol, un poliéter y un polialquidóxido y un copollímero y un híbrido de los mismos.
7. El método tal como en las reivindicaciones 3 ó 5, en el cual dicho polímero natural se selecciona del grupo que comprende un polisacárido, un policarbohidrato, un ácido de poliamina, un ácido poliláctico o un ácido poliglicólico y un copolímero y un híbrido de los mismos.
8. El método, tal como en la reivindicación 2, en el cual dicha modificación de superficie se selecciona del grupo que comprende: electrodeposición, electroevaporación, deposición química por plasma, deposición desde un flujo de plasma iónico, polimerización de plasma, deposición de polímero de superficie aumentada con plasma y deposición de vapor químico.
9. El método tal como en la reivindicación 2, en el cual dicho, al menos uno, grupo funcional se selecciona del grupo que comprende: un sulfihidrilo, un carboxilato, una amina, un aldehído, una cetona, un hidroxilo, un halógeno, una hidracida o un hidrógeno activo.
10. El método tal como en la reivindicación 2, en el cual un ligando se acopla con dicho, cuando menos uno, grupo funcional de una manera covalente.
11. El método tal como en la reivindicación 10, en el cual dicho ligando se selecciona del grupo que comprende: una proteína, un péptido, un anticuerpo o un fragmento de los mismos, un carbohidrato, un polisacárido, una hormona, un antioxidante, una glicoproteína, una lipoproteína, un lípido, una vitamina soluble en grasa, un ácido biliar, un colorante reactivo, alantoina, ácido úrico o polimixina o combinaciones de los mismos.
12. El método tal como en las reivindicaciones 10 u 11, en el cual se acopla covalentemente un reticulador entre dicho, al menos uno, grupo funcional y dicho ligando.
13. El método tal como en la reivindicación 12, en el cual dicho reticulador se selecciona del grupo que comprende un reticulador homobifuncional, uno heterobifuncional y uno trifuncional.
14. El método tal como en las reivindicaciones 12 ó 13, en el cual dicho reticulador se acopla covalentemente como un separador entre dicho, al menos uno, grupo funcional y dicho ligando.
15. El método tal como en la reivindicación 14, en el cual dicho separador se selecciona del grupo que comprende: un silano, un diisocianato, un glicolato, un polietilenglicol, un reactivo de succinimidilo, una dihidrazina, ácido adipídico, una diamina, un aminoácido, un ácido oligoamino, un poliaminoácido, un péptido y una proteína.
16. El método, tal como en la reivindicación 1, en el cual dicha matriz de separación tiene la forma seleccionada del grupo que comprende: un disco, una barra, un cilindro, un anillo, una esfera, un tubo y un tubo hueco.
17. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el cual dicho tamaño de poro es desde 50 micrones hasta 500 micrones.
18. El método tal como en cualquiera de las reivindicaciones 1 hasta 17, que se lleva a cabo en un dispositivo (1) que comprende una carcasa (2), una entrada (3), una salida (4), y dicha, por lo menos una, matriz de separación (5a, 5b, ...).
19. El método tal como en la reivindicación 18, en el cual dicho dispositivo tiene por lo menos dos matrices de separación (5a, 5b, ...), las cuales, cada una de ellas, remueven selectivamente y por separado por lo menos un componente de un fluido corporal.
20. El método tal como se reivindica en la reivindicación 19, en el cual dichas, por lo menos dos, matrices de separación (5a, 5b, ...) remueven por lo menos dos componentes de un fluido corporal.
21. El método tal como se reivindica en la reivindicación 20 en el cual una primera matriz de separación remueve un primer componente y una segunda matriz de separación remueve un segundo componente de un fluido corporal.
22. El método de las reivindicaciones 19, 20 ó 21, en el cual por lo menos una de dichas matrices de separación tiene un tamaño de poro desde 50 micrones hasta 500 micrones.
23. El método tal como en cualquiera de las reivindicaciones 16 ó 22, en el cual la tasa de flujo a través de dicho dispositivo es desde 5 ml/h hasta 6 000 ml/min.
24. Un dispositivo para enlazar selectivamente y separar por lo menos un componente de un fluido corporal de acuerdo con el método de cualquiera de las reivindicaciones 1-21, que comprende una carcasa (2), una entrada (3), una salida (4) y por lo menos una matriz de separación (5a, 5b, ..., que es rígida e integral para dejar pasar dicha sangre o fluido corporal a través de sí, la cual tiene una estructura porosa con un tamaño de poro que abarca desde 5 micrones hasta 500 micrones así como también una superficie activa en un rango desde 0,5 cm^{2} hasta 10 m^{2}, la cual es capaz de enlazar dicho, por lo menos uno, componente, donde dicha matriz de separación tiene una estructura porosa obtenida mediante un proceso seleccionado del grupo de: proceso de sinterizar, moldear y espumar.
25. El dispositivo tal como se reivindica en la reivindicación 24, en el cual dicha matriz tiene un tamaño de poro desde 50 micrones hasta 500 micrones.
26. El dispositivo tal como se reivindica en las reivindicaciones 24 ó 25, donde dicho dispositivo tiene por lo menos dos matrices de separación (5a, 5b, ...), cada una de ellas remueve selectivamente y por separado por lo menos un componente de sangre entera o de un fluido corporal.
27. El dispositivo tal como se reivindica en la reivindicación 26, en el cual dichas por lo menos dos matrices de separación (5a, 5b, ...) remueven por lo menos dos componentes de un fluido corporal.
28. El dispositivo tal como se reivindica en la reivindicación 27, en el cual una primera matriz de separación remueve un primer componente y una segunda matriz de separación remueve un segundo componente de un fluido corporal.
29. El dispositivo tal como se reivindica en las reivindicaciones 26, 27 ó 28, en el cual por lo menos una de dichas matrices tiene un tamaño de poro desde 50 micrones hasta 500 micrones.
30. El dispositivo tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 24 a 29, en el cual dicha matriz de separación tiene la forma de un disco, una barra, un cilindro, un anillo, una esfera, un tubo o un tubo hueco.
31. El dispositivo tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 24 a 30, en el cual dicha matriz de separación comprende varios discos dispuestos uno después de otro en la dirección de flujo para que el fluido corporal se disponga para pasar un disco y luego fluya por la superficie entera del siguiente disco.
32. El dispositivo tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 24 a 31, en el cual se lleva a cabo una modificación de superficie por medio de un proceso seleccionado del grupo de electrodeposición, electroevaporación, deposición química por plasma, deposición de un flujo de plasma iónico, polimerización por plasma, deposición polimérica de superficie aumentada por plasma y deposición química de vapor.
ES03713168T 2002-04-25 2003-04-04 Separacion mejorada. Expired - Lifetime ES2266797T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE0201257 2002-04-25
SE0201257A SE0201257D0 (sv) 2002-04-25 2002-04-25 Improved Separation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2266797T3 true ES2266797T3 (es) 2007-03-01

Family

ID=20287687

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES06008934T Expired - Lifetime ES2328386T3 (es) 2002-04-25 2003-04-04 Separacion mejorada.
ES03713168T Expired - Lifetime ES2266797T3 (es) 2002-04-25 2003-04-04 Separacion mejorada.

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES06008934T Expired - Lifetime ES2328386T3 (es) 2002-04-25 2003-04-04 Separacion mejorada.

Country Status (16)

Country Link
US (3) US20030231981A1 (es)
EP (2) EP1704880B1 (es)
JP (4) JP2006508703A (es)
KR (2) KR100950432B1 (es)
CN (2) CN101049522B (es)
AT (1) ATE329687T1 (es)
AU (1) AU2003217134C1 (es)
BR (1) BR0309349A (es)
CA (2) CA2680643A1 (es)
DE (2) DE60306135T2 (es)
ES (2) ES2328386T3 (es)
HK (2) HK1081138A1 (es)
MX (1) MXPA04010543A (es)
RU (2) RU2311183C2 (es)
SE (1) SE0201257D0 (es)
WO (1) WO2003090924A1 (es)

Families Citing this family (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005085440A1 (de) * 2004-03-05 2005-09-15 Sirs-Lab Gmbh VERFAHREN ZUR ANREICHERUNG UND/ODER ABTRENNUNG VON PROKARYONTER DNA MITTELS EINES PROTEINS, DAS NICHT-METHYLIERTE CpG-MOTIVE ENTHALTENDE DNA SPEZIFISCH BINDET
EP1792635B1 (en) * 2004-08-30 2014-05-21 Kaneka Corporation Granulocyte adsorbent
WO2006025556A1 (en) * 2004-08-31 2006-03-09 Showa Denko K.K. Surface-modified packing material for liquid chromatography and production method thereof
GB2420976B (en) * 2004-11-19 2006-12-20 Zvi Finkelstein Therapeutic implant
DE102004062535A1 (de) * 2004-12-24 2006-07-06 Forschungszentrum Karlsruhe Gmbh Semipermeables Membransystem für magnetische Partikelfraktionen
JP4821466B2 (ja) * 2006-07-03 2011-11-24 富士ゼロックス株式会社 液滴吐出ヘッド
US8165663B2 (en) * 2007-10-03 2012-04-24 The Invention Science Fund I, Llc Vasculature and lymphatic system imaging and ablation
ES2639183T3 (es) 2007-09-19 2017-10-25 The Charles Stark Draper Laboratory, Inc. Estructuras microfluídicas con sección transversal circular
US8285367B2 (en) * 2007-10-05 2012-10-09 The Invention Science Fund I, Llc Vasculature and lymphatic system imaging and ablation associated with a reservoir
US8285366B2 (en) * 2007-10-04 2012-10-09 The Invention Science Fund I, Llc Vasculature and lymphatic system imaging and ablation associated with a local bypass
US7790803B2 (en) * 2008-06-02 2010-09-07 Uop Llc Crosslinked organic-inorganic hybrid membranes and their use in gas separation
US8167871B2 (en) * 2009-02-25 2012-05-01 The Invention Science Fund I, Llc Device for actively removing a target cell from blood or lymph of a vertebrate subject
US8721618B2 (en) 2009-02-25 2014-05-13 The Invention Science Fund I, Llc Device for actively removing a target cell from blood or lymph of a vertebrate subject
US8317737B2 (en) 2009-02-25 2012-11-27 The Invention Science Fund I, Llc Device for actively removing a target component from blood or lymph of a vertebrate subject
US8430831B2 (en) 2009-02-25 2013-04-30 The Invention Science Fund I, Llc Device, system, and method for controllably reducing inflammatory mediators in a subject
DE102009034150A1 (de) * 2009-07-20 2011-01-27 Fresenius Medical Care Deutschland Gmbh Adsorbens zur Adsorption von Hepcidin
AT509192B1 (de) * 2010-06-24 2011-07-15 Zentrum Fuer Biomedizinische Technologie Der Donau Uni Krems Sorptionsmittel für endotoxine
JP6055464B2 (ja) * 2011-05-09 2016-12-27 ザ ユニバーシティー オブ マイアミ 循環血中の可溶性ウロキナーゼ受容体の低減
CN102441363A (zh) * 2011-09-28 2012-05-09 南开大学 一种用于清除血液中癌细胞的吸附剂
GB201203546D0 (en) * 2012-02-29 2012-04-11 Whatman Gmbh Membrane filter and a method of manufacturing the same
CN104507953B (zh) * 2012-05-31 2018-05-18 新加坡科技研究局 通过用正电性有机添加剂处理来降低蛋白质制剂中蛋白质-污染物复合物和聚集物水平的方法
EP2854980B1 (en) 2012-05-31 2017-11-01 Agency For Science, Technology And Research Selective binding of biological targets to solid phase ureides
EP2679302A1 (de) 2012-06-28 2014-01-01 Zentrum für biomedizinische Technologie der Donau- Universität Krems Selektives Sorptionsmittel für die extrakorporale Blutreinigung
KR101427700B1 (ko) * 2012-06-29 2014-08-07 주식회사 아모그린텍 사이토카인 흡착시트, 그 제조방법 및 이를 이용한 혈액 필터
JP2014061284A (ja) * 2012-08-31 2014-04-10 Asahi Kasei Medical Co Ltd 臓器炎症抑制用基材及びデバイス
JP5592450B2 (ja) * 2012-09-18 2014-09-17 大日精化工業株式会社 自走細胞捕捉具
WO2014059323A1 (en) * 2012-10-12 2014-04-17 Advantageous Systems Llc Immobilization of particles on a matrix
DE102012020615A1 (de) * 2012-10-19 2014-04-24 Hydac Filtertechnik Gmbh Verfahren zur Oberflächenbehandlung eines Filtermediums
RU2537860C2 (ru) * 2013-01-09 2015-01-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт металлоорганической химии им. Г.А. Разуваева Российской академии наук (ИМХ РАН) Фотополимеризующаяся композиция для одностадийного получения полимерного нанопористого материала с гидрофобной поверхностью пор, нанопористый полимерный материал с селективными сорбирующими свойствами, способ его получения, способ одностадийного формирования на его основе водоотделяющих фильтрующих элементов и способ очистки органических жидкостей от воды
CN103303997B (zh) * 2013-06-14 2015-04-22 湖北大学 一种磁固相萃取剂在处理染料废水中的用途
EP3620218A1 (en) * 2013-06-24 2020-03-11 ExThera Medical Corporation Blood filtration system containing mannose coated substrate
US11680080B2 (en) 2014-03-13 2023-06-20 Folim G. Halaka Purification columns and methods
EP3117208A4 (en) * 2014-03-13 2018-01-24 Folim G. Halaka Purification columns and methods
WO2015153287A1 (en) * 2014-03-31 2015-10-08 Zoll Medical Corporation Blood filtering of inflammatory biomarkers to treat post-resuscitation syndrome
WO2016040850A1 (en) * 2014-09-11 2016-03-17 Oregon State University Microfluidic device for removal of constituents from blood
KR101935123B1 (ko) * 2014-09-29 2019-01-03 아사히 가세이 메디컬 가부시키가이샤 중공사막형 혈액 정화 장치
EP3422943A4 (en) * 2016-03-02 2019-10-16 ExThera Medical Corporation METHOD OF TREATING DRUG ENTRIES
US11911551B2 (en) 2016-03-02 2024-02-27 Exthera Medical Corporation Method for treating drug intoxication
EP3501561B1 (en) * 2016-08-18 2020-12-23 Asahi Kasei Medical Co., Ltd. Filter element for blood treatment filter, blood treatment filter, and leukocyte removal method
WO2020009008A1 (ja) * 2018-07-02 2020-01-09 旭化成メディカル株式会社 血液処理用ビーズ
JP7312030B2 (ja) 2018-07-02 2023-07-20 旭化成メディカル株式会社 血液処理用ビーズ
WO2020018005A1 (en) * 2018-07-17 2020-01-23 Limited Liability Company "Gero" Devices, methods, compositions and systems for the treatment of aging and age- related disorders
DE102018121552A1 (de) * 2018-09-04 2020-03-05 Karl Leibinger Medizintechnik Gmbh & Co. Kg Lasergesinterter Filter, Verfahren zum Herstellen des Filters sowie Verfahren zum Flüssigkeitstransport
CN110824157B (zh) * 2019-11-14 2023-03-31 广州科方生物技术股份有限公司 一种用于免疫层析检测试剂盒的快速分离红细胞的方法
EP4221778A1 (en) 2020-10-01 2023-08-09 Alteco Medical AB Matrices for selective binding of at least one component from a body fluid
RU2765188C1 (ru) * 2020-11-03 2022-01-26 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации Способ получения селективного сорбента для твердофазной экстракции
CN116635143A (zh) 2020-11-30 2023-08-22 阿尔特克医药股份公司 用于从体液中结合和分离至少一种成分的装置
CN112755973B (zh) * 2020-12-16 2023-03-10 重庆天外天生物技术有限公司 一种应用于血液净化领域的复合型吸附材料及其制备方法

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3994799A (en) * 1973-04-17 1976-11-30 Yao Shang J Blood and tissue detoxification apparatus
JPS5434341U (es) * 1977-08-10 1979-03-06
JPS5714357A (en) * 1980-06-30 1982-01-25 Asahi Chemical Ind Catching material for lymphocyte
US4433059A (en) * 1981-09-08 1984-02-21 Ortho Diagnostic Systems Inc. Double antibody conjugate
CA1221307A (en) * 1982-12-02 1987-05-05 Nobutaka Tani Adsorbent and process for preparing the same
US4656254A (en) * 1985-12-02 1987-04-07 Miles Laboratories, Inc. Method of preparing alpha-1-proteinase inhibitor and antithrombin III
DE3617672C2 (de) * 1986-05-26 2000-02-17 Claus Heuck Verfahren zur Herstellung eines Reagenz, ein danach hergestelltes Reagenz sowie dessen Verwendung zur Bindung von Polymeren und Mikroorganismen aus wäßrigen Lösungen
WO1989003885A1 (en) * 1987-10-27 1989-05-05 Centocor, Inc. Method of removing endotoxin contaminants
JPH0622633B2 (ja) 1987-10-30 1994-03-30 鐘淵化学工業株式会社 吸着体およびそれを用いた除去装置
JPH0246858A (ja) * 1988-08-08 1990-02-16 Terumo Corp 体液処理装置
US5153166A (en) * 1988-08-18 1992-10-06 Trustees Of At Biochem Chromatographic stationary supports
DE3932971C2 (de) * 1989-10-03 2003-03-13 Fresenius Ag Zur Eliminierung von Biomakromolekülen, insbesondere LDL und Endotoxinen, aus Vollblut in extrakorporalem Kreislauf geeignetes Adsorbens
US5476715A (en) * 1989-10-03 1995-12-19 Fresenius Ag Particulate adsorbent for the removal of biomacromolecules such as LDL and endotoxins from whole blood in extracorporeal circuits
EP0640351A1 (en) * 1993-07-26 1995-03-01 Duphar International Research B.V Method for the separtion of bacterial lipopolysaccharides from protein-containing solutions
ATA159993A (de) * 1993-08-10 1995-09-15 Dieter Dr Falkenhagen Anordnung zur elimination von substanzen aus flüssigkeiten
CA2127605A1 (en) * 1993-12-23 1995-06-24 Peter J. Degen Affinity separation method
JP3615785B2 (ja) * 1994-04-28 2005-02-02 テルモ株式会社 Hiv及びその関連物質除去材料
CN1147210A (zh) * 1994-12-27 1997-04-09 有限会社米卡子基文化会馆 多孔陶瓷过滤器、其制造方法及多孔陶瓷过滤器制造用挤出成型模具和使用该模具的挤出成型装置
JPH1076004A (ja) * 1996-09-05 1998-03-24 Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd 体液処理用吸着材及び体液処理用吸着器
US6616623B1 (en) * 1997-07-02 2003-09-09 Idializa Ltd. System for correction of a biological fluid
US6416487B1 (en) 1997-07-30 2002-07-09 Renal Tech International Llc Method of removing beta-2 microglobulin from blood
US6022477A (en) * 1997-11-14 2000-02-08 New Jersey Institute Of Technology Method and apparatus for isolation purification of biomolecules
JP3635654B2 (ja) * 1997-12-26 2005-04-06 ニプロ株式会社 血液成分採取器具
US6576478B1 (en) * 1998-07-14 2003-06-10 Zyomyx, Inc. Microdevices for high-throughput screening of biomolecules
SE9901825D0 (sv) * 1999-05-20 1999-05-20 Amersham Pharm Biotech Ab Foamed material filled with inner material
CN2385290Y (zh) * 1999-07-07 2000-06-28 海尔集团公司 板式空气换热器
US6774102B1 (en) 1999-09-29 2004-08-10 Gambro Dialysatoren Gmbh & Co. Kg Extracorporeal endotoxin removal method
US6866783B2 (en) * 2000-03-07 2005-03-15 Mat Adsorption Technologies Gmbh & Co. Kg Module with membrane elements in cross-flow and in a dead-end arrangement
JP2001276212A (ja) * 2000-03-30 2001-10-09 Terumo Corp 血液成分採取方法および血液成分採取回路
US6497675B1 (en) * 2000-04-17 2002-12-24 Renal Tech International Llc Device for extracorporeal treatment of physiological fluids of organism
JP2001321365A (ja) * 2000-05-16 2001-11-20 Fuji Photo Film Co Ltd 血漿又は血清採取具
JP2001347116A (ja) * 2000-06-09 2001-12-18 Asahi Medical Co Ltd 白血球除去フィルター装置
JP2002173433A (ja) * 2000-12-04 2002-06-21 Terumo Corp 白血球除去血液製剤の調製方法および血液セット
US6408894B1 (en) 2001-04-25 2002-06-25 Renaltech International, Llc Method of producing devices for blood purification
EP2035061A4 (en) * 2006-06-16 2012-02-01 Glycorex Transplantation Ab ADSORPTION DEVICE

Also Published As

Publication number Publication date
RU2004134345A (ru) 2005-05-27
EP1497025B1 (en) 2006-06-14
RU2311183C2 (ru) 2007-11-27
CA2481711C (en) 2011-09-20
RU2007110420A (ru) 2008-09-27
WO2003090924A1 (en) 2003-11-06
EP1704880A3 (en) 2006-10-04
CA2481711A1 (en) 2003-11-06
KR20040104615A (ko) 2004-12-10
ATE329687T1 (de) 2006-07-15
JP2011083632A (ja) 2011-04-28
AU2003217134A1 (en) 2003-11-10
US20030231981A1 (en) 2003-12-18
JP2006508703A (ja) 2006-03-16
US20070068870A1 (en) 2007-03-29
RU2429902C2 (ru) 2011-09-27
KR20080044359A (ko) 2008-05-20
CN1308068C (zh) 2007-04-04
AU2003217134C1 (en) 2008-07-03
EP1497025A1 (en) 2005-01-19
MXPA04010543A (es) 2005-01-25
BR0309349A (pt) 2005-03-01
AU2003217134B2 (en) 2007-12-13
ES2328386T3 (es) 2009-11-12
DE60306135D1 (de) 2006-07-27
US7601134B2 (en) 2009-10-13
DE60306135T2 (de) 2007-04-19
HK1081138A1 (en) 2006-05-12
KR100950432B1 (ko) 2010-04-02
CN101049522B (zh) 2016-02-03
HK1111369A1 (zh) 2008-08-08
US20080203021A1 (en) 2008-08-28
JP2016120333A (ja) 2016-07-07
EP1704880A2 (en) 2006-09-27
SE0201257D0 (sv) 2002-04-25
CN101049522A (zh) 2007-10-10
US7910002B2 (en) 2011-03-22
DE60328541D1 (de) 2009-09-03
JP2014111203A (ja) 2014-06-19
CN1649667A (zh) 2005-08-03
EP1704880B1 (en) 2009-07-22
CA2680643A1 (en) 2003-11-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2266797T3 (es) Separacion mejorada.
JP7184864B2 (ja) 高流量を用いて血液から細菌を除去するための方法
ES2861359T3 (es) Dispositivo para eliminar citoquinas de la sangre con polisacáridos inmovilizados en superficie
AU729964B2 (en) Affinity membrane system and method of using same
JP2007222596A (ja) 白血球およびサイトカインの吸着器
AU2008201015B2 (en) Improved separation
JPH10225515A (ja) 液体処理用カラムおよび体液処理方法
ES2281709T3 (es) Dispositivo para la eliminacion de lipopolisacaridos o/y acidos lipoteicoicos bacterianos a partir de liquidos que contienen proteinas, asi como su utilizacion para el tratamiento de una sepsis.
RU2573492C2 (ru) ПРИМЕНЕНИЕ МОДИФИЦИРОВАННЫХ ПОЛЫХ ВОЛОКНИСТЫХ МАТЕРИАЛОВ ДЛЯ УДАЛЕНИЯ ЭКЗОТОКСИНОВ, ВЫРАБАТЫВАЕМЫХ Escherichia coli, ИЗ ЖИДКОСТЕЙ, ПРЕИМУЩЕСТВЕННО ИЗ КРОВИ И ПЛАЗМЫ, А ТАКЖЕ ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СОПУТСТВУЮЩИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
RU2448897C1 (ru) Способ комплексной очистки физиологических жидкостей
JPS6253669A (ja) 免疫グロブリン物質の吸着材および吸着装置