EA030687B1 - КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ПИРИМИДИНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КОМПЛЕКСА p97 - Google Patents

КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ПИРИМИДИНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КОМПЛЕКСА p97 Download PDF

Info

Publication number
EA030687B1
EA030687B1 EA201590255A EA201590255A EA030687B1 EA 030687 B1 EA030687 B1 EA 030687B1 EA 201590255 A EA201590255 A EA 201590255A EA 201590255 A EA201590255 A EA 201590255A EA 030687 B1 EA030687 B1 EA 030687B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
benzylamino
methyl
indole
pyrimidin
benzyl
Prior art date
Application number
EA201590255A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201590255A1 (ru
Inventor
Хань-Цзе Чжоу
Франческо Парлати
Дэвид Вустроу
Original Assignee
Клив Байосайенсиз, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48948500&utm_source=***_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA030687(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Клив Байосайенсиз, Инк. filed Critical Клив Байосайенсиз, Инк.
Publication of EA201590255A1 publication Critical patent/EA201590255A1/ru
Publication of EA030687B1 publication Critical patent/EA030687B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
    • C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
    • C07D473/32—Nitrogen atom
    • C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/052—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being six-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Предложены конденсированные пиримидиновые соединения формулы Iгде A, Ar, Z, Y, m и n такие, как указано в формуле изобретения. Указанные соединения являются ингибиторами протеасомного комплекса AAA, содержащего p97, и являются эффективными лекарственными средствами для лечения заболеваний, связанных с биоактивностью p97, таких как рак.

Description

Изобретение относится к соединениям, которые ингибируют АТФазу, связанную с различными видами активности (ААА), имеющую описательное название валозинсодержащий белок, также известную как p97, а также к способам лечения или предотвращения заболевания или состояния у субъекта, который будет иметь благоприятный эффект от ингибирования p97. Соединения, представляющие собой варианты реализации изобретения, представляют собой конденсированные двухкольцевые каркасные структуры, содержащие пиримидин в качестве одного кольца и насыщенное пяти или шестичленное карбоциклическое или гетероциклическое кольцо в качестве второго кольца (A кольцо). Кольцо A может представлять собой 5- или 6-членное кольцо. Соединения, представляющие собой варианты реализации изобретения, также представляют собой хиназолиновые каркасные структуры.
Двухкольцевая каркасная структура воплощена в конденсированном пиримидиновом соединении формулы Ι
А приставляет собой CH2, NR1, O или S; m представляет собой целое число, равное 1-3; n представляет собой 0 или целое число, равное 1-2; сумма m+n составляет не более 2 и не менее 1.
Y выбран из группы, состоящей из Rc, ORc, CN, CO2H, CON(Rc)2, C(NRc)N(Rc)2, SO2N(Rc)2 и SO2Rc, где каждый Rc независимо выбран из группы, состоящей из атома водорода и алкила. Другими словами, указанные группы представляют собой Y, когда 2-заместитель пиримидинового кольца формулы Ι представляет собой индольный фрагмент.
Z выбран из группы, состоящей из галогена, незамещенного алкила, содержащего от 1 до 6 атомов углерода, замещенного алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и замещенного алкокси, содержащего от 1 до 4 атомов углерода; где указанная замещенная алкильная группа содержит в качестве заместителя -ORa, -OC(O)Ra, -C(O)ORa, -OC(O)N(Ra)2, -C(O)N(Ra)2, -N(Ra)C(O)ORa, -N(Ra)C(O)Ra, -N(Ra)C(O)N(Ra)2, -N(Ra)S(O)tRa, -S(O)tORa, -S(O)tN(Ra)2, -N(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой атом водорода, алкил; и замещенная алкоксигруппа содержит в качестве заместителя -ORb, -Rb, -OC(O)Rb, -N(Rb)2, -C(O)ORb, -OC(O)N(Rb)2, -C(O)N(Rb)2, -N(Rb)C(O)ORb, где каждый Rb независимо представляет собой атом водорода, алкил.
R1 выбран из группы, состоящей из атома водорода, незамещенного алкила, содержащего от 1 до 6 атомов углерода, замещенного алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и группы -C(O)Rd; где указанный замещенный алкил содержит в качестве заместителя ORd, OC(O)Rd, C(O)ORd; и где каждый Rd независимо выбран из группы, состоящей из атома водорода, алкила; каждый t независимо выбран из целого числа, равного 1 или 2.
Ar представляет собой незамещенный или замещенный ароматический компонент. Ароматический компонент может представлять собой фенил или фторфенил.
- 17 030687
Варианты реализации конденсированных пиримидиновых соединений включают конкретные соединения, где названия указанных соединений приведены в следующих далее таблицах. Все конденсированные пиримидиновые соединения из указанных таблиц являются синтезированными и демонстрируют соответствующую биологическую активность в одном или более биологических анализах, описанных в настоящей заявке. Не все конденсированные пиримидиновые соединения их указанных таблиц перечислены в табл. III биологических анализов. Соединения, перечисленные в табл. III, относятся к соединениям из таблиц синтезированных соединений в соответствии с их названиями по IUPAC.
Особо предпочтительные виды конденсированные пиримидиновые соединения формулы I включают следующие далее синтезированные соединения. Указанные соединения идентифицированы с помощью их названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
N-бензил-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
N-бенз ил-2-(2-этил-1 Н-индол-1 -ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
2- [2-(аминометил)-1 Н-индол-1 -ил] -N-бенз ил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин; 2-[2-(1-аминоэтил)-1Н-индол-1-ил]-М-бензил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
2-[5-(аминометил)-4Н-пирроло[2,3-d][ 1,3]тиазол-4-ил]-1М-бензил-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
N-бензил-2-(2-метокси-1 Н-индол-1 -ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
{1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -1 Н-инд ол-2-ил } метанол N-бензил-2-[2-(метоксиметил)-1 Н-индол-1 -ил] -5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
N-бенз ил-2-{2-[(метиламино)метил]-1Н-индол-1-ил}-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин4-амин;
N-бензил-2- { 2- [(диметиламино)метил]-1 Н-индол- Нил } -5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
N-( {1 -[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -1 Н-инд ол-2ил } метил) ацетамид;
({1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1 Н-инд ол-2ил } метил)мочевина;
метил-И-({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил}метил)карбамат;
Х-({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил} метил)метансульфонамид;
4-Х-бензил-2-М-[1-(1Н-индол-2-ил)этил]-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2,4-диамин;
N-бенз ил-2-[2-(морфолин-4-илметил)-1Н-индол-1-ил]-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
N-бензил-2-(2-метил-1 Н-инд ол-3 -ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин 1 [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Н-инд ол-4карбонитрил;
1 [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метокси-1 Н-инд ол-4карбонитрил;
N-бенз ил-2-(2-этокси-1 Н-индол-1 -ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин N-бензил-2-[2-(трифторметил)-1 Н-индол-1 -ил] -5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
N-бенз ил-2-(2-хлор-1 Н-индол-1 -ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин И-({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил)проп-2-инамид;
И-({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил)проп-2-енамид;
1 [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Н-инд ол-4карбоксамид;
1 [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метокси-1 Н-инд ол-4карбоксамид;
2-(аминометил)-1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол4-карбоксамид;
1 [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Н-инд ол-4карбоновая кислота;
1 [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Н-инд ол-4сульфонамид;
N-бенз ил-2-(4-метан сульфонил-2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
- 18 030687
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-этил-1 Н-инд ол-4карбоксамид;
]Ч-бензил-2-[2-метил-4-(1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ил)-1Н-индол-1-ил]-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-(2-метоксиэтокси)-1Ниндол-4-карбоксамид;
2- [4-(аминометил)-2-метил-1 Н-индол-1 -ил] -N-бенз ил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-(пропан-2-ил)-1 Н-индол4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-циклопропил-1 Н-инд ол-4карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -N,2-диметил-1 Н-инд ол-4карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -Ν,Ν, 2-триметил-1 Н-инд ол4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -1Ч-этил-2-метил-1 Н-инд ол4-карбоксамид;
1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-М-(2-метоксиэтил)-2-метил1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
14-(2-аминоэтил)-1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-этокси-1 Н-инд ол-4карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-(2-метоксиэтокси)-1Ниндол-4-карбонитрил;
2- [2-(1-аминоэтил)-1Н-индол-1-ил]-Н-бензил-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин4-амин;
N-бенз ил-2-(2-метокси-1Н-индол-1-ил)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-4-амин; N-бензил-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-4-амин;
2- [2-(аминометил)-1 Н-индол-1 -ил] -N-бенз ил-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -б]пиримидин-4амин;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2-метокси-1 Н-инд ол4-карбонитрил;
1 [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2-метил-1 Н-инд ол-4карбонитрил;
1 [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2-метокси-1 Н-инд ол4-карбоксамид;
1 [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2-метил-1 Н-инд ол-4карбоксамид;
2-(аминометил)-1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-1Ниндол-4-карбоксамид;
1 [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2[(диметиламино)метил] -1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-2-(гидроксиметил)1 Н-индол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-Н,2-диметил-1Ниндол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-Н,Н,2-триметил-1Ниндол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-2-метил-М-(пропан-2ил)-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]4М-(бутан-2-ил)-2метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]4М-[2(диметиламино)этил] -2-метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
N-бензил-2- { 2-метил-4-[(морфолин-4-ил)карбонил] -1 Н-индол-1 -ил} -5Н, 7Н, 8Нпирано[4,3-б]пиримидин-4-амин;
N-бензил-2- { 2-метил-4-[(пиперазин-1 -ил)карбонил] -1 Н-индол-1 -ил} -5Н,7Н, 8Нпирано[4,3-б]пиримидин-4-амин;
N-(2-аминоэтил)-1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримид ин-2-ил] -2метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4карбоновая кислота;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4сульфонамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-2-этил-1Н-индол-4карбоксамид;
- 19 030687
N-бензил-2-(4-метансульфонил-2-метил-1 Η-индол-1 -ил)-5Н,7Н, 8Н-пирано[4,3 d] пиримидин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2-метил-1 Н-инд ол-4карбоксимидамид;
Н-бензил-2-[2-метил-4-(1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ил)-1Н-индол-1-ил]-5Н,7Н,8Нпирано[4,ЗУ]пиримидин-4-амин;
1-(4-{[(4-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,ЗУ]пиримидин-2-ил)-2метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1- (4-{[(2-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил)-2метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
2- [4-(аминометил)-2-метил-1 Н-инд ол-1 -ил] -1М-бензил-5Н,7Н, 8Н-пирано[4,3 d] пиримидин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2[(карбамоиламино)метил] -1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2-(пропан-2-ил)-1Ниндол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил]-2-циклопропил-1Ниндол-4-карбоксамид;
1- (4-{[(3-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,ЗУ]пиримидин-2-ил)-2метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
2- [2-(1-аминоэтил)-1Н-индол-1-ил]-М-бензил-5Н,6Н,8Н-пирано[3,4У]пиримидин4-амин;
Н-бензил-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,7Н-фуро[3,4У]пиримидин-4-амин;
N-бензил-2-(2-метил-1 Н-инд ол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[4,3 -d] пиримидин-4амин;
1 - [4-(бензиламино)-2-(2-метил-1 Н-инд ол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[4,3 d]πиpимидин-6-ил]эτaн-1 -он;
2-[2-(1-аминоэтил)-1Н-индол-1-ил]-Н-бензил-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
N-бензил-2-(2-метокси-1 Н-инд ол-1 -ил)-5Н,6Н, 7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримид ин-4амин;
2- [2-(аминометил)-1Н-индол-1 -ил] -1М-бензил-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пирид о[4,3 d] пиримидин-4-амин;
2- [2-(аминометил)-1Н-индол-1 -ил] -N- [(4-фторфенил)метил]-5Н, 6Н, 7Н, 8Нпиридо[4,ЗУ]пиримидин-4-амин;
1М-бензил-2-(2-этокси- 1Н-индол-1 -ил)-5Н,6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,З-d] пиримид ин-4амин;
N-бензил-2-[2-(морфолин-4-илметил)-1 Н-инд ол-1 -ил]-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[4,3 d] пиримидин-4-амин;
Н-бензил-2-(2-метокси-1Н-индол-1-ил)-6-метил-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
{1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,ЗУ]пиримидин-2-ил]-1Н-индол-2ил (метанол;
1-{1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,ЗУ]пиримидин-2-ил]-1Н-индол-2ил}этан-1-ол;
N-бензил-2-[2-(метоксиметил)-1 Н-инд ол-1 -ил] -5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пиридо[4,3 d] пиримидин-4-амин;
N-бензил-2- { 2- [(диметиламино)метил]-1 Н-инд ол-1 -ил } -5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 d] пиримидин-4-амин;
Н-({1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил) ацетамид;
({1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,ЗУ]пиримидин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил)мочевина;
метил-М-({1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,ЗУ]пиримидин-2-ил]-1Ниндол-2-ил } метил)карбамат;
Н-({1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил)метансульфонамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2,3 -дигидро-1Ниндол-2-он;
{1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,ЗУ]пиримидин-2-ил]-1Н-индол-2ил}метилкарбамат;
Н-бензил-2-(2,4-диметил- 1Н-индол-1 -ил)-5Н,6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3-d] пиримид ин-4амин;
Н-бензил-2-(4-фтор-2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-1Ниндол-4-карбонитрил;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-1Ниндол-6-карбонитрил;
- 20 030687
N-бензил-2-(4-метокси-2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пиридо[4,3 d] пиримидин-4-амин;
1М-бензил-2-[2-(трифторметил)-1Н-индол-1-ил]-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
N-бензил-6-метил-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[4,3 d] пиримидин-4-амин;
Н-бензил-2-[2-(пропан-2-ил)-1Н-индол-1-ил]-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
N-бенз ил-2-(2-этил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -1 Н-инд ол-2карбоксамид;
1М-бензил-2-(4-хлор-2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
1М-бензил-6-этил-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
N-бензил-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-6-(пропан-2-ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пиридо[4,3 d] пиримидин-4-амин;
Н-бензил-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-6-пропил-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-1Ниндол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метокси-1Ниндол-4-карбонитрил;
4-(бензиламино)-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-6-ол;
1-[4-(бензиламино)-6-метил-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил1 Н-инд ол-4-карбонитр ил;
1М-бензил-2-[2-метил-4-(трифторметил)-1Н-индол-1-ил]-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
Н-бензил-2-(2-хлор-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-4-амин; 1-[4-(бензиламино)-6-этил-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил1 Н-инд ол-4-карбонитр ил;
1 - [4-(бензиламино)-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[4,3 d]πиpимидин-6-ил]πpoπ-2-ин-l-oн;
1-[4-(бензиламино)-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3б]пиримидин-6-ил]проп-2-ен-1 -он;
4-(бензиламино)-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,34]пиримидин-6-карбальдегид;
М-{1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Ниндол-4-ил } ацетамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пир идо[4,3-б]пиримидин-2-ил]-Н,2-диметил-1Ниндол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо [4,3 -d] пиримидин-2-ил] -ИЦД-триметил1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,ЗЩпиримидин-2-ил]-2-метил-М(пропан-2-ил)-1Н-индол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-2-ил]-Н-(бутан-2-ил)-2метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
1 [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -1 Н-индол-4карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-2,3 дигидро- 1Н-индол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-2,3 дигидро-1 Н-инд ол-4-карбонитр ил;
1-[6-(2-аминоацетил)-4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-2ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбонитрил;
1-[4-(бензиламино)-6-(2-метоксиацетил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-2ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбонитрил;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метокси-1Ниндол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-1Ниндол-4-сульфонамид;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-1Ниндол-4-карбоновая кислота;
Т4-бензил-2-(4-метансульфонил-2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3б]пиримидин-4-амин;
1 [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-(2метоксиэтокси)-1Н-индол-4-карбоксамид;
- 21 030687
N-бензил-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[3,4-d] пиримидин-4амин;
трет-бутил-4-(бензиламино)-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[3,4d] пиримидин-7-карбоксилат;
1 - [4-(бензиламино)-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[3,4d] пиримидин-7-ил]этан-1 -он;
трет-бутил-4-(бензиламино)-2-(2-метокси-1Н-индол-1-ил)-8-оксо-5Н,6Н,7Н,8Нпиридо[3,4-d] пиримид ин-7-карбоксилат;
2-[2-(аминометил)-1Н-индол-1-ил]-М-бензил-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[3,4d] пиримидин-4-амин;
1М-бензил-2-(2-метокси-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[3,4^]пиримидин-4амин;
1- {2-[2-(аминометил)-1Н-индол-1-ил]-4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[3,4d] пиримидин-7-ил }этан-1 -он;
2- [2-(аминометил)-1 Н-индол-1 -ил] -1Ч-бензил-7-этил-5Н,6Н, 7Н, 8Н-пирид о[3,4d] пиримидин-4-амин;
метил-2- [2-(аминометил)-1 Н-индол-1 -ил] -4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Нпиридо[3,4-d] пиримид ин-7-карбоксилат;
N-бензил-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[3,4-d] пиримидин-4амин;
1М-бензил-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н-пирроло[3,4^]пиримидин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-2-(2-метил-1 Н-индол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н-пирроло[3,4d]πиpимидин-6-ил]эτaн-1 -он.
Следующие соединения представляют собой дополнительные примеры соединений формулы I, отличные от ранее синтезированных соединений, которые также представляют собой предпочтительные виды, которые можно получать с помощью способов, описанных в настоящей заявке:
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2- [(карбамоиламино)метил]-1Ниндол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н-фуро[3,4-0]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н-пирроло[3,4-б]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)-6-метил-5Н,6Н,7Н-пирроло[3,4-0]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Ниндол-4-карбоксамид;
1-[6-ацетил-4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н-пирроло[3,4-б]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Ниндол-4-карбоксамид.
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают следующие далее синтезированные соединения. Указанные соединения идентифицированы с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
- 22 030687
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбонитрил;
Ы-бензил-2-(2-метокси-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
2-[2-(аминометил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]-Т4-бензил-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
2-[2-(1-аминоэтил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]-N-бенз ил-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
N-бензил-2-(2-метил-1 Η-1,3 -бензодиазол-1 -ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
{1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -1 Η-1,3-бензодиазол-2ил) метанол;
N-бензил-2- { 2- [(д иметиламино)метил]-1 Η-1,3 -бензодиазол-1 -ил )-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
N-бенз ил-2-[2-(морфолин-4-илметил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
^-({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-1,3-бензодиазол-2ил } метил) ацетамид;
( {1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8 -тетрагидрохиназол ин-2-ил]-1 Η-1,3 -бензодиазол-2ил ) метил)мочевина;
N-бенз ил-2-[2-(морфолин-4-ил)-1Н-1,3-бензодиазол-1 -ил]-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбонитрил;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбоксамид;
2-(аминометил)-1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-1,3бензодиазол-4-карбонитрил;
2-(аминометил)-1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-1,3бензодиазол-4-карбоксамид;
1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил)-2-метокси-1Нбензо[б]имидазол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метокси-1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбоновая кислота;
N-бенз ил-2-(2-этокси- 1Н-1,3-бензодиазол-1 -ил)-5Н,6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
N-бенз ил-2-(2-метокси-1Н-1,3-бензодиазол-1 -ил)-5Н,6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
N-бензил-2-(2-метил-1 Η-1,3 -бензодиазол-1 -ил)-5Н,6Н, 7Н, 8Н-пиридо[4,3 d] пиримидин-4-амин;
{1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-2-ил]-1Н-1,3бензодиазол-2-ил) метанол;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -1 Η-1,3 бензодиазол-2-илкарбамат;
{1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3-б]пиримидин-2-ил]-1Н-1,3бензодиазол-2-ил) мочевина;
N-бензил-2-[2-(трифторметил)-1 Η-1,3 -бензодиазол-1 -ил] -5Н, 6Н,7Н, 8Н-пирид о[4,3 d] пиримидин-4-амин;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбонитрил;
1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил-1 Η-1,3 бензод иазол-4-карбоксамид.
Следующие соединения представляют собой дополнительные примеры соединений, отличные от соединений, которые были ранее синтезированы, которые также представляют собой предпочтительные виды, которые можно получать с помощью способов, описанных в настоящей заявке:
- 23 030687
2-(аминометил)-1 -[4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримид ин-2-ил] -1Н1,3 -бензодиазол-4-карбоксамид
2-амино-1 - [4-(бензиламино)- 5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбоксамид;
2-амино-1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3-0]пиримидин-2-ил]-1Н-1,3бензодиазол-4-карбоксамид;
2-амино-1 - [4-(бензиламино)- 5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбоксамид.
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают следующие далее синтезированные соединения. Указанные соединения идентифицированы с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
8-(аминометил)-Ы-бензил-2-(2-метил-1 Н-и ндол-1 -ил)хиназолин-4-амин 1У-бензил-8-метокси-2-(2-метил-1Н-индол-3-ил)хиназолин-4-амин;
N-бензил-8 -метокси-2-(2-метил-2,3 -дигидро-1 Н-инд ол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
1- [4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-2,3-дигидро-1Н-индол-2-он;
N-бензил-8 -метокси-2-(2-метил-1 Н-инд ол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
1У-бензил-2-(2-этил-1Н-индол-1-ил)-8-метоксихиназолин-4-амин;
М-бензил-8-метокси-2-(2-метокси-1Н-индол-1-ил)хиназолин-4-амин;
2- [2-(аминометил)-1Н-индол-1 -ил] -М-бензил-8-метоксихиназол ин-4-амин;
4-(бензиламино)-2-(2-метил- 1Н- индол-1 -ил)хиназолин-8-карбоксамид;
4-(бензиламино)-2-(2-метил- 1Н- индол-1 -ил)хиназолин-8-карбонитрил;
2- [2-(аминометил)-1Н-индол-1 -ил] - М-бензил-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4амин;
1\Г-({1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил)ацетамид;
Н-({1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-1Н-индол-2-ил]метил)проп-2енамид;
(2Е)-3-{1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-1Н-индол-2-ил}проп-2ененитрил;
(22)-3-{1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-1Н-индол-2-ил}-2цианопроп-2-енамид;
(2Е)-3-{3-[({2-[2-(аминометил)-1Н-индол-1-ил]-8-метоксихиназолин-4ил } амино)метил] фенил } προπ-2-ене нитрил;
(22)-3-{3-[({2-[2-(аминометил)-1Н-индол-1-ил]-8-метоксихиназолин-4ил } амино)метил] фенил } -2-цианопроп-2-енамид;
2- [2-(аминометил)-1Н-индол-1 -ил] -N-({3 - [(Е)-2(бензолсульфонил)этенил]фенил}метил)-8-метоксихиназолин-4-амин;
- 24 030687
2- [2-(аминометил)-1Н-индол-1 -ил] -N-({3 - [(Е)-2метансульфонилэтенил]фенил}метил)-8-метоксихиназолин-4-амин;
N-бензил-2- { 2- [(Е)-2-метансульфонилэтенил]-1 Н-инд ол-1 -ил } -8метоксихиназолин-4-амин;
2- {2- [(Е)-2-(бензол сульфонил )этенил] -1 Н-инд ол-1 -ил} - М-бензил-8метоксихиназолин-4-амин;
2-[2-(1-аминоэтил)-1Н-индол-1-ил]-М-бензил-8-метоксихиназолин-4-амин;
2-[2-(1-аминоэтил)-1Н-индол-1-ил]-М-бензил-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4амин;
(22)-3-{1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-1Н-индол-2-ил}проп-2ененитрил;
3 - [({ 2- [2-(аминометил)-1 Н-инд ол-1 -ил] -8-метоксихиназолин-4ил } амино)метил] бензонитрил;
Н-бензил-2-(2-метокси-1Н-индол-1-ил)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин
{1 - [4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил] -1 Н-инд ол-2-ил } метанол;
Н-бензил-8-(2-метоксиэтокси)-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)хиназолин-4-амин;
N-бензил-2- { 2- [(диметиламино)метил]-1 Н-инд ол- 1 -ил } -8-(2метоксиэтокси)хиназолин-4-амин;
1М-бензил-8-(2-метоксиэтокси)-2-[2-(морфолин-4-илметил)-1Н-индол-1ил]хиназолин-4-амин;
Н-({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил) ацетамид;
({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил)мочевина;
метил-М-({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил}метил)карбамат;
Н-({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил } метил)метансульфонамид;
1 - [4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил] -2-метил-1 Н-индол-4карбонитрил;
1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол-4карбонитрил;
1-[4-(бензиламино)-8-метокси-хиназолин-2-ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид.
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают следующие далее синтезированные соединения. Указанные соединения идентифицированы с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
2- [2-(аминометил)- 1Н-1,3 -бензодиазол-1 -ил]-Р4-бензил-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-4-амин;
2-[2-(1-аминоэтил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]-Р4-бензил-8-(2-1'4-бензил-8-метокси-2(2-метил-1 Η-1,3 -бензодиазол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
М-бензил-8-метокси-2-(2-метокси- 1Н-1,3 -бензодиазол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
Ν-{ l-[4-(бeнзилaминo)-8-мeτoκcиxинaзoлин-2-ил]-lH-l,3-бeнзoдиaзoл-2ил}aцeτaмид;
1М-[(4-фторфенил)метил]-8-метокси-2-(2-метокси-1Н-1,3-бензодиазол-1ил)хиназолин-4-амин;
Н-бензил-2-(2-метокси-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4амин;
Т<-бензил-8-(2-метоксиэтокси)-2-(2-метил- 1Н-1,3 -бензодиазол-1 -ил)хиназолин-4амин;
{1 -[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]- 1Н-1,3-бензодиазол-2ил} метанол;
2-(аминометил)-1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-1Н-1,3бензодиазол-4-карбоксамид.
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают следую- 25 030687
щие далее синтезированные соединения. Указанные соединения идентифицированы с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
1 - [7-(бензиламино)тиазоло[5,4-d] пиримид ин-5 -ил] -2-метилиндол-4-карбоксамид;
1-[6-(бензиламино)-9Н-пурин-2-ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид;
1-[7-(бензиламино)оксазоло[5,4Щ]пиримидин-5-ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид;
1 - [7-(бензиламино)оксазоло[4,5 Щ]пиримидин-5 -ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид;
1 - [7-(бензиламино)тиазоло[4,5 -d] пиримид ин-5 -ил] -2-метилиндол-4-карбоксамид;
1 - [4-(бензиламино)тиено[2,3 -d] пиримид ин-2-ил] -2-метилиндол-4-карбоксамид.
Следующие соединения представляют собой дополнительные примеры, отличные от соединений, которые были ранее синтезированы, которые также представляют собой предпочтительные виды, которые можно получать с помощью способов, описанных в настоящей заявке:
1 - [7-(бензиламино)-[ 1,3 ]тиазоло[5,4-d] пиримидин-5 -ил]-2-метил-1 Н-индол-4карбоксамид;
1-[6-(бензиламино)-9Н-пурин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид;
1-[7-(бензиламино)-[1,3]оксазоло[5,4Щ]пиримидин-5-ил]-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
1-[7-(бензиламино)-[1,3]оксазоло[4,5-0]пиримидин-5-ил]-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
1-[4-(бензиламино)тиено[2,3-0]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид.
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают следующие далее синтезированные соединения. Указанные соединения определены с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
1 - [7-(бензиламино)тиазол о [ 5,4-d] пиримид ин-5 -ил] -2-метилинд ол-4-карбоксамид; 1-[6-(бензиламино)-9Н-пурин-2-ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид; 1-[7-(бензиламино)оксазоло[5,4-б]пиримидин-5-ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид; 1-[7-(бензиламино)оксазоло[4,5-б]пиримидин-5-ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид;
1 - [7-(бензиламино)тиазол о [4,5 -d] пиримид ин-5 -ил] -2-метилинд ол-4-карбоксамид; 1-[4-(бензиламино)тиено[2,3^]пиримидин-2-ил]-2-метилиндол-4-карбоксамид.
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают синтезированные соединения из табл. II-G. Указанные соединения определены с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
^бензил-5-(2-метокси-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил)-[1,3]тиазоло[5,4-б]пиримидин-7-амин
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают следующие далее синтезированные соединения. Указанные соединения определены с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
N-бензил-8-метокси-2-(2-метил-1 Н-индол-3 -ил)хиназолин-4-амин; 14-бензил-2-(2,3-дигидро-1Н-изоиндол-1-ил)-8-метоксихиназолин-4-амин; 3-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-1-он; 14-бензил-2-(2,3-дигидро-1Н-индол-3-ил)-8-метоксихиназолин-4-амин;
14-бензил-8-мето кси-2-(2-метил-2,3 - дигидро- 1Н-изоиндол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
14-бензил-8-метокси-2-(2-метил-1-бензофуран-3-ил)хиназолин-4-амин.
Особо предпочтительные виды конденсированных пиримидиновых соединений включают следующие далее синтезированные соединения. Указанные соединения определены с помощью названий по IUPAC. Если иное специально не указано, все из указанных видов конденсированных пиримидиновых соединений являются синтезированными.
- 26 030687
]\Г-бензил-2-{2-метилимидазо[1,2-а]пиридин-3-ил}-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
И-бензил-2-{2-метилпиразоло[1,5-а]пиридин-3-ил}-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
1М-бензил-2-(2-метил-1 Н-индол-3 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[4,3 -d] пиримидин-4амин;
1\Г-бензил-2-(2-метил-1 Н-индол-3 -ил)-5,6,7,8 -тетрагидрохиназолин-4-амин.
Наиболее предпочтительные конденсированные пиримидиновые соединения согласно изобретению
включают следующие далее примеры. Указанные примеры также включены в описанные ранее таблицы синтезированных соединений.
a) 1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагид рохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Н-инд ол-4карбонитрил;
b) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
c) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол4-карбоксамид;
d) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-этокси-1Н-индол4-карбоксамид;
e) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-(2-метоксиэтокси)1 Н-инд ол-4-карбонитр ил;
f) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-циклопропил-1Ниндол-4-карбоксамид;
g) Т4-({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-2ил} метил)проп-2-инамид;
h) Т4-бензил-2-[2-метил-4-(1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ил)-1Н-индол-1-ил]-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
i) 1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 Л]пиримидин-2-ил] -2-метокси-1Ниндол-4-карбоксамид;
j) 1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 Л]пиримидин-2-ил] -2-метил-1Ниндол-4-карбоксамид;
k) 1-(4-{[(3-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,ЗЩпиримидин-2ил)-2-метил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
l) 1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 Л]пиримидин-2-ил] -2-метил-1Ниндол-4-карбоновая кислота;
ш) 1М-бензил-2-(2-метил-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-4-амин;
π) 1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
o) 1 - [4-(бензиламино)-5Н, 6Н,7Н, 8Н-пиридо[4,3 -d] пиримидин-2-ил] -2-метил1 Н-индол-4-карбоновая кислота;
p) 2- [4-(аминометил)-2-метил-1 Н-инд ол-1 -ил] -N-бензил-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
q) 1 - [4-(бензиламино)-2-(2-метил-1 Н-инд ол-1 -ил)-5Н, 6Н, 7Н, 8Н-пирид о[3,4d]nHpHMHflHH-7-HH]npon-2-HH-l-он;
г) 1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метил-1 Н-инд ол-4сульфонамид;
s) N-бензил-2-(4-метансульфонил-2-метил-1 Н-инд ол-1 -ил)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин;
t) 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,ЗЛ]пиримидин-2-ил)-М,2д иметил-1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
u) 1 - [4-(бензиламино)-5Н, 7Н, 8Н-пирано[4,3 Л]пиримидин-2-ил] -1Ч,2-д иметил1 Н-инд ол-4-карбоксамид;
v) 1 - [4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил] -2-метокси-1 Η-1,3 бензодиазол-4-карбоновая кислота;
w) 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,ЗЛ]пиримидин-2-ил)-2метокси-1Н-бензо[Л]имидазол-4-карбоксамид;
x) М-бензил-2-(2-метокси- 1Н-1,3-бензодиазол-1 -ил)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин.
- 27 030687
Синтетический способ получения
Новые соединения согласно настоящему изобретению можно получать с помощью различных способов, известных специалистам в области органического синтеза. Соединения согласно настоящему изобретению можно синтезировать с использованием способов, описанных далее в настоящей заявке, вместе со способами синтеза, известными в области химии органического синтеза, или их вариантами, что очевидно специалистам в данной области техники.
Способ получения соединений может включать введение и удаление различных химических групп. Специалист в данной области техники легко определит необходимость введения и удаления защитных групп и осуществит выбор подходящих защитных групп. Химизм защитных групп можно найти, например, в источнике Greene and Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 44th. Ed., Wiley & Sons, 2006, а также в источнике Jerry March, Advanced Organic Chemistry, 4th edition, John Wiley & Sons, publisher, New York, 1992, которые полностью включены в настоящую заявку посредством ссылки.
Конденсированную пиримидиновую каркасную структуру можно получать с помощью литературных методов, цитированных в следующем далее тексте. На следующих схемах показаны общепринятые известные способы синтеза указанных каркасных структур.
Фрагмент -G-Het и аминные заместители конденсированных пиримидиновых каркасных структур можно синтезировать и присоединять к указанным каркасным структурам с помощью литературных методов, цитированных в следующем далее тексте. На следующих схемах показаны известные методы осуществления указанного присоединения.
Общие схемы синтеза конденсированных пиримидинов
Соединения согласно настоящему изобретению можно синтезировать с использованием следующих способов. Приведены общие условия реакций, продукты реакций можно очищать с помощью общих известных способов, включая кристаллизацию, хроматографию на силикагеле с использованием различных органических растворителей, таких как гексан, циклогексан, этилацетат, метанол и т.д., препаративную жидкостную хроматографию высокого давления или препаративную обращенно-фазовую жидкостную хроматографию высокого давления.
Циклический сложный кетоэфир общей структуры 1 можно подвергать реакции с мочевиной в присутствии кислоты, такой как HCl, в растворителе, таком как этанол, при температуре обратной конденсации в течение от 6 до 48 ч с получением пиримидиндиона общей структуры 2. Конденсированный пиримидин общей структуры 2 можно получать в результате реакции между циклическим сложным кетоэфиром общей формулы 1 и мочевиной в присутствии основания, такого как метоксид натрия, в растворителе, таком как метанол, при температуре обратной конденсации в течение от 6 до 48 ч. Третий используемый способ получения конденсированных пиримидинов общей структуры 2 представляет собой реакцию между циклическим или гетероциклическим кетоном структуры 3 и хлоркарбонилизоцианатом (4) при температурах от 60 до 130°C в течение 2-4 ч. Полученные промежуточные соединения затем выделяют и обрабатывают гидроксидом аммония при температуре 80°C с получением желаемого соединения 2.
Пиримидиндион 2 можно подвергать реакции с избытком POCl3 при температуре обратной конденсации в течение 3-12 ч необязательно в присутствии третичного амина, такого как триэтиламин, диизопропилэтиламин или диметиланилин с получением конденсированного дихлорпиримидина общей структуры 5. Вместо POCl3 можно использовать другие хлорирующие агенты, такие как тионилхлорид или PCL5.
- 28 030687
Конденсированные дихлорпиримидины общей структуры 5 можно подвергать реакции с избыточным количеством различных замещенных аминов общей структуры 6 при температурах, варьирующих от комнатной температуры до температуры обратной конденсации, в растворителе, таком как ацетонитрил или диметилформамид, с получением 4-амино-2-хлор конденсированных пиримидинов общей структуры 7.
Интересующие соединения общей структуры 9, если применимо, можно получать путем проведения реакции между конденсированным 2-хлорпиримидином 7 и гетероциклическим соединением общей структуры 8 в присутствии металлоорганического катализатора, такого как Pd(dba)2, с добавлением или без добавления фосфинового лиганда, такого как x-phos, трифенилфосфин или т.д., в растворителе, таком как ТГФ или диоксан, при температуре, варьирующей от комнатной температуры до температуры обратной конденсации.
Y, Z = CR, N
А, В, С, D = СХ, CR, N, О, S R = С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Е = СН2, NR, О, S А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил R’ = Н, алкокси, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил ш= 1-2 и= 0-3 р = 0,1
В некоторых случаях соединения общей структуры 9, где Y представляет собой C, R и Z представляют собой N, можно получать путем проведения реакции между диаминоарильным или гетероарильным соединением общей структуры 10 и конденсированным 2-хлорпиримидином 7 в присутствии каталитического количества металлоорганического катализатора, такого как Pd(OAc)2, и основания, такого как карбонат цезия, в растворителе, таком как ТГФ или диоксан, при температуре между комнатной температурой и температурой обратной конденсации с получением диаминов общей структуры 11.
H2N NH2 Pd(OAc)2
7 + М CsCO3 ; - eTJYn i
Г) A Λ4 v_'/ диоксан 0¼8
Ry R7
10 Аг
А, В, C, D = СХ, CR, Ν, 0, S 11
R = H, C1-C6 алкил или Е = СН2, NR, О, S
замещенный С1-С6 алкил А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S
X = галоген, алкокси или R = Н, С1-С6 алкил или
нитрил замещенный С1-С6 алкил
р = 0,1 X = галоген, алкокси или нитрил
т = 1-2
и= 0-3 р = о,1
Диамин 11 можно превращать в соединение общей структуры 12 путем проведения реакции между указанным диамином и бромистым цианогеном в присутствии растворителя, такого как ацетонитрил, с получением соединения общей структуры, такой как 12. Альтернативно, соединения общей структуры 7 можно подвергать реакции с тетраметоксиметаном в присутствии уксусной кислоты при температуре обратной конденсации с получением соединения общей структуры 13. В других случаях соединения общей структуры 7 можно получать путем нагревания диаминов общей структуры 11 с карбоновыми кислотами для получения соединений общей структуры 14.
- 29 030687
Η,Ν
бромистый
цианоген
«ir
.Ν.
12
Ε = СН2, NR, О, S А, В, C, D = CX, CR, N, O, S R = H, C1-C6 алкил или замещенный C1-C6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил ш= 1-2 и= 0-3 Р = 0,1
МеО
11
(ОМе)4С
<07+
Y-R,
Аг 13
Е = СН2, NR, О, S А, В, С, D = CX, CR, N, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил т= 1-2 и= 0-3 р = 0,1
r;
R'CO2H
' 'т I к6 к7 Аг
14
Е = СН2, NR, О, S А, В, С, D = CX, CR, N, О, S R, R’ = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил
X = галоген, алкокси или нитрил т = 1-2 и= 0-3 р = 0,1
Интересующие соединения общей структуры 16 можно получать путем проведения реакции между сложными бороновыми эфирами общей структуры 15 и конденсированными хлорпиримидинами общей структуры 7 в присутствии металлоорганического катализатора, такого как Pd(dba)2, и фосфинового лиганда типа x-phos.
Сложные боронатные эфиры общей структуры 15 можно получать из их соответствующих броми- 30 030687
дов 17 путем проведения реакции между указанными бромидами и сложными эфирами диборана 18 в растворителе, таком как ТГФ, при температуре, варьирующей от 0 до 70°C.
17
Y = CR, Ν; Z = NR, О, S А, В, С, D = СХ, CR, N, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р-0,1
15
Y = CR, Ν; Z = NR, О, S А, В, С, D = CX, CR, N, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Конденсированные дихлорпиримидины общей структуры 19, полученные с использованием способов, описанных в литературе (Heffron, Т. P. et al., J. Med. Chem. 2011 54, 7815), можно подвергать реакции с избыточным количеством различных замещенных аминов общей структуры 6 при температуре, варьирующей от комнатной температуры до температуры обратной конденсации, в растворителе, таком как ацетонитрил или диметилформамид, с получением 4-амино-2-хлор-конденсированных пиримидинов общей структуры 20. Соединения структуры 20 также можно подвергать реакции с гетероциклическими соединениями общей структуры 8 в присутствии металлоорганического катализатора, такого как Pd(dba)2, с добавлением или без добавления фосфинового лиганда, такого как x-phos, трифенил фосфин или т.д., в растворителе, таком как ТГФ или диоксан, при температуре, варьирующей от комнатной температуры до температуры обратной конденсации, с получением интересующего соединения 21.
CI
19
Е = CR, N; F = NR, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил
20
Е = CR, N; F = NR, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил
21
Е = CH, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил R’ = Н, алкокси, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил т = 1-2 п= 0-3
р = 0,1
Альтернативно, соединения общей структуры 20 можно подвергать реакции с диаминами общей структуры 10 с получением диамина 22 с использованием способов, описанных ранее для синтеза соединения 11. Соединение 22 можно превращать в интересующие соединения с общими структурами 23, 24 и 25 с использованием способа, подобного способу, используемому для получения соединений 12, 13 и 14.
- 31 030687
h2n
)==N
.
r,n.r ж
R6 R7 Ar 23
А, В, C, D = CR, CX, N, O, S E = CH, N; F = NR, O, S R = H, C1-C6 алкил или
замещенный C1-C6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
МеО
)==N
/ΎΝΤΝγ4
F ιΝ Ж
R6 R7 Ar 24
А, В, C, D = CR, CX, N, O, S E = CH, N; F = NR, 0, S R = H, C1-C6 алкил или
замещенный C1-C6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
\=Ν
УЛ
"А
и
A J
R6 R7 Ar 25
А, В, C, D = CR, CX, N, 0, S E = CH, N; F = NR, 0, S R = H, C1-C6 алкил или замещенный C1-C6 алкил X = галоген, алкокси или
нитрил р = 0,1
Интересующие соединения общей структуры 26 можно получать путем проведения реакции между сложными бороновыми эфирами общей структуры 15 и конденсированными хлорпиримидинами общей структуры 20 в присутствии металлоорганического катализатора, такого как Pd(dba)2, и фосфинового лиганда типа x-phos.
Конденсированные дихлорпиримидины общей структуры 27, полученные с использованием способов, описанных в литературе (Hancox, Timothy Colin et al., PCT Int. Appl., 2008152390), можно подвергать реакции с избыточным количеством различных замещенных аминов общей структуры 6 при температуре, варьирующей от комнатной температуры до температуры обратной конденсации, в растворителе, таком как ацетонитрил или диметилформамид, с получением 4-амино-2-хлор-конденсированных пиримидинов общей структуры 28. Соединения структуры 28 также можно подвергать реакции с гетероциклическим соединением общей структуры 8 в присутствии металлоорганического катализатора, такого как Pd(dba)2, с добавлением или без добавления фосфинового лиганда, такого как x-phos, трифенил фосфин или т.д., в растворителе, таком как ТГФ или диоксан, при температуре, варьирующей от комнатной температуры до температуры обратной конденсации, с получением интересующего соединения 29.
Альтернативно, соединения общей структуры 28 можно подвергать реакции с диаминами общей структуры 10 с получением диамина 30 с использованием способов, описанных ранее для синтеза соединения 11. Соединение 30 можно превращать в интересующие соединения, имеющие общие структуры 31, 32 и 33, с использованием способа, подобного способам, используемым для получения соединений 12, 13 и 14.
- 32 030687
Ar
30
Ε = CH, N; F = NR, О, S А, В, C, D = CR, CX, N, O, S Y, Z = CR’, N R = H, C1-C6 алкил или замещенный C1-C6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Аг
31
МеО
Аг
32
Аг
33
Е = CH, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, CX, N, О, S Y,Z = CR’,N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрш р = 0,1
Е = CH, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, CX, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Е = CH, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, CX, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Интересующие соединения общей структуры 34 можно получать путем проведения реакции между сложными бороновыми эфирами общей структуры 15 и конденсированными хлорпиримидинами общей структуры 28 в присутствии металлоорганического катализатора, такого как Pd(dba)2, и фосфинового лиганда типа x-phos.
Аг
34
Е = CR, N; F = NR, О, S Y = CR, Ν; Z = NR, О, S А, В, С, D = CR, CX, N, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Соединения общей структуры 35 можно получать из промежуточных соединений и с помощью способа, аналогичных промежуточным соединениям и способам, используемым для получения соединения 27 и описанным в источнике Baraldi PG et al., Biog. Med. Chem. Lett. 2012, 20, 1046-1059. Соединения общей структуры 35 можно использовать для получения соединений общей структуры 36-40 с помощью общего способа, описанного ранее.
- 33 030687
Соединения общей структуры 41 можно иолучать из иромежуточных соединений и с иомощью сиособа, аналогичных иромежуточным соединениям и сиособам, исиользуемым для иолучения соединения 27 и оиисанным в источнике Ali, Amjad et al., J. Med. Chem. 2003 46, 1824-1830. Соединения общей структуры 41 можно исиользовать для иолучения соединений общей структуры 42-46 с иомощью общего сиособа, оиисанного ранее.
CI
41
Е = CR, N; F = NR, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил
Аг
42
Е = CR, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил R’ = Н, алкокси, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Аг
43
Е = CR, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Аг
44
Е = CR, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Аг
45
Е = CR, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Аг
46
Е = CR, N; F = NR, О, S А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y = CR, Ν; Z = NR, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
- 34 030687
Соединения общей структуры 47 можно получать, как описано в источниках Bergeron P. et al. PCT Int. Appl., 2010151601, и Asano, S. PCT Int. Appl., 2011152485. Соединения общей структуры 46 можно использовать для получения интересующих соединений 47-51 с использованием описанного выше способа.
53
Е = NR, О
R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил и— 0-3
E = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил R’ = Н, алкокси, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил и= 0-3 р = 0,1
Аг
МеО
Аг
Аг
49
Е = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил и= 0-3 р = 0,1
50
Е = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил и= 0-3 р = 0,1
51
Е = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил и= 0-3 р = 0,1
Аг
52
Е = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y = CR, Ν; Z = NR, О, S R = Н, С1-С6 алкил или
замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил р = 0,1
Соединения общей структуры 53 можно получать с использованием способа, описанного в источнике Srinivasan, A. et. al. J., Org. Chem. 1982, 47, 4391-6. Соединения общей структуры 53 можно использовать для получения интересующих соединений 54-58 с использованием описанного выше способа.
- 35 030687
ci
53
E = NR, О
R = H, C1-C6 алкил или замещенный C1-C6 алкил η— 0-3
Е = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR’, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил R’ = Н, алкокси, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил п= 0-3 р = 0,1
Аг
55
E = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил п= 0-3 р = 0,1
МеО
Аг
56
E = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил п= 0-3 р = 0,1
Е = NR, О
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y = CR, Ν; Z = NR, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил
X = галоген, алкокси или нитрил и= 0-3 р = 0,1
Соединения общей структуры 59 можно получать с помощью способов, описанных для получения соединений общей структуры 5, и превращать в соединения общей структуры 60 с использованием окисляющего агента, такого как йоднокислый натрий, в присутствии каталитического количества тетроксида рутения. Соединения общей структуры 60 можно превращать в соединения общей структуры 61 с использованием способа, описанного для превращения соединений 7 в соединения 9. Защитную группу можно удалять в подходящее время в ходе последовательных синтетических реакций с использованием раствора HCl в диоксане, если защитная группа представляет собой Boc, H2 и палладия на углеродном носителе, если защитная группа представляет собой CBZ, и цериевого нитрата аммония, если защитная группа представляет собой 4-метокси-CBZ.
Соединения общей структуры 60 можно превращать в соединения общей структуры 61 с использованием способа, описанного для превращения соединений 7 в соединения 11-13. Защитную группу можно удалять в подходящее время в ходе последовательных синтетических реакций с использованием раствора HCl в диоксане, если защитная группа представляет собой Boc, H2 и палладия на углеродном носителе, если защитная группа представляет собой CBZ, и цериевого нитрата аммония, если защитная группа представляет собой 4-метокси-CBZ.
- 36 030687
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил п= 0-3 р = 0,1
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил п= 0-3 р = 0,1
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y, Z = CR, N R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил X = галоген, алкокси или нитрил п= 0-3 р = 0,1
Соединения общей структуры 60 можно превращать в соединения общей структуры 65 с использованием способа, описанного для превращения соединений 7 в соединения 16. Защитную группу можно удалять в подходящее время в ходе последовательных синтетических реакций с использованием раствора HCl в диоксане, если защитная группа представляет собой Boc, H2 и палладия на углеродном носителе, если защитная группа представляет собой CBZ, и цериевого нитрата аммония, если защитная группа представляет собой Т-метокси-CBZ.
Аг
65
А, В, С, D = CR, СХ, N, О, S Y = CR, Ν; Z = NR, О, S R = Н, С1-С6 алкил или замещенный С1-С6 алкил
X = галоген, алкокси или нитрил и= 0-3 р = 0,1
Биологические анализы
Биологическую активность конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению можно определять путем их исследования в анализах in vitro и в клеточных анализах с использованием общепринятых протоколов для идентификации и выбора соединений, которые проявляют противораковую активность. Настоящее изобретение основывается на способности конденсированных пиримидиновых соединений взаимодействовать с протеасомным комплексом p97. Как описано в разделе "Уровень техники", функция комплекса p97 является существенной для продолжительной жизнеспособности клеток. Ингибирование активности комплекса вызывает накопление белка в клетке и последующий апоптоз. Биологические анализы позволяют оценивать биологическую активность конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению.
Первичные биологические анализы представляют собой анализы in vitro и клеточные анализы для определения ингибирующей способности конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению в отношении валозинсодержащего белка, т.е. p97. Анализы также обеспечивают первичный показатель биодоступности конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению.
Способность ингибировать комплекс p97 исследовали с помощью анализа p97 in vitro с использованием меченого субстрата p97 в соответствии с методом Кристиансона (Christianson, Nat Cell Biol. (2011) 14:93) для клеточного анализа p97. Клеточный анализ использовали для исследования противоопухолевых эффектов ингибиторов на культурах раковых клеток. Проводили анализ противоопухолевой активности на культивируемых раковых клетках с использованием коммерчески доступного аналитического набора Cell titer glo, предложенного компанией Promega. Дополнительные анализы на основе общепринятых в данной области техники исследованиях на моделях, разработанные для демонстрации способности соединений согласно изобретению достигать клетки-мишени in vivo, обеспечивают оценку биодоступности. Все исследуемые соединения продемонстрировали противораковую активность. Указанные анализы также позволили идентифицировать конденсированные пиримидиновые соединения как кандидатов, которые могут быть выбраны для дальнейшей проверки с помощью противоопухолевых исследований in vivo на моделях мышей, морских свинок и собак. Было показано, что выбранные кандидаты обладают более чем желаемыми фармакокинетическими свойствами в указанных анализах in vitro.
Биохимический анализ АТФазы p97
Анализ АТФазы проводили в соответствии со следующим протоколом: очищенный фермент (20 нМ p97), субстрат (20 мкМ АТФ) и титры дозы соединений смешивали в буфере (50 мМ Трис pH 7,5, 20 мМ MgCl2, 0,02% ТХ-100, 1 мМ DTT, 0,2 об.% глицерин) и инкубировали при 37°C в течение 15 мин. Реакцию останавливали и уровень образовавшегося продукта измеряли с использованием аналитического
- 37 030687
набора ADP Glo (Promega, Мэдисон, Висконсин). В результате нанесения значения образовавшегося продукта на график относительно концентрации соединения с использованием приведения к четырехпараметрической модели получали значение IC50 для каждого соединения.
Клеточный анализ р97
За эффектами на клетки-мишени соединений согласно изобретению следили с использованием репортерной клеточной линии HEK-293 TCRa-GFP, как описано Кристиансоном (Christianson et al., Nat. Cell Biol. (2011) 14:93). Ингибирование оборота рецептора TCRa-GFP является критерием ингибирования p97. Протокол для отслеживания оборота TCRa-GFP в репортерных клетках следует далее: репортерные клетки высевали и инкубировали с протеасомным ингибитором Mg132 для накопления TCRaGFP. Затем Мд132-содержащую среду удаляли, и титры дозы соединения вместе с циклогексимидом инкубировали с клетками. По окончании инкубирования соединение и среду удаляли, клетки фиксировали и измеряли флуоресценцию GFP с помощью стандартной эпифлуоресцентной микроскопии. Значение флуоресценции наносили на график в зависимости от концентрации соединения с использованием приведенной четырех-параметрической модели с получением значений IC50 для каждого соединения.
Для получения количественных данных из указанных анализов использовали анализ изображений, указанный данные можно приводить к четырехпараметрической сигмоидальной кривой для выведения значений IC50. Наблюдали за субстратами системы убиквитин-протеасома, такими как p53, после инкубации опухолевых клеточных линий с соединениями в течение нескольких часов. Накопление указанных белков указывает на ингибирование опосредованной протеасомами деградации. За накоплением связи лизин-48 цепи поли-убиквитина также следили с помощью иммунофлуоресценции с использованием его в качестве индикатора ингибирования системы убиквитин-протеасома. LC3 и SQSTM1 являются медиаторами аутофагии. За локализацией и количеством указанных белков следили с помощью иммунофлуоресценции и определяли активность и ингибирование аутофагии в ответ на ингибирование p97.
Анализ культивируемых раковых клеток
За противоопухолевыми эффектами следили на культуре раковых клеток через несколько дней после обработки соединением. Анализ Cell titer glo (Promega) позволяет измерять количество присутствующей АТФ в качестве показателя клеточной выживаемости. Подсчет клеток осуществляли с помощью микроскопии с высоким разрешением с последующим анализом изображений. Использовали систему 3D-культуры в висячей капле (3D Biomatrix) с последующим использованием анализа Cell titer glo для измерения роста в опухолеподобных условиях.
Анализ абсорбции
Способность соединений абсорбироваться из просвета желудочно-кишечного тракта после перорального введения оценивали путем измерения степени их проникновения через монослой клеток Caco2. (SunD, et al., Curr. Opin. Drug Discov. Develop[(2004)75). Проникновение соединения in vitro (2 мкМ в буфере Креба или буфере HBSS, n=2) определяли с использованием 21-дневного монослоя клеток Caco2. Коэффициент проникновения определяли для апикально-базолатерального направления (A к B) и для базолатерально-апикального направления (B к A) через 120 мин при температуре 37°C. Отношение оттока рассчитывали на основе отношения коэффициента проникновения от B к A к коэффициенту проникновения от A к B для определения потенциала соединения являться субстратом для эффлюксного насоса (например, Pgp). Протокол для указанного анализа на клетках Caco-2 и соответствующее подробное описание приведены в следующем далее разделе экспериментов.
Анализ метаболической стабильности
Метаболическую стабильность соединений можно оценивать путем измерения периода их полувыведения на препаратах микросом печени (Roserts, Sa, et al., Xenobiotica (2001) 37:557). Соединения наносили на препараты микросом печени мышей в присутствии NADPH, и их время полувыведения определяли путем измерения скорости исчезновения соединений из препарата путем определения концентрации через 0, 15, 30 и 60 мин с использованием ЖХМС/МС. Протокол для определения метаболической стабильности в анализе на мышиной печени и соответствующее подробное описание предложено в следующем разделе экспериментов.
Анализ неспецифичного связывания
Многие соединения, как известно, связываются неспецифично с белками, которые присутствуют в большом количестве в плазме крови. Фракция несвязанного лекарственного средства (свободная фракция) доступна для взаимодействия с мишенями, которые находятся в тканях (Banker, M.J. et al., Curr. Drug Metab. (2008) 9:854). Способность соединений уходить из камеры, содержащей плазму крови, в камеру, содержащую только буфер, можно оценивать путем измерения концентрации, которая появляется в камере, содержащей буфер, и концентрации, которая сохраняется в камере, содержащей плазму. Указанные измерения можно использовать для определения фракции соединения, связанного с белками плазмы, и его свободной фракции (от 100 процентов связанных с белками плазмы). Протокол анализа связывания белков для определения неспецифичного связывания с белками в плазме крови и соответствующее подробное описание предложены в следующем разделе экспериментов.
Результаты первичного анализа, проведенного с выбранными конденсированными пиримидиновы- 38 030687
ми соединениями и замещенными хиназолиновыми соединениями согласно изобретению, показывают, что конденсированные пиримидиновые соединения согласно изобретению обладают значительной ингибирующей активностью (IC50) в отношении ферментативного действия p97 на его природный субстрат. Некоторые из указанных соединений также имеют более высокую активность в клеточных анализах и обладают фармакокинетическими свойствами in vitro, соответствующими хорошей пероральной биодоступности.
В табл. ΙΙΙ представлены результаты нескольких из указанных анализов, проведенных с конденсированными пиримидиновыми соединениями согласно изобретению. В табл. ΙΙΙ представлены не все данные анализов, однако все соединения согласно изобретению, перечисленные в таблицах соединений, показали соответствующие положительные результаты в указанных анализах. В табл. ΙΙΙ представлены суммированные данные таких результатов.
Таблица ΙΙΙ
Номер биологического примера Номер синтетического примера Структура Название по ШРАС IC50 р97 ****<30 нМ ***<100 нМ **<300 нМ * < 1000 нМ Интенсивность К48 в клетках А549, IC50 * < 10 мкМ Повышение LC3 в клетках А549 * > 50% относительно стандарта
1 7 Ы-бензил-8-метокси-2-(2метокси- 1Н-1,3 -бензо диазо л1 -ил)хиназолин-4-амин *** ND ND
2 9 фОЭ 8 -(амино метил) -Ν-бензил-2 (2-метил- Ш-индол-1ил)хиназо лин-4-амин * ND ND
3 21 у ι у' Ь ό 1-[4(бензиламино)тиено [2,3d] пиримидин-2 -и л] -1 Η-1,3 бензо диазол-2-амин ND ND
4 1 у <' с ]\Г-бензил-5-(2-метокси-1Н1,3 -бензодиазол-1 -ил)[1,3]тиазоло[5,4d] пиримидин-7 -амин *** ND ND
5 22 Сс+гЪ ό 2-(2-амино-1Н-1,3бензо диазол-1 -ил)-Ы-бензил9Н-пурин-6-амин ND ND
6 2 А.,2 1-[4-(бензиламино)5Н,6Н,7Нциклопента[б]пиримидин-2ил] - 1Н-1,3 -бензо диазол-2амин ND ND
- 39 030687
7 Ы-бензил-8-метокси-2-(2метил- Ш-индол-З ил)хиназо лин-4 -амин *** ND ND
8 ο7 tv' Ы-бензил-8-метокси-2-(2метил- lH-индол-1 ил)хиназо лин-4 -амин *** ND ND
9 γ Ί } ;' Γ ] "Ί [Γ; ]\Г-бензил-2-(2-метокси-1Н1,3 -бензодиазол-1 -ил)5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин *** *
10 3 , /' < Г'1 ί nJ Ы-бензил-2-(2 -метил- 1Ниндол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Нпиридо [4,3 -d] пиримидин-4 амин ** *
11 4 /Yj Ы-бензил-2-(2 -метил- 1Ниндол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Нпиридо [3,4-d | пиримидин-4амин ** ND ND
12 5 X 4-(бензиламино)-2-(2метокси- 1Н-1,3 -бензо диазо л1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Нпиридо [3,4-d] пиримидин-8он ND ND
13 6 ? <Уц о Ы-бензил-2-(2-метил-lHиндол-1-ил)-5Н,6Н,7Нпирроло [3,4-d | пиримидин-4амин ND ND
14 / Ы-бензил-8-метокси-2-(2метокси- lH-индол-1 ил)хиназо лин-4-амин *** *
15 „т ннЛ 1 СН с?'· 2-[2-(аминометил)-lHиндол- 1 -ил] -Ы-бензил-8метоксихиназолин-4-амин ***
- 40 030687
16 25 HN-^\ / СЩ Α α ]\Г-бензил-8-метокси-2-(2метил-1 -бензофуран-3 ил)хиназо лин-4-амин * ND ND
17 4-(бензиламино)-2-(2-метилШ-индол-1 -ил)хиназолин-8карбоксамид **
18 8 Ы-бензил-2-(2-метил-1Ниндол-1 -ил)-5Н,7Н-фуро[3,4d] пиримидин-4 -амин **
19 9 ο·/ 9? 4-(бензиламино)-2-(2-метилШ-индол-1 -ил)хиназолин-8карбонитрил *
20 7 vl? ° о 1-[4-(бензиламино)-2-(2метил- Ш-индол-1 -ил)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [3,4d] пиримидин-7 -ил] этан-1 -он *** *
21 rto Ы-бензил-2-(2-метил- 1Ниндол-1-ил)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин ** *
22 24 s * X ТЭЭ 1 r ' 1 И Ц 2-[2-(1-аминоэтил)-1Ниндол-1 -ил] -N-бензил5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин *
23 "rt~i J 2-[2-(аминометил)-1Ниндол-1 -ил] -]\Г-бензил-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-4амин **
24 "MX) Т4-бензил-2-(2-метокси-1Н1,3 -бензодиазол-1 -ил)-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-4амин ** *
- 41 030687
- 42 030687
34 С г С' (2Ζ)-3-{ 1-[4-(бензиламино)8-метоксихиназолин-2-ил] 1 Н-индо л-2 -ил } -2 цианопроп-2-енамид
35 -4 ГТу' Χγ " Ы-бензил-2-{2-[(Е)-2метансульфонилэтенил] - 1Ниндол-1-ил}-8метоксихиназолин-4-амин ** *
36 23 '•λ Λ ..... Τ ' L 1 2-[2-(1-аминоэтил)-1Ниндол-1 -ил] -N-бензил5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-4 -амин ND ND
37 "X-Q ΗΝΥ J СНг α- ο- 2-[2-(1-аминоэтил)-1Ниндол-1 -ил] -Ы-бензил-8метоксихиназолин-4-амин ** *
38 χχο .7 2-[2-(1-аминоэтил)-1Ниндол-1 -ил] -Ы-бензил-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-4амин **
39 (2Z)-3-{ 1-[4-(бензиламино)8-метоксихиназо лин-2-ил] 1 Н-индо л-2-ил } проп-2ененитрил **
40 "Ρυυί ό Ы-бензил-2-(2-метокси-1Ниндол-1 -ил)-6-метил5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-4 -амин *
41 X 7 ίΧυ * j Υι 14-бензил-2-(4-фтор-2-метилШ-индол-1-ил)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-4 -амин ** *
42 / ’ τ , Υ Γ t) 1 1-[4-(бензиламино)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-индол-4-карбонитрил * * * *
43 ' Υ7 Λ~ί <r X Υ Ί X ]\Г-бензил-2-(4-метокси-2метил- lH-индол-1 -ил)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-4 -амин $ $
- 43 030687
- 44 030687
53 •Xfl Ы-бензил-8-(2метоксиэтокси)-2-(2-метил1Н-1,3 -бензодиазол-1 ил)хиназо лин-4-амин **
54 "„и J {1-[4-(бензиламино)-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-2ил] - 1Н-1,3 -бензо диазол-2ил}метанол **
55 Q yVtq έ Ы-бензил-2-(2-метил- 1Н-1,3бензодиазол-1-ил)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин **
56 Ry--, {1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-2-ил] 1Н-1,3 -бензо диазол-2ил}метанол *
57 ·: И...... оУ 18Г-бензил-2-[2-(морфолин-4ил)- 1Н-1,3 -бензодиазол-1 ил]-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин **
58 ΐ -,f ί 14-бензил-2-(2-метокси-1Ниндо л-1 -ил)-5Н,7Н, 8Нпирано [4,3 -с!]пиримидин-4амин ** *
59 N-бензил-2 -(2 -метил- 1Н индол-1 -ил)-5Н,7Н, 8Нпирано [4,3 -с!]пиримидин-4амин **
60 У X Ы-бензил-2-{2метилимидазо [1,2а]пиридин-3-ил }-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин **
61 я. X Ы-бензил-2-(2-метил- 1Ниндол-3-ил)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин ** *
- 45 030687
62 ' Ж :Хό N-бензил-2 -(4 -хлор-2 -метилШ-индол-1-ил)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-4 -амин ** *
63 о N-бензил-6 -этил-2 -(2 -мети лШ-индол-1-ил)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-4 -амин * *
64 о Ы-бензил-2-(2-метил-1Ниндол-1 -ил)-6-(пропан-2-ил)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-4 -амин ** *
65 \ о КГ-бензил-2-(2-метил- 1Ниндол-1 -ил)-6-пропил5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-4 -амин *
66 20 1, У / /А У /лл Ί Г 1-[4-(бензиламино)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 -мстил1Н-индол-4-карбоксамид * * * * *
67 '1 ,о Ь 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-2-ил1 2- метил-1Н-индол-4карбонитрил * * *
68 'г ' Ί]"\ι ' I Ί. с 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- метокси-1Н-индол-4карбонитрил *** * *
69 т - <о :. х?... 1-[4-(бензиламино)-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-2ил] -2-метил- 1Н-ИИД0Л-4карбонитрил ****
70 у; м 1-[4-(бензиламино)-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-2ил] -2-метокси- Ш-индол-4карбонитрил ***
- 46 030687
71 'к/ . о 1-[4-(бензиламино)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 метокси- 1Н-индол-4карбонитрил **
72 <-А А ·' о 1-[4-(бензиламино)-6-метил5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 -метилШ-индол-4-карбонитрил *** * *
73 Ζ·?;: 1Ч-бснзил-2-(2-этокси-111индол-1-ил)-5.6.7.8тетрагидрохиназолин-4-амин *** *
74 “Г? ГтДО 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- метил- 1Н-1,3 -бензодиазол4-карбонитрил *** *
75 ,П гу, ό 1-[4-(бензиламино)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-1,3 -бензо диазол-4карбонитрил
76 А/ J Ы-бензил-2-(2-хлор-1Ниндол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Нпиридо [4,3 -d] пиримидин-4 амин ** *
ΊΊ Zl , т ] L 1 1Ч-бснзил-2-(2-\лор-1 ΓΙиндол-1-ил)-5.6.7.8тетрагидрохиназолин-4-амин *** *
78 ΐ < .'П «- .г. 1-[4-(бензиламино)-6-этил5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-индол-4-карбонитрил ***
79 " - 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 метокси-1Н-индол-4карбонитрил *** *
- 47 030687
80 Υϊ ’ 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-индол-4-карбонитрил ***
81 .Vf N-({ 1-[4-(бензиламино)5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 1 Н-индо л-2-ил } метил) проп2-инамид *** *
82 X rX.... < χ 1-[4-(бензиламино)-6-(2метоксиацетил)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-индол-4-карбонитрил ****
83 1-[4-(бензиламино)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-1,3 -бензо диазол-4карбоксамид *
84 4( ΎΥ1 , γ ..· "Ί I J 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 метокси-Ш-индол-4карбоксамид **** *
85 9 ΐ ’ ςη 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-индол-4-карбоксамид **** *
86 'Уо 2-(аминометил)-1-[4(бензиламино)-5Н,7Н,8Нпирано [4,3 -d | пиримидин-2ил] - 1Н-индол-4-карбоксамид ***
87 -у Cyt-J 2-(амино метил)-1 -[4(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-2-ил] 1Н-1,3 -бензо диазол-4карбонитрил *
88 Y 2-(аминометил)-1-[4(бензиламино)-8-(2метоксиэтокси)хиназолин-2ил] - 1Н-1,3 -бензо диазол-4карбоксамид *
- 48 030687
89 Р τγο 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-2-ил] 1H-1,3 -бензо диазол-2-ол *
90 r ρθ A 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- метил-1Н-ИИДОЛ-4карбоксамид **** * *
91 % рП 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- метокси-1Н-индол-4карбоксамид **** * *
92 • >с 1-[4-(бензиламино)5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо [4,3 d] пиримидин-2 -и л] -2 метокси-Ш-индол-4карбоксамид * *
93 К 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-1,3 -бензо диазол-4карбоксамид *** * *
94 • 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 метокси- 1Н-1,3 -бензо диазо л4-карбоксамид **** *
95 rVf'' J 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d]nnpn\nunH-2-[LT|-2[(диметиламино)метил] - 1Ниндол-4-карбоксамид *
96 ό 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d]nnpn\nunH-2-[TT]-2(гидроксиметил)- Ш-индол4-карбоксамид *
97 2 '! Ϊ? Τ ~ 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d]nnpn\nunH-2-[LT|-N.2диметил- lH-индо л-4карбоксамид *** * *
- 49 030687
98 / \ Г ‘ 1 1 J 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -ил] -Ν,Ν,2триметил-1Н-индол-4карбоксамид
99 r -, τ 1 J J 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -метилN-(nponaH-2-Kn)-1Н-индо л4-карбоксамид *
100 “ ν- Λ •У? ! At? T 1 C ΐ 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -ил] -N (бутан-2-ил)-2-метил- 1Ниндол-4-карбоксамид
101 /'! Vi ' ‘1 ~ A 1J 2-(аминометил)-1-[4(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 1Н-индол-4-карбоксамид **** * *
102 о , r rjj 1 С 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3б]пиримидин-2-ил]^-[2(диметиламино)этил] -2метил- 1Н-ИНД0Л-4карбоксамид $ $ $
103 ) r if Г - N-бензил-2 - { 2 -метил-4 [(морфолин-4-ил)карбонил] 1Н-индол-1 -ил}-5Н,7Н,8Нпирано [4,3 -d |пиримидин-4амин
104 / "Λ V. / '? Γ i τ ... . N-бензил-2 - { 2 -метил-4 [(пиперазин-1 -ил)карбонил] IH-индол-1 -ил}-5Н,7Н,8Нпирано 14.3 -d | пиримидин-4амин
105 % с И-(2-аминоэтил)-1-[4(бензиламино)-5Н,7Н,8Нпирано [4,3 -d | пиримидин-2ил] -2-метил- 1Н-ИИДОЛ-4карбоксамид * * *
106 "Ар VXpQ 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 метокси- 1Н-1,3 -бензо диазо л4-карбонитрил ** *
- 50 030687
107 ж/ V А / Ί а ίΟΟ ί ' "1. [I J 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-индол-4-карбоновая кислота **** *
108 12 А С г 5 Ύ" ί! 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-2-ил] 2- метил-1Н-ИИДОЛ-4карбоновая кислота **** *
109 13 >-ΑΑ 2 ι Α ΐ ι'1 Г ' 1 Α ] 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -метил1Н-индол-4-сульфонамид
ПО 14 ί ι ό 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- метил-1Н-ИИДОЛ-4сульфонамид *** *
111 15 ' ·49 Ϊ I Ί I " А U Ы-бензил-2-(4метансульфонил-2-метил1Н-индол-1-ил)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амин *** * *
112 ••'α,’α V’vn ] ’ Г ' ' 1 ί ~J 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- этил-1Н-ИНДОЛ-4карбоксамид *** $
113 Aι A 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 -этил1Н-индол-4-карбоксамид ** *
114 10 A V'Y-p A ’γΑ о 1-(4-(бензиламино)-7,8дигидро -5Н -пирано [4,3 d] пиримидин-2 -и л)-2 метокси-1Нбензо [d] имидазо л-4карбоксамид **** * *
115 4 rr-p A и 2-амино-1-[4-(бензиламино)5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2 -ил] 1Н-1,3 -бензо диазол-4карбоксамид **
- 51 030687
- 52 030687
125 А Уро ό 2 - [4 -(аминомети л)-2 -метилШ-индол-1 -ил] -N-бензил5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-4 -амин ND *
126 'X 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 [(карбамоиламино)метил] 1Н-индол-4-карбоксамид **
127 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- [(карбамоиламино)метил] 1Н-индол-4-карбоксамид ***
128 • ς ύ 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-2-ил] 2- (пропан-2-ил)-1Н-индол-4карбоксамид *** *
129 Аро "X XJ 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d] пиримидин-2 -и л] -2 (пропан-2-ил)-1Н-индол-4карбоксамид * ND ND
130 19 Х-,у ό 1- [4-(бензиламино)-5,6,7,8тетрагидрохиназо лин-2-ил] 2- циклопропил-1Н-индол-4карбоксамид **** * ND
131 18 ί -X, 1-[4-(бензиламино)5Н,7Н,8Н-пирано[4,3d|mipiiMiuHH-2-iu|-2циклопропил- 1Н-ИНДОЛ-4карбоксамид **** ND
132 11 у 1-(4-(бензиламино)-7,8дигидро-5Н-пирано[4,3d|nHpn\nuHH-2-iu)-N.2диметил- lH-индо л-4карбоксамид *
133 7'? 1 *
- 53 030687
Терапевтическое и физиологическое лечение
Согласно конкретным вариантам реализации, изобретение относится к способам ингибирования p97. Предпочтительные конденсированные пиримидиновые соединения и замещенные хиназолиновые соединения для применения в способах, описанных в настоящей заявке, связываются с активным сайтом p97, например, нековалентно или ковалентно. Согласно конкретным указанным вариантам реализации изобретения ковалентное связывание может быть обратимым или необратимым.
Соединения согласно изобретению и их фармацевтические композиции способны действовать в качестве "ингибиторов" p97, то есть способны блокировать или снижать активность фермента, например, ингибировать различные проявления активности p97. Ингибитор может действовать на основе конкурентного, неконкурентного или бесконкурентного ингибирования. Ингибитор может связываться обратимо или необратимо, и, таким образом, термин включает соединения, которые приводят к уничтожению фермента или могут вызывать конформационное изменение в каком-либо другом участке указанного фермента.
Соединения согласно изобретению и их фармацевтические композиции действуют в качестве терапевтических агентов с точки зрения их способности предотвращать, облегчать, модифицировать и/или влиять на расстройство или состояние, относится к соединению, которое в статистической выборке образцов, получающих лечение, снижает случаи возникновения расстройства или состояния по сравнению с контрольным образцом, не получающим лечение, или задерживает начало или снижает тяжесть одного или более симптомов указанного расстройства или состояния по сравнению с контрольным образцом, не получающим указанное лечение.
Способы предотвращения, ослабления, модифицирования и/или воздействия на состояние, такое как местный рецидив (например, боль), заболевание, такое как рак, комплекс синдромов, такой как сердечная недостаточность, или любое клиническое состояние, хорошо известны в данной области техники и включают введение композиции, которая снижает частоту или задерживает начало проявления симптомов указанного клинического состояния у субъекта по сравнению с субъектом, не получающим указанную композицию. Таким образом, предотвращение рака включает, например, снижение количества людей в популяции с опухолевым ростом и/или задержку появления выявляемого опухолевого роста в популяции, получающей лечение по сравнению с контрольной популяцией, не получающей указанное лечение, например, на статистически и/или клинически значимом уровне. Предотвращение инфекции включает, например, снижение количества случаев диагностирования инфекции в популяции, получающей лечение, по сравнению с контрольной популяцией, не получающей лечение, и/или задержку начала развития симптомов инфекции в популяции, получающей лечение, по сравнению с контрольной популяцией, не получающей указанное лечение. Предотвращение боли включает, например, снижение остроты или, альтернативно, задержку болевых ощущений, испытываемых субъектом, в популяции, получающей лечение, по сравнению с контрольной популяцией, не получающей указанное лечение.
- 54 030687
Соединения согласно изобретению и их фармацевтические композиции могут действовать профилактически и/или терапевтически, и их применение включает введение хозяину одной или более из интересующих композиций. Если соединение вводят до клинического проявления нежелательного состояния (например, заболевания или другого нежелательного состояния у животного-хозяина), то лечение является профилактическим (т.е. предотвращает развитие у хозяина нежелательного состояния); если указанное соединение вводят после проявления нежелательного состояния, то лечение является терапевтическим (т.е. направлено на снижение, ослабление или стабилизирование имеющегося нежелательного состояния или его побочных эффектов).
Соединения согласно изобретению и их фармацевтические композиции способны обеспечивать профилактическое и/или терапевтическое лечение. Если соединение или фармацевтическую композиция вводят до клинического проявления нежелательного состояния (например, заболевания или другого нежелательного состояния у животного-хозяина), то указанное лечение является профилактическим (т.е. оно защищает указанного хозяина от развития нежелательного состояния), тогда как если указанное соединение вводят после проявления нежелательного состояния, то лечение является терапевтическим (т.е. оно направлено на снижение, ослабление или стабилизацию имеющегося нежелательного состояния или его побочных эффектов). При использовании в настоящей заявке, термин «лечить» или «лечение» включает обращение, снижение или сдерживание симптомов, клинических признаков и патологических причин состояния, приводящее к улучшению или стабилизации состояния субъекта.
Соединения согласно изобретению и их фармацевтические композиции можно вводить в «терапевтически эффективном количестве» в соответствии с предполагаемым способом лечения. Терапевтически эффективное количество представляет собой количество соединения (соединений) в фармацевтической композиции, которое при введении в качестве части желаемой схемы дозирования (млекопитающему, предпочтительно, человеку) приводит к смягчению симптомов, облегчению состояния или задержке возникновения патологического состояния в соответствии с клинически приемлемыми стандартами для расстройства или состояния, которое предполагается лечить, или вводится в косметических целях, например, при благоприятном соотношении пользы/риска, подходящим для любого медицинского лечения.
Введение
Соединения, полученные, как описано в настоящей заявке, можно вводить в различных формах в зависимости от заболевания, которое предполагается лечить, и возраста, состояния и массы тела пациента, как хорошо известно в данной области техники. Например, когда соединения предполагается вводить перорально, они могут быть представлены в виде таблеток, капсул, гранул, порошков или сиропов; или для парентерального введения они могут быть представлены в виде инъекций (внутривенных, внутримышечных или подкожных), составов для капельного введения или суппозиториев. Для введения через слизистую оболочку глаз соединения могут быть представлены в виде глазных капель или глазных мазей. Указанные лекарственные формы можно получать с помощью стандартных способов и при желании активный ингредиент можно смешивать с любой стандартной добавкой или вспомогательном веществом, таким как связующее вещество, дезинтегрирующий агент, смазывающее вещество, корригирующее вещество, солюбилизирующий агент, суспендирующий агент, эмульгатор, агент покрытия, циклодекстрин и/или буфер. Несмотря на то, что доза варьирует в зависимости от симптомов, возраста и массы тела пациента, природы и тяжести расстройства, которое предполагается лечить или предотвращать, способа введения и формы лекарственного средства, в целом, для взрослого пациента, представляющего собой человека, рекомендуется суточная доза, составляющая от 0,01 до 2000 мг соединения, которую можно вводить в виде однократной дозы или дробных доз. Количество активного ингредиента, которое можно объединять с материалом носителя с получением единичной формы дозирования, в целом представляет собой количество соединения, обеспечивающее терапевтический эффект.
Точное время введения и/или количество композиции, приводящее к наилучшим результатам с точки зрения эффективности лечения у конкретного пациента, зависит от активности, фармакокинетики и биодоступности конкретного соединения, физиологического состояния пациента (включая возраст, пол, тип и стадию заболевания, общее физическое состояние, ответ на конкретную дозировку и тип медикамента), способа введения и т.д. Однако приведенное выше руководство можно использовать как основу для корректировки схемы лечения, например, для определения оптимального времени и/или дозы введения, требующей проведения не более чем стандартных экспериментов, включающих мониторинг субъекта и корректировку дозировки и/или временного режима.
Фраза "фармацевтически приемлемый" используется в настоящей заявке в отношении таких лигандов, материалов, композиций и/или форм дозирования, которые по результатам тщательной медицинской проверки являются подходящими для применения в контакте с тканями человека и животных и не вызывают чрезмерной токсичности, раздражения, аллергических реакций или других проблем или осложнений, в соответствии с благоприятным соотношением польза/риск.
"Фармацевтически приемлемый носитель" представляет собой фармацевтически приемлемый материал, композицию или наполнитель, такой как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, растворитель или инкапсулирующий материал. Каждый носитель должен являться "приемлемым" с точки зрения совместимости с другими ингредиентами лекарственной формы и не нано- 55 030687
сить вред пациенту. Некоторые примеры материалов, которые могут применяться в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают: (1) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (2) крахмалы, такие как кукурузный крахмал, картофельный крахмал и замещенный или незамещенный (3циклодекстрин; (3) целлюлоза и ее производные, такие как карбоксиметилцеллюлоза натрия, этилцеллюлоза и ацетилцеллюлозы; (4) порошокообразный трагант; (5) солод; (6) желатин; (7) тальк; (8) вспомогательные вещества, такие как масло какао и воска для суппозиториев; (9) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, сафлоровое масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (10) гликоли, такие как пропиленгликоль; (11) полиолы, такие как глицерин, сорбит, маннит и полиэтиленгликоль; (12) сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (13) агар; (14) буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; (15) альгиновая кислота; (16) апирогенная вода; (17) изотонический солевой раствор; (18) раствор Рингера; (19) этиловый спирт; (20) фосфатные буферные растворы; и (21) другие нетоксичные совместимые вещества, используемые в фармацевтических лекарственных формах.
В композициях также могут присутствовать увлажняющие агенты, эмульгаторы и смазывающие вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, агенты высвобождения, агенты для покрытия, подсластители, ароматизаторы и отдушки, консерванты и антиоксиданты. Примеры фармацевтически приемлемых антиоксидантов включают: (1) водорастворимые антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота, гидрохлорид цистеина, бисульфат натрия, метабисульфит натрия, сульфит натрия и т.д.; (2) растворимые в масле антиоксиданты, такие как аскорбилпальмитат, бутилированный гидроксианизол (ВНА), бутилированный гидрокситолуол (ВНТ), лецитин, пропилгаллат, альфатокоферол и т.д.; и (3) хелатирующие металлы агенты, такие как лимонная кислота, этилендиаминтетрауксусная кислота (EDTA), сорбит, винная кислота, фосфорная кислота и т.д.
Лекарственные формы, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде капсул, кахетов, пилюль, таблеток, пастилок (с использованием ароматизированной основы, как правило, сахарозы и гуммиарабика или траганта), порошков, гранул или в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкой среде или в виде жидкой эмульсии по типу масло в воде или вода в масле или в виде эликсира или сиропа или в виде пастилок (с использованием инертного матрикса, такого как желатин и глицерин или сахароза и гуммиарабик) и/или в виде ополаскивателей для рта и т.д., каждый из которых содержит заранее определенное количество соединения согласно изобретению в качестве активного ингредиента. Композицию также можно вводить в виде болюса, электуария или пасты.
В твердых формах дозирования для перорального введения (капсулах, таблетках, пилюлях, драже, порошках, гранулах и т.д.) соединение согласно изобретению смешано с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, такими как цитрат натрия или фосфат дикальция, и/или любым из следующих веществ:
(1) наполнители или разбавители, такие как крахмалы, циклодекстрины, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и/или кремниевая кислота;
(2) связующие вещества, такие как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поивинилпирролидон, сахароза и/или гуммиарабик;
(3) увлажняющие агенты, такие как глицерин;
(4) дезинтегрирующие агенты, такие как агар-агар, карбонат кальция, картофельный крахмал или крахмал из тапиоки, альгиновая кислота, конкретные силикаты и карбонат натрия;
(5) замедляющие растворение агенты, такие как парафин;
(6) ускорители абсорбции, такие как четвертичные аммонийные соединения;
(7) увлажнители, такие как, например, ацетиловый спирт и моностеарат глицерина;
(8) абсорбенты, такие как каолин и бетонитовая глина;
(9) смазывающие вещества, такие как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия и их смеси; и
(10) красители. В случае капсул, таблеток и пилюль фармацевтические композиции также могут содержать буферные агенты. Твердые композиции подобного типа также можно использовать в качестве наполнителей в мягких и твердых желатиновых капсулах с использованием таких вспомогательных веществ, как лактоза или молочные сахара, а также высокомолекулярные полиэтиленгликоли и т.д.
Таблетка может быть получена путем прессования или формования, необязательно с одним или более вспомогательными ингредиентами. Прессованные таблетки можно получать с использованием связующего вещества (например, желатина или гидроксипропилметилцеллюлозы), смазывающего вещества, инертного разбавителя, консерванта, дезинтегрирующего агента (например, гликолята крахмала натрия или поперечно-сшитой карбоксиметилцеллюлозы натрия), поверхностно-активного или диспергирующего агента. Формованные таблетки можно получать путем формования в подходящем аппарате смеси порошкообразного ингибитора (ингибиторов), увлажненной жидким разбавителем.
Таблетки и другие твердые формы дозирования, такие как драже, капсулы, пилюли и гранулы, могут необязательно иметь риску или содержать покрытия или оболочки, такие как кишечнорастворимые оболочки и другие покрытия, хорошо известные в области получения фармацевтических лекарственных форм. Они также могут быть получены в виде лекарственных форм с замедленным или контролируемым
- 56 030687
высвобождением из них активного ингредиента с использованием, например, гидроксипропилметилцеллюлозы в различных пропорциях для получения желаемого профиля высвобождения, других полимерных матриксов, липосом и/или микросфер. Они могут быть стерилизованы, например, путем фильтрования через удерживающий бактерии фильтр или путем включения стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые можно растворять в стерильной воде или некоторых других стерильных сред для инъекций непосредственно перед применением. Указанные композиции могут также необязательно содержать опалесцирующие агенты и могут представлять собой композиции, обеспечивающие высвобождение активного ингредиента (ингредиентов) только или преимущественно в определенном участке желудочно-кишечного тракта, необязательно с замедленным высвобождением.
Примеры инкапсулированных композиций, которые можно использовать, включают полимерные вещества и воски. Соединение согласно изобретению в подходящих случаях также может быть представлено в микроинкапсулированной форме с одним или более из описанных выше вспомогательные вещества.
Жидкие формы дозирования для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, микроэмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо активного ингредиента жидкие формы дозирования могут содержать инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники, такие как, например, вода или другие растворители, солюбилизирующие агенты и эмульгаторы, такие как этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, масла (в частности, хлопковое, арахисовое, кукурузное, масло проростков пшеницы, оливковое, касторовое и кунжутное масло), глицерин, тетрагидрофуриловый спирт, полиэтиленгликоли и сложные эфиры жирных кислот и сорбита и их смеси.
Помимо инертных разбавителей пероральные композиции также могут содержать вспомогательные вещества, такие как увлажняющие агенты, эмульгаторы и суспендирующие агенты, подсластители, ароматизаторы, красители, отдушки и консерванты.
Суспензии помимо активного ингибитора (ингибиторов) могут содержать суспендирующие агенты, такие как, например, этоксилированные изостеариловые спирты, полиоксиэтиленсорбит и сложные эфиры сорбита, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагант и их смеси.
Лекарственные формы для ректального или вагинального введения могут быть представлены в виде суппозиториев, которые можно получать путем смешивания одного или более ингибитора (ингибиторов) с одним или более подходящими не вызывающими раздражения вспомогательными веществами или носителями, включающими, например, масло какао, полиэтиленгликоль, воск для суппозиториев или салицилат, которые являются твердым при комнатной температуре, но жидкими при температуре тела, и, таким образом, тают в просвете прямой кишке или вагинальной полости с высвобождением активного агента.
Лекарственное формы, который являются подходящими для вагинального введения, также включают лекарственные формы в виде пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спреев, содержащих носители, которые являются подходящими, как известно в данной области техники.
Формы дозирования для местного или трансдермального введения ингибитора (ингибиторов) включают порошки, спреи, мази, пасты, крема, лосьоны, гели, растворы, пластыри и ингаляторы. Активный компонент может быт смешан в стерильных условиях с фармацевтически приемлемым носителем и с любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут быть необходимы.
Мази, пасты, крема и гели помимо соединения согласно изобретению могут содержать вспомогательные вещества, такие как животные и растительные жиры, масла, воски, парафины, крахмал, трагант, производные целлюлозы, полиэтиленгликоли, силиконы, бетониты, кремниевая кислота, тальк и оксид цинка или их смеси.
Порошки и спреи могут содержать помимо соединения согласно изобретению вспомогательные вещества, такие как лактоза, тальк, кремниевая кислота, гидроксид алюминия, силикаты кальция и полиамидный порошок или смеси указанных веществ. Спреи могут дополнительно содержать стандартные пропелленты, такие как хлорфторуглеводороды и летучие незамещенные углеводороды, такие как бутан и пропан.
Альтернативно, соединение согласно изобретению можно вводить с помощью аэрозоля. Такое введение осуществляют путем получения водного раствора аэрозоля, липосомного состава или твердых частиц, содержащих композицию. Можно использовать неводные суспензии (например, фторуглеродный пропеллент). Ультразвуковые небулайзеры являются предпочтительными, так как они обеспечивают минимальное воздействие агента на усилие сдвига, которое может приводить к разрушению соединения.
Обычно водный аэрозоль готовят путем получения водного раствора или суспензии соединения согласно изобретению вместе со стандартными фармацевтически приемлемыми носителями и стабилизаторами. Носители и стабилизаторы различаются в зависимости от требований конкретной композиции, но, как правило, включают неионные поверхностно-активные вещества (твины, плюроники, сложные эфиры сорбита, лецитин, кремофоры), фармацевтически приемлемые ко-растворители, такие как полиэтиленгликоль, нетоксичные белки типа сывороточного альбумина, олеиновая кислота, аминокислоты,
- 57 030687
такие как глицин, буферы, соли, сахара или сахарные спирты. Аэрозоли в целом получают из изотонических растворов.
Трансдермальные пластыри имеют дополнительное преимущество, которое заключается в обеспечении контролируемой доставки соединения согласно изобретению в организм субъекта. Такие формы дозирования можно получать путем растворения или диспергирования агента в подходящей среде. Также можно использовать усилители абсорбции для повышения скорости поступления ингибитора (ингибиторов) через кожу.
Скорость указанного поступления можно регулировать либо путем использования контролирующей скорость мембраны, либо путем диспергирования ингибитора (ингибиторов) в полимерной матрице или геле.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению, подходящие для парентерального введение, содержат одно или более соединений согласно изобретению в комбинации с одним или более фармацевтически приемлемыми стерильными водными или неводными растворами, дисперсиями, суспензиями или эмульсиями или стерильными порошками, которые можно восстанавливать в стерильных растворах или дисперсиях для инъекций, изотоничных крови предполагаемого реципиента, непосредственного до введения, или суспендирующими агентами или загустителями. Примеры подходящих носителей водных и неводных растворов, которые можно использовать в фармацевтических композициях согласно изобретению, включают воду, этанол, полиолы (такие как глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.д.) и их подходящие смеси, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические сложные эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Подходящую текучесть можно поддерживать, например, путем применения материалов покрытия, таких как лецитин, поддержания требуемого размера частиц в случае дисперсий и применения поверхностно-активных веществ.
Указанные композиции также могут содержать вспомогательные вещества, такие как консерванты, увлажняющие агенты, эмульгаторы и диспергирующие агенты. Предотвращение воздействия микроорганизмов можно обеспечивать путем включения различных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, парабена, хлорбутанола, фенолсорбиновой кислоты и т.д. Также может являться желательным включать в композиции регуляторы тоничности, такие как сахара, хлорид натрия и т.д. Кроме того, можно осуществлять пролонгированную абсорбцию фармацевтической формы для инъекций путем включения агентов, замедляющих абсорбцию, таких как моностеарат алюминия и желатин.
В некоторых случаях для продления эффекта соединения согласно изобретению желательно замедлять абсорбцию указанного соединения из подкожных или внутримышечных инъекций. Например, для замедления абсорбции вводимой парентеральным путем формы лекарственного средства указанное лекарственное средство растворяют или суспендируют в масляном носителе.
Формы депо для инъекций получают путем образования микроинкапсулированных матриц ингибитора (ингибиторов) в биодеградируемых полимерах, таких как полилактид-полигликолид. В зависимости от соотношения лекарственного средства и полимера и природы конкретного используемого полимера можно контролировать скорость высвобождения лекарственного средства. Примеры других биодеградируемых полимеров включают сложные поли(ортоэфиры) и поли(ангидриды). Лекарственные формы для инъекций в виде депо также получают путем включения лекарственного средства в липосомы или микроэмульсии, которые совместимы с тканью организма.
Фармацевтические композиции можно вводить перорально, парентерально, местно или ректально. Фармацевтические композиции, безусловно, вводят в форме, подходящей для каждого способа введения. Например, указанные композиции вводят в форме таблеток или капсул, путем инъекции, ингаляции, лосьона для глаз, мази, суппозитория, инфузии; местно с помощью лосьона или мази; и ректально с помощью суппозиториев. Пероральное введение является предпочтительным.
Фразы "парентеральное введение" и "вводимое парентерально" при использовании в настоящей заявке относятся к способам введения, отличным от кишечного и местного введения, как правило, к введению путем инъекции, и включают, но не ограничивается указанными, внутривенные, внутримышечные, внутриартериальные, интратекальные, интракапсулярные, внутриглазничные, внутрисердечные, внутрикожные, внутрибрюшинные, транстрахеальные, подкожные, подкутикулярные, внутрисуставные, субкапсулярные, субарахноидальные, интраспинальные и внутригрудинные инъекции и инфузии.
Фармацевтические композиции согласно изобретению можно вводить путем "системного введения", "введения системно", "периферического введения" и "введения периферически", что означает введение лиганда, лекарственного средства или другого материала иначе чем непосредственно в центральную нервную систему, таким образом, что он проникает в систему пациента и, таким образом, подвергается метаболизму и другим подобным процессам, например, путем подкожного введения.
Соединение (соединения) согласно изобретению можно вводить человеку и другим животным для терапевтического лечения с помощью любого подходящего способа введения, включая пероральное введение, назальное введение, например, с помощью спрея, ректальное, интравагинальное, парентеральное, интрацистернальное и местное введение, например, с помощью порошков, мазей или капель, включая буккальное и сублингвальное введение.
Независимо от выбранного способа введения, соединение (соединения) согласно изобретению, ко- 58 030687
торые можно применять в подходящей гидратированной форме, и/или фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению получают в виде фармацевтически приемлемых форм дозирования с помощью стандартных методов, известных специалистам в данной области техники.
Действительный уровень дозы соединения (соединений) согласно изобретению в фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению можно изменять с получением количества активного ингредиента, эффективного для достижения желаемого терапевтического эффекта для конкретного пациента, композиции и способа введения и не токсичного для указанного пациента.
Концентрация соединения согласно изобретению в фармацевтически приемлемой смеси варьирует в зависимости от различных факторов, включая дозу соединения, которое предполагается вводить, фармакокинетические характеристики используемого соединения (соединений) и способа введения.
В целом, композиции согласно настоящему изобретению могут быть представлены в водном растворе для парентерального введения, содержащем примерно 0,1-10% (масса к объему) соединения, описанного в настоящей заявке, а также другие вещества. Типичные диапазоны доз составляют от примерно 0,01 до примерно 50 мг/кг массы тела в день при введении в виде 1-4 дробных доз. Каждая дробная доза может содержать одинаковые или разные соединения согласно изобретению. Доза представляет собой эффективное количество в зависимости от нескольких факторов, включая общее состояние здоровья пациента, лекарственную форму и способ введения выбранного соединения (соединений).
Другой аспект изобретения обеспечивает комбинированную терапию, где один или более других терапевтических агентов вводят вместе с соединениями и композициями согласно изобретению. Такое комбинированное лечение приводит к достижению такого же или подобного лечебного действия в результате аддитивного действия совместно вводимых терапевтических агентов, отличных от соединений согласно изобретению.
Согласно конкретным вариантам реализации изобретения соединение согласно изобретению вводят совместно с одним или более протеасомным ингибитором (ингибиторами). Согласно конкретным вариантам реализации изобретения соединение согласно изобретению вводят совместно с химиотерапевтическим агентом. Подходящие химиотерапевтическим агенты могут включать природные продукты, такие как алкалоиды барвинка (т.е. винбластин, винкристин и винорельбин), паклитаксел, эпидиподофиллотоксины (т.е. этопозид, тенипозид), антибиотики (дактиномицин (актиномицин D) даунорубицин, доксорубицин и идарубицин), антрациклины, митоксантрон, блеомицины, пликамицин (митрамицин) и митомицин, ферменты (L-аспарагиназу C, которая метаболиирует L-аспарагин на системном уровне и устраняет клетки, не способные синтезировать собственный аспарагин); антитромбоцитарные агенты; антипролиферативные/противомитотические алкилирующие агенты, такие как азотистые иприты (мехлоретамин, циклофосфамид и аналоги, мельфалан, хлорамбуцил), этиленимины и метилмеламины (гексаметилмеламин и тиотепа), алкилсульфонаты (бусульфан), нитрозомочевины (кармустин (BCNU) и аналоги, стрептозоцин), тразены - дакарбазинин (DTIC); антипролиферативные/антимитотические антиметаболиты, такие как аналоги фолиевой кислоты (метотрексат), пиримидиновые аналоги (фторурацил, флоксуридин и цитарабин), пуриновые аналоги и родственные ингибиторы (меркаптопурин, тиогуанин, пентостатин и 2-хлордезоксиаденозин); ингибиторы ароматазы карбоплатин), прокарбазин, гидроксимочевина, митотан, аминоглутетимид; гормоны (т.е. эстроген) и агонисты гормонов, такие как агонист рилизингфактора лютеинизирующего гормона (LHRH) (гозерелин, лейпролид и трипторелин). Другие химиотерапевтические агенты могут включать мехлоретамин, камптотецин, ифосфамид, тамоксифен, ралоксифен, гемцитабин, навельбин или любой аналогичный вариант или производное перечисленных выше соединений.
Согласно конкретным вариантам реализации изобретения соединение согласно изобретению вводят совместно со стероидом. Подходящие стероиды могут включать, но не ограничиваются указанными, 21ацетоксипрегненолон, альклометазон, альгестон, амцинонид, беклометазон, бетаметазон, будезонид, хлорпреднизон, клобетазол, клокортолон, клопреднол, кортикостерон, кортизон, кортивазол, дефлазакорт, дезонид, дезоксиметазон, дексаметазон, дифлоразон, дифлукортолон, дифупреднат, эноксолон, флуазакорт, флуклоронид, флуметазон, флунизолид, флуоцинолон ацетонид, флуцинонид, флуокортин бутил, флуокортолон, флуорометолон, флуперолон ацетат, флупредниден ацетат, флупреднизолон, флурандренолид, флутиказон пропионат, формокорталформокортал, хальцинонид, галобетазол пропионат, галометазон, гидрокортизон, лотепреднол этабонат, параметазон, предникарбат, преднизолон, преднизолон 25-диэтиламиноацетат, преднизолон фосфат натрия, преднизон, преднивал, преднилиден, римексолон, тиксокортол, триамцинолон, триамцинолон ацетонид, триамцинолон бенетонид, триамцинолон гексацетонид и их соли и/или производные.
Согласно конкретным вариантам реализации изобретения соединения согласно изобретению вводят совместно с иммунотерапевтическим агентом. Подходящие иммунотерапевтические агенты могут включать, но не ограничиваются указанными, циклоспорин, талидомид и моноклональные антитела. Моноклональные антитела могут быть либо очищенными, либо конъюгированными, такими как ритуксимаб, тозитумомаб, алемтузумаб, эпратузумаб, ирбитумомаб тиуксетан, гемтузумаб озогамицин, бевацизумаб, цетуксимаб, эрлотиниб и трастузумаб.
- 59 030687
Лечение рака
Примеры форм раковых заболеваний, которые можно лечить с помощью способов согласно изобретению, включают, но не ограничиваются указанными, рак простаты, рак мочевого пузыря, рак легкого (включая мелкоклеточный и немелкоклеточный рак), рак толстой кишки, рак почки, рак печени, рак молочной железы, рак шейки матки, рак эндометрия или другие виды рака матки, рак яичка, рак пениса, рак влагалища, рак уретры, рак мочевого пузыря, эзофагеальный рак или рак поджелудочной железы.
Дополнительные примеры форм рака, которые можно лечить с помощью способов согласно изобретению, включают, но не ограничиваются указанными, рак скелетных и гладких мышц, рак желудка, рак тонкой кишки, рак слюнной железы, рак анального канала, рак прямой кишки, рак щитовидной железы, рак паращитовидной железы, рак гипофиза и рак носоглотки.
Соединения согласно настоящему изобретению и их соли и сольваты можно применять отдельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами для лечения заболевания или состояний, связанных с несоответствующей активностью p97.
Дополнительные заболевания, которые можно лечить в соответствии со способами согласно изобретению, помимо раковых заболеваний включают аутоиммунные расстройства, метаболические заболевания, инфекционные заболевания, неврологические заболевания, заболевания трансплантат против хозяина и другие врожденные заболевания, приведенные далее: бета-липопротеинемия, ацерулоплазминемия, недостаточность альфа-1-антихимотрипсина (ACT), аспартилглюкозаминурия, аутосомная доминантная пигментная дегенерация сетчатки, синдром Бругады, синдром Шарко-Мари-Тута, врожденная гиперплазия надпочечников, врожденная хлоридная диарея, врожденный гипотиреоз, врожденный синдром удлиненного интервала QT, врожденный нефритический синдром, врожденная недостаточность сахаразы-изомальтазы, болезнь Криглера-Найяра II типа, муковисцедоз, сахарный диабет, диастрофическая дисплазия, синдром Дубина-Джонсона, болезнь Фабри, наследственная хиломикронемия, наследственная недостаточность глюкокортикоидов, наследственная гиперхолестеринемия, болезнь Гоше, болезнь тяжелых цепей, наследственная эмфизема, наследственная эмфизема с повреждением печени, наследственный гемохроматоз, наследственная гипофибриногенемия, наследственная миелопероксидазная болезнь, наследственный сфероцитоз, болезнь Гиршпрунга, гипоганадотропный гипоганадизм, детский системный гиалиноз, неврональный цероид-липофусциноз новорожденных, синдром Ларона, печеночная недостаточность, синдром Марфана, медуллярное кистозное заболевание почек, наследственная ювенильная мочекислая нефропатия, болезнь Менкеса, нефрогенный диабет, несахарный нейрогипофизарный диабет, глазокожный альбинизм, синдром ломких костей, болезнь Пелицеуса-Мерцбахера, синдром Пендреда, устойчивая гиперинсулинемическая гипогликемия новорожденных, первичный гипотиреоз, недостаточность белка C, псевдоахондроплазия с множественной эпифизарной дисплазией, тяжелый наследственный агранулоцитоз, Штаргардт-подобная макулодистрофия, устойчивый к стероидам нефротический синдром, болезнь Тея-Сакса, наследственный ангиотический отек I типа, недостаточность тироксин-связывающего глобулина, болезнь Виллебранда типа IIA, болезнь Шарко-Мари-Тута, сцепленная с X-хромосомой, гипофосфатемия, сцепленная с X-хромосомой, болезнь Альцгеймера, аутосомнорецессивный ювенильный паркинсонизм, совмещенная недостаточность факторов V и VIII, краниолентикуло-сутурная дисплазия, гипотония и диморфизм, миопатия кости Пагета с инклюзионными тельцами и лобно-височная деменция (IBMPFD), нарушения липидной абсорбции, синдром МаринескуШегрена, болезнь Паркинсона, поликистозная болезнь печени, поздняя спондилоэпифизарная дисплазия, синдром Уолкотта-Раллисона и болезнь Шарко (ALS).
Согласно конкретным вариантам реализации изобретения соединения согласно изобретению можно применять для лечения неопластического роста, ангиогенеза, инфекции, воспаления, связанного с иммунной системой заболевания, ишемии и реперфузионного повреждения, множественного склероза, ревматоидного артрита, нейродегенеративных состояний или псориаза.
Неопластический рост может включать рак. Подходящим образом, настоящее изобретение относится к способам лечения или снижения тяжести ракового заболевания, выбранного из: рака мозга (глиом), глиобластом, рака молочной железы, опухоли Вильма, саркомы Юинга, рабдомиосаркомы, эпендимомы, медуллобластомы, рака толстой кишки, рака головы и шеи, рака почки, легкого, печени, меланомы, рака яичника, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, саркомы, остеосаркомы, гигантоклеточной остеобластомы, рака щитовидной железы, лимфобластного T-клеточного лейкоза, хронического миелогенного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза, волосисто-клеточного лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелогенного лейкоза, хронического нейтрофильного лейкоза, острого лимфобластного T-клеточного лейкоза, плазмацитомы, иммунобластного крупноклеточного лейкоза, лейкоза клеток мантии, множественной миеломы, мегакариобластного лейкоза, множественной миеломы, острого мегакариоцитарного лейкоза, промиелоцитарного лейкоза, эритролейкоза, злокачественной лимфомы, ходжкинской лимфомы, неходжкинской лимфомы, лимфобластной T-клеточной лимфомы, лимфомы Беркитта, фолликулярной лимфомы, нейробластомы, рака мочевого пузыря, рака уротелия, рака легкого, рака влагалища, рака цервикального канала, рака эндометрия, рака почки, мезотелиомы, эзофагеального рака, рака слюнной железы, гепотоклеточного рака, рака желудка, рака носоглотки, рака щеки, рака ротовой полости, GIST (желудочно-кишечной стромальной опухоли) и рака яичка.
- 60 030687
Согласно конкретным вариантам реализации изобретения рак выбран из рака мозга (глиом), глиоластом, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака головы и шеи, рака почки, рака легкого, рака печени, меланомы, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака простаты, саркомы и рака щитовидной железы.
Согласно конкретным вариантам реализации изобретения рак, который предполагается лечить, связан с протеасомой. См. источник Voorhees et al., The Proteasome as a Target for Cancer Therapy, Clinical Cancer Research, vol. 9, 6316-6325, December 2003, полностью включенный в настоящую заявку посредством ссылки. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения рак связан с конкретной мишенью, такой как NF-kB, p44/42 MAPK, P-gp, TopI, TopII-альфа.
Согласно конкретным вариантам реализации изобретения рак представляет собой солидную опухоль. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения рак выбран из множественной миеломы, метастатического рака молочной железы, немелкоклеточного рака легкого, рака простаты, рака прямой и толстой кишки на поздней стадии, рака яичника или первичной перитонеальной карциномы, гормонорезистентный рак предстательной железы, плоскоклеточной карциномы головы и шеи, метастатической аденокарциномы поджелудочной железы, рака гастроэзофагеального соединения или желудка или неходжкинской лимфомы.
Описан способ с использованием соединений, описанных в настоящей заявке, для лечения расстройства, которое характеризуется несоответствующим уровнем протеасомной активности или при котором снижение нормального уровня протеасомной активности приводит к клиническом благоприятному эффекту. Указанное расстройство может включать рак или иммунные нарушения, характеризующиеся избыточной клеточной пролиферацией или клеточным сигналингом. Раковые заболевания включают раковые заболевания человека, при которых наблюдается повышенная экспрессия c-Myc или экспрессии онкогенных форм белка K-Ras.
Нейродегенеративные заболевания и состояния могут включать, но не ограничиваются указанными, инсульт, ишемическое повреждение нервной системы, травма нервной системы (например, повреждение головного мозга в результате удара, повреждение спинного мозга и травматическое повреждение нервной системы), множественной склероз и другие опосредованные иммунитетом нейропатии (например, синдром Г ийена-Барре и его варианты, острая моторная аксональная нейропатия, острая воспалительная димиелинизирующая полинейропатия и синдром Фишера), комплекс деменции ВИЧ/СПИД, аксономию, диабетическую нейропатию, болезнь Паркинсона, болезнь Хантингтона, ALS, множественной склероз, бактериальный, паразитарный, грибковый и вирусный менингит, энцефалит, сосудистую деменцию, мультиинфарктную деменцию, деменцию с тельцами Леви, деменцию лобной доли, такую как болезнь Пика, подкорковую деменцию (такую как болезнь Хантингтона или прогрессирующий надъядерный паралич), синдромы очаговой кортикальной атрофии (такие как первичная афазия), метаболотоксические деменции (такие как хронический гипотиреоз или недостаточность B12) и деменции, вызванные инфекциями (такими как сифилис или хронический менингит). Соединения согласно изобретению можно применять для лечения болезни Альцгеймера, включая введение субъекту эффективного количества агента или композиции (например, фармацевтической композиции), описанной в настоящей заявке.
Соединения согласно изобретению можно применять для лечения кахексии и мышечной атрофии. Соединения согласно изобретению можно применять для лечения таких состояний, которые связаны с раковым заболеванием, хроническим инфекционным заболеванием, лихорадкой, мышечной дисфункции (атрофии) и денерваций, повреждением нерва, голоданием, почечной недостаточностью, связанной с ацидозом, диабетом и печеночной недостаточностью.
Соединения согласно изобретению можно использовать для лечения гиперпролиферативных состояний, таких как диабетическая ретинопатия, макулярная дегенерация, диабетическая нефропатия, гломерулосклероз, IgA-нефропатия, цирроз, атрезия желчевыводящих путей, застойная сердечная недостаточность, склеродермия, вызванный облучением фиброз и фиброз легкого (идиопатический легочный фиброз, коллагеноз сосудов, саркоидоз, интерстициальное заболевание легких и легочные расстройства, вызванные внешним фактором). Лечение ожогов часто осложняется фиброзом, таким образом, дополнительный вариант реализации изобретения представляет собой местное или системное введение ингибиторов для лечения ожогов. Ушивание ран после хирургического вмешательства часто связано с обезображивающими рубцами, образование которых можно предотвратить путем ингибирования фиброза. Таким образом, согласно конкретным вариантам реализации изобретения заявка относится к способам предотвращения или снижения рубцевания.
Соединения согласно изобретению можно использовать для лечения ишемических состояний или реперфузионного повреждения, например, острого коронарного синдрома (нестабильных бляшек), артериального окклюзивного заболевания (закупорки сосудов сердца, сосудов мозга, периферических артерий и сосудов), атеросклероза (коронарный склероз, заболевания коронарных артерий), инфаркта, сердечной недостаточности, панкреатита, гипертрофии миокарда, стеноза и рестеноза.
Соединения согласно изобретению можно использовать для ингибирования ФНО-альфа для предотвращения и/или лечения септического шока.
Соединения согласно изобретению можно использовать для ингибирования презентации антигена в
- 61 030687
клетке, включающего подвержение клетки действию агента, описанного в настоящей заявке. Соединение согласно изобретению можно применять для лечения связанных с иммунной системой состояний, таких как аллергия, астма, отторжение органного/тканевого трансплантата (болезнь трансплантат против хозяина) и аутоиммунные заболевания, включая, но не ограничиваясь указанными, волчанку, ревматоидный артрит, псориаз, множественный склероз и воспалительные заболевания кишечника (такие как язвенный колит и болезнь Крона). Таким образом, дополнительный вариант реализации изобретения представляет собой способ модулирования иммунной системы субъекта (например, ингибирования отторжения трансплантата, аллергий, аутоиммунных заболеваний и астмы), включающий введение указанному субъекту эффективного количества соединения согласно изобретению.
Соединения согласно изобретению можно использовать в способах для изменения репертуара антигенных пептидов, образующихся в результате сборки протеасомных или других белков с мультикаталитической активностью.
Соединения согласно изобретению можно использовать в способах для ингибирования деградации IKB-альфа, включающих контактирование клетки с агентом, идентифицированным в настоящей заявке. Дополнительной вариант реализации представляет собой способ снижения клеточного содержания NFkB в клетке, мышце, органе или субъекте, включающий контактирование клетки, мышцы, органа или субъекта с соединением согласно изобретению.
Соединения согласно изобретению можно использовать в способах воздействия на циклинзависимые циклы эукариотических клеток. Соединения согласно изобретению можно использовать в способах лечения пролиферативных заболеваний у субъекта (например, рака, псориаза или рестеноза). Соединения согласно изобретению можно использовать для лечения связанного с циклинами воспаления у субъекта.
Один вариант реализации представляет собой способ лечения p53-связанного апоптоза, включающий введение субъекту эффективного количества соединения согласно изобретению.
Согласно другому варианту реализации изобретения, агенты в соответствии с настоящей заявкой применимы для лечения паразитарных инфекций, таких как инфекции, вызванные простейшими паразитами. Согласно конкретным таким вариантам реализации изобретения агенты применимы для лечения паразитарных инфекций у человека, вызванных паразитом, представляющим собой простейшее, выбранное из Plasmodium sps., Trypanosoma sps., Leishmania sps., Pneumocystis carinii, Toxoplasma gondii, Entamoeba histolytica, Entamoeba invadens и Giardia lamblia. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения агенты применимы для лечения паразитарных инфекций у животных и домашнего скота, вызванные паразитом, представляющим собой простейшее, выбранное из Plasmodium hermani, Cryptosporidium sps., Echinococcus granulosus, Eimeria tenella, Sarcocystis Neurona и Neurospora crassa. Другие соединения, применимые в качестве протеасомных ингибиторов для лечения паразитарных заболеваний описаны в международной публикации WO 98/10779, которая полностью включена в настоящую заявку.
В частности, способы лечения включают ингибирование, сдерживание, смягчение, минимизирование и/или устранение патологических состояний, связанных с неспособностью клеток метаболизировать, деградировать или другим образом удалять меченые убиквитином белки и пептоиды в результате расщепления, деградации, удаления указанной метки или другим образом приобретенной дисфункциональности в результате активности домена металлопротеиназы p97. Включены способы, согласно которым расстройство человека характеризуется аномальной деградацией регуляторного пептида, приводящей к избыточной клеточной пролиферации или клеточному сигналингу. Способы направлены на введение эффективного количества соединения или фармацевтической лекарственной формы, описанной выше, таким образом, что аномальная деградация регуляторного пептида облегчается, снижается или ингибируется. В частности, расстройства человека включают рак или иммунное расстройство, раковое заболевание, являющееся результатом повышенной экспрессии c-Myc или экспрессии онкогенной формы белка K-Ras. Способы также включают ингибирование или ослабление активности домена металлопротеиназы p97 у пациента, представляющего собой человека, страдающего аномальной активностью домена металлопротеиназы p97 в отношении белков, модифицированных убиквитином. Как описано выше, указанные способы включают введение пациенту эффективного количества соединения или фармацевтической лекарственной формы, описанной выше, таким образом, что аномальная активность металлопротеиназного домена p97 ослабляется, снижается или ингибируется.
Диагностика
Различные клеточные белки подвергаются протеолитическому процессингу во время созревания или активации. Композиции, идентифицированные в настоящей заявке, также могут быть применимы в качестве диагностических агентов (например, в диагностических наборах или для применения в клинических лабораториях) для скрининга белков (например, ферментов, транскрипционных факторов), подвергаемых процессингу гидролазами, включая протеасомный процессинг. Агенты также применимы в качестве реагентов для исследований специфичного связывания субъединицы альфа-цепи X/MB 1 и ингибирования протеолитической активности, связанной с ней. Например, можно определять активность (и ее специфические ингибиторы) других субъединиц протеасомы.
Соединения согласно изобретению, идентифицированные в настоящей заявке, можно использовать
- 62 030687
для того, что бы определить, регулирует ли протеолитическая активность клеточный процесс, процесс развития или физиологический процесс или его результат. Один из таких способов включает получение организма, препарата интактных клеток или клеточного экстракта; подвержение указанного организма, клеточного препарата или клеточного экстракта воздействию агента, идентифицированного в настоящей заявке; связывание подверженного воздействию агента организма, клеточного препарата или клеточного экстракта с сигнальной молекулой и отслеживание процесса или результата. См., например, патент США № 7741432.
Соединения согласно настоящему изобретению можно использовать в качестве части диагностического анализа. Например, можно получать клетки из тела пациента и проводить анализ для определения потенциальной терапевтической эффективности соединений согласно изобретению для указанного пациента. Клетки, полученные из организма пациента, могут, например, представлять собой раковые клетки опухоли. Клетки можно культивировать и соединения согласно изобретению можно применять для определения ответа указанных раковых клеток.
Диагностический аспект согласно изобретению также включает анализ для определения ингибирования активности p97. Анализ включает объединение ферментативного материала p97 с белковым субстратом и определение способности потенциального кандидата-ингибитора снижать ферментативную активность в указанном анализе. Ферментативный материал p97 либо является стандартным, либо отбирается из клеток пациента. Белковый субстрат подобным образом либо является стандартным, либо отбирается из клеток пациента. В частности, белковый субстрат выбран из группы, состоящей из белка, модифицированного убиквитином, белка, модифицированного убиквитин-подобным модификатором, и белка, модифицированного убиквитиновой цепочкой, которая может быть выделена их клеток пациента. Объединение ферментативного материала p97 и белкового субстрата приводит к получению ферментативной среды. Для указанной среды белковый субстрат модифицируют с помощью метки, которая поддается выявлению путем измерения молекулярной массы, спектроскопического взаимодействия или хроматографического выявления Rf.
После выделения и мечения проводят первое измерение в ферментативной среде относительно только белкового субстрата, где первое измерение проводят путем выявления метки.
После процедуры первого измерения потенциальный кандидат-ингибитор объединяют с меченным белковым субстратом и добавляют ферментативный материал p97 с получением среды для кандидата.
Среду для кандидата готовят для проведения второго измерения в среде для кандидата относительно только белкового субстрата, где второе измерение проводят путем выявления метки.
Наконец, способность кандидатов-ингибиторов обеспечивать эффективное лечение для пациента, нуждающегося в указанном лечении, оценивают путем сравнения первого и второго измерения для идентификации кандидата, демонстрирующего по меньшей мере примерно 50% ингибирование в концентрации не более 500 микромолей в среде для указанного кандидата, где различие между первым и вторым измерением составляет по меньшей мере примерно 50%, при этом значение второго измерения больше первого.
Примеры
Далее следует более подробное описание способов получения примеров соединений согласно изобретению. Следующие примеры предложены в целях иллюстрации и никоим образом не ограничивают настоящее изобретение. Специалисты в данной области техники легко определят множество некритичных параметров, которые можно изменять или модифицировать с получением по существу таких же результатов.
Специалисты в данной области техники могут определить или выяснить с использованием не более чем стандартных экспериментов различные эквивалентные способы синтеза соединений и способы их применения, описанным в настоящей заявке.
Несмотря на то что в настоящей заявке показаны и описаны конкретные примеры вариантов реализации изобретения, необходимо понимать, что соединение согласно изобретению можно получать в соответствии со способами, в целом доступными специалисту в данной области техники. Все из цитированных выше ссылок и публикаций, таким образом, включены в настоящую заявку посредством ссылки.
Если иное не указано, все растворители, химические вещества и реагенты получены коммерческим путем и используются без очистки. 1Н ЯМР спектры были получены в CDCl3, й6-ДМСО, CD3OD или d6ацетоне при 25°C при 300 МГц на спектрометре OXFORD (Varian) с химическим сдвигом (δ, ppm), описанным относительно TMS в качестве внутреннего стандарта. Хроматограммы ЖХВД-МС и массспектры были получены с помощью системы Shimadzu LC-MS-2020. Приборы для препаративной ЖХВД, используемые для очистки некоторых соединений, представляли собой систему Gilson GX281(Gilson) или препаративную градиентную систему P230 (Elite). Разделения для препаративной хиральной ЖХВД осуществляли с помощью препаративной градиентной системы Elite P230, Thar Prep-80 или Thar SFC X-5. Реакции с использованием микроволнового облучения проводили на приборе СЕМ Discover SP.
Пример 1
Синтез N-бензил-5-(2-метокси-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)тиазоло[5,4-d]пиримидин-7-амина (AA):
- 63 030687
KOH, (NH4)2S Н2О, 160°С, 8h
63%
85% НСООН reflux, 4h
О
О
82%
POCI3, DIPEA reflux, 3h
56%
Этап 3
BnNH2, MeCN reflux, 3h
74%
Этап 4
C(OMe)4, HOAc 55%
Этап 6
reflux - обратная конденсация
К раствору 1H-пурин-2,6,8(3H,7H,9H)-триона 1 (3,0 г, 17,8 ммоль) в холодной воде (30 мл) при температуре 0°C добавляли гидроксид калия (1,0 г, 17,8 ммоль) и водный раствор сульфида аммония (17%, 100 мл). Смесь перемешивали и затем нагревали в реакционном сосуде с плотно закрытой крышкой в течение 8 ч при 180°C. Реакционной смеси позволяли охлаждаться и кристаллы аммонийной соли 6тиоурамила 2 золотисто-желтого цвета собирали посредством фильтрования и промывали водой (50 мл) (2,0 г, 63%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 160,01; обнаружено: 160,11. 1Н ЯМР (300 МГц, d^Mra): δ
14,09 (br, 1H), 11,79 (s, 1H), 11,61 (s, 3H).
Суспензию 6-тиоурамила 2 (1,6 г, 10,1 ммоль) в муравьиной кислоте (40 мл) нагревали с обратной конденсацией в течение 4 ч, полученную смесь охлаждали и фильтровали с получением промежуточного соединения 3) (1,4 г, 82%) в виде порошка желтого цвета. MCHP (M+H ) m/z: рассчитано: 168,99; обнаружено: 169,0. 1Н ЯМР (300 МГц, de-ДМСО): δ 10,43 (s, 1H), 8,68 (s, 2H).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 3 (1,4 г, 8,3 ммоль) в этилдиизопропиламине (2,1 г, 16,6 ммоль) при температуре 0°C добавляли оксихлорид фосфора (30 мл) и полученную смесь нагревали при 110°C в течение 3 ч. Затем указанную смесь охлаждали до комнатной температуры, растворители удаляли в вакууме и осадок разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и этилацетатом (50 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (2x50 мл), объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и затем концентрировали с получением промежуточного соединения 4 (955 мг, 56%) в виде твердого вещества коричневого цвета. 1Н ЯМР
(300 МГц, CDCl3): δ 9,17 (s, 1H).
К раствору 5,7-дихлортиазоло[5,4М]пиримидина 4 (950 мг, 4,6 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) при температуре 0°C добавляли бензиламин (593 мг, 5,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и затем нагревали с обратной конденсацией в течение 2 ч. Полученную смесь охлаждали и концентрировали при пониженном давлении, осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат=3:1) с получением соединения 5 (950 мг, 74%) в виде коричневого масла. 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 8,66 (s, 1H), 7,52-7,27 (m, 5H), 6,63 (br, 1H), 4,80 (s, 2H).
К раствору промежуточного соединения 5 (100 мг, 0,36 ммоль) и бензол-1,2-диамина (47 мг, 0,43 ммоль) в изопропаноле (10 мл) при 0°C добавляли п-толуолсульфоновую кислоту (6,2 мг, 0,036 ммоль). Затем смесь перемешивали при температуре 80°C в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и реакцию гасили насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (20 мл) с последующим экстрагированием этилацетатом (3x50 мл), объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении, осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол= 20:1) с получением желаемого соединения 7 (100 мг, 80%) в виде твердого вещества. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 349,42; обнаружено: 349,40.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 7 (50 мг, 0,14 ммоль) в уксусной кислоте (3 мл) при 0°C добавляли тетраметоксиметан (40 мг, 0,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч и затем гасили водой (3 мл), экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого конечного продукта AA (30 мг, 55%) в виде твердого вещества. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 389,11; обнаружено: 389,45. Чистота по результатам ЖХВД (214 нМ): 95%. 1Н ЯМР (300 МГц, CD3OD): δ 8,92 (s, 1H), 7,51 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,41-7,22 (m, 6H), 7,15-7,10 (m, 1H), 6,976,94 (m, 1H), 4,92 (s, 2H), 4,12 (s, 3H).
Пример 2
Синтез 1-(4-(бензиламино)-6,7-дигидро-5H-циклопента[d]пиримидин-2-ил)-1H-бензо[d]имидазол-2амина (BB)
- 64 030687
reflux - обратная конденсация TFA - трифторуксусная кислота
Раствор этил-2-оксоциклопентанкарбоксилата 1 (10 мл, 67 ммоль), мочевины (6,07 г, 101 ммоль) и соляной кислоты (1 мл) в этаноле (20 мл) нагревали с обратной конденсацией в течение 2 ч. Полученную смесь затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме, осадок разбавляли водным раствором гидроксида натрия (5%, 25 мл) и полученную смесь нагревали с обратной конденсацией в течение 30 мин. Указанную смесь охлаждали до комнатной температуры и осадок собирали и сушили с получением диола 2 (6,77 г, 66%), который использовали в следующем этапе без дополнительной очистки. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 153,15; обнаружено: 153,09.
Раствор указанного выше диола 2 (4 г, 26 ммоль), \,\-диметил6ензоламина (6,6 мл, 52 ммоль) в оксихлориде фосфора (80 мл) нагревали с обратной конденсацией в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Осадок гасили смесью лед-вода (20 мл), осажденное твердое вещество собирали, промывали гексаном (3x50 мл) и сушили с получением соединения 3 (3 г, 61%), которое использовали в следующем этапе без дополнительной очистки. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 190,04; обнаружено: 190,10.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 3 (2 г, 10,6 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) при температуре 0°C добавляли фенилметанамин (2,9 г, 26,5 ммоль). Затем реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого 4, (2,3 г, 84%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 260,73; обнаружено: 260,64.
К раствору промежуточного соединения 4 (300 мг, 1,16 ммоль) и бензол-1,2-диамина (138 мг, 1,38 ммоль) в н-бутаноле (5 мл) при 0°C добавляли трифторуксусную кислоту (0,05 мл). Затем полученный раствор перемешивали при температуре 90°C в течение 2 ч. Затем указанный раствор охлаждали до комнатной температуры, осажденное твердое вещество собирали, промывали гексаном и сушили с получением желаемого продукта 6 (320 мг, 83%) в виде твердого вещества, которое использовали в следующем этапе без дополнительной очистки. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 332,41; обнаружено: 332,56.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 6 (100 мг, 0,3 ммоль) в ацетонитриле (1 мл) и воде (8 мл) при 0°C добавляли бромистый циан (64 мг, 0,6 ммоль). Затем полученный раствор нагревали с обратной конденсацией в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и гасили насыщенным водным раствором гидроксида аммония (10 мл) с последующим экстрагированием этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали, осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол= 10:1) с получением желаемого соединения BB (50 мг, 47%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 357,42; обнаружено: 357,40. 1Н ЯМР (300 МГц, бб-ДМСО): δ 8,05 (t, J=6 Гц, 1H), 7,98-7,96 (m, 1H), 7,66 (s, 2H), 7,39-7,31 (m, 4H), 7,26-7,22 (m, 1H), 7,13-7,10 (m, 1H), 7,02-6,97 (m, 1H), 6,80-6,75 (m, 1H), 4,68 (d, J=6 Гц, 2H), 2,90-2,85 (m, 2H), 2,81-2,76 (m, 2H), 2,12-2,05 (m, 2H).
Пример 3
Синтез ^~-бензил-2-(2-метил-1Н-индол-Гил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,3М]-пиримидин-4-амина
(CC)
- 65 030687
Urea - мочевина
reflux - обратная конденсация TFA - трифторуксусная кислота 1,2-dichloroethane - 1,2 -дихлорэтан Dioxane -диоксан
К раствору гидрохлорида этил-1-бензил-4-оксоиииеридин-3-карбоксилата 1 (6,0 г, 20,2 ммоль), мочевины (2,54 г, 42,42 ммоль) в MeOH (100 мл) ири 0°C добавляли NaOMe (6,14 г, 113,7 ммоль) в атмосфере азота. Полученную смесь иеремешивали ири темиературе 60°C в течение 20 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной темиературы и концентрировали ири иониженном давлении, осадок очищали с иомощью колоночной хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол= 10:1) с иолучением желаемого соединения 2 (2,2 г, 42%). MCI IP (М+Н+) m/z: рассчитано: 258,29; обнаружено: 258,30.
Раствор иромежуточного соединения 2 (2,2 г, 8,56 ммоль) в POCl3 (25 мл) иеремешивали ири темиературе 100°C в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной темиературы и медленно выливали в смесь лед-вода (50 мл) с иоследующим экстрагированием ДХМ (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали ири иониженном давлении, осадок очищали с иомощью колоночной хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол= 10:1) с иолучением желаемого соединения 3 (830 мг, 33%). MCI IP (М+Н+) m/z: рассчитано: 295,18; обнаружено: 295,20.
К раствору иромежуточного соединения 3 (700 мг, 2,39 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (15 мл) ири 0°C добавляли 1-хлорэтилхлорформиат (1,02 г, 7,71 ммоль), иолученный раствор иеремешивали ири темиературе 100°C в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной темиературы и концентрировали в вакууме, осадок растворяли в MeOН (10 мл) и иолученную смесь иеремешивали ири темиературе 70°C в течение 1 ч.
Затем указанную смесь охлаждали до комнатной темиературы и концентрировали ири иониженном давлении. Полученный осадок очищали с иомощью флэш-хроматографии с исиользованием смеси гексана и этилацетата с иолучением желаемого иродукта 4 (270 мг, 55%) в виде твердого вещества. MfflP (M+Y) m/z: рассчитано: 205,06; обнаружено: 205,14.
К раствору иромежуточного соединения 4 (270 мг, 1,33 ммоль) в ДХМ (30 мл) ири 0°C добавляли (Boc)2O (348 мг, 1,6 ммоль) и TEA (200 мг, 2,0 ммоль). Полученный раствор иеремешивали ири комнатной темиературе в течение 16 ч. Затем указанный раствор разбавляли водой (30 мл) и ДХМ (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали ДХМ (30 мл x2). Объединенные органические слои иромывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли иосредством фильтрования и летучие вещества удаляли ири иониженном давлении. Полученный осадок очищали с иомощью флэшхроматографии с исиользованием смеси гексана и этилацетата с иолучением иродукта 5 (300 мг, 74%). MCIIP (M+Y) m/z: рассчитано: 305,17; обнаружено: 305,24.
К раствору указанного выше иромежуточного соединения 5 (300 мг, 1,0 ммоль) в ацетонитриле (25 мл) ири 0°C добавляли фенилметанамин (1,07 г, 10,0 ммоль). Затем реакционный раствор иеремешивали ири комнатной темиературе в течение 12 ч. Полученную смесь концентрировали ири иониженном давлении. Полученный осадок очищали с иомощью флэш-хроматографии с исиользованием смеси гексана и этилацетата с иолучением желаемого соединения 6 (280 мг, 74%). MfflP (M+Н) m/z: рассчитано: 375,15; обнаружено: 375,04.
К раствору иромежуточного соединения 6 (100 мг, 0,267 ммоль), 2-метил-1Н-индола (35 мг, 0,267 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) ири 0°C добавляли t-BuOK (60 мг, 0,534 ммоль), Pd2(dha)3 (24 мг, 0,026 ммоль) и x-Phos (13 мг, 0,026 ммоль) в атмосфере азота. Полученную смесь иеремешивали ири темиературе 80°C в течение 3 ч. Затем указанную смесь охлаждали до комнатной темиературы и разбавляли водой (30 мл) и этилацетатом (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл x2). Объединенные органические слои иромывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли иосредством фильтрования и летучие вещества удаляли ири иониженном давлении. Полученный осадок очищали с иомощью флэш-хроматографии с исиользованием смеси гексана и этилацетата с иолучением иродукта 7 (75 мг, 60%). MCIIP (M+Н) m/z: рассчитано: 470,58; обнаружено: 470,63.
Указанное выше иромежуточное соединение 7 (75 мг, 0,16 ммоль) обрабатывали раствором НО в этилацетате (2 М, 10 мл) ири комнатной темиературе в течение 1 ч.
- 66 030687
Затем указанный раствор разбавляли насыщенным водным раствором карбоната натрия (10 мл) и этилацетатом (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью препаративной ЖХВД (вода/MeCN) с получением конечного продукта CC (50 мг, 84%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 370,46; обнаружено: 370,43. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 8,27 (s, 1H), 7,63-7,73 (m, 2H), 7,22-7,39 (m, 6H), 6,86-7,01 (m, 2H), 6,30 (s, 1H), 4,65 (d, J=6,0 Гц, 2H), 3,75 (s, 2H), 3,09 (d, J=6,0 Гц, 2H), 2,68 (d, J=6,0 Гц, 2H), 2,37 (s, 3H).
Пример 4
Синтез N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидропиридо-[3,4-d]пиримидин-4-амина
(DD)
К раствору этил-1-бензил-3-оксопиперидин-4-карбоксилата 1 (12,0 г, 40,4ммоль) в MeOH (200 мл) при 0°C добавляли мочевину (5,1 г, 84,8 ммоль) и NaOMe (12,3 г, 228 ммоль) в атмосфере азота. Полученный раствор перемешивали при температуре 60°C в течение 96 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали, осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол= 10:1) с получением желаемого соединения 2 (6,3 г, 61%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 258,29; обнаружено: 258,30.
К раствору промежуточного соединения 2 (3 г, 11,6 ммоль) и DIPEA (1,5 г, 11,6 ммоль) в ДМФА (1 мл) при 0°C добавляли POCl3 (25 мл). Полученный раствор перемешивали при температуре 130°C в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Затем указанный раствор выливали медленно в смесь лед-вода (50 мл) и экстрагировали ДХМ (3х50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали, осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, дихлорметан:метанол=10:1) с получением желаемого соединения 3 (830 мг, 33%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 295,18; обнаружено: 295,20. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 7,316 (m, 5H), 3,536 (s, 2H), 2,945 (s, 3H), 2,27 (m, 2H), 2,207 (m, 2H).
К раствору промежуточного соединения 3 (1,2 г 4,08 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (15 мл) при 0°C добавляли 1-хлорэтилхлорформиат (700 мг), полученный раствор перемешивали при температуре 0°C в течение 15 мин. Реакционную смесь хранили при комнатной температуре в течение 16 ч и затем концентрировали в вакууме, осадок растворяли в MeOH (10 мл) и полученную смесь перемешивали при температуре 70°C в течение 1 ч. Затем указанный раствор охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого продукта 4 (810 мг, 97%) в виде твердого вещества. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано. 205,06; обнаружено: 205,14.
К раствору промежуточного соединения 4 (270 мг, 1,33 ммоль) в ДХМ (30 мл) при 0°C добавляли (Boc)2O (348 мг, 1,6 ммоль) и TEA (200 мг, 2,0 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем указанный раствор разбавляли очищенной водой (30 мл) и ДХМ (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали ДХМ (30 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования, и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением продукта 5 (300 мг, 74%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 305,17; обнаружено: 305,24. 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 4,624 (s, 2H), 3,739-3,700 (t, J=5,9 Гц, 2H), 2,848-2,811 (t, J=5,6 Гц, 2H), 1,472 (s, 9H).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 5 (300 мг, 1,0 ммоль) в ацетонитриле (25
- 67 030687
мл) при 0°C добавляли фенилметанамин (1,07 г, 10,0 ммоль). Затем реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого соединения 6 (280 мг, 74%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 375,15; обнаружено: 375,04.
К раствору промежуточного соединения 6 (100 мг, 0,267 ммоль), 2-метил-1H-индола (35 мг, 0,267 ммоль) в 1,4-диоксане (15 мл) при 0°C добавляли t-BuOK (60 мг, 0,534 ммоль), Pd2(dba)3 (24 мг, 0,026 ммоль) и x-Phos (13 мг, 0,026 ммоль) в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивали при температуре 80°C в течение 3 ч. Затем указанную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (30 мл) и этилацетатом (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением продукта 7 (79 мг, 62%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 470,58; обнаружено: 470,63.
Указанное выше промежуточное соединение 7 (75 мг, 0,16 ммоль) обрабатывали раствором HCl в этилацетате (2 М, 10 мл) при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем указанный раствор разбавляли насыщенным водным раствором карбоната натрия (10 мл) и этилацетатом (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования, и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью препаративной ЖХВД с получением конечного продукта DD (50 мг, 84%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 370,46; обнаружено: 370,43. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 7,686-7,660 (m, 1H), 7,451-7,426 (m, 1H), 7,357-7,268 (m, 5H), 7,130-7,036 (m, 2H), 4,849(s, 2H), 4,384 (s, 2H), 3,75 (s, 2H), 3,703-3,664 (t, J=6,0 Гц, 2H), 3,955-3,918 (t, J=6,0 Гц, 2H), 2,47 (s, 3H).
Пример 5
Синтез 4-(бензиламино)-2-(2-метокси-1H-бензо[d]имидазол-1-ил)-6,7-дигидропиридо[3,4-d]-пиримидин-8(5Н)-она (EE)
2
4 NHBn
r.t. - комнатная температура overnight - в течение ночи min-минуты
TFA - трифторуксусная кислота
Dioxane -диоксан
К раствору промежуточного соединения 1 (300 мг, 1,01 ммоль) в этилацетате (1 мл) при 0°C добавляли тетроксид рутения (149 мг, 5%, 0,045 ммоль) и водный раствор йоднокислого натрия (0,47 М, 2,1 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и затем разбавляли водой (10 мл) и этилацетатом (10 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (10 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования, и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением продукта 2 (238 мг, 76%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 319,16; обнаружено: 319,21. 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 4,093-4,053 (t, J=6,0 Гц, 2H), 3,128-3,089 (t, J=6,0 Гц, 2H), 1,569 (s, 9H).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 2 (238 мг, 0,74 ммоль) в ацетонитриле (20 мл) при 0°C добавляли фенилметанамин (1,07 г, 10,0 ммоль). Затем реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого соединения 3 (280 мг, 96%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 389,85; обнаружено: 389,92. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD) δ 7,353-7,335 (d, J=7,2 Гц, 2H), 7,300-7,263 (t, J=7,4 Гц, 2H), 7,233-7,197 (m, 1H), 4,627 (s, 2H), 4,007-3,976 (t, J=6,2 Гц, 2H), 2,775-2,743 (t, J=6,4 Гц, 2H), 1,537 (s, 9H).
К раствору промежуточного соединения 3 (170 мг, 0,43 ммоль) и бензол-1,2-диамина (75 мг, 0,7 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) при 0°C добавляли Pd(Oac)2(12 мг, 0,05 ммоль) и Cs2CO3 (400 мг, 1,2 ммоль). Затем полученную смесь перемешивали при температуре 110°C в течение 12 ч. Затем указанную
- 68 030687
смесь охлаждали до комнатной температуры и растворители удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого соединения 4 (160 мг, выход 65%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 461,53; обнаружено: 461,61.
Раствор промежуточного соединения 4 (75 мг, 0,16 ммоль) обрабатывали раствором HCl в этилацетате (2М, 10 мл) при комнатной температуре в течение одного часа. Затем реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором карбоната натрия (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл х2). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью препаративной ЖХВД с получением конечного продукта 5 (50 мг, 84%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 361,41; обнаружено: 361,45.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 5 (50 мг, 0,14 ммоль) в уксусной кислоте (3 мл) при 0°C добавляли тетраметоксиметан (54 мг, 0,4 ммоль). Затем полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем растворитель удаляли при пониженном давлении и осадок очищали с помощью препаративной ЖХВД (MeCN/вода с 0,1% ТФУ) с получением желаемого соединения EE (44 мг, 80%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 401,43; обнаружено: 401,50. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО) δ 7,449-7,310 (m, 7H), 7,156 (m, 1H), 7,021-6,985 (m, 1H), 4,753 (s, 2H), 4,123(s, 3H), 3,6263,581 (t, J=6,7 Гц, 2H), 2,881-2,836 (t, J=6,7 Гц, 2H), 2,37 (s, 3H).
Пример 6
Синтез N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[3,4-d]-пиримидин-4-амина
(FF)
К раствору указанного выше промежуточного соединения 1 (290 мг, 1,0 ммоль) в ацетонитриле (10 мл) при 0°C добавляли фенилметанамин (150 мг, 1,5 ммоль). Затем реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого соединения 3 (288 мг, 80%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 361,84; обнаружено: 361,70.
К раствору промежуточного соединения 3 (180 мг, 0,5 ммоль) и 2-метил-1H-индола (100 мг, 0,5 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) при 0°C добавляли Cs2CO3 (326 мг, 1,0 ммоль), Pd2(dba)3 (105 мг, 0,1 ммоль) и x-Phos (50 мг, 0,1 ммоль) в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивали при температуре 100°C в течение 3 ч. Затем указанную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (30 мл) и этилацетатом (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением продукта 5 (97 мг, 43%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 456,55; обнаружено: 456,40.
К раствору соединения 5 (97 мг, 0,21 ммоль) в ДХМ (3 мл) при 0°C добавляли ТФУ (1 мл) и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении, осадок затем разбавляли насыщенным водным раствором карбоната натрия (10 мл) и ДХМ (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали ДХМ (30 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью препаративной ЖХВД (с использованием растворителей) с получением конечного продукта FF (67 мг, 90%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 356,44; обнаружено: 356,32. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 7,75 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,43-7,17 (m, 5H), 7,03-6,91 (m, 2H), 6,28 (s, 1H), 4,72 (s, 2H), 4,25 (d, J=19,8 Гц, 4H),
- 69 030687
2,45 (s, 3H).
Пример 7
Синтез 1-(4-(бензиламино)-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5,6-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-7(8H)ил)этанона (GG)
К раствору соединения 1 (15 мг, 0,04 ммоль) в ДХМ (3 мл) при 0°C добавляли уксусный ангидрид (102 мг, 1,00 ммоль) и Et3N (101 мг, 1,00 ммоль). Полученный раствор перемешивали при такой же температуре в течение 1 ч и при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением продукта GG (15 мг, выход 93%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 412,50; обнаружено: 412,53. 1Н ЯМР (300 МГц, CD3OD) δ 7,75 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,43-7,17 (m, 5H), 7,036,91 (m, 2H), 6,28 (s, 1H), 4,72 (s, 2H), 4,25 (d, J=19,8 Гц, 4H), 2,45 (s, 3H), 2,02 (s, 3H).
Пример 8
Синтез N-бензил-2-(2-метил-2Н-индол-1(7aH)-ил)-5,7-дигидрофуро[3,4-d]пиримидин-4-амина (HH)
о Vo. . S
i)NaH'THF'
ii) Ethyl acryl DMSO, r.t
Cl
N Et3N,BnNH2 Vl ACN, 1 h
THF -ΤΓΦ Ethyl acrylate
DMSO - ДМСО r.t. - комнатная температура overnight - в течение ночи Urea - мочевина
Dimethyl aniline - диметиланилин reflux - обратная конденсация ACN - ацетонитрил Dioxane -диоксан
К раствору этил-2-гидроксиацетата 1 (5 мл, 50 ммоль) в ТГФ (100 мл) при температуре 0°C добавляли NaH (60%, 2,3 г, 58 ммоль) в атмосфере азота. Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 45 мин. Растворители удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок суспендировали в диметилсульфоксиде (65 мл) и охлаждали до 0°C. Затем добавляли по каплям этилакрилат (6,8 мл, 63 ммоль). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Затем полученный раствор медленно выливали в водный раствор соляной кислоты (10%, 250 мл). Полученную смесь экстрагировали диэтиловым эфиром (150 мл х3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения 2 (3 г, 38%). которое использовали в следующем этапе без дополнительной очистки. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 159,15; обнаружено: 159,21.
К раствору указанного выше соединения 2 (3 г, 18 ммоль) в метаноле при температуре 0°C (15 мл) добавляли мочевину (1,65 г, 27,6 ммоль) и концентрированный водный раствор соляной кислоты (0,75 мл). Полученный раствор нагревали с обратной конденсацией в течение 2 ч. Затем указанный раствор охлаждали до 0°C и перемешивали при указанной температуре в течение 15 мин. Осадок белого цвета собирали и затем суспендировали в водном растворе гидроксида натрия (15 мл, 2 М), полученную смесь нагревали при температуре обратной конденсацией в течение 1 ч.
Затем полученный раствор охлаждали до комнатной температуры и медленно окисляли водным раствором соляной кислоты (10%). Осадок собирали, промывали солевым раствором и сушили с получением промежуточного соединения 3 (1,5 г, 54%), которое использовали в следующем этапе без дополнительной очистки. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 155,12; обнаружено: 155,23.
К раствору указанного выше соединения 3 (500 мг, 3,25 ммоль) в оксихлориде фосфора (30 мл) при
- 70 030687
температуре 0°C добавляли диметиланилин (500 мг, 4,13 ммоль). Полученный раствор нагревали при температуре обратной конденсации в течение 12 ч. Растворители удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок выливали на лед (100 г) и экстрагировали дихлорметаном (50 мл х3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением конечного продукта 4 (300 мг, 49%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 192,01; обнаружено: 192,10.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 4 (300 мг, 1,58 ммоль) в ДХМ (50 мл) при температуре 0°C добавляли фенилметанамин (300 мг, 3 ммоль) и TEA (500 мг, 3,88 ммоль). Затем реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Полученную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением желаемого соединения 5 (300 мг, 73%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 262,71; обнаружено: 262,85.
К раствору промежуточного соединения 5 (261 мг, 1,0 ммоль) и 2-метил-1H-индола (130 мг, 1,0 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) при температуре 0°C добавляли Cs2CO3 (650 мг, 2,0 ммоль), Pd2(dba)3 (212 мг, 0,2 ммоль) и X-Phos (100 мг, 0,2 ммоль) в атмосфере азота. Полученную смесь подвергали микроволновому облучению при 200°C в течение 2 ч. Затем указанную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (30 мл) и этилацетатом (30 мл), слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл х2). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с использованием смеси гексана и этилацетата с получением продукта HH (150 мг, 42%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 359,44; обнаружено: 359,65. 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 8,14-8,11 (m, 1H), 7,39-7,37 (m, 1H), 7,28-7,27 (m, 5H), 7,15-7,14 (m, 2H), 6,40 (s, 1H), 5,09-5,06 (m, 4H), 4,81 (s, 2H), 2,67 (s, 3H), 2,03 (s, 1H).
Пример 9
Синтез 1-[4-(бензиламино)-5H,7H,8H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоксамида (II)
К смеси NaH (60% в гексане, 10,0 г, 250 ммоль) в ТГФ (300 мл) при комнатной температуре добавляли тетрагидропиран-4-он 1 (10,0 г, 100 ммоль) и диметилкарбонат (21 мл, 250 ммоль). Затем полученную смесь нагревали до 45°C в течение ночи. Конечную смесь выливали в 0,01 н раствор HCl и Et2O, фильтровали через целит, отделенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и осадок очищали с помощью силикагеля (петролейный эфир/этилацетат =50:1) с получением желаемого продукта 2 (7,8 г, выход 49%). 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ: 4,23 (m, 1H), 3,84 (t, 2H), 3,77 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,39 (m, 2H).
Смесь соединения 2 (1,58 г, 10 ммоль) и ацетата аммония (2,3 г, 30 ммоль) в растворе MeOH (20 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Полученную смесь концентрировали в вакууме, добавляли дихлорметан (100 мл) и воду (20 мл) и отделенный органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт 3 растворяли в 20 мл раствора CH3CN, обрабатывали 2,2,2-трихлорацетилизоцианатом (3,76 г, 20 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Полученное твердое вещество собирали посредством фильтрования и растворяли в растворе NH3 в MeOH (8 мл, 7 н), смесь нагревали при температуре 70°C. После охлаждения смеси до комнатной температуры образовывалось твердое вещество, которое собирали посредством фильтрования с получением соединения 4 (1,2 г, 71%). 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСОМ6): δ 10,98 (br, 2H), 4,19 (s, 2H), 3,76 (t, J=5,4 Гц, 2H), 2,38 (и = 5,4 Гц, 2H).
Раствор соединения 4 (1,68 г, 10 ммоль) в POCl3 (10 мл) нагревали до температуры обратной кон- 71 030687
денсации и перемешивали в течение 2 ч. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали в вакууме. Добавляли ДХМ (100 мл) и воду (10 мл), отделенный органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта 5 (0,7 г, 34%).
Раствор соединения 5 (1,03 г, 5 ммоль) в 50 мл CH3CN обрабатывали бензиламином (2,68 г, 25 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, концентрировали в вакууме и осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (PE/EA = 1:1) с получением продукта 6 (1,0 г, 72%). 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 7,34 (m, 5H), 4,70 (d, J=5,1 Гц, 2H), 4,61 (br, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,96 (t, J=5,4 Гц, 2H), 2,79 (t, J=5,4 Гц, 2H).
К раствору 2-метил-Ш-индол-4-карбонитрила (85 мг, 0,54 ммоль), соединения 6 (150 мг, 0,54 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли Pd2(dba)3 (100 мг, 0,11 ммоль), X-Phos (52 мг, 0,11 ммоль) и CsCO3 (358 мг 1 ммоль). Смесь дегазировали 3 раза, затем перемешивали при температуре 100°C в течение 2 ч. Полученную смесь концентрировали в вакууме и осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 5:1) с получением желаемого продукта 7 (150 мг, выход 70%). 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,81 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,40 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,34-7,30 (m, 4H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,02-6,98 (m, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,72 (s, 2H), 4,66 (s, 2H), 4,07 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2,83 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2,50 (s, 3H).
К раствору соединения 7 (180 мг, 0,46 ммоль) в растворе этанола (8 мл) и воды (1 мл) добавляли Pd(OAc)2 (11 мг, 0,046 ммоль), PPh3 (14 мг, 0,053 ммоль) и оксим ацетальдегида (53 мг, 0,92 ммоль). Затем реакционную смесь нагревали до обратной конденсации в течение 2 ч. Полученную смесь концентрировали и осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол = 20:1) с получением желаемого продукта II (110 мг, выход 58%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 414,19; обнаружено: 414,20; 1Н ЯМР (300 МГц, D3COD) δ 7,72 (d, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,41 (m, 1H), 7,31 (m, 3H), 7,25 (m, 1H), 6,96 (t, 1H), 6,77 (s, 1H), 4,71 (d, 2H), 4,63 (s, 1H), 4,05 (t, 2H), 2,11, (t, 2H), 2,45 (s, 3H).
Пример 10
Синтез 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил)-2-метокси-1H-бензо^]имидазол-4-карбонитрила (JJ)
jj
rt - комнатная температура Dioxane - диоксан
acetaldehyde oxime - оксим ацетальдегида
К раствору 2,3-диаминобензонитрила 1 (0,532 г, 4,0 ммоль) в уксусной кислоте (10 мл) при температуре 0°C добавляли тетраметилортокарбонат (0,544 г, 4,0 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат=10:1) с получением 2-метоксиШ-бензо^]имидазол-4-карбонитрила 2 (0,61 г, 88%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 174,06; обнаружено: 174,17.
Смесь 2-метокси-Ш-бензо^]имидазол-4-карбонитрила 2 (63 мг, 0,36 ммоль) и Ы-бензил-2-хлор-7,8дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-4-a 3 (100 мг, 0,36 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия (0) (33 мг, 0,036 ммоль), X-phos (34 мг, 0,072 мг) и K2CO3 (100 мг, 0,72 ммоль) в диоксане (4 мл) нагревали при температуре 100°C в течение 12 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали и затем очищали полученный осадок с помощью флэшхроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 4:1) с получением промежуточного соединения 4 (100 мг, 67%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 413,16; обнаружено: 413,20.
К раствору промежуточного соединения 4 (50 мг, 0,12 ммоль) в этаноле (4 мл) и воде (0,4 мл) добавляли Pd(OAc)2 (2,7 мг, 0,012 ммоль), PPh3 (6,3 мг, 0,024 ммоль) и оксим ацетальдегида (14 мг, 0,24 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при температуре 80°C в течение 12 ч. Полученную смесь охлаждали и концентрировали, полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол = 20:1) с получением желаемого соединения JJ (32 мг, 62%) в виде твердого вещества. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 431,46; обнаружено: 431,51. 1Н ЯМР (300 МГц,
- 72 030687
CDCl3): δ 9,30-9,29 (m, 1Н), 8,03 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7,68 (d,J= 8,1 Гц, 1Н), 7,37-7,35 (m, 4Н), 7,13 (t, J=8,1 Гц, 1Н), 5,97 (s, 1Н), 5,40-5,25 (m, 2Н), 4,77 (d, J=5,4 Гц, 2Н), 4,60 (s, 2Н), 4,27 (s, 3Н), 4,06 (t, J=5,4 Гц, 2Н), 3,02 (t, J=5,4 Гц, 2Н).
Пример 11
Синтез 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил)-Н2-диметил-1Н-индол4-карбоксамида (KK)
THF -ТГФ DCM-ДХМ Dioxane -диоксан
К раствору 4-бром-1Н-индола (10 г, 50 моль) в ТГФ (100 мл) при температуре 0°C добавляли NaH (96%, 1,4 г, 56 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин и затем медленно добавляли PhSO2Cl (8,8 г, 0,05 моль). Полученную смесь перемешивали при такой же температуре в течение 6 ч. Затем указанную смесь гасили водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия. Na2SO4 удаляли посредством фильтрования и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 5:1) с получением 4-бром-1-(фенилсульфонил)-1Н-индола 2 (10 г, 60%). МОН? (М+Н+) m/z: рассчитано: 335,96; обнаружено: 336,10.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 2 (8 г, 23,9 ммоль) в ТГФ (100 мл) при температуре -45°C добавляли LDA (1,6 М, 18 мл, 28,9 ммоль). Смесь перемешивали при такой же температуре в течение 1 ч, затем добавляли MeI (4,04 г, 28,7 ммоль). Полученную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще одного часа. Затем полученную смесь гасили насыщенным раствором N1 ДО (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором, сушили над безводным MgSO4 и концентрировали при пониженном давлении. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 5:1) с получением промежуточного соединения 3 (7,0 г, 84%). MCHP (М+Н+) m/z: рассчитано: 348,98; обнаружено: 349,10.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 3 (7,0 г, 20,1 ммоль) в MeOH (80 мл) и воде (40 мл) добавляли NaOH (4,01 г, 0,1 моль). Полученный раствор перемешивали при температуре 50°C в течение 6 ч. Затем указанную смесь охлаждали и концентрировали в вакууме; осадок экстрагировали ДХМ (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали водой и солевым раствором, сушили над безводным MgSO4 и концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 5:1) с получением 4-бром-2-метил-1Н-индола 4 (3,0 г, 71%). MCHP (M+Н*) m/z: рассчитано: 209,98; обнаружено: 210,12.
Смесь указанного выше промежуточного соединения 4 (1,2 г, 5,74 ммоль), Pd(OAc)2 (122 мг, 0,58 ммоль), dppp (238 мг, 0,58 ммоль), TEA (1,6 мл, 11,48 ммоль) в MeOH (40 мл) герметизировали в атмосфере CO и нагревали при температуре 90°C в течение ночи. Полученную смесь охлаждали и концентрировали, затем очищали осадок с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 5:1) с получением метил-2-метил-1Н-индол-4-карбоксилата 5 (0,9 г, 83%). MCI IP (M+Н*) m/z: рассчитано: 190,08; обнаружено: 190,12.
Смесь указанного выше промежуточного соединения 5 (1,02 г, 3,70 ммоль), метил-2-метил-1Ниндол-4-карбоксилата 6 (700 мг, 3,70 ммоль), трис(дибензилиден-ацетон)дипалладия(0) (677 мг, 0,74 ммоль), X-Phos (352 мг, 0,74 ммоль) и Cs2CO3 (2,4 г, 7,4 ммоль) в диоксане (35 мл) нагревали при температуре 100°C в течение 12 ч в атмосфере азота. Полученную реакционную смесь охлаждали до комнат- 73 030687
ной температуры и концентрировали в вакууме, осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир / этилацетат = 2:1) с получением метил-1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Нпирано[4,3-п]пиримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4-карбоксилата 7 (1,2 г, 76%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 429,48; обнаружено: 429,59.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 7 (600 мг, 1,4 ммоль) в ТГФ (15 мл), метаноле (5 мл) и воде (5 мл) добавляли LiOH (177 мг, 4,2 ммоль). Затем реакционную смесь нагревали с обратной конденсацией в течение 3 ч. Затем указанную смесь охлаждали и растворители удаляли в вакууме и осадок окисляли HCl (2 М) до pH 2-3 и экстрагировали ДХМ (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали с получением промежуточного соединения 8, которое использовали для следующего этапа без дополнительной очистки. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 415,17; обнаружено: 415,25.
К раствору указанного выше неочищенного промежуточного соединения 8 (70 мг, 0,17 ммоль) в ДХМ (10 мл) при температуре 0°C добавляли метиламин в ТГФ (2 М, 0,17 мл), HATU (78 мг, 0,20 ммоль) и DIPEA (44 мг, 0,34 ммоль). Реакционный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем гасили водой (30 мл) и ДХМ (100 мл), органический слой отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме и осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол =20:1) с получением 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин2-ил)-N,2-диметил-1H-индол-4-карбоксамида KK (35 мг, 48%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 428,20; обнаружено: 428,25. 1Н ЯМР (300 МГц, CD3OD): δ 7,73 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,37-7,24 (m, 6H), 6,96 (t, J=7,5 Гц, 1H), 6,71 (s, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,64 (s, 2H), 4,05 (t, J=5,7 Гц, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,82 (t, J=5,7 Гц, 2H), 2,45 (s, 3H).
Пример 12
Синтез 1-(4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4-карбоновой кислоты (LL)
THF -ТГФ Dioxane -диоксан
Смесь метил-2-метил-1Н-индол-4-карбоксилата 1 (60 мг, 0,32 ммоль), ^бензил-2-хлор-5,6,7,8тетрагидрохиназолин-4-амина 2 (87 мг, 0,32 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия (0) (59 мг, 0,064 ммоль), X-Phos (30 мг, 0,064 ммоль) и Cs2CO3 (208 мг, 0,64 ммоль) в диоксане (5 мл) нагревали при температуре 100°C в течение 12 ч в атмосфере азота. Затем указанную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме, осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат= 2:1) с получением промежуточного соединения 3 (100 мг, 73,5%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 427,21; обнаружено: 427,26.
К раствору указанного выше неочищенного промежуточного соединения 3 (100 мг, 0,23 ммоль) в ТГФ (12 мл), метаноле (4 мл) и воде (4 мл) добавляли LiOH (30 мг, 0,7 ммоль). Затем смесь нагревали с обратной конденсацией в течение 3 ч. Затем указанную реакционную смесь нагревали с обратной конденсацией в течение 3 ч. Затем указанную смесь охлаждали и растворители удаляли в вакууме и осадок окисляли HCl (2 М) до pH 2-3 и экстрагировали ДХМ (3x50 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным MgSO4, фильтровали и концентрировали в вакууме, осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол = 20:1) с получением 1-(4-(бензиламино)5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил)-2-метил-1H-индол-4-карбоновой кислоты LL (60 мг, 63%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 413,19; обнаружено: 413,25. !Н ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,76 (dd, J=7,5 Гц, J=0,9 Гц, 1H), 7,65 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,32-7,24 (m, 5H), 6,986,93 (m, 2H), 4,72 (s, 2h), 2,75-2,72 (m, 2H), 2,55-2,51 (m, 2H), 2,42 (s, 3H), 1,94-1,92 (m, 4H).
Пример 13
Синтез 1-(4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4-сульфонамида (MM)
- 74 030687
DMF - ДМФА Dioxane -диоксан
К раствору 2-метил-4-нитро-Ш-индола (6,34 г, 36 ммоль) в ДМФА (40 мл) при температуре 0°C добавляли NaH (1,29 г, 54 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при такой же температуре в течение 15 мин и затем добавляли хлорид бензолсульфонила (9,54 г, 54 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и затем гасили водным раствором NH4Cl (10 мл) и H2O (50 мл), твердое вещество собирали посредством фильтрования с получением 2-метил-4-нитро-1-(фенилсульфонил)-Шиндола в виде твердого вещества желтого цвета 2 (10 г, 88%), которое использовали в следующем этапе без дополнительной очистки.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 2 (10 г, 31 ммоль) в этаноле (300 мл) добавляли насыщенный водный раствор NH4Cl (60 мл) и Fe (8,7 г, 155 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре 60°C в течение 2 ч. Затем указанную смесь охлаждали и твердое вещество отфильтровывали и фильтрат концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэшхроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 1:2) с получением 2-метил-1-(фенилсульфонил)-Ш-индол-4-амина 3 (8,8 г, 97%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 287,08; обнаружено: 287,19, Ίί ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 7,81-7,78 (m, 2H), 7,67-7,64 (m, 1H), 7,59-7,54 (m, 2H), 7,18 (d, J=8,1 Гц, 1H), 6,92 (t, J=8,0 Гц, 1H), 6,64 (s, 1H), 6,34 (d, J=7,8 Гц, 1H), 5,40 (s, 2H), 2,49 (s, 3H).
К суспензии указанного выше промежуточного соединения 3 (2,86 г, 0,01 моль) в концентрированном водном растворе HCl (20 мл, 36%) при температуре 0°C добавляли по каплям раствор NaNO2 (1,6 г) в воде (6 мл) в течение 30 мин и затем смесь перемешивали в течение дополнительных 60 мин. Раствор CuCl2 (0,27 г) в воде (0,5 мл) добавляли к раствору ледяной уксусной кислоты (50 мл), насыщенной SO2. Затем полученную суспензию хлористого диазония вводили в указанную выше реакционную смесь при комнатной температуре. Когда прекращалось выделение газообразного азота (примерно через 60 мин), полученную реакционную смесь выливали на смесь лед/вода (55 мл) и осажденное твердое вещество 4 (3,5 г неочищенного продукта) собирали посредством фильтрования, которое использовали в следующем этапе без дополнительной очистки.
К раствору указанного выше промежуточного соединения 4 (3,5 г) в MeOH (50 мл) при температуре 0°C добавляли NH3 в MeOH (20 мл, 7 н). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и осадок очищали с помощью флэшхроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат=5:3) с получением 2-метил-1(фенилсульфонил)-Ш-индол-4-сульфонамида 5 (500 мг, 15%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 351,04; обнаружено: 351,16. Ίί ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 8,44 (d, J=11,2 Гц, 1H), 7,84-7,78 (m, 7H), 4,76 (s, 2H), 2,74 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2,67 (s, 3H).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 5 (500 мг, 1,4 ммоль) в MeOH (20 мл) при температуре 0°C добавляли NaOH (168 мг, 4,2 ммоль) и воду (2 мл).
Полученный раствор затем нагревали до обратной конденсации в течение ночи. Указанный раствор охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэшхроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат = 5:3) с получением желаемого продукта 6 в виде твердого вещества желтого цвета (245 мг, 82%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 211,05; обнаружено: 211,08. Ίί ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,56 (d, J=10 Гц, 1H), 7,49 (d, J=10 Гц, 1H), 7,10 (t, J=10 Гц, 1H), 6,61 (s, 1H), 2,48 (s, 3H).
К раствору указанного выше соединения 6 (50 мг, 0,18 ммоль) в диоксане (10 мл) при температуре 0°C добавляли N-бензил-2-хлор-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,18 ммоль), трис(дибензилиден-ацетон)дипалладия(0) (30 мг, 0,03 ммоль), X-Phos (30 мг, 0,06 ммоль) и KOl-Bu (40 мг, 0,36 ммоль) и реакционную смесь затем нагревали при температуре 100°C в течение 2 ч в атмосфере азота. Указанную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме и осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, ДХМ/МеОН =30:1) с получением желаемого продукта MM (10 мг, 12%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 450,15; обнаружено: 450. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,56 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,54 (d, J=8,8 Гц, 1H), 7,27-7,20 (m, 3H), 7,04-7,02 (m, 2H), 6,84 (t, J=8,0 Гц, 1H), 6,60 (s, 1H), 4,23-4,21 (m, 4H), 3,84 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2,57 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2,37 (s, 3H).
Пример 14
Синтез 1-(4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил)-2-метил-Ш-индол-4-сульфонамида
(NN)
- 75 030687
Пример 14 получали в соответствии со способами примера 13 с использованием показанных реагентов и реакций.
Пример 15
Синтез К-бензил-2-(2-метил-4-(метилсульфонил)-Ш-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин- 4амина (OO)
3
Pd2(dba)3, X-Phos Cs2CO3, dioxane
SO2Me
NHBn
5
1
NHBn
OO
L-proline - L-пролин DMSO - ДМСО Dioxane -диоксан
К суспензии 2-метил-1-(фенилсульфонил)-Ш-индол-4-амина (572 мг, 2 ммоль) в H2O (10 мл) при температуре 0°C добавляли раствор NaNO2 (305 мг, 4,4 ммоль) в H2O (10 мл) и водный раствор HCl (10 мл, 10%). Через 30 мин полученную реакционную смесь добавляли к раствору KI (8,53 г, 51,4 ммоль) в H2O (20 мл) при температуре 0°C. Затем полученную смесь поддерживали при такой же температуре в течение дополнительных 1,5 ч и нагревали при 85°C в течение 10 мин. Раствор охлаждали и экстрагировали этилацетатом (2х 100 мл), объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (петролейный эфир/этилацетат = 3/1) с получением 4-йод-2-метил-1-(фенилсульфонил)-Ш-индола 2 в виде твердого вещества белого цвета (600 мг, выход 76%). 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО): δ 8,05 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,90-7,87 (m, 2H), 7,72-7,69 (m, 1H), 7,65-7,57 (m, 3H), 7,07 (t, J=8,1 Гц, 1H), 6,46 (s, 1H), 2,63 (s, 3H).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 2 (0,6 г, 1,51 ммоль) в ДМСО (10 мл) добавляли метансульфонат натрия, CuI (58 мг, 0,3 ммоль) и L-пролин (70 мг, 0,6 ммоль) в атмосфере N2. Смесь перемешивали при температуре 80°C в течение 2 дней. Указанную смесь охлаждали и гасили насыщенным водным раствором NH4Cl (10 мл), разбавляли водой (20 мл), экстрагировали этилацетатом (30 мл х2), сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (петролейный эфир/этилацетат=2/1) с получением 2-метил-4(метилсульфонил)-1-(фенилсульфонил)-Ш-индола 3 в виде твердого вещества желтого цвета (320 мг, выход 60%). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО): δ 8,40 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,98-7,96 (m, 2H), 7,77-7,72 (m, 2H), 7,62 (t, J=8,0 Гц, 2H), 7,52 (t, J=8,0 Гц, 1H), 6,99 (s, 1H), 3,20 (s, 3H), 2,69 (s, 3H).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 3 (320 мг, 0,92 ммоль) в MeOH (20 мл) добавляли воду (2 мл) и NaOH (110 мг, 2,75 ммоль). Смесь нагревали при температуре 60°C в течение 0,5 ч. Указанную смесь охлаждали и растворитель удаляли в вакууме и осадок очищали с помощью флэшхроматографии (петролейный эфир/этилацетат=1/1) с получением 2-метил-4-(метилсульфонил)-Шиндола 4 в виде твердого вещества белого цвета (170 мг, выход 88%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 209,05; обнаружено: 209.
К раствору указанного выше соединения 4 (77 мг, 0,365 ммоль) в диоксане при температуре 0°C (20 мл) добавляли Ы-бензил-2-хлор-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин (100 мг, 0,365 ммоль), Pd2(dba)3 (67 мг, 0,073 ммоль), X-Phos (35 мг, 0,073 ммоль) и Cs2CO3 (357 мг, 1,095 ммоль) и реакционную смесь затем нагревали при температуре 100°C в течение 2 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали и гасили путем добавления воды (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл х2), объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, MeOH / ДХМ = 1/15) с получением Ы-бензил-2-(2-метил-4(метилсульфонил)-Ш-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амина (OO) в виде твердого вещества белого цвета (90 мг, выход 55%). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 447,18; обнаружено: 446,30. 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ 8,17 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,71 (d,J= 7,6 Гц, 1H), 7,37-7,32 (m, 5H), 7,15 (t, J=8,0 Гц, 1H), 6,82 (s, 1H), 5,09 (s, 1H), 4,75 (d, J=5,6 Гц, 2H), 3,08 (s, 3H), 2,82 (t, J=5,0 Гц, 2H), 2,64 (s, 3H), 2,42 (t, J=5,4 Гц, 2H), 1,93-1,91 (m, 4H).
Пример 16
Синтез N-бензил-2-(2-метил-4-(1H-тетразол-5-ил)-1H-индол-1-ил)-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3- 76 030687
d]пиримидин-4-амина (PP)
Смесь 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4-карбонитрила 1 (340 мг, 0,86 ммоль), NaN3 (560 мг, 8,6 ммоль), NH4Cl (465 мг, 8,6 ммоль), LiCl (110 мг, 2,58 ммоль) и ДМФА (20 мл) перемешивали при температуре 120°C в течение 14 ч в атмосфере N2. Смесь охлаждали и разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл x3), объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, MeOH / ДХМ = 1:8) с получением №бензил-2-(2-метил-4(1Н-тетразол-5-ил)-1Н-индол-1-ил)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3^]пиримидин-4-амина PP в виде твердого вещества желтого цвета (40 мг, выход 11% выход). MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 439,19; обнаружено: 439,20. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,77 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7,60 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 7,34-7,26 (m, 5Н), 7,09 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 6,98 (s, 1Н), 4,73 (s, 2Н), 4,66 (s, 2Н), 4,07 (t, J=5,6 Гц, 2Н), 2,84 (t, J=5,6 Гц, 2Н), 2,5 (s, 3H).
Пример 17
Синтез 2-(4-(аминометил)-2-метил-1Н-индол-1-ил)-Л-бензил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амина
(QQ)
К раствору 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4карбонитрила 1 (50 мг, 0,13 ммоль) в ТГФ (5 мл) при температуре 0°C добавляли алюмогидрид лития (10 мг, 0,26 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь гасили Na2SO4, 10H2O и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, ДХМ / MeOH = 20:1) с получением 2-(4(аминометил)-2-метил-1Н-индол-1-ил)-Л-бензил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амина QQ (30 мг, 59%) в виде твердого вещества белого цвета. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 398,23; обнаружено: 398,23. 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD): δ 7,44 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,31-7,23 (m, 5H), 7,02 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,94 (t, J=8,0 Гц, 1H), 6,41 (s, 1H), 4,72 (s, 2H), 4,05 (s, 2H),2,74 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2,50 (t, J=5,6 Гц, 2H), 2,40 (s, 3H), 1,95-1,89 (m, 4H).
Пример 18
Синтез 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил)-2-циклопропил-1Н-индол-4-карбоксамида (SS)
- 77 030687
К раствору трет-бутилацетата 2 (6 г, 52 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл) при температуре -65°C добавляли диизопропиламид лития (52 мл, 2М в гексане, 104 ммоль). Смесь продолжали перемешивать при температуре -65°C в течение 1 ч. Затем добавляли раствор хлорида циклопропанекарбонила 1 (6 г, 57,4 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл). Смесь поддерживали при такой же температуре в течение 2 ч и затем позволяли ей медленно нагреваться до температуры 0°C. Затем полученную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл х2). Объединенные органические слои промывали водным раствором соляной кислоты (200 мл, 1н) и солевым раствором (200 мл), сушили с помощью безводного сульфата натрия и концентрировали. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (петролейный эфир/этилацетат=4:1) с получением трет-бутил-3циклопропил-3-оксопропаноата 3 (2,1 г, 60%) в виде жидкости желтого цвета. 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 3,42 (s, 1H), 2,03-1,97 (m, 1H), 1,43 (s, 9H), 1,06-1,03 (m, 2H), 0,93-0,88 (m, 2H).
Раствор указанного выше промежуточного соединения 3 (1 г, 5,4 ммоль), 2-хлор-3-нитробензонитрила 4 (1,6 г, 8,8 ммоль) и карбоната калия (2,2 г, 15,9 ммоль) в Ν,Ν-диметилацетамиде (30 мл) нагревали при 80°C в течение 4 ч в атмосфере азота. Реакционный раствор охлаждали и концентрировали в вакууме и осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (петролейный эфир/этилацетат =4 : 1) с получением трет-бутил-2-(2-циано-6-нитрофенил)-3-циклопропил-3-оксопропаноата 5 (1,2 г, 67%) в виде твердого вещества коричневого цвета. 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 13,53 (s, 1H), 8,10 (dd, J=1,2 Гц, J=8,4 Гц, 1H), 7,91 (dd, J=1,2 Гц, J=8,4 Гц, 1H), 7,57 (3,42 J=7,8 Гц, 1H), 1,48 (m, 1H), 1,34 (s, 9H), 1,30 (d, J=7,2 Гц, 4Н).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 5 (400 мг, 0,233 моль) в дихлорметане (20 мл) при температуре 0°C добавляли трифторуксусную кислоту (5 мл). Реакционную смесь поддерживали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем концентрировали с получением 2-(2-циклопропил-2оксоэтил)-3-нитробензонитрила 6 (270 мг, 91%), который использовали для следующего этапа без дополнительной очистки. !Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 12,84 (s, 1H), 8,20 (dd, J=1,2 Гц, J=8,1 Гц, 1H), 7,97 (dd, J=1,2 Гц, J=8,1 Гц, 1H), 7,66 (t, J=8,1 Гц, 1H), 1,50 (m, 1H),1,38-1,24 (m, 4H).
К раствору указанного выше промежуточного соединения 6 (270 мг, 1,17 ммоль) в диоксане (8 мл) при температуре 0°C добавляли дитионит натрия (880 мг, 5,06 ммоль) в воде (6 мл) и насыщенный водный раствор бикарбоната натрия (2 мл). Смесь хранили при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл х2). Объединенные органические слои концентрировали и осадок очищали с помощью препаративной ТСХ (петролейный эфир/этилацетат = 4:1) с получением 2-циклопропил-1H-индол-4-карбонитрила 7 и 3-амино-2-(2циклопропил-2-оксоэтил)бензонитрила (в отношении примерно 1:1 по результатам 1Н ЯМР), который использовали для следующего этапа без дополнительной очистки. 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 8,43 (s, 1H), 7,46 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,31 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,07 (t, 1H), 6,20 (s, 1H), 2,00-1,96 (m, 1H), 0,90-0,79 (m, 1H).
К раствору указанного выше соединения 7 (70 мг, 0,38 ммоль с содержанием 3-амино-2-(2-циклопропил-2-оксоэтил)бензонитрила в отношении примерно 1:1) в диоксане (20 мл) при температуре 0°C добавляли N-бензил-2-хлор-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-4-амин 8 (110 мг, 0,38 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (40 мг, 0,04 ммоль), X-Phos (40 мг, 0,08 ммоль) и Cs2CO3 (250 мг, 0,76 ммоль) и затем реакционную смесь нагревали при температуре 100°C в течение 2 ч в атмосфере азота. Реакционную смесь охлаждали и гасили путем добавления воды (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл х2), объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме. Осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат =2:1) с получением 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил)2-циклопропил-1H-индол-4-карбонитрила 9 (110 мг, 69%). 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3): δ 8,03-8,00 (m, 1H), 7,43-7,29 (m, 6H), 7,34-7,30 (m, 4H), 7,08 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,43 (s, 1H), 4,76 (d, J=4,5 Гц, 2H), 4,62 (s, 2H), 4,09 (t, J=6,0 Гц, 2H), 2,97(m, 2H), 2,53 (m, 1H),1,26 (m, 2H), 0,97 (m, 2H).
К раствору 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил)-2-циклопропил-1Hиндол-4-карбонитрила (100 мг, 0,3 ммоль) в ДМСО (2 мл) добавляли UHP (гидроперекись мочевины) (226 мг, 2,4 ммоль) и K2CO3 (20 мг, 0,15 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли воду (0,17 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К полученной смеси добавляли воду (50 мл). Смесь фильтровали с получением неочищенного продукта (30 мг), который очищали с помощью препаративной ТСХ (дихлорметан/метанол = 20:1) с получением 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Hпирано[4,3-d]пиримидин-2-ил)-2-циклопропил-1H-индол-4-карбоксамида SS (30 мг, 48%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета. MCHP (M+H+) m/z: рассчитано: 440,20; обнаружено: 440,25. 1Н ЯМР (300 МГц, CD3OD): δ 7,67 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,46 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,28 (m, 5H), 7,01 (t, J=8,4 Гц, 1H), 6,64 (s, 1H), 4,71 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 4,06-4,07 (m, 2H), 2,83 (m, 2H), 2,20 (m, 1H), 0,54-0,57 (m, 4H).
Примеры 18-29 получали в соответствии со способами примеров 1-17 с использованием показанных реагентов и реакций.
Пример 19
Синтез ГН-^ензиламино^^^З-тетрагидрохиназолин^-ил^-метил-Ш-индолТ-карбоксамида
- 78 030687
(TT)
Пример 20
Синтез 1-(4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидроииридо[4,3Ф]ииримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4карбоксамида(ии)
Пример 21
Синтез 2-(2-амино-1Н-бензо^]имидазол-1-ил)-Ы-бензилтиено[2,3Ф]ииримидин-4-амина (VV)
DMF -ДМФА
DCM-ДХМ
reflux - обратная конденсация
Пример 22
Пример 23 Синтез
Синтез 2-(2-амино-1Н-бензо^]имидазол-1-ил)-Ы-бензил-9Н-иурин-6-амина (WW)
2-(5-(аминометил)-4Н-тиено[3,2-Ь]ииррол-4-ил)-У-бензил-8-метоксихиназолин-4-амина
(ZZ)
- 79 030687
Пример 24
Синтез 2-(2-( 1 -аминоэтил)-1 H-индол-1 -ил)-Ы-бензил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амина (AC)
Пример 25
Синтез ^бензил-8-метокси-2-(2-метилбензофуран-3-ил)хиназолин-4-амина (AE)
Способы скрининга для идентификации соединений, ингибирующих p97
Способы скрининга для идентификации соединений, которые ингибируют, ослабляют или другим образом снижают ферментативную активность p97, применимы для изучения соединений согласно изобретению. Указанные способы скрининга в целом обеспечивают разработку кандидатов, направленных против p97, а также обеспечивает сами указанные кандидаты. Способ включает применение стандартизированного убиквитинированного белка или другого белкового субстрата для фермента p97. Стандартизированный субстрат метят поддающимся выявлению фрагментом, который обеспечивает различия между (a) субстратом, содержащим, например, убиквитин или цепочку убиквитина, или другим субстратом p97 и (b) расщепленным субстратом с отсутствием всего или части фрагмента субстрата, чувствительного к расщеплению p97. В частности, способы скрининга соединения, которое ингибирует ферментативную активность фермента p97, включают анализы, описанные выше как биологические анализы.
Способы скрининга также обеспечивают измерение активности любого исследуемого агента в отношении p97, которое включает отслеживание эффекта указанного исследуемого агента на способность p97 проявлять ферментативную активность.
Согласно одному аспекту такой способ включает модифицирование убиквитина флуоресцентной молекулой и расщепление флуоресцентного конъюгата убиквитина. За ходом реакции расщепления следят по снижению флуоресцентной поляризации флуоресцентной молекулы.
Согласно одному аспекту такой способ включает модификацию убиквитина флуоресцентными красителями, которые претерпевают резонансный перенос энергии флуоресценции (FRET). За расщеплением конъюгата следят по потере сигнала FRET (т.е. по снижению флуоресценции акцепторного красителя или отсутствию гашения донорного красителя).
Согласно одному аспекту выбранный аналитический способ применяется для скрининга библиотеки малых молекул для идентификации молекул, ингибирующих ферментативную активность p97.
Согласно одному аспекту за расщеплением меченого убиквитина следят с помощью электрофореза в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия с последующим выявлением убиквитина.
Соединения, которые, как было определено, являются ингибиторами ферментативной активности
- 80 030687
p97, включают соединения, описанные выше в разделе "Соединения".
Биологические протоколы
Биологические анализы in vitro и in vivo для определения противораковых свойств конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению суммированы выше. Подробное описание указанных протоколов предоставляет описание того, как проводили анализы.
Протокол биохимического анализа р97
Анализ p97 представляет собой первоначальный скрининговый анализ, используемый для определения ингибиторной активности конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению в отношении комплекса p97. Как обсуждается выше, ингибирование активности протеасомного комплекса p97 может обеспечивать апоптоз и вызывать уничтожение неопластических клеток (раковых клеток). Способ осуществляют в соответствии со способом, описанным в источнике Christianson, Nat. Cell Biol., (2011)14:93.
Реагенты, используемые для анализа p97, включают
Аналитический буфер представлял собой смесь 50 мМ триса, pH 7,5, 20 мМ MgCl2; 0,02% TX-100, 1 мМ DTT и 0,2 об.% глицерина. Луночный планшет представлял собой планшет следующего типа: 384луночный планшет, Corning 3674. Набор для идентификации представлял собой набор ADP glo (Promega): останавливающий буфер, выявляющий реагент.
Протокол анализа был следующим:
Получали 10 точек 1:3,33-кратных серийных разведений соединения в ДМСО.
В каждую лунку 384-луночного планшета добавляли следующие реагенты:
0,5 мкл серийно разведенных соединений в ДМСО (конечная концентрация 10%)
2 мкл АТФ (конечная концентрация=20 мкМ, разбавленного в аналитическом буфере)
2,5 мкл p97 (конечная концентрация =20 нМ, разбавленного в аналитическом буфере)
Инкубировали при 37°C в течение 15 мин.
Добавляли 5 мкл останавливающего буфера, инкубировали при комнатной температуре в течение 40 мин.
Добавляли 10 мкл выявляющего реагента, инкубировали при комнатной температуре в течение 30
мин.
Считывали люминесцентный сигнал с помощью планшетного ридера Envision.
Полученные данные люминесцентного считывания можно анализировать следующим образом:
Нормализовали данные люминесценции с использованием контролей, не содержащих фермент (полное ингибирование) и не содержащих соединение (отсутствие ингибирования). Нормализованные данные люминесценции наносили на график в зависимости от логарифмически преобразованных значений концентрации и приводили к сигмоидальной кривой для определения значений IC50 (осуществляли с помощью программы Collaborative Drug Discovery).
Анализ способности проникновения на клетках Caco-2
Данный анализ разработан в качестве модели для определения способности конденсированного пиримидинового соединения согласно настоящему изобретению поступать из кишечника в кровоток. Результаты указанного анализа показывают, может ли конденсированное пиримидиновое соединение эффективно поступать в кровоток пациента. Успешная эффективная абсорбция введенного пероральным путем лекарственного средства частично определяет его биодоступность. Для конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению настоящий анализ является моделью для оценки их биодоступности как результата способности проходить через биологические барьеры для поступления в физиологическую систему пациента.
Экспериментальная цель анализа на клетках Caco-2 заключалась в измерении направленного проникновения исследуемых соединений через монослой культивируемых клеток линии Caco-2.
Исследуемые соединения представляют собой конденсированные пиримидиновые соединения согласно изобретению.
План эксперимента
Приборы
CO2 инкубатор для тканевых культур с контролем влажности Манипулятор для работы с жидкостями Орбитальный встряхиватель Вольтомметр для эпителиальных клеток EVOM, снабженный плоскими электродами (World Precision Instruments, Сарасота, Флорида), необходимыми для измерения трансэпителиального электрического сопротивления (TEER) Настольная центрифуга с адаптером для 96луночных планшетов Клетки Caco-2 (колоректальная аденокарцинома человека, Американская коллекция типовых культур, ATCC, #37-HTB, 30-45 пассажей).
Клетки высевали на ПЭТ-мембраны (с размером пор 1 мкМ, площадь поверхности 0,31 мм2) в многолуночной системе-вкладыше Falcon HTS с использованием 24-луночных планшетов (планшеты Becton Dickinson, номер изделия 351181, Fisher Scientific, Inc.) в плотности 23,000 клеток/лунку. Клетки растили 20-23 дня, среду меняли каждые 2-3 дня.
Реагенты
Раствор буфера Рингера (pH 7,4 при 25°C) Буфер Рингера с 1% метанолом
- 81 030687
Раствор Blk: буфер Рингера: метанол=2:1 (по объему); 100% метанол, включающий внутренний стандарт (IS); исходный 10 мМ раствор для дозирования в ДМСО; 100 мкМ раствор для дозирования в буфере.
Краткое описание протокола
Анализ проникновения на клетках Caco-2: 20-23 дней/30-45 пассажей 24-луночный трансвел: площадь поверхности 0,31 см2 Донорная концентрация: 100 мкМ, включая 1% ДМСО A: 300 мкл, pH 7,4/ B: 1200 мкл pH 7,4, буфер Рингера Направление: от A к B и от B к A (N=4)
Отбор проб с донорной стороны: 20 мкл в начале и в конце (90 мин) Отбор проб с акцепторной стороны: 100 мкл через 30, 50, 70 и 90 мин
Инкубирование при скорости 50 колебаний в минуту, 37°C, 5% CO2, влажности 95%
Анализ: ЖХ-УФ, ЖХ-МС или лазерная сканирующая цитометрия
Выход: Peff(см/с)=(dX/dt)/(AхCoх60), dX/dt: профиль транспортированного количества (нмоль) в зависимости от времени (минуты) в камеру-приемник; A: площадь поверхности (см2); и Co: изначальная донорная концентрация (мкМ)
Положительный контроль: атенолол и пропранолол
Прочность мембраны: TEER >200 Осм2
Требуемое количество: примерно 1 мг или 100 мкл 10 мМ исследуемого соединения в ДМСО
Приборы: CO2 инкубатор с контролем влажности, манипулятор для работы с жидкостями, вольтомметр для эпителиальных клеток для измерения TEER, клетки Caco-2 (ATCC #37-HTB) и 24-луночные планшеты-вкладыши (ПЭТ-мембраны, размер пор 1 мкМ, площадь поверхности платы 0,31 см2, номер изделия 351181, Becton Dickinson)
Производительность: 6 соединений / 2 платы клеток Caco-2/1 FTE/ в день
Получение
Таблица 24. Получение раствора Рингера с глюкозой (изотонический раствор = 290 мОсм/кг), pH 7,4
Химическое вещество Молекулярная масса Концентрация Масса (г) на 1 л Масса (г) на 2 л Масса (г) на 4 л
CaSO4 2Н2О 172,2 1,25 мМ 0,2152 0,4305 0,861
MgSO4 7Н 20 246,5 1,1 мМ 0,2712 0,5423 1,0846
КС1 74,55 5 мМ 0,3728 0,7455 1,491
Na2HPO4 142,0 1,15 мМ 0,1633 0,3266 0,6532
NaH2PO4 Н2О 138,0 0,3 мМ 0,0414 0,0828 0,1656
NaHCO3 84,01 25 мМ 2,100 4,200 8,401
Глюкоза (C6H12O6) 180,2 25 мМ 4,505 9,01 18,02
NaCl 58,44 110мМ 6,428 12,86 25,71
Получение 4 л раствора
1. К 3,5 л дистиллированной воды добавляли сульфат кальция и сульфат магния.
Замечание: Сначала добавляли сульфат кальция и сульфат магния из-за их низкой растворимости, оставшиеся ингредиенты добавляли в порядке, указанном в табл. 1.
2. Конечный объем раствора доводили до 4 л дистиллированной водой при непрерывном перемешивании.
3. Значение pH конечного раствора доводили до pH 7,4 с помощью 1 н раствора HCl или 1 н раствора NaOH.
4. Получали изоосмотический буфер с использованием NaCl. Измеряли тоничность раствора с использованием тонометра. При условии что изотонический раствор эквивалентен 0,9% NaCl (290 мОсм/л),
Y={(290-x)/290}x9 мгх4000 мл, где y = требуемое количество NaCl (мг) для получения изотонического раствора, и x = наблюдаемая тоничность раствора (выраженная в единицах мОсм/л).
Получение раствора для дозирования в полипропиленовой пробирке на 15 мл
1. 100 мкМ раствора для дозирования в RG: 140 мкл 10 мМ исходного раствора + (14 мл - 140 мкл)
RG
Получение градуировки в 96 мелких лунках
1. Получали 10 мкМ стандарт: 100 мкл 100 мкМ дозирующего раствора + 0,9 мл раствора Рингера с 1% метанолом.
2. Получали аналитические стандартные растворы 10, 5, 2, 1, 0,5, 0,2, 0,1, 0,05, 0,02, 0,01 и 0 мкМ. (см. табл. 26).
- 82 030687
Таблица 25. Получение аналитической градуировки в 96 мелких лунках
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
0 20 мкл ОД мкМ раств ора 20 мкл 0,2 мкМ раств ора 20 мкл 0,5 мкМ раств ора 20 мкл 1 мкМ раств ора 20 мкл 2 мкМ раств ора 20 мкл 5 мкМ раств ора 20 мкл 10 мкМ раств ора 40 мкл 10 мкМ раств ора 100 мкл 10 мкМ раст вора 200 мкл 10 мкМ раст вора Исхо дный раств ор
18 0 мк л 180 мкл 180 мкл 180 мкл 180 мкл 180 мкл 180 мкл 180 мкл 160 мкл 100 мкл 0 1% Me ОН в буф ере
Соедин ение 1 в 1 0,0 1 0,02 мкМ 0,05 мкМ од мк 0,2 мк 0,5 мк 1 мк 2 мк 5 мк 10 мк
к МК М м м м м м м м
Соедин ение 2
Соедин ение 3
Исследование транспорта
Дозирование и отбор проб
1. Уравновешивали обе стороны монослоя в течение 10 мин с помощью предварительно нагретого (37°C) буфера Рингера (300 мкл на апикальной стороне, 1,200 мкл на базолатеральной стороне) с добавлением глюкозы (25 мМ), не содержащего лекарственного средства.
2. Измеряли TEER на водяной бане при 37°C.
Замечание: Значение TEER используется в качестве проверки целостности монослоя. Через 21 дней после посева каждый монослой клеток Caco-2 должен иметь значение TEER больше или равное 2000 х см2, и монослои, не соответствующие этому критерию, являются не подходящими для оценки проникновения.
3. При исследования транспорта от A к B: Наполняли базолатеральную сторону 1,200 мкл буфера Рингера. Инициировали исследование транспорта путем переноса раствора исследуемого лекарственного средства для дозирования (320 мкл) на апикальную сторону.
4. При исследовании транспорта от B к A: Наполняли апикальную сторону 300 мкл буфера Рингера. Инициировали исследование транспорта путем переноса раствора исследуемого лекарственного средства для дозирования (1,220 мкл) на базолатеральную сторону. Исследования транспорта для каждого направления (от A к B, от B к A) осуществляли в четырех повторностях для каждого исследуемого лекарственного средства.
5. Таймер запускали после введения дозы в последнюю донорную лунку.
6. Отирали аликвоты по 20 мкл из донорных лунок на 0 мин (D0) и переносили указанные аликвоты на донорную сторону 96-луночного планшета, содержащего 180 мкл буфера с 1% метанолом. Указанный этап приводил к эффективному разбавлению аликвоты Do в десять раз.
7. Инициировали исследование транспорта путем помещения планшета на орбитальный встряхиватель, который поддерживали внутри предварительно нагретого (37°C) инкубатора (5% CO2) с увлажнением. Исследования проводили при перемешивании со скоростью 50 колебаний в минуту.
8. Отбирали аликвоты по 100 мкл из акцепторной стороны монослоя через 30, 50, 70 и 90 мин после введения дозы и переносили указанные аликвоты в соответствующий 96-луночный планшет для образцов (см. табл. 26). Замещали эквивалентным объемом предварительно нагретого буфера.
9. Отбирали аликвоты по 20 мкл с донорной стороны монослоя через 90 мин после дозирования (Df)
- 83 030687
и переносили указанные аликвоты на донорную сторону 96-луночного планшета, содержащую 180 мкл буфера Рингера с 1% метанолом. Указанный этап приводил к эффективному разведению аликвоты Df в десять раз.
10. Замещали среду с обеих сторон монослоя свежим предварительно нагретым буфером Рингера, не содрежащим лекарственное средство (300 мкл на апикальной стороне, 1,200 мкл на базолатеральной стороне) и уравновешивали в течение 10 мин.
11. Измеряли TEER на водяной бане при 37°C.
Манипуляции с образцами
Следующие этапы проводили в 96-луночном аналитическом планшете для клеток Caco-2, табл. 26.
1. Переносили 20 мкл разбавленных аликвот D0 и Df в соответствующий 96-луночный планшет для образцов, каждая лунка которого содержала 80 мкл буфера с 1% метанолом. Указанный этап приводил к эффективному дополнительному разбавлению образцов в пять раз. Таким образом, исходную концентрацию донорных образов разбавляли в 50 раз.
2. Переносили по 100 мкл точек аналитической градуировки (от 0 до 10 мкМ) в ряд планшетов для образцов 1.
3. Добавляли 50 мкл метанола, содержащего IS, во все лунки для образцов и смешивали (стандарты, образцы и D0 и Df).
4. Переносили 150 мкл раствора Blk в ряд 2 аналитического планшета.
5. Запечатывали аналитический планшет с помощью адгезивной герметизирующей пленки и хранили образцы с меткой при температуре -80°C для ЖХ-УФ или ЖХ-МС анализа.
6. Анализировали аликвоты по 20 мкл отдельных образцов для анализа проникновения и стандартов с использованием подходящего аналитического инструмента.
7. Peff=(dX/dt)/(AxC0x60), где Peff представляет собой эффективное проникновение, см/с, X = перенесенная масса, A представляет собой площадь поверхности (см)2, доступную для транспорта, C0 представляет собой исходную донорную концентрацию лекарственного средства (мкМ), и dX/dt представляет собой профиль наклона наилучшей эмпирической кривой через график зависимости транспортированного количества (нмоль) от времени (мин) в акцепторной камере.
Таблица 26. Аналитический планшет для клеток Caco-2 (96-луночный планшет)
0 0,01 мкМ 0,02 мкМ 0,05 mkM 0,1 mkM 0,2 mkM 0,5 mkM 1 mkM 2 mkM 5 mkM 10 mkM
Blk Blk Blk Blk AkB В к A Blk Blk Blk Blk
1-30 2-30 3-30 4-30 5-30 6-30 7-30 8-30
1-50 2-50 3-50 4-50 5-50 6-50 7-50 8-50
1-70 2-70 3-70 4-70 5-70 6-70 7-70 8-70
1-90 2-90 3-90 4-90 5-90 6-90 7-90 8-90
1-Do 2-Do 3-Do 4-Do 5-Do 6-Do 7-Do 8Do
1-Df 2-Df 3-Df 4-Df 5-Df 6-Df 7-Df 8-Df
Данные положительного контроля
Средние данные в табл. 27 представляют собой среднее значение, полученное от 12 отдельных межсуточных экспериментов.
Таблица 27. Peff (x E-6 см/сек), pH 7,4, Caco-2
АВ В А
Атенолол
Среднее 1,08 2,29
Диапазон 0,69-1,80 1,69-2,68
Пропранолол
Среднее 28,53 20,91
Диапазон 18,50-36,80 16,30-31,40
Анализ с использованием микросом печени мышей
Анализ микросом печени представляет собой модель для исследования метаболической стабильности конденсированных пиримидиновых соединений согласно изобретению. Метаболическая стабильность является другим аспектом, определяющим биодоступность. Легкость биоабсорбции соединения в
- 84 030687
кровоток, как показано на модели клеток Caco-2, показывает уровень достижения пероральной дозы соединения кровотока. Организм эффективно метаболизирует вещества для их выведения и/или для их использования в качестве питательных веществ. Данный аспект биодоступности можно определять с помощью исследований на такой модели, как печеночный микросомальный метаболизм. Метаболизм лекарственного средства путем окисления, конъюгации или любым другим биологическим способом определяет по меньшей мере отчасти время действия лекарственного средства в организме.
Анализ микросом печени мышей представляет собой модель, разработанную для определения периода полувыведения лекарственного средства in vivo. Ферменты печени отвечают за превращение веществ в материалы, которые могут легко выводиться из организма. Другие способы такого метаболизма включают почечный метаболизм, клеточный метаболизм и т.д.
В соответствии с данным протоколом соединение объединяли с препаратом микросом печени (белки) и NADPH. Смесь инкубировали и измеряли скорость исчезновения соединения из исследуемого раствора. Измерение проводили путем скрининга концентрации соединения в определенное время с использованием жидкостной хроматографии в комбинации с масс-спектрометрией.
Концентрации реагентов, готовых для получения в виде исследуемого раствора:
Белок: 1,0 мг/мл
Соединение: 1 мкМ
Органический растворитель: 0,4% ДМСО
Среда: 0,1 М фосфат калия (KB)
1 мМ NADPH (Sigma N1630, FW 833,3, готовили свежим)
Получали исследуемое изделие (ИИ, т.е. соединение согласно изобретению) путем растворения твердого ИИ в ДМСО с получением 0,25 мМ раствора
Количество растворов реагентов для объединения с получением исследуемого раствора: 423 мкл KB (фосфат калия)
+25 мкл млМ (20 мг/мл) (препарат мышиных микросом печени)
448 мкл
+2 мкл исследуемого соединения (конденсированного пиримидинового соединения в концентрации 0,25 мМ ДМСО)
+50 мкл исходного раствора NADPH (10 мМ, 10 х) 500 мкл
Протокол исследования для проведения анализа
1. Добавляли 423 мкл KB в пробирки с глубокими лунками на 8 полос
2. Добавляли 25 мкл млМ для состояния 1
3. Помещали на лед, добавляли 2 мкл соединений (250х исходный раствор в ДМСО, исходный раствор при концентрации 0,25 мМ)
4. Предварительно инкубировали реакционную смесь при 37°C в течение от 3 до 5 мин (встряхивали при скорости 150 об/мин)
5. Инициировали реакцию путем добавления 50 мкл NADPH для состояния 1
6. Добавляли 50 мкл KB для состояния 2
7. Аликвоты образцов по 100 мкл собирали через 0, 15, 30 и 60 мин и 200 мкл смеси ацетонитрила, содержащей IS, добавляли для гашения реакции.
8. Центрифугировали в течение 10 мин при скорости 4000 об/мин
9. Супернатант вводили для анализа с помощью жидкостной хроматографии и тандемной массспектрометрии (LC-MS/MS)
Процедура связывания белка с использованием 96-луночного планшета для равновесного диализа
Неспецифичное связыванием белка является другим аспектом, влияющим на биодоступность и эффективность лекарственного средства. Для оценки неспецифичного связывания соединения указанное соединение объединяли с плазмой крови человека и раствор диализовали через мембрану, предотвращающую проход более крупных молекул, таких как белки плазмы крови человека, но пропускающую малые молекулы, такие как соединения согласно изобретению. Как правило, такие мембраны позволяют проходить таким соединениям независимо от их формы - нейтральной или формы соли. Диализат (раствор, проходящий через мембрану) оценивали с помощью методов жидкостной хроматографии и массспектрометрии для определения наличия и концентрации присутствующего соединения. Результаты сравнения концентрации соединения в диализате с концентрацией соединения, объединенного с плазмой крови, показывают, произошло ли неспецифическое связывание с белком.
Оборудование и реагенты:
96-луночный планшет для равновесного диализа (производитель Harvard Apparatus)
Ротатор для планшетов с фиксацией планшетов для диализа в зажимном устройстве
Буфер: DPBS (gibco, 1X)
Концентрация соединения: 1 мкМ ( ~0,5 в мкг/мл) в плазме крови человека
Процедура:
1. Запечатывали пустую сторону лунки с образцом на окрашенной стороне с помощью полосок с
- 85 030687
колиачками.
2. Переворачивали иланшет и осторожно наносили с иомощью иииетки буфер в объеме 200 мкл, равном объему образца, в лунки на стороне буфера (ирозрачная стенка), не касаясь мембран, иозволяя жидкости течь вдоль внутренней стороны стенки каждой лунки.
3. Осторожно заиечатывали заиолненные буфером лунки иолосками с колиачками.
4. Переворачивали иланшет и осторожно удаляли иолоски с колиачками с лунок со стороны образца. Наносили с иомощью иииетки желаемые образцы, не касаясь мембран.
5. Заново заиечатывали лунки с образцами с иомощью иолосок с колиачками.
6. Задвигали собранный иланшет для диализа в ротатор для иланшетов и затягивали вручную уилотнители. Включали и иозволяли вращаться до достижения равновесия (24 ч ири 37°C), удаляли иланшет для диализа из ротатора.
7. После достижения равновесия удаляли иланшет для диализа из ротатора.
8. Осторожно удаляли иолоски с колиачками со стороны иланшета, содержащей буфер (ирозрачная стенка) и медленно отбирали иииеткой аналитические образцы из лунок, стараясь не касаться или не ирокалывать мембраны.
Образцы включали контрольные образцы ири 4°C и образцы стабильности ири 37°C в ФСБ и илазме.
MC анализ
Получали стандарт в концентрации 5, 10, 50, 100, 500 и 1000 нг/мл илазмы крови
Пииетировали 10 мкл каждой из концентрации стандарта и наносили в 40 мкл контрольного буфера/контрольной илазмы (отношение илазма/DPBS 1/4), смешивали. Добавляли 200 мкл Is (внутреннего стандарта) в ацетонитриле, смешивали.
Центрифугировали образцы и иереносили раствор суиернатанта для ЖХ/МС анализа.
Протокол клеточного анализа
Клеточный анализ обесиечивает информацию об антинеоиластической активности соединений согласно изобретению. Исследовали активность соединений в отношении культивируемых раковых клеток для оиределения сиособности соединений согласно изобретению взаимодействовать с раковыми клетками со снижением или устранения таких клеток. Анализ включал установление колоний таких клеток и иоследующую их обработку исследуемым соединением в конкретных условиях и режиме анализа для оиределения результатов.
1 день, рассев клеток для установления колоний раковых клеток Рассев клеток:
Рассевали клетки за ~16 ч до обработки соединением
Помещали ио 25 мкл клеток оиухоли легочной аденокарциномы A549 в каждую лунку 384луночного иланшета с исиользованием многоканальной иииетки.
Два (2) черных иланшета для иммунофлуоресценции в концентрации 2500 клеток/лунку
Оставляли иланшет ири комнатной темиературе на 10-15 мин до иомещения в инкубатор для того, чтобы иозволить клеткам ирикреииться в центральной части иланшета.
Один (1) белый иланшет для оценки жизнесиособности с клетками в концентрации 500 клеток/лунку.
2 день, обработка культивируемых клеток исследуемыми соединениями
Обработка клеток
Получали 10 точек серийных 2-кратных разведений соединений в ДМСО с иолучением 250Х стокового раствора соединений
Разбавляли соединения в отношении 1:125 в среде для клеточных культур с иолучением 2Х раствора. Добавляли ио 25 мкл разведений соединений в дубликаты лунок иланшетов для клеток
Помещали клетки обратно в инкубатор (6 ч инкубирования для черных иланшетов, 72 ч инкубирования для белых иланшетов).
Фиксирование/окрашивание черных иланшетов
Инкубировали клетки в черных иланшетах с соединением ири 37°C в течение 6 ч. добавляли 15 мкл 16% иараформальдегида (PFA) неиосредственно в среду в каждую лунку, инкубировали ири комнатной темиературе в течение 5 мин, встряхивали иланшет и иромывали в 50
мкл ФСБ,
блокировали с иомощью 50 мкл блокирующего буфера в течение 30 мин (можно увеличивать время до нескольких часов).
Блокирующий буфер: 1ХФСБ, 1% БСА, 0,3% тритон-Х100, краситель Хехст (1:10,000) инкубировали в 25 мкл раствора иервичных антител в блокирующем буфере ири 4°C в течение ночи
Первичные антитела
- 86 030687
Планшет А антитела K48-Ub 1:20,000 (Millipore 05-1307 Lot 2049282),
кроличьи
антитела CHOP / Gaddl53 1:2,000 (SC-7351), мышиные Планшет В антитела Р53 1:2,000 (SC-6243), кроличьи
антитела p62/SQSTMl 1:2,000 (SC-28359), мышиные в течение ночи при 4°С
Вторичные антитела:
Alexafluor488, козлиные антикроличьи антитела, 1:2,000 (Life Tech А11008)
Alexafluor555, козлиные антимышиные антитела 1:2,000 (Life Tech А21422)
3/4 День
Окрашивание в черном планшете (продолжение): Промывали черные планшеты 3X в 50 мкл ФСБ (~5 мин каждый)
инкубировали в 25 мкл вторичных антител (1:2,000) в блокирующем буфере в течение 1-2 ч при комнатной температуре (alexafluor488-антикроличьи/alexafluor555-антимышиные)
промывали 4X в 50 мкл ФСБ (~5 мин каждый) оставляли планшеты в ФСБ для получения изображений отмывали дно планшетов с помощью 70% БЮН
Получение изображений
Изображения с планшетов получали на микроскопе с высоким разрешением с фильтрами 405 нМ, 488 нМ и 555 нМ
Анализ данных
Количество ядер и интенсивность в клетке каждого маркера измеряли с использованием красителя Хехст в качестве маркера ядра с использованием автоматизированного протокола анализа изображения с использованием программы Matlab (Math Works)
5 день
Анализ жизнеспособности
Оттаивали аликвоту замороженной смеси Cell titer glo (Promega G7572) при комнатной температура
К 5 мл смеси Cell titer glo (10X) добавляли 45 мл раствора NaCl/ФСБ.
Белые планшеты доставали из инкубатора, оставляли при комнатной температуре на 30 мин.
Добавляли 25 мкл разбавленной смеси Cell titer glo в каждую лунку.
Встряхивали планшет в течение >1 мин.
Инкубировали планшет в течение >5 мин для стабилизации люминесценции.
Люминесцентный сигнал стабилен до 3 ч.
Люминесценцию считывали с помощью планшетного ридера.
Краткое заявление
Изобретения, примеры, биологические анализы и результаты, описанные и заявленные в настоящей заявке, могут иметь признаки и варианты реализации изобретения включающие, но не ограничивающиеся указанными, перечисленные или описанные или цитированные в настоящей заявке.
Все патенты, публикации, научные статьи, интернет-сайты и другие документы и материалы, цитированные или упомянутые в настоящей заявке, показывают уровень в области техники, к которой относится изобретение, и каждый такой цитированный документ и материал, таким образом, включен в настоящую заявку посредством ссылки в такой же степени, как если бы он был включен дословно и был полностью изложен в настоящей заявке. Автор вправе физически включать в настоящую заявку любой и все материалы и информацию из любого такого патента, публикации, научной статьи, интернет-сайта, информации, доступной в электронном виде, учебного пособия или другого цитированного материала или документа.
Изложенное описание настоящей патентной заявки включает все притязания. Все притязания, включая все исходные притязания, полностью включены в настоящую заявку посредством ссылки как часть изложенного описания заявки, и изобретатели вправе физически включать в изложенное описание или любую часть заявки любое и все из таких притязаний. Таким образом, например, ни при каких условиях нельзя предполагать, что патент по утверждению не обеспечивает изложенного описания для притязания на основе заявления, что точная формулировка притязания не изложена в тех же выражениях в части изложенного описания патента.
Все признаки, описанные в настоящей заявке, можно объединять в любом порядке и в любой комбинации с формулой I.
Несмотря на то, что изобретение было описано с помощью его подробного описания, изложенное выше описание приведено в качестве иллюстрации и не ограничивает объем изобретения, который определяется прилагаемой формулой изобретения. Таким образом, из указанного выше очевидно, что несмотря на то, что в целях иллюстрации в настоящей заявке были описаны конкретные неограничивающие варианты реализации изобретения, возможны различные модификации в пределах сущности и объ- 87 030687
ема изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации находятся в пределах объема следующей формулы изобретения, и настоящее изобретение ограничивается исключительно прилагаемой формулой изобретения.
Конкретные способы и композиции, описанные в настоящей заявке, приведены в качестве примера предпочтительных неограничивающих вариантов реализации изобретения и представляют собой примеры и не ограничивают объем настоящего изобретения. Специалисты в данной области техники могут обнаруживать другие объекты, аспекты и варианты реализации изобретения при рассмотрении настоящей заявки, которые включены в сущность настоящего изобретения, как определено объемом формулы изобретения. Специалисту в данной области техники очевидно, что возможны различные замены и модификации изобретения, описанного в настоящей заявке, в пределах объема и сущности настоящего изобретения. Изобретение, иллюстративно описанное в настоящей заявке, подходящим образом можно осуществлять на практике в отсутствие любого элемента или элементов или ограничения или ограничений, которые специально не описаны в настоящей заявке как существенные. Таким образом, например, в каждом примере в настоящей заявке, в неограничивающих вариантах реализации изобретения или примерах согласно настоящему изобретению термины "включающий", "включая", "содержащей" и т.д. следует понимать в широком неограничивающем смысле. Способы и процессы, иллюстративно описанные в настоящей заявке, подходящим образом можно осуществлять на практике с различным порядком этапов, которые не обязательно ограничиваются порядками этапов, указанными в настоящей заявке или в формуле изобретения.
Употребляемые термины и выражения используются как описательные и не ограничивают и не исключают любой эквивалент признаков, показанных и описанных в настоящей заявке, или их частей. Однако следует понимать, что возможны различные модификации в пределах заявленного объема изобретения. Таким образом, необходимо понимать, что несмотря на то, что настоящее изобретение было конкретно описано с помощью различных неограничивающих вариантов реализации изобретения и/или предпочтительных неограничивающих вариантов реализации изобретения и необязательно признаков, предполагается, что любая и все модификации и варианты идей, описанных в настоящей заявке, осуществимые специалистами в данной области техники, находятся в пределах объема настоящего изобретения, как определено прилагаемой формулой изобретения.
Изобретение было описано в широком смысле и в родовом отношении в настоящей заявке. Каждый из более узких видов и подродовых группировок, находящихся в пределах родового описания, также образует часть изобретения, что включает родовое описание изобретения с условием или отрицательным ограничением, исключающим любой предмет из рода, независимо от того, описан ли конкретно исключенный материал в настоящей заявке.
Также необходимо понимать, что при использовании в настоящей заявке и в прилагаемой формуле изобретения употребление существительного в единственном числе включает множественное число указанного существительного, если иное явно не следует из контекста, например, термин "X и/или Y" означает "X" или "Y" или как "X", так и "Y", и употребление существительного во множественном числе означает как множественное, так и единственное число указанного существительного. Кроме того, если признаки или аспекты изобретения описаны в рамках формулы Маркуша, то предполагается, как очевидно специалистам в данной области техники, что изобретение включает и, таким образом, также описано, в рамках любого отдельного члена и любой подгруппы членов формулы Маркуша, и авторы изобретения вправе изменять заявку или формулу изобретения со ссылкой конкретно на любой отдельный член или любую подгруппу членов формулы Маркуша.

Claims (16)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Конденсированное пиримидиновое соединение формулы I
    Z
    Формула I
    где
    A представляет собой CH2, NR1, O или S;
    m представляет собой целое число, равное 1-3;
    n равен 0 или представляет собой целое число, равное 1-2;
    кольцо, содержащее A, является пяти- или шестичленным так, что сумма m и n равна 1 или 2;
    - 88 030687
    Y выбран из группы, состоящей из Rc, ORc, CN, CO2H, CON(Rc)2, CH2N(Rc)2, SO2N(Rc)2 и SO2Rc, где каждый Rc независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода;
    Z выбран из группы, состоящей из галогена, незамещенного алкила, содержащего от 1 до 6 атомов углерода, замещенного алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и замещенного алкокси, содержащего от 1 до 4 атомов углерода; где
    указанная замещенная алкильная группа содержит в качестве заместителя ORa, OC(O)Ra, C(O)ORa, OC(O)N(Ra)2, C(O)N(Ra)2, N(Ra)C(O)ORa, N(Ra)C(O)Ra, N(Ra)C(O)N(Ra)2, N(Ra)S(O)tRa, S(O)tORa, S(O)tN(Ra)2, N(Ra)2, где каждый Ra независимо представляет собой водород, алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода; и
    замещенная алкоксигруппа содержит в качестве заместителя ORb, Rb, OC(O)Rb, N(Rb)2, C(O)ORb, OC(O)N(Rb)2, C(O)N(Rb)2, N(Rb)C(O)ORb, где каждый Rb независимо представляет собой водород, алкил, содержащий от 1 до 4 атомов углерода;
    R1 выбран из группы, состоящей из водорода, незамещенного алкила, содержащего от 1 до 6 атомов углерода, замещенного алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и -C(O)Rd; где
    замещенный алкил содержит в качестве заместителя ORd, OC(O)Rd, C(O)ORd; где каждый Rd независимо выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода;
    каждый t независимо выбран из целого числа, равного 1 или 2; и
    Ar представляет собой фенил или фторфенил, или его фармацевтически приемлемая соль.
  2. 2. Конденсированное пиримидиновое соединение по п.1, отличающееся тем, что Z выбран из группы, состоящей из метила, этила, пропила, метоксиметила, метоксиэтила, метоксиметокси и метоксиэтокси.
  3. 3. Конденсированное пиримидиновое соединение по п.1, отличающееся тем, что Y выбран из группы, состоящей из алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, ORc, CN, СО2Н, CON(Rc)2, CH2N(Rc)2, SO2N(Rc)2 и SO2Rc, где каждый Rc независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила, содержащего от 1 до 4 атомов углерода.
  4. 4. Конденсированное пиримидиновое соединение по п.1 или 2, отличающееся тем, что Y выбран из
    группы, состоящей из циано, метила, этила, пропила, бутила, аминометила, метиламинометила, диметиламинометила, метокси, этокси, пропокси, карбоновой кислоты, карбоксамида, сульфонамида, N-C14алкилкарбоксамида, У^ди^^алкилкарбоксамида, N-Cl-4алкилсульфонамида,
    4алкилсульфонамида.
  5. 5. Конденсированное пиримидиновое соединение по п.1, отличающееся тем, что Ar представляет собой незамещенный фенил.
  6. 6. Конденсированное пиримидиновое соединение по п.1, отличающееся тем, что индольная группа в положении 2 указанного конденсированного пиримидина представляет собой 2-Cl-6алкилиндолил, 2галоиндолил, 2-(гидрокси-Cl-4алкил)индолил, 2-(амино-Cl-4алкил)индолил, 2-(Cl-4алкиламино-Cl-4алкил)индолил, 2-(ди-Cl-4алкиламино-Cl-4алкил)индолил, 2-(ациламидо-Cl-4алкил)индолил, 2-(^^^^^ карбониламино-Cl-4алкил)индолил, 2-(сульфонамидо-Cl-4алкил)индолил, 2-(β-Cl-4алкилсульфонил-Cl4алкенил)индолил, 2-(аминокарбониламино-Cl-4алкил)индолил.
  7. 7. Конденсированное пиримидиновое соединение, имеющее следующее название по IUPAC, или его соль:
    N-бензил-8-метокси-2-(2-метокси-1H-1,3-бензодиазол-1-ил)хиназолин-4-амин;
  8. 8-(аминометил)-N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
    1- [4-(бензиламино)тиено[2,3Д]пиримидин-2-ил]-Ш-1,3-бензодиазол-2-амин;
    N-бензил-5-(2-метокси-1H-1,3-бензодиазол-1-ил)-[1,3]тиазоло[5,4-d]пиримидин-7-амин;
    2- (2-амино-Ш- 1,3-бензодиазол-1-ил)-И-бензил-9Н-пурин-6-амин;
    1- [4-(бензиламино)-5H,6H,7H-циклопента[d]пиримидин-2-ил]-1H-1,3-бензодиазол-2-амин;
    N-бензил-8-метокси-2-(2-метил-1H-индол-3-ил)хиназолин-4-амин;
    N-бензил-8-метокси-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)хиназолин-4-амин;
    N-бензил-2-(2-метокси-1H-1,3-бензодиазол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,6H,7H, 8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-4-амин;
    N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо[3,4-d]пиримидин-4-амин;
    4-(бензиламино)-2-(2-метокси-1H-1,3-бензодиазол-1-ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо[3,4-d]пиримидин-8он;
    N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,6H,7H-пирроло[3,4-d]пиримидин-4-амин;
    N-бензил-8-метокси-2-(2-метокси-1H-индол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
    2- [2-(аминометил)-1H-индол-1-ил]-N-бензил-8-метоксихиназолин-4-амин;
    N-бензил-8-метокси-2-(2-метил-1 -бензофуран-3 -ил)хиназолин-4-амин;
    4-(бензиламино)-2-(2-метил-Ш-индол-1-ил)хиназолин-8-карбоксамид;
    N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,7H-фуро[3,4-d]пиримидин-4-амин;
    4-(бензиламино)-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)хиназолин-8-карбониΊрил;
    - 89 030687
    1- [4-(бензиламино)-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо[3,4-d]пиримидин-7-ил]этан-1он;
    ^бензил-2-(2-метил-Ш-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    2- [2-(1-аминоэтил)-Ш-индол-1-ил]-Н-бензил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин; 2-[2-(аминометил)-Ш-индол-1-ил]-Н-бензил-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин; ^бензил-2-(2-метокси-Ш-1,3-бензодиазол-1-ил)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин; ^({1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метил)ацетамид; ^бензил^-С-метокси-Ш-индолД-ил^ДДД-тетрагидрохиназолинЧ-амин; {1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-теΊрагидрохиназолин-2-ил]-1H-индол-2-ил}метанол; ^бензил-2-{2-[(диметиламино)метил] -Ш-индол-1 -ил} -5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин; ^({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метил)ацетамид; ({Ь^Дбензиламино^ДДЗ-тетрагидрохиназолинД-илГШ-индол^-илЩетилЩочевина; метил-Н-({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метил)карбамат; ^({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-Ш-индол-2ил}метил)метансульфонамид;
    (2E)-3-{1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-1H-индол-2-ил}проп-2-ененитрил;
    (22)-3-{1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}-2-цианопроп-2-енамид;
    N-бензил-2-{2-[(E)-2-метансульфонилэтенил]-1H-индол-1-ил}-8-метоксихиназолин-4-амин;
    2-[2-(1-аминоэтил)-1H-индол-1-ил]-N-бензил-5H,7H,8H-пирано[4,3-d]пиримидин-4-амин;
    2-[2-(1-аминоэтил)-Ш-индол-1-ил]-Н-бензил-8-метоксихиназолин-4-амин;
    2-[2-(1-аминоэтил)-Ш-индол-1-ил]-Н-бензил-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин;
    (22)-3-{1-[4-(бензиламино)-8-метоксихиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}проп-2-ененитрил;
    N-бензил-2-(2-метокси-1H-индол-1-ил)-6-метил-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-4-амин;
    ^бензил-2-(4-фтор-2-метил-Ш-индол-1 -ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо [4,3Д]пиримидин-4-амин;
    1-[4-(бензиламино)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбонитрил;
    N-бензил-2-(4-метокси-2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-4-амин;
    ^бензил-2-(2-метокси-Ш-индол-1-ил)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин;
    {1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метанол;
    ^бензил^-рДморфолинЧ-илметилГШ-индолЛ-ил^ДДЗ-тетрагидрохиназолинЧ-амин;
    ^бензил-8-(2-метоксиэтокси)-2-(2-метил-Ш-индол-1-ил)хиназолин-4-амин;
    ^бензил-2-{2-[(диметиламино)метил] -Ш-индол-1 -ил} -8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин; ^({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метил)ацетамид; ({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метил)мочевина; метил-Ы-({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метил)карбамат;
    ^({1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-Ш-индол-2-ил}метил)метансульфонамид;
    ^бензил-8-(2-метоксиэтокси)-2-(2-метил-Ш- 1,3-бензодиазол-1 -ил)хиназолин-4-амин;
    {1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-Ш- 1,3-бензодиазол-2-ил}метанол;
    ^бензил-2-(2-метил-Ш-1,3-бензодиазол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    {1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-Ш-1,3-бензодиазол-2-ил}метанол;
    ^бензил-2-[2-(морфолин-4-ил)-Ш-1,3-бензодиазол-1-ил]-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    ^бензил-2-(2-метокси-Ш-индол-1-ил)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3Д]пиримидин-4-амин;
    ^бензил-2-(2-метил-Ш-индол-1 -ил)-5H,7H,8H-пирано [4,3Д]пиримидин-4-амин;
    ^бензил-2-{2-метилимидазо[1,2-н]пиридин-3-ил}-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    ^бензил-2-(2-метил-Ш-индол-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    N-бензил-2-(4-хлор-2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-4-амин;
    N-бензил-6-этил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-4-амин;
    N-бензил-2-(2-метил-1H-индол-1-ил)-6-(пропан-2-ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-4амин;
    ^бензил-2-(2-метил-Ш-индол-1 -ил)-6-пропил-5H,6H,7H,8H-пиридо [4,3Д]пиримидин-4-амин;
    1-[4-(бензиламино)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-Ш-индол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метокси-Ш-индол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-2-метил-Ш-индол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил]-2-метокси-Ш-индол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метокси-1H-индол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-6-метил-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбонитрил;
    ^бензил-2-(2-этокси-Ш-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-Ш-1,3-бензодиазол-4-карбонитрил;
    - 90 030687
    1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-1,3-бензодиазол-4карбонитрил;
    ^бензил-2-(2-хлор-1Н-индол-1-ил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-4-амин;
    ^бензил-2-(2-хлор-1Н-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    1-[4-(бензиламино)-6-этил-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбонитрил;
    ^({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-2-ил}метил)проп-2-инамид;
    1-[4-(бензиламино)-6-(2-метоксиацетил)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Ниндол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-1,3-бензодиазол-4карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1- [4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    2- (аминометил)-1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-1Н-индол-4-карбоксамид;
    2-(аминометил)-1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-1,3-бензодиазол-4-карбонитрил;
    2-(аминометил)-1-[4-(бензиламино)-8-(2-метоксиэтокси)хиназолин-2-ил] -1Н- 1,3-бензодиазол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-1,3-бензодиазол-2-ол;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,6Н,7Н,8Н-пиридо[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-1,3-бензодиазол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано [4,3^]пиримидин-2-ил] -2-метокси-1Н- 1,3-бензодиазол-4карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано [4,3^]пиримидин-2-ил] -2-[(диметиламино)метил] -1Н-индол4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-(гидроксиметил)-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-Ы,2-диметил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-Ы,^2-триметил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-Ы-(пропан-2-ил)-1Н-индол-4карбоксамид;
    1- [4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-Ы-(бутан-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
    2- (аминометил)-1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-4-карбоксамид; 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-Ы-[2-(диметиламино)этил]-2-метил1Н-индол-4-карбоксамид;
    ^бензил-2-{2-метил-4-[(морфолин-4-ил)карбонил]-1Н-индол-1-ил}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-4-амин;
    ^бензил-2-{2-метил-4-[(пиперазин-1-ил)карбонил]-1Н-индол-1-ил}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-4-амин;
    ^(2-аминоэтил)-1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано [4,3^]пиримидин-2-ил] -2-метокси-1Н- 1,3-бензодиазол-4-карбонитрил;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоновая кислота;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоновая кислота;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано [4,3^]пиримидин-2-ил] -2-метил-1Н-индол-4-сульфонамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-сульфонамид;
    ^бензил-2-(4-метансульфонил-2-метил-1Н-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-этил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-этил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил)-2-метокси-1Н-бензо[б]ими- 91 030687
    дазол-4-карбоксамид;
    2-амино-1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1H-1,3-бензодиазол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метокси-1Н-1,3-бензодиазол-4-карбоновая
    кислота;
    1-[4-(бензиламино)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоновая
    кислота;
    ^бензил-2-(4-метансульфонил-2-метил-1Н-индол-1 -ил)-5H,7H,8H-пирано [4,3-б]пиримидин-4амин;
    1-[4-(бензиламино)-5H,7H,8H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоксимидамид;
    N-бензил-2-[2-метил-4-(1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)-1H-индол-1-ил]-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-d]пиримидин-4-амин;
    N-бензил-2-[2-метил-4-(1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)-1H-индол-1-ил]-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
    1-(4-{[(4-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
    1- (4-{[(2-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
    2- [4-(аминометил)-2-метил-1H-индол-1-ил]-N-бензил-5,6,7,8-теΊрагидрохиназолин-4-амин; 2-[4-(аминометил)-2-метил-1H-индол-1-ил]-N-бензил-5H,7H,8H-пирано[4,3-d]пиримидин-4-амин; 1-[4-(бензиламино)-5H,7H,8H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-[(карбамоиламино)метил]-1H-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-[(карбамоиламино)метил]-1Н-индол-4карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-(пропан-2-ил)-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-2-(пропан-2-ил)-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-циклопропил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил]-2-циклопропил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил)-^2-диметил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-^^диметил-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-^этил-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-этокси-1Н-индол-4-карбоксамид;
    1-(4-{[(3-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-б]пиримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол-4карбоксамид;
    1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-(2-метоксиэтокси)-1Н-индол-4-карбонитрил.
    8. Конденсированное пиримидиновое соединение по пп.1, 2 или 3, отличающееся тем, что A представляет собой ОН2.
  9. 9. Конденсированное пиримидиновое соединение по пп.1, 2 или 3, отличающееся тем, что A представляет собой NR1.
  10. 10. Конденсированное пиримидиновое соединение по пп.1, 2 или 3, отличающееся тем, что A представляет собой O.
  11. 11. Конденсированное пиримидиновое соединение, имеющее любое из следующих названий по IUPAC:
    a) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбонитрил;
    b) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол-4-карбоксамид;
    c) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-этокси-1Н-индол-4-карбоксамид;
    d) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-(2-метоксиэтокси)-1Н-индол-4карбонитрил;
    e) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-циклопропил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    f) ^({1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-1Н-индол-2-ил}метил)проп-2-инамид;
    g) ^бензил-2-[2-метил-4-(1Н-1,2,3,4-тетразол-5-ил)-1Н-индол-1-ил]-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
    h) 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил]-2-метокси-1Н-индол-4-карбоксамид;
    i) 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3Щ]пиримидин-2-ил]-2-метил-1Н-индол-4-карбоксамид;
    j) 1-(4-{[(3-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3^]пиримидин-2-ил)-2-метил-1Н-индол4-карбоксамид;
    - 92 030687
    k) 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3Д]пиримидин-2-ил]-2-метил-Ш-индол-4-карбоновая кислота;
    l) ^бензил-2-(2-метил-Ш-индол-1 -ил)-5H,6H,7H,8H-пиридо [4,3Д]пиримидин-4-амин;
    m) 1-[4-(бензиламино)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоксамид;
    n) 1-[4-(бензиламино)-5H,6H,7H,8H-пиридо[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота;
    o) 2-[4-(аминометил)-2-метил-1H-индол-1-ил]-N-бензил-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    p) 1-[4-(бензиламино)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-2-ил]-2-метил-Ш-индол-4-сульфонамид;
    q) ^бензил-2-(4-метансульфонил-2-метил-Ш-индол-1-ил)-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4-амин;
    r) 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил)-N,2-диметил-1H-индол-4карбоксамид;
    s) 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3Д]пиримидин-2-ил]-У2-диметил-Ш-индол-4карбоксамид.
  12. 12. Конденсированное пиримидиновое соединение, имеющее любое из следующих названий по IUPAC:
    a) Ь^Дбензиламино^ДДД-тетрагидрохиназолинД-ил^-метил-Ш-индолЧ-карбоксамид;
    b) Ь^Дбензиламино^ДДЗ-тетрагидрохиназолинД-ил^-метокси-Ш-индолМ-карбоксамид;
    c) Ь^Дбензиламино^ДДД-тетрагидрохиназолинД-ил^-этокси-Ш-индолМ-карбоксамид;
    d) Ь^Дбензиламино^ДДД-тетрагидрохиназолин^-ил^-С-метоксиэтоксиЕШ-индолМ-карбонитрил;
    e) Ь^Дбензиламино^ДДД-тетрагидрохиназолинД-ил^-циклопропил-Ш-индолМ-карбоксамид;
    f) N-бензил-2-[2-метил-4-(1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)-1H-индол-1-ил]-5,6,7,8-тетрагидрохиназолин-4амин;
    g) 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3Д]пиримидин-2-ил]-2-метокси-Ш-индол-4карбоксамид;
    h) 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано [4,3Д]пиримидин-2-ил] -2-метил-Ш-индол-4-карбоксамид;
    i) 1-(4-{[(3-фторфенил)метил]амино}-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3Д]пиримидин-2-ил)-2-метил-Ш-индол4-карбоксамид;
    j) 1-[4-(бензиламино)-5Н,7Н,8Н-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоновая кислота;
    k) 1-(4-(бензиламино)-7,8-дигидро-5H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил)-N,2-диметил-1H-индол-4карбоксамид.
  13. 13. Конденсированное пиримидиновое соединение по п.1, имеющее название IUPAC
    1-[4-(бензиламино)-5H,7H,8H-пирано[4,3-d]пиримидин-2-ил]-2-метил-1H-индол-4-карбоксамид.
  14. 14. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и соединение по любому из пп.1-13.
  15. 15. Лекарственное средство для уменьшения активности валозинсодержащего белка или уменьшения деградации субстрата протеасомной системы при лечении рака, представляющее собой соединение по любому из пп.1-13.
  16. 16. Лекарственное средство для применения в качестве ингибитора p97 при лечении рака, представляющее собой соединение по любому из пп.1-13.
EA201590255A 2012-07-20 2013-07-19 КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ПИРИМИДИНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КОМПЛЕКСА p97 EA030687B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261674144P 2012-07-20 2012-07-20
US201261737666P 2012-12-14 2012-12-14
PCT/US2013/051358 WO2014015291A1 (en) 2012-07-20 2013-07-19 FUSED PYRIMIDINES AS INHIBITORS OF p97 COMPLEX

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201590255A1 EA201590255A1 (ru) 2015-07-30
EA030687B1 true EA030687B1 (ru) 2018-09-28

Family

ID=48948500

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201590255A EA030687B1 (ru) 2012-07-20 2013-07-19 КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ПИРИМИДИНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КОМПЛЕКСА p97

Country Status (19)

Country Link
US (3) US9062026B2 (ru)
EP (2) EP3208270A1 (ru)
JP (2) JP6109937B2 (ru)
KR (1) KR101862912B1 (ru)
CN (2) CN107459508A (ru)
AU (1) AU2013292309B2 (ru)
BR (1) BR112015001213A2 (ru)
CA (1) CA2879789C (ru)
CL (1) CL2015000132A1 (ru)
EA (1) EA030687B1 (ru)
ES (1) ES2667726T3 (ru)
HK (1) HK1210140A1 (ru)
HU (1) HUE037190T2 (ru)
IL (1) IL236812B (ru)
MX (1) MX2015000908A (ru)
NZ (1) NZ705040A (ru)
TW (1) TWI614246B (ru)
WO (1) WO2014015291A1 (ru)
ZA (1) ZA201500953B (ru)

Families Citing this family (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107459508A (zh) 2012-07-20 2017-12-12 克里弗生物科学公司 作为p97复合物的抑制剂的稠合嘧啶
WO2014127214A1 (en) 2013-02-15 2014-08-21 Kala Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and uses thereof
US9353123B2 (en) 2013-02-20 2016-05-31 Kala Pharmaceuticals, Inc. Therapeutic compounds and uses thereof
US9688688B2 (en) 2013-02-20 2017-06-27 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of 4-((4-((4-fluoro-2-methyl-1H-indol-5-yl)oxy)-6-methoxyquinazolin-7-yl)oxy)-1-(2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonan-7-yl)butan-1-one and uses thereof
JPWO2015005491A1 (ja) 2013-07-12 2017-03-02 国立大学法人京都大学 疾病の発症又は進行の一因となる異常スプライシングを抑制できる物質のスクリーニング方法
PT3042658T (pt) 2013-09-04 2019-05-13 Univ Kyoto Composição medicinal que melhora a resistência à leptina
US9890173B2 (en) 2013-11-01 2018-02-13 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
WO2015066482A1 (en) 2013-11-01 2015-05-07 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
EP3080101A1 (en) 2013-12-10 2016-10-19 Cleave Biosciences, Inc. Monocyclic pyrimidine/pyridine compounds as inhibitors of p97 complex
ES2819867T3 (es) 2014-01-20 2021-04-19 Cleave Biosciences Inc Pirimidinas condensadas como inhibidores del complejo p97
US20170159101A1 (en) * 2014-07-09 2017-06-08 Cleave Biosciences, Inc. Drug-resistant p97 atpase mutations
TW201617368A (zh) * 2014-09-05 2016-05-16 史坦森特瑞斯公司 新穎抗ｍｆｉ２抗體及使用方法
WO2016154110A1 (en) * 2015-03-20 2016-09-29 Cleave Biosciences, Inc. Companion diagnostic for p97 inhibitor therapy and methods of use thereof
WO2016200840A1 (en) * 2015-06-08 2016-12-15 Cleave Biosciences, Inc. Mono and bicyclic ring boronic acid, ester and salt compounds as inhibitors of p97 complex
US11312690B2 (en) * 2015-07-24 2022-04-26 University Of Lousville Research Foundation, Inc. Compounds, compositions, methods for treating diseases, and methods for preparing compounds
KR20180061318A (ko) * 2015-10-02 2018-06-07 센티넬 온콜로지 리미티드 P70s6 키나제 억제제로서의 2-아미노퀴나졸린 유도체
WO2017070320A1 (en) 2015-10-21 2017-04-27 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Phenyl indole allosteric inhibitors of p97 atpase
IT201600070952A1 (it) * 2016-07-07 2018-01-07 Univ Degli Studi Di Ferrara NUOVI TIAZOLO[5,4-d]PIRIMIDIN DERIVATI QUALI AGONISTI INVERSI DEI RECETTORI A2A DELL’ADENOSINA
EP3509423A4 (en) 2016-09-08 2020-05-13 Kala Pharmaceuticals, Inc. CRYSTALLINE FORMS OF THERAPEUTIC COMPOUNDS AND USES THEREOF
KR20190051010A (ko) 2016-09-08 2019-05-14 칼라 파마슈티컬스, 인크. 치료 화합물의 결정형 및 그의 용도
US10253036B2 (en) 2016-09-08 2019-04-09 Kala Pharmaceuticals, Inc. Crystalline forms of therapeutic compounds and uses thereof
IT201600130706A1 (it) 2016-12-23 2018-06-23 Fondazione St Italiano Tecnologia 4 amino-2-pirido-biciclo pirimidine e lo uso come medicamenti
WO2019099402A1 (en) * 2017-11-14 2019-05-23 Rutgers, The State University Of New Jersey Therapeutic compounds and methods to treat infection
DK3710457T3 (da) * 2017-11-16 2022-10-24 Principia Biopharma Inc Immunproteasomhæmmere
US20200360386A1 (en) * 2017-12-30 2020-11-19 Unity Biotechnology, Inc. Inhibitors of HSP90, PI3-Kinase, Proteasome, HDAC, and P97 Pathways for Selective Removal of Senescent Cells in the Treatment of Age Related Conditions
TW201942116A (zh) * 2018-02-09 2019-11-01 美商輝瑞股份有限公司 作為抗癌劑之四氫喹唑啉衍生物
CA3130083A1 (en) * 2019-03-01 2020-09-10 Revolution Medicines, Inc. Bicyclic heterocyclyl compounds and uses thereof
CN110339828B (zh) * 2019-07-19 2020-08-11 浙江大学 以苯并噻唑基硫代羧酸为功能配基的层析介质及其制备方法
JP2023500328A (ja) 2019-11-08 2023-01-05 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド 二環式ヘテロアリール化合物及びその使用
JP2022170472A (ja) * 2021-04-28 2022-11-10 国立大学法人京都大学 皮膚組織の異常を改善するための組成物
GB202111193D0 (en) 2021-08-03 2021-09-15 Phoremost Ltd Pharmaceutical compounds
CN114105887B (zh) * 2021-09-16 2023-12-01 沈阳药科大学 一种氨基嘧啶衍生物及其制备方法和用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011140527A2 (en) * 2010-05-07 2011-11-10 California Institute Of Technology And The University Of Kansas Methods and compositions for inhibition of the transitional endoplasmic reticulum atpase

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998010779A1 (en) 1996-09-13 1998-03-19 New York University Method for treating parasitic diseases with proteasome inhibitors
CA2524221A1 (en) * 2003-04-30 2004-11-18 The Institutes For Pharmaceutical Discovery, Llc Substituted heteroaryls as inhibitors of protein tyrosine phosphatases
AU2006251941B2 (en) 2005-05-27 2012-02-09 Onyx Therapeutics, Inc. Novel substrate for Rpn11 enzymatic activity
WO2007041282A2 (en) * 2005-09-29 2007-04-12 The Johns Hopkins University Methods and compositions for treatment of cystic fibrosis
CN101679456B (zh) 2007-06-12 2012-09-05 霍夫曼-拉罗奇有限公司 噻唑并嘧啶类和它们作为磷脂酰肌醇3-激酶的抑制剂的应用
US8637560B2 (en) * 2007-07-18 2014-01-28 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Imidazolidinone compounds, methods to inhibit deubiquitination and methods of treatment
SG176959A1 (en) 2009-06-24 2012-01-30 Genentech Inc Oxo-heterocycle fused pyrimidine compounds, compositions and methods of use
WO2011018417A1 (en) * 2009-08-10 2011-02-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Inhibitors of jnk
JP2013166700A (ja) 2010-06-02 2013-08-29 Dainippon Sumitomo Pharma Co Ltd 新規４，５−縮環ピリミジン誘導体
CN107459508A (zh) 2012-07-20 2017-12-12 克里弗生物科学公司 作为p97复合物的抑制剂的稠合嘧啶

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011140527A2 (en) * 2010-05-07 2011-11-10 California Institute Of Technology And The University Of Kansas Methods and compositions for inhibition of the transitional endoplasmic reticulum atpase

Also Published As

Publication number Publication date
CN107459508A (zh) 2017-12-12
BR112015001213A2 (pt) 2018-05-22
MX2015000908A (es) 2015-09-21
EP3208270A1 (en) 2017-08-23
KR20150032588A (ko) 2015-03-26
EP2875018B1 (en) 2018-02-14
ES2667726T3 (es) 2018-05-14
IL236812B (en) 2019-03-31
US9062026B2 (en) 2015-06-23
US20150239907A1 (en) 2015-08-27
NZ705040A (en) 2017-07-28
HUE037190T2 (hu) 2018-08-28
CN104768946B (zh) 2017-05-03
AU2013292309A1 (en) 2015-03-05
US9475824B2 (en) 2016-10-25
US10010554B2 (en) 2018-07-03
EA201590255A1 (ru) 2015-07-30
JP2015526420A (ja) 2015-09-10
CL2015000132A1 (es) 2015-10-02
JP2017125053A (ja) 2017-07-20
WO2014015291A1 (en) 2014-01-23
CA2879789A1 (en) 2014-01-23
US20170258795A1 (en) 2017-09-14
HK1210140A1 (en) 2016-04-15
TW201414728A (zh) 2014-04-16
AU2013292309B2 (en) 2017-05-25
JP6109937B2 (ja) 2017-04-05
US20140024661A1 (en) 2014-01-23
KR101862912B1 (ko) 2018-05-30
EP2875018A1 (en) 2015-05-27
TWI614246B (zh) 2018-02-11
ZA201500953B (en) 2016-01-27
CN104768946A (zh) 2015-07-08
CA2879789C (en) 2019-08-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA030687B1 (ru) КОНДЕНСИРОВАННЫЕ ПИРИМИДИНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КОМПЛЕКСА p97
RU2708236C2 (ru) СОЛЬ ПРИСОЕДИНЕНИЯ КИСЛОТЫ СОЕДИНЕНИЯ, ИНГИБИРУЮЩЕГО Trk
JP6387111B2 (ja) ｐ９７複合体の阻害剤としての縮合ピリミジン
CN106467541B (zh) 取代喹诺酮类衍生物或其药学上可接受的盐或立体异构体及其药用组合物和应用
Frolova et al. Exploring natural product chemistry and biology with multicomponent reactions. 5. Discovery of a novel tubulin-targeting scaffold derived from the rigidin family of marine alkaloids
CN104583195A (zh) 作为酪氨酸激酶抑制剂的含氮杂芳环衍生物
CN105377845B (zh) 取代的吡唑并嘧啶基氨基‑吲唑类
CN104837841A (zh) 用于治疗过度增殖性疾病的取代的吲唑-吡咯并嘧啶
Gour et al. Facile synthesis of 1, 2, 3-triazole-fused indolo-and pyrrolo [1, 4] diazepines, DNA-binding and evaluation of their anticancer activity
CN104781260A (zh) 用于治疗过度增殖性障碍的取代的吲唑-吡咯并嘧啶
WO2022253283A1 (zh) 一类蛋白激酶降解剂及其用途
TW201718552A (zh) 作為ｐ９７複合體抑制劑之單及雙環酸、酯及鹽化合物
Lin Synthesis Of Substituted Pyrrolo [2, 3-D] Pyrimidines As Microtubule-Binding Agents and HSP90 Inhibitors
Zaher Synthesis of some new thiophene and thiopyrimidine compounds of expected anticancer activity and studying the augmenting effect of gamma radiation

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU