EA028780B1 - Применение эстетрола в качестве экстренного контрацептива - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к новому применению известного медицинского соединения эстетрола (1,3,5(10)-эстратриен-3,15α,16α,17β-тетрола), а именно к способу экстренной контрацепции. Способ экстренной контрацепции в соответствии с изобретением включает пероральное введение эстетрола в однократной дозе в пределах 120 ч от полового сношения.

Description

Изобретение относится к новому применению известного медицинского соединения эстетрола (1,3,5(10)-эстратриен-3,15а,16а,17в-тетрола), а именно, к способу экстренной контрацепции.

Предшествующий уровень техники

Несмотря на наличие высокоэффективных способов контрацепции, значительное число беременностей являются незапланированными, например, в результате отсутствия доступных контрацептивов или повреждения контрацептива (такого как соскальзывание презерватива).

Экстренная контрацепция (ЭК), с помощью применения лекарственного средства или устройства, является важным средством предотвращения нежелательной беременности после полового сношения. Описано несколько подходов для экстренной контрацепции. Хотя медьсодержащий внутриматочный контрацептив является наиболее эффективным способом ЭК, который можно применять до 5 суток после установленного времени овуляции, его широкое применение ограничено по логистическим и медицинским причинам. В конце 1970-х Уи/рс предложил режим, включающий комбинированное применение эстрогена (0,1 мг этинилэстрадиола) и прогестогена (0,5 мг левоноргестрела) в пределах 72 ч от сношения и повторно спустя 12 ч. Режим Уи/рс связан с высокой частотой тошноты и рвоты из-за высокого содержания эстрогена. С 1990-х признан потенциал синтетического прогестерона левоноргестрела (ЛНГ). Лечение 0,75 мг ЛНГ с повторением спустя 12 ч или единой дозой 1,5 мг в пределах 72 ч от сношения, как было показано, отличается более низкой частотой побочных эффектов и высокой эффективностью, чем режим Уи/рс. Однако если его принимать, когда уровень лютеинизирующего гормона уже начал повышаться (подъем ЛГ), ЛНГ теряет эффективность. Модулятор рецептора прогестерона мифепристон (10 мг) обеспечивает другой вариант ЭК с очень низкими побочными эффектами и более высокой эффективностью, чем у режима Уи/рс. Кроме того, интервал между половым сношением и приемом препарата с мифепристоном можно продлить до 120 ч. Еще одним режимом является применение модулятора рецептора прогестерона улипристала ацетата, который является более эффективным, чем ЛНГ, и который можно применять вплоть до 120 ч после сношения.

В данной области техники остается потребность в альтернативных способах экстренной контрацепции со снижением побочных реакций, эффективных для предотвращения нежелательной беременности после полового сношения, и которые можно применять в виде однократной эффективной дозы, вплоть до 120 ч после полового сношения.

Настоящее изобретение обеспечивает новый экстренный контрацептив, преодолевающий вышеперечисленные проблемы, по меньшей мере, отчасти.

Сущность изобретения

Изобретение обеспечивает новый экстренный контрацептив, содержащий эстетрол, натуральный эстроген, продуцируемый только эмбриональной печенью человека при беременности. По структуре эстетрол характеризуется наличием четырех гидроксильных групп. Ранее эстетрол считали слабым эстрогеном из-за его относительно низкой аффинности к рецепторам эстрогена. Однако в недавних исследованиях у крыс была продемонстрирована высокая абсорбция и биодоступность при пероральном применении, что привело к возобновлению интереса к эстетролу. Недавние исследования поддержали потенциальное применение эстетрола в качестве гормонозаместительной терапии, контрацепции, профилактики остеопороза и лечения рака молочной железы, но не его применение в экстренной контрацепции.

Таким образом, в одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает экстренный контрацептив, содержащий эстетрол (1,3,5(10)-эстратриен-3,15а,16а,17в-тетрол) в эффективном количестве для ингибирования овуляции и/или беременности у самки млекопитающего, и фармацевтически пригодную соль или наполнитель.

В предпочтительном варианте осуществления экстренный контрацептив, описанный здесь, содержит эстетрол в дозе от 0,5 до 7 мг/кг.

В другом варианте осуществления экстренный контрацептив, описанный здесь, далее содержит дополнительный активный ингредиент, пригодный для предотвращения беременности.

Другой аспект настоящего изобретения обеспечивает применение экстренного контрацептива, описанного здесь, для предотвращения овуляции.

Другой аспект настоящего изобретения обеспечивает применение экстренного контрацептива, описанного здесь, для предотвращения беременности.

Другой аспект настоящего изобретения охватывает способ предотвращения овуляции и/или беременности у самки млекопитающего, включающий введение экстренного контрацептива, описанного здесь, в эффективном количестве для ингибирования овуляции и/или беременности.

В предпочтительном варианте осуществления способа, раскрытого здесь, введение экстренного контрацептива, раскрытого здесь, осуществляют пероральным, парентеральным, вагинальным, ректальным, чрескожным или местным способом. Более предпочтительно, указанное введение осуществляют невагинальным путем. Наиболее предпочтительно, указанное введение осуществляют пероральным, парентеральным, ректальным, чрескожным или местным способом.

В другом предпочтительном варианте осуществления способа, раскрытого здесь, введение экстрен- 1 028780 ного контрацептива, раскрытого здесь, проводят с помощью однократной дозы.

В другом предпочтительном варианте осуществления введение экстренного контрацептива, раскрытого здесь, проводят в двойной дозе, например, с интервалом 6, 12, 18 или 24 ч.

В другом предпочтительном варианте осуществления введение экстренного контрацептива, как описано в настоящей заявке, проводят в пределах 120 ч после полового сношения, предпочтительно в пределах 96, 72, 48, 24, 12 ч или меньше.

В другом аспекте настоящего изобретения обеспечена фармацевтическая композиция для применения в способе экстренной контрацепции у самок млекопитающего, где способ включает пероральное, парентеральное, вагинальное, ректальное, чрескожное или местное введение эстетрола (1,3,5(10)эстратриен-3,15а,16а,17в-тетрола) самке, обладающей способностью к деторождению, в эффективном количестве для ингибирования овуляции и/или беременности, и где способ охватывает применение однократной дозы указанного эстрогена у указанного субъекта в пределах 120 ч после полового сношения.

В другом варианте осуществления указанная фармацевтическая композиция содержит дополнительный активный ингредиент.

Другой аспект настоящего изобретения охватывает набор, содержащий экстренный контрацептив, раскрытый в настоящей заявке, или фармацевтическую композицию, раскрытую в настоящей заявке, и инструкции для их применения.

Краткое описание чертежей

Изобретение иллюстрировано следующими фигурами, предназначенными только для иллюстрации, но не для ограничения изобретения вариантами осуществления, описанными в настоящей заявке.

На фиг. 1 показаны средние уровни эстетрола в плазме крови (± стандартная ошибка) здоровых женщин в постменопаузальном периоде после перорального приема однократной дозы 1,10 или 100 мг эстетрола;

на фиг. 2 - процентное изменение средних уровней лютеинизирующего гормона (ЛГ) женщин в постменопаузальном периоде после перорального приема однократной дозы 100 мг эстетрола;

на фиг. 3 - процентное изменение средних уровней фолликулостимулирующего гормона (ФСГ) у женщин в постменопаузальном периода после перорального приема однократной дозы 100 мг эстетрола.

Осуществление изобретения

Терминология, используемая в настоящей заявке, не предназначена для ограничения, поскольку объем настоящего изобретения ограничен только формулой изобретения.

Как применяется в настоящей заявке, форма единственного числа включает ссылки как на единственное, так и на множественное число, если только в контексте ясно не указано противоположное.

Термины содержащий, содержит и содержать, применяемые в настоящей заявке, являются синонимами для включающий, включает или имеющий в составе, имеет в составе, и являются включающими или незамкнутыми, и не исключают дополнительных, не перечисленных членов, элементов, или этапов способа. Если варианты осуществления обозначены как включающие частные характеристики, элементы или этапы, это означает специальное включение вариантов осуществления, состоящих из перечисленных характеристик, элементов или этапов.

Обозначение численных диапазонов конечными точками включает все числа и фракции, находящиеся в пределах соответствующих диапазонов, а также указанные конечные точки.

Термин примерно, как применяется в настоящей заявке, означает измеряемую величину, такую как параметр, количество, продолжительность времени, и тому подобное, и предназначен для охвата отклонений ±10% или меньше, предпочтительно ±5% или меньше, более предпочтительно ±1% или меньше и еще более предпочтительно ±0,1% или меньше от указанного значения, в той мере, в какой такие отклонения пригодны для осуществления раскрытого изобретения. Необходимо понять, что величина, к которой относится характеристика примерно, также специально и предпочтительно раскрывается как таковая.

Все документы, перечисленные в настоящей заявке, включены настоящим посредством ссылки во всей полноте.

Если не указано иное, все термины, используемые в описании изобретения, включая технические и научные термины, имеют значение, общеизвестное для рядового специалиста в области техники, к которой относится изобретение. В качестве дополнительного руководства, определения для терминов, используемых в описании, включены для лучшего понимания учения настоящего изобретения.

Ссылки на протяжении настоящего описания на один вариант осуществления или вариант осуществления означают, что частная характеристика, структура или черта, описанная в сочетании с вариантом осуществления, включена по меньшей мере в одном варианте осуществления настоящего изобретения. Таким образом, наличие фраз в одном варианте осуществления или в варианте осуществления в различных местах описания не обязательно относится к одному и тому же варианту осуществления, но может относиться. Далее, частные характеристики, структуры или черты могут быть объединены любым подходящим образом, как понятно специалисту в данной области техники из настоящей заявки, в одном или нескольких вариантах осуществления. Далее, в то время как некоторые варианты осуществления,

- 2 028780 описанные в настоящей заявке, включают одни, но не другие характеристики, включенные в другие варианты осуществления, комбинации характеристик из различных вариантов находятся в пределах объема настоящего изобретения и образуют другие варианты осуществления, как понятно специалисту в данной области техники. Например, в формуле изобретения любые из заявленных вариантов осуществления могут быть использованы в любой комбинации.

Авторы настоящего изобретения установили, что экстренную контрацепцию можно обеспечить путем применения однократной дозы эстетрола. Они установили, что эстетрол может ингибировать овуляцию у крыс и предотвращать беременность у кроликов. Далее, они показали, что эстетрол оказывает ингибирующее влияние на гонадотропины (лютеинизирующий гормон и фолликулостимулирующий гормон) у женщин в раннем постменопаузальном периоде при пероральном применении однократной дозы эстетрола. Кроме того, было показано, что эстетрол обладает высокой биоабсорбцией при пероральном приеме и существенно более длительным периодом полувыведения.

Соответственно, один аспект настоящего изобретения относится к применению эстетрола для экстренной контрацепции или к способу экстренной контрацепции.

Экстренная контрацепция определяется в настоящей заявке как лечение, предназначенное для предотвращения беременности после полового сношения. В отличие от обычного контрацептива, который применяют ежедневно в низкой дозе во время цикла овуляции, экстренный контрацептив обычно применяют в однократной (или двойной) высокой дозе. Беременность относится в данном контексте к состоянию самки после успешной имплантации оплодотворенной яйцеклетки в оболочке матки.

Эстетрол, 1,3,5(10)-эстратриен-3,15а,16а,17в-тетрол и Е₄ являются синонимами и применяются взаимозаменяемо в настоящей заявке для обозначения натурального эстрогена, продуцируемого эмбриональной печенью только во время беременности. Структурно он характеризуются наличием четырех гидроксильных групп, поэтому его сокращением является Е₄. Предложено применение эстетрола для гормонозаместительной терапии, контрацепции, профилактики остеопороза и лечения рака молочной железы, но никогда не предлагалось применение в качестве экстренного контрацептива. Эстетрол является так называемым тетрагидроксилированным эстрогеном и имеет следующую формулу (II):

Из-за относительно длительного периода полувыведения эстетрола экстренный контрацептив по настоящему изобретению можно применять в виде однократной дозы. Однако также охватывается применение множества доз, например двух доз, например, принятых с интервалом 12 ч.

При использовании у человека можно получить хорошие результаты при пероральном приеме однократной дозы от 30 до 400 мг, такой как от 40 до 250 мг, от 40 до 200 мг, от 40 до 150 мг, от 40 до 100 мг или от 50 до 100 мг эстетрола.

Альтернативно, единственную дозу эстетрола можно определить с учетом массы тела субъекта, у которого его нужно применить. Типичные дозы находятся в следующих диапазонах: от 0,5 до 7,0 мг/кг, от 1,0 до 5,0 мг/кг, от 1,5 до 2,5 мг/кг или примерно 2,0 мг/кг. Таким образом, доза 0,5 мг/кг соответствует дозе 30 мг для субъекта с массой тела 60 кг, в то время как доза 4 мг/кг соответствует дозе 240 мг/кг для субъекта с массой тела 60 кг и т.д.

В предпочтительном варианте экстренный контрацептив по настоящему изобретению можно вводить перорально в качестве экстренного контрацептива. Авторы настоящего изобретения установили, что после перорального приема наблюдается высокий и быстрый подъем уровня эстетрола в плазме. Таким образом, можно обеспечить немедленные эффекты после перорального применения эстетрола. Лекарственные формы для перорального применения хорошо известны специалистам в данной области техники, и могут быть, например, таблетками, таблетками с пленочным покрытием; таблетками, покрытыми оболочкой; капсулами, гелевыми капсулами, пилюлями или порошковыми препаратами. Помимо активного ингредиента эстетрола, лекарственные формы в соответствии с настоящим изобретением дополнительно содержат фармацевтически приемлемый эксципиент, например, такой как лактоза, крахмал, поливинилпирролидон (ПВП), магния стеарат и т.д., но не ограничиваясь ими.

Альтернативно, экстренный контрацептив по настоящему изобретению можно также вводить парентеральным, ректальным, вагинальным, чрескожным или местным путем.

В предпочтительном варианте осуществления экстренный контрацептив по настоящему изобретению вводят невагинальным способом. В другом варианте осуществления экстренный контрацептив по настоящему изобретению можно также вводить парентеральным, ректальным, чрескожным или местным путем.

Также раскрываются лекарственные формы, дополнительно содержащие другой активный ингредиент или эксципиент, обладающий определенной активностью.

Другой аспект настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей от

- 3 028780

0,5 до 7 мг/кг эстетрола, в качестве активного ингредиента, и фармацевтически приемлемый эксципиент.

Экстренный контрацептив по настоящему изобретению вводят в течение ограниченного периода времени после полового сношения, и предпочтительно, как можно быстрее после полового сношения. Обычно этот период времени находится в пределах 120 ч (5 суток) от полового сношения, таком как в пределах 96 (4 суток), 72 (3 суток), 48 (2 суток), 24 ч (1 суток) после полового сношения или меньше.

Результаты, полученные с помощью настоящего изобретения, указывают, что Е₄ у кроликов с высокой эффективностью предотвращает беременность. Не желая углубляться в теорию, Е₄ можно применять вплоть до 120 ч после сношения, что обеспечивает преимущество по сравнению с известными экстренными пилюлями. Было показано, что эстетрол предотвращает овуляцию и беременность. Эстетрол эффективен даже при введении незадолго перед овуляцией, когда уровень ЛГ уже начал повышаться, в период времени, когда применение, например, левоноргестрела больше не является эффективным, или даже после овуляции, когда ни одна из существующих экстренных пилюль не является эффективной.

Авторы настоящего изобретения показали, что единственные дозы до 100 мг эстетрола являются безопасными и хорошо переносятся у людей, что является преимуществом по сравнению с синтетическими эстрогенами, такими как этинилэстрадиол, которые связаны с нежелательными побочными эффектами, такими как тромбоэмболия, задержка жидкости, тошнота, вздутие, желчнокаменная болезнь, головная боль и боль в груди.

Другой аспект настоящего изобретения относится к способу экстренной контрацепции, включающему пероральное введение единственной дозы эстетрола от 0,5 до 7 мг/кг у женщины в пределах 120 ч от полового сношения.

Далее раскрыт режим лечения для экстренной контрацепции с применением тетрагидроксилированного эстрогена, предпочтительно эстетрола, в качестве активного ингредиента. Режим лечения в соответствии с настоящим изобретением заключается в приеме единственной дозы от 0,5 до 7 мг/кг эстетрола в качестве активного ингредиента, в пределах 120 ч от полового сношения.

Альтернативно, указанный режим лечения можно применять в виде двух последовательных фаз, например, с интервалом 6, 12, 18 или 24 ч.

Далее раскрыт набор для экстренной контрацепции, включающий фармацевтическую композицию, содержащую эстетрол, как определено в настоящей заявке. Набор может дополнительно содержать инструкции по применению.

Настоящее изобретение далее иллюстрировано следующими примерами, которые не ограничивают объем настоящего изобретения каким-либо образом.

Примеры

Пример 1. Антиовуляторный эффект Е₄ у крыс с 4-дневным циклом.

Настоящий пример показывает антиовуляторную активность эстетрола (Е₄) после перорального применения у крыс с 4-дневным циклом.

Вагинальные мазки самок крыс получали ежедневно в течение двух недель перед началом лечения для идентификации четырехдневного цикла крыс. Все виды лечения проводили путем перорального применения дважды в день примерно в 6:30 и 16:30 в течение четырех последовательных дней (1-4 сутки), начиная с суток эструса. Спустя сутки после получения окончательной дозы (5 сутки) крыс умерщвляли путем СО₂ асфиксии примерно в 13.00 и подсчитывали число яйцеклеток в яйцеводе с помощью препаровальной лупы.

В одном исследовании у животных (8 на группу) применяли Е₄ (0,03; 0,1; 0,3; 1,0 или 3,0 мг/кг) или этинилэстрадиол (ЕЕ) (0,0003; 0,001; 0,003; 0,01 или 0,03 мг/кг). Контрольная группа получала только растворитель.

У всех крыс, получавших растворитель перорально, отмечалась овуляция, в то время как у животных, получавших Е4 или ЕЕ, отмечено снижение овуляторной активности. Лечение Е4 дважды в сутки по 0,03 мг/кг не подавляло овуляцию. В более высоких дозах Е₄ блокировал овуляцию дозозависимым образом. Овуляция была подавлена у 2 из 8 крыс при применении Е4 в дозе 0,1 мг/кг; у 5 из 8 крыс при 0,3 мг/кг; у 7 из 8 крыс при 1,0 мг/кг, и у 8 из 8 при 3,0 мг/кг. Расчетное значение ЕЭ₅₀ составило 0,182 мг/кг. Применение ЕЕ дважды в сутки обеспечило следующие результаты: 0,0003 и 0,001 мг/кг не подавляли овуляцию; доза 0,003 мг/кг блокировала овуляцию у 1 из 8 крыс; доза 0,01 мг/кг - у 4 из 8 крыс; а 0,03 мг/кг - у 8 из 8 крыс. Расчетное значение ЕЭ₅₀ составило 0,01 мг/кг.

Результаты этого исследования показали, что Е₄, также как и ЕЕ, обладает антиовуляторной активностью в условиях эксперимента.

В другом исследовании оценивали антиовуляторную активность Е4 по отношению к эстрадиолу (Е₂). У животных (8 на группу) применяли Е₄, Е₂ или растворитель (контрольная группа). Из-за крутизны кривой зависимости от дозы нельзя рассчитать антиовуляторное значение ЕЭ₅₀ для Е₂, но было установлено, что оно находится в диапазоне от 0,03 до 0,1 мг/кг. Антиовуляторное значение ЕЭ₅₀ для Е₄ составило 0,204 мг/кг.

Результаты этого исследования показали, что Е4, также как и Е2, обладает антиовуляторной активностью в условиях этого эксперимента.

В заключение, исследования показали, что Е₄ подавляет овуляцию при пероральном приеме у

- 4 028780 взрослых крыс с астральным циклом.

Пример 2. Предотвращение беременности у кроликов.

В данном примере исследовали, может ли Е₄ предотвратить беременность у кроликов.

У 18 самок кроликов с доказанной плодовитостью, по 3 на группу, применяли два раза в сутки примерно с 12-часовыми интервалами в течение 14 суток, за 4 дня перед спариванием.

Группа 1: контрольный растворитель (Л8У: 0,9% хлорид натрия; 0,4% полисорбат 80; 0,5% карбоксиметилцеллюлоза и 0,9% бензиловый спирт в дистиллированной или деионизированной воде, 1 мл/кг);

Группа 2: 0,01 мг/кг Е₄ в Л8У, 1 мл/кг;

Группа 3: 0,03 мг/кг Е₄ в Л8У, 1 мл/кг;

Группа 4: 0,1 мг/кг Е₄ в Л8У, 1 мл/кг;

Группа 5: 0,3 мг/кг Е₄ в Л8У, 1 мл/кг; и

Группа 6: 1,0 мг/кг Е₄ в Л8У, 1 мл/кг.

Дозы определяли по массе тела, полученной в первые сутки лечения, и регулировали в соответствии с массой, полученной спустя одну неделю. Каждую самку спаривали с двумя кроликами-самцами с доказанной плодовитостью спустя 4 дня после лечения. Самок умерщвляли спустя 10 дней и определяли число беременностей.

Результаты исследования приведены в табл. 1. В контрольной группе, получавшей растворитель, наблюдалось 25 овуляций. Угнетение овуляций отмечено в группе, получавшей 1,0 мг/кг, где отмечено только 3 овуляции. Увеличение матки у кроликов при отсутствии желтых тел подтвердило успешное спаривание. В группе, получавшей растворитель, наблюдалось всего 13 беременностей в результате 15 овуляций (2 животных). При применении дозы 0,1 мг/кг не наблюдалось беременностей, хотя отмечено 20 овуляций. Подобным образом, при применении дозы 0,3 мг/кг отмечено 20 овуляций, но не наблюдалось беременностей.

Таблица 1

Влияние контрольного растворителя и различных доз Е₄ на овуляцию и беременность

	Число желтых тел	Число беременностей
Индивидуальные значения (3 животных на группу)	Общее число	И н диви дуальные значения (3 животных на группу)	Общее число
Контрольный растворитель	10; 7; 8	25	0; 7; 61	13
0,01 мг/кг	13; 92	22	13; 92	22
0,03 мг/кг	5; 6;11	22	5; 5; 11	21
0,1 мг/кг	5; 7; 8	20	0; 0; 0	0
0,3 мг/кг	6; 7; 7	20	0; 0; 0	0
1,0 мг/кг	0; 0; 3	3	0; 0; 0	0

¹У одной самки в группе, получавшей контрольный растворитель, не было беременности.

²У одной самки не было спаривания.

Было сделано заключение, что пероральном применении Е₄ в дозе более 0,3 мг/кг дважды в сутки отмечается угнетение овуляции. При применении более 0,03 мг/кг дважды в сутки достигается полное предотвращение беременности.

Пример 3. Влияние Е4 на беременность крыс Вистар.

Задачей настоящих исследований была оценка влияния Е₄ на беременность крыс Вистар при пероральном введении с помощью зонда. В одном исследовании в группах из семи спарившихся крыс-самок применяли Е₄ перорально, с помощью зонда, в дозе 30, 60 или 90 мг/кг/сутки от 6 до 17 суток беременности включительно. В подобной группе из 7 крыс применяли растворитель, 0,5% м/о карбоксиметилцеллюлозу, в течение такого же периода времени в качестве контроля. На 20 сутки беременности исследовали самок.

Во время исследования не было отмечено случаев гибели животных, все животные дожили до запланированной аутопсии. Не было существенных клинических наблюдений или замечаний при аутопсии, значимых для эксперимента. Снижение средней массы тела в группе и значительное уменьшение среднего потребления пищи в группах для всех дозировок отмечено во время лечения.

В другом исследовании, с применением того же протокола, как описано выше, в группах из семи самок крыс после спаривания применяли Е₄ в дозировке 0,1; 0,3; 1; 3 и 10 мг/кг/сутки, или растворитель (контроль).

Не отмечено случаев гибели животных во время исследования. Отмечено, что три самки в группе,

- 5 028780 принимавшей 10 мг/кг/сутки и одна самка в группе, принимавшей 3 мг/кг/сутки, горбились к концу периода беременности. Не отмечено других клинических явлений, которые могли быть связаны с лечением. При приеме 10 мг/кг/сутки отмечено общее снижение средней массы тела во время периода лечения, с уменьшением среднего потребления пищи. При употреблении 0,1; 0,3; 1 и 3 мг/кг/сутки средняя прибавка массы тела была меньше, чем в контрольной группе во время лечения, со снижением средней массы беременной матки в группах, получавших 0,3; 1 и 3 мг/кг/сутки. При приеме 1 и 3 мг/кг/сутки среднее потребление пищи во время периода лечения было слегка меньше, чем в контроле. При приеме дозы менее 3 мг/кг/сутки отмечена только легкая токсичность у самок.

Пример 4. Изучение токсичности эстетрола на обезьянах.

Исследования максимальной переносимой дозы (ΜΤΌ) проводили на взрослых самках яванских макак.

У трех контрольных животных применяли перорально только раствор, а у других четырех животных применяли перорально Е₄ в виде суспензии в растворе в виде однократных возрастающих доз 1, 10, 100 или 1000 мг/кг на 1, 3, 6 и 14 сутки соответственно.

При проведении исследования не было выявлено незапланированной гибели животных.

Не было выявлено значительных клинических проявлений, связанных с применением Е₄. Единственным побочным клиническим проявлением была рвота у одной из самок, получавших Е₄ в дозе 1000 мг/кг примерно 12 ч спустя после приема дозы.

Не отмечено влияния на массу тела или гематологические параметры.

Клиническая химия продемонстрировала снижение уровней неорганического фосфора у 2 из 3 контрольных животных и у 3 из 4 животных, получавших Е4 в дозе 1 мг/кг на следующий день после приема дозы. После этого наблюдалось снижение уровней у всех животных, получавших Е4 в дозе 1000 мг/кг. Это явление, вероятно, имеет минимальное значение.

Минимальные изменения были выявлены для некоторых параметров печени (уровней аспартатаминотрансферазы (АсАТ) и аланин-аминотрансферазы (АлАТ)) у одного животного из контрольной группы и у одного животного, получавшего Е₄. Однако не было выявлено явных изменений, связанных с приемом лекарства или его дозой.

При аутопсии не было выявлено существенных изменений.

Было сделано заключение, что при разовом пероральном приеме Е₄ яванскими макаками вплоть до дозировки 1000 мг/кг лекарство хорошо переносится и не вызывает существенных токсических реакций.

Пример 5. Безопасность, переносимость, фармакокинетика и фармакодинамика однократной дозы Е4 у здоровых женщин в постменопаузе.

В настоящем примере безопасность, переносимость, фармакокинетику и фармакодинамику однократной повышающейся дозы Е₄ (0,1; 1; 10 и 100 мг) оценивали у здоровых женщин в постменопаузальном периоде.

Двойное слепое рандомизированное плацебо-контролируемое исследование с однократными возрастающими дозами (0,1; 1; 10 и 100 мг Е4) проводили у здоровых женщин в постменопаузальном периоде. В исследовании участвовали 32 здоровых женщин-добровольцев в постменопаузальном периоде в возрасте от 53 до 69 лет. Менопаузу определяли как >12 месяцев аменореи, или аменорею в течение 6 месяцев при уровне ФСГ в сыворотке >40 МЕ/л и уровне Е₂ в сыворотке <73 пмоль/л. Экспериментальные группы были сопоставимы по демографическим параметрам и характеристикам. В каждую группу назначали по 8 женщин; 6 женщин получали активное лечение, а 2 женщины получали плацебо.

Безопасность.

Не отмечено тяжелых или серьезных побочных реакций. Одна побочная реакция была умеренной интенсивности (боль в спине, признана не связанной с лечением), все прочие были слабыми. Одна побочная реакция (ПР) была отмечена у пациентки в группе, получавшей наивысшую дозу (100 мг Е₄): аллергическая реакция (крапивница), которая была признана не тяжелой, слабой, и вероятно связанной с Е4. Реакция полностью прошла за несколько часов. Анализ аллергии после исследования не смог подтвердить прямой аллергический ответ на Е4 или экспериментальный раствор в исследовании. Наиболее часто наблюдаемые побочные реакции встречались в группах систем органов, таких как заболевания нервной системы и желудочно-кишечные заболевания, у субъектов во всех экспериментальных группах, включая субъектов, принимавших плацебо (см. табл. 2). Число и природа побочных реакций были сходными у лиц, принимавших плацебо и 0,1; 1,0 и 10 мг Е₄. Число ПР (все ПР и связанные ПР) были наивысшими у лиц, принимавших 100 мг Е₄. Не отмечалось накопления специфических ПР в какой-либо опытной группе. Число лиц, у которых отмечены ПР, было сопоставимо в опытных группах, с наименьшим числом в группе, принимавшей 10 мг, в которой отмечена только одна ПР. Не отмечено существенных изменений ЭКГ, каких-либо данных лабораторных анализов или основных показателей состояния организма.

- 6 028780

Таблица 2

Побочные реакции, связанные с приемом лекарства, отмеченные более чем у одного лица в какой-либо из опытных групп

Классы систем органов Используемые параметры	Плацебо (N=8) Ε; п; %	0,1 мг (N=6) Ε; п; %	1 мг (N=6) Ε; п; %	10 мг (N=6) Ε; п; %	100 мг (N=8) Ε; п; %
Желудочно-кишечные		ί

заболевания Диарея N08	1; 1; 12,5				2; 2; 33,3
Скелетно-мышечные заболевания, и заболевания соединительной ткани Миалгия				ΐ; 1; 16,7	2; 2; 33,3
Заболевания нервной системы Сонливость	-	1; 1; 16,7	1; 1; 16,7	-	2; 2; 33,3

N - число лиц в опытной группе;

Е - число побочных реакций; η - число лиц с побочными реакциями;

% - процент лиц с побочными реакциями от числа субъектов в опытной группе.

В заключение, результаты данного исследования показали, что Е₄ после однократного применения в дозе до 100 мг является безопасным и хорошо переносится.

Фармакокинетика.

Кривые зависимости средней концентрации Е₄ в плазме от времени для групп 1, 10 и 100 мг представлены на фиг. 1. Профили концентрации в плазме не удалось определить у субъектов в группе, получавшей 0,1 мг.

Фармакокинетические данные Е₄ были согласованными в каждой группе и на протяжении изучаемого диапазона доз. Вариабельность между субъектами была очень низкой.

Абсорбция Е₄ была крайне быстрой и сопровождалась быстрым распределением. Реабсорбция была выявлена в первые 18 ч после перорального приема. Соединение выводилось с периодом полувыведения в конечной фазе 28 ч (диапазон 18-60 ч).

Значения АСС_0-/ были пропорциональными пероральной дозе в диапазоне от 10 до 100 мг Е₄.

Значения С_тах были пропорциональными в диапазоне от 1 до 100 мг Е₄. На значения периода полувыведения в конечной фазе и фракционного клиренса не влиял уровень дозы.

В заключение, результаты настоящего исследования показали, что в исследуемом диапазоне доз Е₄ демонстрировал высокую и пропорциональную дозе биоабсорбцию при пероральном приеме с согласованным профилем в плазме из-за небольшой вариации между субъектами, и существенно более продолжительным периодом полувыведения в конечной фазе около 28 ч.

Фармакодинамика.

Данные фармакодинамики показали явное дозозависимое угнетение уровней ЛГ в плазме при использовании Е₄ вплоть до 48 ч после приема. Максимальное среднее угнетение составило 48% спустя 4 ч после приема. Второе значение ЛГ 45% наблюдалось спустя 12 ч после приема, синхронно со средними уровнями Е4. Процентное изменение уровней ЛГ в группе, получавшей 100 мг, показано на фиг. 2.

Глубокое и длительное ингибирование уровней ФСГ с максимальной супрессией 41% спустя 48 ч после приема можно также видеть в группе, принимавшей 100 мг (не определено группах, получавших другие дозы) до 168 ч (1 неделя) после приема. Процентные изменения уровней ФСГ в группе, принимавшей 100 мг, представлены на фиг. 3.

Некоторые быстрые эстрогензависимые параметры, связанные с печеночным и костным метаболизмом, были определены только в группе, получавшей 100 мг. Было отмечено легкое повышение триглицеридов и легкое снижение холестерина ЛПНП и аполипопротеина В100. Минимальные изменения наблюдались в костных параметрах остеокальцине и С-телопептиде. Не отмечено существенных изменений для параметров свертывания крови, фактора XII и плазминогена. Наблюдалось легкое повышение глобулина, связывающего половые гормоны, и глобулина, связывающего кортизол. Общий профиль позволяет сделать заключение о минимальном влиянии на метаболизм печени. Интерпретацию фармакокинетических данных следует проводить осторожно, с учетом малого количества лиц и однократного применения дозы.

Не отмечалось существенной стимуляции эндометрия, поскольку ни у одной из испытуемых не отмечалось кровотечения, связанного с прекращением приема прогестогена после лечения.

- 7 028780

В заключение, влияние Е₄ на уровни ЛГ и ФСГ свидетельствуют о сильном центральном гонадотропин-ингибирующем эффекте соединения.

Пример 6. Исследование ингибирования овуляции эстетролом у здоровых женщин с регулярным менструальным циклом.

В данном примере показано ингибирование овуляции с однократной дозой эстетрола после перорального приема у здоровых женщин с регулярным менструальным циклом.

Рандомизированное, двойное слепое, плацебо-контролируемое перекрестное исследование проводили у здоровых женщин с регулярным менструальным циклом. Женщины не применяли гормональные контрацептивы, и регулярный менструальный цикл определяется как менструальный цикл 24-35 дней. Женщин произвольно распределяли в одну из опытных групп, в целом по 20 женщин в каждой опытной группе. В каждой опытной группе каждая из женщин получала одну пероральную дозу эстетрола (например, 50, 75 или 100 мг эстетрола) в один цикл лечения и одну пероральную дозу плацебо в другой цикл лечения (перекрестное исследование).

Вначале испытуемых исследовали в цикле до лечения (т.е. нормальном менструальном цикле) для установления развития фолликулов и подтверждения овуляции. Развитие фолликулов и эндометрия оценивали с помощью трансвагинального ультразвукового устройства (Τνϋδ) каждые 3 дня, начиная от 6 дня менструального цикла до наблюдения овуляции. Когда диаметр фолликула достигал 13 мм, испытуемых исследовали каждый день или через день. Овуляция считалась подтвержденной, если измеренный сывороточный уровень прогестерона (Р) составлял > 16 нмоль/л. Лютеиновая фаза составляла по меньшей мере 10 суток.

В экспериментальном цикле развитие фолликулов и эндометрия анализировали с помощью Τνϋδ каждые 3 суток, начиная с 6 дня менструального цикла до достижения размера основного фолликула > 18 мм. Когда диаметр фолликула при измерении составлял 13 мм, испытуемых наблюдали каждый день или через день. Испытуемых назначали препарат (в виде однократной дозы эстетрола или плацебо), когда размер основного фолликула составлял > 18 мм. После приема испытуемых в течение 6 суток исследовали с помощью Τνϋδ и собирали образцы крови для анализа уровня гормонов (ФСГ, ЛГ, Е2, Р). Если разрыв фолликула уже произошел, испытуемую все равно лечили.

Пример 7. Эффективность, безопасность и переносимость эстетрола по сравнению с левоноргестрелом для экстренной контрацепции у здоровых женщин детородного возраста.

В данном примере показана эффективность, безопасность и переносимость эстетрола по сравнению с левоноргестрелом (ЛНГ) для экстренной контрацепции здоровых женщин детородного возраста.

Перспективное, рандомизированное, двойное слепое, многоцентровое, контролируемое по действующему препарату исследование проводили у здоровых женщин детородного возраста с регулярным менструальным циклом, проводивших экстренную контрацепцию в пределах 48-120 ч после незащищенного сношения. Женщины имели возраст по меньшей мере 18 лет, не применяли гормональную контрацепцию, и регулярный менструальный цикл определялся как менструальный цикл от 24 до 35 суток. Женщины произвольно применяли от 48 до 120 ч после незащищенного сношения однократную дозу 50 или 100 мг Е4, или одну дозу 1,5 мг ЛНГ с последующим визитом в течение 5-7 суток после ожидаемого наступления менструации или другим визитом спустя 12-14 суток после ожидаемого начала менструации (если необходимо). В этом исследовании участвовали 40-45 женщин на клиническую базу, всего было 40-45 клинических баз.

Уровни беременности после применения препарата сравнивали между группами. Беременность (эффективность) определяли путем выявления гормона беременности - хорионического гонадотропина человека (чГТ) в сыворотке и возврата менструации.

Оценивали характер менструальных кровотечений до завершения примерно одной недели после следующей менструации.

Безопасность и переносимость оценивали путем определения рутинных лабораторных параметров безопасности (гематологических, биохимических и анализа мочи), основных показателей состояния организма, путем физических, гинекологических исследований, анализа молочных желез, кровяного давления, частоты сердечных сокращений, массы тела и контроля (строгого) побочных реакций до завершения примерно одной недели после следующей менструации.

Claims (8)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Способ экстренной контрацепции у самки млекопитающего, включающий введение экстренного контрацептива, содержащего эстетрол в эффективном количестве для подавления овуляции и беременности у самки млекопитающего, где указанное введение осуществляют пероральным, парентеральным, ректальным, чрескожным или местным путем.
2. 2. Способ по п.1, в котором указанный экстренный контрацептив дополнительно содержит фармацевтически приемлемую соль или эксципиент.
3. 3. Способ по п.1, в котором указанный экстренный контрацептив дополнительно содержит дополнительный активный ингредиент, пригодный для предотвращения беременности.

   - 8 028780
4. 4. Способ по любому из пп.1-3, в котором указанный экстренный контрацептив содержит эстетрол в дозе от 0,5 до 7 мг/кг, от 1,0 до 5,0 мг, от 1,5 до 2,5 мг/кг или примерно 2,0 мг/кг.
5. 5. Способ по любому из пп.1-4, в котором указанный экстренный контрацептив содержит эстетрол в дозе от 30 до 400 мг, от 40 до 250 мг, от 40 до 200 мг, от 40 до 150 мг, от 40 до 100 мг, от 50 до 100 мг эстетрола или около 100 мг.
6. 6. Способ по любому из пп.1-5, в котором введение осуществляют в виде однократной дозы.
7. 7. Способ по пп.1-6, в котором введение осуществляют в виде двойной дозы с интервалом 6, 12, 18 или 24 ч.
8. 8. Способ по любому из пп.1-7, в котором указанное введение выполняют в пределах 120 ч после полового сношения, предпочтительно в пределах 96, 72, 48, 24, 12 ч.