EA019723B1 - ИНГИБИТОРЫ cMET - Google Patents

Abstract

Изобретение относится к соединению структурной формулы, указанной ниже, или его фармацевтически приемлемой соли, где Rпредставлен формулой, Rпредставляет собой циклопропил; Rвыбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила, CF, циано, фенила, замещенного 0, 1, 2, 3, 4 или 5 R, радикала формулыи радикала формулы, где Rвыбран из группы, состоящей из водорода, (C)алкила, фенила, (С)циклоалкила, гетеро(С)арила, гидрокси(С)алкила и галогена. Также изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей указанное соединение. Соединения настоящего изобретения могут применяться для ингибирования cMET.

Description

Область техники

Данное изобретение касается соединений, которые могут применяться для ингибирования сМЕТ, а также композиций, которые включают указанные соединения. Кроме того, изобретение касается способов получения соединений по данному изобретению, а также промежуточных соединений, пригодных для таких способов.

Уровень техники сМЕТ киназа - это рецепторная тирозинкиназа. НОР (фактор роста гепатоцитов, также известный как фактор рассеивания), лиганд сМЕТ, секретируется клетками мезодермального происхождения, тогда как сМЕТ в основном экспрессируется на клетках эпителиального/эндотелиального происхождения, что ведет к паракринному проведению сигнала эпителиальными-мезенхимальными клетками (81окет, М. с1 а1., №11игс 327: 239-242 (1987)). Связывание НОР с внеклеточным участком сМЕТ активирует внутриклеточную тирозинкиназную активность сМЕТ. Считается, что сМЕТ принимает участие в процессах фосфорилирования белка, которые регулируют размножение, апоптоз, подвижность клеток и диссоциацию взаимодействий клетка-клетка, морфогенез, ангиогенез на эпителиально-мезенхимальный переход. Нарушение регуляции сМЕТ может приводить к нерегулируемому размножению и выживанию клеток. Предполагается, что сМЕТ - ключевой регулятор инвазивного роста, онкогенеза и прогрессирования до метастаза (Тти8о1шо, Т. и Сошодйо, Р. №1Шгс Ке\'1е\\'8 Сапсег 2: 289-300 (2002)). Амплификация, изменение, мутация гена сМЕТ и избыточная экспрессия белка или активация сМЕТ через эндокринные или паракринные механизмы обнаружены в широком спектре карцином. Например, выявлено, что сМЕТ чрезмерно экспрессируется и амплифицируется в ткани рака желудка человека (8то1еп, О.А., е1 а1. ΡΝΑ8 103: 2316-2321, (2006)). Обнаружено, что в глиобластомах и карциномах легкого, щитовидной железы и молочной железы человека сМЕТ активируется в результате увеличения уровней НОР и аутокринного проведения сигнала (В1тсйше1ег, С. е1 а1. Кеу. Мо1. Се11 Вю1. 4: 915-925, (2003)). Обнаружено, что в ткани рака легкого человека сМЕТ регулируется вверх как механизм резистентности к лекарственным средствам (Епде1тап, 1.А., е1 а1. 8с1епсе 316: 1049-1043, (2007)). Сообщалось, хоть и не очень часто, об активации мутаций в сМЕТ в случаях спорадической и наследственной сосковидной карциномы почки, плоскоклеточной карциномы головы и шеи, а также рака желудка и легкого. Кроме того, повышенная экспрессия - наиболее распространенное изменение, касающееся сМЕТ, - обнаружена в широком спектре опухолей человека (в том числе, не ограничиваясь ими, различные виды рака почки, яичника, клеток печени, немелкоклеточный рак легкого, рак костей, печеночные метастазы рака ободочной кишки, плоскоклеточный рак ротовой полости, рак пищевода, желудка, поджелудочной и предстательной железы) и коррелирует с плохим прогнозом (Вепуепиб, 8. апб Сошодйо, Р.М., 1. Се11. РЬу8ю1. 213: 316-325, (2007)).

Существует непрерывная необходимость в поиске новых терапевтических средств для лечения заболеваний человека. Ингибирование сМЕТ представляет собой особенно привлекательную мишень для открытия новых терапевтических средств за счет ее важной роли в развитии рака и других заболеваний.

Сущность изобретения

Данное изобретение касается соединений, которые обладают активностью ингибиторов сМЕТ. В данном изобретении также предложена композиция, которая включает указанные соединения. Кроме того, изобретение касается способов получения соединений по данному изобретению, а также промежуточных соединений, пригодных для таких способов.

В одном из вариантов предложена фармацевтическая композиция, содержащая ингибитор сМЕТ по данному изобретению в качестве активного ингредиента. Фармацевтические композиции по изобретению необязательно могут содержать 0,001-100% одного или больше ингибиторов по данному изобретению. Фармацевтические композиции по изобретению необязательно могут содержать одно или больше соединений, выбранных из группы, состоящей из вспомогательных веществ, разбавителей, смазывающих средств, связывающих средств, адъювантов, носителей, увлажняющих средств, эмульгаторов, суспендирующих средств и буферных веществ для коррекции рН. Фармацевтические композиции можно вводить или одновременно вводить разнообразными способами, в том числе, например, перорально, парентерально, интраперитонеально, внутривенно, внутриартериально, трансдермально, сублингвально, внутримышечно, ректально, через слизистую оболочку, интраназально, в липосомах, путем ингаляции, интравагинально, в глаза, с помощью локального устройства (например, катетера или шунта), подкожно, в жировую ткань, внутрисуставно или интратекально. Композиции можно также вводить или одновременно вводить в дозированных лекарственных формах с пролонгированным высвобождением.

Также предложены способы получения соединений и композиций по данному изобретению. Например, несколько схем синтеза предложены в данном описании для синтеза соединений по данному изобретению.

Относительно всех упомянутых выше вариантов следует отметить, что данное изобретение предназначено включать все фармацевтически приемлемые ионизированные формы (например, соли) соединений, независимо от того, указаны ли такие ионизированные формы явно, поскольку из уровня техники хорошо известно введение фармацевтических средств в ионизированной форме.

- 1 019723

Определения

Если не указано иное, следующие термины, использованные в описании и формуле изобретения, имеют следующие значения для целей данного изобретения.

Дополнительно, определение стандартных химических терминов можно найти в справочных работах, в том числе Сагеу апй 8ипйЬегд Айуапеей Огдашс СНетМгу 41Н Ей., νοΚ А (2000) аий В (2001), Р1епит Рге55. ке> Уогк. Также, если не указано иное, применяются обычные методы массспектрометрии, ЯМР, ВЭЖХ, химии белков, биохимии, методы рекомбинации ДНК и фармакологические методы, которые находятся в пределах компетенции специалиста в данной области.

Алициклический обозначает фрагмент, включающий неароматическую кольцевую структуру. Алициклические фрагменты могут быть насыщенными или частично ненасыщенными, с одной, двумя или больше двойных или тройных связей. Алициклические фрагменты также могут необязательно содержать гетероатомы, например азот, кислород и серу. Атомы азота необязательно могут быть кватернизированы или окислены, и атомы серы необязательно могут быть окислены. Примеры алициклических фрагментов включают, не ограничиваясь ими, фрагменты с (С_3-8) кольцами, такие как циклопропил, циклогексан, циклопентан, циклопентен, циклопентадиен, циклогексан, циклогексен, циклогексадиен, цик логептан, циклогептен, циклогептадиен, циклооктан, циклооктен и циклооктадиен.

Алифатический обозначает фрагмент, характеризующийся расположением атомов углерода в виде линейной или разветвленной цепи, и может быть насыщенным или частично ненасыщенным, то есть содержать одну, две или больше двойных или тройных связей.

Алкенил обозначает линейную или разветвленную цепь, состоящую из атомов углерода и содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную двойную связь (-СЯ=СЯ'- или -СЯ=СЯ'Я, где каждый из Я, Я' и Я независимо представляет собой водород или дополнительные заместители). Примеры алкенила включают винил, аллил, изопропенил, пентенил, гексенил, гептенил, 1-пропенил, 2-бутенил, 2метил-2-бутенил и т.п. В конкретных вариантах алкенил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_2-20)алкенил, (С_2-15)алкенил, (С_2-10)алкенил, (С_2-5)алкенил или (С_2-3)алкенил. Альтернативно, алкенил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₂)алкенил, (С₃)алкенил или (С₄)алкенил.

Алкенилен обозначает линейную или разветвленную двухвалентную цепь, состоящую из атомов углерода и содержащую одну или больше углерод-углеродных двойных связей (-СЯ=СЯ'-, где каждый из Я и Я' независимо представляет собой водород или дополнительные заместители). Примеры алкенилена включают этен-1,2-диил, пропен-1,3-диил, метилен-1,1-диил и т.п. В конкретных вариантах алкенилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С2-20)алкенилен, (С_2-1₅)алкенилен, (С_2-1₀)алкенилен, (С_2-5)алкенилен или (С_2-3)алкенилен. Альтернативно, алкенилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С2)алкенилен, (С3)алкенилен или (С4)алкенилен.

Алкокси обозначает кислород, дополнительно замещенный алкильным заместителем. Алкоксильная группа по данному изобретению необязательно может быть замещена.

Алкил сам по себе обозначает радикал линейной или разветвленной, насыщенной или ненасыщенной алифатической цепи, состоящей из атомов углерода, в которой один или больше атомов углерода необязательно заменены на кислород (см. оксаалкил), карбонильную группу (см. оксоалкил), серу (см. тиоалкил) и/или азот (см. азаалкил). Типично используются обозначения (С_х)алкил и (С_Х-у)алкил, где X и Υ показывают количество атомов углерода в цепи. Например, (С1_-6)алкил включает алкильные радикалы с длиной цепи от 1 до 6 атомов углерода (например, метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, винил, аллил, 1-пропенил, изопропенил, 1-бутенил, 2бутенил, 3-бутенил, 2-метилаллил, этинил, 1-пропинил, 2-пропинил и т.п.). Алкил, представленный вместе с другим радикалом (например, арилалкил, гетероарилалкил и т.п.), обозначает линейный или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный алифатический двухвалентный радикал, где указано количество атомов и где отсутствие указаний на количество атомов обозначает связь (например, (С6 _-1₀)арил(С1_-3)алкил включает бензил, фенэтил, 1-фенилэтил, 3-фенилпропил, 2-тиенилметил, 2пиридинилметил и т.п.). В конкретных вариантах алкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_1-20)алкил, (С_1-15)алкил, (С_1-10)алкил, (С_1-5)алкил или (С_1-3)алкил. Альтернативно, алкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С1)алкил, (С₂)алкил или (С₃)алкил.

Алкилен, если не указано иное, обозначает линейный или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный, алифатический двухвалентный радикал. Типично используются обозначения (С_х)алкилен и (С_х^)алкилен, где X и Υ показывают количество атомов углерода в цепи. Например, (С1_-6)алкилен включает метилен (-СН2-), этилен (-СН2СН2-), триметилен (-СН2СН2СН2-), тетраметилен (-СН2СН2СН2СН2-) 2бутенилен (-СН2СН=СНСН2-), 2-метилтетраметилен (-СН2СН(СН3)СН2СН2-), пентаметилен (-СН₂СН₂СН₂СН₂СН₂-) и т.п. В конкретных вариантах алкилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С1_-20)алкилен, (С_1-15)алкилен, (С1_-1₀)алкилен, (С1_-5)алкилен или (С_1-3)алкилен. Альтернативно, алкилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₁)алкилен, (С₂)алкилен или (С₃)алкилен.

- 2 019723

Алкилиден обозначает линейный или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный, алифатический радикал, присоединенный к остальной молекуле двойной связью. Типично используются обозначения (С_х)алкилиден и (С_х-у)алкилиден, где X и Υ показывают количество атомов углерода в цепи. Например, (С1_-6)алкилиден включает метилен (=СН₂), этилиден (=СНСН₃), изопропилиден (=С(СН₃)₂), пропилиден (=СНСН₂СН₃), аллилиден (=СН-СН=СН₂) и т.п. В конкретных вариантах алкилиден, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_1-20)алкилиден, (С_1-15)алкилиден, (С_1-10)алкилиден, (С_1-5)алкилиден или (С_1-3)алкилиден. Альтернативно, алкилиден, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₁)алкилиден, (С2)алкилиден или (С3)алкилиден.

Алкинил обозначает линейную или разветвленную цепь, состоящую из атомов углерода и содержащую по меньшей мере одну углерод-углеродную тройную связь (-С^С- или -С'=СК где Я представляет собой водород или дополнительный заместитель). Примеры алкинила включают этинил, пропаргил, 3метил-1-пентинил, 2-гептинил и т.п. В конкретных вариантах алкинил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_2-20)алкинил, (С_2-15)алкинил, (С_2-10)алкинил, (С2-5)алкинил или (С2-3)алкинил. Альтернативно, алкинил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₂)алкинил, (С₃)алкинил или (С₄)алкинил.

Алкинилен обозначает линейную или разветвленную, двухвалентную цепь, состоящую из атомов углерода и содержащую одну или больше углерод-углеродных тройных связей -С=С-. Примеры алкинилена включают этин-1,2-диил, пропин-1,3-диил и т.п. В конкретных вариантах алкинилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_2-20)алкинилен, (С_2-15)алкинилен, (С_2-10)алкинилен, (С_2-5)алкинилен или (С_2-3)алкинилен. Альтернативно, алкинилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₂)алкинилен, (С₃)алкинилен или (С₄)алкинилен.

Амидо обозначает радикал -С(=О)-ЛЯ-, -С(=О)-ЛКК', -ПК.-С(=О)- и/или -ЛК.-С(=О)К.', где каждый Я и Я' независимо представляет собой водород или дополнительный заместитель.

Амино обозначает атом азота, дополнительно содержащий два заместителя, например, где атом водорода или углерода присоединен к атому азота. Например, характерные аминогруппы включают -ΝΗ₂, -ΝΗΟΗ₃, -Л(СН₃)₂, -ХН((С_1-10)алкил), -Л((С_1-10)алкил)₂, -ПН(арил), -ПН(гетероарил), -Л(арил)₂, -Ы(гетероарил)₂ и т.п. Необязательно, два заместителя вместе с атомом азота также могут образовывать кольцо. Если не указано другое, соединения по изобретению, содержащие аминные фрагменты, могут включать их защищенные производные. Подходящие защитные группы для аминных фрагментов включают ацетил, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил и т.п.

Животное включает человека, млекопитающих, не принадлежащих к Ното 5ар1СП5 (например, собаки, кошки, кролики, коровы, лошади, овцы, козы, свиньи, олени и т.п.), и животных, которые не принадлежат к млекопитающим (например, птицы и т.п.).

Ароматический обозначает фрагмент, где атомы образуют ненасыщенную систему колец, все атомы в системе кольца находятся в §р² гибридизации и общее количество π-электронов равно 4п+2. Ароматическое кольцо может быть таким, где все атомы кольца являются атомами углерода, или может содержать атомы углерода и неуглеродные атомы (см. гетероарил).

Арил обозначает моноциклическую или полициклическую систему колец, где каждое кольцо является ароматическим или при конденсации с одним или больше кольцами образует ароматическую систему колец. Если один или больше атомов кольца являются неуглеродными (например, Ν, 8), арил является гетероарилом. Типично используются обозначения (С_х)арил и (С_х.-Д где X и Υ показывают количество углеродных атомов в кольце. В конкретных вариантах арил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_3-14)арил, (С_3-10)арил, (С_3-7)арил, (С_8-10)арил или (С_5-7)арил. Альтернативно, арил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₅)арил, (С₆)арил, (С₇)арил, (С₈)арил, (С₉)арил или (С₁₀)арил.

Азаалкил обозначает алкил, как определено выше, за исключением того, что один или больше углеродных атомов, которые образуют алкильную цепь, заменены на замещенные или незамещенные атомы азота (^Я- или -ΝΒΒ'. где каждый Я и Я' независимо представляет собой водород или дополнительные заместители). Например, (С_1-10)азаалкил обозначает цепь, содержащую от 1 до 10 атомов углерода и один или больше атомов азота.

Бициклоалкил обозначает насыщенную или частично ненасыщенную бициклическую систему спиросоединенных или соединенных мостиком колец. В конкретных вариантах бициклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_4-15)бициклоалкил, (С4 _-10)бициклоалкил, (С_6-10)бициклоалкил или (С_8-10)бициклоалкил. Альтернативно, бициклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₈)бициклоалкил, (С₉)бициклоалкил или (С₁₀)бициклоалкил.

Бициклоарил обозначает бициклическую систему спиросоединенных или соединенных мостиком колец, где как минимум одно из колец, включенных в систему, является ароматическим. Типично используются обозначения (С_х)бициклоарил и (С_х-Цбициклоарил, где X и Υ показывают количество угле

- 3 019723 родных атомов в бициклической системе колец и непосредственно касаются кольца. В конкретных вариантах бициклоарил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_4-1₅)бициклоарил, (С_4-ю)бициклоарил, (С_6-ю)бициклоарил или (С_8-ю)бициклоарил. Альтернативно, бициклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₈)бициклоарил, (С₉)бициклоарил или (С₁₀)бициклоарил.

Соединенные мостиком кольца и объединенные мостиком кольца в данном описании обозначают кольцо, которое присоединено к другому кольцу с образованием соединения бициклической или полициклической структуры, где два атома кольца, общие для обоих колец, непосредственно не соединены друг с другом. Неисключительные примеры распространенных соединений, содержащих соединенные мостиком кольца, включают борнеол, норборнан, 7-оксабицикло[2.2.1]гептан и т.п. Одно или оба кольца бициклической системы могут также содержать гетероатомы.

Карбамоил обозначает радикал -Οί.’(Ό)ΝΒΒ'. где каждый В и В' независимо представляет собой водород или дополнительные заместители.

Карбоцикл обозначает кольцо, состоящее из углеродных атомов.

Карбонильный обозначает радикал -С(=О)- и/или -С(=О)В, где В представляет собой водород или дополнительный заместитель. Следует отметить, что карбонильный радикал может быть дополнительно замещен различными заместителями с образованием разнообразных карбонильных групп, в том числе кислот, галогенангидридов кислот, альдегидов, амидов, сложных эфиров и кетонов.

Карбокси обозначает радикал -С(=О)-О- и/или -С(=О)-ОВ, где В представляет собой водород или дополнительный заместитель. Следует отметить, что соединения по изобретению, которые содержат карбоксильные фрагменты, могут включать их защищенные производные, т.е. такие, в которых кислород замещен защитной группой. Подходящие защитные группы для защиты карбоксильных фрагментов включают бензил, трет-бутил и т.п.

В данном описании сМе! применяется синонимически с с-Ме!, МЕТ, Ме!, рецептором фактора роста гепатоцитов и другими обозначениями, известными специалистам в данной области.

Циано обозначает радикал -СК

Циклоалкил обозначает неароматическую, насыщенную или частично ненасыщенную, моноциклическую, бициклическую или полициклическую систему колец. Типично используются обозначения (Сх)циклоалкил и (С_х-Ациклоалкил, где X и Υ показывают количество углеродных атомов в системе колец. Например, (С_3-10)циклоалкил включает циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогексенил, 2,5-циклогексадиенил, бицикло[2.2.2]октил, адамантан-1-ил, декагидронафтил, оксоциклогексил, диоксоциклогексил, тиоциклогексил, 2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил и т.п. В конкретных вариантах циклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_3-14)циклоалкил, (С_3-10)циклоалкил, (С_3-7)циклоалкил, (С_8-10)циклоалкил или (С_5-7)циклоалкил. Альтернативно, циклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С₅)циклоалкил, (С₆)циклоалкил, (С₇)циклоалкил, (С₈)циклоалкил, (С₉)циклоалкил или (С10)циклоалкил.

Циклоалкилен обозначает двухвалентную, насыщенную или частично ненасыщенную, моноциклическую, бициклическую или полициклическую систему колец. Типично используются обозначения (С_х)циклоалкилен и (С_х-Ациклоалкилен, где X и Υ показывают количество углеродных атомов в системе колец. В конкретных вариантах циклоалкилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С_3-14)циклоалкилен, (С_3-10)циклоалкилен, (С_3-7)циклоалкилен, (С_8-10)циклоалкилен или (С_5-7)циклоалкилен. Альтернативно, циклоалкилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой (С5)циклоалкилен, (С6)циклоалкилен, (С₇)циклоалкилен, (С₈)циклоалкилен, (С₉)циклоалкилен или (С₁₀)циклоалкилен.

Заболевание конкретно включает любое патологическое состояние животного или части его организма и включает патологическое состояние, которое может быть вызвано или случайным образом причинено медицинским или ветеринарным лечениям, примененным к этому животному, т.е., побочными эффектами такого лечения.

Конденсированное кольцо в данном описании обозначает кольцо, соединенное с другим кольцом с образованием соединения бициклической структуры, где атомы кольца, общие для обоих колец, непосредственно соединены друг с другом. Неисключительные примеры распространенных конденсированных колец включают декалин, нафталин, антрацен, фенантрен, индол, фуран, бензофуран, хинолин и т.п. Соединения, которые содержат системы конденсированных колец, могут быть насыщенными, частично насыщенными, карбоциклическими, гетероциклическими, ароматическими, гетероароматическими и т.п.

Галоген обозначает фтор, хлор, бром или йод.

Г етероалкил обозначает алкил, как определено в данном изобретении, при условии, что один или больше атомов в пределах алкильной цепи представляют собой гетероатомы. В конкретных вариантах гетероалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С_1-20)алкил, гетеро(С_1-15)алкил, гетеро(С_1-10)алкил, гетеро(С_1-5)алкил, гетеро(С_1-3)алкил или гетеро(С_1-2)алкил. Альтернативно, гетероалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С₁)алкил, гетеро(С₂)алкил или гетеро(С₃)алкил.

- 4 019723

Г етероарил обозначает моноциклическую, бициклическую или полициклическую ароматическую группу, где как минимум один атом кольца представляет собой гетероатом, и остальные атомы кольца являются атомами углерода. Моноциклические гетероарильные группы включают, не ограничиваясь ими, циклические ароматические группы, которые содержат пять или шесть атомов в кольце, где как минимум один атом кольца представляет собой гетероатом, и остальные атомы кольца являются атомами углерода. Атомы азота необязательно могут быть кватернизированы, и атомы серы необязательно могут быть окислены. Гетероарильные группы по данному изобретению включают, не ограничиваясь ими, производные фурана, имидазола, изотиазола, изоксазола, оксадиазола, оксазола, 1,2,3-оксадиазола, пиразина, пиразола, пиридазина, пиридина, пиримидина, пирролина, тиазола, 1,3,4-тиадиазола, триазола и тетразола. Гетероарил также включает, не ограничиваясь ими, бициклические или трициклические системы колец, где гетероарильное кольцо конденсировано с одним или двумя кольцами, независимо выбранными из группы, состоящей из арильного кольца, циклоалкильного кольца, циклоалкенильного кольца и другого моноциклического гетероарильного или гетероциклоалкильного кольца. Указанные бициклические или трициклические гетероарилы включают, не ограничиваясь ими, производные бензо[Ь]фурана, бензо[Ь]тиофена, бензимидазола, имидазо[4,5-с]пиридина, хиназолина, тиено[2,3-с]пиридина, тиено[3,2-Ь]пиридина, тиено[2,3-Ь]пиридина, индолизина, имидазо[1,2а]пиридина, хинолина, изохинолина, фталазина, хиноксалина, нафтиридина, хинолизина, индола, изоиндола, индазола, индолина, бензоксазола, бензопиразола, бензотиазола, имидазо[1,5-а]пиридина, пиразоло[1,5-а]пиридина, имидазо[1,2-а]пиримидина, имидазо[1,2-с]пиримидина, имидазо[1,5-а]пиримидина, имидазо[1,5-с]пиримидина, пиррол [2,3-Ь]пиридина, пиррол[2,3-с]пиридина, пиррол[3,2-с]пиридина, пиррол[3,2-Ь]пиридина, пиррол[2,3-б]пиримидина, пиррол[3,2-б]пиримидина, пиррол[2,3-Ь]пиразина, пиразоло[1,5-а]пиридина, пиррол [1,2-Ь]пиридазина, пиррол[1,2-с]пиримидина, пиррол[1,2-а]пиримидина, пиррол[1,2-а]пиразина, триазо[1,5-а]пиридина, птеридина, пурина, карбазола, акридина, феназина, фенотиазина, феноксазина, 1,2дигидропиррол[3,2,1-Ы]индола, индолизина, пиридо[1,2-а]индола и 2(1Н)-пиридинона. Бициклические или трициклические гетероарильные кольца могут быть присоединены к остальной молекуле непосредственно через гетероарильную группу или через арильную, циклоалкильную, циклоалкенильную или гетероциклоалкильную группу, с которой они конденсированы. Гетероарильные группы по данному изобретению могут быть замещенными или незамещенными. В конкретных вариантах гетероарил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С1_-1₃)арил, гетеро(С_2-1₃)арил, гетеро(С_2-6)арил, гетеро(С_3-9)арил или гетеро(С_5-9)арил. Альтернативно, гетероарил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С₃)арил, гетеро(С₄)арил, гетеро(С₅)арил, гетеро(С₆)арил, гетеро(С₇)арил, гетеро(С₈)арил или гетеро(С₉)арил.

Гетероатом обозначает атом, который не является атомом углерода. Конкретные примеры гетероатомов включают, не ограничиваясь ими, азот, кислород и серу.

Гетероатомный фрагмент включает фрагмент, где атом, через который фрагмент присоединен, не является атомом углерода. Примеры гетероатомных фрагментов включают -ΝΚ-, -Ν' (О^-)=, -О-, -8- или -8(О)₂-, где Κ представляет собой водород или дополнительный заместитель.

Гетеробициклоалкил обозначает бициклоалкил, как определено в данном изобретении, при условии, что один или больше атомов в пределах кольца представляют собой гетероатомы. Например, гетеро(С9 _-1₂)бициклоалкил в данном изобретении включает, не ограничиваясь ими, 3-азабицикло[4.1.0]гепт3-ил, 2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил, 3-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил и т.п. В конкретных вариантах гетеробициклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С1_-1₄)бициклоалкил, гетеро(С_4-1₄)бициклоалкил, гетеро(С_4-9)бициклоалкил или гетеро(С_5-9)бициклоалкил. Альтернативно, гетеробициклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С₅)бициклоалкил, гетеро(С₆)бициклоалкил, гетеро(С₇)бициклоалкил, гетеро(С₈)бициклоалкил или гетеро(С₉)бициклоалкил.

Гетеробициклоарил обозначает бициклоарил, как определено в данном изобретении, при условии, что один или больше атомов в пределах кольца представляют собой гетероатомы. Например, гетеро(С_4-1₂)бициклоарил в данном изобретении включает, не ограничиваясь ими, 2-амино-4-оксо-3,4дигидроптеридин-6-ил, тетрагидроизохинолинил и т.п. В конкретных вариантах гетеробициклоарил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С_4-44)бициклоарил, гетеро(С_4-1₄)бициклоарил, гетеро(С_4-9)бициклоарил или гетеро(С_5-9)бициклоарил. Альтернативно, гетеробициклоарил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С₅)бициклоарил, гетеро(С₆)бициклоарил, гетеро(С₇)бициклоарил, гетеро(С₈)бициклоарил или гетеро(С9)бициклоарил.

Гетероциклоалкил обозначает циклоалкил, как определено в данном изобретении, при условии, что один или больше атомов, которые образуют кольцо, представляют собой гетероатомы, независимо выбранные из Ν, О или 8. Неисключительные примеры гетероциклоалкила включают пиперидил, 4морфолил, 4-пиперазинил, пирролидинил, пергидропирролизинил, 1,4-диазапергидроэпинил, 1,3диоксанил, 1,4-диоксанил и т.п. В конкретных вариантах гетероциклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С_1-13)циклоалкил, гетеро(С_1-9)циклоалкил, гетеро(С1_-6)циклоалкил, гетеро(С_5-9)циклоалкил или гетеро(С_2-6)циклоалкил. Альтернативно,

- 5 019723 гетероциклоалкил, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С2)циклоалкил, гетеро(С₃)циклоалкил, гетеро(С₄)циклоалкил, гетеро(С₅)циклоалкил, гетеро(С₆)циклоалкил, гетеро(С₇)циклоалкил, гетеро(С₈)циклоалкил или гетеро(С₉)циклоалкил.

Гетероциклоалкилен обозначает циклоалкилен, как определено в данном изобретении, при условии, что один или больше атомов атома углерода, образующих кольцо, заменены на гетероатом. В конкретных вариантах гетероциклоалкилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С1_-1₃)циклоалкилен, гетеро(С1_-9)циклоалкилен, гетеро(С_1-6)циклоалкилен, гетеро(С_5-9)циклоалкилен или гетеро(С_2-6)циклоалкилен. Альтернативно, гетероциклоалкилен, отдельно или представленный вместе с другим радикалом, может представлять собой гетеро(С₂)циклоалкилен, гетеро(С₃)циклоалкилен, гетеро(С₄)циклоалкилен, гетеро(С₅)циклоалкилен, гетеро(С₆)циклоалкилен, гетеро(С₇)циклоалкилен, гетеро(С₈)циклоалкилен или гетеро(С₉)циклоалкилен.

Гидрокси обозначает радикал -ОН.

1С₅о обозначает молярную концентрацию ингибитора, который обеспечивает 50% ингибирование целевого фермента.

Имино обозначает радикал -СК(=ИК^|) и/или -С(=ИК')-, где каждый Я и Я' независимо представляет собой водород или дополнительный заместитель.

Термин изомеры обозначает соединения с идентичной молекулярной формулой, отличающиеся природой или последовательностью связей между атомами или расположением атомов в пространстве. Изомеры, которые отличаются расположением атомов в пространстве, называются стереоизомерами. Стереоизомеры, которые не являются зеркальными отображениями друг друга, называются диастереомерами, и стереоизомеры, которые представляют собой зеркальные отображения, не совпадающие при наложении, называются энантиомерами или иногда оптическими изомерами. Углеродный атом, соединенный с четырьмя разными заместителями, называется хиральным центром. Соединение с одним хиральным центром имеет две энантиомерные формы с противоположной хиральностью. Смесь двух энантиомерных форм называется рацемической смесью. Соединение, содержащее более чем один хиральный центр, имеет 2^П-1 энантиомерных пар, где η - это количество хиральных центров. Соединения более чем с одним хиральным центром могут существовать в форме эфира отдельного диастереомера или смеси диастереомеров, которая носит название диастереомерной смеси. Если присутствует хиральный центр, стереоизомер может быть охарактеризован абсолютной конфигурацией такого хирального центра. Абсолютная конфигурация обозначает пространственное расположение заместителей, присоединенных к хиральному центру. Энантиомеры характеризуются абсолютной конфигурацией хиральных центров и описываются по правилам установления Я- и ^-последовательности, приведенным в Сайп, Ιηдо1б и Рге1од. Конвенции относительно номенклатуры стереохимии, способы определения стереохимии и разделения стереоизомеров хорошо известны из уровня техники (например, см. Абуапсеб Огдашс Сйет151гу, 411 ебйюп. Магсй, 1епу, 1о1т ЮПеу & 8оп§, Ыете Уогк, 1992).

Фрагмент, обеспечивающий мостик из X атомов и линкер, обеспечивающий мостик из X атомов между двумя другими фрагментами означают, что длина цепи атомов, которая непосредственно соединяет два других фрагмента, составляет X атомов. Если X приведен как интервал (например, Х₁-Х₂), то длина цепи атомов составляет как минимум X! и не более Х₂ атомов. Следует понимать, что цепь атомов может быть образована комбинацией атомов, в том числе, например, атомами углерода, азота, серы и кислорода. Дополнительно, каждый атом может необязательно быть соединен с одним или больше заместителями, если позволяет валентность. Кроме того, цепь атомов может образовывать часть кольца. Соответственно в одном из вариантов фрагменты, обеспечивающие мостик длиной X атомов между двумя другими фрагментами (Я и Я'), могут быть представлены как ЯДЬ^-Я', где каждый Ь независимо выбран из группы, состоящей из СЯЯ', ΝΒ, О, 8, СО, С8, С=ИЯ....., 8О, 8О₂ и т.п., где любые два или больше Я, Я', Я и Я.....вместе могут образовывать замещенное или незамещенное кольцо.

Нитро обозначает радикал -ΝΟ₂.

Оксаалкил обозначает алкил, как определено выше, за исключением того, что один или больше углеродных атомов, которые образуют алкильную цепь, заменены на атомы кислорода (-О- или -ОЯ, где Я представляет собой водород или дополнительный заместитель). Например, окса(С_1-10)алкил обозначает цепь, содержащую от 1 до 10 атомов углерода и один или больше атомов кислорода.

Оксоалкил обозначает алкил, как определено выше, за исключением того, что один или больше углеродных атомов, которые образуют алкильную цепь, заменены на карбонильные группы (-С(=О)- или -С(=О)-Я, где Я представляет собой водород или дополнительный заместитель). Карбонильная группа может быть альдегидом, кетоном, сложным эфиром, амидом, кислотой или галогенангидридом кислоты. Например, оксо(С_1-10)алкил обозначает цепь, содержащую от 1 до 10 атомов углерода и одну или больше карбонильных групп.

Окси обозначает радикал -О- или -ОЯ, где Я представляет собой водород или дополнительный заместитель. Соответственно предусматривается, что радикал окси может быть дополнительно замещен разнообразными заместителями с образованием разнообразных оксигрупп, в том числе гидрокси, алкокси, арилокси, гетероарилокси или карбонилокси.

Фармацевтически приемлемый означает пригодность для получения фармацевтической компози

- 6 019723 ции, которая в целом безопасна, нетоксична и не обладает другими нежелательными свойствами ни с биологической, ни с других точек зрения, в том числе, является пригодной для ветеринарного применения, а также для применения в медицине и фармации.

Термин фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество обозначает вспомогательные вещества, которые обычно используют для получения фармацевтических композиций, и такое вещество должно иметь чистоту фармацевтической категории и быть нетоксичным в используемых количествах. В целом такие вещества представляют собой твердый, полутвердый или жидкий материал, который может служить носителем или средой для активного ингредиента или облегчать хранение, введение или производство композиции. Некоторые примеры фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ можно найти в Кеттдои'к Рйагтасеибса1 8с1Спсс5 и НаибЬоок о£ Рйагтасеийса1 ΕχοίρίοηΚ и они включают разбавители, растворители, носители, мазевые основы, связующие средства, дезинтегранты, смазывающие средства, средства для улучшения скольжения, подсластители, вкусовые добавки, гелевые основы, матрицы с контролируемым высвобождением, стабилизаторы, консерванты, растворители, суспендирующие средства, буферные вещества, эмульгаторы, красители, пропелленты, средства для нанесения покрытия и т.д.

Фармацевтически приемлемые соли обозначают соли соединений по данному изобретению, которые являются фармацевтически приемлемыми, как определено выше, и которые обладают целевой фармакологической активностью. Такие соли включают кислотно-аддитивные соли, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористо-водородная кислота, бромоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п.; или с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, гептановая кислота, циклопентапропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, о-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этансульфоновая кислота, 2гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, п-хлорбензолсульфоновая кислота, 2нафталинсульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, сульфокамфорная кислота, 4метилбицикло[2.2.2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 4,4'-метилен-бис-(3гидрокси-2-ен-1-карбонова кислота), 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, третбутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п.

Фармацевтически приемлемые соли также включают основно-аддитивные соли, которые могут быть образованы при наличии кислотных протонов, способных реагировать с неорганическими или органическими основаниями. Подходящие неорганические основания включают гидроксид натрия, карбонат натрия, гидроксид калия, гидроксид алюминия и гидроксид кальция. Подходящие органические основания включают этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, Ν-метилглюкамин и т.п.

Полициклическое кольцо включает бициклические и полициклические кольца. Отдельные кольца, из которых состоит полициклическое кольцо, могут быть конденсированными, спиросоединенными или соединенными мостиком.

Термин пролекарство обозначает соединение, которое ίη у1уо превращается метаболическим путем в ингибитор по данному изобретению. Пролекарство непосредственно может обладать или не обладать активностью по отношению к данному целевому белку. Например, соединение, содержащее гидроксигруппу, можно вводить в виде сложного эфира, который превращается путем гидролиза ίη угуо в гидроксильное соединение. Подходящие сложные эфиры, которые могут быть преобразованы ίη у1уо в гидроксильные соединения, включают ацетаты, цитраты, лактаты, фосфаты, тартраты, малонаты, оксалаты, салицилаты, пропионаты, сукцинаты, фумараты, малеаты, метилен-бис-Ь-гидроксинафтоаты, гентизаты, изетионаты, ди-п-толуоилтартраты, метансульфонаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, птолуолсульфонаты, циклогексилсульфаматы, хинаты, сложные эфиры аминокислот и т.п. Подобным образом соединение, содержащее аминогруппу, можно вводить как амид, который превращается гидролизом ίη у1уо в аминное соединение.

Термин защищенные производные обозначает производные ингибиторов, в которых реакционноспособная группа или группы блокированы защитными группами. Защищенные производные пригодны для получения ингибиторов или сами по себе могут быть активными как ингибиторы. Всеобъемлющий перечень подходящих защитных групп можно найти в Т.0. Стен. Рго1ес1шд Сгоирк ίη Огдашс ЗуиШечч 3гб ебйющ 1о1т 011еу & 8оп§, 1пс. 1999.

Кольцо и система колец обозначает карбоциклическую или гетероциклическую систему и включает ароматические и неароматические системы. Система может быть моноциклической, бициклической или полициклической. Кроме того, для бициклических и полициклических систем отдельные кольца, которые включают полициклическое кольцо, могут быть конденсированными, спиросоединенными или соединенными мостиком.

Субъект и больной (пациент) включает человека, млекопитающих, которые не принадлежат к Ното 5ар1е1'15 (например, собаки, кошки, кролики, крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы, свиньи,

- 7 019723 олени и т.п.), и животных, которые не принадлежат к млекопитающим (например, птицы и т.п.).

Заместитель, который превращается в водород ίη νίνο, обозначает любую группу, которая превращается в атом водорода под действием ферментов или химических процессов, в том числе, не ограничиваясь ими, гидролиза и гидрогенолиза. Примеры включают группы, которые подвергаются гидролизу, например ацильные группы, группы, которые содержат оксикарбонильную группу, остатки аминокислот, пептидные остатки, о-нитрофенилсульфенил, триметилсилил, тетрагидропиранил, дифенилфосфинил и т.п. Примеры ацильных групп включают формил, ацетил, трифторацетил и т.п. Примеры групп, содержащих оксикарбонильные группы, включают этоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил [(СН₃)₃С-ОСО-], бензилоксикарбонил, п-метоксибензилоксикарбонил, винилоксикарбонил, в-(птолуолсульфонил)этоксикарбонил и т.п. Примеры подходящих остатков аминокислот включают собственно остатки аминокислот и остатки аминокислот, защищенные с помощью защитных групп. Подходящие остатки аминокислот включают, не ограничиваясь ими, остатки С1у (глицин), А1а (аланин; 0Ή₃0Ή(ΝΗ_;)0Ό-). Агд (аргинин), Акп (аспарагин), Акр (аспарагиновая кислота), Сук (цистеин), С1и (глутаминовая кислота), Ηίκ (гистидин), Не (изолейцин), Ьеи (лейцин; (СН^СНСНгСНСЛ^СО-), Ьук (лизин), Мс1 (метионин), РЬе (фенилаланин), Рго (пролин), 8ег (серин), ТНг (треонин), Тгр (триптофан), Туг (тирозин), Уа1 (валин), Ννα (норвалин), Нке (гомосерин), 4-Нур (4-гидроксипролин), 5-Ну1 (5гидроксилизин), Огп (орнитин) и β-Λ1α. Примеры подходящих защитных групп включают группы, которые типично используются в синтезе пептидов, в том числе ацильные группы (такие как формил и ацетил), арилметилоксикарбонильные группы (такие как бензилоксикарбонил и п-нитробензилоксикарбонил), трет-бутоксикарбонильные группы [(СН₃)₃С-ОСО-] и т.п. Подходящие пептидные остатки включают пептидные остатки, содержащие от 2 до 5 и необязательно от 2 до 3 вышеуказанных остатков аминокислот. Примеры таких пептидных остатков включают, не ограничиваясь ими, остатки таких пептидов, как А1а-А1а [Сн₃СН(МН₂)СО-МНСН(СН₃)СО-], С1у-РНе, Ννα-Ννα, А1а-РЬе, С1у-С1у, С1у-С1у-С1у, А1а-Ме1, МеГМеН Ьеи-Ме1 и А1а-Ьеи. Остатки указанных аминокислот или пептидов могут присутствовать в стереохимических конфигурациях Ό-формы, Ь-формы или их смеси. Кроме того, остаток аминокислоты или пептида может содержать асимметричный атом углерода. Примеры подходящих остатков аминокислот, которые содержат асимметричный атом углерода, включают остатки А1а, Ьеи, РЬе, Тгр, Пуа, Уа1, МеН 8ег, Ьук, ТЬг и Туг. Пептидные остатки, содержащие асимметричный атом углерода, включают пептидные остатки, содержащие как составляющие один или больше остатков аминокислот, которые содержат асимметричный атом углерода. Примеры подходящих защитных групп для аминокислот включают группы, которые типично используются в синтезе пептидов, в том числе ацильные группы (такие как формил и ацетил), арилметилоксикарбонильные группы (такие как бензилоксикарбонил и пнитробензилоксикарбонил), трет-бутоксикарбонильные группы [(СН₃)₃С-ОСО-] и т.п. Другие примеры заместителей, которые превращаются в водород ίη νίνο, включают группы, которые удаляются восстановительным гидрогенолизом. Примеры подходящих групп, которые удаляются восстановительным гидрогенолизом, включают, не ограничиваясь ими, арилсульфонильные группы (такие как отолуолсульфонил); метильные группы, замещенные фенилом или бензилокси (такие как бензил, тритил и бензилоксиметил); арилметоксикарбонильные группы (такие как бензилоксикарбонил и о-метоксибензилоксикарбонил) и галогеноэтоксикарбонильные группы (такие как β,β,β-трихлорэтоксикарбонил и β -йодэтоксикарбонил).

Сульфинил обозначает радикал -8О- и/или -8О-К, где К представляет собой водород или дополнительный заместитель. Следует отметить, что сульфинильный радикал может быть дополнительно замещен разнообразными заместителями с образованием разнообразных сульфинильных групп, в том числе сульфиновые кислоты, сульфинамиды, сульфинильные эфиры и сульфоксиды.

Сульфонил обозначает радикал -8О₂- и/или -8О₂-К, где К представляет собой водород или дополнительный заместитель. Следует отметить, что сульфонильный радикал может быть дополнительно замещен различными заместителями для образования разнообразных сульфонильных групп, в том числе сульфониевые кислоты, сульфонамиды, сульфонатные эфиры и сульфоны.

Терапевтически эффективное количество обозначает количество, которое при введении животному для лечения заболевания является достаточным для обеспечения такого лечения заболевания.

Тио обозначает замену кислорода на серу и включает, не ограничиваясь ими, группы, содержащие -8К, -8- и =8.

Тиоалкил обозначает алкил, как определено выше, за исключением того, что один или больше углеродных атомов, которые образуют алкильную цепь, заменены на атомы серы (-8- или -8-К, где К представляет собой водород или дополнительный заместитель). Например, тио(С1_-ю)алкил обозначает цепь, содержащую от 1 до 10 атомов углерода и один или больше атомов серы.

Тиокарбонил обозначает радикал -С(=8)- и/или -С(=8)-К, где К представляет собой водород или дополнительный заместитель. Следует отметить, что тиокарбонильный радикал может быть дополнительно замещен различными заместителями для образования разнообразных тиокарбонильных групп, в том числе тиокислот, тиоамидов, тиоэфиров и тиокетонов.

Лечение или терапия обозначает любое введение соединения по данному изобретению и вклю

- 8 019723 чает:

(1) профилактику развития заболевания у животного, которое может быть склонным к заболеванию, но еще не испытывает, или у которого не проявляется патология или симптоматика заболевания;

(2) подавление заболевания у животного, которое испытывает или у которого проявляется патология или симптоматика заболевания (то есть остановка последующего развития патологии и/или симптоматики); или (3) улучшение при заболевании состояния животного, которое испытывает или у которого проявляется патология или симптоматика заболевания (то есть обращение патологии и/или симптоматики).

Относительно всех определений, приведенных в данном описании, следует отметить, что определения следует интерпретировать, как открытые множества, т.е. кроме указанных могут быть включены дополнительные заместители. Таким образом, (С₁)алкил показывает, что присутствует один углеродный атом, но не показывает заместителей, которые присутствуют при углеродном атоме. Таким образом, (С₁)алкил включает метил (т.е. -СН₃), а также -СКК'К, где каждый из К, К' и К может независимо представлять собой водород или дополнительный заместитель, где атом, присоединенный к атому углерода, представляет собой гетероатом или циано. Таким образом, например, СР₃, СН₂ОН и СН₂СЫ - все представляют собой (СДалкилы. Также, например, термины алкиламино и т.п. включают диалкиламино и т.п.

Соединение, представленное формулой с пунктирной связью, предназначено включать формулы, которые необязательно содержат 0, 1 или больше двойных связей, например, как показано ниже

представляет

Кроме того, атомы, из которых состоят соединения по данному изобретению, предназначены включать все изотопные формы таких атомов. Изотопы в данном описании включают атомы с одинаковым атомным числом, но разной массой. Для общего примера, не ограничиваясь ими, изотопы водорода включают тритий и дейтерий и изотопы атома углерода включают ¹³С и ¹⁴С.

Подробное описание изобретения

Данное изобретение касается соединений, которые могут быть применены для ингибирования сМЕТ. Данное изобретение также касается фармацевтических композиций, наборов и промышленных изделий, которые содержат такие соединения. Кроме того, данное изобретение касается способов и промежуточных соединений, подходящих для получения соединений. Дополнительно, данное изобретение касается способов применения указанных соединений. Следует отметить, что соединения по данному изобретению могут также обладать активностью по отношению к другим членам того же семейства белков и, таким образом, могут применяться при патологических состояниях, связанных с указанными другими членами семейства.

сМЕТ принадлежит к семейству фосфорилтрансферазных ферментов, которые перемещают фосфорсодержащие группы с одного субстрата на другой. В соответствии с конвенцией, сформулированной Комиссией по номенклатуре Международного сообщества биохимии и молекулярной биологии (ШВМВ), ферментам данного типа присвоены номера Комиссии по ферментам (ЕС), которые начинаются с 2.7.-.- (см., Вайоек А, Тке ΕΝΖΥΜΕ йа!аЬаке ίη ΝιιοΚίο Аайк Кек. 28:204-305 (2000)). Киназы - это класс ферментов, которые функционируют, катализируя перенос фосфорила. Протеинкиназы составляют одно из наибольших подсемейств структурно родственных фосфорилтрансфераз и ответственны за контроль широкого спектра процессов клеточного превращения сигнала (см., Нагй1е, О. апй Напкк, 8. (1995) Тке Рго1ет Кшаке Раек Воок, I апй II, Аеайешк Ргекк, 8ап О1едо, СА).

Нарушения регуляции сМЕТ вовлечены в механизм таких заболеваний, как различные виды рака (в том числе карцинома [например, мочевого пузыря, молочной железы, шейки матки, холангиокарцинома,

- 9 019723 ободочной и прямой кишки, пищевода, желудка, головы и шеи, почки, печени, легкого, назофарингеальной области, яичника, поджелудочной железы, предстательной железы и щитовидной железы]; скелетномышечная саркома [например, остеосаркома, синовиальная саркома и рабдомиосаркома]; саркома мягких тканей [например, злокачественная фиброзная гистиоцитома/фибросаркома, лейомиосаркома и саркома Капоши]; злокачественные новообразования кроветворных органов [например, множественная миелома, лимфома, Т-клеточный лейкоз взрослых, острый миелогенный лейкоз и хронический миелоидный лейкоз]; а также другие новообразования [например, глиобластома, астроцитома, меланома, мезотелиома и опухоль Вильмса]); и пролиферативные заболевания (например, миелопролиферативные расстройства, атеросклероз и легочный фиброз).

Следует отметить, что соединения по данному изобретению могут также обладать ингибирующей активностью по отношению к другим членам семейства рецепторных тирозинкиназ и, таким образом, могут быть применены при патологических состояниях, связанных с указанными другими членами семейства. В частности, соединения по данному изобретению могут применяться для модуляции активности других белков в подсемействе Ме! (например, Кои и 8еа).

Ингибиторы сМЕТ.

В одном из аспектов данное изобретение касается соединений, пригодных в качества ингибиторов сМЕТ. В одном из вариантов ингибиторы сМЕТ по данному изобретению включают соединение

или его полиморф, сольват, сложный эфир, таутомер, энантиомер, фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, где

С представляет собой Ν;

представляет собой СК₅;

К представляет собой СК·,;

М представляет собой СК₇;

Ь представляет собой СЕ₂;

Т представляет собой СК₈;

и представляет собой СК₉;

V представляет собой СК₁₀; представляет собой СК₁₁;

X представляет собой Ν;

Υ представляет собой С;

Ζ представляет собой Ν;

К1 представлен формулой

К2 представляет собой водород;

К5 представляет собой водород;

Кб представляет собой водород;

К7 представляет собой водород;

К₈ представляет собой водород;

К9 представляет собой водород;

К₁₀ выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, циано, метила, СЕ₃ и фенила, замещенного 0, 1, 2, 3, 4 или 5 К_20Ь, радикала формулы и радикала формулы

К₁₁ представляет собой водород;

К₁₉ представляет собой циклопропил;

Ь представляет собой линкер, выбранный из группы, состоящей из -(СК₂₇К₂₈)_Г, где г равен 1;

К27 представляет собой фтор;

К28 представляет собой фтор;

Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций Т

- 10 019723 представляет собой СК₈.

В другой вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций и представляет собой СКу.

Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций V представляет собой СКщ.

Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций представляет собой СК₁₁

Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций X представляет собой N.

В другой вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций каждый из С, X и Ζ представляет собой N.

Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций каждый из X и Ζ представляет собой N. В другой вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций С представляет собой Ν, 1 представляет собой СК₅, К представляет собой СК₆ и М представляет собой СК₇. Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций один и только один из С и представляет собой Ν. В другой вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций С представляет собой N и представляет собой СК₁₁.

В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций С представляет собой N и каждый из 1, К, М, Т, и, V и представляет собой СН. Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций С представляет собой N 1; каждый из К, М, Т, и и представляет собой СН и V представляет собой СК₁₀.

В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций каждый из К₅, К₆, К₇, К₈ и представляет собой водород.

В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁ представлен формулой о

где К.|₉ представляет собой циклопропил.

Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₂ представляет собой водород.

Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₃ отсутствует.

Еще в одной дополнительной представляет собой водород.

Еще в одной дополнительной представляет собой водород.

Еще в одной дополнительной вариации вариации каждого каждого из из приведенных приведенных выше выше вариантов вариантов вариаций К₅ вариаций К₆ вариаций К₇ представляет собой водород. Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К представляет собой водород.

В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ представляет собой водород. Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ представляет собой галоген. В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ выбран из группы, состоящей из С1, Вг и I.

В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ представляет собой метил. Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ представляет собой -СЕ₃. В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ представляет собой циано.

Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ представлен формулой вариации каждого из приведенных выше вариантов

где К._20|, выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, (С1_-5)алкила, гидрокси(С1_-6)алкила, (С_3-1₂)циклоалкила, фенила и гетеро(С_4-10)арила.

Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₁₀ представлен формулой

где К_20Ь выбран из группы, состоящей из водорода, (С_1-5)алкила, галогена, гидрокси(С_1-6)алкила, фенила, (С_3-12)циклоалкила и гетеро(С_4-10)арила.

Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20| представляет собой водород. В другой вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20| представляет собой (С_1-5)алкил. Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и

- 11 019723 вариаций К₂оь представляет собой метил. Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₂₀ь представляет собой этил. В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20Ь представляет собой пропил. Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20Ь представляет собой фенил. В другой вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20Ь представляет собой (С_3-1₂)циклоалкил. Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20Ь представляет собой циклогексил. Еще в одной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20Ь представляет собой гетеро(С_4-10)арил. В дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20Ь представляет собой гидрокси(С_1-6)алкил. Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₂₀ь представляет собой гидроксиэтил.

Еще в одной дополнительной вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К₂₀ь представляет собой галоген. В другой вариации каждого из приведенных выше вариантов и вариаций К_20Ь представляет собой фтор.

Предусматривается, что соединения по данному изобретению могут существовать в форме фармацевтически приемлемой соли.

В другом аспекте предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций; и одно или больше фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. В одной из конкретных вариаций композиция представляет собой твердый препарат, приспособленный для перорального введения. В другой конкретной вариации композиция представляет собой жидкий препарат, приспособленный для перорального введения. Еще в одной конкретной вариации композиция представляет собой таблетку. Еще в одной конкретной вариации композиция представляет собой жидкий препарат, приспособленный для парентерального введения.

В данном изобретении также предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций, где композиция приспособлена для введения способом, выбранным из группы, состоящей из перорального, перентерального, интраперитонеального, внутривенного, внутриартериального, трансдермального, сублингвального, внутримышечного, ректального, через слизистую оболочку, интраназального, липосомального, ингаляционного, вагинального, внутриглазного, местного применения (например, с помощью катетера или шунта), подкожного, в жировую ткань, внутрисуставного и интратекального введения.

В другом аспекте предлагается набор, включающий соединение по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций; и инструкции, которые включают одну или больше форм информации, выбранной из группы, состоящей из указания на патологическое состояние, при котором следует вводить композицию, информации относительно хранения композиции, информации относительно дозирования и/или инструкции относительно введения композиции. В одной из конкретных вариаций набор включает соединение в многодозовой форме.

Еще в одном аспекте предлагается промышленное изделие, включающее соединение по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций; и упаковочные материалы. В одной из вариаций упаковочный материал включает емкость для помещения соединения. В одной из конкретных вариаций емкость включает этикетку, где указаны один или больше членов группы, состоящей из патологического состояния, при котором следует вводить соединение, информации относительно хранения, информации относительно дозирования и/или инструкций относительно того, как вводить соединение. В другой вариации промышленное изделие включает соединение в многодозовой форме.

В последующем аспекте предлагается способ лечения, включающий введение субъекту соединения по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций.

В другом аспекте предлагается способ ингибирования сМЕТ, включающий обеспечение контакта сМЕТ с соединением по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций.

В другом аспекте предлагается способ ингибирования сМЕТ, включающий обеспечение присутствия соединения по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций в организме субъекта с целью ингибировать сМЕТ ίη νίνο.

В дальнейшем аспекте предлагается способ ингибирования сМЕТ, включающий введение субъекту первого соединения, которое превращается ίη νίνο во второе соединение, где второе соединение ингибирует сМЕТ ίη νίνο, причем второе соединение представляет собой соединение по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций.

В другом аспекте предлагается способ лечения патологического состояния, при котором активность сМЕТ проявляется и способствует патологии и/или симптоматике патологического состояния, где способ включает обеспечение присутствия соединения по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций в организме субъекта в терапевтически эффективном количестве для патологического состояния.

Еще в одном аспекте предлагается способ лечения патологического состояния, при котором активность сМЕТ проявляется и способствует патологии и/или симптоматике патологического состояния, где способ включает введение субъекту соединения по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций, где соединение присутствует в организме субъекта в терапевтически эффективном количестве для патологического состояния.

- 12 019723

В последующем аспекте предлагается способ лечения патологического состояния, при котором активность сМЕТ проявляется и способствует патологии и/или симптоматике патологического состояния, где способ включает введение субъекту первого соединения, которое превращается ίη νίνο во второе соединение, где второе соединение ингибирует сМЕТ ίη νίνο, причем второе соединение представляет собой соединение по любому из упомянутых выше вариантов и вариаций.

В одной из вариаций каждого из упомянутых выше способов патологическое состояние представляет собой рак. В конкретных вариациях рак выбран из группы, состоящей из карциномы [например, мочевого пузыря, молочной железы, шейки матки, холангиокарциномы, ободочной и прямой кишки, пищевода, желудка, головы и шеи, почки, печени, легкого, назофарингеальной области, яичника, поджелудочной железы, предстательной железы и щитовидной железы]; скелетно-мышечной саркомы [например, остеосаркома, синовиальная саркома и рабдомиосаркома]; саркомы мягких тканей [например, злокачественная фиброзная гистиоцитома/фибросаркома, лейомиосаркома и саркома Капоши]; злокачественных новообразований кроветворных органов [например, множественная миелома, лимфома, Тклеточный лейкоз взрослых, острый миелогенный лейкоз и хронический миелоидный лейкоз]; а также других новообразований [например, глиобластома, астроцитома, меланома, мезотелиома и опухоль Вильмса]). В других конкретных вариациях рак выбран из группы, состоящей из рака желудка, рака легкого, рака ободочной и прямой кишки, рака молочной железы и других солидных опухолей.

В другой вариации каждого из упомянутых выше способов патологическое состояние - это пролиферативное заболевание. В конкретных вариациях пролиферативное заболевание выбрано из группы, состоящей из миелопролиферативных расстройств, атеросклероза и легочного фиброза.

Соли, гидраты и пролекарства ингибиторов сМЕТ.

Следует понимать, что соединения по данному изобретению могут существовать и необязательно быть введены в форме солей, гидратов и пролекарств, которые превращаются ίη νίνο в соединения по данному изобретению. Например, в пределах контекста данного изобретения находится превращение соединений по данному изобретению в фармацевтически приемлемые соли и применение их в форме таких солей, полученных с разнообразными органическими и неорганическими кислотами и основаниями в соответствии с методиками, хорошо известными из уровня техники.

Если соединения по данному изобретению могут существовать в форме свободного основания, соединения могут быть получены в форме фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли путем реакции соединения в форме свободного основания с фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислотой, например хлористо-водородной, например гидрохлорид, гидробромид, гидройодид; другими минеральными кислотами и их соответствующими солями, такими как сульфат, нитрат, фосфат и т.п.; и алкил- и моноарилсульфонатами, такими как этансульфонат, толуолсульфонат и бензолсульфонат; и другими органическими кислотами и их соответствующими солями, такими как ацетат, тартрат, малеат, сукцинат, цитрат, бензоат, салицилат и аскорбат. Дополнительные кислотно-аддитивные соли по данному изобретению включают, не ограничиваясь ими: адипат, альгинат, аргинат, аспартат, бисульфат, бисульфит, бромид, бутират, камфорат, камфорсульфонат, каприлат, хлорид, хлорбензоат, циклопентанпропионат, биглюконат, дигидрофосфат, динитробензоат, додецилсульфат, фумарат, галактерат (с муциновой кислотой), галактуронат, глюкогептонат, глюконат, глутамат, глицерофосфат, гемисукцинат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гиппурат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2гидроксиэтансульфонат, йодид, изетионат, изобутират, лактат, лактобионат, малат, малонат, манделат, мета-фосфат, метансульфонат, метилбензоат, моногидрофосфат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, олеат, памоат, пектинат, персульфат, фенилацетат, 3-фенилпропионат, фосфат, фосфонат и фталат. Следует отметить, что формы свободного основания обычно будут несколько отличаться от соответствующих солевых форм с точки зрения физических свойств, таких как растворимость в полярных растворителях, но с других точек зрения соли, равноценные соответствующим формам свободного основания для целей данного изобретения.

Если соединения по данному изобретению могут существовать в форме свободной кислоты, фармацевтически приемлемая основно-аддитивная соль может быть получена путем реакции соединения в форме свободной кислоты с фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим основанием. Примеры таких оснований - это гидроксиды щелочных металлов, в том числе гидроксиды калия, натрия и лития; гидроксиды щелочно-земельных металлов, такие как гидроксиды бария и кальция; алкоксиды щелочных металлов, например калия этанолят и натрия пропанолят; и разнообразные органические основания, такие как гидроксид аммония, пиперидин, диэтаноламин и Ν-метилглутамин. Также включены алюминиевые соли соединений по данному изобретению. Дополнительные основноаддитивные соли по данному изобретению включают, не ограничиваясь ими: соли меди, железа(11), железа(111), лития, магния, марганца(П), марганца(Ш), калия, натрия и цинка. Органические основноаддитивные соли включают, не ограничиваясь ими, соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, в том числе природных замещенных аминов, циклических аминов и основных ионообменных смол, например аргинина, бетаина, кофеина, хлорпрокаина, холина, Ν,Ν'-дибензилетилендиамина (бензатина), дициклогексиламина, диэтаноламина, 2-диетиламиноэтанола, 2-диметиламиноэтанола, этаноламина, этилендиамина, Ν-этилморфолина, Ν-этилпиперидина, глюкамина, глюко

- 13 019723 замина, гистидина, гидрабамина, изопропиламина, лидокаина, лизина, меглумина, Ν-метил-Эглюкамина, морфолина, пиперазина, пиперидина, полиаминной смолы, прокаина, пуринов, теобромина, триэтаноламина, триэтиламина, триметиламина, трипропиламина и трис-(гидроксиметил)метиламина (трометамина). Следует отметить, что формы свободных кислот обычно будут несколько отличаться от соответствующих солевых форм с точки зрения физических свойств, таких как растворимость в полярных растворителях, но с других точек зрения соли, равноценные соответствующим формам свободных кислот для целей данного изобретения.

Данное изобретение также касается Ν-оксидов соединений по данному изобретению. Ν-Оксиды соединений по данному изобретению могут быть получены способами, известными среднему специалисту в данной области. Например, Ν-оксиды могут быть получены путем обработки неокисленной формы соединения окислителем (например, трифторперуксусная кислота, пермалеиновая кислота, пербензойная кислота, перуксусная кислота, мета-хлорпероксибензойная кислота и т.п.) в подходящем инертном органическом растворителе (например, галогенированный углеводород, такой как дихлорметан) при температуре приблизительно 0°С. Альтернативно, Ν-оксиды соединений могут быть получены из Ν-оксида соответствующего начального материала. Следует понимать, что Ν-оксиды могут быть получены метаболическими путями ίη νίΐτο и ίη νίνο.

Производные соединений по данному изобретению в форме пролекарств могут быть получены путем модификации заместителей в соединениях по данному изобретению таким образом, что дальше они превращаются ίη νίνο в другой заместитель. Предусматривается, что во многих случаях собственно пролекарства также находятся в пределах контекста соединений по данному изобретению. Например, пролекарства могут быть получены путем реакции соединения с карбамилирующим агентом (например, 1,1ацилоксиалкилкарбонохлоридат, пара-нитрофенилкарбонат и т.п.) или ацилирующим средством. Дополнительные примеры способов получения пролекарств описаны в 8аи1шет с1 а1.(1994), Вюотдашс апб Меб1сша1 Сйет1к1гу Ьейетк, νοί. 4, р. 1985.

Также могут быть получены защищенные производные соединений по данному изобретению. Примеры способов, подходящих для введения защитных групп и их удаления, могут быть найдены в Т.А. Стеепе, Рго1есбпд Сгоирк ίη Огдашс 8упШекщ 3гб ебйюп, Ιοίιη Абеу & 8οηκ. 1пс. 1999.

Соединения по данному изобретению также могут быть подходящим образом получены или образованы в ходе способа по изобретению как сольваты (например, гидраты). Гидраты соединений по данному изобретению могут быть подходящим образом получены перекристаллизацией из смеси водного/органического растворителя с использованием органических растворителей, таких как диоксин, тетрагидрофуран или метанол.

Фармацевтически приемлемая соль в данном описании предназначена охватывать любое соединение по данному изобретению, которое применяется в форме его соли, особенно, если соль улучшает фармакокинетические свойства соединения по сравнению со свободной формой соединения или другой солевой формой соединения. Форма фармацевтически приемлемой соли может также обеспечивать желаемые фармакокинетические свойства соединению, которыми оно до этого не обладало, и может даже положительно влиять на фармакодинамику соединения с точки зрения его терапевтической активности в организме. Пример фармакокинетических свойств, на которые может быть осуществлено благоприятное влияние, - это способ переноса соединения сквозь мембраны клеток, который, в свою очередь, может непосредственно и положительно влиять на абсорбцию, распределение, биотрансформацию и экскрецию соединения. Хотя способ введения фармацевтической композиции является важным, и разнообразные анатомические, физиологические и патологические факторы могут быть критичными для биодоступности, растворимость соединения обычно зависит от характера ее конкретной солевой формы, которую применяют. Специалисту в данной области будет понятно, что водный раствор соединения обеспечит самую быструю абсорбцию соединения в организме данного субъекта, тогда как растворы в липидах и суспензии, а также твердые лекарственные формы будут приводить к более медленной абсорбции соединения.

Композиции, которые содержат ингибиторы сМЕТ.

Широкий спектр композиций и способов введения может применяться в сочетании с соединениями по данному изобретению. Такие композиции могут содержать в дополнение к соединениям по данному изобретению традиционные фармацевтические вспомогательные вещества и другие традиционные фармацевтически неактивные агенты. Кроме того, композиции могут содержать активные агенты в дополнение к соединениям по данному изобретению. Указанные дополнительные активные агенты могут включать дополнительные соединения по изобретению и/или одно или больше других фармацевтически активных средств.

Композиции могут существовать в газообразной, жидкой, полужидкой или твердой форме, изготовленной таким способом, чтобы быть пригодными для способа введения, который применяется. Для перорального введения обычно используются капсулы и таблетки. Для парентерального введения обычно используется разведение лиофилизированного порошка, полученного, как описано в данном описании.

Композиции, которые содержат соединения по данному изобретению, можно вводить или совместно вводить перорально, парентерально, интраперитонеально, внутривенно, внутриартериально, транс

- 14 019723 дермально, сублингвально, внутримышечно, ректально, сквозь слизистую оболочку, интраназально, липосомально, ингаляционно, вагинально, в глаза, применять местно (например, с помощью катетера или шунта), вводить подкожно, в жировую ткань, внутрисуставно или интратекально. Соединения и/или композиции по изобретению также можно вводить или совместно вводить в дозированных лекарственных формах с пролонгированным высвобождением.

Ингибиторы сМЕТ и композиции, которые их содержат, можно вводить или совместно вводить в любой традиционной лекарственной форме. Совместное введение в контексте данного изобретения обозначает введение более чем одного терапевтического агента, один из которых включает ингибитор сМЕТ, в ходе координированного лечения, чтобы достичь улучшенного клинического результата. Такое совместное введение также может иметь место в одно и то же время, т.е. осуществляться на протяжении периодов времени, которые частично перекрываются.

Растворы или суспензии, которые применяются для парентерального, внутрикожного, подкожного введения или местного применения, необязательно могут содержать один или больше из следующих компонентов: стерильный разбавитель, такой как вода для инъекций, раствор соли, нелетучее масло, полиэтиленгликоль, глицерин, пропиленгликоль или другой синтетический растворитель; противомикробные средства, такие как бензиловый спирт и метилпарабен; антиоксиданты, такие как аскорбиновая кислота и бисульфит натрия; хелатные агенты, такие как этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА); буферные вещества, такие как ацетаты, цитраты и фосфаты; средства для коррекции тоничности, такие как хлорид натрия или глюкоза, и средства для регуляции кислотности или щелочности композиции, такие как щелочные или кислотные вещества либо буферные вещества, например карбонат, бикарбонаты, фосфаты, хлористо-водородная кислота, а также органические кислоты, например уксусная и лимонная кислоты. Парентеральные препараты необязательно могут быть помещены в ампулы, одноразовые шприцы или одно- или многодозовые флаконы, изготовленные из стекла, пластичного материала или другого походящего материала.

Если соединениям по данному изобретению свойственна недостаточная растворимость, могут быть применены способы солюбилизации соединения. Такие способы известны специалисту в данной области и включают, не ограничиваясь ими, использование сорастворителя, такого как диметилсульфоксид (ДМСО), использование поверхностно-активных веществ, таких как Твин, или растворение в растворе натрия бикарбоната. Производные соединений, такие как пролекарства соединений, также могут быть использованы в рецептуре эффективных фармацевтических композиций.

При смешивании или добавлении соединений по данному изобретению к композиции могут образовываться растворы, суспензии, эмульсии и т.п. Форма полученной композиции будет зависеть от целого ряда факторов, в том числе предусмотренного способа введения и растворимости соединения, в выбранном носителе или растворителе. Эффективная концентрация, необходимая для облегчение состояния при конкретном заболевании, может быть определена эмпирически.

Композиции по данному изобретению необязательно предлагаются для введения человеку и животному в дозированных лекарственных формах, таких как таблетки, капсулы, пилюли, порошки, сухие порошки для ингаляторов, гранулы, стерильные растворы или суспензии для парентерального введения, растворы или суспензии для перорального введения, эмульсии масло-в-воде, содержащие подходящие количества соединений, особенно фармацевтически приемлемых солей указанных соединений, предпочтительно натриевых солей. Фармацевтически и терапевтически активные соединения и производные указанных компонентов обычно изготавливают и вводят в однодозовых или многодозовых лекарственных формах. Однодозовые формы в данном описании обозначают физически дискретные единицы, подходящие для введения человеку и животному и упакованные индивидуально, как известно из уровня техники. Каждая единица дозы содержит предварительно определенное количество терапевтически активного соединения, достаточное для обеспечения целевого терапевтического эффекта, в сочетании с необходимым фармацевтическим носителем, растворителем или разбавителем. Примеры однодозовых форм включают ампулы и шприцы, индивидуально упакованную таблетку или капсулу. Однодозовые формы можно вводить в виде фракций или множественных доз. Многодозовая форма - это множество идентичных однодозовых форм, упакованных в одну емкость для введения в виде отдельных единиц лекарственной формы. Примеры многодозовых форм включают флаконы, бутылки с таблетками или капсулами или бутылки с пинтой или галлонами жидкости. Таким образом, многодозовая форма - это множество однодозовых форм, которые содержатся в одной упаковке.

В добавление к одному или больше соединений по данному изобретению композиция может содержать разбавитель, такой как лактоза, сахароза, дикальция фосфат или карбоксиметилцелюллоза; смазывающее средство, такое как стеарат магния, стеарат кальция и тальк; связующее средство, такое как крахмал, природные камеди, такие как акациевая камедь, желатин, глюкоза, меласса, поливинилпирролидон, целлюлоза и ее производные, повидон, кроссповидон и другие связующие средства, известные специалисту в данной области. Жидкие композиции для фармацевтического введения могут, например, быть получены путем растворения, диспергирования или смешивания другим способом активного соединения, определенного выше, и необязательных фармацевтических адъювантов в носителе, таком как вода, раствор соли, водный раствор глюкозы, глицерин, гликоли, этанол и т.п., с образованием раствора

- 15 019723 или суспензии. По желанию, фармацевтические композиции для введения могут также содержать незначительные количества вспомогательных субстанций, таких как увлажняющие средства, эмульгаторы или солюбилизирующие средства, буферные вещества для коррекции рН и т.п., например ацетат, цитрат натрия, производные циклодекстрина, сорбитана монолаурат, натрия триэтаноламина ацетат, триэтаноламина олеат и другие такие средства. Фактические способы получения таких лекарственных форм известны из уровня техники или будут очевидными для квалифицированных специалистов в данной области; например, см. КеттЦопО Рйагтасеибса1 8с1епсе5, Маск РпЫЫппд Сотрапу, Еа^оп. Ра, Ι5ΐΠ Εάίΐίοη, 1975. Композиция или рецептура для введения в любом случае будет содержать достаточное количество ингибитора по данному изобретению для снижения активности сМЕТ ίη νί\Ό и, таким образом, лечения патологического состояния у субъекта.

Лекарственные формы или композиции необязательно могут содержать одно или больше соединений по данному изобретению в интервале 0,005-100% (мас./мас.), где остальную композицию составляют дополнительные субстанции, такие как описаны в данном описании. Для перорального введения фармацевтически приемлемая композиция необязательно может содержать любое одно или больше традиционных вспомогательных веществ, таких как маннит, лактоза, крахмал, стеарат магния, тальк, производные целлюлозы, натрий кроскармеллоза, глюкоза, сахароза, карбонат магния, сахаринат натрия, тальк фармацевтической категории. Такие композиции включают растворы, суспензии, таблетки, капсулы, порошки, сухие порошки для ингаляторов и рецептуры с пролонгированным высвобождением, такие как, не ограничиваясь ими, имплантаты и микроинкапсулированные системы доставки, а также биодеградирующие, биосовместимые полимеры, такие как коллаген, этиленвинилацетат, полиангидриды, полигликолевая кислота, полиортоэфиры, полимолочная кислота и т.п. Способы получения указанных препаратов известны специалистам в данной области. Композиции необязательно могут содержать 0,01-100% (мас./мас.) одного или больше ингибиторов сМЕТ, необязательно 0,1-95 и необязательно 1-95% (мас./мас.).

Соли, предпочтительно натриевые соли ингибиторов, могут быть введены в композиции с носителями, которые защищают соединение против быстрого выведения из организма, такими как препараты пролонгированного высвобождения или покрытия. Препарат может дополнительно содержать другие активные соединения для получения целевых комбинаций свойств.

Композиции для перорального введения.

Дозированные лекарственные формы для перорального введения могут существовать в форме твердого вещества, геля или жидкости. Примеры твердых лекарственных форм включают, не ограничиваясь ими, таблетки, капсулы, гранулы и насыпные порошки. Более конкретные примеры таблеток для перорального введения включают прессованные, жевательные леденцы и таблетки, на которые может быть нанесено кишечно-растворимое покрытие, сахарное покрытие или пленочное покрытие. Примеры капсул включают твердые или мягкие желатиновые капсулы. Гранулы и порошки могут существовать в нешипучих или шипучих формах. Каждая из них может быть соединена с другими ингредиентами, известными специалистам в данной области.

В некоторых вариантах соединения по данному изобретению введены в твердые лекарственные формы, предпочтительно капсулы или таблетки. Таблетки, пилюли, капсулы, пастилки и т.п. необязательно могут содержать один или больше следующих ингредиентов или соединений подобной природы: связующее средство; разбавитель, дезинтегрант; смазывающее средство; средство для улучшения скольжения; подсластитель и ароматизатор.

Примеры связующих средств, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, микрокристаллическую целлюлозу, трагакантовую камедь, раствор глюкозы, акациевую камедь, раствор желатина, сахарозу и крахмальную пасту.

Примеры смазывающих средств, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, тальк, крахмал, стеарат магния или кальция, ликоподий и стеариновую кислоту.

Примеры разбавителей, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, лактозу, сахарозу, крахмал, каолин, соль, маннит и дикальция фосфат.

Примеры средств для улучшения скольжения, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, коллоидный кремния диоксид.

Примеры дезинтегрантов, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, натрий кроскармеллозу, натрий крахмалгликолят, альгиновую кислоту, кукурузный крахмал, картофельный крахмал, бентонит, метилцеллюлозу, агар и карбоксиметилцеллюлозу.

Примеры красителей, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, любой из зарегистрированных сертифицированных растворимых в воде красителей ΕΌ и С, смеси указанных компонентов и нерастворимых в воде красителей ΕΌ и С, суспендированных на гидрате алюминия оксида.

Примеры подсластителей, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, сахарозу, лактозу, маннит и искусственные подсластители, такие как натрия цикламат и сахарин, а также любое количество сухих ароматизаторов, для распыления.

Примеры ароматизаторов, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими,

- 16 019723 природные ароматизаторы, экстрагированные из растений, например фруктов, и синтетические смеси соединений, которые создают приятное ощущение, например, не ограничиваясь ими, мята перечная и метилсалицилат.

Примеры увлажняющих средств, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, пропиленгликоль моностеарат, сорбитана моноолеат, диэтиленгликоля монолаурат и полиоксиэтиленлауриловый эфир.

Примеры противорвотного покрытия, которое может быть использовано, включают, не ограничиваясь ими, жирные кислоты, жиры, воски, шеллак, аммонизированный шеллак и целлюлозы ацетат фталат.

Примеры пленочного покрытия, которое может быть использовано, включают, не ограничиваясь ими, гидроксиэтилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль 4000 и целлюлозы ацетат фталат.

Если предусматривается пероральное введение, соль соединения необязательно может быть введена в композицию, которая защищает ее от кислой среды желудка. Например, на препарат может быть нанесено кишечно-растворимое покрытие, которое сохраняет его целостность в желудке и обеспечивает высвобождение активного соединения в кишечнике. Композиция может также быть изготовлена в форме препарата в комбинации с антацидным средством или другим таким ингредиентом.

Если единица лекарственной формы представляет собой капсулу, она может необязательно дополнительно включать жидкий носитель, такой как жирное масло. Кроме того, единицы лекарственной формы необязательно могут дополнительно включать различные другие материалы, которые изменяют физическую форму единицы лекарственной формы, например сахарное покрытие и другие кишечнорастворимые средства.

Соединения по данному изобретению также можно вводить как компонент эликсира, суспензии, сиропа, капсулы, спрея, жевательной резинки и т.п. Сироп может необязательно содержать в дополнение к активным соединениям сахарозу как подсластитель и некоторые консерванты, красители и окрашивающие вещества, а также ароматизаторы.

Соединения по данному изобретению также можно смешивать с другими активными ингредиентами, которые не уменьшают целевого эффекта, или с материалами, которые дополняют целевой эффект, такими как антацидные средства, Н₂ блокаторы и мочегонные средства. Например, если соединение применяется для лечения астмы или гипертензии, его можно применять с другими бронходилататорами и антигипертензивными средствами соответственно.

Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые могут входить в состав таблеток, содержащих соединения по данному изобретению, включают, не ограничиваясь ими, связующие средства, смазывающие средства, разбавители, дезинтегранты, красители, ароматизаторы и увлажняющие средства. Покрытые кишечно-растворимой оболочкой таблетки благодаря кишечно-растворимому покрытию устойчивы к действию кислоты в желудке и растворяются или распадаются в нейтральной или щелочной среде кишечника. Покрытые сахарным покрытием таблетки могут представлять собой прессованные таблетки, на которые нанесены разные слои фармацевтически приемлемых субстанций. Покрытые пленочной оболочкой таблетки могут представлять собой прессованные таблетки, покрытые полимерным покрытием или другим пригодным покрытием. Многочисленные прессованные таблетки могут представлять собой прессованные таблетки, изготовленные в ходе более чем одного цикла прессования с использованием фармацевтически приемлемых субстанций, упомянутых выше. Красители также могут быть использованы в таблетках. Ароматизаторы и подсластители могут быть использованы в таблетках и являются особенно подходящими для получения жевательных таблеток и леденцов.

Примеры жидких лекарственных форм для перорального введения, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, водные растворы, эмульсии, суспензии, растворы и/или суспензии, изготовленные из нешипучих гранул, и шипучие препараты, изготовленные из шипучих гранул.

Примеры водных растворов, которые могут быть использованы, включают, не ограничиваясь ими, эликсиры и сиропы. В данном описании эликсиры обозначают прозрачные, подслащенные водноспиртовые препараты. Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые могут быть использованы в эликсирах, включают, не ограничиваясь ими, растворитель. Конкретные примеры растворителей, которые могут быть использованы, включают глицерин, сорбит, этиловый спирт и сироп. В данном описании сиропы обозначают концентрированные водные растворы сахара, например сахарозы. Сиропы необязательно могут содержать консерванты.

Эмульсии обозначают двухфазные системы, в которых одна жидкость диспергирована в форме маленьких шариков в другой жидкости. Эмульсии необязательно могут быть эмульсиями масло-в-воде или вода-в-масле. Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые могут быть использованы в эмульсиях, включают, не ограничиваясь ими, неводные жидкости, эмульгаторы и консерванты.

Примеры фармацевтически приемлемых субстанций, которые могут быть использованы в нешипучих гранулах, из которых изготавливают жидкую лекарственную форму для перорального введения, включают разбавители, подсластители и увлажняющие средства.

Примеры фармацевтически приемлемых субстанций, которые могут быть использованы в шипучих гранулах, из которых изготавливают жидкую лекарственную форму для перорального введения, вклю

- 17 019723 чают органические кислоты и источник углекислоты.

Красители и ароматизаторы необязательно могут использоваться во всех упомянутых выше лекарственных формах.

Конкретные примеры консервантов, которые могут быть использованы, включают глицерин, метил- и пропилпарабен, бензойную кислоту, бензоат натрия и спирт.

Конкретные примеры неводных жидкостей, которые могут быть использованы в эмульсиях, включают минеральное масло и хлопковое масло.

Конкретные примеры эмульгаторов, которые могут быть использованы, включают желатин, акациевую камедь, трагакантовую камедь, бентонит и поверхностно-активные вещества, такие как полиоксиэтилен сорбитана моноолеат.

Конкретные примеры суспендирующих средств, которые могут быть использованы, включают натрий карбоксиметилцеллюлозу, пектин, трагакантовую камедь, Уеедит и акациевую камедь. Разбавители включают лактозу и сахарозу. Подсластители включают сахарозу, сиропы, глицерин и искусственные подсластители, такие как цикламат натрия и сахарин.

Конкретные примеры увлажняющих средств, которые могут быть использованы, включают пропиленгликоль моностеарат, сорбитана моноолеат, диэтиленгликоль монолаурат и полиоксиэтиленлауриловый эфир.

Конкретные примеры органических кислот, которые могут быть использованы, включают лимонную и винную кислоту.

Источники углекислоты, которые могут быть использованы в шипучих композициях, включают натрия бикарбонат и натрия карбонат. Красители включают любой из зарегистрированных сертифицированных водорастворимых красителей ΡΌ и С, а также их смеси.

Конкретные примеры ароматизаторов, которые могут быть использованы, включают природные ароматизаторы, экстрагированные из растений, например из фруктов, и синтетические смеси соединений, которые создают ощущение приятного вкуса.

Для получения твердой лекарственной формы раствор или суспензию, например, в пропиленкарбонате, растительных маслах или триглицеридах предпочтительно инкапсулируют в желатиновые капсулы. Такие растворы, их изготовление и помещение в капсулы раскрыты в патентах США №№ 4328245; 4409239 и 4410545. Для жидкой лекарственной формы раствор, например, в полиэтиленгликоле может быть разбавлен достаточным количеством фармацевтически приемлемого жидкого носителя, например воды, чтобы обеспечить легкое отмеривание для введения.

Альтернативно, жидкие или полутвердые препараты для перорального введения можно получить, растворяя или диспергируя активное соединение или соль в маслах, гликолях, триглицеридах, эфирах пропиленгликоля (например, пропиленкарбонате) и других подобных носителях, с инкапсуляцией указанных растворов или суспензий в оболочки твердых или мягких желатиновых капсул. Другие подходящие рецептуры включают приведенные в патентах США №№ Ке 28819 и 4358603.

Инъекционные препараты, растворы и эмульсии.

Данное изобретение также направлено на композиции, разработанные таким образом, чтобы вводить соединения по данному изобретению парентерально, что в целом включает подкожную, внутримышечную или внутривенную инъекцию. Инъекционные препараты могут быть получены в любой традиционной форме, например, как жидкие растворы или суспензии, твердые формы, подходящие для растворения или суспендирования в жидкости перед инъекционным введением, или как эмульсии.

Примеры вспомогательных веществ, которые могут быть использованы, в сочетании с инъекционными препаратами по данному изобретению, включают, не ограничиваясь ими, воду, раствор соли, раствор глюкозы, глицерин или этанол. Инъекционные композиции также могут необязательно содержать незначительные количества нетоксичных вспомогательных субстанций, таких как увлажняющие средства или эмульгаторы, буферизующие вещества для коррекции рН, стабилизаторы, солюбилизаторы и другие такие средства, например ацетат натрия, сорбитана монолаурат, триэтаноламина олеат и циклодекстрин. Имплантация системы замедленного высвобождения или пролонгированного высвобождения, таким образом, что поддерживается постоянный уровень дозы (см., например, патент США № 3710795) также предусмотрена в данном изобретении. Процент активного соединения, содержащийся в таких препаратах для парентерального введения, в высокой степени варьирует в зависимости от конкретной природы указанных компонентов, а также от активности соединения и потребностей субъекта.

Парентеральное введение препаратов включает внутривенное, подкожное и внутримышечное введение. Препараты для парентерального введения включают стерильные растворы, готовые для инъекционного введения, стерильные сухие растворимые продукты, такие как лиофилизированные порошки, описанные в данном описании, которые соединяют с растворителем непосредственно перед использованием, в том числе подкожные таблетки, готовые для инъекции стерильные суспензии, стерильные сухие нерастворимые продукты, готовые для соединения с растворителем непосредственно перед использованием, и стерильные эмульсии. Растворы могут быть водными или неводными.

Для внутривенного введения примеры подходящих носителей включают, не ограничиваясь ими, физиологический раствор соли или буферизованный фосфатом раствор соли (ФБР), и растворы, содер

- 18 019723 жащие загустители и солюбилизаторы, такие как глюкоза, полиэтиленгликоль и полипропиленгликоль, а также смеси указанных компонентов.

Примеры фармацевтически приемлемых носителей, которые необязательно могут быть использованы в парентеральных препаратах, включают, не ограничиваясь ими, водный растворитель, неводный растворитель, противомикробные средства, средства для обеспечения изотоничности, буферные вещества, антиоксиданты, местноанестезирующие средства, суспендирующие и диспергирующие средства, эмульгаторы, секвестранты или хелатные агенты и другие фармацевтически приемлемые субстанции.

Примеры водного носителя, который необязательно может быть использован, включают инъекционный раствор хлорида натрия, инъекционный раствор Рингера, изотонический раствор глюкозы для инъекций, стерильную воду для инъекций, раствор глюкозы и раствор Рингера с лактатом для инъекций.

Примеры неводного носителя для парентерального введения, который необязательно может быть использован, включают нелетучие масла растительного происхождения, такие как хлопковое масло, кукурузное масло, кунжутное масло и арахисовое масло.

Противомикробные средства в бактериостатических или фунгистатических концентрациях могут быть прибавлены к парентеральным препаратам, особенно, если препараты упакованы в многодозовые емкости и разработаны для хранения в условиях извлечения множественных аликвот. Примеры противомикробных средств, которые могут быть использованы, включают фенолы или крезолы, ртутьсодержащие препараты, бензиловый спирт, хлорбутанол, метиловые и пропиловые эфиры пгидроксибензойной кислоты, тимеросал, бензалкония хлорид и бензэтония хлорид.

Примеры средств для обеспечения изотоничности, которые могут быть использованы, включают натрия хлорид и глюкозу. Примеры буферных веществ, которые могут быть использованы, включают фосфат и цитрат. Примеры антиоксидантов, которые могут быть использованы, включают натрия бисульфат. Примеры местноанестезирующих средств, которые могут быть использованы, включают прокаина гидрохлорид. Примеры суспендирующих и диспергирующих средств, которые могут быть использованы, включают натрий карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу и поливинилпирролидон. Примеры эмульгаторов, которые могут быть использованы, включают полисорбат 80 (Твин 80). Секвестрант или хелатный агент, образующий комплекс с ионами металла, включает ЭДТА.

Фармацевтические носители также необязательно могут включать этиловый спирт, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль для смешиваемых с водой носителей, и гидроксид натрия, хлористоводородную кислоту, лимонную кислоту или молочную кислоту для коррекции рН.

Концентрация ингибитора в парентеральном препарате может быть отрегулирована таким образом, что в ходе инъекции вводится фармацевтически эффективное количество, достаточное для осуществления целевого фармакологического эффекта. Точная концентрация ингибитора и/или доза, которая применяется, в конечном счете будет зависеть от возраста, массы тела и состояния больного или животного, как известно из уровня техники.

Однодозовые парентеральные препараты могут быть упакованы в ампулу, флакон или шприц с иглой. Все препараты для парентерального введения должны быть стерильными, как известно и практикуется в уровне техники.

Инъекционные препараты могут быть разработаны для местного и системного введения. Обычно терапевтически эффективную дозу вводят в препарат таким образом, чтобы он содержал концентрацию как минимум от приблизительно 0,1% (мас./мас.) до приблизительно 90% (мас./мас.) или больше, предпочтительно более 1% (мас./мас.) ингибитора сМЕТ в леченной ткани(ях). Ингибитор можно вводить в виде единой дозы или разделенной на несколько меньших доз, которые вводят с промежутками времени. Следует понимать, что точные дозы и длительность лечения будут функцией места парентерального введения композиции, носителя и других переменных, которые могут быть определены эмпирически с использованием известных, проверенных протоколов или экстраполяцией на базе полученных ίη νίνο или ίη νίΐτο тестовых данных. Следует отметить, что значения концентрации и дозы также могут варьировать в зависимости от возраста данного индивидуума. Также следует понимать, что для любого конкретного субъекта может быть необходимым осуществить коррекцию конкретной схемы лечения спустя некоторое время согласно индивидуальной потребности и профессиональному суждению лица, которое вводит или контролирует введение препаратов. Таким образом, интервалы концентрации, приведенные в данном описании, предназначены служить примером и не предназначены для ограничения контекста или практики заявленных композиций.

Ингибитор сМЕТ необязательно может быть суспендирован в микронизированной или другой пригодной форме или могут быть получены его производные с целью создания активного продукта с большей растворимостью или образования пролекарств. Форма полученной смеси зависит от целого ряда факторов, в том числе предусмотренного способа введения и растворимости соединения в выбранном носителе или растворителе. Эффективная концентрация достаточна для облегчения симптомов патологического состояния и может быть определена эмпирически.

Лиофилизированные порошки.

Соединения по данному изобретению также могут быть получены в форме лиофилизированных порошков, которые могут быть разведены для введения в виде растворов, эмульсий и других смесей. Лио

- 19 019723 филизированные порошки также могут быть введены в твердые препараты или гели.

Стерильный, лиофилизированный порошок может быть получен путем растворения соединения в буферном растворе натрия фосфата, содержащем глюкозу или другое пригодное вспомогательное вещество. Дальнейшая стерилизующая фильтрация раствора с последующей лиофилизацией в стандартных условиях, известных специалисту в данной области, дает целевой препарат. Если коротко, лиофилизированный порошок необязательно может быть получен путем растворения глюкозы, сорбита, фруктозы, кукурузного сиропа, ксилита, глицерина, сахарозы или другого пригодного средства, в концентрации приблизительно 1-20%, предпочтительно приблизительно 5-15%, в подходящем буферном растворе, таком как раствор цитрата, натрия или калия фосфата или другой буферный раствор, известный специалисту в данной области, обычно при нейтральных значениях рН. Далее, ингибитор сМЕТ добавляют к полученной смеси предпочтительно при температуре выше комнатной, более предпочтительно приблизительно при 30-35°С, и перемешивают до растворения. Полученную смесь разбавляют, добавляя дополнительное количество буферного раствора до целевой концентрации. Полученную смесь обрабатывают стерилизующей фильтрацией или другим способом для удаления механических включений и обеспечения стерильности и фасуют во флаконы для лиофилизации. Каждый флакон может содержать одну дозу или несколько доз ингибитора.

Местное применение.

Соединения по данному изобретению также можно применять в смесях для местного применения. Смеси для местного применения могут быть использованы для местного и системного введения. Полученная смесь может быть раствором, суспензией, эмульсиямии т.п. и изготовлена в виде кремов, гелей, мазей, эмульсий, растворов, эликсиров, лосьонов, суспензий, настоек, паст, пены, аэрозолей, жидкостей для орошения, спреев, суппозиториев, повязок, кожных пластырей или любых других препаратов, подходящих для местного применения.

Ингибиторы сМЕТ могут быть введены в аэрозоль для местного применения, например ингаляционного (см. патенты США №№ 4044126, 4414209 и 4364923, где описаны аэрозоли для введения стероида, пригодного для лечения воспалительных заболеваний, особенно астмы). Указанные препараты для введения в дыхательные пути могут существовать в форме аэрозоля или раствора для распылителя либо в форме микронизированного порошка для вдувания, отдельно или в комбинации с инертным носителем, таким как лактоза. В таком случае диаметр частиц препарата обычно будет составлять меньше 50 мкм, предпочтительно меньше 10 мкм.

Ингибиторы также могут быть введены в препараты для местного или локального применения, такие как препараты для местного нанесения на кожу и слизистые оболочки, например, глаза, в форме гелей, кремов и лосьонов для введения в глаз или для внутрипузырного или интраспинального введения. Местное применение предусматривается для трансдермального введения, а также для введения в глаза или на слизистую оболочку либо для ингаляционного лечения. Растворы ингибитора сМЕТ отдельно или в комбинации с другими фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами также можно вводить интраназально.

Препараты для других способов введения.

В зависимости от конкретного патологического состояния также применяются другие способы введения, например местное нанесение, трансдермальные пластыри и ректальное введение. Например, дозированные лекарственные формы для ректального введения - это ректальные суппозитории, капсулы и таблетки для осуществления системного воздействия. Ректальные суппозитории применяются в данном описании для обозначения твердых тел для вставки в прямую кишку, которые расплавляются или размягчаются при температуре тела, высвобождая один или больше фармакологически или терапевтически активных ингредиентов. Фармацевтически приемлемые субстанции, которые применяют в ректальных суппозиториях, - это основы или носители и средства для повышения температуры плавления. Примеры основ включают масло какао, желатин, глицерин, карбовоск (полиоксиэтиленгликоль) и подходящие смеси моно-, ди- и триглицеридов жирных кислот. Комбинации разнообразных основ могут быть использованы. Средства для повышения температуры плавления суппозиториев включают спермацет и воск. Ректальные суппозитории могут быть получены способом прессования или формования. Типичная масса ректального суппозитория составляет приблизительно 2-3 г. Таблетки и капсулы для ректального введения могут быть произведены с использованием такой же фармацевтически приемлемой субстанции и такими же способами, как препараты для перорального введения.

Примеры препаратов.

Ниже приведены конкретные примеры препаратов для перорального, внутривенного введения и таблеток, которые необязательно могут применяться с соединениями по данному изобретению. Предусматривается, что указанные рецептуры могут быть изменены в зависимости от конкретного применяемого соединения и показания, при котором предусматривается применять препарат.

Композиция для перорального введения:

соединение по данному изобретению 10-100 мг лимонная кислота, моногидрат 105 мг гидроксид натрия 18 мг

- 20 019723 ароматизатор вода до 100 мл.

Композиция для внутривенного введения:

соединение по данному изобретению 0,1-10 мг глюкозы моногидрат - необходимое количество для изотоничности лимонная кислота, моногидрат 1,05 мг гидроксид натрия 0,18 мг вода для инъекций до 1,0 мл.

Композиция в форме таблетки:

соединение по данному изобретению 1% микрокристаллическая целлюлоза 73% стеариновая кислота 25% коллоидный кремния диоксид 1%.

Наборы, которые включают ингибиторы сМЕТ.

Изобретение также направлено на наборы и другие промышленные изделия для лечения заболеваний, связанных с сМЕТ. Предусматривается, что заболевания предназначены охватывать все состояния, при которых активность сМЕТ проявляется и способствует развитию патологии и/или симптоматики состояния.

В одном из вариантов предлагается набор, включающий композицию, которая содержит как минимум один ингибитор по данному изобретению в комбинации с инструкциями. Инструкции могут содержать указания на патологическое состояние, при котором следует вводить композицию, информацию относительно хранения, информацию относительно дозирования и/или инструкции относительно того, как вводить композицию. Набор также может включать упаковочные материалы. Упаковочный материал может включать емкость для помещения композиции. Набор также может необязательно включать дополнительные компоненты, такие как шприцы для введения композиции. Набор может включать композицию в однодозовых или многодозовых формах.

В другом варианте предложено промышленное изделие, включающее композицию, которая содержит как минимум один ингибитор по данному изобретению в комбинации с упаковочными материалами. Упаковочный материал может включать емкость для помещения композиции. Емкость необязательно может включать этикетку, содержащую указания относительно патологического состояния, при котором следует вводить композицию, информацию относительно хранения, информацию относительно дозирования и/или инструкции относительно того, как вводить композицию. Набор также может необязательно включть дополнительные компоненты, такие как шприцы для введения композиции. Набор может включать композицию в однодозовых или многодозовых формах.

Предусматривается, что упаковочный материал, использованный в наборах и промышленных изделиях по данному изобретению, может образовывать множественные разделенные емкости, например разделенный флакон или разделенный пакет из фольги. Емкость может существовать в любой традиционной форме, как известно в уровне техники, будучи изготовленной из фармацевтически приемлемого материала, например бумажная или картонная коробка, флакон или банка из стекла или пластичного материала, герметически закупориваемый пакет (например, для хранения запаса таблеток для помещения в другую емкость) или блистерная упаковка с отдельными дозами для выдавливания из упаковки согласно расписанию лечения. Вид емкости, которая используется, будет зависеть от конкретной лекарственной формы, например традиционная картонная коробка в целом не может быть использована для хранения жидкой суспензии. Вероятно, что более чем одна емкость может быть использована одновременно в одной и той же упаковке для продажи единицы лекарственной формы. Например, таблетки могут содержаться в флаконе, который, в свою очередь, помещен в коробку. Обычно набор включает указания относительно введения отдельных компонентов. Форма набора является особенно предпочтительной, если отдельные компоненты предпочтительно вводят в разных лекарственных формах (например, перорально, местно, трансдермально и парентерально), вводят с разными промежутками времени или если желательно титрование индивидуальных компонентов в комбинации врачом.

Одним из конкретных примеров набора по данному изобретению является так называемая блистерная упаковка. Блистерные упаковки хорошо известны в паковочной промышленности и широко используются для упаковки единиц дозированных лекарственных форм (таблетки, капсулы и т.п.). Блистерные упаковки в целом состоят из листа относительно жесткого материала, покрытого фольгой, предпочтительно из прозрачного пластичного материала. В ходе обработки упаковки формируются углубления в пластичной фольге. Углубления имеют размер и форму индивидуальных таблеток или капсул, которые будут туда помещены, или могут иметь такие размер и форму, чтобы упаковать несколько таблеток и/или капсул. Далее, таблетки или капсулы помещают в углубление соответствующим образом и листом относительно жесткого материала запечатывают пластичную фольгу на поверхности, противоположной направлению образования углублений. В результате, таблетки или капсулы запечатываются индивидуально или коллективно, по желанию, в углублениях между пластичной фольгой и листом. Преимущественно прочность листа является такой, что таблетки или капсулы могут быть вытянуты из блистерной

- 21 019723 упаковки вручную, путем приложения давления к углублениям, посредством чего образуются отверстия в листе за местом углубления. Таблетка или капсула далее может быть извлечена через указанное отверстие.

Другой конкретный вариант набора - это диспенсер, разработанный таким образом, чтобы отпускать ежедневные дозы по одной в порядке их предусмотренного применения. Преимущественно диспенсер оборудован напоминающим устройством, чтобы дополнительно облегчить соблюдение схемы лечения. Примером такого напоминающего устройства является механический счетчик, который показывает количество отпущенных ежедневных доз. Другой пример такого напоминающего устройства - это микрочип памяти с аккумулятором, связанный с жидкокристаллическим дисплеем или звуковым сигналом напоминания, который, например, читает вслух дату отпуска последней ежедневной дозы и/или напоминает, когда следует вводить следующую дозу.

Дозы, хозяин и безопасность.

Соединения по данному изобретению стабильны и могут применяться безопасно. В частности, соединения по данному изобретению пригодны как ингибиторы сМе! для разнообразных субъектов (например, человека, млекопитающих, которые не принадлежат к Ното кархе^, и животных, которые не принадлежат к млекопитающим). Оптимальная доза может варьировать в зависимости от таких факторов, как, например, вид субъекта, масса тела субъекта, способ введения и конкретные свойства конкретного применяемого соединения. В целом ежедневная доза для перорального введения взрослому человеку (масса тела приблизительно 60 кг) составляет приблизительно 1-1000, приблизительно 3-300 или приблизительно 10-200 мг. Следует понимать, что суточная доза может быть введена за один раз или быть разделена на несколько приемов (например, 2 или 3) в сутки.

Комбинированная терапия.

Широкий спектр терапевтических средств может осуществлять аддитивное или синергическое терапевтическое воздействие с ингибиторами по данному изобретению. Может применяться комбинированная терапия, которая включает одно или больше соединений по данному изобретению и одно или больше других терапевтических средств, например, с целью 1) увеличения терапевтического эффекта(ов) одного или больше соединений по данному изобретению и/или одного или больше других терапевтических средств; 2) уменьшения побочного действия, которое демонстрируют одно или больше соединений по данному изобретению и/или одно или больше других терапевтических средств; и/или 3) уменьшения эффективной дозы одного или больше соединений по данному изобретению и/или одного или больше других терапевтических средств. Например, такие терапевтические средства могут быть аддитивным или синергичным образом быть объединены с ингибиторами по данному изобретению с целью подавления нежелательного роста клеток, такого как аномальный рост клеток, результатом которого являются нежелательные доброкачественные новообразования или рост опухоли.

В одном из вариантов предлагается способ лечения пролиферативного патологического состояния клеток, которое включает лечение клеток соединением по данному изобретению в комбинации с антипролиферативным средством, где клетки лечат соединением по данному изобретению перед, одновременно и/или после лечения клеток антипролиферативным средством, обозначенный в данном описании как комбинированная терапия. Предусматривается, что лечение одним средством перед лечением другим средством в данном описании носит название последовательной терапии, даже если средства также вводят вместе. Предусматривается, что комбинированная терапия предназначена охватывать случаи, когда средства вводят перед или друг после друга (последовательная терапия), а также когда средства вводят в одно и то же время.

Примеры терапевтических средств, которые могут применяться в комбинации с ингибиторами по данному изобретению, включают, не ограничиваясь ими, противораковые средства, алкилирующие средства, антибиотические средства, антиметаболические средства, гормональные средства, растительные средства и биологические средства.

Алкилирующие средства - это полифункциональные соединения, которые обладают способностью заменять алкильные группы на ионы водорода. Примеры алкилирующих средств включают, не ограничиваясь ими, бисхлорэтиламини (ипритный азот, например хлорамбуцил, циклофосфамид, ифосфамид, мехлорэтанамин, мелфалан, ипритный урацил), азиридини (например, тиотепа), алкилалконсульфонати (например, бусульфан), производные нитрозомочевины (например, кармустин, ломустин, стрептозоцин), неклассические алкилирующие средства (альтретамин, дакарбазин и прокарбазин), соединения платины (карбоплатин и цисплатин). Указанные соединения реагируют с фосфатными, аминными, гидроксильными, сульфгидрильными, карбоксильными и имидазольными группами. В физиологических условиях указанные лекарственные средства ионизируются и образуют положительно заряженный ион, который присоединяется к чувствительным нуклеиновым кислотам и белкам, приводя к остановке клеточного цикла и/или гибели клетки. Комбинированная терапия, которая включает ингибитор по данному изобретению и алкилирующее средство, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние при раке и уменьшать побочное действие, связанное с указанными химиотерапевтическими средствами.

Антибиотические средства - это группа лекарственных средств, продуцируемых способом, до некоторой степени сходным с продуцированием антибиотиков, как модификация природных продуктов.

- 22 019723

Примеры антибиотических средства включают, не ограничиваясь ими, антрациклины (например, доксорубицин, даунорубицин, эпирубицин, идарубицин и антрацендион), митомицин С, блеомицин, дактиномицин, пликатомицин. Указанные антибиотические средства препятствуют росту клетки, нацеливаясь на различные клеточные компоненты. Например, в целом считается, что антрациклин препятствует действию ДНК топоизомеразы ΙΙ в участках транскрипционной активности ДНК, что приводит к разрезанию цепи ДНК. В целом считается, что блеомицин образует хелатные комплексы с железом с образованием активированного комплекса, который далее связывается с основаниями ДНК, вызывая разрезание цепи и гибель клетки. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и антибиотическое средство, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние при раке и уменьшать побочное действие, связанное с указанными химиотерапевтическими средствами.

Антиметаболические средства - это группа лекарственных средств, которые препятствуют метаболическим процессам, жизненно важным для физиологии и размножения раковых клеток. Активное размножение раковых клеток требует непрерывного синтеза больших количеств нуклеиновых кислот, белков, липидов и других жизненно необходимых составляющих клеток. Многочисленные антиметаболиты ингибируют синтез пуриновых или пиримидиновых нуклеозидов или ингибируют ферменты репликации ДНК. Некоторые антиметаболиты также препятствуют синтезу рибонуклеозидов и РНК и/или также метаболизму аминокислот и синтезу белка. Препятствуя синтезу жизненно важных составляющих клеток, антиметаболиты могут задержать или остановить рост раковых клеток. Примеры антиметаболических средств включают, не ограничиваясь ими, фторурацил (5-РИ), флоксуридин (5-РИбЯ), метотрексат, лейковорин, гидроксимочевину, тиогуанин (6-ТС). меркаптопурин (6-МР), цитарабин, пентостатин, флударабина фосфат, кладрибин (2-СЭА), аспарагиназу и гемцитабин. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и антиметаболическое средство, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние при раке и уменьшать побочное действие, связанное с указанными химиотерапевтическими средствами.

Гормональные средства - это группа лекарственного средства, которые регулируют рост и развитие органов-мишеней. Большинство гормональных средств - это половые стероиды и их производные и аналоги, такие как эстрогены, андрогены и прогестины. Указанные гормональные средства могут служить антагонистами рецепторов половых стероидов для регуляции вниз экспрессии рецепторов и транскрипции жизненно необходимых генов. Примерами таких гормональных средств являются синтетические эстрогены (например, диэтилстильбестрол), антиэстрогены (например, тамоксифен, торемифен, флуоксиместерол и ралоксифен), антиандрогены (бикалутамид, нилутамид и флутамид), ингибиторы ароматазы (например, аминоглутетимид, анастрозол и тетразол), кетоконазол, гозерелина ацетат, лейпролид, мегестрола ацетат и мифепристон. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и гормональное средство, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние при раке и уменьшать побочное действие, связанное с указанными химиотерапевтическими средствами.

Растительные средства - это группа лекарственных средств, полученных из растений или модифицированных на базе молекулярной структуре средств. Примеры полученных из растений средств включают, не ограничиваясь ими, алкалоиды барвинка (например, винкристин, винбластин, виндезин, винзолидин и винорелбин), подофиллотоксины (например, этопозид (УР-16) и тенипозид (УМ-26)), а также таксаны (например, паклитаксел и доцетаксел). Указанные растительные средства в целом действуют как противоопухолевые средства, которые связываются с тубулином и подавляют митоз. Считается, что подофиллотоксины, такие как этопозид, препятствуют синтезу ДНК, взаимодействуя с топоизомеразой ΙΙ, что ведет к разрезанию цепи ДНК. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и растительное средство, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние при раке и уменьшать побочное действие, связанное с указанными химиотерапевтическими средствами.

Биологические средства - это группа биологических молекул, которые вызывают регресс рака/опухоли при применении отдельно или в комбинации с химиотерапией и/или радиотерапией. Примеры биологических средств включают, не ограничиваясь ими, иммуномодулирующие белки, такие как цитокины, моноклональные антитела против опухолевых антигенов, гены-супрессоры опухолей и противораковые вакцины. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и биологическое средство, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние при раке, усиливать иммунный ответ больного на туморигенные сигналы и уменьшать побочное действие, связанное с указанными химиотерапевтическими средствами.

Цитокин обладает фундаментальной иммуномодулирующей активностью. Некоторые цитокины, такие как интерлейкин-2 (1Ь-2, алдеслейкин) и интерферон, продемонстрировали противоопухолевую активность и зарегистрированы для лечения больных метастатической почечно-клеточной карциномой и метастатической злокачественной меланомой. 1Ь-2 - это фактор роста Т-клеток, который является центральным для опосредствованных Т-клетками иммунных реакций. Считается, что выборочное противоопухолевое действие 1Ь-2 у некоторых больных является результатом опосредствованного клетками иммунного ответа, который позволяет отличить собственное от инородного. Примеры интерлейкинов, которые могут быть применены в сочетании с ингибиторами по данному изобретению, включают, не ограничиваясь ими, интерлейкин 2 (1Ь-2), интерлейкин 4 (1Ь-4) и интерлейкин 12 (1Б-12).

- 23 019723

Интерфероны (ΙΕΝ) включают более 23 родственных подтипов с частично совпадающей активностью, и все подтипы ΙΕΝ находятся в пределах данного изобретения. ΙΕΝ продемонстрировал активность против многочисленных солидных и гематологических злокачественных новообразований, причем последние, похоже, являются особенно чувствительными.

Другие цитокины, которые могут быть применены в сочетании с ингибиторами по данному изобретению, включают цитокины, которые осуществляют фундаментальное влияние на кроветворение и иммунные функции. Примеры таких цитокинов включают, не ограничиваясь ими, эритропоэтин, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор (филграстим) и гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (сарграмостим). Указанные цитокины могут быть применены в сочетании с ингибитором по данному изобретению для уменьшения вызванной химиотерапией миелопоэтической токсичности.

Другие иммуномодулирующие средства, кроме цитокинов, также могут быть применены в сочетании с ингибиторами по данному изобретению с целью ингибирования аномального роста клеток. Примеры таких иммуномодулирующих средств включают, не ограничиваясь ими, бациллу Кальмета-Жерена, левамизол и октреотид, октапептид длительного действия, который имитирует действие природного гормона соматостатина.

Моноклональные антитела против опухолевых антигенов - это антитела, сгенерированные против антигенов, экспрессированных опухолями, предпочтительно специфических для опухолей антигенов. Например, моноклональное антитело Герцептин® (трастузумаб) сгенерировано против рецептора 2 человеческого эпидермального фактора роста (НЕЯ2), который чрезмерно экспрессируется в некоторых опухолях молочной железы, в том числе при метастазирующем раке молочной железы. Чрезмерная экспрессия белка НЕЯ2 связана с более агрессивным заболеванием и худшим прогнозом в клинических условиях. Г ерцептин® применяется в качестве монотерапии для лечения больных метастатическим раком молочной железы, у которых опухоли чрезмерно экспрессируют белок НЕЯ2. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и Герцептин®, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние на опухоли, особенно при метастатическом раке.

Другой пример моноклональных антител против опухолевых антигенов - это Ритуксан® (ритуксимаб), сгенерированный против СИ20 на клетках лимфомы, который селективно истощает нормальные и пораженные злокачественным заболеванием СИ20+ пре-В и зрелые В-клетки. Ритуксан® применяется в качестве монотерапии для лечения больных рецидивирующей или резистентной низкой степени или фолликулярной неходжкинской лимфомы, СЭ20+, В-клеток. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и Ритуксимаб®, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние не только на лимфому, но и на другие формы или виды злокачественных опухолей.

Гены-супрессоры опухолей - это гены, которые функционируют в направлении ингибирования роста клеток и циклов деления, таким образом предотвращая развитие новообразований. Мутации в генахсупрессорах опухолей вызывают игнорирование клеткой одного или больше компонентов сети ингибирующих сигналов, преодолевая точки проверки клеточного цикла, что ведет к повышению частоты неконтролируемого роста клеток - раку. Примеры генов-супрессоров опухолей включают, не ограничиваясь ими, ИРС-4, ΝΓ-1, ΝΓ-2, ЯВ, р53, №Т1, ВЯСА1 и ВЯСА2.

ИРС-4 вовлечен в развитие рака поджелудочной железы и принимает участие в цитоплазматическом пути, который ингибирует деление клеток. ΝΓ-1 кодирует белок, который ингибирует Яак, ингибиторный белок цитоплазмы. ΝΓ-1 вовлечен в развитие нейрофибромы и феохромоцитомы нервной системы и миелоидного лейкоза. ΝΓ-2 кодирует ядерный белок, который вовлечен в развитие менингиомы, шванномы и эпендимомы нервной системы. ЯВ кодирует белок рЯВ, ядерный белок, который является основным ингибитором клеточного цикла. ЯВ вовлечен в развитие ретинобластомы, а также в развитие рака костей, мочевого пузыря, мелкоклеточного рака легкого и рака молочной железы. Р53 кодирует белок р53, который регулирует деление клеток и может индуцировать апоптоз. Мутация и/или бездеятельность р53 обнаружена в широком спектре злокачественных опухолей. \УТ1 вовлечен в развитие опухоли Вильмса почек. ВЯСА1 вовлечен в развитие рака молочной железы и яичника и ВЯСА2 вовлечен в развитие рака молочной железы. Ген-супрессор опухоли может быть перенесен в клетки опухоли, где он осуществляет свои функции подавления опухоли. Комбинированная терапия, включающая ингибитор по данному изобретению и супрессор опухоли, может осуществлять синергическое терапевтическое влияние у больных, которые страдают различными формами рака.

Противораковые вакцины - это группа средств, которые индуцируют специфический иммунный ответ организма против опухолей. Большинство противораковых вакцин, которые находятся в стадии исследования, разработки и клинических испытаний - это связанные с опухолью антигены (ТАА). ТАА это структуры (т.е. белки, ферменты или углеводы), которые присутствуют на опухолевых клетках и в относительной степени отсутствуют или присутствуют в меньшем количестве на нормальных клетках. Благодаря уникальности для опухолевой клетки ТАА обеспечивают мишени для иммунной системы с целью их определения и уничтожения. Примеры ТАА включают, не ограничиваясь ими, ганглиозиды (СМ2), простата-специфичный антиген (Р8А), альфа-фетопротеин (АГР), канцероэмбрионный антиген

- 24 019723 (СЕА) (продуцируется раковыми опухолями ободочной кишки и другими видами аденокарциномы, например молочной железы, легкого, желудка и поджелудочной железы), связанные с меланомой антигены (МАКТ-1, др100, МАСЕ 1,3 тирозиназа), Е6 и Е7 фрагменты папилломавируса, цельные клетки или части аутологических опухолевых клеток и аллогенных опухолевых клеток.

Адъювант может быть использован для усиления иммунного ответа на ТАА. Примеры адъювантов включают, не ограничиваясь ими, бациллу Кальметта-Жерена (БЦЖ), липополисахаридные эндотоксины, гемоцианин фиссуреловых (СКЬН), интерлейкин-2 (1Ь-2), гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (СМ-С8Б) и цитоксан, химиотерапевтическое средство, которое, как считается, уменьшает индуцируемое опухолью подавление при введении в низких дозах.

Примеры

Получение ингибиторов сМЕТ.

Различные способы могут применяться для синтеза соединений по данному изобретению. Характерные способы синтеза указанных соединений приведены в Примерах. Однако следует отметить, что соединения по данному изобретению также могут быть синтезированы иными синтетическими путями, которые могут быть изобретены другими.

Следует понимать, что некоторые соединения по данному изобретению содержат атомы, соединенные с другими атомами таким способом, который обеспечивает специфическую стереохимию соединения (например, хиральные центры). Следует отметить, что синтез соединений по данному изобретению может приводить к образованию смесей различных стереоизомеров (т.е. энантиомеров и диастереомеров). Если не указана конкретная стереохимия, заявленное соединение предназначено охватывать все возможные стереоизомеры.

Различные способы разделения смесей разных стереоизомеров известны из уровня техники. Например, рацемическая смесь соединения может реагировать с оптически активным разрешающим средством с образованием пары диастереомерных соединений. Диастереомеры в дальнейшем могут быть разделены с восстановлением оптически чистых энантиомеров. Способные к диссоциации комплексы также могут быть использованы для разделения энантиомеров (например, диастереомерные кристаллические соли). Диастереомеры обычно обладают достаточно четкими отличиями физических свойств (например, температура плавления, температура кипения, растворимость, реакционная способность и т.п.) и могут быть легко разделены с использованием указанных отличий. Например, диастереомеры обычно могут быть разделены хроматографически или методами отделения/разделения, которые базируются на разнице в растворимости. Более подробное описание методов, которые могут применяться для выделения стереоизомеров соединений из рацемической смеси, можно найти в 1еап 1асс.|иек Апбге Со11е1, 8атие1 Н. У1еп, ЕпапБотетк, Касета!ек апб Кеко1и!юпк, Ιοίιη \УПеу & 8опк, 1пс. (1981).

Соединения по данному изобретению также могут быть получены в форме фармацевтически приемлемой кислотно-аддитивной соли путем реакции формы свободного основания соединения с фармацевтически приемлемой неорганической или органической кислотой. Альтернативно, фармацевтически приемлемая основно-аддитивная соль соединения может быть получена путем реакции формы свободной кислоты соединения с фармацевтически приемлемым неорганическим или органическим основанием. Неорганические и органические кислоты и основания, подходящие для изготовления фармацевтически приемлемых солей соединений, приведены в разделе Определения данного изобретения. Альтернативно, формы солей соединений могут быть получены с использованием солей начальных материалов или промежуточных соединений.

Формы свободной кислоты или свободного основания соединений могут быть получены из соответствующей формы основно-аддитивной соли или кислотно-аддитивной соли. Например, соединение в форме кислотно-аддитивной соли может быть преобразовано в соответствующее свободное основание обработкой подходящим основанием (например, раствором гидроксида аммония, гидроксида натрия и т.п.). Соединение в форме основно-аддитивной соли может быть преобразовано в соответствующую свободную кислоту обработкой подходящей кислотой (например, хлористо-водородная кислота и т.п.).

Ν-Оксиды соединений по данному изобретению могут быть получены способами, известными среднему специалисту в данной области. Например, Ν-оксиды могут быть получены обработкой неокисленной формы соединения окислителем (например, трифтроперуксусная кислота, пермалеиновая кислота, пербензойная кислота, перуксусная кислота, мета-хлорпероксибензойная кислота и т.п.) в подходящем инертном органическом растворителе (например, галогенированный углеводород, такой как дихлорметан) при температуре приблизительно 0°С. Альтернативно, Ν-оксиды соединений могут быть получены из Ν-оксида соответствующего начального материала.

Соединения в неокисленной форме могут быть получены из Ν-оксидов соединений обработкой восстановительным средством (например, сера, серы диоксид, трифенилфосфин, лития боргидрид, натрия боргидрид, фосфора трихлорид, трибромид и т.п.) в подходящем инертном органическом растворителе (например, ацетонитрил, этанол, водный диоксан и т.п.) при температуре 0-80°С.

Производные соединений в форме пролекарств могут быть получены способами, известными среднему специалисту в данной области (например, см. дополнительные подробности в 8аи1шет е! а1. (1994),

- 25 019723

Вюогдашс апб Мебк1па1 Сйеш151гу ЬеРегз, νοί. 4, р. 1985). Например, соответствующие пролекарства могут быть получены реакцией недериватизированного соединения с подходящим карбамилирующим агентом (например, 1,1-ацилоксиалкилкарбонохлоридат, пара-нитрофенилкарбонат и т.п.).

Защищенные производные соединений могут быть получены способами, известными среднему специалисту в данной области. Подробное описание методов, подходящих для введения и удаления защитных групп, можно найти в Т.А. Сгеепе, РгсИесбпд бгоирз ίη Огдашс 8упШе515, 3гб еббюп, бобп Абеу & 8опз, 1пс. 1999.

Соединения по данному изобретению могут быть подходящим образом получены или образованы в ходе способа по изобретению как сольваты (например, гидраты). Гидраты соединений по данному изобретению могут быть подходящим образом получены перекристаллизацией из смеси водного/органического растворителей с использованием таких органических растворителей, как диоксин, тетрагидрофуран или метанол.

Соединения по данному изобретению могут также быть получены как индивидуальные стереоизомеры путем реакции рацемической смеси соединения с оптически активным разрешающим агентом, с образованием пары диастереоизомерных соединений, разделения диастереомеров и восстановления оптически чистого энантиомера. Хотя разделение энантиомеров может быть осуществлено подходящим образом с использованием ковалентно соединенных диастереомерных производных соединений, способные к диссоциации комплексы являются предпочтительными (например, диастереомерные кристаллические соли). Диастереомерам свойственна четкая разница физических свойств (например, температуры плавления, температуры кипения, растворимости, реакционной способности и т.п.), и они могут быть легко разделены с использованием указанных отличий. Диастереомеры могут быть разделены хроматографически или предпочтительно методами разделения/отделения, которые базируются на отличиях в растворимости. Оптически чистый энантиомер далее восстанавливают вместе с разрешающим агентом любыми практическими средствами, которые не приводят к рацемизации. Более подробное описание методов, пригодных для выделения стереоизомеров соединений из рацемической смеси, можно найти в беап бассщез Апбге Собес 8атие1 Н. Абеп, Епапботегз, Васета1ез апб ВезоЫбопз, бобп Абеу & 8опз, 1пс. (1981).

В данном описании обозначения и конвенции, примененные в указанных способах, схемах и примерах, согласуются с применяемыми в современной научной литературе, например боигпа1 оГ 1бе Атепсап С’11еибса1 8ос1е1у или боигпа1 оГ Вю1ощса1 С’беибУгу. Стандартные однобуквенные или трехбуквенные сокращения в целом применяются для обозначения остатков аминокислот, которые приведены в Ьконфигурации, если другое не упоминается. Если не указано иное, все начальные материалы получали от коммерческих поставщиков и использовали без последующей очистки.

Все ссылки на эфир или Εΐ₂Θ касаются диэтилового эфира; и раствор соли обозначает насыщенный водный раствор №С1. Если не указано иное, все значения температуры выражены в °С (стоградусная шкала). Все реакции осуществляются в инертной атмосфере при комнатной температуре, если не упоминается другое.

Спектры ¹Н ЯМР зарегистрированы на приборе Вгикег Аνаηсе 400. Химические сдвиги выражены в частях за миллион (м.д.). Константы соединения приведены в Герцах (Гц). Характер расщепления описан очевидной множественностью и обозначен как с (синглет), д (дублет), т (триплет), к (квартет), м (мультиплет), ш (уширенный).

Масс-спектры (МС) с низким разрешением и данные относительно чистоты соединения получены с помощью системы РХ/МС Аа1егз ΖΟ с одинарной квадрупольной линзой, оборудованной источником ионизации электрораспылением (ИЭР), УФ-детектором (220 и 254 нм) и испарительным детектором рассеивания света (ИДРС). Тонкослойную хроматографию осуществляли на пластинках силикагеля Е. Мегск толщиной 0,25 мм (60Е-254) с визуализацией в УФ-свете, 5% этанольный раствор фосфомолибденовой кислоты, раствор нингидрина или п-анизальдегида. Флеш-хроматографию на колонке осуществляли на силикагеле (230-400 меш, Мегск).

Начальные материалы и реактивы, использованные для получения указанных соединений, доступны от коммерческих поставщиков, таких как А1бг1сН Сбет1са1 Сотрапу (Мб^аикее, А1), Васбет (Тоггапсе, СА), 8щта (8ΐ. Ьошз, МО), или могут быть получены способами, хорошо известными среднему специалисту в данной области, в соответствии с методиками, описанными в таких стандартных литературных источниках, как Е1езег апб Е1езег'з ВеадеШз Гог Огдашс 8упШез15, νο15. 1-17, бобп Абеу апб 8опз, №\ν Уогк, ΝΥ, 1991; Вобб'з СбеибУгу оГ СагЬоп Сотроипбз, νο15. 1-5 апб зиррз, Ε15еν^е^ 8с1епсе РиЬЕзйегз, 1989; Огдашс Веасбопз, νο15. 1-40, бобп Абеу апб 8опз, №\ν Уогк, ΝΥ, 1991; Магсб б.: Абνаηсеб Огдапю Сбет151гу, 41Н еб, бобп Абеу апб 8опз, №\ν Уогк, ΝΥ и Ьагоск: С’отргебепзАе Огдашс ТгапзГогтаИопз, УСН РиЬ115Йег5, №\ν Уогк, 1989.

Полное раскрытие всех документов, процитированных в данном изобретении, включено в данное описание путем ссылки.

Схемы синтеза соединений по данному изобретению.

Соединения по данному изобретению могут быть синтезированы в соответствии со схемами реакции, показанными ниже. Другие схемы реакции могут быть легко изобретены специалистами в данной

- 26 019723 области. Также следует понимать, что различные другие растворители, значения температуры и другие условия реакции могут быть применены для оптимизации выхода реакций.

В реакциях, описанных ниже, может возникнуть необходимость в защите реакционноспособных функциональных групп, например гидрокси, амино, имино, тио или карбоксильных групп, если их присутствие желательно в конечном продукте, во избежание их нежелательного участия в реакциях.

Традиционные защитные группы могут быть использованы в соответствии со стандартной практикой; примеры см. в Т.^. Отеепе αηά Р.О.М. \¥ιιΐδ ιη РгсЛесШе Огоирз ιη Огдашс СйепизЦу 1ойп \¥11еу аис! 8опз, 1991.

Схема А

о

,*1 ΝΗ

АЗ

А2

Соединение А2 может быть получено, начиная с соединения А1, в 3 стадии в соответствии со способом, аналогичным описанному в патенте США № 6358971, который включен путем ссылки в данное описание в полном объеме. Восстановление сложного эфира может быть осуществлено в присутствии восстановительного реагента, такого как ЛАГ или ΝαΒΗ₄, в ТГФ или диоксане при температуре 0-80°С на протяжении 1-8 ч, с получением спирта (А3). Стандартное сочетание Мицунобу А3 и А4 в присутствии трифенилфосфина и азодикарбоксилата, такого как ДЭАД или ДИАД, при температуре 0-80°С на протяжении 1-24 ч, может применяться для получения соединений А5 и А6. Соединения А5 и А6 могут быть разделены с использованием любого из многочисленных методов, известных из уровня техники, в том числе, например, препаративной РХМС.

ΗΝ^

Βΐ

Схема В ___»2_____. Ν^Ν'4 к_а= н, ν-Ч. „у*

4-НМТрО, И Т.Д. ^Т в₅

Соединение В1 обрабатывают соединением

N=4 У

В2 (например, фенилизотиоцианатом или пнитрофенилизотиоцианатом) в ДМЭ при температуре 100-120°С в микроволновом реакторе на протяже нии 1-8 ч с получением тиола (В3). Опосредованное палладием сочетание соединений В3 и В4 в ДМЭ с использованием РС2(СЬа)з и 4,5-бис-(фенилфосфино)-9,9-диметилксантена при температуре 100-120°С в микроволновом реакторе на протяжении 1-8 ч может быть осуществлено с получением соединения В5.

Схема С

Анилин (С1) нагревают в ΗΙ до 100°С, выдерживая при этой температуре на протяжении 18 ч, с по

- 27 019723 лучением соединения С2. Анилин (С2) обрабатывают ацетамидом (С3) и основанием, таким как натрия гидрофосфат, в полярном растворителе (например, ДМА, ДМФА или ДМСО) и нагревают в микроволновом реакторе до температуры 100-120°С, выдерживая при этой температуре на протяжении 1-8 ч, с получением циклизированного продукта С4. Опосредованное палладием сочетание С4 и С5 может быть осуществлено ДМЭ с использованием Рб₂(бЬа)₃ и 4,5-бис-(фенилфосфино)-9,9-диметилксантена при температуре 100-120°С в микроволновом реакторе на протяжении 1-8 ч, с получением соединения С6. Удаление группы К_с из соединения С6 может быть осуществлено в растворителе, таком как ТГФ или диоксан, или спирте, таком как МеОН, ЕЮН или изо-РгОН, в присутствии кислоты, такой как НС1 или ТФУ, при температуре 0-100°С на протяжении 1-24 ч, с получением соединения С7. Соединение С7 обрабатывают соответствующим хлорангидридом кислоты в растворителе (например, ДХМ, ТГФ или СНС13) в присутствии основания (например, ТЭА, ДИЭА или пиридин) при температуре 0-80°С на протяжении 1-24 ч с получением соединения С9.

Схема Ό

1) нз/ноАс/на

Соединение Ό1 бромируют в стандартных условиях, например Ν-бромсукцинимид в присутствии пероксида, АИБН, или при освещении с интенсивностью 200-400 Вт, в СС1₄ при кипячении с обратным холодильником (например, на протяжении 1-8 ч). Вытеснение бромида (Ό2) с использованием аммиака в спиртном растворителе (например, МеОН, ЕЮН или изо-РгОН) при температуре 0-80°С на протяжении

1-24 ч дает соединение Ό3. Реакцию замещения с соединениями Ό3 и Ό4 осуществляют в растворителе (например, ДМФА, ДМА или ЕЮН) в присутствии основания (например, ТЭА, ДИЭА или пиридин) при температуре 0-80°С на протяжении 1-24 ч с получением арилнитро Ό5. Восстановление арилнитро (Ό5) осуществляют в стандартных условиях с использованием палладиевого катализатора, такого как 10% Рб/С или металл (например, Ре или Ζπ) в кислотной среде. Последующее закрытие кольца полученного анилина в триазол осуществляют в присутствии водного раствора NаNО₂ с получением соединения Ό6. Обработка соединения Ό6 в насыщенном аммиаком растворителе (например, ЕЮН или изо-РгОН в закупоренной емкости) при температуре 100-150°С на протяжении 1-4 дней дает анилин Ό7. Анилин (Ό7) обрабатывают ацетамидом (Ό8) и основанием, таким как гидрофосфат натрия, в полярном растворителе (например, ДМА, ДМФА или ДМСО) и нагревают до температуры 100-120°С в микроволновом реакторе на протяжении 1-8 ч с получением циклизированного продукта Ό9. Обработка соединения Ό9 кислотой (например, НС1 или ТФУ) дает соединение Ό10.

- 28 019723

Схема Е

Соединения Е3а и Е3Ь могут быть получены, начиная с соединений Е1 и Е2, путем обработки соединения Е2 основанием, таким как NаΗ, в растворителе, таком как ТГФ или диоксан, при температуре от -78 до 0°С, с последующей обработкой соединением Е1. Соединения Е3а и Е3Ь необязательно разделяют перед последующим использованием. Обработка соединений Е3а и/или Е3Ь основанием, таким как ЫОН или №1ОН, при температуре от -20 до 75°С на протяжении 1-8 ч дает соединения Е4а и/или Е4Ь в виде литиевой или натриевой соли соответственно. Обработка соединений Е4а и/или Е4Ь соединением Е5 в присутствии ЭДК или ДКК на протяжении 1-24 ч дает соединения Е6а и/или Е6Ь. Обработка соединений Е6а и/или Е6Ь РОС1₃ при температуре 80-160°С дает соединения Е7а и/или Е7Ь. Альтернативно, соединения Е7а и/или Е7Ь могут быть получены обработкой соединений Е6а и/или Е6Ь Τδί,Ί/Νметилморфолином при температуре от комнатной до 100°С на протяжении 0,5-8 ч. Сочетание соединения Е8 и соединений Е7а и/или Е7Ь осуществляют в растворителе, таком как ТГФ, диоксан или ДМФА, при температуре 25-100°С на протяжении 2-24 ч, в присутствии сооснования, такого как ДИЭА или Εΐ₃Ν. Удаление диметоксибензильной группы из соединений Е9а и/или Е9Ь осуществляют, обрабатывая соединения Е9а и/или Е9Ь кислотой, такой как ТФУ, при температуре 25-75°С на протяжении 2-24 ч, с получением соединений Е10а и/или Е10Ь. Обработка соединений Е10а и/или Е10Ь соединением Е11 в присутствии основания, такого как №₂НРО₄, в растворителе, таком как ДМА, при 120°С дает соединения Е12а и/или Е12Ь. Обработка соединений Е12а и/или Е12Ь кислотой, такой как ТФУ или НС1, дает соединения Е13а и/или Е13Ь. Обработка соединений Е13а и/или Е13Ь галогенангидридом кислоты в присутствии сооснования, такого как ДИЭА или Εΐ₃Ν, при температуре 25-75°С в растворителе, таком как ДХМ, ТГФ, диоксан или ДМФА, дает соединения Е14а и/или Е14Ь.

- 29 019723

Схема Ε

Соединения Е3а и Е3Ь могут быть получены, начиная с соединений Ε1 и Ε2, путем обработки соединения Е1 основанием, таким как ΝαΗ, в растворителе, таком как ТГФ или диоксан, при температуре от -78 до 0°С с последующей обработкой соединением Е2. Соединения Е3а и Е3Ь необязательно разделяют перед последующим использованием. Обработка соединений Е3а и/или Е3Ь основанием, таким как ΝαΗ, и источником фторид-иона дает соединения Е4а и/или Е4Ь. Последующая обработка соединений Е4а и/или Е4Ь кислотой, такой как ТФУ или НС1, в растворителе, таком как ТГФ, ДХМ или диоксан, при температуре 0-75°С на протяжении 1-8 ч дает соединения Е5а и/или Е5Ь. Обработка соединений Е5а и/или Е5Ь основанием, таким как NаΗ, и источником фторид-иона дает соединения Е6а и/или Е6Ь. Обработка соединений Е6а и/или Е6Ь соединением Е7 в присутствии основания, такого как ТЭА или ДИЭА, в растворителях, таких как МеОН или ΕΐΘΗ, на протяжении 1-24 ч, дает соединения Е8а и/или Е8Ь. Обработка соединений Е8а и/или Е8Ь РОС1₃ при температуре 80-160°С дает соединения Е9а и/или Е9Ь. Альтернативно, соединения Е9а и/или Е9Ь могут быть получены обработкой соединений Е8а и/или Е8Ь Т§С1/№метилморфолином при температуре от комнатной до 100°С на протяжении 0,5-8 ч. Сочетание соединений Е9а и/или Е9Ь с соединением Е10 осуществляют в растворителе, таком как ТГФ, диоксан или ДМФА, при температуре 25-100°С на протяжении 2-24 ч, в присутствии сооснования, такого как ДИЭА или Εΐ₃Ν. Удаление диметоксибензильной группы из соединений Е11а и/или Е11Ь осуществляют, обрабатывая соединения Е11а и/или Е11Ь кислотой, такой как ТФУ, при температуре 25-75°С на протяжении

- 30 019723

2-24 ч, с получением соединений Р12а и/или Р12Ь. Обработка соединений Р12а и/или Р12Ь соединением Р13 в присутствии основания, такого как №₂НРО₄ в растворителе, таком как ДМА, при температуре 120°С, дает соединения Р14а и/или Р14Ь. Обработка соединений Р14а и/или Р14Ь кислотой, такой как ТФУ или НС1, дает соединения Р15а и/или Р15Ь. Обработка соединений Р15а и/или Р15Ь галогенангидридом кислоты в присутствии сооснования, такого как ДИЭА или Εΐ₃Ν, при температуре 25-75°С в растворителе, таком как ДХМ, ТГФ, диоксан или ДМФА, дает соединения Р16а и/или Р16Ь.

Схема О

Нагревание соединения О1 и О2 в НОАс до 50-100°С, выдерживая при этой температуре на протяжении 2-24 ч, дает соединение О3. Обработка соединения О3 соединением О4 в присутствии основания, такого как №ьНРО₄. в растворителе, таком как ДМА, при температуре 120°С дает соединение О5.

Схема Н

Раствор Н1 (5 ммоль; где К_Н представляет собой К₈, К₉, К₁₀ или К_п) и гидразина (30 ммоль) в изопропаноле или ЕЮН (5 мл) нагревают с помощью микроволн до температуры 60-160°С, выдерживая при этой температуре на протяжении 2-5 ч, в зависимости от субстратов. Твердый продукт отфильтровывают, промывают водой и сушат под глубоким вакуумом. Дополнительно, гидразин необязательно может быть удален путем упаривания смеси и совместного упаривания с МеОН и Εΐ₃Ν. Продукт может быть суспендирован в эфире, отфильтрован и высушен под глубоким вакуумом (например, на протяжении ночи).

Схема I к У” „/Ц *={ .

ν-υ и

Соединение И обрабатывают метил-3-бром-2-оксопропаноатом в присутствии основания, такого как Νη^Ο^ №₂СО₃, натрия фосфат (одно-, двух- или трехосновный) или К₂СО₃, в растворителе, таком как диоксан или ТГФ, и нагревают до температуры 50-100°С, выдерживая при этой температуре на протяжении 1-18 ч, с получением соединения структуры 12. Соединение 12 омыляют с использованием основания, такого как №ЮН, КОН или ЫОН, в растворителе, таком как МеОН, ΕЮН или спирто-водные смеси, при перемешивании на протяжении 1-18 ч при температуре 25-100°С, с получением соединения структуры 13. Соединение 13 можно обработать азидом натрия и РуВОВ в присутствии основания, такого как ТЭА, ДИЭА или пиридин, в безводном растворителе, таком как ДМА или ДМФА, перемешивая на протяжении 1-18 ч при температуре окружающей среды, с получением соединения 14. Соединение 14 перемешивают в трет-бутаноле на протяжении 1-18 ч при температуре 25-120°С с получением соединения 15. Соединение 15 обрабатывают кислотой, такой как ТФУ или НС1, в растворителе, таком как ДХМ или диоксан, и перемешивают на протяжении 1-18 ч при температуре 25-100°С. Полученный продукт с удаленной защитной группой далее обрабатывают хлорангидридом кислоты в присутствии основания, такого как ТЭА, ДИЭА или пиридин (что дает бис-ацилированный продукт), или в отсутствие основания

- 31 019723 (что дает моноацилированный продукт) в растворителе, таком как ДХМ, ТГФ, диоксан или ДМФА, перемешивая на протяжении 1-18 ч при температуре 25-100°С, с получением соединения структуры 16.

Схема I

К смеси основания, такого как ΝβΗ или калия трет-бутоксид, в растворителе, таком как диоксан или ТГФ, добавляют диэтил-2-метилмалонат при температуре от -78 до 0°С. Смеси позволяют нагреться до температуры окружающей среды на протяжении 1-4 ч. К полученной смеси порциями добавляют Л и далее реакционную смесь перемешивают на протяжении 1-18 ч при температуре 25-100°С с получением соединения структуры 12. Соединение 12 омыляют с использованием основания, такого как ΝαΟΗ, ΚΟΗ или ЫОН, в растворителе, таком как МеОН, ΕΐΟΗ или спирто-водные смеси, перемешивая на протяжении 1-18 ч при температуре 25-100°С, с получением соединения структуры 13 в форме соответствующей соли. Соединения 13 и А5 в присутствии реагентов соединения, таких как ЭДКИ и НоВТ или РуВОВ, в растворителе, таком как ДМФА или ДМА, перемешивают на протяжении 1-8 ч при температуре 25100°С, с получением соединений структуры 14. Соединение 14 нагревают в фосфора оксихлориде на протяжении 1-18 ч при температуре 80-160°С с получением соединения структуры 15. Альтернативно, соединение 15 может быть получено обработкой соединения 14 ТзС1Ж-метилморфолином при температуре от комнатной до 100°С на протяжении 0,5-8 ч. Соединение 15 обрабатывают 2,4-диметоксибензиламином в присутствии основания, такого как NаΗСΟз, ΝίΑίΧρ. натрия фосфат (одно-, двух- или трехосновный) или К2СО3, в растворителе, таком как ИПА, и нагревают в микроволновом реакторе до температуры 75150°С на протяжении 1-24 ч с получением соединения структуры 16. Соединение 16 обрабатывают кислотой, такой как ТФУ или Ж1, в растворителе, таком как ДХМ или диоксан, на протяжении 1-18 ч при температуре 25-100°С с получением соединения структуры 17. Соединение 17 обрабатывают бромацетонитрилом в присутствии основания, такого как NаΗСΟз, ΝίΑΤΧ.χ натрия фосфат (одно-, двух- или трехосновный) или К2СО3, в растворителе, таком как ИПА, на протяжении 1-18 ч при температуре 100°С в закупоренной пробирке с получением соединений структуры 18. Соединение 18 обрабатывают циклопропанкарбонилхлоридом в присутствии основания, такого как ТЭА, ДИЭА или пиридин, или в отсутствие основания, в растворителе, таком как ДХМ, ТГФ или диоксан, на протяжении 1-8 ч при температуре окружающей среды с получением соединений структуры 19.

Схема Κ

ОМв

Соединение Κ1 нагревают в фосфора оксихлориде на протяжении 1-18 ч при температуре 80-160°С, с получением соединения структуры Κ2. Альтернативно, соединение Κ2 может быть получено обработ- 32 019723 кой соединения К1 Т8С1/Ы-метилморфолином при температуре от комнатной до 100°С на протяжении 0,5-8 ч. Соединение К2 обрабатывают 2,4-диметоксибензиламином в присутствии основания, такого как ЫаНСО₃, Ыа₂СО₃, натрия фосфат (одно-, двух- или трехосновный) или К₂СО₃, в растворителе, таком как ИПА, и нагревают в микроволновом реакторе до 75-150°С на протяжении 1-24 ч, с получением соединения структуры К3. Соединение К3 обрабатывают кислотой, такой как ТФУ или НС1, в растворителе, таком как ДХМ или диоксан, на протяжении 1-18 ч при температуре 25-100°С с получением соединения структуры К4. Соединения структуры К4 с соединениями структуры К5 в присутствии КИ и основания, такого как гидрофосфат натрия, в растворителе, таком как ДМА или ДМЭ, нагревают до 50-120°С, выдерживая при этой температуре на протяжении 1-24 ч, с получением соединений структуры К6. Соединение К6 обрабатывают соответствующей борной кислотной или борным эфиром в присутствии катализатора, такого как палладия(0) тетракис(трифенилфосфин), и основания, такого как С§₂СО₃ (водн.) или К₂СО₃ (водн.), в растворителе, таком как диоксан, ТГФ или ДУЕТ, на протяжении 15 мин-8 ч при температуре 50-120°С, с получением соединения структуры К7.

Схема Ь

Соединение Ь1 обрабатывают соединением Ь2 и основанием (например, К₂НРО₄) в полярном растворителе (например, ДМА, ДМФА или ДМСО) и нагревают до температуры 65-85°С с получением соединения Ь3. Соединение Ь3 реагирует с соединением Ь4 и основанием (например, К₂СО₃) в полярном растворителе (например, ДМА, ДМФА или ДМСО) при температуре 130-160°С и атмосферном давлении до 125 фунт/дюйм Ν₂ с получением соединения Ь5.

Хиральные компоненты могут быть разделены и очищены с использованием любого из разнообразных методов, известных специалистам в данной области. Например, хиральные компоненты могут быть очищены с использованием жидкостной хроматографии в суперкритической фазе (СКЖХ). В одной из конкретных вариаций хиральный анализ аналитической СКЖХ/МС осуществляют с использованием системы аналитической СКРХ Вегдег (Аи1оСЬет, №\\агк, ΌΕ), которая состоит из контрольного модуля двойного жидкостного насоса Вегдег 8РС с насосом суперкритической жидкости Вегдег РСМ 1100/1200 и модификатором жидкостного насоса РСМ 1200, печью Вегдег ТСМ 2000 и аутосемплером А1со11 718. Объединенная система может контролироваться программным обеспечением В1-8РС Сйетйайоп, версия 3.4. Детектирование может быть осуществлено с помощью детектора \Уа1ег5 ΖΟ 2000, который работает в позитивном режиме с интерфейсом ионизации электрораспылением и интервалом сканирования 200800 Да (0,5 с на сканирование). Хроматографическое разделение может осуществляться на колонке СЫга1Рак АЭ-Н, СЫга1Рак А8-Н, СЫга1Се1 ОЭ-Н или СЫга1Се1 О1-Н (5 мкм, 4,6x250 мм; СЫга1 Тескпо1од1е8, 1пс. \Уе51 Скейег, РА), содержащей 10-40% метанола как модификатор с или без добавления аммония ацетата (10 мМ). Любое из многочисленных значений скорости потока может применяться, в том числе, например, 1,5 или 3,5 мл/мин со входным давлением, установленным на уровне 100 бар. Дополнительно, различные условия инъекции образца могут применяться, в том числе, например, инъекцией образца в 5 или 10 мл метанола с концентрацией 0,1 мг/мл.

В другой вариации препаративное хиральное разделение осуществляют с использованием системы очистки Вегдег МиШРгат II 8РС. Например, образцы могут быть загружены на колонку СЫга1Рак ΛΌ (21x250 мм, 10 м). В конкретных вариациях скорость потока для разделения может составлять 70 мл/мин, объем инъекции - до 2 мл и входное давление установлено на уровне 130 бар. Пакетные инъекции могут применяться для увеличения эффективности.

В каждой из упомянутых выше методик реакции или схем разнообразные заместители могут быть выбраны из числа других заместителей, чем указано в данном описании.

Описание синтеза конкретных соединений по данному изобретению, который базируется на показанной выше схеме реакции, приведено в данном описании.

Примеры ингибиторов сМЕТ.

Данное изобретение дополнительно объясняется с помощью следующих неограничивающих примеров, где описан синтез конкретных соединений по изобретению.

- 33 019723

Соединения 1 и 2. №(6-((3Н-[1,2,3]Триазоло[4,5-Ь]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-а]пиридин-2ил)-2,2,2-трифторацетамид и №(6-((1Н-[1,2,3]триазоло[4,5-Ь]пиридин-1-ил)метил)имидазо-[1,2а] пиридин-2 -ил) -2,2,2-трифторацетамид

Метил 2-(2,2,2-трифторацетамидо)имидазо[1,2-а]пиридин-6-карбоксилат (1В).

Соединение 1В получают, используя в качестве исходного материала соединение 1А, в 3 стадии в соответствии со способом, аналогичным описанному в патенте США № 6358971, который включен в данное описание путем ссылки в полном объеме. Конкретно, смесь метил-6-аминоникотината (1А, 3 г, 19,7 ммоль) и тозилхлорида (4,5 г, 23,6 ммоль) в пиридине (40 мл) нагревают до 80°С, выдерживая при этой температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и пиридин удаляют под вакуумом. Полученный остаток разбавляют водой и перемешивают в течение 10 мин. Полученное твердое вещество отфильтровывают и сушат под вакуумом с получением метил-6-(4метилфенилсульфонамидо)никотината, который использовали без дополнительной очистки. К суспензии метил-6-(4-метилфенилсульфонамидо)никотината (5,3 г, 17,3 ммоль) в безводном ДМФА последовательно прибавляют ДИЭА (3,31 мл, 19,03 ммоль) и затем 2-бромацетамид (2,63 г, 19,03 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч, после чего выливают в воду. Полученное твердое вещество отфильтровывают и сушат под вакуумом с получением метил-1-(2-амино-2оксоэтил)-6-(4-метилфенилсульфонамидо)-1,6-дигидропиридин-3-карбоксилата, который использовали без дополнительной очистки. К суспензии метил-1-(2-амино-2-оксоэтил)-6-(4метилфенилсульфонамидо)-1,6-дигидропиридин-3-карбоксилата (1,0 г, 2,8 ммоль) в ДХМ (20 мл) прибавляют ТФУА (8,0 мл, 57,5 ммоль) по каплям при комнатной температуре. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры и затем упаривают под вакуумом. Полученный остаток суспендируют в насыщенном растворе натрия бикарбоната и перемешивают в течение 15 мин. Полученное твердое вещество отфильтровывают и сушат под вакуумом с получением метил-2-(2,2,2-трифторацетамидо)имидазо[1,2-а]пиридин-6-карбоксилата (1В), который использовали без дополнительной очистки.

2,2,2-Трифтор-№(6-(гидроксиметил)имидазо [ 1,2-а]пиридин-2-ил)ацетамид (1С).

При перемешивании к раствору соединения 1В (470 мг, 1,64 ммоль) в безводном ТГФ (20 мл) пор циями прибавляют лития алюминия гидрид (155 мг, 4,09 ммоль) при 0°С. После перемешивания в течение 1 ч при 0°С реакцию гасят 0,16 мл воды с последующим добавлением 0,16 мл 15% раствора ΝαΟΗ и 0,48 мл воды. Гетерогенную реакционную смесь перемешивают в течение 0,5 ч при комнатной температуре и затем фильтруют сквозь броунмиллерит. Остаток промывают ТГФ. Фильтрат и промывную жидкость упаривают и неочищенный остаток очищают колоночной хроматографией с получением соединения 1С (220 мг, 52%). '11 ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 12,41 (с, 1Н), 8,52 (с, 1Н), 8,21 (с, 1Н), 7,47 (д, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,25 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 5,36 (т, 1=5,6 Гц, 1Н), 4,48 (д, 1=5,6 Гц, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 260,2 (М+Н)⁺.

№(6-((3Н-[1,2.3]Триазоло[4,5-Ь]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-а]пиридин-2-ил)-2,2,2-трифторацетамид и №(6-((1Н-[1,2,3]триазоло[4,5-Ь]пиридин-1-ил)метил)имидазо-[1,2-а]пиридин-2-ил)-2,2,2трифторацетамид (1 и 2).

При перемешивании к раствору соединения 1С (30 мг, 0,12 ммоль) в безводном ТГФ (3,0 мл) последовательно прибавляют соединение 1Ό (28 мг, 0,23 ммоль) и трифенилфосфин (61 мг, 0,23 ммоль). Реакционную смесь охлаждают до 0°С и диизопропилазодикарбоксилат (0,05 мл, 0,23 ммоль) прибавляют по каплям. По окончании добавления перемешивание продолжают еще в течение 0,5 ч при 0°С и затем в течение 12 ч при комнатной температуре. Растворитель удаляют под вакуумом и остаток очищают препаративной ВЭЖХ с получением соединений 1 и 2 в виде соли ТФУ. МС-ИЭР для обоих соединений: соотношение массы и заряда 362,1 (М+Н)⁺.

- 34 019723

Соединение 3. №(6-([1,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид. Способ А

6-Йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амина гидрохлорид (3В).

Соединение 3В синтезируют в соответствии с методикой, аналогично описанной в международной патентной публикации \УО 2008/06192 (Такеба Рйаттасеибса1 Сотрапу ЫтНеб), которая включена путем ссылки в данное описание в полном объеме. Конкретно, трет-бутил-6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин2-илкарбамат (3А, 5,9 г, 16,38 ммоль) растворяют в 4н. НС1 в диоксане (60 мл) и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Эфир (140 мл) прибавляют к реакционной смеси, образуется коричневый осадок. Осадок отфильтровывают и промывают эфиром с получением 6-йодимидазо[1,2Ь]пиридазин-2-амина гидрохлорида с количественным выходом. Полученный материал использовали без очистки. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 261,0 (М+Н)⁺.

№(6-Йодимидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (3 С).

Соединение 3С синтезируют в соответствии с методикой, аналогично описанной в международной патентной публикации \УО 2008/06192 (Такеба Рйаттасеибса1 Сотрапу ЫтНеб), которая включена в данное описание путем ссылки в полном объеме. 6-Йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амина гидрохлорид (4,45 г, 17,11 ммоль) и циклопропанкарбонилхлорид (1,35 мл, 18,82 ммоль) растворяют в ДМА (85 мл) и перемешивают в течение 3 ч при комнатной температуре. Далее реакционную смесь выливают в воду (400 мл); образуется коричневый осадок. Твердое вещество отфильтровывают и сушат под вакуумом с получением №(6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (4,2 г, 77%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,21 (с, 1Н), 8,26-8,17 (м, 1Н), 7,74 (д, 6=9,3 Гц, 1Н), 7,49 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 2,07-1,87 (м, 1Н), 0,97-0,77 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 329,1 (М+Н)⁺.

Ν-(6-([1,2,4]Триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (3).

№(6-Йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (0,5 г, 1,52 ммоль), [1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиол (0,23 г, 1,52 ммоль), трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (84 мг, 0,09 ммоль), 9,9-диметил-4,5-бис-(дифенилфосфино)ксантен (106 мг г, 0,18 ммоль) и ДИЭА (0,531 мл, 3,05 ммоль) растворяют в ДМЭ (15,2 мл) и нагревают в микроволновом реакторе до 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния, разбавляют ДМСО и очищают препаративной ЖХМС с получением №(6-([1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (1 г, 43%) в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,17 (с, 1Н), 8,57-8,44 (м, 1Н), 8,03-7,94 (м, 1Н), 7,96-7,88 (м, 2Н), 7,59 (ддд, 1=1,0, 6,6, 9,3 Гц, 1Н), 7,22-7,11 (м, 1Н), 7,11-7,03 (м, 1Н), 1,97-1,84 (м, 1Н), 0,83-0,73 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 352,3 (М+Н)⁺. Т.пл. 193-195°С.

Способ В

6-([1,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-илсульфанил)пиридазин-3-иламин.

Реакционную смесь [1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиола (8,49 г, 55,0 ммоль) и 6-хлорпиридазин-

3-амина (6,82 г, 50 ммоль) в уксусной кислоте (100 мл) нагревают до 80°С, выдерживая при этой температуре в течение 20 ч. Реакционную смесь десорбируют до сухого состояния с помощью роторного испарителя и полученный материал суспендируют в Н₂О (100 мл). К полученной суспензии порциями прибавляют твердый №₃СО₃ до рН 10 и затем смесь обрабатывают ультразвуком. Полученное твердое ве

- 35 019723 щество отделяют фильтрацией и промывают тщательно водой и затем диэтиловым эфиром. Твердое вещество сушат под вакуумом над Р₂О₅ с получением названного в заголовке соединения, 6([1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илсульфанил)пиридазин-3-иламина (11,0 г), в виде белого порошка. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 7,15-7,25 (м, 1Н), 7,53-7,58 (м, 1Н), 7,61 (ддд, 1=9,22, 6,69, 1,26 Гц, 1Н), 7,84-7,90 (м, 1Н), 7,99 (дт, 1=9,09, 1,01 Гц, 1Н), 8,51 (дт, 1=7,01, 1,04 Гц, 1Н), 8,79 (ш с, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 553,2 (М+Н)⁺.

Ν-(6-([1,2,4]Триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбокса мид.

Смесь 6-([1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)пиридазин-3-амин (2,443 г, 10 ммоль), N-(2бромацетил)циклопропанкарбоксамид (3,09 г, 15,00 ммоль), калия гидрофосфат (5,23 г, 30,0 ммоль) и калия йодид (0,830 г, 5,00 ммоль) в ДМА (100 мл) перемешивают при 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Дополнительное количество №(2-бромацетил)циклопропанкарбоксамида (2,06 г, 10 ммоль) и калия гидрофосфата (1,74г, 10 ммоль) прибавляют к смеси и реакционную смесь перемешивают при 120°С еще в течение 2 ч. Далее реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь снова перемешивают при температуре 140°С в течение 3 ч, после чего охлаждают до комнатной температуры. Полученное твердое вещество отфильтровывают и промывают ДМА. Фильтрат упаривают до объема 100 мл и затем выливают в воду (300 мл). Полученный осадок отделяют фильтрацией и промывают тщательно водой. Твердый материал ресуспендируют в 10% МеОН/СН₂С1₂ (100 мл), обрабатывают ультразвуком, кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин и охлаждают до комнатной температуры. Раствор в МеОН/СН₂С1₂ фильтруют сквозь слой кремния диоксида, промывают 10% МеОН/СН₂С1₂ (200 мл). К полученному выше органическому раствору прибавляют активированный уголь (0,5 г), раствор кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин и затем перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Смесь с углем фильтруют сквозь броунмиллерит и фильтрат упаривают до сухого состояния с получением твердого вещества белого цвета. Полученное твердое вещество кипятят с обратным холодильником в МеОН (10 мл) в течение 30 мин и охлаждают до комнатной температуры. Полученное твердое вещество белого цвета отделяют фильтрацией, промывают метанолом (2 мл) и сушат под вакуумом с получением названного в заголовке соединения, №(6-([1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (1,2 г). ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,17 (с, 1Н), 8,57-8,44 (м, 1Н), 8,03-7,94 (м, 1Н), 7,96-7,88 (м, 2Н), 7,59 (ддд, 1=1,0, 6,6, 9,3 Гц, 1Н), 7,22-7,11 (м, 1Н), 7,11-7,03 (м, 1Н), 1,97-1,84 (м, 1Н), 0,83-0,73 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 352,3 (М+Н)⁺. Т.пл. 193-195°С.

Способ С

6-Хлорпиридазин-3-амин, №(2-бромацетил)циклопропанкарбоксамид и калия гидрофосфат смешивают в ДМА при 75°С с получением №(6-хлоримидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида. Осуществляют реакцию №(6-хлоримидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид с [1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиола и К₂СО₃ в ДМА при температуре 145°С и давлении 100 фунт/дюйм² Ν₂ с получением №(6-([1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)цикло-пропанкарбоксамида.

Соединение 4. №(6-(6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид

5Н

ΗΝ

Η₂Ν*

Вт

200 °С Ν* νμρ, 2,4-ди-С1-бен«ол

РЩсДмЬ ХагмирЛок дмэ ДИПЭА

4А

6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиол (4А).

К суспензии 5-бром-2-гидразинилпиридина (1,85г, 10 ммоль) в смеси 1,4-дихлорбензола и ΝΜΡ (5:1, 10 мл) прибавляют изотиоцианато-3-метилбензол (1,5 г, 10 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин, 70°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин и затем нагревают с помощью микроволн до 200°С, выдерживая при этой температуре в течение 1,5 ч. Смесь выливают в эфир (20 мл). Твердое вещество отфильтровывают и промывают эфиром с получением названного в заголовке продукта.

- 36 019723 №(6-(6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (4). В пробирку с герметичной крышкой, содержащую №(6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид (100 мг, 0,3 ммоль), соединение 4А, Рй(йЬа)₂ (3%/моль), хаи1йрйо8 (5%/моль) и ДИПЭА (1,5 ммоль) прибавляют ДМЭ (2 мл). После дегазации под вакуумом смесь нагревают с помощью микроволн до 125°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Смесь очищают ЖХМС с получением названного в заголовке соединения в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц,

СЭС1_;-СЭ_;ОЭ 10:1) δ м.д. 8,5 (с, 1Н), 8,1 (с, 1Н), 7,8 (д, 1=9,8 Гц, 1Н), 7,7 (д, 1=9,2 Гц, 2Н), 7,60 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,1 (д, 1=9,36 Гц, 1Н), 1,7 (м, 1Н), 1,05 (м, 2Н), 0,90 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 430,2 (М+Н)⁺.

Соединение 5. №(6-(6-( 1 -Метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Τψ''··,

РДР(С^^)„С.^О₃ Д / дноксан , Н_гО ц

Смесь соединения 4 (15 мг, 0,35 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)1Н-пиразола (11 мг, 0,52ммоль), С§₂СО₃ (350 мг) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (т.е. Рй[Р(С₆Н₅)₃]₄) (1%/моль) в диоксан-Н₂О (20:1, 1,5 мл) нагревают с помощью микроволн до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Смесь очищают ЖХМС с получением названного в заголовке соединения в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃-СП₃ОЭ 10:1) δ м.д. 8,33 (с, 1Н), 8,14(с, 1Н), 7,75 (с, 1Н), 7,70 (с, 1Н), 7,67 (д, 1=9,5 Гц, 1Н), 7,56 (дд, 1=9,4 и 1,6 Гц, 1Н), 7,06 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 3,96 (с, 3Н), 1,67 (м, 1Н), 1,06 (м, 2Н), 0,90 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 432,2 (М+Н)⁺.

Соединение 6. №(6-(6-Циано-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид

К суспендированной смеси 6-хлорникотинонитрила (7 г, 50,8 ммоль) в Е1ОН (50 мл) прибавляют N^N4^ (10 г, 310,2 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 мин и затем при температуре 60°С в течение 5 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры. Твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и сушат под глубоким вакуумом с получением 6гидразинилникотинонитрила (3,5 г). Соединение 6 получают из 6-гидразинилникотинонитрила в соответствии с методикой синтеза соединения 4. ¹Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃-СП₃ОЭ 10:1) δ м.д. 11,37 (с, 1Н), 8,70 (т, 1=1,2 Гц, 1Н), 8,14 (с, 1Н), 8,11 (дд, 1=1,04 и 9,52 Гц, 1Н), 7,96 (дд, 1=1,12 и 9,52 Гц, 1Н), 7,61 (дд, 1=1,52 и 9,48 Гц, 1Н), 7,38 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 1,77 (м, 1Н), 1,06 (м, 2Н), 0,90 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 377,2 (М+Н)⁺.

Соединение 7. трет-Бутил-6-(6-хлор-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [1,2Ь] пиридазин-2 -илкарбамат νη₂

о.

ТА

I /)—ынвос

7В

6-Йодпиридазин-3-амин (7А).

Соединение 7А синтезируют в соответствии с методикой, аналогично описанной в международной патентной публикации \УО 2007/30366 (8шййк1те Веесйат Согрогайои), которая включена в данное

- 37 019723 описание путем ссылки в полном объеме. Конкретно, 6-хлорпиридазин-3-амин (10,0 г, 77,2 ммоль) смешивают с йодисто-водородной кислотой (78 мл, 57% водный раствор) и нагревают до 100°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи. Этилацетат (50 мл) прибавляют после охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры. Полученную смесь обрабатывают ультразвуком и фильтруют. Остаток на фильтре промывают обильным количеством этилацетата. Неочищенный материал затем сушат под глубоким вакуумом с получением 6-йодпиридазин-3-амин (7А; 24 г, 89%) в виде твердого вещества светло-желтого цвета, который использовали без дополнительной очистки. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 8,36-8,08 (м, 1Н), 7,95 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,12-7,03 (м, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 221,9 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-6 -йодимидазо [1,2-Ь] пиридазин-2 -илкарбамат (7В).

Смесь, содержащую соединение 7А (2,5 г, 11,3 ммоль), трет-бутил-2-хлорацетилкарбамат (2,4 г, 12,4 ммоль), натрия гидрофосфат (3,2 г, 22,6 ммоль) и ДМА (23 мл), нагревают до 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, выливают в колбу, содержащую 400 мл воды, и обрабатывают ультразвуком. Твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и затем сушат под вакуумом. Твердое вещество затем переносят в 600 мл этилацетата и фильтруют сквозь короткий столбик силикагеля. Фильтрат упаривают с получением соединения 7В (1,6 г, 39%) в виде твердого вещества темно-зеленого цвета, которое использовали без дополнительной очистки. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 10,21 (ш с, 1Н), 8,06-8,00 (м, 1Н), 7,69 (д, 1=9,9 Гц, 1Н), 7,46 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 1,48 (с, 9Н), МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 361,1 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-6-(6-хлор-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-илкарбамат (7).

Смесь соединения 7В (50 мг, 0,14 ммоль), 6-хлор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиола (28 мг, 0,15 ммоль), трис-(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (11 мг, 0,01 ммоль), 9,9-диметил-4,5-бис(дифенилфосфино)ксантена (14 мг, 0,025 ммоль), ДИЭА (48 мкл, 0,28 ммоль) и ДМЭ (1,4 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Полученный неочищенный материал очищают на силикагеле с использованием 5% МеОН в ДХМ. Самые чистые фракции упаривают с получением соединения 7 (0,06 г; количественный выход). ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 10,18 (ш с, 1Н), 8,86-8,82 (м, 1Н), 8,11-8,05 (м, 1Н), 7,89 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,73 (с, 1Н), 7,66 (дд, 1=1,9, 9,7 Гц, 1Н), 7,09 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 1,48-1,41 (м, 9Н), МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 418,2,0 (М+Н)⁺.

Соединение 8. 6-(6-Хлор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амин

8

Соединение 7 (0,15 г, 0,42 ммоль) и 4н. НС1 в диоксане (2 мл) объединяют и перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч с получением соединения 8. Неочищенную реакционную смесь упаривали и использовали без очистки. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 318,2 (М+Н)⁺.

Соединение 9. №(6-(6-Хлор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид

Соединение 8 (0,13 г, 0,41 ммоль), циклопропанкарбонилхлорид (112 мкл, 1,23 ммоль), триэтиламин (690 мл, 4,9 ммоль) и ДХЭ (2 мл) объединяют и перемешивают в течение 2 ч с получением соединения 9. Реакционную смесь упаривают и очищают препаративной ЖХ. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 386,3 (М+Н)⁺.

- 38 019723

Соединение 10. 6-(6-Бромбензотриазол-1-илметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-иламина гидрохлорид

3-Бромметил-6-хлорпиридазин (10В).

Раствор 3-хлор-6-метилпиридазина 10А (5,12 г, 40 ммоль) и ΝΒ8 (8,90г, 50 ммоль) в ССЦ (300 мл) кипятят с обратным холодильником при освещении (200 Вт) в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Остаток твердого вещества тщательно промывают С14С и фильтруют. Фильтраты объединяют, упаривают до небольшого объема и загружают на колонку с силикагелем. Колонку элюируют 50% гексана в этилацетате с получением 2,2 г целевого продукта (10В), который сушат под вакуумом и немедленно используют на следующей стадии. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 206,9 (М+Н)⁺.

С-(6-Хлорпиридазин-3-ил)метиламина гидробромид (10С).

В раствор соединения 10В (2,08г, 10 ммоль) в метаноле (50 мл) прибавляют предварительно насыщенный аммиаком метанол (200 мл) при 0°С. Реакционную смесь закупоривают и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Метанольный раствор упаривают и сушат под вакуумом с получением 2,2 г неочищенного продукта (10С) в виде соли гидробромида, которую использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 144,1 (М+Н)⁺.

(5-Бром-2-нитрофенил)-(6-хлорпиридазин-3-илметил)амин (10Е).

Раствор соединения 10С (1,00 г, 4,46 ммоль) и 4-бром-2-фтор-1-нитробензола (10Ώ) (0,97 г, 4,40 ммоль) в ДМФА (50 мл) и ДИЭА (1,30 г, 10 ммоль) перемешивают при 65°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь выливают в смесь лед/вода и осадок твердого вещества отделяют фильтрацией, промывают водой и сушат под вакуумом над Р2О5 в течение ночи с получением 1,5 г целевого продукта (10Е). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 342,9 (М+Н)⁺.

-Бром-1 -(6-хлорпиридазин-3 -илметил)-1 Н-бензотриазол (10В).

К раствору соединения 10Е (1,40 г, 4,08 ммоль) в НОАс/НС1 (50/5 мл) прибавляют порошок железа (2,2 г, 40 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 50°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин, затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Далее раствор ΝαΝθ2 (0,35 г, 5 ммоль) в воде (2 мл) прибавляют по каплям в полученный выше раствор кислоты при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч и упаривают до сухого состояния при сниженном давлении. Полученный остаток обрабатывают ультразвуком в смеси этилацетат/КНСОэ, осадок отфильтровывают и промывают тщательно этилацетатом. Органический раствор отделяют и сушат с помощью М§8О4, фильтруют и упаривают с получением 1,2 г целевого продукта (10В). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 323,9 (М+Н)⁺.

6-(6-Бромбензотриазол-1-илметил)пиридазин-3-иламин (10О).

Сквозь суспензию соединения 10В (1,2 г, 3,7 ммоль) в изопропаноле (15 мл) в пробирке из нержавеющей стали для обработки под давлением пропускают газообразный аммиак при температуре -78°С, выдерживая при этой температуре в течение 5 мин. Пробирку для обработки под давлением закупоривают и нагревают на масляной бане при температуре 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 дней. Далее реакционную смесь охлаждают снова, переносят в круглодонную колбу, упаривают и сушат под вакуумом с получением 1,3 г неочищенного продукта (10О), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 305,1 (М+Н)⁺.

[6-(6-Бромбензотриазол-1-илметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил]карбоновой кислоты третбутиловый эфир (10Н).

Смесь соединения 10О (1,0 г, 3,28 ммоль), (2-хлорацетил)карбаминовой кислоты трет-бутилового эфира (1,0г, 5,0 ммоль) и Ка2НРО4 (1,4г, 10 ммоль) в ДМА (50 мл) перемешивают при 135°С, выдерживая при этой температуре в течение 4 ч. Растворитель удаляют при сниженном давлении. Остаток обрабаты

- 39 019723 вают ультразвуком в смеси этилацетат/вода и осадок отфильтровывают. Этилацетатный раствор отделяют, упаривают и загружают на силикагель. Колонку с кремния диоксидом элюируют смесью гексан/этилацетат (1/2) с получением 0,45 г целевого продукта (10Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 444,1 (М+Н)⁺.

6-(6-Бромбензотриазол-1 -илметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-иламина гидрохлорид (10).

Раствор соединения 10Н (0,44г, 1,0 ммоль) в 4н. НС1 в диоксане (10 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 60 мин, упаривают и сушат под вакуумом с получением 0,3 г продукта (10) в виде соли гидрохлорида. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 344,1 (М+Н)⁺.

Соединение 11. Циклопропанкарбоновой кислоты [6-(6-бромбензотриазол-1-илметил)имидазо[1,2Ь] пиридазин-2 -ил] -амид

К раствору соединения 10 (0,34 г, 1 ммоль) в СН₂С1₂ (25 мл) прибавляют ДИЭА (0,31 г, 3 ммоль) с последующим прибавлением циклопропанкарбонилхлорида (0,23 г, 2,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 60 мин и упаривают. Остаток снова растворяют в метаноле (10 мл) и прибавляют аммония гидроксид (0,5 мл). Реакционную смесь перемешивают в течение 30 мин и упаривают. Остаток растворяют в этилацетате, промывают 5% раствором лимонной кислоты и затем насыщенным раствором NаНСОз. Органическую фракцию сушат с помощью Мд§О₄ и упаривают с получением 0,25 г целевого продукта (11). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 412,1 (М+Н)⁺.

Соединение 12. №(6-((6-Метил-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид

1) БегНОАкНС!

2) ΝηΝΟ^Ηι,Ο

-ΑΧ _________Η _

МагНРОд/ДМА

0>ВОС)НЫ 120

НС!

О

2) ΝΗ,ΟΗ/МеОН

Соединение 12Е получают с применением методики, аналогично описанной для соединения 10, за исключением того, что используют 2-фтор-4-метил-1-нитробензол вместо соединения 10Ό. Соединение 12 далее получают из соединения 12Е с применением способа, описанного для соединения 11. 'Н ЯМР (ДМСО-б₆): δ м.д. 11,20 (с, 1Н), 8,20 (с,1Н), 7,96 (м, 2Н), 7,68 (с, 1Н), 7,28 (д, 1Н), 7,10 (д, 1Н), 6,14 (с, 2Н), 2,46 (с, 3Н), 1,94 (м, 1Н), 0,80 (м, 4Н).

Соединение 13. Циклопропанкарбоновой кислоты {6-[6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)бензотриазол-1илметил] имидазо [1,2-Ь] пиридазин-2 -ил}амид

Смесь соединения 11 (20 мг, 0,05 ммоль), 1-метилпиразол-4-борной кислоты пинаколового эфира (20 мг, 0,1 ммоль) и каталитического количества Рб(бррР)С1₂ в насыщенном растворе NаНСОз в смеси

- 40 019723 диоксан/Н₂О (2/1, 0,5 мл) нагревают в микроволновой печи до 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. После очистки препаративной ЖХМС 11 мг целевого продукта получают в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆): δ м.д. 11,40 (с, 1Η), 8,32 (с, 1Η), 8,16 (с, 1Η), 8,08 (с, 1Н), 8,04 (д, 1Η), 7,96 (м, 2Н), 7,64 (м, 1Η), 7,14 (д, 1Η), 6,16 (с, 2Н), 3,90 (с, 3Н), 1,94 (м, 1Η), 0,80 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 414,2 (М+Н)⁺.

Соединения 14-24 синтезируют с применением способа, подобного получению соединения 13, из соединения 11 и соответствующий борной кислоты или эфира и очищают.

Соединение	Структура	РХ/МС	ЯМР
	ν=ν.		’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-^е) 5 м.д. м.д. 11,17 (с, 1 Н), 8,408,28 (м, 1Н), 8,218,11 (м, 1 Н), 7,97 (д, 7 - 9,3 Гц, 1 Н), 7,86-
°
14	427	7,78 (м, 1 Н), 7,69-
			7,45 (м, 4 Н), 7,31-
	Е		7,21 (м, 1 Н), 7,16(д,7
	Ы-(6-((6=(3-фторфенил)-1Н- бензо[<1][ 1,2,3 )триазол-1 -ил)метил)имидазо[ 1,2Ь]пиридазин-2-м)циклопропанкарбоксамнд		= 9,3 Гц, 1 Н), 6,306,17 (м, 2 Н), 1,92 (квин,7=6,1 Ги, 1 Н), 0,86-0,75 (м, 4 Н)
			Ή ЯМР (400 МГц,
			ДМСОЧ) δ м.д. 11,18 (с, I Н), 8,24 (с, 1 Н), 8,19-8,13 (м, 2 Н),
	о С-/		7,97 (д, 7=9,3 Гц, 1 Н), 7,81-7,73 (м, 3 Н),
15	о	409	7,52 (т, 7 =7,6 Гц 2 Н), 7,45-7,38 (м, 1 Н),
			7,16 (д, 7 = 9,1 Гц, 1
	Ь1«(6-((6-фенил-1 Н-бемзо[<1] [1,2,3]триазол-1 -		Н), 6,28-6,19 (м,2Н),
	ил)метил)имидазо[ 1,2-Ь]пиридазин-2-		1,92 (квин, 7=6,1 Гц,
	ил)цикло пропанкарбо ксамид		1 Н), 0,85-0,78 (м, 4 Н)
	о Х=/
16	/X \__/Ν	410	...
	М-(6-((6-(пиридин-3-ил)-1Нбензо[4][ 1,2,3]триазол- 1-ил)метил)имидазо[1,2Ь]ш1ридаЗин-2-11л)цик-тОпропанкарбоксамид
17	Νίγ'Ά, Ν=ν о 8*0 Н3с%	487	’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-де) δ м.д. 11,18 (с, 1 Н), 8,39 (с, 1 Н), 8,25-8,20 (м, 1 Н), 8,14 (с, 1Н), 8,09-8,03 (м,4Н), 7,98 (д, 7= 9,9 Гц, 1 Н), 7,86-7,80 (м, 1 Н), 7,17(д,7 = 9,3 Гц, 1 Н), 6,27 (с, 2 Н), 3,28 (с, 3 Н), 1,98-
	К-(6-((6-(4-(метилсульфонил)фенил)-1Нбензо[с1][ 1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2Ь]пиридазин~2'ил)циклопропанкарбоксамид		1,85 (м, 1 Н), 0,85- 0,77 (м, 4 Н)

- 41 019723

	Ν=Ν		'н ЯМР (400 МГц. ДМСО-ад δ м.д. 11,17 (с, 1 Н), 8,39 (с, 1 Н), 8,28-8.20 (м, 2 Н), 8,13 (с, 2 Н), 7,95 (дд,
ил -ο
18	501	7=8,7, 14,8 ГщЗН), 7,90-7,79 (м, 2 Н), 7,15 (д, 7 = 9,3 Гц, 1
	сн3		п;, 6,28 (с, 2 Н), 1,92
	Ν-(6-((6*(3-(3ΤΗΠθνΠ1.φθΗΙ£Τ)φ€Ηΐη)-ΙΗ' бензо[д][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид		(д, 7= 5,3 Гц, 1Н), 1,14 (т, 7= 7,2 Гц, 4 Н), 0,88-0,76 (м, 4 Н)
	Νΐ-Χ-Ч) ν=Ν Ο		'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-4) δ м.д. 11,18 (с, 1 Н), 8,64 (д, 7 = 1.8 Гц, 1 Н), 8,47-8,36 (м,2Н), 8,21 (д, 7 = 8.8 Гц, 1 Н), 8,14 (с, 1
19	440	Н), 7,98 (д, 7= 9,3 Гц,
	Ν=/~θ		1 Н), 7,91-7,79 (м, 2
	СН3		Н), 7,17 (д, 7= 9,3 Гц,
	М*(6<(6-(5-метоксипиридин*3‘Ил)-1Нбензо[д][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид		1 Н), 6,26 (с, 2 Н), 3,97-3,93 (м, 3 Н), 2,02-1,86 (м, 1 Н), 0,83-0,78 (м, 4 И)
	Ν_Ν		'н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а,) δ м.д. 11,20 (с, 1 Н), 8,17 (с, 1 Н), 8,08 (д, 7 =8,6 Гц, I Н), 7,99 (д, 7= 9,3 Гц,
), ΧΗ3 Ν'Ν
20	427	1 Н), 7,71 (с, 1 Н), 7,44-7,35 (м, 1 Н), 7,17(д,7 = 9,3 Гц, 1
	Η		Н), 6,20 (с, 2 Н), 2,26-
	Ν-(6-((6-(3,5-дим етил-1Н-пиразол-4-ил)-1Н-		2,16(м,6Н), 2,02-
	бензо[6][1,253]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-		1,88 (м, I И), 0,90-
	Ь]пиридазин-2-ил)цикло пропан карбоксамид		0,77 (м, 4 Н)
	ν=ν		'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-адбм.д. 11,17 (с, 1 11). 9.35 (д,./ 2,0 Гц, 1 Н), 9,19 9,04
	о		(м, 1 Н), 8,70-8,65 (М, 1 Н), 8,54 (с, 1 Н),
21		488	8,30-8,25 (м, 1 Н), 8,18-8,10 (м, 1 Н),
	№/ р-0		8,00-7,91 (м, 2 Н),
	СНз		7,17 (д, 7= 9,3 Гц, 1
	М-(6-((6-(5-(метилсульфонил)пиридин-3-ил)-1Н’		Н), 6,29 (с, 2 Н), 3,42
	беазо[<1][ 1,2,3 ]триазол-1 -ил)метил)имндазо[ 1,2-		(с, ЗН), 1,96-1,86 (м,
	Ь]пиридазин-2-мл)циклопропанкарбоксамид		1 Н), 0,85-0,77 (м, 4 Н)

- 42 019723

22	О \ ОН ОН (5)-Ν’(6·((6-( 1 -(2,3’ДИГИдроксипропил)-1Нпиразол-4-ил)-1 Н-бекзо[д][1,2,3]триазол-1 ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид	474	’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-дб) δ м.д. 11,18 (с, 1Н), 8,30 (с,1Н), 8,25 (с, 1Н), 8,14 (д, 2Н), 8,00 (м, ЗН), 7,70 (д, 1Н), 7,20 (д, 1Н), 6,16 (с, 2Н), 4,26 (м, 1Н>} 4,10 (м, ΙΗ), 3,34 (м,1Н),1,94(м, 1Н), 0,83 (м, 4Н).
	N^<^6 ν^Ν
	ΗΝ—1 ), V
	О		'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-сЦ) δ м.д. 11,18
			(с, 1Н), 8,30 (с, 1Н),
			8,25 (с, 1Н), 8,14 (д,
23	N н \-ОН	474	2Н), 8,00 (м, ЗН), 7,70 (л, 1Н),7Д0(д, 1Н), 6,16 (с, 2Н), 4,26 (м,
	Ен		1Н),4,10(м, 1Н), 3,34 (м,1Н),1,94 (м, 1Н),
	(Κ)-Ν-(6-((6-(1-(2,3-дигидроксипропил )-1Нпиразол-4-ил)-1Н-бензо[8][],2.3]триазол-1· ил)метил)имидазо[ 1.2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид		0,83 (м, 4Н)
	О НС1		’Н ЯМР (ДМСО-с16): 5 11,21 (с,1Н), 8,ЗО(с, 1Н), 8,20 (с, 1Н), 8,12 (с, 1Н), 8,02 (м, ЗН),
X
24 я	Ν'Ν	444	7,70 (д, 1Н), 7,14 (д,
			1Н), 6,16 (с, 2Н), 4,17
	НО		(т, 2Н), 3,77 (м, 2Н),
	Ν-(ό·((6-( 1 *(2-гидроксиэтил)-1 Н-пиразол-4-ил)· 1 Н-бензо[(1] [1,2,3]гриазол-1 ил)метнл)нмидазо[ 1,2-Ъ)пиридазиц-2Ш1)циклопропанкарбоксамид гидрохлорид		1,94 (м, 1Н), 0,83 (м, 4Н)

^аТемпература плавления >200°С.

Соединение 13. №(6-((6-(1-Метил-1Н-пиразол-4-ил)-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь] пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Этил-6-((6-бром-1Н-бензо[б] [ 1,2,3]триазол-1 -ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-карбоксилат.

Смесь 6-((6-бром-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1-ил)метил)пиридазин-3-амина 106 (4,8 г, 15,73 ммоль), этил-3-бром-2-оксопропаноата (4,60 г, 23,60 ммоль) и ΝαΙ 1СО₃ (4,0 г) в диоксане нагревают до 60°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Дополнительное количество этил-3-бром-2оксопропаноата (1,5 г, 7,87 ммоль, 0,5 экв.) прибавляют и перемешивают при температуре 60°С еще в течение 1 ч. Реакционную смесь фильтруют и промывают диоксаном. 4-Метилбензолсульфоновую кислоту (2,71 г, 15,73 ммоль) прибавляют к фильтрату и реакционную смесь нагревают до 75°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя и полученный остаток растворяют в ЕЮАс. Органическую фракцию промывают насыщенным раствором ΝαΗΕΟβ и затем 0,1н. ΝαΟΙΙ (3x150 мл). Раствор сушат с помощью Мд8О4, фильтруют, упаривают до сухого состояния и очищают ЖХСД (10% МеОН/СН^С^) с получением названного в заголовке соединения, этил-6-((6-бром-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-карбоксилата 13А (4,7 г, 11,6 ммоль, 50%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,30 (т, 1=7,07 Гц, 3Н), 4,30 (к, 1=7,07 Гц, 2Н), 6,26 (с, 2Н), 7,33 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,59 (дд, 1=8,72, 1,64 Гц, 1Н),

- 43 019723

8,08 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 8,23 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,31 (д, 1=1,26 Гц, 1Н), 8,77 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 401,2 (М+Н)⁺.

6-((6-Бром-1Н-бензо [С] [ 1,2,3]триазол-1 -ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-карбоновая кислота.

К раствору этил-6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2карбоксилата 13А (5 г, 12,46 ммоль) в 10% Н₂О/МеОН (200 мл) прибавляют ЫОН (0,597 г, 24,92 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего упаривают для удаления МеОН. Прибавляют Н₂О (100 мл) и рН доводят до 4 с помощью конц. НС1. Полученное твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают водой, затем ЕЮАс и сушат под вакуумом над Р₂О₅ с получением названного в заголовке соединения, 6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-карбоновой кислоты 13В (3,6 г 9,65 ммоль, 77%). Фильтрат экстрагируют ЕЮАс (3x150 мл), органические фракции объединяют, сушат с помощью Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с получением еще 0,6 г продукта. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 6,24 (с, 2Н), 7,24 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,58 (дд, 1=8,84, 1,77 Гц, 1Н), 8,04-8,14 (м, 2Н), 8,32 (д, 1=1,01 Гц, 1Н), 8,47 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 373,2 (М+Н)⁺.

6-((6-Бром-1Н-бензо [С] [ 1,2,3]триазол-1 -ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-карбонилазид.

При перемешивании к раствору 6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-карбоновой кислоты 13В (3,6 г, 9,65 ммоль), №этил-№изопропилпропан-2-амина (7,48 г, 57,9 ммоль) и натрия азида (6,27 г, 96 ммоль) в безводном ДМФА (60 мл) при комнатной температуре порциями прибавляют РуВОР (6,02 г, 11,58 ммоль) в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивают еще в течение 30 мин и затем выливают в смесь ЕЮАс/Н₂О (100:300 мл) и тщательно встряхивают. Полученный осадок фильтруют, промывают Н₂О, затем ЕЮАс и сушат под вакуумом над Р₂О₅ в течение 18 ч с получением названного в заголовке соединения, 6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-карбонилазида 13С (2,1г, 5,28 ммоль, 55%). Раствор в ЕЮАс промывают 5% раствором лимонной кислоты (2x100 мл), раствором NаΗСОз, сушат с помощью Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с получением дополнительного количества неочищенного продукта (1,6 г материала с чистотой 80%). Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 6,28 (с, 2Н), 7,37 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,59 (дд, 1=8,84, 1,77 Гц, 1Н), 8,09 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 8,26 (д, 1=10,10 Гц, 1Н), 8,32 (д, 1=1,26 Гц, 1Н), 8,92 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 398,2 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-6-((6-бром-1Н-бензо [С] [ 1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-илкарбамат.

Суспензию 6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-карбонилазида 13С (1 г, 2,51 ммоль) в 2-метилпропан-2-оле (50 мл, 753 ммоль) нагревают в микроволновой печи до 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч. Реакцию повторяют с другой порцией реакционной смеси. Порции реакционной смеси объединяют и растворитель удаляют с помощью роторного испарителя. Полученный остаток суспендируют в ЕЮАс/Н₂О и обрабатывают ультразвуком. Полученное твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают Н₂О, затем ЕЮАс и сушат под вакуумом над Р₂О₅ с получением названного в заголовке соединения, трет-бутил-6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-

1- ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-илкарбамата 13Ό (1,7 г, 3,83 ммоль, 77%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 1,47 (с, 9Н), 6,18 (с, 2Н), 7,13 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,58 (дд, 1=8,72, 1,64 Гц, 1Н), 7,94 (д, 1=9,85 Гц, 2Н), 8,07 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 8,31 (д, 1=1,77 Гц, 1Н), 10,24 (ш, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 444,2 (М+Н)⁺.

№(6-((6-Бром-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)-№(циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамид.

Смесь трет-бутил-6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2илкарбамата 13Ό (1,7 г, 3,83 ммоль) в смеси 4н. НС1/диоксан (30 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и полученный остаток сушат под вакуумом в течение 18 ч с получением 6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амина в виде соли НС1. Полученный материал используют без дополнительной очистки. К раствору 6-((6-бром-1Н-бензо[С][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-амина НС1 (1,8 г, 5,23 ммоль) в СН₂С1₂ при 0°С прибавляют №этил-№изопропилпропан-

2- амин (2,70 г, 20,92 ммоль) и затем циклопропанкарбонилхлорид (1,640 г, 15,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь промывают 5% раствором лимонной кислоты, затем насыщенным раствором NаΗСОз, сушат с помощью Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния. Полученный остаток очищают ЖХСД (5% МеОН/СН₂С1₂) с получением названного в заголовке соединения, №(6-((6-бром-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)-№(циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамида 13Е (2,0 г, 4,1 ммоль, 80%). Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,75-0,86 (м, 8Н) 1,93 (м, 2Н), 6,19 (с, 2Н), 7,16 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,51-7,64 (м, 1Н), 7,99 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,01-8,10 (м, 1Н), 8,13 (с, 1Н), 8,31 (д, 1=1,77 Гц, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 480,2 (М+Н)⁺.

- 44 019723

М-(6-((6-(1-Метил-1Н-пиразол-4-ил)-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Смесь Ы-(6-((6-бром-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)-М(циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамида 13Е (0,7 г, 1,457 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (0,303 г, 1,457 ммоль) и РбС1₂(брр1)-СН₂С1₂ (0,06 г, 0,075 ммоль) в смеси Ыа₂СО₃ (2н. раствор, 6 мл)/диоксан (12 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 110°С, выдерживая при этой температуре в течение 45 мин. Реакционную смесь фильтруют и промывают ЕЮАс. Реакцию повторяют дважды с другими порциями реакционной смеси. Органические растворы объединяют и промывают 5% раствором лимонной кислоты, затем раствором ЫаНСО₃, сушат с помощью Мд§О₄ и фильтруют. МеОН прибавляют к раствору в ЕЮАс с получением 5% МеОН (об./об.), полученный раствор фильтруют сквозь короткую колонку с кремния диоксидом и тщательно промывают 5% МеОН/ЕЮАс. Активированный уголь (1 г) прибавляют к элюенту и перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Раствор фильтруют сквозь броунмиллерит и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный материал суспендируют в ЕЮАс (50 мл) и обрабатывают ультразвуком. Полученное твердое вещество отделяют фильтрацией и промывают ЕЮАс с получением названного в заголовке соединения, Ы-(6-((6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-1Н-бензо[б][1,2,3]триазол-1ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида 13 (820 мг, 1,98 ммоль, 45%). Фильтрат упаривают и разбавляют 10% МеОН/ЕЮАс, загружают на короткую колонку с кремния диоксидом и элюируют 10% МеОН в этилацетате с получением дополнительного количества продукта (190 мг). ¹Н

ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,76-0,86 (м, 4Н), 1,88-1,97 (м, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 6,15 (с, 2Н), 7,12 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,66 (дд, 1=8,72, 1,39 Гц, 1Н), 7,93-8,01 (м, 2Н), 8,04 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 8,17 (с, 1Н), 8,26 (с, 1Н), 11,18 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 414,2 (М+Н)⁺. МР 250,2-251,6°С.

Соединение 25. М-(6-(6-(Проп-1-ен-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид расуиррп, гмс^со, дмэ ηνΑ>ν -X, Ло ^Ν χ

Ν’ /

4,4,5,5-тетраметил-2-(проп-1-еп-2-ил)-1,3,24

Смесь соединения 4 (50 мг, 0,10 ммоль), диоксаборолана (71 мг, 0,43 ммоль), Ск₂СО₃ (3 М; 0,11 мл, 0,30 ммоль) и РбС1₂(брр1)₂ (4,0 мг, 0,0005 ммоль) в ДМЭ (1,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент 25-50% АСЫ/0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют, и АСЫ удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют с получением соли ТФУ названного в заголовке соединения. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО ά₆) δ м.д. 11,17 (с, 1Н), 8,31 (с, 1Н), 8,14 (с, 1Н), 7,95 (с, 1Н), 7,91 (д, 1=9,5 Гц, 1Н), 7,64 (дд, 1=9,4 и 1,6 Гц, 1Н), 7,05 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 5,67 (с, 1Н), 5,29 (с, 1Н), 2,08 (м, 3Н), 1,89 (м, 1Н), 1,06 (м, 2Н), 0,90 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 391,1 (М+Н)⁺.

Соединение 26. М-(6-(6-Изопропил-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

К раствору М-(6-(6-(проп-1-ен-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (150 мг, 0,383 ммоль) в этаноле (20 мл) прибавляют платины(1У) оксид (4,35 мг, 0,019 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 24 ч при температуре 25°С и давлении Н₂ 10 фунт/дюйм². Далее реакционную смесь фильтруют сквозь броунмиллерит и фильтрат упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент 25-50% САЯ/0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и АСМ удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют с получением соли ТФУ названного в заголовке соединения (6,0 мг, 0,015 ммоль, выход 3,98%) в виде твердого вещества желтого цвета. ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,71-0,87 (м, 4Н), 1,19 (д, 1=6,82 Гц, 6Н), 1,79-1,98 (м, 1Н), 3,02 (дт, 1=13,71, 6,92 Гц, 1Н), 7,03 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,62 (дд, 1=9,47, 1,64 Гц, 1Н), 7,90-7,97 (м, 3Н), 8,26 (с, 1Н), 11,17 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 394,3 (М+Н)⁺.

- 45 019723

Соединение 27. 1 -(6-(6-(3 -Фторфенил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [1,2Ь]пиридазин-2-ил)-3 -(2-гидроксиэтил)мочевина

-(2-Г идроксиэтил)-3 -(6-йодимидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)мочевина.

К раствору 6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амина гидрохлорида (250 мг, 0,843 ммоль) и ДМАР (227 мг, 1,855 ммоль) в ДХМ (объем 5,0 мл) прибавляют метил-4-(хлоркарбонилокси)бензоат (199 мг, 0,927 ммоль) при 25°С. Реакционную смесь перемешивают при температуре 25°С в течение 1 ч с получением гетерогенной смеси темно-зеленого цвета, которую фильтруют. Твердое вещество ресуспендируют в ДХМ (объем 5,0 мл), обрабатывают этаноламином (2 М в МеОН, 0,843 мл, 1,686 ммоль) при комнатной температуре и затем перемешивают еще в течение 1 ч. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя и полученный остаток суспендируют в ЕЮАс (объем 10,0 мл). Смесь фильтруют, полученное твердое вещество черного цвета сушат под глубоким вакуумом и используют без дополнительной очистки.

-(6-(6-(3 -Фторфенил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)-3 -(2гидроксиэтил)мочевина.

Смесь 1-(2-гидроксиэтил)-3-(6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)мочевина (125 мг, 0,360 ммоль), 6-(3-фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиола (88 мг, 0,360 ммоль), Рй₂(йЬа)₃ (19,79 мг, 0,022 ммоль), ХайрЬок (25,00 мг, 0,043 ммоль) и ДИЭА (0,126 мл, 0,720 ммоль) в ДМЭ (объем 2,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (объем 1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент 20-45% АСЫ/0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и АСЫ удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют и разбавляют смесью вода/АСК (1:10, 5,0 мл). Прибавляют 2 капли НС1 и полученный раствор лиофилизируют с получением соли НС1 названного в заголовке соединения (20 мг, 0,043 ммоль, выход 11,96%) в виде твердого вещества коричневого цвета. 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 3,14 (к, 1=5,47 Гц, 2Н), 3,41 (м, 2Н), 6,61 (ш с, 1Н), 6,97-7,07 (м, 2Н), 7,21-7,32 (м, 1Н), 7,53 (тд, 1=7,96, 6,06 Гц, 1Н), 7,62 (д, 1=8,34 Гц, 1Н), 7,65-7,72 (м, 1Н), 7,83 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,99 (дд, 1=9,60, 1,77 Гц, 1Н), 8,11 (дд, 1=9,60, 1,01 Гц, 1Н), 8,69-8,93 (м, 1Н), 9,17 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 465,3 (М+Н)⁺.

Соединение 28. 2-Хлор-4-(3-(2-(циклопропанкарбоксамидо)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-6-илтио)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-ил)-М-метилбензамид

Смесь М-(6-(6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (150 мг, 0,349 ммоль), 3-хлор-4-(метилкарбамоил)фенилборной кислоты (112 мг, 0,523 ммоль), РйС1₂(брр£) (12,75 мг, 0,017 ммоль) и цезия карбоната (0,349 мл, 1,046 ммоль) в ДМЭ (объем 1,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (объем 1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером с использованием в качестве элюента градиента 20-45% АСМ/0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и АСМ удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют с получением соли ТФУ названного в заголовке соединения (6,0 мг, 0,012 ммоль, выход 3,32%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,69-0,85 (м, 4Н), 1,81-1,96 (м, 1Н), 2,75 (д, 1=4,55 Гц, 3Н), 7,07 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,51 (д, 1=8,08 Гц, 1Н), 7,79 (дд, 1=7,83, 1,77 Гц, 1Н), 7,87-7,97 (м, 3Н), 8,00 (дд, 1=9,60, 1,77 Гц, 1Н),

8,11 (дд, 1=9,60, 1,01 Гц, 1Н), 8,39 (д, 1=4,80 Гц, 1Н), 8,86 (д, 1=1,52 Гц, 1Н), 11,15 (с, 1Н). МС-ИЭР: соот

- 46 019723 ношение массы и заряда 4’9,2 (М+Н)⁺.

Соединение 29. Ν-(6-(6-( ’ -((2-Метоксиэтокси)метил)-’ Н-пиразол-4-ил)-[’ ,2,4]триазоло [4,3 а]пиридин-3 -илтио)имидазо[’ ,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Раствор 4-(4,4,5,5-тетраметил-’,3,2-диоксаборолан-2-ил)-’Н-пиразола (0,8 г, 4,’ ммоль), цезия карбоната (2,0 г, 6,2 ммоль) и ’-(хлорметокси)-2-метоксиэтана (0,59 мл, 5,2 ммоль) в ДМФА (’4 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 90°С, выдерживая при этой температуре в течение ’ ч. После начального нагревания прибавляют дополнительное количество ’-(хлорметокси)-2-метоксиэтана (0,59 мл) и цезия карбоната (2 г). Нагревание повторяют еще в течение ’ ч. Затем неочищенную реакционную смесь разбавляют водой (250 мл) и экстрагируют этилацетатом (3x50 мл). Названное в заголовке соединение очищают на колонке с силикагелем с использованием смеси ДХМ/ЕЮАс/МеОН (8:’,5:0,5) в качестве элюента с получением ’-(2-метоксиэтил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-’,3,2-диоксаборолан-2-ил)-’Н-пиразола (’,6 г) в виде масла светло-желтого цвета. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 283,2 (М+Н)⁺.

Смесь №(6-(6-бром-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (’00 мг, 0,232 ммоль), ’-((2-метоксиэтокси)метил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-’,3,2диоксаборолан-2-ил)-’Н-пиразола (328 мг, ’,’62 ммоль), РбСЦбррО (8,50 мг, 0,0’2 ммоль) и цезия карбоната (0,232 мл, 0,697 ммоль) в диоксане (объем ’,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до ’00°С, выдерживая при этой температуре в течение ’ ч. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (объем ’,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент ’5-40% ΑΟΝ/0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и ΑСN удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют с получением соли ТФУ названного в заголовке соединения (8,0 мг, 0,0’6 ммоль, выход 6,8’%) в виде твердого вещества бледножелтого цвета. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Й6) δ м.д. 0,72-0,78 (м, 4Н), ’,90 (м, ’Н), 3,20 (м, 3Н), 3,38-3,42 (м, 2Н), 3,54-3,58 (м, 2Н), 5,45 (м, 2Н), 7,00 (м, ’Н), 7,67 (м, ’Н), 7,9’-7,96 (м, 3Н), 8,04 (м, ’Н), 8,59 (м, ’Н), 8,76 (м, ’Н), ’ ’,’6 (с, ’Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 506,3 (М+Н)⁺.

Соединение 30. №(6-(6-(’-(2-(Диметиламино)-2-оксоэтил)-’Н-пиразол-4-ил)-[’,2,4]триазоло[4,3а]пиридин-3 -илтио)имидазо[’ ,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Раствор 4-(4,4,5,5-тетраметил-’,3,2-диоксаборолан-2-ил)-’Н-пиразола (0,8 г, 4,’ ммоль), цезия карбоната (2,0 г, 6,2 ммоль) и 2-хлор-Ы^И-диметилацетамида (0,47 мл, 4,5 ммоль) в ДМФА (’4 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 90°С, выдерживая при этой температуре в течение ’ ч. Затем неочищенную реакционную смесь разбавляют водой (300 мл) и экстрагируют этилацетатом (3x50 мл). Продукт очищают на колонке с силикагелем с использованием смеси ДХМ/ЕЮАс/МеОН (8:’,5:0,5) в качестве элюента с получением ^№диметил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-’,3,2-диоксаборолан-2-ил)-’Н-пиразол-’ил)ацетамида (’,3 г) в виде масла бледно-желтого цвета. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 280,3 (М+Н)⁺.

Смесь №(6-(6-бром-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (’00 мг, 0,232 ммоль), ^№диметил-2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-’,3,2-диоксаборолан-2ил)-’Н-пиразол-’-ил)ацетамида (324 мг, ’,’62 ммоль), РбС^бррГ) (8,50 мг, 0,0’2 ммоль) и цезия карбоната (0,232 мл, 0,697 ммоль) в диоксане (объем ’,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры ’00°С, выдерживая при этой температуре в течение ’ ч. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный

- 47 019723 материал разбавляют ДМСО (объем 1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент 15-40% ΑΟΝ/0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и ΑСN удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют с получением соли ТФУ названного в заголовке соединения (4,8 мг, 9,55 мкмоль, выход 4,11%) в виде твердого вещества желтого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 0,79 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,90 (д, 1=6,57 Гц, 1Н), 2,84 (с, 3Н), 3,03 (с, 3Н), 5,12 (с, 2Н), 7,00 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,87-7,97 (м, 3Н), 8,01-8,08 (м, 2Н), 8,31 (с, 1Н), 8,71 (с, 1Н), 11,16 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 503,3 (М+Н)⁺.

Соединение 31. Ν-(6-(6-( 1 -(2-Метоксиэтил)-1 Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Раствор 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-Ы-пиразола (0,8 г, 4,1 ммоль), цезия карбоната (2,0 г, 6,2 ммоль) и 1-бром-2-метоксиэтана (0,41 мл, 4,3 ммоль) в ДМФА (14 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 90°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. После начального нагревания дополнительное количество 1-бром-2-метоксиэтана (0,41 мл) прибавляют к реакционной смеси. Нагревание повторяют еще в течение 1 ч. Затем неочищенную реакционную смесь разбавляют водой (250 мл) и экстрагируют этилацетатом (3x50 мл). Продукт очищают на колонке с силикагелем с использованием смеси ДХМ/ЕЮАс/МеОН (8:1,5:0,5) в качестве элюента с получением 1-(2-метоксиэтил)-4(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (1,2 г) в виде масла бледно-желтого цвета. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 253,2 (М+Н)⁺.

Смесь №(6-(6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (100 мг, 0,232 ммоль), 1-(2-метоксиэтил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (410 мг, 1,627 ммоль), РбСЦбрр!) (8,50 мг, 0,012 ммоль) и цезия карбоната (0,232 мл, 0,697 ммоль) в диоксане (объем 1,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (объем 1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент 15-40% АС№0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и ΑСN удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют с получением соли ТФУ названного в заголовке соединения (6,0 мг, 0,013 ммоль, выход 5,43%) в виде твердого вещества желтого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6) δ м.д. 0,69-0,86 (м, 4Н), 1,90 (м, 1Н), 3,20 (м, 3Н), 3,63-3,70 (м, 2Н), 4,22-4,27 (м, 2Н), 7,00 (м, 1Н), 7,57 (м, 1Н), 7,86-7,95 (м, 3Н), 8,04 (м, 1Н), 8,08 (м, 1Н), 8,37 (м, 1Н), 11,16 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 476,3 (М+Н)⁺.

Соединение 32. №(6-(6-(1-(2-Гидроксиоксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-

3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

2-(4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил)этанол синтезируют в соответствии с методикой, описанной в публикации РСТ АО 2008/44022, которая включена в данном описании в полном объеме. Конкретно, 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол (5,0 г, 25,8 ммоль), 1,3-диоксолан-2-он (2,5 г, 28,3 ммоль) и натрия гидроксид (гранулы, 1,0 г, 25,8 ммоль) растворяют в ДМФА (206 мл). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. Активированный уголь прибавляют после охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры и реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч, после чего фильтруют сквозь броунмиллерит. Остаток на фильтре промывают ДМФА (120 мл) и фильтрат упаривают с получением 2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2

- 48 019723 диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразол-1-ил)этанола (6 г) в виде желтого масла. Полученный материал используют без дополнительной очистки. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 239,3 (М+Н)⁺.

Смесь №(6-(6-бром-|1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (500 мг, 1,2 ммоль), 2-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразол-1-ил)этанола (1,4 г, 5,8 ммоль), цезия карбоната (1,14 мл, 3 М раствор) и [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(11) (85 мг, 0,12 ммоль) в ДМЭ (5 мл) нагревают в микроволновом реакторе до температуры 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (объем 1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент 10-35% ЛСМ0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и ΑСN удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют и разбавляют смесью вода/ΑСN (1:10, 5,0 мл). Прибавляют 2 капли конц. НС1 и полученный раствор лиофилизируют с получением соли НС1 названного в заголовке соединения. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 11,16 (с, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 8,04-8,08 (м, 1Н), 8,02 (д, 1=1,01 Гц, 1Н), 7,91-7,95 (м, 1Н), 7,88-7,91 (м, 2Н), 6,99-7,05 (м, 1Н), 4,10-4,16 (м, 2Н), 3,73 (т, 1=5,56 Гц, 2Н), 1,90 (квин, 1=6,19 Гц, 1Н), 0,74-0,84 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 462,3 (М+Н)⁺. Т.пл. 182-184°С.

Соединение 33. 3 -(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-илтио)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-карбоновая кислота

-Меркапто-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-карбоновая кислота.

6-Хлорникотиновую кислоту (1,6 г) в МеОН (10 мл) обрабатывают ΝΉ₂ΝΉ₂ (2 г) при 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. После охлаждения до -20°С твердое вещество отфильтровывают с получением 560 мг соединения 33В. Соединение 33В обрабатывают изотиоцианатобензолом (141 мг) в 1,2-дихлорбензоле (5 мл) при 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 мин, и затем при 180°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Продукт очищают ЖХМС с получением 3меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбоновой кислоты (450 мг). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 196,1 (М+Н)⁺.

-(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо) 1,2-Ь]пиридазин-6-илтио)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин6-карбоновая кислота.

Соединение 33 получают из 3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбоновой кислоты в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединения 4. ¹Н ЯМР (400 МГц, ί.Όί.Ί₃-ί.Ό₃ΟΟ 10:1) δ м.д. 9,03 (ш с, 1Н), 8,01 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,68 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 7,36 (м, 1Н), 7,09 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 2,84 (м, 1Н), 1,72 (т, 1Н), 0,97 (м, 2Н), 0,84 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 396,1 (М+Н)⁺.

Соединение 34. 3 -(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [1,2-Ь] пиридазин-6 -илтио)^ циклопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбоксамид

ΝΗ

К раствору соединения 33 (10 мг), циклопропанамина (30 мг) и ДИЭПА (100 мкл) в ДМФА (1 мл) прибавляют ГАТУ (20 мг). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 0,5 ч и при температуре 60°С в течение 5 ч. Названное в заголовке соединение отделяют препаративной ЖХМС. ¹Н ЯМР (400 МГц, С1)С1_;-С1)_;О1) 10:1) δ м.д. 8,95 (ш с, 1Н), 8,06 (дд, 1=9,4, 1,6 Гц, 1Н), 7,98 (дд, 1=9,6, 1,0 Гц, 1Н), 7,93 (с, 1Н), 7,87 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 7,29 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 1,77 (т, 1Н), 1,04 (м, 1Н), 0,95 (м, 2Н). 0,89 (м, 2Н). 0,80 (м, 2Н), 0,63 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 435,1 (М+Н)⁺.

- 49 019723

Соединение 35. 3 -(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-илтио)-№изобутил[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбоксамид

Соединение 35 получают из 2-метилпропан-1-амина в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединения 34. Ή ЯМР (400 МГц, С1)_;О1)) δ м.д. 8,88 (ш с, 1Н), 8,72 (ш с, 1Н), 7,95-7,88 (м, 3Н), 7,15 (ш с, 1Н), 3,08 (т, 1=6,0 Гц, 2Н), 1,78 (м, 1Н), 1,3-1,15 (м, 3Н), 0,85 (м, 2Н), 0,82 (д, 1=6,8 Гц, 6Н). МСИЭР: соотношение массы и заряда 451,1 (М+Н)⁺.

Соединение 36. №(6-(6-(4-(Пиперазин-1-ил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Соединение 36 получают из №(6-(6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида и трет-бутил-4-(4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-

2-ил)фенил)пиперазин-1-карбоксилата по методике, аналогично описанной для синтеза соединения 5. Неочищенный продукт обрабатывают 4 М НС1 в диоксане при температуре 80°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Очистка смеси ЖХМС дает названное в заголовке соединение в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц С1)_;О1)) δ м.д. 8,61 (ш с, 1Н), 7,92-8,0 (м, 2Н), 7,8 (ш с, 1Н), 7,6 (м, 1Н), 7,57, (д 1=8,9 Гц, 2Н), 7,21 (ш с, 1Н), 7,08, (д, 1=8,8 Гц, 2Н), 3,47 (м, 4Н), 3,36 (м, 4Н), 1,82 (м, 1Н), 1,3-1,15 (м, 2Н), 0,85 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 512,2 (М+Н)⁺.

Соединение 37. №(6-(6-(3-Гидроксипроп-1-инил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Смесь №(6-(6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (43 мг), проп-2-ин-1-ола (10 мг), РЬ₃Р (1,1 мг) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (т.е. Рй[Р(С₆Н₅)₃]₄) (4 мг) в ТГФ (1,5 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 10 мин в атмосфере Ν₂ и затем прибавляют Си1 (1 мг). Смесь нагревают до 60°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи. Очистка смеси ЖХМС дает названное в заголовке соединение в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ м.д. 11,16 (с, 1Н), 8,67 (т, 1=1,0 Гц, 1Н), 8,00 (дд, 1=9,4 и 1,0 Гц,1Н), 7,93 (дд, 1=9,3 и 0,7 Гц, 1Н), 7,91 (с, 1Н), 7,53 (дд, 1=9,4 и 1,5 Гц, 1Н), 7,12 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 1,91 (м, 1Н), 1,24 (м, 2Н), 0,80 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 406,2 (М+Н)⁺.

Соединение 38. №(6-(6-(2Н-Тетразол-5-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

6-(2Н-Тетразол-5-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -тиол.

Смесь 3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбонитрила (360 мг, 2 ммоль), NаN₃ и ΝΉ₄α в ДМФА (10 мл) нагревают с помощью микроволн до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 ч. Продукт очищают ЖХМС с получением соединения 38В (320 мг). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 220,1 (М+Н)⁺.

-(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-илтио)-№изобутил[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбоксамид.

Соединение 38 получают из соединения 38В в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединения 4. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ м.д. 11,16 (с, 1Н), 9,14 (т, 1=1,5Гц, 1Н), 8,22 (дд, 1=9,6 и 1,0 Гц, 1Н), 8,14 (дд, 1=9,6 и 0,7 Гц, 1Н), 7,95 (с, 1Н), 7,94 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 7,18 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 1,90 (м, 1Н), 0,78 (шд, 1=5,8Гц, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 419,1 (М+Н)⁺.

- 50 019723

Соединение 39. К-(6-(6-(5-(Метоксиметил)-1,2,4-оксадиазол-3 -ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

(2)-К-Гидрокси-3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбоксимидамид.

Смесь 3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбонитрила (390 мг, 2 ммоль) и гидроксиламина (50 мас.%, в воде, 420 мг) в ЕЮН (4 мл) нагревают с помощью микроволн до 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 ч. Продукт очищают ЖХМС с получением соединения 39А и его таутомера (128 мг). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 210,0 (М+Н)⁺.

(2)-К-(6-(6-(К'-Гидроксикарбамимидоил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Соединение 39В и его таутомер получают из соединения 39А и его таутомера в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединения 4. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 410,1 (М+Н)⁺.

К-(6-(6-(5-(Метоксиметил)-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

К охлажденной (-10°С) смеси соединения 39В (30 мг) и ДИЭПА (200 мл) в смеси ТГФ/ДМЭ (1-1, 1,5 мл) прибавляют раствор 2-метоксихлорангидрида уксусной кислоты (11 мг) в ТГФ (0,5 мл). Смесь перемешивают при указанной температуре в течение 5 мин и затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь нагревают с помощью микроволн до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин, и очищают ЖХМС с получением названного в заголовке соединения в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ м.д. 11,49 (с, 1Н), 9,09 (ш с, 1Н), 8,19 (дд, 1=9,6 и 1,6 Гц, 1Н), 8,11-8,12 (м, 2Н), 7,92 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,37 (д, 1=9,4 Гц, 1Н), 4,77 (с, 1Н), 3,56 (с, 3Н), 1,77 (м, 1Н), 1,06 (м, 2Н), 0,93 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 463,1 (М+Н)⁺.

Соединение 40. К-(6-(6-(2-Гидроксипропан-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

2-(6-Хлорпиридин-3-ил)пропан-2-ол.

К раствору 1-(6-хлорпиридин-3-ил)этанона (2,0 г, 12,85 ммоль) в ТГФ (объем 25 мл) прибавляют метиллитий (16,07 мл, 25,7 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 1 ч и дают нагреться до комнатной температуры. Полученный раствор насыщенного красного цвета гасят водой (объем 50 мл), экстрагируют ЕЮЛс (1x50 мл) и органическую фракцию сушат над Мд8О₄. Органическую фракцию фильтруют и фильтрат выпаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный материал очищают ЖХСД (ДХМ/МеОН, 95:5) с получением 2-(6-хлорпиридин-3ил)пропан-2-ола (,985 г, 5,74 ммоль, выход 44,6%) в виде твердого вещества темно-красного цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСОЩ) δ м.д. 1,44 (с, 5Н), 5,32 (с, 1Н), 7,44 (д, 1=8,34 Гц, 1Н), 7,90 (дд, 1=8,34, 2,53 Гц, 1Н), 8,49 (д, 1=2,53 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 172,0 (М+Н)⁺.

2-(6-Гидразинилпиридин-3-ил)пропан-2-ол.

Смесь 2-(6-хлорпиридин-3-ил)пропан-2-ола (975 мг, 5,68 ммоль) и гидразингидрата (5512 мкл, 114

- 51 019723 ммоль) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры 110°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры и гидразин удаляют с помощью роторного испарителя. Полученный остаток желтого цвета используют без дополнительной обработки.

2-(3-Меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)пропан-2-ол.

Смесь 2-(6-гидразинилпиридин-3-ил)пропан-2-ола (250 мг, 1,495 ммоль) и 1-изотиоцианато-4нитробензола (269 мг, 1,495 ммоль) в ΑСN (объем 2,0 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляют ЕьО (объем 5,0 мл) и полученное твердое вещество отфильтровывают. Полученное твердое вещество содержит минимальное количество продукта. После стояния в течение 1 ч в фильтрате образуется осадок. Смесь фильтруют с получением 2-(5-(2гидроксипропан-2-ил)пиридин-2-ил)-№(4-нитрофенил)гидразинкарботиоамида (175 мг, 0,504 ммоль, выход 33,7%) в виде твердого вещества оранжевого цвета. Раствор 2-(5-(2-гидроксипропан-2ил)пиридин-2-ил)-№(4-нитрофенил)гидразинкарботиоамида (275 мг, 0,792 ммоль) в ДМЭ (объем 2,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры 110°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь десорбируют до сухого состояния на силикагеле с помощью роторного испарителя и очищают соединение ЖХСД, элюируя смесью ДХМ/МеОН (98:2) с получением 2-(3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)пропан-2-ола.

№(6-(6-(2-Гидроксипропан-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Смесь №(6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (62,7 мг, 0,191 ммоль), Рб₂(бЬа)₃ (10,50 мг, 0,011 ммоль), Хайрйок (13,27 мг, 0,023 ммоль), ДИЭА (0,067 мл, 0,382 ммоль) и 2-(3меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)пропан-2-ола (40 мг, 0,191 ммоль) в ДМЭ (объем 1,5 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный неочищенный материал разбавляют ДМСО (объем 1,0 мл) и очищают препаративной ЖХМС с массовым триггером, используя в качестве элюента градиент 20-45% АСМ0,05% ТФУ (водн.). Собранные фракции объединяют и ΑСN удаляют с помощью роторного испарителя. Полученную смесь лиофилизируют с получением соли ТФУ названного в заголовке соединения (3,3 мг, 8,06 мкмоль, выход 4,22%) в виде твердого вещества коричневого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,72-0,85 (м, 3Н), 1,43 (с, 4Н), 1,91 (м, 1Н), 7,04 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,70 (дд, 1=9,60, 1,77 Гц, 1Н), 7,87-8,00 (м, 2Н), 8,32 (д, 6=1,52 Гц, 1Н), 11,18 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 410,3 (М+Н)⁺.

Соединение 41. №(6-(6-(Трифторметил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение получают с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 6. ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,16 (с, 1Н), 9,03 (д, 1=1,3 Гц, 1Н), 8,25-8,17 (м, 1Н), 7,96-7,90 (м, 2Н), 7,83 (дд, 1=1,5, 9,6 Гц, 1Н), 7,17 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 1,91 (квин, 1=6,3 Гц, 1Н), 0,840,76 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 420,3 (М+Н)⁺.

Соединение 42. №(6-(6-Метил-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение получают с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 6. ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,17 (с, 1Н), 8,35 (д, 1=1,3 Гц, 1Н), 7,96-7,87 (м, 3Н), 7,46 (дд, 1=1,5, 9,3 Гц, 1Н), 7,00 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 2,34-2,27 (м, 3Н), 1,95-1,86 (м, 1Н), 0,82-0,75 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 366,3 (М+Н)⁺.

Соединение 43. №(6-(7-Метил-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение получают с применением методики, аналогично описанной для

- 52 019723 синтеза соединения 6. ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,17 (с, 1Н), 8,38 (д, 1=7,1 Гц, 1Н), 7,96-7,88 (м, 2Н), 7,76 (д, 1=1,3 Гц, 1Н), 7,06 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,00 (дд, 1=1,5, 7,1 Гц, 1Н), 2,44 (с, 3Н), 1,95-1,86 (м, 1Н), 0,83-0,73 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 366,3 (М+Н)⁺.

Соединение 44. Ν-(6-(6-(3 -Фторфенил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение получают с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 6. ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,15 (с, 1Н), 8,81 (д, 1=1,5 Гц, 1Н), 8,11 (дд, 1=1,0, 9,6 Гц, 1Н), 7,99 (дд, 1=1,6, 9,5 Гц, 1Н), 7,95-7,89 (м, 1Н), 7,68 (дт, 1=2,1, 10,4 Гц, 2Н), 7,62 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,53 (тд, 1=6,2, 8,0 Гц, 1Н), 7,27 (тд, 1=2,1, 8,3 Гц, 1Н), 7,07 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 1,89 (квин, 1=6,3 Гц, 1Н), 0,86-0,74 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 446,3 (М+Н)⁺.

Соединение 45. №(6-(Дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Способ А

1-трет-Бутил-3-этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)малонат.

трет-Бутилэтилмалонат (41,3 мл, 211 ммоль) прибавляют по каплям к суспензии натрия гидрида (19,33 г, 483 ммоль) в диоксане (1000 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 0°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч, после чего дают нагреться до комнатной температуры. Затем 3,6-дихлорпиридазин (30 г, 201 ммоль) прибавляют порциями при 25°С. Реакционную смесь перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч и затем растворитель удаляют с помощью роторного испарителя. Полученный остаток растворяют в ЕЮАс (400 мл) и органическую фракцию промывают насыщенным раствором NаНСОз (400 мл), сушат над Мд8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Реакцию повторяют с другой порцией реакционной смеси. Объединенный неочищенный остаток обеих серий очищают ЖХСД (гексан/ЕЮАс, 8:2) с получением названного в заголовке соединения, 1-трет-бутил-3-этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)малоната (86,5 г, 288 ммоль, 71,3%). ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,12-1,23 (м, 3Н), 1,36-1,52 (м, 9Н), 4,20 (м, 1=10,71, 7,22, 7,22, 3,85, 3,85 Гц, 2Н), 5,29 (с, 1Н), 7,85 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 7,99 (д, 1=8,84 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 301,2 (М+Н)⁺.

-трет-Бутил-3 -этил-2-(6-хлорпиридазин-3 -ил)-2-фтормалонат.

К раствору 1-трет-бутил-3-этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)малоната 45А (86,5 г, 288 ммоль) в ТГФ (2400 мл) прибавляют №1Н (12,65 г, 316 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при температуре 0°С в течение 15 мин. Мутный раствор 8е1есГ1иог (112 г, 316 ммоль) в ДМФА (сухой, 800 мл) прибавляют по каплям при 0°С и затем реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры в течение 2 ч. Далее реакционную смесь гасят насыщенным раствором ΝΗ₄Ο (250 мл) и выпаривают до объема при

- 53 019723 близительно 1500 мл. К полученной смеси прибавляют Е1₂О (300 мл) и воду (50 мл). Слои разделяют и водную фракцию экстрагируют ЕьО (3x300 мл). Объединенные органические фракции затем промывают насыщенным раствором NаΗСОз (3x150 мл), сушат с помощью Мд8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Остаток очищают ЖХСД (гексан/ЕЮЛс, 8:2) с получением 1-трет-бутил-3-этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-фтормалоната 45В (70,2 г, 220 ммоль, 77%). ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-40 δ м.д. 1,24 (т, 1=7,20 Гц, 3Н), 1,46 (с, 9Н), 4,28-4,43 (м, 2Н), 8,14 (с, 2Н). МСИЭР: соотношение массы и заряда 319,2 (М+Н)⁺.

Этил 2-(6-хлорпиридазин-3 -ил)-2-фторацетат.

Раствор 1-трет-бутил-3-этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-фтормалоната 45В (60,2 г, 189 ммоль) в 300 мл смеси ТФУ/ДХМ (1:1) перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч, после чего упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный остаток растворяют в Е1ОЛс (300 мл), промывают насыщенным раствором NаΗСОз, сушат над Мд8О₄ и затем упаривают до сухого состояния с получением названного в заголовке соединения, этил-2-(6-хлорпиридазин-

3-ил)-2-фторацетата 45С (36,6 г, 167 ммоль, 89%). Материал используют немедленно, без дополнительной очистки. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,18 (т, 1=7,20 Гц, 3Н), 4,23 (кд, 1=7,12, 4,42 Гц, 2Н), 6,43-6,62 (м, 1Н), 8,00-8,12 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 219,0 (М+Н)⁺.

Этил 2-(6-Хлорпиридазин-3 -ил)-2,2-дифторацетат.

К раствору этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-фторацетата (36,6 г, 167 ммоль) в безводном ТГФ (500 мл) по каплям при температуре -78°С прибавляют литий гексаметилдисилазид (201 мл, 201 ммоль). Через 15 мин раствор 8е1ес1Г1ног (71,2 г, 201 ммоль) в ДМФА (183 мл) прибавляют по каплям. По окончании добавления реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры на протяжении 30 мин. Далее прибавляют насыщенный раствор N^01 (70 мл) и ТГФ удаляют с помощью роторного испарителя. Полученный остаток разбавляют водой (500 мл), экстрагируют Е1₂О (3x100 мл), сушат с помощью Мд8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния. Полученный материал очищают ЖХСД (гексан/Е1ОЛс, 8:2) с получением этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2,2-дифторацетата 45Ό (20,8 г, 88 ммоль, 52,5%). ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆ δ м.д. 1,25 (т, 1=7,07 Гц, 3Н), 4,38 (к, 1=7,07 Гц, 2Н), 8,26 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 8,33 (д, 1=8,84 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 237,1 (М+Н)⁺.

№-(5-Бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2,2-дифторацетогидразид.

К раствору этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2,2-дифторацетата (10,8 г, 45,6 ммоль) и 5-бром-2гидразинилпиридина (8,58 г, 45,6 ммоль) в безводном МеОН (100 мл) прибавляют ДИЭА (5,90 г, 45,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и полученный материал разбавляют Е1ОЛс. Органическую фракцию промывают водой и упаривают до сухого состояния. Полученный остаток очищают ЖХСД (Е1ОЛс) с получением названного в заголовке соединения, №-(5-бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин3-ил)-2,2-дифторацетогидразида 45Е (13,3 г, 35,1 ммоль, выход 77%). ’Н ЯМР (400 МГц, СИС1₃) δ м.д. 6,62 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 7,11 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,47-7,60 (м, 2Н), 8,06 (д, 1=2,53 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 377,9 (М+Н)⁺.

6-Бром-3 -((6-хлорпиридазин-3 -ил)дифторметил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин.

Смесь №-(5-бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин-3 -ил)-2,2-дифторацетогидразида (1,0 г, 2,64 ммоль) и РС1₅ (1,2 г, 8 ммоль) в РОС1₃ (40,5 г, 264 ммоль) нагревают до температуры 140°С в закупоренной пробирке, выдерживая при этой температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и полученный остаток разбавляют Е1ОЛс. Органический раствор промывают насыщенным раствором NаΗСО₃, сушат с помощью Мд8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния. Полученный материал очищают ЖХСД (градиент 50-100% гексана в Е1ОЛс) с получением названного в заголовке соединения, 6-бром-3 -((6-хлорпиридазин-3 -ил)дифторметил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридина 45Е (0,8 г, 2,21 ммоль, 84%). ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 7,75 (дд, 1=9,85, 1,77 Гц, 1Н), 8,01 (дд, 1=9,85, 1,01 Гц, 1Н), 8,31 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 8,42-8,51 (м, 1Н), 8,93 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 359,9 (М+Н)⁺.

6-Бром-3-((6-хлорпиридазин-3-ил)дифторметил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин 45Е также получают смешиванием №-(5-бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2,2-дифторацетогидразида (1,514 г, 4 ммоль) и 4-метилбензол-1-сульфонилхлорида (0,839 г, 4,40 ммоль) в этилацетате (объем 25 мл) и охлаждением смеси до температуры 10°С в защитной атмосфере азота. 4-Метилморфолин (1,142 мл, 10,40 ммоль) прибавляют в течение 2 мин. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 6 ч. Прибавляют дополнительное количество 4-метилморфолина (0,44 мл, 4 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 60°С, выдерживая при этой температуре в течение 24 ч, для снижения содержания промежуточного соединения имидоилхлорида до уровня ниже 1% по данным ВЭЖХ. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. Прибавляют Е1ОЛс (30 мл) и воду (13 мл) и смесь перемешивают в течение 30 мин. Водную фракцию отделяют. Органическую фракцию упаривают и остаток очищают на колонке с силикагелем с получением 1,28г продукта (выход 89%).

- 54 019723

6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)-Н-(2,4-диметоксибензил)пиридазин-3 амин.

Реакционную смесь 6-бром-3 -((6-хлорпиридазин-3 -ил)дифторметил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридина (0,5 г, 1,387 ммоль), (2,4-диметоксифенил)метанамина (0,696 г, 4,16 ммоль) и №1НСО₃ (0,58 г, 7,0 ммоль) в ИПА (10 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и полученный остаток разбавляют ЕЮАс. Органический раствор промывают водой, отделяют и пропускают сквозь короткий столбик кремния диоксида с получением названного в заголовке соединения, 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-

a] пиридин-3-ил)дифторметил)-Н-(2,4-диметоксибензил)пиридазин-3-амино 45С (0,6г, 1,22 ммоль, 88%). ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 3,71-3,76 (с, 3Н), 3,79 (с, 3Н), 3,85-3,89 (м, 2Н), 6,46 (дд, 1=8,34, 2,53 Гц, 1Н), 6,57 (д, 1=2,27 Гц, 1Н), 6,61-6,66 (м, 1Н), 7,08 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,14 (д, 1=8,34 Гц, 1Н), 7,81 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,99 (дд, 1=9,60, 1,01 Гц, 1Н), 8,70 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 491,1 (М+Н)⁺.

6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)пиридазин-3-амин.

Раствор 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)-Н-(2,4-диметоксибензил)пиридазин-3-амина (16,5 г, 33,6 ммоль) и анизола (5,45 г, 50,4 ммоль) в ТФУ (150 мл) перемешивают при 70°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя и полученный остаток обрабатывают ультразвуком в растворе Еΐ₂Ο/NаΗСΟ₃ (рН 7). Полученное твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают водой, затем ЕьО и сушат под вакуумом над Р₂О₅ с получением названного в заголовке соединения, 6-((6-бром[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)пиридазин-3-амина 45Н (11,0 г, 32,2 ммоль, 96%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 7,14 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,71 (дд, 1=9,85, 1,77 Гц, 1Н), 7,92 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,92 (д, 1=10,20 Гц, 1Н), 8,02 (д, 1=10,20 Гц, 1Н), 8,74 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 340,9 (М+Н)⁺.

Метил-6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2карбоксилат.

Реакционную смесь 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)пиридазин-3 амина (11,0 г, 32,2 ммоль), метил-3-бром-2-оксопропаноата (11,67 г, 64,5 ммоль) и №1НСО₃, (10,84 г) в диоксане (150 мл) нагревают до 80°С, выдерживая при этой температуре в течение 4 ч, с образованием реакционной смеси красного цвета. Твердое вещество отфильтровывают, промывают диоксаном и объединенные фильтраты упаривают с помощью роторного испарителя. Полученный остаток растворяют в ЕЮАс и промывают 0,1н. раствором №ЮН до исчезновения красного цвета. Органическую фракцию затем отделяют и упаривают до сухого состояния. Полученный материал очищают ЖХСД (5:95, МеОН/ЕЮАс) с получением названного в заголовке соединения, 451 (4,0 г, 9,45 ммоль, 30%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 3,88 (с, 3Н), 7,77 (дд, 1=9,73, 1,64 Гц, 1Н), 7,85 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,97-8,08 (м, 1Н), 8,53 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,98 (д, 1=1,01 Гц, 1Н), 9,02 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 423,1 (М+Н)⁺.

6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2карбоновая кислота.

Раствор 3 -метил-6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [1,2-

b] пиридазин-2-карбоксилата (4,0 г, 9,45 ммоль) и ЫОН (0,340 г, 14,18 ммоль) в смеси 10% Н₂О/МеОН (150 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя, и полученный остаток разбавляют Н2О (100 мл). рН водной фракции доводят до 5 с помощью конц. НС1. Полученный осадок собирают, промывают водой, ЕЮАс и сушат под вакуумом над Р₂О₅ в течение 18 ч с получением названного в заголовке соединения, 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-карбоновой кислоты 451 (3,5г, 8,55 ммоль, 90%). ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 7,76 (дд, 1=9,85, 1,77 Гц, 1Н), 7,82 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,02 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,51 (д, 1=9,85 Гц, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 8,97 (с,1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 409,0 (М+Н)⁺.

6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-карбонилазид.

При перемешивании к раствору 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)дифторметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-карбоновой кислоты (3,5 г, 8,55 ммоль), Н-этил-Νизопропилпропан-2-амина (6,63 г, 51,3 ммоль) и натрия азида (5,56 г, 86 ммоль) в безводном ДМФА (60 мл), прибавляют порциями РуВОР (5,34 г, 10,27 ммоль) при комнатной температуре в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивают еще в течение 30 мин и разбавляют ЕЮАс (200 мл). Далее реакционную смесь выливают в 10% водный раствор лимонной кислоты (200 мл), органическую фракцию отделяют и промывают раствором лимонной кислоты (2x100 мл), насыщенные раствором №1НСО₃ (3x100 мл) и насыщенным раствором №1С1. Водную фракцию экстрагируют ЕЮАс (200 мл), органические фракции объединяют, сушат с помощью Мд8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный остаток растирают со смесью ЕьО/гексан (1:1), твердое веще- 55 019723 ство отделяют фильтрацией и сушат под вакуумом над Р2О5 с получением названного в заголовке соединения, 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2карбонилазида 45К (3,2 г, 7,37 ммоль, 92%). Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 7,77 (дд, 1=9,85, 1,77 Гц, 1Н), 7,88 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,00-8,05 (м, 1Н), 8,56 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,98 (с, 1Н), 9,14 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 434,0 (М+Н)⁺. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 406,0 (М+Н)⁺.

трет-Бутил-6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин2-илкарбамат.

6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-карбонилазид (3,2 г, 7,37 ммоль, в виде 4 порций) в трет-бутаноле (10 мл) нагревают в микроволновом реакторе до температуры 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя, полученный остаток разбавляют ЕЮАс, промывают 5% раствором лимонной кислоты и насыщенным раствором NаНСОз. Органическую фракцию пропускают сквозь слой кремния диоксида, промывают смесью ЕЮАс/МеОН (95:5) и затем упаривают с получением названного в заголовке соединения, трет-бутил-6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [1,2Ь]пиридазин-2-илкарбамата 45Ь (2,8г, 5,83 ммоль, 79%), который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,47 (с, 9Н), 7,66 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,727,78 (м, 1Н), 7,96-8,06 (м, 2Н), 8,22 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 10,40 (ш, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 480,1 (М+Н)⁺.

6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-амин.

Раствор трет-бутил-6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [1,2Ь]пиридазин-2-илкарбамата (2,8 г, 5,83 ммоль) в смеси 4н. НС1/диоксан (25 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и остаток сушат под вакуумом с получением названного в заголовке соединения, 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-

a] пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амина 45М (2,2 г, 5,84 ммоль, 92%), в виде соли НС1. Полученный материал используют без дополнительной очистки. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 380,1 (М+Н)⁺.

№(6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)-№ (циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамид.

К раствору 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин2-амина (2,2 г, 5,84 ммоль) и ДИЭА (4,53 г, 35,0 ммоль) в СН₂С1₂ (250 мл) прибавляют по каплям циклопропанкарбонилхлорид (1,831 г, 17,52 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Далее реакционную смесь промывают 5% раствором лимонной кислоты (2x100 мл) и затем промывают NаНСОз (2x100 мл). Далее органическую фракцию сушат с помощью Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный материал очищают ЖХСД (ДХМ/МеОН, 95:5) с получением названного в заголовке соединения, N-(6((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)-№(циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамида 45н. (2,2г, 4,27 ммоль, 73%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 0,83-1,03 (м, 8 Н) 2,05-2,12 (м, 2Н), 7,70-7,87 (м, 2Н), 7,97-8,06 (м, 1Н), 8,48 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 8,99 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 516,1 (М+Н)⁺.

№(6-(Дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-

b] пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Смесь №(6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2ил)-№(циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамида (0,6 г, 1,16 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (0,242 г, 1,162 ммоль) и РйС1₂(йрр£):СН₂С1₂ (0,048 г, 0,058 ммоль) в смеси диоксан (10 мл)/2н. раствор №ьСО₃ (5 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 110°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Реакцию повторяют 4 раза с другими порциями реакционной смеси и порции реакционной смеси объединяют. Реакционную смесь разбавляют СН₂С1₂ (500 мл) и промывают Н₂О (3x200 мл). Органическую фракцию отделяют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный остаток суспендируют в ЕЮАс и обрабатывают ультразвуком. Полученное твердое вещество отделяют фильтрацией и промывают ЕЮАс. Твердое вещество растворяют в МеОН/СН₂С1₂ (5:95, 300 мл), фильтруют сквозь слой кремния диоксида и промывают смесью метанол/СН₂С1₂ (5:95). Конц. НС1 (0,5 мл) прибавляют к собранному элюенту и далее прибавляют активированный уголь. Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч и фильтруют сквозь броунмиллерит. Растворитель выпаривают, после чего полученный остаток растирают в ЕЮАс. Твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают ЕЮАс и сушат под вакуумом с получением названного в заголовке соединения, №(6-(дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида гидрохлорида (0,92 г, 1,78 ммоль, 38%). Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 0,82 (д, 1=6,32 Гц, 4Н), 1,91-2,01 (м, 1Н), 3,87 (с, 3Н), 7,70 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,90 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 7,98-8,11 (м, 2Н), 8,19-8,32 (м, 2Н), 8,40 (с, 1Н), 8,70 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 516,1 (М+Н)⁺. Т.пл. 195°С.

№(6-(Дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2

- 56 019723

Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида гидрохлорид также получают растворением 0,5 г неочищенного №(6-(дифтор(6-( 1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида в АсОН (15 мл) при 80°С с образованием прозрачного раствора. Раствор охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 8Ш-тиомочевину (коммерчески доступна от 8Шсус1е; 0,25г) и смесь перемешивают в течение ночи. Смесь фильтруют сквозь броунмиллерит и 6,5 мл 1,7 М раствора НС1 в МеОН прибавляют к раствору в АсОН. Затем медленно прибавляют ЕЮАс (18 мл), чтобы инициировать кристаллизацию. Далее смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, до образования плотного осадка. Прибавляют дополнительное количество ЕЮАс (30 мл) и смесь перемешивают в течение 60 мин. Твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают ЕЮАс (10 мл) и сушат под вакуумом при температуре 60°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи.

Далее №(6-(дифтор(6-( 1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида гидрохлорид получают суспендированием неочищенного №(6-(дифтор(6-( 1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (2,2 г; 4,9 ммоль) в 333 мл ДХМ. Прибавляют 50 мл 0,2 М НС1 в МеОН (10 ммоль). Смесь энергично перемешивают в течение 60 мин и прибавляют 8ί1ίтиомочевину (коммерчески доступна от 8Шсус1е; 1,12 г). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 14 ч, фильтруют сквозь броунмиллерит и промывают 10% МеОН в ДХМ (40 мл) с получением общего объема фильтрата приблизительно 420 мл. Прибавляют 15 мл 2 М раствора НС1 в МеОН. Раствор упаривают с помощью роторного испарителя при 225 мбар на бане с температурой 22°С для удаления приблизительно 325 мл растворителя. Проверяют прозрачность раствора, чтобы убедиться в минимальном образовании твердого вещества. Прибавляют 10 мл 2 М раствора НС1 в МеОН. В раствор вносят 25 мг соли №(6-(дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида гидрохлорида. Раствор продолжают упаривать при 130 мбар для удаления 65 мл растворителя в присутствии внесенных кристаллов. После того как раствор становится мутным, его выдерживают при комнатной температуре в течение 40 мин. Смесь охлаждают до 0°С, перемешивают в течение 2 ч и осадок твердого вещества отделяют фильтрацией. Твердое вещество сушат под вакуумом при температуре 60°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи с получением 1,75 г твердого вещества бледно-желтого цвета.

Способ В

45Н

натрия гидрофосфаг

Ν,Ν-диметмлацетамид

ΚΙ. 100Ό.5 час

Рй(4рр()С1₂ диоксан Ма₂СОз м°с,4час

№(6-((6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид (45О).

К циклопропанкарбоксамиду (58,7г, 690 ммоль) в 1,4-диоксане (1600 мл) прибавляют 2бромацетилбромид (59,9 мл, 690 ммоль) при комнатной температуре и перемешивают в течение 4 ч при 60°С. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния. Остаток растворяют в ЕЮАс и осторожно промывают насыщенным раствором МаНС'О,, водой, затем раствором соли, сушат над Να₂8Ο.₄ и упаривают с получением №(2-бромацетил)циклопропанкарбоксамида (138 г, 670 ммоль, выход 97%) в виде твердого вещества практически белого цвета. Полученный материал использовали без очистки. МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 208,0 (М+2Н)⁺.

К смеси 6-((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)пиридазин-3-амина (21,8 г, 63,9 ммоль) и натрия гидрофосфата (27,2 г, 192 ммоль) в Ν,Ν-диметилацетамиде (250 мл) прибавляют Ν(2-бромацетил)циклопропанкарбоксамид (19,75 г, 96 ммоль) и калия йодид (10,61 г, 63,9 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 ч при 100°С. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют ЕЮАс (1000 мл) и промывают раствором соли (5Х), сушат над Να₂8Ο.₁, летучие вещества выпаривают и остаток очищают С'отЫПакН (2-30% МеОН в дихлорметане в течение 120 мин). Содержащие продукт фракции объединяют и упаривают с получением Ν-(6((6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбокса

- 57 019723 мида (13,9 г, 31,0 ммоль, выход 48,5%) в виде твердого вещества практически белого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,31 (с, 1Н), 8,92 (с, 1Н), 8,18-8,35 (м, 2Н), 7,92-8,06 (м, 1Н), 7,61-7,80 (м, 2Н), 1,91-2,02 (м, 1Н), 0,78-0,89 (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 450,0 (М+2Н)⁺.

№(6-(Дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (45).

Смесь №(6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамида (7,2 г, 16,06 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2ил)-1Н-пиразола (5,01 г, 24,10 ммоль) и РбС1₂(брр£):СН₂С1₂ (0,655 г, 0,803 ммоль) в смеси 1,4-диоксан/1 М №ьСО₃ (соотношение: 2,1; объем 100 мл) нагревают до 95°С, выдерживая при этой температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждают и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя, разбавляют Е!ОАс и водой. Полученное твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают Н₂О и затем Е!ОАс. Твердое вещество серого цвета растворяют в смеси 20% МеОН/хлороформ и обрабатывают активированным углем в течение ночи, фильтруют сквозь слой броунмиллерита и слой броунмиллерита промывают 20% МеОН в хлороформе до тех пор, пока данные ВЭЖХ не покажут отсутствие соединения. Полученный раствор пропускают сквозь колонку с силикагелем, упаривают и полученное твердого вещества промывают Е!ОАс, МеОН, Е!ОАс и затем Е!₂О, после чего сушат под вакуумом с получением №(6-(дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (5,13 г, 11,41 ммоль, выход 71,1%) в виде твердого вещества белого цвета. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 11,35 (с, 1Н), 8,71 (с, 1Н), 8,41 (с, 1Н), 8,19-8,34 (м, 2Н), 8,00-8,12 (м, 2Н), 7,91 (дд, 1=1,64, 9,47 Гц, 1Н), 7,71 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 3,88 (с, 3Н), 1,88-2,02 (м, 1Н), 0,83 (д, 1=6,32 Гц, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 450,1 (М+Н)⁺. Т.пл. 274,9°С.

Соль бис-НС1 соединения 45 получают следующим образом. №(6-(Дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-

4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида бис-гидрохлорид.

К №(6-(дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамиду (2,100 г, 4,67 ммоль) в смеси МеОН и ДХМ (соотношение: 1:2, объем 100 мл) прибавляют хлороводород (12 н, 0,973 мл, 11,68 ммоль) при комнатной температуре и перемешивают в течение 2 ч. Летучие вещества выпаривают до сухого состояния, твердое вещество промывают Е!ОАс и эфиром, затем сушат под вакуумом с получением №(6-(дифтор(6-(1метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамида, 2НС1 (2,4 г, 4,59 ммоль, выход 98%) в виде твердого вещества практически белого цвета. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ 12,21 (ш с, 2Н), 11,32 (с, 1Н), 8,66 (с, 1Н), 8,36 (с, 1Н), 8,14-8,27 (м, 2Н), 7,94-8,08 (м, 2Н), 7,87 (дд, 1=1,52, 9,60 Гц, 1Н), 7,65 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 1,841,99 (м, 1Н), 0,77 (д, 1=6,32 Гц, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 450,1 (М+Н)⁺. Т.пл. 208°С.

Соединение 46. №(6-(Дифтор(6-(изоксазол-4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Смесь №(6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2ил)-Ы-(циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамида (45 н, 0,200 г, 0,38 ммоль), 4-(4,4,5,5тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)изоксазола (0,1 г, 0,5 ммоль) и РбС1₂(брр£):СН₂С1₂ (5 мг, 0,006 ммоль) в смеси №ьСО₃ (2н. раствор, 1 мл)/диоксан (2 мл) нагревают до 110°С в микроволновом реакторе в течение 30 мин. Реакционную смесь фильтруют и твердое вещество промывают ЕЮАс. Далее фильтрат промывают насыщенным раствором №С1, сушат с помощью Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный остаток очищают препаративной ЖХМС. Собранные фракции объединяют и полученную смесь обрабатывают 2 каплями конц. НС1. Раствор лиофилизируют с получением соли НС1 названного в заголовке соединения, №(6-(дифтор(6-(изоксазол-4-ил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (20 мг, 0,04 ммоль, 12%). Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,82 (д, 1=6,32 Гц, 4Н), 1,91-2,01 (м, 1Н), 7,67 (дд, 1=9,47, 5,43 Гц, 1Н), 7,75 (дд, 1=9,73, 1,64 Гц, 1Н), 7,84 (дд, 1=9,85, 1,77 Гц, 1Н), 7,98-8,07 (м, 1Н), 8,23-8,34 (м, 2Н), 8,46 (с, 1Н), 9,02 (с, 1Н), 11,36 (д, 1=2,27 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 437,2 (М+Н)⁺.

- 58 019723

Соединение 47. К-(6-(Дифтор(6-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Смесь К-(6-((6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2ил)-К-(циклопропанкарбонил)циклопропанкарбоксамида (45н., 0,067 г, 0,13 ммоль), 1-(2-(тетрагидро-2Нпиран-2-илокси)этил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиразола (0,042 г, 0,130 ммоль) и Р6С1₂(6рр1) (5 мг, 0,006 ммоль) в смеси №₂СО₃ (2н., 1 мл)/диоксан (2 мл) нагревают до 110°С в микроволновом реакторе в течение 30 мин. Реакционную смесь фильтруют и промывают Е!ОАс. Органическую фракцию промывают насыщенным раствором №С1, сушат с помощью Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния. Полученный остаток растворяют в смеси 4н. НС1/диоксан, перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин и затем упаривают до сухого состояния. Полученный материал очищают препаративной ЖХМС. Собранные фракции объединяют и полученную смесь обрабатывают 2 каплями конц. НС1. Раствор лиофилизируют с получением соли НС1 названного в заголовке соединения (18 мг, 0,037 ммоль, 29%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,95 (д, 1=5,81 Гц, 1Н), 3,77 (т, 1=5,43 Гц, 2Н), 4,10-4,21 (м, 2Н), 7,71 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,87-7,98 (м, 1Н), 8,008,07 (м, 1Н), 8,11 (с, 1Н), 8,20-8,33 (м, 2Н), 8,44 (с, 1Н), 8,73 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 480,2 (М+Н)⁺.

Соединение 48. Ν-(6-(1 -(6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Способ А

Диэтил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-метилмалонат.

К смеси ΝαΗ (13,42 г, 336 ммоль) в диоксане (800 мл) прибавляют диэтил-2-метилмалонат (42,9 мл, 252 ммоль) по каплям при 0°С. Реакционную смесь перемешивают при 0°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч, и дают нагреться до комнатной температуры. Затем прибавляют порциями 3,6дихлорпиридазин (25 г, 168 ммоль) при 25°С. Далее реакционную смесь перемешивают при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и полученный остаток растворяют в Е!ОАс. Органический раствор промывают насыщенным раствором ΝαНСО₃ (100 мл) и затем 5% раствором лимонной кислоты. Далее органическую фракцию сушат с помощью Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния. Полученный остаток очищают ЖХСД (гексан/Е!ОАс, 3:1) с получением названного в заголовке соединения, диэтил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2метилмалоната 48А (12 г, выход 25%) в виде желтого масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,18 (с, 6Н), 1,81 (с, 3Н), 4,21 (дд, 1=7,07, 2,27 Гц, 4Н), 8,00 (с, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 287,1 (М+Н)⁺.

Лития 2-(6-хлорпиридазин-3 -ил)пропаноат.

Раствор диэтил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-метилмалоната (19,8 г, 69,1 ммоль) и ЫОН (3,31 г, 138 ммоль) в смеси МеОН/вода (3:1, 200 мл) перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч. МеОН удаляют из реакционной смеси с помощью роторного испарителя и полученный остаток разбавляют Н₂О (300 мл). Водную смесь промывают Е!₂О (3x100 мл) и затем лиофилизируют до су

- 59 019723 хого состояния с получением лития 2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропаноата 48В с количественным выходом. Материал используют без дополнительной обработки. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,36 (3Н, д, 1=7,33 Гц), 3,63 (1Н, к, 1=7,24 Гц), 7,71 (2Н, с). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 187,0 (М+Н)⁺.

№-(5-Бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропангидразид.

Смесь лития 2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропаноат (7,2 г, 37,4 ммоль), 5-бром-2-гидразинилпиридина (7,03 г, 37,4 ммоль), 1Н-бензо[й][1,2,3]триазол-1-ола (5,05 г, 37,4 ммоль) и Ш-((этилимино)метилен)№,№-диметилпропан-1,3-диамина гидрохлорида (7,89 г, 41,1 ммоль) в ДМФА (объем 320 мл) перемешивают в течение 4 ч при температуре 25°С. Реакционную смесь выливают в Н2О (2 л) и экстрагируют Е1ОАс (3x500 мл). Органическую фракцию сушат над Мд§О₄, фильтруют и выпаривают до сухого состояния. Полученный остаток очищают ЖХСД СНС1₃:МеОН (9:1) с получением названного в заголовке соединения, №-(5-бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропангидразида 48С (5,5 г, 15,42 ммоль, выход 41,2%). Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,52 (д, 1=7,33 Гц, 3Н), 4,17 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 6,52 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 7,67 (дд, 1=8,84, 2,53 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 7,94 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 8,11 (д, 1=1,77 Гц, 1Н), 8,66 (д, 1=1,52 Гц, 1Н), 10,20 (д, 1=1,52 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 356,1 (М+Н)⁺.

6-Бром-3 -(1 -(6-хлорпиридазин-3 -ил)этил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин.

Раствор №-(5-бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропангидразида (5,0 г, 14,02 ммоль) и фосфорилтрихлорида (100 мл, 1073 ммоль) перемешивают при 90°С, выдерживая при этой температуре в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждают, десорбируют до сухого состояния и полученный материал разбавляют смесью ЕЮАс и насыщенного раствора NаНСО₃ (400 мл, 1:1). Органическую фракцию отделяют, промывают насыщенным раствором NаНСО₃ (1x100 мл) и сушат над Мд§О₄. Органическую фракцию удаляют с помощью роторного испарителя с получением названного в заголовке соединения, 6бром-3-(1-(6-хлорпиридазин-3-ил)этил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридина 48Ό (2,2 г, 6,50 ммоль, выход 46,3%). Полученный материал используют без дополнительной очистки. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,86 (д, 1=7,07 Гц, 3Н), 5,27 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,49 (дд, 1=9,60, 1,77 Гц, 1Н), 7,78 (дд, 1=9,85, 1,01 Гц, 1Н), 7,94 (с, 2Н), 8,79 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 339,1 (М+Н)⁺.

№(2,4-Диметоксибензил)-6-( 1 -(6-метил-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)пиридазин-3 -амин.

Смесь 6-бром-3-(1-(6-хлорпиридазин-3-ил)этил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (650 мг, 1,920 ммоль), (2,4-диметоксифенил)метанамина (0,577 мл, 3,84 ммоль) и NаНСО₃ (645 мг, 7,68 ммоль) в ИПА (10,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, десорбируют до сухого состояния с помощью роторного испарителя и разбавляют ЕЮАс (25 мл). Нерастворимые вещества отфильтровывают и фильтрат упаривают до сухого состояния. Полученный остаток очищают ЖХСД (ДХМ/МеОН, 98:2) с получением названного в заголовке соединения, 6-(1-(6-бром[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)-№(2,4-диметоксибензил)пиридазин-3-амина 48Е (750 мг, 1,598 ммоль, выход 83%) в виде твердого вещества желтого цвета. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,77 (д, 1=7,07 Гц, 3Н), 3,72 (с, 3Н), 4,37 (д, 1=5,81 Гц, 2Н), 4,95 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 6,44 (дд, 1=8,34, 2,53 Гц, 1Н), 6,54 (д, 1=2,27 Гц, 1Н), 6,85 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,03 (с, 1Н), 7,12 (д, 1=8,34 Гц, 1Н), 7,29 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,45 (дд, 1=9,73, 1,64 Гц, 1Н), 7,69-7,79 (м, 1Н), 8,59 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 469,2 (М+Н)⁺.

6-(1-(6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)пиридазин-3-амин.

Смесь 6-(1-(6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)-№(2,4-диметоксибензил)пиридазин-3амина (750 мг, 1,598 ммоль), анизола (0,349 мл, 3,20 ммоль) и ТФУ (1,0 мл, 12,98 ммоль) в ДХМ (5,0 мл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением в течение до температуры 75°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь десорбируют до сухого состояния с помощью роторного испарителя и полученное масло обрабатывают Е1₂О с получением твердого вещества. Твердое вещество отфильтровывают и сушат под вакуумом с получением названного в заголовке соединения, 6-(1-(6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)пиридазин-3-амин 2,2,2-трифторацетата 48Р (400 мг, 0,923 ммоль, выход 57,8%) в виде твердого вещества желтого цвета. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСОй₆) δ м.д. 1,77 (д, 1=7,07 Гц, 3Н), 5,05 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,44 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,50 (дд, 1=9,73, 1,64 Гц, 1Н), 7,73-7,84 (м, 1Н), 7,92 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,56 (ш с, 2Н), 8,81 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 319,1 (М+Н)⁺.

6-(1-(6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амин.

Смесь 6-(1-(6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)пиридазин-3-амина (1,0 г, 3,13 ммоль), 2-бромацетонитрила (0,251 мл, 3,76 ммоль) и NаНСО₃ (0,053 г) в ИПА (10 мл) нагревают до 100°С в закупоренной пробирке, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Твердое вещество отфильтровывают, промывают ИПА и десорбируют до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный остаток очищают ЖХМС и лиофилизируют с получением названного в заголовке соединения, 6-(1(6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амина 486 (0,62 мг, 1,73 ммоль, 55%) в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆) δ м.д. 1,85 (д, 1=7,07 Гц, 3Н), 5,17 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,38-7,57 (м, 3Н), 7,80 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,99 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 8,78 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотно- 60 019723 шение массы и заряда 358,1 (М+Н)⁺.

Ν-(6-( 1 -(6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

К раствору 6-(1 -(6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-амина (соль ТФУ, 250 мг, 0,52 ммоль) в СН₂С1₂ прибавляют ДИЭА (0,65 г, 5,0 ммоль) с последующим прибавлением циклопропанкарбонилхлорида (0,16 г, 1,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и полученный остаток разбавляют МеОН (10 мл). Прибавляют ЯН₄ОН (0,5 мл) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Далее реакционную смесь упаривают до сухого состояния, полученный материал растворяют в ЕЮАс, промывают насыщенным раствором NаНСОз, сушат с помощью Мд8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния. Неочищенный материал очищают ЖХСД (5% МеОН/0,1% ЯН₄ОН/этилацетат) с получением названного в заголовке соединения, Ν-(6-(1(6-бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида 48 (0,22 г, 0,52 ммоль, 100%). ^!Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 73-0,87 (м, 4Н), 1,83-1,99 (м, 4Н), 5,17 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,38-7,57 (м, 3Н), 7,80 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,99 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 11,14 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 426,2 (М+Н)⁺.

Способ В

6-Бром-3 -(1 -(6-хлорпиридазин-3 -ил)этил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин (48Ό).

Раствор №-(5-бромпиридин-2-ил)-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропангидразида (13 г, 36,5 ммоль) в фосфорилтрихлориде (84 мл, 901 ммоль) нагревают в микроволновом реакторе до температуры 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин. Реакционную смесь упаривают с помощью роторного испарителя и полученную смесь прибавляют по каплям к смеси Е1ОАс/насыщенный раствор бикарбоната (водн.) (4:6, 1 л). Органическую фракцию отделяют и водную фракцию экстрагируют ЕЮАс (3x75 мл). ЕЮАс фракции объединяют и упаривают до сухого состояния. Полученный остаток очищают ЖХСД (ДХМ/МеОН, 97:3) с получением названного в заголовке соединения, 6-бром-3-(1-(6хлорпиридазин-3-ил)этил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридина (48Ό, 3,3 г, 26,7%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆) δ м.д. 1,86 (д, 1=7,07 Гц, 3Н), 5,27 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,49 (дд, 1=9,60, 1,77 Гц, 1Н), 7,78 (дд, 1=9,85, 1,01 Гц, 1Н), 7,94 (с, 2Н), 8,79 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 339,1 (М+Н)⁺.

6-(1-(6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)-№(2,4-диметоксибензил)пиридазин-3-амин (48Е).

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48Е, способ А.

6-(1 -(6-Бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)пиридазин-3 -амин (48Е).

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48Е, способ А.

Ν-(6-( 1 -(6-Бром-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид (48).

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45О.

Соединение 49. №(6-(1-(6-(1-Метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

- 61 019723

Смесь №(6-(1-(6-бром-[1,2,4]триазоло[4,3-а]-пиридин-3-ил)имидазол[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида (0,23 г, 0,54 ммоль), 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Нпиразола (0,16 г, 0,8 ммоль) и РбС1₂(брр£)/СН₂С1₂ (0,02 г, 0,02 ммоль) в смеси №ьСО₃ (2н. раствор, 1 мл)/диоксан (2 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 110°С, выдерживая при этой температуре в течение 45 мин. Реакционную смесь фильтруют, промывают ЕЮАс и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный материал очищают препаративной ЖХМС. Собранные фракции объединяют и полученную смесь обрабатывают 2 каплями конц. НС1. Раствор лиофилизируют с получением соли НС1 названного в заголовке соединения, №(6-(1-(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида 49 (0,11 г, 0,25 ммоль, 47%). ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,80 (д, 1=6,32 Гц, 4Н), 1,84-1,99 (м, 4Н), 3,87 (с, 3Н), 5,35 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,43 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,02 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,05-8,13 (м, 3Н), 8,19 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,38 (с, 1Н), 9,01 (с, 1Н), 11,18 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 428,2 (М+Н)⁺.

Соединение 50. (8)-Ы-(6-(1-(6-(1-Метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Соединение 50 получают хиральным разделением соединения 49 в следующих условиях: используют систему 8РС/ИУ с подвижной фазой 25% ЕЮН (плюс 10 мМ NН₄ОΑс) в СО₂ на колонке СЫга1Се1 А8-Н (21x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин и УФ-детектором на длине волны 220 нм. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,73-0,88 (м, 3Н), 1,81-1,99 (м, 4Н), 3,87 (с, 3Н), 5,08-5,21 (м, 1Н), 7,27 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,63 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 7,80 (дд, 1=9,60, 1,01 Гц, 1Н), 7,91-8,00 (м, 2Н), 8,12 (с, 1Н),

8,23 (с, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 428,2 (М+Н)⁺.

Соединение 51. (К)-Ы-(6-(1-(6-(1-Метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Соединение 51 получают хиральным разделением соединения 49 в следующих условиях: используют систему 8РС/ИУ с подвижной фазой 25% ЕЮН (плюс 10 мМ ΝΉ/ОАс) в СО₂ на колонке СЫга1Се1 А8-Н (21x250 мм) со скоростью потока 50 мл/мин и УФ-детектором на длине волны 220 нм. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,73-0,88 (м, 3Н), 1,81-1,99 (м, 4Н), 3,87 (с, 3Н), 5,08-5,21 (м, 1Н), 7,27 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,63 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 7,80 (дд, 1=9,60, 1,01 Гц, 1Н), 7,91-8,00 (м, 2Н), 8,12 (с, 1Н),

8,23 (с, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 428,2 (М+Н)⁺.

Соединение 52. №(6-(1-([1,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48 (способ А) с использованием 2-гидразинилпиридина. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,73-0,87 (м, 4Н), 1,83-1,99 (м, 4Н), 5,04-5,15 (м, 1Н), 6,94-7,04 (м, 1Н), 7,19 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,38-7,47 (м, 1Н), 7,80 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,94 (д, 1=9,85 Гц, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 8,35 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 11,14 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 348,2 (М+Н)⁺.

- 62 019723

Соединение 53. №(6-(1-(6-Метил-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48 (способ А) с использованием 2-гидразинил-5-метилпиридина. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,76-0,86 (м, 4Н), 1,85 (д, 1=7,07 Гц, 3Н), 1,92 (м, 1Н), 3,56 (с, 3Н), 5,02 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,18 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,23-7,31 (м, 1Н), 7,70 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 7,93 (д, 1=9,85 Гц, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 8,20 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС: соотношение массы и заряда 362,2 (М+Н)⁺.

Соединение 54. (6-(2-([1,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)пропан-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)(циклопропил)метанон

Этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропаноат (54А).

Раствор диэтил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-метилмалоната (11 г, 38,4 ммоль) и Ν;·ιΟ1 (2,69 г, 46,0 ммоль) в ДМСО (91 мл) и Н2О (1,382 мл), разделенный на 8 порций, помещают во флаконы для обработки микроволнами и каждую порцию реакционной смеси нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до 175°С, выдерживая при этой температуре в течение 90 мин. Порции реакционной смеси объединяют и затем выливают в Н₂О (300 мл). Водную фракцию экстрагируют ЕЮАс (2x100 мл), затем органическую фракцию промывают раствором соли (2x100 мл). Органическую фракцию сушат над Мд§О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученное масло очищают ЖХСД (гексан/ЕЮАс, 3:1) с получением названного в заголовке соединения, этил-2-(6хлорпиридазин-3-ил)пропаноата (54А, 2,9г, 35%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,13 (с, 3Н), 1,49 (д, 1=7,33 Гц, 3Н), 4,09 (дд, 1=7,07, 2,02 Гц, 2Н), 4,23 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,83 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 7,93 (д, 1=8,84 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 215,0 (М+Н)⁺.

Этил 2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-метилпропаноат (54В).

К раствору этил-2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропаноата (2,8 г, 13,04 ммоль) в ТГФ (28 мл) по каплям прибавляют литий гексаметилдисилазид (1,0 М в ТГФ, 15,65 мл, 15,65 ммоль) при -70°С. Реакционную смесь перемешивают при -70°С в течение 30 мин и затем прибавляют йодметан (0,816 мл, 13,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч по мере нагревания до комнатной температуры. Реакционную смесь упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя и полученный материал очищают ЖХСД (ДХМ/МеОН, 98:2) с получением названного в заголовке соединения, этил-2-(6хлорпиридазин-3-ил)-2-метилпропаноата (54В, 2,82г, 95%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,11 (т, 1=7,07 Гц, 3Н), 1,58 (с, 6Н) 4,08 (к, 1=7,07 Гц, 2Н), 7,83-7,97 (м, 2Н).

Лития 2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-2-метилпропаноат (54С).

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48В.

2-(6-Хлорпиридазин-3 -ил)-2-метил-№-(пиридин-2-ил)пропангидразид (54Ό).

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48С с использованием 2-гидразинилпиридина.

- 63 019723

3-(2-(6-Хлорпиридазин-3-ил)пропан-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (54Е).

Смесь 2-(6-хлорпиридазин-3-ил)-Н-(пиридин-2-ил)пропангидразида (1,2 г, 4,32 ммоль) и фосфорилтрихлорида (10,0 мл, 107 ммоль) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин. Полученную реакционную смесь десорбируют до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный остаток разбавляют Е(ОАс (50 мл) и промывают насыщенным раствором бикарбоната (3x50 мл). Органическую фракцию отделяют, сушат над Мд§О₄ и ЕЮАс удаляют с помощью роторного испарителя с получением названного в заголовке соединения, 3-(2-(6-хлорпиридазин-3-ил)пропан-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридина (54Е, 0,750 г, 2,74 ммоль, выход 63,4%).Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 1,94 (6Н, с), 6,75-6,82 (1Н, м), 7,33 (1Н, ддд, 1=9,35, 6,57, 1,01 Гц), 7,72-7,82 (2Н, м), 7,87-7,99 (2Н, м). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 274,1 (М+Н)⁺.

6-(2-([1,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)пропан-2-ил)-N-(2,4-диметоксибензил)пиридазин-3-амин (54Г).

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48Е.

6-(2-([1,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)пропан-2-ил)пиридазин-3-амин (54С).

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 48Г.

(6-(2-([1,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)пропан-2-ил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)(циклопропил)метанон (54).

Смесь 6-(2-([1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)пропан-2-ил)пиридазин-3-амина 2,2,2-трифторацетата (50 мг, 0,136 ммоль), Н-(2-бромацетил)циклопропанкарбоксамида (28,0 мг, 0,136 ммоль), натрия гидрофосфата (57,8 мг, 0,407 ммоль) и калия йодида (22,54 мг, 0,136 ммоль) в ДМА (объем 1160 мкл) нагревают в микроволновом реакторе с высоким поглощением до температуры 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, (6-(2-([1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)пропан-2-ил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)(циклопропил)метанона (54, 13 мг, 26%) в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСОά₆) δ м.д. 0,81 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,87-2,00 (м, 7Н), 6,92-6,97 (м, 1Н), 7,12 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,55 (дд, 1=8,97, 6,69 Гц, 1Н), 7,87-8,01 (м, 3Н), 8,04 (с, 1Н), 11,16 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 362,1 (М+Н)⁺.

Соединение 55. N-(6-(1-(6-(4-Фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49 с использованием 4-фторфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСОά₆) δ м.д. 0,72-0,88 (м, 4Н), 1,81-1,98 (м, 4Н), 5,30 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,30 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,32-7,40 (м, 2Н), 7,76-7,82 (м, 2Н), 7,82-7,88 (м, 1Н), 7,95 (т, 1=9,09 Гц, 2Н), 8,09 (с, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 11,14 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 442,2 (М+Н)⁺.

Соединение 56. N-(6-(1-(6-(4-Метоксифенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-метоксифенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,73-0,87 (м, 5Н), 1,84-2,00 (м, 5Н), 5,30 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,02-7,14 (м, 3Н), 7,29 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,61-7,72 (м, 3Н), 7,83-8,00 (м, 4Н), 8,10 (с, 1Н), 8,71 (с, 1Н), 11,15 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 454,2 (М+Н)⁺.

- 64 019723

Соединение 57. №(6-(1-(6-(3-Цианофенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 3-цианофенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,71-0,86 (м, 4Н), 1,82-1,97 (м, 4Н), 5,24-5,37 (м, 1Н), 7,31 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,69-7,75 (м, 1Н), 7,87-7,99 (м, 4Н), 8,05-8,13 (м, 2Н), 8,31 (т, 1=1,52 Гц, 1Н), 8,94 (с, 1Н), 11,12 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 449,2 (М+Н)⁺.

Соединение 58. 4-(3-(1 -(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-ил)этил)[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)-2-фтор-№метилбензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 3-фтор-4-(метилкарбамоил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,72-0,86 (м, 4Н), 1,84-1,98 (м, 4Н), 2,80 (д, 1=4,55 Гц, 3Н), 5,31 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,30 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,66-7,71 (м, 1Н), 7,71-7,81 (м, 2Н), 7,83-7,88 (м, 1Н), 7,89-7,98 (м, 2Н), 8,09 (с, 1Н), 8,30 (дд, 1=4,55, 2,53 Гц, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 499,2 (М+Н)⁺.

Соединение 59. №(6-(1-(6-(3-(Метилсульфонил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 3-(метилсульфонил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,74-0,85 (м, 5Н), 1,83-1,98 (м, 5Н), 5,34 (д, 1=7,01 Гц, 1Н), 7,32 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,73-7,85 (м, 1Н), 7,89-8,03 (м, 5Н), 8,05-8,14 (м, 2Н), 8,27 (т, 1=1,64 Гц, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 502,2 (М+Н)⁺.

Соединение 60. №(6-(1-(6-(4-(Метилсульфонил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-(метилсульфонил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400

МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,73-0,87 (м, 5Н), 1,83-1,98 (м, 5Н), 5,31 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,30 (д, 1=9,35 Гц, 1Н),

- 65 019723

7,85-7,90 (м, 1Н), 7,93-7,99 (м, 2Н), 7,99-8,07 (м, 5Н), 8,09 (с, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 502,2 (М+Н)⁺.

Соединение 61. К-(6-(1-(6-(3-Метоксифенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 3-метоксифенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 0,74-0,85 (м, 4Н), 1,90 (д, 1=7,33 Гц, 4Н), 3,61 (с, 3Н), 5,32 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 7,02 (ддд, 1=8,21, 2,40, 0,76 Гц, 1Н), 7,21-7,34 (м, 3Н), 7,37-7,49 (м, 1Н), 7,87-8,00 (м, 3Н), 8,09 (с, 1Н), 8,77 (с, 1Н), 11,14 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 454,2 (М+Н)⁺.

Соединение 62. К-(6-(1-(6-(4-Метилтиофен-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-метилтиофен-2-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 0,75-0,87 (м, 4Н), 1,82-1,98 (м, 4Н), 2,24 (д, 1=0,76 Гц, 3Н), 5,24 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,17-7,30 (м, 2Н), 7,45 (д, 1=1,26 Гц, 1Н), 7,71 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 7,86 (дд, 1=9,47, 0,88 Гц, 1Н), 7,95 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,13 (с, 1Н), 8,64 (с, 1Н), 11,15 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 444,2 (М+Н)⁺.

Соединение 63. К-(6-(1-(6-(4-Цианофенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-цианофенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 0,73-0,87 (м, 4Н), 1,83-2,00 (м, 4Н), 5,29 (д, 1=7,01 Гц, 1Н), 7,29 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,807,89 (м, 1Н), 7,90-8,04 (м, 6Н) 8,08 (с, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 449,2 (М+Н)⁺.

Соединение 64. К-(6-(1-(6-(1Н-Пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 1Н-пиразол-4-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а₆) δ м.д. 0,73-0,86 (м, 4Н), 1,82-1,99 (м, 4Н), 5,21 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,31 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,88 (д, 1=6,06 Гц, 2Н), 7,97 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,11 (с, 1Н), 8,19 (с, 2Н), 8,75 (с, 1Н), 11,13 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 414,2 (М+Н)⁺.

- 66 019723

Соединение 65. №(6-(1-(6-(3-Фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-фторфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆) δ м.д. 0,72-0,87 (м, 4Н), 1,83-1,97 (м, 4Н), 5,29 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,51-7,61 (м, 2Н), 7,64 (дт, 1=10,29, 2,05 Гц, 1Н), 7,81 (дд, 1=9,73, 1,64 Гц, 1Н), 7,87-7,92 (м, 1Н), 7,94 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,09 (с, 1Н), 8,80 (с, 1Н), 11,08 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 442,2 (М+Н)⁺.

Соединение 66. 3 -(3 -(1 -(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-ил)этил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-ил)бензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 3-карбамоилфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,71-0,89 (м, 4Н), 1,83-2,00 (м, 4Н), 7,31 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,46 (ш с, 1Н), 7,60 (т, 1=7,71 Гц, 1Н), 7,82-8,03 (м, 5Н), 8,04-8,14 (м, 2Н), 8,22 (т, 1=1,52 Гц, 1Н), 8,86 (с, 1Н), 11,09 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 467,2 (М+Н)⁺.

Соединение 67. 4-(3 -(1 -(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-ил)этил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-ил)бензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-карбамоилфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,73-0,89 (м, 4Н), 1,83-1,99 (м, 4Н), 5,29 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,777,86 (м, 3Н), 7,87-7,92 (м, 1Н), 7,94 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,97-8,06 (м, 3Н), 8,10 (с, 1Н), 8,79 (с, 1Н), 11,08 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 467,2 (М+Н)⁺.

Соединение 68. 4-(3-(1 -(2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-ил)этил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-ил)-№метилбензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-(метилкарбамоил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400

МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,72-0,88 (м, 4Н), 1,83-1,99 (м, 4Н), 2,81 (д, 1=4,55 Гц, 3Н), 5,30 (д, 1=7,07 Гц, 1Н),

- 67 019723

7,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,78-7,87 (м, 3Н), 7,87-8,00 (м, 4Н), 8,10 (с, 1Н), 8,49 (д, 1=4,55 Гц, 1Н), 8,81 (с, 1Н), 11,09 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 481,2 (М+Н)⁺.

Соединение 69. Н-(6-(1-(6-(4-Этоксифенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)этил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-этоксифенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,72-0,87 (м, 4Н), 1,34 (т, 1=6,95 Гц, 3Н), 1,82-1,98 (м, 4Н), 5,27 (д, 1=7,07 Гц, 1Н), 6,997,10 (м, 2Н), 7,26 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,57-7,69 (м, 2Н), 7,74-7,83 (м, 1Н), 7,84-7,91 (м, 1Н), 7,94 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,10 (с, 1Н), 8,64 (с, 1Н), 11,09 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 468,2 (М+Н)⁺.

Соединение 70. Н-(6-(1-(6-(4-Метокси-3-метилфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-метокси-3-метилфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,74-0,86 (м, 5Н), 1,85-1,99 (м, 5Н), 2,21 (с, 4Н), 5,29 (д, 1=7,33 Гц, 2Н), 7,06 (д, 1=8,59 Гц, 1Н), 7,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,42-7,57 (м, 2Н), 7,78-7,99 (м, 4Н), 8,12 (с, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 11,10 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 468,2 (М+Н)⁺.

Соединение 71. Н-(6-(1-(6-(3-Циано-4-фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 3-циано-4-фторфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,73-0,86 (м, 4Н), 1,84-1,99 (м, 5Н), 5,26 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,29 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,68 (т, 1=8,97 Гц, 1Н), 7,75-7,84 (м, 1Н), 7,87-7,98 (м, 2Н), 8,08 (с, 1Н), 8,12-8,22 (м, 1Н), 8,38 (дд, 1=6,19, 2,40 Гц, 1Н), 8,86 (с, 1Н), 11,08 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 467,2 (М+Н)⁺.

Соединение 72. Н-(6-(1-(6-(4-Циано-3-фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 4-циано-3-фторфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400

МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,73-0,86 (м, 4Н), 1,82-2,00 (м, 4Н), 5,29 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,29 (д, 1=9,60 Гц, 1Н),

- 68 019723

7,82-7,88 (м, 2Н), 7,89-7,97 (м, 2Н), 8,02 (дд, 1=10,99, 1,64 Гц, 1Н), 8,05-8,10 (м, 2Н), 8,95 (с, 1Н), 11,08 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 467,2 (М+Н)⁺.

Соединение 73. Ν-(6-(1 -(6-(3 -(Диметиламино)фенил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 ил)этил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 49, с использованием 3-(диметиламино)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400

МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,74-0,86 (м, 4Н), 1,91 (д, 1=7,07 Гц, 4Н), 2,94 (с, 6Н) 5,29 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 6,82 (дд, 1=8,21, 2,15 Гц, 1Н), 6,90 (с, 1Н), 6,97 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,25-7,34 (м, 2Н), 7,83-7,89 (м, 1Н), 7,89-7,98 (м, 2Н), 8,09 (с, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 11,09 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 467,2 (М+Н)⁺.

Соединение 74. №(6-(Дифтор(6-(4-фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-фторфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,19 Гц, 1Н), 7,37 (т, 1=8,84 Гц, 2Н), 7,71 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,79-7,85 (м, 2Н), 7,96 (дд, 1=9,73, 1,39 Гц, 1Н), 8,12 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,74 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 464,2 (М+Н)⁺.

Соединение 75. №(6-(Дифтор(6-(4-метоксифенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45 (способ В), с использованием 4-метоксифенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,32 Гц, 4Н), 1,92-2,00 (м, 1Н), 3,82 (с, 3Н), 7,09 (д, 1=8,84 Гц, 2Н), 7,70 (д, 2Н), 7,72 (с, 1Н), 7,95 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,08 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 8,27 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,66 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 476,2 (М+Н)⁺.

Соединение 76. №(6-(Дифтор(6-(3-метоксифенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-метоксифенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц,

ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,91-2,01 (м, 1Н), 3,83 (с, 3Н), 7,05 (дд, 1=8,21, 1,89 Гц, 1Н), 7,26 (д, 1=2,02 Гц, 1Н), 7,30 (д, 1=7,58 Гц, 1Н), 7,44 (т, 1Н), 7,71 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,98 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц,

- 69 019723

1Н), 8,11 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,73 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 476,2 (М+Н)⁺.

Соединение 77. №(6-(Дифтор(6-(3-фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-фторфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,19 Гц, 1Н), 7,32 (дт, 1Н), 7,54-7,59 (м, 1Н), 7,62 (т, 1=7,58 Гц, 1Н), 7,68 (дт, 1Н), 7,71 (д, 1Н), 8,00 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,13 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,81 (с, 1Н), 11,34 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 464,2 (М+Н)⁺.

Соединение 78. №(6-(Дифтор(6-(пиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием пиридин-3-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 7,61 (дд, 1=7,96, 4,93 Гц, 1Н), 7,73 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,02 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,17 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 8,22 (с, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 8,26-8,32 (м, 1Н), 8,69 (д, 1=4,29 Гц, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 9,00 (ш с, 1Н), 11,34 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 447,2 (М+Н)⁺.

Соединение 79. №(6-(Дифтор(6-(пиридин-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием пиридин-4-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСОб₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=5,31 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 7,69-7,77 (м, 1Н), 7,93 (д, 1=5,05 Гц, 2Н), 8,07 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,19 (д, 1=9,85 Гц, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 8,29 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,76 (ш с, 2Н), 8,98 (с, 1Н), 11,34 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 447,2 (М+Н)⁺.

Соединение 80. №(6-(Дифтор(6-(4-изопропилфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-изопропилфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц,

ДМСО-б₆) δ м.д. 0,84 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,24 (д, 1=6,82 Гц, 6Н), 1,95 (к, 1Н), 2,96 (8р1, 1=6,86 Гц, 1 Н), 7,40 (д, 1=8,34 Гц, 2Н), 7,67 (д, 1=8,34 Гц, 2Н), 7,71 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,96 (дд, 1=9,60, 1,26 Гц, 1Н), 8,11 (д,

- 70 019723

1=9,60 Гц, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,70 (с, 1Н), 11,36 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 488,2 (М+Н)⁺.

Соединение 81. №(6-((6-(3,5-Дифторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3,5-дифторфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=5,81 Гц, 4Н), 1,95 (квин, 1Н), 7,32-7,42 (м, 1Н), 7,56-7,66 (м, 2Н), 7,73 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,01 (дд, 1=9,73, 1,39 Гц, 1Н), 8,14 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,21 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 11,34 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 482,2 (М+Н)⁺.

Соединение 82. Ν-(6-((6-(3 -Цианофенил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-цианофенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 7,68-7,77 (м, 2Н), 7,94 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 8,03 (дд, 1=9,73, 1,14 Гц, 1Н), 8,12 (д, 1=8,34 Гц, 1Н), 8,16 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 8,29 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,33 (с, 1Н), 8,93 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 471,2 (М+Н)⁺.

Соединение 83. №(6-((6-(4-Цианофенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-цианофенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,19 Гц, 1Н), 7,72 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,00 (с, 4Н), 8,03 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,16 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,20-8,24 (м, 1Н), 8,28 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 471,2 (М+Н)⁺.

Соединение 84. №(6-(Дифтор(6-(4-метилтиофен-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-метилтиофен-2-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,84 (д, 1=6,32 Гц, 4Н), 1,95 (к, 1Н), 2,26 (с, 3Н), 7,29 (с, 1Н), 7,59 (с, 1Н), 7,70 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,91 (дд, 1=9,73, 1,64 Гц, 1Н), 8,07 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,26 (с, 1Н), 8,25-8,30 (м, 1Н), 8,69 (с, 1Н), 11,36 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 466,2 (М+Н)⁺.

- 71 019723

Соединение 85. №(6-(Дифтор(6-(4-(метилсульфонил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-(метилсульфонил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (к, 1Н), 3,28 (с, 3Н), 7,72 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,02 (дд, 1Н), 8,05 (с, 4Н), 8,17 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,23 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 524,2 (М+Н)⁺.

Соединение 86. №(6-(Дифтор(6-(6-метоксипиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 6-метоксипиридин-3-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,19 Гц, 1Н), 3,91 (с, 3Н), 6,97 (д, 1=8,59 Гц, 1Н), 7,72 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,97 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,09-8,15 (м, 2Н), 8,22 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,56 (д, 1=2,53 Гц, 1Н), 8,78 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 477,2 (М+Н)⁺.

Соединение 87. №(6-(Дифтор(6-(пиримидин-5-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием пиримидин-5-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=5,56 Гц, 4Н), 1,90-2,00 (м, 1Н), 7,74 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,06 (дд, 1=9,60, 1,26 Гц, 1Н), 8,17-8,25 (м, 2Н), 8,29 (д, 1=9,35 Гц, 1Н) 9,03 (с, 1Н), 9,21 (с, 2Н), 9,24-9,29 (м, 1Н), 11,34 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 448,2 (М+Н)⁺.

Соединение 88. №(6-(Дифтор(6-(3-(метилсульфонил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-(метилсульфонил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,91-2,01 (м, 1Н), 3,32 (с, 3Н), 7,72 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,81 (т, 1=7,83 Гц, 1Н), 8,02 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 8,06 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,13 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 8,18 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,23-8,31 (м, 3Н), 8,92 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 524,2 (М+Н)⁺.

- 72 019723

Соединение 89. 4-(3-((2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-6-ил)дифторметил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-ил)бензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-карбамоилфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,32 Гц, 4Н), 1,90-2,01 (м, 1Н), 7,48 (ш с, 1Н), 7,72 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=8,34 Гц, 2Н), 7,98-8,06 (м, 3Н), 8,10 (ш с, 1Н), 8,11-8,17 (м, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,82 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 489,2 (М+Н)⁺.

Соединение 90. 3-(3 -((2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [1,2-Ь] пиридазин-6 -ил)дифторметил) [ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-ил)бензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-карбамоилфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,84 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 7,62 (т, 1=7,70 Гц, 1Н), 7,72 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,90-7,98 (м, 2Н), 8,04 (дд, 1=9,73, 1,39 Гц, 1Н), 8,16 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,19 (ш с, 1Н), 8,22 (с, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,85 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 489,2 (М+Н)⁺.

Соединение 91. №(6-(Дифтор(6-(4-(2-метоксиэтокси)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-(2-метоксиэтокси)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,84 (д, 1=6,32 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 3,32 (с, 3Н), 3,66-3,71 (м, 2Н), 4,13-4,19 (м, 2Н), 7,09 (д, 1=8,59 Гц, 2Н), 7,70 (дд, 1=9,09, 2,78 Гц, 3Н), 7,95 (дд, 1=9,60, 1,52 Гц, 1Н), 8,08 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,67 (с, 1Н), 11,36 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 520,2 (М+Н)⁺.

Соединение 92. №(6-((6-(1Н-Пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо [1,2-Ь] пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 1Н-пиразол-4-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц,

- 73 019723

ДМСО-С₆) δ м.д. 0,84 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,19 Гц, 1Н), 7,71 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,97 (дд, 1Н), 8,03-8,08 (м, 1Н), 8,17-8,43 (м, 2Н), 8,25 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,75 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МСИЭР: соотношение массы и заряда 436,2 (М+Н)⁺.

Соединение 93. №(6-(Дифтор(6-(3-изопропоксифенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-изопропоксифенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,28 (д, 1=6,06 Гц, 6Н) 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 4,65-4,76 (м, 1Н), 7,02 (дд, 1=8,21, 1,89 Гц, 1Н), 7,21 (с, 1Н), 7,26 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,38-7,46 (м, 1Н), 7,71 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,96 (дд, 1=9,60, 1,26 Гц, 1Н), 8,10 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,71 (с, 1Н), 11,36 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 504,2 (М+Н)⁺.

Соединение 94. №(6-(Дифтор(6-(4-метилпиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-метилпиридин-3-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,79-0,89 (м, 4Н), 1,19-1,29 (м, 3Н), 1,89-2,00 (м, 1Н) 6,87 (с, 1Н), 7,43 (ш с, 1Н), 7,68-7,76 (м, 2Н), 8,11 (д, 1=8,84 Гц, 1Н), 8,22 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,51 (ш с, 1Н), 8,68 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 461,2 (М+Н)⁺.

Соединение 95. 4-(3 -((2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-6-ил)дифторметил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-6-ил)-№метилбензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 4-(метилкарбамоил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-С₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 2,76-2,86 (м, 3Н), 7,72 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,88 (д, 1=8,34 Гц, 2Н), 7,93-8,00 (м, 2Н), 8,03 (дд, 1=9,73, 1,39 Гц, 1Н), 8,14 (д, 1=9,35 Гц, 1Н),

8,24 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,57 (д, 1=4,55 Гц, 1Н), 8,83 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 503,2 (М+Н)⁺.

Соединение 96. №(6-((6-(3-(Диметиламино)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)дифторметил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной

- 74 019723 для синтеза соединения 45, с использованием 3-(диметиламино)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,84 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,96 (квин, 1=6,13 Гц, 1Н), 2,96 (с, 6Н), 6,85 (д, 1=8,34 Гц, 1Н), 6,94 (ш с, 1Н), 6,98 (д, 1=7,33 Гц, 1Н), 7,33 (т, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,68-7,74 (м, 1Н), 7,93-7,99 (м, 1Н), 8,09 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,25 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 11,32-11,40 (м, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 489,2 (М+Н)⁺.

Соединение 97. Н-(6-(Дифтор(6-(3-фтор-5-метилфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-фтор-5-метилфенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=6,06 Гц, 4Н), 1,95 (к, 1Н), 2,41 (с, 3Н), 7,15 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 7,42-7,50 (м, 2Н), 7,72 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,98 (дд, 1=9,73, 1,39 Гц, 1Н), 8,12 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,80 (с, 1Н), 11,36 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 478,2 (М+Н)⁺.

Соединение 98. 4-(3-((2-(Циклопропанкарбоксамидо)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-6-ил)дифторметил)[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)-2-фтор-Н-метилбензамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 45, с использованием 3-фтор-4-(метилкарбамоил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 0,83 (д, 1=5,81 Гц, 4Н), 1,90-2,00 (м, 1Н), 2,80 (д, 1=4,55 Гц, 3Н), 7,687,78 (м, 2Н), 7,81 (д, 1=11,87 Гц, 1Н), 8,00-8,07 (м, 1Н), 8,11-8,18 (м, 1Н), 8,22 (с, 1Н), 8,28 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,33 (д, 1=4,55 Гц, 1Н), 8,88 (с, 1Н), 11,35 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 521,2 (М+Н)⁺.

Соединение 99. 6-(Дифтор(6-( 1 -метил-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -

Раствор соединения 45 (100 мг) в смеси 3н. НС1/50% МеОН/вода нагревают до 50°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь упаривают и очищают препаративной ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, 6-(дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-амина (30 мг) в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 3,89 (с, 3Н), 7,46 (ш с, 1Н), 7,51-7,58 (м, 1Н), 7,90 (дд, 1=9,47, 1,39 Гц, 1Н), 7,93-7,99 (м, 1Н), 8,04 (д, 1=9,60 Гц, 1Н), 8,08 (с, 1Н), 8,39-8,43 (м, 2Н), 8,67 (с, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 382,2 (М+Н)⁺.

Соединение 100. N-(6-(6-(5-Метил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

- 75 019723

6-(5-Метил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиол.

Смесь 3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-карбонитрила (38А, 450 мг, 2,56 ммоль), ацетогидразида (400 мг, 5,4 ммоль) и натрия 2-метилпропан-2-олята (200 мг, 2,08 ммоль) в пропан-2-оле (2,5 мл) нагревают с помощью микроволн до 180°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Продукт очищают препаративной ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, 6-(5-метил-1Н1,2,4-триазол-3-ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3-тиола.

№(6-(6-(5-Метил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 4, с использованием 6-(5-метил-1Н-1,2,4-триазол-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3а]пиридин-3-тиола. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ^!Н ЯМР (ДМСО-б₆, 400 МГц) δ 11,26 (с, 1Н), 9,25 (с, 1Н), 8,19-8,29 (м, 2Н), 8,00 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,85-7,93 (м, 1Н), 7,40 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 2,43 (с, 3Н), 1,96 (ш с, 1Н), 0,75-0,93 м.д. (м, 5Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 433,1 (М+Н)⁺.

Соединение 101. №(6-(6-(6-Метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 5, с использованием 6-метоксипиридин-2-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (метанол-б₄, 400 МГц) δ 9,09 (с, 1Н), 8,35 (д, 1=9,9 Гц, 1Н), 7,95-8,04 (м, 2Н), 7,84 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,71-7,78 (м, 1Н), 7,55 (д, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,23 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 6,79 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 3,85 (с, 3Н), 1,84 (м, 1Н), 0,820,9 δ м.д. (м,4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 459,2 (М+Н)⁺.

Соединение 102. №(6-(6-(6-Метоксипиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 5, с использованием 6-метоксипиридин-3-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ¹Н ЯМР (мета нол-б₄, 400 МГц) δ 8,71 (ш с, 1Н), 8,40 (ш с, 1Н), 7,86-8,16 (м, 4Н), 7,80 (ш с, 1Н), 7,20 (ш с, 1Н), 6,87 (д, 1=8,8 Гц, 1Н), 3,92 (с, 3Н), 1,85 (ш с, 1Н), 0,73-1,02 м.д. (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда

459,2 (М+Н)⁺.

Соединение 103. №(6-(6-(6-Морфолинопиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 5, с использованием 4-(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин2-ил)морфолина. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ.

- 76 019723

Соединение 104. Н-(6-(6-(3-Цианофенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 5, с использованием 3-цианофенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. ЯМР (метанол^, 400 МГц) δ 8,72 (с, 1Н), 8,34 (д, 1=2,3 Гц, 1Н), 8,12 (дд, 1=9,2, 2,4 Гц, 1Н), 8,04 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,92 (д, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,82 (с, 2Н), 7,16-7,27 (м, 2Н), 3,80-3,89 (м, 4Н), 3,61-3,69 (м, 4Н), 1,85 (ш с, 1Н), 0,95 (м, 2Н), 0,80-0,92 м.д. (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 514,2 (М+Н)⁺.

Соединение 105. Н-(6-(6-(1-Метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин3-илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

5-(6-Хлорпиридин-3-ил)-1 -метилпиридин-2( 1 Н)-он.

Смесь 5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (2,2 г, 11,7 ммоль), 6-хлорпиридин-3-илборной кислоты (1,57 г, 9,98 ммоль), НазСО3 (2,2 г, 20,76 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (500 мг, 0,05 ммоль) в смеси диоксан/вода (15:1, 20 мл) дегазируют и нагревают в микроволновом реакторе до 110°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляют Е!ОАс и промывают водой. Органическую фракцию сушат над Наз^Од, фильтруют и упаривают до сухого состояния. Полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (АсОЕ/трет-гексан) с получением названного в заголовке соединения, 5-(6-хлорпиридин-3-ил)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1,6г, выход 73%).

5-(6-Г идразинилпиридин-3-ил)-1 -метилпиридин-2( 1 Н)-он.

Смесь 5-(6-хлорпиридин-3-ил)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1,2 г, 5,44 ммоль) и гидразина (870 мг,

2,2 ммоль) в 2-пропаноле (5 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 5 ч. Реакционную смесь упаривают с метанолом (3х) и затем суспендируют в воде (50 мл). Твердое вещество отделяют фильтрацией и сушат под глубоким вакуумом в течение 24 ч с получением названного в заголовке соединения, 5-(6-гидразинилпиридин-3-ил)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (600 мг, выход 51%).

5-(3-Меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)-1-метилпиридин-2(1Н)-он.

Смесь 5-(6-гидразинилпиридин-3-ил)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (600 мг, 2,78 ммоль) и изотиоцианатобензола (450 мг, 3,33 ммоль) в смеси КМР/1,3-дихлорбензол (1:1, 10 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 160°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч, после чего очищают препаративной ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, 5-(3-меркапто-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин6-ил)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (310 мг, выход 43%).

Н-(6-(6-(1-Метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Названное в заголовке соединение получают из Н-(6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамида и 5-(3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)-1-метилпиридин2(1Н)-она в соответствии с методикой синтеза соединения 4. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Далее продукт растворяют в МеОН, обрабатывают 4 М НС1 в диоксане и упаривают до сухого состояния с получением соли НС1 названного в заголовке соединения. ¹Н ЯМР (метанол-а^ 400 МГц) δ 8,83 (с, 1Н), 8,18 (д, 1=9,9 Гц, 2Н), 8,11 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,98 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,77-7,92 (м, 2Н), 7,55 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 6,58 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,52-3,59 (м, 3Н), 1,73 (ш с, 1Н), 0,80-0,90 м.д. (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 459,2 (М+Н)⁺.

- 77 019723

Соединение 106. №(6-(6-(1-Этил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

ОН

5-Бром-1-этилпиридин-2(1Н)-он.

Раствор 5-бромпиридин-2-ола (1,74 г, 10,00 ммоль) в ДМФА (20 мл) обрабатывают NаН при комнатной температуре и затем перемешивают в течение 30 мин. Йодэтан (0,823 мл, 12,00 ммоль) прибавляют к смеси и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют ДХМ, промывают водой, сушат над №₂8О₄ и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя с получением названного в заголовке соединения в виде неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки.

5-(6 -Хлорпиридин-3 -ил) -1 -этилпиридин-2 (1Н)-он.

Смесь 5-бром-1-этилпиридин-2(1Н)-она (1,9 г, 9,45 ммоль), 6-хлорпиридин-3-илборной кислоты (1,8 г, 11,46 ммоль), С§₂СО₃ (9,9 г, 30,37 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (543 мг, 0,55 ммоль) суспендируют в смеси диоксан/вода (20 мл, 15:1). После дегазации смесь нагревают в микроволновом реакторе до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Далее реакционную смесь разбавляют ЕЮАс и промывают водой. Органическую фракцию сушат над №₂8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя. Полученный остаток очищают ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, 5-(6-хлорпиридин-3-ил)-1-этилпиридин-2(1Н)-она (1,2 г, выход 51%).

5-(6-Гидразинилпиридин-3-ил)-1-этилпиридин-2(1Н)-он.

Смесь 5-(6-хлорпиридин-3-ил)-1-этилпиридин-2(1Н)-она (1,2 г, 5,44 ммоль) и гидразина (820 мг, 25,62 ммоль) в 2-пропаноле (5 мл) нагревают в микроволновом реакторе до 140°С, выдерживая при этой температуре в течение 4 ч. Смесь упаривают совместно с метанолом (3х) и затем суспендируют в воде (50 мл). Полученное твердое вещество отделяют фильтрацией и сушат под глубоким вакуумом в течение 1 дня с получением названного в заголовке соединения, 5-(6-гидразинилпиридин-3-ил)-1-этилпиридин2(1Н)-она (1,2 г, выход 95,9%) в виде неочищенного продукта.

5-(3-Меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)-1-этилпиридин-2(1Н)-он.

Смесь 5-(6-гидразинилпиридин-3-ил)-1-этилпиридин-2(1Н)-она (1,2 г, 5,22 ммоль) и изотиоцианатобензола (775 мг, 5,74 ммоль) в смеси NМР (3 мл) и ДХМ (10 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. ДХМ удаляют с помощью роторного испарителя и реакционную смесь разбавляют 1,3-дихлорбензолом (7 мл). Далее смесь нагревают в микроволновом реакторе до 160°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Эфир (10 мл) прибавляют к реакционной смеси, полученное твердое вещество отделяют фильтрацией и промывают эфиром с получением названного в заголовке соединения, 5-(3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)-1-этилпиридин-2(1Н)-она (600 мг, выход 42,3%).

№(6-(6-(1-Этил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Названное в заголовке соединение получают из №(6-йодимидазо[1,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамида и 5-(3-меркапто-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-6-ил)-1-этилпиридин2(1Н)-она в соответствии с методикой синтеза соединения 4. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Далее продукт растворяют МеОН, обрабатывают 4 М НС1 в диоксане и упаривают до сухого состояния с получением названного в заголовке соединения в виде соли НС1. ^!Н ЯМР (ДМСО-й₆, 400 МГц) δ 11,15 (с, 1Н), 8,66-8,72 (м, 1Н), 8,24 (д, 1=2,5 Гц, 1Н), 8,08 (дд, 1=9,6, 1,0 Гц, 1Н), 7,93 (с, 2Н), 7,90-7,92 (м, 1Н), 7,87 (дд, 1=9,5, 2,9 Гц, 1Н), 7,06 (д, 1=9,3 Гц, 2Н), 6,47 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,96 (к, 1=7,1 Гц, 2Н), 1,92 (т, 1=6,1 Гц, 1Н), 1,24 (т, 1=7,2 Гц, 3Н), 0,75-0,82 м.д. (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 473,2 (М+Н)⁺.

- 78 019723

Соединение 107. Н-(6-(6-(3-Циано-4-(2-гидроксиэтокси)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

5-Бром-2-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси)бензонитрил.

Раствор 5-бром-2-гидроксибензонитрила (1 г, 5,05 ммоль) в ДМФА обрабатывают 95% №1Н (242 мг, 9,6 ммоль) в течение 20 мин при комнатной температуре. 2-(2-Бромэтокси)тетрагидро-2Н-пиран (0,839 мл, 5,56 ммоль) затем прибавляют к реакционной смеси и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 ч. Далее реакционную смесь разбавляют ДХМ и промывают водой. Органическую фракцию сушат над На₂8О₄, фильтруют и упаривают до сухого состояния с получением названного в заголовке соединения, 5-бром-2-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси)бензонитрила (1,6 г, выход 9,75%) в виде неочищенного продукта, который использовали без дополнительной очистки.

2-(2-(Те1рагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрил.

Смесь 5-бром-2-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси)бензонитрила (1,6 г, 4,92 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолан) (1,9г, 7,48 ммоль), АсОК (1,47 г, 15 ммоль) и Рй(брр£)С1₂ (366 мг, 0,5 ммоль) в диоксане (50 мл) нагревают до 110°С, выдерживая при этой температуре в течение 60 мин. Реакционную смесь выпаривают до сухого состояния с помощью роторного испарителя и полученный остаток очищают хроматографией на силикагеле (ДХМ/гексан) с получением названного в заголовке соединения, 2-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этокси)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)бензонитрила (1,7 г, выход 92,6%).

N-(6-(6-(3-Циано-4-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)пропил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида.

Названное в заголовке соединение получают из соединения 4 и 2-(2-(тетрагидро-2Н-пиран-2илокси)этокси)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензонитрила в соответствии с методикой синтеза соединения 5. Реакционную смесь используют без дополнительной очистки.

N-(6-(6-(3-Циано-4-(2-гидроксиэтокси)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

N-(6-(6-(3-Циано-4-(3-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)пропил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид в виде неочищенной реакционной смеси обрабатывают смесью [НС1]/диоксан (1:5) при температуре 70°С в течение 30 мин. Реакционную смесь упаривают и очищают ЖХМС с получением названного в заголовке соединения в виде соли ТФУ. Далее продукт растворяют в МеОН, обрабатывают 4 НС1 в диоксане и упаривают до сухого состояния с получением названного в заголовке соединения в виде соли НС1. ¹Н ЯМР (метанол-б₄, 400 МГц) δ 9,00 (ш с, 1Н), 8,36 (ш с, 1Н), 8,24 (ш с, 1Н), 8,08 (ш с, 2Н), 8,01 (ш с, 1Н), 7,94 (ш с, 1Н), 7,66-7,74 (м, 1Н), 7,36 (ш с, 1Н), 4,27 (ш с, 2Н), 3,95 (ш с, 2Н), 1,83 (ш с, 1Н), 0,84-1,04 м.д. (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 513,4 (М+Н)⁺.

Соединение 108. N-(6-(6-(5-Циано-6-гидроксипиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Н-(6-(6-(5-Циано-6-((2-(триметилсилил)этокси)метокси)пиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 5, с использованием 5-циано-6-((2-(триметилсилил)этокси)метокси)пиридин-3илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь используют на следующей стадии без дополнительной очистки.

N-(6-(6-(5-Циано-6-гидроксипиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Н-(6-(6-(5-Циано-6-((2-(триметилсилил)этокси)метокси)пиридин-3-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид в виде неочищенной реакционной смеси кипятят с обратным холодильником в смеси ТФУ/ДХМ (1:1, 5 мл) в течение 30 мин. Далее реак- 79 019723 ционную смесь упаривают и очищают препаративной ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, №(6-(6-(5-циано-6-гидроксипиридин-3 -ил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 илтио)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида, в виде соли ТФУ. Далее продукт растворяют в МеОН, обрабатывают 4 М НС1 в диоксане и упаривают до сухого состояния с получением названного в заголовке соединения в виде соли НС1. ¹Н ЯМР (метанол-й₄, 400 МГц) δ 8,80 (ш с, 1Н), 8,51 (д, 1=2,5 Гц, 1Н), 8,13 (д, 1=2,8 Гц, 1Н), 8,04 (д, 1=9,6 Гц, 1Н), 7,79-7,96 (м, 3Н), 7,27 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 1,83 (ш с, 1Н), 0,91 м.д. (д, 1=16,7 Гц, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 513,4 (М+Н)⁺.

Соединение 109. №(6-(6-(2-(3-Гидроксипропиламино)пиримидин-5-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3а]пиридин-3 -илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 5, с использованием 2-(3-гидроксипропиламино)пиримидин-5-илборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (ацетонитрил-й₃, 400 МГц) δ 8,50 (с, 2Н), 8,44 (с, 1Н), 7,89-8,00 (м, 2Н), 7,67-7,78 (м, 2Н), 7,62 (с, 3Н), 7,01 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,55 (т, 1=6,1 Гц, 2Н), 3,45 (т, 1=6,6 Гц, 2Н), 1,70-1,79 (м, 3Н), 0,85 м.д. (д, 1=16,2 Гц, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 503,3 (М+Н)⁺.

Соединение 110. №(6-(6-(2-Морфолинотиазол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

синтезируют с применением методики, аналогично описанной неочищенной

Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной реакционной смеси с использованием 2Названное в заголовке соединение для синтеза соединения 5 в виде морфолинотиазол-4-илборной кислоты. ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (ацетонитрил-й₃, 400 МГц) δ 8,74 (с, 1Н), 8,03 (ш с, 1Н), 7,91-7,97 (м, 1Н), 7,83-7,90 (м, 1Н), 7,71 (ш с, 1Н), 7,15 (с, 1Н), 7,03 (ш с, 1Н), 3,75 (с, 4Н), 3,393,45 (м, 4Н), 1,78 (дт, 1=5,0, 2,4 Гц, 1Н), 0,81-0,92 м.д. (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда

520,2 (М+Н)⁺.

Соединение 111. №(6-(6-(3-(3-Гидроксипропил)фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

Названное в заголовке соединение синтезируют с применением методики, аналогично описанной для синтеза соединения 5, с использованием 3-(3-гидроксипропил)фенилборной кислоты. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Ή ЯМР (метанол-й₄, 400 МГц) δ 8,54 (с, 1Н), 7,84-7,94 (м, 3Н), 7,72 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,33-7,39 (м, 2Н), 7,25-7,32 (м, 1Н), 7,18 (д, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,10 (д, 1=9,3 Гц, 1Н), 3,46 (т, 1=6,3 Гц, 2Н), 2,58-2,67 (дд, 1=8,0 и 7,6, 2Н), 1,67-1,79 (м, 3Н), 0,72-0,87 м.д. (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 486,3 (М+Н)⁺.

Соединение 112. №(6-(6-((2-Метоксиэтокси)метил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3илтио)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

2-Гидразинил-5-((2-метоксиэтокси)метил)пиридин.

К раствору 2-хлор-5-(хлорметил)пиридина (1620 мг, 10 ммоль) в 2-метоксиэтанола (10 мл) прибавляют натрия 2-метоксиэтанолат (5,9 г, 12,00 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в

- 80 019723 течение ’0 мин и затем при температуре 50°С в течение 2 ч. Далее гидразин (’,6 г, 50,0 ммоль) прибавляют к смеси и реакционную смесь нагревают до ’20°С, выдерживая при этой температуре в течение ’ ч. Смесь очищают препаративной ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, 2-гидразинил5-((2-метоксиэтокси)метил)пиридина (540 мг, выход 27,4%).

6-((2-Метоксиэтокси)метил)-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиол.

Названное в заголовке соединение получают из 2-гидразинил-5-((2-метоксиэтокси)метил)пиридина и изотиоцианатобензола в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединения 4А.

№(6-(6-((2-Метоксиэтокси)метил)-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Названное в заголовке соединение получают из №(6-йодимидазо[’,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамида и 6-((2-метоксиэтокси)метил)-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиола в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединение 4. ’Н ЯМР (метанол-сД, 400 МГц) δ 8,75-8,78 (м, ’Н), 8,’5 (дд, 1=9,3, ’,0 Гц, ’Н), 8,04-8,’’ (м, ’Н), 8,02 (д, 1=9,3 Гц, ’Н), 7,94 (с, ’Н), 7,56 (д, 1=9,3 Гц, ’Н), 4,7’ (д, 1=’,0 Гц, 2Н), 3,61-3,67 (м, 2Н), 3,47-3,53 (м, 2Н), 3,29 (с, 3Н), ’,80-’,87 (м, ’Н), 0,88-1,0’ м.д. (м, 4Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 440,2 (М+Н)⁺.

Соединение ’’3. №(6-(6-Фтор-5-метил-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид

3-Фтор-6-гидразинил-2-метилпиридин.

К смеси 6-хлор-3-фтор-2-метилпиридина (4,7 г, 32,3 ммоль) и изопропанола (’00 мл) прибавляют гидразингидрат (5 г, ’00 ммоль). Далее смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч, прибавляют дополнительное количество гидразингидрата (5 г, ’00 ммоль) и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 3 дней. Затем смесь упаривают до сухого состояния и перемешивают под глубоким вакуумом в течение ночи. Полученный материал используют без дополнительной очистки.

6-Фтор-5-метил-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиол.

Названное в заголовке соединение получают из 3-фтор-6-гидразинил-2-метилпиридина и изотиоцианатобензола в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединения 4А.

№(6-(6-Фтор-5-метил-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид.

Названное в заголовке соединение получают из №(6-йодимидазо[’,2-Ь]пиридазин-2ил)циклопропанкарбоксамида и 6-фтор-5-метил-[’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиола в соответствии с методикой, описанной для синтеза соединения 4. Неочищенную реакционную смесь очищают препаративной ЖХМС и продукт выделяют в виде соли ТФУ. Далее продукт растворяют в МеОН, обрабатывают 4 М НС1 в диоксане и упаривают до сухого состояния с получением названного в заголовке соединения в виде соли НС1. ’Н ЯМР (метанол-^, 400 МГц) δ 8,00 (с, ’Н), 7,83-7,89 (м, 3Н), 7,63 (дд, 1=9,9, 8,3 Гц, ’Н), 7,22 (д, 1=9,6 Гц, ’Н), 2,96 (д, 1=3,5 Гц, 4Н), ’,8’-’,9’ (м, ’Н), 0,96 (дт, 1=4,5, 3,0 Гц, 2Н), 0,86-0,92 (м, 2Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 384,3 (М+Н)⁺.

Соединение ’ ’4. 6-([’,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-амин ат

ЗН

Ν'-м \А.Л..ТЛ^МНВ0С

I Τ^-ΝΗΒΟΟ

трет-Бутил-6-([’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-илкарбамат.

Названное в заголовке соединение получают из трет-бутил-6-йодимидазо[’,2-Ь]пиридазин-2илкарбамата и [’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-тиола в соответствии с методикой синтеза соединения 4.

6-([’,2,4]Триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-амин.

Раствор трет-бутил-6-([’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-илкарбамата (300 мг, 0,78 ммоль) в диоксане (5 мл) обрабатывают 4 М НС1 в диоксане (5 мл) при 80°С, выдерживая при этой температуре в течение ’ года. Смесь упаривают и очищают ЖХМС с получением названного в заголовке соединения, 6-([’,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-илтио)имидазо[’,2-Ь]пиридазин-2-амина

- 8’ 019723 (201 мг, выход 68%) в виде соли ТФУ. ’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆) δ м.д. 7,00 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 7,16 (т, 1=6,44 Гц, 1Н), 7,22 (с, 1Н), 7,54-7,65 (м, 1Н), 7,73 (д, 1=9,35 Гц, 1Н), 8,00 (д, 1=9,09 Гц, 1Н), 8,47 (д, 1=6,82 Гц, 1Н). МС-ИЭР: соотношение массы и заряда 284,2 (М+Н)⁺.

Общая методика получения свободного основания и соли НС1

Форму свободного основания для приведенных выше примеров соединений получают очисткой неочищенного материала ЖХСД с использованием смеси гексан/ЕЮАс (9:1^4:6) или ДХМ/МеОН (99:1^9:1) в качестве элюента. Конкретно, получают форму свободного основания соединений 3, 13, 45 и 49.

Соли НС1 для приведенных выше примеров соединений могут быть получены растворением соли ТФУ в воде, обработкой раствора с помощью конц. НС1 и лиофилизации до сухого состояния. Конкретно, получают соли НС1 соединений 3, 13, 45, 49 и 112.

Дополнительно, приведенные выше схемы реакций и их вариации могут быть использованы для получения соединений формулы

где Ь представляет собой СР₂; С представляет собой Ν;

Т и V представляют собой СН;

К₁₀ выбран из группы, состоящей из С1, Вг, I, СН₃, СР₃, ΟΝ,

У''

К.|₉, представляет собой '

Биологические испытания

Активность соединений как ингибиторов протеинкиназы может быть исследована ш νίίτο, ш νίνο или в линии клеток. Анализы щ νίίτο включают анализы, которые определяют ингибирование активности фосфорилирования или АТФазной активности активированной протеинкиназы. Альтернативно, в анализах 1п νίίτο количественно определяют способность ингибитора связываться с протеинкиназой. Связывание ингибитора может быть измерено путем введения радиоактивной метки в ингибитор перед связыванием, выделения комплекса ингибитор/протеинкиназа и определения количества радиоактивной метки. Альтернативно, связывание ингибитора может быть определено в ходе конкурентного эксперимента, где новые ингибиторы инкубируют с протеинкиназой, связанной с известными радиоактивными лигандами.

Определение ингибирования сМЕТ.

Ингибирующие свойства соединения по отношению к катализу сМЕТ определяют с применением капиллярного электрофореза с количественным определением флуоресценции фосфорилированного пептидного продукта сМЕТ. Фермент сМЕТ (аминокислоты 1023-1360) в номинальной концентрации 24 мкМ до использования хранят при температуре -80°С в буферном растворе, содержащем 25 мМ ТрисНС1 (рН 8,5), 150 мМ №С1, 3 мМ дитиотрейтола и 10% глицерина. Фермент получают из клеток 8Г9 с помощью аффинной хроматографии на никеле меченого гистидином Ν-концевого домена киназы сМЕТ. После очистки метку удаляют и фермент концентрируют. Конечный фермент частично фосфорилирован и частично каталитически активен. Для полной активации фермента замороженный сМЕТ быстро размораживают и активируют добавлением буфера для анализа (50 мМ НЕРЕ8, рН 7,5, 10 мМ №С1, 10 мМ МдС1₂, 0,01% Вп|® 35), 1,25 мМ АТФ, 5 мМ МдС1₂ и 5 мМ дитиотрейтола, с концентрацией сМЕТ 2,4 мкМ, с последующей инкубацией на протяжении 30 мин при комнатной температуре. Растворы исследуемых соединений в варьирующих концентрациях готовят в ДМСО и разбавляют до конечной концентрация ДМСО 2% в коктейле анализа, содержащем буфер анализа, 0,5 мМ ЭДТА и 2 мкМ пептидного субстрата РЬ-2 (5-РАМ-ЕА1¥ААРРАККК-СОХН₂, где 5-РАМ=5-карбоксифлуоресцеин). Далее добавляют фермент сМЕТ (конечная концентрация 1,2 нМ) и систему инкубируют при комнатной температуре на протяжении 20 мин. Катализ инициируют добавлением АТФ (конечная концентрация 50 мкМ). Реакционные смеси инкубируют при комнатной температуре на протяжении 2 ч, после чего реакцию гасят добавлением ЭДТА. Количество фосфорилированного пептидного продукта определяют путем мониторинга флуоресценции в ходе капиллярного электрофореза с использованием Сайрег Ь1Ге8с1епсе8 йаЬСЫр 3000 со следующими установками: базовое давление=-0,1 фунт/дюйм², давление экрана=-1,2 фунт/дюйм², напряжение вниз по течению=-500 В, напряжение вверх по течению=-2300 В, тип микрочипа=ТС372. Буфер для элюации идентичен буферу анализа, за исключением отсутствия дитиотрейтола, РЬ-2 и АТФ, а также добавления 0,1% реагента для покрытия (Сайрег). В таких условиях фосфорилированный продукт элюируется на 37 с и нефосфорилированный субстрат элюируется на 45 с. Высоту пика определяют и используют для определения скоростей для фермента.

- 82 019723

Значение 1С₅₀ вычисляют на основе кривой, аппроксимированной нелинейным методом наименьших квадратов к стандартному уравнению 1С₅₀ для скорректированной с учетом фона скорости сМЕТ против концентрации соединения. Как ориентир для данного анализа, стауроспорин демонстрирует 1С₅₀ ~150 нМ. Значения 1С₅₀ для выбранных соединений по изобретению против сМЕТ приведены в таблице.

В. Определение подавления жизнеспособности клеток.

Клетки содержат при температуре 37°С в увлажненной атмосфере, содержащей 5-8% СО₂, в соответствии с инструкциями поставщика (Американская коллекция типичных культур, Роквиль, МО). Подавление жизнеспособности клеток определяют для панели линий (МКШ5, ЕВС1 и А549) опухолевых клеток, используя растворимую соль тетразолия, МТ8 (Рготеда, Мэдисон, 01). Клетки высевают с плотностью 2000-7500 клеток/лунку на 96-луночные планшеты для культуры тканей и позволяют прикрепиться приблизительно на протяжении 24 ч перед добавлением соединений или растворителя ДМСО. Через 96 ч инкубации с исследуемыми соединениями, превращение МТ8 метаболически активными клетками определяют, измеряя ОО_{490 нм} с применением устройства для считывания микропланшетов 8рес1атах (Мо1еси1аг Осисеч Сан Диего, СА). Клетки обрабатывают исследуемыми соединениями в двойном повторении. Соединения посерийно разбавляют (1:2,5) от столбика 1 до 11, и столбик 12 содержит растворитель ДМСО. Соединения разбавляют питательной средой для клеток и далее раствор соединения добавляют к клеткам. Равные количества ДМСО добавляют к клеткам (конечная концентрация составляет 0,5%). После вычитания фона и нормализации против обработанных ДМСО клеток значение ЕС₅₀ вычисляют, применяя нелинейную аппроксимацию кривой жизнеспособности клеток как функции концентрации соединения. Линии клеток МКШ5 и ЕВС1 содержат высокие уровни Рйокрйо-Ме!, и их пролиферация зависит от сМЕТ, а линию А549 используют как негативный контроль.

Значение ЕС₅₀ может быть вычислено нелинейной аппроксимацией кривой концентрации соединений и интенсивности флуоресценции к стандартному уравнению ЕС₅₀. Значения ЕС₅₀ для выбранных соединений по изобретению против МКШ5, ЕВС1 и А549 приведены в таблице.

Соединение	сМе! 1С50, нМ	ΜΚΝ45 ЕСМ, нМ	ЕВС1ЕС$о, нМ	А549 ЕС50, нМ
1	> 100	—	—	—
2	> 100	—	—	—
3 (соль НС1)	> 100	250-630	100-199	8000-25000
3 (соль ТФО)	> 100	250-630	100-199	8000-25000
3 (свободное основание)	> 100	100-199	60-100	8000-25000
4	30-59	100-249	<35	> 50000
5	<30	< 100	<35	> 50000
6	> 100	>630	>200	> 50000
9	60-100	250-630	100-199	8000-25000
12	> 100	>630	>200	> 50000
13 (соль НС1)	30-59	100-249	<35	8000-25000
13 (соль ТФО)	30-59	60-100	<30	5000-8000
13 (свободное основание)	30-59	<30	<30	> 50000
14	30-59	250-630	100-199	600-1600
15	60-100	250-630	100-199	8000-25000
16	> 100	>630	>200	> 50000
17	60-100	< 100	<35	>19500
18	30-59	100-249	100-199	> 19500
19	60-100	250-630	100-199	>19500
20	60-100	250-630	>200	> 50000
21	> 100	>630	>200	> 50000
22	60-100	>630	>200	> 50000
23	30-59	250-630	100-199	> 50000
24	60-100	100-249	35-99	> 50000
25	<30	< 100	<35	8000-25000

- 83 019723

26	<30	<100	<35	> 19500
27	<30	< 100	35-99	> 50000
28	<30	< 100	<35	> 50000
29	60-100	< 100	35-99	> 50000
30	30-59	>630	>200	> 19500
31	30-59	< 100	<35	> 50000
32	<30	100-249	35-99	> 50000
33	> 100	>630	>200	> 50000
34	60-100	>630	>200	> 50000
35	> 100	>630	100-199	>19500
36	<30	250-630	35-99	> 50000
37	30-59	250-630	100-199	> 50000
38	> 100	>630	>200	> 50000
39	60-100	100-249	35-99	600-1600
40	> 100	>630	>200	> 50000
41	60-100	100-249	35-99	8000-25000
42	60-100	100-249	35-99	> 50000
43	> юо	—	—	—
44	<30	< 100	<35	600-1600
45 (соль НС1)	<30	<30	<30	> 50000
45 (соль ТФО)	30-59	—	—	—
46	30-59	60-100	60-100	> 50000
47	<30	<30	<30	> 50000
49 (соль НС1)	<30	30-59	<30	8000-25000
49 (соль ТФО)	30-59	60-100	60-100	> 50000
49 (свободное основание)	<30	60-100	<30	> 50000
50	<30	30-59	<30	> 50000
51	> 100	> 100	> 100	> 50000
52	> 100	> 100	> 100	> 50000
53	250-630	250-630	250-630	> 50000
55	<30	<30	<30	> 50000
56	<30	<30	<30	> 50000
57	<30	<30	<30	> 50000
58	<30	<30	<30	> 50000
59	<30	100-249	60-100	> 50000
60	<30	60-100	60-100	> 50000
61	<30	<30	<30	> 50000
62	<30	<30	<30	5000-8000
63	<30	<30	<30	>50000
64	<30	100-249	100-249	> 50000
65	<30	<30	<30	> 50000
66	<30	100-249	100-249	> 50000

- 84 019723

67	<30	100-249	60-100	> 50000
68	<30	30-59	30-59	> 50000
69	<30	<30	<30	> 50000
70	<30	<30	<30	> 50000
71	<30	<30	<30	> 50000
72	<30	<30	<30	> 50000
73	<30	<30	<30	8000-25000
74	<30	<30	<30	8000-25000
75	<30	<30	<30	8000-25000
76	<30	<30	<30	> 50000
77	<30	<30	<30	> 50000
78	30-59	<30	<30	> 50000
79	60-100	<30	<30	> 50000
80	30-59	<30	30-59	> 50000
81	<30	<30	<30	> 50000
82	<30	<30	<30	> 50000
83	<30	<30	<30	> 50000
84	<30	<30	<30	> 50000
85	<30	<30	<30	> 50000
86	30-59	<30	<30	> 50000
87	100-249	30-59	30-59	> 50000
88	<30	<30	<30	> 50000
89	<30	-	-	-
90	<30	<30	<30	> 50000
91	<30	<30	<30	> 50000
92	<30	<30	<30	> 50000
93	60-100	30-59	30-59	8000-25000
94	250-630	-	-	-
95	<30	-	-	-
96	<30	<30	<30	8000-25000
97	<30	<30	<30	> 50000
98	<30	<30	<30	> 50000
99	250-630	100-249	100-249	> 50000
101	<30	100-249	30-59	> 50000
102	30-59	60-100	30-59	> 50000
103	<30	30-59	<30	> 50000
104	<30	<30	<30	> 50000
105	<30	250-630	100-249	> 50000
106	<30	60-100	30-59	> 50000
107	<30	100-249	60-100	> 50000
108	30-59	8000-25000	8000-25000	> 50000
109	250-630	8000-25000	8000-25000	8000-25000
ПО	30-59	100-249	30-59	> 50000
	.....	.....	.....	.....
111	<30	100-249	30-59	8000-25000
112	100-249	-	-	-
113	250-630	-		-
114	>630	>630	>630	> 50000

Специалистам в данной области будет понятно, что могут быть осуществлены разнообразные модификации и вариации соединений, композиций, наборов и способов по данному изобретению без отхода от духа или контекста изобретения. Таким образом, предусматривается, что данное изобретение охватывает модификации и вариации данного изобретения при условии, что они находятся в пределах контекста пунктов прилагаемой формулы изобретения и их эквивалентов.

Claims (7)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где Я1 представлен формулой где Я19 представляет собой циклопропил;

   Я₁₀ выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила, СЕ₃, циано, фенила, замещенного

   0, 1, 2, 3, 4 или 5 Я_20Ь, радикала формулы и радикала формулы где Я_20Ь выбран из группы, состоящей из водорода, (С1_-5)алкила, фенила, (С_3-1₂)циклоалкила, гетеро(С_4-1₀)арила, гидрокси(С1_-6)алкила и галогена.
2. 2. Соединение по п.1, где Я_20Ь представляет собой водород.
3. 3. Соединение по п.1, где Я_20Ь представляет собой метил.
4. 4. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из Н-(6-(дифтор(6-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3- ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида;

   N-(6-(дифтор(6-(4-фторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)метил)имидазо[1,2-Ь]пиридазин2-ил)циклопропанкарбоксамида;

   Н-(6-(дифтор(6-(4-изопропилфенил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо [1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида;

   N-(6-((6-(3,5-дифторфенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида;

   N-(6-((6-(1Н-пиразол-4-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)дифторметил)имидазо[1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида и

   Н-(6-(дифтор(6-(3 -фтор-5-метилфенил)-[1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо [1,2Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамида, или фармацевтически приемлемая соль любого из вышеперечисленных соединений.
5. 5. Соединение по п.1, которое представляет собой Н-(6-(дифтор(6-(1-метил-1Н-пиразол-4-ил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
6. 6. Соединение по п.1, которое представляет собой Н-(6-(дифтор(6-(3-фторфенил)[ 1,2,4]триазоло [4,3-а]пиридин-3 -ил)метил)имидазо [ 1,2-Ь]пиридазин-2-ил)циклопропанкарбоксамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
7. 7. Фармацевтическая композиция, включающая соединение по любому из пп.1-6 и фармацевтиче ски приемлемое вспомогательное вещество.

   Евразийская патентная организация, ЕАПВ

   Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2