EA018907B1

EA018907B1 - Кристаллический гидрохлорид n-{(1s)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1h-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида

Info

Publication number: EA018907B1
Application number: EA201101144A
Authority: EA
Inventors: Пиньюн Й. Чэнь; Джеффри Голдинг
Original assignee: ГЛЭКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи
Priority date: 2009-01-30
Filing date: 2010-01-28
Publication date: 2013-11-29
Also published as: NZ594064A; IL214023A0; JP2015212269A; US20110288142A1; CA2750565C; AU2010208265B2; JP2017061559A; MY161598A; US8609711B2; TW201038564A; JP6924794B2; AR075153A1; BRPI1006896A2; IL214023A; ZA201105033B; BRPI1006896B1; WO2010088331A1; UA106740C2; JP2012516344A; US20150045405A1

Abstract

В изобретении разработан усовершенствованный ингибитор AKT, а именно кристаллический гидрохлорид N-{(1S)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1H-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида.

Description

Настоящее изобретение относится к усовершенствованному ингибитору протеинкиназы В (далее по тексту РКБ/Лк1, РКВ или АКТ), а именно гидрохлориду Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в кристаллической форме. Это соединение представлено структурной формулой (I)

Соединение по настоящему изобретению применимо в качестве ингибитора активности АКТ и при лечении раковых заболеваний и артрита.

Краткое описание фигур чертежей

На фиг. 1 изображена картина дифракции рентгеновских лучей (РХКЭ) для Ы-{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в кристаллической форме.

На фиг. 2 изображена картина дифракции рентгеновских лучей (РХКЭ) для Ы-{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в кристаллической форме.

На фиг. 3 изображена картина дифракции рентгеновских лучей (РХКЭ) для Ы-{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в аморфной форме.

Подробное описание изобретения

Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2тиофенкарбоксамид представляет собой соединение, которое было раскрыто и заявлено, наряду со своими фармацевтически приемлемыми солями, как подходящее для применения в качестве ингибитора активности АКТ, в частности при лечении рака и артрита, в международной заявке № РСТ/И808/053269, с международной датой подачи 7 февраля 2008 г.; международной патентной публикации № ХУО 08/098104 с датой международной публикации 14 августа 2008 г. (соединение примера 96). Содержание указанных документов полностью включено в настоящую заявку с помощью ссылки. В международной заявке № РСТ/Б808/053269 раскрыт способ получения гидрохлорида Ы-{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида. Однако гидрохлорид, полученный по способу примера 96 международной заявки № РСТ/И808/053269, имеет аморфную форму.

В настоящем изобретении было обнаружено, что гидрохлорид Ы-{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида может быть получен в кристаллической форме и что кристаллическая форма обладает рядом преимуществ по сравнению со свободной кислотой и другими солевыми формами, в т.ч. гидрохлоридом в аморфной форме. Кристаллическую форму гидрохлорида Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-

1- метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида легче вводить в состав фармацевтических дозированных форм, в частности таблеток, и она обладает повышенной химической устойчивостью. Кристаллическая форма по настоящему изобретению является негигроскопичной, безводной формой и демонстрирует хорошую растворимость в биологических средах. Аморфная форма является гигроскопичной.

Хотя соединение в свободной форме можно с успехом применять в качестве ингибитора активности АКТ, в т.ч. при лечении раковых заболеваний и артрита, кристаллическая форма гидрохлорида N-{(18)-

2- амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида обладает дополнительными преимуществами.

Соединение по настоящему изобретению, т.е. гидрохлорид №{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в кристаллической форме (далее по тексту - активный ингредиент или соединение А), применимо в качестве ингибитора активности АКТ, в частности при лечении раковых заболеваний и артрита. Активный ингредиент по настоящему изобретению можно вводить в составе обычных дозированных форм, полученных смешиванием активного ингредиента с обычным фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем в соответствии с методиками, хорошо известными специалисту в данной области техники, например, описанными в международной заявке № РСТ/И808/053269.

Соответственно, в объем настоящего изобретения входят фармацевтические композиции, включающие гидрохлорид N-{(18)-2-амино-1-[(3 -фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1 -метил-1Нпиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в кристаллической форме в качестве активного ингредиента в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем. Соединение А по настоящему изобретению можно вводить пероральным, парентеральным, интрадермальным или местным путем. Термин парентеральный в настоящей заявке включает внутривенное, внутримышечное, подкожное, интра

- 1 018907 назальное, интраректальное, интравагинальное и интраперитонеальное введение. В основном предпочтительно пероральное введение. Соединение А можно включать в состав дозированных форм, подходящих для каждого из путей введения, в т.ч. капсул, таблеток, пилюль, порошков и гранул. В таких твердых дозированных формах, активное соединение, как правило, смешано по меньшей мере с одним инертным разбавителем. Пероральные дозированные формы могут также включать в качестве обычной практики, дополнительные вещества, помимо инертных разбавителей, например, смазывающие средства, средства для скольжения и антиоксиданты. В случае капсул, таблеток и пилюль, дозированные формы могут включать также буферные средства. Кроме того, таблетки и пилюли могут иметь такой состав, который обеспечивает продолжительное высвобождение.

Препараты по настоящему изобретению, предназначенные для парентерального введения, включают стерильные водные растворы, хотя могут применяться и неводные суспензии или эмульсии. Эти дозированные формы могут также включать адъюванты, например, консервирующие, смачивающие, осмотические, буферирующие, эмульгирующие и диспергирующие агенты. Их можно стерилизовать, например, с помощью фильтрования через фильтр, удерживающий бактерии, путем включения в композиции стерилизующих агентов, облучением композиций или нагреванием композиций.

Содержание активного ингредиента по настоящему изобретению в описанных выше дозированных лекарственных формах должно представлять собой эффективное количество, предпочтительно выбранное из диапазона 0,001-100 мг/кг общей массы тела, предпочтительно 0,001-50 мг/кг. При лечении пациента из числа людей, нуждающегося в ингибировании АКТ при необходимости лечения рака или при необходимости лечения артрита, выбранную дозу предпочтительно вводят от 1 до 6 раз в день, перорально или парентерально. Предпочтительные формы парентерального введения включают местное введение, ректальное введение, трансдермальное введение, введение с помощью инъекции или продолжительное вливание с помощью инфузии. Пероральные дозированные формы, предназначенные для приема людьми, предпочтительно содержат от 0,05 до 3500 мг активного ингредиента, наиболее предпочтительно от 0,5 до 1000 мг активного ингредиента. Предпочтительным является пероральное введение, при котором применяются более низкие дозировки. Однако, кроме того, можно применять парентеральное введение более высоких доз, если это безопасно и удобно для пациента. Приведенные выше дозировки относятся к предпочтительным количествам активного ингредиента в форме свободной кислоты.

Специалист в данной области техники поймет, что оптимальное количество и распределение индивидуальных доз активного ингредиента будет определяться природой и степенью развития состояния, подвергаемого лечению, формой, путем и местом введения, а также конкретным пациентом, и что этот оптимум можно определить с помощью обычных методик. Кроме того, специалист в данной области техники поймет, что оптимальный курс лечения, т.е. количество доз активного ингредиента, вводимых в течение суток на протяжении определенного количества дней, может быть определен специалистом в данной области с использованием обычных тестов для выявления надлежащего курса лечения.

Говоря в общем, соединение по настоящему изобретению получают растворением свободного основания, т.е. И-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)2-тиофенкарбоксамида в подходящем органическом растворителе, например метил-трет-бутиловом эфире (МТВЕ), с последующим добавлением к этому раствору НС1, например, 4М НС1 в диоксане при нагревании, например, до 42°С в течение 4 ч. Раствору дают остыть и соединение по настоящему изобретению отделяют фильтрованием и высушивают, например, высушивают в вакууме или на воздухе при повышенной температуре.

Органические растворители можно приобрести у А1бпе11 С11С1шеа1 Сотрапу, МП\\<шксс. ХУюеопмп.

Поскольку фармацевтически активное соединение по настоящему изобретению проявляет активность в качестве ингибитора АКТ, оно демонстрирует терапевтическую эффективность при лечении рака и артрита.

Соответственно, настоящее изобретение относится к способу лечения или облегчения тяжести ракового заболевания, выбранного из: рака мозга (глиом), глиобластом, синдрома Баннаяна-Зонана, болезни Ковдена, болезни Лермитт-Дюкло, рака груди, воспалительного рака груди, опухоли Вильма, саркомы Эвинга, рабдомиосаркомы, эпендимомы, медуллобластомы, рака толстой кишки, рака головы и шеи, рака почек, рака легких, рака печени, меланомы, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака простаты, саркомы, остеосаркомы, гигантоклеточной опухоли костей, рака щитовидной железы, лимфобластного Т-клеточного лейкоза, хронического миелогенного лейкоза, хронического лимфоцитарного лейкоза, лейкоза ворсистых клеток, острого лимфобластного лейкоза, острого миелогенного лейкоза, хронического нейтрофильного лейкоза, острого лимфобластного Т-клеточного лейкоза, плазмацитомы, иммунобластного крупноклеточного лейкоза, лейкоза клеток мантийной зоны, множественной миеломы, мегакариобластного лейкоза, множественной миеломы, острого мегакариоцитарного лейкоза, промиелоцитарного лейкоза, эритролейкоза, злокачественной лимфомы, ходжкинской лимфомы, неходжкинской лимфомы, лимфобластной Т-клеточной лимфомы, лимфомы Беркитта, фолликулярной лимфомы, нейробластомы, рака мочевого пузыря, рака уротелия, рака легких, рака вульвы, рака шейки матки, рака эндометрия, рака почек, мезотелиомы, рака пищевода, рака слюнных желез, гепатоклеточного рака, рака желудка, рака носоглотки, рака щек, рака ротовой полости, С18Т (желудочно-кишечных стромальных опухолей) и рака

- 2 018907 яичек.

Как указано в РСТ/и82008/053269, соединение по настоящему изобретению, полученное по способу РСТ/и82008/053269, тестировали на активность в основном в соответствии с ферментным анализом АКТ, раскрытым в РСТ/Б82008/053269, и по меньшей мере в одном эксперименте демонстрировали значение р1С₅₀, равное 9,0 для полноразмерного АКТ1; равное 8,0 для полноразмерного АКТ2; и равное 8,8 для полноразмерного АКТ3.

Под термином лечение и его производными в настоящей заявке подразумевается терапевтическое лечение.

Профилактическое лечение подходит, например, в случае, если считается, что у субъекта имеется высокий риск развития рака, или если субъект подвергается действию канцерогенов.

В настоящем описании термин эффективное количество и его производные означает такое количество лекарственного средства или фармацевтического агента, которое вызовет такую биологическую или медицинскую реакцию ткани, системы, животного или человека, которая имелась в виду, например, исследователем или клиницистом. Кроме того, термин терапевтически эффективное количество и его производные означает любое количество, которое, при сравнении с соответствующим субъектом, который не получал этого количества, приводит к более эффективному лечению, профилактике или облегчению заболевания, расстройства или побочного эффекта, или к понижению скорости развития заболевания или расстройства. Этот термин также охватывает количества препаратов, эффективные для улучшения нормальной физиологической функции.

Под термином совместное введение и его производными в настоящей заявке подразумевается либо одновременное введение, либо любой способ раздельного последовательного введения соединения А и другого активного ингредиента или ингредиентов, о которых известно, что они применимы при лечении рака, включая химиотерапию и радиационное лечение, или применимы при лечении артрита. Термин другой активный ингредиент или ингредиенты в настоящей заявке включает любое соединение или терапевтический агент, о котором известно, что он обладает полезными свойствами или который демонстрирует такие свойства при введении пациенту в случае необходимости лечения рака или артрита. Предпочтительно, если введение не является одновременным, соединения вводят в течение минимального промежутка времени друг относительно друга. Кроме того, не важно, вводятся ли соединения в одной и той же дозированной лекарственной форме, например, одно соединение можно вводить местно и другое соединение можно вводить перорально.

Как правило, при лечении рака соединением по настоящему изобретению можно осуществлять совместное введение любого антинеопластического агента, который обладает активностью против восприимчивых к нему опухолей, подвергаемых лечению. Примеры таких агентов можно найти в Сапсег ΡΓίηοίр1ек апб Ртасйсе οί Опсо1оду Ьу У.Т.Эеуйа апб 8.Не11тап (ебйога), 6^4Ь ебйюп (РеЬтиату 15, 2001), Ырршсой ^1Шат5 & ХУПктз РиЬШйега. Рядовой специалист в данной области мог бы распознать полезные комбинации агентов на основе конкретных характеристик лекарственных препаратов и ракового заболевания. Типовые анти-неопластические агенты, применимые в настоящем изобретении, включают, не ограничиваясь этим, агенты, нарушающие образование микротрубочек, например дитерпеноиды и алкалоиды барвинка; координационные комплексы платины; алкилирующие агенты, например азотистые иприты, оксазафосфорины, алкилсульфонаты, нитрозомочевины и триазены; антибиотики, например, антрациклины, актиномицины и блеомицины; ингибиторы топоизомеразы II, например эпиподофиллотоксины; антиметаболиты, например, аналоги пурина и пиримидина и антифолаты; ингибиторы топоизомеразы I, например камптотецины; гормоны и аналоги гормонов; ингибиторы путей передачи сигнала; не рецепторные тирозинкиназы, являющиеся ингибиторами ангиогенеза; иммунотерапевтические агенты; проапоптотические агенты; и ингибиторы передачи сигналов клеточного цикла.

Примерами другого активного ингредиента и ингредиентов (анти-неопластического агента), подходящих для применения в комбинации или для совместного введения с соединением А по настоящему изобретению, являются химиотерапевтические агенты.

Средства, нарушающие сборку микротрубочек, или антимитотические агенты являются фазоспецифичными агентами, проявляющими активность против микротрубочек опухолевых клеток во время фазы М или митоза клеточного цикла. Примеры таких агентов включают, не ограничиваясь этим, дитерпеноиды и алкалоиды барвинка.

Дитерпеноиды, которые извлекают из природных источников, являются фазоспецифичными противораковыми агентами, которые действуют во время фаз С₂/М клеточного цикла. Считается, что дитерпеноиды стабилизируют субъединицу β-тубулина микротрубочек, за счет связывания с этим белком. Отсутствие белка при сборке микротрубочки, возникающее после его ингибирования, приводит к остановке митоза и последующей смерти клетки. Примеры дитерпеноидов включают, не ограничиваясь этим, паклитаксел и его аналог доцетаксел.

Паклитаксел, т.е. 5в,20-эпокси-1,2а,4,7в,10в,13а-гексагидрокситакс-11-ен-9-он 4,10-диацетат 2бензоат 13-эфир с (2К,38)-Л-бензоил-3-фенилизосерином представляет собой природный дитерпеновый продукт, выделенный из тихоокеанского тиса Тахик ЬгехТГоНа, и его можно приобрести в виде раствора

- 3 018907 для инъекций ТАХОЬ®. Он является членом семейства таксанов, входящего в число терпенов. Впервые паклитаксел был выделен в 1971 г. \Уаш и соавторами (1. Ат. Скет. Зос, 93:2325, 1971), которые установили его структуру химическими методами и способом рентгеновской кристаллографии. Один из механизмов, обеспечивающих активность паклитаксела, связан с его способностью связывать тубулин, тем самым ингибируя рост раковых клеток. ЗскгГГ е! а1., Ргос. ΝηΐΕ Асаб. 8с1., И8А, 77:1561-1565 (1980); 8ск1ГГ е! а1., Ыа1иге, 277:665-667 (1979); Китаг, 1. Βΐο1. Скет., 256: 10435-10441 (1981). Для ознакомления с обзором синтеза и противораковой активности некоторых производных паклитаксела см.: Ό.Ο.Ι.Κίη^δΐοη е! а1., 8!иб1е§ ίη Огдашс Скет18!гу νοί. 26, раздел, озаглавленный №\ν 1геиб8 ίη Ыа1ига1 Ргобисй Скет181гу 1986, А!ίаи^-Какшаη, РЛУ.Ье Оиете, Еб§. (ЕЕеззег. АтМегбат. 1986), рр. 219-235.

Паклитаксел был одобрен для клинического применения в Соединенных Штатах при лечении рефрактерного рака яичников (Магктаг! е! а1., Уа1е 1оита1 оГ Вю1оду апб Мебюше, 64:583, 1991; МсОшге е! а1., Аии. Ιη^τη, Меб., 111:273, 1989) и для лечения рака груди (Но1те§ е! а1., 1. На!. Саисет Ιη§!., 83:1797, 1991). Паклитаксел является потенциальным кандидатом для лечения новообразований на коже (Ет/|д е! а1., Ргос. Ат. 8ос. С1т. Опсо1., 20:46), а также карцином головы и шейного отдела (ЕогаШге е! а1., 8еш. Опсо1., 20:56, 1990). Кроме того, это соединение демонстрирует потенциал для лечения поликистозной болезни почек (\Уоо е! а1., Ыа!иге, 368:750, 1994), рака легких и малярии. Лечение пациентов паклитакселом приводит к подавлению деятельности костного мозга (многочисленные последовательности клеточных поколений, [дгюГЕ К.Т е! а1., Сансег Скето!кегару Роске! Ошбе, 1998), связанному с продолжительным введением при концентрациях выше пороговой (50 нМ) (Кеату СМ. е! а1., Зетшаге ίη Огсо1оду, 3(6) р. 16-23, 1995).

Доцетаксел, т.е. тригидрат (2В,38)-Ы-карбокси-3-фенилизосерина Ν-трет-бутилового эфира, 13эфира с 5(3-20-эпокси-1,2а,4,7в,10в,13а-гексагидрокситакс-11-ен-9-он 4-ацетат 2-бензоатом, можно приобрести в виде раствора для инъекций ТАХОТЕКЕ®. Доцетаксел показан для лечения рака груди. Доцетаксел является полусинтетическим производным паклитаксела (см. выше), получаемым с использованием природного синтетического предшественника, а именно 10-деацетилбаккатина ΙΙΙ, который экстрагируют из иголок европейского тиса. Токсичность, ограничивающая дозировку доцетаксела, связана с нейтропенией.

Алкалоиды барвинка являются фазоспецифичными антинеопластическими агентами, выделяемыми из растения барвинок малый. Алкалоиды барвинка действуют во время фазы М (митоза) клеточного цикла за счет специфического связывания с тубулином. Вследствие этого связанные молекулы тубулина не способны полимеризоваться с образованием микротрубочек. Считается, что митоз останавливается в метафазе с последующей смертью клетки. Примеры алкалоидов барвинка включают, не ограничиваясь этим, винбластин, винкристин и винорелбин.

Винбластин, т.е. винкалейкобластина сульфат, можно приобрести под торговым наименованием УЕЬВАН® в форме раствора для инъекций. Хотя имеется возможность его применения в качестве терапии второй линии при лечении различных солидных опухолей, он прежде всего показан при лечении рака яичек и различных лимфом, включая болезнь Ходжкина; а также лимфоцитарных и гистоцитарных лимфом. Побочным действием винбластина, ограничивающим его дозировку, является миелосупрессия.

Винкристин, т.е. винкалейкобластина, 22-оксо, сульфат, можно приобрести под торговым наименованием ОНСОУШ® в форме раствора для инъекций. Винкристин показан для лечения острых лейкозов, а также нашел применение в схемах лечения Ходжкинских и не Ходжкинских злокачественных лимфом. Облысение и неврологические эффекты являются наиболее распространенными побочными действиями винкристина, и в меньшей степени проявляется миелосупрессия и воздействие на слизистую оболочку желудочно-кишечного тракта.

Винорелбин, т.е. 3',4'-дидегидро-4'-дезокси-С'-норвинкалейкобластина [К-(К*,К*)-2,3дигидроксибутандиоат] (соль) (1:2), который можно приобрести в форме раствора тартрата винорелбина для инъекций (НАУЕЬВЕНЕ®), представляет собой полусинтетический алкалоид барвинка. Винорелбин показан в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами, например цисплатином, при лечении различных солидных опухолей, в частности немелкоклеточного рака легких, рака груди на поздних стадиях и рака простаты, устойчивого к гормонотерапии. Наиболее распространенным побочным действием винорелбина, ограничивающим его дозировку, является миелосупрессия.

Координационные комплексы платины являются не фазоспецифичными противораковыми агентами, которые взаимодействуют с ДНК. Эти комплексы платины проникают в опухолевые клетки, претерпевают гидратацию и образуют поперечные связи внутри нити ДНК и между нитями ДНК, оказывая разрушительное биологическое воздействие на опухоль. Примеры координационных комплексов платины включают, не ограничиваясь этим, цисплатин и карбоплатин.

Цисплатин, т.е. цис-диаминдихлорплатину, можно приобрести под торговым наименованием РЕАТЕНОЬ® в форме раствора для инъекций. Цисплатин показан в первую очередь при лечении метастатического рака яичек и яичников, а также рака мочевого пузыря на поздних стадиях. Основными побочными эффектами цисплатина, ограничивающими дозировку, являются нефротоксичность, которую

- 4 018907 можно ограничить путем насыщения организма водой и диуреза, и ототоксичность.

Карбоплатин, т.е. диамин[1,1-циклобутандикарбоксилат(2-)-О,О']платину, можно приобрести под торговым наименованием ΡΑΒΑΡΕΑΤΙΝ® в форме раствора для инъекции. Карбоплатин показан для лечения первой и второй линии карциномы яичников на поздней стадии. Ограничивающая дозировку токсичность карбоплатина связана с подавлением деятельности костного мозга.

Алкилирующие агенты являются не фазоспецифичными противораковыми агентами и сильными электрофилами. Как правило, алкилирующие агенты за счет алкилирования образуют ковалентные связи с нуклеофильными фрагментами молекулы ДНК, например фосфатными, амино, сульфгидрильными, гидроксильными, карбоксильными и имидазольными группами. Такое алкилирование нарушает функции нуклеиновых кислот, приводя к смерти клетки. Примеры алкилирующих агентов включают, не ограничиваясь этим, азотистые иприты, например циклофосфамид, мелфалан и хлорамбуцил; алкилсульфонаты, например бусульфан; нитрозомочевины, например кармустин; и триазены, например дакарбазин.

Циклофосфамид, т.е. моногидрат 2-[бис(2-хлорэтил)амино]тетрагидро-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2оксида, можно приобрести в виде раствора для инъекций или таблеток под торговым наименованием ί,ΎΤΟΧΑΝ®. Циклофосфамид показан в виде индивидуального лекарственного средства или в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами при лечении злокачественных лимфом, множественной миеломы и лейкозов. Облысение, тошнота, рвота и лейкопения являются наиболее распространенными побочными эффектами, ограничивающими дозировки циклофосфамида.

Мелфалан, т.е. 4-[бис(2-хлорэтил)амино]-Ь-фенилаланин, можно приобрести в виде раствора для инъекции или таблеток под торговым наименованием ΑΕΚΕΚΑΝ®. Мелфалан показан для паллиативного лечения множественной миеломы и неоперабельной карциномы эпителия яичников. Подавление деятельности костного мозга является наиболее распространенным побочным эффектом, ограничивающим дозировку мелфалана.

Хлорамбуцил, т.е. 4-[бис(2-хлорэтил)амино]бензолбутановую кислоту, можно приобрести в форме таблеток под торговым наименованием ΕΕυΚΕΚΑΝ®. Хлорамбуцил показан для паллиативного лечения хронического лимфатического лейкоза и злокачественных лимфом, например, лимфосарком, гигантофолликулярной лимфомы и болезни Ходжкина. Подавление деятельности костного мозга является наиболее распространенным побочным эффектом, ограничивающим дозировку хлорамбуцила.

Бусульфан, т.е. 1,4-бутандиолдиметансульфонат, можно приобрести в виде таблеток ΜΥΕΕΚΑΝ®. Бусульфан показан для паллиативного лечения хронического миелогенного лейкоза. Подавление деятельности костного мозга является наиболее распространенным побочным эффектом, ограничивающим дозировку бусульфана.

Кармустин, т.е. 1,3-бис-(2-хлорэтил)-1-нитозомочевину, можно приобрести в форме отдельных флаконов с лиофилизованным материалом под торговым наименованием Βίί,’Νυ®. Кармустин, в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими средствами, показан для паллиативного лечения опухолей мозга, множественной миеломы, болезни Ходжкина и не Ходжкинских лимфом. Замедленное наступление миелосупрессии является наиболее распространенным побочным эффектом, ограничивающим дозировку кармустина.

Дакарбазин, т.е. 5-(3,3-диметил-1-триазено)имидазол-4-карбоксамид, можно приобрести в форме отдельных флаконов с препаратом под торговым наименованием ИТЮ-Иоше®. Дакарбазин показан для лечения метастатической злокачественной меланомы и в комбинации с другими агентами для лечения второй линии болезни Ходжкина. Тошнота, рвота и анорексия являются наиболее распространенными побочными эффектами, ограничивающими дозировку дакарбазина.

Антинеопластические средства из числа антибиотиков являются не фазоспецифичными агентами, которые связываются с ДНК или встраиваются в нее. Как правило, это приводит к образованию устойчивых комплексов с ДНК или разрушению нитей ДНК, что нарушает обычные функции нуклеиновых кислот, приводя к смерти клеток. Примеры антинеопластических средств из числа антибиотиков включают, не ограничиваясь перечисленным, актиномицины, например дактиномицин, антроциклины, например даунорубицин и доксорубицин; и блеомицины.

Дактиномицин, известный также как актиномицин Ό, можно приобрести в форме препарата для инъекций под торговым наименованием ί,ΌδΜΕΟΕΝ®. Дактиномицин показан для лечения опухоли Вильма и рабдомиосаркомы. Тошнота, рвота и анорексия являются наиболее распространенными побочными эффектами, ограничивающими дозировку дактиномицина.

Даунорубицин, т.е. гидрохлорид (8§-цис)-8-ацетил-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-а-Ь-ликсогексапиранозил)окси] -7,8,9,10-тетрагидро-6,8,11-тригидрокси-1-метокси-5,12-нафтацендиона, можно приобрести в форме липосомального препарата для инъекций под торговым наименованием ΌΑυΝΟΧΟΜΕ® или в форме препарата для инъекций под торговым наименованием СЕКиВГОГЖ®. Даунорубицин показан для достижения ремиссии при лечении острого нелимфоцитарного лейкоза и поздних стадий ВИЧ, связанных с саркомой Капоши. Миелосупрессия является наиболее распространенным побочным эффектом, ограничивающим дозировки даунорубицина.

Доксорубицин, т.е. гидрохлорид (8§,108)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-а-Е-ликсо-гексапира

- 5 018907 нозил)окси]-8-гликолоил-7,8,9,10-тетрагидро-6,8,11-тригидрокси-1-метокси-5,12-нафтацендиона, можно приобрести в форме препарата для инъекций под торговым наименованием КИВЕХ® или ΑΌΚΙΑΜΥΟΙΝ КЭБ®. Доксорубицин в первую очередь показан для лечения острого лимфобластного лейкоза и острого миелобластного лейкоза, но применим также в качестве компонента лечения ряда солидных опухолей и лимфом. Миелосупрессия является наиболее распространенным побочным эффектом, ограничивающим дозировки доксорубицина.

Блеомицин, т.е. смесь цитотоксичных гликопептидных антибиотиков, выделенных из штамма 81гер1отусс5 уейюШиу можно приобрести под торговым наименованием ΒΕΕΝΟΧΑΝ®. Блеомицин показан для паллиативного лечения карциномы плоских клеток, лимфом и карцином яичек, в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими средствами. Токсическое действие на легкие и кожу является наиболее распространенным побочным эффектом, ограничивающим дозировки блеомицина.

Ингибиторы топоизомеразы II включают, не ограничиваясь этим, эпиподофиллотоксины.

Эпиподофиллотоксины являются фазоспецифичными антинеопластическими агентами, получаемыми из растения мандрагора лекарственная. Эпиподофиллотоксины, как правило, действуют на клетки в фазах 8 и С₂ клеточного цикла путем формирования тройного комплекса с топоизомеразой II и ДНК, что приводит к разрыву нитей ДНК. Разрывы нитей накапливаются, и наступает смерть клетки. Примеры эпиподофилотоксинов включают, не ограничиваясь перечисленным, этопозид и тенипозид.

Этопозид, т.е. 4'-диметилэпиподофиллотоксин-9-[4,6-0-(К)-этилиден-в-Э-глюкопиранозид] можно приобрести в форме раствора для инъекций или капсул под торговым наименованием УеРЕ8ГО® и он широко известен как УР-16. Этопозид показан при лечении рака яичек и немелкоклеточного рака легких в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими химиотерапевтическими средствами. Миелосупрессия является наиболее распространенным побочным эффектом этопозида. Проявление лейкопении обычно бывает более тяжелым, чем тромбоцитопении.

Тенипозид, т.е. 4'-диметилэпиподофиллотоксин-9-[4,6-0-(К)-тиенилиден-3-О-глюкопиранозид], можно приобрести в форме раствора для инъекций под торговым наименованием ΥΌΜΟΝ®, и он широко известен как УМ-26. Тенипозид показан при лечении острого лейкоза у детей в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими химиотерапевтическими средствами. Миелосупрессия является наиболее распространенным побочным эффектом тенипозида. Тенипозид может вызывать как лейкопению, так и тромбоцитопению.

Антинеопластические антиметаболиты являются фазоспецифичными анти-неопластическим агентами, которые действуют во время 8 фазы (синтеза ДНК) клеточного цикла, за счет ингибирования синтеза ДНК или за счет ингибирования синтеза пуриновых или пиримидиновых оснований и вследствие этого ограничения синтеза ДНК. В результате этого не осуществляется 8 фаза и наступает смерть клетки. Примеры антинеопластических антиметаболитов включают, не ограничиваясь перечисленным, фторурацил, метотрексат, цитарабин, мекаптопурин, тиогуанин и гемцитабин.

5-фторурацил, т.е. 5-фтор-2,4-(1Н,3Н)пиримидиндион, можно приобрести под торговым наименованием фторурацил. Введение 5-фторурацила ведет к ингибированию синтеза тимидилатов и, кроме того, он включается в состав как РНК, так и ДНК. Результатом этих процессов, как правило, является смерть клетки. 5-фторурацил показан при лечении карцином груди, толстой кишки, прямой кишки, желудка и поджелудочной железы как в качестве единственного лекарственного средства, так и в комбинации с другими химиотерапевтическими средствами. Миелосупрессия и мукозит являются побочными эффектами, ограничивающими дозировки 5-фторурацила. Другие аналоги фторпиримидина включают 5фтордезоксиуридин (флоксуридин) и 5-фтордезоксиуридина монофосфат.

Цитарабин, т.е. 4-амино-1-3-Э-арабинофуранозил-2-(1Н)-пиримидинон, можно приобрести под торговым наименованием ΟΥΤΟ8ΑΚ-ϋ®, и он широко известен под названием Ага-С. Считается, что цитарабин проявляет фазоспецифичность, оказывая действие на 8-фазе клеточного цикла, за счет ингибирования удлинения цепи ДНК при включении цитарабина в конец растущей цепи ДНК. Цитарабин показан при лечении острого лейкоза в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами. Другие аналоги цитидина включают 5-азацитидин и 2',2'дифтордезоксицитидин (гемцитабин). Цитарабин вызывает лейкопению, тромбоцитопению и мукозит.

Меркаптопурин, т.е. моногидрат 1,7-дигидро-6Н-пурин-6-тиона, можно приобрести под торговым наименованием ΡϋΚΙΝΕΤΗΟΕ®. Меркаптопурин проявляет фазоспецифичность, действуя во время 8фазы клеточного цикла за счет ингибирования синтеза ДНК по не установленному до настоящего времени механизму. Меркаптопурин показан при лечении острого лейкоза в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами. Ожидаемыми побочными эффектами меркаптопурина при его высоких дозировках являются миелосупрессия и гастроинтестинальный мукозит. Применимым аналогом меркаптопурина является азатиоприн.

Тиогуанин, т.е. 2-амино-1,7-дигидро-6Н-пурин-6-тион, можно приобрести под торговым наименованием ΤΑΒΕΟΓΟ®. Тиогуанин проявляет фазоспецифичность, действуя во время 8-фазы клеточного цикла за счет ингибирования синтеза ДНК по не установленному до настоящего времени механизму.

- 6 018907

Тиогуанин показан при лечении острого лейкоза в качестве единственного лекарственного средства или в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами. Миелосупрессия, в т.ч. лейкопения, тромбоцитопения и анемия являются наиболее распространенными побочными эффектами введения тиогуанина, ограничивающими его дозировку. Однако проявляются и гастроинтестинальные побочные действия, которые могут ограничивать дозировки. Другие аналоги пурина включают пентостатин, эритрогидроксинониладенин, флударабина фосфат и кладрибин.

Гемцитабин, т.е. моногидрохлорид 2'-дезокси-2',2'-дифторцитидина (β-изомер), можно приобрести под торговым наименованием 0ΕΜΖΑΚ®. Гемцитабин проявляет фазоспецифичность, действуя во время δ-фазы клеточного цикла и за счет блокирования продвижения клеточного цикла через границу фаз 01/8. Гемцитабин показан в комбинации с цисплатином при лечении местнораспространенного немелкоклеточного рака легких и индивидуально при лечении местнораспространенного рака поджелудочной железы. Миелосупрессия, в т.ч. лейкопения, тромбоцитопения и анемия являются наиболее распространенными побочными эффектами введения гемцитабина, ограничивающими его дозировку.

Метотрексат, т.е. Ы-[4-[[(2,4-диамино-6-птеридинил)метил]метиламино]бензоил]-Е-глутаминовую кислоту, можно приобрести под наименованием метотрексат натрия. Метотрексат демонстрирует фазоспецифичность, действуя на 8-фазе клеточного цикла за счет ингибирования синтеза, репарации и/или репликации ДНК, путем ингибирования редуктазы дигидрофолиевой кислоты, которая необходима для синтеза пуриновых нуклеотидов и тимидилата. Метотрексат показан при лечении хориокарциномы, менингеальной лейкемии, не Ходжкинской лимфомы и карцином груди, головы, шеи, яичников и мочевого пузыря, индивидуально или в комбинации с другими химиотерапевтическими агентами. Миелосупрессия (лейкопения, тромбоцитопения и анемия) и мукозит являются ожидаемыми побочными эффектами введения метотрексата.

Камптотецины, включая камптотецин и производные камптотецина, имеются в продаже или находятся на стадии разработки в качестве ингибиторов топоизомеразы I. Считается, что цитотоксическая активность камптотецинов связана с их ингибирующим действием на топоизомеразу I. Примеры камптотецинов включают, не ограничиваясь перечисленным, иринотекан, топотекан и описанные ниже различные оптические формы 7-(4-метилпиперазинометилен)-10,11-этилендиокси-20-камптотецина.

Гидрохлорид иринотекана, т.е. гидрохлорид (48)-4,11-диэтил-4-гидрокси-9-[(4-пиперидинопиперидино)карбонилокси]-1Н-пирано[3',4',6,7]индолизино[1,2-Ь]хинолин-3,14-(4Н, 12Н)-диона, можно приобрести в виде раствора для инъекций САМРТО8АЯ®.

Иринотекан является производным камптотецина, который, наряду с его активным метаболитом 8Ν-38, связывается с комплексом топоизомераза I - ДНК. Считается, что цитотоксичность возникает в результате не поддающихся восстановлению разрывов двойной спирали ДНК, вызванных взаимодействием тройного комплекса топоизомераза 1:ДНК:иринотекан или 8Ν-38 с репликативными ферментами. Иринотекан показан для лечения метастатического рака толстой или прямой кишки. Побочными эффектами гидрохлорида иринотекана, ограничивающими его дозировку, являются миелосупрессия, в т.ч. нейтропения, и гастроинтестинальные эффекты, включая диарею.

Гидрохлорид топотекана, т.е. моногидрохлорид (8)-10[(диметиламино)метил]-4-этил-4,9дигидрокси-1Н-пирано[3',4',6,7]индолизино[1,2-Ь]хинолин-3,14-(4Н,12Н)-диона можно приобрести в виде раствора для инъекций ΗΥΟΑΜΤΙΝ®. Топотекан является производным камптотецина, который связывается с комплексом топоизомераза I - ДНК и предотвращает повторное лигирование разрывов отдельных нитей, вызванных топоизомеразой I, в ответ на закручивание нитей молекулы ДНК. Топотекан показан для лечения второй линии метастатической карциномы яичников и мелкоклеточного рака легких. Побочным эффектом гидрохлорида топотекана, ограничивающим его дозировку, является миелосупрессия, в первую очередь нейтропения.

Кроме того, интерес представляет производное камптотецина приведенной ниже формулы А, которое находится в стадии разработки, в т.ч. рацемическая смесь (Я,8) форм, а также Я и 8 энантиомеры:

известное под химическим наименованием 7-(4-метилпиперазинометилен)-10,11-этилендиокси20(Я,8)камптотецин (рацемическая смесь) или 7-(4-метилпиперазинометилен)-10,11-этилендиокси20(Я)камптотецин (Я энантиомер) или 7-(4-метилпиперазинометилен)-10,11-этилендиокси-20(8)камптотецин (8 энантиомер). Эти, а также родственные им соединения, включая способы их получения, описаны в патентах США №№ 6063923; 5342947; 5559235; 5491237 и находящейся на рассмотрении па

- 7 018907 тентной заявке США № 08/977 217, поданной 24 ноября 1997 г.

Гормоны и аналоги гормонов применимы для лечения раковых заболеваний, для которых существует взаимосвязь между гормоном (гормонами) и ростом и/или отсутствием роста раковой опухоли. Примеры гормонов и аналогов гормонов, применимых при лечении раковых заболеваний, включают, не ограничиваясь этим, адренокортикостероиды, например предизон и преднизолон, которые применимы при лечении злокачественной лимфомы и острого лейкоза у детей; аминоглутетимид и другие ингибиторы ароматазы, например анастрозол, летразол, воразол и экземестан, применимы при лечении карциномы надпочечников и гормонозависимой карциномы груди, содержащей рецепторы эстрогенов; прогестрины, например мегестрола ацетат, применимый при лечении гормонозависимого рака груди и карциномы эндометрия; эстрогены, андрогены и антиандрогены, например флутамид, нилутамид, бикалютамид, ципротерона ацетат и 5а-редуктазы, например финастерид и дутастерид, применимые при лечении карциномы простаты и доброкачественной гипертрофии простаты; антиэстрогены, например тамоксифен, торемифен, ралоксифен, дролоксифен, йодоксифен, а также селективные модуляторы рецептора эстрогенов (8ЕКМ8), например, описанные в патентах США №№ 5681835, 5877219 и 6207716, применимые при лечении гормонозависимой карциномы груди и других восприимчивых раковых заболеваний; а также гонадотропин-высвобождающий гормон (СиКН) и его аналоги, которые стимулируют высвобождение лютеинизирующего гормона (ЕН) и/или фоликулостимулирующего гормона (Б8Н) для лечения карциномы простаты, например агонисты и антагонисты ЬНКН, такие как госерелина ацетат и люпролид.

Ингибиторы путей передачи сигнала представляют собой такие ингибиторы, которые блокируют или ингибируют химические процессы, вызывающие внутриклеточные изменения. В настоящей заявке этими изменениями являются клеточная пролиферация или дифференцировка. В число применимых в настоящем изобретении ингибиторов передачи сигнала входят ингибиторы рецепторных тирозинкиназ, не рецепторных тирозинкиназ, блокаторы домена 8Н2/8Н3, ингибиторы серин/треонин киназ, фосфатидил инозит-3 киназ, ингибиторы передачи сигнала миоинозита и онкогенов Как.

Некоторые тирозиновые протеинкиназы катализируют фосфорилирование определенных тирозильных остатков в различных белках, вовлеченных в регулирование клеточного роста. Эти тирозиновые протеинкиназы можно в широком смысле разделить на рецепторные и не рецепторные киназы.

Рецепторные тирозинкиназы являются трансмембранными белками, имеющими внеклеточный лигандсвязывающий домен, трансмембранный домен и домен тирозинкиназы. Рецепторные тирозинкиназы принимают участие в регулировании роста клеток и их часто именуют рецепторами факторов роста. Было показано, что неадекватная или неконтролируемая активация многих из этих киназ, т.е. нарушение киназной активности рецепторов факторов роста, например, вследствие избыточной экспрессии или мутации, приводит к нерегулируемому росту клеток. Соответственно, нарушение активности этих киназ связано с ростом злокачественной ткани. Следовательно, выявление ингибиторов этих киназ могло бы обеспечить способы лечения рака. Рецепторы факторов роста включают, например, рецептор эпидермального фактора роста, (ЕСБг), рецептор фактора роста тромбоцитарного происхождения (РЭСБг), егЬВ2, егЬВ4, рецептор сосудистого эндотелиального фактора роста (УЕСБг), тирозинкиназу с иммуноглобулин-подобным доменом и доменом, гомологичным эпидермальному фактору роста (Т1Е-2), рецептор инсулиноподобного фактора роста-1 (1СБ1), макрофаг колониестимулирующий фактор (сГтк), ВТК, скй, сте1, рецепторы фактора роста фибробластов (БСБ), рецепторы Тгк (ТгкА, ТгкВ и ТгкС), рецепторы эприна (ерй) и протоонкоген КЕТ. Некоторые ингибиторы рецепторов факторов роста находятся в разработке, и в их число входят антагонисты лигандов, антитела, ингибиторы тирозинкиназы и антисмысловые олигонуклеотиды. Рецепторы факторов роста и агенты, которые ингибируют деятельность рецепторов факторов роста, описаны, например, в Καΐΐι, Ιοίιη С, Ехр. Θρίη. Тйег.Ра1еи1к (2000)10(6):803-818; 8йа^уег е! а1 ЭЭТ νοΐ.2, №2 БеЬгиагу 1997; и Ьойк, БЭ. е! а1, Сго\\П1 Гас1ог гесер!огк ак 1агде1к, Иете Мо1еси1аг Тагде1к Гог Саисег СйетоШегару, еб. ХУогктап, Раи1 аиб Кегг, Ο;·ινί6, СКС ргекк 1994, Ьоибои.

Тирозинкиназы, которые не являются рецепторами факторов роста, именуются не рецепторными тирозинкиназами. Не рецепторные тирозинкиназы, которые подходят для применения в настоящем изобретении, и являются мишенями или потенциальными мишенями противораковых средств, включают с8гс, Ьск, Буи, Уек, 1ак, сАЬ1, БАК (киназу фокальной адгезии), тирозинкиназу Брутона и Всг-АЬ1. Эти не рецепторные киназы, а также агенты, которые ингибируют деятельность не рецепторных тирозинкиназ, описаны в 8тй, 8. аиб Согеу, 8.Г, (1999) 1оита1 оГ Нета1о1йегару аиб 81ет Се11 Кекеагсй 8(5): 465-80; и Во1еи, 1.В., Вгидде, 1.8., (1997) Аиииа1 ге\зе\\· оГ 1ттиио1оду. 15:371-404.

Блокаторы домена 8Н2/8Н3 являются агентами, которые нарушают связывание домена 8Н2 или 8Н3 в целом ряде ферментов или адаптерных белков, включая субъединицу Р13-К р85, семейство киназ 8гс, адаптерные молекулы (8йе, Сгк, Иек, СгЬ2) и Как-САР. Домены 8Н2/8Н3 в качестве мишеней для противораковых лекарственных средств обсуждаются в 8тИйда11, Т.Е. (1995), 1оита1 оГ Рйагтасо1од1са1 аиб Тох1со1одюа1 Ме1йобк, 34(3) 125-32.

Ингибиторы серин/треонин киназ включают блокаторы каскада киназы МАР, в число которых входят блокаторы киназ КаГ (гаГк), митоген или внеклеточно-регулируемых киназ (МЕКк) и внеклеточно регулируемых киназ (ЕККк); а также блокаторы членов семейства С протеин киназ, в т.ч. блокаторы РКСк (альфа, бета, гамма, ипсилон, мю, лямбда, йота, дзета). Семейство киназ 1кВ (1ККа, 1ККЬ), семей

- 8 018907 ство киназ РКВ, членов семейства киназ ак! и киназы рецептора ТОР бета. Эти серин/треонин киназы и их ингибиторы описаны в Уатато1о, Т., Тауа, 8., Ка1ЬисЫ, К., (1999), 1оитиа1 оГ Вюсйет1к1ту. 126 (5) 799-803; Вгой!, Р, 8атап1, А., апй ЫауаЬ, В. (2000), В1осйет1са1 Рйагтасо1оду, 60. 1101-1 107; Маккадие, 1., \Уе18-Сагаа. Р. (1996) Сапсег 8игуеук. 27:41-64; РЫйр, Р.А., апй Натк, А.Ь. (1995), Сапсег Тгеа1теп1 апй Векеатсй. 78: 3-27, Ьаскеу, К. е! а1 Вюотдашс апй Мей1С1па1 Сйет1к1ту Ье!!етк, (10), 2000, 223-226; и.8. патент № 6268391; и МагНпех-1асасР Ь., е! а1, 1п!. 1. Сапсег (2000), 88(1), 44-52.

Ингибиторы членов семейства фосфотидил инозит-3 киназ, в т.ч. блокаторы Р13-киназы, АТМ, ΌΝΑ-РК и Ки, также могут применяться в настоящем изобретении. Эти киназы обсуждаются в АЬтайаш, ВТ. (1996), Сштеп! Оршюп ш 1ттипо1оду. 8 (3) 412-8; Саптап, С. Е., Вт, Ό. 8. (1998), Опсодепе 17 (25) 3301-3308; 1асккоп, 8. Р. (1997), 1п!егпа!юпа1 1оитпа1 оГ Вюсйеш1к!ту апй Се11 Вю1оду. 29 (7):935-8; и /Понд, Н. е! а1, Сапсег гек, (2000) 60(6), 1541-1545.

Кроме того, в рамках настоящего изобретения представляют интерес ингибиторы передачи сигнала миоинозита, например блокаторы фосфолипазы С и аналоги миоинозита. Эти ингибиторы сигнала описаны в Роток, О., апй Ко/|ко\\'кк| А., (1994) Νον Мо1еси1аг Тагде!к Гот Сапсег СйешоШетару ей., Раи1 \огктап апй Эау|й Кегг, СВС ргекк 1994, Ьопйоп.

Другой группой ингибиторов путей сигнальной трансдукции являются ингибиторы онкогена Вак. В число этих ингибиторов входят ингибиторы фарнезилтрансферазы, геранил-геранил трансферазы и протеаз СААХ, а также антисмысловые олигонуклеотиды, рибозимы и иммунотерапевтические средства. Было показано, что эти ингибиторы блокируют активацию гак в клетках, содержащих мутантный онкоген гак дикого типа, тем самым действуя в качестве антипролиферативных агентов. Ингибирование онкогена гак обсуждается в 8сйатоукку, О.С., Вохайок, У.В., Сетуакош, 8.Ι., Ма!аг, Р. (2000), 1оитпа1 оГ Вютей1са1 8с1епсе. 7(4) 292-8; АкйЬу, М.Н (1998), Ситгеп! Оршюп ш Ыр1йо1оду, 9(2) 99-102; и ВюСЫш. Вюрйук. Ас!а, (19899) 1423 (3) :19-30.

Как указано выше, антитела, являющиеся антагонистами связывания рецепторной киназы с лигандом, также могут выполнять функцию ингибиторов передачи сигнала. Эта группа ингибиторов путей сигнальной трансдукции включает применение гуманизированных антител к внеклеточному лигандсвязывающему домену рецепторных тирозинкиназ. Например, ЕСРВ-специфичное антитело 1тс1опе С225 (см. Сгееп, М.С. е! а1., Мопос1опа1 АпйЬойу Тйетару Гот 8о11й Титогк, Сапсег ТгеаРВеу., (2000), 26(4), 269-286); антитело против егЬВ2 Нетсерйп® (см. Тугокте К1паке 81дпаШпд ш Вгеак! сапсег: егЬВ РатПу Весер!ог Тугокте Кшакек, Вгеак! Сапсег Век., 2000, 2(3), 176-183); и УЕСРВ2-специфичные антитела 2СВ (см. Вгеккеп, В.А. е! а1., 8е1еск'е 1п1иЬШоп оГ УЕСРВ2 Асйуйу Ьу а топос1опа1 Апй-УЕСР ап!1Ьойу Ь1оскк !итог дго\\111 ш тке, Сапсег Век. (2000) 60, 5117-5124).

Не рецепторные киназы, являющиеся ингибиторами ангиогенеза, также могут применяться в настоящем изобретении. Ингибиторы ангиогенеза, связанные с УЕСРВ и Т1Е2, были рассмотрены выше в связи с ингибиторами сигнальной трансдукции (оба рецептора представляют собой рецепторные тирозинкиназы). Ангиогенез в основном связан с передачей сигнала егЬВ2/ЕСРВ, поскольку было показано, что ингибиторы егЬВ₂ и ЕСРВ ингибируют ангиогенез, в первую очередь экспрессию УЕСР. Соответственно, ингибиторы не рецепторных тирозинкиназ могут применяться в комбинации с соединениями по настоящему изобретению. Например, анти-УЕСР антитела, которые не распознают УЕСРВ (рецепторную тирозинкиназу), но связываются с лигандом; низкомолекулярные ингибиторы интегрина (альфа_Убета₃), которые будут ингибировать ангиогенез; эндостатин и ангиостатин (не-ВТК) также могут оказаться применимыми в комбинации с раскрытыми соединениями (см. Вгипк С.1. е! а1. (2000), Сапсег Век., 60: 2926-2935; 8сйте1Ьет АВ, \шк1ет М.Е. апй Оетупск В. (1986), 8скпсе, 232: 1250-1253; Уеп Ь е!.а1., (2000), Опсодепе 19: 3460-3469).

Агенты, используемые в иммунотерапевтических схемах лечения, также могут найти применение в настоящем изобретении. Существует ряд иммунологических стратегий для генерирования иммунного ответа. Эти стратегии, как правило, относятся к области вакцинации опухолей. Эффективность иммунологических подходов можно существенно улучшить путем комбинированного ингибирования сигнальных путей с применением низкомолекулярных ингибиторов. Обсуждение применения иммунологических/опухолевых вакцин против егЬВ2/ЕСРВ имеется в ВеШу В.Т. е! а1., (2000), Сапсег Век.60: 3569-3576; и Сйеп Υ, Ни Ό, Е1шд Ό.Ι., ВоЬЫпк 1 апй К1ррк Т.1. (1998), Сапсег Век.58: 1965-1971.

Агенты, применяемые в проапоптотических схемах лечения (например, антисмысловые олигонуклеотиды Ьс1-2), также могут применяться в комбинации по настоящему изобретению. Члены семейства белков Вс1-2 блокируют апоптоз. Поэтому повышающая регуляция Ьс1-2 связана с невосприимчивостью к химическим препаратам. Исследования показали, что эпидермальный фактор роста (ЕСР) стимулирует анти-апоптотических членов семейства Ьс1-2 (т.е. тс1-1). Вследствие этого, стратегии, направленные на понижающую регуляцию экспрессии Ьс1-2 в опухолях, продемонстрировали положительные клинические результаты и в настоящее время находятся на стадии фазы ΙΙ/ΙΙΙ испытаний, причем конкретно речь идет об антисмысловом олигонуклеотиде для Ьс1-2 Сеп!а'к С3139. Подобные проапоптотические стратегии, в которых применяется антисмысловой олигонуклеотид для белка Ьс1-2, обсуждаются в \а!ег 1.8. е! а1., (2000), 1.С1ш.Опсо1 18: 1812-1823; и Кйайа 8., е! а1., (1994), АпИкепке ВекЛеу. 4: 71-79.

Ингибиторы передачи сигналов клеточного цикла ингибируют молекулы, принимающие участие в

- 9 018907 управлении клеточным циклом. Семейство протеин киназ, именуемых циклин-зависимыми киназами (СЭКк) и их взаимодействие с семейством белков, именуемых циклинами, управляет развитием клеточного цикла эукариотических клеток. Координированная активация и инактивация различных комплексов циклин/СЭК необходима для нормального продвижения по клеточному циклу. В разработке находится несколько ингибиторов передачи сигналов клеточного цикла. Примеры циклинзависимых киназ, в т.ч. ί.ΌΙ<2. СЭК4 и СЭК6 и их ингибиторов описаны, например, в Кокаша с1 а1., Ехр.ОршТйег. Ра1епй (2000) 10 (2): 215-230.

В одном из вариантов осуществления способ лечения рака по настоящему изобретению включает совместное введение соединения А и по меньшей мере одного антинеопластического агента, например, выбранного из группы, состоящей из агентов, нарушающих образование микротрубочек, координационных комплексов платины, алкилирующих агентов, антибиотических агентов, ингибиторов топоизомеразы II, антиметаболитов, ингибиторов топоизомеразы I, гормонов и их аналогов, ингибиторов путей передачи сигнала, ингибиторов ангиогенеза, являющихся не рецепторными тирозинкиназами, иммунотерапевтических агентов, проапоптотических агентов и ингибиторов передачи сигналов клеточного цикла.

Соединение А по настоящему изобретению применимо в качестве ингибитора АКТ при лечении рака и артрита у млекопитающих, в частности человека, нуждающихся в таком лечении.

Способ лечения рака и артрита у млекопитающих, в т.ч. человека, по настоящему изобретению включает введение нуждающемуся в этом субъекту, терапевтически эффективного количества соединения А по настоящему изобретению.

Настоящее изобретение относится также к применению соединения А для производства лекарственного средства, предназначенного для применения в терапии.

Настоящее изобретение относится также к применению соединения А для производства лекарственного средства, предназначенного для применения в качестве ингибитора АКТ.

Кроме того, настоящее изобретение относится к применению соединения А для производства лекарственного средства, предназначенного для применения при лечении рака.

Помимо этого, настоящее изобретение относится к применению соединения А для производства лекарственного средства, предназначенного для применения при лечении артрита.

Кроме того, изобретение относится к фармацевтической композиции, предназначенной для применения в лечении рака, которая включает соединение А и фармацевтически приемлемый носитель.

Помимо этого, изобретение относится к фармацевтической композиции, предназначенной для применения в лечении артрита, которая включает соединение А и фармацевтически приемлемый носитель.

Приведенные ниже примеры служат дополнительной иллюстрацией настоящего изобретения. Эти примеры не предполагают ограничения объема изобретения, который определен выше по тексту и в приведенной ниже формуле изобретения.

Пример 1. получение кристаллического гидрохлорида Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида

Аморфный Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5ил)-2-тиофенкарбоксамид в форме свободного основания получали, как описано в Международной патентной заявке № РСТ/И8 08/053269. 1 мл метил-т-бутилового эфира (МТВЕ) добавляли в сосуд, содержавший 50,8 мг аморфного Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Нпиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в форме свободного основания. Большая часть твердого вещества растворилась. После добавления к реакционной смеси хлористо-водородной кислоты (1 экв, 29,7 мл 4М НС1 в 1,4-диоксане) белое твердое вещество быстро выпало в осадок при комнатной температуре. Аликвоту реакционной смеси исследовали с помощью микроскопии в поляризованном свете (РЬМ) и обнаружили, что это твердое вещество является аморфным. Затем полученную суспензию нагревали до 40°С, перемешивая магнитной мешалкой, для растворения большей части твердого вещества. Образовавшуюся не густую суспензию перемешивали в течение ночи при 40°С, затем охлаждали с 40 до 25°С. Образовывалась густая белая суспензия. Аликвоту реакционной смеси исследовали с помощью микроскопии в поляризованном свете (РЬМ) и обнаружили, что образовавшееся твердое вещество является кристаллическим. Полученное белое твердое вещество отделяли вакуумным фильтрованием и затем высушивали при 50°С в течение ночи. По картине дифракции рентгеновских лучей на порошке (РХКЭ), изображенной на фиг. 1, было установлено, что продукт является твердым кристаллическим веществом.

- 10 018907

Прибор: Ктдаки МйпПех II, порядковый № ΌΌ02652

Основные операционные параметры:

Метод нормального сканирования

Образец сканировали, используя следующие параметры:

Диапазон сканирования: 2-40° по углу 2Θ

Питание генератора: 30 КВ, 15 мА

Источник излучения: Си КАльфа

Режим сканирования: РТ

Время регистрации сигналов: 1,0 с

Величина шага: 0,020 градусов по углу 2Θ на шаг

Оси сканирования: 2 Θ/Θ

Оптика падающего пучка: щель Соллера с углом расхождения ±2,5°, дивергентная щель 1,25 град., щель приемника 0,3 мм, щель рассеяния 1,25 град.

Оптика дифрагированного пучка: фиксированные щели (М1шР1ех II), щели Соллера ±2,5°

Тип детектора: Ктдаки М1ш11ех II (Счетчик сцинтилляции)

Образец помещали в держатель образцов с нулевым фоном (с выемкой глубиной 100 мкм) и осторожно разравнивали с помощью стеклянной пластины.

Пример 2. Получение кристаллического гидрохлорида И-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида.

мл МТВЕ добавляли к 213,9 мг аморфного И-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в форме свободного основания (0,500 ммоль). Эту смесь нагревали до 40°С при перемешивании магнитной мешалкой в течение 1 ч. Четырьмя равными порциями добавляли 4М раствор НС1 в 1,4-диоксане (1 экв; 125,1 мкл). После добавления первой порции (0,25 экв) смесь нагревали до 42°С и добавляли 1 мл ацетонитрила для растворения всего твердого вещества. После добавления оставшегося раствора НС1 выделилось небольшое количество твердого вещества. Полученную суспензию перемешивали при 42°С в течение 4 ч, затем медленно в течение ночи охлаждали до 22°С, выдерживая по 90 мин при 35, 30 и 25°С. Белое твердое вещество отделяли фильтрованием и высушивали в вакууме при 50°С в течение ночи, продувая слабым током азота. Выход гидрохлорида составлял 73,6% (0,3685 ммоль; 170,90 мг). По данным ионной хроматографии было установлено, что полученное твердое вещество являлось солью с НС1 в стехиометрическом отношении 1:1, и картина дифракции рентгеновских лучей на порошке соли (РХКЭ), изображенная на фиг. 2, и характеризуемая приведенными ниже дифракционными пиками, указала на кристаллическую природу продукта, который имеет температуру плавления 211°С.

Пики РХКИ (приведены значения углов 2Θ в градусах, и в круглых скобках даны межплоскостные расстояния б):

7,2(12,20)	14,4(6,16)	17,9(4,94)	18,5(4,79)	20,8(4,26)
21,5(4,12)	22,4(3,96)	22,9(3,88)	23,7(3,75)	24,5(3,63)
24,7(3,61)	25,1(4,12)	25,7(3,46)	27,3(3,26)	28,2(3,16)
28,8(3,10)	30,4(2,94)	32,4(2,76)	32,7(2,73)	35,2(2,55)
36,1(2,48)	40,0(2,25)	41,3(2,18)	41,7(2,16)

Прибор: РАЫа1уйеа1 Х'Рей-Рто МРЭ с монохроматором Ιοίιαηκκοη Κα1, в котором использовался детектор Х'Се1ега1от.

Основные операционные параметры:

Излучение: Си(Ка1), 1,540598 ангстрем (монохроматическое)

Детектор: Х'Се1ега1от

Напряжение: 45 КВ

Ток: 40 мА

Начальный угол: 2,0° 2Θ

Конечный угол: 52,0° 2Θ

Величина шага: 0,02°

Время/шаг: 40,0 с

Скорость сканирования: 0,05°/с

Падающий пучок: 2° фиксированная щель рассеяния и программируемая дивергентная щель Дифрагированный пучок: щель Соллера 0,02 рад, и программируемая щель рассеяния Образцы готовили на кремниевом держателе для образцов с нулевым фоном.

Пример 3. Получение аморфного гидрохлорида Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида.

Гидрохлорид Ы-{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол

- 11 018907

5-ил)-2-тиофенкарбоксамида получали в основном, как описано в примере 96 международной патентной заявки № РСТ/и82008/053269 с международной датой подачи 7 февраля 2008 г., и имеющей номер международной публикации νθ/2008/098104 и дату международной публикации 14 августа 2008 г., где в общих чертах указано, что соединение в форме свободного основания, т.е. Ы-{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамид, обрабатывают 4М НС1 в диоксане и через 5 мин полученный раствор концентрируют и высушивают в вакууме, получая гидрохлорид N-{(18)-2-амино-1-[(3 -фторфенил)метил]этил}-5 -хлор-4-(4-хлор-1 -метил-1Н-пиразол5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в виде аморфного твердого вещества, согласно картине дифракции рентгеновских лучей на порошке (РХКЭ), изображенной на фиг. 3.

Прибор: Ктдаки МйпПех II, порядковый № ΌΌ02652

Основные операционные параметры:

Метод нормального сканирования

Диапазон сканирования: 2-40° по углу 2Θ

Питание генератора: 30 КВ, 15 мА

Источник излучения: Си КАльфа

Режим сканирования: РТ

Время регистрации сигналов: 1,0 с

Величина шага: 0,020 градусов по углу 2Θ на шаг

Оси сканирования: 2 Θ/Θ

Оптика дифрагированного пучка: фиксированные щели (М1щР1ех II), щели Соллера ±2,5°

Тип детектора: Рщакн МйнПе.х II (Счетчик сцинтилляции)

Образец помещали в стеклянный держатель образцов и осторожно разравнивали с помощью стеклянной пластины.

Пример 4. Композиция таблетки.

Лактозу, микрокристаллическую целлюлозу, натрия крахмалгликолят, стеарат магния и кристаллический гидрохлорид N-{(18)-2-амино-1-[(3 -фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1 -метил-1Нпиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида смешивали в пропорциях, показанных ниже в табл. 1. Затем эту смесь прессовали в таблетки.

Таблица 1

Ингредиент	МГ
Кристаллический гидрохлорид Ν-( (15)-2-амино-1-[(3- фторфенил)метил]этил)-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Нпиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида	3,45
Микрокристаллическая целлюлоза	112
Лактоза	70
Крахмал гликолят натрия	8
Стеарат магния	2

Пример 5. Парентеральная композиция для инъекций.

Форму для инъекций, предназначенную для введения активного ингредиента по настоящему изобретению, получают перемешиванием 5,0 мг кристаллического гидрохлорида №{(18)-2-амино-1-[(3фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в 1,0 мл нормального солевого раствора.

Пример 6. Гигроскопичность.

Кристаллический

Кристаллический гидрохлорид №{(18)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида, полученный в основном по методике примера 1, кристаллическое строение которого подтверждено РХКП, тестировали с помощью прибора 8ОА 100 производства УП, используя следующую методику.

Получение образца:

Растворитель: Вода

Температура высушивания (°С): Без высушивания

Температура эксперимента (°С): 25

Макс, время достижения равновесия (мин): 240

Критерий равновесия (мас.%): 0,0025 за 10 мин

Интервал регистрации данных (мин.): 2 или 0,01 мас.%

Использовали 24 стадии относительной влажности. На каждой стадии относительная влажность имела следующие значения: 1-40; 2-50; 3-60; 4-70; 5-80; 6-90; 7-80; 8-70; 9-60; 10-50; 11-40; 12-30; 13-20;

- 12 018907

14-10; 15-5; 16-10; 17-20; 18-30; 19-40;20-50; 21-60; 22-70; 23-80; и 24-90.

Прирост массы соединения по настоящему изобретению за счет поглощения влаги составлял менее 1 мас.%, что указывает на низкую гигроскопичность соединения.

Аморфная соль

В отдельном эксперименте, проведенном в другой день, с помощью прибора 8СЛ 100 производства УТ1, исследовали аморфный гидрохлорид И-{(1§)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида (аморфное строение подтверждено РХКИ), используя следующую методику.

Получение образца:

Растворитель: Вода

Температура высушивания (°С): 60

Скорость нагревания (°С/мин): 1

Максимальное время высушивания (мин): 120

Температура эксперимента (°С): 25

Макс, время достижения равновесия(мин): 300

Критерий равновесия (мас.%): 0,0025 за 10 мин

Использовали 19 стадий относительной влажности. На каждой стадии относительная влажность имела следующие значения: 1-0; 2-10; 3-20; 4-30; 5-40; 6-50; 7-60; 8-70; 9-80; 10-90; 11-80; 12-70; 13-60; 14-50; 15-40; 16-30; 17-20; 18-10 и 19-0.

Прирост массы соединения за счет поглощения влаги составлял более 18 мас.%, что указывает на высокую гигроскопичность соединения.

Хотя предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения проиллюстрированы приведенным выше описанием, следует понимать, что изобретение не ограничивается раскрытыми в описании точными инструкциями, и что оговаривается право на все модификации, входящие в объем приведенной ниже формулы изобретения.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Гидрохлорид И-{(1§)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Нпиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида в кристаллической форме.
2. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора АКТ, включающая гидрохлорид И-{(1§)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2тиофенкарбоксамида в кристаллической форме и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
3. Способ получения фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и эффективное количество соединения по п.1, где указанный способ включает смешивание соединения по п.1 с фармацевтически приемлемым носителем.
4. Кристаллический гидрохлорид И-{(1§)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида по п.1, имеющий характеристические дифракционные пики при 14,4±0,3° и 32,4±0,3° на рентгеновской дифрактограмме порошка при использовании СиКа излучения.
5. Кристаллический гидрохлорид И-{(1§)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида по п.4, имеющий характеристические дифракционные пики при 25,1±0,3° и 25,7±0,3° на рентгеновской дифрактограмме порошка при использовании СиКа излучения.
6. Кристаллический гидрохлорид И-{(1§)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор1-метил-1Н-пиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида по п.4, имеющий характеристические дифракционные пики при 21,5±0,3° и 20,8±0,3° на рентгеновской дифрактограмме порошка при использовании СиКа излучения.
7. Фармацевтическая композиция, обладающая активностью ингибитора АКТ, включающая кристаллический гидрохлорид И-{(1§)-2-амино-1-[(3-фторфенил)метил]этил}-5-хлор-4-(4-хлор-1-метил-1Нпиразол-5-ил)-2-тиофенкарбоксамида, имеющий характеристические дифракционные пики, приведенные в п.4, а также фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.