DE69816109T2

DE69816109T2 - Substituierte imidazole zur behandlung von entzündlichen krankheiten

Info

Publication number: DE69816109T2
Application number: DE69816109T
Authority: DE
Inventors: A. Scott BEERS; Elizabeth Malloy; P. Michael WACHTER; Wei Wu
Original assignee: Ortho McNeil Pharmaceutical Inc
Current assignee: Janssen Pharmaceuticals Inc
Priority date: 1997-04-24
Filing date: 1998-04-17
Publication date: 2004-04-22
Anticipated expiration: 2018-04-18
Also published as: PT1028954E; WO1998047892A1; PL336758A1; RU2222534C2; PL191111B1; ZA983451B; NZ500447A; NO995095L; JP2001522357A; CN1253558A; CN1211381C; CA2297176A1; NO318937B1; NO995095D0; KR100568438B1; ATE244234T1; IL132318A0; BR9808998A; DE69816109D1; ES2202840T3

Description

Diese Erfindung betrifft eine Reihe von substituierten Imidazolen, pharmazeutischen Zusammensetzungen, welche diese enthalten, und Zwischenprodukten, die bei ihrer Herstellung verwendet werden Die Verbindungen der Erfindung inhibieren die Produktion einer Anzahl von Entzüdungscytokinen, insbesondere TNF-α und IL-1β. Verbindungen dieser Erfindung sind geeignet bei der Behandlung von Krankheiten, die mit der Überproduktio von Entzündungsctokinen verbunden sind, wie Rheumatodarthritis, entzüdlicher Darmerkrankung septischer Schock, Osteoporose und Osteoarthritis.
HINTERGRUND DER ERFINDUNG
Die Entzündungscytokine IL-1β und TNF-α spielen eine wichtige Rolle bei einer Anzahl von entzündlichen Krankheiten, wie Rheumatoidarthritis C. Dinarello et al., Inflammatory cytokines: Interleukin-1 and Tumor Necrosis Factor as Effector Molecules in Autoimmune Diseases Curr. Opin. Immunol. 1991, 3, 941–48. Arthritis ist eine entzündliche Krankheit, welche Millionen von Menschen angreift und jede Stelle des menschlichen Körpers befallen kann Ihre Symptome reichen von leichtem Schmerz und Entzündung an betroffenen Stellen zu schwerem und schwächendem Schmerz und Entzündung. Obwohl die Erkrankung hauptsächlich mit alternden Erwachsenden verbunden, ist sie nicht auf Erwachsene beschränkt Die gewöhnlichste Arthritistherapie schließt die Verwendung von nicht steroiden, entzüdungshemmenden Arzneimitteln (NSAID) ein, um die Symptome zu lindem Jedoch können einige Individuen, trotz ihrer weitverbreiteten Verwendung, die Dosierumgen nicht vertragen, die notwendig sind, um die Erkrankung über eine ausgedehnte Zeitdauer zu behandeln. Zusätzlich behandeln NSAIDs lediglich die Symptome der Erkrankung ohne den zugrundeliegenden Grund zu beeinflussen. Andere Arzneimittel, wie Methotrexat, Goldsalze, D-Penicillamin und Prednison, werden häufig verwendet, wenn es bei Patienten keinen Erfolg gibt, auf NSAIDs zu reagieren Diese Arzneimittel weisen ebenfalls beträchtliche Toxizitätem auf und ihr Wirkungsmechanismus bleibt unbekannt
Für Rezeptorantagonisten zu IL-1β und monoklonale Antikörper zu TNF-α, ist gezeigt worden, daß sie Symptome von Rheumatoidarthritis in klinischen Testserien in kleinem Maßstab mit Menschen reduzieren. Zusätzlich zu Therapien auf Protein-Basis gibt es kleine Molekülagentien, welche die Produktion dieser Cytokine inhibieren und eine Aktivität bei tierischen Arhritismodellen demonstriert haben J. C. Boehm et al., 1-Substituted 4-Aryl-5-pyridinylimidazoles: A New Class of Cytokine Suppressive Drugs With Low 5-Lipoxygenase and Cyclooxygenase Inhibitory Potency, J. Meel Chem, 1996, 39, 3929–37. Von diesen kleinen Molekülagentien hat sich SB 203580 als effektiv bei der Reduzierung der Produktion von TNF-α, und IL-1 in LPS-stimulierten menschlichen Monocytzelllinien mit IC₅₀-Weten von 50 bis 100 nM erwiesen J. Adams et al., Imidazol Derivatives And Their Use as Cytokine Inhibitor, Internationale Patentanmeldung WO 93/14081, 23. Juli 1993. Zusätzlich zu diesem in vitro-Test inhibiert SB 203580 die Produktion der Entzündungscytokine in Raben und Mäusen bei IC₅₀-Werten von 15 bis 25 mg/kg. AM Badger et al., Pharmacological Profile of SB 203580, A Selective Inhibitor of Cytokine Suppressive Binding Protein/p38 Kinase, in Animal Models of Arthritis, Bone Resorption, Endotoxin Shock and Immune Function, The Journal of Pharmacology and Experi mental Therapeutics, 1996, 279,1453–61. Obwohl Daten für Menschen gegenwärtig für SB 203580 nicht verfügbar sind, haben sich manoklonale Antikörper zu TNF-α als wirksam bei der Behandlung von Rheumatoidarthritis erwiesen M. J. Elliot et al., Treatment of Rheumatoid Arthritis with Chimeric Monoclonal Antrbodies to Tumor Necrosis Factor α, Arthritis Rheum. 1993 36, 1681–90. Aufgrund der oralen Aktivität und der Stärke in Tiermodellen von SB 203580, haben Forscher vorgeschlagen, daß eine Verbindung mit diesem Profil Potential hat als eine brauchbare Behandlung für Rheumatoidarthritis. AM Badger et al., Pharmacological Profile of SB 203580, A Selective Inhibitor of Cytokine Suppressive Binding Protein/p38 Kinase, in Animal Models of Arthritis, Bone Resorption, Endotoxin Shock and Immune Function, The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, 1996, 279,1453–61.
SB 203580 und andere kleine Molekülagentien reduzieren die Produktion von Entzündungscytokinen durch Inhibierung der Aktivität einer Serin/Threonin-Kinase-p38 (es ist zu erwähnen, daß andere Forscher dieses Enzym als CSBP bezeichnen) bei einem IC₅₀-Wert von 200 nM D. Griswold et al., Pharmacology of Cytokine Suppressive Anti-inflammatory Drug Binding Protein (CSPB), A Novel Stress-Induoed Kinase, Pharmacology Communications, 1996, 7, 323–29. Obwohl der genaue Mechanismus dieser Kinase nicht bekannt ist ist sie verwickelt worden in sowohl der Produktion von TNF-α und den Signal gebenden Reaktionen, die mit dem TNF-α-Rezeptor verbunden sind.
ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
Die neuen Verbindungen dieser Erfindung inhibieren die in vitro Aktivität von p-38 in dem nanomolaren Bereich Zusätzlich inhibieren die Verbindungen die in vitro-Sekretion von TNF-α, und IL-1β in dem nanomolaren Bereich Tiermodelle zeigen die Inhibierung von LPS-induziertem TNF-α, ebenso wie die Inhibierung von Rheumatoidarthritis. Mit diesem Aktivitätsbereich sind die Verbindungen der Erfindung geeignet bei der Behandlung einer Vielzahl von mit Cytokin zusammenhängenden Funktionsstörungen, einschließlich: Rheumatoidarthritis, entzündliche Darmerkrankung, septischer Schock, Osteoporose, Osteoarthritis, neuropathischer Schmerz, HIV-Replikation, HIV-Demenz virale Myokarditis, Insulin-abhängige Diabetes, Nicht-Insulinabhängige Diabetes, Peridontalerkrankung, Restenose, Alopezie areta, T-Zellenverarmung bei HIV-Infektion oder AIDS, Psoriasis, akute Pankreatitis, Allograft-Abstaßung, allergische Entzündung in der Lunge, Atherosklerose, Multiple Sklerose, Kachexie, Alzheimer-Erkrankung Schlaganfall Crohn-Erkrankung, entzündliche Darmerkankung, Ischämie, kongestiver Herzfehler, Lungenfibrose, Hepatitis, Glioblasbom, Guillain-BarreSyndrom und systemischer Lupus erythermatodes.
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der Formel I
wie sie in jedem der Ansprüche 1 bis 10 definiert sind solche Verbindungen zur Verwendung bei der Behandlung einer Cytokin-vermittelten Erkrankung, wie definiert in Anspruch 13, spezifische Zwischenprodukte, und ein Verfahren zur Herstellung bestimmter Verbindungen der Formel I, wie in jedem der Ansprüche 15 bis 18 definiert.
DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
Die Begriffe, die zur Beschreibung der Erfindung verwendet werden, werden gewöhnlicherweise verwendet und sind Fachleuten auf dem Gebiet bekannt Jedoch werden die Begriffe, die andere Bedeutungen halten könnten, definiert. Der Begriff "FCS" bezeichnet fetales Kalbsserum "TCA" bezeichnet Trichloressgsäure und "RPMP" bezeichnet das Medium aus dem Roswell Park Memoria Inst. (Sigma Katalog Nr. R0833). "Unabhängig" bedeutet, daß, wenn es mehr als einen Substituenten gibt, die Substituenten unterschiedlich sein können Der Begriff "Alkyl" bezieht sich auf gerade, cyclische und verzweigt-kettige Alkylgruppen, und "Alkoxy" bezieht sich auf O-Alkyl wo Alkyl wie oben definiert ist Der Begriff Heteroaryl bezieht sich auf einen aromatischen Ring aus sechs Gliedern, der bis zu drei Stickstoffatome als Heteroatome enthalten kann Beispiele solcher Heteroaryle schließen Pyridin-2-yl, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl, Pyrimidin-3-yl, Pyridazin und Triazin ein "SEM" bezieht sich auf 2-(Trimethylsilyl)ethoxymethyl) und "LDA" bezieht sich auf Lithiumdiisopropylamid. Das Symbol "Ph" bezieht sich auf Phenyl, "PHT" bezieht sich auf Phthalimido und das "Aryl" bezieht sich auf mono- und kondensierte aromatische Ringe, wie Phenyl und Naphthyl. Das Symbol C(C) stellt eine Ethinylen
Wenn er in dieser Erfindung verwendet wird, bezieht sich der Begririff "Cytokin" auf die Proteine TNF-α und IL-β. Mit Cytokin zusammenhängende Funktionsstörungen sind Erkankungen von Menschen und anderen Säugetieren, wo die Überproduktion von Cytokinen die Symptome der Erkrankung hervorruft. Die Überproduktion der Cytokine, TNF-α und IL-β ist mit einer Anzahl von Erkankungen verknüpft worden. Diese mit Cytokinen zusammenhängenden Funktiomsstörungen schließen ein, sind jedoch nicht begrenzt auf Rheumatoidarthritis, entzündliche Darmerkrankung septischer Schock, Osteoporose, Ostsoarthritis, neuropathischer Schmerz, HIV-Replikation, HIV-Demenz, virale Myocarditis, Insulin-abhängige Diabetes, Nicht Insulin abhängige Diabetes, peridontale Erkankung, Restenose, Alopezie areta, T-Zellenverarmung bei HIV-Infektion oder AIDS, Psoriasis, akute Pankreatitis, Allograft-Abstoßung, allergische Entzündung in der Lunge, Atherosklerose, Multiple Sklerose, Kachexie, Alzheimer-Erkankung, Schlaganfall, Crohn-Erkrankung entzündliche Darmerkrankung Ischämie, kongestiver Herzfehler, Lungenfibrose, Hepatitis, Glioblastom, Guillain-Barre-Syndrom und systemischer Lupus erythematodes. Der Begiff "wirksame Dosis" bezieht sich auf eine Menge einer Verbindung der Formel I welche die Menge an TNF-α und/oder IL-1β reduziert welche in einem Säugetier delektiert weiden kann, das unter einer mit Cytokin zusammenhängenden Funktionsstörung leidet Zusätzlich bezieht sich der Begriff "wirksame Dosis" auf eine Menge einer Verbindung der Formel I welche die Symptome einer mit Cytokin zusammenhängenden Funktionsstörung vermindert
Die Verbindungen der Erfindung können durch die folgenden Schematas hergestellt werden, wo einige Schematas mehr als eine Ausführungsform der Erfindung herstellen. In solchen Fällen ist die Wahl eines Schemas eine Ermessenssache, welche innerhalb der Fähigkeit von Fachleuten auf diesem Gebiet liegt Um die Verbindungen der Erfindung herzustellen, wo A Ethinylen ist, kann Schema 1 verwendet werden Das Ausgangsmaterial für das Schema ist ein 4,5-disubstitinertes Imidazol des Typs 1 a Substituierte Imidazole können unter Befolgung bekannter Vorgehensweisen hergestellt weiden, und die Substituenten R₁ und R₂ der Verbindungen der Erfindung werden durch die Substiuenten des Zwischenproduks 1a festgelegt Zwischenprodukt 1a wird mit einer Base, wie NaH, und einem inerten Lösungsmittel, wie DMF, bei Raumtemperatur für etwa 30 Minuten bis 1 Stunde behandelt Sobald die Anionenbildung vollständig ist, wird ein Alkylierungsagens, wie Phenethylchlorid, zugefügt, und die Reaktionsmischung wird bei etwa 60–100°C für etwa 2–4 Stunden gerührt, um Zwischenprodukte 1b₁ und 1b₂ zu ergeben. Diese Zwischenprodukte werden an dieser Stelle getrennt, um die Bildung von Endprodukten mit einem vorherrschenden Isomer zu ermöglichen. Obwohl die Endprodukte getrennt werden können, führt die Trennung von 1b₁ und 1b₂ zu höhren Produktausbeuten. Alternativ können Zwischenprodukte 1b₁ und 1b₂ hergestellt werden witer Verwendung der Verfahren, die in WO 96/21452, "Certain 1,4,5-Trisubstituted Imidazol Compounds Useful as Cytokine" beschrieben werden.
Zwischenprodukt 1b₂ wird mit einer starken Base, wie LDA, in einem inerten Lösungsmittel, wie THF, bei –78°C für etwa 30 Minuten behandelt Eine Quelle von Halogenatomen, wie Iod oder Brom, wird zu dem gebildeten Anion zugefügt, und diese Mischung kann auf Umgebungstemperatur über 30 Minuten bis 1 Stunde erwärmen, um Zwischenprodukt 1c zu ergeben, wo W Iod ist Die Behandlung von 1c mit einem Palladiumkupplungsagens, wie Bis(Acetatato)bis(triphenylphosphin)pelladium II, einer substituerten Ethinylverbindung, wie 3-Butin-1-ol, und einer organischen Base, wie Triethylamin, in einem inerten Lösungsmittel, wie Methylenchlorid, unter Rückfluß ergibt Verbindungen der Erfindung des Typs 1d Alternativ kann 1c mit anderen Palladiumkupplungsagentien behandelt werden. Die Agentien müssen Palladium-II-Arten sein und schließen ein, sind jedoch nicht begrenzt auf Bis(triphenylphosphin)palladiumdichlorid, Bis(acetonitril)chlornitropalladium(II), Bis(aceto-nitril)-dichlornitropalladium(II) und Bis(benzonitril)dilichlorpalladium(II). Zusätzlich können katalytische Mengen von Kupferkatalysatoren, wie Kupferiodid, augefügt werden, um die Geschwindigkeit der Reaktion zu steigern und/oder die Reaktionstemperatur von Rückfluß auf Raumtemperatur zu vermindem.
Obwohl Schema 1 verwendet wird, um eine Verbindung der Erfindung herzustellen, wo A Ethinylen ist, q 2 ist, X Hydroxy ist, R₁ 1,3-Pyrimidin-4-yl ist, R₂ 4-Chlorphenyl ist und R₃ Phenethyl ist, kann das Schema verwendet werden, um andere Produkte herzustellen Beispielsweise um R₃ zu variieren, kann das Alkylierungsagens durch entweder anderes Alkylierungsagens oder ein Acylierungsgens ersetzt werden. Um Verbindungen herzustellen, wo R₃ C_1-5Alkoxycarbonyl, Aryloxycabonyl, Aryl-C_1-5-alkoxycarbonyl, C_1-5-Alkylcarbonyl und Arylcarbonyl ist, ersetzt ein Acylierungsagens das Benzylchlorid in Schema 1. Beispielsweise um Verbindungen herzustellen, wo R₃ Benzoyl ist, ersetzt Benzoylchlorid Benzylchlorid Falls Verbindungen gewünscht weiden, wo R₃ substituiertes Aryl-C_1-5-alkyl, Amino-C_1-5-alkyl, substituertes Amino-C_1-5-alkyl und C_1-5-Alkyl ist, kann Benzylchiorid mit jeder Anzahl von Alkylierungsagentien ersetzt werden. Beispielsweise um Verbindungen herzustellen, wo R₃ substiuiertes Amino-C_1-5-alkyl ist, kann 1-Brom-3-dimethylaminopropan anstelle von Phenethylchlorid verwendet werden
Um X und q zu variieren, kann eine Vielzahl von bekannten substituierten Ethinylenverbindungen verwendet werden. Beispielsweise, wenn man 3-Butin-1-ol mit Propargyylchlorid ersetzt, können Verbindungen, wo q 1 ist und X Cl ist, hergestellt weiden. Verbindungen, wo q 0–9 ist und X C_1-5-Alkyl, substituiertes C_1-5- Alkyl, Phenyl, substituiertes Phenyl, Amino, C_1-5-Alkylamino, Nirtil, Vinyl, Ethinyl-Aryl-C_1-5-alkyl, Suocinimido, Phthalimidooxy und Halogen ist, können alle auf diese Art und Weise hergestellt werden.
Schema 1
Schema 2 kann verwendet werden, um Verbindungen der Erfindung herzustellen, wo A Vinylen ist Zwischenprodukt 1a ist das Ausgangsmaterial für dieses Schema und wird mit einer Base, wie NaH, und einem inerten Lösungsmittel, wie DMF, bei Raumtemperatur für etwa 30 Minuten bis 1 Stunde behandelt Sobald die Anionenbildung vollständig ist, wird 2-{Trimethylsilyl)ethoxymethylchlorid bei Raumtemperatur zugefügt und für etwa 3–5 Stunden gerührt, um Zwischenprodukte 2a₁ und 2a₂ zu ergeben. Wie in Schema 1 werden die Isomere an dieser Stelle getrennt. Zwischenprodukt 2a₂ wird mit einer starken Base, wie n- Butyllithium in einem inerten Lösungsmittel, wie THF, bei –78°C für etwa eine Stunde behandelt Eine Halogenquelle, wie Iod, wird zugefügt und die Mischung wird bei Umgebungstemperatur für etwa 1 Stunde gerührt, um Zwischenprodukt 2b zu ergeben. Die Behandlung von 2b mit einem Palladiumkupplungsagens, wie Bis(acerarato)bis(triphenylphosphin-palladium II, Trimethylsilylacetylen und Triethylamin bei etwa 70°C für 18 bis 24 Stunden ergibt Ethnyl-Zwischenprodukt 2c. Dieses Zwischenprodukt wird mit wäßriger HBr in einem alkoholischen Lösungsmittel, wie EtOH, unter Rückfluß für etwa 3–6 Stunden behandelt, um eine Verbindung der Formel 1 zu ergeben, wo A Vinyl ist und X Br ist.
Schema 2
Ein weiteres Verfahren zur Herstellung von Verbindungen, wo A Vinylen ist ist durch Schema 3 veranschaulicht Der Ausgangspunkt für dieses Schema ist die Behandlung von Zwischenprodukt 2a₂ mit einer Base, wie n BuLi, in einem inerten Lösungsmittel, wie THF, bei etwa –78°C unter einer inerten Atmosphäre für etwa 15–30 Minuten. DMF wird zugefügt, und diese Mischung wird bei Umgebungstemperatur für etwa 1–5 Stunden gerührt, um das Aldehydzwischenprodukt 3a zu ergeben Die Behandlung von 3a mit Wttig-Reagens, gebildet aus Triphenylphosphin und Kohlenstofftetrabromid, Triethylamin und einem inerten Lösungsmittel, wie Methylenchlorid, ergibt die Vinylverbindung 3b. Diese Verbindung kann mit einer väßrigen Säure, wie HCl, bei etwa Raumtemperatur über mehrere Stunden behandelt werden, um das 2-substitueite Derivat 3c zu
Aufgrund der Vielzahl bekannter Wittig-Reagentien können viele der Verbindung der Erfindung, wo A Vinyl ist, durch Schema 3 hergestellt werden. Beispielsweise um Verbindungen der Erfindung herzustellen, wo A Vinylen ist, q 1 ist und X Vinyl ist, ersetzt das Wittüg-Reagens, hergestellt aus Triphenylphosphin und Allylbromid, das Wittig-Reagens, das in Schema III verwendet wird Verbindungen, wo q 1–9 ist und X Ethinyl, Vinyl, substituiertes Vinyl, C_1–5-Alkyl, sulutituiertes C_1–5-Alkyl, Cycloalkyl, Phenyl, Ara-C_1–5-alkyl, C_1–5-Alkylamino und Nitril ist, können mit diesem Schema hergestellt werden.
Zusätzlich zu Verbindungen, wo A Vinylen ist, kann Schema 3 verwendet werden, um Verbindungen. herzustellen, wo A Ethinylen ist und X Hydroxy-substituiertes Arylalkyl ist Die Behandlung von 3c mit einer Base, wie n-BuLi, in einem inerten Lösungsmittel, wie THF, bei –78°C, gefolgt von einer Behandlung mit Benzaldehyd, ergibt das gewünschte Produkt 3d. Schema 3

R₅ Wasserstoff ist, kann Schema 4 verwendet werden. Die Behandlung von Zwischenprodukt 3a mit Hydroxylamin in einem inerten Lösungsmittel, wie MeOH, für etwa 3–6 Stunden bei Raumtemperatur ergibt Zwischenprodukt 4a. Die SEM-Gruppe von 4a kann durch Behandlung mit einer wäßrigen Säure und einem alkoholischen Lösungsmittel unter Rückfluß für etwa 4 Stunden entfernt werden, um das gewünschte Produkt 4b zu ergeben Um die Verbindungen der Erfindung herzustellen, wo R₅ C_1–5-Alkyl, Phenyl, Phenyl-C_1–5-alkyl ist, kann Hydroxylamin durch die bekannten, korrespondierenden O-substiuierten Hydroxylamine, wie O-Benzylhydroxylamin, ersetzt werden
Schema 4
Die Verbindung der Erfindung, wo X C_1–5-Alkylthio, substituiertes C_1–5-Alkylthio, C_1–5-Alkylsulfonyl, Phenylsulfonyl und substituiertes Phenylsulfonyl ist können durch Schema 5 hergestellt werden. Die Behandlung von 1c mit 5-Chlor-1-pentin und einem Palladiumkupplungsagens, wie zuvor beschrieben, ergibt Verbindung 5a Eine Ersetzung des Chlorids mit nukleophilen Agentien, wie 2-Mercaptoethanol, in einem inerten Lösungsmittel, wie Acetonitril, bei Raumtemperatur, ergibt das Thiol 5b. Die Behandlung von 5b mit wäßrigem Oxon und einem inerten Lösungsmitiel, wie MeOH, bei Umgebungstemperatrur über 3–6 Stunden ergibt die Sulfonverbindung 5c.
Schema 5
Um Verbindungen der Erfndung herzustellen, wo X C_1–5-Alkoxycarbonyloxy ist kann Verbindung 1d verwendet werden, wie durch Schema 6 veranschaulicht ist Die Behandlung von Verbindung 1d mit einem Acylierungsagens, wie Methylchlorformat, bei Raumtemperatur in einem inerten Lösungsmittel und einer milden Base ergibt Verbindung 6a. Dieses Verfahren kann verwendet werden, um Verbindungen der Erfindung herzustellen, wo X C_1–5-Alkylcarbonyloxy, Phenylcarbonyloxy, Phenyl-C_1–5-Alkylcarbonyloxy, Aminoarbonyloxy, C_1–5-Alkylaminocarbonyloxy, Di-C_1–5-alkylaminocarbonyloxy, C_1–5-Alkoxycarbonyloxy, substituiertes C_1–5-Akoxcycarbonyloxy, Phenoxycarbonyloxy und substituiertes Phenoxycarbonyloxy ist, durch Ersetzen von Methylchlorfomat durch bekannte Acylierungsagentien. Um beispielsweise Verbindungen herzustellen, wo X Methylaminocarbonyloxy ist, wird Methylchlorfomat durch Methylisocyanat ersetzt
Die Verbinndungen, wo X Halogen ist können synthetisiert werden unter Verwendung von 1d, wie durch Schema 6 veranschaulicht ist Die Behandlung von Verbindung 1d mit Triphenylphosphin und einer Halogenquelle, wie Kohlenstofftetrachlorid, bei Raumtemperatur, ergibt Verbindung 6b. Die Behandlung von 6b bei Raumtemperatur mit einem nukleophilen Agens, wie Diethylamin, ergibt Verbindung 6c.
Schema 6
Obwohl die beanspruchten Verbindungen als Inhibitoren von TNF-α und IL-1β geeignet sind, sind einige Verbindungen aktiver als andere und sind entweder bevorzugt oder besonders bevorzugt.
Die bevorzugten Verbindugen der Formel I schließen ein:
Die besonders bevorzugten "R₁" sind Phenyl oder substituiertes Phenyl, wo die Phenylsubstituenten Halogen oder Nitril sind.
Die besonders bevorzugten "R₂" sind Pyrid-4-yl, Pyrimidin-4-yl und 2-Butyl-pyridin-4-yl.
Die besonders bevorzugten "R₃" sind Wasserstoff, (CH₂)₃Ph und (CH₂)₃PHT.
Die besonders bevorzugten "A" sind Vinylen und Ethinylen
Die besonders bevorzugten "q" sind 0–6.
Die besonders bevorzugten "X" sind Wasserstoff, Hydroxyl, Chlor, Nitril, Cyclopentyl, C_1–5-Alkylcarbonyloxy, Phenylcarbonyloxy, Phenyl-C_1–5-alkylcarbonyloxy, Aminocarbonyloxy, C_1–5-Allcylaminocarbonyloxy und Di-C_1–5-alkylaminocarbonyloxy.
Verbindungen der Formel I könnnen in pharmazeutoschen Zusammensetzung verwendet werden, um Patienten (Menschen und andere Primaten) mit Funktionsstörungen zu behandeln, die mit der Überproduktion von Entzündungscytokinen, insbesondere TNF-α, verbunden sind. Der bevorzugte Weg ist eine orale Verabreichung, obwohl Verbindung durch intravenöse Infusion oder topische Verabreichung verabreicht werden können Orale Dosierungen reichen von etwa 0,05 bis 100 mg/kg pro Tag. Einige Verbindungen der Erfindung könnnen oral in dem Bereich von etwa 0,05 bis etwa 50 mg/kg pro Tag dosiert werden, während andere mit etwa 0,05 bis etwa 20 mg/kg pro Tag dosiert werden können Infusionsdosierungen können von etwa 1,0 bis 1,0 × 10^– ⁴ μg/kg/min Inhibitor, vermischt mit einem pharmazeutischen Träger, über eine Zeitdauer, die von mehreren Minuten bis zu mehreren Tagen reicht, reichen. Für eine topische Verabreichung können Verbindungen der Formel I mit einem pharmazeutischen Träger mit einer Konzentration von etwa 0,1 bis etwa 10% Arzneimittel pro Trägersubstanz vermischt werden.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen können hergestellt werden unter Verwendung von herkömmlichen pharmazeutischen Füllstoffen und Compoundierungsmethoden Orale Dosierungsformen können Elixiere, Sirupe, Kapseln, Tabletten und dergleichen sein. Wo der typische feste Träger eine inerte Substanz, wie Lactose, Stärke, Glucose, Methylcellulose, Magnesiumstearat, Dicalciumphosphat, Mannitol und dergleichen ist; und typische flüssige orale Füllstoffe Ethanol, Glycerol, Wasser und dergleichen einschließen Alle Füllstoffe können, wie erforderlich, mit Zerfallsmitteln, Streckmitteln, Granulierungsagentien, Schmiermitteln, Bindemitteln und dergleichen unter Verwendung herkömmlicher Methoden, die Fachleuten auf dem Gebiet zur Herstellung von Dosierungsformen bekannt sind, vermischt werden. Parenterale Dosierungsformen können hergestellt werden unter Verwendung von Wasser oder anderen sterilen Trägem
Typischerweise werden die Verbindungen der Formel I isoliert und als freie Basen, obwohl die Verbindungen isolert und als ihre pharmazeutisch annehmbaren Salze verwendet werden können. Beispiele solcher Salze schließen Bromwasserstoff-, Iodwasserstoff-, Chlorwasserstoff-, Perchlor-, Schwefel-, Malein-, Fumar-, Äpfel-, Wein-, Zitronen, Benzoe-, Mantel-, Methansulfon-, Hydroethansulfon-, Benzolsulfon, Oxal-, Pamoin-, 2-Naphthalensulfon, p-Toluolsulfon-, Cyclohexansulfamid- und Saccharin- ein
BIOLOGISCHE BELSPIELE
Die biologische Aktivität der Verbindungen der Erfindung wurde in in vitro- und in vivo-Untersuchungen demonstriert Wie zuvor diskutiert, inhibieren Agentien, welche die Aktivität des Enzyms p38 inhibieren, die Herstellung der Entzündungscytokine TNF-α und IL-1β. Verbindungen der Erfindung wurden bezüglich ihrer Fähigkeit die Aktivtät von p38 zu inhibieren, durch die folgende in vitro-Unteisuchung abgeschätzt.
Eine Lösung (38 μl) von gereinigtem rekombinanten p38 (wo die Menge an Enzym empirisch bestimmt wurde, betrachtend den linearen Bereich der Untersuchung und das annehmbare Sigrial-zu-Rausch-Verhältnis; 6xHis-p38, expressiert in E. coli), basischem Myelirrproteinsubstrat (ebenfalls empirisch bestimmt), einem Puffer von pH Wert 7,5 (Hepes : 25 mM, MgCl₂ : 10 mM MnCl₂ : 10 mM) wurde zu 92 Bohrungen einer 96 Rundbodenbolmmgen aufweisenden Polypropylenplatte zugefügt Die verbleibenden Bohrugen wurden zur Kontrolle ("CTRL") und Hintergrund ("BKG") verwendet Die CTRL wurde hergestellt mit dem Enzym, Substratpuffer und 2% DMSO, und die BKG wurde hergestellt mit Substratpuffer und 2% DMSO. Eine Lösung (12 μl) der Testuerbindung in DMSO (Verbindungen wurden auf 125 μM in 10% DMSO/H₂O vedünnt und bei 25 μM untersucht wo die endgültige DMSO-Konzentration 2% war) wurde zu den Testbohrungen zugefügt Die ATP/³³P-ATP-Lösung (10 μl: enthaltend 50 μM nichat-gelabeltes ATP und 1 μCi³³P-ATP) wurde zu allen Bohrrugen zugefügt, und die vervollständigten Platten wurden gemischt und bei 30°C für 30 Minuten inkubiert Eiskaltes 50% TCA/10 mM Natriumphosphat (60 μl) wurde zu jeder Bohrung zugefügt, und die Platten wurden auf Eis für 15 Minuten gehalten Die Inhalte jeder Bohrung wurden zu den Bohrungen einer 96 Bohrungen aufweisenden Filterplatte (Millipore, MultiScreen-DP) überführt, und die Filterplatte wurde auf einem Vakuumrohrverteiler angeordnet, ausgerüstet mit einer Abfallsammelschale. Die Bohrugen wurden fünfmal mit 10%TCA/10 mM Natriumphosphat (200 μl) unter Vakuum gewaschen. MicroScint-20 wurde zugefügt, die Platten wurden unter Verwendung von Topseal-S-Bögen versiegelt und in einem Packard TopCount Szintillationszähler unter Verwendung eines ³³P-Flüssigprogramms mit Farbquenchkorrektur gezählt, wo die Ausgabe ein Fartiquench-korrigiertes CPM ist Die %-Inhibierung der Testverbindung wurde durch die folgende Formel berechnet: %-Inhibierung = [1 – (Prob – BKG)/(CTKL – BKG)] ×100.
Obwohl Verbindungen anfänglich bei 20 μM getestet wurden, wenn gewährleistet, wurden die Verbindungen bei vierfachen Inkrementen über und unter dieser Konzentration getestet Zusätzlich wurden IC₅₀-Werte für einige Verbindungen unter Verwendung des Deltagraph 4-Parameterkurvenanpassungsprogramms berechnet.
Neben der Enzymuntersuchung wurden viele der Verbindungen der Erfindung in einer in vitro-Gesamtzelluntersuchung unter Verwendung von peripheren mononuklearen Blutzellen ("PBMC") getestet, welche aus menschlichem Blut wie folgt erhalten wurden Frisch erhaltenes Venenblut wurde antikoaguliert mit Heparin, mit einem gleichen Volumen an Phosphat-gepufferter Salzlösung ("PBS") verdünnt und in einem sterilen Röhrchen oder einem anderen Behälter angeordnet Aliquote (30 μl) dieser Mischung wurden in Zentrifugenröhrhen transferiert, welche mit Ficoll-Hypaque (15 ml) unterlegt waren Die hergestellten Röhrchen wurden bei 400 × g ohne Bremsen für 30 Minuten bei Raumtemperatur zentrifugiert Etwa 1/2 bis 2/3 der Plättchenschicht oberhalb der mononuklearen Zellbande wurden mit einer Pipette entfernt Die Mehrheit der mononuklearen Zellschicht wurde vorsichtig unter Verwendung einer Pipette entfernt, und diese PBMCs wurden mit PBS verdünnt und bei 600 × g für 15 Minuten gesponnen Die resultierenden PBMCs wurden mit einem anderen Teil PBS gewaschen und bei 400 × g in 10 Minuten bei Raumtemperatur gesponnen Die gewonnenen Plättchen wurden in Kultiumedium mit niedrigem Endotoxin RPMUI/1% FCS verdünnt und ergaben eine Zellkonzentration von 0,5 2,0 × 10⁶ PMBC/ml. Ein kleines Volumen der Suspension wurde zum Zählen an einem Hämocytometer entfernt, und die verbleibende Zubereitung wurde bei 200 × g für 15 Minuten bei Raumtemperatin zentrifugiert Die gewonnenen pellettesierten PMBCs wurden wieder in RPMUI/1% FCS auf eine Konzentration von 1,67 × 10⁶/ml suspendiert.
Um die Untersuchung durchzuführen, wurde die PBMC-Suspension (180 μl) zu Doppelbohrungen einer 96-Bohrungen-Mikrotiterplatte mit flachem Boden überführt und für 1 Stunde bei 37°C inkubiert. Eine Lösung der Testverbindung (10 μl: hergestellt bei 20 x der gewünschten Endkonzentration) wurde zu jeder Bohrung zugefügt, und die Platte wurde für eine Stunde bei 37°C inkubiert. Eine Lösung (10 μl) von LPS in RPMUI/1 FCS (200 ng/ml) wurde zugefügt, und die Bohrungen wurden über Nacht bei 37°C inkubiert Die überstehende Flüssigkeit (100 μl) wurde von jeder Bohrung entfernt und mit RPMUI/1% FCS (400 μl) verdünnt Die Proben winden für TNFßα, unter Verwendung eines kommerziellen ELISA-Kits (Genzyme) analysiert.
Die IL-1β-Aktivität ausgewählter Verbindung der Erfindung winde durch die folgende in vitro-Untersuchung bestimmt Kunststoff-haftfähige Zellen wurden aus PBMC hergestellt Kurz gesagt, wurden PBMCs zu den Bohrungen einer 96 Bohrungsplatte, wie oben, zugefügt, für 1 Stunde bei 37°C inkubiert, und die haftfähigen Zellen wurden hergestellt durch behutsames Resuspendieren der nicht haftfähigen Zellen mit einem Pipettor, Entfernen und Verwerfen derselben und behutsames Waschen der Bohrungen dreimal mit 200 μl Kulturmedium Zusätzliches Kulturmedium (180 μl) wurde zu den Bohrungen nach der letzten Wäsche zugefügt Verbindungszugabe, LPS-Stimulierung, Inkubation und Erhalt der übelstehenden Flüssigkeit waren wie für TNF-α. Übentehende Flüssigkeit wurde für Interleukin-1β unter Verwendung eines kommerziellen ELISA (Genzyme) ientersucht.
Verbindungen 4 und 36 inhibierten die Herstellung von IL-1β bei IC₅₀s von 7 bzw 13 nM
Die Fähigkeit der Verbindungen der Formel I, LPS-induzierte TNF-α-Herstellung zu inhibieren, wurde in den folgenden in vivo-Nagetieruntersuchungen demonstriert. Mäuse (BALB/cJ Weibchen, Jackson Laboratories) oder Ratten (Lewis-Männchen, Charles River) wurden für 30 Minuten vor einer oralen Dosierung mit 5–10 ml/kg Testverbindung bei 5–50 mg/kg gefastet 30 Minuten nach der Dosierung wurden die Tiere intraperitoneal mit LPS bei 1 mg/kg injiziert und zu ihren Käfigen für 1 Stunde zurückgebracht. Die Tiere wurden anästhesiert mit CO₂, durch Kardialpunktur ausgeblutet und das gesamte Blut gesammelt (0,1–0,7 mn). Das Blut konnte gerinnen, und Serum wurde zu einem Zentrifugenröhrchen überführt. Diese Probe wurde zentifugiert, Serum wurde gesammelt, aliquotiert und bei –80°C eingefroren Die Proben wurden durch kommerzielle ELI-SAs für TNF-α (Endogen für Mäuse-TNF-α, und Bioquelle für Ratten-TNF-α) getestet.
Zusätzlich zu ihrer in vivo-TNF-α-Aktivität inhibiert eine Verbindung der Formel I Polyarthritis wie folgt in einem in vivo-Rattenmodell. Am Tag 0 wurden männliche Lewis-Ratten subkutan in der Nähe der Basis ihres Schwer mit 100 μl einer 7,5 mg/ml Suspension von wärmeabgetötetem Mycobacterium butyricum in Mineralöl injiziert. Gruppen von Ratten wurden, einmal pro Tag oral von Tag 0 bis zum Ende des Experimentis mit HCl als eine Negativkontrolle, oder mit 20 oder 50 mg/kg Verbindung 4 dosiert. Als eine positive Kontrolle zur Inhibierung wurde eine Gruppe mit HCl an Tagen 0–9 und dann mit 20 mg/kg (oder 50 mg/kg) Cyclosporin (Cys) vom Tag 10 bis zum Fade des Experiments dosiert. Unterdiesen Bedingungen beginnt die Pfote der Tiere in der negativen Kontrolle an Tagen 11–12 zu schwellen Das Schwellvolumen beider Hinterpfoten wurde auf einem Quecksilberplesthysmographen an Tagen 8–10, abhängig von dem Experimen und wieder an Tagen 14,17 und entweder 19 oder 21 bestimmt. Die Daten wurden als die Steigerung der Pfotenvolumina, verglichen mit den Grundlinienmessungen der Tage 8–10, analysiert Die in vier Experimenten erhalten Daten sind in Tabelle A aufgeführt.
TABELLE A
Auswahlverbindung der Erfindung sind in Tabelle B aufgeführt Die meisten Verbindungen wurden bezüglich ihrer Fähigkeit getestet, p38 und TNF-α zu inhibieren, jedoch wurden einige Verbindungen in einer Untersuchung überprüft. Die IC₅₀-Werte für die Mehrzahl der Verbindungen sind aufgeführt, und falls diese Berechnung nicht verfügbar ist, ist die %-Inhibierung für eine gegebene Konzentration aufgeführt Zusätzlich zu den biologischen Daten sind die Syntheseschematas, die verwendet wurden, um die Verbindungen herzustellen, aufgeführt. Da Imidazole, welche an der 1-Position nicht substituiert sind, einer Tautomerisierung unterliegen, sind die Substituenten, die für R₁ und R₂ aufgeführt sind, austauschbar, wenn R₃ Wasselstoff ist. TABELLE B
Die in-vivo-Testergebnisse für Auswahlverbindungen der Erfindung sind in Tabelle C aufgeführt Die Verbindunge wurden bezüglich ihrer Fähigkeit getestet, TNF-α-Heistellung in Mäusen und/oder Ratten zu inhibieren, und die Daten sind als %-Inhibierung bei 25 mg/kg aufgeführt.
TABELLE C
PREPARATIVE BEISPIELE
Um die Erfindung zu veranschaulichen, sind die folgenden Beispiele eingeschlossen.
Diese Beispiele begrenzen nicht die Erfindung. Sie sind lediglich beabsichtigt, um ein Verfahren zum Durchführen der Erfindung vorzuschlagen Faachleute auf diesem Gebiet können andere Verfahren zur Durch führung der Erfindung finden, welche für diese offensichtlich sind Jedoch werden solche Verfahren als innerhalb des Umfangs der Erfindung liegend betrachtet
Beispiel 1
5(4)-(4-Fluorphenyl)-4(5)-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 1
Eine Lösung aus Selendioxid (4,82 g, 43,4 mmol) in H₂O (20 mn wurde zu einer Lösung von 1(4-Fluorphenyl)-2-(4-pyridyl)-2-ethanon (9,33 g, 43,4 mmol) in Dioxan (100 ml) zugefügt, und die resultierende Mischung wurde unter Rückfluß für 2 Stunden erwähnt Diese Mischung wurde in vacuo konzentriert, mit Ethylacetat pulverisiert und filtriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromaaogtaphie unter Verwendung von Ethylacetat/Hexan (1 : 1) als ein Eluierungsmitel gereinigt, um 1-(4-Fluorphenyl)2-(4-pyridyl)-1,2-ethandion zu ergeben Eine Mischung von Ammoniumacetat (25,25 g, 0,328 mol) und Hexamethylentetraamin (9,18 g 65,5 mmol) wurde zu einer Lösung des isolierte Dions, gelöst in Essigsäure (150 ml), zugefügt Diese Mischung wurde bei 80°C für 2 Stunden gerührt, in konzentriertes Ammoniumhydroxid (200 ml) gegossen, und der resultierende Niederschlag wurde filtriert, mit H₂O gewaschen und getroknet, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben Smp. 242–4,3°C; MS 240 (MH⁺).
Beispiel 2
4-(4-Fluorphenyl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 2a
5-(4-Fluorphenyl)-1-(3-phenylpropyl)-4-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 2b
60%iges Natriumhychid (1,32 g 33 mmol) wurde zu einer Mischung von Verbindung 1(7,15 g, 29,9 mmol) in DMF (70 ml) zugefügt und für 30 Minuten gerührt 3-Bromphenylpropan (5,05 ml, 33 mmol) wurde zugef ügt, und die Reaktionsmischung wurde unter N₂ bei 60°C für 2 Stunden gerührt. Die Mischung wurde in H₂O gegossen und mit mehreren Teilen Ethylacetat extrahiert Die vereinigte organische Schicht wurde mit H₂O gewaschen, in vacuo konzentriert und durch Säulenchromatographie auf Silicagel unter Verwendung von Ethylacetat als ein Eluierungsmittel gereinigt Vebindung 2a ist die polarere Verbindung und wurde als ein Feststoff isoliert: Smp. 70–74°C; MS 358 (MH⁺). Verbindung 2b war die weniger polare Verbindung und wurde als ein Feststoff isoliert: Smp. 107,5–112,5°C.
Beispiel 3
4-(4-Fluorphenyl)-2-iod-1-(3-henylpropyl)-5-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 3
2 M Lithiumdiisopropylamid/THF (17 ml) wurde zu einer Lösung von Verbindung 2a (9,69 g, 27,1 mmol) bei –78°C zugefügt, und diese Mischung wurde bei –78°C für 15 Minuten gerührt. Iod (10,0 g, 39,4 mmol) wurde zugefügt, und die resultierende Mischung konnte auf Umgebungstemperatur über 30 Minuten eiwärmen. Wäßriges Natriumsulfit und Ethylaoetat wurden zugefügt, und die organische Schicht wurde getrennt, mit Wasser gewaschen und in vacuo konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie auf Silicagel gereinigt und mit Ethylacetat : Hexan (1 : 1) eluiert, um Verbindung 3 als einen Feststoff zu ergeben Smp. 117–19°C; MS 484 (MH⁺).
Beispiel 4
4-(4-Fluarphenyl)-2-(4-hydroxybutin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 4
Triethylamin (80 ml), Bis(acetato)bis(triphenylphosphin)palladiun II (0,71 g, 0,95 mmol) und 3-Butin-1-ol(2,90 ml, 37,6 mmol) wurden zu einer Lösung von Verbindung 3 (9,10 g 18,8 mmol) in Methylenchlorid (40 ml) zugefügt Die Reaktionsmischung wurde unter Rückfluß für 4 Stunden gerührt, in vacuo konzentrieit und zwischen H₂O und Ethylacetat partitioniert Die organische Schicht wurde in vacuo konzentriert und durch Säulenchromatographie unter Verwendung von Ethylacetat als ein Eluierungsmittel gereinigt, um Verbindung 4 als einen Feststoff zu ergeben: Smp. 125–26,5°C; MS 426 (MH⁺).
Neben Verbindung 4 wurden zusätzliche Verbindungen der Formel I durch das Verfahren dieses Beispiels hergestellt Geeignet substituierte Ethinylderivate wurden anstelle von 3-Butin-ol verwendet, um die Verbindungen zu ergeben, die in Tabelle D mit ihren gefundenen Massenspektrumdaten aufgeführt sind
Tabelle D
Beispiel 5
4-(4-Fluorphenyl)-5-(4-pyridyl)-1-(2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl)-imidazol
Verbindung 5a
5-(4-Fuorphenyl)-4-(4-pyridyl)-1-(2-trimethylsilyl)ethoxymethyl)-imidazol
Verbindung 5b
60 %iges Natriumhydrid (0,92 g, 23 mml) wurde zu einer gerührten Lösiung von 5(4)-(4- Fluorphenyl)-4(5)-(4-pyridyl)-imidazol (5,50 g, 23 mmol) in DMF unter N₂ zugefügt 2-(Trimeihylsilyl)ethoxymethylchlorid (4,07 ml, 23 mmol) wurde nach 15 Minuten zugefügt, und die resultierende Mischung wurde für 3 Stunden gerührt, in H₂O gegossen, getrocknet (MgSO₄) und in vacuo konzentriert Das resultierende Öl wurde durch Säulenchromatogiaphie auf Silicagel unter Verwendung von Ethylacetat als ein Eluierungsmittel gereinigt Das erste Isomer kristallisierte, um Verbindung 5a zu ergeben: Smp. 111–13°C; MS 370 (MH⁺). Das zweite Isomer kristallisierte, um Verbindung 5b zu ergeben: Smp. 624°C; MS 370 (MH⁺).
Beispiel 6
5-(4-Fluorphenyl)-2-iod-4-(4-pyridyl0-1-(2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl)-imidazol
Verbindung 6
2 N n-Butyllithium/THF (3,2 ml) wurde zu einer gerührten Lösung von Verbindung 5b (2,35 g 6,40 mmol) in Ether (150 ml) bei –78°C zugefügt. Nach einer Stunde wurde Iod (2,16 g, 8,50 mmol) zugefügt, und die resultierende Mischung wurde bei Umgebungstemperatur für 1 Stunde gerührt. Wäßriges Natriumsulfit (100 ml) wurde zugefügt, und die resultierende organische Schicht wurde mit H₂O gewaschen, getrocklmet (MgSO₄) und durch Säulenchromatographie gereinigt, um Verbindung 6 als ein Öl zu ergeben MS 496 (MH⁺).
Beispiel 7
5-(4-Fluorphenyl)-4-(4-Pyridyl)-2-(trimethylsilyl)ethinyl-1-(2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl)-imidazol
Verbindung 7
Trimetliylsilylacetylen (0,31 ml), Bis(acetato)bis(triphenylphospin)palladium (II) (5 mol-%) wurden zu einer Lösung von Vebindung 2 (0,60 g 1,20 mmol) in Triedrylamin (15 ml) zugefügt, und die resultierende Mischung wurde bei 70°C für 18 Stunden gerührt. Die resultierende Mischung wurde auf Raumtemperatur gekühlt, und das Feststofffiltrat wurde isoliert. Dieser Feststoff wurde mit Triethylamin gewaschen, und die vereinigten organischen Schichten wurden in vacuo konzentriert Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie unter Vewendung von Ethylacerat : Hexan (1 : 1) als ein Eluierungsmittel gereinigt, um Verbindung 7 als einen Feststoff zu ergeben: Smp. 128,3–129°C; MS 466 (MH⁺).
Beispiel 8
2-(2-Chlorvinyl)-5-(4-fluorphenyl)-4-(4-pyridyl)-imidazol
Verbindung 8
3 N HCl wurde zu einer Lösung von Verbindung 7 in Ethanol zugefügt, und die Mischung wurde unter Rückfluß für 5 Stunden erwärmt Das resultierende Reaktionsgebräu wurde in vacuo konzentriet, mit Natriumbicarbonat neutralisiert und mit Ethylacetat extrahiert Die organische Schicht winde in vacuo konzentriert und durch Säulenchromatographie unter Verwendung von Ethylacetat als ein Eluierungsmittel gereinigt, um Verbindung 8 als einen Feststoff zu ergeben: Smp. 185–87°C; MS 300 (MH⁺).
Beispiel 9
5-(4-Fluorphenyl)-4-(4-pyridyl)-1-(2-trimethylsilyl)ethoxymethyl)-imidazol-2-carboxcaldehyd
Verbindung 9
1,6 N n-BuLi (13 ml, 21 mmol) wurden zu einte gerührten Lösung von Vebindung 5b (7,10 8,19,2 mmol) in THF bei –78°C zugef ügt Nach 15 Minuten wurde DMF (2,0 ml, 26 mmol) zugefügt, und die Mischung wurde bei Umgebungstempeatur für 1 Stunde gerührt und mit Wasser gequencht Diese Mischung wurde mit Ethylacetat extrahiert, und die vereinigten organischen Extrakte wurden in vacuo konzentrieit. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatogiaphie auf Silicagel unter Verwendung von Ethylaceat : Hexanen (1 : 1) gereinigt, um Verbidung 9 als einen Feststoff zu ergeben: Smp. 425°C; MS 398 (MH⁺).
Beispiel 10
2-[2,2-Dibromethylen-1-yl]-5-(4-fluorphenyl)-4-(4-pyridyl)-1-(2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl)imidazol
Verbindung 10
Triphenylphosphin (13,40 g 51,1 mmol) wurde in Methylenchlorid (300 ml) gelöst und auf 10°C gekühlt Eine Lösung von Kohlenstofftetrabromid (8,50 g 25,6 mmol) wurde tropfenweise zugefügt, gefolgt von einer Lösung von Verbindung 9 (6,85 g 17,2 mmol) und Triahylamin (2,79 ml, 20 mmol) in Methylenchlorid Diese Mischung wurde für 30 Minuten gerührt, in Ether (500 ml) gegossen und filtriert Das Filtrat wurde in vacuo konzentriert durch Säulenchromatographie auf Silcagel unter Verwendung von Ethylacetat : Hexan (1 : 1) als ein Eluirungsmittel gereinigt; um Verbindung 10 als einen Feststoff zu ergeben: Smp. 128–31°C; MS 554 (MH⁺).
Beispiel 11
5(4)-(4-Fluorphenyl)-2-(3-hydroxy-3-phenyl-propin-1-yl)-4(5)-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 11
1,6 N n-Butyllithium (5,0 ml, 8,0 mmol) winde zu einer gerührten Lösung von Verbindung 10 (2,20 g, 3,80 mmol) in 1 THF (50 ml) bei –78°C zugefügt. Nach 30 Minuten wurde Benzaldehyd (0,40 ml, 3,94 mmol) zugefügt, und die Mischung konnte bei Umgebungstemperatur für 30 Minuten rühren. Wasser wurde zugefügt, und die restiltierende organische Schicht wurde in vacuo konzentriert und in MeOH (20 ml) und 1 N HCl (20 ml) gelöst Diese Mischung wurde für 2 Stunden bei 50°C gerührt, und die resialtierende Misikung winde mit Natriumbicabonat neutralisieit und mit Ethylacerat extrahiert Die vereinigte organische Schicht wurde getrocknet (MgSO₄) und auf Silicagel unter Verwendung von Ethylacetat als ein Eluierungsmittel gereinigt, um Verbindung 11 als einen Feststoff zu ergeben Smp. 193–94°C; MS 370 (MH⁺).
Verbindung 12
5-(4-Fluorphenyl)-4-(4-pyridyl)-1-(2-trimethylsilyl)ethoxymethyl)-2-oximinoimidazol
Verwendung 12
Eine Lösung von Hydroxylaminhydroghlorid (0,09 g 1,3 mmol), Natriumbicarbonat (0,11 g 1,3 mmol) und H₂O (5 ml) wurde zu einer gerührten Lösung von Verbindung 9 (0,50 g, 1,2 mmol) in MeOH (5 ml) bei Raumtemperatur zugefügt Diese Mischung wurde für 3 Stunden gerührt und in H₂O gegossen. Der feste Niederschlag winde filtriert und in vacuo getroknet, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben Smp. 212–13°C; MS 413 (MH⁺).
Beispiel 13
5-(4-(Fluorphenyl)-4-(4-pyridyl)-2-imidazoloxim
Verbindung 13
0,5 M HCl (3 ml) wurde zu einer Lösung von Verbindung 12 in MeOH (5 ml) zugefügt. Diese Mischung wurde unter Rückfluß für 2 Stunden erwärmt, mit Natriumbicarbonat neutralisieit, und der resultierende Niederschlag wurde filtriert. Dieser Feststoff wurde aus MeOH/H₂O kristallisiert, um die Trielverbindung als einen Feststoff zu ergeben: Smp. 318–20°C; MS 283 (MH⁺).
Beispiel 14
2-(5-Chlorpentin-1-yl)-4-(4-fluorphenyl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridyl)imidazol Verbindung 14 Triethylamin (50 ml) Bis(aceto)bis(hiphenylposphin)palladium II (0,71 g, 0,95 mmol) und 5-Chlor-1-pentin (0,71 ml, 6,70 mmol) und Verbindung 3 (1,62, g, 3,35 mmol) wurden unter Rückfluß für 16 Stunden gerührt. Ethylacetat wurde zugefügt, und die festen Niederschläge wurden durch Filtration entfern. Die Filtratschicht wurde in vacuo konzentriert und durch Säulenchromatographie unter Verwendung von Ethylaceat Hexan (12) als ein Eluierungsmittel gereinigt, um Verbindung 14 als einen Feststoff zu ergeben: Smp. 102– 104°C.
Beispiel 15
4-(4-Fluorphenyl)-2-(4-N-phenylcarbamoyloxybutin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 15
Phenyl (11 ml, 1,0 mmol) wurde zu einer gerührten Lösung von Verbindung 4 (200 mg 0,50 mmol) in Pyridin zugefügt Die Mischung wurde für 4 Stunden gerührt und auf Eis gegossen. Der feste Niederschlag wurde mit Wasser gewaschen und getrocknet um Verbindung 15 als einen Feststoff zu ergeben Smp. 120–24°C.
Beispiel 16
2-(4-Chlorbutin-1-yl)-4-(4-fluorphenyl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 16
Triphenylphosphin (1,11 g 4,23 mmol) und Kohlenstofftetrachlorid (0,41 ml, 4,23 mmol) wurden zu einer Lösung von Verbindung 4 (0,9 g 2,12 mmol) bei Raumtemperatatur zugefügt Die Mischung wurde für 22 Stunden gerührt, in vacuo konzentriert und durch Säulenchromatogiaphie unter Verwendung von Ethylacetat : Hexan (1 : 1) als Eluierungsmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergeben Smp. 132– 34°C.
Beispiel 17
2-(4-Dimethylaminobutin-1-yl)-4-(4-fluorphenyl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridyl)imidazol
Verbindung 17
Eine Lösung von Verbindung 16 (208 mg, 0,47 mmol) in 2 N Dimethylamin/MeOH (10 ml) wurde für 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und in vacuo konzentriert. Der Rückstand wurde ducrh Säulen chromatographie unter Verwendung von Methylenchlorid : MeOH (19 : 1) als ein Eluienmgmittel gereinigt, um die Titelverbindung als einen Feststoff zu ergebenÖ Smp.115-17°C.

Claims

Verbindung der Formel I
wo R₁ Phenyl, substituiertes Phenyl (wobei jeder Substituent C_1–5-alkyl, Halogen, Nitro Trifluormethyl oder Nitril) oder Heteroaryl bedeutet wobei das Heteroaryl 6 Ringatome enthält und bis zu drei Stickstoffatome als Heteroatome enthält R₂ Phenyl, substitiuertes Phenyl (wobei jeder Substituent C_1–5-alkyl, Halogen, Nitro, Trifluormethyl oder Nitrit bedeutet), Heteroaryl bedeutet, wobei das Heteroaryl 6 Ringatome enthält und bis zu drei Stickstoffatome als Heterotome enthält und optional C_1–4-alkyl substitituiert ist; R₃ Wasserstoff, SEM, C_1–5-Alkoxycarbonyl, Aryloxycarbonyl, Aryl-C_1–5-alkyloxycarbonyl, Aryl-C_1–5alkyl, stabstituiertes Aryl-C_1–5-alkyl (wobei jeder Aryl-Substituent unabhängig C_1–5-alkyl, C_1–5-alkoxy, Halogen, C_1–5-alkylamin oder DiCi_1–5-alkylamin bedeutet) Phthalimido-C_1–5-alkyl, Amino-C_1–5-alkyl, Diamino-C_1–5-alkyl, Succinimido-C_1–5-alkyl, C_1–5-alkylcarbonyl, Arylcarbonyl, C_1–5-alkylcarbonyl-C-_1–5-alkyl, Aryloxycarbonyl-C_1–5-alkyl oder Heteroaryl-C_1–5-alkyl ist, wobei das Heteroaryl 6 Ringatome enthält und bis zu drei Stickstoffatome als Heteroatome enthält; R₄(a)-(CH₂)_q-X bedeutet; A Vinylen oder Ethinylen oder
R₅ Wasserstoff, C_1–5-alkyl, Phenyl oder Phenyl-C_1–5-alkyl bedeutet; q 0–9 ist; X Wasserstoff Hydroxy, Vinyl, substitituiertes Vinyl (wobei jeder Substituent Fluor, Brom, Chlor oder Iod ist) Ethinyl, substituites Ethinyl (wobei jeder Substituent Fluor, Brom, Chlor oder Iod ist), C_1–5-alky(substituiertes C_1–5-alkyl (wobei jeder Alkylsubstituent C_1–5-alkoxy, Trihalo-C_1–5-alkyl, Phthalimid oder Amin ist), C_3– ₇-cycloalkyl, C_1–5-alkoxy, substitiuertes C_1–5-alkoxy (wobei jeder Alkylsubstituent Phthalimid oder Amin ist), Phtalimidooxy, Phenoxy, substituiertes Phenoxy (wobei jeder Phenylsubstituent C_1–5-alkyl, Halogen oder C_1–5alkoxy ist), Phenyl, subistituiertes Phenyl (wobei jeder Phenylsubstituent C_1–5-alkyl, Halogen oder C_1–5-alkoxy ist), Aryl-C_1–5-alkyl, substituiertes Aryl-C_1–5-alkyl, (wobei jeder Arylsubstituent C_1–5-alkyl, Halogen oder C_1–5-alkoxy ist), Arylhydroxy-C_1–5-alkylamin, C_1–5-alktlamin Di-C_1–5-alkylamin, Nitril, Oxim, Benzyloxyimin, C_1–5- alkyloxyimin, Phtlialimid, Sucinimid, C_1–5-alkylcarbonyloxy, Phenylcarbonyloxy, subtituiertes Phenylcarbonyloxy (wobei jeder Phenylsubtituent C_1–5-alkyl, Halogen oder C_1–5-alkoxy ist), Phenyl-C_1–5-alkylcarbonyloxy (wobei jeder Phenylsubstituent C_1–5-alkyl, Halogen oder C_1–5-alkoxy ist), Aminocarbonyloxy, C_1–5-alkylaminocarbonyloxy, Di-C_1–5-alkylaminocarbonyloxy, C_1–5-alkoxycarbonyloxy, substituiertes C_1–5-alkoxycarbonyloxy (wobei jeder Alkylsubstituent Methyl, Ethyl, Isopropyl oder Hexyl ist)Phenoxycarbonyloxy, substituiertes Phenoxycarbonyloxy (wobei jeder Phenylsubstituent C_1–5-alkyl, C_1–5-alkoxy oder Halogen ist), C_1–5-alkylthio, substituiertes C_1–5-alkylthio (wobei jeder Alkylsubstituent Hydroxy oder Phthalimid ist), C_1–5-alkylssulfonyl, Phenylsulfonyl, substituiertes Phenylsulfonyl (wobei jeder Phenylsubstituent Brom, Fluor, Chlor, C_1–5-alkoxy oder Trifluormethyl ist); Mit der Maßgabe: daß, wenn A
ist q 0 ist und X H ist und R₃ nicht SEM bedeutet; und pharmazutisch annehmbare Salze davon.
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R, mit Phenyl substituiert ist und R₂ Pyridin-2-yl, Pyridin-3-yl, Pyridin-4-yl, Pyrimidin-3-yl, Pyridazin oder Triazin badeutet.
Verbindung nach Anspruch 2, wobei R₁ 4-Fluorphenyl bedeutet und R₂ Pyridin-4-yl bedeutet.
Verbindung nach Anspruch 3, wobei R₃ Wasserstoff, Aryl-C_1–5-alkyl oder substituiertes Aryl-C_1–5-alkyl bedeutet
Verbindung nach Anspruch 4, wobei R₃ Wasserstoff oder Phenyl-C_1–5-alkyl bedeutet
Verbindung nach Anspruch 5, wobei A Ethinylen bedeutet und g 0–5 ist
Verbindung nach Anspruch 6, wobei X Succinimid, Hydroxy, Methyl, Phenyl, C_1–5-alkylsulfonyl, C_3–6-cycloalkyl, C_1–5-alkylcarbonyloxy, C_1–5-alkoxy, Phenylcarbonyloxy, C_1–5-alkylamin, Di-C_1–5-alkylamin. oder Nitril bedeutet
Verbindung nach Anspruch 1, wobei R₁ Phenyl bedeutet und R₂ 3-Pyrimidinyl bedeutet
Verbindung nach Anspruch 8, wobei R₂3-Pyrimidinyl bedeutet
Verbindung nach Anspruch 1, die 4-(4-Fluorphenyl)-2-(4-hydroxybutin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4 pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(3-hydroxypropin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(5-hydroxypentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(3-hydroxyhexin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(3-cyanopentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(4-dimethylaminobutin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(4-(phenylcarbonyloxy)butin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(4-(methylcarbonyl)butin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(3-cyclopentylpropin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(5-9butylsulfonyl)pentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(octin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(5-butylthiopentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(5-phenylpentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(5-chlorpentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(5-hydroxypentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-(pentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; oder 4-(4-Fluorphenyl)-2-(5-N-succinimidopentin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol ist
Verbindung nach Anspruch 1, die 4-(4-Fluorphenyl)-2-(4-hydroxybutin-1-yl)-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol oder ein pharmazeutisch annehmbares Salz davon ist
Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend eine Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 11 und ein pharmazetisch annehmbaren Träger oder ein Verfünnungsmittel.
Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 11 oder Zusammensetzung nach Anspruch 12 für die Verwendung in der Behandlung einer Cytokin-vermittelten Erkrankung wie Arthritis, beispielsweise durch die orale Verabreichung einer wirksamen Dosis von täglich 0,1–100 mg/kg vorzugsweise täglich 0,1–50 mg/kg.
4-(4-Fluorphenyl)-2-iod-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; 4-(4-Fluorphenyl)-2-brom-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol; oder 4-(4-Fluorphenyl)-2-chlor-1-(3-phenylpropyl)-5-(4-pyridinyl)imidazol.
Verfahren zur Herstellung bestimmter Verbindungen der Formel (wie in Anspruch 1 definiert, in den A Ethinylen badeutet, das: In-Kontakt bringen einer Verbindung der Formel II
wobei R₁, R₂ und R₃ wie in Anspruch 1 definiert sind und R₆ Iod, Chlor oder Brom ist mit einer Verbndung der Formel N C(C)-(CH₂)_q-X IV,wobei C(C) eine Ethinylen-Gruppe darstellt, q 0–9 ist und X Wasserstoff bedeutet, C_1–5-alkyl, substituiertes C_1–5-alky( Hydroxy, Phenyl, subtituiertes Phenyl, Amin, C_1–5-alkylamin, Nitril, Vinyl, Ethynyl, Aryl-C_1–5-alkyl, Suoccinimid, Phthalimidoxy oder Halogen bedeutet, in der Gegenwart eines Palladiun-Kopplungsmittels, einer organischen Base und eines geeigneten Lösungsmittels unter Reaktionsbedingungen, die die Herstellung einer Verbindung der Formel I erlaubt, umfaßt
Verfahren nach Anspruch 15, wobei das Palladium Kopplungsmittel Bis(aoeto)bis(triphenylphosphin)alladium (II), Bis(triphenylphosphin)palladiumdichlorid, Bis(acetonitril)chlomitropalladium (II), Bis(acetonitril)dichlornitropalladium (In oder Bis(benzonitril)dichlorpalladium (II) ist
Verfahren nach Anspruch 15 oder 16, wobei die organische Base Triethylamin ist
Verfahren nach einem der Ansprüche 15 bis 17, wobei das geeignete Lösungmittel Methylenchlorid ist und die Reaktionsbedingungen Rückflußerhitzen des Methylenchlorids sind.