DE69516540T2

DE69516540T2 - AMINO-IMIDAZO [4,5-c] CHINOLINE

Info

Publication number: DE69516540T2
Application number: DE69516540T
Authority: DE
Inventors: J. Lindstrom
Original assignee: Minnesota Mining and Manufacturing Co
Current assignee: 3M Co
Priority date: 1995-01-12
Filing date: 1995-12-06
Publication date: 2000-08-10
Anticipated expiration: 2015-12-07
Also published as: PT802913E; AU692033B2; FI113866B; CA2209487C; DK0802913T3; SK87297A3; SK282145B6; KR100404166B1; CZ220497A3; IL116566A0; NZ298296A; MX9705283A; DE69516540D1; ZA96101B; CN1066447C; US5482936A; CN1173178A; WO1996021663A1; CA2209487A1; NO972801D0

Description

Diese Erfindung betrifft Amino-Imidazo[4,5-c]Chinolinverbindungen. In einem anderen Gesichtspunkt betrifft diese Erfindung Immunmodulatorverbindungen. In anderen Gesichtspunkten betrifft diese Erfindung Arzneimittel, die solche Verbindungen enthalten, und pharmakologische Verfahren zum Verwenden solcher Verbindungen.
Bestimmte 1H-Imidazo[4,5-c]chinolin-4-amine sind als antivirale Mittel und/oder Immunmodulatoren bekannt. Solche Verbindungen sind z. B. in US Pat. Nr. 4,689,338, 4,929,624, 5,037,986, 5,266,575, 5,268,376, 5,346,905, EP-A-0 385 630 und WO92/15582 (alle von Gerster et al.) offenbart. Die gemeinsam übertragene, gleichzeitig anhängige Anmeldung 08/092 002 (Lindstrom et al.) offenbart Immunmodulator-Imidazopyridinamine der Formel
in der R&sub1; aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus einem Wasserstoffatom; CHRxRy, wobei Rx ein Wasserstoffatom ist, und Ry aus der Gruppe ausgewählt ist, die aus einem geradkettigen, verzweigten oder zyklischen Alkylrest, enthaltend 1 bis etwa 10 Kohlenstoffatome, einem geradkettigen oder verzweigten Alkenylrest, enthaltend 2 bis etwa 10 Kohlenstoffatome, einem geradkettigen oder verzweigten Hydroxyalkylrest, enthaltend 1 bis etwa 6 Kohlenstoffatome, einem Alkoxyalkylrest, wobei die Alkoxyeinheit 1 bis etwa 4 Kohlenstoffatome und die Alkyleinheit 1 bis etwa 6 Kohlenstoffatome enthält, und einer Phenylethylgruppe besteht; und -CH=CRzRz, wobei jedes Rz unabhängig voneinander ein geradkettiger, verzweigter oder zyklischer Alkylrest mit 1 bis etwa 6 Kohlenstoffatomen ist, besteht.
US-A-5 352 784 (Nickolaides et al.) offenbart Immunmodulator-[6,7-c]-Cycloalkylimidazopyridinamine.
1H-Imidazo[4,5-c]chinolin-4-amine sind Verbindungen der allgemeinen Gerüstformel I mit dem gezeigten Nummerierungssystem:
Diese Erfindung stellt Verbindungen und pharmazeutisch verträgliche Salze davon bereit, die sich formal durch Überbrücken der 1- und 2-Positionen von 1H-Imidazo[4,5-c]- chinolin-4-aminen ableiten. Insbesondere stellt diese Erfindung Verbindungen der Formel II bereit
wobei R, Z und q die nachstehend im Einzelnen angegebene Bedeutung haben, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.
Diese Erfindung stellt auch eine pharmazeutische Formulierung bereit, die (i) eine Verbindung der Formel II in einer Menge, die die Interferonbiosynthese in Tieren wirksam induziert, und (ii) eine pharmazeutisch verträgliche Trägersubstanz umfaßt. Diese Erfindung stellt ferner die Verwendung einer Verbindung der Formel II in einer wirksamen Menge für die Herstellung eines Arzneimittels zur Induktion der Interferonbiosynthese in Tieren bereit.
Diese Erfindung stellt Verbindungen der Formel II bereit, wobei Z aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus:
-(CH&sub2;)n-, wobei n 1 bis 4 ist;
-(CH&sub2;)a-C(R&sub1;R&sub2;)(CH&sub2;)b-, wobei a und b ganze Zahlen sind und a + b 0 bis 3 ist, R&sub1; ein Wasserstoffatom oder ein Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist, und R&sub2; aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einem Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einer Hydroxygruppe, einem Rest -OR&sub3;, wobei R&sub3; einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, und einem Rest -NR&sub4;R4', worin R&sub4; und R4' voneinander unabhängig ein Wasserstoffatom oder einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellen;
-(CH&sub2;)a-(Y)-(CH&sub2;)b-, wobei a und b ganze Zahlen sind, und a + b 0 bis 3 ist, und Y ein Sauerstoff- oder Schwefelatom oder ein Rest -NR&sub5; ist, worin R&sub5; ein Wasserstoffatom oder einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt;
und wobei q 0 oder 1 ist, und R aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einem Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einem Alkoxyrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und einem Halogenatom, und pharmazeutisch verträgliche Salze davon.
Wenn Z die vorstehend angegebene Bedeutung -(CH&sub2;)n- hat, stellt es vorzugsweise einen Alkylenrest mit 1, 2 oder 3 Kohlenstoffatomen dar. Wenn Z die vorstehend angegebene Bedeutung -(CH&sub2;)a-C(R&sub1;R&sub2;)(CH&sub2;)b- hat, stellt R&sub1; vorzugsweise ein Wasserstoffatom und R&sub2; vorzugsweise einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, besonders bevorzugt eine Methylgruppe, dar. Wenn Z die vorstehend angegebene Bedeutung -(CH&sub2;)a-(Y)-(CH&sub2;)b- hat, stellt Y vorzugsweise ein Sauerstoffatom dar, und wenn Y ein Sauerstoffatom darstellt, ist a + b vorzugsweise 1.
Zu bevorzugten Verbindungen der Erfindung gehören:
8,9,10,11-Tetrahydropyrido[1',2':1,2]imidazo [4,5-c]chinolin-6-amin, d. h.
10-Methyl-8,9,10,11-tetrahydropyrido[1',2':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin, d. h.
8H-9,10,11,12-Tetrahydrohexamethylen-imino[1',2':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin, d. h.
9,10-Dihydro-8H-pyrrolo[1',2':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin, d. h.
und 10,11-Dihydro-8H-[1,4]-oxazino[4',3':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin, d. h.
Das Reaktionsschema I veranschaulicht die Herstellung der Verbindungen der Erfindung. Die unsubstituierte Verbindung der Formel XI ist eine bekannte, im Handel erhältliche Verbindung, und andere Verbindungen der Formel XI können durch Verfahren hergestellt werden, die dem Fachmann bekannt sind und offenbart wurden, z. B. in Kohler, Chem. Ber. 60 (1927), 1108 und Kappe, J. Heterocyclic Chem. 25 (1988), 857.
In Schritt (i) wird zuerst 3-Nitrochinolin-2,4-disulfonat durch Umsetzen von 2,4-Dihydroxy-3-nitrochinolin mit Sulfonylhalogenid, oder vorzugsweise Sulfonsäureanhydrid, hergestellt. Zu geeigneten Sulfonylhalogeniden gehören Alkylsulfonylhalogenide, wie Methansulfonylchlorid und Trifluormethansulfonylchlorid, und Arylsulfonylhalogenide, wie Benzolsulfonylchlorid, p-Brombenzolsulfonylchlorid und p- Toluolsulfonylchlorid. Zu geeigneten Sulfonsäureanhydriden gehören die, die den vorstehend erwähnten Sulfonylhalogeniden entsprechen. Ein besonders bevorzugtes Sulfonsäureanhydrid ist Trifluormethansulfonsäureanhydrid. REAKTIONSSCHEMA I
Die Reaktionsbedingungen schließen vorzugsweise zuerst das Vereinigen einer Verbindung der Formel XI mit einer Base, vorzugsweise einem Überschuß einer Tertiäraminbase (z. B. einer Trialkylaminbase, wie Triethylamin) und vorzugsweise in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Dichlormethan, und dann Hinzufügen des Sulfonylhalogenids oder des Sulfonsäureanhydrids ein. Das Hinzufügen wird vorzugsweise in regulierter Art und Weise (z. B. tropfenweise) und bei herabgesetzter Temperatur (z. B. bei etwa 0ºC) durchgeführt.
1 Das Disulfonat wird dann mit tert-Butylamin, vorzugsweise in Gegenwart eines Überschusses einer Tertiäraminbase in einem Lösungsmittel, wie Dichlormethan, umgesetzt, was eine Verbindung der Formel XII liefert. Die Umsetzung kann durch Hinzufügen der Tertiäraminbase zum Reaktionsgemisch, das aus dem ersten Teil von Schritt (i) erhalten wurde, Kühlen auf eine herabgesetzte Temperatur (z. B. 0ºC) und Hinzufügen des tert- Butylamins in regulierter Art und Weise (z. B. tropfenweise) durchgeführt werden. Die Umsetzung kann auch durch Hinzufügen des tert-Butylamins zu einer Lösung des Disulfonats und einer Tertiäraminbase in einem Lösungsmittel, wie Dichlormethan, durchgeführt werden. Die Umsetzung kann bei relativ niedrigen Temperaturen, z. B. bei etwa 0ºC, ablaufen, um die Menge unerwünschter 2-aminierter und 2,4-diaminierter Nebenprodukte zu verringern. Es ist manchmal erforderlich oder wünschenswert, das Reaktionsgemisch nach dem Hinzufügen zu erwärmen, um die Reaktion zu vervollständigen.
In Schritt (ii) wird die Verbindung der Formel XII mit Dibenzylamin umgesetzt. Die Umsetzung kann durch Einbringen des Ausgangsmaterials und des Dibenzylamins in ein inertes Lösungsmittel, wie Benzol, Toluol oder Xylol, und Erwärmen auf eine Temperatur und für einen Zeitraum, die das Ersetzen der Sulfonatgruppe durch Dibenzylamin wirksam bewirken, wobei Temperatur und Zeit durch den Fachmann leicht ausgewählt werden, durchgeführt werden. Dann wird die tert-Butylgruppe durch Erwärmen in einem polaren Lösungsmittel, wie Methanol, in Gegenwart einer Säure, wie Salzsäure entfernt.
Dann wird die Nitrogruppe zu einer Aminogruppe reduziert. Verfahren für solch eine Reduktion sind dem Fachmann bekannt.
Ein bevorzugtes Verfahren schließt die in situ Erzeugung von Ni&sub2;B aus Natriumborhydrid und NiCl&sub2; in Methanol ein, um eine Reduktionsmittellösung zu liefern. Die Nitroverbindung wird zu der Reduktionsmittellösung hinzugefügt, um die Reduktion der Nitrogruppe zu bewirken. Das Produkt ist eine Verbindung der Formel XIII.
In Schritt (iii) wird die Verbindung der Formel XIII mit Essigsäure oder einem Equivalent davon umgesetzt, um die zyklisierte Verbindung der Formel XIV zu liefern. Zu geeigneten Equivalenten von Essigsäure gehören entsprechende Acetylhalogenide und Orthoester. Wenn Essigsäure oder ein Orthoesterequivalent verwendet werden, kann die Umsetzung in Abwesenheit von Lösungsmittel oder in einem inerten Lösungsmittel, wie Xylol oder Toluol, mit hinreichendem Erwärmen (z. B. auf etwa 80-150ºC, abhängig vom Lösungsmittel, wenn überhaupt eines) ablaufen, um allen Alkohol oder alles Wasser auszutreiben, die als Nebenprodukt der Umsetzung erzeugt wurden. Wenn ein Acetylhalogenid verwendet wird, läuft die Umsetzung vorzugsweise in Essigsäure unter Erwärmen.
In Schritt (iv) wird die zyklisierte Verbindung der Formel XIV zuerst an 1-Position mit einem Alkoxymethylrest (-CH&sub2;OR', wobei R' ein Alkylrest, wie Ethyl, ist) substituiert, um den 1- Stickstoff zu schützen. Die Substitution kann durch Behandeln der Verbindung der Formel XIV mit Natriumhydrid und einem Halogenmethylalkylether, wie Chlormethylethylether, durchgeführt werden. Die so erhaltene 1-geschützte Verbindung wird dann an der 2-Methylgruppe mit einer Einheit der Formel -ZCl substituiert, um eine Verbindung der Formel XV zu liefern. Dies kann durch Metallieren der 2-Methylgruppe der 1-geschützten Verbindung erreicht werden, z. B. durch Behandeln mit n- Butyllithium in Tetrahydrofuran, und dann Hinzufügen eines Alkylierungsmittels der Formel X'-ZCl, wobei X' eine bessere Abgangsgruppe als Chlor ist (z. B. kann X' Brom sein). Ein anderes geeignetes Verfahren zum Substituieren an der 2- Methylgruppe schließt Metallieren, Umsetzen mit einem Epoxid, wie Ethylenoxid, und Umwandeln der so erhaltenen 2- (Hydroxyalkyl)-Verbindung zum entsprechenden Halogenid durch Umsetzen mit einem Chlorierungsmittel, wie Thionylchlorid, in einem inerten Lösungsmittel ein.
In Schritt (v) wird die 1-Position der Verbindung der Formel XV entschützt, z. B. durch Erwärmen in Gegenwart von HCl in einem Lösungsmittel, wie Methanol. Die so erhaltene 1- Wasserstoff-Verbindung wird dann durch formales Ersetzen der Chlorgruppe durch den 1-Stickstoff zyklisiert. Behandeln mit Natriumiodid in einem polaren Lösungsmittel, wie Aceton, in Gegenwart einer neutralisierenden Base (z. B. Kaliumcarbonat) ist ein geeignetes Mittel zum Beeinflussen der Zyklisierung. Es ergibt sich eine Verbindung der Formel XVI.
In Schritt (vi) wird die Verbindung der Formel XVI hydriert, um die entsprechende 4-Amino-Verbindung Formel II zu liefern. Herkömmliche bekannte katalytische Hydrierungsbedingungen sind geeignet. Bevorzugte Bedingungen schließen Erwärmen in Ameisensäure in Gegenwart von Pd(OH)&sub2;/C ein.
Das Reaktionsschema II zeigt einen Weg zu bestimmten Verbindungen der Erfindung, die nicht der Herstellung über das Reaktionsschema I zugänglich sind.
In Schritt (i) wird eine Verbindung der Formel XIII unter Verwendung von Ameisensäure oder eines Equivalents davon, wie Orthoformiat (z. B. Triethylorthoformiat), zyklisiert, um eine Verbindung der Formel XXI (siehe z. B. Schritt (iii) von Reaktionsschema I) bereitzustellen. In Schritt (ii) wird die Verbindung der Formel XXI an der 1-Position, wie vorstehend in Verbindung mit Schritt (iv) von Reaktionsschema I beschrieben, geschützt. Das geschützte Produkt wird dann an der 2-Position durch zuerst Metallieren in einem polaren Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran, z. B. durch Umsetzen mit n-Butyllithium und dann Behandeln mit Formaldehyd, formyliert. Schritt (iii) schließt das Homologieren des 2-Substituenten der Verbindung der Formel XXII, z. B. durch Umsetzen mit 1-Brom-2- (triphenylmethoxy)ethan, ein. Das Produkt der Formel XXIII kann durch säurekatalysierte Hydrolyse der Schutzgruppen, Umwandlung der Hydroxylgruppe am 2-Substituenten zu einer geeigneten Abgangsgruppe, Zyklisierung (z. B. wie vorstehend in Verbindung mit Schritt (v) von Reaktionsschema I beschrieben) und reduktive Spaltung, wie vorstehend in Verbindung mit Schritt (vi) von Reaktionsschema I beschrieben, zu einer Verbindung der Formel II überführt werden, um eine Verbindung der Formel XXIV zu liefern.
Verbindungen der Formel II, die nicht der Herstellung über die veranschaulichten Wege in Reaktionsschema I oder II oder anderweitig hierin beschrieben zugänglich sind, können unter Verwendung von Varianten der veranschaulichten Schemata, die bekannte Synthesealternativen, Änderung der Reihenfolge der Schritte und dergleichen einschließen, hergestellt werden. REAKTIONSSCHEMA II
Die Produktverbindung der Formel II kann auf dem herkömmlichen Wege isoliert werden, der in US Pat. Nr. 4,689,338 (Gerster) offenbart wurde, wie z. B. Entfernen des Lösungsmittels und Umkristallisieren aus einem geeigneten Lösungsmittel (z. B. N,N-Dimethylforrriamid) oder Lösungsmittelgemisch oder durch Lösen in einem geeigneten Lösungsmittel (wie Methanol) und Wiederausfällen durch Hinzufügen eines zweiten Lösungsmittels, in welchem die Verbindung unlöslich ist.
Eine Verbindung der Formel II kann als antivirales Mittel allein oder in Form eines pharmazeutisch verträglichen Salzes, wie Hydrochlorid, Dihydrogensulfat, Trihydrogenphosphat, Hydrogennitrat, Methansulfonat oder eines Salzes einer anderen pharmazeutisch verträglichen Säure verwendet werden. Ein pharmazeutisch verträgliches Salz einer Verbindung der Formel II kann allgemein durch Umsetzung der Verbindung mit einer equimolaren Menge einer verhältnismäßig starken Säure, vorzugsweise einer anorganischen Säure, wie Salzsäure, Schwefelsäure oder Phosphorsäure, oder einer organischen Säure, wie Methansulfonsäure, in einem polaren Lösungsmittel, leicht hergestellt werden. Die Isolierung des Salzes wird durch Hinzufügen eines Lösungsmittels, wie Diethylether, in welchem das Salz unlöslich ist, erleichtert.
Eine Verbindung der Erfindung kann für die verschiedenen Wege der Verabreichung (z. B. orale Verabreichung durch eine Tablette, Kapsel, Oralsuspension oder dergleichen, lokale Anwendung, perkutane oder parenterale Verabreichung) durch Kombination einer therapeutisch wirksamen Menge einer Verbindung der Formel II mit einem geeigneten pharmazeutisch verträglichen Arzneistoffträger, zu dem jedes Adjuvans und jeder für die ausgewählte Dosierform geeignete Excipient gehört, formuliert werden. Zu geeigneten Formulierungen gehören parenterale Lösungen, Cremes, Gele und Salben zur lokalen Anwendung, und Tabletten und Kapseln zur oralen Verabreichung. Herstellungsverfahren solcher pharmazeutischen Verbindungen sind dem Fachmann bekannt und offenbart, z. B. in Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. Auflage, 1990 Mack Publishing Company, A. R. Gennaro, Herausgeber. Folglich können besondere, für einen ausgewählten Verabreichungsweg geeignete Formulierungen leicht angegeben und durch den Fachmann hergestellt werden. Eine feste Dosierform enthält zum Beispiel eine Verbindung der Formel II und eine oder mehrere Verdünnungsmittel (z. B. Dicalciumphosphat, Calciumsulfat, Lactose, Mannitol, Cellulose, Kaolin, Natriumchlorid, Stärke, Sucrose, Inositol, Sorbitol), Bindemittel (z. B. Stärke, Gelatine, Sucrose, Glucose, Dextrose, Melasse, Lactose, natürliche und synthetische Gummi), Gleitmittel (z. B. Talk, Magnesiumstearat, Calciumstearat, Stearinsäure, hydrierte Pflanzenöle, Polyethylenglykole), Disintegrantien (z. B. Maisstärke, Kartoffelstärke, Tone, Cellulose, Alginate), Färbemittel und Geschmacksstoffe. Eine parenterale Lösung enthält eine Verbindung der Formel II und einen pharmazeutisch verträglichen, wäßrigen Arzneistoffträger, zu dem geeignete Excipienten, wie Säuren (Salzsäure, Milchsäure, Essigsäure, Asparginsäure oder Gemische davon) oder Basen (Natriumhydroxid) gehören, die zum Erreichen eines pH von 2 bis etwa 6 hinreichend sind, und Tonizitätseinsteller (z. B. Sorbitol oder Glycerin), damit die Formulierung mit Serum isoton ist. Örtliche oder perkutane Formulierungen enthalten eine Verbindung der Formel II in einer Creme, Salbe oder einer Haftklebstoffmasse. Eine Creme kann Weichmacher (z. B. Cetylalkohol, Stearylalkohol, Petrolatum, leichtes Mineralöl, acetyliertes Lanolin), Emulgatoren (z. B. nichtionische, oberflächenaktive Mittel, wie Polysorbat 60, Sorbitanmonostearat), Verdickungsmittel (z. B. Montmorillonit- Tone oder langkettige Alkohole, wie Cetearylalkohol, Cetylalkohol und Stearylalkohol) und Konservierungsmittel (z. B. Methylparaben, Propylparaben, Benzylalkohol) in Mengen enthalten, die durch den Fachmann leicht ausgewählt werden. Eine Salbe enthält eine Salbenbasis (z. B. Polyethylenglykol, Petrolatum) und Weichmacher und Verdickungsmittel.
Die Menge einer Verbindung der Formel II, die eine therapeutisch wirksame Menge ausmacht, wird gemäß der verwendeten, besonderen Verbindung, der gewünschten therapeutischen Wirkung, der Behandlungsbedingung, der Dosierweise und dem Verabreichungsweg variieren. Allgemein wird eine Verbindung der Formel II in einer parenteralen Formulierung in einer Menge von etwa 0,1 bis etwa 10 Gewichtsprozent (Gew.-%), beruhend auf dem Gesamtgewicht der Formulierung, vorhanden sein. Entsprechend wird eine Oraltablette oder -kapsel allgemein etwa 0,5 bis etwa 50 Gew.-% enthalten; und eine örtliche oder perkutane Formulierung wird etwa 0,1 bis etwa 10 Gew.-% enthalten. Besondere Formulierungen werden durch den Fachmann leicht ausgewählt werden.
Mehrere Verbindungen der Formel II wurden untersucht, und es wurde gefunden, daß sie die Biosynthese von Interferon in menschlichen Zellen und Mäusen induzieren. Diese Ergebnisse legen nahe, daß die Verbindungen der Erfindung zum Behandeln viraler Krankheiten (z. B. Hepatitis, Herpes, Warzen) und Krankheiten, wie rheumatischer Arthritis, Ekzem, Psoriasis, multipler Sklerose, essentieller Thrombozythämie, Krebs, wie Basalzellkarzinom und anderen neoplastischen Krankheiten, brauchbar sein könnten.
Die nachstehenden Beispiele sollen die Erfindung veranschaulichen. Die Strukturen wurden durch Kernresonanzspektroskopie bestätigt.

Beispiel 1

8,9,10,11-Tetrahydropyrido[1',2':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin

Teil A

Triethylamin (84 mL, 0,6 mol) wurde zu einer Suspension von 3-Nitro-2,4-chinolindiol (40 g, 0,194 mol) in Methylenchlorid (1200 mL) hinzugefügt. Die so erhaltene Lösung wurde in einem Eisbad gekühlt, und Trifluormethansulfonsäureanhydrid (67,2 mL, 0,40 mol) wurde hinzugefügt. Nachdem das Hinzufügen beendet war, wurde das Reaktionsgemisch 10 Minuten lang in einem Dampfbad erwärmt und dann noch einmal in einem Eisbad gekühlt. Tert-butylamin (42 mL, 0,4 mol) wurde hinzugefügt, dann wurde das Reaktionsgemisch 15 Minuten lang in einem Dampfbad erwärmt. Das Reaktionsgemisch wurde mit wäßrigem Natriumbicarbonat (500 mL) gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum getrocknet. Das Konzentrat wurde auf ein Kieselgelbett gegeben und das Kieselgel wurde mit Methylenchlorid eluiert. Die Methylenchloridlösung wurde im Vakuum eingedampft, um 54 g [4-(1,1-Dimethylethyl)amino-3- nitrochinolin-2-yl]trifluormethansulfonat bereitzustellen.

Teil B

Triethylamin (19,2 mL, 0,137 mol) wurde zu einer Lösung von [4-(1,1-Dimethylethyl)amino-3-nitrochinolin-2-yl]trifluormethansulfonat (54 g, 0,137 mol) in Toluol (etwa 1 L) hinzugefügt. Dibenzylamin (27 mL, 0,137 mol) wurde hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde etwa 2 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde mit Methanol (900 mL) verdünnt. Salzsäure (100 mL, 6 N) wurde hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde lang unter Rückfluß erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde bei Umgebungstemperatur über Nacht gerührt. Der so erhaltene Niederschlag wurde durch Filtration isoliert, mit Methanol gewaschen und dann getrocknet, um 42,1 g N²,N²- bis(Phenylmethyl)-3-nitrochinolin-2,4-diamin-Hydrochlorid als gelben Feststoff bereitzustellen.

Teil C

Natriumborhydrid (5,5 g, 0,147 mmol) wurde vorsichtig zu einer Nickel(II)chlorid-Hydrat (11,9 g, 0,05 mol) in Methanol (1200 mL) enthaltenden Lösung hinzugefügt. N²,N²-bis(Phenylmethyl)-3-nitrochinolin-2,4-diamin-Hydrochlorid (42,1 g, 0,1 mol) wurde in ein Gemisch von Methylenchlorid (400 mL) und Methanol (200 mL) aufgenommen und zum Nickelboratreagens hinzugefügt. Zusätzliches Natriumborhydrid wurde vorsichtig hinzugefügt, bis der erzeugte Schaum farblos war. Das Reaktionsgemisch wurde durch eine Schicht CeliteTM Filtermaterial filtriert. Das Filtrat wurde im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und Wasser verteilt. Die Methylenchlorid-Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde in Diethylether (etwa 1200 mL) aufgenommen. Chlorwasserstoffgas wurde 5 Minuten lang durch die Etherlösung sprudeln gelassen. Der so erhaltene Niederschlag wurde gesammelt und getrocknet, um 32 g N²,N²-bis(Phenylmethyl)chinolin-2,3,4-triamin- Hydrochlorid bereitzustellen.

Teil D

Triethylamin (3,6 mL, 25,6 mmol) wurde zu einer Suspension von N²,N²-bis(Phenylmethyl)chinolin-2,3,4-triamin-Hydrochlorid (5 g, 12,8 mmol) in Essigsäure (120 mL) hinzugefügt. Acetylchlorid (0,91 mL, 12,8 mmol) wurde hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde 5 bis 6 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Diethylether und gesättigtem, wäßrigem Natriumbicarbonat verteilt. Die Ether-Phase wurde getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit Methylenchlorid eluiert wird, das 1-5% (v/v) Ethylacetat enthält) gereinigt, um etwa 2,4 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin- 4-amin bereitzustellen.

Teil E

Eine Suspension von Natriumhydrid (0,064 g, 2 mmol) in Tetrahydrofuran (15 mL) wurde in einem Eisbad gekühlt. N,N- bis(Phenylmethyl)-2-methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (0,5 g, 1,32 mmol) wurde hinzugefügt, und man ließ das Reaktionsgemisch 20 Minuten lang auf Raumtemperatur erwärmen. Chlormethylethylether wurde hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde 30 Minuten lang gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Diethylether verdünnt, zweimal mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit Methylenchlorid eluiert wird) gereinigt, um 0,43 g N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-2- methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil F

Unter einer Stickstoffatmosphäre wurde eine Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-2-methyl-1H-imidazo[4,5- c]chinolin-4-amin (1,12 g, 2,56 mmol) in Tetrahydrofuran (20 mL) auf -78ºC gekühlt. Butyllithium (1,03 mL, 2,5M in Hexanen, 2,56 mmol) wurde hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde 5 Minuten lang gerührt. 1-Brom-3-chlorpropan (2,7 mL, 25 mmol) wurde hinzugefügt, und man ließ das Reaktionsgemisch auf Umgebungstemperatur erwärmen. Sobald die Reaktion beendet war, wie durch Dünnschichtchromatographie (Kieselgel, 30% Ethylacetat in Hexanen (v/v)) angezeigt, wurde das Reaktionsgemisch mit Diethylether und Wasser verdünnt. Die Ether-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der so erhaltene Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10-20% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 0,76 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(4-chlorbutyl)-1-ethoxymethyl-1H- imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil G

Methanol (mehrere mL) wurde zu einer Suspension von N,N- bis(Phenylmethyl)-2-(4-chlorbutyl)-1-ethoxymethyl-1H- imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (0,76 g, 1,5 mmol) in 3 N Salzsäure (20 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Stunden lang auf einem Dampfbad erwärmt und dann zwischen Methylenchlorid und wäßrigem, gesättigtem Natriumbicarbonat verteilt. Die Methylenchlorid-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert, um 0,64 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(4-chlorbutyl)-1H-imidazo[4,5- c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil H

Natriumiodid (1 g, 6 mmol) und Kaliumcarbonat (0,8 g, 6 mmol) wurden zu einer Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(4- chlorbutyl)-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (0,55 g, 1,2 mmol) in Aceton hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt, filtriert und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Flash-Chromatographie (Kieselgel, das mit 10-15% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt. Kernresonanzspektroskopie zeigte die mögliche Gegenwart von Iodid-Zwischenprodukten an; so wurde der Rückstand in Aceton aufgenommen, mit Natriumiodid und Kaliumcarbonat vereinigt und über Nacht unter Rückfluß erhitzt.
Die Reaktion ausgearbeitet, um 0,38 g N,N-bis(Phenylmethyl)- 8,9,10,11-tetrahydropyrido-[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6- amin bereitzustellen.

Teil I

Palladiumhydroxid auf Kohlenstoff (0,35 g) wurde zu einer Lösung von N,N-bis(phenylmethyl)-8,9,10,11-tetrahydropyrido- [1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin (0,38 g, 0,9 mmol) in Ameisensäure (etwa 15 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 3 Tage lang unter Rückfluß erhitzt, dann mit Methylenchlorid verdünnt und mit 10% Natriumhydroxid basisch gemacht (etwa pH 9). Die Methylenchlorid-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert, um einen weißen Feststoff bereitzustellen. Das Material wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 4-10% Methanol in Methylenchlorid (v/v) eluiert wird) gereinigt, um einen Feststoff bereitzustellen. Der Feststoff wurde in Methylenchlorid (20 mL) suspendiert, dann durch Filtration isoliert und getrocknet, um 70 mg 8, 9,10,11- Tetrahydropyrido[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin als Feststoff, FP 275-278ºC, bereitzustellen. Für C&sub1;&sub4;H&sub1;&sub4;N&sub4; + 0,2 CH&sub2;Cl&sub2; wurde berechnet: C = 66,81%; H = 5,69%; N = 21,95%; gefunden wurde: C = 67,06%; H = 5,60%; N = 22,18%.

Beispiel 2

10-Methyl-8,9,10,11-tetrahydropyrido[1',2':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin

Teil A

Eine Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-2- methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (1,8 g, 4,12 mmol, Beispiel 1, Teil E) in Tetrahydrofuran (40 mL) wurde auf -78ºC gekühlt. Butyllithium (1,7 mL, 2,5M in Hexanen, 4,2 mmol) wurde hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde 20 Minuten lang gerührt. 1-Brom-3-chlor-2-methylpropan (4,8 mL, 41 mmol) wurde hinzugefügt, und man ließ das Reaktionsgemisch über einen Zeitraum von 1 Stunde auf Umgebungstemperatur erwärmen. Das Reaktionsgemisch wurde mit Diethylether und Wasser verdünnt. Die Ether-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der so erhaltene Rückstand wurde durch Flash-Chromatographie (Kieselgel, das mit 5-20% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 0,65 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(4-chlor-3-methylbutyl)-1- ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil B

Salzsäure (80 mL, 6 N) wurde zu einer Suspension von N,N- bis(Phenylmethyl)-2-(4-chlor-3-methylbutyl)-1-ethoxymethyl-1H- imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (0,64 g, 1,2 mmol) in Methanol (40 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 2 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt (alles Methanol wurde während dieses Zeitraums ausgetrieben), mit Methylenchlorid verdünnt und dann mit 10% Natriumhydroxid basisch gemacht. Die Methylenchlorid- Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann konzentriert, um etwa 0,5 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(4- chlor-3-methylbutyl)-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil C

Ein großer Überschuß (etwa 10fach) von sowohl Natriumiodid als auch Kaliumcarbonat wurden zu einer Lösung von N,N- bis(Phenylmethyl)-2-(4-chlor-3-methylbutyl)-1H-imidazo[4,5-c]- chinolin-4-amin (etwa 0,5 g) in Aceton (etwa 75 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde über Nacht unter Rückfluß erhitzt, mit zusätzlichem Aceton verdünnt, filtriert und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde mit Methylenchlorid gewaschen, um das Produkt von Salzen zu befreien, und dann durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 3% Ethylacetat in Methylenchlorid (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 0,35 g N,N-bis(Phenylmethyl)-8,9,10,11- tetrahydro-10-methylpyrido[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6- amin bereitzustellen.

Teil D

Palladiumhydroxid auf Kohlenstoff (0,35 g) wurde zu einer Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-8,9,10,11-tetrahydro-10- methylpyrido[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin (0,35 g, 0,809 mmol) in Ameisensäure (etwa 15 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 3 Tage lang unter Rückfluß erhitzt, mit einem Gemisch aus Methanol und Wasser verdünnt und dann durch CeliteTM Filtermaterial filtriert. Das Filtrat wurde im Vakuum konzentriert und dann mit 10% Natriumhydroxid basisch gemacht. Der so erhaltene Niederschlag wurde durch Filtration isoliert und dann durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 2-5% Methanol in Methylenchlorid (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 0,1 g 10-Methyl-8,9,10,11-tetrahydropyrido[1',2':1,2]imidazo- [4,5-c]chinolin-6-amine als Feststoff, FP 279-281ºC, bereitzustellen. Für C&sub1;&sub5;H&sub1;&sub6;N&sub4; wurde berechnet: C = 71,40%; H = 6,39%; N = 22,20%; gefunden wurde: C = 71,10%; H = 6,46%; N = 22,25%.

Beispiel 3

8H-9,10,11,12-Tetrahydrohexamethylen-imino[1',2':1,2]- imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin-Hydrat

Teil A

Eine Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-2- methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (1,5 g, 3,43 mmol, Beispiel 1, Teil E) in Tetrahydrofuran (30 mL) wurde auf -78ºC gekühlt. Butyllithium (1,4 mL, 2,5M in Hexanen, 3,5 mmol) wurde tropfenweise hinzugefügt, gefolgt vom Hinzufügen von 1-Brom-4- chlorbutan (4 mL, 34 mmol). Das Reaktionsgemisch ließ man auf Umgebungstemperatur erwärmen, und es wurde dann mit Diethylether und Wasser gelöscht. Die Ether-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der so erhaltene Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 1,5 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(5-chlorpentyl)-1-ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5-c]- chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil B

Eine Suspension von N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(5- chlorpentyl)-1-ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (1,5 g, 3 mmol) in 6 N Salzsäure (100 mL) wurde 1 Stunde lang unter Rückfluß erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde gekühlt, mit Methylenchlorid verdünnt, mit 10% Natriumhydroxid basisch gemacht und dann mit Methylenchlorid (insgesamt 400 mL) extrahiert. Die Methylenchlorid-Extrakte wurden vereinigt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert, um etwa 1,3 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(5-chlorpentyl)-1H-imidazo- [4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil C

Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 2, Teil C wurde N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(5-chlorpentyl)-1H-imidazo [4,5-c]chinolin-4-amin (1,3 g, 3 mmol) zyklisiert, um 1,1 g N,N-bis(Phenylmethyl)-8H-9,10,11,12-tetrahydrohexämethylenimino[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin als weißen Feststoff bereitzustellen.

Teil D

Palladiumhydroxid auf Kohlenstoff (1 g) wurde zu einer Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-8H-9,10,11,12-tetrahydrohexamethylen-imino[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin (1 g, 2,3 mmol) in Ameisensäure (etwa 30 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage lang unter Rückfluß erhitzt, filtriert, mit Methanol/Methylenchlorid gewaschen und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und 10% Natriumhydroxid verteilt. Die Methylenchlorid- Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 3-10% Methanol in Methylenchlorid (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 0,4 g 8H- 9,10,11,12-Tetrahydrohexamethylen-imino[1',2':1,2]imidazo[4,5- c]chinolin-6-amin-Hydrat als weißen Feststoff, FP 237-240ºC, bereitzustellen. Für C&sub1;&sub5;H&sub1;&sub6;N&sub4; + 1/3 H&sub2;O wurde berechnet: C = 69,74%; H = 6,50%; N = 21,69%; gefunden wurde: C = 69,74%; H = 6,27%; N = 21,37%.

Beispiel 4

9,10-Dihydro-8H-pyrrolo[1',2':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin-Hydrat

Teil A

Eine Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-2- methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (1,7 g, 3,9 mmol, Beispiel 1, Teil E) in Tetrahydrofuran (50 mL) wurde auf -78ºC gekühlt. Butyllithium (1,6 mL, 2,5M in Hexanen, 4,1 mmol) wurde tropfenweise hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde 5 Minuten lang gerührt. Ethylenoxid wurde über die Oberfläche des Reaktionsgemischs laufengelassen. Nach 10 Minuten ließ man das Reaktionsgemisch auf Umgebungstemperatur erwärmen. Mit dem Hinzufügen von Ethylenoxid wurde aufgehört, sobald die Reaktionstemperatur 0ºC erreichte. Die Reaktion wurde mit Diethylether und Wasser gelöscht. Die Ether-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der so erhaltene Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 5-10% Ethylacetat in Methylenchlorid (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 1,4 g N,N- bis(Phenylmethyl)-2-(3-hydroxypropyl)-1-ethoxymethyl-1H- imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil B

Thionylchlorid (5 mL, 68 mmol) wurde zu N,N- bis(Phenylmethyl)-2-(3-hydroxypropyl)-1-ethoxymethyl-1H- imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (1 g, 2,1 mmol) hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde schnell gerührt, bis Dünnschichtchromatographie (Kieselgel, 10% Ethylacetat in Methylenchlorid (v/v)) anzeigte, daß die Reaktion beendet war. Das Reaktionsgemisch wurde mit Methylenchlorid verdünnt und dann mit 10% Natriumhydroxid und Natriumbicarbonat neutralisiert. Die Methylenchlorid-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10-30% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 1 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(3-chlorpropyl)-1-ethoxymethyl-1H- imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil C

Eine Suspension von N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(3-chlorpropyl)-1-ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (1 g, 2,0 mmol) in 6 N Salzsäure (80 mL) wurde 2 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt und dann über Nacht bei Umgebungstemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit 10% Natriumhydroxid neutralisiert und dann mit Methylenchlorid extrahiert. Das Extrakt wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert, um 0,8 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(3-chlorpropyl)-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil D

Kaliumcarbonat (10facher Überschuß) und Natriumiodid (5facher Überschuß) wurden zu einer Lösung von N,N- bis(Phenylmethyl)-2-(3-chlorpropyl)-1H-imidazo[4,5-c]chinolin- 4-amin (0,8 g, 1,8 mmol) in Aceton hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 2 Stunden lang unter Rückfluß erhitzt, filtriert und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid und Wasser verteilt. Die Methylenchlorid-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10-30% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 0,25 g N,N-bis(Phenylmethyl)-9,10-dihydro-8H-pyrrolo[1',2':1,2]- imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin bereitzustellen.

Teil E

Palladiumhydroxid auf Kohlenstoff (0,5 g) wurde zu einer Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-9,10-dihydro-8H-pyrrolo- [1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin (0,25 g, 0,62 mmol) in Ameisensäure (75 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 4 Tage lang unter Rückfluß erhitzt, dann mit Methanol verdünnt und filtriert. Das Filtrat wurde im Vakuum konzentriert und dann mit Wasser und Natriumbicarbonat gemischt. Ein grauer Niederschlag wurde durch Filtration isoliert. Das Filtrat wurde konzentriert. Der so erhaltene Rückstand wurde mit einem Gemisch aus Methanol und Methylenchlorid aufgeschlämmt und dann filtriert. Das Filtrat wurde mit dem vorher isolierten grauen Niederschlag vereinigt und dann durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 3-5% Methanol in Methylenchlorid (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 80 mg N,N-bis(Phenylmethyl)-9,10- dihydro-8H-pyrrolo[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin als weißen Feststoff, FP 275-277ºC, bereitzustellen. Analyse: für C&sub1;&sub3;H&sub1;&sub2;N&sub4; + 1/3 H&sub2;O wurde berechnet: C = 67,81%; H = 5,54%; N = 24,33%; gefunden wurde: C = 67,80%; H = 5,26%; N = 24,28%.

Beispiel 5

10,11-Dihydro-8H-[1,4]-oxazino[4',3':1,2] imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin

Teil A

Eine Suspension von N²,N²-bis(Phenylmethyl)chinolin-2,3,4- triamin-Hydrochlorid (10 g, 25,6 mmol, Beispiel 1, Teil C) in Triethylorthoformiat (40 mL) wurde 30 Minuten lang auf etwa 120ºC erhitzt, auf Umgebungstemperatur gekühlt und dann mit Diethylether verdünnt. Der so erhaltene Niederschlag wurde durch Filtration isoliert und dann zwischen Ammoniumhydroxid und Methylenchlorid verteilt. Die Methylenchlorid-Phase wurde abgetrennt, zweimal mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert, um 8,6 g N,N-bis(Phenylmethyl)-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin als dunkelbraunen Feststoff bereitzustellen.

Teil B

Eine Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-1H-imidazo[4,5-c]- chinolin-4-amin (2 g, 5,49 mmol) in Tetrahydrofuran (10 mL) wurde zu einer Suspension von Natriumhydrid (0,21 g, 6,58 mmol) in Tetrahydrofuran (25 mL) hinzugefügt. Nach 30 Minuten wurde Chlormethylethylether (0,61 mL, 6,58 mmol) hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch 2 Stunden lang gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Diethylether verdünnt, mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert, um das Rohprodukt als braunes Öl bereitzustellen. Das Öl wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 20-30% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 1,77 g N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin- 4-amin als weißen/gelbbraunen Feststoff bereitzustellen.

Teil C

Butyllithium (1,6 mL, 2,5M in Hexanen, 4 mmol) wurde zu einer kalten Lösung (Trockneis/Aceton-Bad) von N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin (1,7 g, 4 mmol) in Tetrahydrofuran hinzugefügt. Es wurde keine Farbveränderung beobachtet. Das Reaktionsgemisch wurde auf -20ºC (Trockneis/Tetrachlormethan) erwärmt, und das Reaktionsgemisch wechselte die Farbe nach rot. Formaldehydgas, das von einem Stickstoffstrom mitgerissen wurde, wurde zum Reaktionsgemisch hinzugefügt. Nach mehreren Minuten wurde das Reaktionsgemisch zu einer festen Masse, und das Eisbad wurde entfernt. Das Reaktionsgemisch ließ man auf Umgebungstemperatur aufwärmen, und die Farbe des Reaktionsgemischs wechselte von rot nach gelb. Das Reaktionsgemisch wurde mit Diethylether und Wasser verdünnt. Die Ether-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10-20% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 1 g 4-bis(Phenylmethyl)amino-1-ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5- c]chinolin-2-methanol bereitzustellen.

Teil D

Natriumhydrid (0,11 g, 3,3 mmol) wurde zu einer Lösung von 4-bis(Phenylmethyl)amino-1-ethoxymethyl-1H-imidazo[4,5-c]- chinolin-2-methanol (1 g, 2,21 mmol) in N,N-Dimethylformamid (15 mL) hinzugefügt, und das so erhaltene Gemisch wurde 10 Minuten lang gerührt. 1-Brom-2-(trityloxy)ethane wurde hinzugefügt, und das Rühren wurde 3-4 Stunden lang bei Umgebungstemperatur fortgesetzt. Die Reaktion wurde mit Diethylether und Wasser gelöscht. Die Ether-Phase wurde abgetrennt, mehrere Male mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10-30% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 1,1 g N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl-2-[(2-triphenylmethoxy)ethoxy]methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil E

Eine Suspension von N,N-bis(Phenylmethyl)-1-ethoxymethyl- 2-[(2-triphenylmethoxy)ethoxy]methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin- 4-amin (1,1 g, 1,5 mmol) in 6 N Salzsäure (25 mL) wurde 1,5 Stunden lang auf einem Dampfbad erhitzt. Das Reaktionsgemisch wurde auf pH 7 neutralisiert und dann mit Methylenchlorid extrahiert. Das Extrakt wurde getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10-50% Ethylacetat in Hexanen (v/v) eluiert wird) gereinigt, um 0,5 g N,N- bis(Phenylmethyl)-2-(2-hydroxyethoxy)methyl-1H-imidazo[4,5-c]- chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil F

Triethylamin (0,17 mL, 1,25 mmol) wurde zu einer Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(2-hydroxyethoxy)methyl-1H-imidazo- [4,5-c]chinolin-4-amin (0,5 g, 1,14 mmol) in Methylenchlorid (20 mL) hinzugefügt. Methansulfonylchlorid (0,09 mL, 1,14 mmol) wurde hinzugefügt, und das Reaktionsgemisch wurde 1 Stunde lang bei Umgebungstemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Methylenchlorid verdünnt, mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert, um 0,6 g N,N-bis(Phenylmethyl)-2-(2-methylsulfonyloxyethoxy)- methyl-1H-imidazo[4,5-c] chinolin-4-amin bereitzustellen.

Teil G

Ein Überschuß von Kaliumcarbonat und ein Überschuß von Natriumiodid wurden zu einer Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)- 2-(2-methylsulfonyloxyethoxy)methyl-1H-imidazo[4,5-c]chinolin- 4-amin (0,6 g, 1,14 mmol) in Aceton (200 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde über Nacht unter Rückfluß erhitzt und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Methylenchlorid (150 mL) und Wasser (50 mL) verteilt. Die Methylenchlorid-Phase wurde abgetrennt, über Magnesiumsulfat getrocknet und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde durch Säulenchromatographie (Kieselgel, das mit 10 : 10 : 80 (v/v/v) Methylenchlorid : Ethylacetat : Hexanen eluiert wird) gereinigt, um 0,42 g N,N-bis(Phenylmethyl)-10,11-dihydro-8H- [1,4]-oxazino[4',3':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin als weißen Feststoff bereitzustellen.

Teil H

Palladiumhydroxid auf Kohlenstoff (0,5 g) wurde zu einer Lösung von N,N-bis(Phenylmethyl)-10,11-dihydro-8H-[1,4]- oxazino[4',3':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin (0,4 g, 0,95 mmol) in Ameisensäure (etwa 40 mL) hinzugefügt. Das Reaktionsgemisch wurde 6 Tage lang unter Rückfluß erhitzt, dann with Methanol verdünnt und durch eine Schicht CeliteTM Filtermaterial filtriert. Das Filtrat wurde mit Ammoniumhydroxid basisch gemacht und dann im Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde in einem Gemisch von Methanol und Methylenchlorid aufgenommen. Kieselgel wurde hinzugefügt, und das so erhaltene Gemisch wurde im Vakuum konzentriert. Der Feststoff wurde auf eine Säule aufgetragen und mit 2-5% Methanol in Methylenchlorid eluiert, um einen weißen Feststoff bereitzustellen. Die Kernresonanzspektren stimmten mit dem Formiatsalz des gewünschten Produkts überein. Das Salz wurde in 5% Salzsäure aufgenommen und 30 Minuten lang auf einem Dampfbad erhitzt. Das Gemisch wurde mit 10% Natriumhydroxid basisch gemacht. Der so erhaltene Niederschlag wurde durch Filtration isoliert, mit Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet, um 75 mg 10,11-Dihydro-8H-[1,4]-oxazino[4',3':1,2]imidazo[4,5-c]- chinolin-6-amin als Feststoff, FP 258-259ºC, bereitzustellen. Analyse: für C&sub1;&sub3;H&sub1;&sub2;N&sub4;C wurde berechnet: C = 64,99%; H = 5,03%; N = 23,32%; gefunden wurde: C = 64,61%; H = 4,88%; N = 23,18%.

Interferon-α-induktion in menschlichen Zellen

Ein in vitro System menschlicher Blutzellen wurde verwendet, um die Interferoninduktion durch Verbindungen der Erfindung zu beurteilen. Die Aktivität beruht auf der Messung von Interferon, das in die Kulturmedien sekretiert wurde. Das Interferon wird durch biologische Prüfung gemessen.

Blutzellpräparation für die Kultur

Vollblut wird durch Venenpunktion in EDTA-Vacutainer- Röhrchen gesammelt. Periphere einkernige Blutzellen (PBM's) werden durch Verwendung entweder von LeucoPREPTM Zellseparationsmarkenröhrchen (erhältlich von Becton Dickinson) oder Ficoll-Paque®-Lösung (erhältlich von Pharmacia LKB Biotechnology Inc. Piscataway, NJ) von dem Vollblut getrennt. Die PBM's werden zu 1 · 10&sup6;/mL in RPMI 1640-Medium suspendiert (erhältlich von GIBCO, Grand Island, NY), die 25 mM HEPES (N-2- Hydroxyethylpiperazin-N'-2-ethansulfonsäure) und L-Glutamin (1% Penicillin-Streptomycin-Lösung hinzugefügt) mit 10% hinzugefügtem, hitzeinaktiviertem (56ºC, 30 Minuten lang) autologem Serum enthalten. 200-uL-Portionen der PBM-Suspension werden zu sterilen MicroTest III-Gewebekulturplatten mit 96 Vertiefungen (Flachboden) hinzugefügt.

Verbindungsherstellung

Die Verbindungen werden in Ethanol, Dimethylsulfoxid oder Gewebekulturwasser solubilisiert und dann mit Gewebekulturwasser, 0,01N Natriumhydroxid oder 0,01 N Salzsäure verdünnt (die Wahl des Lösungsmittels hängt von den chemischen Eigenschaften der zu untersuchenden Verbindung ab). Die Ethanol- oder DMSO-Konzentration sollte eine Endkonzentration von 1% zum Hinzufügen zu den Vertiefungen der Kulturplatten nicht überschreiten. Die Verbindungen werden anfänglich in einem Konzentrationsbereich von etwa 0,1 ug/mL bis etwa 5 ug/mL untersucht. Verbindungen, welche bei einer Konzentration von 0,5 ug/mL Induktion zeigen, werden dann in einem weiteren Konzentrationsbereich untersucht.

Inkubation

Die Lösung der Testverbindung wird in einem Volumen (weniger als oder gleich wie 50 uL) zu den Vertiefungen hinzugefügt, die 200 uL verdünntes Vollblut oder PBM's in Medien enthalten. Lösungsmittel und/oder Medien werden zu den Kontrollvertiefungen (Vertiefungen ohne Testverbindung) hinzugefügt und nach Bedarf auf ein Endvolumen pro Vertiefung von 250 uL eingestellt. Die Platten werden mit Kunststoffdeckeln bedeckt, sanft mit dem Vortexer geschüttelt und dann 48 Stunden lang bei 37ºC in einer 5% Kohlendioxidatmosphäre inkubiert.

Abtrennung

Der Inkubation folgend werden die Platten mit Parafilm bedeckt und dann 10 bis 15 Minuten lang bei 1000 rpm und 4ºC in einer Damon IEC-Zentrifuge, Modell CRU-5000 zentrifugiert. Die Medien (etwa 200 uL) von 4 bis 8 Vertiefungen wurden entfernt und in sterile 2 mL-Gefrierfläschchen vereinigt. Die Proben wurden bis zur Analyse bei -70ºC gehalten.

Interferon Analyse/Berechnung

Interferon wird durch biologische Prüfung unter Verwendung von menschlichen A549-Lungenkarzinomzellen, die von Encephalomyocarditis angegriffen wurden, bestimmt. Die Einzelheiten des biologischen Prüfungsverfahrens wurden von G. L. Brennan und L. H. Kronenberg in "Automated Bioassay of Interferons in Micro-test Plates", Biotechniques, June/July, 78, 1983, hierin unter Bezugnahme aufgenommen, beschrieben. Kurz angegeben, funktioniert das Verfahren wie folgt: Interferonverdünnungen und A549-Zellen werden 12 bis 24 Stunden lang bei 37ºC inkubiert. Die inkubierten Zellen werden mit einem Impfmittel des Encephalomyocarditis-Virus infiziert. Die infizierten Zellen werden einen zusätzlichen Zeitraum lang bei 37ºC inkubiert, bevor die virale zytopathogene Wirkung quantifiziert wird. Die virale zytopathogene Wirkung wird durch Anfärben, gefolgt von spektrophotometrischen Absorptionsmessungen quantifiziert. Die Ergebnisse werden als α-Bezugseinheiten/mL ausgedrückt, die auf dem Wert beruhen, der für den NIH HU IF-L-Standard erhalten wird. Durch Untersuchung in Schachbrett-Neutralisationsprüfungen gegen Kaninchen anti- Humaninterferon-β und Ziege anti-Humaninterferon-α unter Verwendung von einzelligen Schichten von A549-Zellen, die vom Encephalomyocarditis-Virus angegriffen wurden, wurde im wesentlichen alles Interferon als Interferon-α identifiziert. Die Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle gezeigt, wobei das Fehlen einer Eintragung anzeigt, daß die Verbindung bei dieser besonderen Dosiskonzentration nicht untersucht wurde.

Interferoninduktion in Mäusen

Dieses Untersuchungsverfahren wurde verwendet, um die Fähigkeit der Verbindungen der Erfindung, die Interferonbiosynthese in Mäusen zu induzieren, zu beurteilen.
Für jede zu untersuchende Dosiermenge werden drei Gruppen (mit drei Mäusen pro Gruppe) von männlichen Mäusen (nicht fastend) oral eine Verbindung gegeben. Eine Stunde später wird Blut aus dem Retrobulbärplexus gesammelt und vereinigt. Das Blut wird zentrifugiert, und das Serum wird gesammelt und aliquotiert. Die Serumproben werden bis zur Analyse bei -70ºC gefroren gelagert. Dieses Verfahren wird 2 Stunden nach Gabe mit der zweiten Gruppe von Mäusen und 4 Stunden nach Gabe mit der dritten Gruppe von Mäusen wiederholt.
Die Proben werden, wie vorstehend in Verbindung mit der Analyse der Interferoninduktion in menschlichen Zellen beschrieben, geprüft. Die Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle als α/β-Bezugseinheiten/mL ausgedrückt, die auf dem Wert beruhen, der für einen Maus-MU-1-IF-Standard erhalten wird. Die Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle gezeigt, wobei Ergebnisse, die mit "< " einer bestimmten Zahl gekennzeichnet sind, anzeigen, daß Interferon in Mengen oberhalb des unteren Sensitivitätsniveaus der Prüfung nicht nachweisbar war.

Indirekte in vitro antivirale Aktivität

Das nachstehend beschriebene Untersuchungsverfahren legt die Fähigkeit der Verbindungen der Erfindung dar, den Fortgang einer viralen Infektion zu inhibieren.
Vollblut wird durch Venenpunktion in EDTA-Vacutainer- Röhrchen gesammelt. Periphere einkernige Blutzellen (PBM's) werden durch Verwendung von Ficoll-Paque®-Lösung (erhältlich von Pharmacia LKB Biotechnology Inc. Piscataway, NJ) isoliert. Die PBM's werden mit Phosphatpuffer mit Salz gewaschen und dann mit RPMI 1640-Medium (erhältlich von GIBCO, Grand Island, New York) und 10% fetalem Kälberserum verdünnt, um eine Endkonzentration von 2,5 · 10&sup6; Zellen/mL zu erhalten. 1-mL- Portionen der PBM's in Medium werden in 15-mL-Polypropylen- Röhrchen untergebracht. Die Testverbindung wird in Dimethylsulfoxid gelöst und dann mit RPMI 1640 Medium verdünnt. Die Lösung der Testverbindung wird zu einem Röhrchen hinzugefügt, das die PBM's enthält, um Endkonzentrationsbereiche von 0,05 ug/mL bis 1,0 ug/mL zu geben. Kontrollröhrchen enthalten keine Testverbindung. Die Röhrchen werden dann 24 Stunden lang bei 37ºC in einer 5% Kohlendioxidatmosphäre inkubiert. Der Inkubation folgend werden die Röhrchen 5 Minuten lang bei 400 · g zentrifugiert. Der Überstand wird entfernt. Die PBM's werden in 100 uL RPMI 1640- Medium aufgezogen und dann mit 100 uL Lösung infiziert, die 10&sup5; Dosen einer 50% infektiösen Gewebekultur eines Vesikularstomatitisvirus (VSV) enthält. Die Röhrchen werden 30 Minuten lang bei 37ºC inkubiert, um den Virus adsorbieren zu lassen. Ein mL RPMI 1640-Medium wird zu jedem Röhrchen hinzugegeben, und die Röhrchen werden 48 Stunden lang bei 37ºC inkubiert. Die Röhrchen werden gefroren und dann aufgetaut, um die Zellen zu lysieren. Die Röhrchen werden 5 Minuten lang bei 400 · g zentrifugiert, um Zelltrümmer zu entfernen, und dann wird der Überstand durch fortlaufende 10fache Verdünnungen auf Vero-Zellen in Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen geprüft. Die infizierten Zellen werden 24 Stunden lang bei 37ºC inkubiert, bevor die virale zytopathogene Wirkung quantifiziert wird. Die virale zytopathogene Wirkung wird durch Anfärben mit 0,05% Kristallviolett quantifiziert. Die Ergebnisse werden als VSV-Inhibierung dargestellt, die als der log&sub1;&sub0; (Kontroll-VSV- Aubeute/Versuchs-VSV-Ausbeute) definiert ist. Die Ergebnisse sind in der nachstehenden Tabelle gezeigt, wobei das Fehlen einer Eintragung anzeigt, daß die Verbindung bei dieser besonderen Konzentration nicht untersucht wurde. Kontrollröhrchen haben einen Wert von 0.

Claims

1. Verbindung der Formel II

wobei Z aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus:

-(CH&sub2;)n-, wobei n 1 bis 4 ist;

-(CH&sub2;)a-C(R&sub1;R&sub2;)(CH&sub2;)b-, wobei a und b ganze Zahlen sind und a + b 0 bis 3 ist, R&sub1; ein Wasserstoffatom oder ein Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist und R&sub2; aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einem Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einer Hydroxygruppe, einem Rest -OR&sub3;, wobei R&sub3; einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, und einem Rest -NR&sub4;R4', worin R&sub4; und R4' voneinander unabhängig ein Wasserstoffatom oder einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellen; und

-(CH&sub2;)a-(Y)-(CH&sub2;)b-, wobei a und b ganze Zahlen sind und a + b 0 bis 3 ist und Y ein Sauerstoff oder Schwefelatom oder ein Rest -NR&sub5; ist, worin R&sub5; ein Wasserstoffatom oder, einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt;

und wobei q 0 oder 1 ist und R aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einem Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einem Alkoxyrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen und einem Halogenatom, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

2. Verbindung nach Anspruch 1, worin Z -(CH&sub2;)n- ist und n 1 bis 3 ist, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

3. Verbindung nach Anspruch 1, worin Z -(CH&sub2;)a-C(R&sub1;R&sub2;)(CH&sub2;)b- ist, wobei a und b ganze Zahlen sind und a + b 0 bis 3 ist, R&sub1; ein Wasserstoffatom oder einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt und R&sub2; aus der Gruppe ausgewählt ist, bestehend aus einem Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, einer Hydroxygruppe, einem Rest -OR&sub3;, worin R&sub3; ein Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen ist, und einem Rest -NR&sub4;R4', wobei R&sub4; und R4' voneinander unabhängig ein Wasserstoffatom oder ein Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen sind, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

4. Verbindung nach Anspruch 3, wobei R&sub1; ein Wasserstoffatom ist und R&sub2; ein Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

5. Verbindung nach Anspruch 1, wobei Z -(CH&sub2;)a-(Y)-(CH&sub2;)b- ist, wobei a und b ganze Zahlen sind und a + b 0 bis 3 ist und Y ein Sauerstoff oder Schwefelatom oder ein Rest -NR&sub5; ist, wobei R&sub5; ein Wasserstoffatom oder einen Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

6. Verbindung nach Anspruch 5, wobei Y ein Sauerstoffatom ist, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

7. Verbindung nach Anspruch 6, worin a + b 1 ist, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

8. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus:

8,9,10,11-Tetrahydropyrido[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin,

10-Methyl-8,9,10,11-tetrahydropyrido[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin,

8H-9,10,11,12-Tetrahydrohexamethylen-imino[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6- amin,

9,10-Dihydro-8H-pyrrolo[1',2':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin,

10,11-Dihydro-8H-[1,4]-oxazino[4',3':1,2]imidazo[4,5-c]chinolin-6-amin, oder ein pharmazeutisch verträgliches Salz davon.

9. Pharmazeutische Formulierung, die (i) eine Verbindung nach Anspruch 1 in einer Menge, die die Interferonbiosynthese in Tieren wirksam induziert, und (ii) eine pharmazeutisch verträgliche Trägersubstanz umfaßt.

10. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 1, in einer wirksamen Menge für die Herstellung eines Arzneimittels zur Induktion der Interferonbiosynthese in Tieren.