DE69427548T2

DE69427548T2 - Heterozyklische Derivate als Plätchenaggregationsinhibitoren

Info

Publication number: DE69427548T2
Application number: DE69427548T
Authority: DE
Inventors: Stuart Dennett Mills
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 1993-03-29
Filing date: 1994-03-28
Publication date: 2002-04-18
Anticipated expiration: 2014-03-29
Also published as: ES2159798T3; PL310889A1; HU9502290D0; NZ262941A; US5556977A; NO305244B1; FI954616A; NO953837D0; CN1120334A; JPH08508291A; GR3036640T3; TW276254B; DE69411900D1; GB9406143D0; HUT72088A; NO953837L; PT825184E; WO1994022834A1; BR9406613A; AU692438B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein heterocyclisches Derivat, das die Zelladhäsion (beispielsweise Plättchen- bzw. Thrombocytenaggregation) inhibiert, Verfahren zu seiner Herstellung und dieses Derivat enthaltende pharmazeutische Zusammensetzungen.
Bei der Entwicklung verschiedener Krankheiten spielt die Zelladhäsion eine Rolle. So ist beispielsweise die Thrombocytenaggregation an der Bildung von Blutthromben beteiligt, die zu Krankheiten wie Thrombose (z. B. Schlaganfall und thrombotischen Ereignissen in Begleitung von instabiler Angina und transitorischen ischämischen Attacken), Myokardinfarkt, Atherosklerose, Thromboembolie und Reokklusion während und nach thrombolytischer Therapie, führen können.
Nach allgemeiner Auffassung wird die Thrombocytenaggregation durch das Plättchenmembran- Glykoprotein IIb/IIIa (GP IIb/IIIa) vermittelt. Es wird angenommen, daß Adhäsionsmoleküle wie Fibrinogen und von-Willebrand-Faktor an GP-IIb/IIIa-Stellen an benachbarten Plättchen binden und diese dadurch zum Aggregieren bringen. Als weitere Adhäsionsmoleküle, die bekanntlich an das GP IIb/lila binden, seien Fibronectin, Vitronectin und Thrombospondin genannt.
Überraschenderweise wurde beim Zufalls- Screening gefunden, daß bestimmte heterocyclische Derivate mit einer 4-[(4-Pyridyl)piperazin-1-yl-Gruppe oder einer verwandten Gruppe die Fähigkeit zur Inhibierung der Thrombocytenaggregation und zur Inhibierung der Bindung von Fibrinogen an GP IIb/IIIa besitzen.
Gemäß einem ersten Aspekt stellt die vorliegende Erfindung daher eine Verbindung (RS)-3- Methyl-4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxybuttersäure oder einen metabolisch labilen Ester oder ein metabolisch labiles Amid davon oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon bereit.
Ohne Festlegung auf eine bestimmte Theorie wird angenommen, daß das Stickstoffatom in der Pyridylgruppe als Ersatz für die stark basische Guanidingruppe in Arginin fungiert. Es wird angenommen, daß das pyridylgebundene Stickstoffatom in der durch M2 wiedergegebenen Gruppe zur Fähigkeit des Stickstoffatoms in der Pyridylgruppe, als Base zu fungieren, beiträgt. So wird beispielsweise für eine 4-(4-Pyridyl)piperazin-1-yl- Gruppe angenommen, daß das Stickstoffatom in der Piperazin-1-yl-Gruppe folgendermaßen zur Fähigkeit des Stickstoffatoms in der Pyridylgruppe, als Base zu fungieren, beiträgt:
Beispiele für metabolisch labile Esterderivate einer Carboxylgruppe sind Ester mit Alkoholen, wie C&sub1;-&sub6;- Alkanolen, beispielsweise Methanol, Ethanol, Propanol und Isopropanol; Indanol; Adamantol; C&sub1;&submin;&sub6;-Alkanoyloxy- C&sub1;&submin;&sub4;-alkanolen, wie Pivaloyloxymethyl; Glycolamiden; (S- Methyl-2-oxo-1,3-dioxol-4-yl)methylalkohol und C&sub1;&submin;&sub4;- Alkyloxycarbonyl-C&sub1;&submin;&sub4;-alkanolen. Es versteht sich, daß Verbindungen der Formel I, worin Z¹ für Hydroxy steht, innere Ester zu bilden vermögen.
Beispiele für metabolisch labile Amidderivate einer Carboxylgruppe sind aus Ammoniak und Aminen, wie C&sub1;&submin;&sub4;-Alkylamin, beispielsweise Methylamin, Di-C&sub1;&submin;&sub4;- alkylaminen, C&sub1;&submin;&sub4;-Alkoxy-C&sub1;&submin;&sub4;-alkylaminen, wie Methoxyethylamin, Phenyl-C&sub1;&submin;&sub2;-alkylaminen, wie Benzylamin; und Aminosäuren, wie Glycin oder einem Ester davon gebildete Amide.
Beispiele für besondere pharmazeutisch unbedenkliche Salze sind Salze mit Säuren, die physiologisch unbedenkliche Anionen liefern, wie Salze mit Mineralsäuren, beispielsweise einem Halogenwasserstoff (wie Chlorwasserstoff und Bromwasserstoff), Schwefelsäure oder Phosphorsäure, und Salze mit organischen Säuren, beispielsweise Trifluoressigsäure. Weitere pharmazeutisch unbedenkliche Salze sind beispielsweise Salze mit anorganischen Basen, wie Alkali- und Erdalkalimetallsalze (beispielsweise Natriumsalze), Ammoniumsalze, und Salze mit organischen Aminen und quartären Basen, die physiologisch unbedenkliche Kationen liefern, wie Salze mit Methylamin, Dimethylamin, Trimethylamin, Ethylendiamin, Piperidin, Morpholin, Pyrrolidin, Piperazin, Ethanolamin, Triethanolamin, N- Methylglucamin, Tetramethylammoniumhydroxid und Benzyltrimethylammoniumhydroxid.
Gemäß einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von (RS)-3- Methyl-4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxybuttersäure oder einem metabolisch labilen Ester oder einem metabolisch labilen Amid davon oder einem pharmazeutisch unbedenklichen Salz davon bereit, bei dem man
(A) eine Verbindung der Formel:
oder ein Säureadditionssalz davon mit einer Verbindung der Formel:
worin U¹ für ein Abgangsatom oder eine Abgangsgruppe steht, umsetzt.
Beispiele für U¹ sind Halogen, wie Chlor oder Brom, und Hydrocarbylsulfonyloxy, wie Methansulfonyloxy und p-Toluolsulfonyloxy. Wenn es sich bei der Gruppe in X¹, an die U¹ gebunden ist, um eine Carbonylgruppe handelt, so kann U¹ auch für eine Hydroxylgruppe oder ein reaktives Derivat davon stehen. Beispiele für reaktive Derivate einer Hyxdroxylgruppe sind Acyloxygruppen, wie Acetyloxy, und durch. Umsetzung einer Verbindung der Formel III, worin U¹ für Hydroxy steht, mit einem Peptidkupplungsreagenz in situ gebildete Gruppen. Beispiele für Peptidkupplungsreagenzien sind Carbodiimide, wie 1,3- Dicyclohexylcarbodiimid (DCC), vorzugsweise in Kombination mit 1-Hydroxybenzotriazolhydrat (HOBT).
Beispiele für Säureadditionssalze sind z. B. die Hydrochloride.
Die Umsetzung kann zweckmäßigerweise bei einer Temperatur im Bereich von -10 bis 120ºC, vorzugsweise von 10 bis 100ºC, durchgeführt werden. Als Lösungsmittel eignen sich beispielsweise Ether, wie Tetrahydrofuran, Amide, wie Dimethylformamid, Nitrile, wie Acetonitril, halogenierte Kohlenwasserstoffe, wie Dichlormethan, und Alkohole, wie Ethanol oder Isopropanol.
Unter manchen Umständen, beispielsweise bei Verwendung eines Säureadditionssalzes einer Verbindung der Formel II als Edukt oder wenn die Verbindung der Formel II verhältnismäßig reaktionsträge ist, kann man die Umsetzung vorteilhafterweise in Gegenwart einer Base durchführen. Als Basen eignen sich beispielsweise tertiäre Amine, wie Triethylamin, und Alkalimetallhydroxide, -carbonate und -hydrogencarbonate, wie Natrium- und Kaliumhydroxid, -carbonat oder -hydrogencarbonat. Wenn die Verbindung der Formel II verhältnismäßig reaktionsträge ist, kann man zweckmäßigerweise eine starke Base, wie ein Alkalimetallhydrid, beispielsweise Kaliumhydrid, verwenden.
(B) einen Ester der Formel:
worin R²&sup0; für eine Carboxylschutzgruppe steht, zersetzt.
R²&sup0; kann für eine beliebige übliche Carboxylschutzgruppe stehen, die ohne Beeinflussung anderer Molekülteile abgespalten werden kann. Beispiele für Carboxylschutzgruppen sind C&sub1;&submin;&sub6;-Alkylgruppen (wie Methyl, Ethyl, Propyl oder t-Butyl), Phenyl und Benzyl, wobei die Phenylgruppe jeweils gegebenenfalls 1 oder 2 Halogen-, C&sub1;&submin;&sub4;-Alkyl-, C&sub1;&submin;&sub4;-Alkoxy- oder Nitrogruppen tragen kann.
Die Zersetzung kann unter Verwendung von einem oder mehreren der an sich bekannten und üblichen Reagenzien und Bedingungen zur Umwandlung von Carbonsäureestern in Carbonsäuren erfolgen. So kann die Zersetzung zum Beispiel zweckmäßigerweise durch basenkatalysierte Hydrolyse erfolgen, beispielsweise unter Verwendung eines Alkalimetallhydroxids, wie Lithium-, Kalium- oder Natriumhydroxid, oder eines tertiären Amins, wie Triethylamin, in Gegenwart von Wasser. Die basenkatalysierte Hydrolyse kann zweckmäßigerweise in Gegenwart eines Lösungsmittels, wie eines Alkohols, beispielsweise Methanol oder Ethanol, oder eines Ethers, wie Tetrahydrofuran oder Dioxan, erfolgen. Alternativ dazu kann die Zersetzung durch säurekatalysierte Hydrolyse erfolgen, beispielsweise unter Verwendung von wäßriger Essigsäure oder Trifluoressigsäure. Die Temperatur liegt zweckmäßigerweise im Bereich von -10 bis 100ºC, beispielsweise 10 bis 50ºC. Wenn es sich bei dem Alkoholrest um t-Butyl handelt, so kann dieses zweckmäßigerweise auch durch Erhitzen, beispielsweise auf eine Temperatur im Bereich von 80 bis 150ºC, in Substanz oder in Gegenwart eines geeigneten Verdünnungsmittels, wie Diphenylether oder Diphenylsulfon, abgespalten werden. Eine Benzylgruppe kann zweckmäßigerweise durch katalytische Hydrierung abgespalten werden, beispielsweise durch Hydrierung in Gegenwart von Palladium auf Kohle bei einer Temperatur im Bereich von -10 bis 100ºC in Gegenwart eines Lösungsmittels, wie eines Alkohols, beispielsweise Methanol oder Ethanol.
(C) eine Verbindung der Formel:
worin U³ für ein Abgangsatom oder eine Abgangsgruppe steht, mit einer Verbindung der Formel:
oder einem Säueradditionssalz davon umsetzt.
Beispiele für U³ sind Halogen, wie Chlor oder Brom, und Cyano.
Beispiele für Säureadditionssalze sind z. B. die Hydrochloride.
Die Umsetzung kann zweckmäßigerweise bei einer Temperatur im Bereich von -10 bis 120ºC, vorzugsweise von 10 bis 100ºC, erfolgen. Als Lösungsmittel eignen sich beispielsweise Ether, wie Tetrahydrofuran und Dioxan, Amide, wie Dimethylformamid, Nitrile, wie Acetonitril, halogenierte Kohlenwasserstoffe, wie Dichlormethan, Alkohole, wie Ethanol, und Wasser.
Unter manchen Umständen, beispielsweise bei Verwendung eines Säureadditionssalzes einer Verbindung der Formel VIII als Edukt, kann man die Umsetzung vorteilhafterweise in Gegenwart einer Base durchführen. Als Basen eignen sich beispielsweise tertiäre Amine, wie Triethylamin, und Alkalimetallhydroxide, -carbonate und -hydrogencarbonate, wie Natrium- und Kaliumhydroxid, -carbonat oder -hydrogencarbonat.
(D) eine Verbindung der Formel
mit einer geeigneten Verbindung der Formel
oder einem reaktiven Derivat seiner Hydroxylgruppe (wie einem Halogenid, beispielsweise einem Bromid), worin X2C für eine Hydroxylgruppe oder ein reaktives Derivat davon steht, umsetzt.
Die Umsetzung erfolgt zweckmäßigerweise in Gegenwart einer starken Base, wie eines Alkalimetallhydrids, beispielsweise Natriumhydrid. Als Lösungsmittel eignen sich Amide, wie Dimethylformamid. Die Umsetzung erfolgt zweckmäßigerweise bei einer Temperatur im Bereich von 0 bis 100ºC.
Die bei den obigen Verfahren eingesetzten Zwischenprodukte sind bekannt oder können in Analogie zu bekannten Verfahren zur Herstellung von bekannten Verbindungen hergestellt werden.
So können die Verbindungen der Formel IV in Analogie zu den hier beschriebenen Verfahren (A), (c) und (D), aber mit den entsprechend geschützten Edukten, hergestellt werden.
Die Verbindung kann nach an sich gut bekannten Methoden in pharmazeutisch unbedenkliche Salze und/oder metbolisch labile Ester oder Amide davon umgewandelt werden. So kann man beispielsweise ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz bilden, indem man eine Verbindung der Formel I mit einer zur Lieferung eines physiologisch unbedenklichen Anions befähigten Säure oder einer zur Lieferung eines physiologisch unbedenklichen Kations befähigten Base umsetzt. Zur Bildung eines pharmazeutisch unbedenklichen metabolisch labilen Esters oder Amids kann man eine Verbindung der Formel I nach einer üblichen Technik verestern bzw. eine Säure oder ein reaktives Derivat davon mit dem entsprechenden Amin umsetzen.
Die Fähigkeit der Verbindung zur Inhibierung der Thrombocytenaggregation kann anhand eines Standardtests (a) belegt werden, der auf dem von Born beschriebenen Test (Nature, 1962, 194, 927-929) beruht und bei dem man:
(i) humanes thrombocytenreiches Citratplasma durch Zugabe von Adenosindiphosphat aggregiert, um eine Dosis-Reaktions-Kurve zu erstellen;
(ii) eine Dosis-Reaktions-Kurve für die ADP- stimulierte Plättchenaggregation in Gegenwart von zunehmenden Mengen einer Testverbindung (im allgemeinen im Bereich von 10&supmin;&sup5; M bis 10&supmin;¹&sup0; M) erstellt und
(iii) aus dem berechneten Wert für 50% Reaktion für die ADP-Aggregation in Gegenwart und Abwesenheit der Testverbindung einen über mehrere Konzentrationen gemittelten pA&sub2;-Wert berechnet, der die Wirksamkeit der Inhibierung der Thrombocytenaggregation für die Testverbindung anzeigt.
Der Test (a) kann zur Abschätzung der Wirkungen einer Testverbindung ex vivo auf die Aggregation von humanen Blutplättchen nach Verabreichung der Testverbindung an ein Labortier, wie eine Ratte, ein Kaninchen, ein Meerschweinchen, eine Maus oder einen Hund, abgeändert werden. So wird beispielsweise Gruppen von vier männlichen, nüchternen Alderley-Park-Wistar- Ratten eine Testverbindung oder ein geeigneter Träger oral verabreicht, und in geeigneten Zeitabständen (1, 3, 5 und 8 Stunden nach der Verabreichung) werden Tiere mit Fluothan anästhesiert und mittels Herzpunktion ausgeblutet. Nach Auffangen des Bluts in 3,2%igem Citrat (1 bis 9 Teile Vollblut) wird durch Zentrifugieren (4500 · g, 10 min) plättchenarmes Plasma (ppp) hergestellt.
Humanblut wird in 3,2%igem Trinatriumcitrat (1 bis 9 Teile Vollblut) aufgefangen und zur Herstellung von plättchenreichem Plasma (prp) zentrifugiert (200 · g, 15 min).
Gleiche Volumina (125 ul) von Ratten-ppp und Human-prp werden miteinander vermischt und mit ADP versetzt, wonach das Ganze in einem Plättchenaggregometer von BioData inkubiert (37ºC) und gerührt (900 UpM) wurde. Nach Induzierung der Aggregation mit ADP werden für Mischungen von Ratten- ppp und Human-prp von Lebewesen, denen Testverbindung oder Träger verabreicht wurde, Agonisten-EC&sub5;&sub0;-Werte berechnet. An jedem Zeitpunkt wird ein mittleres Konzentrationsverhältnis (zur Hervorrufung einer 50%igen Aggregationsreaktion in Mischungen von Ratten- ppp und Human-prp von Lebewesen, denen Antagonist verabreicht wurde, erforderliche ADP-Konzentration dividiert durch die zur Hervorrufung einer 50%igen Aggregationsreaktion in Mischungen von Ratten-ppp und Human-prp von Lebewesen, denen Träger verabreicht wurde, erforderliche ADP-Konzentration) berechnet.
Die Fähigkeit der Verbindungen der Formel I zur Inhibierung der Bindung von Fibrinogen an GP IIb-IIIa kann anhand des folgenden Standardtests (b) belegt werden, der folgendes umfaßt:
(i) Herstellung von Humanplättchenlysaten
Plättchenreiches Plasma (PRP) wird mittels Zentrifugation (1000 UpM, 15 min) von mit Säure- Citrat-Dextrose (85 mM Trinatriumcitrat, 70 mM Citronensäure, 110 mM D-Glucose) im Verhältnis von 1 Teil zu 6 Teilen Blut antikoaguliertem Vollblut geerntet. Nach Zusatz von Prostacyclin (PGI&sub2;, 1 uM) wird das PRP zentrifugiert (2400 UpM, 15 min), wonach das erhaltene Pellet in modifizierter Tyrode-Lösung (130 mM NaCl, 26 mM KCl, 12 mM NaHCO&sub3;, 0,5 mM NaH&sub2;PO&sub4;, 1 mM MgCl&sub2;, 20 mM CaCl&sub2;, 12 mM Glucose, 5 mM HEPES) mit 3,5 g/L Rinderserumalbumin, 1 uM PGI2 und 0,5 U/ml Hirudin resuspendiert wurde. Die Plättchensuspension wird zentrifugiert (2400 UpM, 15 min), wonach das erhaltene Pellet in 500 ul Lysepuffer (50 mM Octylglucosid, 10 mM HEPES, 150 mM NaCl, 1 mM CaCl&sub2;,, mM MgCl&sub2;, 1 mM PMSF, 10 mM NEM, 0,1 mM Leupeptin) resuspendiert, 15 Minuten bei 4ºC bewegt und dann 15 min bei 24.000 UpM zentrifugiert wurde. Der Überstand wird bei 4ºC gelagert, und das Pellet wird in 500 ul Lysepuffer resuspendiert. Der Zentrifugationsprozeß wird noch 3mal wiederholt, und die vereinigten Überstände werden bei -70ºC gelagert.
(ii) Rezeptor-Reinigung
Glykoprotein IIb/IIIa wird mit einer 2-ml- Affinitätssäule mit Peptid (KYGRGDS) gekoppelter CNBr-aktivierter Sepharose aus Humanplättchenlysaten isoliert. Auf die Säule wird ein 1,5-ml- Volumen Plättchenlysat aufgegeben und über Nacht bei 4ºC stehengelassen. Dann wird Puffer (30 ml, 25 mM Octylglucosid, 10 mM HEPES, 150 mM NaCl, 1 mM CaCl&sub2;, 1 mM MgCl&sub2;, 1 mM PMSF, 10 mM NEM, 0,1 mM Leupeptin) durch die Säule geleitet, wobei durchgehend 2-ml-Fraktionen aufgefangen werden. GPIIb/IIIa wird mit 12 ml Puffer mit HHLGGAKQAGDV (2 mg/ml, pH 7,5) eluiert, wonach die Säule mit 4 ml Puffer gewaschen und das restliche GPIIb/IIIa mit 12 ml Puffer mit GRGDSPG (1 mg/ml pH 7,5) eluiert wird. Die Säule wird schließlich mit 20 ml Puffer gewaschen und kann für drei derartige Präparationen verwendet werden. GPIIb/IIIa-haltige Fraktionen werden mittels Gelelektrophorese und Immunoblotting identifiziert, vereinigt und bei -70ºC gelagert.
(iii) GPIIb/IIIa-ELISA
Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen werden mit 100 ul in Beschichtungspuffer (20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 1 mM CaCl&sub2;, pH 7,4) verdünntem gereinigtem Humanplättchenfibrinogenrezeptor (GPIIb/IIIa) beschichtet und über Nacht bei 4ºC belassen. Die Platten werden mit Waschpuffer (50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 2 mM CaCl&sub2;, pH 7,4) gewaschen, wonach die unspezifische Bindung durch Zugabe von 200 ul 2%igem BSA blockiert wird (2 Stunden, 30ºC). Die Platten werden vor der Inkubation (2 Stunden, 30ºC) mit 100 ul biotinyliertem Fibrinogen (10 nm), das entweder Testverbindung oder Träger enthielt, gewaschen. Die Platten werden gewaschen, mit Streptavidin (5 ug/ml, 1 Stunde, Umgebungstemperatur) inkubiert, dann erneut gewaschen und mit 100 ul biotinylierter Meerrettichperoxidase (0,1 ug/ml, 1 Stunde, Umgebungstemperatur) versetzt. Dann werden die Platten gewaschen, wonach in jede Vertiefung 150 ul einer unmittelbar vorher hergestellten Mischung aus gleichen Volumina Peroxidasesubstrat (0,4 g/l 3,5- Tetramethylbenzidin) und H&sub2;O&sub2; (0,02%ig) gegeben werden. Nach 10-15 min Farbentwicklung werden die optischen Dichten bei 650 nM abgelesen.

Abkürzungen

PMSF Phenylmethylsulfonylfluorid
HEPES (N-[2-Hydroxyethyl]piperazin-N-[2- ethansulfonsäure]
NEM N-Ethylmaleimid.
Die zur Hervorrufung von 50% Inhibierung der Bindung von biotinyliertem Fibrinogen erforderliche Konzentration an Verbindung wird berechnet und als pIC&sub5;&sub0;-Wert (-log (IC&sub5;&sub0;)) ausgedrückt.
Testverbindungen, die bei dieser Prüfung eine Aktivität zeigen, weisen im allgemeinen einen pIC&sub5;&sub0;-Wert von mehr als etwa 4,0 auf.
Die Wirkungen jeder der hier beispielhaft aufgeführten Verbindungen der Formel I in den obigen Tests sind in der nachstehenden Tabelle aufgeführt. Wo ein Wertebereich angegeben ist, ist die Verbindung mehr als einmal getestet worden. Ein Strich (-) zeigt an, daß eine Verbindung nicht getestet worden ist. TABELLE DER ERGEBNISSE DER BIOLOGISCHEN TESTS
Wie weiter oben bereits angegeben, kann die Verbindung bei der Therapie oder Prävention von mit Zelladhäsion (insbesondere Thrombocytenaggregation) verbundenen Krankheiten, beispielsweise Venen- oder Arterienthrombose (z. B. Lungenembolie, Schlaganfall und thrombotischen Ereignissen in Begleitung von instabiler Angina und transitorischen ischämischen Attacken), Myokardinfarkt, Atherosklerose, Thromboembolie und Reokklusion während und nach thrombolytischer Therapie, verwendet werden. Die Verbindung eignet sich möglicherweise auch zur Prävention von Reokklusion und Restenose nach perkutaner transluminaler Koronarangioplastie (PTCA) und koronaren Bypass- Operationen. Es versteht sich außerdem, daß die Verbindung möglicherweise zur Behandlung von anderen Krankheiten, die durch Bindung von Adhäsionsmolekülen an GPIIb/IIIa vermittelt werden, beispielsweise Krebs, geeignet ist.
Gemäß einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung daher ein Verfahren zur Inhibierung der Thrombocytenaggregation bei einem Warmblüter, der einer derartigen Behandlung bedarf, bereit, bei dem man eine wirksame Menge von (RS)-3-Methyl-4-[4-(4-pyridyl)- piperazin-1-yl)phenoxybuttersäure [der Verbindung] oder eines metabolisch labilen Esters oder Amids davon oder eines pharmazeutisch unbedenklichen Salzes verabreicht.
Gemäß noch einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung ein Verfahren zur Inhibierung der Bindung von Fibrinogen an GPIIb/IIIa bei einem Warmblüter, der einer derartigen Behandlung bedarf, bereit, bei dem man eine wirksame Menge der Verbindung oder eines metabolisch labilen Esters oder Amids davon oder eines pharmazeutisch unbedenklichen Salzes davon verabreicht.
Gemäß einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung die Verwendung der Verbindung oder eines metabolisch labilen Esters oder Amids davon oder eines pharmazeutisch unbedenklichen Salzes davon zur Herstellung eines Arzneimittels zur Prävention oder Behandlung einer mit Thrombocytenaggregation verbundenen Krankheit bereit.
Gemäß noch einem weiteren Aspekt stellt die Erfindung die Verwendung der Verbindung oder eines metabolisch labilen Esters oder Amids davon oder eines pharmazeutisch unbedenklichen Salzes davon zur Herstellung eines Arzneimittels zur Prävention oder Behandlung einer mit der Bindung von Fibrinogen an GP IIb/IIIa verbundenen Krankheit bereit.
Im allgemeinen wird die Verbindung zu diesem Zweck auf oralem, rektalem, topischem, intravenösem, subkutanem oder intramuskulärem Weg oder per Inhalation so verabreicht, daß sich je nach Verabreichungsweg, Alter und Geschlecht des Patienten und der Schwere des zu behandelnden Leidens eine Dosis im Bereich von 0,01 bis 50 mg/kg Körpergewicht ergibt.
Die Verbindung wird im allgemeinen in Form einer pharmazeutischen Zusammensetzung verwendet, die die Verbindung oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon gemäß obiger Definition zusammen mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Verdünnungsmittel oder Träger enthält. Eine derartige Zusammensetzung bildet einen weiteren Aspekt der Erfindung und kann in verschiedenen Dosierungsformen vorliegen. So kann sie beispielsweise zur oralen Verabreichung in Form von Tabletten, Kapseln, Lösungen oder Suspensionen, zur topischen Verabreichung in Form von Creme oder Salben oder als Transdermalpflaster (Hautpflaster), zur rektalen Verabreichung in Form von Suppositorien, zur intravenösen oder intramuskulären Injektion in Form einer sterilen Lösung oder Suspension, zur inhalativen Verabreichung in Form eines Aerosols oder einer Verneblerlösung oder -suspension und zur Verabreichung durch Insufflation in Form eines Pulvers zusammen mit pharmazeutisch unbedenklichen inerten festen Verdünnungsmitteln, wie Lactose, vorliegen. Je nach Verabreichungsweg kann die Zusammensetzung beispielsweise 0,1 bis 99,9 Gew.-% der Verbindung enthalten.
Die pharmazeutischen Zusammensetzungen sind unter Verwendung von an sich gut bekannten pharmazeutisch unbedenklichen Verdünnungsmitteln und Trägern nach üblichen Verfahrensweisen erhältlich. Tabletten und Kapseln zur oralen Verabreichung können zweckmäßigerweise mit einem magensaftresistenten Überzug, der beispielsweise Celluloseacetatphthalat enthält, versehen werden, um den Kontakt des Wirkstoffs mit Magensäuren auf ein Minimum zu reduzieren.
Die Verbindung kann zusammen mit einem oder mehreren Agenzien, die bekanntlich für zu behandelnde Krankheiten oder Zustände von Wert sind, verabreicht oder formuliert werden; so kann beispielsweise die Gegenwart eines bekannten Thrombocytenaggregationsinhibitors (z. B. Aspirin, ein Thromboxanantagonist oder ein Thromboxansynthaseinhibitor), Hipolipidämikums, Antihypertonikums, Thrombolytikums (wie Streptokinase, Urokinase, Prourokinase, Gewebsplasminogenaktivator und Derivaten davon), beta-adrenergen Blockers oder Vasodilatators in einer erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zusammensetzung zur Verwendung bei der Behandlung einer Herz- oder Gefäßkrankheit oder eines Herz- oder Gefäßzustands zweckmäßig sein.
Neben ihrer Verwendung in der therapeutischen Medizin eignet sich die Verbindung auch als pharmazeutisches Werkzeug bei der Entwicklung und Standardisierung von Testsystemen zur Abschätzung der Wirkungen von Adhäsionsmolekülen in Labortieren, wie Katzen, Hunden, Kaninchen, Affen, Ratten und Mäusen, als Teil der Suche nach neuen therapeutischen Mitteln. Die Verbindungen der Formel I können aufgrund ihrer thrombocytenaggregationsinhibierenden Eigenschaften auch als Hilfsmittel bei der Blutlagerung und zur Erhaltung der Lebensfähigkeit von Blut und Blutgefäßen in Warmblütern (oder Teilen davon) unter künstlichem extrakorporalem Kreislauf, beispielsweise bei Glieder- oder Organtransplantationen, eingesetzt werden. Bei Verwendung für diesen Zweck wird die Verbindung oder ein physiologisch unbedenkliches Salz davon im allgemeinen so verabreicht, daß im Blut eine stationäre Konzentration im Bereich von beispielsweise 0,1 bis 10 mg pro Liter erreicht wird.
Die Erfindung wird nun anhand der folgenden Beispiele näher erläutert, ohne sie zu beschränken, wobei, sofern nicht anders vermerkt:
(i) Aufkonzentrierungen und Eindampfungen am Rotationsverdampfer im Vakuum durchgeführt wurden;
(ii) Arbeiten bei Umgebungstemperatur, d. h. im Bereich von 18 bis 26ºC, durchgeführt wurden;
(iii) Säulenchromatographie an Kieselsäure (Merck Art. 9385) von E. Merck und Co., Darmstadt, Deutschland, und neutralem Aluminiumoxid (ICN Alumina N, Akt. III und IV) von ICN Biomedicals GmbH, D-3440 Eschwege, Deutschland, durchgeführt wurde;
(iv) Ausbeuten lediglich zur Veranschaulichung angegeben sind und nicht unbedingt das durch sorgfältige Verfahrensentwicklung erreichbare Maximum darstellen;
(v) Protonen-NMR-Spektren in der Regel bei 200 MHz oder 250 MHz in Dimethylsulfoxid-d&sub6; unter Verwendung von Tetramethylsilan (TMS) als internem Standard aufgenommen und als chemische Verschiebungen (delta-Werte) in Teilen pro Million relativ zu TMS ausgedrückt wurden, wobei zur Bezeichnung der Hauptsignale übliche Abkürzungen verwendet wurden: s: Singulett; m: Multiplett; t: Triplett; br: breit; d: Dublett; und
(vi) Ether für Diethylether, THF für Tetrahydrofuran, DMF für N,N-Dimethylformamid, DMSO für Dimethylsulfoxid, TFA für Trifluoressigsäure, HOBT für 1-Hydroxybenzotriazol und NBA für m-Nitrobenzylalkohol steht.
(vii) Trocknen mit PS-Papier bezieht sich auf die Verwendung von PS-Phasentrennpapier von Whatman.

BEISPIEL 1: (RS)-3-Methyl-4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1- yl]phenoxybuttersäure-trifluoracetat

Eine gerührte Suspension von 4-[(4-Pyridyl)- piperazin-1-yl]phenol (1,02 g) in trockenem DMF (10 ml) wurde mit Natriumhydrid (60%ige Dispersion in Mineralöl, 0,16 g) versetzt und 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Die erhaltene Lösung wurde mit 4-Brom-3-methylbuttersäureethylester versetzt und 16 Stunden gerührt. Der nach Abdampfen des Lösungsmittels verbleibende Rückstand wurde zwischen Wasser und Dichlormethan verteilt. Nach Abzentrifugieren von Unlöslichem wurde die organische Schicht über Phasentrennpapier (Whatman IPS) filtriert und der Rückstand mittels Flash-Chromatographie an Kieselgel unter Elution mit Methanol/Dichlormethan/konzentriertem Ammoniak (50/950/5) gereinigt, was 3-Methyl-4-[4-(4- pyridyl)piperazin-1-yl]phenoxybuttersäureethylester (0,27 g) ergab, welcher in Methanol (3 ml) und wäßrigem Natriumhydroxid (1 N, 2 ml) 2 Stunden bei Raumtemperatur hydrolysiert wurde. Der nach Eindampfen der Lösung verbleibende Rückstand wurde mittels Umkehrphasen-HPLC (Wasser/Acetonitril/0,1%-TFA-Gradient) gereinigt, was ein Glas ergab, das beim Triturieren mit Ether auskristallisierte, was die Titelverbindung (0,08 g) ergab: Fp. 169-171ºC; NMR (DMSO-d&sub6;) δ 13,45 (1H, breit); 12,07 (1H, breit); 8,27 (2H, d); 7,28 (2H, d); 6,9 (4H, m) ; 3,80 (6H, m); 3,16 (4H, t); 2,45 (1H, m); 2, 37 (1H, m) ; 2,12 (1H, m); 1,0 (3H, d); m/e 356 (M+H)&spplus;; Berechnet für C&sub2;&sub2;H&sub2;&sub5;N&sub3;O&sub4;F&sub3;. 0,5 H&sub2;O: C 55,2; H 5,6; N 8,9. Gefunden: C 55,3; H 5,6; N 8,7%.

BEISPIEL 2

Als beispielhafte pharmazeutische Dosierungsformen, die zur Darbietung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur therapeutischen oder prophylaktischen Verwendung geeignet sind, seien die folgenden genannt, die nach an sich gut bekannten und üblichen Verfahrensweisen erhältlich sind.
a)

Tablette I mg/Tablette

Wirkstoff 1,0
Lactose Ph. Eur. 93,25
Croscarmellose-Natrium 4,0
Maisstärkepaste (5% w/v wäßrige Paste) 0,75
Magnesiumstearat 1,0
b)

Tablette II mg/Tablette

Wirkstoff 50
Lactose 223,75
Croscarmellose-Natrium 6,0
Maisstärke 15,0
Polyvinylpyrrolidon (5% w/v wäßrige Paste) 2,25
Magnesiumstearat 3,0
c)

Tablette III mg/Tablette

Wirkstoff 100
Lactose 182,75
Croscarmellose-Natrium 12,0
Maisstärkepaste (5% w/v wäßrige Paste) 2,25
Magnesiumstearat 3,0
d)

Kapsel mg/Kapsel

Wirkstoff 10
Lactose Ph. Eur. 488,5
Magnesiumstearat 1,5
e)

Injektion mg/ml

Wirkstoff (Säureadditionssalz) 1,0
Natriumchlorid 9,0
Gereinigtes Wasser ad 1,0 ml

Claims

1. (RS)-3-Methyl-4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]- phenoxybuttersäure oder ein metabolisch labiler Ester oder ein metabolisch labiles Amid davon.

2. (RS)-3-Methyl-4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]- phenoxybuttersäure oder ein pharmazeutisch unbedenkliches Salz davon.

3. (RS)-3-Methyl-4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]- phenoxybuttersäure.

4. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zur Verwendung bei der medizinischen Therapie.

5. Pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 zusammen mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Verdünnungsmittel oder Träger.

6. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 bei der Herstellung eines Arzneimittels zur Prävention oder Behandlung einer mit Thrombocytenaggregation verbundenen Krankheit.

7. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 bei der Herstellung eines Arzneimittels zur Prävention oder Behandlung einer mit der Bindung von Fibrinogen an Glykoprotein IIb/IIIa verbundenen Krankheit.