DE538049T1 - Hochmolekulares Pullulan und Verfahren zur seiner Herstellung. - Google Patents
Hochmolekulares Pullulan und Verfahren zur seiner Herstellung.Info
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Claims (19)
1. Verfahren zur Gewinnung eines biologisch reinen Kulturstamms von Aureobasidium pullulans, der bei der Kultivierung
(nur) äußerst wenig Pigment produziert, bei welchem man
a) mindestens einen Stamm von Aureobasidium pullulans
vom Wildtyp aus natürlichen Quellen sammelt; . b) den gesammelten Stamm zur Anreicherung von.als hefeartige
Pilzzellen wachsenden Organismen Fermentationsbedingungen unterwirft und die hierbei gebildeten
hefeartigen Zellen abtrennt;
c) Kolonien aus den abgetrennten hefeartigen Zellen wachsen läßt;
d) durch visuelle Betrachtung Kolonien aus Stufe c), die
hefeartige Zellen enthalten und im Vergleich zu den anderen Zellen eine verminderte Pigmentierung aufweisen,
selektiert;
e) die selektierten Kolonien auf ihre Pigmentproduktion testet und
g) das in einer Tauchkultur am wenigsten Pigment produzierende Isolat selektiert.
2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei man vor Stufe c) die Kolonien mit Ethidiumbromid behandelt.
3. Biologisch reiner Kulturstamm von Aureobasidium pullulans, erhältlich nach dem Verfahren gemäß Anspruch 1.
4. Biologisch reiner Kulturstamm von Aureobasidium pullulans, erhältlich nach dem Verfahren gemäß Anspruch 2.
5. Verfahren zur Herstellung von Pullulan, bei welchem man den reinen Kulturstamm gemäß Anspruch 3 in einer Fermentationsbrühe
Fermentationsbedingungen unterwirft und das Pullulan aus der Brühe sammelt.
6. Verfahren zur Herstellung von Pullulan, bei welchem man den reinen Kulturstamm gemäß Anspruch 4 in einer Fermentationsbrühe
Fermentationsbedingungen unterwirft und das Pullulan aus der Brühe sammelt.
7. Verfahren nach Anspruch 5 oder 6, wobei man den pH-Wert
der Fermentationsbrühe nach seiner Stabilisierung auf etwa 7,0 einstellt.
8. Verfahren nach Anspruch 5 oder 6, wobei man das Pullulanprodukt
erntet und ausreichend lange und auf eine ausreichende Temperatur erwärmt, um die darin enthaltenen
und das Molekulargewicht des Pullulans senkenden Enzyme zu deaktivieren.
9. Praktisch nicht-pigmentiertes Pullulan eines durchschnittlichen
Molekulargewichts von mindestens etwa 8 &khgr; &Igr;&Ogr;5.
10. Pullulan nach Anspruch 9, wobei das durchschnittliche Molekulargewicht mindestens etwa 1 &khgr; &Igr;&Ogr;6 beträgt.
11. Pullulan nach Anspruch 9, wobei das durchschnittliche Molekulargewicht mindestens etwa 2 &khgr; &Igr;&Ogr;6 beträgt.
12. Pullulan nach Anspruch 9, wobei das durchschnittliche Molekulargewicht mindestens etwa 4 &khgr; &Igr;&Ogr;6 beträgt.
13. Pullulan nach Anspruch 9, wobei das durchschnittliche
Molekulargewicht mindestens etwa 6 &khgr; &Igr;&Ogr;6 beträgt.
14. Pullulan nach Anspruch 9, wobei das durchschnittliche I
Molekulargewicht etwa 6 &khgr; &Igr;&Ogr;6 beträgt. ·
15. Pullulan eines durchschnittlichen Molekulargewichts von mindestens etwa 4 &khgr; 106, erhältlich nach dem Verfahren
gemäß Anspruch 5 oder 6.
16. Pullulan nach Anspruch 9 oder 15 in Faserform.
17. Pullulan nach Anspruch 9 oder 10 in Filmform.
18. Isolierte, praktisch biologisch reine Mikrobenkultur, ausgewählt aus der Gruppe solcher mit folgenden identifizierenden
Eigenschaften: A. pullulans ATCC 74100, A. pullulans ATCC 74101, A. pullulans 74102, A. pullulans
74103, A. pullulans 74104 und A. pullulans 74105 und deren Mutanten, wobei die betreffenden Kulturen bei der
Züchtung in einem flüssigen Wachstumsmedium mit assimilierbaren Quellen von Kohlenstoff, Stickstoff und anorganischen
Substanzen die Fähigkeit zur Eigenreproduktion und zur Produktion von Pullulan in isolierbaren Mengen
aufweisen.
19. Isolierte und praktisch biologisch reine Mikrobenkulturen,
ausgewählt aus der Gruppe mit folgenden identifizierbaren Eigenschaften: A. pullulans ATCC 74100, A.
pullulans 74101 und A. pullulans ATCC 74105 und deren Mutanten, wobei die Kulturen bei Züchtung unter aeroben
Bedingungen in einem flüssigen Wachstumsmedium mit assimilierbaren
Quellen von Kohlenstoff, Stickstoff und anorganischen Substanzen die Fähigkeit zur Eigenreproduktion
und zur Produktion von Pullulan in isolierbaren Mengen und die DNA-Restriktionsmuster der Spuren b, c und d
von Figur 2B aufweisen.
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