DE2714157A1

DE2714157A1 - Substituierte chinoxaline, verfahren zu deren herstellung und arzneimittel gegen cholera, welche diese verbindungen enthalten

Info

Publication number: DE2714157A1
Application number: DE19772714157
Authority: DE
Inventors: Andrea Bottazzi; William Ferrari; Aldo Garzia
Original assignee: Istituto Chemioterapico Italiano SpA
Current assignee: Archimica SpA
Priority date: 1976-03-31
Filing date: 1977-03-30
Publication date: 1977-10-27
Also published as: GB1536393A; DK143701B; NZ183626A; NL7703465A; IE45275L; ES457359A1; PH12676A; IN144232B; CA1069899A; DK140377A; JPS5437154B2; JPS52139087A; BE852913A; MX4659E; AR212615A1; DK143701C; IE45275B1

Description

HOFFMANN · EITLE & PARTNER

PATENTANWÄLTE Z / \ H \ Ό

DR. ING. E. HOFFMANN (1930-1976) · D I PL.-I NG. W. F. ITLE · OR. RER. NAT. K. HOFFMANN · Dl PL.-ING. W. LEH N

DIPL.-ING. K. FOCHSLE · DR. RER. NAT. B. HANSEN ARABELLASTRASSE 4 (STERNHAUS) · D-8000 MO N C H E N 81 · TELEFON (089) 911087 ■ TELEX 05-29619 (PATH E)

29 119 o/wa

ISTITUTO CHEMIOTERAPICO ITALIANO S.p.A. MAILAND / ITALIEN

Substituierte Chinoxaline, Verfahren zu deren Herstellung und Arzneimittel gegen Cholera, welche diese Verbindungen enthalten

Die Erfindung betrifft Verbindungen, die zur Bekämpfung der Cholera geeignet sind. Sie betrifft weiterhin ein Verfahren zur Herstellung dieser Verbindungen, sowie Arzneimittel, welche diese Verbindungen enthalten.

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Cholera ist eine durch Vibrio-Organismen verursachte Infektionskrankheit. Obwohl die Infektion durch Kontakt von Personen sich ausbreiten kann, wird sie meistens durch verseuchtes Wasser verursacht, wobei die Verseuchung im allgemeinen durch Abwasser, welches die Organismen enthält, bewirkt wird. Im allgemeinen kann Cholera durch die Verabreichung geeigneter Arzneimittel an Personen, welche unter dieser Krankheit leiden, behandelt werden. Es ist aber sehr vorteilhaft, wenn man Personen, die einer Cholera seuche ausgesetzt sind, prophylaktisch behandeln kann und wenn man das verunreinigte Wasser behandeln kann, um das Auftreten der Krankheit zu vermeiden oder erheblich zu vermindern.

Eine Aufgabe der Erfindung ist es, Verbindungen und Zusammensetzungen, welche diese Verbindungen enthalten, zur Verfügung zu stellen, welche zur Bekämpfung der Cholera geeignet sind.

Eine weitere Aufgabe der Erfindung ist es, substituierte Chinoxaline zur Verfügung zu stellen, welche prophylaktisch zur Bekämpfung der Cholera verabreicht werden können.

Eine weitere Aufgabe der Erfindung besteht darin, substituierte Chinoxaline für eine prophylaktische Verabreichung gegen Cholera zur Verfügung zu stellen, durch welche der choleraverursachende Mechanismus bekämpft wird, ohne dass das Gleichgewicht der in der Umgebung enthaltenen Organismen zerstört wird, beispielsweise, das beim Menschen vorhandene biologische Gleichgewicht, wie es etwa bei der

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Eingeweidaflora vorliegt. Weitere Ziele der Erfindung gehen aus der nachfolgenden Beschreibung vor.

Die Erfindung besteht in der Auffindung von substituierten Chinoxalinen (die nachfolgend "C-Verbindungen" genannt werden) der allgemeinen Formel

CH = CH

worin R Wasserstoff oder Niedrigalkyl mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen bedeutet, beispielsweise Äthyl, Propyl und dergleichen, und die zur Bekämpfung von choleraverursachenden Organismen geeignet sind. Sie sind besonders geeignet für eine prophylaktische Verabreichung vor der Entwicklung von Cholerasymptomen. Der Ausdruck "niedrig", wie er hier verwendet wird, steht für eine Kette aus 1 bis 5 Kohlenstoffatomen.

Die C-Verbindungen der Erfindung schliessen ein, ohne dass sie darauf beschränkt sind

CO-1: 2-/2-(2-Amino-4-pyrimidinyl)äthenyl7-chinoxalin-1 ,4-dioxid

CO-2: 2-/2-(2-Amino-6-methyl-4-pyrimidinyl)äthenyl/-chinoxalin-1,4-dioxid.

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Diese Verbindungen werden hergestellt, indem man, vorzugs weise in einem Molverhältnis von annähernd 1:1 Chinoxalin di-N-oxid-2-carboxyaldehyd oder dessen Niedrigalkylacetal mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

NH

H₃C

in welcher R die vorher angegebene Bedeutung hat, umsetzt.

Die Umsetzung wird vorzugsweise in Gegenwart eines stark sauren Katalysators und eines geeigneten Lösungsmittels, beispielsweise einer Niedrigalkansäure, wie Ameisensäure oder Essigsäure, vorgenommen. Die Umsetzung findet bei Reaktionstemperaturen, bei denen die Umsetzung bewirkt wird, statt und diese Temperaturen liegen im Bereich von Umgebungstemperatur, beispielsweise 0 C bis zu höheren Temperaturen, beispielsweise 80°C,oder darüber und vorzugsweise bei etwa 25 bis 50°C oder darüber. Nach Beendigung der Umsetzung, d.h. nach etwa 10 bis 24 Stunden, wird das Produkt vorteilhaft durch Kristallisation aus Wasser gewonnen.

Geeignete Katalysatoren für die vorliegende Erfindung sind im allgemeinen starke Säuren und alle bekannten starken Säuren können verwendet werden. Geeignete starke Säuren sind beispielsweise Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure,

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Schwefelsäure, Salpetersäure, Arylsulfonsäure, wie Toluolsulfonsäure, Trichloressigsäure und dergleichen, ohne dass diese Aufzählung limitierend sein soll. Die Säuren werden im allgemeinen in einem Verhältnis von etwa 0,5 bis 2 Mol Säure pro Mol der Chinoxalin-Ausgangsverbindung eingesetzt.

Der Chinoxalin-di-N-oxid-2-carboxyaldehyd und dessen Acetale, die als Ausgangsverbindungen für die Herstellung der erfindungsgemässen Verbindungen verwendet werden, sind bekannt. Die Acetale können nach der in der GB-PS 1 305 138, Beispiel XIII, beschriebenen Verfahrensweise hergestellt werden. Der Aldehyd wird in US-PS 3 371 090 beschrieben.

Die Pyrimidin-Verbindungen, die als Ausgangsmaterial verwendet werden, sind in gleicher Weise bekannt. Sie sind im Handel erhältlich und die üblichen Reinheitsgrade sind geeignet. Sie sollen aber vorzugsweise guter Qualität sein und frei von störenden Materialien.

Die C-Verbindungen der vorliegenden Erfindung sind zur Bekämpfung von Cholera verursachenden Organismen, beispielsweise Vibrio-Organismen, geeignet. Die Verbindungen haben eine niedrige Toxizität und können oral verabreicht werden für eine prophylaktische Kontrolle der Cholera. Sie sind vorteilhaft, weil sie nicht nur die Cholera verursachenden Organismen bekämpfen, sondern selektiv die Cholera verursachenden Organismen bekämpfen können, ohne nachteilige Wirkungen auf das Gleichgewicht, wie es in einer Umgebung, beispielsweise dem menschlichen Körpersystem, wünschenswert ist.

Für eine orale Verabreichung wird eine C-Verbindung im allgemeinen zu einer pharmazeutischen Einzeldosierung, wie einer

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■<■

Pille, Tablette, Kapsel und dergleichen, formuliert, zusammen mit einem pharmazeutisch annehmbaren Träger. Solche Einzeldosierungen enthalten beispielsweise etwa 50 bis etwa 500 mg einer C-Verbindung und sie können in üblicher bekannter Weise hergestellt werden. Die Einzeldosierungsformen enthalten somit die normalen Verdünnungsmittel, Trägermaterialien, Schmiermittel und Extender, wie sie üblicherweise beim Formulieren von derartigen Arzneimitteln verwendet werden. Typische Träger sind Feststoffe, wie Lactose oder Stärke, und diese können in Kapseln oder Tabletten in Mengen von etwa 100 bis 300 mg pro Einzeldosierung verwendet werden. Im allgemeinen wird täglich eine Dosierung von etwa 1 bis 6 Kapseln oder Tabletten für geeignet gehalten. Die bevorzugte tägliche Dosis liegt bei etwa 0,5 bis 3 g pro Tag während 3 bis 5 Tagen.

Die erfindungsgemässen Verbindungen sind auch zum Sterilisieren von Vibrrio-Organismen enthaltendem Wasser geeignet. Hierbei werden oberhalb 10, vorzugsweise etwa 30 bis 100 Mikrogramm pro ml Wasser verwendet.

Die Erfindung wird in den nachfolgenden Beispielen beschrieben, jedoch sind diese Beispiele nur beschreibend und sollen nicht limitierend ausgelegt werden.

Beispiel 1

In einem Reaktionsgefäss werden 15 ml 99 %-ige Ameisensäure, 1,15 g 96 %-ige Schwefelsäure, 1,09 g (0,01 Mol)

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2-Amino-4-methyl-pyrimidin und 2,3 6 g (0,01 Mol) Chinoxalin-di-N-oxid-2-carboxyaldehyd-dimethylacetat vorgelegt. Die Mischung wird auf 45 bis 50°C erhitzt und bei dieser Temperatur 10 Stunden gehalten. Sie wird dann gekühlt, mit 3 5 ml kaltem Wasser verdünnt und der pH wird mit Natriumbicarbonat oberhalb 5 eingestellt. Es bildet sich ein gelber kristalliner Niederschlag. Dieser wird filtriert und mit Wasser gewaschen. Man erhält in 64 %-iger Ausbeute 1,8 g 2-^2-(2-Amino-4-pyrimidyl)äthenyl7chinoxalin-1,4-dioxid mit dem Schmelzpunkt 237 bis 23 9°C (unter Zersetzung).

Das Produkt, das mit CO-1 der Einfachheit halber bezeichnet wird, wurde geyen 5 Stämme von vibrio cholerae bei Konzentrationen von 10, 30 und 100,ug/ml geprüft. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 angegeben.

Versuche wurden auch durchgeführt, um festzustellen, ob die Verbindung gegen vibrio cholerae El Tor Ogawa 6 in Gegenwart von Abwasser wirksam ist. Abwässer wurden aus dem Abwassersystem der Stadt Modena, Italien, erhalten. Diese Abwasser wurden zentrifugiert, um die Feststoffe abzutrennen und die überstehende Flüssigkeit wurde für den Versuch verwendet. Die Ergebnisse sind in Tabelle 2 angegeben. Bei 10 .ug/ml von CO-1 fand kein Wachstum bei drei der Organismen nach 48 Stunden statt und nur ein Randwachstum bei den verbleibenden zwei Organismen bei 100,ug/ml.

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co

O « CD (O

Tabelle 1 Wirkung von verschiedenen Stämmen von vibrio cholerae

Verbin dung	Konzentra tion ,ug/ml	Classical Inaba 3 5	Classical Ogawa 41	El Tor Ogawa 6	El Tor Ogawa 8	El Tor Inaba 4
CO-1	100	-	-	+	-	+
	30	-	-	-	-	++
	10	-	—	++	—	++
CO-2	100	-	—	+	-	+
	30	-	-	-	-	++
	10	-	-	. ++	-	++

- : Kein Wachstum nach 48 h bei 37^UC + : Gerade erkennbares Wachstum

+ : Deutliches Wachstum aber in geringerem Masse als bei einer unbehandelten Kontrollprobe

++: Gleiches Wachstum wie bei der unbehandelten Kontrollprobe

cn

Tabelle 2

Probe	Konzentra tion von CO-1	Wirkung nach	48 h	5 Tagen
Kontroll+	—	24 h	+++	+++
Vibrion		+++
Abwasser	-
Abwasser+
Vibrion	-		+++	+++
Abwasser+		+++
Vibrion	5 WmI
Abwasser+
Vibrion	10 f/ml
Abwasser+
Vibrion	20 WmI
Abwasser+
Vibrion	30 y/ml		——
———

Die Verbindungen wurden auf akute Toxizität bei verschiedenen Verabreichungsarten bei vier Tierarten, nämlich bei Mäusen, Ratten, Meerschweinchen und Kaninchen geprüft. Es wurde festgestellt, dass die Verbindungen eine niedrige
Toxizität haben. Die Ergebnisse sind in den Tabellen 3, 4, 5 und 6 angegeben.

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Tabelle 3

Aktue Toxizität von CO-1 bei weiblichen Mäusen

Dosie rung mg/kg	Tote/Behandelte Tiere nach	2 Tagen	4 Tagen	7 Tagen
	1 Tag	toneale Ver,	abreichung
2000	endoperi			6/6
1000	6/6	6/6		6/6
500				6/12
250				0/18
		ale Verabre	ichung
O(x)	ösophage			0/6
4000			1/12	1/12
2000				0/12
1000				0/12

(x) Hierbei wurde nur der Trägerstoff dem Magen zugeführt.

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Tabelle

Akute Toxizität von CO-1 bei Ratten

a. 1. Experiment

Ge	Verabreichungs	mg/kg	tot/behan	Körperge	(m+SEM) Be	Statisti
schlecht	route		delt inner	wicht bei	endigung	sche Bedeu
			halb 21 Tagen	Beginn in g		tung (°)
M	ösophageal	4000	0/4	234,5+13,8	288,7+13,8	t > 0,05
M	ösophageal	0(x)	1/4	233,7+ 3,7	331,0+ 0,5
W	ösophageal	400C	0/4	201,2+ 4,2	238,2+12,1	t > 0,05
W	ösophageal	0(x)	1/4	189,2+ 3,9	230,0+10,5
M	endoperitoneal	500	1/4	234,0+ 6,2	314,3+10,3	t > 0,05
M	endoperitoneal	0(x)	0/4	230,0+ 5,7	324,0+ 8,7
W	endoperitoneal	500	2/4	206,2+ 8,7	286,O⁼272,O	t > 0,05
W	end iper itoneal	O(x)	0/4	207,5+ 4,3	253,5+ 7,7

(x) Nur das Trägermaterial wurde mittels dieser Route zugegeben (°) Ein Studenten t Versuch

b. 2. Experiment

Ge schlecht	Verabreichungs route	mg/kg	tot/behan delt inner halb 7 Tagen	Körperge wicht bei Beginn in g	(+ SE) Beendigung
SSSS	ösophageal ösophageal i ntr aper i toneal intraperitoneal	4000 4000 500 500	0/4 0/4 2/4 . 0/4	222,5+ 6,2 252,0+16,6 226,2+ 6,8 232,5+ 5,9	231 ,7+15,7 253,5+12,1 225,0-212 218,2+ 7,0

Fortsetzung Tabelle

c. Cumulative Daten, unabhängig vom Geschlecht des Tieres

Verabreichungs route	mg/kg	tot/behandelt inner halb 7 Tagen
ösophageal ösophageal intraperitoneal intraperitoneal	O(x) 4000 O(x) 500	0/8 0/16 0/8 4/16

O CO OO *■» CO

O CD O)

(x) Nur das Trägermaterial wurde verabreicht

Ui I

(Jl

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Tabelle 5

Akute Toxizität von CO-1 beim Meerschweinchen durch ösophageale Verabreichung

Dosierung	Tot/Behandelt innerhalb 21 Tagen
500 1000 2000 4000 O(x)	0/4 1/4 5/6 6/6

(x) Nur das Trägermaterial wurde verabreicht

	Tabelle 6	Körpergewicl· bei Beginn	it in g (m+SE) bei Beendigung
Akute		2250-2150 2037+104,3 2135+74 2OOO-21OO	2180-2140 1922,5+71,5 2262+2Ϊ5 165Ο⁼155Ο
durch	Toxizität von CO-1 beim Kaninchen
	ösophageale Verabreichung
Dosierung mg/kg
2000 1000 O(x) 500	Tot/Behandelt innerhalb 7 Tagen
0/2* 0/4 0/4 0/2

(χ) Nur das Trägermaterial wurde verabreicht

χ Von 7 behandelten Tieren waren 2 tot innerhalb 4 Tagen.

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Aufgrund der günstigen akuten Toxizitätsdaten wurden die Verbindungen subakut in relativ grossen Mengen an Mäuse und Ratten 15 Tage lang verabreicht. Die Daten wurden aufgezeichnet hinsichtlich der Wirkung auf die Zahl der Toten, das Gewicht, die Leber und die Nieren. Die Daten sind in Tabelle 7 und 8 angegeben.

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Tabelle 7

Subakute Toxizität von CO-1 bei der Maus

Tägliche Dosierung: 500 mg CO-1 durch Magensonde für 15 Tage

Orale
Behandlung

Träger

CO-1, 500 mg/
kg/Tag

Tot/Behandelt

0/10
0/10

% Körpergewichtsveränderung (m+SE)

20,4+4,2

-8,1+3,9

Frisches Organ-zum-Körpergewicht-Verhältnis

Leber

5,2+0,2

5,9+0,3

Nieren

a. Mortalität und Körpergewicht Tägliche Dosis 1 g/kg/Tag während 15 Tagen

1,4+0,1 1,5+0,1

Orale Behandlung	Tot/Behandelt	% Kö. ^ergewichtsver- änderung
Träger (H₂O) CO-1 in H₃O, 1g/kg/Tag Träger (Tragantharz)(x) CO-1 in Tragantharz	0/12 2/12 0/12 3/12	24,54+0,64 18,5+0,7 5 25,04+1,18 16,27+1,31

Fortsetzung Tabelle

b. SGOT und SGPT (24 Stunden nach letzter Dosis)

Orale Behandlung	SGOT	Einheiten	SGPT

Träger:	116	4
Wasser	119	6
Tragantharz	124	9
CO-1 in Wasser	132	10
CO-1 in Tragantharz

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«.ΟΓ

Tabelle 8

Subakute Toxizität von CO-1 bei weiblichen Ratten

Tägliche Dosis: 2 g/kg/Tag von CO-1 durch Magensonde

während 21 Tagen

Orale
Behandlung

Tot/Behandelt

Körpergewicht in g (m+SE) bei Beginn bei Beendigung

Träger

CO-1, 2g/kg/
Tag

2/6 (χ)

1/6 (x)

200,0+4,1

204,1+2,0

233,2+5,1

210,6+9,6

(x) Der Tod wurde verursacht durch einen Fehler bei der Einführung der Kanüle in den Ösophagus. Diese Diagnose wurde durch eine post-mortem Untersuchung bestätigt.

Tägliche Dosis: 2 g/kg/Tag von CO-1 durch Magensonde

während 21 Tagen

Orale Behandlung	DurchschnittIi Lunge	,06	ehe Gew. (m+SE) Leber	% an	frische	η Organen Nieren
Träger	0,85+0		3,45+0	,07		0,95+0,04
(3 Tiere)		,09 NS
CO-1	1,07+0		4,54+0	,10	HS(x)	1,04+0,3NS
(5 Tiere)

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Wegen dieser günstigen subakuten Toxizitäten wurden die chronischen Toxizitäten bei weiblichen Mäusen studiert. Die Ergebnisse sind in Tabelle 9 wiedergegeben.

Tabelle 9

Chronische Toxizität bei weiblichen Mäusen

Tägliche Behandlung mittels einer Magensonde währen 18 Wochen (4,5 Monate)

a. Mortalität und Körpergewicht	Tot/Behan delt	Körpergewic bei Beginn	2+1 4+0,9 3+0,5	tit in g (m+SE) bei Beendigung	0+1 0+0 7+0	,1 ,7 ,7
Orale Behandlung	3/10 2/10 0/10	28 30 27		33, 30, 26,
Träger CO-1, 500 mg/ kg/Tag CO-1, 250 mg/ kg/T ag

b. Urinausscheidung. Menge des von 6 Tieren in 6 h ausgeschiedenen Urins

Orale Behandlung	Urinmenge (ml)
Kontrolle CO-1, 500 mg/kg/Tag CO-1, 250 mg/kg/Tag	6 7 6,5

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JLl

Fortsetzung Tabelle 9

c. Blutzucker. Durchschnittswerte bei 6 Tieren. Blutproben wurden 24 Stunden nach der letzten Dosis entnommen

Orale Behandlung	Blutzucker
Kontrolle CO-1, 500 mg/kg/Tag CO-1, 250 mg/kg/Tag	1,14 1 ,06 1 ,10

d. SGPT und SGOT. Durchschnittswerte von 6 Tieren. Blutproben wurden 24 Stunden nach der letzten Dosis entnommen

Orale
Behandlung

Einheit/ml

SGOT

SGPT

Kontrolle

CO-1, 500 mg/kg/Tag CO-1, 250 mg/kg/Tag

125 159 118

5 6 5

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Fortsetzung Tabelle

Chronische Toxizität von CO-I bei weiblichen Mäusen

e. Grischgewicht	der Organe	Orga	n-zu-Körpergev Herz	,055	/icht-Ver Leber	57+0,	hält	nis (m+SE, 4 Tiere) Lunge	,67+0,044
Orale Behandlung		044	O,	,02	4,	66+0,	15	O	011+0,110
Kontrolle		04	O	,08	4,	57+0,	91	1,	,731+0,035
CO-1, 500 mg/kg/ Tag		08	O₁		4,		25	O
CO-1, 250 mg/kg/ Tag			,481+0
Frisches Nieren		47 +0
0,938+0,		60 +0
1,07 +0,
0,87 +0,

to

cn

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Wegen der günstigen Resultate, die bei der chronischen
Toxizität gefunden wurden, wurde eine teratogenetische Untersuchung mit männlichen und weiblichen Mäusen und Ratten vorgenommen. Die Anzahl der Jungtiere, die lebend
geboren wurden, wurden mit der Kontrollprobe verglichen. Bei keiner Gruppe wurden Missbildungen festgestellt. Die Tabelle 10 enthält die gefundenen Daten.

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Tabelle

Teratogenetische Untersuchungen

an cn vo

a. Tierart: Maus. Männliche und weibliche Mäuse wurden 10 Tage zusammen beherbergt

Orale Behandlung vom 3. bis 13. Tag

Orale Behandlung

CO-1, 250 mg/kg/Tag
Kontrolle

Trächtig/ behändlete Tiere

3/10 (χ) 9/10

Zahl der lebenden Fötuse pro Geburt(m+SE)

Körpergewicht |Zahl der Fötuse der Fötuse in !mit Missbildun-

g (m+SE)

10,3+0,6 9,0+0,9

1,42+0,05 1,46+0,07

gen

0 0

(x) Auf Basis dieser grossen Erfahrungen könnten die vorgenannten Ergebnisse als Zufallsergebnisse betrachtet werden. Die Studie sollte wiederholt werden um festzustellen, ob CO-1 tatsächlich die Trächtigkeit unterbindet.

b. Tierart: Ratte. Die gleichen experimentellen Bedingungen wie bei der Maus

Orale Behandlung	Trächtig/ behandelte Tiere	Zahl der leben den Fötuse pro Geburt (m+SE)	Körpergewicht der Fötuse in g (m+SE)	Zahl der Fötuse mit Missbildun gen 0 0
CO-1, 250 mg/kg/Tag Kontrolle	7/10 6/10	10,8+0,86 11 ,3 + 1 ,12	7,08+0,19 6,82+0,40

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Die Verbindung CO-1 wurde an Menschen verabreicht, die Cholera unter epidemischen Bedingungen ausgesetzt waren. Die Dosierung betrug 0,3 bis 5 g/Person/Tag während 3 bis 5 Tagen. Keine der behandelten Personen wurde infiziert, aber zahlreiche Personen, mit denen sie täglich Kontakt hatten, wurden infiziert. Es wurde festgestellt, dass CO-1 bei oraler Verabreichung als Prophylaktikum gegen Cholera geeignet ist. CO-1 ist auch vorteilhaft insofern, als es selektiv angreift, indem es beispielsweise das Wachstum von Cholera verursachten Mikroorganisment inhibiert, ohne dass der Organismus im menschlichen Körpersystem nachteilig beeinflusst wird.

Beispiel 2

In einem Reaktionsgefäss wurde eine Lösung aus 1,15 g 96 %-iger Schwefelsäure, gelöst in 25 ml Essigsäure, 1,2 g (0,01 Mol) 2-Amino-4,6-dimethyl-pyrimidin und 1,9 g (0,01 Mol) 2-Formyl-chinoxalin-di-N-oxid vorgelegt. Die Mischung wurde 16 Stunden auf 40 C erwärmt, dann gekühlt, mit Wasser verdünnt und mit Natriumbicarbonatlösung auf einen pH von 5 eingestellt. Der erhaltene gelte, kristalline Niederschlag wurde filtriert und gewaschen, wobei man in 71 %-iger Ausbeute 2,1 g 2-/2-(2-Amino-6-methyl-4-pyrimidyl)-äthenyl7~ chinoxalin-1,4-dioxid erhielt, das der Einfachheit halber mit CO-2 bezeichnet wird. Diese Verbindung schmilzt unter Zersetzung bei 24O°C.

Das Produkt wurde gegen 5 Stämme der in Beispiel 1 beschriebenen vibrio cholerae geprüft. Die Ergebnisse sind in

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Tabelle 1 angegeben. Es wurde kein Wachstum nach 48 Stunden bei drei Organismen bei 10 g/ml von CO-2 festgestellt und nur ein Randwachstum bei den verbleibenden zwei Stämmen bei 1OO g/ml.

Die Verbindung CO-2 wurde in gleicher Weise wie für CO-1 in Beispiel 1 beschrieben auf Toxizität geprüft. Es wurden vergleichbare Ergebnisse erhalten, die zeigen dass die Verbindung für eine prophylaktische Verabreichung geeignet ist.

Die Verbindung CO-2 wurde an Menschen verabreicht, die Cholera unter epidemischen Bedingungen ausgesetzt waren, wobei die Dosierung O,3 bis 5 g/Tag während 3 bis 5 Tagen betrug. Keine der Pesonen wurde infiziert, aber zahlreiche Kontaktpersonen wurden infiziert. Es wurde festgestellt, dass CO-2 wirksam ist bei einer oralen Verabreichung als Prophylaktikum gegen Cholera.

Verbindungen die anstelle des 6-Methylsubstituenten einen 6-Äthyl-, Propyl-, Butyl- oder Pentyl-Substituenten enthalten, können in gleicher Weise als Prophylaktikum verwendet werden.

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V-

Claims

27H157 PATENTANSPRÜCHE

1./' Ein substituiertes Chinoxalin der allgemeinen Formel

-CH = CH

worin R Wasserstoff oder Niedrig C₁-C Alkyl ist.

2. Substituiertes Chinoxalin gemäss Anspruch 1, worin R Wasserstoff bedeutet.

3. Substituiertes Chinoxalin gemäss Anspruch 1, worin R Methyl bedeutet.

4. Arzneimittel gegen Cholera, enthaltend eine wirksame Menge eines substituierten Chinoxalins gemäss Ansprüchen 1 bis 3.

5. Verfahren zur Herstellung eines substituierten Chinoxalins gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man Chinoxalin-di-N-oxid-2-carboxyaldehyd oder dessen Niedrigalkylacetal in einem im wesentlichen 1:1 Molverhältnis mit einer Verbindung der Formel

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ORIGINAL INSPECTED

NH,

271A157

^H3^C

N' ^ N

worin R die vorher angegebene Bedeutung hat, in Gegenwart eines stark sauren Katalysators umsetzt.

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeic net, dass die Verbindung 2-Amino-4-methyl-pyrimidin ist und das substituierte Chinoxalin 2-/3-(2-Amino-4-pyrimidinyl)äthenyl/chinoxalin-1,4-dioxid ist.

7. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeich net, dass die Verbindung 2-Amino-4,6-dimethyl-pyrimidin ist und das substituierte Chinoxalin 2-/2-(2-Amino-6-methyl-4-pyrimidinyl)äthenyl/chinoxalin-1,4-dioxid ist.

8. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeich net, dass die Umsetzung in einem Lösungsmittel durchgeführt wird.

9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeich net, dass als Lösungsmittel Ameisensäure oder Essigsäure verwendet wird.

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27H157

10. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet , durchgeführt wird.

zeichnet , dass die Umsetzung bei 25 bis 50°c

11. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet , dass der Anteil der starken Säure 0,5 bis 2 Mole pro Mol Chinoxalin-Ausgangsverbindung beträgt.

12. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet , dass die starke Säure Chlorwasserstoff säure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Salpetersäure, Trichloressigsaure oder eine Arylsulfonsäure ist.

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