DE2638766A1 - Antibiotischer glykopeptidkomplex, verfahren zu seiner herstellung und diese enthaltende mittel - Google Patents
Antibiotischer glykopeptidkomplex, verfahren zu seiner herstellung und diese enthaltende mittelInfo
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Description
M/17188 München, 27. August 1976
Antlbiotlacher Glykopeptidkomplex, Verfahren zu seiner
Herstellung und diesen enthaltende Mittel
Die Erfindung betrifft einen neuen antibiotischen wasserlöslichen basischen Glykopeptidkomplex, der im folgenden als Bu-2231
bezeichnet wird, sowie seine Herstellung durch Fermentieren eines neuen Streptoalloteichus-Staiames, der in der Bristol-Banyu-KultursamEilung
als E465-9** bezeichnet wird. Der vorstehende
Organismus ist ein Actinomycetes-Bacteriura, das aus einer
indischen Bodenprobe isoliert wurde. Eine Kultur des Organismus wurde in der American Type Culture Collection, Washington,
D.C, hinterlegt und in die dortige permanente Sammlung von Mikroorganismen als A.T.C.C.31158 eingereiht.
Der neue erfindungsgemässe Glykopeptidkomplex umfasst zwei Haupt-Glykopeptidkomponenten, die als Bu-2231A und B bezeichnet
werden. Diese beiden Komponenten sind bioaktiv. Der Komplex und 3ede der beiden vorstehenden Komponenten weisen eine inhibitorische
Wirkung auf das Wachstum von Mikrobenorganismen, sowohl von Bakterien als auch von Fungi auf, die pathogen für Tiere und
Pflanzen sind» Diese Antibiotika sind daher nützlich zur Therapie
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bakterieller Infektionen des Menschen oder von Tieren sowie
zur Vorbeugung bzw. Behandlung von Reis, Erbsen, Weizen oder anderen Pflanzen, die durch pflanzenpathogene Organismen hervorgerufen
werden. Der Komplex und seine Einzelbestandteile sind auch geeignet zur Behandlung verschiedener Tumorsysteme an
Nagetieren einschliesslich des Walker 256-Karzinosarkoms (Aszitesform) und des Lewis-Lungenkarzinoms.
Die beigefügte Figur 1 zeigt das Infrarot-Absorptionsspektrum
von Bu-2231 A in Form des kupferfreien Hydrochloridsalzes als Pressling in Kaliumbromid.
Die Figur 2 zeigt das protonenmagnetische Resonanzspektrum von Bu-2231 A als kupferfreies Hydrochloridsalz, gelöst in
DpO unter Anwendung von 2,2-Dimethyl-2-silapentan-5-sulfonat
(DSS) als innerer Standard, bestimmt mit einem JEOL 60 MHz NMR-Spektrometer (Typ TNM-C-60 HL).
Die Figur 3 zeigt das Infrarot-Absorptionsspektrum von Bu-2231 B
in Form des kupferfreien Formiatsalzes als Pressling in Kaliumbromid.
Die Figur 4 zeigt das protonenmagnetische P^esonanzspektrum
von Bu-2231 B in Form des kupferfreien Formiatsalzes, gelöst in DpO unter Anwendung von 2,2-Dimethyl-2-silapentan-5-sulfonat
(DSS) als innerer Standard, bestimmt mit einem JEOL 60 MHz NMR-Spektrometer (Typ TNM-C-60 HL).
Im folgenden werden die morphologischen Charakteristika, KuI*
turcharakteristika und physiologischen Charakteristika des Stammes E465-94 aufgeführt:
Der Stamm E465-94 erzeugt auf den meisten Agar-Medien im an
der Luft befindlichen Mycel Trauben bzw. Bündel und ein SkIerotium.
Die Traube bzw. das Bündel ist eine dominante bzw. vorherrschende sporenbildende Struktur und die Bildung von Sklero-
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tien ist etwas unberechenbar. Die Traube bzw. das Bündel besteht aus kurvenförmigen oder L-förmigen kurzen Sporenketten
mit vielen Zweigen und entwickelt sich häufig zu einer dicken Masse. Einige Sporenketten erstrecken sich aus der Traubenbzw.
Bündelstruktur heraus und bilden häufig offene Spiralen.
Die Form des Sklerotiums ist oval oder gelegentlich unregelmässig.
Eine Fragmentbildung des vegetativen Mycels tritt nicht auf. Windungen bzw. Ringe werden nicht gebildet.
Der Stamm E465-94 erzeugt an der Luft befindliche bzw. wachsende
Mycelien auf den meisten untersuchten Agar-Medien« Die Farbe des reifen, an der Luft gewachsenen Mycels ist hellgelb,
beige oder schwach blassrosa-gelb bzw. blassrötlich-gelb. Ein
verbreitbares Pigment wird nicht erzeugt. Die Tyrosinase-Reaktion verläuft negativ. Der Stamm ist wärmebeständig und wächst
reichlich bei 500C. Die Kulturcharakteristika und physiologischen
Charakteristika sowie die Kohlenhydratverwertung des Stammes E465-94 sind in den Tabellen 1, 2 und 3 angegeben.
Hefeextrakt-Malzextrakt-Agar G: Reichlich
(ISP Nr. 2 Medium) R: Blassgelblich-braun bis
Pridham et al., 1956-57 hellbraun
A: Dick, samtartig, hellgelblichbeige oder blassrötlichbeige D: Keines
Hafermehl-Agar G: Massig
(ISP Nr. 3 Medium) R: Farblos, teilweise blass-
Kuster, 1959 gelblich-braun
A: Pulverförmig bis samtartig, gelegentlich mit Flecken, blassrötlich-beige
Ds Keines
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Fortsetzung Tabelle
Anorganische Salaa-Stärke-Agar
(ISP Nr. 4 Medium) Küster, 1959
Glycerin-Asparagin-Agar (ISP Nr. 5 Medium)
Pridham und Lyons, 1961
Pepton-Hefe extrakt-Eis en-Agar
(ISP Nr. 6 Medium) Tresner und Danga, 1958
Tyrosin-Agar
(ISP Nr. 7 Medium) Shinobu, 1958 G: Massig
R: Farblos bis blassgelblichbraun
A: Pulverförmig bis samtartig, blassrötlich-gelb
D: Keines
G: Beschränkt
R: Farblos bis blass olivfarbenge Ib
A: Pulverförmig mit Flecken, weisslich bis blassgelblichbeige
D: Keines
G: Dürftig R: Braun Ai Dürftig, weiss D: Blass-braun
G: Massig
R: Blassgelb bis blassgrünlichgelb
A: Samtartig bis baumwollartig, weiss, später leicht rötlichgelb
D: Keines
G: Massig
R: Blass olivfarben-geIb bis
hellbraun
A: Samtartig, hellgelblichbeige
D: Keines
G: Beschränkt R: Blassbräunlich-gelb A: Dürftig, weiss
D: Blassgelb
G: Massig R: Farblos A: Dünn, blassgelblich-beige,
Flecken D: Keines
G: Massig
R: Hellgelblich-braun
A: Samtartig, blassrötlich-gelb
D: Keines
Abkürzungen: G = Wachstum; R * Färbung der Rückseite (reverse
color); A = an der Luft befindliches bzw. gewach-
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Bennett-Agar
Nähr-Agar
Bodenextrakt-Agar
Tomatenpaste-Hafermehl-Agar
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Fortsetzung Tabelle 1
senes Mycel; D= verbreitbares bzw. diffusions
fähiges Pigment
Tabelle 2 Physiologische Charakteristik^ des Stammes E465-94
Gelatineverflüssigung Stärkehydrolyse Milch
Melanin aus L-Tyrosin Nitrit aus Nitrat
Wachstumstemperatur
Fluoreszierendes Licht
NaCl-Toleranz
Kartoffelstempel-Säuretoleranz
Katalasereaktion Oxidase
Erzeugte Antibiotika Positiv; rasch verflüssigt Positiv
Beträchtliche Koagulation und leichte Peptonisierung. rH-V/ert
ins alkalische verschoben. Gelbliches Ringwachstum
Negative Tyrosinase Positiv
Reiches Wachstum bei 32-5O0C, massig bei 25-30 C, beschränkt
bei 230C und 520C, dürftig bei
200C und 54°C, Jcein Wachstum
bei 12°C und
C
und 560C
und 560C
Keine deutliche Inhibierung der Mycelbildung an der Luft
unter einer fluoreszierenden Lampe von 15 W während 14 Tagen
Beschränktes Wachstum und Mycelbildung an der Luft in Leudemann's
Agarmedium bei 3% NaCl. Kein Wachstum bei 7% NaCl.
Normales Wachstum und Mycelbildung an der Luft beim Leudemann-Kartoffeistempeltest
Positiv
Negativ
Negativ
Bu-2231-Komplex und Nebramycin-Faktoren.,
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Tabelle 3 Kohlenhydrat-Verwertung des Stammes E465-94
D(-)-Arabinose - D(+)-Melibiose
L(+)-Arabinose - Trehalose
D-Xylose - Raffinose
D-Ribose + D(+)-Melezitose
L-Rhamnose - Lösliche Stärke
D-Glucose ++ Cellulose
D(+)-Galactose ++ Glycerin
D-Fructose ++ Inosit
D-Mannose ++ D-Mannit
L(-)-Sorbose - D-Sorbit
Sucrose bzw. Saccharose ++ Dulcit
Lactose ++ Salizin Cellobiose
Basalmedium: Pridham-Gottlieb Salze-Medium, ergänzt mit
0,196 Difco Hefeextrakt
Inkubationstemperatur: 370C
Die Präparation der Zellwand wurde nach der von T.Yamaguchi
in J.Bacteriol.89:444-453 (1965) beschriebenen Methode durchgeführt.
Die Analyse der Aminosäuren wurde wie folgt durchgeführt: 10 mg gereinigte Zellwand wurde in 1 ml 6n-HCl in einem
verschlossenen Rohr bei 1200C während 18 Stunden hydrolysiert»
Das Hydrolysat wurde mit einem gleichen Volumen von destilliertem Yfesser verdünnt,filtriert und anschliessend im Vakuum zur
Trockne verdampft. Die Hälfte des Endprodukts wurde erneut in 1 ml destilliertem Wasser gelöst und durch zweidimensionale
Dünnschichtchromatographie untersucht. Die andere Hälfte wurde
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in 2 ml Citratpuffer (pH-Wert 2,2) gelöst und durch Flüssig-Chromatographie
analysiert. Ein Teil von 5 /ul des Hydrolysate wurde auf eine Siliciumdioxidgel-Dünnschichtplatte (60F2^,
E.Merck AG, Deutschland) aufgetragen und mit Phenol-Wasser (4:1) in einer Richtung und anschliessend mit n-Butanol-Essigsäure-Wasser
(3:1:1) senkrecht zum ersten Lauf entwickelt. Die Flecken wurden durch Aufsprühen von 0,2% athanolischem Ninhydrin-Reagens,
gefolgt von Erwärmen der Platte während 5 Minuten auf 11O0C sichtbar gemacht. Zur Unterscheidung von meso- und/oder
DD-DAP von LL-DAP wurden 5 /ul des Hydrolysats auf eine Cellulosepulver-Dünnschichtplatte
aufgetragen. Die Platte wurde mit den Lösungsmittelsysten Methanol-Wasser-IOn-HCl-Pyridin (80:
17,5:2,5:10) während 24 Stunden entwickelt und anschliessend mit 0,2% NinhydrJa-Reagens besprüht. In diesem Dünnschichtchromatographie-System
bewegte sich LL-DAP rascher als das als Bezugsstandard verwendete meso-DAP. Die Aminosäuren in dem Zellwandpräparat
wurden auch in einem Aminosäuren-Analysator bestimmt. Die Aminosäurenanalyse des Zellwandpräparates von
Stamm E465-94 zeigte die Anwesenheit von meso- o<f,£ -Diaminopimelinsäure
(meso-DAP), Alanin und Glutaminsäure (Tabelle 4). Die Kohlenhydrate in der Zellwand wurden wie folgt bestimmt: Sine
Probe von 50 mg der rohen Zellwand wurde in 3 ml 2n-H2S0^ gelöst
und in einem verschlossenen Rohr während zwei Stunden bei 1200C hydrolysiert. Das Hydrolysat wurde mit gesättigter Ba(OH)2-Lösung
neutralisiert, das ausgefällte BaSO^ wurde durch Zentrifugieren entfernt und die überstehende Flüssigkeit wurde lyophilisiert.
Das so erhaltene Material wurde trimethylsilyliert und das Produkt wurde gaschromatographisch untersucht und mit
verschiedenen Bezugszuckern verglichen. Die Kohlenhydratanalyse der Zellwand von E465-94 zeigte die Anwesenheit von Rhamnose,
Mannose, Galactose und Glucosamin an (Tabelle 5)«
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DAP (isomer) Glycin Glutamin- Asparagin- Alanin —————— —— säure säure —
++ (meso) + ++ Spuren +++
Kohlenhydrat-Zusammensetzung der Zellwand Arabinose Rhamnose Mannose Galactose Glucose
am in
Vergleich mit Actinomyceten-Stämmen Herstellung von Antibiotika vom Bleomycin-Typ
Der Stamm E465-94 erzeugt einen neuen antibiotischen Komplex
Bu-2231, von dem angenommen wird, dass er aus Antibiotika vom
Bleomycin-Typ besteht. Es wurden daher Vergleiche mit verschiedenen Actinomycetes-Stämmen durchgeführt, von denen bekannt
ist, dass sie Bleomycin oder mit dem Bleomycin verwandte Antibiotika erzeugen. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 6 aufgeführt.
Der Stamm E465-94 unterscheidet sich deutlich von jedem dieser Mikroorganismen.
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Vergleich des Stammes E465-94 mit sechs Actinomyceten-Stämmen, die Antibiotika der Bleomycin-Gruppe erzeugen
Name des Mikroorganismus
Streptomyces verticillus
Nr.843-11^
Erzeugtes Antibiotikum
PhIe omyc ine
Streptomyces verti· cillus
B80-Z22)
Streptomyces bikiniensis
Variation zorbonensis5;
Streptomyces humidus Variation antitumoris MCRL-0387^
Streptosporangium violaceochromogenes
MK-,495)
YA-56 Komplex
Hauptunterschi ed zum Stamm E465-94
Ringbildung. Positive Ausnutzung von Inosit, Mannit, Raffinose und
Rhamnose. Negative Verwertung von Galactose.
Ringbildung. Negative Verwertung von Galactose, Lactose und Sucrose
bzw. Saccharose
Luftwachstum grau bis grauartig-gelb. Sporophor gerade. Verwertung ++: D-Xylose,
L-Arabinose, Rhamnose, Cellobiose.
Verwertung +: Raffinose, Dulcit, D-Mannit, D-Sorbit und Inosit.
Luftmycel: Hellbräunlich-grau und hygroskopisch. Positive Verwertung
von Arabinose, Xylose, Rhamnose, Mannit und Inosit.
Bildung von sphärischem Sporangium. Luftmycel: Muschelbzw. Shell-rosa.
Positive Verwertung von Xylose.
Negative Verwertung von Lactose.
Negative Verwertung von Lactose.
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Fortsetziang Tabelle 6
Name des Mikro- Erzeugtes Anti- Hauptunterschied Organismus biotikum zum Stamm E465-94
Streptosporangium Platomycine Bildung von sphäviolaceochromogenes
rischem Sporangium.
mit 7A^) Luftmycel weiss
1^"'0 bis rötlich-weiss.
Positive Verwertung von Xylose. Negative Verwertung von Lactose und
Glycerin.
1) K.Maeda et al. (Institute Microbial Chemistry): Japan.
Patent 34-2598, April 17, 1959.
2) HiUmezawa et al.: New antibiotics, bleomycin A and B. J.Antibiotics 19:200-209, 1966.
3) The Upjohn Company: British Patent 1,277,150, 7.Juni 1972.
4) T.Furumai et al.: The antibiotic YA-56 komplex: Taxonomy and production of the producing strain. J.Antibiotics 26:
70-76, 1973.
5) I.Kawamoto et al.: A new antibiotic victomycin (XK 49-1-B-2).
J.Antibiotics 28: 358-371, 1975.
6) T.Nara et al. (kyowa-Hakko Kogyo Co., Ltd.): Japan.Kokai,
49-108292, 15.Oktober 1974.
Der Actinomyceten-Stamm E465-94 erzeugte auf Agar-Medium ein
Büschel bzw. eine Traube und Sklerotium im an der Luft befindlichen
Mycel, die morphologisch typisch für solche waren, die man
bei gewissen Species von Streptomyces oder Chainia findet. Jedoch unterschieden sich die Aminosäure- und Zuckerzusammensetzung
des Zellwandpräparates des Stammes E465-94 stark von jeglicher Species der Familie Spreptomycetaceae. Das Zellwandpräparat
enthielt meso-o^-f -Diaminopimelinsäure (meso-DAP) anstelle von LL-DAP, die als spezifischer Zellwandbaustein der
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Genera Streptomyces und Chainia berichtet wurde. Darüberhinaus
waren die Hauptzuckerbestandteile des Stammes Galactose, Mannose und Rhamnose, die sich von den für Streptomyces oder
Chainia berichteten stark unterscheiden. Aufgrund der vorstehenden Fakten wird vorgeschlagen, einen neuen Genus Streptoalloteichus
(Strepto-ein Streptomyces-ähnlicher Organismus, allo-geändert und teichos-Wand, d.h. ein streptomycesartiger
Organismus mit ungewöhnlicher Zellwandzusammensetzung) unter der Familie Streptomycetaceae zu schaffen, um Actinomycetenstämme,
die Streptomyces in der Morphologie ähneln, die jedoch die Zellwandzusammensetzung des Stammes E465-94 vom
Typ meso-DAP, Alanin und Glutaminsäure als Hauptaminosäuren und Galactose, Mannose und Rhamnose als diagnostisch neutrale
Zucker aufweisen, zu unterscheiden. So ist Streptoalloteichus ein alleiniger Genus unter den Genera der Familie Streptomycetaceae,
der meso-DAP anstelle von LL-DAP in der Zellwandzusammensetzung aufweist. Es wird auch vorgeschlagen, den
Stamm E465-94- als Streptoalloteichus hindustanus gen.nov. und
sp.nov. zu bezeichnen, da der Organismus in Nordindien isoliert wurde. Der Stamm E465-94 erscheint deutlich unterschiedlich
von den Mikroorganismen, die zur Herstellung von Bleomycinen und zum Bleomycin verwandten Antibiotika bekannt sind.
Es versteht sich, dass für die Herstellung von Bu-2231 die
vorliegende Erfindung nicht auf den spezifischen Stamm Streptoalloteichus hindustanus, d.h. Stamm E465-9^, A.T.C.C.31158,
beschränkt ist oder auf Mikroorganismen, die durch ihre Kulturcharakteristika hier voll beschrieben wurden, beschränkt ist,
obwohl die folgende Beschreibung auf diesen speziellen Stamm Bezug nimmt. Die vorliegende Erfindung soll auch andere Bu-2231-produzierende
Stämme oder Mutanten des genannten Mikroorganismus umfassen, die auf bekannte Weise beispielsweise durch Röntgenstrahlen-,
Ultraviolettstrahlen-Behandlung, Stickstofflost-Behandlung,
Phagenbehandlung und dergleichen des neuen Mikroorganismus
erhalten werden können«
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Der Antibiotikakomplex Bu-2231 wird durch Kultivieren eines Bu-2231-produzierenden Stammes von Streptoalloteichus hindustanus,
vorzugsweise des Stammes Streptoalloteichus hindustanus E465-94, A.T.C.C.31158 oder einer Mutante davon unter
submergen aeroben Bedingungen in einem wässrigen Nährmedium erzeugt. Der Organismus wird in einem Nährmedium gezüchtet,
das eine Quelle für assimilierbaren Kohlenstoff, beispielsweise ein assimilierbares Kohlenhydrat enthält. Beispiele für geeignete
Kohlenstoffquellen umfassen Glucose, Ribose, Galactose,
Fructose, Mannose, Sucrose bzw. Saccharose, Lactose,lösliche Stärke und Glycerin. Das Nährmedium sollte auch eine Quelle
für assimilierbaren Stickstoff enthalten wie beispielsweise Fischmehl, Sojabohnenmehl, Mais- bzw. Korn-quell- bzw.-einweichflüssigkeit,
Peptone, Fleischextrakt, Erdnussmehl, Hefeextrakt oder Ammoniumsalze. Anorganische Salaswie Natriumchlorid,
Kaliumchlorid, Magnesiumsulfat, Calciumcarbonat, Phosphate usw. können gegebenenfalls zugesetzt werden. Spurenelemente wie
Kupfer, Mangan, Eisen, Zink usw. werden dem Medium gegebenenfalls zugesetzt oder können als Verunreinigungen anderer Bestandteile
des Mediums zugeführt werden. Die Inkubationstemperatur kann jegliche Temperatur sein, bei der ein Bu-2231-erzeugender
Stamm wachsen kann, z.B. 20 bis 5^°C Vorzugsweise
wird die Fermentation bei 25 bis 35°C und besonders bevorzugt bei 27 bis 320C durchgeführt. In dem Medium wird vorzugsweise
ein neutraler oder fast neutraler pH-Wert, z.B. pH etwa 6-7, angewendet und die Erzeugung des Antibiotikums wird im allgemeinen
während etwa zwei bis sieben Tagen durchgeführt. Gewöhnlich wird eine optimale Produktion in drei bis fünf Tagen
erzielt. Zur Herstellung von relativ geringen Mengen können Schüttelkolben- und Oberflächenkulturen angewendet werden, jedoch
wird für die Herstellung grosser Mengen die submerge aerobe Kultur in sterilen Tanks bzw. Bottichen bevorzugt. Wird
eine Fermentation im Bottich durchgeführt, so ist es günstig, ein vegetatives Inokulum in einer Nährbrühe durch Inokulieren
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der Kulturbrühe mit einer Spore des Organismus herzustellen. Hat man ein junges aktives vegetatives Inokulum erhalten, so
führt man dieses aseptisch in das Mediuni des Fermentationsbottichs
über. Die Belüftung in Bottichen und Flaschen kann durch Einleiten von steriler Druckluft durch oder auf die Oberfläche
des Fermentationsmediums erfolgen. Darüberhinaus wird in den Bottichen mit einem mechanischen Flügelrührer gerührt. Gegebenenfalls
kann ein Antischaummittel wie Specköl zugesetzt werden.
Die Erzeugung von Bu-2231 in dem Fermentationsmedium kann
leicht im Verlauf der Fermentation durch die Papierscheiben-Agar-Diffusionsmethode
unter Anwendung von Bacillus subtilis PCI-219 und Mycobacterium 607 Stamm M6-3 als Testorganismus
verfolgt werden.
Bu-2231 A und B sowie die Nebramycin-Faktoren,von denen man
annimmt, dass sie koproduziert werden, sind Jeweils aktiv gegen B.subtilis PCI-219, jedoch zeigten lediglich die Komponenten
Bu-2231 A und B eine Wirksamkeit gegen M.607 M6-3. Bei
der Fermentation im Schüttelkolben erzeugte der Stamm Ξ465-94
50-100 mcg/ml Bu-2231 Komplex nach drei bis fünf Tagen.
Nachdem die Nährbrühe ihr optimales Leistungsvermögen erreicht hat (wie beispielsweise durch die vorstehende Untersuchung bestimmt)
werden das Mycel und die ungelösten Rückstände von der
Fermentationsbrühe auf übliche Weise durch Filtrieren oder Zentrifugieren abgetrennt. Die antibiotische Aktivität ist im
Filtrat enthalten und kann daraus durch Anwendung üblicher Adsorptionstechniken gewonnen werden. Die Adsorbentien, die
man für die Gewinnung besonders bevorzugt verwendet, sind Kationenaustauscherharze,
beispielsweise Harze vom Typ IRC-50, die im Handel von Rohm und Haas unter dem Handelsnamen "Amberli·
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te IRC-50" erhältlich sind. Das nötigenfalls auf den pH-Wert 7 neutralisierte FiItrat wird durch eine mit einem Kationenaustauscherharz
wie Amberlite IRC-50 in der Ammoniumform gefüllte Säule geleitet. Es wird anschliessend mit Wasser gewaschen.
Zusätzlich zu dem Komplex Bu-2231 produziert der Organismus E465-94 auch einen antibiotischen Aminoglykosidkoiaplex,
der aus Nebramycinfaktoren besteht» Diese Aminoglykosidverunreinigung
kann von dem Komplex Bu-2231 gemäss der Erfindung durch Eluieren mit einer verdünnten Base, z.B. 0,25n-Ammoniumhydroxid
abgetrennt werden. Der gewünschte Komplex Bu-2231,
der auf dem Harz adsorbiert verbleibt, kann anschliessend mit einer Mineralsäurelösung, z.B. Chlorwasserstoffsäure vom pH-Wert
2 eluiert werden und die Fraktionen von Bu-2231 des EIuats werden gesammelt und vereint.
Eine partielle Reinigung des Komplexes kann durch Chromatographie der vereinten Fraktionen von Bu-2231 an einem geeigneten
Adsorbens wie Aktivkohle und Eluieren mit beispielsweise wässrigem Butanol bei saurem pH-Wert erzielt werden. Die Butanolschicht
wird abgetrennt und die wässrige Schicht wird lyophilisiert oder im Vakuum konzentriert, wobei man den festen Bu-2231
Komplex erhält. Der Komplex kann weiter chromatographiert und/
oder einer Gelfiltration unterzogen werden, wobei man den gereinigten, kupferenthaltenden festen Komplex erhält.
Die Glykopeptid-Komponenten Bu-2231 A und B können von dem Komplex durch Gradienten-Elutions-Chromatographie über einem
modifizierten Dextranderivat als Kationanaustauscher abgetrennt werden» Beispielsweise kann ein modifiziertes PoIysacchariddextran
des im Handel unter dem Namen CM-Sephadex C-25 üblichen Typs verwendet werden. Eine wässrige Lösung des Komplexes
Bu-22311 der vorzugsweise wie vorstehend beschrieben gereinigt wurde, wird in eine Säule gefüllt, die den modifizier-
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ten Dextranionenaustauscher enthält. Wie im Falle der Bleomycine (J.Antibiotics, 19, 210-21 (1966)) ist es leichter, die
Komponenten auf diese Weise abzutrennen, wenn der Komplex mit Kupfer ausreichend cheliert ist. Die bevorzugte Herstellungsweise
umfasst so das Auflösen des Komplexes in einer Kupfer-II-Chloridlösung,
um sicherzustellen, dass er in einer ausreichend chelierten Form mit Kupfer vorliegt und das Einbringen dieser
Lösung in die Säule. Die Komponenten werden anschliessend stufenweise
mit wässriger Ammoniumformiatlösung in von 1 bis 7% variierenden Konzentrationen eluiert. In den ersten Fraktionen
erscheint das Bu-2231 B, während das Bu-2231 A in den letzten
Fraktionen des Eluats enthalten ist. Die die gleichen Komponenten enthaltenden Fraktionen werden vereint, durch Gelfiltration
entsalzt, konzentriert und lyophilisiert, wobei man die gereinigten Komponenten Bu-2231 A und B in Form ihrer Kupferkomplexe erhält.
Die Anwendung von Ammoniumformiat als Eluiermittel bei der chromatographischen Trennung, die vorstehend beschrieben wurde,
führt dazu, dass man die Komponenten beim Lyophilisieren als Formiatsalze erhält. Zur Umwandlung der Formiatsalze in die
jeweiligen freien Basen und/oder zur Umwandlung der Formiatsalze oder der freien Basen in andere gewünschte Säureadditionssalze,
z.B. die Hydrochloridsalze, können dem Fachmann bekannte
bzw. übliche Standardtechniken verwendet werden.
Die Glykopeptid-Komponenten Bu-2231 A und B weisen wie die Bleomycine die Eigenschaft auf, mit Kupfer Chelate zu bilden
und die Komponenten und ihre Säureadditionssalze können daher entweder in der Kupferkomplexform oder in der kupferfreien
Form vorliegen. Die kupferfreien Formen von Bu-2231 A und B können aus den Kupferkomplexen durch Anwendung von HpS in Methanol,
wie in der US-Patentschrift 3,646,197 beschrieben, hergestellt werden.
Die beiden Glykopeptid-Antibiotikakomponenten können vonein-
709828/ 1 009
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90
0,22 | 0,05 |
0,41 | 0,11 |
0,16 | 0,04 |
0,31 | 0,09 |
ander und von den verwandten Bleomycinen und Phleomycinen entweder
in Form des Kupferkomplexes oder in der kupferfreien Form durch die in der nachstehenden Tabelle 7 gezeigten Dünnschichtsysteme
S-102 und S-123 unterschieden werden.
Tabelle 7 Rf-Werte
S-102 S-123
Cu-A Cu-B Freies A Freies B
Bleomycine 0,34, 0,44, 0,69 0,21, 0,50, 0,79
Phlemycine 0,37, 0,54, 0,72 0,22, 0,41, 0,59
S-102: SiO2-Platte, CH3OH-I0% CH3COONH4 (1:1)
S-123: SiO2-Platte, CH3OH-I0# CH3COONH4-I0# NH4OH (10:9:1)
Daten zur Charakterisierung von Bu-2231 Antibiotlsche Komponenten
Die antibiotischen Substanzen Bu-2231 A und B sind jeweils amorphe Basen, die in der Form des Kupferkomplexes als blaue
Feststoffe und in der kupferfreien Form als weisse Feststoffe vorliegen» Beide Substanzen sind in Wasser und Methanol löslich,
gering löslich in Äthanol und praktisch unlöslich in anderen organischen Lösungsmitteln.
Bu-2231 A und B können mit Säuren Salze bilden und die pharmazeutisch
brauchbaren Säureadditionssalze der Antibiotika
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werden von der vorliegenden Erfindung unifasst. Beispiele für
geeignete pharmazeutisch brauchbare Säureadditionssalze umfassen die nicht-toxischen Salze mit organischen und anorganischen
Säuren wie beispielsweise Chlorwasserstoffsäure, Schwefelsäure,
Phosphorsäure, Essigsäure, Ameisensäure, Stearinsäure, Propionsäure, Weinsäure, Maleinsäure, Benzoesäure, Bernsteinsäure
und dergleichen.
Die Elementaranalysen des Kupferkoraplexes und der kupferfreien
Verbindungen Bu-2231 A und B sind im folgenden angegeben:
Bu-2231 A (Kupferkomplex)s
C64H112N20°32S2Cu
C64H112N20°32S2Cu
ber.s C 42,68, H 6,27, N 15,56, S 3,56 gef.: C 42,66, H 6,16, N 15,31, S 3,14
Bu-2231 A (kupferfrei):
C64H112N20O32S2
C64H112N20O32S2
ber.: C 44,24, H 6,50, N 16,12, S 3,69 gef.: C 45,10, H 6,51, N 16,05, S 3,55
Bu-2231 B (Kupferkomplex):
C58H1OON18°31S2CU
C58H1OON18°31S2CU
ber.: C 41,63, H 6,02, N 15,07, S 3,83 gef.: C 40,96, H 5,61, N 14,78, S 3,39
Bu-2231 B (kupferfrei);
C58H100N18°31S2
C58H100N18°31S2
ber.; C 43,27, H 6,26, N 15,66, S 3,98 gef.: C 43,01, H 6,22, N 14,81, S 3,61
Der Kupfergehalt wurde in einer vereinten Probe von Bu-2231 A und B durch Atomabsorptionsspektrometrie als etwa 3% bestimmt.
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2G307GG
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Die Ultraviolettabsorptionsmaxima und die optische Drehung
der Komponenten sind im folgenden aufgeführt:
UV Absorption /ά/^
Verbindung "1^ in op &\% cm) (c 0
Bu-2231 A (Kupferkomplex) 243(125), 291 (98) +50°
Bu-2231 A (kupferfrei) 235(Sch), 290 (67) -21
Bu-2231 B (Kupferkomplex) 243(134), 291 (109) +76
Bu-2231 B (kupferfrei) 235(Sch), 289,5 (77) -19
Bleomycin A (Kupferkomplex) 242(149), 291 (121)
Phleomycin (Kupferkomplex) 244(138), 301 (49) +84,5
(Literatur ref.)
Das Verhältnis der UV-Absorptionsvermögen der beiden Absorptionsmaxima
für Bu-2231 (relatives Absorptionsvermögen bei 240 τψ und 290 mu: 1,2-1,3) lässt eher auf die Ähnlichkeit der
neuen Komplexe mit Antibiotika der Bleomycin-Gruppe schliessen
als mit solchen der Phleomycin-Gruppe.
Die Infrarot- und kernmagnetischen Resonanz-Spektren des kupferfreien Hydrochloridsalzes von Bu-2231 A und des kupferfreien
Formiatsalzes von Bu-2231 B sind in den beigefügten Figuren 1 bis 4 angegeben.
Beide aitibioti sehen Komponenten ergeben positive Reaktionen mit
dem Ninhydrin-Reagens.
Die nahe strukturelle Ähnlichkeit von Bu-2231 A und B mit Bleomycin wurde durch die vorstehend beschriebenen physikalisch-
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chemischen Eigenschaften aufgezeigt. Die kupferfreien Präparate der beiden Komponenten sowie Bleomycin A2 wurden in einem
verschlossenen Rohr mit 6n-HCl während 20 Stunden bei 1050C
hydrolysiert. Jedes der Hydrolysate wurde im Vergleich durch Hochspannungs-Papierelektrophorese untersucht. Die Lokalisation
der Aminosäuren wurde mit Ninhydrin-Reagens sowie auch durch UV-Licht bestimmt.
Wie in der Tabelle 8 gezeigt, wurde jede der sechs Aminosäuren (I bis VI) und ein Aminrest (VII) des Bleoiaycins A2, der in der
Literatur beschrieben wird (J.Antibiotics 21: 79, 1968) durch Papierelektrophorese identifiziert. Die Hydrolyseprodukte
von Bu-2231 A und B zeigten positive Ninhydrin-Zonen, die den Aminosäuren I, II, IV und V des Bleomycins A2 entsprachen.
Die Identität jeder der vier aus Bu-2231 A und B isolierten
Aminosäuren mit den Aminosäuren I, II, IV und V aus Bleomycin A2 wurde chemisch und spektroskopisch bewiesen. Die Aminosäure
III (Zone bei 13,5 cm) des Bleomycins A2 war in Bu-2231 A und
B nicht vorhanden. Dieses zeigte indessen eine zusätzliche Ninhydrin-positive
Zone bei 14,8 cm (bezeichnet als Aminosäure VIII). Die Struktur der Aminosäure VIII wurde als 4-Amino-3-hydroxy-n-valeriansäure
bestimmt, die das Desmethylanalogon der Aminosäure III ist.
Die Aminosäure VI (Zone bei 8,5 cm, UV-Absorptionsmaximum bei 290 mu) des Bleomycins A2 war in Bu-2231 A und B nicht vorhanden.
Jedoch wurde eine saure Verbindung (IX) mit einem UV-Ab-
196
sorptionsmaximum bei 283 mu (Eicm = 280) als Ausfällung aus
sorptionsmaximum bei 283 mu (Eicm = 280) als Ausfällung aus
dem sauren Hydrolysat von Bu-2231 A und B isoliert.
Der endständige Aminorest (VII der Tabelle 8) von Bleomycin A2
erschien in der Zone 31,5 cm. Bu-2231 A und B ergaben dieselbe Zone wie das Amin VII des Bleomycins A2, jedoch zeigen verschiedene
Aminoreste des Bleomycin-Komplexes eine vergleichbare Mobilität bei dieser Papierelektrophorese-Methode.
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Die anschliessende Analyse zeigt tatsächlich, dass der endständige
Aminorest von Bu-2231 A und B Spermidin (X), der Aminorest
von Bleomycin A1- ist. Bu-2231 A ergab eine zusätzliche
Ninhydrin-positive Zone bei 23,0 cm (XI ind Tabelle 8), die
im Bleomycin Ap und Bu-2231 B nicht vorhanden war. Die Verbindung
XI wurde als ß-Lysin identifiziert.
Die Strukturen der vorstehend beschriebenen Aminosäuren und Aminoreste sind im nachfolgenden aufgeführt:
Aminosäuren und Amin-Bestandteile von Bleomycin A2 und Bu-2231
A und B
CH^-CH-CH-COOH J ι ι
OH NH2
OH NH2
L-Threonin
II
iN NH9
COOH
ß-Amino-ß-(4-amino-6-carboxy-5-methyl-pyrimidin-2-yl)-propionsäure
III CH,-CH - CH-CH-COOH 3 1 11
NH2 OH CH3 A-Amino^-hydroxy-^-methyl-n-valeriansäure
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IV N
CH-CH-CCOH I
Π Η OH NHn
β-Hydroxyhistidin
V NH2-CH2-CH-COOH
NH2
L-ß-Aminoalanin
VI
COOH
2' - (2-Aminoäthyl)-2,4·-bithiazol-^-carbonsäure
VII NH2-(CH2)5-S+(CH3)2· Χ"
3-Aminopropyldimethylsulfoniumsalz
VIII CH,-CH—CH-CH -COOH
3 1 ι
NH2 OH
4-Amino-3-hydroxy-n-valeriansäure
4-Amino-3-hydroxy-n-valeriansäure
IX Unbekannte Struktur (/I
283 ιημ)
-(CH2 )3-NH-( CH2 )A-NH2 (Spermidin)
XI NH2-(CH2)3-CH-CH2-C00H (ß-Lysin)
Die Zuckerkomponente von Bu-2231 A und B wurde auch im Vergleich
mit Bleomycin untersucht. Eine Mischung der Komponenten
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A und B wurde in Methanol mit einem stark sauren Harz (Amberlyst
15) während 20 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Basische
Fragmente der Hydrolyse wurden an dem Harz adsorbiert und neutrale Produkte, die in der Lösung freigesetzt wurden, wurden
im Vakuum zu einem klebrigen Sirup konzentriert. Dieses Material wurde trimethylsilyliert und anschliessend gaschromatographisch
analysiert. Bleomycin ergab Peaks, die Glucose und Mannose zuzuordnen waren, und die Bu-2231-Komponenten
zeigten fast das gleiche Eluierungsmuster wie das Bleomycin, was die gleiche Struktur des Kohlenhydratteils der Antibiotika
anzeigte«.
Lokalisierung von Ninhydrin-positiven Zonen (Entfernung vom Ausgangspunkt)*»
Aminosäuren und Amin*
VI I
II
III
VIII IV
XI
VII (X)
* Die Strukturen der Aminosäure- und Amin-Komponenten sind
im Text angegeben,
** Toyo Filterpapier Nr. 51, Pufferlösung: Ameisensäure-Essigsäure-Wasser
(25:75:900)
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Bleomycin A^ | Bu-2231 A | Bu-2231 B |
6,5 cm | - | — |
9,7 | 9,7 | 9,7 |
12,0 | 12,0 | 12,0 |
13,5 | - | - |
- | 14,8 | 14,8 |
16,0 | 16,0 | 16,0 |
18,5 | 18,5 | 18,5 |
- | 23,0 | - |
31.5 | 31,5 | 31,5 |
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Die minimalen inhibitorischen Konzentrationen (MIC) von Bu-2231 A und B wurden gegenüber einer Vielzahl von Bakterien
und Fungi nach der zweifachen Agar-Verdünnungsmethode untersucht. Es wurde ein MUller-Hinton-Agar-Medium zur Bestimmung
der bakteriellen MIC-Werte (grampositiv und gramnegativ) verwendet.
Für säurefeste Bakterien wurde ein Medium Nr. 1001 verwendet /Glycerin (3%), Natriumglutamat (0,3%), Pepton
(0,2%), Na2HPO4 (0,31%), KH2PO4 (0,196), Ammoniumeitrat (0,005%),
MgSO4.7H£0 (0,001%), Agar (1,5%)/. Für Fungi wurde ein Sabouraud-Agar
verwendet.
Die Ergebnisse sind in den Tabellen 9 und 10 im Vergleich mit
Bleomycin und Phleomycin aufgezeigt. Die antibakteriellen Wirksamkeiten und Antifungus-Wirksamkeit von Bu-2231 A und B
liegen über denen der Vergleichsantibiotika. Bu-2231Azeigte
eine etwas stärkere antibakterielle Wirksamkeit als das Bu-2231 B, war jedoch in seiner Antifungus-Wirksamkeit geringer.
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O
CD
CO
O
O
CD
Testorganismus
E.coil NIHJ
" Juhl AI5II9
" Juhl AI5II9
" K-12 A9632
" A20665
" A20683
" A20732
E.cloacae A21006
K.pneumoniae D11
" A9678
K.pneumoniae D11
" A9678
" A20680
" A20328
P.vulgaris A9436
P.morganii A9553
P.mirabilis A9554
P.rettgeri A15167
P.stuartii A20854
H A20734
P.morganii A9553
P.mirabilis A9554
P.rettgeri A15167
P.stuartii A20854
H A20734
S.marcescens A20019
" A20460
" A20460
" A2O333
" A21235
P.aeruginosa A9923
" A993O
" A993O
" H9, D 113
" A20741
Bu-2231 A
Bu-2231 B
Bleomycin Phleomycin
NIHJ
0,025
0,1
0,05
0,05
6,3
0,05
1,6
<ro,oo63
0,2
6,3
0,8
0,2
0,4
0,1
0,4
0,4
0,4
0,4
0,4
0,2
0,2
50
6,3
0,8
0,2
0,4
0,1
0,4
0,4
0,4
0,4
0,4
0,2
0,2
50
0,4
>1OO
0,2
>1OO
0,2
gramnegativ
0,025
0,1
0,05
0,05 25
0,05
1,6
0,0125
0,4 50
0,8
0,4
0,4
0,1
0,4
0,4
0,4
0,4
0,4
0,2
0,4 >100
0,4 >100
0,2
0,2
0,2
0,1
0,05 12,5
0,2
6,3
0,025
0,4 25
1,6
0,2
1,6
0,2
0,8
0,4
0,8
0,8
0,8
0,8
1,6 >100
0,8 >100
0,2 0,1 0,2 0,2
0,25 50
0,1
12,5 < 0,0063
0,4 100
1,6 0,2 1,6 0,2 0,8 0,8 0,8 0,8 0,8 0,4
1,6 >1OO
1,6 >1OO
0,2
0,8 1,6 0,8 0,2
>100 1,6
>100 0,2
6,3 >1OO 25
6,3 >100 50 >100
3,1 >100 >100
>100 >100
100
>100 >100
•100
12,5
Nr.616
0,8 1,6 1,6 0,4
100
1,6 50
0,4 12,5
100
100 0,8
6,3 1,6
3,1 0,8 1,6 0,8 0,8 0,8 0,8
100 3,1
100 6,3
Fortsetzung Tabelle 9
TestOrganismus
S.aureus 209P
« Smith A9537
" Nr.193
M 209P, R4
" A20239
" BX-1633, A9606
S.lutea PCI-1001
M.flavus D12
B.mycoides "0"
B.sphaericus Nr.122
B.cereus ATCC 10702A
B.subtilis PCI-219
B.ahthracis 115
Mycobacterium 607, D87
" 607, D46
" 607, D46
w 607, D47
" phlei, D88
" ranae, ATCC110
" ranae, ATCC110
Bu-2231 A
Bu-2231 B
0,1
0,1
0,1
0,4
0,2
0,2
0,2
0,2
0,2 <O,OO63
0,2 <TO,OO63
0,05
grampositiv
0,2
0,1
0,2
0,4
0,2
0,2
0,2
0,2
0,1 <r 0,0063
0,2 /0,0063
0,05
0,4 0,05 0,4 0,8 0,8 0,8 0,4 0,4 0,2 0,2 0,2
<^O,OO63 0,1
säurefest
0,2 | 0,1 |
0,1 | 0,1 |
0,1 | 0,1 |
0,05 | 0,05 |
0,1 | 0,1 |
0,1 0,1
0,05 0,05
0,1
0,4
0,05
0,4
0,8
0,8
0,2
0,8
0,8
0,2
0,2
0,1
0,05
0,4
0,8
0,8
0,2
0,8
0,8
0,2
0,2
0,1
40,0063
0,2
0,2
Bleomycin Phleomycin NIHJ Nr.616
6,3
3,1
12,5
12,5
12,5
12,5
12,5
12,5
6,3
100
50
12,5
100
50
12,5
6,3
1.6
<f 0,0063
12,5
12,5
0,05 | 0,8 |
0,05 | 0,2 |
0,025 | 0,4 |
0,025 | 0,2 |
0,05 | 0,8 |
0,2
0,1
0,2 0,4 0,4 0,4 0,4 0,2 0,2 0,4 0,2
<O,OO63 0,4
0,4 0,2 0,2 0,1 0,4
CD CO CO
BBRI
Code- Testorganismus
Nr.
Bu-2231 A
Cu-
frei
Cu-Komplex
Bu-2231 B
Cufrei Cu-Komplex
Bleomycin
NIHJ
NIHJ
Phleomycin Nr.616
Ca-I
Ca-2
Ca-4
Ck-I
Ck-2
Ct-I
Ct-4
Cn-I
Cn-2
Sc-I
Sc-2
An-I
Af-I
Hy-I
Sy-I
Vx-I
My-I
Fm-I
Cl-I
Pt-I
Tm-I
Ta-I
Tr-I
Mc-I
Ca-2
Ca-4
Ck-I
Ck-2
Ct-I
Ct-4
Cn-I
Cn-2
Sc-I
Sc-2
An-I
Af-I
Hy-I
Sy-I
Vx-I
My-I
Fm-I
Cl-I
Pt-I
Tm-I
Ta-I
Tr-I
Mc-I
C,
Il
Il
C. kruset IAM 4489
I!
Il
albtcans IAM 4888 0.8
Nystatin-R 0.8
#520 Yale A9540 3.1
0.8 0.8 0.8 0.8 0.4 0.4 0.4 0.4 0.2 0.8. 0.8
• #96 A15052
tropicalis IAM 4157
tropicalis IAM 4157
#125 A15051
neo formans
neo formans
IAM 4514
S. cerevisiae ATCC 9763
IAM 4009
IAM 4009
A. niger var Tieghem
ϋ· futnlgatus IAM 2530
Hormodendrum sp.
Sporotrinbum sp.
Verticillium sp.
Mucor sp.
ϋ· futnlgatus IAM 2530
Hormodendrum sp.
Sporotrinbum sp.
Verticillium sp.
Mucor sp.
C.
T.
T.
M.
NRRL A2284
lunata ATCC 13432
cit:rinum IAM 7008
mentagrophytes D-155
asteroides rubrum D-55
canis D-51 ·
cit:rinum IAM 7008
mentagrophytes D-155
asteroides rubrum D-55
canis D-51 ·
3,
3,
3,
1 1
6.3
0,8 0.8 1.6 12.5 3.1 3.1 3.1
1.6 1.6 6.3 0.8 0.8 1.6 1.6 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.4 0.2 3.1 6.3
6.3 0.8 0.2 1.6 12.5 . 1.6 1.6
0.8 0.8 1.6 0.4 0.4 0.8" 0.8 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.4 0.2 3.1 1.6
3.1 0.8 0.2 1.6 6.3 0.8 0.8 0.8
0.8
0.8
3.1
0.2
0.2
0.8
0.8
1
1
1
1
1
1
1
0.2
0.2
0.2
1.6
3.1
3.1
0.8
0.2
0.8
6-3
1.6
1.6
1.6
,5 ,5
,5
.1 ,5
12,
12.
>100
12.
3,
12,
>100
1.6 1.6 0.8 0.4 0.4 0.8 0.8
>100
6.3 3.1
MOO
0.1
>100
>100
>100
>100
>100
3.1 1.6 6.3 0.8 0.8 3.1 6.3 0.4 0.4 0.8 0.8 0.4 0.8
. 0.8
12.5 6.3 3.1
12.5 0.4 3.1
12.5 6.3 3.1 6.3
M/17188
Die Aktivität in vivo des Bu-2231-Komplexes wurde an experimentellen
Infektionen von Mäusen gegen S.aureus Smith und E. coli NIHJ untersucht. Als Vergleichsantibiotikum wurde Bleomycin
verwendet. Die Ergebnisse sind in der Tabelle 11 aufgeführt. Bu-2231 war etwa 2Ofach (S.aureus) bis 8Ofach (E.coli)
wirksamer als Bleomycin, ausgedrückt als Wert der mittleren Schutzdosis
Tabelle 11 | Bleomycin | Bleomycin | |
4/5 | 5/5 | ||
Aktivität in vivo von Bu-2231 | - | 1/5 | |
Dosis (se) | gegenüber S.aureus Smith-Infektion | 2/5 | 1/5 |
8 mg/kg | Bu-2231 (A + B) | 0/5 | |
4 | mm | V5 | |
2 | - | - | - |
1 | - | 0/5 | 2,55 mg/kg |
0,5 | 5/5 | - | |
0,25 | 5/5 | - | |
0,13 | 5/5 | 2,5 mg/kg | |
0,06 | 1/5 | gegenüber E.coli NIHJ-Infektion | |
0,03 | 1/5 | Bu-2231 (A + B) | |
PD50 | 0/5 | ||
0,14 mg/kg | 5/5 | ||
Dosis (se) | 5/5 | ||
8 mg/kg | 5/5 | ||
2 | 2/5 | ||
0,5 | 1/5 | ||
0,13 | 0,031 mg/kg | ||
0,03 | 709878/1009 | ||
0,008 | |||
PD50 | |||
2G38766 M/17188 - se -
a»
Die Aktivität in vivo der einzelnen Komponenten von Bu-2231
wurde sowohl in der kupferfreien als auch in der Form des Kupfer-Komplexes bei der E.coli-Infektion untersucht. Wie aus
der Tabelle 12 ersichtlich ist, war das Bu-2231 A etwas aktiver als das Bu-2231 B. Die Anwesenheit des Kupfers im Bu-2231 Molekül
beeinflusste die in vivo-Wirkung nicht nennenswert.
Aktivität in vivo von Bu-2231 A und B in der kupferfreien Form sowie in der Form des Kupfer-Komplexes
(gegen E.coli NIHJ-Infektion)
Bu-2231 A | 5/5 | Bu-2231 B | 3/5 | |
Dosis (se) | Cu-frei Cu-Komplex | 5/5 | Cu-frei Cu-Komplex | 5/5 |
8 | — | 5/5 | 5/5 | |
2 | 5/5 | 4/5 | 5/5 | 3/5 |
0,5 | 5/5 | 3/5 | 5/5 | 2/5 |
0,13 | 5/5 | 0/5 | 4/5 | 2/5 |
0,03 | 3/5 | 0,031 | 1/5 | 0,040 |
0,008 | 1/5 | mg/kg | 0/5 | mg/kg |
PDso | 0,024 | 0,065 | ||
mg/kg | mg/kg |
Die akute Toxizität des kupferfreien Bu-2231 A und B wurde an Mäusen durch eine einzige subcutane Injektion bestimmt.
Für Jede Dosis wurden Gruppen von drei Mäusen verwendet und das Körpergewicht wurde während 16 Tagen aufgezeichnet. Die
Ergebnisse sind in der Tabelle 13 aufgeführt. Das Bu-2231 A erwies sich als etwas toxischer als das Bu-2231 B. Bei einer
Dosis bis zu 50 mg/kg traten bei Bu-2231 B keine Todesfälle auf, jedoch wurde an allen untersuchten Tieren eine Abnahme
des Körpergewichts festgestellte
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Bu-2231 A | Dosis (se) | Anzahl der überlebenden an ,iedem Tag |
3 | 3 | 2 | 3 | 3 | 5 | 3 | 3 | 9 | 3 | 3 | 12 | 3 | 3 | Tiere | 3 | 3 | Mittleres (er) |
15,0 | Körpergewicht | 16 | LD50 | 7188 | |
Cu-frei | O | 3 | 1 | O | O | 16 | JL | 14,7 | 10 | - | ||||||||||||||||
50 mg/kg | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 2 | 3 | O | 3 | 19,3 | 16,7 | - | 14,5 | |||||||||||
25 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 2 | 3 | 20,0 | 18,7 | 13,3 | 16,3 | ||||||||||||||
12,5 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 20,0 | 15,7 | 19,3 | 28 mg/kß |
||||||||||||||||
O | Bu-2231 B | 6,3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 20,0 | 15,7 | 17,3 | |||||||||||||||
CO | Cu-frei | 15,7 | 15,3 | |||||||||||||||||||||||
OO
N> |
50 mg/kg | 19,3 | 16,7 | 14,7 | 17,3 | |||||||||||||||||||||
OO
— |
25 | 18,7 | 16,0 | 16,7 | 20,7 | >50 mg/kg |
si | |||||||||||||||||||
O | 12,5 | 20,0 | 19,3 | 20,3 | I | |||||||||||||||||||||
O
CO |
6,3 | 18,7 | 18,7 | |||||||||||||||||||||||
M/17188
07GG
Es wurde auch gefunden, dass der Bu-2231-Komplex und seine
Hauptkomponenten Bu-2231 A und B zusätzlich zu der vorstehend gezeigten antimikrobiellen Wirksamkeit auch verschiedene experimentelle
Tumore bei Tieren inhibieren. Im nachfolgenden sind Untersuchungen beschrieben, die an zwei transplantierten Nagetiertumorsystemen
durchgeführt wurden, nämlich am Walker 256 Karzinosarkom in der Ascitesform und am Lewis-Lungenkarzinom
mit intraperitonealer Tumorbreiverpflanzung. Die angewendete Methodologie entsprach im allgemeinen der vom National Cancer
Institute in Cancer Chemotherapy Reports 3 (2):1-103 (1972) beschriebenen. Die wesentlichen Einzelheiten der Untersuchungen
sind in den nachfolgenden Tabellen I bis III aufgeführt.
Dosis mcg/kg/Tag |
Versuch-Nr« | C | Walker 256-Ascites-Tumor | +10 | überlebende Tag Tag 5 44 |
4/6 | |
2560 | MST Tage |
.5439 | + 9 | 6/6 | 1/6 | ||
Tabelle ] | 640 | >44,0 | Wirkung Durch- MST schnitt- 96T/C liehe Ge- wichtsän- derung/κ |
+11 | 6/6 | 0/6 | |
Wirkung von Bu-2231 auf den | 160 | 17,5 | >489 | + 7,5 | 6/6 | 0/6 | |
2560 | 10,0 | 194 | +18 | 6/6 | 5/6 | ||
Verbindung | 640 | 26,0 | 111 | +19 | 6/6 | 4/6 | |
Bleomycin | 160 | >44,0 | 288 | +19,5 | 6/6 | 1/6 | |
40 | >44,0 | ^489 | +18 | 6/6 | 1/6 | ||
10 | 9,0 | >489 | +34 | 6/6 | 0/10 | ||
Bu-2231 | 8,5 | 100 | 10/10 | ||||
9,0 | 94 | ||||||
Kontroll salzlösung |
|||||||
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M/17188
Tumor:
Behandlung:
Behandlung:
Bewertung: Wirkung: Kriterien:
Überlebende:
JS
10 Asciteszellen, i.p.in weibliche SD-Ratten implantiert.
Einmal täglich während acht Tagen, beginnend mit dem ersten Tag i.p.
MST - Mittlere Überlebenszeit in Tagen.
96T/C = MST behandelt/MST Kontrolle χ 100
T/C > 125 bedeutet eine beträchtliche Inhibierung
des Tumors (Verlängerung der Lebensdauer des Wirtes).
Bewertung der T'oxizität und der Gewichtsänderung am 5.Tag; am 44.Tag wurde die Untersuchung
abgeschlossen. Die Überlebenden waren "geheilt". Die anderen Tiere starben am Tumor.
Tabelle II | 640 | 1 | Untersuchung Nr. | Wirkung MST %T/C |
5501 | Überlebende Tag 5 |
|
Wirkung | 160 | MST Tage |
179 | Durch schnitt liche Ge- wichtsän- derung/ß |
6/6 | ||
640 | 12,5 | 157 | + 4,5 | 6/6 | |||
der Bu-2231-Fraktionen auf den Walker 256- | 160 | 11,0 | 250 | + 7,8 | 6/6 | ||
Ascites-Tumor - | 40 | 17,5 | 179 | + 7,2 | 6/6 | ||
Dosis Verbindung mcg/kg/Tag |
10 | 12,5 | 157 | +28,8 | 6/6 | ||
Bleomycin | 640 | 11,0 | 129 | + 6,0 | 6/6 | ||
160 | 9,0 | 186 | + 5,5 | 6/6 | |||
Bu-2231 A | 40 | 13,0 | 186 | +10,7 | 6/6 | ||
10 | 13,0 | 157 | +36,5 | 6/6 | |||
11,0 | 114 | + 8,3 | 6/6 | ||||
8,0 | ... | +36,5 | 10/10 | ||||
Bu-2231 B | 7,0 | M009 | +38,4 | ||||
Ό9828/ | |||||||
Kontroll salzlösung |
|||||||
M/17188
Tumor:
Behandlung s
Behandlung s
Bewertung: Wirkung:
Kriterien:
Überlebende:
10 Asciteszellen, implantiert i.p. in weibliche SD-Ratten .
feinmal täglich i.p.während acht Tagen, beginnend
am ersten Tag.
MST = mittlere Überlebenszeit in Tagen.
S6T/C = MST behandelt/MST Kontrolle χ 100
S6T/C = MST behandelt/MST Kontrolle χ 100
125 bedeutet eine beträchtliche Inhibierung
des Tumors (Verlängerung der überlebenszeit des Wirtes).
Toxizitätsbewertung und Aufzeichnung der Gewichtsänderung am 5.Tag.
genkarzinom
Untersuchung Nr. 55
Verbindung | Dosis mcg/kg/Tag |
MST Tage |
Wirkung MST %T/C |
Durch schnitt liche Ge wichtsän derung/ff |
Bleomycin | 8 | 10,5 | 48 | - 1,1 |
4 | 12,5 | 57 | - 2,3 | |
2 | 24,0 | 109 | - 1,5 | |
1 | 24,0 | 109 | - 1,3 | |
Bu-2231 A | 8 | 6,0 | 27 | - 3,3 |
4 | 7,0 | 32 | - 3,1 | |
2 | 25,0 | 114 | - 1,3 | |
1 | 27,0 | 123 | - 2,3 | |
0,5 | 26,5 | 120 | - 1,1 | |
Bu-2231 B | 8 | 6,0 | 27 | - 1,8 |
4 | 10,5 | 48 | - 1,4 | |
2 | 30,0 | 136 | - 1,8 | |
1 | 29,5 | 134 | - 0,8 |
überlebende
Tag
6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 6/6 5/6 6/6 6/6 6/6
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M/17188
Fortsetzung Tabelle III
Wirkung Durch- überlebende Dosis MST MST schnitt- „
Verbindung mcg/kg/Tag Tage %T/C liehe Ge- g
wichtsän- 5 derung/g
Bu-2231 B
Kontrollsalzlösung
0,5
22,5 22,0
102
- 1,1
- 0,8
6/6 10/10
Tumor:
Behandlung:
Behandlung:
Bewertung: Wirkung: Kriterien:
Überlebende:
2 χ 10 Zellen aus zerkleinertem Tumorbrei implantiert i.p. in männliche C57 Bl/6 Mäuse.
Einmal täglich i.p. während neun Tagen, beginnend am ersten Tag.
MST = Mittlere Überlebenszeit in Tagen. %1/C = MST behandelt/MST Kontrolle χ 100.
T/C > 125 bedeutet eine beträchtliche Inhibierung des Tumors (Verlängerung der Lebenszeit
des Wirtes).
Bewertung der Toxizität und Aufzeichnung der Gewichtsänderung am 5.Tag.
Die in den Tabellan aufgeführten Ergebnisse sind folgendermassen
zu interpretieren:
Die Untersuchungen wurden am Walker 256-Ascites-Tumor mit dem Komplex Bu-2231 sowie mit dem Bleomycin-Komplex zum Vergleich
durchgeführt. Die Dosis von 2560 mcg/kg ist wirksam, jedoch toxisch, da der Wert T/C unter der nächstniedrigeren Dosis lag
und keine langzeitigen Überlebenden (A4 Tage) festgestellt wurden. Die minimal wirksame Dosis (MED) des Bleomycins betrug
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M/17188 -*♦-
640 mcg/kg, wohingegen die MED von Bu-2231 160 mcg/kg betrug,
was anzeigte, dass Bu-2231 etwa viermal stärker wirksam als Bleomycin ist.
Bu-2231 A und B wurden in Form ihrer kupferfreien Formiatsalze am Walker 256-Ascites-Tumor untersucht. Die wahrscheinlich
minimal wirksame Dosis (MED) beträgt bei dieser Untersuchung 160 mcg/kg. Ein vergleichsweiser Anstieg der Überlebenden (T/C
=s 157) wurde bei beiden Komponenten bei 40 mcg/kg festgestellt,
was anzeigt, dass die Wirksamkeit von Bu-2231 A und B vierfach überlegen ist. Die Komponente A kann leicht wirksamer sein als
die Komponente B (Wirksamkeit bei 10 mcg/kg), jedoch kann der Unterschied nicht als bedeutend angesehen werden.
Bleomycin zeigte gelegentlich bei der Untersuchung am Lewis-Lungenkarzinom
starke Grenzwirkungen. Bei dieser Untersuchung lag Bu-2231 A bei einer Verabreichung von 1 mg/kg (T/C = 123)
gerade unter dem aktiven Niveau, wohingegen Bu-2231 B bei Dosierungen von 2 und 1 mg/kg aktiv war.
Die folgenden Beispiele dienen lediglich zur Erläuterung der Erfindung, ohne sie zu beschränken. CM-Sephadex C-25 ist ein
Handelsname für ein trockenes unlösliches Pulver (hergestellt von der Pharmacia Fine Chemicals Inc.), bestehend aus mikroskopischen
Kügelchen, die synthetische organische Verbindungen sind und funktionelle Carboxymethylgruppen enthalten, und sich
von Polysacchariddextran ableiten. Amberlyst 15 ist ein Handelsname für ein Ionenaustauscherharz der Rohm & Haas Company»
Amberlite XAD-2 ist ein Warenzeichen für ein adsorbierendes
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Harz, das aus einem Styrol-divinylbenzol-Copolymeren der Rohm
& Haas Company besteht.
Eine gut gewachsene Agar-Schrägkultur des Bu-2231 produzierenden
Organismus E465-94 wurde zum Inokulieren eines flüssigen wachstumfördernden Mediums aus folgenden Bestandteilen verwendet:
1,5% Glucose, 0,5% Polypepton, 0,2% Hefeextrakt, 0,05% K2HPO4 und 0,05% MgSO4.7Η£0. Die Impfkultür wurde bei 28°C
während zwei Tagen auf einem Rotationsschüttler (250 Upm) inkubiert
und 2 ml der Kultur wurden in 100 ml des Fermentationsmediums
in einem 500 ml Erlencieyer-Kolben gefügt, das folgende Zusammensetzung aufwies: 2% Glycerin, 1% Pharmamedien, 1%
Mais-Quellflüssigkeit, 0,3% (NH4J2SO4, 0,003% ZnSO4.7H2O und
0,4% CaCO,. Die Erzeugung des Antibiotikums erreichte nach drej-bis fünftägigem Schütteln bei 280C ein Maximum.
Die gewonnene Brühe (etwa 10 1, 50 mcg/ml), die gemäss Beispiel
1 hergestellt wurde, wurde filtriert und das bioaktive Material im Filtrat wurde beim pH-Wert 7 an Amberlite IRC-50
(NH4-Form, 900 ml) adsorbiert. Das Harz wurde mit 5 1 Wasser
und anschliessend mit 4 1 0,25n-NH40H-Lösung gewaschen, um
Nebramycin-Faktoren .zu eluiersn. Der Bu-2231-Komplex wurde
anschliessend mit dreimal ein Liter HCl-Lösung vom pH-Wert 2
eluiert. Die Bu-2231-Fraktionen wurden vereint, an 30 g Kohle adsorbiert und mit dreimal ein Liter wässrigem Butanol vom
pH-Wert 2 eluiert. Die Butanolschicht wurde abgetrennt und die
wässrige Schicht wurde im Vakuum zur Trockne konzentriert. Der so erhaltene rohe Feststoff (1,2 g) wurde durch Chromatographie
an Amberlite XAD-2 und anschliessend an Sephadex LH-20 gereinigt, wobei man ein schwach-grünliches Pulver des Bu-2231·
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Komplexes (150 mg in Form des Kupferkomplexes) erhielt.
Zur Trennung ^eder Komponente wurden 140 mg des Bu-2231-Komplexes
in 3 ml 0,7% Kupfer-II-chloridlösung gelöst und auf
eine Säule von 85 ml CK-SephadexC-25 aufgetragen, die im Gradienten
mit wässriger Ammoniumformiatlösung von 1-7% eluiert
wurde. Bu-2231 B wurde mit 3% Ammoniumformiatlösung und Bu-2231
A bei einer Konzentration von 5% eluiert. Jede Fraktion wurde durch Chromatographie an Sephadex LH-20 entsalzt, im Vakuum
konzentriert und lyophilisiert, wobei man die Jeweiligen Formiatsalze
von Bu-2231 A (84 mg) und B (21 mg) (Kupfer-Komplexformen) erhielt. Die kupferfreien Formiatsalzpräparate wurden
durch Behandeln der Kupfer-Komplexformen mit H2S in Methanol
nach der allgemeinen Arbeitsweise des Beispiels 1 der US-Patentschrift 3t646,197 erhalten.
Eine Lösung von 750 mg des kupferfreien Bu-2231 A-Formiats in 100 ml Methanol wurde durch Zusatz von 2n-methanolischer Chlorwasserstoff
lösung auf den pH-Wert 2,0 eingestellt. Die Lösung wurde anschliessend unter Rühren zu 300 ml Aceton getropft. Die
Ausfällung, die sich bildete, wurde durch Filtrieren abgetrennt und im Vakuum getrocknet, wobei man 673 mg des rohen Bu-2231 A-Hydrochloridsalzes
als weisses Pulver erhielt. Ein Teil von 140 mg dieses Pulvers wurde auf eine Säule aufgetragen, die
70 ml Sephadex LH-20 (Handelsname für ein modifiziertes alkyliertes
Dextrangel der Pharmacia Fine Chemicals Inc.), eingefüllt in 98% Methanol, enthielt. Die Säule wurde mit 98% Methanol
entwickelt und die bioaktiven Fraktionen wurden gesammelt, im Vakuum konzentriert und lyophilisiert, wobei man 105 mg des
kupferfreien Hydrochlorids von Bu-2231 A erhielt.
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Leerseite
Claims (4)
- P a tentansprücheAntibiotikum mit der Bezeichnung Bu-2231 A oder seine pharmazeutisch brauchbaren Säureadditionssalze, das in Form eines Glykopeptidkomplexes vorliegt, wobei die antibiotische Substanz eine Base ist, die sowohl in einer Kupfer-Komplexform als auch in einer kupferfreien Form vorliegen kann, das bei der sauren Hydrolyse die Aminosäuren L-Threonin, ß-Amino-ß-(4-amino-6-carboxy-5-raethylpyrimidin-2-yl)-propionsäure, ß-Hydroxyhistidin, L-ß-Aminoalanin, 4-Amino-3-hydroxyn-valeriansäure, ß-Lysin und eine Aminosäure ergibt, die im Ultraviolett-Absorptionsspektrum ein Maximum bei 283 mu (E..£ 280) aufweist, als terminales Amin Spermidin und die Kohlenhydrate Mannose und Gulose ergibt; das in der Form des Kupferkomplexes 1. ein bläulicher amorpher Feststoff ist, der in Wasser und Methanol löslich ist, gering löslich ist in Äthanol und praktisch unlöslich ist in anderen organischen Lösungsmitteln, 2. eine positive Reaktion mit Ninhydrin ergibt, 3. die folgende Elementaranalyse (in %) aufweist: C 42,66, H 6,16, N 15,31 und S 3,14, 4. eine Ultraviolett-Absorption^ mix 243 und 291 Ψ (2I^Cm = 125 1^ 98) aufweist, 5- eineJ °spezifische Drehung von /WJq = +50° (c 0,5, H2O) aufweist und 6. bei der Dünnschichtchromatographie unter Anwendung von Siliciumdioxidgel und Methanol-10% Ammoniumacetat (1:1) einen Rf-Wert von 0,22 und bei Anwendung von Siliciumdioxidgel und Methanol-1096 Ammoniumacetat - MJft Ammoniumhydroxid (10:9:1) einen Rf-Wert von 0,05 auf v/eist; das in der kupferfreien Form 1. ein weisser amorpher Feststoff ist, 2. eine spezifische Drehung von /et /jp = -21° (c 0,5, H2O) aufweist, 3. die folgende Elementaranalyse (in 56) ergibt: C 45,10, H 6,51,N 16,05 und S 3,55, 4. Ultraviolett-Absorptionen L%2° 235 1wax196
und 290 rn^i (E1Jj1n Schulter und 67) aufweist und 5. bei der Dünnschichtchromatographie unter Anwendung von Siliciumdioxidgel und Methanol-10% Ammoniumformiat (1:1) einen Rf-Wert von 0,16 und unter Anwendung von Siliciumdioxidgel und Methanol-709828/1009ORIGINAL INSPECTSsD10% Ammoniumacetat -10% Ammoniumhydroxid (10:9:1) einen Rf-Wert von 0,04 aufweist; das in der kupferfreien Form als Hydrochloridealζ in mit Kaliumbromid gepresster Form ein Infrarotspektrum aufweist, das im wesentlichen in der Figur 1 gezeigt ist, und das bei der Auflösung in Deuteriumoxid in einer Konzentration von 10% ein NI-IR-Spektrum ergibt, das im wesentlichen in der Figur 2 gezeigt ist; und das sowohl in der kupferfreien Form als auch in Form des Kupfer-Komplexes das Wachstum von Bakterien und Pilzen wirksam inhibiert. - 2. Das mit Bu-2231 A bezeichnete Antibiotikum gemäss Anspruch 1 als Formiatsalz oder Hydrochloridsalz der freien Base.
- 3. Antibiotikum mit der Bezeichnung Bu-2231 B oder seine pharmazeutisch brauchbaren Säureadditionssalze, das in Form eines Glykopeptids vorliegt, eine Base ist, die sowohl in der Form eines Kupfer-Komplexes als auch in einer kupferfreien Form vorliegen kann; das bei der sauren Hydrolyse die Aminosäuren L-Threonin, ß-Araino-ß-(4-amino-6-carboxy-5-methyl-pyrimidin-2-yl)-propionsäure, ß-Hydroxyhistidin, L-ß-Aminoalanin, 4-Amino-3-hydroxy-n-valeriansäure und eine Aminosäure, die im Ultraviolettabsorptionsspektrum1?£
ein Maximum bei 283 mu (E1Jn £ 280) aufweist, das endständige Amin. Spermidin und die Kohlenhydrate Mannose und Gulose ergibt; das in Form des Kupfer-Komplexes 1. ein bläulich-amorpher Feststoff ist, der in Wasser und Methanol löslich, gering löslich in Äthanol und praktisch unlöslich in anderen organischen Lösungsmitteln ist, 2. eine positive Reaktion mit Ninhydrin ergibt, 3. die folgende Elementaranalyse (in %) aufweist: C 40,96, H 5,61, N 14,78 und S 3,39, 4. die Ultraviolett-Absorptionen 1 ]*2° 243 und 291 mu (e2* und 109) zeigt, 5. eine spezifische Drehung von /oC/q = +76° (c 0,5, HpO) ergibt und 6. bei der Dünnschichtchromatographie unter Anwendung von Siliciumdioxidgel und Methanol-10% Ammoniumacetat (1:1) den Rf-Wert 0,41 und unter Anwendung7098?Β / 1 009von Siliciumdioxidgel und Methanol-10% Ammoniumacetat-10% Ammoniumhydroxid (10:9:1) den Rf-Wert 0,11 ergibt; das in der kupferfreien Form 1. ein weisser amorpher Feststoff ist, 2. eine spezifische Drehung von /dl/-q - -19° (c 0,5, H2O), aufweist, 3. folgende Elemtaranalyse (in %) ergibt: C 43,01, H 6,22, N 14,81 und S 3t61, 4. die Ultraviolett-Absorptionen ^"Six 235 Und 289»5 ^ (E1cm Schulter und 77) ergibt und 5. bei der Dünnschichtchromatographie unter Anwendung von Siliciumdioxidgel und Methanol-1096 Ammoniumformiat (1:1) den Rf-Wert 0,31 und unter Anwendung von Siliciumdioxidgel und Methanol-1096 Ammoniumacetat-10% Ammoniumhydroxid (10:9:1) den Rf-Wert 0,09 ergibt; das als kupferfreies Formiatsalz gepresst mit Kaliumbromid.das im wesentlichen in Figur 3 gezeigte Infrarotspektrum ergibt und beim Auflösen in Deuteriumoxid in einer Konzentration von 10% das im wesentlichen in Figur 4 gezeigte NMR-Spektrum ergibt; und das sowohl in der kupferfreien Form als auch in der Form des Kupfer-Komplexes das Wachstum von Bakterien und Pilzen wirksam inhibiert. - 4. Das mit Bu-2231 B bezeichnete Antibiotikum gemäss Anspruch 3 in Form des Formiatsalzes oder Hydrochloridsalzes der freien Base.5. Verfahren zur Herstellung des Antibiotikum-Komplexes Bu-2231)dadurch gekennzeichnet,dass man einen Bu-2231 erzeugenden Stamm von Streptoalloteichus hindustanus in einem wässrigen Nährmedium, das Quellen für assimilierbaren Stickstoff und Kohlenstoff enthält, unter submergen aeroben Bedingungen bzw. unter Bedingungen der aeroben Tauchkultur kultiviert, bis dieser Organismus in dem Medium eine wesentliche Menge an Bu-2231-Komplex erzeugt hat»6. Verfahren gemäss Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass man als Stamm Streptoalloteichus hindustanus A.T.CoC.31158 oder eine Mutante davon verwendet.7 Π Q P Ί R / 1 Π 0 97. Verfahren gemäss Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass man zusätzlich den Komplex Bu-2231 aus dem Kulturmedium durch Abtrennen des wasserlöslichen äntibiotischen Komplexes von dem Mycel, Adsorbieren des Komplexes an einem Kationanaustauscherharz, Abtrennen des koproduzierten Aminoglykosid-Komplexes von dem Glykopeptid Bu-2231-Komplex durch Eluieren des Aminoglykosid-Komplexes mit einer verdünnten Base und Eluieren des Bu-2231-Komplexes von dem Adsorbens mit einer Mineralsäurelösung gewinnt.8. Verfahren gemäss einem der Ansprüche 5 bis 7, dadurch gekennzeichnet, dass man den Komplex Bu-2231 einer Chromatographie unter Eluierung im Gradienten zur Aufspaltung des Komplexes in die Einzelbestandteile Bu-2231 A und B in Form der Kupfer-Komplexe unterzieht und gegebenenfalls die Formen des Kupfer-Komplexes mit Schwefelwasserstoff in Methanol behandelt, um die entsprechenden kupferfreien Formen zu erhalten.9. Verfahren gemäss Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Kupfer-II-chloridlösung des Komplexes Bu-2231 über einen Kationenaustauscher aus einem modifizierten Polysaccharid-Dextranderivat mit funktionellen Carboxymethylgruppen chromatographiert, wobei man als Eluiermittel wässriges Ammoniumformiat in Konzentrationen von 1 bis 7% verwendet.10. Arzneimittel, bestehend aus wenigstens einem Wirkstoff, einem pharmazeutisch brauchbaren Träger und/oder pharmazeutisch brauchbaren Zusätzen, dadurch gekennzeichnet, dass es als Wirkstoff wenigstens eine Verbindung der Ansprüche 1 bis 4 enthält.7098 2 8/1009
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US05/608,494 US4051237A (en) | 1975-08-28 | 1975-08-28 | Glycopeptide antibiotics bu-2231 a and b and process for producing same |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE2638766A1 true DE2638766A1 (de) | 1977-07-14 |
DE2638766C2 DE2638766C2 (de) | 1985-07-04 |
Family
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Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE2638766A Expired DE2638766C2 (de) | 1975-08-28 | 1976-08-27 | Antibiotika,Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende Arzneimittel |
Country Status (13)
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GB (1) | GB1539740A (de) |
HU (1) | HU175049B (de) |
IL (1) | IL50357A (de) |
NL (1) | NL167199C (de) |
SE (1) | SE432781B (de) |
YU (1) | YU39084B (de) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2649604A1 (de) * | 1975-10-29 | 1977-05-05 | Meiji Seika Kaisha | Neue antibiotika sf-1771 und sf- 1771-b und verfahren zu ihrer herstellung |
DE2950980A1 (de) * | 1978-12-27 | 1980-07-03 | Meiji Seika Kaisha | Antibiotikum bn-183b, verfahren zu dessen herstellung und arzneimittel, welche dieses enthalten |
DE3026425A1 (de) * | 1979-07-13 | 1981-01-29 | Bristol Myers Co | Antibiotische verbindungen |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4314028A (en) * | 1979-07-13 | 1982-02-02 | Bristol-Myers Company | Fermentation process for producing tallysomycin compounds |
KR910002457A (ko) * | 1989-07-10 | 1991-02-25 | 원본미기재 | 항 비루스 항생제 bu-3889v |
ID18900A (id) * | 1996-11-21 | 1998-05-20 | Lilly Co Eli | Alkilasi menurun dari gliko peptida anti biotik |
US5952466A (en) * | 1997-11-12 | 1999-09-14 | Eli Lilly And Company | Reductive alkylation of glycopeptide antibiotics |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB1038242A (en) * | 1963-03-05 | 1966-08-10 | Zaidan Hojin Biseibutsu | Bleomycin and processes for preparation thereof |
-
1975
- 1975-08-28 US US05/608,494 patent/US4051237A/en not_active Expired - Lifetime
-
1976
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Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
NICHTS-ERMITTELT * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE2649604A1 (de) * | 1975-10-29 | 1977-05-05 | Meiji Seika Kaisha | Neue antibiotika sf-1771 und sf- 1771-b und verfahren zu ihrer herstellung |
DE2950980A1 (de) * | 1978-12-27 | 1980-07-03 | Meiji Seika Kaisha | Antibiotikum bn-183b, verfahren zu dessen herstellung und arzneimittel, welche dieses enthalten |
DE3026425A1 (de) * | 1979-07-13 | 1981-01-29 | Bristol Myers Co | Antibiotische verbindungen |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPS5231001A (en) | 1977-03-09 |
YU207876A (en) | 1982-06-30 |
DK384076A (de) | 1977-03-01 |
SE432781B (sv) | 1984-04-16 |
NL7609449A (en) | 1977-03-02 |
HU175049B (hu) | 1980-05-28 |
GB1539740A (en) | 1979-01-31 |
DK141372C (de) | 1980-09-01 |
IL50357A (en) | 1979-07-25 |
JPS5653318B2 (de) | 1981-12-17 |
YU39084B (en) | 1984-04-30 |
NL167199C (nl) | 1981-11-16 |
CA1073386A (en) | 1980-03-11 |
US4051237A (en) | 1977-09-27 |
DK141372B (da) | 1980-03-03 |
BE845513A (fr) | 1977-02-25 |
FR2321897A1 (fr) | 1977-03-25 |
NL167199B (nl) | 1981-06-16 |
IL50357A0 (en) | 1976-10-31 |
FR2321897B1 (de) | 1978-11-17 |
DE2638766C2 (de) | 1985-07-04 |
SE7609425L (sv) | 1977-03-01 |
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