DE2513407A1 - Ein verfahren zur differenzierung der leber- und herzspezifischen lactatdehydrogenase im blutserum - Google Patents

Ein verfahren zur differenzierung der leber- und herzspezifischen lactatdehydrogenase im blutserum

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lactate dehydrogenase
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/32—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving dehydrogenase

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Description

  • BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG Titel: Ein Verfahren zur Differenzierung der leber- und herzspezifischen Lactatdehydrogenase im Blutserum.
  • wendungs- Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur organspezifischen biet: Differenzierung der enzymatischen Aktivität der Lactatdehydrogenase in einem kinetischen Test für medizinische Laboratorien.
  • eck: Mit derartigen Differenzierungsverfahren kann ein krankhafter 1-rozeß, der zu einem Anstieg der enzymatischen Aktivität im Serum führt, in ein bestimmtes Organ lokalisiert werden. Wichtig ist insbesondere die Unterscheidung zwischen Herz- und Lebererkrankungen wegen der klinischen Bedeutung dieser Fragestellung.
  • stand der Es ist bekannt, daft zur Erfüllung dieser Erfordernisse Technik: eine gelelektrophoretische Trennung der organspezifischen Isoenzyme vorgenommen werden an, deren Verteilungsmuster eine Lokalisation des Kràl eits?rozesses erlaubt. Um auch im kinetischen Test eine Differenzierung zu erreichen sind vorwiegen zwei Verfahren bekannt geworden. Zum einen die Bestimmung der sog. α-Hydroxybutyratdehydrogenase, bei der die unterschiedlicne Reaktionsgeschwindigkeit der einzelnen Isoenzyme mit dem Substrat α-Hydroxybutyrat zur Differenzierung verwendet wird. Das zweite Verfahren beruht auf der unterschiedlichen Adsorption der einzelnen Isoenzyme an DEAE-Sephadex und anschließende Bestimmung der nicht a dsorbierten LDH-Aktivität.
  • ritik des Die gelelektrophoretische Auftrennung ermöglicht eine Standes der rechnik: optimale Organdifferenzierung ist aber für die analytisch Routine in Klinik und Praxis zu aufwendig. Die kinetische Tests mit Variation des Substrats oder Acisorption an unlösliche Träger sind einerseits wenig spezifisch, anderer seits erfordern sie zusätzliche Arbeitsgänge und sind nur teilweise automatisierbar.
  • Aufgabe: Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine spezifisch Trennung der der herz- bzw. leber typischen LDH zu erreicht und die quantitative Bestimmung ohne zusätzliche Arbeitsg, auf handelsüblichen Enzymautomaten durchzuführen.
  • Lösung: Diese Aufgabe wird erfindungsmäßig dadurch gelöst, daß zu dem LDH-haltigen Blutserum eine Schwermetallsalzlösung zu gesetzt wird, die hochselektiv eine Hemmung der leberspez: fischen LDH herbeiführt. Danach kann die ungehemmte d.h.
  • herzspezifische LDH ohne jede verfahrenstechnische derui auf demselben Gerät bestimmt werden, das auch zur Bestimmt der Gesamt-LDH Verwendung findet.
  • Erzielbare Die mit der Erfindung erzielten Vorteile bestehen darin, Rtorteile: daß ohne jeden zusätzlichen apparativen Aufwand eine orga spezifische Differenzierung der Lactatdehydrogenase ermöglicht wird. Mit Ausnahme des Schwermetallsalzes werden keine Chemikalien benötigt, zusätzliche Arbeitsgänge wie Zentrifugieren, Inkubieren sind nicht erforderlich.
  • ihrungsbeispiel Photometrischer Test im Ultraviolett Wellenlänge 334 nm Schichtdicke der Küvette 1 cm Temperatur 25°C Folgende Volumina dosieren: Serum 4 Vol AgNO3 1 mM 1 Vol Bestimmungsansatz: 50 MM Phosphatpuffer pH 7,5 500 jil o,18 mM NADEL Serum + AgNO3-Lösung 10 µl o,6 mM Pyruvat 20 Berechnung der Vol.Aktivität nach Vol.Akt. = 441 ' tan n (mU/ml) Anschließend Berücksichtigung der 20 %igen Verdünnung durch die AgNO3-Lösung.
  • Die Ergebnisse zahlreicher Bestimmungen mit statistischer Auswertung sind in der Abbildung angegeben.

Claims (1)

  1. PATENTANS PRÜCHE
    Oberbegriff: Ein Verfahren zur Differenzierung der leber- und herzspezifischen Lactatdehydrogenase (LDH) im Blutserum Kennzeichnen- dadurch gekennzeichnet, daß zu dem Blutserum eine der Teil: Schwermetallsalzlösung zugesetzt und anschließend die nicht gehemmte d.h. herzspezifische LDH in einem üblichen Verfahren bestimmt wird.
    ERFINDERBENENNUNG Weitere Personen sind meines Wissens an der Erfindung nicht beteiligt. Der Titel der Erfindung lautet: "Ein Verfahren zur Differenzierung der leber-und herzspezifi schen Lactatdehydrogenase im Blutserum".
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2830453A1 (de) * 1977-07-11 1979-02-01 Eastman Kodak Co Verfahren zur bestimmung der aktivitaet von isoenzymen
EP0292838A1 (de) * 1987-05-28 1988-11-30 Abbott Laboratories Verfahren und Reagens zur Bestimmung von LD-1-Isoenzym
EP0352547A2 (de) * 1988-07-15 1990-01-31 International Reagents Corporation Nachweis von LDH1

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