DE2303495C2 - Herstellung von Ergosterin und seinen Estern - Google Patents
Herstellung von Ergosterin und seinen EsternInfo
- Publication number
- DE2303495C2 DE2303495C2 DE2303495A DE2303495A DE2303495C2 DE 2303495 C2 DE2303495 C2 DE 2303495C2 DE 2303495 A DE2303495 A DE 2303495A DE 2303495 A DE2303495 A DE 2303495A DE 2303495 C2 DE2303495 C2 DE 2303495C2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- ergosterol
- ifo
- parts
- esters
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 28
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 28
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 28
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 title claims description 28
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 title claims description 28
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 title claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 23
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 241001619326 Cephalosporium Species 0.000 claims description 3
- 241001149959 Fusarium sp. Species 0.000 claims description 3
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 3
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 claims description 2
- 241001557886 Trichoderma sp. Species 0.000 claims description 2
- 241000221779 Fusarium sambucinum Species 0.000 claims 1
- 241000223261 Trichoderma viride Species 0.000 claims 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 9
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 9
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N hexane Substances CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N decane Chemical compound CCCCCCCCCC DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N dodecane Chemical compound CCCCCCCCCCCC SNRUBQQJIBEYMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OJDWINNMESMCGK-UHFFFAOYSA-N ergosterol palmitate Natural products C12CCC3(C)C(C(C)C=CC(C)C(C)C)CCC3C2=CC=C2C1(C)CCC(OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C2 OJDWINNMESMCGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OJDWINNMESMCGK-NXCSPJMSSA-N ergosteryl palmitate Chemical compound C([C@@H]12)C[C@]3(C)[C@@H]([C@H](C)\C=C\[C@H](C)C(C)C)CC[C@H]3C1=CC=C1[C@]2(C)CC[C@H](OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCC)C1 OJDWINNMESMCGK-NXCSPJMSSA-N 0.000 description 8
- IIYFAKIEWZDVMP-UHFFFAOYSA-N tridecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCC IIYFAKIEWZDVMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- RSJKGSCJYJTIGS-UHFFFAOYSA-N undecane Chemical compound CCCCCCCCCCC RSJKGSCJYJTIGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 6
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 description 5
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 5
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 4
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 4
- -1 fatty acid esters Chemical class 0.000 description 4
- NDJKXXJCMXVBJW-UHFFFAOYSA-N heptadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCC NDJKXXJCMXVBJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DCAYPVUWAIABOU-UHFFFAOYSA-N hexadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC DCAYPVUWAIABOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CBFCDTFDPHXCNY-UHFFFAOYSA-N icosane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCCC CBFCDTFDPHXCNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LQERIDTXQFOHKA-UHFFFAOYSA-N nonadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCC LQERIDTXQFOHKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RZJRJXONCZWCBN-UHFFFAOYSA-N octadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC RZJRJXONCZWCBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- YCOZIPAWZNQLMR-UHFFFAOYSA-N pentadecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC YCOZIPAWZNQLMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 4
- 239000001818 polyoxyethylene sorbitan monostearate Substances 0.000 description 4
- 235000010989 polyoxyethylene sorbitan monostearate Nutrition 0.000 description 4
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 4
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 4
- BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N tetradecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 3
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- 239000012452 mother liquor Substances 0.000 description 2
- 229940038384 octadecane Drugs 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 5,8-dihydroxy-2-methoxy-6-methyl-7-(2-oxopropyl)naphthalene-1,4-dione Chemical compound CC1=C(CC(C)=O)C(O)=C2C(=O)C(OC)=CC(=O)C2=C1O UHPMCKVQTMMPCG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 229920001214 Polysorbate 60 Polymers 0.000 description 1
- 240000006394 Sorghum bicolor Species 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHJPVZLSLOHJDM-UHFFFAOYSA-N azane;butanedioic acid Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CCC([O-])=O NHJPVZLSLOHJDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGPGDYLVALNKEG-UHFFFAOYSA-N azanium;azane;2,3,4-trihydroxy-4-oxobutanoate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O NGPGDYLVALNKEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N hexanoic acid Chemical compound CCCCCC(O)=O FUZZWVXGSFPDMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Chemical class 0.000 description 1
- 239000002184 metal Chemical class 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002897 organic nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N oxo(oxoalumanyloxy)alumane Chemical compound O=[Al]O[Al]=O TWNQGVIAIRXVLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 150000003016 phosphoric acids Chemical class 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 235000019710 soybean protein Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P33/00—Preparation of steroids
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/925—Cephalosporium
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/929—Fusarium
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/945—Trichoderma
Landscapes
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Erfindungsgegenstana ist das im Patentanspruch 1 angegebene Verfahren. Der Anspruch 2 nennt eine
Ausgestaltung dieses Verfahrens.
Ergosterin und seine Ester sind wichtig als Ausgangsverbindungen für die Synthese von Vitamin D und als
Vorstufe für die Herstellung von synthetischen Steroidhormonen und sind sehr begehrt.
Ergosterin ist als Bestandteil der Zellen von Schimmelpilzen und Hefen bekannt und wird durch
Züchtung von Saccharomyces cerevisiae gewonnen, wobei der Mikroorganismus veranlaßt wird, Ergosterin
intrazellulär anzuhäufen und das Ergosterin aus den Zellen extrahiert wird. Der Ergosteringehalt in den
Zellen ist jedoch nicht sehr hoch, weil Ergosterin als Bestandteil der Zellen vom Stoffwechselsystem der
Zellen abhängt. Der Produktionssteigerung nach diesem bekannten Verfahren ist somit eine Grenze gesetzt. Die
Extraktion der Zellen ist ferner ziemlich umständlich und führt zu hohen Produktionskosten. Aufgabe der
Erfindung ist es daher, ein neues Verfahren zu schaffen, das die Herstellung von Ergosterin oder seinen Estern
vorteilhafter und wirtschaftlicher ermöglicht.
Diese Aufgabe wird mit dem beanspruchten Verfahren gelöst.
Die für die Zwecke der Erfindung verwendeten Mikroorganismen vermögen Ergosterin oder seine
Ester extrazellulär anzuhäufen. Aufgrund der extrazellulär angehäuften großen Menge der Endprodukte und
der leichten Reinigung dieser Verbindungen werden beim Verfahren gemäß der Erfindung Ergosterin oder
seine Ester in hoher Ausbeute erhalten.
Die erfindungsgemäß verwendeten Mikroorganismen sind beim Institute for Fermentation, Osaka, Japan
unter den jeweiligen IFO-Nummern hinterlegt und der Öffentlichkeit zugänglich.
Verschiedene Arten von Estern von Ergosterin mit Fettsäuren können ausschließlich oder gleichzeitig mit
freiem Ergosterin durch Züchtung der verwendeten Mikroorganismen hergestellt werden. In Frage kommen
beispielsweise Ester mit Fettsäuren, die 2 bis 19 C-Atome enthalten. Als typische Beispiele solcher
Fettsäuren sind niedere Fettsäuren wie Essigsäure und höhere Fettsäuren mit 14 bis 18 C-Atomen, z.B.
Palmitinsäure. Stearinsäure und Oleinsäure, zu nennen.
Durch Zugabe der gewünschten Fettsäure oder ihrer Derivate, z. B. der Ester, zum Kulturmedium können die
verschiedensten Arten von Fettsäureestern von Ergosterin hergestellt werden. Wenn die vorstehend
genannten Fettsäuren dem Kulturmedium zugesetzt werden, ist es möglich, das gebildete Ergosterin in Form
der entsprechenden Fettsäureester zu isolieren.
Die Mikroorganismen können auf e.nem festen
Medium oder in einem flüssigen Medium gezüchtet lu werden, jedoch ist für die Großherstellung die
Verwendung eines flüssigen Mediums zweckmäßig. Bei Verwendung eines flüssigen Mediums kann die Züchtung
unter Schütteln oder unter Belüftung und Rührung durchgeführt werden.
Das für das Verfahren gemäß der Erfindung verwendete Kulturmedium enthält assimilierbare Kohlenstoffquellen,
verwertbare Stickstoffquellen, anorganische Salze und Wachstumsfaktoren.
Als Kohlenstoffquellen eignen sich beispielsweise Kohlenwasserstoffe, z. B. Normalparaffine, insbesondere Cio—C2o-Paraffine (z. B. Decan, Undecan, Dodecan, Tridecan, Tetradecan, Pentadecan, Hexadecan, Heptadecan, Octadecan, Nonadecan und Eicosan) und ihre Gemische, Saccharide (z. B. Glucose, Saccharose, Stärke, lösliche Stärke, Endmelasse, Xylose und Galactose), Glycerin, Inosit, Mannit, Hirsegel, Sorbit, Dextrin, Essigsäure, Methanol und Äthanol. Die Kohlenwasserstoffe, insbesondere η-Paraffine, können im Medium als geeignetste Kohienstoffquellen zur Anhäufung einer großen Menge von Ergosterin oder seinen Estern im Medium verwendet werden.
Als Kohlenstoffquellen eignen sich beispielsweise Kohlenwasserstoffe, z. B. Normalparaffine, insbesondere Cio—C2o-Paraffine (z. B. Decan, Undecan, Dodecan, Tridecan, Tetradecan, Pentadecan, Hexadecan, Heptadecan, Octadecan, Nonadecan und Eicosan) und ihre Gemische, Saccharide (z. B. Glucose, Saccharose, Stärke, lösliche Stärke, Endmelasse, Xylose und Galactose), Glycerin, Inosit, Mannit, Hirsegel, Sorbit, Dextrin, Essigsäure, Methanol und Äthanol. Die Kohlenwasserstoffe, insbesondere η-Paraffine, können im Medium als geeignetste Kohienstoffquellen zur Anhäufung einer großen Menge von Ergosterin oder seinen Estern im Medium verwendet werden.
Als Stickstoffquellen eignen sich beispielsweise Bestandteile oder Extrakte von Tieren (z. B. Pepton,
Fleischextrakt und Casein), Bestandteile oder Extrakte von Pflanzen (z. B. Maisquellwasser, entfettetes Sojabohnenmehl,
Trockenhefe, Hefeextrakt, Proteinhydrolysate [z. B. das enzymatische Hydrolysat von Sojabohnenprotein
oder Caseinhydrolysat], Sojabohnenmehl, Baumwollsaatmehl, Reiskleie und Weizenkleie), Ammoniumsalze
von organischen Säuren (Ammoniumsuccinat, Ammoniumtartrat und Ammoniumacetat), anorganische
Stickstoffverbindungen (z. B. Ammoniumchlorid, Ammoniumsulfat und Ammoniumphosphat) und organische
Stickstoffverbindungen (z. B. Harnstoff).
Als anorganische Salze werden beispielsweise Phosphorsäuresalze und Metallsalze, z. B. Kaliumsalze,
Magnesiumsalze oder Calciumsalze, verwendet.
Als Wachstumsfaktoren werden beispielsweise Vitamine, z. B. Biotin oder Thiamin, verwendet.
Die Kultivierungsbedingungen, d. h. der pH-Wert des Mediums, die Kultivierungstemperatur und Kultivierungszeit,
werden so gewählt, daß der Mikroorganismus Ergosterin oder seine Ester in maximaler Menge
anhäuft. Beispielsweise wird bei der Schüttelkultur oder Submerskultur die Züchtung vorteilhaft bei einer
Temperatur von 15 bis 45°C, am besten 20 bis 38°C und bei einem pH-Wert von 2 bis 9, am besten 4 bis 8,10 bis
360 Stunden, am besten 72 bis 192 Stunden durchgeführt.
Die Isolierung und Reinigung des angehäuften Ergosterins oder der angehäuften Ester von Ergosterin
erfolgen in an sich bekannter üblicher Weise. Beispielsweise kann das Kulturmedium mit einem organischen
Lösungsmittel, z. B. η-Hexan, Cyclohexan, Benzol,
Äthylacetat, Butylacetat und Chloroform, extrahiert werden. Die Extraktion kann gegebenenfalls nach der
Entfernung des Mycels vorgenommen werden. Die Produkte gehen bei der Extraktion in das organische
Lösungsmittel Ober. Die Schicht des organischen Lösungsmittels wird abgetrennt und unter vermindertem
Druck eingedampft, wobei als Rückstand ein brauner Sirup erhalten wird. Der Rückstand wird in
Chloroform gelöst und die Lösung über eine mit Kieselgel oder Aluminiumoxyd gefüllte Säule geleitet.
Als Entwickler für die Elution wird Chloroform, Petroläther oder Erdölbenzin verwendet. Isoliert
werden die Fraktionen, die eine starke Absorption bei 283 ΐημ zeigen.
Diese isolierten Anteile werden in einem Lösungsmittel, z. B. Hexan und Äthanol, gelöst und in einem kalten
Raum stehen gelassen, wobei sich das gewünschte Produkt in Form von Kristallen abscheidet
Die Erfindung wird in den folgenden Beispielen weiter erläutert Hierin verstehen sich die Teile als
Gewichtsteile, faüs nicht anders angegeben. Gewichtsteile verhalten sich zu Raumteilen wie Gramm zu ml.
10 Japan 83 [1962], 107) genannten Werten gut überein.
Das Produkt enthält Kohlenstoff-, Wasserstoff- und Sauerstoffatome. Die Elementaranalyse ergibt 82,8% C
und 11,6% H. Das Molekulargewicht wird durch Masserispektrometrie mit 635 ermittelt Das Infrarotspektrum
ist mit dem in der Literatur veröffentlichten Infrarotspektrum völlig identisch.
Die Mutterlauge, die bei der Entfernung der Kristalle von Ergosterylpalmitat durch Filtration zurückbleibt
wird eingedampft und in Chloroform gelöst Die Chloroformlösung wird durch eine Kieselgelsäule
geleitet, worauf mit Chloroform eluiert wird.
Die auf die Elution von Ergosterylpalmitat folgenden Anteile werden aufgefangen und eingeengt, wobei 0,2
Gew.-Teile Ergosterin in Form eines gelben Pulvers erhalten werden. Das Produkt ist in den physikalischen
und chemischen Eigenschaften mit einer authentischen Probe von Ergosterin identisch.
20
Eine Kultur von Fusarium sp. IFO 8884 wird auf einen schräg erstarrten Nährboden (pH 6,5) geimpft, der 1%
Malzextrakt, 1 % Glucose, 1 % Polypepton und 2% Agar enthält, und 168 Stunden bebrütet.
50 Raumteile eines Impfkulturmediums (pH 6,5), das 2% Glucose, 2% Sojabohnenmehl, 0,1% KH2PO4 und
0,5% Sojabohnenöl enthält, wird in einen Fermenter gegossen, der ein Fassungsvermögen von 300 Raumteilen
hat. Nach Sterilisation für 20 Minuten bei 120°C wird
das Medium zur Herstellung einer Impfkultur mit dem auf der Schrägkultur wachsenden Mycel geimpft und
dann 48 Stunden bei 24°C gehalten.
1000 Raumteile eines Fermentationsmediums (pH 6,5), das 13% η-Paraffin (Gemisch von Decan, Undecan,
Dodecan und Tridecan), 7% Polypepton S, 0,8% KH2PO4, 0,2% K2HPO4, 0,1% FeSO4 · 7 H2O, 0,05%
MgSO4 · 7 H2O, 0,01% CaCl2 ■ 2 H2O, 0,5% Sojabohnenöl,
0,5% Polyoxyäthylensorbitanmonostearat und 1% CaCO3 enthält, wird in einen Fermenter gegossen,
der ein Fassungsvermögen von 3000 Raumteilen hat. Nach Sterilisation für 20 Minuten bei 120°C wird das
Medium mit 50 Raumteilen der oben genannten Impfkultur geimpft und dann 90 Stunden bei 24°C
bebrütet.
Das hierbei erhaltene Kulturmedium wird zur Entfernung des Mycels zentrifugiert. Die Kulturflüssigkeit
wird dreimal mit dem 0,5fachen Cyclohexanvolumen extrahiert. Die Cyclohexanschichten werden
isoliert und durch Behandlung mit Natriumsulfat getrocknet und dann unter vermindertem Druck
eingedampft. Das hierbei erhaltene Konzentrat wird in Chloroform gelöst. Die Chloroformlösung wird der
Säulenchromatographie an Kieselgel unterworfen, wobei Petroläther als Entwickler verwendet wird.
Von den Petrolätheifraktionen werden diejenigen, die eine starke Absorption bei 283 πιμ zeigen,
aufgefangen und eingeengt. Der Rückstand wird in Äthanol gelöst und zwei Tage in einem kalten Raum
stehen gelassen. Die ausgefällten rohen farblosen feinen Nadeln werden abfiltriert und aus Äthanol umkristallisiert,
wobei 0,650 Gew.-Teile Ergosterylpalmitat in Form von farblosen Plättchen erhalten werden.
Die Kristalle haben einen Schmelzpunkt von 1080C
und eine in Chloroformlösung gemessene optische (,5
Drehung von [λ] " = —58°. Die physikalischen und chemischen Eigenschaften stimmen mit den in der
Literatur (z. B. Journal of the Parmaceutical Society of
Eine Kultur von Trichoderma sp. IFO 6355 wird auf einen in Röhrchen schräg erstarrten Nährboden, der 1%
Malzextrakt, 1 % Glucose, 1 % Polypepton und 2% Agar enthält, geimpft und 168 Stunden bei 24°C bebrütet.
50 Raumteile eines Nährmediums (pH 6,5) für eine Impfkultur, das 2% Glucose, 2% Sojabohnenmehl, 0,1%
KH2PO4 und 0,5% Sojabohnenöl enthält, wird in einen
Fermenter mit einem Fassungsvermögen von 300 Raumteilen gegossen. Nach Sterilisation für 20 Minuten
bei 1200C wird das Nährmedium mit dem Mycel der Schrägkultur geimpft und dann zur Bildung einer
Impfkultur 48 Stunden bei 24°C gehalten.
Je 20 Raumteile eines Fermentationsmediums (pH 6,5), das 13% η-Paraffin (Gemisch von Decan, Undecan,
Dodecan und Tridecan), 7% Polypepton S, 0,8% KH2PO4, 0,2% K2HPO4, 0,1% FeSO4 · 7 H2O, 0,05%
MgSO4 · 7 H2O, 0,01% CaCl2 ■ 2 H2O, 0,5% Sojabohnenöl,
0,5% Polyoxyäthylensorbitanmonostearat und 1% CaCO3 (getrennt sterilisiert) enthält, werden in 50
Fermenter gegossen, die ein Fassungsvermögen von jeweils 200 Raumteilen haben. Nach Sterilisation für 20
Minuten bei 120"C wird jedes Medium mil I Raumteil
der Impfkultur geimpft und dann 90 Stunden bei 24°C bebrütet. Nach der Bebrütung werden die Kulturmedien
zusammengegossen, worauf das Mycel durch Zentrifugieren entfernt wird. Die Kulturflüssigkeit wird dreimal
mit dem halben Volumen η-Hexan extrahiert. Die Hexanschicht wird mit Natriumsulfat getrocknet und
dann unter vermindeitem Druck eingedampft. Das
Konzentrat wird in Chloroform gelöst und der Säulenchromatographie an Kieselgel unterworfen.
Eluatanteile mit hoher Extinktion bei 283 ιημ werden
aufgefangen, eingeengt und in η-Hexan gelöst. Die Lösung wird zwei Tage in einem kalten Raum stehen
gelassen. Die ausgefällten farblosen feinen Nadeln werden abfiltriert und aus Äthanol umkristallisiert,
wobei 0,56 Gew.-Teile Ergosterylpalmitat in Form von farblosen Plättchen erhalten wird.
Die nach Entfernung der rohen Kristalle von Ergosterylpalmitat durch Filtration erhaltene Mutterlauge
wird eingedampft und der Rückstand in Chloroform gelöst. Die Chloroformlösung wird der
Säulenchromatographie an Kieselgel unterworfen. Die nach der Elution von Ergosterylpalmitat folgenden
Fraktionen werden aufgefangen und eingeengt, wobei 0,15 Gew.-Teile Ergosterin als gelbes Pulver erhalten
wird. Das Produkt hat die gleichen physikalischen und
chemischen Eigenschaften wie eine authentische Probe von Ergosterin.
1000 Raumteile eines Nährmediums (pH 6,5), das 13%
η-Paraffin (Gemisch von Tetradecan, Pentadecan und Hexadecan), 7% Polypepion S, 0,8% KH2PO4, 0,2%
K2HPOi. 0,1% FeSO4 · 7 H2O, 0,05% MgSO4 - 7 H2O,
0,01% CaCl2 - 2 H2O, 0,5% Sojabohnenöl, 0,5% PoIyoxyäthylensorbitanmonostearat
und 1% CaC03 (getrennt sterilisiert) enthält, wird in einen Fermenter mit
einem Fassungsvermögen von 3000 Raumteilen gegossen. Nach der Sterilisation für 20 Minuten bei 1200C
wird das Medium mit 50 Raumteilen der auf die in Beispiel 1 beschriebene Weise hergestellten Impfkultur
von Fusarium sp. IFO 8884 geimpfL
Das geimpfte Medium wird auf die in Beispiel 1 beschriebene Weise bebrütet und gereinigt, wobei 0,58
Gew.-Teile Ergosterylpalmilat und 0,18 Gew.-Teile
Ergosterin erhalten werden.
Fusarium oxysporum IFO 4471 wird in der gleichen
Weise und unter den gleichen Bedingungen wie in Beispiel 2 verwendet, wobei 0,3 Gew.-Teile Ergosterylpalmitat
und 0,15 Gew.-Teile Ergosterin aus 1000 Raumteilen Kulturmedium erhalten werden.
1000 Raumteile eines Nährmediums (pH 6,5), das 5% Saccharose, 7% Polypepton S, 0,8% KH2PO4, 0.2%
K2HPO4, 0,1% FeSO4 · 7 H2O, 0,05% MgSO4 · 7 H2O,
0,01 % CaCl2 ■ 2 H2O, 0,5% Poiyoxyäthylensorbitanmoi.ostearat,
1 % CaCO3 und 5% η-Paraffin (Gemisch von Decan, Undecan, Dodecan und Tridecan) enthält, wird
mit einer Impfkultur von Cephalosporium coremioides IFO 8579 auf die in Beispiel 2 beschriebene Weise
geimpft und 90 Stunden bebrüieL Das Kulturmedium wird auf die in Beispiel 2 beschriebene Weise
aufgearbeitet, wobei 0,52 Gew.-Teile Ergosterylpalmitat und 0,23 Gew.-Teile Ergosterin erhalten werden.
1000 Raumteile eines Nährmediums (pH 6,5), das 13% η-Paraffin (Gemisch von Heptadecan, Octadecan,
Nonadecan und Eicosan), 7% Polypepton S, 0,8% KH^PO4, 0,2% K2HPO4, 0,1% FeSO; - 7 H2O, 0,05%
MgSO4 · 7 H2O, 0,01% CaCl2 - 2 H2O, 0,5% Sojabohnenöl,
0,5% Polyoxyäthylensorbitanmonostearat und 1% CaCO3 (getrennt sterilisiert) enthält, wird in einen
Fermenter mit einem Fassungsvermögen von 3000 Raumteilen gegossen. Nach Sterilisation für 20 Minuten
bei 1200C wird das Medium mit 50 Raumteilen der gemäß Beispiel 1 hergestellten Impfkultur von Fusarium
sp. IFO 8884 geimpft.
Das geimpfte Medium wird auf die in Beispiel 1 beschriebene Weise bebrütet und gereinigt, wobei 0,51
Gew.-Teile Ergosterylpalmitat und 0,15 Gew.-Teile Ergosterin erhalten werden.
Claims (2)
1. Verfahren zur Herstellung von Ergosterin oder seinen Estern, dadurch gekennzeichnet,
daß man die Mikroorganismen Trichoderma sp. IFO 6355, Trichoderma viride IFO 9066, Fusarium sp.
IFO 8884, Fusarium oxy.sporum IFO 4471, Fusarium roseum IFO 7189, Cephalosporium coremioides IFO
8579 oder Cephalosporium sclerotigenum IFO 8385 in ein Nährmedium impft, die Kultur bebrütet, bis
sich Ergosterin oder seine Ester im Kulturmedium angehäuft haben, und das Ergosterin in freier Form
oder seine Ester aus dem Kulturmedium isoliert
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Nährmedien verwendet werden, die
η-Paraffine mit 10 bis 20 C-Atomen als Kohlenstoffquellen enthalten.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1076572A JPS5541756B2 (de) | 1972-01-28 | 1972-01-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE2303495A1 DE2303495A1 (de) | 1973-08-02 |
| DE2303495C2 true DE2303495C2 (de) | 1982-04-15 |
Family
ID=11759409
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE2303495A Expired DE2303495C2 (de) | 1972-01-28 | 1973-01-25 | Herstellung von Ergosterin und seinen Estern |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3884759A (de) |
| JP (1) | JPS5541756B2 (de) |
| BE (1) | BE794467A (de) |
| CA (1) | CA982505A (de) |
| DE (1) | DE2303495C2 (de) |
| FR (1) | FR2169218B1 (de) |
| GB (1) | GB1423034A (de) |
| NL (1) | NL177327C (de) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2393535A1 (fr) * | 1977-06-07 | 1979-01-05 | Agronomique Inst Nat Rech | Procede pour l'obtention de proteines alimentaires d'origine fongique ou a partir de micro-organismes pluricellulaires, dispositif de fermentation et proteines obtenues |
| JPH02195130A (ja) * | 1989-01-21 | 1990-08-01 | Osaka Prefecture | 冷熱流体同時供給可能なヒートポンプ |
| US6558943B1 (en) | 2000-09-05 | 2003-05-06 | Sun Ten Pharmaceutical Co., Ltd. | Method for propagating fungi using solid state fermentation |
| KR20050084930A (ko) * | 2002-11-08 | 2005-08-29 | 가부시키가이샤 가네카 | 에르고스테롤의 분리 방법 |
| CN113045618B (zh) * | 2021-03-19 | 2022-08-16 | 河北华旭化工有限公司 | 从青霉素发酵菌丝体中提取麦角甾醇、制备微生态的工艺 |
-
0
- BE BE794467D patent/BE794467A/xx not_active IP Right Cessation
-
1972
- 1972-01-28 JP JP1076572A patent/JPS5541756B2/ja not_active Expired
-
1973
- 1973-01-19 US US325116A patent/US3884759A/en not_active Expired - Lifetime
- 1973-01-22 GB GB319673A patent/GB1423034A/en not_active Expired
- 1973-01-24 FR FR7302525A patent/FR2169218B1/fr not_active Expired
- 1973-01-25 DE DE2303495A patent/DE2303495C2/de not_active Expired
- 1973-01-25 NL NLAANVRAGE7301123,A patent/NL177327C/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-01-26 CA CA162,170A patent/CA982505A/en not_active Expired
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| NICHTS ERMITTELT * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2169218A1 (de) | 1973-09-07 |
| BE794467A (fr) | 1973-07-24 |
| NL177327C (nl) | 1985-09-02 |
| NL177327B (nl) | 1985-04-01 |
| DE2303495A1 (de) | 1973-08-02 |
| FR2169218B1 (de) | 1976-11-05 |
| JPS4880783A (de) | 1973-10-29 |
| US3884759A (en) | 1975-05-20 |
| GB1423034A (en) | 1976-01-28 |
| JPS5541756B2 (de) | 1980-10-25 |
| CA982505A (en) | 1976-01-27 |
| NL7301123A (de) | 1973-07-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE3051175C2 (de) | ||
| DE3051097C2 (de) | ||
| DE68902670T2 (de) | Ks-506 verbindungen und verfahren zu deren herstellung. | |
| CH647749A5 (de) | Salze und ester von monacolin-k, verfahren zu ihrer herstellung und pharmazeutische praeparate. | |
| DE2303495C2 (de) | Herstellung von Ergosterin und seinen Estern | |
| DE3112566C2 (de) | ||
| DE3114242A1 (de) | Carbonsaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese derivate enthaltende arzneimittel | |
| DE3512194A1 (de) | Ein neues ansamycin-antibiotikum, ein mikrobielles verfahren zu seiner herstellung und seine verwendung als arzneimittel | |
| DE69908569T2 (de) | Verfahren zur herstellung von fexofenadin | |
| DE2911353C2 (de) | ||
| DE2150375A1 (de) | Verfahren zur biotechnischen Herstellung rhamnosehaltiger Glycolipide | |
| CH629852A5 (de) | Verfahren zur herstellung von ubichinon-10. | |
| DE2014277C3 (de) | Verfahren zur Herstellung von Acylderivaten des Antibiotikums T-2636 C | |
| DE2440942A1 (de) | Fructose-fettsaeureester, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als netzmittel | |
| DE3247175A1 (de) | Dihydro- und tetrahydromonacolin l, ihre metallsalze und alkylester sowie verfahren zu ihrer herstellung und sie enthaltende arzneimittel | |
| DE2028403B2 (de) | Pepstatin | |
| DE3878264T2 (de) | Monoacetylierung von diolen mit einem biokatalysator aus corynebakteriumoxidans. | |
| DE2921052C2 (de) | ||
| DE2034593B2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Zitronensäure | |
| DE3523082A1 (de) | Verfahren zur herstellung von 2-(substituylphenyl)-propionsaeure durch mikroorganismen | |
| DE2318594C2 (de) | Verfahren zur Herstellung von 2-substituierten-3-alpha-hydroxy-5-oxo-1cyclopenten-1-heptansäurederivaten durch stereospezifische mikrobiologische Hydrolyse | |
| DE1070176B (de) | Verfahren zur Herstellung neuer Steroidverbindungen der 1, 4 - Pregnadienreihe | |
| DE1442309A1 (de) | Verfahren zur Herstellung der freien Saeuren oder Ester der BC-Faktoren A,B,C1 und C2 | |
| DE2213674C3 (de) | Gemisch aus Pepstatin B und Pepstatin C, Verfahren zu dessen Herstellung und dieses Gemisch enthaltende Arzneimittel | |
| AT329759B (de) | Verfahren zur herstellung von deacetoxycephalosporin c |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| OD | Request for examination | ||
| D2 | Grant after examination | ||
| 8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |