DE1617796C - Fermentatives Verfahren zur Herstel lung der Antibiotika N 329A und N 329B Ausscheidung aus 1567095 - Google Patents
Fermentatives Verfahren zur Herstel lung der Antibiotika N 329A und N 329B Ausscheidung aus 1567095Info
- Publication number
- DE1617796C DE1617796C DE19641617796 DE1617796A DE1617796C DE 1617796 C DE1617796 C DE 1617796C DE 19641617796 DE19641617796 DE 19641617796 DE 1617796 A DE1617796 A DE 1617796A DE 1617796 C DE1617796 C DE 1617796C
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- antibiotics
- yellowish
- brown
- antibiotic
- growth
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
Links
- 230000003115 biocidal Effects 0.000 title claims description 58
- 229940064005 Antibiotic throat preparations Drugs 0.000 title claims description 39
- 229940083879 Antibiotics FOR TREATMENT OF HEMORRHOIDS AND ANAL FISSURES FOR TOPICAL USE Drugs 0.000 title claims description 39
- 229940042052 Antibiotics for systemic use Drugs 0.000 title claims description 39
- 229940042786 Antitubercular Antibiotics Drugs 0.000 title claims description 39
- 229940093922 Gynecological Antibiotics Drugs 0.000 title claims description 39
- 229940024982 Topical Antifungal Antibiotics Drugs 0.000 title claims description 39
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title claims description 39
- 229940079866 intestinal antibiotics Drugs 0.000 title claims description 39
- 229940005935 ophthalmologic Antibiotics Drugs 0.000 title claims description 39
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 241000813842 Streptomyces tsusimaensis Species 0.000 claims description 5
- 239000001963 growth media Substances 0.000 claims description 2
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- FCFNRCROJUBPLU-GGUWDUSBSA-N (3S,6S,9S,12S,15R,18R,21R,24S,27R,30R,33S,36S)-6,18,30-trimethyl-3,9,12,15,21,24,27,33,36-nona(propan-2-yl)-1,7,13,19,25,31-hexaoxa-4,10,16,22,28,34-hexazacyclohexatriacontane-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-dodecone Chemical compound CC(C)[C@@H]1NC(=O)[C@H](C)OC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)OC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C)OC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)OC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C)OC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)OC1=O FCFNRCROJUBPLU-GGUWDUSBSA-N 0.000 description 17
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 16
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 16
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 239000002609 media Substances 0.000 description 15
- 108010067973 Valinomycin Proteins 0.000 description 12
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 12
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 12
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 12
- 210000004215 spores Anatomy 0.000 description 11
- RMIXHJPMNBXMBU-QIIXEHPYSA-N Nonactin Chemical compound C[C@H]([C@H]1CC[C@H](O1)C[C@@H](OC(=O)[C@@H](C)[C@@H]1CC[C@@H](O1)C[C@@H](C)OC(=O)[C@H](C)[C@H]1CC[C@H](O1)C[C@H](C)OC(=O)[C@H]1C)C)C(=O)O[C@H](C)C[C@H]2CC[C@@H]1O2 RMIXHJPMNBXMBU-QIIXEHPYSA-N 0.000 description 10
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N D-Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 9
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 9
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 8
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 6
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 6
- 230000000855 fungicidal Effects 0.000 description 6
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 5
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 201000009910 diseases by infectious agent Diseases 0.000 description 5
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 5
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 5
- 230000003032 phytopathogenic Effects 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- GUBGYTABKSRVRQ-YOLKTULGSA-N Maltose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@H]1CO)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-YOLKTULGSA-N 0.000 description 4
- 241000544912 Melanoides Species 0.000 description 4
- 229940010383 Mycobacterium tuberculosis Drugs 0.000 description 4
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 4
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 4
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N indole Chemical compound C1=CC=C2NC=CC2=C1 SIKJAQJRHWYJAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 4
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 4
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 3
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N Ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 240000001016 Solanum tuberosum Species 0.000 description 3
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 3
- -1 acetanol Substances 0.000 description 3
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 3
- 235000012970 cakes Nutrition 0.000 description 3
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 3
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 3
- BJHIKXHVCXFQLS-UYFOZJQFSA-N keto-D-fructose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO BJHIKXHVCXFQLS-UYFOZJQFSA-N 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic Effects 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 3
- 241000186046 Actinomyces Species 0.000 description 2
- RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N Anthrone Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C3=CC=CC=C3CC2=C1 RJGDLRCDCYRQOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 2
- 229940065181 Bacillus anthracis Drugs 0.000 description 2
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 2
- 229940075615 Bacillus subtilis Drugs 0.000 description 2
- 240000008371 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003563 Calcium Carbonate Drugs 0.000 description 2
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 2
- 229940095731 Candida albicans Drugs 0.000 description 2
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 2
- 244000206911 Candida holmii Species 0.000 description 2
- 235000002965 Candida holmii Nutrition 0.000 description 2
- 241001337994 Cryptococcus <scale insect> Species 0.000 description 2
- 241001149409 Cystobasidium minutum Species 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N D-sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 102000003425 EC 1.14.18.1 Human genes 0.000 description 2
- 108060008724 EC 1.14.18.1 Proteins 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 210000002683 Foot Anatomy 0.000 description 2
- 241001149475 Gaeumannomyces graminis Species 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N HCl Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K Iron(III) chloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N Lactose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)O[C@@H]1CO)[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1 GUBGYTABKSRVRQ-UUNJERMWSA-N 0.000 description 2
- 241000186367 Mycobacterium avium Species 0.000 description 2
- QCDYQQDYXPDABM-UHFFFAOYSA-N Phloroglucinol Chemical compound OC1=CC(O)=CC(O)=C1 QCDYQQDYXPDABM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M Potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 2
- 241000531795 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Paratyphi A Species 0.000 description 2
- 206010039447 Salmonellosis Diseases 0.000 description 2
- 229940007046 Shigella dysenteriae Drugs 0.000 description 2
- 241000607764 Shigella dysenteriae Species 0.000 description 2
- 241000607762 Shigella flexneri Species 0.000 description 2
- 229940076185 Staphylococcus aureus Drugs 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 241000187392 Streptomyces griseus Species 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N Sucrose Natural products O([C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)[C@@]1(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-GDQSFJPYSA-N 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K Tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N biuret Chemical compound NC(=O)NC(N)=O OHJMTUPIZMNBFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- LKYXEULZVGJVTG-UHFFFAOYSA-N chloromethane Chemical compound Cl[CH] LKYXEULZVGJVTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 2
- 229910052570 clay Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000002349 favourable Effects 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000583 Acetic Acid Drugs 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 240000005781 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 Asparagine Drugs 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 description 1
- 229960005069 Calcium Drugs 0.000 description 1
- 229940041514 Candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 241000186227 Corynebacterium diphtheriae Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N D-Mannitol Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 241001043481 Debaryomyces subglobosus Species 0.000 description 1
- 210000003298 Dental Enamel Anatomy 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 241000223218 Fusarium Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N Galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- 240000007842 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 241000592921 Helminthosporium Species 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N Inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 Inositol Drugs 0.000 description 1
- 229940029339 Inulin Drugs 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N Inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 1
- 229940045505 Klebsiella pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 241000588747 Klebsiella pneumoniae Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 210000004080 Milk Anatomy 0.000 description 1
- 241000235042 Millerozyma farinosa Species 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229940055036 Mycobacterium phlei Drugs 0.000 description 1
- 241000187481 Mycobacterium phlei Species 0.000 description 1
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 1
- 241000379990 Nakataea oryzae Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 229960001553 Phloroglucinol Drugs 0.000 description 1
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 1
- 241000521553 Pichia fermentans Species 0.000 description 1
- 210000002381 Plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920001451 Polypropylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 229940055023 Pseudomonas aeruginosa Drugs 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N Raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N Salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 240000008529 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N aldehydo-D-glucose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- GZCGUPFRVQAUEE-KVTDHHQDSA-N aldehydo-D-mannose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O GZCGUPFRVQAUEE-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N aldehydo-D-xylose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-VPENINKCSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 239000010425 asbestos Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 239000007640 basal medium Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 235000013532 brandy Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000012225 czapek media Substances 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001408 fungistatic Effects 0.000 description 1
- 230000002070 germicidal Effects 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N hexane Substances CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008079 hexane Substances 0.000 description 1
- 231100000086 high toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 239000010699 lard oil Substances 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L malate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)C(O)CC([O-])=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective Effects 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 229910052895 riebeckite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000630 rising Effects 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 230000028070 sporulation Effects 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 235000019798 tripotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000001796 valino group Chemical group 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 235000021307 wheat Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N β-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
Description
Die vorliegende Erfindung betrifft ein fermentatives Verfahren zur Herstellung der Antibiotika N-329A
und N-329 B. Dieses Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß man Streptomyces tsusimaensis ATCC
Nr. 15 141 in einem wäßrigen Nährmedium züchtet und dann in üblicher Weise aufarbeitet.
Im Laufe der Forschungen auf dem Gebiete der Antibiotika wurde eine Streptomyces-Art gefunden,
die in der Sammlung von Shionogi & Co., Ltd., Osaka, Japan, mit N-329 bezeichnet wurde und im
American Type Culture Collection unter der laufenden Nummer ATCC Nr. 15 141 hinterlegt wurde
und die imstande ist, zwei Antibiotika unter der Bezeichnung N-329 A und N-329 B zu erzeugen.
Die Standard-Art an Streptomyces N-329 wurde in einer Erdprobe gefunden, gesammelt in Tsushima
• Island, Nagasaki Pref., Japan, isoliert und zeigt die folgenden krobiologischen Charakteristika.
Morphologische Charakteristika
Die morphologische Eigenschaft dieses Stammes wurde auf einem synthetischen oder organischen
Medium, gemäß der Agar-Zylinderkultur-Methode, gemäß N i s h i m u r a und Mitarbeiter, J. Antibiotics
(A), Bd. 10, S. 227 (1957), nach 14tägiger Inkubation bei 28° C beobachtet, und die bis ins
einzelne gehenden Beobachtungen wurden mit Hilfe eines Elektronenmikroskopes durchgeführt. Die
Sporophoren sind gerade bis wellig und verzweigt in Büschel. Die Sporen sind in Form von Ketten ausgebildet.
Die Form der Sporen ist ellipsoidal bis zylindrisch, und die Oberfläche ist glatt.
Kultur-Charakteristika
Die Beobachtung würde während einer Htägigen Inkubationszeit bei 28° C durchgeführt. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengestellt.
Wachstum | - | Aeriales mycelium | Farbe | •lösliches Pigment | |
Medium | gut | Sporulation | gelblichweiß | Substratum mycelium | hellgelblich- |
Synthetischer | gut, pulvrig | . bis gelblich | hellgelblich- | braun | |
Agar (Glycerin | grau | braun bis | |||
Czapek's | graugelb | ||||
Agar) | mäßig | gelblichgrau | braun | kein | |
Glucose- | gut | gelblichgrau | |||
Asparagin- | |||||
Agar | mäßig | gelblichgrau | kein | ||
Calcium- | mäßig | gelblichgrau | |||
malat-Agar | bis hellgeib- | ||||
gut | gelblichgrau | lichbraun | kein bis Q /"· Vt Wf r% r% V| |
||
Stärke-Agar | gut, pulvrig | gräulichbraun | braun | ||
mäßig | gelblichgrau | schwach gelb | |||
Glucose- | (Häutchen) | mäßig | gelblichgrau | ||
Czapek's- | |||||
Lösung | - | ||||
Wachstum | Spekulation | Aeriales mycelium | Farbe | lösliches Pigment | |
Medium | gut | gut, pulvrig | gelblichweiß | Substratum mycelium1 | schwach gelb |
Nähragar | schwach gelb | lichbraun | |||
gut | gut, pulvrig | gelblichgrau | lichbraun | gelblichbrauh | |
Glücose- | gelblichbraun | (chromogen) | |||
Bouillon-Agar | gut . | mäßig, | gelblichweiß | gelblichbräun. | |
Glucose- | pulvrig | gelblichbraun | (chromogen) | ||
Pepton-Agar | gut | gut | gelblichgrau | gelbiichbraun | |
Glucose-Brühe | (Häutchen) | schwach gelb | |||
- | bis schwach | ||||
dürftig | — | ■ — | gelblichbraun | — ■ · | |
Cellulose-Agar | gut, dick, | gut | gelblichgrau | — | gelblichbraun |
Kartoffel | faltig | schwach gelb- | bis bräun | ||
iichbraun | lichschwarz | ||||
Temperaturempfindlichkeit des Wachstums.
gutes Wachstum bei 28°C, günstiges Wachstum bei 370C, kein Wachstum bei 45° C.
Physiologische Charakteristika
Die Beobachtung erfolgte nach Inkubation bei 28° C während 14 Tagen, falls nicht anders angeführt.
Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengestellt: .
KohlenstofTquelle
Test
Säurebildung aus Glucose-
pepton
(10 Tage Inkubation bei 28° C)
Melanoid-Pigment
Tyrosinase-Reaktion
Stärke-Hydrolyse
Nitrat-Reduktion
Gelatin-Verflüssigung
Milch-Peptonisation
Cellulose-Reaktion
Ergebnis
Negativ
Positiv
Positiv
Positiv
Positiv
Positiv (stark)
Positiv
Negativ
20
Die Verwendung der Kohlenstoffquellen im basalem
Medium von P r i d h a m und G ο 111 i e b durch den Organismus nach 14tägiger Inkubation
bei 28° C wird in der folgenden Tabelle gezeigt, worin die Zeichen »+« und »++« eine steigende
Verwendung anzeigen, und das Zeichen » —« keine Verwendung und das Zeichen »±« eine zweifelhafte
Verwendung angeben:
d-Glucose + +
d-Mannose + +
d-Fructose + +
Mannitol + +
Calactose + +
Maltose 4- +
1-Arabinose +
Sucrose +
d-Xylose +
Ergebnis
gutes Wachstum
desgl.
desgl.
desgl.
desgl.
desgl. günstiges Wachstum
desgl.
desgl. ..·;.
35
40
45
10
15
Lactose +
Salicin +
Inositol ±
Rhamnose ±
Rhaffinose ±
Sorbitol -
Inulin —
Dulcitol -
Ergebnis
desgl.
desgl.
schwaches Wachstum
schwaches Wachstum
desgl.
desgl.
kein Wachstum
kein Wachstum
desgl.
desgl.
Aus den Ergebnissen dieser Beobachtungen können die Charakteristiken von Streptomyces N-329
wie folgt zusammengefaßt werden: Sporophoren sind gerade bis wellig in Büscheln, Oberfläche der Sporen
ist milde, und die Sporen sind ellipsoidal bis zylindrisch. Wachstumstypus auf Glucose-Brühe ist vom
Häutchentypus. Säureerzeugung aus Glucose ist negativ. Farbe des Aerial Myceliums ist gelblichweiß bis
gelblichgrau und das Mycelsubstrat ist schwach gelblichbraun auf synthetischem Medium, Farbe des
Aerial Myceliums ist gelblichweiß bis gelblichgrau, das Mycelsubstrat schwach gelblichbraun bis gelblichbraun,
und das lösliche Pigment ist gelblichbraun (chromogen) auf organischem Medium. Melanoid-Pigment
und Tyrosinase-Reaktion sind positiv. Reduktion auf Nitrat ist positiv.
Unter den vielen Streptomyces-Arten, beschrieben in Bergey's »Manual of Determinative Bacteriology«,
Waksman and Lechevalier's »Actinomyces and their Antibiotics«, Waksman's »The Actinomyces« und
anderen Literaturangaben, scheint Streptomyces N-329 am meisten durch seine morphologischen
Eigenschaften, durch seine Farbe auf aerialem Mycelium auf synthetischem Agar, durch einige biöche^
mische Charakteristiken und Wachstumstypus auf Glucose-Brühe, dem Streptomyces griseus verwandt
zu sein. Er unterscheidet sich aber vom Streptomyces
griseus im ausbreitbaren 'Pigment auf einer Anzahl von Medien und am Melanoid»)Pigment, wie
dies in der folgenden Tabelle gezeigt wird:
, . ; Eigenschaften . ,- . .·■' . |
Streptomyces
' ■ , ' N-329 ' '·■/J11 |
kein ''' | S | trdptomyces grise - W-11,8 ;, |
US | ' H-12 .-,- |
Glycerin-Czapek's-Agar, lösliches ^J | schwach gelblichbrauh | ';■·' | kein "■' | kein '"■■ | ||
Pigment . . ;,; : ' | kein | ■ | ||||
Glucose-Czapek's-Lösung, lösliches' r ■;, Pigment ':..!.;. |
schwach gelblichbraun | kein | kein | kein | ||
Nähragar, lösliches Pigment · | schwach gelblich ■ | kein | kein· | kein | ||
Pepton-Glucose-Agar, lösliches Pigment '■· ,· · |
gelblichbraun | kein | kein | kein | ||
Glucose-Boüillon-Agar, lösliches Piffmpnt * ■' ■'"'■'." |
gelblichbraun | negativ, | kein | kein | ||
JL ■*& »JLwXJL ι Melanoid-Pigment . , |
positiv | schwach | negativ, | negativ , | ||
Gelatin-Medium , | , dunkelbraun | gelblich | schwach | kein . | ||
braun | gelblich | |||||
braun ■ | ||||||
Dieser Mikroorganismus wurde somit als neue Art befunden und mit dem Namen Streptomyces tsusimaensis
ATCC 15 141 bezeichnet.
Gemäß einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung werden die Antibiotika N-329 A und/oder
N-329 B während der Züchtung des Mikroorganis-
mus Streptomyces tsusimaensis ATCC 15141, in
einem wäßrigen Nährmedium bei einer Temperatur von etwa 25 bis etwa 32° C, vorteilhafterweise bei 27
bis 29° C, unter aeroben Bedingungen, erzeugt. Die Zusammensetzung des Nährmediums kann innerhalb
eines sehr weiten Bereiches variieren. Erforderlich sind eine Kohlenstoffquelle, eine Stickstoffquelle und
Spuren anorganischer Elemente. Kohlenstoffquellen sind Stärke, Glucose, Glycerin, Dextrin, Maltose,
Fructose, Sucrose, Lactose und Melassen. Stickstoffquellen für den Fermentationsprozeß sind Fleischextrakte,
Pepton, Getreidequellwasser, Soyabohnenmehl, Erdnußmehl, Weizenkleber, Baumwollsamenmehl,
Casamino-Säure, das ist das Hydrolyzat von Casein, NZ-Amin, das ist das enzymatische Hydrolyzat
von Casein, und Hefeextrakte. Anorganische Elemente sind Natriumchlorid, Kaliumchlorid, Calciumcarbonat
und Kaliumphosphat.
Bei Durchführung der Fermentation in einem verhältnismäßig größeren Maßstab können zweckmäßigerweise
Antischaummittel, wie Pflanzenöle, Specköl und Polypropylenglycol zum Fermentationsmedium, vor oder im Laufe der Fermentation, zugefügt
werden.
Bei Durchführung der Fermentation unter den genannten Bedingungen werden N-329A und N-329B
im Medium angereichert. Die Erträge dieser Antibiotika variieren in Abhängigkeit von den Fermentationsbedingungen,
insbesondere von der Fermentationsdauer. Im allgemeinen führt eine kürzere Dauer zu einer höheren Ausbeute des Antibiotikums
N-329A, und eine längere Dauer verursacht einen höheren Ertrag an Antibiotikum N-329B. Falls z. B.
die Fermentation bei einer Temperatur von 27 bis -29° C durchgeführt wird, erhält man maximale Erträge
des N-329A und des N-329B innerhalb von 48 bis 192 Stunden bzw. von 144 bis 312 Stunden. Eine
bessere Belüftung führt des weiteren zur Erhöhung des Ertrages an Antibiotikum N-329 B. Im allgemeinen
kann die Fermentation innerhalb einer weiten Zeitspanne, d. h. etwa 30 bis etwa 340 Stunden, unter
optimalen Temperatur- und Belüftungsbedingungen durchgeführt werden.
Nach erfolgtem Wachstum des Mikroorganismus wird das Mycelium von der Fermentationsbrühe,
unter Verwendung von Standardeinrichtungen, wie Filterpressen und Zentrifugen, separiert. Bei dieser
Separierung kann ein übliches Filterhilfsmittel, wie Kieselgur der Handelsmarke »Hyflo Super-Cel«, Asbest,
aktivierte Kohle und Talk, zur Verwendung kommen. Gewünschtenfalls kann der. pH der^.Fer-.; ■.
mentatiohsbrühe auf etwa 7,0 vor der Separierung' eingestellt werden. Der so abgeschiedene Kuchen des
Myceliums wird mit dem Filterhilfsmittel, falls ein solches verwendet wird, einem Lösungsmittelextrak- '55
tionsverfahren, zwecks Gewinnung des Antibiotikums, unterworfen. Zum Beispiel wird der Kuchen mit
einem Lösungsmittel, wie Aceton, Methanol, Acethanol, Petroläther, Äther, Benzol, Chloroform, Eisessig
und Butylacetat, geschüttelt, und nach Abdampfen des Lösungsmittels aus dem Extrakt ergibt sich ein
Gemisch, das die Antibiotika Nr329A und N-329 B
enthält. ' ■
Zur Isolierung jedes der Antibiotika N-329A und N-329 B wird das Gemisch einem üblichen Trennungsverfahren,
wie Extraktion, Ausfällen, Adsorption oder Umkristallisation oder einer Kombination derselben
unterworfen, z. B. kann das Gemisch in Petroläther gelöst und dann konzentriert werden, wobei sich ein
kristalliner Niederschlag bildet. Der Niederschlag wird abfiltriert und aus Aceton oder Methanol umkristallisiert
und ergibt das Antibiotikum N-329A in Form reiner Kristalle. Das Filtrat wird im weiteren
konzentriert, auf Tonerde chromatographiert und mit Petroläther eluiert. Nach Abdampfen des Lösungsmittels
aus dem Eluat wird der Rückstand aus Aceton oder Methanol umkristallisiert und ergibt das Antibiotikum
N-329 B als reine Kristalle.
N-329A hat den F. = 148 bis 149,5° C. Die Elementaranalyse
ist die folgende:
C 65,65, H 8,85, O 25,48; kein Stickstoff, Schwefel und Halogen. Das Molekulargewicht beträgt 730 bis
740 mit Hilfe der Rast-Methode. Die oben angeführten Analysen entsprechen der Molekularformel
C40H64O12 für das Antibiotikum N-329A. Die spezifische
Drehung beträgt [a]f + 0,5 ± 2° (C = 1,269% in Chloroform). Das Ultraviolett-Absorptionsspektrum
in 95%igem Äthanol ist durch die Maxima bei 211 bis 213 πΐμ (E{*„ = 6,4), charakterisiert (s. dazu
Fig. 1). Das Infrarot-Absorptionsspektrum in einem •
Nujol-Mull zeigt die folgenden charakteristischen ν
Banden 2921, 1726, 1468, 1425, 1383, 1371, 1360, 1333, 1298, 1265, 1190, 1168, 1152, 1135, 1116, 1095,
1061, 1021, 996, 974, 948, 932, 912, 893, 868, 852, 813, 793, 750, 723, 658 cm"1 (s. Fig. 2). Das Antibiotikum
N-329A weist einen positiven Dragendorf-Test und eine Jodreaktion auf. Ninhydrin-, Biuret-,
Molisch-, Indol-, Anthron-, Tollen's-phloroglucin-Sakaguchi
und Ferrichlorid-Test sind negativ, und auch ein Säurehydrolysat ergibt einen negativen
Ninhydrin-Test.
Das andere Antibiotikum N-329 B hat den F. = 190,5 bis 191°C. Die Elementaranalyse ist die
folgende: C 58,48, H 8,22, O 24,77, N 7,66; kein Schwefel und Halogen. Das Molekulargewicht beträgt
764, festgestellt mit Hilfe der Rast-Methode. Die obigen Analysen entsprechen der Molekularformel
C36H60O12N4. Die spezifische Rotation ist
[α]? + 36,2 ± 2° (C = 1,015% in Chloroform) und
[α]? + 32,2 ± 1,3° (C = 1,539% in Benzol). Das
Ultraviolett-Absorptionsspektrum in η-Hexan zeigt kein Maximum (s. Fig. 3). Das Infrarot-Absorptionsspektrum
in einer Kaliumbromid-Tablette weist die folgenden charakteristischen Banden auf: 3300,
2954, 1743, 1652, 1538, 1470, 1375, 1345, 1313, 1302, 1252, 1191, 1147, 1131, 1098, 1027, 1009, 978, 931,
886, 865, 795, 764, 749 cnT1 (s. dazu Fig. 4). Das
Antibiotikum ergibt einen positiven Dragendorf-Test und eine Jodreaktipn, und ein Säurehydrolysat
zeigt einen starken positiven Ninhydrin-Test. Biuret-,
Molisch-, Indol-, Anthron-, Tollen's-phlorÖglucin-, Sakaguchi- und Ferrichlorid-Reaktionen sind negativ.
Es wurde überdies bestätigt, daß das Säurehydrolysat des Antibiotikums N-329 B Valin, a-Oxyisovaleriansäure
und Milchsäure, festgestellt mit Hilfe der Papierchromatographie, enthält. ■
;; Die oben angeführten physikal-chemischen Eigenschaften der Antibiotika N-329A und N-329. B sind
sehr dem vormals bekannten Antibiotikum. Nonactin ähnlich (s. dazu Corbaz und Mitarbeiter, HeIv.
Chim. Acts, Vol. 38, S. 1445 [1955])'; dieses Antibiotikum wird auch als SQ 15,859 (s. Dutcher,
Antimicrobial Agents and Chemotherapy, S. 173 [1961]), und TA 25M-I (s. Okuda und Mitarbeiter,
Studies on macrocyclic polylactone antibiotics) bezeichnet. Auf der 130. Versammlung der Japan
Antibiotic Research Association, gehalten in Tokyo, Japan, am 25. Mai 1962, wurden die Eigenschaften
obengenannter Antibiotika und des Valinomycins (s. Brockmann und Mitarbeiter, Chem. Ber.,
Bd. 88, S. 57 [1955]); Ann., Bd. 603, S. 216 [1957], Brown und Mitarbeiter, Antibiotics and Chemotherapy,
Bd. 12, S. 482 [1962]) mit Hilfe der folgenden Tabelle verglichen:
N-329A | Nonactin | 5>Q 15,859 | TA 25 M-I | N-329B | ,Valinomycin | Valinomycin | |
Eigenschaften | (C ο r b a ζ und | (Dutcner) | (O k u d a und | (Brockmann | (B r ο w η | ||
Mitarbeiter) | Mitarbeiter) | und Mitarbeiter) | und Mitarbeiter) | ||||
Schmelz | 148 bis | 148 bis | 190,5 bis | ||||
punkt ... | 149,5° C | 147 bis | 152° C | 142 bis | 191°C | 19O0C | 186 bis |
148° C | 143,50C | 186,5° C | |||||
Elementar | C 65,65% | C 65,30% | C 58,48% | ||||
analyse .. | H 8,85% | C 65,13% | H 8,50% | C 65,18% | H 8,22% | C 58,34% | C 58,12% |
O 25,48% | H 8,81% | O 26,20% | H 9,05% | O 24,77% | H 8,25% | H 7,83% | |
O 26,20% | Q | N 7,66% | O 25,92% | O 26,49% | |||
N 7,48% | N 7,56% | ||||||
Molekular | 730 bis | 500 bis | 764 | ||||
gewicht .. | 740 | 719 bis | 700 | 626,85 | 675, 775, | 734 | |
727 | 750 | ||||||
Molekular | C40H64O12 | C40H64O12 | Cs4H56 _58 O10ZC36H60 | ||||
formel ... | C40H64O12 | O12N4ZC36H6C O12N4 · |
,O12N4Z | ||||
Spezifische Rotation |
[α]? + 0,5° (±2°) . |
Nonactin | [α]? (±2°) | SQ 15,859 | Valino | [α]? +31,3C (C =1,57% in Benzol) |
|
N-329A | (C = 1,269% in CHCl3)- |
(C =.1,2% in CHCl3) |
- | [α]? + 31,0° (C = 1,6% in Benzol) |
mycin Brown |
||
Spezifische Rotation |
[α] is + 0,5° (C = 7% in Dioxan) |
N-329B | [α]?+ 32,20 (±1,3°) (C = 1,5% in Benzol) |
Valino | |||
TA 25 M-I | mycin Brock |
||||||
mann | |||||||
N-329A | Nonactin (C ο r b a ζ und Mitarbeiter) |
SQ 15,859 Du tcher |
TA 25 M-I (O k u d a und Mitarbeiter) |
N-329B | Valinomycin (Brockmann und Mitarbeiter) |
Valinomycin (Brown und Mitarbeiter) |
Ultrayiolett-Äbsorptions- Spektrum Zusammensetzung des Säurehydrolysats: Valin |
211 bis 213 ηΐμ 264 άμ |
keine , Bänder |
End-Ab- sorptioh |
keine Absorption |
281 ήΐμ 4 Mol 2 Mol ■ |
keine . Absorption |
α-Oxyisovaleriänsäure Milchsäure |
Bemerkung: Die Angaben sind den Referenzen jedes Autors entnommen.
Im Hinblick auf die obengenannten Ähnlichkeiten wurden die wirklichen. Vergleichsteste der Antibiotika
N-329A und N-329B mit den authentischen Proben der obengenannten bekannten Antibiotika, geliefert
durch 'jeden Autor,-, durchgeführt, und zwar Mm
Schmelzpunkt, in der Elenientaranalyse,. im MoIekulargewicht,
in der spezifischen Rotation, im Ültr^r"
violett-Absorptionsspektrum4' und/oder Infrarot-Absorptionsspektrum, und es wurde· bestätigt, daß die
physikalisch-chemischen Eigenschaftenrder Antibio-
209544/458
tika N-329A und N-329B im wesentlichen identisch
mit jenen von Nonactin (SQ 15,859, TA 25 M-I) bzw. mit Valinomycin sind.
Bisher war bekannt, daß Nonactin besonders inaktiv gegenüber chemischen Verbindungen und Mikroorganismen
ist. Es war auch bekannt, daß Valinomycin aktiv in vitro gegenüber Mycobacterium tuberculosis
ist, wegen ihrer relativ hohen Toxizität aber in der Praxis nicht angewandt wurde. Es wurde nun jetzt
unerwarteterweise gefunden, daß die Antibiotika N-329A und N-329B und auch die genannten bekannten
Antibiotika, die im wesentlichen dieselben physikalisch-chemischen Eigenschaften wie jedes einzelne
der ersteren besitzen, charakteristische hochaktive pilztötende Wirksamkeit gegenüber Piricularia oryzae
und/oder einigen anderen phytopathogenen Pilzen aufweisen.
Zwecks Bestimmung der minimalen Inhibitions-Konzentrationen der Antibiotika N-329 A und N-329 B
gegenüber verschiedenen Mikroorganismen, einschließlich Bakterien, Pilze und Hefen und zwecks
direktem Vergleich mit jenen von Nonactin, SQ 15,859, TA 25 M-I und zwei Proben von Valinomycin, wurden
diese Antibiotika, unter Verwendung ihrer Acetonlösungen, geprüft. Die Ergebnisse sind in den folgenden
Tabellen zusammengestellt:
Test-Organismus Minimale Inhibitionskonzentration in mcg/ml
N-329A
Nonactin
(C ο r b a z
und Mitarbeiter
SQ 15,859 (D u t c h e r)
TA 25 N-I
(Ok u da
und Mitarbeiter)
9. 10. 11. 12. 13, 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20. 21. 22. 23. 24. 25.
26. 27. 28. 29-
Shigelladysenteriae
Shigella paradysenteriae, Ohara
Salmonella typhosa
Salmonella paratyphi A
Escherichia coli
Pseudomonas aeruginosa
Klebsiella pneumoniae
Bacillus subtilis
Bacillus anthracis
Staphylococcus aureus, 209 P
Diplococcus pneumoniae, Typus I Diplococcus pneumoniae, V-Typus Diplococcus pneumoniae, Typus II...
Diplococcus pneumoniae, Typus III..
Streptococcus hemolyticus, D
Streptococcus hemolyticus, H
Corynebacterium diphteriae, Tront...
Corynebacterium diphteriae, HA
Mycobacterium tuberculosis, H 37 RV
Mycobacterium avium .........
Mycobacterium 607
Mycobacterium smegmatis
Mycdbaterium phlei
Piricularia oryzae
Heiminthosporium sigmoideum..
Sclerbtiana libertiänä ;.........
Ophiobolus graminis
Fusarium oxysporiüm :....:....
Cochlibboliis riliyabiänus
Phytdphthbrä iöfestaris ... ......
Altanaria kikuchiana...: ,
EpideTmbphyton ferrügineum
Triciibpliytori rubfürn Täkaise
TnchSphytön iriterdigitale ;:...:...:,
Trichbphytbri pedis Tricridphytbn m'eritagrbphytis ;:
iiäriöpsis brevicäülis.
ftchiä ierrheni
Pichia larinbsie'
> 100,0
> 100,0
> 100,0
>i00,0
>i00,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
100,0
100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
>ioo,p
> ιόο,ό
> iÖÖ,d
> 100,0
>iöo,p
>iöo,o
■J!■'■. ' \
> ιόο,ο
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
P'1
> ioo.o
> 100,0
> 100,0
> 100,0 :> 100,0
> ibb.o
>1ÖO,Ö ^100,0
>ipb,ö
>ioo,p
>!P9'P
>ipp,ö
> iöp.o >iöo,ö
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
2>lÖCi,0
>iöö,o
> ίόο,ο
> 100,0
> ίοο,ο
>joo,q
^jbd,o
> 100,0
>p.p
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
9>l
> iÖo,o
> 100,0
> iöb,ö
> iöö,ö
>ioö,q
>iöö,ö
>iÖö,Ö
> 100,0
>iöo,ö
> iöb',0
> itiöö
Fortsetzung
Test-Organismus Minimale Inhibitionskonzentration in mcg/ml
N-329A
Nonactin
(C ο r b a ζ
und Mitarbeiter)
SQ 15,859 (D u t c h e r)
TA 25 N-I
(Okuda
und Mitarbeiter)
40. Rhodotorula minuta
41. Torulopsis gropengieperi ..
42. Debaryomyces subglobosus
43. Aspergillus niger ..
44. Candida albicans, M-8 ....
45. Saccharomyces exiguus
46. Cryptococcus difiuluens ...
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> ίοο,ο
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
Test-Organismus Minimale I nhibitionskonzentration in mcg/ml
N-329 B
Valinomycin (Brock mann)
Valinomycin (Brown)
1. Shigella dysenteriae
2. Shigella paradysenteriae, Ohara
3. Salmonella typhosa
4. Salmonella paratyphi A
5. Escherichia coli
6. Pseudomonas aerugimosa
7. Klebsieila pneumoniae
8. Bacillus subtilis
9. Bacillus anthracis
10. Staphylococcus aureus, 209 P
11. Diplococcus pneumoniae, Typus I
12. Diplococcus pneumoniae, V-Typus I .
13. Diplococcus pneumoniae, Typus II...
14. Diplococcus pneumoniae, Typus IH ..
15. Streptococcus hemolyticus, D
16. Streptococcus hemolyticus, H
17. Corynebacterium diphteriae, Tront...
18. Corynebacterium diphteriae, HA
19. Mycobacterium tuberculosis, H 37RV
20. Mycobacterium avium
21. Mycobacterium 607
22. Mycobacterium smegmaüs
23. Mycobacterium phlei :
24. Piriculäria bryzae.
25. Helmirithospörium sigmöideum. .
26. Sclerötiäne libertiana..:.......;....
27. Öphibboius graminis..;..;.....;...
28. Füsariüm öxyspbrium'.:......:.....
29. CochliöDoiüs rtuyäbiänus ..:..:..:..
30. Phytbjjhiiiörä infestans: :.::...
31. Ältanäria kikuchiana;..;.:..:.....;
32: JEpidenribphyibn ferrügineum :...:.':
33. Trichöphyton rubrurn, Takäse;...;..
34. TrichöpHyton interdigitalie.;.:..:::.
35. Tricnöpnyton pedis ;.;.::..:::.:...
3fj; Trichöphyton mentägropnytis ....;:.
37. Scopüläriopsis brevicaulis..;..:.....
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
5,0
5,0
5,0
5,0
10,0
10,0
1,0
1,0
0,5
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
°'2
6,3
> 100,0
6,3
> 100,0
> 100,0
>ipö,ö
iiö
iiö
> 100,0
> 100,0
>ioö,o
> iöo;6
> iöo;6
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
5,0
5,0
5,0
5,0
10,0
10,0
1,0
1,0
0,5
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
0,2 6,3
> 100,0
6,3
> 100,0
> 100,0
> 100,0 :> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
>io6,ö
:>ίΟΟ,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
5,0
5,0
5,0
5,0
1O3O
10,0"
1,0
1,0
0,5
> 100,0
> 100,0
>iöo,o
> 100,0
°'2
6,3
> 100,0
^100,0
> 100,0
>ιοο,ό
> 100,0
>iob,o
> 100,0
> 100,0
> 100,0
>ioö,ö >ibb,o
Fortsetzung
14
Test-Organismus
Minimale Inhibitionskonzentration in mcg/ml
N-329 B Valinomycin
(B rock mann)
(B rock mann)
Valinomycin
(Brown)
(Brown)
38. Pichia fermentans
39. Pichia farinose
40. Rhodotorula minuta
41. Torulopsis gropengieperi .
42. Debarymyces subglobosus
43. Aspergillus niger
44. Candida albicans, M-8 ...
45. Saccharomyces exiguus ...
46. Cryptococcus diffuluens ..
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
> 100,0
Bemerkung
Kulturmedium: 1 bis 10 Rindsextrakt; 11 bis 18,
Rindsextrakt + 10% Kaninchenblut; 19,
Kirchner + 10% Menschenplasma; 20 bis 23,
Rindsextrakt + Glycerin; 24 bis 31, Kartoffel-Glucose; 32 bis 46, Sabouraud + Hefeextrakt.
Testmethode: 1 bis 18 und 20 bis 46, Agar-Streich-Verdünnungsmethode; 19, Unterflächenkultur.
Endpunkt beobachtet: 1 bis 18, kein Wachstum nach 24 Stunden bei 37°C; 19, kein Wachstum nach 3 Wochen bei 37°C; 20 bis 23, kein
Wachstum nach 48 Stunden bei 37° C; 24 bis 31, kein Wachstum nach 10 Tagen bei 280C; 32 bis 44, kein Wachstum nach 7 Tagen bei 28° C;
45 bis 46, kein Wachstum nach 2 Tagen bei 28° C.
Aus den vorangehenden Tabellen ist ersichtlich, daß die Antibiotika N-329 A, Nonactin, SQ 15,859
und Ta 25 M-I in ihrer Wirkung ziemlich spezifisch sind. Das heißt, daß Piricularia oryzae inhibitiert wird,
obgleich die anderen Organismen überhaupt nicht berührt werden. Die minimale Inhibitionskonzentrationen
dieser vier Antibiotika gegenüber den genannten phytopathogenen Pilzen sind von derselben Größenordnung,
wobei keine quantitative Differenz beobachtet wurde. Die obigen Tabellen zeigen auch,
daß sowohl die Antibiotika N-329 B und Valinomycin ziemlich spezifisch in ihrer Wirksamkeit sind. So wird
z. B. Piricularia oryzae stark inhibitiert, sowie auch Mycobacterium tuberculosis, H 37RV, und diese
Antibiotika sind auch wirksam gegen einige phytopathogene Pilze, wie Helminthosporium sigmoideum
und Ophiobolus graminis und einige gram-positive Bakterien, wie Diplococcus pneumoniae, Streptococcus
hemolyticus und Corynebacterium diphteriae.
Zwecks Testierung der fungicidalen Wirksamkeit der Antibiotika N-329A und N-329 B wurden sogenannte
Kontakt-Test-Techniken durchgeführt, unter Verwendung einer Sporensuspension von Piricularia
oryzaa.. Diese Sporensuspension wurde aus einer
14tägigen Kulturbrühe von Kartoffel-Glucose schräg im Reagenzglas angelegte Agrarkulturen geerntet und
mit 10 ml sterilem Wasser suspendiert. Da die Antibiotika in Wasser unlöslich sind, wurde eine wäßrige
Suspension der Antibiotika hergestellt und dann zur gewünschten Konzentration mit sterilem destilliertem
Wasser verdünnt. Im Kontakttest mit der Sporensuspension von Piricularia oryzae wird ein Gemisch
von 8 ml der Antibiotika, in Konzentrationen von 1 bis 100 meg pro Milliliter und 0,3 ml der Sporensuspension
bei Zimmertemperatur, das ist bei etwa 23° C, während etwa 4, 8 und 24 Stunden stehengelassen. Jede dieser
Proben wurde zentrifugiert, und die Sporen wurden 2mal mit sterilem Salzwasser gewaschen. Die. gewäschenen
Sporen wurden dann auf der Oberfläche der Kartoffel-Glucose-Agarkultür geimpft und bei 28° C
während 14 Tagen bebrütet.. Nach Impfung wird diese schräg im Reagenzglas angelegte Agarkultur auf
Gegenwart einer Vermehrung geprüft und mit Vergleichskulturen, die unter identischen Bedingungen
bebrütet wurden, verglichen. Die niedrigste Konzentration der das Wachstum der schräg im Reagenzglas
angelegten Agarkultur verbindernde Antibiotika wurde als fungicide Konzentration der Antibiotika
betrachtet. Die Ergebnisse dieser Studien sind in der folgenden Tabelle angeführt, worin die Zeichen » + «
und »—« das Wachstum bzw. kein Wachstum anzeigen:
40 Antibiotika |
Konzen tration in mcg/ml |
Ergebnis entnommei 4 |
.se der Sub
j in Stunde 8 |
culturen, nabständen 24 |
N-329 A 45 |
100 50 10 1 |
: | ||
N-329 B 50. . . |
. 100 · .50 . 10 . . . 1 . |
+ ■ -·· | — | — |
Kein (Vergleich) | ■■ + -; | • + " | ■ ^ |
Wie aus der oben angeführten Tabelle zu ersehen ist, sind beide Antibiotika gegenüber Piricularia
oryzae fungicid, wobei das Antibiotikum N-329 B eine stärkere fungicide Wirksamkeit gegenüber dem
Organismus als das Antibiotikum N-329 A aufweist. , Wegen ihrer fungicidalen Wirksamkeit in vitro
gegenüber Piricularia oryzae wurde ein sogenannter Topftest im Treibhaus durchgeführt, wobei experimentale
Infektionen auf. Blatttriebe in Reispflanz-Setzlingen aufgetragen wurden. Die Setzlinge Aichiasahi
wurden in Töpfe von etwa' 100 mm Durchmesser bebrütet. Die Blatttriebe der Reispflanz-Setzlinge
wurden dann mit einer Sporensuspension von
Piricularia oryzae, KU, durch Besprühen der Oberflächen der Blätter infiziert. 1 Tag nach der Infektion
erfolgte nur eine Behandlung durch Besprühen mit den Antibiotika, welche mit Natriumcarboxymethyl-Cellulose
suspendiert waren; beim Besprühen wurden 20 ml der Antibiotikum-Suspensionen in jeden Topf
verwendet. Die Wirksamkeit der Antibiotika wurde durch den Grad (Typus) der Symptome der infizierten
Triebe am 10. Tag nach der Infektion beurteilt. Die Ergebnisse sind in der folgenden Tabelle zusammengefaßt:
Konzentration | Symptome der infizierten Blätter am 10. Tag nach der Infektion |
N-329 B |
in mcg/ml | N-329A | Fleckentypus |
100,0 | Fleckentypus | (bräunlicher |
(bräunlicher | Flecken: | |
Flecken: | Blatt, grün) | |
Blatt, grün) | Fleckentypus | |
50,0 | Fleckentypus | (bräunlicher |
(bräunlicher | Flecken: | |
Flecken: | Blatt, grün) | |
Blatt, grün) | Diffuser Typus | |
25,0 | Diffuser Typus | (Blatt, gelb |
(Blatt gelb | lich) | |
lich) | Diffuser Typus | |
12,5 | Diffuser Typus | (Blatt, gelb |
(Blatt, gelb | lich) | |
lich) | Diffuser Typus | |
0 | Diffuser Typus | (Blatt, gelb |
(Vergleich) | (Blatt, gelb | lich) |
lich) |
20
35
Aus den in obiger Tabelle angeführten Angaben ergibt sich, daß beide Antibiotika, d. h. das N-329 A
und das N-329 B, wirksam gegenüber Infektionen von Piricularia oryzae in Blatttrieben auf Reispflanzen-Setzlingen
sind und daß die Schutzwirkung beider Antibiotika eine sehr ähnliche Wirksamkeit aufweist.
Wie oben ersichtlich, weisen die Antibiotika N-329 A und N-329 B fungistatische und fungicidale Wirksamkeiten
gegenüber Piricularia oryzae und einige andere phytopathogene Pilze, wie Helminthosporium sigmoi-Jeum
und Pphiobolus graminis auf. Demgemäß sind sie für die Therapie und die Prophylaktik von Pflanzenkxankheiten,
verursacht durch die genannten phytopathogenen Pilze, insbesondere Reisbrand, nützlich.
Anders dargelegt sind diese Antibiotika als aktive Bestandteile in keimtötenden Mittel zum landwirtschaftlichen
Gebrauch nützlich.
Eine bevorzugte Ausführungsform des oben beschriebenen erfindungsgemäßen Verfahrens ist durch
das folgende Beispiel veranschaulicht.
IO Ein wäßriges Nährmedium wird aus den folgenden Materialien hergestellt: g/\
Getreidestärke 10,0
Sojabohnenmehl 10,0
Glycerin 5,0
Getreidequellwasser 5,0
Calciumcarbonat 3,5
Natriumchlorid 3,0
Das pH wird auf etwa 7,0 eingestellt. Nach Sterilisierung mit Dampf bei 1200C während 20 Minuten
wird das Medium mit Streptomyces tsusimaensis HTCl 15 141 geimpft und unter Rühren und Belüftung
während einer Zeitspanne von 144 bis 192 Stunden, bei einer Temperatur von 27 bis 29°C, kultiviert.
Die Fermentationsbrühe wird dann mit Kieselgur der Handelsmarke »Hyflo-Super-Cel«, und zwar mit
einer Menge von 10 g pro Liter der Fermentationsbrühe, vermengt, mit 10%iger Chlorwasserstoffsäure
auf etwa pH 7,0 eingestellt, während 30 Minuten gerührt und durch Saugen filtriert. Der gesammelte
Kuchen des Mycels und des Kieseigurs wird mit Wasser gewaschen und 3mal mit etwa Y4. Volumen
Aceton geschüttelt. Die Acetonextrakte werden vereinigt, unter vermindertem Druck eingeengt und dann
mit Petroläther geschüttelt. Der Petrolätherextrakt wird zur Abscheidung einer kristallinen Substanz
konzentriert. Die kristalline Substanz wird filtriert und aus Aceton umkristallisiert, wobei das Antibiotikum
N-329 A, in Kristallen mit F. = 148 bis 149,5° C, erhalten wird. Das Filtrat, aus welchem das
Antibiotikum N-329 A separiert wurde, wird zwecks Entfernung des Lösungsmittels abgedampft. Die erhaltene
ölige Substanz wird durch eine mit Tonerde gefüllte Kolonne, die mit Petroläther vorbehandelt
wurde, durchgesetzt und die Kolonne dann mit Petroläther entwickelt. Jedes der eluierten Fraktionen
mit Petroläther wird einem Test zur Bestimmung der Antibiotikum-Wirksamkeit mit HiUe der Papierscheiben-
oder Schalenmethode, unter Verwendung von Corynebacterium diphtheriae, unterworfen (s. E d w i η
und Mitarbeiter, J. Bacteriology, Bd. 50, S. 459 [1945]; N i s h i m u r a und Mitarbeiter, Annual Report of
Shionogi Research Laboratory, Nr. 11, S. 145 [1961]).
Die Fraktionen, die die antibiotische Wirksamkeit zeigen, werden vereinigt, unter reduziertem Druck
konzentriert und bei Zimmertemperatur zwecks Abscheidung einer kristallinen Substanz stehengelassen.
Die kristalline Substanz wird filtriert und aus Aceton umkristallisiert und liefert das Antibiotikum N-329 B
in Form von Kristallen mit F. = 190,5 bis 1910C
Aus 501 des Nährmedium erhält man 2 bis 3 g an Antibiotikum N-329A und 0,2 bis 0,3 g des Antibiotikums
N-329 B.
Hierzu 1 Blatt Zeichnungen 209544/458
Claims (1)
- Patentanspruch:Fermentatiyes Verfahren zur . Herstellung der Antibiotika N-329 A und N-329 B, dadurch gekennzeichnet, daß man Streptomyces tsusimaensis ATCC Nr. 15 141 in einem wäßrigen Nährmedium züchtet und dann in üblicher Weise aufarbeitet.10
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP4157863 | 1963-08-03 | ||
JP4157863 | 1963-08-03 | ||
DES0105213 | 1964-07-11 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE1617796A1 DE1617796A1 (de) | 1972-03-23 |
DE1617796C true DE1617796C (de) | 1973-05-17 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE1617299B2 (de) | Glycopeptid-Antibiotikum AV 290 - Komplex (Avoparcin) Verfahren zu seiner Herstellung und seine Verwendung | |
DE2900591A1 (de) | Antibiotica, ein verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung als pflanzenschutzmittel | |
DE2167325C2 (de) | Antibiotikum A-201B und Verfahren zu seiner Herstellung | |
DE1617796C (de) | Fermentatives Verfahren zur Herstel lung der Antibiotika N 329A und N 329B Ausscheidung aus 1567095 | |
DE2737943C2 (de) | Antibiotisch wirksames Oligosaccharid, Verfahren zu seiner Herstellung sowie dieses enthaltende Arzneimittel | |
DE1617796B (de) | Fermentatives Verfahren zur Herstellung der Antibiotika N-329A und N-329B. Ausscheidung aus: 1567095 | |
DE2342404C3 (de) | 3-(5,7-Dimethyl-2-hydroxy-4-oxo-6,8-decadienyI)-glutarimid sowie Verfahren zu dessen Herstellung | |
DE3141168A1 (de) | Anthracyclin-verbindungen, verfahren zu deren herstellung und diese enthaltende arzneimittel | |
DE2026595A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Antibiotika | |
DE2510868C3 (de) | Nanaomycin A und Verfahren zur Herstellung der Antibiorica Nanaomycin A und Nanaomycin B | |
DE1667923C3 (de) | Neue Antibiotika, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie pharmazeutische Zubereitung, die diese Antibiotika enthält | |
DE2133181C3 (de) | Tuberactinomycin-N, Verfahren zu dessen Herstellung und dieses enthaltende Arzneimittel | |
DE1617796A1 (de) | Fermentatives Verfahren zur Herstellung von Antibiotika | |
DE2818544A1 (de) | Antibiotikum sf-1942, verfahren zu dessen herstellung und pharmazeutische zusammensetzung, die das antibiotikum sf-1942 enthaelt | |
DE1795154C3 (de) | Verfahren zur Herstellung eines neuen, Tuberactin genannten antibiotischen Wirkstoffes | |
DE2638400A1 (de) | Neue organische verbindung, ihre herstellung und verwendung | |
DE1492111C (de) | Verfahren zur Herstellung von Poly oxm A und B | |
AT361619B (de) | Verfahren zur herstellung von neuen antibiotika | |
DE3111582C2 (de) | Antibiotische Substanz SF-2107 A-1 | |
AT266316B (de) | Verfahren zur Herstellung eines neuen Antibiotikums | |
DE2138588A1 (de) | Antibiotikum CP 21 635 und Verfahren zu seiner Herstellung | |
DE2608337A1 (de) | Neue organische verbindung, ihre herstellung und verwendung | |
DE1617890A1 (de) | Neues Antibiotikum und Verfahren zu seiner Herstellung | |
DE1961764A1 (de) | Antibiotisch wirksames Aabomycin-A und Verfahren zu seiner Herstellung | |
DE1116864B (de) | Herstellung und Gewinnung des Antibiotikums Avilamycin |