CZ295983B6 - Kosmetický prostředek a způsob ošetřování pleti - Google Patents
Kosmetický prostředek a způsob ošetřování pleti Download PDFInfo
- Publication number
- CZ295983B6 CZ295983B6 CZ19991089A CZ108999A CZ295983B6 CZ 295983 B6 CZ295983 B6 CZ 295983B6 CZ 19991089 A CZ19991089 A CZ 19991089A CZ 108999 A CZ108999 A CZ 108999A CZ 295983 B6 CZ295983 B6 CZ 295983B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- retinol
- compound
- cosmetic composition
- retinyl
- alpha
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/35—Ketones, e.g. benzophenone
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/33—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing oxygen
- A61K8/34—Alcohols
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/494—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with more than one nitrogen as the only hetero atom
- A61K8/4946—Imidazoles or their condensed derivatives, e.g. benzimidazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/49—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds
- A61K8/4973—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom
- A61K8/498—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds containing heterocyclic compounds with oxygen as the only hetero atom having 6-membered rings or their condensed derivatives, e.g. coumarin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/67—Vitamins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/67—Vitamins
- A61K8/671—Vitamin A; Derivatives thereof, e.g. ester of vitamin A acid, ester of retinol, retinol, retinal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
- A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cosmetics (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Kosmetický prostředek obsahuje a) 0,001 až 10 % sloučeniny ze skupiny retinol, retinylester a směsi těchto látek, b) 0,001 až 50 % sloučeniny, která v koncentraci 100 .mi.M vyvolá inhibici nejméně 20 % esterifikace retinolu, katalyzované LRAT nebo ARAT při měření na mikrosomech in vitro, sloučenina se volí z derivátů cyklických nenasycených uhlovodíků a smáčedel, hydroxyethylimidazolinových derivátů mastných kyselin a c) nosič, přijatelný z kosmetického hlediska. Součást řešení tvoří také způsob ošetřování pleti, který spočívá v nanášení uvedeného kosmetického prostředku na pleť.
Description
Kosmetický prostředek a způsob ošetřování pleti
Oblast techniky
Vynález se týká kosmetického prostředku pro péči o plet a způsobu ošetřování pleti.
Dosavadní stav techniky
Retinol (vitamin A) je endogenní sloučenina, která se přírodně vyskytuje v lidském organismu a má zásadní význam pro normální diferenciaci epitheliálních buněk. Z tohoto důvodu byly přírodní i syntetické deriváty vitaminu A široce užívány k léčení různých kožních onemocnění a k obnově pokožky. Kyselina retinová byla užívána například k léčení akné, vrásek, lupenky, stařeckých skvrn a odlišně zbarvených oblastí pokožky, jak bylo popsáno například v publikacích Vahlquist A. a další, J. Invest. Dermatol., sv. 94, Holland D. B. a Cunliffe W. J., 1990, str.496 až 498, Ellis C. N. a další, Pharmacology of Retinols in Skin, Vasel, Karger, sv. 3, 1989, str. 249 až 252, Lowe N. J. a další, Pharmacology of Retinols in Skin, sv. 3, 1989, str. 240 až 248 a PCT patentová přihláška WO 93/19743.
FR dokument 2 666 226 popisuje použití flavonoidů spolu s estery retinolu k výrobě prostředků pro péči o pleť.
Obvykle se považuje použití retinolu nebo esteru retinolu za výhodnější než použití samotné kyseliny. Retinol se přirozeně vyskytuje v lidském organismu a jeho použití se tedy považuje za bezpečnější než použití kyseliny retinové. Estery retinolu se in vivo hydrolyzují za vzniku retinolu. Je pravděpodobné, že se estery retinolu a retinol v pokožce metabolicky mění na kyselinu podle následujícího schématu:
retinylester _Σ*retinol kyselina retinová
Většina endogenního retinolu je však rychle převedena na neúčinné estery mastných kyselin pro uložení v keratinocytech pokožky, Esterifikace retinolu na neúčinné retinylestery je prováděna v buňkách přenosem acylové skupiny afatické kyseliny z acylCoA, reakce je katalyzována enzymem acylCoAretinoltransferázou, ARAT, nebo může jit o přenos acylové skupiny z fosfatidylcholinu, katalyzovaný enzymem lecithinretinolacyltransferázou, LRAT. Tyto esterifikační reakce jsou v keratinocytech velmi účinné, takže převážná většina 95 % buněčných retionidů je ve formě retinylesterů s mastnými kyselinami, přestože tedy retinol a retinylestery jsou při použiti bezpečnější než kyselina retinová, jsou naneštěstí méně účinné.
Vynález je z části založen na objevu, že některé sloučeniny mohou vyvolat inhibici těchto esterifikačních reakcí, a tím potenciaci účinku retinolu zvýšením množství retinolu, které je k dispozici pro přeměnu kyseliny retinové, směs těchto látek s retinolem nebo retinylestery tedy napodobuje působeni kyseliny retinové, její použití je však bezpečnější.
-1 CZ 295983 B6
Podstata vynálezu
Podstatu vynálezu tvoří kosmetický prostředek pro péči o pleť, který obsahuje
a) 0,001 až 10 % sloučeniny ze skupiny retinol, retinylester a směsi těchto látek,
b) 0,0001 až 50 % sloučeniny, která v koncentraci 100 μΜ vyvolá inhibici nejméně 20 % esterifíkace retinolu, katalyzované LRAT nebo ARAT při měření na mikrozomech in vitro, přičemž tato sloučenina je odlišná od amidu mastné kyseliny nebo dimethylimidazolidinonu a volí se ze skupiny derivátů cyklických nenasycených uhlovodíků, diterpenů a smáčedel, hydroxyethylimidazolinových derivátů mastných kyselin vzorcel
R
kde
R znamená alifatický nasycený nebo nenasycený uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující 8 až 20 atomů uhlíku, nebo směs těchto látek, a
c) nosič, přijatelný z kosmetického hlediska.
Sloučeniny, užité spolu s retinolem a/nebo retinylesterem se volí podle schopnosti vzniklé kombinace napodobit účinek kyseliny retinové na pokožce. Další možností je zkouška in vitro na mikrozomech ke stanovení, zda takové látky vyvolávají dostatečnou inhibici esterifíkace retinolu, katalyzované LRAT nebo ARAT.
Uvedený prostředek je možno použít k péči o pleť místním nanesením prostředku na pokožku k napodobení účinku kyseliny retinové.
Pod pojmem „péče o pleť“ se rozumí například prevence a/nebo léčení suché pokožky nebo pokožky, poškozené například slunečním zářením, léčení nebo prevence vrásek, stařeckých skvrn, zvýšení flexibility stratům corneum nebo zesvětlení barvy pokožky a obecně zlepšení jejího celkového stavu.
Podle vynálezu je možno přidáním účinného množství sloučeniny, která v koncentraci 100 μΜ vyvolává inhibici nejméně 20 % esterifíkace retinolu, katalyzované ARAT nebo LRAT při měření in vitro na mikrozomech, podstatně zlepšit účinek kosmetického prostředku.
Popis výhodných provedení
První základní složkou kosmetického prostředku podle vynálezu je sloučenina ze skupiny, tvořené retinolem a retinylesteru. Pod pojmem „retinol“ se mimo jiné rozumí následující izomery retinolu. alfall-trans-retinol, 13-cis-retinol, 11-cis-retinol, 9-cis-retinol, 3,4-didehydroretinol. Výhodnými izomeryjsou alfall-trans-retinol, 13-cis-retinol, 3,4-didehydroretinol a 9-cis-retinol. Nejvýhodnější je alfal 1-trans-retinol vzhledem k tomu, že je běžně dodáván.
Retinyiester je ester retínolu. Retinylestery, vhodné pro použití v kosmetickém prostředku podle vynálezu, mají 1 až 30 atomů uhlíku, s výhodou 2 až 20 atomů uhlíku v esterové skupině, nejvýhodnější jsou estery, obsahující 2, 3 a 16 atomů uhlíku vzhledem k tomu, že jsou běžně dostupné. Jako příklady retiny testerů je možno uvést například: retinylpalmitát, retinylformiát, retinylacetát, retinylpropionát, retinylbutyrát, retinylvalerát, retinylisovalerát, retinylhexanát, retinylheptanoát, retinyloktanoát, retinylnonanoát, retinyldekanoát, retinylundekanoát, retinyllaurát, retinyltridekanoát, retinylmyristát, retinylpentadekanoát, retinylheptadekanoát, retinylstearát, retinylisostearát, retinylnonadekanoát, retinylarachidonát, retinylbehenát, retinyllinoleát a retinyloleát.
Výhodné estery pro použití v kosmetickém prostředku podle vynálezu se volí z retinylpalmitátu, retinylacetátu a retinylpropionátu vzhledem k tomu, že tyto látky se běžně dodávají a jsou proto nejlevnější. Retinyllinoleát je rovněž výhodný vzhledem ke své účinnosti.
Retinol a/nebo retinyiester je v prostředku podle vynálezu obsažen v množství 0,001 až 10 %, s výhodou v množství 0,01 až 1 % a zvláště 0,01 až 0,5 %.
Druhou základní složkou kosmetického prostředku podle vynálezu jsou látky, které při zkouškách na mikrozomech in vitro vyvolávají v koncentraci 100 μΜ nejméně 20% inhibici esterifíkace retinolu, katalyzované LRAT nebo ARAT. Dále bude popsána zkouška in vitro na mikrozomech pro stanovení vhodnosti zkoumané látky pro zařazení do kosmetického prostředku podle vynálezu.
Ve výhodném provedení vynálezu se pro zařazení do kosmetického prostředku volí látky, které v koncentraci 100 μΜ vyvolávají inhibici nejméně 40 a s výhodou nejméně 50 % esterifikace retinolu, katalyzované LRAT nebo ARAT.
Zkouška na mikrozomech in vitro
Mikrozomy se získají způsobem podle publikace J. C. Saari a D. L. Bredberg, CoA and NonCoA Dependent Retinol Esterification in Retinal Pigment Epithelium, J, Biol. Chem., 263, 8084 až 8090, 1988.
Roztok, obsahující 0,1 M pufru s fosfátem sodným o pH 7, 5 mM dithiothreitolu, 2 mg/ml sérového albuminu skotu, 40 μΜ roztok palmitoyl CoA, 40 μΜ roztok dialuroylfosfatidylcholinu, 10 μΜ roztok retinolu a zkoumanou látku nebo pouze rozpouštědlo v případě slepé zkoušky se inkubuje 1 hodinu při teplotě 37 °C s mikrozomální frakcí, izolovanou z pigmentových epitheliálních buněk sítnice skotu. Po inkubaci se reakce zastaví přidáním stejného objemu ethanolu a vytvořené retinylestery (retinyllaurát z reakce, katalyzované LRAT a retinylpalmitát z reakce, katalyzované ARAT) se extrahují hexanem. Hexanová vrstva se oddělí, odpaří pod dusíkem a odparek se analyzuje pomocí HPLC na sloupci v reverzní fázi Cis s rozměrem 3,9 x 300 mm při použití 80% methanolu v tetrahydrofuranu jako mobilní fáze a při detekci fluorescencí (excitace 325 nm, emise 480 nm) ke kvantitativnímu stanoveni retinylesteru, Množství esteru, vytvořeného v přítomnosti rozpouštědla jako slepé zkoušky se pokládá za 100 %, ze získaných hodnot se vypočítá inhibice tvorby esterů v procentech pro každou ze zkoumaných látek. Při kontrolním pokusu se stejné množství mikrozomů inaktivuje varem po dobu 5 minut, čímž dojde k nejméně 95% inhibici tvorby esteru.
Příkladem sloučenin, splňujících podmínky svrchu popsané zkoušky in vitro na mikrozomech mohou být deriváty cyklických nenasycených uhlovodíků, diterpeny, flavonony, flavonoly a některá smáčedla typu derivátů hydroxyethylimidazolínů s mastnými kyselinami. Tyto látky budou dále podrobněji popsány. Použít je však možno i jiné látky, pokud splní uvedené podmínky.
-3 CZ 295983 B6
Deriváty cyklických nenasycených sloučenin
Vhodné látky tohoto typu byly vybírány podle výsledků svrchu uvedené zkoušky na mikrozomech.
Výhodné deriváty cyklických nenasycených sloučenin se volí ze skupiny cyklických nenasycených aldehydů, ketonů, alkoholů a esterů.
Výhodnými cyklickými nenasycenými aldehydy, ketony, alkoholy a estery jsou: alfa-damaskon, 10 beta-damaskon, delta-damaskon, iso-damaskon, damascenon, alfa-ionon, beta-ionon, allyl— alfa-ionon, isobutylionon, alfa-methylionon, gamma-methylionon, brahmanol, sandanol, alfaterpineol, lyral, ethylsafranát a směsi těchto látek. Jde o sloučeniny s následující strukturou:
alfa-damaskon
de Ita-damaskon
-4CZ 295983 B6
damascenon
alfa-ionon.
bet a-i orion
alfa-methylionon
-5CZ 295983 B6
gamma-me thylionon
ethyl-safranát
K dosažení maximálních výhod při nejmenších nákladech se cyklická nenasycená sloučenina volí ze skupiny damaskonů a iononů se svrchu uvedenou strukturou.
Nejvýhodnějšími cyklickými nenasycenými sloučeninamijsou alfa-damaskon a/nebo alfa-ionon.
-6CZ 295983 B6
Cyklickou nenasycenou sloučeninu je možno do prostředku podle vynálezu zařadit v množství, které se pohybuje v rozmezí 0,0001 až 50 % hmotnostních, vztaženo na celkovou hmotnost kosmetického prostředku, výhodné rozmezí je 0,01 až 10 a zvláště 0,1 až 5% hmotnostních.
Diterpeny
Diterpeny, vhodnými pro použití v kosmetickém prostředku podle vynálezu jsou takové diterpeny, které splňují svrchu uvedenou zkoušku na mikrozomech. Výhodný je geranylgeranion s následující strukturou
Diterpeny mohou být v kosmetickém prostředku podle vynálezu obsaženy v množství 0,0001 až 50 % hmotnostních, vztaženo na celkovou hmotnost prostředku, výhodné rozmezí je 0,01 až 10 a zvláště 0,1 až 5 % hmotnostních. Smáčedla na bázi sloučenin hydroxyethylimidazolinu s mastnými kyselinami.
Ze smáčedel tohoto typu jsou vhodná ta smáčedla, která splňují podmínky svrchu uvedené zkoušky in vitro na mikrozomech. Výhodné látky tohoto typuje možno vyjádřit obecným vzorcem
R \—N—CH,CH,OH i kde R znamená alifatický nasycený nebo nenasycený uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující 8 až 20 atomů uhlíku.
Jako příklad vhodných hydroxyethylimidazolinových derivátů mastných kyselin je možno uvést kokoylhydroxyethylimidazolin, v němž R je odvozeno od masných kyselin kokosového oleje, z nichž většina má 12 atomů uhlíku a některé mají delší řetězce, dále může jít o laurylhydroxyethylimidazolin vzorce R = CH3(CH2)i0, myristylhydroxyethylimidazolin vzorce R = CH3(CH2)|2, stearylhydroxyethylimidazolin vzorce R=CH3(CH2)i6 a oleylhydroxyethylimidazolin R % CH3(CH2)7 CH = CH(CH2)7.
V uvedených sloučeninách obsahuje R s výhodou 8 až 18 a zvláště 11 až 18 atomů uhlíku. Nejvýhodněji je použitou látkou oleylhydroxyethylimidazolin vzhledem ke své účinnosti a dobré dostupnosti.
Uvedené hydroxyethylimidazolinové deriváty mohou být v kosmetickém prostředku podle vynálezu obsaženy v množství 0,0001 až 50 % hmotnostních, vztaženo na celkovou hmotnost prostředku, s výhodou jsou obsaženy v množství 0,01 až 10 a zvláště 0,1 až 5% hmotnostních.
Kosmeticky přijatelný nosič
Kosmetický prostředek podle vynálezu obsahuje také kosmeticky přijatelný nosič jako ředidlo, disperzní prostředí nebo nosič pro retinol a/nebo retinylester a N-substituovaný amid mastné kyseliny, nosič nebo nosné prostředí slouží zejména ke snadnému nanášení kosmetického prostředku na pokožku.
-7CZ 295983 B6
Nosná prostředí, odlišná od vody nebo užívaná společně s vodou zahrnují kapalná nebo pevná změkčovadla, rozpouštědla, zahuštovadla, látky zadržující vodu a různé práškové materiály. Zvláště výhodným nosičem nevodné povahy je polydimethylsiloxan a/nebo polydimethylfenylsiloxan. Silikony pro použití v kosmetickém prostředku podle vynálezu mají s výhodou viskozitu 10 až 10 000 000 mm2/s při teplotě 25 °C. Zvláště vhodné jsou směsi silikonů s nízkou a vysokou viskozitou. Tyto silikony se běžně dodávají pod obchodními názvy Vicasil SE a SF (Generál Electric company) a pod čísly 200 a 550 (Dow Orning Company). Množství silikonu, které je možno použít v prostředku podle vynálezu je 5 až 95 %, s výhodou 25 až 90 % hmotnostních prostředku.
Kosmeticky přijatelný nosič bude tvořit obvykle 5 až 99,9, s výhodou 25 až 80 % hmotnostních prostředku a může v nepřítomnosti dalších kosmeticky přijatelných složek doplnit kosmetický prostředek na požadované množství. S výhodou tvoří nosné prostředí nejméně z 50 % a zvláště z 80 % hmotnostních voda. Výhodný obsah vody je zvláště 60 až 80 % hmotnostních, vztaženo na celkovou hmotnost kosmetického prostředku.
Případné další účinné a pomocné složky
K získání emulze typu voda v oleji nebo olej ve vodě může být v kosmetickém prostředku podle vynálezu obsažen olej nebo materiál typu oleje spolu s emulgátorem v závislosti na hydrofílnělipofilní rovnováze HLB použitého emulgátoru.
Kosmetické prostředky podle vynálezu s výhodou obsahují ochranné látky proti slunečnímu záření. Jde o materiály, běžně užívané k ochraně proti ultrafialovému záření. Z těchto látek je možno uvést deriváty PABA, cinnamát a salicylát. Je například možno použít oktylmethoxycinnamát a 2-hydroxy-4-methoxybenzofenon, známý také jako oxybenzon. Oktylmethoxycinnamát a 2hydroxy-4-methoxybenzofenon se běžně dodávají pod obchodními názvy Parsol MCX a Benzophenon-3. Přesné množství těchto látek v emulzi se může měnit v závislosti na požadovaném stupni ochrany proti slunečnímu záření.
Další výhodnou případnou složkou jsou esenciální mastné kyseliny EFA, to znamená takové mastné kyseliny, které jsou nezbytné pro tvorbu plazmatické membrány všech buněk, například u keratinocytů dochází při nedostatku EFA ke zvýšené proliferaci. Tento stav je možno léčit dodáním EFA. EFA také podporuji biosyntézu lipidů v pokožce a poskytují lipidy pro tvorbu bariery pokožky. Z esenciálních mastných kyselin je možno zvláště uvést kyselinu linolovou, gammalinolenovou, homo-gamma-linolenovou, columbinovou, eicosa-(n-6,9,13)-trienovou, arachidonovou, timnodonovou, hexaenovou a směsi těchto kyselin.
Do kosmetických prostředků podle vynálezu se často přidávají změkčovadla. Množství změkčovadel se může pohybovat v rozmezí 0,5 až 50, s výhodou 5 až 30 % hmotnostních, vztaženo na celkovou hmotnost prostředku. Změkčovadla pro toto použití jsou látky z různých chemických skupin, jako estery, mastné kyseliny a alkoholy, polyoly a uhlovodíky.
Estery mohou být monoestery nebo diestery. Přijatelnými příklady diesterů mastných kyselin mohou být dibutyladipát, diethylsebakát, diisopropyldimerát a dioktylsukcinát. Přijatelné estery mastných kyselin s rozvětveným řetězcem zahrnují 2-ethylhexylmyristát, isopropylstearát a isostearylpalmitát. Přijatelné estery trikarboxylových kyseliny zahrnují triisopropyltrilinoleát a trilaurylcitrát. Přijatelné estery mastných kyselin s přímým řetězcem zahrnují laurylpalmitát, myristyllaktát, oleylerukát a stearyloleát. Výhodnými estery jsou kokokaprylát/kaprát (směs kokokaprylátu a kokokaprátu), acetát myristyletheru propylenglykolu, diisopropyladipát a cetyloktanát.
Z vhodných mastných alkoholů a kyselin je možno uvést sloučeniny, obsahující 10 až 20 atomů uhlíku. Zvláště výhodné jsou cetyl·-, myristyl-, palmityl- a stearylalkoholy a příslušné kyseliny.
-8CZ 295983 B6
Z polyolů, použitých jako změkčovadla je možno uvést alkylpolyhydroxysloučeniny s přímým nebo rozvětveným řetězcem. Výhodnými látkami z této skupiny jsou propylenglykol, sorbitol a glycerol. Použitelné jsou také polymerní polyoly, jako polypropylenglykol a polyethylenglykol. Butylenglykol a propylenglykol jsou zvláště výhodné jako látky, které usnadňují průnik.
Z uhlovodíků, použitých jako změkčovadla je možno uvést zejména uhlovodíky, obsahující 12 až 30 atomů uhlíku. Specifickými příklady mohou být minerální olej, vazelína, squalen a isoparafíny·
Další kategorií funkčních složek pro kosmetické prostředky podle vynálezu jsou zahušťovadla. Látky tohoto typu budou obvykle obsaženy v množství 0,1 až 20, s výhodou 0,5 až 10 % hmotnostních z celkové hmotnosti kosmetického prostředku. Jako příklady zahušťovadel je možno uvést zesítěné polyakryláty, dodávané pod obchodním názvem Carbopol (B. F. Goodrich Company). Je také možno užít gumy, jako xanthan, carrageenan, želatinu, karayu, pektin a gumu z bobů. Za určitých okolností může být zahušťovadlo voleno z látek, použitých jako silikon nebo jako změkčovadla. Například silikonové pryže s viskositou vyšší než lOcentistoke a také některé estery, například glycerolstearát mohou v kosmetickém prostředku splnit dvojí funkci.
Do kosmetických prostředků podle vynálezu je možno začlenit také práškové materiály. Takovými složkami jsou například křída, mastek, kaolin, škrob, smektit, chemicky modifikovaný křemičitan hořečnatohlinitý, organicky modifikovaná montmorilonitová hlinka, hydratovaný křemičitan hlinitý, vysušený oxid křemičitý, oktenylsukcinát škrobu ve formě hlinité soli a směsi těchto látek.
Do kosmetických prostředků podle vynálezu mohou být zařazeny v malém množství také další složky, jako jsou barviva, parfémy a podobně. Množství těchto složek se může pohybovat v rozmezí 0,001 až 20 % hmotnostních.
Použití kosmetického prostředku
Kosmetický prostředek podle vynálezu je primárně určen pro místní podání na lidskou pokožku, zejména k péči o pleť a k prevenci nebo odstranění vrásek nebo jiných projevů stárnutí pokožky.
Při použití se malé množství prostředku, například 1 až 100 ml, nanese na příslušné části pokožky z vhodné nádobky nebo aplikátoru a popřípadě se pak materiál roztírá a/nebo vetře do pokožky rukou, prsty nebo vhodnými pomůckami.
Výrobky a balení
Prostředky podle vynálezu pro místní podání mohou být například emulze, krémy nebo gely. Tyto materiály mohou být baleny do vhodných nádobek podle viskozity a předpokládaného použití. Například emulze nebo krémy je možno uložit do lahviček, popřípadě opatřených ve výstupním otvoru kulkou pro snadnější nanášení, nebo je možno prostředek uložit do přístroje pro nanášení aerosolu s hnacím prostředkem nebo do nádobky s mechanickým nanášením pomocí prstů. V případě krémuje možno použít nedeformující se kelímek nebo také tubu. Prostředek je rovněž možno ukládat do kapslí, například podle US 5 063 057.
Praktické provedení vynálezu bude osvětleno následujícími příklady, které však nemají sloužit k omezení rozsahu vynálezu. V příkladové části přihlášky budou užity různé materiály a budou také prováděny různé typy zkoušek.
-9CZ 295983 B6
Materiály a metody
Buněčná kultura
Lidské keratinocyty, izolované z předkožky novorozence působením trypsinu se pěstují v Eaglově prostředí v Duíbeccově modifikaci DME HamsF12 (1 : 1) s 10% fetálního telecího séra v přítomnosti ozáření myších fibroblastů 3T3 pro zahájení dělení kolonií keratinocytů. Buňky byly pěstovány až do druhé pasáže a pak byly udržovány ve zmrazeném stavu pro příští použití. Pak byly keratinocyty opět rozmraženy ve svrchu uvedeném prostředí a pěstovány 5 dnů, načež bylo prostředí vyměněno na prostředí na bázi MCBD 153, prosté séra a vhodné pro pěstování keratinocytů, KGM (Clonetic Corporation, San Diego, CA), prostředí obsahuje 0,15 mM vápníku, nebo je také možno užít prostředí KSFM, prosté séra a vhodné pro pěstování keratinocytů (GIBCO), které obsahuje 0,09 mM vápníku. Ve dni 7 vytvořil buněčný materiál vrstvu, souvislou na 80 až 90 %, vrstva byla zpracována trypsinem a nanesena na plotny v prostředí, prostém séra, pro různé zkoušky.
Zkouška s thymidinem
Příjem 3H-thymidinu a proliferace keratinocytů
Příjem 3H-thymidinu keratinocyty, pěstovanými v kultuře, byl užit jako zkouška na proliferaci keratinocytů. Thymidin je jeden ze čtyř deoxynukleotidů, které jsou monomemími jednotkami DNA, univerzální banku genetické informace u živočichů.před dělením buněk, například keratinocytů dochází k úplné replikaci genomu dělící se buňky. K tomuto účelu buňka produkuje velké množství DNA tak, aby obě dceřinné buňky obsahovaly totožné kopie genetického materiálu.
V případě, že se do živného prostředí pro keratinocyty přidá 3H-thymidin, dojde k zařazení tohoto značeného nukleosidu do nově syntetizované DNA v průběhu přípravy na dělení buněk. Míra příjmu radioaktivního thymidinu do určité populace buněk je tedy přímo úměrná množství syntetizované DNA v této buněčné populaci a je tedy současně také indikátorem proliferace těchto buněk.
Keratinocyty, pěstované svrchu uvedeným způsobem se nanesou na plotny s 24 vyhloubeními v množství 20 000 buněk na vyhloubení v 1 ml prostředí. Materiál se inkubuje 4 dny nebo tak dlouho, až se vytvoří vrstva, souvislá na 60 až 70 %, pak se prostředí vymění za čerstvé prostředí. 24 hodin po výměně prostředí se ve trojím opakování do vyhloubení přidají zkoumané látky a po dalších 4 hodinách se do každého vyhloubení přidá ještě 50 mikrolitrů živného prostředí s obsahem 1 pCi 3H-thymidinu. Buněčný materiál se pak inkubuje dalších 24 hodin. Pak se prostředí odstraní, přidá se 10% kyselina trichloroctová TCA, chlazená ledem a plotny se inkubují v ledu 30 minut. Pak se buněčný materiál pětkrát promyje 5% TCA a nechá se rozpouštět v 500 mikrolitrech 0,1 MNaOH nejméně 1 hodinu, obvykle přes noc. Pak se vzorky neutralizují přidáním 0,1 M HC1, načež se 50 mikrolitrů preparátu užije ke stanovení celkového obsahu bílkovin. Radioaktivní vodík v DNA se na základě počtu rozpadů za minutu DPM stanoví kapalinovou scintilací při použití vzorku s objemem 900 mikrolitrů. Příjem thymidinu se vyjádří jako DPM/mikrogram bílkoviny.
Zkouška na transglutaminázu
Zkouška na transglutaminázu a diferenciace keratinocytů
V průběhu konečné diferenciace epidermis se vytváří na vnitřním povrchu periferie buněk vrstva bílkoviny s tloušťkou 15 nm, označovaná jako obalová vrstva CE. Tato vrstva CE je tvořena řadou bílkovin, které byly spolu zesítěny za tvorby Neta-(gamma-glutamyl)lysinisodipeptidových vazeb, tato tvorba je katalyzována působením nejméně dvou různých transglutamináz TG, k jejichž expresi dochází v epidermis. K expresi transglutaminázy I TG I dochází ve velkém množství v diferencovaných vrstvách epidermis, zvláště v granulární vrstvě, avšak nedochází k ní
-10CZ 295983 B6 v nediferencované bazální vrstvě. To znamená, že uvedený enzym je vlastně průkazem diferenciace keratinocytů, přičemž vyšší množství enzymu je vždy ukazatelem diferencovanějšího stavu. Při průkazu tohoto enzymu zkouškou ELISA při použití protilátky proti uvedenému enzymu je možno prokázat stav diferenciace vypěstovaných keratinocytů, jak bude uvedeno v následujících příkladech.
V případě příkladu 1 bylo použito následujícího postupu:
Keratinocyty, vypěstované svrchu uvedeným způsobem, byly naneseny na plotnu s 96 vyhloubeními v množství 3000 buněk na vyhloubení ve 200 mikrolitrech živného prostředí. Po inkubaci 4 dny bylo prostředí vyměněno za prostředí, obsahující zkoumané látky, každá látka byla užita v dané koncentraci vždy v šesti opakováních. Pak byly buňky pěstovány dalších 72 hodin a pak po odsátí živného prostředí byly plotny uloženy při teplotě -70 °C. Pro použití byly plotny vyjmuty z mrazicího zařízení a buněčný materiál byl promytPBS. Bylo přidáno 100 mikrolitrů sterilní vody a buněčný materiál se rozruší zmrazením na -70 °C s následným rozmražením. Buňky se inkubují 1 hodinu při teplotě místnosti v PBS se 3 % BSA, jde o promývací pufr se sérovým albuminem skotu, pak se buněčný materiál promyje čerstvým podílem promývacího pufru. Buňky se inkubují spolu s 50 mikrolitry primární myší monoklonální protilátky proti lidské transglutamináse, IgG (Biomedical Industries) v ředění 1 : 2000 v promývacím pufru 1 hodinu při teplotě 37 °C a pak se promyjí dvakrát po sobě promývacím pufrem. Pak se buněčný materiál inkubuje 150 mikrolitry sekundární protilátky (fragment Fab, protilátka IgG proti myším tkáním, konjugované s peroxidázou, Amersham) v ředění 1 :4000 v promývacím pufru 1 hodinu při teplotě 37 °C, načež se dvakrát promyje promývacím pufrem. Buňky se inkubují s roztokem substrátu, jde o roztok 4 mg o-fenylendiaminu a 3,3 mikrolitrů 30% peroxidu vodíku v 10 ml a 0,1 M citrátového pufru o pH 5,0 celkem 5 minut při teplotě místnosti ve tmě pod hliníkovou fólií. Reakce se zastaví přidáním 50 mikrolitrů 4 N kyseliny sírové. Absorbance vzorků se odečítá příslušným přístrojem při 492 nm. Ze Šesti vzorků byly ke čtyřem vzorkům přidány obě protilátky, ke dvěma byla přidána pouze sekundární protilátka ke stanovení vazby protilátky, konjugované s enzymem. Koncentrace transglutaminázy byly stanoveny odečtením takto zjištěného pozadí z koncentrace, zjištěné v jednotlivých vzorcích a stanovením směrodatné odchylky pro vzorky, k nimž byly přidány obě protilátky.
V ostatních příkladech byl užit následující postup:
Keratinocyty, vypěstované svrchu uvedeným způsobem byly naneseny na plotnu s 96 vyhloubeními v množství 3 000 buněk na vyhloubení ve 200 ml živného prostředí. Po inkubaci 4 dny bylo prostředí nahrazeno prostředím s obsahem zkoumaných látek, zkoušky byly prováděny v šesti opakováních. Pak byl buněčný materiál pěstován ještě 72 hodin, načež byly po odsátí živného prostředí plotny uloženy při -70 °C. Po vyjmutí z mrazicího zařízení byl buněčný materiál znovu zmrazen a rozmražen a pak třikrát promyt PBS. Pak byly buňky inkubovány 1 hodinu při teplotě místnosti v pufru TBS s 5 % BSA. Pak byly buňky inkubovány se 100 mikrolitry primární protilátky, monoklonální myšíprotilátky IgG proti lidské transglutamináse (Biomedical Technologies Inc.) v ředění 1 : 2000 v pufru TBS s 1 % BSA 2 hodiny při teplotě 37 °C, načež byly 6x promyty promývacím pufrem TBS s 1 % BSA a s 0,05 % Tween-20. Pak byl buněčný materiál inkubován se 100 mikrolitry fragmentu Fab sekundární protilátky, protilátky IgG proti myším tkáním, konjugované s peroxidázou (Amersham) v ředění 1 : 4000 v promývacím pufru celkem 2 hodiny při teplotě 37 °C, načež byl materiál 3x promyt promývacím pufrem a pak ještě 3x PBS. Buňky pak byly inkubovány s roztokem substrátu, 4 mg o-fenylendiaminu a 3,3 mikrolitrů 30% peroxidu vodíku v 10 ml 0,1 M citrátového pufru o pH 5,0 celkem 5 minut při teplotě místnosti a ve tmě pod hliníkovou fólií. Reakce byla zastavena přidáním 50 mikrolitrů 4 N kyseliny sírové. Absorbance vzorků byla odečítána příslušným přístrojem při 492 nm. Ze šesti opakování byly ke čtyřem vzorkům přidány obě protilátky a ke dvěma z nich pouze sekundární protilátka ke stanovení pozadí vazby enzymu konjugovanou protilátkou. Koncentrace transglutaminázy I byly stanoveny odečtením tohoto pozadí od výsledku pro každý ze vzorků za současného stanovení směrodatné odchylky.
-11 CZ 295983 B6
Stanovení DNA
Množství transglutaminázy I, zjištěná po zpracování buněk může být ovlivněna počtem buněk, to znamená, že čím větší bude počet buněk, tím vyšší bude koncentrace enzymu. Koncentrace enzymu byla tedy normalizována na obsah DNA v buňkách téhož vyhloubení, čímž byly vyloučeny variace, způsobené rozdílem v počtu buněk. Kvantitativní stanovení DNA je zvláště vhodným ukazatelem počtu buněk včetně keratinocytů vzhledem k tomu, že každá z buněk má stejný genom a tím i stejné množství DNA. Celkové množství DNA ve vyhloubení je tedy přímo úměrná počtu buněk v tomto vyhloubení. Pak je možno stáhnout údaje o koncentraci enzymu na zjištěné množství DNA.
Keratinocyty byly naneseny na plotny s 96 vyhloubeními v množství 3000 buněk na vyhloubení ve 200 mikrolitrech živného prostředí. Po inkubaci 4 dny bylo prostředí nahrazeno prostředím s obsahem zkoumaných látek, každá zkouška byla provedena v šesti opakováních. Pak byly buňky pěstovány ještě 72 hodin, načež bylo živné prostředí odstraněno odsátím a plotny byly uloženy nejméně na 1,5 hodiny při teplotě -70 °C. Pak byly plotny vyjmuty z mrazicího zařízení a na 30 minut rozmraženy, do každého vyhloubení bylo přidáno 100 mikrolitrů barviva Hoechst (konečná koncentrace 1 mikrogram/ml) a plotny byly inkubovány 15 minut, překryty a výsledek byl odečítán fluorimetrem (excitace 360 nm, emise 460 nm). Pak byl roztok barviva odstraněn a vyhloubení byla promyta PBS a tak připravena na stanovení transglutaminázy.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Kyselina retinová je účinnější než retinol při změně stadia diferenciace keratinocytů
Byl sledován účinek transglutaminázy, normalizované na obsah DNA v buňkách po přidání kyseliny retinové RA a retinolu ROH, výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 1 :
Tabulka 1
průměr TGáza/DNA x 10 4 + s.d. (% kontroly) | hodnota p proti kontrole | PPro 2.5x 10’MROH | ppro 2.5x 10 8 M ROH | ppro 2.5x 10'9MROH | |
kontrola | 2.44 + 0.24(100%) | - | 0.001 | 0.001 | 0.001 |
2.5x10’’ M RA | 0.16 ±0.11 (7%) | 0.001 | 0.001 | 0.001 | 0.001 |
2.5xl07 M ROH | 1.14 ±0.22 (47%) | 0.001 | - | 0.001 | 0.001 |
2.5xl0‘8 MRA | 1.34 ±0.40 (55%) | 0.001 | 0.2 | 0.001 | 0.001 |
2.5χ108 M ROH | 1.89 ±0.30 (77 %) | 0.001 | 0.001 | - | 0.001 |
2.5x10·’ MRA | 1.87 ± 0.49 (77 %) | 0.001 | 0.001 | 0.784 | 0.001 |
2.5x10’’ M ROH | 2.70 ±0.59 (>100%) | 0.001 | 0.001 | 0.001 | — |
n = 3
Všechny zkoušené koncentrace kyseliny retinové, to znamená 2,5 x 10“7M, 2,5 x 10“8M a 2,5 x 10~9 M snižovaly diferenciaci keratinocytů ve významně vyšším rozsahu než retinol ve stejných koncentracích. Snížení množství transglutaminázy bylo závislé na dávce jak v případě
-12CZ 295983 B6 kyseliny retinové, tak v případě retinolu. To je v souladu se skutečností, že kyselina retinová má na diferenciaci epithelu větší účinnost než retinol.
Příklad 2
Esterifikace retinolu v mikrozomech in vitro
Mikrozomy byly získány podle publikace J. C. Saari a D. L. Bredberg, CoA and Non-CoA Dependent Retinol Esterifikation in Retinal Pigment Epithelium, J. Biol. Chem., 23, 8084 až 8090, 1988:
Roztok, obsahující 0,1 M pufru s fosfátem sodným o pH 7, 5 mM dithiothreitolu, 2 mg/ml sérového albuminu, skotu, 40 μΜ roztok palmitoyl CoA, 40 μΜ roztok dilauroylfosfatidylcholinu, 10 μΜ roztok retinolu a zkoumanou látku nebo pouze rozpouštědlo V případě slepé zkoušky se inkubuje 1 hodinu při teplotě 37 °C s mikrozomální frakci, izolovanou z pigmentových epitheliálních buněk sítnice skotu. Po inkubaci se reakce zastaví přidáním stejného objemu ethanolu a vytvořené retinylestery (retinyllaurát z reakce, katalyzované LRAT a retinylpalmitát z reakce, katalyzované ARAT) se extrahují hexanem. Hexanová vrstva se oddělí, odpaří pod dusíkem a odparek se analyzuje pomocí HPLC na sloupci v reverzní fázi Ci8 s rozměrem 3,9 x 300 mm při použití 80% methanolu v tetrahydrofuranu jako mobilní fáze a při detekci fluorescenci (excitace 325 nm, emise 480 nm) ke kvantitativnímu stanovení retinylesteru. Množství esteru, vytvořeného v přítomnosti rozpouštědla jako slepé zkoušky se pokládá za 100 %, ze získaných hodnot se vypočítá inhibice tvorby esterů v procentech pro každou ze zkoumaných látek. Při kontrolním pokusu se stejné množství mikrozomů inaktivuje varem po dobu 5 minut, čímž dojde nejméně 95% inhibici tvorby esteru.
Získané výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 2:
Tabulka 2 sloučenina_________________________koncentrace μΜ % inhib. ARAT % inhib. LRAT
oleylhydroxyethylimidazolin | 100 | 90 | 95 |
oleylhydroxyethylimidazolin | 10 | 14 | 28 |
kapryloylhydroxyethylimidazolin | 100 | - | 8 |
diazolidinyl močovina | 100 | 0 | 0 |
thiamin | 100 | 0 | 0 |
kofein | 100 | 0 | 0 |
adenin | 100 | 0 | 0 |
kyselina fenylbenzimidazolsulfonová | 100 | 0 | 0 |
uráčil | 100 | 0 | 0 |
tryptofan | 100 | 0 | 0 |
kokoglutamát | 100 | 0 | 0 |
dimethylkokoaminoxid | 100 | 0 | 0 |
sodná sůl kokoaminu diacetátu | 100 | 0 | 0 |
oleylamidopropylbetain | 100 | 0 | 0 |
oleylaminoxid | 100 | 0 | 0 |
lauroylsarkosin | 100 | 20 | 0 |
Je zřejmé, že smáčedla na bázi hydroxyethylimidazolinu jsou účinnými inhibitory esterifikace, jiná smáčedla a jiné heterocyklické sloučeniny jsou v podstatě neúčinné. Hydroxyethylimidazolinový derivát kyseliny kaprylové vzorce I (R = CH3(CH2)6) neinhibuje dostatečně LRAT.
-13CZ 295983 B6
Příklad 3
Byl opakován postup podle příkladu 2 při použití různých hydroxyethylimidazolidinových smáčedel se skupinami R, uvedenými v tabulce 3. Získané výsledky jsou shrnuty v tabulce 3.
Tabulka 3
R | konc. μΜ | % INHIB. ARAT | % INHIB. LRAT |
Oleyl | 100 | 90 | 90 |
Oleyl | 10 | 15 | 12 |
Lauryl | 100 | 53 | 47 |
Lauryl | 10 | 0 | 0 |
Coco | 100 | 68 | 65 |
Coco | 10 | 0 | 0 |
Výsledky v tabulce 3 ukazují relativní účinnost zbytku kyseliny olejové, laurové a zbytků kyselin z kokosového oleje. Zbytky kyselin z kokosového oleje jsou velmi výhodné pravděpodobně z toho důvodu, že neobsahují pouze zbytky o 12 atomech uhlíku, nýbrž také některé delší zbytky.
Údaje v tabulce 2, týkající se hydroxyethylimidazolinového derivátu kyseliny kapiylové ukazují pouze 8% inhibici při koncentraci 100 μΜ. Je tedy zřejmé, že výhodnost klesá od nejvhodnějšího zbytku kyseliny olejové přes zbytky kyselin z kokosového oleje a zbytek kyseliny laurové až ke zbytku kyseliny kaprylové.
Příklad 4
Zkouška na transglutaminázu byla provedena při použití oleylhydroxyethylimidazolinuOHI, kyseliny retinové RA, retinolu ROH a retinylpalmitátu RP. Získané výsledky jsou shrnuty v tabulce 4.
Tabulka 4
příkl. | sloučenina | konc. μΜ | % kontroly |
1 | RA | 0.25 | 35.1 |
1 | ROH | 0.25 | 76.2 |
1 | OHI | 1 | 80.7 |
1 | ROH+OHI | 0.25+1 | 45.1 |
2 | RA | 0.25 | 43.4 |
2 | ROH | 0.025 | 91.6 |
2 | OHI | 1 | 78.2 |
2 | ROH+OHI | 0.025+1 | 57.9 |
3 | RA | 0.25 | 45.9 |
3 | RP | 0.25 | 91.6 |
3 | OHI | 1 | 91.1 |
3 | RP+OHI | 0.25+1 | 71.6 |
-14CZ 295983 B6
Z výsledků, uvedených v tabulce 4 je zřejmé, že kyselina retinová podstatně snižuje diferenciaci keratinocytů, zatímco retinol, oleylhydroxyethylimidazolina retinylpalmitát neovlivní diferenciaci keratinocytů nebojí ovlivní jen do menšího rozsahu než kyselina retinová.
V pokusech I a 2, v nichž byl retinol kombinován s oleylhydroxyethylimidazolinem, došlo k synergnímu účinku na pokles diferenciace keratinocytů na hodnoty, odpovídající hodnotám při použití kyseliny retinové.
V pokusu 3 byl oleylhydroxyethylimidazolin kombinován s retinylpalmitátem, výsledek nebyl io tak průkazný jako v pokusech 1 a 2, přesto však je možno pozorovat synergní účinek na pokles diferenciace.
Tento příklad také prokazuje, že sloučeniny, které splňují podmínky zkoušky na mikrozomech in vitro, mají účinek na keratinocyty v kombinaci s retinolem, přičemž tento účinek je srovnatelný 15 s účinkem kyseliny retinové.
Příklad 5
Zkouška in vitro na mikrozomech byla provedena se sloučeninami, uvedenými v následujících tabulkách 5A a 5B.
Sloučeniny z tabulky 5A byly podrobeny zkouškám v koncentraci 100 μΜ. Sloučeniny z tabulky RB byly zkoušeny v koncentraci 100 μΜ.
Tabulka 5 A
sloučenina | % inhib. ARAT | % inhib. LRAT |
alfadamaskon | 83 | 98 |
betadamASKON | 84 | 92 |
deltadamaskon | 87 | 95 |
isodamaskon | 80 | 92 |
damascenon | 70 | 79 |
alfaionon | 45 | 49 |
betaionon | 22 | 24 |
allylalfa-ionon | 22 | 36 |
isobutylionon | 8 | 45 |
alfa-methylionon | 67 | 77 |
gamma-methyl ionon | 21 | 38 |
brahmanol | 70 | 75 |
sandanol | 15 | 43 |
alfa-terpineol | 26 | 25 |
timberol | 34 | 33 |
lyral | 76 | 71 |
tonalid | 50 | 33 |
ethylsafranát | 51 | 49 |
traseolid | 41 | 21 |
sandalon | 23 | 12 |
-15CZ 295983 B6
Tabulka 5B
alfa-damaskon | 67 | 87 |
beta-damaskon | 45 | 52 |
delta-damaskon | 58 | 64 |
damascenon | 23 | 29 |
allylalfa-ionon | 16 | 17 |
Z výsledků, uvedených v tabulkách 5A a 5B je zřejmé, že některé cyklické alifatické nenasycené sloučeniny jsou účinnými inhibitory esterifikace retinolu, katalyzované působením LRAT a ARAT.
Srovnávací příklad 6
Zkouška in vitro na mikrozomech byla provedena s dalšími cyklickými alifatickými nenasycenými sloučeninami. Výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 6, v níž byla každá látka podrobena zkouškám při koncentraci 100 μΜ.
Tabulka 6 % inhib. LRAT sloučenina % inhib. ARAT
dihydro-alfa-ionon | 13 | 18 |
alfa-ionol | 0 | 0 |
beta-ionol | 0 | 0 |
cinnamaldehyd | 0 | 0 |
vanilin | 0 | 0 |
eukalyptol | 0 | 0 |
mentol | 0 | 0 |
thymol | 0 | 0 |
carvon | 0 | 0 |
kamphor | 0 | 0 |
menton | 0 | 0 |
fenchylalkohol | 12 | 4 |
isocyklogeraniol | 18 | 16 |
dimethylionon | 0 | 9 |
delta-methylionon | 0 | 10 |
Z výsledků je zřejmé, že jen některé cyklické alifatické nenasycené sloučeniny vyvolávají dostatečnou inhibici esterifikace retinolu, katalyzované LRAT a ARAT.
Příklad 7
Byl zkoumán vliv sloučenin z tabulky 7 a jejich kombinací na diferenciaci keratinocytů. Výsledky byly vyjádřeny v procentech kontroly. Koncentrace transglutaminázy byla normalizována na množství DNA. Údaje jsou ze dvou pokusů, v nichž byla pozměněna koncentrace retinolu. Získané výsledky jsou shrnuty v následující tabulce 7.
-16CZ 295983 B6
Tabulka 7
pokus | sloučenina | koncentrace mM | % kontroly |
1 | kyselina retinová | 0,00025 | 24 |
1 | retinol | 0,001 | 67 |
1 | alfa-damaskon | 1 | 92 |
1 | retinol + alfa-damaskon | 0,001+1 | 34 |
2 | kyselina retinová | 0,00025 | 8 |
2 | retinol | 0,00025 | 63,5 |
2 | alfa-damaskon | 1 | 86 |
2 | retinol + alfa-damaskon | 0,00025+1 | 30 |
Výsledky v tabulce 7 prokazují, že samotný alfa-damaskon a samotný retinol nejsou příliš účinné, avšak kombinace těchto dvou látek dává vznik synergii a zvýšenému snížení množství transglutaminázy, která napodobuje účinek kyseliny retinové na diferenciaci keratinocytů. Výsledky jsou také dokladem dobré korelace mezi zkouškou in vitro na mikrozomech a mezi výsledky, získanými na buněčné kultuře.
Příklad 8
Test in vitro na mikrozomech byl proveden s diterpenovými sloučeninami, geranylgeraniolem nebo famesolem. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 8.
Tabulka 8
sloučenina | koncentrace μΜ | % inhibice ARAT | % inhibice LRAT |
geranylgeraniol1 | 100 | 81 | 77 |
geranylgeraniol | 10 | 38 | 16 |
famesol2 | 100 | 43 | 43 |
famesol | 10 | 20 | 10 |
TCI America (Portland, Oregon) nebo také Sigma a CTC Organics (Atlanta, Georgia).
Givaudan Co., Bedoukian Co., nebo Dragaco Co.
Z výsledků, uvedených v tabulce 8 je zřejmé, že geranylgeraniol i famesol způsobují inhibici esterifikace retinolu. Geranylgeraniol je podstatně účinnější inhibitor esterifíkace než famesol s následující strukturou:
- 17CZ 295983 B6
Příklad 9
Příjem 3H-thymidinu byl měřen způsobem, který byl popsán svrchu při popisu použitých metod. Získané výsledky jsou shrnuty v tabulkách 9A a 9B.
Tabulka 9A
Pokus 1
DPM/mikrogram průměr | bílkoviny s.d. | % kontroly | |
kontrola | (278) | 100 | |
250 nM retinolu | 2082 | (146) | 108 |
250 nM kyseliny retinové | 3013 | (226) | 156 |
250 nM retinolu +10 nM geranylgeraniolu | 2970 | (308) | 154 |
Tabulka 9B
Pokus 2
DPM/mikrogram průměr | bílkoviny s.d. | % kontroly | |
kontrola | (322) | 100 | |
250 nM retinolu | 974 | (148) | 107 |
250 nM kyseliny retinové | 1494 | (45) | 163 |
250 nM retinolu + 10 nM geranylgeraniolu | 1450 | (318) | 159 |
Z výsledků je zřejmé, že geranylgeraniol významně zvyšuje účinek retinolu na proliferaci buněk až do úrovně, srovnatelné s působením kyseliny retinové. Výsledky jsou rovněž důkazem dobré korelace mezi výsledky zkoušky na mikrozomech a výsledky, získanými v buněčné kultuře.
Příklad 10
Zkouška na mikrozomech in vitro byla provedena při použití sloučenin, uvedených v tabulce 10. Získané výsledky jsou shrnuty rovněž v tabulce 10. Sloučeniny byly použity v koncentraci 100 μΜ.
Tabulka 10 % inhibice LRAT sloučenina % inhibice ARAT
kontrola | 0 | 0 |
naringenin | 33 | 14 |
quercetin | 25 | 14 |
-18CZ 295983 B6
Příklad 11
Synergní inhibice diferenciace karatinocytů kombinací naringeninu a retinolu
Po působení zkoumaných látek po dobu 72 hodin byly zjištěny koncentrace transglutaminázy I, normalizované na obsah DNA v buňkách. Výsledky jsou uvedeny v tabulce 11. Naringenin byl získán od firmy Sigma.
Tabulka 11
Vliv retinolu a naringeninu na transglutaminázu keratinocytů/DNA
průměr TGáza/DNA xlO5 ± s.d. (% kontroly) | p proti kontrole | p pro 2.5 x 10'9MROH | p pro 2.5 x 10“7MRA | ppro 10“7M naringenin | |
52.78 ±5.69 (100%) | - | 0.235 | 0.001 | 0.329 | |
2.5x10''MRA | 22.47 ±2.31 (42%) | 0.001 | 0.001 | - | 0.001 |
2.5xl0'9 M Retinol | 48.31 ±5.31 (92%) | 0.235 | 0.001 | 0.585 | |
10-/ M Naringenin | 49.84 ± 2.76 (94 %) | 0.329 | 0.585 | 0.001 | - |
2.5xl0~9 M ROH + 10“7 M Naringenin | 27.61 ± 10.79 (53 %) | 0.002 | 0.005 | 0.328 | 0.002 |
n = 3
Z výsledků, uvedených v tabulce 11 je zřejmé, že 2,5 x 10 7M kyseliny retinové mělo značný účinek na potlačení transglutaminázy I v keratinocytech, a to až na 42 % hodnoty pro kontroly. Množství 2,5 x 10-9 retinolu bylo zcela neúčinné (91 %) a 10'7M naringeninu rovněž nemělo žádný vliv na koncentraci enzymu. Avšak při použití směsi 2,5 x 10“9 M retinolu a 10“7 M naringeninu došlo ke nížení koncentrace transglutaminázy I až na 53 % koncentrace u kontrol. Naringenin a retinol tedy měly synergní účinek při potlačování diferenciace geratinocytů, přičemž tento účinek byl srovnatelný s účinkem kyseliny retinové.
Příklad 12
Synergní účinek naringeninu a retinylpalmitátu na inhibici diferenciace keratinocytů
Účinek uvedených látek na koncentraci transglutaminázy I, normalizovanou na obsah DNA v buňkách byl sledován po působení zkoumaných látek po dobu 72 hodin. Výsledky jsou shrnuty v tabulce 12.
-19CZ 295983 B6
Tabulka 12
Účinek retinylpalmitátu a naringeninu na transglutaminázu keratinocytů/DNA
průměr TGázy/DNA x 105 ± s.d. % kontroly | p proti kontrole | p pro 2.5.x 106MRP | p pro 2.5 x 10'7MRA | ppro 10“8 M naringenin | |
Control | 50.64 ± 1.74 (100 %) | - | 0.143 | 0.001 | 0.001 |
2.5x10“™ kA | 16.31 +2.58 (32 %) | 0.001 | 0.001 | - | 0.001 |
2.5xl0'8 M Retinyl Palmitate (RP) | 47.32 ± 4.22 (93 %) | 0.143 | — | 0.001 | 0.296 |
10'8 M Naringenin | 45.01 ± 1.90 (89%) | 0.001 | 0.296 | 0.001 | - |
2.5x10'“ M RP + 10'8 M Naringenin | 43.12 ± 13.01 (85 %) | 0.005 | 0.036 | 0.001 | 0.065 |
n = 3
Z výsledků v tabulce 12 je zřejmé, že 2,5 x 10'7 M kyseliny retinové účinně potlačuje koncentraci ío transglutaminázy I v keratinocytech, a to až na 32 % hodnot u kontrol. Koncentrace 2,5 x 10'9 M retinylpalmitátu je neúčinná (93 %) a 10~8 M naringeninu má jen malý inhibiční účinek na transglutaminázu I. Avšak kombinace 2,5 x 10'8 M retinolu a 10~9 M naringeninu snižuje koncentraci transglutaminázy I v keratinocytech na 85 % kontrolních hodnot. Jde tedy o synergní účinek, kombinace obou látek potlačuje diferenciaci keratinocytů obdobným způsobem jako kyseli15 na retinová.
Příklad 13
Quercetin a retinol mají synergní inhibiční účinek na diferenciaci keratinocytů
Byl zkoumán účinek použitých látek po jejich působení 72 hodin na koncentraci transglutaminázy I, normalizovanou na obsah DNA v buňkách. Výsledky jsou shrnuty v tabulce 13. Quercetin byl získán od firmy Sigma.
Tabulka 13
průměr TGázy/DNA x 105 ± s.d. % kontroly | p proti kontrole | p pro 2.5 x 10'7 M ROH | p pro 2.5 x 10'7 M RA | ppro 1 (Γ6 M quercetin | |
69.16 ± 4.26 (100 %) | - | 0.042 | 0.001 | 0.003 | |
2.5x10'7 MRA | 35.91 ±3.01 (52%) | 0.001 | 0.001 | - | 0.001 |
2.5x10/ M Retinol | 61.93 ±5.18 (90%) | 0.042 | - | 0.001 | 0.328 |
10”6 M Quercetin | 59.04 ± 3.38 (85 %) | 0.003 | 0.328 | 0.001 | - |
2.5xl0'7 M ROH + 10'6 M Quercetin | 48.45 ± 8.60 (70 %) | 0.001 | 0.017 | 0.015 | 0.034 |
n = 3
Z výsledků, uvedených v tabulce 13 je zřejmé, že koncentrace 2,5 x 1(T7M kyseliny retinové účinně snižuje množství transglutaminázy I v keratinocytech, a to až na 52 % kontrolní hodnoty.
Koncentrace 2,5 x 10“7M retinolu je neúčinná (90%) a 10 6M quercetinu mělo jen malý inhibiční účinek na množství uvedeného enzymu. Avšak kombinace 2,5xlO7M retinolu + 10“6 M quercetinu snížila koncentraci transglutaminázy v keratinocytech až na 70 % kontrolní
-20CZ 295983 B6 hodnoty. Obě látky tedy měly synergní účinek a potlačovaly diferenciaci keratinocytů způsobem, srovnatelným s účinkem kyseliny retinové.
V průběhu uvedených zkoušek byla kyselina retinová použita jako pozitivní kontrola a referenční sloučenina, s níž byl srovnáván účinek dalších zkoumaných látek. Kyselina retinová snižuje koncentraci transglutaminázy I v keratinocytech pokožky v závislosti na použité dávce. Jinak řečeno, kyselina retinová snižuje diferenciaci keratinocytů. Retinol a retinylpalmitát jsou při inhibici diferenciace keratinocytů statisticky významně méně účinné než kyselina retinová.
Neočekávané výsledky, ilustrované jednotlivými příklady prokazují, že účinek retinolu nebo retinylesteru na keratinocyty, pěstované v buněčné kultuře je možno zvýšit až na účinek, srovnatelný s účinkem kyseliny retinové tak, že se retinol nebo jeho ester kombinuje se sloučeninou, která v koncentraci 100 μΜ vyvolává alespoň 20% inhibici esterifíkace retinolu, katalyzované LRAT nebo ARAT při měření zkouškou na mikrozomech in vitro. Tato látka se užije v množství 0,0001 až 50 % hmotnostních, vztaženo na celkové množství použitého prostředku. Získaný účinek je vyšší než účinek retinolu nebo jeho esteru nebo použité látky jako takové, jde o synergní účinek obou látek, vyvolávající u keratinocytů odpověď, srovnatelnou súčinkem kyseliny retinové.
Svrchu uvedené výsledky prokazují, že sloučeniny, které splňují podmínky zkoušky in vitro na mikrozomech, působí synergním způsobem s retinolem a retinylestery a snižují diferenciaci keratinocytů a/nebo zvyšují jejích proliferaci, takže jejich účinek na keratinocyty je obdobný účinku kyseliny retinové.
V následujících příkladech 14 až 19 jsou uvedeny různé kosmetické prostředky podle vynálezu, určené pro místní podání. Prostředky je možno připravit obvyklým způsobem a použítje k běžnému účelu, zejména jsou tyto prostředky vhodné pro ošetření vrásek, drsné a suché pokožky, otupující se, stárnoucí a/nebo ultrafialovým zářením poškozené pokožky, kde mohou zlepšit celkový vzhled i pocit na pokožce. Prostředky jsou také určeny k použití na zdravou pokožku k prevenci nebo zpomalení jejího stárnutí.
Příklad 14
Tento příklad uvádí kosmetický prostředek podle vynálezu typu emulze voda v oleji s vysokým obsahem vnitřní fáze.
% hmotnostní
A | B | C | D | |
retinol | 0,5 | — | _ | 0,01 |
retinylpalmitát | - | 0,15 | 0,15 | - |
plně hydrogenovaný kokosový olej | 3,9 | 3,9 | 3,9 | 3,9 |
naringenin | - | 5 | 0,1 | 5 |
quercetin | 1 | 1 | - | - |
brij 92x | 5 | 5 | 5 | 5 |
bentone 38 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
MgSO4.7H2O | 0,3 | 0,3 | 0,3 | 0,3 |
butylovaný hydroxytoluen | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,01 |
parfém | podle potřeby | |||
voda do | 100 | 100 | 100 | 100 |
Brij 92 je polyoxyethylen (2) oleylether
-21 CZ 295983 B6
Příklad 15
Krém typu olej ve vodě
A | % hmotnostní | |||
B | C | D | ||
retinylpalmitát | _ | 0,15 | 0,15 | |
retinol | 0,15 | — | 0,001 | 0,15 |
minerální olej | 4 | 4 | 4 | 4 |
alfa-ionon | 1 | — | _ | 1 |
alfa-methylionon | — | 0,5 | _ | |
lyral | — | — | — | 0,2 |
isodamaskon | — | _ | 0,3 | _ |
brij 56x | 4 | 4 | 4 | 4 |
alfol 16RD* | 4 | 4 | 4 | 4 |
triethanolamin | 0,75 | 0,75 | 0,75 | 0,75 |
butan-l,3-diol | 3 | 3 | 3 | 3 |
xanthanová guma | 0,3 | 0,3 | 0,3 | 0,3 |
parfém | podle potřeby | |||
butylovaný hydroxytoluen | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,01 |
voda do | 100 | 100 | 100 | 100 |
□ x Brij 56 je cetylalkohol POE (10) | ||||
x Alfol 16RD je cetylalkohol |
Příklad 16
Lotion % hmotnostní
A | B | C | D | |
retinol | _ | 0,15 | 0,15 | |
retinylpalmitát | 0,15 | — | — | 0,15 |
alfa-damaskon | 0,1 | 0,1 | _ | |
geranylgeraniol | 1 | 0,2 | ||
ethanol | 40 | 40 | 40 | 40 |
parfém | podle potřeby | |||
butylovaný hydroxytoluen | 0,01 | 0,01 | 0,01 | 0,01 |
voda do | 100 | 100 | 100 | 100 |
Příklad 17
Tento příklad popisuje kosmetický prostředek podle vynálezu ve formě alkoholického lotionu.
% hmotnostní | |
retinol oleylhydroxyethylimidazolin ethanol antioxidační látka parfém voda do | 0,15 0,1 40 0,1 podle potřeby 100 |
-22CZ 295983 B6
Příklad 18
Tento příklad popisuje kosmetický prostředek podle vynálezu jako opalovací krém.
% hmotnostní
retinylpalmitát | 0,01 |
kokoylhydroxyethylimidazolin | 0,1 |
silikonový olej 200 cts | 7,5 |
glycerylmonostearát | 3 |
cetostearylalkohol | 1,6 |
poloxyethylen-(20)-cetylalkohol | 1,4 |
xanthanová guma | 0,5 |
parsol 1789 | 1,5 |
oktylmethoxycinnamát (Parsol MCX) | 7 |
parfém | podle potřeby |
barvivo | podle potřeby |
voda do | 100 |
Příklad 19 | |
Pleťový krém nevodné povahy | |
% hmotnostní | |
retinylpalmitát | 0,15 |
laurylhydroxyethylindazolin | 1 |
silikonová pryž SE-301 | 10 |
kapalný silikon 3452 | 20 |
kapalný silikon 3443 | 55,79 |
squalen | 10 |
kyselina linolová | 0,01 |
cholesterol | 0,03 |
kyselina 2-hydroxy-n-oktanová | 0,7 |
linoleát vitaminu E | 0,5 |
květinový olej | 0,5 |
ethanol | 2 |
dimethylsilikonový polymer s molekulovou hmotností nejméně 50 000 a viskositou nejméně 10 000 cts při teplotě 25 °C, (GEC), 2 cyklický pentamer dimethylsiloxanu (Dow Coming Corp.) 3 tetramer dimethylsiloxanu (Dow Coming Corp.).
V případě, že to v příkladech není uvedeno, jsou dále uvedené materiály dodávány uvedenými výrobci:
Palmitoyl CoA, BSA, dilauroylfosfatidylcholin, retinol, kyselina retinová, dithiothreitol- Sigma.
Cyklické nenasycené alifatické sloučeniny:
Damaskony - Firmenich
-23CZ 295983 B6
Ionony IFF, ostatní: uvedeno ve Flavor and Fragrance Materials, 1991, Allured Pub. Co.
Smáčedla imidazolinové povahy: Oleylimidazolin byl Scherozoline 0, ostatní od Mclntyre, pod názvem Mackezolin CY (kyselina kaprylová), C (kokosový olej), L (kyselina laurová).
Claims (6)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Kosmetický prostředek pro péči o pleť, vyznačující se tím, že obsahujea) 0,001 až 10 % sloučeniny ze skupiny retinol, retinylester a směsi těchto látek,b) 0,0001 až 50% sloučeniny, která v koncentraci 100 μΜ vyvolá inhibici nejméně 20% esterifikace retinolu, katalyzované LRAT nebo ARAT při měření na mikrozomech in vitro, přičemž tato sloučenina je odlišná od amidu mastné kyseliny nebo dimethylimidazolidinonu a volí se ze skupiny derivátů cyklických nenasycených uhlovodíků, diterpenů a smáčedel, hydroxyethylimidazolinových derivátů mastných kyselin vzorcelR kdeR znamená alifatický nasycený nebo nenasycený uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující 8 až 20 atomů uhlíku, nebo směs těchto látek, ac) nosič, přijatelný z kosmetického hlediska.
- 2. Kosmetický prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že jako cyklickou alifatickou nenasycenou sloučeninu obsahuje sloučeninu ze skupiny alfa-damaskon, beta-damaskon, delta-damaskon, isodamaskon, damascenon, alfa-ionon, beta-ionon, allyl-alfa-ionon, isobutylionon, alfa-methylionon, gamma-methylionon, brahmanol, sandanol, alfa-terpineol, lyral, ethylsaffranát a směsi těchto látek.
- 3. Kosmetický prostředek podle nároku 1,vyznačující se tím, že jako diterpen obsahuje geranylgeraniol.
- 4. Kosmetický prostředek podle některého z nároků 1 až 3, vy z n a č uj í c í se tím, že jako retinylester obsahuje sloučeninu ze skupiny retinylpalmitát, retinylacetát, retinylpropionát, retinyllinoleát nebo směsi těchto látek.
- 5. Způsob ošetřování pleti, vyznačující se t í m , že se místně nanáší kosmetický prostředek podle některého z nároků 1 až 4.
- 6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že se kosmetický prostředek nanáší io pro napodobení účinku kyseliny retinové.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US2682496P | 1996-09-27 | 1996-09-27 | |
PCT/EP1997/005150 WO1998013020A1 (en) | 1996-09-27 | 1997-09-18 | Skin care compositions containing combinations of compounds for mimicking the effect on skin of retinoic acid |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ108999A3 CZ108999A3 (cs) | 1999-08-11 |
CZ295983B6 true CZ295983B6 (cs) | 2005-12-14 |
Family
ID=21833981
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CZ19991089A CZ295983B6 (cs) | 1996-09-27 | 1997-09-18 | Kosmetický prostředek a způsob ošetřování pleti |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0932387B1 (cs) |
JP (1) | JP3589469B2 (cs) |
KR (1) | KR100330678B1 (cs) |
CN (1) | CN1105554C (cs) |
AR (1) | AR009096A1 (cs) |
AU (1) | AU714271B2 (cs) |
BR (1) | BR9712124A (cs) |
CA (1) | CA2265635C (cs) |
CZ (1) | CZ295983B6 (cs) |
DE (1) | DE69719528T2 (cs) |
ES (1) | ES2193357T3 (cs) |
ID (1) | ID21932A (cs) |
PL (1) | PL188574B1 (cs) |
TW (1) | TW503112B (cs) |
WO (1) | WO1998013020A1 (cs) |
ZA (1) | ZA978660B (cs) |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1053988B1 (en) * | 1998-02-02 | 2008-12-31 | Takasago International Corporation | Trimethylcyclohexane derivatives and melanin-formation inhibitors and perfume-holding agents with the use of the same |
DE19834816A1 (de) * | 1998-08-01 | 2000-02-03 | Merck Patent Gmbh | Verwendung von Ectoin oder Ectoin-Derivaten in kosmetischen Formulierungen |
GB9918022D0 (en) * | 1999-07-30 | 1999-09-29 | Unilever Plc | Skin care composition |
GB9918025D0 (en) * | 1999-07-30 | 1999-09-29 | Unilever Plc | Skin care composition |
EP1104672A1 (de) * | 1999-12-02 | 2001-06-06 | Laboratoires Serobiologiques(Societe Anonyme) | Kosmetische und/oder pharmazeutische Zubereitungen |
BR0112142A (pt) * | 2000-06-30 | 2003-10-07 | Unilever Nv | Composição para cuidado com a pele e métodos cosméticos de condicionar a pele e de reproduzir o efeito sobre a pele de ácido retinóico |
KR100432797B1 (ko) * | 2000-08-03 | 2004-05-24 | 민병무 | 레티노산 화합물을 유효성분으로 함유하는 인간 정상 피부의 복제 노화 예방용 화장품 |
US7048910B2 (en) | 2000-09-07 | 2006-05-23 | Merck Patent Gmbh | Use of ectoine or ectoine derivatives for oral care |
AU2002226373A1 (en) * | 2000-12-28 | 2002-07-16 | Unilever Plc | Skin care product containing a retinoid and a retinoid booster system in a dual compartment package |
US6949247B2 (en) | 2000-12-28 | 2005-09-27 | Unilever Home & Personal Care Usa Division Of Conopco, Inc. | Stable skin care compositions containing a retinoid and a retinoid booster system |
US20020168389A1 (en) * | 2000-12-28 | 2002-11-14 | Prem Chandar | Stable skin conditioning compositions containing retinoid boosters |
WO2002067988A2 (en) * | 2001-02-27 | 2002-09-06 | The Regents Of The University Of Michigan | Use of natural egfr inhibitors to prevent side effects due to retinoid therapy, soaps, and other stimuli that activate the epidermal growth receptor |
DE10214257A1 (de) | 2002-03-28 | 2003-10-16 | Merck Patent Gmbh | Verwendung von kompatiblen Soluten zur Inhibierung der Freisetzung von Ceramiden |
JP3926711B2 (ja) * | 2002-08-30 | 2007-06-06 | 株式会社ファンケル | 表皮の偏平化を予防、防止、改善する皮膚老化防止用組成物 |
US20080227868A1 (en) | 2004-03-26 | 2008-09-18 | Volker Schehlmann | Composition Comprising an Hdac Inhibitor in Combination with a Retinoid |
US7175836B1 (en) | 2005-12-23 | 2007-02-13 | Conopco, Inc. | Oil continuous phase cosmetic emulsions with conjugated linoleic acid |
US7175835B1 (en) | 2005-12-23 | 2007-02-13 | Conopco, Inc. | Cosmetic emulsions with inorganic sunscreens stabilized with conjugated linoleic acid |
US7172754B1 (en) | 2005-12-23 | 2007-02-06 | Conopco, Inc. | Cosmetic emulsions with sunscreens and conjugated linoleic acid |
FR2968972B1 (fr) * | 2010-12-17 | 2012-12-14 | Oreal | Utilisation du linoleate de retinyle comme agent apaisant, pour la prevention et/ou le traitement de reactions cutanees specifiques |
WO2015046315A1 (ja) * | 2013-09-30 | 2015-04-02 | 学校法人東京女子医科大学 | 細胞の培養法 |
IL262583B2 (en) * | 2016-04-28 | 2023-10-01 | Spark Therapeutics Inc | Relative potency assay for a vector encoding isomerohydrolases |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR2558058B1 (fr) * | 1984-01-18 | 1987-03-20 | Pf Medicament | Compositions dermatologiques a usage topique externe, a base de metronidazole utiles pour le traitement de l'acne |
FR2666226B1 (fr) * | 1990-08-30 | 1994-10-28 | Jean Noel Thorel | Composition protectrice de la peau. |
RO109503B1 (ro) * | 1992-02-17 | 1995-03-30 | Constantin Nistor | Cremă antisolară |
ES2289370T3 (es) * | 1992-07-13 | 2008-02-01 | Shiseido Company, Ltd. | Composicion estabilizada para tratamiento cutaneo externo que comprende retinol. |
EP0601698B1 (en) * | 1993-10-22 | 1998-07-08 | Shiseido Company Limited | Topical composition comprising tocopherol |
US5818139A (en) * | 1994-07-25 | 1998-10-06 | Daikin Industries, Ltd. | Brushless DC motor |
IT1273742B (it) * | 1994-08-01 | 1997-07-09 | Lifegroup Spa | Composizioni ad elevata bioadesivita' e mucoadesivita' utili per il trattamento di epitali e mucose |
US5536740A (en) * | 1995-06-01 | 1996-07-16 | Elizabeth Arden Company, Division Of Conopco, Inc. | Skin care compositions containing dimethyl imidazolidinone and retinol or retinyl ester |
US5665367A (en) * | 1996-09-27 | 1997-09-09 | Chesebrough-Pond's Usa Co., Division Of Conopco, Inc. | Skin care compositions containing naringenin and/or quercetin and a retinoid |
-
1997
- 1997-09-18 CA CA002265635A patent/CA2265635C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-18 WO PCT/EP1997/005150 patent/WO1998013020A1/en active IP Right Grant
- 1997-09-18 AU AU47758/97A patent/AU714271B2/en not_active Ceased
- 1997-09-18 ES ES97910315T patent/ES2193357T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-18 CZ CZ19991089A patent/CZ295983B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1997-09-18 DE DE69719528T patent/DE69719528T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-18 JP JP51524198A patent/JP3589469B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-18 ID IDW990131A patent/ID21932A/id unknown
- 1997-09-18 CN CN97180116A patent/CN1105554C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-18 PL PL97332430A patent/PL188574B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1997-09-18 BR BR9712124-0A patent/BR9712124A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-09-18 EP EP97910315A patent/EP0932387B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-09-18 KR KR1019997002662A patent/KR100330678B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-09-26 ZA ZA978660A patent/ZA978660B/xx unknown
- 1997-09-29 AR ARP970104468A patent/AR009096A1/es active IP Right Grant
- 1997-12-16 TW TW086118986A patent/TW503112B/zh not_active IP Right Cessation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
DE69719528T2 (de) | 2003-11-06 |
BR9712124A (pt) | 1999-08-31 |
ZA978660B (en) | 1999-03-26 |
TW503112B (en) | 2002-09-21 |
PL332430A1 (en) | 1999-09-13 |
EP0932387A1 (en) | 1999-08-04 |
DE69719528D1 (de) | 2003-04-10 |
AU4775897A (en) | 1998-04-17 |
ID21932A (id) | 1999-08-12 |
AR009096A1 (es) | 2000-03-08 |
KR20000048705A (ko) | 2000-07-25 |
PL188574B1 (pl) | 2005-02-28 |
KR100330678B1 (ko) | 2002-04-03 |
WO1998013020A1 (en) | 1998-04-02 |
AU714271B2 (en) | 1999-12-23 |
JP3589469B2 (ja) | 2004-11-17 |
CA2265635C (en) | 2005-07-05 |
CA2265635A1 (en) | 1998-04-02 |
CZ108999A3 (cs) | 1999-08-11 |
JP2000503031A (ja) | 2000-03-14 |
ES2193357T3 (es) | 2003-11-01 |
CN1105554C (zh) | 2003-04-16 |
EP0932387B1 (en) | 2003-03-05 |
CN1253493A (zh) | 2000-05-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CZ295983B6 (cs) | Kosmetický prostředek a způsob ošetřování pleti | |
CZ108899A3 (cs) | Kosmetický prostředek | |
JP4841778B2 (ja) | レスベラトロール及びレチノイドを含有する化粧品組成物 | |
ES2210583T3 (es) | Composiciones para el cuidado de la piel que contienen una amina y un retinoide. | |
US5536740A (en) | Skin care compositions containing dimethyl imidazolidinone and retinol or retinyl ester | |
AU730825B2 (en) | Cosmetic compositions | |
US5756109A (en) | Skin care compositions containing geranyl geraniol and retinol or retinyl esters | |
EP0722715B1 (en) | Cosmetic compositions containing lactate dehydrogenase inhibitors | |
US5759556A (en) | Skin care compositions containing certain cyclic aliphatic unsaturated compounds and retinol or retinyl ester | |
CZ108799A3 (cs) | Kosmetický prostředek | |
EP0775482B1 (en) | Cosmetic compositions containing tricholine citrate | |
JP3792651B2 (ja) | 二重区画包装においてレチノイド、レチノイドブースター、およびフィトエストロゲンを含んでいるスキンケア製品 | |
US5738858A (en) | Skin care compositions containing fatty hydroxyethyl imidazoline surfactants and retinol or retinyl ester | |
JP2004526690A (ja) | レチノイド及びレチノイドブースター系を含有する安定なスキンケア組成物 | |
RU2172167C2 (ru) | Композиция для ухода за кожей, косметические способы ухода за кожей |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20120918 |