JP2000503031A - レチノイン酸の皮膚に対する効果と類似の効果を有する化合物の組合せを含有するスキンケア組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 ＬＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触媒されるレチノールの不活性レチニルエステルへのエステル化を十分に阻害する化合物は、レチノイン酸と同一のケラチノサイトに対する効果を有する。かくして、これらの化合物と組み合わせたレチノールまたはレチニルエステルの効果はレチノイン酸での処置と同様である。

Description

【発明の詳細な説明】レチノイン酸の皮膚に対する効果と類似の効果を有する化合物の組合せを含有す るスキンケア組成物 発明の分野 本発明は、レチノール及び／又はレチニルエステルと組み合わせてある種の化 合物を含有するスキンケア組成物およびそのような組成物を皮膚に適用すること を含む化粧方法に関する。 発明の背景 レチノール（ビタミンＡ）は、ヒト身体で天然に生じ、正常な上皮細胞分化に 必須の内因性化合物である。天然および合成のビタミンＡ誘導体は種々の皮膚障 害の治療で広範囲に使用され、皮膚修復または再生剤として使用されてきた。レ チノイン酸は、種々の皮膚疾患、例えば、アクネ、皺、乾癬、老人斑および脱色 を治療するのに使用されてきた。例えば、Ｖａｈｌｑｕｉｓｔ，Ａ．ら，Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，第９４巻， Ｈｏｌｌａｎｄ Ｄ．Ｂ． およびＣｕｎｌｉｆｆｅ， Ｗ．Ｊ．（１９９０）、４９６−４９８頁；Ｅｌｌ ｉｓ， Ｃ．Ｎ．ら， 「Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｒｅｔｉｎｏｌｓ ｉｎ Ｓｋｉｎ」、Ｖａｓｅｌ， Ｋａｒｇｅｒ， 第３巻，（１９８９），２ ４９−２５２頁； Ｌｏｗｅ， Ｎ．Ｊ．ら，「Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏ ｆ Ｒｅｔｉｎｏｌｓ ｉｎＳｋｉｎ」、第３巻，（１９８９）， ２４０−２ ４８頁；ＰＣＴ出願ＷＯ９３／１９７４３参照。 レチノールまたはレチノールのエステルの使用はレチノイン酸よりも好ましい と信じられている。レチノールはヒト身体で天然に生じ、レチノイン酸よりもず っと安全であると考えられている。レチノールのエステルはｉｎ ｖｉｖｏで加 水分解されてレチノールを生じる。レチノールエステルおよびレチノールは、以 下のメカニズムに従って、代謝により皮膚中でレチノイン酸に変換されると信じ られている。 しかしながら、内因的に生じるレチノールのほとんどは、表皮細胞（ケラチノ サイト）における貯蔵のために不活性な脂肪エステルに迅速に変換される。レチ ノールから不活性なレチニルエステルへのエステル化は、酵素アシルＣｏＡレチ ノールトランスフェラーゼ（ＡＲＡＴ）によって触媒される、アシル ＣｏＡからの脂肪アシル基の転移によって、あるいは酵素レシチンレチノールア シルトランスフェラーゼ（ＬＲＡＴ）によって触媒される、ホスファチジルコリ ンからのアシル基の転移によって細胞中で行なわれる。これらのエステル化反応 はケラチノサイトでは非常に効率的であり、細胞レチノイドの大部分（９５％） はレチニル脂肪エステルの形態である。かくして、生憎にも、レチノールおよび レチニルエステルはレチノイン酸よりも安全に使用できるが、皮膚に対する有益 な効果においてレチノイン酸よりも効果的ではない。 本発明は、部分的には、ある種の化合物がこれらのエステル化反応を阻害し、 かくして、レチノイン酸への変換に利用できるレチノールの量を増加させること によってレチノールの作用を増強させるという発見に基づいている。かくして、 これらの化合物とレチノールまたはレチニルエステルとの混合物はレチノイン酸 を模倣するが、レチノイン酸よりも安全に使用できる。 発明の概要 本発明は、部分的には、 （ａ）組成物の０．００１重量％ないし１０重量％のレチノールまたはレチニ ルエステル； （ｂ）イン・ビトロミクロソーム検定によって測定して、ＬＲＡＴ またはＡＲＡＴにより触媒されるレチノールのエステル化の少なくとも２０％を １００μＭ濃度で阻害する、組成物の０．０００１重量％ないし５０重量％の化 合物（ただし、この化合物は脂肪酸アミドでもジメチルイミダゾリジノンでもな い）；および （ｃ）化粧品上許容されるビヒクル； を含有する皮膚コンディショニング用組成物を含む。 本発明で用いるのに好ましい化合物は、環状脂肪族不飽和炭化水素、ジテルペ ン、フラボノン、フラボノール、脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤 およびその混合物である。本発明においてレチノール及び／又はレチニルエステ ルと組み合わせて含まれる化合物は、皮膚に対するレチノイン酸の効果を模倣す るかかる組合せの能力に基づいて選択される。もし化合物が本明細書に記載する イン・ビトロミクロソーム検定をパスすれば、明示的に言及されていなくても、 それは本発明に含まれる。言い換えると、もし化合物か、イン・ビトロミクロソ ーム検定によって測定して、ＬＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触媒されるレチノー ルのエステル化を十分に阻害すれば、それはレチノールまたはレチニルエステル と共に作用して、レチノイン酸のケラチノサイト（皮膚細胞）に対する効果を模 倣する。 本発明は、さらに、本発明の組成物を皮膚に局所的に適用す ることを含む皮膚をコンディショニングする化粧方法を提供する。また、本発明 は、本発明の組成物を皮膚に局所的に適用することを含む、皮膚に対するレチノ イン酸の効果を模倣する化粧方法を提供する。 本明細書で用いる「コンディショニング」という用語は、乾燥した皮膚、光に より損傷を受けた皮膚、皺の外観、老人斑及び老化した皮膚のうちの１以上の予 防および治療を意味する。また、本組成物は、角質層柔軟性を増加させ、皮膚の 色を薄くし、皮脂分泌を制御し、そして一般的に皮膚の質を増大させるのにも有 用である。該組成物は皮膚の剥離および表皮分化を改善するのにも使用できる。 本発明組成物中の選択された化合物の存在は、レチノールまたはレチニルエス テルの効能を実質的に改良する。 本発明によれば、イン・ビトロミクロソーム検定によって測定して、ＡＲＡＴ またはＬＲＡＴにより触媒されるレチノールのエステル化の少なくとも２０％を １００μＭ濃度で阻害する有効量の化合物を、レチノールまたはレチニルエステ ルを含有する組成物に含ませることによって、該組成物の効能が実質的に改良さ れる。好ましい態様の説明 本発明の組成物は、第１の必須成分として、レチノールおよびレチニルエステ ルよりなる群から選択される化合物を含有する。「レチノール」なる語は、とり わけ、レチノールの以下の異性体：オール−トランス−レチノール、１３−シス −レチノール、１１−シス−レチノール、９−シス−レチノール、３，４−ジデ ヒドロ−レチノールを含む。好ましい異性体はオール−トランス−レチノール、 １３−シス−レチノール、３，４−ジデヒドロ−レチノール、９−シス−レチノ ールである。最も好ましいものは、その広い商業的入手可能性のため、オール− トランス−レチノールである。 レチニルエステルはレチノールのエステルである。「レチノール」なる語は前 記で定義した。本発明で用いるのに適したレチニルエステルはレチノールのＣ₁ −Ｃ₃₀エステル、好ましくはＣ₂−Ｃ₂₀エステル、最も好ましくはＣ₂、Ｃ₃およ びＣ₁₆エステルである。何故ならば、それらはより通常に入手できるからである 。レチニルエステルの例は、パルミチン酸レチニル、ギ酸レチニル、酢酸レチニ ル、プロピオン酸レチニル、酪酸レチニル、吉草酸レチニル、イソ吉草酸レチニ ル、ヘキサン酸レチニル、ヘプタン酸レチニル、オクタン酸レチニル、ノナン酸 レチニル、デカン酸レチニル、ウンデカン酸レチニル、ラウリン酸レチニル、ト リデカン酸レチニル、ミリスチン酸レチニル、ペンタデカン酸レチニル、ヘプタ デカン酸レチニル、ステアリン酸レチニル、イソステアリン酸レチニル、ノナデ カン酸レチニル、アラキドン酸レチニル、ベヘン酸レチニル、リノール酸レチニ ル、オレイン酸レチニルを含むが、それらに限定されるものではない。 本発明で用いる好ましいエステルは、パルミチン酸レチニル、酢酸レチニルお よびプロピオン酸レチニルから選択される。何故ならば、これらは最も商業的に 入手可能であり、従って、最も安価だからである。リノール酸レチニルもその効 力のため好ましい。 レチノール及び／又はレチニルエステルは、本発明の組成物では、０．００１ ％ないし１０％の量で、好ましくは０．０１％ないし１％の量で、最も好ましく は０．０１％ないし０．５％の量で使用される。 本発明の組成物の第２の必須成分は、イン・ビトロミクロソーム検定にパスす る化合物である。本発明で使用するのに適した化合物は、イン・ビトロミクロソ ーム検定によって測定して、ＬＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触媒されるレチノー ルのエステ ル化の少なくとも２０％を１００μＭ濃度で阻害する。本発明組成物に該化合物 を含ませることの適切さを決定するのに使用されるイン・ビトロミタロソーム検 定は以下の通りである： 本発明の好ましい具体例において、ＬＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触媒される レチノールのエステル化の少なくとも４０％、最も好ましくは少なくとも５０％ を、１００μＭの濃度で阻害する化合物が選択される。 イン・ビトロミクロソーム検定 ミクロソームは、Ｊ．Ｃ．ＳａａｒｉおよびＤ．Ｌ．Ｂｒｅｄｂｅｒｇ、「Ｃ ｏＡ ａｎｄ Ｎｏｎ−ＣｏＡ ＤｅｐｅｎｄｅｎｔＲｅｔｉｎｏｌ Ｅｓｔｅ ｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎ Ｒｅｔｒｉｎａｌ Ｆｉｇｍｅｎｔ Ｅｐｉｔｈ ｅｌｉｕｍ」、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２６３，８０８４−９０（１９８８ ）に記載されているごとくに得られる。 ０．１Ｍリン酸ナトリウム（ｐＨ７）緩衝液、５ｍＭジチオスレイトール、２ ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン、４０マイクロモル濃度のパルミトイルＣｏＡ、 ４０マイクロモル濃度のジラウロイルホスファチジルコリン、１０マイクロモル 濃度のレチノールおよびテスト化合物を含有する溶液または溶媒ブランクを、ウ シ・レチナール色素上皮細胞から単離したミクロソー ム画分と共に、３７℃て１時間インキュベートする。インキュベーション後、等 容量のエタノールの添加によつて反応をクエンチし、形成されたレチニルエステ ル（ＬＲＡＴにより触媒される反応からのラウリン酸レチニルおよびＡＲＡＴに より触媒される反応からのパルミチン酸レチニル）をヘキサンで抽出する。ヘキ サン層を取り出し、窒素下で蒸発させ、残渣を、テトラヒドロフラン中８０％メ タノールの移動相および蛍光検出（３２５ｎｍ励起、４８０ｎｍ発光）を用いる ３．９×３００ｍｍ Ｃ₁₉逆相カラム上のＨＰＬＣによって分析して、レチニル エステルを定量する。溶媒ブランクの存在下で形成されたエステルの量を１００ ％とし、これを用いて、テストした化合物についてのエステル形成の阻害率（％ ）を計算する。対照として、ミクロソームのアリコートを５分間沸騰することに よって不活化したところ、エステル形成が少なくとも９５％阻害される。 環状脂肪族不飽和炭化水素、ジテルペン、フラボノン、フラボノールおよびあ る種の脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤は、上記したイン・ビトロ ミクロソーム検定を満足する化合物の例である。これらの化合物の個々について 以下に述べる。もちろん、本明細書で明示的に言及しない他の化合物も、 それらが本明細書に記載するイン・ビトロミクロソーム検定テストをパスする限 り、本発明組成物に含まれる。 環状脂肪族不飽和化合物 適当な環状脂肪族不飽和化合物は、前記したイン・ビトロミクロソーム検定テ ストに従って選択される。 好ましい環状脂肪族不飽和化合物は環状脂肪族不飽和のアルデヒド、ケトン、 アルコールおよびエステルから選択される。 好ましい環状脂肪族不飽和のアルデヒド、ケトン、アルコールおよびエステル は、アルファダマスコン、ベータダマスコン、デルタダマスコン、イソダマスコ ン、ダマスセノン、アルファイオノン、ベータイオノン、アリルアルファイオノ ン、イソブチルイオノン、アルファメチルイオノン、ガンマメチルイオノン、ブ ラマノール、サンダノール、アルファテルピネオール、リラール、エチルサフラ ネート、およびそれらの混合物である。これらの化合物の構造は以下の通りであ る： 好ましくは、最小コストで効能を最大化するためには、環状脂肪族不飽和化合 物は上記した構造を有するダマスコンおよびイオノンよりなる群から選択される 。 最も好ましくは、環状脂肪族不飽和化合物はα−ダマスコン及び／又はα−イ オノンである。 環状脂肪族不飽和化合物は、組成物の０．０００１重量％ないし５０重量％の 範囲の量で本発明組成物に含ませることができ、好ましくは０．０１重量％ない し１０重量％、最も好ましくは０．１重量％ないし５重量％の量である。 ジテルペン 本発明に含ませるのに適当なジテルペンは前記したイン・ビトロミクロソーム 検定にパスするものである。好ましいジテルペン化合物はゲラニルゲラニオール であり、これは以下の構造を有する： ジテルペンは、０．０００１％ないし５０％の範囲の量で本発明組成物に含ま せることができ、好ましくは０．０１％ないし１０％、最も好ましくは０．１％ ないし５％の量で使用される。 フラボノンおよびフラボノール 本発明で含ませるフラボノンおよびフラボノールは、前記し たイン・ビトロミクロソーム検定をパスするものである。好ましいフラボノンお よびフラボノールはナリンゲニン、ケルセチンおよびそれらの混合物から選択さ れる。 ナリンゲニンおよびケルセチンの構造は以下の通りである： フラボノンまたはフラボノールは、０．０００１％ないし５０％の範囲の量で 本発明組成物に含ませることができ、好ましくは０．０１％ないし１０％、最も 好ましくは０．１％ないし５％の量で使用される。 ケルセチン及び／又はナリンゲニンはＳｉｇｍａから得ることがてきる。ケル セチン及び／又はナリンゲニンを含有する植物抽出物、例えば、ルチン、マツヨ イグサ、タマネギ、柑橘種も本発明で使用するのに適する。 脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤 本発明に含まれる脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤は前記したイ ン・ビトロミクロソーム検定テストをパスする。好ましい脂肪ヒドロキシエチル イミダゾリンは、以下の一般的構造： ［Ｒは８ないし２０個の炭素原子を含有する脂肪族で飽和または不飽和の、直鎖 または分岐鎖炭化水素鎖である］ を有する。 適当な脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリンの例は、限定されるものではないが 、ココイルヒドロキシエチルイミダゾリン（Ｒはヤシ油脂肪酸に由来し、ほとん どはＣ₁₂でいくらかはより長い鎖である）、ラウリルヒドロキシエチルイミダゾ リン（Ｒ＝ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₀）、ミリスチルヒドロキシエチルイミダゾリン（Ｒ ＝ＣＨ₃（ＣＨ₂）₁₂）、ステアリルヒドロキシエチルイミダゾリン（Ｒ＝ＣＨ₃ （ＣＨ₂）₁₆）、およびオレイルヒドロキシエチルイミダゾリン（Ｒ＝ＣＨ₃（Ｃ Ｈ₂）₇ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇）を含む。 好ましくは、脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリンにおけるＲは８ないし１８個 の炭素原子、より好ましくは１１ないし１８個の炭素原子を含有する。最も好ま しくは、脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリンは、その商業的入手可能性および効 能のため、オレイルヒドロキシエチルイミダゾリンである。 脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリンは、０．０００１％ないし５０％の範囲の 量で本発明組成物に含ませることができ、好ましくは０．０１％ないし１０％、 最も好ましくは０．１％ないし５％の量で使用される。化粧品上許容されるビヒクル 本発明の組成物は、組成物中の有効成分のための希釈剤、分散剤または担体と して作用して、組成物が皮膚に適用された場合にそれらの分配を促進するための 化粧品上許容されるビヒクルも含む。 水以外のまたは水と共に用いるビヒクルとしては液体または固体の軟化剤、溶 剤、保湿剤、増粘剤および粉末を挙げることができる。特に好ましい非水性担体 はポリジメチルシロキサン及び／又はポリジメチルフェニルシロキサンである。 本発明のシリコーンは２５℃において１０ないし１０，０００，０００ｍｍ²／ ｓ（センチストークス）の範囲の粘度を持つものでよい。特に望ましいものは、 低粘度および高粘度シリコーンの混合物である。これらのシリコーンは商品名Ｖ ｉｃａｓｉｌ、ＳＥおよびＳＦの下にＧｅｎｅｒａｌ Ｅｌｅｃｔｒｉｃ Ｃｏ ｍｐａｎｙから、２００および５５０シリーズとしてＤｏｗＣｏｒｎｉｎｇ Ｃ ｏｍｐａｎｙから入手できる。本発明の組成物で使用できるシリコーンの量は、 組成物の５重量％ないし９５重量％の範囲、好ましくは２５重量％ないし９０重 量％である。 化粧品上許容されるビヒクルは、通常、組成物の５重量％ないし９９．９重量 ％、好ましくは２５重量％ないし８０重量％であり、他の化粧品添加剤の不存在 下では、組成物の残りを形成できる。好ましくは、該ビヒクルはビヒクルの少な くとも５０重量％、より好ましくは少なくとも８０重量％が水である。好ましく は、水は組成物の少なくとも５０重量％、最も好ましくは６０ないし８０重量％ を占める。 任意の皮膚有益物質および化粧品添加剤 乳化剤と共に油または油性物質を存在させて、使用する乳化剤の平均親水性− 親油性バランス（ＨＬＢ）に大いに依存して油中水型エマルジョンまたは水中油 型エマルジョンいずれかを供することができる。 本発明の組成物は、好ましくは、日焼け止めを含む。日焼け止めは紫外線をブ ロックするのに通常使用される物質を含む。例示的化合物はＰＡＢＡ、シンナメ ーチおよびサリチレートの誘導体である。例えば、メトキシ桂皮酸オクチルおよ び（オキシベンゾンとしても公知の）２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェ ノンを使用できる。メトキシ桂皮酸オクチルおよび２−ヒドロキシ−４−メトキ シベンゾフェノンは、各々、商標名 Ｐａｒｓｏｌ ＭＣＸおよびＢｅｎｚｏｐｈｅｎｏｎｅ−３の下で商業的に入手 できる。エマルジョンで使用される日焼け止めの正確な量は、太陽の紫外線放射 からの所望される保護の程度に依存して変化し得る。 もう１つの好ましい任意成分は必須脂肪酸（ＥＦＡ）、すなわち、全ての細胞 の原形質膜形成に必須の脂肪酸から選択され、ケラチノサイトではＥＦＡ欠乏は 細胞を過剰増殖性とする。ＥＦＡの補足はこれを矯正する。また、ＥＦＡは表皮 細胞の脂質生合成を促進し、表皮細胞のバリヤー形成のための脂質を提供する。 該必須脂肪酸は、好ましくは、リノール酸、γ−リノレン酸、ホモ−γ−リノレ ン酸、コロンビン酸、エイコサ−（ｎ−６，９，１３）−トリエン酸、アラキド ン酸、α−リノレン酸、チムノドン酸、ヘキサエン酸およびそれらの混合物から 選択される。 軟化剤は、しばしば、本発明の化粧品組成物に配合される。かかる軟化剤の量 は組成物全体の０．５重量％ないし５０重量％、好ましくは５重量％および３０ 重量％の間の範囲とし得る。軟化剤は、エステル、脂肪酸およびアルコール、ポ リオールおよび炭化水素のごとき一般的化学範疇の下で分類できる。 エステルはモノ−またはジーエステルであり得る。脂肪酸ジ−エステルの許容 される例はアジピン酸ジブチル、セバシン酸ジエチル、ダイマー酸ジイソプロピ ル、およびコハク酸ジオクチルである。許容される分岐鎖脂肪酸エステルは、ミ リスチン酸２−エチル−ヘキシル、ステアリン酸イソプロピルおよびパルミチン 酸イソステアリルを含む。許容される三塩基酸エステルはトリリノール酸トリイ ソプロピルおよびクエン酸トリラウリルを含む。許容される直鎖脂肪酸エステル はパルミチン酸ラウリル、乳酸ミリスチ、エルカ酸オレイルおよびオレイン酸ス テアリルを含む。好ましいエステルはココカプリレート／カプレート（ココカプ リレートおよびココカプレートのブレンド）、プロピレングリコールミリスチル エーテルアセテート、アジピン酸ジイソプロピルおよびオクタン酸セチルを含む 。 適当な脂肪アルコールおよび脂肪酸は１０ないし２０個の炭素原子を有する化 合物を含む。特に好ましいものはセチル、ミリスチル、パルミチックおよびステ アリルアルコールおよび対応する酸のごとき化合物である。 軟化剤として働き得るポリオールには、直鎖および分岐鎖アルキルポリヒドロ キシル化合物がある。例えば、プロピレング リコール、ソルビトールおよびグリセリンが好ましい。また、有用なのはポリプ ロピレングリコールおよびポリエチレングリコールのごときポリマー性のポリオ ールである。ブチレンおよびプロピレングリコールは浸透促進剤としても特に好 ましい。 軟化剤として働き得る例示的炭化水素は１２ないし３０個の炭素原子の炭化水 素鎖を有するものである。特別の例は鉱油、石油ゼリー、スクアレンおよびイソ パラフィンである。 本発明の化粧品組成物内の機能的成分のもう１つの範疇は増粘剤である。増粘 剤は、通常、組成物の０．１重量％ないし２０重量％、好ましくは０．５重量％ ないし１０重量％である。例示的増粘剤はＢ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉｃｈ Ｃｏｍｐ ａｎｙからの商標Ｃａｒｂｏｐｏｌ下で入手できる架橋ポリアクリレート物質で ある。キサンタン、カラギーナン、ゼラチン、カラヤ、ペクチンおよびローカス トビーンガムのごときガムを使用できる。ある状況下では、増粘機能は、シリコ ーンまたは軟化剤としても働く物質によって達成できる。例えば、１０センチス トーク以上の粘度を持つシリコーンガムおよびステアリン酸グリセロールのよう なエステルは二元の機能を有する。 粉末を本発明の化粧品組成物に配合することができる。これ らの粉末は白亜、タルク、カオリン、澱粉、緑粘土、化学的に修飾されたケイ酸 マグネシウムアルミニウム、有機的に修飾されたモンモリロナイト粘土、水和ケ イ酸アルミニウム、ヒュームドシリカ、アルミニウム澱粉コハク酸オクテニルお よびそれらの混合物を含む。 他の添加少量成分を化粧品組成物に配合することもできる。これらの成分は着 色剤、乳白剤および香料を含むことができる。これらの他の少量成分の量は組成 物の０．００１重量％ないし２０重量％の範囲であり得る。 組成物の使用 本発明による組成物は、主として、ヒトの皮膚への局所適用用の製品として、 特に皮膚をコンディショニングし滑らかにし、皺の入ったまたは老化した皮膚の 外観を予防しまたは低下させるための剤として意図される。 使用において、例えば、１ないし１００ｍｌの少量の組成物を、適当な容器ま たはアプリケーターから皮膚の露出領域に適用し、要すれば、次いで、手もしく は指または適当なデバイスを用い、皮膚に広げ及び／又は皮膚に擦り込む。製品の形態および包装 本発明の局所皮膚治療用組成物は、適当には、ローション、クリームまたはゲ ルとして処方することができる。該組成物は、適当な容器にパッケージして、そ の粘度および消費者によって意図される使用に適合させることができる。例えば 、ローションまたはクリームはボトルまたはロール−ボールアプリケーター、ガ ス−駆動エアロゾルデバイスまたは指操作のために適したポンプを備えた容器に 詰めることができる。組成物がクリームである場合、それは簡便に非変形性ボト ルまたはチューブもしくはフタ付きジャーのような絞容器に貯蔵することができ る。 また、本組成物は米国特許第５，０６３，０５７号に記載されているごときカ プセルに含ませることができる。 本発明は、従って、本明細書に定義した化粧品上許容される組成物を含有する 閉鎖容器を提供する。 以下特定実施例により本発明を説明する。材料及び方法 細胞培養 トリプシン処理によって新生***から単離したヒト・ケラチノサイトを、*** するケラチノサイトコロニーを樹立するため に、照射された３Ｔ３マウス線維芽細胞の存在下、ダルベッコ修飾イーグル（Ｄ ＭＥ）Ｈａｍｓ Ｆ１２（１：１）培地／１０％胎児ウシ血清中で増殖させた。 前記条件下、細胞を二次継代まで増殖させ、将来の使用のために凍結保存した。 凍結した二次継代ケラチノサイトを解凍し、前記培地に植え付け、５日間増殖さ せ、しかる後、それを、０．１５ｍＭ Ｃａを含有するＣｌｏｎｅｔｉｃｓ Ｃ ｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ， Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡからの無血清ＭＣＤＢ１５ ３−ベースの培地ケラチノサイト増殖培地（ＫＧＭ）、または０．０９ｍＭ Ｃ ａを含有するＧＩＢＣＯからのケラチノサイト無血清培地（ＫＳＦＭ）に取り換 えた。第７日、細胞が８０−９０％コンフルエントになったとき、トリプシン処 理し、種々の実験のために無血清培地に平板培養した。 チミジン検定 ³ Ｈ−チミジン取り込みおよびケラチノサイト増殖 培養したケラチノサイトによる³Ｈ−チミジンの取り込みをケラチノサイト増 殖の検定として使用した。チミジンは、動物界における遺伝情報の普遍的ライブ ラリーであるＤＮＡのモノマー単位である４つのデオキシヌクレオシドの１つで ある。ケ ラチノサイトのごとき体細胞の細胞***に先立って、細胞***をする細胞の完全 なゲノムか複製される。これには、細胞による大量のＤＮＡ合成が含まれ、両娘 細胞が遺伝物質の同一コピーを受け取ることが可能になる。細胞***のためにＤ ＮＡを合成しているケラチノサイトの培地に³Ｈ−チミジンを含ませると、標識 ヌクレオシドが新たに合成されたＤＮＡに取り込まれる。³Ｈ−チミジンの細胞 集団への取り込みの程度は、その細胞集団によるＤＮＡの合成速度に比例し、従 って、細胞増殖の指標である。 （前記したごとくに培養した）ケラチノサイトを１ｍｌ培地のウェル当たり２ ０，０００細胞の密度で２４ウェルプレートに植えた。４日間のインキュベーシ ョンまたは細胞が６０−７０％コンフルエントになるまでのインキュベーション の後、培地を交換した。培地交換の２４時間後にテスト化合物を（三連で）ウェ ルに添加し、４時間後、５０μｌの培地中の１μＣｉ ³Ｈ−チミジンをウェル 当たりに添加した。細胞をさらに２４時間インキュベートした。培地を細胞から 除去し、１０％氷冷トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を添加し、プレートを氷上で３０ 分間インキュベートした。細胞を５％ ＴＣＡで５回洗浄し、少なく とも１時間（通常は一晩）、５００μｌの０．１Ｍ ＮａＯＨ中に溶解させた。 調製物を０．１Ｍ ＨＣｌで中和し；細胞調製物５０μｌを用いて、全蛋白質含 有量を決定した。ＤＮＡの³Ｈ標識からの１分当たりの崩壊（ＤＰＭ）を、細胞 調製物９００μｌの液体シンチレーションカウンティングによって測定した。チ ミジン取り込みの結果をＤＰＭ／μｇ蛋白質として表した。 トランスグルタミナーゼ検定 トランスグルタミナーゼ検定およびケラチノサイト分化 表皮における末端分化のプロセスの間に角化エンベロープ（ＣＥ）として知ら れている蛋白質の１５ｎｍ厚み層が細胞周辺の内部表面で形成される。ＣＥは、 表皮で発現される少なくとも２つの異なるトランスグルタミナーゼ（ＴＧａｓｅ ）の作用によって触媒されるＮ^ε−（γ−グルタミル）リシンイソジペプチド結 合の形成によって互いに架橋された多数の異なる蛋白質からなる。トランスグル タミナーゼＩ（ＴＧａｓｅＩ）は表皮の分化した層、特に顆粒層で豊富に発現さ れるが、未分化基底表皮には存在しない。かくして、ＴＧａｓｅＩは表皮ケラチ ノサイト分化の有用なマーカーであり、高ＴＧａｓｅＩレベルがより分化した状 態を示す。ＴＧａｓｅＩ抗体を用いるＥＬＩ ＳＡベースのＴＧａｓｅ検定を用いて、以下の実施例において、培養したケラチ ノサイトの分化の状態を評価した。 実施例１では、以下の手法を用いた： （前記したごとくに培養した）ケラチノサイトを、２００μｌ培地のウェル当 たり３，０００細胞の密度で９６ウェルプレートに植え付けた。４日間のインキ ュベーションの後、培地を、テスト化合物を含有する培地に交換した（テスト当 たり６連）。細胞をさらに７２時間培養し、しかる時点の後、培地を吸引し、プ レートを−７０℃で貯蔵した。プレートをフリーザーから取り出し、細胞をＰＢ Ｓで洗浄した。１００μｌの滅菌水を添加し、−７０℃で凍結し、次いで解凍す ることによって細胞を破砕した。細胞をＰＢＳ／３％ＢＳＡ（洗浄緩衝液、ウシ 血清アルブミン）と共に室温（Ｒ／Ｔ）で１時間インキュベートし、次いで、洗 浄緩衝液の新鮮アリコートですすいだ。洗浄緩衝液で１：２０００に希釈したＢ ｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓから得た５０μｌの一次抗体のモノ クローナル抗−ヒトトランスグルタミナーゼ・マウス抗体（ＩｇＧ）と共に細胞 を３７℃で１時間インキュベートし、次いで洗浄緩衝液で２回すすいだ。次いで 、洗浄緩衝液で１：４０００に希釈した５０μｌの二次 抗体（Ｆａｂ断片、Ａｍｅｒｓｈａｍから得られるペルオキシダーゼ結合抗−マ ウスＩｇＧ）と共に３７℃で１時間インキュベートし、次いで洗浄緩衝液で２回 洗浄した。暗所にて（アルミニウムホイル下）、基質溶液（１０ｍｌの０．１Ｍ クエン酸緩衝液ｐＨ５．０中の４ｍｇのｏ−フェニレンジアミンおよび３．３μ ｌの３０％Ｈ₂Ｏ₂）と共に細胞を室温で５分間インキュベートした。５０μｌの ４Ｎ Ｈ₂ＳＯ₄の添加によって反応を停止させた。試料の吸光度をプレートリー ダーにて４９２ｎｍで読んだ。６連のうち、４つを両抗体で処理し、２つを第二 抗体でのみ処理した（すなわち、酵素結合Ａｂのバックグラウンド結合を決定し た）。ＴＧａｓｅレベルは、各処理からの読みからバックグラウンドを差し引き 、両抗体に暴露された複製につき平均値±標準偏差を決定することによって決定 した。 ＴＧａｓｅＩレベルを測定した他の実施例については、以下の手法を用いた： （前記したごとくに培養した）ケラチノサイトを、２００μｌ細胞培養培地の ウェル当たり３，０００細胞の密度で９６ウェルプレートに植え付けた。４日間 のインキュベーションの後、培地を、テスト化合物を含有する培地に交換した（ テスト当た り６連）。細胞をさらに７２時間培養し、しかる時点の後、培地を吸引し、プレ ートを−７０℃で貯蔵した。プレートをフリーザーから取り出し、凍結し解凍す ることによって細胞をさらに凍結破砕し、次いで、ＰＢＳで３回洗浄した。細胞 をＴＢＳ／５％ＢＳＡ緩衝液と共に室温（Ｒ／Ｔ）で１時間インキュベートした 。次いで、ＴＢＳ／１％ＢＳＡ緩衝液で１：２０００に希釈したＢｉｏｍｅｄｉ ｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから得た１００μｌのモノクローナル抗−ヒ トトランスグルタミナーゼ（ＩｇＧ）マウス抗体（一次抗体）と共に細胞を３７ ℃で２時間インキュベートし、次いで洗浄緩衝液（ＴＢＳ／１％ＢＳＡ／０．０ ５％ Ｔｗｅｅｎ−２０）で６回すすいだ。次いで、細胞を、洗浄緩衝液で１： ４０００に希釈したＡｍｅｒｓｈａｍからの１００μｌのＦａｂ断片、ペルオキ シダーゼ結合抗−マウスＴｇＧ抗体（二次抗体）と共に３７℃で２時間インキュ ベートし、次いで洗浄緩衝液で３回、およびＰＢＳで３回すすいだ。暗所にて（ アルミニウムホイル下）、基質溶液（１０ｍＬの０．１Ｍクエン酸緩衝液ｐＨ５ ．０中の４ｍｇのｏ−フェニレンジアミンおよび３．３μｌの３０％Ｈ₂Ｏ₂）と 共に細胞を室温で５分間インキュベートした。５０μｌの４Ｎ Ｈ₂ＳＯ₄の添加によって反応を停止させた。試料の吸光度をプレートリーダーに て４９２ｎｍで読んだ。６連のうち、４つを両抗体で処理し、２つを第二抗体で のみ処理した（すなわち、酵素結合抗体のバックグラウンド結合を決定した）。 トランスグルタミナーゼＩレベルは、各処理からの読みからバックグラウンドを 差し引き、両抗体に暴露された複製につき平均値±標準偏差を決定することによ って決定した。 ＤＮＡ検定 細胞の処理後に検出されたＴＧａｓｅＩのレベルは、細胞数によって影響され 得た。すなわち、細胞の数が多くなれば、検出されたＴＧａｓｅ−Ｉのレベルは 大きくなった。ＴＧａｓｅＩのレベルを同一ウェル中の細胞のＤＮＡ含有量に正 規化し、かくして、細胞数の差異による変動を排除した。ＤＮＡの定量は、ケラ チノサイト細胞数を含めた細胞数の特に有用な指標である。何故ならば、各細胞 は、全ての意図および目的に対して、同一のゲノム、従って同一量のＤＮＡを有 するからである。従って、細胞のウェルの全ＤＮＡ含有量はそのウェル中の細胞 数に直接比例する。ＤＮＡの定量を用いて、ＴＧａｓｅデータを細胞数に対して 正規化した。 ２００μｌ培地のウェル当たり３，０００の細胞密度で、ケラチノサイトを９ ６ウェルプレートに植え付けた。４日間のインキュベーションの後、培地を、テ スト化合物を含有する培地と交換した（テスト当たり６連）。細胞をさらに７２ 時間培養し、しかる時点の後、培地を吸引し、プレートを−７０℃で少なくとも １．５時間貯蔵した。プレートをフリーザーから取り出し、３０分間で解凍した 。Ｈｏｅｃｈｓｔ染料（１μｇ／ｍｌ最終濃度）の１００μｌ／ウェルを添加し 、これを１５分間インキュベートし、被覆し、次いで、蛍光計で読んだ（励起３ ６０ｎｍおよび発光４６０ｎｍ）。染色溶液を取り除き、ＴＧａｓｅ検定の準備 としてＰＢＳでウェルをすすいだ。 実施例１ レチノイン酸はケラチノサイト分化状態を改変することにおいてレチノールよ りも効果的である。 レチノイン酸（ＲＡ）およびレチノール（ＲＯＨ）の添加後に細胞のＤＮＡ含 有量に対して規格化したトランスグルタミナーゼレベルに対する効果を調べ、結 果を表１に示す。 テストしたレチノイン酸の全ての濃度、すなわち、２．５×１０^-7Ｍ、２．５ ×１０^-8Ｍおよび２．５×１０^-9Ｍはエタノール対照よりもケラチノサイト分化 を減少させ、対応する２．５×１０^-7Ｍ、２．５×１０^-8Ｍおよび２．５×１０^-9 Ｍレチノール処理の各々よりも有意に大きい程度までそうした。トランスグル タミナーゼレベルの減少は、レチノイン酸およびレチノール双方につき用量依存 的であった。これは、レチノールよりも上皮分化に対する大きな阻害効果を有す るレチノイン酸に合致する。 実施例２ イン・ビトロミクロソームのレチノールのエステル化の方法 ミクロソームは、Ｊ．Ｃ．ＳａａｒｉおよびＤ．Ｌ．Ｂｒｅｄｂｅｒｇ「Ｃｏ Ａ ａｎｄ Ｎｏｎ−ＣｏＡ ＤｅｐｅｎｄｅｎｔＲｅｔｉｎｏｌ Ｅｓｔｅｒ ｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｉｎＲｅｔｉｎａｌ Ｐｉｇｍｅｎｔ Ｅｐｉｔｈｅｌｉ ｕｍ」、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ，２３，８０８４−９０（１９８８）に記載さ れているごとくに得られる。 ０．１Ｍリン酸ナトリウムｐＨ７緩衝液、５ｍＭジチオスレイトール、２ｍｇ ／ｍｌウシ血清アルブミン、４０マイクロモ ル濃度のパルミトイルＣｏＡ、４０マイクロモル濃度のジラウロイルホスファチ ジルコリン、１０マイクロモル濃度のレチノールおよびテスト化合物または溶媒 ブランクを含有する溶液を、ウシ・レチナール色素上皮細胞から単離したミクロ ソーム画分と共に、３７℃で１時間インキュベートした。インキュベーション後 、等容量のエタノールの添加によって反応をクエンチし、形成されたレチニルエ ステル（ＡＲＡＴ触媒反応からのパルミチン酸レチニルおよびＬＲＡＴ触媒反応 からのラウリン酸レチニル）をヘキサンで抽出した。ヘキサン層を取り出し、窒 素下で蒸発させ、残渣を、テトラヒドロフラン中８０％メタノール移動相および 蛍光検出（３２５ｎｍ励起、４８０ｎｍ発光）を用いる３．９×３００ｍｍ Ｃ １８逆相カラム上のＨＰＬＣによって分析して、レチニルエステルを定量した。 溶媒ブランクの存在下で形成されたエステルの量を１００％とし、これを用いて テストした化合物についてのエステル形成の阻害率（％）を計算した。対照とし て、ミクロソームのアリコートを５分間沸騰することによって不活化した結果、 エステル形成は少なくとも９５％阻害された。 得られた結果を表２にまとめる。 ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤は優れたエステル化阻害剤であり、 他方、他の界面活性剤および他の複素環化合物は実質的に不活性であることが分 かる。カプリリックヒドロキシエチルイミダゾリン（Ｒ＝ＣＨ₃（ＣＨ₂）₆）は 十分にはＬＲＡＴを阻害しなかった。 実施例３ 表３に示すＲ基を有する種々のヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤で実 施例２を反復した。得られた結果を表３に示す。 表３の結果は、オレイル＞ココ＞ラウリルの相対活性を示す。恐らくはココは 純粋にはＣ₁₂ではないが、同様にいくらか長いアルキル基を有するので良好であ る。 カプリリックヒドロキシエチルイミダゾリンに対する表２のデータは、１００ マイクロモル濃度において８％に過ぎない阻害を示した。一緒にすると、データ は、オレイル＞ココ＞ラウリル＞カプリリックの相対活性を明瞭に示す。 実施例４ オレイルヒドロキシエチルイミダゾリン（ＯＨＩ）、レチノイン酸（ＲＡ）、 レチノール（ＲＯＨ）およびパルミチン酸レチニル（ＲＰ）を用いてトランスグ ルタミナーゼ検定を行った。 得られた結果を表４にまとめる。 表４ 濃度 実験番号 化合物 （マイクロモル濃渡） 対照の％ 1 RA 0.25 35.1 1 ROH 0.25 76.2 1 OHI 1 80.7 1 ROH+OHI 0.25+1 45.1 2 RA 0.25 43.4 2 ROH 0.025 91.6 2 OHI 1 78.2 2 ROH+OHI 0.025+1 57.9 3 RA 0.25 45.9 3 RP 0.25 91.6 3 OHI 1 91.1 3 RP＋OHI 0.25+1 71.6 レチノイン酸はケラチノサイト分化を実質的に低下させたが、他方、レチノー ル、オレイルヒドロキシエチルイミダゾリン、およびパルミチン酸レチニルは単 独で使用した場合にケラチノサイト分化に影響しなかつた、あるいはレチノイン 酸よりもかなり低い程度だったことが、表４の結果から分かる。 実験１および２において、レチノールをオレイルヒドロキシエチルイミダゾリ ンと組み合わせると、結果は、レチノイン酸の効果に近づくレベルまで、ケラチ ノサイト分化の相乗的低下であった。 実験３では、オレイルヒドロキシエチルイミダゾリンをパルミチン酸レチニル と組み合わせた場合、結果は、実験１および２におけるごとく劇的ではなかった が、それにもかかわらず、相対的低下が観察された。 また、本実施例は、本明細書に記載するインビトロミクロソーム検定にパスし た化合物は、実際には、レチノイン酸の効果と同様のレベルにて、レチノールと 組み合わせた場合にケラチノサイトに対して効果を有していたことも示している 。 実施例５ インビトロミクロソーム検定テストを表５Ａおよび５Ｂにリ ストした化合物に対して行った。 表５Ａの化合物は１００μＭ濃度でテストした。表５Ｂの化合物は１０μＭ濃 度でテストした。 ある種の環状脂肪族不飽和化合物はＬＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触媒される レチノールのエステル化の優れた阻害剤であることが表５Ａおよび５Ｂの結果か ら分かる。 比較例６ イン・ビトロミクロソーム検定テストを、さらなる環状脂肪族不飽和化合物で 行った。得られた結果を表６にまとめる。 表６の化合物は１００μＭ濃度でテストした。 全ての環状脂肪族不飽和化合物が、ＬＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触媒される レチノールのエステル化を阻害するのではない、または十分に阻害するのではな いことが表６の結果から分かる。 実施例７ 表７にリストした化合物および組合せのケラチノサイト分化に対する効果を調 べた。結果は対照の％として表した。トランスグルタミナーゼレベルはＤＮＡに 対して正規化した。データ は、レチノール濃度を変化させた２つの実験からのものである。得られた結果を 表７にまとめる。 表７の結果は、α−ダマスコンは単独では、およびレチノールは単独では非常 には効果的ではなく、他方、２つの組合せは、ケラチノサイト分化に対するレチ ノイン酸の効果を模倣するトランスグルタミナーゼの相乗的低下を達成したこと を示す。また、本実施例はミクロソーム検定と細胞培養データとの間の良好な相 関を確立する。 実施例８ イン・ビトロミクロソーム検定テストを、ジテルペン化合物、ゲラニルゲラニ オールまたはファルネソルで行った。得られた結果を表８にまとめる。 ¹ ＴＣＩ Ａｍｅｒｉｃａ（ポートランド、オレゴン州）から得た。また、 ＳｉｇｍａおよびＣＴＣ Ｏｒｇａｎｉｃｓ（アトランタ、ジョージア州）から も入手可能。 ² Ｇｉｖａｕｄａｎ Ｃｏ．，Ｂｅｄｏｕｋｉａｎ Ｃｏ．，またはＤｒａ ｇｏｃｏ Ｃｏ．から入手可能。 ゲラニルケラニオールおよびファルネソルは共にレチノールのエステル化を阻 害することが表８の結果から分かる。ゲラニルゲラニオールは、この構造が以下 のものであるファルネソルよりも実質的に優れたエステル化阻害剤である。 実施例９ ³Ｈ−チミジン取り込みを、前記「材料および方法」欄に記載した手法に従っ て測定した。得られた結果を表９Ａおよび９Ｂ にまとめる。 ゲラニルゲラニオールは、レチノールの増殖促進効果を、レチノイン酸の匹敵 する量で達成できるのと同様のレベルまで、有意に増加させることが前記結果か ら分かる。ここでも、良好な相関が、ミクロソーム検定テストと細胞培養に対す る化合物 の効果との間に存在することが判明する。 実施例１０ イン・ビトロミクロソーム検定を表１０にリストする化合物に対して行った。 得られた結果を表１０にまとめる。表１０の化合物は１００μＭ濃度でテストし た。 実施例１１ ナリンゲニンおよびレチノールはケラチノサイト分化を相乗的に阻害する。 細胞のＤＮＡ含有量に正規化したＴＧａｓｅＩレベルに対する効果を、テスト 化合物での７２時間処理に応答して調べた。結果を表１１に示す。ナリンゲニン はＳｉｇｍａから得た。 ２．５×１０^-7Ｍレチノイン酸はケラチノサイトＴＧａｓｅＩレベルを（対照 レベルの４２％まで）抑制することにおいて非常に効果的であったことが表１１ の結果から分かる。２．５×１０^-9Ｍレチノールは効果的ではなく（９１％）、 １０^-7Ｍナリンゲニンは単独で使用した場合にケラチノサイトＴＧａｓｅＩレベ ルに対して阻害活性を有しなかった。しかしながら、２．５×１０^-9Ｍレチノー ル＋１０^-7ＭナリンゲニンはケラチノサイトＴＧａｓｅＩを対照レベルの５３％ まで抑制した。ナリンゲニンおよびレチノールは、従って、相乗的に作用して、 レチノイン酸の効果と同様にしてケラチノサイト分化を抑制する。 実施例１２ ナリンゲニンおよびパルミチン酸レチニルはケラチノサイト分化を相乗的に抑 制する。 細胞のＤＮＡ含有量に対して正規化したＴＧａｓｅＩレベルに対する効果を、 テスト化合物での７２時間処理に対応して調べた。結果を表１２に示す。 ２．５×１０^-7Ｍレチノイン酸はケラチノサイトＴＧａｓｅＩレベルを（対照 レベルの３２％まで）抑制することにおいて非常に効果的ではなかったことが表 １２の結果から分かる。２．５×１０^-9Ｍパルミチン酸レチニルは効果的ではな く（９３％）、１０^-8Ｍナリンゲニンは単独で使用した場合にケラチノサイトＴ ＧａｓｅＩレベルに対して小さな阻害効果を有した。しかしながら、２．５×１ ０^-8Ｍレチノール＋１０^-8Ｍナリンゲニンは対照レベルの８５％までケラチノサ イトＴＧａｓｅＩを抑制した。ナリンゲニンおよびパルミチン酸レチニルは、従 って、レチノイン酸の効果と同様にしてケラチノサイト分化を抑制するように相 乗的に作用する。 実施例１３ ケルセチンおよびレチノールはケラチノサイト分化を相乗的に阻害する。 細胞のＤＮＡ含有量に対して正規化したＴＧａｓｅＩレベルに対する効果を、 テスト化合物での７２時間処理に対応して調ベた。結果を表１３に示す。ケルセ チンはＳｉｇｍａから得た。 ２．５×１０^-7Ｍレチノイン酸はケラチノサイトＴＧａｓｅＩレベルを（対照 レベルの５２％まで）抑制することにおいて効果的であることが表１３の結果か ら分かる。２．５×１０^-7Ｍレチノールは効果的ではなく（９０％）、１０^-6ケ ルセチンは単独で使用した場合はケラチノサイトＴＧａｓｅＩレベルに対して小 さな阻害効果しか有しなかった。しかしながら、２．５×１０^-7Ｍレチノール＋ １０^-6ＭケルセチンはケラチノサイトＴＧａｓｅＩを対照レベルの７０％まで抑 制した。ケルセチンおよびレチノールは、従って、レチノイン酸の効果と同様に してケラチノサイト分化を抑制するのに相乗的に作用する。 これらのテストの工程の間、レチノイン酸は、それに対して分析した他の化合 物と比較する陽性対照として使用した。レチノイン酸は、皮膚ケラチノサイトに おいてトランスグルタミナーゼＩレベルを用量依存的に低下させた。換言すれば 、レチノイン酸はケラチノサイト分化を低下させた。レチノールおよびパルミチ ン酸レチニルは、ケラチノサイト分化を阻害することにおいてレチノイン酸より も有意に効果が低かった。 しかしながら、前記実施例によって証明された予期せぬ結果は、培養したケラ チノサイトに対するレチノールおよびレチニ ルエステルの効果が、イン・ビトロミクロソーム検定によって測定して、ＬＲＡ ＴまたはＡＲＡＴにより触媒されるレチノールのエステル化の少なくとも２０％ を１００μＭで阻害する化合物の０．０００１％ないし５０％である化合物とレ チノールまたは該エステルとを組み合わせることによって、レチノイン酸のレベ ルに近づくレベルまで増強できることであった。この効果はレチノールまたは該 エステルまたは当該化合物自体いずれかの効果よりも大きいのみならず、２つの 成分が相互と相乗的に作用してケラチノサイトに対するレチノイン酸タイプの応 答を促進する。前記結果は、イン・ビトロミクロソーム検定をパスする化合物が 、レチノールおよびレチニルエステルと相乗的に作用して、ケラチノサイト分化 を低下させ及び／又はケラチノサイト分化を増加させ、レチノイン酸のケラチノ サイトに対する効果を模倣することを示す。 実施例１４−１９は、本発明による局所組成物を示す。該組成物は常法により 加工できる。それらは、化粧品用途に適する。特に、該組成物は、外観およびそ の感触を改良するために皺のある、粗い、乾燥した、はげ落ちやすい、老人及び ／又は紫外線損傷皮膚への適用に、ならびにその質低下を防止しまたは遅 らせるために健康な皮膚に適用するのに適する。 実施例１４ 本実施例は本発明の組成物を配合する高内部層油中水型エマルジョンを説明す る。 ^*Ｂｒｉｊ９２はポリオキシエチレン（２）オレイルエーテル 実施例１５ 本実施例は本発明による水中油型クリームを説明する。 ^*Ｂｒｉｊ５６はセチルアルコールＰＯＥ（１０）である。Ａｌｆｏｌ １６Ｒ Ｄはセチルアルコールである。 実施例１６ 本実施例は本発明によるアルコール性ローションを説明する。 実施例１７ 本実施例は本発明組成物を含有するもう１つのアルコール性ローションを説明 する。 実施例１８ 本実施例は本発明の組成物を配合するサンケアクリームを説明する。 実施例１９ 本実施例は本発明の組合せを配合する非水性スキンケア組成物を説明する。 ¹ＧＥＣから入手可能な、少なくとも５０，０００の分子量および２５℃で少な くとも１０，０００センチストータスの粘度を有するジメチルシリコーンポリマ ー² Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｒｐ．から入手可能な、ジメチルシリコーン環 状ペンタマー³ Ｄｏｗ Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｒｐ．から入手可能なジメチルシリコーンテト ラマー 実施例で言及しなければ、本発明で使用した材料は以下の入手源から得た。 パルミトイルＣｏＡ、ＢＳＡ、ジラウロイルホスファチジルコリン、レチノー ル、レチノイン酸ジチオスレイトールはＳｉｇｍａから。 環状脂肪族不飽和化合物： ダマスコンはＦｉｒｍｅｎｉｃｈから； イオノンはＩＦＦから； 他のものはＡｌｌｕｒｅｄ Ｐｕｂ． Ｃｏ．による、 「Ｆｌａｖｏｒ ａｎｄ Ｆｒａｇｎａｎｃｅ Ｍａｔｅｒｉａｌｓ」中の供給 業者から。 イミダゾリン界面活性剤： オレイルイミダゾリンはＳｃｈｅｒ ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ．からのＳｃｈ ｅｒｃｏｚｏｌｉｎｅ Ｏであり；他のものは、以下の通り、Ｍａｃｋａｚｏｌ ｉｎｅ名称下でＭｃＩｎｔｙｒｅからのものであった：カプリリック、ココ、ラ ウリル：各々、Ｍａｃｋａｚｏｌｉｎｅ ＣＹ，ＣおよびＬ。

【手続補正書】特許法第１８４条の８第１項 【提出日】１９９８年１０月２２日（１９９８．１０．２２） 【補正内容】 発明の概要 本発明は、部分的には、 （ａ）レチノール、レチニルエステルおよびそれらの混合物よりなる群から選 択される０．００１％ないし１０％の化合物、 （ｂ）明細書に記載したイン・ビトロミクロソーム検定によって測定して、Ｌ ＲＡＴによりまたはＡＲＡＴにより触媒されるレチノールのエステル化の少なく とも２０％を１００μＭ濃度で阻害する０．０００１％ないし５０％の化合物［ ここで、該化合物は脂肪酸アミドまたはジメチルイミダゾリジノンではなく、環 状脂肪族不飽和炭化水素、ジテルペン、および以下の構造： （式中、Ｒは８ないし２０個の炭素原子を含有する脂肪族で不飽和または飽和の 、直鎖または分岐鎖炭化水素鎖である） を有する脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤、およ びそれらの混合物よりなる群から選択される］、および （ｃ）化粧品上許容されるビヒクル を含む皮膚コンディショニング用組成物を包含する。 本発明においてレチノール及び／又はレチニルエステルと組み合わせて含まれ る化合物は、皮膚に対するレチノイン酸の効果を模倣する（類似の効果を有する ）かかる組合せの能力に基づいて選択される。言い換えると、もし化合物がイン ・ビトロミクロソーム検定によって測定して、ＬＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触 媒されるレチノールのエステル化を十分に阻害するならば、それはレチノールま たはレチニルエステルと一緒に作用して、レチノイン酸のケラチノサイト（皮膚 細胞）に対する効果を模倣することになる。 本発明は、さらに、本発明の組成物を皮膚に局所的に適用することを含む皮膚 をコンディショニングする化粧方法を提供する。請求の範囲 １．（ａ）レチノール、レチニルエステルおよびそれらの混合物よりなる群から 選択される０．００１％ないし１０％の化合物、 （ｂ）明細書に記載したイン・ビトロミクロソーム検定によって測定して、Ｌ ＲＡＴまたはＡＲＡＴにより触媒されるレチノールのエステル化の少なくとも２ ０％を１００μＭ濃度で阻害する０．０００１％ないし５０％の化合物［ここで 、該化合物は脂肪酸アミドまたはジメチルイミダゾリジノンではなく、環状脂肪 族不飽和炭化水素、ジテルペン、および以下の構造： （式中、Ｒは８ないし２０個の炭素原子を含有する脂肪族で不飽和または飽和の 、直鎖または分岐鎖炭化水素鎖である） を有する脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤、およびそれらの混合物 よりなる群から選択される］、および （ｃ）化粧品上許容されるビヒクル を含むスキンケア組成物。 ２．該環状脂肪族不飽和化合物がアルファダマスコン、ベータダマスコン、デル タダマスコン、イソダマスコン、ダマスセノン、アルファイオノン、ベータイオ ノン、アリルアルファイオノン、イソブチルイオノン、アルファメチルイオノン 、ガンマメチルイオノン、ブラマノール、サンダノール、アルファテルピネオー ル、リラール、エチルサフラネート、およびそれらの混合物よりなる群から選択 される請求項１記載の組成物。 ３．該ジテルペンがゲラニルケラニオールである請求項１記載の組成物。 ４．該レチニルエステルがパルミチン酸レチニル、酢酸レチニル、プロピオン酸 レチニル、リノール酸レチニルおよびそれらの混合物よりなる群から選択される 請求項１−４いずれか１項記載の組成物。 ５．請求項１−４いずれか１項記載の化粧品組成物を皮膚に局所適用することを 特徴とする皮膚をコンディショニングする化粧方法。 ６．請求項１−４いずれか１項記載の化粧品組成物を皮膚に適 用することを特徴とするレチノイン酸の効果と類似の効果を発揮させることによ って皮膚をコンディショニングする化粧方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 17/00 Ａ６１Ｋ 31/00 ６１７ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 スコツト，イアン・リチヤード アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07401、アレンデイル、パイン・ロード・ ９ (72)発明者 イワタ，コウイチ アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07660、リツジフイールド・パーク、クリ ステイ・ストリート・115、ナンバー・５ (72)発明者 チヤン，ケリー・ホワ アメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 08854、ピスカタウエイ、アニタ・ドライ ブ・110 (72)発明者 ロウリングス，アンソニー・ビンセント イギリス国、エム・ケイ・44・１エル・エ イ、ベツドフオード、シヤーンブルツク、 コルワース・ロード、ツイン・ロツジイ ズ・２

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． （ａ）レチノール、レチニルエステルおよびそれらの混合物から選択され る０．００１％ないし１０％の化合物； （ｂ）イン・ビトロミクロソーム検定によって測定して、ＬＲＡＴまたはＡＲ ＡＴにより触媒されるレチノールのエステル化の少なくとも２０％を１００μＭ 濃度で阻害する０．０００１％ないし５０％の化合物［ここで、該化合物は脂肪 酸アミドまたはジメチルイミダゾリジノンではない］、および （ｃ）化粧品上許容されるビヒクル； を含むスキンケア組成物。 ２． 化合物（ｂ）が環状脂肪族不飽和炭化水素、ジテルペン、フラボノン、フ ラボノール、脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤およびそれらの混合 物よりなる群から選択される請求項１記載の組成物。 ３．該環状脂肪族不飽和化合物がアルファダマスコン、ベータダマスコン、デル タダマスコン、イソダマスコン、ダマスセノン、アルファイオノン、ベータイオ ノン、アリルアルファイオノン、イソブチルイオノン、アルファメチルイオノン 、ガンマ メチルイオノン、ブラマノール、サンダノール、アルファテルピネオール、リラ ール、エチルサフラネート、およびそれらの混合物よりなる群から選択される請 求項２記載の組成物。 ４．該ジテルペンがゲラニルゲラニオールである請求項２または３記載の組成物 。 ５．該フラボノンがナリンゲニンである請求項２−４いずれか１項記載の組成物 。 ６． 該フラボノールがケルセチンである請求項２−５いずれか１項記載の化合 物。 ７． 該脂肪ヒドロキシエチルイミダゾリン界面活性剤が以下の構造：［式中、Ｒは８ないし２０個の炭素原子を含有する脂肪族で飽和または不飽和の 、直鎖または分岐鎖炭化水素鎖である］ を有する請求項２−６いずれか１項記載の組成物。 ８． 該レチニルエステルがパルミチン酸レチニル、酢酸レチニル、プロピオン 酸レチニル、リノール酸レチニルおよびそれ らの混合物よりなる群から選択される請求項１−７いずれか１項記載の組成物。 ９． 請求項１−８いずれか１項記載の組成物を皮膚に局所適用することを特徴 とする皮膚をコンディショニングする化粧方法。 １０． 請求項１−８いずれか１項記載の組成物を皮膚に適用することを特徴と するレチノイン酸の皮膚に対する効果と類似の効果を発揮する化粧方法。