CZ2003555A3 - 3-indolyl-4-phenyl-1h-pyrrole-2,5-dione derivatives as inhibitors of glycogen synthase kinase-3beta - Google Patents

3-indolyl-4-phenyl-1h-pyrrole-2,5-dione derivatives as inhibitors of glycogen synthase kinase-3beta Download PDF

Info

Publication number
CZ2003555A3
CZ2003555A3 CZ2003555A CZ2003555A CZ2003555A3 CZ 2003555 A3 CZ2003555 A3 CZ 2003555A3 CZ 2003555 A CZ2003555 A CZ 2003555A CZ 2003555 A CZ2003555 A CZ 2003555A CZ 2003555 A3 CZ2003555 A3 CZ 2003555A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
heteroalkyl
compound
hydrogen
dione
disease
Prior art date
Application number
CZ2003555A
Other languages
English (en)
Inventor
Leyi Gong
Andrew Grupe
Gary Allen Peltz
Original Assignee
F. Hoffmann-La Roche Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by F. Hoffmann-La Roche Ag filed Critical F. Hoffmann-La Roche Ag
Publication of CZ2003555A3 publication Critical patent/CZ2003555A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Otolaryngology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Oblast techniky:
Předložený vynález se týká 3-indolyl-4-fenyl-lH-pyrrol-2,5Tdionových derivátů, které inhibují glykogen-syntázu kinázu-3p (GSK-3β) a jsou tudíž vhodné pro léčení savců, majících chorobné stavy, které jsou jimi zprostředkovány. Předložený vynález je rovněž veden na léčiva obsahující tyto sloučeniny, metody jejich přípravy a jejich použití, konkrétně pro léčení nemocí charakterizovaných přebytkem Th2 cytokinů a/nebo přebytkem IgE produkce.
Dosavadní stav techniky:
Glykogen-syntáza kináza (GSK) je serin/threonin kináza, u níž byly identifikovány dva isomery, a a β. Glykogen syntáza kináza-3β (GSK-3β) byla původně identifikována jako protein kináza, která fosforylovala a inaktivovala gly ko gen syntázu, klíčový enzym regulující inzulínem stimulovanou syntézu glykogenu (viz Embi a kol., Eur. J. BiochemAQT, 519-5Π, (1980); Rylatt a kol., Eur. J. Biochem. 107, 529-537, (1980); a Vandenheede a kol., J. Biol. Chem. 255, 117678-11774, (1980)). Následně bylo zjištěno, že GSK^ je inhíbována při aktivaci inzulínu, a tím umožňuje aktivaci glykogen syntázy. Proto inhibice GSK3β stimuluje inzulín-dependentní proces a je užitečná pro léčení diabetů typu 2, který je charakterizován sníženou citlivostí vůči inzulínu a zvýšením hladiny glukózy v krvi. Pro léčení diabetů se používá řada léčiv, jako 5-jodotubercidin®, metformin®, troglitazonem®. Tato léčiva však mají omezené použití, protože metformin® může způsobovat hypoglykémii, troglitazonem® může způsobovat těžkou hepatoxicitu a 5-jodotubercidin®, GSK-3 inhibitor, inhibuje další serin/threonin a tyrosin kinázy.
• ·
Nedávno bylo zjištěno, že GSK-33 hraje roli v patogenezi Alzheimerovy nemoci (viz Lovestone a kol., Current Biology, 4, 1077-86 (1994), Brownlees a kol., Neuroreport, 8, 3251-3255 (1997), Takashima a kol., PNAS 95, 9637-9641 (1998), a Pei a kol., J.Neuropathol. Exp., 56, 70-78 (1997)) a bipolární choroby (viz Chen a kol., J. Neurochemistry, 72, 1327-1330 (1999)), Rovněž bylo zjištěno, že GSK-33 je zapojen do blokování včasné imunitní odpovědi na aktivaci genu přes NF-AR a regulace apoptózy (viz Beals a kol., Science, 275, 1930-33 (1997) a Pap
M. a kol., J. Biochem. 273, 19929-19932, (1998)). Nedávno bylo také zjištěno, že GSK-33 je požadován pro odpověď přežití zprostředkovanou NF-κΒ v TNF-α cestě přenosu signálu obsažené v pro-zánětlivé odpovědi na infekci (Hoeflich a kol., Nátuře, 406, 86-90 (2000)).
Dále je rovněž známo, že GSK-33 reguluje degradaci proteinu (β-katenin), který reguluje aktivitu TCF rodiny transkripčních faktorů (viz Dále , T. C., Biochem. J. 329, 209-223 (1998); Clevers, H. & van de Wetering, M., Trends in Genetics 13, 485-489 (1997); Staal, F.J.T. a kol., International Immunology 11, 317-323 (1999)). Rovněž se prokázalo, že aktivita této cesty reguluje proliferaci epitelových buněk tlustého střeva; a biochemická data a klinické genetiky prokazují, že reguluje rozvinutí rakoviny střeva.
Existuje tudíž potřeba sloučenin, které by inhibovaly GSK-3p a tím poskytnou prostředky pro boj s nemocemi, které jsou jimi vyvolány. Tento vynález tento požadavek splňuje.
Předložený vynález je veden na 3-indolyí-4-fenyl-lH-pyrroI-2,5-dionové deriváty, které inhibují glykogen-syntázu kinázu-33 (GSK-33) a jsou tudíž vhodné pro léčení savců, majících chorobné stavy, které jsou jimi zprostředkovány, jako je diabetes, Alzheimerova nemoc, bipolární choroba, ischémie, traumatické poškození mozku a imunitní nedostatečnost.
Dále přihlašovatel zjistil, že inhibice GSK-33 aktivity redukuje hladinu CD4+ T-helper 2 buněk (Th2), které produkují cytokiny, jako je IL-4, IL-5, IL-13, a promotují produkci IgE a eozinofílní diferenciaci. To je důležitý objev, protože • · • · bylo stanoveno, že Th2 specifické cytokiny hrají klíčovou roli v patogenesi chorob, jako jsou alergie a astma. Proto sloučeniny podle předloženého vynálezu rovněž poskytují nový přístup k léčení alergií a astmatu.
Podstata vynálezu:
Z prvního hlediska se předložený vynález týká 3-indolyl-4-fenyl-lH-pyrrol-2,5-dionových derivátů reprezentovaných vzorcem (I),
kde
R a R nezávisle označuje vodík, alkyl, halogen, haloalkyl, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino, nebo dialkylamino;
R3 znamená vodík, alkyl, cykloalkyl, heteroalkyl, -COR7 (kde R7 je vodík nebo alkyl), nebo fenyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, haloalkylu, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino, a dialkylamino;
R4 a R5 nezávisle označují vodík, alkyl, halogen, haloalkyl, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino nebo dialkylamino;
R6 je heteroalkyl, heterocyklyl, heterocyklylalkyl, heteroalkylsubstituovaný heterocyklyl, heteroalkylsubstituovaný cykloalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, -OR8, -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), -NR9R10 (kde R9 je vodík nebo alkyl a R10 je heterosubstituovaný cykloalkyl, heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo • · • ·
heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-Z (kde X je kovalentní vazba, -Ο-, -NH-, nebo -S(O)ni- , kde nl je celé číslo od 0 do 2, Y je -Ο-, -NH-, nebo -S- a Z je heteroalkyl nebo SiRn(R12)(R13), kde R11, R12, a R13 jsou nezávisle vodík nebo alkyl) nebo R6 společně s R4 tvoří methylendioxy nebo ethylendioxy-skupinu, když jsou navzájem sousedící;
nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.
Rovněž výhodné sloučeniny, které se odkazují na následující podle (i), kterými jsou sloučeniny , jak definováno výše [tyto budou uvedeny v následujícím podle (A)j,
Kde: R3 znamená vodík, alkyl, cykloalkyl, heteroalkyl, -COR7 (kde R7 je vodík nebo alkyl), nebo fenyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, haloalkylu, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino, a dialkyíamino; a
R6 je heteroalkyl, heterocyklyl, heterocyklylalkyl, heteroalkylsubstituovaný heterocyklyl, heteroalkylsubstituovaný cykloalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, -OR8, -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od O do 2; a R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), -NR9R10 (kde R9 je vodík nebo alkyl a R10 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), nebo
-X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -Ο-, -NH-, nebo -S(O)ni- , kde nl je celé číslo od O do 2, a Y je -Ο-, -NH-, nebo -S-) nebo R6 společně s R4 tvoří methylendioxy nebo ethylendioxy-skupinu, když jsou navzájem sousedící.
Dalšími výhodnými sloučeninami jsou:
(ii) Sloučenina (i), kde R3 je alkyl.
(iii) Sloučenina (ii), kde R3 je methyl.
(iv) Sloučenina (i), kde R6 je na 3-pozici fenylového kruhu a je heteroalkyl, heterocyklylakyl, -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
(v) Sloučenina (iv), kde R6 je (RS), (R) nebo (S)-2,3-dihydroxypropyloxy, 3hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3-aminopropyl oxy, 2-morfolin-4-ylethyloxy, nebo (RS), (R) nebo (S) 2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-ylmethoxy.
• · <· ···· φ φ (vi) Sloučenina (iv), kde R6 je (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropylamino, 2hydroxyethylamino, 3-hydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (S)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-1,3-dioxolan-4-ylmethylamino, 2-hydroxy-1 -hydroxymethylethylamino,
3-hydroxybutylamino nebo tetrahydropyran-4-ylamino.
(vii) Sloučenina (i), kde R1 a R2 jsou vodík; R4 a R5 jsou na 2 a 6 pozicích fenyl ového kruhu a jsou nezávisle na sobě vodík nebo halogen; a R6 je na 3-pozici fenylového kruhu.
(viii) Sloučenina (vii), kde R3 je vodík nebo alkyl, R6 je -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(aíkylen)-Y-heteroalkyí (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
(ix) Sloučenina (viii), kde R3 je methyl a R4 a R5 jsou nezávisle navzájem vodík, chlor nebo fluor.
(x) Sloučenina (ix), kde R4 a R5 jsou vodík.
(xi) Sloučenina (x), kde R6 je (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropyloxy, 3hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3-aminopropyloxy, 2-morfolin-4-ylethyloxy, nebo (RS), (R) nebo (S)- 2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethoxy.
(xii) Sloučenina (x), kde R6 je (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropylamino, 2hydroxyethylamino, 3-hydroxypropylamíno, (RS), (R) nebo (S)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-ylmethylamino, 2-hydroxy-1 -hydroxymethylethylamino, 3-hydroxybutylamino nebo tetrahydropyran-4-ylamino.
(xiii) Sloučenina (i), kde R1 je na 5-pozici indolového kruhu a je halogen; R2 je vodík; R4 a R5 jsou na 2 a 6 pozicích fenylového kruhu a jsou nezávisle navzájem vodík nebo halogen; R6 je na 3-pozici fenylového kruhu.
(xiv) Sloučenina (xiii), kde R3 je vodík nebo alkyl, R6 je -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
(xv) Sloučenina (xiv), kde R1 je chlor nebo fluor; Ř3 je methyl; R4 a R5 jsou nezávisle navzájem vodík, chlor nebo fluor.
(xvi) Sloučenina (xv), kde R6 je (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropyloxy, 3hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3-aminopropyloxy, 2-morfolin-4-ylethyloxy, nebo (RS), (R) nebo (2()-2,2-dímethyl-l,3-dioxoIan-4-ylmethoxy.
• · (xvii) Sloučenina (xv), kde R6 je (RS), (R) nebo (S)-2,3-dihydroxypropylamino, 2hydroxyethylafnino, 3-hydroxypropylámino, (RS), (R) nebo (S/-2,2-dimethyl-l,3~ dioxolan-4-ylmethylamino, 2-hydroxy-1 -hydroxymethylethylamino, 3-hydroxybutylamino nebo tetrahydropyran-4-y lamino.
(xviii) Sloučenina A nebo (i), kde R6 je na 2,3, nebo 4-pozici fenylového kruhu.
(xix) Sloučenina podle kteréhokoliv z A nebo (i) a (xviii), kde R6 je na 3-pozici fenylového kruhu.
(xx) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i), (xviii) a (xix), kde R6 je heteroalkyl, heterocyklylalkyl, -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba,
-O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
(xxi) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xx), kde R4 a T5 jsou na 2 a 6 pozicích fenylového kruhu a jsou nezávisle navzájem vodík nebo halogen, (xvii) Sloučenina podle kteréhokoliv z (a), (i) a (xviii) až (xxi), kde R1 a R2 jsou vodík.
(xxiii) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i), a (xviii) až (xxi), kde R1 je na 5pozici indoiového kruhu a je halogen a R je vodík.
(xxiv) Sloučenina podle kteréhokoliv z (a) a (i), (xviii) až (xxiii), kde R3 je vodík nebo alkyl, R6 je -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
(xxv) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xxiv), kde R3 je vodík nebo alkyl, R6 je -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH). (xxvi) Sloučeniha podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xxv), kde R3 je alkyl, (xxvii) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xxvi), kde R3 je methyl.
(xxviii) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xxvii), kde R4 a R5 jsou nezávisle navzájem vodík, chlor,fluor.
(xxix) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xxviii), kde R4 a R5 jsou vodík.
• · • · · · · ·· · · • · · · « · • · · · · ·· * (xxx) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xxix), kde R6 je (RS), (R) nebo (5j 2,3-dihydroxypropyloxy, 3-hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3aminopropyloxy, 2-morfolin-4-ylethyloxy, nebo (RS), (R) nebo (S) 2,2-dimethyl1,3-dioxolan-4-ylmethoxy.
(xxxi) Sloučenina podle kteréhokoliv z (A), (i) a (xviii) až (xxix), kde R6 je (RS), (R) nebo (5) 2,3-dihydroxypropylamino, 2-hydroxyethylamino, 3-hydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (S) 2,2-dímethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylamino, 2hydroxy-l-hydroxymethylethylaraino, 3-hydroxybutylamino nebo tetrahydropyran4-ylamino.
Sloučeniny podle předloženého vynález vykazují překvapivě účinnou aktivitu proti GSK-30. Předpokládá se, že zlepšená účinnóst je díky jejich zvýšené biodostupnosti a zvýšené metaboíické stabilitě.
Z druhého hlediska je tento vynález veden na léčivo zahrnující terapeuticky účinné tnnožství sloučeniny vzorce (i) a farmaceuticky přijatelný excipient. Zvláště je výše uvedené léčivo vhodné pro léčení GSK-3p zprostředkovaných nemocí zvolených z Alzheimerovy nemoci, obezity, diabetů, arteriosklerotické kardiovaskulární choroby, polycystického ovariálního syndromu X, ischemické choroby, traumatického poškození mozku, bipolární choroby, imunonedostatečnosti, rakoviny, alergie a astmatu u savců, a zejména je vhodné pro léčení astmatu.
Z třetího hlediska poskytuje vynález způsob přípravy sloučenin vzorce I.
Ze čtvrtého hlediska je vynález veden na použití sloučeniny vzorce I pro výrobu léčiv, zahrnující jednu nebo více sloučenin vzorce I pro léčení GSK-3P zprostředkovaných nemocí zvolených z Alzheimerovy nemoci, obezity, diabetů, arteriosklerotické kardiovaskulární choroby, pdlycystického ovariálního syndromu X, ischemické choroby, traumatického poškození mozku, bipolární choroby, imunonedostatečnosti, rakoviny, alergie a astmatu u savců, a zejména astmatu.
• ·
Z pátého hlediska je tento vynález veden na použití inhibitoru GSK-3 β pro léčení nemoci charakterizované přebytkem CD4+Th2 cytokinů, jako je astma, alergie nebo alergická rýma, zejména astma.
Z šestého hlediska je tento vynález veden na použití inhibitoru Θ8Κ-3β pro léčení nemoci charakterizované přebytkem IgE produkce, jako je astma, alergie nebo alergická rýma, zejména astma.
Přehled obrázků na výkresech:
Obrázek 1 ukazuje korelaci mezi GSK inhibici sloučeninami podle vynálezu a hladinou β-kateninu v Juřkat T-buňkách.
Obrázek 2A ukazuje expresi TCF7 transkriptů v mRNA zB10.D2 buněk ve vztahu k témuž v Balb/C T-buňkách.
Obrázek 2B ukazuje indukci TCF-7 interferonem-gamma.
Pokud nebude uvedeno jinak, mají termíny použité v popisu a nárocích významy uvedené dále:
„Alkyl“ znamená nasycený jednovazný lineární uhlovodíkový radikál mající od jednoho do šesti atomů uhlíku nebo větvený nasycený jednovazný uhlovodíkový radikál se třemi až šesti atomy uhlíku, jako je methyl, ethyl, propyl, 2-propyl, nbutyl, iso-butyl, terc-butyl, pentyl, a podobné.
„Alkylen“ označuje dvojvazný lineární nasycený radikál z jednoho až šesti atomů uhlíku nebo větvený nasycený dvojvazný uhlovodíkový radikál, mající od tří do šesti atomů uhlíku, jako je methylen, ethylen, 2,2-dimethylen, propylen, 2methylpropylen, butyíen, pentylen a podobné.
„Alkoxy“ znamená radikál -OR, kde R je alkyl, jak je zde definován, např. methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy a podobné.
„Alkylthio“ znamená radikál -SR, kde R je alkyl jak je definován výše, např.
methylthio, ethylthio, propylthio, butylthio a podobné.
„Acyl“ označuje radikál -C(O)R, kde R je vodík, alkyl, cykloalkyl, cykloalkylalkyl, fenyl nebo fenylalkyl, kde alkyl, cykloalkyl, cykloalkyl alkyl a fenylalkyl jsou zde definovány. Reprezentativní příklady zahrnují, ale neomezují se na ně, formyl, acetyl, cyklohexylkarbonyl, cyklohexylmethylkarbonyl, benzoyl, benzylkarbonyl a podobné.
„Acylamino“ označuje radikál -NR'C(O)R, kde R' je vodík nebo alkyl, a R je vodík, alkyl, cykloalkyl, cykloalkylalkyl, fenyl nebo fenylalkyl, kde alkyl, cykloalkyl, cykloalkylalkyl a fenylalkyl jsou zde definovány. Reprezentativní příklady zahrnují, ale neomezují se na ně, formylamino, acety lamino, cyklohexylkarbonylamino, cyklohexylmethyl-karbonylamino, benzoylamino, benzylkarbonylamino a podobné.
„Cykloalkyl“ znamená jednovazný nasycený cyklický uhlovodíkový radikál ze tří až sedmi uhlíků v kruhu, jako je cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, 4methylcyklohexyl a podobné.
„Cykloalkylalkyl“ znamená radikál -RaRb -, kde Ra je alkylenová skupina, jak je zde definována, a Rb je cykloalkylová skupina, jak je zde definována, jako cyklohexyl methyl a podobné.
„Dialkylamino“ znamená radikál -NRR', kde R a R'nezávisle reprezentují alkyl, cykloalkyl nebo cykloalkylalkylovou skupinu, jak je zde definována. Reprezentativní příklady zahrnuji, ale neomezují se na ně, dimethylamino, di(l* methylethyl)amino, methylethylamino, cyklohexyl)(methy)amino, (cyklohexyl)(ethyl)amino, (cyklohexyl)(propyl)amino, (cyklohexylmethyl)(methyl)amino, (cyklohexylmethyl)(ethyl)amino a podobné..
„Halogen“ znamená fluoro, bromo, chloro nebo jodo, přednostně ftuoro nebo cbloro.
·· ·· ·· * . ·♦ · • · · · · ··· · ·· ; ; ···· ··♦· . · ··· · · · · · ····
ΊΛ ··· · · · ♦·· ·· ···· ·· ··· ·· * „Halogenalkyl“ znamená alkyl substituovaný jedním nebo více stejnými nebo různými halogenovými atomy, jako -CH2C1, -CF3, -CH2CF3, -CH2CCI3 a podobné.
„Heteroalkyl“ znamená alkylový radikál, jak je zde definován, kde jeden, dva nebo tři vodíkové atomy byl nahrazeny se substituentem nezávisle zvoleným ze skupiny sestávající z -ORa, -NRbRc a -S(O)nRd (kde n je celé číslo od 0 do 2), s tím významem, že místo navázání heteroalkylového radikálu je přes uhlíkový atoňi, přičemž Ra je vodík, acyl, alkyl, cykloalkyl nebo cykloalkylalkyl; Rb a Rc jsou nezávisle navzájem vodík, acyl, alkyl, cykloalkyl nebo cykloalkylalkyl; a kde n je 0, Rd je vodík, alkyl, cykloalkyl nebo cykloalkylalkyl, a kde n je 1 nebo 2, Rd je alkyl, cykloalkyl, cykloalkylalkyl, amino, acylamino, monoalkylamino, nebo dialkylamino. Reprezentativní příklady zahrnují, ale neomezují se na ně, 2hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 3-hydroxy-1-methylpropyl, 2-hydroxy-1-hydroxymethylethyl, 2,3-dihydroxypropyl, 1-hydroxymethylethyl, 3-hydroxybutyl, 2,3dihydroxybutyl, 2-hydroxy-1-methylpropyl, 2-aminoethyl, 3-aminopropyl, 2methylsulfonylethyl, amino-sUlfonylmethyl, aminosulfonylethyl, aminosulfonylpropyí, methylaminosulfonylmethyl, methyl^minosulfonylethyl, methylaminosulfonylpropyl, a podobné.
„Hydroxyalkyl“ znamená alkylový radikál, jak je zde definován, substituovaný jednou nebo dvěma, přednostně jednou, dvěma nebo třemi hydroxyskupinami, s tíhl, že stejné uhlíkové atomy nenesou více než jednu hydroxyskupinu. Reprezentativní vzorky zahrnují, ale neomezují se na ně, 2-hydroxyethyl,
2- hydroxypropyl, 3-hydroxypropyl, 2-hydroxybutyl, 3-hydroxybutyl, 4hydroxybutyl, 2,3-díhydroxypropyl, l-(hydroxymethyl)-2-methylpropyl, 2-hydroxy1-hydroxymethylethyl, 2,3-dihydroxybutyl, 3,4-dihydroxybutyI a 2-(hydroxymethyl)3- hydroxypropyl, přednostně 2-hydroxyethyl, 2,3-dihydroxypropyl a 1(hydroxymethyl)-2-hydroxyethyl.
Dále, jak se zde používá, termín „hydroxyalkyl“ se používá pro definování podsouboru heteroalkyl o vých skupin.
„Heterosubstítuovaný cykloalkyl“označuje cykloalkylový radikál, jak je zde definován, kde jeden, dva nebo tři vodíkové atomy v cykloalkylovém radikálu byly nahrazeny substituentem nezávisle zvoleným ze skupiny sestávající z hydroxy, • · ii ........
alkoxy, amino, acylamino, monoalkylamino, dialkylamino, nebo -S(O)nR (kde n je celé číslo od 0 do 2) takové, že když n je 0, R je vodík, alkyl, cykloalkyl nebo cykloalkylalkyl, a kde n je 1 nebo 2, R je alkyl, cykloalkyl, cykloalkylalkyl, amino, acylamino, monoalkylamino nebo dialkylamino. Reprezentativní příklady zahrnují, ale neomezují se ňa ně, 2-, 3-, nebo 4-hydroxycyklohexyl, 2-, 3- nebo 4aminocyklohexyl, 2-, 3- nebo 4-sulfonamidocyklohexyl a podobné, přednostně 4hydroxycyklohexyl, 2-aminocyklohexyl, 4-sulfonamidocyklohexyl.
„„Heteroalkylsubstítuovaný cykloalkyl“označuje cykloalkylový radikál, jak je zde definován, kde jeden, dva nebo tři vodíkové atomy v cykloalkylovém radikálu byly nahrazeny heteroalkylovou skupinou, jak je zde definována, s tím, že heteroalkylový radikál je připojen na cykloalkylový radikál přes vazbu uhlík-uhlík. Reprezentativní příklady zahrnují, ale neomezují se na ně, 1-hydroxy methylcyklopentyl, 2-hydroxymethylcyklohexyl a podobné.
„Heteroaryl“ znamená jednovazný monocyklický nebo bicyklický radikál s 5 až 12 atomy v kruhu, mající alespoň jeden aromatický kruh obsahující jeden, dva nebo tři heteroatomy v kruhu, vybrané z dusíku, kyslíku nebo síry, ostatní atomy v kruhu jsou C, s tím, že místo připojení heteroárylového radikálu je na aromatickém kruhu. Heteroarylový kruh je volitelně substituován nezávisle jedním nebo více, přednostně jedním nebo dvěma substituenty, zvolenými z alkylu, haloalkylu, heteroalkylu, hydroxy, alkoxy, halogenu, nitro, kyano. Konkrétněji termín heteroaryl zahrnuje, ale neomezuje se na ně, pyridyl, furanyl, thienyl, thiazolyl, isothiazolyl, triazolyl, imidazolyl, isoxazolyl, pyrrolyl, pyrazolyl, pyrimidinyl, benzofuranyl, tetrahydrobenzofuranyl, isobenzofuranyl, benzothiazolyl, benzoisothiazolyl, benzotriazolyl, indolyl, isoindolyl, benzoxazolyl, chinolyl, tetrahydrochinolinyl, isochinolinyl, benzimidazolyl, benzisoxazolyl nebo benzothienyl a jejich deriváty.
„Heteroaralkyl“ znamená radikál vzorce -RaRb, kde Ra je alkylenová skupina, jak je zde definována, a Rb je heteroarylová skupina, jak je zde definována, např. pyridin-3-ylmethyl, imidazolylmethyl, imidazolylethyl, pyridinylethyl, 3-(benzofuran-2-yl)propyl a podobné.
• · i2 ........
„Heterocyklyl“ znamená nasycený cyklický radikál s pěti až osmí atomy v kruhu, v nichž jeden nebo dva atomy v kruhu jsou heteroatomy zvolené z NR (kde R je nezávisle vodík, alkyl, nebo heteroalkyl), O nebo S(O)n (kde n je celé číslo od 0 do 2), zbývající atomy v kruhu jsou C, kde jeden nebo dva C atomy mohou být volitelně nahrazeny karbonylovou skupinou. Heterocyklylový kruh může být volitelně substituován nezávisle jedním, dvěma nebo třemi substituenty, zvolenými z alkylu, haloalkylu, heteroalkylu, halogenu, nitro, kyano, hydroxy, alkoxy, amino, monoalkylamino, dialkyíamino, -COR (kde R je alkyl). Konkrétněji zahrnuje termín heterocyklyl, ale neomezuje se na ně, tetrahydropyranyl, 2,2-dímethyi-l,3díoxolan, 2,2-dimethyl-l,3-dioxan-5-yí, piperidino, N-methylpiperidin-3-yl, píperazino, N-methylpyrrolidin-3-yl, 3-pyrrolidino, morfolin-4-yl, mórfolino, thiomorfolino, thiomorfblino-l-oxid, thiomorfolino 1,1-dioxid, pyrrolinyl, imidazolinyl a jejich deriváty.
„Heteroalkylsubstituovaný heterocyklyl“ označuje heterocyklylový radikál jak je zde definován, kde jeden, dva nebo tři Vodíkové atomy v heterocyklylovém radikálu byly nahrazeny heteroalkylovou skupinou s tím, že heteroalkylový radikál je připojen na heterocyklylový radikál přes vazbu uhlík-uhlík. Reprezentativní příklady zahrnují, ale neomezují se na ně, 4-hydroxy-methylpiperidin-l-yI, 4hydroxymethylpiperazin-1 -yl, 4-hydroxyethylpíperidin-1 -yl, 4-hydroxyethylpiperaziň-l-yl a podobné.
„Heterocyklylalkyl“ označuje radikál vzorce -RaRb, kde R8 je alkylenová skupina, jak je zde definována, a Rb je heterocyklylová skupina, jak je zde definována, např. tetrahydropyran-2-ylmethyl, 4-methylpiperazin-l-ylethyl, 3piperidinylmethyl, 2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yímeťhyl, benzyl, cyklohexylmethyl, 2-morfolin-4-yíethyl a podobné.
„Monoalkylamino“ znamená radikál -NHR, kde R je alkylová, cykloalkylová nebo cykloalkylalkylová skupina, jak je definována výše, např, methylamino, (l-methylethyl)amino, cyklohexy lamino, cyklohexylmethylamino, cyklohexylethylamino, 2-morfolin-4-ylethyí a podobné.
4 • · „Volitelný“ nebo „volitelně, případně“ znamená, že následně popisovaná událost nebo okolnost může, ale nemusí nastat, a že popis zahrnuje případy, kde se událost nebo okolposti vyskytnou, a případy, kde tomu tak není. Například „heterocykloskupina volitelně mono- nebo di-substituoVaná alkylovou skupinou“ znamená, že alkyl může ale nemusí být přítomen, a popis zahrnuje situace, kde heterocykloskupina je mono- nebo di-substituovaná alkylovou skupinou a situace, kde heterocykloskupina není substituována alkylovou skupinou.
„Feny 1 alkyl“ znamená radikál vzorce -RaRb, kde Ra je alkylenová skupina a Rb je fenylová skupina, jak je zde definována, např. benzyl a podobné.
„Hydroxy- nebo amino-chránící skupina“ se týká těch organických skupin, uvažovaných pro chránění atomu kyslíku nebo dusíku proti nežádoucím reakcím během syntézových postupů. Vhodné kyslík a dusík chránící skupiny jsou ze stavu techniky velmi dobře známé, jako je trimethylsilyl, dimethyl-terc.butylsilyl, benzyl, benzyloxykarbonyl CBZ, terč. butoxy karbonyl (BOC), trifluoracetyl, 2-trimethylsilylethansulfonyl (SES) a podobné.Další je možno nalézt v publikaci autora T.WGreene a G.M. Wuts, Protéct ing Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, Wiley, New York, 1991 a odkazech citovaných zde.
Sloučeniny, které mají stejný molekulový vzorec ale liší se ve svých vlastnostech nebo sekvenci vazeb svých atomů nebo v uspořádání svých atomů v prostoru jsou označovány „isomery“. Isomery, které se liší uspořádáním svých atomů v prostoru, jsou označovány „stereoisomery“. Stereoisomery, které nejsou vzájemnými zrcadlovými obrazy, jsou označovány „diastereoisomery“, a stereoisomery, které jsou nepřekrývatelnými zrcadlovými obrazy jsou označovány „enantiomery“. Když má sloučenina asymetrické centrum, například je vázána na čtyři různé skupiny, je možná dvojice enantiomerů. Enantiomer může být charakterizován absolutní konfigurací svého asymetrického centra a je popsán jako R- nebo S- podle sekvenčního pravidla autorů Cahn a Prelog, nebo způsobem, v němž molekula rotuje v rovině polarizovaného světla a označuje se jako pravotočivá nebo levotočivá (tedy jako (+) nebo (i)-isomery). Chirální sloučenina může existovat jako buď individuální enantiomer nebo jako jejich směs. Směs obsahující stejné poměry enantiomerů je označována „racemická směs“.
9
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou vykazovat jedno nebo více chirálních center; takové sloučeniny tedy mohou být připraveny jako individuální (R)- nebo (S)- stereoisomery nebo jejich směsi. Například pokud R6 substituent ve sloučenině vzorce (I) je 2-hydroxyethyl, potom uhlík, na nějž je hydroxyskupina • 9
• to • to to » ·· · · • · • to navázána je asymetrické centrum a tudíž může sloučenina vzorce (I) existovat jako (R)- nebo (S)-sterepisomer. Pokud nebude uvedeno jinak, popis a označování konkrétní sloučeniny v popisu a nárocích je předpokládáno, že zahrnuje oba individuální enantiomery a jejich směsi, racemické nebo jiné. Způsoby stanovení stereochemie a oddělování stereoisomerů jsou velmi dobře známé ze stavu techniky (viz diskusi v kapitole 3 publikace “Advanced Organic Chemistry“, 4.vydání
J.March, John Wiley a synové, New York, 1992).
„Farmaceuticky přijatelný excipienť označuje excipjent, který je vhodný pro přípravu farmaceutické kompozice, která je obecně bezpečná, netoxická, a ani biologicky ani jiným způsobem není nežádoucí, a zahrnuje excipient, který je přijatelný pro veterinární stejně jako humánní farmaceutické využití. „Farmaceuticky přijatelný excipient“ jak je použit v popisu a nárocích zahrnuje obé, tedy použití jednoho a více než jednoho takového excipientů.
„Farmaceuticky přijatelné soli“ sloučeniny označují soli, které jsou farmaceuticky přijatelné a které vykazují požadovanou farmakologickou účinnost mateřské sloučeniny. Tyto soli zahrnují;
(1) adiční soli s kyselinami, vytvořené s anorganickými kyselinami jako je kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina dusičná, kyselina fosforečná a pod.; nebo vytvořené s organickými kyselinami, jako je kyselina octová, kyselina propionová, kyselina hexanová, kyselina cyklopentanpropionová, glykolová kyselina, kyselina pyrohroznová, kyselina mléčná, kyselina malonová, kyselina jantarová, kyselina jablečná, kyselina fumarová, kyselina vinná, kyselina citrónová, kyselina benzoová, kyselina 3-(4hydroxybenzoyl)benžoová, kyselina skořicová, kyselina mandlová, kyselina methansulfonová, kyselina ethansuífonová, 1,2-ethan-disulfonová, kyselina 2hydroxyethansulfonová, kyselina benzensulfonová, kyselina 4-chlorbenzensulfonová, kyselina 2-naftalensulfonová, kyselina 4-toluensulfonová,
· 9*99
9 9 9 9
9· 9999 99 9
9 9 9 9
9999
9 9
9 kyselina kafrosulfonová, kyselina 3-fenylpropíonová, kyselina trimethyloctová, terč. butyl octová kyyelina, kyselina laurylsírová, kyselina glukonová, kyselina glutamová, kyselina hydroxynaftoová, kyselina salícylová, kyselina stearová, kyselina mukonová, a podobné; nebo (2) solí vytvořené, když acídický proton přítomný v mateřské sloučenině je bud’ nahrazen kovovým iontem, např. iontem alkalického kovu, iontem kovu alkalické zeminy, nebo hlinitým iontem; nebo koordináty s organickými nebo anorganickými bázemi, jako je diethanolamin, ethanolamin, N-methylglukamin, triethanolamin, trimethamin a podobné.
Sloučeniny vzorce (I) mohou působit jako proléčiva. Prolék, proléčivo označuje jakoukoliv sloučeninu, která uvolňuje aktivní mateřské léčivo vzorce (I) in vivo, když je toto proléčivo podáváno savčímu subjektu. Proléčiva sloučeniny vzorce (I) jsou připravena modifikací funkčních skupin přítomných ve sloučenině vzorce (I) takovým způsobem, že modifikace mohou být štěpeny in vivo, aby se uvolnila mateřská sloučenina. Proléčiva zahrnují sloučeniny vzorce (I), kde je hydroxy, amino, nebo sulfhydrylová skupina ve sloučenině (I) vázána na jakoukoliv skupinu, která může být štěpena in vivo pro generování volné hydroxylové, aminové nebo sulfhydrylové skupiny. Příklady proléčiv zahrnují, ale neomezují se na ně, estery (jako acetáty, formiáty, deriváty benzoátů), karbamáty (jako N,Ndimethylamino-karbonyl) hydroxy-funkčních skupin ve sloučeninách vzorce (I) a podobně.
„Léčení“ nebo „léčba“ nemoci zahrnuje:
(1) prevenci nemoci, tedy zajištění, že se klinické symptomy nemoci nevyvinou u savce, který může být vystaven stavu nebo být náchylný k nemoci, ale doposud neprodělal nebo nevykazuje symptomy nemoci, (2) inhibici nemoci, tedy zabrzdění nebo redukování rozvoje choroby nebo jejích klinických symptomů, nebo (3) ulehčení od nemoci, tedy zajištění regrese nemoci nebo jejích klinických symptomů.
„Terapeuticky účinné množství“ označuje množství sloučeniny, které, když je podáváno savci pro léčení nemoci, je postačující pro zajištění léčivého účinku na tuto nemoc. „Terapeuticky účinné množství“ se bude měnit v závislosti na sloučenině, na nemoci a závažnosti léčené nemoci, věku, hmotnosti atd. léčeného savce.
Označování a číslování sloučeni podle vynálezu je doloženo dále:
Φ Φ · φφ φ φφφφ φ φ φ φφ φ φ φφ φφφφ • φ φ φφφ Φ·· φφ φφφφ φφ φφφ φφ φ
Nomenklatura použitá v této přihlášce je obecně založena na doporučeních IUPAC. Jelikož by ale striktní dodržování těchto doporučení mohlo vést k názvům, která by se podstatně měnila při změně pouze jediného substituentu, jsou sloučeniny označovány formou, která zachovává stejnost nomenklatury pro základní strukturu molekuly. Například:
sloučenina vzorce (I), kde R1, R2, R4 a R5 jsou vodík, R3 je methyl, R6 je 2hydroxyethylamino a je meta k uhlíků vážícímu fenylový kruh na pyrrol—2,5dionový kruh je označena 3-(1-methylindolyl)-4-[3-(2-hydroxy-ethylaminofenyi)lH-pyrrol-2,5-dion.
sloučenina vzorce (I), kde R1, R2, R4 a R5 jsou vodík, R3 je methyl, R6 je 2hydroxyethylamino a je para k uhlíků vážícímu fenylový kruh na pyrrol—2,5dioriový kruh je označena 3-(l-methylindolyl)-4-[4-(2-hydroxy-ethylaminofenyl)lH-pyrrol-2,5-dion.
Reprezentativní sloučeniny vynálezu jsou následující :
I. Sloučeniny vzorce (I), ), kde R1, R2, R4 a R5 jsou vodík, R3 je methyl, R6 je definován dále, jsou :
í Slouč. 1 i, í R6 T.tání °C Hmot. spek. Př.
• 14 2,3-dihydroxypropyloxy 245-247.1 392 NT 1
! ; i-2 1 : ť i --i- 2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-ylmethyloxy 220.8-221.2 432 NT 2
II. Sloučeniny vzorce (I), ), kde R1, R2, R4 a R5 jsou vodík, R3 je methyl, R6 je definován dále, jsou :
Slouč. č. R6 T.tání °C Hmot. spek. Př.
H-l 2-aminoethyloxy(*) 182.4-187 362 kT 6
Π-2 3-aminopropyloxy(*) 375 VT 5
II-3 . • 2(7?),3-dihydroxyprop yloxy 177.7-178 392 NT 2
Π-4,. 2-morpholin-4-ylethyloxy 197.7-199 431 NT 3.
H-5 2(S),3-dihydroxy-:propyloxy 176.9-178.1 392 M* 2
H-6 (7?)-2,2-dimethyl-l ,3dioxolan-4-ylmethyloxy 432 M+ 1
H-7 (S)-2,2-dimethyl-1,3' dioxolan-4-ylmethyloxy 186.8-187.4 432 M+ 1
n-s (7?S)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-yl-methylaniino 431 M+ 7
H-9 2,3-dihydroxy-propylanůno 160-163.5 392 (M+H)+ 7
H-10 2,2-dimethyl-l ,3-dioxan-5ylamino 201-203 431 M1 9
n-n (7?S)-2-hýdroxy-1hydroxymethylethylamino 97.5-101 391 M+ 10
H-12 (7?S)-3-hydroxybutylamino 389 M+ 14
Π-13 (7?5)-2-hydroxy-1methylpropylamino 389 M+ 15
Π-13Α· tetrahydropyran-4-ylamino 401 8
H-14 imidazol-2-ylmethylamino 397 M+ 11
H-15 morpholin-4-yl(*) 205.3-212.6 388 NT 4
Π-16 3-(tórt-butyl-dimethylsilyloxy)propylamino 58-65 490 (M+H)+ 12
Π-17 2-(řerr-butyl-diphenylsilyloxy)ethylamirío 500 (M+H)+ 12
H-18 3-hydroxypropylamino(*) 180-192 376 (M+H)+ 13
Π-19 2-hydroxyethylamino(*) 170.3-170.6 362 (M+H)+ 13
H-20 ' 3-hydroxypropyloxy 150.2-152.6 377 (M+H)+ 13
·· · · · · · · · · • · · ·· · · ·· · ·· ·
SlouČ. č. R6 T.tání °c Hmot. spek. Př.
Π-21 3-(tórr-butyl-dimethylsilyloxy)propyloxy 151.2-151.7 491 (M+H)+ 6
; H-22 (2?S)-l-hydroxymethylethylamino 203.1-205.8 376 (M+H)+ 15
H-23 ' 3-hydroxy-lmethyípropylamino 389 M* 14·
Π-24 (2?S)-bis(2,3-dihydroxypropyl)amino 466 (M+H)+ 7
Π-25 pyrrolidin-1-yl 372 M* 4
H-26 (5)-2,3dihydroxypropylamino 392(M+H)+ 7
r 11-27 2(2?),3-dihydroxypropylamino(:|:) 392 (M+H)+ 7
Π-28 . 4-hydroxycyclohexylamino 415 M* 8
H-29 4-hydroxypiperidin-l-yl 136.0-141.0 402 (M+H)+ 23
Π-30 (2?)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-yl-methylsulfanyl 448 NT 18
Π-31 dihydroxypropylsulfanyl 408 NT 21
Π-32 (2?)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-yl-methylsulfinyl 465 (M+H)+ 19
Π-33 W-2,3dihydroxypropylsulfinyl 425 (M+H)+ 21
Π-34 (J?)-2,2-dimethyl-1,3dioxolan-4-yl-methylsulfonyl 481 (M+H)+ 20
Π-35 W-2,3dihydroxypropylsulfonyl a 411 (M+H)+ 21
hydrochlorid
• · · ··· · ·
III. Sloučeniny vzorce (I), ), kde
R2, R4 a R5 jsou vodík, R1, R3 a R6 jsou definovány dále, jsou :
Slouč. R1 i R3 R6 T.tání °C Hmot. spektr. Př.
ΙΠ-1 chloro methyl (RS)-2,3dihydroxypropylamino 224.5-225.7 426 (M+H)+ 16
m-2 fluoro methyl S-aminopropyloxy1*’ 223.2-225.0 410 (M+H)+ 17
m-3 H H 2-moiphoIin-4-yl-ethyloxy 417 (M+H)+ <» 0
m-4 chloro methyl (R)-2,3-dihydroxypropyloxy 427 (M+H)* 24
m-5 fluoro methyl (R)-2,3-dihydroxypropyloxy 411 (M+H)* 24
HI-6 fluoro 3-hydroxypropyl (ftS)-2,3-dihydroxypropylamino 454 (M+H)* 22
ΠΙ-7 methoxy methyl 2,3-dihydroxy-propylamino 421 25
ΪΠ-8 methyl methyl . 2,3-dihydroxy-propylamino 405 25
ΠΊ-9 isopropoxy methyl 2,3-dihydroxy-propylamino 449 26
hydrochlorid • · · • ·· · ·
IV. Sloučeniny vzorce (I), ), kde R1, R2, R4 a R5 jsou vodík, R3 je methyl, R6 je definován dále, jsou ;
Slouč. R6 T.tání °C Hmot.spek. Př.
IV-1 ; (2?)-2,2rdimethyl-l,3dioxolan-4-yl-methyloxy 432 λΤ 1
IV-2 (R5)-2,3-dihydroxypropylamino 212-213.5 7
IV-3 • (RS)-2,2-dimethyl-1,3dioxolan-4-yl-methylamino 85-87.8 7
IV-4 3-hydroxybutylamino 58-61.5 389 M* 13
IV-5 (RS)-l-methyl-2hydroxyethylamino 375 15
IV-6 2(R),3-dihydroxypropyloxy 220.3-222.7 392 M* 1
V. Další sloučeniny vzorce (I),), kde pouze jedno z R4 - R6 je vodík, jsou:
3-(l-methyl-indol-3-yl)-4-{3-((R)-2,3-dihydroxy-propoxyí)-2-methylfenyl}-lH-pyn-ol-2,5dion (příklad 27);
3-(l-methyl-mdol-3-yl)-4-{3-((R)-2,3-dihydroxy-propoxyl)-2-nitrofenyl}-lH-pyrrol-2,5-dion (příklad 28); a
3-(l-meíhyl-indol-3-yl)-4-[5-((R)-2,3-dihydroxy-propoxy)-2-nitrofenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion (příklad 28).
• · •· 4« · ·· ft • · · · · · ···· • ft · ·· * · ·· ftftftft • · ft ··· ft·· • ft ···· ·· ··· ·· ft
Ačkoliv je v podstatě vynálezu uvedena co nej širší definice tohoto vynálezu, jsou preferovány některé sloučeniny.
(A) Preferovaná skupina sloučenin je ta, kde R3 je alkyl, přednostně methyl nebo ethyl, výhodněji methyl.
V této skupině je nejvýhodnější skupinou sloučenin ta, kde R6 je na 3- nebo 5pozici fenylového kruhu, přednostně R6 je na 3-pozici fenylového kruhu.
V této skupině je nejvýhodnější skupinou sloučenin ta, kde R6 je heteroaryl.
Jinou výhodnou skupinou sloučenin je ta, kde R6 je heterocyklylalkyl.
Ještě další výhodnou skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), přednostně (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropyloxy, 3-hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3-aminopropyloxy, 2morfolin-4-ylethyloxy, nebo (R) nebo 6SJ-2,2-dimethyI-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy, ještě výhodněji (RS), (R) nebo (3)-2,3-dihydroxypropyloxy.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), přednostně (RS), (R) nebo (5)2,3-dihydroxypropylamino, 2-hydroxyethylamino, 3-hydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (2)-2,2-dimethyl-1,3 -dioxolan-4-ylmethylamino, 2,2-dimethyl-1,3-dioxan-5-ylamino, 2-hydroxy-l-hydroxymethylethylamino, 3-hydroxybutylamino, imidazol2-ylmethylamino nebo tetrahydropyran-4-ylamino, ještě výhodněji (RS), (R) nebo (S)-2,3-dihydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (2)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylamino, 3-hydroxybutylamino, nebo 2-hydroxy-l-hydroxymethyIethylamino.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6je heterocyklyl nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -Nil·· a Y je -Onebo -NH), přednostně heterocyklyl, výhodněji morfolin-4-yl nebo pyrrolidin-l-yl.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), přednostně R6 je -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), ještě výhodněji R6 je (RS), (R) nebo (S)-2,2dimethy 1-1,3 -dioxolan-4-y lmethy 1-sulfanyl, (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropyl-sulfanyl, (RS), (R) nebo (5)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-sulfinyl, (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropylsulfinyl, (RS), (R) nebo (S)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-sulfonyl, nebo (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropylsulfonyl.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je heterosubstituovaný cyklohexylamino.
Mezi těmito výhodnými a ještě výhodnějšími skupinami sloučenin je dokonce ještě výhodnější skupina sloučenin ta, kde:
R1 a R2 jsou vodík; nebo R1 je halogen, přednostně chlor a je umístěn na 5pozici indolového kruhu a R2 je vodík; a
R4 a R5 jsou na 2- a 6-pozicích fenylového kruhu a jsou vodík, alkyl, halogen, alkoxy, kyano nebo nitro, přednostně vodík, chlor nebo fluor, ještě výhodněji R4 a R5 jsou oba vodík nebo jeden z R4 a R5 je fluor a druhý je vodík, nebo oba z R4 a R5 jsou fluor.
• · • · · · · · · · · · · φ φ φ · · · · · · · • · φ · φ · · · · · ··· · φ · · φ · φφφ φ· φφφφ φ· «φφ φφ φ (Β) Další výhodnou skupinou sloučenin je ta, kde R6 je na 3- nebo 5-pozici fenyl ového kruhu, přednostně R6 je na 3-pozici fenylového kruhu.
V této skupině je výhodnější skupinou sloučenin ta, kde R6 je heteroalkyl.
Další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je heterocyklylalkyl.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -OR8 (kde Rs je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), přednostně (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropyloxy, 3-hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3-amiriopropyIoxy, 2morfolin-4-ylethyloxy, nebo (R) nebo (5/-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy, ještě výhodněji (RS), (R) nebo (5/-2,3-dihydroxypropyloxy.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), přednostně (RS), (R) nebo (5)2,3-dihydroxypropylamino, 2-hydroxyethyíamino, 3-hydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (5/-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-ylmethylamino, 2,2-dimethyl-l,3-dioxan-5-ylamino, 2-hydr oxy-1-hydroxymethylethy lamino, 3-hydroxybutylamino, imidazol2-ylmethylamino nebo tetrahydropyran-4-ylamino, ještě výhodněji (RS), (R) nebo (5)-2,3-dihydroxypropyíamino, (RS), (R) nebo (5/-2,2-dimethyl-l,3-dioxoIan-4-yl-methylamino, 3-hydroxybutylatnino, nebo 2-hydroxy-l-hydroxy-methylethylamino.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6je heterocyklyl nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyí (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -Onebo -NH), přednostně heterocyklyl, výhodněji morfolin-4-yl nebo pyrrolidin-1-yl.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), přednostně R6 je -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), ještě výhodněji R6 je (RS), (R) nebo (5/-2,2dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-sulfanyl, (RS), (R) nebo (S)-2,3-dihydroxypropyl-sulfanyl, (RS), (R) nebo (S/-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethýl-sulfinyl, • · ·· ·* · ·· · • ·· · · * ·* · · · • · · · · · «··· • · · · · · · · · · »»· • · · ··· · · · ·· ···· ·· ··· ·· # (RS), (R) nebo (S))-2,3-dihydroxypropylsulfinyl, (RS), (R) nebo (S)-2,2-dimethy1-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-sulfonyl, nebo (RS), (R) nebo (S)-2,3-dihydroxypropylsulfonyl.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je heterosubstituovaný cyklohexylamino.
Mezi těmito výhodnými a ještě výhodnějšími skupinami sloučenin je ještě výhodnější skupina sloučenin, kde R3 je alkyl, přednostně ethyl nebo methyl, výhodněji methyl.
Mezi těmito výhodnými, výhodnějšími a dokonce ještě výhodnějšími skupinami sloučenin je zvláště výhodná skupina sloučenin ta, kde:
R a R jsou vodík; nebo R je halogen, přednostně chlor a je umístěn na 5A pozici indolového kruhu a R je vodík; a
R4 a R5 jsou na 2- a 6-pozicích fenylového kruhu a jsou vodík, alkyl, halogen, alkoxy, kyano nebo nitro, přednostně vodík, chlor nebo fluor, ještě výhodněji R4 a R5 jsou oba vodík nebo jeden z R4 a R5 je fluor a druhý je vodík, nebo oba z R4 a R5 jsou fluor.
(C) Ještě další výhodnou skupinou sloučenin je ta, kde R1 a R2 jsou na 5- a 7pozicích indolového kruhu; R4 a R5 jsou na 2- a 6-pozicích fenylového kruhu a R6 je na 3- nebo 5-pozici fenylového kruhu, přednostně R6 je na 3-pozici fenylového kruhu.
V této skupině je nejvýhodnější skupinou sloučenin ta, kde R6 je heteroalkyl.
Jinou výhodnou skupinou sloučenin je ta, kde R6 je heterocykiylalkyl.
Ještě další výhodnou skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocykiylalkyl), přednostně (RS), (R) nebo (3)-2,3-dihydroxypropyloxy, 3-hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3-aminopropyloxy, 2morfolín-4-ylethyloxy, nebo (R) nebo (7>)-2,2~di methyl-l,3-dioxolan-4-vlní ethyl oxy, ještě výhodněji (RS), (R) nebo (3)-2,3-dihydroxypropyloxy.
·· · · ·· · ·· · • · · · · · ·· · · · • · · · · * · · · · • · · · · 9 · · · · ··· • · · ··· · · « ·· «·«· »· ··· ·* *
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), přednostně (RS), (R) nebo (5)2,3-dihydroxypropylamino, 2-hydroxyethylamino, 3-hydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (SJ-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylamino, 2,2-dimethyl-l,3-dioxan-5-ylamino, 2-hy dr oxy-1-hydroxymethylethy lamino, 3-hydroxybutylamino, imidazol2-ylmethylamino nebo tetrahydropyran-4-ylamino, ještě výhodněji (RS), (R) nebo (0)-2,3-dihydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (CSý-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylamino, 3-hydroxybutylamino, nebo 2-hydroxy-l-hydroxymethylethylamino.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6je heterocyklyl nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -Onebo -NH), přednostně heterocyklyl, výhodněji morfolin-4-yl nebo pyrrolidin-l-yl.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), přednostně R6 je -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), ještě výhodněji R6 je (RS), (R) nebo (S)-2,2dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-sulfanyl, (RS), (R) nebo (2>J-2,3-dihydroxypropyl-sulfanyl, (RS), (R) nebo fS)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-sulfinyl, (RS), (R) nebo (S)-2,3-dihydroxypropylsulfinyl, (RS), (R) nebo (S)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-sulfonyl, nebo (RS), (R) nebo (S)-2,3-dihydroxypropylsulfonyl.
Ještě další výhodnější skupinou sloučenin je ta, kde R6 je heterosubstituovaný cyklohexylamino.
Mezi těmito výhodnými a ještě výhodnějšími skupinami sloučenin je ještě výhodnější skupina sloučenin, kde R3 je alkyl, přednostně ethyl nebo methyl, výhodněji methyl.
Mezi těmito výhodnými a ještě výhodnějšími skupinami sloučenin je dokonce ještě výhodnější skupina sloučenin ta, kde:
R1 a R2 jsou vodík; nebo R1 je halogen, přednostně chlor a R2 je vodík; a
R4 a R5 jsou vodík, alkyl, halogen, alkoxy, kyano nebo nitro, přednostně vodík, chlor nebo fluor, ještě výhodněji R4 a R5 jsou oba vodík nebo jeden z R4 a R5 je fluor a druhý je vodík, nebo oba z R4 a R5 jsou fluor.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být vyrobeny postupy znázorněnými v reakčních schématech uvedených dále.
Výchozí materiály a reagens použité při přípravě těchto sloučenin jsou buď dostupné od běžných dodavatelů jako je Aldrich Chemical Co., (Milwaukee, Wisconsin, USA), Bachem (Torrance, Kalifornia, USA), Emka-Chemie, nebo Sigma (St.Louis, Missouri, USA), nebo jsou připraveny postupy známými odborníkům v dané oblasti techniky podle postupů uvedených v odkazech, jako je Fieser and Fieseťs Reagents for Organic Synthesis, Vol. 1-15 (John Wileý and Sons, 1991); Rodd 's Chemistry of Carbon Compounds, Volumes 1-5 and Supplertientals (Elsevier Science Publishers, 1989), Organic Reactions, Volumes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991), March's Advanced Organic Chemistry, (John Wiley and Sons, 4th Edition), and Larock's Comrehensive Organic Transformations (VCH Publishers lne., 1989). Tato schémata jsou pouze ilustrativní jako některé z postupů, kterými lze sloučeniny podle tohoto vynálezu syntetizovat, a mohou být provedeny různé modifikace těchto schémat, přičemž odborník na základě tohoto postupuje navrhne.
Výchozí materiály a meziprodukty reakcí mohou být izolovány a purifikovány, pokud je to požadováno, běžnými postupy, včetně, ale bez omezení se na ně, filtrace, destilace, krystalizace, chromatografie, a podobných. Tyto materiály mohou být charakterizovány použitím běžných prostředků, včetně fyzikálních konstant a spektrálních dat.
Schémata 1-4 popisují alternativní metody pro přípravu sloučenin vzorce (I).
Sloučeniny vzorce (I), kde R3 je methyl, R6 je -NHR10, a jiné skupiny, jak jsou definovány v Podstatě vynálezu, mohou být připraveny, jak je znázorněno ve schématu 1 dále.
• toto· ·· to toto · • to · · · · ♦ · to · · • · to to to to to to to to • · · · · · to ·· ····· ··· · · « ··· to· ···· ·♦ ··· ·· ♦
Schéma 1
Acylace N-methylindolu vzorce i s oxalylchloridem v etherovém rozpouštědle jako je diethylether poskytne indol-3-glyoxylyl-chlorid vzorce 2. Reakce se typicky provádí mezi 0 °C a teplotou místnosti, přednostně při 0 °C. Sloučeniny vzorce 1 jsou komerčně dostupné nebo mohou být připraveny postupy velmi dobře známými ze stavu techniky. Například 1-methylindol, 4-methoxy-lmethylindol a 5-brom-1-methylindol jsou komerčně dostupné. 5-chlor-1-methylindol může být připraven alkylací komerčně dostupného 5-chlorindolu metodami velmi dobře známými ze stavu techniky, jako je zpracování 5-chlorindolu s alkylhalogenidem za přítomnosti báze, jako je hydrid sodný v rozpouštědlech jako je dimethylformamíd. Obdobně jiné substituované indoly jako 5-fluoroindol a 4-, 5, 6- nebo 7-dimethylindol, které jsou také komerčně dostupné a mohou být konvertovány na N-alkylindoly alkylací, jak je popsána výše.
Kondenzace 2 s nitrofenyloctovou kyselinou vzorce 3 poskytne 3-indolino-4-(nitrofenyl)-2,5-furandion vzorce 4. Reakce se provádí v inertním organickém rozpouštědle, jako je methylenchlorid, chloroform a podobné, a za přítomnosti nenukleofilní organické báze, jako je triethylamin, diisopropylamin a podobné. Nitrofenyloctové kyseliny vzorce 3 jsou komerčně dostupné. Například 2-, 3-, a 4-
nitro-fenyloctové kyseliny jsou komerčně dostupné od Aldrich. Další nitrofenyloctové kyseliny mohou být připraveny z odpovídajících kyano-halobenzenů homologací kyanoskupiny na vedlejším řetězci kyseliny octové metodami velmi dobře známými ze stavu techniky. Například 2,6-difluor-3-nitrokyanobenzen může být konvertován na 2,6-dífluor-3-nitrofenyloetovou kyselinu následně. Hydrolýza kyanoskupiny v 2,6-difluor-3-nitrokyanobenzenu za podmínek reakce kyselé hydrolýzy poskytne 2,6-difluor-3-nitrobenzoovou kyselinu, která je potom zpracována s chloračním činidlem, jako je oxalylchlorid za získání 2,6-difluor-3nitrobenzoylchloridu. Zpracování 2,6-difluor-3-nitrobenzoylchloridu s diazomethanem poskytne odpovídající diazoketonový derivát, který po zpracování se stříbrnou solí kyseliny benzoové (viz Fieser VoLI, str. 1004) za přítomnosti triethylamjnu v methanolu poskytne methyl 2,6-difluor-3-nitrofenylacetát. Hydrolýza methyl 2,6-difluor-3-nitrofenylacetátu za reakčních podmínek zásadité hydrolýzy (jako je hydroxid lithný ve vodném methanolu) poskytne požadovanou
2,6-difluor-3 -nitrofenyloctovou kyselinu.
Zpracování 4 s vodným hydroxidem amonným ve yysokovroucím organickém rozpouštědle jako je N,N-dimethylformamid poskytne 3-indolin-4-(nitrofenyl)-lH-pyrřol-2,5-dion vzorce 5. Reakce se typicky provádí mezi 130-140 °C.
Redukce nitroskupiny v 5 s vhodným redukčním činidlem, jako je chlorid titánitý v acetonu poskytne sloučeninu vzorce 6, která je potom konvertována na sloučeninu vzorce (I), kde R6 je skupina vzorce -NHR10, kde R10 je, jak je definováno v Podstatě vynálezu, metodami velmi dobře známými ve stavu techniky. Například sloučenina vzorce (I), kde R10 je heteroaraikylová, heteťocyklylová nebo heterocyklylalkylová skupina, jako je 2-imidazolylmethyl, 2,2-dimethyl-l,3dioxan-5-yl nebo 2,2-dimethyldioxolan-4-ylmethyl může být připraveria reakcí sloučeniny vzorce 6 s 2-imidazol-karboxaldehydem, 2,2-dimethyl-1,3-dioxan-5-onem, resp. 2,2-dimethyldioxolan-4-karboxaldehydem, za reakčních podmínek reduktivní aminace, tj. prováděním reakce za přítomnosti vhodného redukčního činidla (jako je kyanohydroboritan sodný, triacetoxyhydroboritan sodný a podobné) a organické kyseliny (jako je ledová kyselina octová, trifluoroctová kyselina a podobné) při teplotě okolí. Vhodnými rozpouštědly pro reakci jsou halogenované uhlovodíky (jako 1,2-dichlorethan, chloroform a podobné). 2,2-Aldehydy a ketony, jako 2-imidazolkarboxyaldehyd, 2,2-dímethyl-l,3-dioxan-5-on a 2,2-dimethyI• · • · · • ·· · • · dioxolan-4-karboxaldehyd jsou komerčně dostupné. 2,2-Dimethyldioxolan-4-karboxaldehyd může být připraven postupem popsaným v Dumont, von R., a kol., Helv. Chim. Acta, 66, 814 (1983).
Pro odborníka v dané oblasti je zřejmé, že sloučeniny vzorce (I) může být konvertována na jiné sloučeniny vzorce (I). Například acidická hydrolýza sloučeniny (I), kde R10 je 2,2-dimethyldioxolan-4-ylmethyl, poskytne sloučeninu vzorce (I), kde R10 je 2,3-dihydroxy-propylová skupina.
Sloučeniny vzorce (I), kde R3 je methyl, R6 je heteroalkyl, heterocyklyl nebo -OR8, kde R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl, a jiné skupiny, jak jsou definovány v Podstatě vynálezu, mohou být připraveny podle schématu 2 dále.
Schéma 2
(l)
(O • · • · tttt · · · tt · tt · tttttt tttt · « tttt tttttttt • · · · · tt • tt tttttt tttt ·
Reakce sloučeniny vzorce 2 se sloučeninou vzorce 7 (kde R6 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo -OR8, kde R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl) za reakčních podmínek popsaných ve schématu 1 výše, poskytne
3-indol-4-fenyl-2,5-furandion vzorce 8.
Sloučeniny vzorce 7, kde R6 je heteroalkyl, heterocyklyl nebo -OR8 (kde R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl) může být připravena postupy velmi dobře známými ze stavu techniky. Například 3-heterocyklyl-fenyloctová kyselina může být připravena za reakčních podmínek katalytické aminace reakcí methyl 3-bromfenylacetátu s vhodným heterocyklem (jako je morfolin, piperidin, pyrrolidin a podobné) za přítomnosti substituovaného fosforečného ligandu jako je 2,2-bis(difenylfosfin)-l,l'-binaftyl (BINAP) a paladiového katalyzátoru jako je tris(dibenzylidenacetonu)paladia (Pd2(dba)3), následně de-esterifikací získaného methyl 3-heterocyklylfenylacetátu za reakčních podmínek bazické hydrolýzy.
3-(2-Aminoethyl)fenyloctová kyselina může být připravena kuplováním methyl 3-bromfenylacetátu s nitroethylenem za Heck-reakčních podmínek za získání methyl 3-(-nitrovinyl)fenyl-acetátu, následovaným redukcí alkenové vazby a nitro-skupiny metodami velmi dobře známými ze stavu techniky, jako je katalytická hydrogenace následovaná hydridovou redukcí. Hydrolýza methyl 3-(2-aminoethyl)-fenylacetátu za bazických podmínek potom poskytne 3-(2-aminoethyl)fenyloctovou kyselinu. Pro odborníka v dané oblasti techniky je zřejmé, že aminoskupina v 3-(2-aminoethyl)fenyloctové kyselině by mohla být chráněna vhodnou chránící skupinou před reagováním se sloučeninou 2.
Sloučeniny vzorce 7, kde R6 je -OR8 (kde R8 je heteroaralkyl nebo heterocyklylalkyl) mohou být připravény réakcí hydroxyfenyloctové kyseliny s alkylačním činidlem vzorce R8X, kde R8 je jak je definováno výše, a X je odstupující skupina za alkylační ch reakčních podmínek, jako je halogen (Cl, Br, I), tosylát, mesylát, triflát a podobné. Reakce typicky probíhá Za přítomnosti báze, jako je uhličitan česný, uhličitan draselný a podobné, a v aprotickém polárním organickém rozpouštědle, jak je acetonitril, N-methylpyrrolidin a podobné. Alkylační činidla jako je 2-chIormethylpyridin, 2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl32 ·· ·· ·· 9 ·» · • · · » · · »· ··· • · · · · · ···· • · · · · · 4··· ··· • · · · · ♦ · · · ·· ···· ·· ·*· ·» · methyl p-toluensulfonát, l-(3-chlorpropyl)piperidin a 4-(2-chlorethyl)morfolin a podobné jsou komerčně dostupné.
Sloučenina 8 je potom konvertována na sloučeninu vzorce (I), jak je popsáno ve schématu 1 výše. Opět, jak bylo diskutováno výše, může být sloučenina vzorce (I) konvertována na jiné sloučeniny vzorce (I). Například aeidická hydrolýza sloučeniny (I), kde R8 je 2,2-dimethyldioxolan-4-ylmethyl poskytne sloučeninu vzorce (I), kde R8 je 2,3-dihydroxy-propylová skupina (např. R8 je heteroalkylová skupina).
Alternativně sloučeniny vzorce (I), kde R3 je methyl a další skupiny jsou definovány v Podstatě vynálezu, mohou být připraveny, jak je znázorněno ve schématu 3 dále.
Schéma 3
Reakce sloučeniny vzorce 7 s chloračním činidlem jako je oxalylchlorid za přítomnosti katalytického množství dimethylformamidu a v inertním rozpouštědle jako je dichlormethan, chloroform a podobné, poskytne chlorid kyseliny. Zpracování chloridů kyseliny s vodným amoniakem při 0 °C poskytne fenylacetamid vzorce 9. Kuplování 9 s methyl indolglyoxolatem 10 poskytne
ΦΦ ·
Φ Φ
ΦΦΦ • ΦΦΦΦ
ΦΦΦ
ΦΦ Φ • 9 ·· ΦΦ • Φ · · Φ Φ Φ
Φ Φ Φ φ Φ
Φ · ΦΦΦΦ ΦΦΦ Φ Φ sloučeninu vzorce (I). Kuplovací reakce se provádí za přítomnosti silné organické báze, jako je terc.butoxid, a v etherovém organickém rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran a podobné. Sloučeniny vzorce 10, kde R1 a R2 se mění, mohou být připraveny z 1-methylindolu postupy popsanými ve Faul, M. a kol., J. Org. Chem., 63, 6053-6058, (1998).
Sloučenina vzorce (I) může být konvertována na jiné sloučeniny vzorce (I), jak jsou popsány výše. Tato cesta syntézy je zejména vhodná pro přípravu sloučenin vzorce (I), kde R6 je heterocyklyl.
Alternativně mohou být připraveny sloučeniny vzorce (I), kde R3 je methyl a další skupiny, jak jsou definovány v podstatě vynálezu, podle schématu 4 dále.
Schéma 4
(i)
Zpracování jodbenzenu vzorce 11 s bis(pinakolato)diboranem za přítomnosti palladiového katalyzátoru jako je PdCl2(dppf), následované kuplováním získaného borátu s 4-brom-3-(l-methylindol-3-ylmethyl)-l-methyl-pyrrol-2,5-dionem 12. podle podmínek Suzuki reakce poskytne 4-fenyl-3-(l-methylindol-3-ylmethyl)-l-methylpyrrol-2,5-dion 13. Sloučeniny vzorce 12 mohou být připraveny metodami velmi dobře známými ze stavu techniky. Například 4-brom-3-(l-methylindol-3-yl)-l-methylpyrrol-2,5-dion může být připraven postupem popsaným v Brenner , M. a kol., Tet. Lett., 44, 2887, (1988).
Zpracování 13 se silnou bází jako je hydroxid sodný, hydroxid draselný a podobné ve vodném alkoholickém rozpouštědle jako je ethanol poskytne 4-fenyl-3-(l-methylindol-3-ylmethyl)-l-H-pyrrol-2,5-dion 8, kteiý je potom konvertován na sloučeninu vzorce (I), jak je popsána výše.
Alternativně sloučenina vzorce (I), kde R3 je methyl a další skupiny definované v podstatě vynálezu může být připravena jak je znázorněno ve schématu 5 dále.
Schéma 5
(O • · toto • · ···
Acylace N-methylindolu vzorce i s oxalylchloridem, jak je popsána výše, následovaná zchlazením s vodným amoniakem při 0 °C poskytne sloučeninu vzorce
14. Kuplování 14 s methyl fenylacetátem vzorce 15 poskytne sloučeninu vzorce (I).
Kuplovací reakce se provádí za přítomnosti silné báze jako je terc.butoxid a v etherovém organickém rozpouštědle jako je tetrahydrofuran a podobné.
Deriváty 3-indolyl-4-fenyl-lH-pyrrol-2,5-dionu vzorce (I) inhibují GSK-3p. Sloučeniny a kompozice, které je obsahují, jsou tedy vhodné pro léčení nemocí zprostředkovaných GSK-3P nemocemi, jako je Alzheimerova nemoc, obezita, diabetes, arterjosklerotická kardiovaskulární nemoc, pplycystický ovariální syndrom, syndrom X, ischémie, traumatické poškození mozku, bipolární poškození, imunonedostatečnost a rakovina.
Dále přihlašovatel objevil, že inhibice GSK-30 aktivity redukuje hladinu CD4+ T-helper 2 buněk (Th2), které produkují cytokiny, jako je IL-4, IL-5, IL-13, a promotují produkci IgE a eozinofilní diferenciaci. CD4 T-buňky se mohou diferencovat na funkčně odlišné subsety s různými profily cytokinové produkce. Buňky Typu 1 T Helper (Thl) produkují IFN-g a IL-2 a promotují imunitu zprostředkovanou buňkami. Buňky Typu 2 T Helper (Th2) produkují IL-4 a IL-5 a promotují produkci IgE a eozinofilní diferenciaci. Zdá se, že nerovnováha mezi odezvou typu T-buněk je základem pro náchylnost k astmatu a alergickým nemocím. Ačkoliv genetické studie přihlašovatele objevily, že GSK-3{5 reguluje aktivitu TCF7 (také známých v literatuře jako TCF1), čímž kontroluje, zda či nikoliv se prosté T-buňky diferencují na Thl nebo Th2 buňky. Dále přihlašovatel zjistil, že inhibitory GSK-33 inhibují rozvoj Th2 buněk. To je důležitý objev, protože bylo stanoveno, že Th2 specifické cytokiny hrají klíčovou roli v patogenesi nemoci, jako je alergie a astma. Konkrétně IL-13 je implikován v přecitlivělosti dýchacích cest a hypersekreci hlenu, jak je doloženo ve studii myší při podávání IL-13 do plic myší (Wills-Karp, M. a kol., Science 282, 2258-2261 (1998); Grunig , G. A kol., Science 282, 2261-2^63 (1998)). Také byla pozorována zvýšená sekrece IL-13 v dýchacích cestách astmatických pacientů, která podporuje roli IL-13 při nemoci (Kroegel, C., a kol., European Respirátory Journal, 9, 899-904, (1996). Dále celkové hladiny séra IgE a tkáňová eozinofilie, charakteristické stavy alergie a astmatu, korelují se závažností nemoci u pacientů s atopickým astmatem (Yssel, H.
a kol., Clinical and Experimental Allergy, 28, Suppl 5; 104-109 (1998)). Předtím než přihlašovatel zjistil, že GSK-3P reguluje TCF7 a tím moduluje Th2 buněčnou diferenciaci, bylo známo, že inhibice GSK-ββ by mohla poskytnout obecnou metodu léčení nemocí, jako je astma (zvláště atopické astma), alergie, alergická rýma, kdy všechny jsou způsobeny přebytkem Th2 buněk a zde asociovanými cytokiny. Jak je znázorněno v příkladech dále, přihlašovatel potvrdil schopnost inhibitorů GSK-3p léčit astmatickou odezvu v řadě in vivo modelů akceptovaných ve stavu techniky. Vynález přihlašovatele tedy zahrnuje použití inhibitorů GSK-3p pro léčení široké řady alergií, astmatu a jiných nemocí charakterizovaných přebytkem Th2 cytokinů.
Genetický postup s čeledí myšovitých byl použit pro identifikaci genetického místa, které diferenčně regulovalo TD4 diferenciaci subšetu T buněk a citlivost k IL-12. Genetický základ myšího kmene ovlivňuje rozvoj CD4 T buněk. Rozvoj Th2 buněk je podporován v jednom kmeni (Balb/C) myší, zatímco T buňky zjiného kmene (B10.D2) mají větší kapacitu pro zachování IL-12 citlivosti a rozvoji Thi in vivo a in vitro.. Analýzy experimentálních křížových testů mezi Balb/C a B.10.D2 receptory antigenů exprimujících transgenních T buněk myší vedly k identifikaci místa lokalizovaného v 0,5 cM regionu myšího chromosomu 11, který reguluje zachování IL-12 citlivosti (Guler M., a kol., J. Immunol. 162, 13391347, 1999). Tento region byl syntenický k umístění lidského chromosomu 5q31, který byl spojen se zvýšenými hladinami IgE séra a náchylností k astmatu (Review: Cookson, W., Nátuře 402, Suppl., B-5-B11, 1999). Poziční klonování tohoto genetického místa bylo provedeno analýzou chromosomální sekvence v tomto chromosomálním regionu, a analýzou genové exprese.
Demonstrovali jsme, že TCF4 reguluje T helper buněčnou diferenciaci. Bylo ukázáno, že TCF7, který je exprimován jen T buňkami, je exprimován v klidových Thi buňkách myší, ale ne ve Th2 buňkách. Tento faktor byl také indukován IFNgamma (Obrázek 2B); a prvky rozlišení pro TCF-7 byly nalezeňy v regionech promotéru genů exprimovaných v Thi buňkách; IFN-gamma, IFN-alfa, IL-18 a beta-2-subjednotce IL12 receptoru. Rovněž jsme ukázali, že inhibice GSK-30 zvýší hladinu β-kateninu v T buňkách, β-katenin se potom akumuluje v jádru a působí jako kofaktor pro TCF7 pro aktivaci genové transkripce (Příklad II, obrázek 1).
···· · · · · · · ·· · · · · · · · c • · · · · · · ·· ···· ’··’·*·· *..*......
Inhibitory GSK-3β tudíž budou inhibovat rozvoj Th2 buněk. To jsme potvrdili prokázáním, že hladiny cytokinů Th2 jsou sníženy v buňkách zpracovaných s GSK3β inhibitory (příklady III a IV).
Přednostně budou GSK-3 β použité pro léčení nemocí charakterizovaných přebytkem Th2 cytokinů selektivní pro GSK-3 β vzhledem k jiným kinázám, zvláště PKC, p38 kináze, lek a cdk2, v poměru alespoň 10:1, výhodněji 100:1 (založeno na jejich konkrétních hodnotách IC50). Stanovení relativních hodnot IC50 předpokládaného inhibitoru může být doplněno standardními testy aktivity kinázy, velmi dobře známými ze stavu techniky. Tyto selektivní modulace umožňují selektivní léčení nemocí charakterizovaných přebytkem Th2 buněčné produkce bez ovlivnění biologických procesů podmíněných jinými kinázami.
Dále, jelikož isoformy GSK-3a a Θ8Κ-3β mají 95% identické katalytické domény, uvažuje se, že sloučeniny podle předloženého vynálezu by mohly být vhodné pro léčení nemocí zprostředkovaných GSK-3 a.
Schopnost sloučenin vzorce (I) inhibovat GSK-3 β byla měřena testy in vitro jako je test vazebnosti ligandu a inhibice degradace β-kateninu, jak je popsána detailně v biologickém příkladu I a II dále. Schopnost sloučenin podle vynálezu inhibovat sekreci IL-4 a IL-3 z lidských T-buněk byla měřena testem in vitro popsaným podrobně v biologickém příkladu III dále. Schopnost sloučenin podle vynálezu inhibovat sekreci IL-4, IL-5 a IL-13 z myších T buněk byla stanovena testem in vitro popsaným podrobně v biologickém příkladu IV dále. Schopnost sloučenin podle vynálezu inhibovat infiltraci leukocytů do plic byla stanovena testem in vivo popsaným podrobně v biologickém příkladu V dále. Schopnost sloučenin podle vynálezu redukovat hladiny IgE byla měřena testem in vivo popsaným podrobně v biologickém příkladu VI dále.
Obecně, sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou být podávány v terapeuticky účinném množství kterýmkoliv z přijatelných typů podávání látek s podobnými účinky. Skutečné množství sloučeniny podle tohoto vynálezu, tedy účinné složky, bude záviset na řadě faktorů, jako je závažnost léčené nemoci, věk a relativní zdraví subjektu, síla použité sloučeniny, cesta a forma podání, a dalších
faktorech. Léčivo může být podáváno více než jedenkrát denně, přednostně jednou nebo dvakrát denně.
Terapeuticky účinná množství sloučenin vzorce (I) jsou v rozmezí od přibližně 1 mg do 5 mg na kilogram tělesné hmotnosti příjemce na den; přednostně asi 3 mg/kg/den. Pro podávání osobě o hmotnosti 70 kg tak bude dávkové rozmezí asi 70 až 350 mg/den, výhodněji asi 200 mg na den.
Obecně, sloučeniny podle tohoto vynálezu budou podávány jako farmaceutické prostředky kteroukoliv z následujících cest: podáním orálně, systémicky (jako transdermálně, intranasálně, nebo čípky), nebo parenterálně (jako intramuskulárně, intravenosně nebo subkutánně). Preferovaným postupem podávání je orální použitím běžného dávkového režimu, který může být upraven podle stupně nemoci. Prostředky mohou být ve formě tablet, pilulí, kapslí, polopevných látek, prášků, prostředků s postupným uvolňováním, roztoků, suspenzí, elixírů, aerosolů nebo jiných vhodných prostředků. Jiným výhodným způsobem podávání sloučenin podle tohoto vynálezu je inhalace. To je účinná metoda pro podávání terapeutických látek přímo do dýchacích cest pro léčení nemocí jako je astma a podobné nebo příbuzné choroby dýchacích cest (viz patent US 5 607 915).
Výběr formulace závisí na různých faktorech, jako je způsob podávání léčiva a biodostupnost léčivé substance. Pro podávání inhalací může být sloučenina formulována jako tekutý roztok, suspenze, aerosolové propelanty nebo suchý pudr a nanesena na vhodné nosiče pro podávání. Je řada typů zařízení pro farmaceutické inhalování - rozprašovacích inhalátorů, inhalátorů s dávkovači (MDI) a suchých práškových inhalátorů (DPI). Rozprašovací zařízení produkují proud vzduchu o vysoké rychlosti, který způsobuje, že se léčivé látky (které jsou formulovány v kapalné formě) rozpráší jako mlha, která je nesena do dýchacích cest pacienta. Typicky jsou MDI prostředky balené se stlačeným plynem. Při aplikaci uvolní zařízení odměřené množství terapeutické látky stlačeným plynem, a tímto poskytne vhodnou metpdu podávání množství dávky látky. DPI rozděluje terapeutické látky ve formě volně tekoucích prášků, které mohou být dispergovány ve vdechnutém proudu vzduchu při dýchání pacienta ze zařízení. Aby se dosáhlo volně tekoucího prášku, je terapeutická látka formulována s nosičem, ja,ko je laktóza. Odměřené množství terapeutické látky je uloženo do kapsle a je dávkováno při každé aktivaci.
Nedávno byly vyvinuty farmaceutické přípravky zvláště pro léčiva, která vykazují slabou biodostupnost, založené na principu, že biodostupnost může být zvýšena zvětšením plochy povrchu, a snížením velikosti částice. Například patent US 4 107 288 popisuje farmaceutické složení, mající velikost částic v rozmezí od 10 do 1000 nm, v nichž je účinný materiál nanesen na zesítěnou matrici makromolekul. Patent US 5 145 684 popisuje výrobu farmaceutického prostředku, v němž je léčivá substance rozdrcena na nanočástice (průměrná velikost částic 400 nm) za přítomnosti modifikátoru povrchu a potom dispergována v kapalném médiu za získání farmaceutického přípravku, který vykazuje význačně vyšší biodostupnost.
Prostředky jsou složeny, obecně řečeno, ze sloučeniny vzorce (I) v kombinaci s alespoň jedním farmaceuticky přijatelným excipientem. Přijatelnými excipienty jsou netoxické pomocné prostředky pro podávání, a neovlivňující nepříznivě terapeutické výhody sloučeniny vzorce (I). Tyto excipienty mohou být jakékoliv pevné, kapalné, polopevné nebo, v případě aerosolových prostředků, plynné excipienty, které jsou odborníkovi v oblasti techniky obecně dostupné.
Pevné farmaceutické excipienty zahrnují škrob, celulosu, talek, glukosu, laktosu, sacharosu, želatinu, slad, rýži, mouku, křídu, silikagel, stearát hořečnatý, stearát sodný, glyceroj monostearát, chlorid sodný, sušené mléko a podobné. Kapalné a polopevné excipienty mohou být zvoleny z glycerolu, propylenglykolu, vody, ethanolu, a různých olejů, včetně vazelíny, živočišného, rostlinného nebo syntetického původu, jako je arašídový olej, sojový olej, minerální olej, sezamový olej, atd. výhodné kapalné nosiče, zvláště pro injekční roztoky, zahrnují vodu, fyziologický roztok, vodnou dextrosu a glykoly.
Pro rozdělení sloučeniny podle tohoto vynálezu do aerosolové formy mohou být použity stlačené plyny. Inertními plyny vhodnými pro tyto účely jsou dusík, oxid uhličitý atd. Další vhodné farmaceutické excipienty a jejich složení jsou popsány v Remingtonů Pharmaceutical Sciences, vyd. E.W. Martin (Mack Publishing Company, 18. Vyd., 1990).
• ·
Obsah sloučeniny ve složení se může měnit v plném rozmezí používaném odborníkovi v dané oblasti techniky. Typicky bude složení obsahovat, vztaženo na hmotnostní procenta (% hmotn.) základu od asi 0,01-99,99 % hmotn. sloučeniny vzorce (I), vztaženo na celkové složení, s rovnováhou mezi jedním nebo více vhodnými excipienty. Přednostně je sloučenina přítomna v množství od asi 1-80 % hmotn. Reprezentativní farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu vzorce (I) jsou popsány dále.
PŘÍKLADY PROVEDENÍ VYNÁLEZU
Zkratky, jak se používají dále v příkladech, jsou definovány takto: „HCl“ pro kyselinu chlorovodíkovou, „DMF“ pro dimethylformamid, „NaOH“ pro hydroxid sodný, „KOH“ pro hydroxid draselný, „DMSO“ pro dimethylsulfoxid, „NaHCOg“ pro hydrogenuhličitan sodný, „NaCl“ pro chlorid sodný, „K2CO3“ pro uhličitan draselný, „LiOH“ pro hydroxid lithný, „Et3N“ pro triethylamin, ,,NH3(aq.)“ pro hydroxid amonný, „CH2CI2“ pro methylenchlorid, „MeOH“ pro methanol, „EtOH pro ethanol, „Ph3P“ pro trifenylfosfin, „CsCO3“ pro uhličitan česný, „BINAP“ pro
2,2-bis(difenylfosfini)-l,l '-binaftyl, „Pd2(dba)3“ pro tris(dibenzylidenaceton)dipaladium, „NaCNBH3“ pro kyanohydroboritan sodný, „THF“ pro tetrahydrofuran, „Na2SO4“ pro síran sodný, „RT“ pro teplotu místnosti (nebo t.t.), „PTLC“ pro prepartivní chromatografií na tenké vrstvě, „S1O2“ pro silikagel, „EtOAc“ pro ethylacetát, „APMA“ pro acetát aminofenyl-rtuťnatý, „IL-1“ pro interleukín-1, a „RPMI“ pro Roswell Park Memoriál Institute.
Příklad 1
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl j -1 H-pyrrol-2,5-dionu
Krok 1
Thionylchlorid (17 ml, 0,64 mol) byl přidán po kapkách do methanolu při 0 °C. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána při 0 °C po 10 min., a potom byla přidána kyselina 3-hydroxyfenyloctová (25 g, 0,16 mol). Získaná reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po 2 hodiny. Těkavé podíly byly odstraněny a zůstatek byl rozdělen mezi vodu a ethylacetát. Organická vrstva byla oddělena, promyta H2O, NaHCO3 a NaCl (nasyc.) a sušena nad Na2SO4. Surový produkt byl purifikován na koloně se silikagelem s 20% EtOAc v hexanu za získání methyl 3hydroxyfenylacetátu jako bezbarvého oleje (25 g, 94% výtěžek).
Krok 2
Methyl 3-hydroxyfenylacetát (20 g, 0,12 mol), (R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl p-tosylát (51,7 g, 1,5 ekv.) a K2CO3 (50 g, 3 ekv.) vN-methylpyrrolidinonu byl zahříván při 96 °C přes noc. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti, zchlazena H2O a rozdělena mezi H2O a EtOAc. Organická vrstva byla oddělena, promyta s H2O a NaCl (nasyc.) a potom sušena nad Na2SO4. Surový produkt byl purifikován na koloně se silikagelem s 20% EtOAc v hexanu za získání
3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenylacetátu jako oleje (23 g, 68% výtěžek).
Krok 3
Do roztoku methyl 3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenylacetátu (23 g, 0,08 mol) v methanolu (80 ml) a vody (5 ml) byl přidán LxOH-H2O (13,8 g, 4 ekv.). Po míchání reakční směsi při teplotě místnosti po 4 h byly těkavé látky odstraněny pod vakuem a zůstatek byl rozdělen mezi EtOAc a H2O. Vodná vrstva byla oddělena, ochlazena s ledovou lázní a potom okyselena 10% vod.HCl. Aeidická vrstva byla extrahována EtOAc. EtOAc vrstva byla promyta NaCl
(nasyc.), sušena nad Na2SC>4 a koncentrována za získání 3-((R)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyloctové kyselina jako bílé pevné látky (22 g, >99% výtěžek).
Krok 4
Oxalylchlorid (1,05 ekv., 4,15 ml) byl přidán po kapkách do roztoku Nmethylindolu (5,8 ml, 50 mmol) v diethyletheru (393 ml) při 0 °C. Byla vytvořena žlutá sraženiny. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána při 0 °C po 30 min, a potom byly těkavé látky odstraněny ve vakuu. Zůstatek byl opětovně rozpuštěn v dichlormethanu (375 ml) a přidán do roztoku 3-((R)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-ylmethyloxy)fenylacocotvé kyseliny (13,3 g, 50 mmol) a Et3N (12,5 ml,
2,2 ekv.) v dichlormethanu (375 ml) při 0 °C. Získaná směs byla míchána pří 0 °C a potom ponechána pomalu ohřát na teplotu místnosti. Po míchání přes noc byly těkavé látky odstraněny a zůstatek byl purifikován na koloně se silikagelem dichlormethanem za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{3-((R)-2,2-ďimethyl-l,3dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl}furan-2,5-dionu (5,4 g, 27% výtěžek).
Krok 5
3-(l-methyIindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]- furan-2,5-dion (5,4 g, 13,7 mmol) byl rozpuštěn v DMF (50 ml) a byl zředěn NH3 (aq.) (100 ml). Potom byla reakční směs zahřívána při 140 °C po 5 hodin, ochlazena na teplotu místnosti a potom zředěna vodou. Produkt byl extrahován EtOAc a organická vrstva byla promyta NaCl (nasyc.) a sušena nad síranem sodným za získání surového produktu, který byl dále purifikován rekrystalizací z dichlormethanu a hexanu za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (5 g).
’H NMR (DMSO-d6): 8 11,08 (s, NH), 8,04 (s, 1H), 7,49 (d, 1H, J = 8,2),
7,22 (t, 1H, J = 8,0), 7,12 (t, 1H, J = 7,0), 6,97 (m, 3H), 6,76 (t, 1H, J = 7,5), 6,33 (d, 1H, J = 8,0), 4,23 (m, 1H), 3,96 (dd, 1H, J = 6,5, 8,4), 3,91 (s, 3H), 3,77 (d, 1H, J = 5,1), 3,60 (dd, 1H, J - 6,1, 8,2), 1,30 (s, 3H), 1,27 (s, 3H; MS (El); M+ 432.
• · • · · ··· · » · · • · · · · · » « · · ···· Λ~ ··· · ♦ · · · ·
J ····♦· · · · · · ·· ·
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 3-hydroxyfenyloctové kyseliny s 2-hydroxyfenyloctovou kyselinou se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[2((RS)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion.
’H NMR (DMSO-d6): δ 10,99 (s, NH), 8,03 (s, IH), 7,46 (d, IH, J = 7,2),
7,38 (t, IH, J = 5,4), 7,27 (d, IH, J = 7,5), 7,11 (t, IH, J = 7,1), 7,03 (m, 2H), 6,64 (t, IH, J = 7,1), 6,32 (d, IH, J = 7,1), 4,3 (br.s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,68 (br s, 2H),
3,2 (br.s, IH), 1,19 (s, 6H), tepl.tání 220,8 -221,2 °C; MS (El): M+432.
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 3-hydrPxyfenyloctové kyseliny s 4-hydroxyfenyloctovou kyselinou se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[4((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion.
JH NMR (DMSO-d6): δ 11,00 (s, NH), 7,97 (s, IH), 7,48 (d, IH, J = 6,3),
7,36 (d, 2H, J = 8,9), 7,13 (t, IH, J = 7,2), 6,90 (d, 2H, J = 8,9), 6,78 (t, IH, J = 7,2), 6,42 (d, IH, J = 8,0), 4,39 (m, IH), 4,06 (m, 3H), 3,90 (s, 3H), 3,73 (m, IH), 1,35 (s, 3H), 1,30 (s, 3H); MS (El): M+ 432. ;
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou (R)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-ylmethyl p-tosylátu s (S)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl ptosylátem se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((S)-2,2-dimethyI-l,3-dioxolan-4ylmethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion.
Příklad 2
Syntéza 3 -(1 -methylindol-3 -yl)-4-{ 3-[((R)-2,3 -dihydroxypropyloxy] fenyl} -1Hpyrrol-2,5-dionu
*·
Krokl
Tolpensulfonová kyselina (100 mg) byla přidána do roztoku 3-(lmethylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl)-lHpyrrol-2,5-dionu (4,3 g) v methanolu (100 ml) a vody (10 ml) a reakční směs byla zahřívána při 50 °C přes noc. Těkavé látky byly odstraněny a zůstatek byl rozdělen mezi vodu a EtOAc. Organická vrstva byla promyta NaCl (nasyc.) a sušena nad síranem sodným. Surový produkt byl purifikován na koloně se silikagelem s 5% MeOH v CH2CI2 a dále purifikován rekrystalizací z C^Ch/hexanu za získání 3-(lmethylindol-3-yl)-4-{3-[((R)-2,3-dihydroxypropyloxy]fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dionu (2,46 g).
Ή NMR (DMSO-d6): δ 11,05 (s, NH), 8,03 (s, ÍH), 7,48 (d, ÍH, J = 8,2),
7,15 (m, ÍH), 7,02 (s, ÍH), 6,92 (m, ÍH), 6,76 (t, ÍH, J = 7,3), 6,37 (t, ÍH, J = 8,0), 4,89 (d, OH, J = 4,7), 4,61 (t, OH, J = 5,8), 3,90 (s, 3H), 3,85 (m, ÍH), 3,72 (m, 2H),
3,37 (m, 2H); MS (El): M+ 392; tepl. tání 177,7-178,0 °C; Anal (C22H2oN205-0,15 H2O): C, Η, N.
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu s 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[2-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-lHpyrrol-2,5-dionem se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{2-[(2,3-dihydroxypropyloxyjfenyl} -1 H-pyrrol-2,5 -dion.
Ή NMR (DMSO-dó): δ 10,96 (s, NH), 7,98 (s, ÍH), 7,47 (d, ÍH, J = 8,1), 7,36 (t, ÍH, J= 8,8), 7,23 (d, ÍH, J = 7,2), 7,11 (t, ÍH, J = 7,1), 6,95 (m, 2H), 6,66 (t, ÍH, J - 7,3), 6,33 (d, OH, J - 8,0), 3,87 (s, 3H), 3,6 (br.š, 1H), 3,2 (br.s, 2H), 3,1 (br s, 2H); tepl. tání 245,0-247,1 °C; MS (El): M+ 392; Anal (C22H2oN205-l,20 H2O): C, N, H.
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-1 H-pyrrol-2,5-dionu s 3 -(1 -methylindol-3-yl)-4-[4-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-lH• φ ·· ···· ·♦ ··· ·· · pyrrol-2,5-dionem se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{4-[((R)-2,3-dihydroxypropyloxy] fenyl} -1 H-pyrrol-2, 5-dion.
’H NMR (DMSO-d6): δ 11,00 (s, NH), 7,97 (s, IH), 7,48 (t, IH, J - 8,2), 7,34 (d, 2H, J= 8,9), 7,13 (t, IH, J = 7,2), 6,87 (d, 2H, J = 8,9), 6,86 (t, IH, J = 7,2), 6,43 (d, IH, J = 8,1), 4,00 (m, IH), 3,90 (s, 3H), 3,8 (m, 2H), 3,43 (m, 2H); tepl. tání
220,3-222,7 °C; MS (El): M+ 392.
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu s 3-(l-methylí ndol-3-yl)-4-{ 3 -((S )-2,2-dimethyl-1,3 -dioxolan-4 -ylmethyloxy )fenyl] -1Hpyrrol-2,5-dionem se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{3-[(S)-2,3-dihydroxypropyloxy]fenyl}-l H-pyrrol-2,5-dion. MS (El): M+ 392; tepl.tání 176,9-178,1 °C.
Příklad 3
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-morfolin-4-ylethyloxy)fenyl]-1 H-pyrrol-2,5^ dionu
Krok 1
Do míchaného roztoku 3-jodfenolu (2,2 g, 10 mmol), N-(2-hydroxyethyl)morfolinu (2 ekv., 2,4 ml) a ΡΙΪ3Ρ (2 ekv., 5,24 g) v THF (90 ml) při 0 °C byl přidán po kapkách roztok diisopropylazodikarboxylátu (2 ekv., 3,96 g) v THF (20 ml). Výsledný roztok byl míchán při teplotě místnosti přes noc a potom byl zchlazen s NaHCCh. Produkt byl extrahován s EtOAc a EtOAc-vrstva byla promyta nasyceným NaCl, sušena nad síranem sodným. Surová směs byla potom purifikována ·· ·· 99 9 99 9 • 99 9 · · 9 9 · 99 • 9 9 99 9 9 · 9 9
9 9 9 9 9 · 9 9 9999 • 99 999 999
9999 99 999 99 9 na silikagelové koloně s 25% acetonem v hexanu za získání 3-(2-morfolin-4-ylethyloxy)jodbenzenu (2,8 g, 84% výtěžek).
Krok 2
Baňka naplněná 3-(2-morfolin-4-ylethyloxy)jodbenzenem (0,33 g, 1 mmol), bis(pinakolato)diborem (0,279 g, 1,1 mmol), octanem draselným (0,294 g, 3 mmol) a PdCl2(dppf) (48 mg, 0,06 mmol) byla propláchnuta dusíkem. Byl přidán N,Ndimethylformamid (6 ml) a reakční směs byla míchána při 80 °C po 3 hodiny a potom byla ochlazena na teplotu místnosti. Do reakční směsi byl přidán 3-brom-4-(lmethylindol-3-yl)-l-methylpyrrol-2,5-dion (0,255 g, 0,8 mmol) (syntetizován podle postupu popsaného v Brenner, M. a kol., Tet.Lett. 44, 2887, (1988)), následovalo přidání PdCfyídppť) (48 mg, 0,06 mmol) a 2M Na2CC>3 (2,5 ml). Výsledná směs byla míchána při 80 °C po 2,5 hodiny, potom byla ochlazena na teplotu místnosti a zchlazena vodou. Produkt byl extrahován EtOAc. EtOAc-vrstva byla promyta H2O, NaCl (nasyc.), sušena nad Na2SO4 a koncentrována. Purifikace surového produktu na silikagelové koloně s 2/3/5 acetonu /CffyCfy/hexanu poskytla 3-(1-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-morfolin-4-ylethyloxy)fenyl]-l-methylpyrrol-2,5-dion jako oranžovočervený olej (0,25 g, 70% výtěžek).
Krok 3
3-( 1 -Methylindol-3 -y l)-4 - [3-(2-morfolin-4-ylethyloxy)fenyl]-1 -methylpyrrol-2,5-dion (0,22 g, 0,5 mmol) byl rozpuštěn v EtOHA (10 ml) a byl přidán roztok KOH (1,5 g) VH2O (2,5 ml). Po refluxování reakční směsi po 3 hodiny byla směs ochlazena na teplotu místnosti, následovalo odpaření EtOH. Zůstatek byl okyselen vodn. HCl na pH = 4. Produkt byl extrahován EtOAc a EtOAc-vrstva byla sušena nad síranem sodným a koncentrována za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-morfolin~ -4-ylethyloxy)fenyl]furan-2,5-dionu, který byl v dalším kroku bez další purifikace.
Krok 4
3-(l-Methylindol-3-yl)-4-[3-(2-morfolin-4-ylethyloxy)fenyl]furan-2,5-dion byl potom rozpuštěn v DMF (5 ml) a byl přidán hydroxid amonný (10 ml). Získaná směs byla zahřívána na 140 °C po 4 hodiny, potom ochlazena na teplotu místnosti a zředěna vodou. Produkt byl potom extrahován do EtOAc. EtOAc.vrstva byla promyta NaCl (nasyc.) a sušena nad síranem sodným. Purifikace na silikagelové ·· 99 9 ·· · • · · · · ···· • · · · · · · · ···· • · · · · · · ·
99 94 999 99 9 koloně s 5% (10% NH4OH v MeOH) v CH2C12 poskytla 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-morfolin-4-ylethyloxy)fenyl]-lH-pyrroI-2,5-dion (0,21 g, >99% výtěžek).
’H NMR (DMSO-dó): δ 7,95 (s, NH), 7,41 (br,s, NH), 7,32 (d, 1H, J = 7,2), 7,17 (m, 3H), 7,02 (s, 1H), 6,91 (d, 1H, J = 6,5), 6,83 (t, 1H, J = 7,1), 6,4 (d, 1H, J = 8,1), 3,92 (br.s, 2H), 3,90 (s, 3H), 3,78 (br.s, 4H), 2,65 (br.s, 2H), 2,51 (br.s. 4H); MS (El): M+431; tepl.tání 197,7 -199 °C; Anal (C25H25O4N3-0,3H2O): C, H,
N.
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 3-brom-4-(l-methylindol-3-yl)-l-methylpyrrol-2,5~dionu s 3-brom-4-(lH-indol-3-yl)-l-methylpyrrol-2,5-dionem se získal 3-(lH-indol-3-yl)-4-[3-(2-morfoIin-4-ylethoxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion. MS (El): M+417.
Příklad 4
Syntéza 3-( 1 -methylindol-3-yl)-4-(3-morfolin-4-ylfenyl)- lH-pyrrol-2,5-dionu
Krokl
Baňka s kruhovým dnem promytá argonem byla naplněna methyl 3-bromfenylacetátem (2,29 g, 10 ml) (připravený z 3-bromfenyloctové kyseliny, jak je popsáno v příkladu 2, kroku 1), morfolinem (1,05 ml, 1,2 ekv), CSCO3 (4,45 g, 1,4 ekv.); (Pd2(dba)3 (92 mg, 0,01 ekv.) a BINAP (93 mg, 0,15 ekv.) v toluenu (20 ml). Získaná směs byla zahřívána při 100 °C přes noc a potom byla zředěna diethyletherem (120 ml). Sraženina byla filtrována přes celitovou podložku a filtrát byl koncentrován a purifikován na silikagelové koloně s 20% EtOAc hexanu za získání methyl 3-(morfolin-4-yl)fenylacetátu (0,55 g, 23%).
• · • to to to • to to · to • · ·· ·· totototo ·· • to
Krok 2
Do roztoku methyl 3-(morfolin-4-yl)fenylaeetátu (0,50 g, 2,1 mmol) v methanolu (5 ml) a H2O (1 ml) byl přidán hydroxid lithný, monohydrát (0,18 g, 2 ekv.). Po míchání reakční směsi při teplotě místnosti přes noc byl koncentrován do sucha. Potom byla do zůstatku přidána kyselina octová a získaná směs byla rozdělena mezi EtOAc a H2O. Organická vrstva byla promyta NaCl (nasyc.), sušena nad Na2SO4 a odpařena ve vakuu za získání 3-(morfolin-4-yl)fenyloctové kyseliny (0,42
g).
Krok 3
3-(Morfoíin-4-yl)fenyloctová kyselina (0,42 g, 1,9 mmol) byla rozpuštěna v CH2C12 (5 ml) a byl přidán oxalylchlorid (0,22 mí, 1,2 ekv.). Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po 2 hodiny a potom byla ochlazena na 0 °C. Po kapkách byl přidán roztok hydroxidu amonného (2 ml). Těkavé látky byly odstraněny a surová směs byla rozpuštěna v methanolu, míchána a filtrována. Filtrát byl koncentrován za získání 3-(morfolin-4-yl)benzylaminu (0,5 g), který byl v dalším kroku bez jakékoliv další purifikace.
Krok 4
Do suspenze 3-(morfolin-4-yl)benzylamidu (0,5 g) a methyl indolglyoxalátu (0,55 g, 2,5 mmol) v THF při 0 °C byl přidán terc.butoxid draselný (1,0 M, 3,45 ml,
3,45 mmol) po kapkách. Reakční směs, která se zbarvila do oranžova, byla míchána při 0 °C po 1 hodinu a potom byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Po míchání přes noc byla reakční směs zchlazena H2O a extrahována EtOAc. Organická vrstva byla promyta NaCl (nasyc.) a sušena nad Na2SO4. Preparativní TLC purifikace s 5% MeOH v CH2C12 poskytla 3-(1-methylindol-3-yl)-4-(3-morfolin-4-yl)-lH-pyrrol-2,5dionu (150 mg) jako oleje, který byl konvertován na hydrochloridovou sůl a ta rekrystalizována z EtOAc za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-morfolin-4-ylfenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu hydrochloridu (72 mg) jako pevné látky.
*H NMR (DMSO-d6): δ 11,02 (s, NH), 8,02 (s, IH), 7,48 (d, IH, J = 8,1),
7,15 (m, 2H), 6,90 (m, 2H), 6,74 (t, IH, J = 7,4), 6,34 (d, IH, J = 8,1), 3,90 (s, 3H),
3,62 (ms, 4H), 2,8 (m, 4H); MS (LSIMS): (M+H)+388; tepl.tání 205,3 -212,6 °C.
• tt
• tt tt • tttt • tttttt • «tttttttt • tttt
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou morfolinu pyrrolidinem v kroku 1 byl připraven 3-(l-meťhylindol-3-yl)-4-(3-pyrrolidon-l-ylfenyl)-lHpyrrol-2,5-dion. MS (El); M+ 372.
Příklad 5
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-aminopropyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu
Krokl
Do roztoku methyl 3-hydroxyfenylacetátu (2,49 g, 15 mmol) a l-brom-3chlorpropanu (2,96 tni, 2 ekv.) v acetonitrilu (50 ml) byl přidán uhličitan česný (5,4 g, 1,1 ekv.). Reakční směs byla refluxována po 24 hodiny, potom byla ochlazena při teplotě místnosti a filtrována přes celitovou podložku. Filtrát byl koncentrován a zůstatek byl purifikován na silikagelové koloně s 5/55/40 MeOH/CHbCh/hexanem za získání methyl 3-(3-chlor-propyloxy)fenylacetátu (4,2 g) jako oleje.
Krok 2
Do roztoku methyl 3-(3-chlorprópyloxy)fenylacetátu (2,87 g, 10 mmol) v methanolu (15 ml) byl přidán LiOH-H2O (0,84 g, 2 ekv.). Reakění směs byla míchána při teplotě místnosti po 2 hodiny. Těkavé látky byly odstraněny a zůstatek byl rozdělen mezi EtOAc a vodu. Vodná vrstva byla okyselena a extrahována EtOAc. Spojené EtOAc-vrstvy byly promyty NaCl (nasyc.), sušeny nad Na2SO4 a koncentrována za získání 3-(3-chlorpropyloxy)fenyloctové kyseliny (2,8 g).
Krok 3
Do roztoku N-methylindolu (1,16 ml, 9,1 mmol) v diethyletheru (70 ml) při 0 °C byl přidán po kapkách oxalylchlorid (0,83 ml, 1,1 ekv.). Po přidání byla reakční směs míchána při 0 °C po 15 min, a těkavé látky byly odstraněny ve vakuu. Zůstatek byl opětovně rozpuštěn v dichlormethanu (70 ml) a byl přidán triethylamin (2,3 ml, 2 ·· · • · • · · • ··· • · ·· ·· ·· • · · · · · · • * · ♦ · • · · · · · • · · · · ekv.). Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a po kapkách byl přidán roztok 3-(3chlor-propyloxy)fenylocotvé kyseliny (2,73 g, 10 mmol) v dichlormethanu (70 ml). Získaná směs byla míchána při 0 °C a potom byla ponechána ohřát na teplotu místnosti přes noc. Těkavé látky byly odstraněny pod vakuem a zůstatek byl purifikován na silikagelové koloně dichlormethanem za získání 3-(l-methylindol-3yl)-4-[3-(3-chlorpropyloxy)-fenyl]furan-2,5-dionu (1,1 g).
Krok 4
Do roztoku 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-chlorpropyloxy)-fenyl]furan-2,5dionu (1,0 g, 2,2 mmol) v DMF (15 ml) byl přidán azid sodný (0,43 g, 3 ekv.) a výsledná směs byla zahřívána při 75 °C po 24 hodiny. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti a zchlazena vodou. Potom byl produkt extrahován EtOAe. EtOAc-vrstvy byly promyty H2O, NaCl (nasyc.), sušeny nad Na2SC>4 a koncentrovány ve vakuu za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-azidopropyloxy)fenyl]furan-2,5-dionu (1,0 g), který byl použit přímo v dalším kroku bez další purifikace.
Krok 5
Do roztoku 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-azidopropyloxy)-fenyl]furan-2,5dionu (1,0 gl) v DMF (7 mí) byl přidán hydroxid amonný (50 ml). Směs byla zahřívána při 140 °C po 3,5 hodiny. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti a zředěna vodou. Sraženina byla filtrována a sušena za získání 3-(lmethylindol-3-yl)-4-[3-(3-azidopropyloxy)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (0,58 g). MS (El): M+ 401.
Krok 6
Do roztoku 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-azidopropyloxy)~fenylj-lH-pyrrol-2,5-dionu (0,4 g, 1 mmol) v THF (20 ml) byl přidán Ph3P (0,25 g, 1,1 ekv.), následně voda (0,017 ml). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti po 48 hodin a potom koncentrována ve vakuu. Zůstatek byl purifikován na silikagelové koloně s 8% (10% NH4OH v methanolu) v CH2Q2 za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-aminopropyloxy)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5~dionu (0,35 g), který byl konvertován na HCl sůl a rekrystalizoval za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3— aminopropyloxy)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (0,21 g) jako HCl soli.
'Η NMR (DMSO-d6): δ 11,1 (s, NH), 8,06 (s, 1H), 7,50 (d, 1H, J = 8,2),
7,20 (m, 2H), 6,91 (m, 2H), 6,73 (t, 1H, J = 7,2), 6,33 (d, 1H, J = 8,0), 3,93 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,67 (br.s. 2H), 1,85 (m, 2H); MS (El): M+375.
Příklad 6
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-aminoethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu
Krok 1
Do míchaného roztoku methyl 3-hydroxyfenylacetátu (1,66 g, 10 mmol), 2chlorethanolu (1,34 ml, 2 ekv.) a trifenylfosfinu (5,24 g, 2 ekv.) v THF (100 ml) při 0 °C byl přidán po kapkách diisopropylazodikarboxylát (3,96 ml, 2 ekv.) a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Reakční směs potom byla zchlazena s NaHCCb a produkt byl extrahován EtOAc. EtOAc vrstvy byly promyty solankou, sušeny nad síranem sodným a koncentrovány. Purifikace na koloně se silikagelem s 10% EtOAc v hexanu poskytla methyl 3-(2-chlorethyloxy)fenylacetát (1,6 g, 70% výtěžek), který byl konvertován na 3-(l-methylindol-3-yl)4-[3-(2-aminoethyloxy)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion postupem podle příkladu 5, kroků
2-6 výše.
’H NMR (DMSO-d6): δ 11,11 (s, NH), 8,22 (br.s, NH2), 8,05 (s, 1H), 7,49 (d, 1H, J = 8,2), 7,20 (m, 1H), 7,12 (s, 1H), 6,99 (dd, 1H, J - 2,6, 8,3), 6,90 (d, 1H, J - 7,8), 6,75 (t, 1H, J = 7,3), 6,35 (d, 1H, J = 8,1), 4,09 (t, 2H, J = 5,0), 3,91 (s, 3H), 3,15 (br.s, 2H); MS (LSIMS): (M+H)+ 362; t.t. 182,4-187 °C; Anal. (C21H2oN303Cl-0,85 H2O): C, Η, N, • · · • 4 * * *
Příklad 7
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{3-[(2(RS),3-dihydroxy-2-hydroxypropylamino]feny 1} -1 H-pyrrol-2,5-dionu
Krokl
Oxalylchlorid (4,9 ml, 56 mmol) byl přidán po kapkách do míchaného roztoku
1-methyl indolu (6,5 ml, 51 mmol) v etheru (350 ml) při 0 °C. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána při 0 °C po 30 min, a potom byly těkavé látky odstraněny za sníženého tlaku za získání l-methylindol-3-glyoxylyl chloridu.
Krok 2
Roztok l-methylindol-3-glyoxylyl chloridu v dichlormethanu (350 ml) byl přidán do roztoku 3-nitrofenyloctové kyseliny (8,5 g, 0,093 ml) a triethylaminu (13 ml, 93 mmol) v dichlormethanu (350 ml) při 0 °C. Reakční směs potom byla míchána při teplotě místnosti přes noc a potom koncentrována za sníženého tlaku. Surový produkt byl purifikován na koloně se silikagelem s 6:1 hexanem / ethylacetátem za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dionu (9 g, 55%).
Krok 3
Roztok 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dionu (9 g, 26 mmol) v DMF (20 ml) byl zahříván na asi 140 °C. Po částech byl přidán vodný amoniak (20 ml) a zahřívání pokračovalo 6 hodin. Byla přidána voda (20 ml) a reakční směs byla ponechána stát při teplotě místností přes noc. Oranžově zbarvená pevná látka byla odfiltrována, promyta vodou a sušena ve vakuu za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (6,7 g, 75%).
Krok 4
Do roztoku 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (6,5 g, 19 mmol) v acetonu (500 ml) byl přidán TiCl3 (45 ml) v 5 částech ve 30minutových intervalech. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc a potom neutralizována s ION NaOH. Produkt byl extrahován EtOAc, sušen a koncentrován. Surový produkt byl purifikován na silikagelové koloně s 3% MeOH vCH2C12 za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (4,9 g, 82,5 %).
Krok 5
Směs 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (100 mg, 0,32 mmol) a 2,2-dimethyldioxolan-4-karboxaldehydu (0,38 mmol) (připraveného, jak je popsáno vKumont, von R., a kol., Helv. Chim. Acta., 66, 814, (1983)) v dichlormethanu (12 ml) byla míchána při teplotě místnosti po 10 min., a potom byl přidán Na(Oac)3BH (120 mg, 0,57 mmol). Reakční směs byla míchána přes noc a potom rozdělena mezi EtOAc a H2O. Organická vrstva byla oddělena, promyta vodou a koncentrována. Surový produkt byl purifikován preparativní TLC s 3/1 hexan/ EtOAc za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2,2-dimethyldioxolan-4-ylmethylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (32,6 mg, 24%).
Krok 6
3-(l-Methylindpl-3-yl)-4-[3-(2,2-dimethyldioxolan-4-ylmethyl-amino)fenyl]lH-pyrrol-2,5-dion (30 mg) byl rozpuštěn v MeOH (5 ml) a H2O (1 ml). Bylo přidáno katalytické množství p-toluensulfonové kyseliny a reakční směs byla míchána při 50 °C přes noc. Reakční směs byla koncentrována a zůstatek byl purifikován preparativní TLC za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{3-[(2(RS),3dihydroxypropylamino]fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dionu (18 mg, 66%). MS (El): M+ 391; T.t. 160-163,5 °C.
Příklad 8
Syntéza 3-(l-methylindoI-3-yl)-4-(3-tetrahydropyran-4-yíaminofenyl)- 1Hpyrrol-2,5-dionu • · · · · · · · • · · · · · ♦ ·····
Směs 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (100 mg, 0,32 mmol) a tetrahydro-4H-pyran-4-onu (65 mg, 0,65 mmol) v MeOH (8 ml) byla míchána při teplotě místnosti po 40 min., a potom byl přidán NaCNBH3 (63 mg, 1,0 mmol). Po míchání reakční směsi přes noc byly těkavé látky odstraněny ve vakuu a zůstatek byl purifikován preparativní TLC (3% MeOH/CLLCL) za získání 3-(lmethylindol-3-yl)-4-(3-tetrahydropyran-4-ylaminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (88,2 mg, 70%). LC/MS: M1 401 (98,6%).
Příklad 9
Syntéza 3-( 1 -methylindol-3-yl)-4-[3-(2,2-dimethyl-1,3-dioxan-5-ylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu
Směs 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (200 mg, 0,63 mmol) a 2,2-dimethyl-l,3-dioxan-5-onu (96 mg, 0,76 mmol) v MeOH (10 ml) byla míchána při teplotě místnosti po 15 min., a potom byl přidán NaCNBH3 (79 mg,
1,26 mmol). Po míchání reakční směsi přes noc byly těkavé látky odstraněny ve vakuu a zůstatek byl purifikován preparativní TLC (1% MeOH/CHiCb) za získání 3(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2,2-dimethyl-l,3-dioxan-5-ylamino)fenyl)-lH-pyrrol-2,5dionu (185 mg, 68%). MS(EI): M+ 431; T.t. 201-203 °C.
Příklad 10 ·· ·· · ·· · • 9 9 · · ··· · ··
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 99 9 9 99 99999
9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 999 99 9
Syntéza 3-(1 -methylindol-3-yl)-4-[3-(1 -(RS)-hydroxy-2-hydroxymethylethylamino)fenyl] -1 H-pyrrol-2,5-dionu
Roztok 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2,2-dimethyl-l,3-dioxan-5-yl-amino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (173 mg, 0,4 mmol) v MeOH (30 ml) a H2O (3 ml) s katalytickým množstvím p-toluensulfonové kyseliny byl míchán při 50 °C přes noc. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a zůstatek byl purifíkován preparativní TLC (3% MeOH/CH2Cl2) za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(l-(RS)-hydroxy-2hydroxymethylethylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (130 mg, 83%). MS(LSIMS): (M+H)+ 392, T.t. 97,5-101 °C.
Příklad 11
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(imidazol-2-ylmethylamino)fenyl]-4Hpyrrol-2,5-dionu
Směs 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (100 mg, 0,32 mmol) a imidazol-2-karboxaldehydu (40 mg, 0,42 mmol) v MeOH (8 ml) byla míchána po 15 min., a potom byl přidán NaCNBH3 (40,2 mg, 0,64 mmol). Po míchání reakční směsi přes noc byly těkavé látky odstraněny ve vakuu a zůstatek byl purifíkován preparativní TLC (3% MeOH/CH2Cl2) za získání 3-(l-methylindol-3-yl)4-[3-(imidazol-2-ylmethylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (24,8 mg, 20%). MS/MS: M+ 397 (94,2%).
φ · · · · ·
Příklad 12
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-terc.butyldimethylsiIyloxapropylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu ·· ·
Krok 1:
Tetrapropylamonium perruthenát (0,18 g, 5,3 mmol) byl přidán do směsi methylenchloridu (20 ml) a acetonitrilu (2 ml) obsahujícího 3(terc.butyldimethylsilyloxy)-propanol (2 g, 0,01 mmol), N-methylmorfolin N-oxid (1,76 g) a molekulová síta 4 Angstromy. Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc a potom byla filtrována přes podložku ze silikagelu. Filtrát byl koncentrován ve vakuu za získání 3-(terc.butyldimethylsilyloxy)-propionaldehydu (1,3 g, 66%).
Krok 2
Směs 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (0,2 g, 6 mmol) a 3-(terc.butyldimethylsilyloxy)-propionaldehydu (0,25 g, 13 mmol) v CH2CI2 (10 ml) a MeOH (5 ml) byla míchána po 15 min. při teplotě místnosti a potom byl přidán NaCNBH3 (57 mg, 1,5 ekv.). Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc a potom byla koncentrována ve vakuu. Zůstatek byl purifikován preparativní TLC za získání 98 mg 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-terc.butyldimethylsilyloxypropylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (32%). MS(LSIMS): (M+H)+ 490; t.t. 58-65 °C.
Zpracování, jak je popsáno v příkladu 12 výše, ale s náhradou 3-(terc.butyldimethylsilyloxy)-propanolu s 2-(terc.butyldifenylsilyloxy)-ethanolem poskytlo 3 -(1 -methylindol-3 -y 1 )-4 - [3 -(3 -terč. butyldifenylsilyloxy-ethylamino)fenyl] -1Hpyrrol-2,5-dion.
Příklad 13
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-hydroxypropylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5dionu
Do roztoku 3-(l-methyIindol-3-yl)-4-[3-(3-terc.butylsilyloxypropyl-amino)fenyl]-l H-pyrrol-2,5-dionu (85 mg, 0,17 mmol) v THF byl přidán roztok 1M tetrabutyíamonium fluoridu v THF (5 ml) pomocí injekční stříkačky. Reakční směs byla míchána po 1 h při teplotě místnosti a potom byla koncentrována ve vakuu. Zůstatek byl purifikován preparativní TLC (4 % MeOH/ClLCL) za získání 3-(lmethylindol-3-yl)-4-[3-hydroxypropylamino)fenyl-1 H-pyrrol-2,5-dionu, který byl konvertován na HCl sůl (29 mg, 41 %) rozpuštěním v MeOH a přidáním 1M HCl v etheru (3 ml).
MS (LSIMS): (M+H)+ 376, T.t. 180-192 °C.
Zpracování, jak je popsáno v příkladu 13 výše, ale s náhradou 3-(lmethylindol-3 -y 1)-4 - [3 -(3 -terč. -butyl silyloxypropylamino)-fenyl] -1 H-pyrrol-2,5 -dionu s 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-terc.-butyldifenylsilyloxyethylamino)-fenyl]1 H-pyrrol-2,5-dionem poskytlo 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-hydroxyethylamino)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion.
MS (LSIMS): (M+H)+ 362, T.t. 170,3-170,6 °C.
Přiklad 14
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-hydroxy-l-methylpropylamino)fenyl]-lHpyrrol-2,5-dionu
Do směsi 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (0,2 g, 0,6 mmol) a 4-hydroxy-2-butanonu (80 mg, 1,5 ekv.) v dichlormethanu (15 ml) byl přidán NaCNBH-) (56 mg, 1,5 ekv) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po 3 dny. Produkt 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(3-hydroxy-l-methylpropylamino)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion byl oddělen preparativní TLC (8,9 mg, 3,6 %).
LC/MS: M+ 389.
Příklad 15
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-hydroxy-l-methylethylamino)fenyl]-lHpyrrol-2,5-dionu
• · · • ···· • ·
Do směsi 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (100 mg, 0,32 mmol) a hydroxyacetonu (0,03 ml, 1,5 ekv.) v CH2CI2 (12 ml) a THF (5 ml) byl přidán NaCNBH3 (28 mg, 1,5 ekv) a reakční směs byla míchána přes noc. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a zůstatek byl purifikován preparativní TLC za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(2-hydroxy-l-methylethylamino)fenyl-lHpyrrol-2,5 dionu (8 mg).
LC/MS: M+ 375 (85,6 %).
Příklad 16
Syntéza 3-(l-methylindol-5-chlorindol-3-yl)-4-{3-[((RS))-2,3-dihydroxypropyl-amino] fenyl} -1 H-pyrrol-2,5-dionu
Krokl
Při teplotě místnosti byly do roztoku 5-chlorindolu (4,97 g) v suchém DMF (40 g) přidány pelety hydroxidu draselného (2,76 g) a míchány 1 h, až byla většina pevné látky rozpuštěna. Výsledná směs byla ochlazena na 0 °C v ledové lázni a po kapkách byl přidán jodmethan (2,45 ml) a později míchán přes noc při teplotě místnosti pod argonem. Reakční směs byla nalita do vody a extrahována dvakrát EtOAc. Podíly EtOAc byly spojeny, promyty vodou, sušeny nad síranem hořečnatým, koncentrovány a zpracovány mžikovou chromatografií s 10% EtOAc/hexanem za získání l-methyl-5-chlorindolu jako fialové kapaliny (5,43 g).
Krok 2 l-Methyl-5-chlorindol-3-glyoxylylchlorid byl připraven zpracováním jak je popsáno v příkladu 12, kroku 1, ale s náhradou l-methyl-5-chlorindolu za 5methylindol.
to toto toto to to • * ·«··
Krok 3
3-(l-Methyl-5-chlorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dion byl připraven zpracováním, jak je popsáno v příkladu 12, krok 2, ale s náhradou 1-methylchlorindolu-3-glyoxylyl chloridu za l-methylindol-3-glyoxylyl chlorid.
Krok 4
-(1 -Methy 1-5 -chlorindol-3 -y 1)-4-(3 -nitro feny 1)-1 H-pyrrol-2,5 -dion byl připraven zpracováním, jak je popsáno v příkladu 12, krok 3, ale s náhradou 3-(lmethyl-5-chlorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dionu za 3-(l-methylindol-3-yl)4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dion.
Krok 5
Směs 3-(l-methyl-5-chlorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (865 mg), 10% paladia na uhlíku (90 mg) a ledové HOAc (35 ml) byla míchána a hydrogenována při atmosférickém tlaku použitím balonu (2 h). Reakční směs byla filtrována přes podložku z celitu, ochlazena na 0 °C a byly přidány pelety KOH do pH 8. Roztok byl extrahován s EtOAc, sušen (síran hořečnatý) a stripován. Surovina byla podrobena mžikové chromatografií 10% až 20% EtOAc-hexanem za získání 3-(l-methyl-5-chlorindolu-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu (495 mg).
Krok 6
Do roztoku 3-(l-methyl-5-chlorindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-1 H-pyrrol-2,5-dionu (492 mg) v methanolu (250 ml) byl přidán dimer DL-glyceraldehydu rozpuštěný ve vodě (15 ml), následně kyanotetrahydroboritan sodný (110 mg) a reakční směs byla míchána přes noc pod argonem. Podle TLC byla reakce ukončena pouze z 30 %. Byl přidán další dimer (150 mg) a kyanohydroboritan (100 mg). Po dalších 6 h se zdálo, že je reakce ukončena z 50 %. Rozpouštědlo bylo odstraněno a surový zůstatek byl podroben mžikové chromatografií s 5% až 10% MeOH / dichlormethanem. Byl získán 3-(l-methyl‘-5-chorindol-3-yl)-4-{3-[((R,S)-2,3-dihydroxypropylamino]fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dion jako tmavě červená pevná látka (220 mg).
MS(EI): (M+H/426; T.t. 224,8-226,1 °C.
Příklad 17
Syntéza 3-(l-methyl-5-íTuorindol-3-yl)-4-{3-[((R,S)-2,3-di-hydroxypropylaniino]fenyl} - lH-pyrrol-2,5-dion
Krokl
2-Methyl-5-fluorindol byl připraven postupem, jak je popsán v příkladu 16, krok 1, ale s náhradou 5-fluorindolu za 5-chlorindol.
Krok 2 l-ethyl-5-fluorindol-3-glyoxylyl chlorid byl připraven postupem, jak je popsán v příkladu 16, krok 2, ale s náhradou l-methyl-5-fluorindolu za 1-methyl chlorindol.
Krok 3
3-(l-Methyl-5-fluorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dion byl připraven postupem, jak je popsán v příkladu 16, krok 3, ale s náhradou l-methyl-5-fluoríndol
3-glyoxylyl chloridu za l-methyl-5-chlorindol-3-glyoxylyl chlorid.
Krok 4
3-(l-Methyl-5-fluorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dion byl připraven postupem, jak je popsán v příkladu 16, krok 3, ale s náhradou 3-(1-methyl-5fluorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dionu za 3-( l-methyl-5-chlorindol-3-yl)-4 (3-nitrofenyl)furan-2,5-dion.
Krok 5
3-(1 -Methyl-5-fluorindol-3-yl)-4-(3 -aminofenyl)-1 H-pyrrol-2,5-dion byl připraven postupem, jak je popsán v příkladu 16, krok 5, ale s náhradou 3-(1-3-(1• ·
-methyl-5-fluorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dionu za l-methyl-5chlorindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dion.
Krok 6
3-(l-Methyl-5-fluorindol-3-yl)-4-{3-[((R,S)-2,3-dihydroxypropylamino]-fenyl}-lHpyrrol-2,5-dion byl připraven postupem, jak je popsán v příkladu 16, krok 5, ale s náhradou 3-(l-methyl-5-fluorindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-2,5-dionu za 3-(lmethyl-5-chlorindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dion.
MS (El) (M+H)+ 410; T.t. 223,2-225 °C.
Přiklad 18
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylsulfanyl)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu
Krokl
Do chladného methanolu (20 ml) při 0 °C byl přidán po kapkách thionylchlorid (7 ml). Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána při 0 °C po 10 min, a potom byla přidána kyselina 3-merkaptofenyloctová (4,0 g, 23,8 mmol). Získaná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Těkavé látky byly odstraněny a zůstatek byl rozdělen mezi vodu a ethylacetát. Organická vrstva byla oddělena, promyta H2O, NaHCO3, a NaCl (nasyc.) a sušena nad Na2SO4. Surový produkt byl purifikován na koleně ze silikagelu s 20% EtOAc v hexanu za získání bis(3-ethoxykarbonylmethylfenyl)-disulfidu (4,1 g).
Krok 2
Do roztoku bis(3-ethoxykarbonylmethylfenyl)-disulfidu (4,1 g, 11 mmol) v THF (20 ml) a methanolu (5 ml) byl přidán NaBH4 (1,76 g, 4 ekv.) a získaná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Potom byla zchlazena NH4CI (nasyc.) a • · · • ·· ·· extrahována EtOAc. EtOAc vrstva byla promyta vodou, NaCl (nasyc.) a sušena nad Na2SO4. Purifikace na koloně s 15% EtOAc v hexanu poskytla 3,47 g methyl (2merkaptofenyl)acetátu (84%).
Krok 3
Do roztoku 3-(merkaptofenyl)acetátu (3,47 g, 19 mmol) v N-methylpyrrolidinonu (100 ml) byly přidány (R)-2,2~dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl)tosylát) (6,54 g, 1,2 ekv.) a K2CO3 (7,9 g, 4 ekv.). Reakční směs byla zahřívána při 65 °C přes noc. Byla ochlazena na teplotu místnosti, zchlazena vodou a extrahována s EtOAc. Organická vrstva byla oddělena, promyta vodou a NaCl (nasyc.) a sušena nad Na2SO4. Surový produkt byl purifikován na silikagelové koloně s 10% EtOAc v hexanu za získáni 5,2 g methyl 3-(R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylsulfanyl)fenylacetátu (92%).
Krok 4
Oxalylchlorid (1,05 ekv., 3,64 ml) byl přidán po kapkách do roztoku Nmethylindolu (5,1 ml, 50 mmol) v diethyletheru (395 ml) při 0 °C. Vytvořila se žlutá sraženina.Po ukončené přidávání byla reakční směs míchána při 0 °C po 30 min. Potom byla suspenze přidána po kapkách do roztoku 100 ml hydroxidu amonného při 0 °C po 10 min po ukončení přidávání. Do extraktu byl přidán dichlormethan a organická vrstva byla oddělena, promyta NaCl (nasyc.), sušena nad síranem sodným a koncentrována. Zůstatek rekrystalizoval z dichlormethanu a hexanu za získání 5,6 g N-methylindolyl-3-glyoxylamidu.
Krok 5
Do roztoku N-methylindolyl-3-glyoxylamidu (0,404 g, 2 mmol) v THF (15 ml) při 0 °C byl přidán terc.butoxid draselný (2 ml, 1,0 M v THF) po kapkách. Vytvořila se sraženina a reakční směs byla míchána při 0 °C po 5 min. Potom byl přidán methyl 3-(R) -2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylsulfanyl)fenylacetát (0,65 g, 1,1 ekv.), míchán po 5 min a potom následovalo přidání terc.butoxidu draselného (4 ml, 1,0 M). Výsledná směs byla míchána při 0 °C po 2 hodiny a potom byla ponechána ohřát na teplotu místnosti. Po 3 hodinách byl přidán methyl 3-(R)-2,2-dimethyl-l,3dioxolan-4-ylmethylsulfanyl)fenylacetát (0,65 g) a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Potom byla zchlazena chloridem amonným (nasyc.) a • ·
extrahována EtOAc. Organická vrstva byla promyta NaCl (nasye.), sušena a koncentrována. Kolonová purifikace s 7/43/50 EtOAc/CřUCh/hexanem poskytla 0,52 g 3-( 1 -methylindol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-ylmethylsulfanyl)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu. MS(EI): M+448.
• 9 99
Příklad 19
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylsulfinyl)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu
Do roztoku 3-( 1 -methylindol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4ylmethylsulfanyl)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (100 mg, 0,22 mmol) v methanolu (5 ml) a vodě (2,5 ml) při -10 °C byl přidán oxon (16 mg, 1,15 ekv.) a míchán po 2 hodiny při -10 °C. Potom byla reakční směs nalita do ledové vody a extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta NaS2O3 (15% aq.), NaCl (nasyc.) a sušena nad síranem sodným. Preparativní TLC s 2/4/4 acetonu / dichlormethanu/hexanu poskytla 45 mg 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2dimethyl-1,3-dioxolan-4-ylmethylsulfinyl)-fenyl]- lH-pyrrol-2,5-dionu. MS (ESI): (M+l)+465.
Příklad 20
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylsulfonyl)-fenyl]-1 H-pyrrol-2,5-dionu φ · • ·
Do roztoku 3-( 1 -methylindol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4ylmethylsulfanyl)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu (100 mg, 0,22 mmol) v methanolu (5 ml) a vodě (2,5 ml) při -10 °C byl přidán oxon (16 mg, 1,15 ekv.) a míchán po 2 hodiny při -10 °C. Potom byla reakční směs nalita do ledové vody a extrahována dichlormethanem. Organická vrstva byla promyta Na2S2O3 (15% aq.), NaCl (nasyc.) a sušena nad síranem sodným. Preparativní TLC s 2/4/4 acetonu / dichíormethanu/hexanu poskytla 45 mg 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylsulfinyl)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu. MS (ESI): (M+l)+481.
Příklad 21
Syntéza 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,3-dihydroxypropylsulfanyl)fenyl]-lHpyrtol-2,5-dionu
Toluensulfonová kyselina (10 mg) byla přidána do roztoku 3-(l-methylindol3-yl)-4-{3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl-methylsulfanyl)fenyl]-lH-pyrroI-2,5dionu (60 mg) v methanolu (10 ml) a vodě (1 ml) a reakční směs byla zahřívána 50 °C po 2 hodiny. Těkavé látky byly odstraněny a zůstatek byl rozdělen mezi vodu a EtOAc. Organická vrstva byla promyta NaCl (nasyc.) a sušena nad síranem sodným. Surový produkt byl purifikován na silikagelové koloně s 10/45/45 «« 4· ·· · 44 4 φ 44 · · 444 4 44 • 4 4 4·· 4 4·· • · 4 4 · · · · · 4 44 44
444 444··· '-''-Χ 44 44·· ·· ··· ·· *
MeOH/CH2Cl2/hexanem a dále purifikována rekrystalizací z CILCL/hexanu za získání 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,3-dihydroxypropylsulfanyl)fenyl]-lHpyrrol-2,5-dionu (47 mg). MS (El): M+ 408.
Podle postupů popsaných výše ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl-methylsulfanyl)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu s 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl-methylsulfinyl)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionem sé získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,3dihydroxypropylsulfinyl)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion. MS (ESI): (M+l)+425.
Podle postupů popsaných výše ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-yl-methylsulfanyl)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu s 3 -(1 -methy lindol-3 -yl)-4-{ 3 -((R)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl-methylsulfony 1)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionem se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,3dihydroxypropylsulfonyl)fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion. MS (ESI): (M+l)+441.
Příklad 22
Syntéza 3-{ 3-[2,3-dihydroxypropyl)amino]fenyl} -4-[5-fluor-1 -(3-hydroxypropyl)1 H-indol-3 -yl] -1 H-pyrrol-2,5 -dionu
Krokl
Chlortrifenylmethan (14,64, 52,5 mmol) byl přidán do roztoku 3-brom-lpropanolu (6,95 g, 62,5 mmol) v pyridinu (30 ml) pod argonem. Roztok byl míchán pod argonem po 12 hodin a vytvořila se sraženina. Ta byl filtrována a promyta pyridinem. Filtrát byl stripován a spojen s předchozí sraženinou. Tato látka byla purifikována kolonovou chromatografií (SiO2, 5% CH2C12 / hexan, potom 10% «« · ·· · ···· .············· • · · · · · · A · !
·· ···· ·· ··· ·· ·
CH2Cl2/hexan). Bezbarvý olej (5,2 g) byl ponechán ztuhnout a rekrystalizoval z hexanu za získání chráněného alkoholu (5,2 g).
Krok 2
Do roztoku hydridu sodného (60%, 0,44 g, 10,9 mmol) v dimethylformamidu (8 ml) pod argonem při teplotě místnosti byl přidán 5-fluorindol (0,98 g, 7,25 mmol) v dimethylformamidu (10 ml). Výsledný roztok byl míchán po 1 hodinu a potom ochlazen na 0 °C. Byl přidán bromid (krok 1 výše, 4,15 g, 10,9 mmol) v dimethylformamidu (15 ml) a reakce byla ponechána probíhat při teplotě místnosti a byla míchána po 12 hodin. Směs byla nalita do vody (200 ml) a extrahována ethylacetátem (2x). Organický roztok byl promyt vodou (2x) a sušen (solanka, MgSO4). Odpaření za sníženého tlaku poskytlo bezbarvý olej (4,9 g), který byl purifikován chromatografií (SiO2, 5% EtOAc-hexan) za získání indolu jako bílé pevné látky (2,98 g).
Krok 3
Alkylovaný fluiorindol (krok 2 - výše) byl konvertován na nitroarylindol postupy popsanými výše v příkladu 7, krocích 1-3.
Krok 4
Suspenze nitroarylindolu (krok 3 - výše, 0,7 g, 10,7 mmol), dodekakarbonyl triželeza (0,65 g, 1,3 mmol) a absolutního ethanolu (30 ml) byla reťluxována přes noc pod argonem. Horká směs byla filtrována přes Buchnerovu nálevku naplněnou zcela celitem a promyta několikrát horkým methanolem a horkým 50% MeOH/EtOAc, až je většina oranžové barvy odstraněna. Odpaření těkavých látek za sníženého tlaku a purifikace chromatografií (SiO2, CH2CI2, potom 1% MeOH / CH2CI2, potom 2% MeOH /CH2CI2) poskytly anilin jako oranžovou pevnou látku (0,43 g).
Krok 5
DL-glyceraldehyd (0,25 g, 1,38 mmol) ve vodě (30 ml) byl přidán do roztoku anilinu (krok 4 - výše, 0,43 g, 0,69 mmol) v MeOH (zcela rozpuštěný) pod argonem. Reakční směs byla míchána po 30 min, byl přidán kyanohydroboritan sodný (89 mg, *« 9 • · · • · · · • · ····· • · · ·· · ·· ·· • 9 · · • · « • « + • · · ·· ·»·«
1,38 mmol) a směs byla míchána po 12 hodin. Odpaření za sníženého tlaku a purifikace chromatografií (SÍO2, 5% MeOH / CH2CI2 / 0,5% NH4OH) poskytly diol jako oranžovou pěnu (295 mg).
Kroků
Do roztoku diolu o teplotě místnosti (krok 5 - výše, 0,245 g, 0,35 mmol) v methylenchloridu (10 ml) pod argonem byla přidána kyselina trifluoroctová (0,16 ml, 2,22 mmol) následovaná anhydridem kyseliny trifuroctové (0,3 ml, 2,11 mmol). Reakční směs byla míchána po 10 min, ochlazena na 0 °C a byl přidán triethylamin (0,6 ml). Roztok byl míchán po 15 min, byla přidána voda (0,5 ml) a reakční směs byla nalita do MeOH (10 ml). Odpaření těkavých látek za sníženého tlaku poskytlo surový reakční zůstatek. Tento byl rozpuštěn v methylenchloridu / methanolu (50%) a zpracován s triethylaminem (1-2 ml) a odpařen za sníženého tlaku. Purifikace chromatografií (S1O2, CH2CI2 potom 5% MeOH/CH2Cl2) poskytla volnou bázi. Přidání kyseliny chlorovodíkové v etheru (1M, 2 ekv.) následované odstraněním těkavých látek poskytlo 3-{3-[2,3-dihydroxypropyl)amino]fenyl}-4-[5-ťluor-l-(3hydroxypropyl)-lH-indol-3-yl]-lH-pyrrol-2,5-dion (94 mg). T.t. 118-125 °C: MS (El): (M+H)+ 454.
Příklad 23
Syntéza 3-(5-fluor-l-methyl-lH-indol-3-yl)-4-[3-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenyl]- lH-pyrrol-2,5-dionu
Krokl • · · · · ··· · · · ·· · · · · ···· • · »· · · · ·· ·····
AQ ··· · · · · · · ······ · · ··· * · ·
Při teplotě místnosti byla do roztoku 3-bromfenylalkoholu (1,22 g, 6,05 mmol) v methylenchloridu (20 ml) a dihydrofuranu (2054 g, 30,3 mmol) přidána p-toluensulfonová kyselina monohydrát (11,5 mg, 0,06 mmol). Reakční směs byla míchána po 30 min, následovalo přidání etheru (50 ml). Organický roztok byl promyt nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml), sušen (MgSO4) a odpařen za sníženého tlaku na olej (3,5 g). Ten byl purifikován mžikovou chromatografií (SiO2, 4% EtOAc/hexan) za získání 2-[2-(3-bromfenyl)ethoxy]tetrahydro-2H-pyranu jako bezbarvé kapaliny (1,4 g).
Krok 2
Tetrahydropyran (krok 1 výše, 0,40 g, 1,97 mmol), BINAP (90 mg, 0,295 mmol), Pd2(dba)3 (90 mg, 0,0486 mmol), bezvodý t.butoxíd sodný (0,28 g) byly suspendovány v toluenu (20ml) pod argonem. Potom byl přidán 4-{[terč.-butyl -(difenyl)silyl]oxy}piperidin (0,67 g, 1,97 mmol) a reakční směs byla míchána při 100 °C po 12 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti byl přidán ether, reakční směs byla filtrována přes celit a promyta dalším etherem (25 ml). Odpaření za sníženého tlaku a purifikace chromatografií (SiO2, 5% až 70% EtOAc /hexan) poskytly 4{[terc.-butyl(difenyl)silyl]oxy}-l-{3-[2-(tetrahydro-2H-pyran-2-yloxy)-ethyl]fenyl}piperidin jako hnědavý olej (0,674 g, 1,24 mmol).
Krok 3
Roztok piperidinu (krok 2 výše, 0,64 g, 1,18 mmol) v kyselině octové / tetrahydrofuranu / vodě (4:2:1) byl míchán pod argonem při 50 °C po 24 hodiny. Po odstranění těkavých látek odpařením byl přidán toluen a reakční směs byla odpařena podruhé. Purifikace mžikovou chromatografií (SiO2, 10% EtOAc /hexan) poskytla primární alkohol (0,42 g, 0,914 mmol).
Krok 4
Do 0 °C roztoku alkoholu ( krok 3 výše, 0,42 g, 0,914 mmol) v acetonu (6 ml) bylo přidáno po kapkách Jonesovo reagents (1,9 M, 1,05 ml). Roztok byl míchán při 0 °C po 1 hodinu, ohřát na teplotu místnosti a ponechán míchat po další 2 hodiny. Po kapkách byl přidán isopropanol (10 ml), reakční směs byla zfiltrována přes celit a promyta acetonem (40 ml). Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku, byla přidána voda a směs byla extrahována ethylacetátem (2x). Organický roztok byl sušen (solanka, • 4
MgSO4) a odpařen ve vakuu za získání kyseliny karboxylové jako pevné látky (100 mg, 0,21 mol).
Krok 5
Při teplotě místnosti byl do roztoku kyseliny (krok 4 výše, 100 mg, 0,21 mmol) v methylenchloridu (5 ml) pod argonem přidán po kapkách oxalylchlorid (22 μΐ). Reakění směs byla míchána po 2 hodiny, ochlazena na 0 °C a po kapkách byl přidán hydroxid amonný (0,5 ml). Směs byla míchána při teplotě místnQsti po 1 hodinu a odpařena za sníženého tlaku. Surová směs byla rozpuštěna v methylenchloridu, filtrována a odpařena ve vakuu za získání amidu (94,5 mg, 0,2 mmol).
Krok 6
Do roztoku 1-methylindolu (7,58 g, 50 mol) v suchém etheru (75 ml) při 0 °C pod argonem byl pomalu přidáván oxalylchlorid (4,36 ml, 50 mmol). Získaná suspénze byla míchána po 30 min. Po ochlazení na -65 °C byl methoxid sodný (22,9 ml, 100 mmol, 25% v MeOH) přidáván po kapkách rychlostí, aby se udrželo -60 °C. Když je přidávání ukončeno, je reakění směs ponechána ohřát na teplotu místnosti a míchána po 2 hodiny. Byla přidána voda (30 ml) a surová směs byla míchána a potom filtrována. Získaná pevná látka byla promyta vodou, etherem a sušena vzduchem. Purifikace surového produktu mžikovou chromatografií (S1O2, 20% až 40% ethylacetát / hexan - gradient) poskytla methyl (1-methyl-lH-indol-3-yl)(oxo)acetát jako pevnou látku (9 g, 41,4 mmol).
Krok 7
Do ethyl (1 -methyl-lH-indol-3-yl)-(oxo)acetátu (krok 6 výše, 51,3 mg, 0,237 mmol) a 2-[3-(4-{[terc.butyl-(difenyl)silyl]oxy}piperidin-l-yl)fenyl]acetamidu (krok 5 výše, 93,3 mg,0,197 mmol) při 0 °C v tetrahydrofuranu (10 ml) byl přidán po kapkách roztok t-butoxidu draselného (0,59 ml, 0,591 mmol), 1M v THF). Reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po 12 hodin. Byla přidána voda do suspenze a směs byla extrahována s etherem (2x), sušena (solanka, MgSO4). Odpaření těkavých látek za sníženého tlaku a purifikace mžikovou chromatografií (SÍO2, 1% MeOH / CH2CI2) poskytla indol (54 mg, 0,084 mmol).
Krok 8
Při teplotě místnosti do roztoku indolu (krok 7 výše, 52 mg, 0,0812 mmol) v suchém tetrahydrofuranu (3 ml) pod argonem byl přidán tetrabutylamonium fluorid (0,122 ml, 0,122 mmol, AMv THF). Reakční směs byla míchána po 12 hodin a potom byla přidána voda (25 ml). Směs byla extrahována ethylacetátem (2x), sušena (solanka, MgSCL) a odpařena ve vakuu. Purifikace získaného produktu mžikovou chromatografií (SiO^, 4% MeOH /CH2CI2) poskytla 3-[3-(4-hydroxypiperidin-l-yl)fenyl]-4-( 1-methyl-lH-indol-3-yl)-lH-pyrrol-2,5-dion jako prášek (29,9 mg, 0,0745 mmol): T.t. 136-141 °C: MS (El): (M+H)+ 402.
Příklad 24
Podle postupu popsaného výše v příkladu 1 a 2, ale s náhradou Nmethylindolu s N-methyl-5-chlorindolem a N-methyl-5-fluorindolem v kroku 4 z příkladu 1 se získal 3-(l-methyl-5-chlorindol-3-yl)-4-{3-[((R)-2-hydroxy-2hydroxymethyI)ethoxy]fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dion (MS (El): (M+H)+ 427); a 3-(lmethyl-‘5-fluorindol-3-yl)-4-{3-[((R)-2-hydroxy-2-hydroxymethyl)ethoxy]fenyl}-lHpyrrol-2,5-dion (MS (El): (M+H)+ 411.
• ♦ • · * * · · · e • · φ ·« · φφφφ
Φ φ · φφ φ φ φφ φφφφφ • φ · φ · · · · <
•φ «φφφ φφ «φφ ·· φ
Příklad 25
Syntéza 3-(5-methoxy-l-methylíndol-3-yl)-4-{3-[(2,3-dihydroxypropyl)amino]fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dionu
Krokl
Směs 5-methoxylindol-2-karboxyIové kyseliny (6 g, 31,4 mmol) a zásaditého uhličitanu měďnatého (0,6 g) byla zahřívána na 230 °C - 240 °C pod N2 po dobu pěti až šesti hodin. Po ochlazení byla získaná černá pryskyřice zpracována s benzenem a filtrována. Filtrát byl koncentrován a purifíkován mžikovou kolonou s 9/1 hex/EtOAc, potom 6/1 hexanem/EtOAc. Byl získán požadovaný produkt 5methoxyindol (3,1 g) (61,6%). MS (El): (M++l) 148.
Krok 2
Do roztoku 5-methoxyindolu (1 g, 6,8 mmol) v 8 ml DMF byly přidány hydroxid draselný (0,92 g, 2,4 ekv.) a methyljodid (1 ml, 16 mmol). Získaná směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Po odstranění těkavých látek byl zůstatek zředěn s EtOAc a promyt vodou (4x). Organická vrstva byla sušena a koncentrována za získání 0,9 g (82 %) 5-methoxy.-l-methylindolu. MS /El): (M++ 1) 162.
Krok 3
3-(5-methoxy-l-methylindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dion byl připraven zpracováním, jak je popsáno v příkladu 7, krok 1 a 2, ale s náhradou 5-methoxy-l-methylindolu za l-methylindol.
Krok 4
3-(5-methoxy-l-methylindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dion byl připraven zpracováním, jak je popsáno v příkladu 7, krok 3, ale s náhradou 3-(5— • · • · • · · · • · · · · · · • · · »
• 99 · methoxy-l-methylindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dionu za 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)furan-2,5-dion.
Krok 5
-(5 -methoxy-1 -methylindol-3 -yl)-4-(3 -aminofenyl)-1 H-pyrrol-2,5-dion byl připraven zpracováním, jak je popsáno v příkladu 7, krok 4, ale s náhradou 3-(5methoxy-1 -methylindol-3-y 1)-4-(3-nitrofenyl)-1 H-pyrrol-2,5-dionu za 3-(1 -methyl-indol-3-yl)-4-(3-nitrofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dion.
Krok 6
3-(5-methoxy-l-methyl-lH-indol-3-yl)-4-{-[(2,3-dihydroxypropyl)amino]fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dion byl připraven zpracováním, jak je popsáno v příkladu 7, krok 5, ale s náhradou 3-(5-methoxy-l -methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)- 1Hpyrrol-2,5-dionu za 3-(l-methylindol-3-yl)-4-(3-aminofenyl)-lH-pyrrol-2,5-dion. MS (El): M+421.
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 5-methylindol-2-karboxýlové kyseliny za 5-methoxyindol-2-karboxy lovou kyselinu v kroku 1 se získal 3-(l,5-di-methyl-lH-indol-3-yl)-4-{-[(2,3-dihydroxy-propyl)amino]fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dion. MS (El): M+ 405.
Příklad 26
Syntéza 3 -(5-isopropoxy-1 -methylindol-3 -yl)-4- { 3-((2,3-dihydroxypropyl)amino] fenyl} -1 H-pyrr o 1-2,5 -di onu
Krokl
Směs 3-methyl-4-nitrofenolu (4,59 g, 0,03 mol) a 2-brompropanu (4,06 g,
0,033 mol) byla refluxována s uhličitanem draselným (10 g) v acetonu (200 ml) po 5 hodin. Po ochlazení byla reakční směs filtrována přes celit a zůstatek byl purifikován na mžikové koloně (9/1 hexanu/EtOac) za získání 3,42 g 4-isopropoxy-2-methyl-lnitrobenzenu (58,5 %).
Krok 2
Směs 4-isopropoxy-2-methyl-l-nitrobenzenu (3,55 g, 0,018 mol) a terc.butoxybis(dimethylamino)methanu (9 ml) byla refluxována po 4 hodiny a těkavé látky byly odstraněny. Temně hnědý zůstatek byl rozpuštěn v THF (150 ml) a hydrogenován s katalytickým množstvím 10% Pd na uhlíku s H2 v balónku. Po míchání při teplotě místnosti přes noc byl katalyzátor odfiltrován a filtrát byl koncentrován za získání 3,07 g 5-isopropoxyinolu (96%). MS (El): (M++ 1) 176.
Krok 3
Postup popsaný výše v příkladu 24, kroku 2 až 6, byl následován, ale s náhradou 5isopropoxyindolu za 5-methoxyindol za získání 3-(5-isopropoxy-l-methyl-indol-3yl)-4-{3-[(2,3-dihydroxypropyl)amino]-fenyl}-lH-pyrrol-2,5-dionu. MS (El): M+ 449.
Příklad 27
Syntéza 3-(l-methyl-indol-3-yl)-4-{3-((R)-2,3-dihydroxypropoxyl)-2-methylfenyl}1 H-pyrrol-2,5-dionu
Krokl
Do methanolového roztoku (25 ml) při 0 °C byl po kapkách přidáván thionylchlorid (9,6 ml, 0,13 mol). Po 15 min byla přidána kyselina 3-hydroxy-2— φ φ φ φ φ φ φφφφ φφφφ φ * · φφ φ φφφ φφφφ φ φ φ φφ φ φ φφ φφφφφ
7< φφ® φφφφφφ • ί φφφφφφ φφ φφφ φφ φ methylbenzoová (4 g, 0,033 mol) a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti po 24 hodiny. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a zůstatek byl rozdělen mezi vodu a ethylacetát. Organická vrstva byla oddělena, promyta vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, a sušena nad síranem sodným. Po koncentrování byl surový produkt rekrystalizován z dichlormethanu a hexanu za získání 3,48 g methyl 3-hydroxy-2-methylbenzoátu,
Krok2
Do roztoku methyl 3-hydroxy-2-methylbenzoátu (3,0 g, 18 mmol) vNmethylpyrrQljdinónu (30 ;ml) byl při#p (R)-2^-4jn>pthyl-l3-jJjop)jap-4-yJmethyl. p-tosylát (6,2 g, 1,2 ekv.) a následoval ŤC2CO3 (7,5 g, 3 ekv.). Po zahřívám' sm$si při 96 °C přes noc byla tato ochlazena na teplotu místnosti, zchlazena H2O a rozdělena mezi H2O a EtOAc. Organická vrstva byla oddělena, promyta H2O a NaCl (nasyc.) a potom sušena nad Na2SO4. Surový produkt byl purifikován na silikagelové koloně s 20% EtOAc v hexanu za získání methyl 3-((R)-2,2-dimethyll,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)-2-methylbenzoátu jako oleje (4,5 g).
Krok 3
Methyl 3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)-2-methylbenzoát (4,2 g, 15 mmol) byl rozpuštěn ve 20 ml methanolu a 1 ml vody. Do výše uvedeného roztoku byl přidán hydroxid lithný (2,4 g, 5 ekv.). Po míchání reakční směsi při teplotě místnosti po 4 hodiny byly těkavé látky odstraněny ve vakuu a zůstatek byl rozdělen mezi EtOAc a H2O. Vodná vrstva byla oddělena, ochlazena v ledové lázni a potom okyselena s 10% vod. HCl. Kyselá vodná vrstva byla extrahována s EtOAc. EtOAc vrstva byla promyta sNaCl (nasyc.), sušena nad Na2SO4 a koncentrována za získání 3-((R)-2,2-dimethyl-1,3-dioxol an-4-ylm ethyl-oxy)-benzoové kyseliny jako bílé pevné látky (4 g).
Krok 4
Do roztoku 3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan~4-ylmethyloxy)-2-methylbenzoové kyseliny (2,44 g, 9 mmol) ve 20 ml dichlormethanu byl přidán oxalylchlorid (0,86 ml, 1,1 ekv.). Výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti za přítomnosti katalytického množství DMF. Tvořily se bubliny a míchání pokračovalo, až se přestaly bubliny tvořit. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a • a zůstatek byl suspendován v etheru (20 ml) a byl přidán po kapkách do etherového roztoku (60 ml) při 0 °C obsahujícího diazomethan generovaný z nitroso-N-methylmočoviny (6,95 g, 7,5 ekv.) a 19 g hydroxidu draselného podle postupu popsaného Berkowitzem, D. B. v J. Org. Chem. 65, 847, (2000). Získaná směs byla míchána při 0 °C po 1 hodinu a byla ponechána ohřát na teplotu místnosti, kde byla ponechána míchat po další hodinu. Přebytečné množství diazomethanu bylo zchlazeno kyselinou octovou a těkavé látky byly odstraněny ve vakuu. Zůstatek byl purifikován na silikagelové koloně s 10% ethylacetátem v hexanu za získání 0,8 g
2-diazo-l-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-2-methyl-fenyl]ethanonu.
Krok 5
Do roztoku 2-diazo-l-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-2-methyl-fenylj-ethanonu (0,5 g, 1,73 mmol) ve 20 ml methanolu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok benzoátu stříbrného (52 mg, 13%) ve 2,6 ml triethylaminu. Roztok zezelenal a potom zhnědnul, vytvořila se černá sraženina. Po míchám po 1,5 hodiny byla zfiltrována přes celit a filtrát byl koncentrován. Potom byl zůstatek purifikován na silikagelové koloně s 20% ethylacetátem v hexanu za získání 0,43 g methylesteru kyseliny [3~((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-yl-methoxy)-2-methylfenyl]-octové. Výše uvedený ester byl potom hydrolyzován mícháním s hydroxidem lithným (0,25 g) v 5 ml methanolu při teplotě místnosti za získání 0,4 g [3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-2-methyl-fenyl]octové kyseliny.
Krok 6
3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-[l,3]dioxolan-4-ylmethoxy)-2methylfenyl]furan-2,5-dion byl připraven podle postupu popsaného v příkladu 1, kroku 4, ale s náhradou [3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-2-methylfenylj-octové kyseliny za 3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-fenyloctovou kyselinu.
Kríík 7
3-(l-methylÍndol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-[l,3]dioxolan-4-ylmethoxy)-2methylfenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion byl připraven podle postupu popsaného v příkladu
1, kroku 5, ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3jdioxolan-4-ylmethoxy)-2-methyl-fenyl]furan-2,5-dionu za 3-(l-methylindol-3-yl)4-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)fenyl3furan-2,5-dion.
Krok 8
3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,3-dihydroxyprůpoxy)-2-methylfenyl]-lHpyrrol-2,5-dion byl připraven podle postupu popsaného v příkladu 2, kroku 1, ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-2-methylfenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu za 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-fenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion. MS (El): (M++l) 407.
Přiklad 28
Syntéza 3-(l-methyl-indol-3-yl)-4-{3-((R)-2,3-dihydroxypropoxyl)-2-nitrofenyl}-lH-pyrrol-2,5-dionu
Krok 1
Do methanolového roztoku (15 ml) při 0 °C byl po kapkách přidáván thionylchlorid (6,4 ml, 0,088 mol). Po 15 min byla přidána kyselina 3-hydroxy-2-nitrobenzoová (4 g, 0,022 mol) a výsledná směs byla míchána při teplotě místnosti po 72 hodiny. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a zůstatek byl rozdělen mezi vodu a ethylacetát. Organická vrstva byla oddělena, promyta vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, a sušena nad síranem sodným. Po koncentrování byl surový produkt rekrystalizován z dichlormethanu a hexanu za získání 4,5 g methyl 3-hydroxy-2-nitrobenzoátu.
Krok 2 φ φφφφ
Do roztoku methyl 3-hydroxy-2-nitrobenzoátu (1,97 g, 10 mmol) vNmethylpyrrolídinonu (15 ml) byl přidán (R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-y lmethy 1 p-tosylát (3,43 g, 1,2 ekv.) a následoval K2CO3 (4,2 g, 3 ekv.). Po zahřívání směsi při 96 °C přes noc byla tato ochlazena na teplotu místnosti, zchlazena H2O a rozdělena mezi H2O a EtOAc. Organická vrstva byla oddělena, promyta H2O a NaCl (nasyc.) a potom sušena nad Na2SO4. Surový produkt byl purifikován na silikagelové koloně s 20% EtOAc v hexanu za získání methyl 3~((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)-2-nitrobenzoátu jako oleje (3,1 g).
Krok 3
Methyl 3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)-2-nitrobenzoát (2,8 g, 9 mmol) byl rozpuštěn ve 25 ml methanolu a 2 ml vody. Do výše uvedeného roztoku byl přidán hydroxid lithný (1,13 g, 3 ekv.). Po míchání reakční směsi při teplotě místnosti po 5 hodin byly těkavé látky odstraněny ve vakuu a zůstatek byl rozdělen mezi EtOAc a H2O. Vodná vrstva byla oddělena, ochlazena v ledové lázni a potom okyselena s 10% vod. HCl. Kyselá vodná vrstva byla extrahována s EtOAc. EtOAc vrstva byla promyta s NaCl (nasyc.), sušena nad Na2SO4 a koncentrována za získání 3-((R)-2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)-2-nitrobenzoové kyseliny jako bílé pevné látky (1,9 g).
Krok 4
Do roztoku 3-((R)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyloxy)-2-nitrobenzoové kyseliny (1,9 g, 6,4 mmol) ve 20 ml dichlormethanu byl přidán oxalylchlorid (0,55 růl, 1,1 ekv.). Výsledná suspenze byla míchána při teplotě místnosti za přítomností katalytického množství DMF. Tvořily se bubliny a míchání pokračovalo, až se přestaly bubliny tvořit. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a zůstatek byl suspendován v etheru (20 ml) a byl přidán po kapkách do etherového roztoku (40 ml) při 0 °C obsahujícího diazomethan generovaný z nitroso-N-methylmoČoviny (4,95 g, 7,5 ekv.) a 13,5 g hydroxidu draselného podle postupu popsaného Berkowitzem, D. B. v J. Org. Chem. 65, 847, (2000). Získaná směs byla míchána při 0 °C po 1 hodinu a byla ponechána ohřát na teplotu místnosti, kde byla ponechána míchat po další hodinu. Přebytečné množství diazomethanu bylo zchlazeno kyselinou octovou a těkavé látky byly odstraněny Ve vakuu. Zůstatek byl purifikován na silikagelové koloně s 2/4/4 acetonu/diehlormethanu/hexanu za • 9
9« 9999 získání 0,95 g 2-diazo-l-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-2-nitrofenylj-ethanonu.
Krok 5
Do roztoku 2-diazo-l-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxo!an-4-ylmethoxy)-2-nitrofenyl]-ethanonu (0,9 g, 2,8 mmol) ve 30 ml methanolu při teplotě místnosti byl přidán po kapkách roztok benzoátů stříbrného (84 mg, 13%) ve 4,2 ml triethylaminu. Roztok zezelenal a potom zhnědnul, vytvořila se černá sraženina. Po míchání po 1,5 hodiny byla zfiltrována přes celit a filtrát byl koncentrován. Potom byl zůstatek purifikován na silikagelové koloně s 20% ethylacetátem v hexanu za získání 0,75 g methylesteru kyseliny [3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-yl-methoxy)-2-nitrofenyl]-octové. Výše uvedený ester (0,52 g, 1,6 mmol) byl potom hydrolyzován mícháním s hydroxidem lithným (0,27 g) v 5 ml methanolu při teplotě místnosti za získání 0,5 g [3-((R)-2,2-dímetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)2-nitrofenylj-octové kyseliny.
Krok 6
3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-[l,3]dioxolan-4-ylmeťhoxý)-2nitrofenyl]furan-2,5-dion byl připraven podle postupu popsaného v příkladu 1, kroku 4, ale s náhradou [3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-2-methylfenyl]-octové kyseliny za 3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)-fenyloctovou kyselinu.
Krok 7
3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-(R)-2,2-dimethyl-[l,3]dioxoían-4-ylmethoxy)-2nitrofenyl]-lH-pyrrol-2,5-dion byl připraven podle postupu popsaného v příkladu 1, kroku 5, ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]dioxolan-4-yImethoxy)-2-nitrofenyl|furan-2,5-dionu za 3-(l-methylindol-3-yl)-4~[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3]-dioxolan-4-ylmethoxy)fenyl]furan-2,5-dion.
Krok 8
3-( 1 -methylindol-3 -yl)-4-[3-((R)-2,3 -dihydroxypropoxy)-2-nitrofenyl] -1Hpyrrol-2,5-díon byl připraven podle postupu popsaného v příkladu 2, kroku 1, ale s náhradou 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimetyl-[l,3J-dioxolan-4-yl·» ·· methoxy)-2-nitrofenyl]-lH-pyrrol-2,5-dionu za 3-(l-methylindol-3-yl)-4-[3-((R)-2,2-dimetyl-[ 1,3 ]-dioxolan-4-y lmethoxy)-fenyl] -1 H-pyrrol-2,5 -dion. MS (El): (M++l) 438.
Podle postupu popsaného výše, ale s náhradou 5-hydroxy-2-nitrobenzoové kyseliny za 3-hydroxy-2-nitrobenzoovou kyselinu se získal 3-(l-methylindol-3-yl)-4-{5-((R)-2,3-dihydrox-propoxyl)-2-nitrofenyl}-lH-pyrrol-2,5-dion. MS (El): (M++l) 438.
Následují reprezentativní příklady farmaceutických složení obsahujících sloučeninu vzorce (I).
Příklad A
Složení tablet
Uvedené přísady jsou důkladně promíseny a slisovány do jednotlivých tablet s drážkou.
Množství
Složka v tabletě, mg
Sloučenina podle vynálezu 400
Kukuřičný škrob 50 kroskarmelosa sodná 25 laktosa 120 stearát hořečnatý 5
Příklad B
Složení kapslí
Uvedené přísady jsou důkladně promíseny a plněny do tvrdých želatinových kapslí.
Množství
Složka
Sloučenina podle vynálezu Laktosa, sprejové sušená stearát hořečnatý
Příklad C v kapsli, mg 200 148 2
Složení suspenze
Uvedené přísady jsou smíseny do formy suspenze pro orální podávání.
Složka
Sloučenina podle vynálezu Kyselina fumarová Chlorid sodný Methylparaben Propylparáben Granulovaný cukr Sorbitol (70% roztok) Veegum K (Vanderbilt Co.) Ochucovadlo Barviva
Destilovaná voda množství 1,0g 0,5 g 2,0 g
0,15 g 0,05 g 25,0 g 13,00 g 1,0 g 0,035 ml 0,5 g
q.s. do 100 ml
Příklad D
Složení pro injekce
Následující složky jsou smíseny do formy injikovatelných prostředků.
• · • ····
Složka
Sloučenina podle vynálezu
Pufrovací roztok octanu sodného, 0,4 M
HCl (IN) nebo NaOH (IN) Voda (destilovaná, sterilní)
množství
0,2 mg-20 mg 2,0 ml dle potřeby pH dle potřeby do 20 ml
Přiklad E
Složení Čípků
Čípek o celkové hmotnosti 2,5 g je připraven smísením sloučeniny podle vynálezu s Witepsolem® H-15 (triglyceridy přírodních rostlinných mastných kyselin; Riches-Nelson, lne. New York), a má následující složení:
Sloučenina podle vynálezu 500 mg
Witepsol® H-15 v rovnováze
Příklad 1
Inhibice glykogen-syntáza kinázy-3-β - test in vitro
Inhibiční aktivita in vitro GSB-33 sloučenin podle tohoto vynálezu byla stanovena s omezenou formou rekombinantního králičího GSK-3 β enzymu.
Izolace GSK-3 β enzymu
Konstrukt byl klonován v pGEX-3X vektoru podle postupu popsaného ve Wang, Q.M. a kol., J. Biol. Chem. 269, 14566-14574 (1994). Deset aminokyselin na N-zakončeních byly deletovány za získání konstruktivně aktivního GSK-3 β (viz Murai H. a kol., FEBS Lett. 392, 153-60, (1996)). 68Κ-3β byl exprimován v BL21 DE3 buňkách. Buňky byly kultivovány při 37 °C, až dosáhly mid log fáze a potom byly indukovány s isopropyl-beta-(D)-ihiogalaktopyranosidem (finální koncentrace 0,4 mM) při 30 °C po 2 hodiny. Buňky byly homogenizovány a buněčný extrakt byl nanesen na kolonu 4B s glutathion sepharosou. GSK-3 β byl promýván s glutathionovým pufrem (50 mM Tris pH 8 a 10 mM redukovaný glutathion). Eluát byl shromážděn ve 3minutových frakcích a testován na obsah GSK-3 β na 10% SDS φφ · φ · · φ φφφ • φ φ φ φ φ φ • φ φ φ φ φ
PAGE (elektroforéza na polyakrylamidovém gelu). Frakce nad 20% výškou píku byly vyjmuty, spočteny a uloženy při -80 °C až do použití.
Φ · · φ * * · φ φ φ φ • · · φφφ φ φ φφφφ φφ ·
Inhibice GSK-33
Test vazebnosti GSK-33 se prováděl v 50μ1 reakcích na 96 miskové polypropylenové desce, každá reakce obsahovala 20 mM chloridu hořečnatého, 40 μΜ ATP, 2 mM DTT, 88,5 μΜ biotinylovaného a fosforylovaného CREBpeptidového substrátu (biotin-KRREILSRRPS(PO4)YR-OH, viz Wang, Q.M. a kol. J.Biol. Chem. 269, 14566-14574 (1994)), [γ-33Ρ] ATP (1 pCi) a 2 μΐ sloučenin podle tohoto vynálezu v DMSO (různé koncentrace). Bylo přidáno 15 μΐ GSK-33 (různých koncentrací) a reakční směs byla inkubována při 30 °C po 1 hodinu. Reakce byla zastavena vnesením 25 μΐ reakční směsi na fosfoeelulosovou plotnu obsahující 130 μΐ 1,85 % kyseliny fosforečné. Volné radionukleotidy na membráně byly vymyty pod vakuem 1,85% kyselinou fosforečnou (5krát). Po posledním promytí byly plotny přeneseny na adoptorovou plotnu a do každé misky bylo přidáno 50 μΐ scintilačního koktejlu (Mícroscint-20, Packard, cat # 20-133) a obsah radioaktivity byl sčítán v čítači.
Sloučeniny z tohoto vynálezu byly v tomto testu aktivní.
Inhibiční aktivity GSK-33 (vyjádřeny jako IC50, koncentrace inibitoru vykazující 50% inhibici aktivity kontrolního vzorku) určitých sloučenin podle vynálezu popsaných v tabulkách I-IV byly menší než 2 pm.
Aktivity některých konkrétních sloučenin jsou uvedeny níže.
Sloučenina ICsogM
1-1 0,194
n-1 0,02
II-2 0,0264
II-4 0,0296
III-3 0,23
IV-1 0,1334
··»♦ · · · · ♦ · ·
9 * 9 9 9 9 9 9 9
9 9999 9999 9999 * · * » · 9 9 9
9999 99 999 99 9
Příklad Π
Inhibice β-kateninové degradace - tesťin vitro
GSK-33 na bázi buněk aktivita sloučenin podle tohoto vynálezu byla stanovena měřením hladin β-kateninu v Jurkat T-buňkách po zpracování se sloučeninami podle tohoto vynálezu použitím ELISA následujícím způsobem.
Jurkat-buňky (5 x 105 buněk /ml) byly uloženy do 6-miskových ploten (6 ml/misku) a potom byly zpracovány s různými koncentracemi sloučenin podle vynálezu (přednostně 1 nM-10 μΜ) po 24 hodiny. Na konci inkubace byly buňky spojeny a promyty jedenkát PBS. Potom byly buňky suspendovány v 0,3 ml pufru Radioimmuno Precipitation Assay lysis (RIPA) (Boehringer Mannheim, kat. ě.
920 603). Po 3 cyklech mražení-tavení byly buněčné extrakty odstředěny při 15000 ot/min po dobu 10 min. Supernatant byl spojen a analyzován použitím ELISA testu jak je popsán dále. 96 mikromističkové plotny byly potaženy přes noc zachytávací protilátkou (myší monoklonální anti-p-katenin, Zymed La., kat..č. 13-8400, 100 μΐ na misku, obsahující 250 ng protilátky) zředěnou povlékacím pufrem (0,1 M NaHCO3, pH 9,5). Z misek byl odstraněn vzduch a byly promyty třikrát 300 μΐ promývacího pufru (PBS obsahující 0,05% Tween 20) a blokovány s 200 μΐ testovacího ředidla (PBS, 10% RBS, pH 7; PharMingen) a potom inkubovány při teplotě místnosti po alespoň 72 hodin. Misky byly opět promyty, jak bylo popsáno výše. 100 μΐ Jurkat buněčného supernatantu a různé koncentrace β-kateninového standardu (Behrens a kol., Nátuře, Sv. 382, str. 638 (1996)) byly přidávány do misek a inkubovány po 2 h při teplotě místnosti. Po inkubaci byly misky promyty a do každé misky bylo přidáno 100 μΐ protilátky anti-P-kateninu (Santa Cruz; β-catenin H-102, sc-7199, králičí IgG) zředěné v testovacím ředidle (1:1250) a buňky byly inkubovány při teplotě místnosti po 2 hodiny. Po promytí bylo do každé misky přidáno 100 μΐ pracovního detektoru (Sigma B5283, myší monoklonální anti-králičí IgG-Biotin) zředěného v testovacím ředidle (1:2000) a inkubováno po 1 h při teplotě místnosti. Pro zbarvení byl použit 3,3',5,5'-tetramethylbenzidin (PharMingen, kat.č.2642KK). Reakce byly zastavena přidáním 50 μΐ roztoku pro zastavení (2N H2SO4) do každé misky. Plotny byl čteny ELISA čítačem ploten při 570 nm po 30 min od zastavení reakce.
9« 99 ·· · 99 ·
9 9 9 9 · 9 9 9 9 9 • · · · 9 · · · · · • · · 9 9 9 · *9 9 ·· 99
9·· 999 999
9999 99 9·9 99 9
Hladina GSK-3P inhibice byla vypočtena vynesením koncentrace sloučeniny proti hladinám β-kateninu. Výsledky jsou znázorněny na obr. 1, znázorňujícím vliv sloučenin podle tohoto vynálezu na hladiny β-kateninu.
Příklad III
Testy na sekreci cytokinů - test lidských T-buněk
Vliv sloučenin podle tohoto vynálezu na hladiny sekrece cytokinů z lidských CD4+ T-helper buněk byl stanoven jako v Rogge a kol., J. Exp. Med. 185, 825-831 (1997).
Pro tuto zkoušku byly izolovány lidské neonatální leukocyty z čerstvě shromážděné heparinizované neonatální krve odstřeďováním s hustotním gradientem od Ficoll-Paque (Pharmacia Biotecg, Uppsala, Sweden). Aby se generovaly Thl a Th2 buněčné linie, byly CD8+T buňky odstraněny pozitivní selekcí s anti-CD8 mikrokuličkami a magneticky aktivovaným rozřazováním buněk podle protokolu dodávaného výrobcem (Miltenyi Biotec, Bergish Gladbach, Germany). V den 0 byly buňky předem inkubovány s různými koncentracemi testované sloučeniny pro jeden den. Další den byly buňky stimulovány s 2 pg/ml fytohemaglutininu (Wellcome, Beckenham, U.K.) za přítomnosti 2,5 ng/ml IL-12 (Hoffmann-LaRoche, Nutley, NJ) a 200 ng/ml neutralizující anti-IL-4 protilátky (ě. 18500D; PharMingen, San Diego, ČA) pro Th 1 kultury nebo 1 ng/ml IL-4 (PharMingen) a 2 pg/ml neutralizující antiIL-12 protilátky 17F7 a 20C2 (laskavě poskytnuto od M.Gately, Hoffmann-LaRoche) pro Th2 kultury. Buňky byly promývány v den 3 a expandovány v úplném RPMI 1640 mediu (Life Technologies, Milan, Italy), doplněny sloučeninami podle tohoto vynálezu, 5% FetalClone I (HyClone,Logan, UT), 2 mM L-glutqminu, 1 mM pyruvátu sodného, 100 U/ml penicilinu-streptomycinu, a obsahující U/ml IL-2 (Hoffmann-LaRoche). Buňky byly opět promyty v den 14 a 105 buněk bylo opět stimulováno v plotnách s 96-miskami s kruhovým dnem po 24 h s vázanými antiCD3 a anti-CD28 monoklonálními protilátkami (klon TR66; viz Lanzavecchia, A., a
D. Scheidegger., Eur. J. Immunol. 17:105-111 (1987)) pro měření IFN-gamma, IL-4, a IL-13 v kultivačních supernatantech testy ELISA (Gallati, H., a kol., J. Biol. Regul. Homeostatic Agents, 1:109-118, (1987)). Hodnoty ED150 (koncentrace sloučeniny, * * · · • · · ···· • · · která inhibuje cytokinovou sekreci na 50 % z maximální hodnoty), byly stanoveny vytvořením sigmoidální křivky zaznamenaných údajů.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu byly v tomto testu aktivní a vykazovaly supresi IL-4 a IL-13 sekrečních hladin, zatímco hladiny Interferon-gamma zůstaly nezměněny.
Příklad IV
Testy sekrece cytokinů — test myší T-buňky
CD4+, CD62Lhi buňky (naivě T-buňky) jsou izolovány ze slezin Balb/C.Doll.10 OA-TCR transgenní myši (Murphy K.M. a kol., Science, 250, 1720 (1990)) Ficcoll hustotním gradientem a Miltenyi magnetickými imunokuličkpvými separacemi. Tyto naivě T-buňky byly kultivovány ve společné kultuře s ozářenými Balb/C splenocyty (T:APC 1:25) za neutrálních podmínek (bez přidávání diferenciačních cytokinů). T-buňky jsou stimulovány s 300 nM ovalbuminového peptidu (NH2-KISQAVHAAHAEINEAG-COOH) za přítomnosti různých koncentrací inhibitoru (testovaných sloučenin), včetně kontrolních vzorků pouze s rozpouštědlem. V den 3 byly buňky zředěny 1:3, inhibitory byly přidány zpět do média pro uchování původní koncentrace. V den 6 byly buňky počítány, promyty, opět naneseny na desku v poměru 1:25 s ozářenými Balb/C splenocyty, a opět stimulovány s 300 nM ovalbuminového peptidu. V den 8 byly získány supernatanty a hladiny IFN-gamma, IL-4, IL-5 a IL-13 byly kvantifikovány pomocí ELISA (R&D Systémy). Hodnoty ED50 (koncentrace sloučeniny, která inhibuje cytokinovou sekreci na 50 % z maximální hodnoty) byly stanoveny vytvořením sigmoidální křivky zaznamenaných údajů.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu byly v tomto testu aktivní a vedly k redukci hladin Th2 cytokinů.
Příklad V
Inhibice influxu eosinofílů do plic vaječným albuminem (ovalbuminem) senzibilizovaných hnědých norských krys - in vivo test
9 4
99 94
9494
Schopnost sloučenin podle vynálezu inhibovat leukocytovou infiltraci do píic byla stanovena měřením inhibice eosinofilní akumulace v bronchioalveolární výplachové (BAL) tekutině senzibilizované vaječným albuminem (ovalbumin, OA) u hnědých norských krys po expozici antigenů aerosolem. Stručně, samci hnědých norských krys byli senzibilizováni i.p. se 100 pg OA ve 0,2 ml alum v den 0, den 7 a den 14. V den 21 byly krysy exponovány s 1% OA po 45 min a za 72 h usmrceny. Testované sloučeniny nebo pouze nosič (kontrolní skupina) byly podávány ode dne před třetí imunizací do konce studie. V době usmrcení byly krysy anestetikovány (urethan, přibližně 2 g/kg, i.p.) a plíce byly propláchnuty 3 x 3 ml BAL. BAL tekutina byla analyzována na celkový počet leukocytů a diferenciální počty leukocytů. Celkový počet leukocytů v álikvotu buněk (20 μΐ) byl stanoven čítačem Coulter. Pro diferenciální počty leukocytů byly 50-200 μΐ vzorky odstředěny v Cytospinu a sklíčko bylo zbarveno s Diff-Quik. Podíly monocytů, eosinofilů, neutrofilů a lymfocytů byly počítány pod světelným mikroskopem použitím standardních morfologických kritérií a vyjádřeny v procentech.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu byly v tomto testu aktivní a vedly k rédukci infiltrace monocytů, eosinofilů, neutrofilů a lymfocytů do plic.
Příklad VI
Redukce celkového séra IgE a ovalbumin-specifické IgE v A/J myši senzibilizované ovalbuminem (vaječným albuminem) - in vivo test
Tento protokol byl určen k prozkoumám vlivu sloučenin na hladiny IgE v séru A/J myši senzibilizované vaječným albuminem (OA). Primárním konečným bodem byla produkce IgE během senzibilizace. Stručně, samci A/J myší (20-25 g) byli senzibilizováni intraperitoneální injekcí OA/Alum (10 pg v 0,2 ml A1(OH)3; 2%) v den 0, a den 7. V den 14 byly myši anestetikovány urethanem a krev byl odebrána srdeční punkcí. Testované sloučeniny nebo pouze nosič (kontrolní skupina) byly podávány ode dne před druhou OA/Alum injekcí do konce studie. Celkové sérum IgE a OA-specifické IgE byly měřeny pomocí ELISA (Pharmingen, kat.č. 2655 KI, biotinylovaný vaječný albumin pro O A specifický IgE) a porovnány mezi skupinami ošetřenými sloučeninou a vehikulem.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu byly v tomto testu aktivní a vedly k redukci hladin IgE do plic.
Příklad VII
Diferenciační exprese TCF7 v buňkách Thl a Th2
CD4+, naivě T-buňky, byly připraveny jak je popsáno v příkladu IV z Balb/C Doll.10 OA-TCR (+/+) transgenní myši a B10.D2 DO11.10 OA-TCR (+/-) transgenní myši (Guler M.L. a kol., J. Immunol. 162, 1339-1347, 1999). Buňky byly získány v den 5 po původní stimulaci s 300 nM peptidu vaječného albuminu a byla připravena mRNA (celková RNA: Chomzynski a Sacchi, Anal. Biochem 162: 150159, 1987, mRNA: Promega polyA tract) pro analýzu exprese pomocí Northern Blot. Jako hybridizační sonda byl označen klon AA119960 (Genbank) nahodilým nástřelem (GIBCO 18187-013) (obr. 2A). Jak je znázorněno na obr. 2A, exprese TCF7 transkriptů byla detekována v mRNA z přípravku B10.D2 (Th-1 buňky), zatímco transkripty TCF7 byly nedetekovatelné v přípravku mRNA z Balb/C Tbuněk /Th-2 buňky). V samostatném experimentu byly CD4+, naivě T-buňky z Balb/C Doll.10 OA-TCR (+/+) transgenní myši buď stimulovány s 300 ftM peptidu vaječného albuminu a interferonem-gamma nebo peptidem vaječného albuminu po 5 dní, Byl izolován mRNA a použit v kvantitativní RT-PCR (Baranzini a kol., Journal of Immunology. 165:6576-6582, 2000). Ke stanovení relativních hladin TCF7mRNA mezi ovalbuminem indukovanými vzorky z Balb/C a B10.D2 a relativními hladinami ovalbuminem ošetřených Balb/C vzorků vs. ovalbuminem a IFNG ošetřených vzorků z Balb/C CD4+ T-buněk. TCF7 primery pro kvantitativní RTPCR byly: AGCTGCAGCCATATGATAGAA a CTTGAGTGTGCACTCAGCAA. Tak, jak je znázorněno na obrázku 2B, interferon gamma, cytokin, který promotuje Thl diferenciaci Balb/C T-buněk, indukuje expresi TCF7. Oba tyto experimenty potvrzují, že hladiny TCF7 jsou spojeny s odezvou T-helperu. Vysoké hladiny exprese TCF7 se zdají být spojeny s Thl odezvou, zatímco nízké hladiny jsou spojeny s Th2 odezvou.
Výše uvedený vynález byl popsán podrobně pomocí příkladů pro jasnost a pochopení. Odborníkovi v oblasti techniky bude zřejmé, že změny a úpravy mohou • · ·· φφ φφ • φ · φ · φ φφφ φφ φφ Φ· φφ φ φ · φ φ φφφ φ φφφφφ φφφ φφ φ být prováděny v rozsahu připojených nároků. Je tudíž zřejmé, že výše uvedený popis je považován za ilustrativní a nikoliv omezující. Rozsah vynálezu by měl být určen nikoliv s odkazem na uvedený popis, ale měl by být stanoven s odkazem na připojené nároky, spolu s úplným zahrnutím ekvivalentů, k nimž tyto nároky opravňují.
Všechny patenty, patentové přihlášky a publikace citované v této přihlášce jsou tedy začleněny odkazem v celé své velikosti pro všechny účely ve stejném rozsahu, jako kdyby každý jednotlivý patent, patentová přihláška nebo publikace byly jednotlivě vyjmenovány.
• « · · • · · tttttt • · · • tt tttttttt • tt • tt • tttt ·· · • · • · · • ···· • tttt • tt ·

Claims (35)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučenina vzorce (I);
    kde
    R1 a R2 nezávisle označuje vodík, alkyl, halogen, haloalkyl, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino, nebo dialkylamino;
    R3 znamená vodík, alkyl, cykloalkyl, heteroalkyl, -COR7 (kde R7 je vodík nebo alkyl), nebo fenyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, haloalkylu, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino, a dialkylamino;
    R4 a R5 nezávisle označují vodík, alkyl, halogen, haloalkyl, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino nebo dialkylamino;
    R6 je heteroalkyl, heterocyklyl, heterocyklylalkyl, heteroalkylsubstituovaný heterocyklyl, heteroalkylsubstituovaný cykloalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, -OR8, -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), -NR9R10 (kde R9 je vodík nebo alkyl a R10 je heterosubstituovaný cykloalkyl, heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-Z (kde X je kovalentní vazba, -Ο-, -NH-, nebo -S(O)ni- , kde nl je celé číslo od 0 do 2, Y je -Ο-, -NH-, nebo -S- a Z je heteroalkyl nebo SiRn(R12)(R13), kde R11, R12, a R13 jsou nezávisle vodík nebo alkyl) nebo R6 společně s R4 tvoří methylendioxy nebo ethylendioxy-skupinu, když jsou navzájem sousedící;
    nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.
  2. 2. Sloučenina podle nároku 1, kde
    R3 znamená vodík, alkyl, cykloalkyl, heteroalkyl, -COR7 (kde R7 je vodík nebo alkyl), nebo fenyl volitelně substituovaný jedním nebo dvěma substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, haloalkylu, alkylthio, hydroxy, alkoxy, kyano, nitro, amino, acylamino, monoalkylamino, a dialkylamino; a
    R6 je heteroalkyl, heterocyklyl, heterocyklylalkyl, heteroalkylsubstituovaný heterocyklyl, heteroalkylsubstituovaný cykloalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, -OR8, -S(O)nR8 (kde n je celé číslo od 0 do 2; a R8 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), -NR9R10 (kde R9 je vodík nebo alkyl a R10 je heteroalkyl, heteroaralkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), nebo
    -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -Ο-, -NH-, nebo -S(O)ni- , kde nl je celé číslo od O do 2, a Y je -Ο-, -NH-, nebo -S-) nebo R6 společně s R4 tvoří methylendioxy nebo ethylendioxy-skupinu, když jsou navzájem sousedící.
  3. 3. Sloučenina podle nároku 1 nebo 2, kde R6 je na 2- ,3- , nebo 4-pozici fenylového kruhu.
  4. 4. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 3, kde R6 je na 3-pozici fenylového kruhu.
  5. 5. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 4, kde R6 je heteroalkyl, heterocyklylakyl, -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba,
    -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
  6. 6. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 5, kde R4 a R5 jsou na 2- a 6- pozicích fenylového kruhu a jsou nezávisle na sobě vodík nebo halogen.
  7. 7. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 6, kde R a R jsou vodík.
  8. 8. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 6, kde R1 je na 5-pozici indolového kruhu a je halogen; R2 je vodík.
  9. 9. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 8, kde R3 je vodík nebo alkyl, R6 je -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde Ri0 je heteroalkyl, heterosubstituovaný cykloalkyl, heterocyklyl nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Y-heteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
  10. 10. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 8, kde R3 je vodík nebo alkyl, R6 je
    -OR8 (kde R8 je heteroalkyl nebo heterocyklylalkyl), -NHR10 (kde R10 je heteroalkyl, heterocyklyl, nebo heterocyklylalkyl), nebo -X-(alkylen)-Yheteroalkyl (kde X je kovalentní vazba, -O- nebo -NH- a Y je -O- nebo -NH).
  11. 11. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 10, kde R3 je alkyl.
  12. 12. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 11, kde R3 je methyl.
  13. 13. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 12, kde R4 a R5 jsou nezávisle navzájem vodík, chlor nebo fluor.
  14. 14. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 13, kde R4 a R5 jsou vodík.
  15. 15. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 14, kde R6 je (RS), (R) nebo (5)-2,3dihydroxypropyloxy, 3-hydroxypropyloxy, 2-aminoethyloxy, 3-aminopropyloxy, 2morfolin-4-ylethyloxy, nebo (RS), (R) nebo fSJ~2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4ylmethoxy.
  16. 16. Sloučenina podle některého z nároků 1 až 14, kde R6 je (RS), (R) nebo (5)-2,3dihydroxypropylamino, 2-hydroxyethylamino, 3-hydroxypropylamino, (RS), (R) nebo (5)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethylamino, 2-hydroxy-1-hydroxymethylethylamino, 3-hydroxybutylamino nebo tetrahydropyran-4-ylamino.
  17. 17. Způsob přípravy sloučeniny vzorce (I) vyznačující se tím, že zahrnuje:
    (i) reakci 3-indol-3-yl-4-fenylfuran-2,5-dionu vzorce :
    kde R1_~R6 jsou definovány v nároku vzorce (I); nebo s amoniakem za získání sloučeniny (ii) reakci sloučeniny vzorce:
    kde R1—R3 jsou definovány v nároku 1 a R je alkyl, se sloučeninou vzorce:
    kde R4 - R6 jsou definovány v nároku 1, za přítomnosti báze; a (iii) popřípadě konvertování sloučeniny vzorce (I) na jiné sloučeniny vzorce (I);
    (iv) popřípadě konvertování sloučeniny vzorce (I) připravené v krocích (i) nebo (ii) výše, na odpovídající adični kyselinovou sůl zpracováním s kyselinou;
    (v) popřípadě konvertování sloučeniny vzorce (I) připravené v kroku (i) nebo (ii) výše na Odpovídající volnou bázi zpracováním s bází; a (vi) (vi) popřípadě oddělení směsi stereoisomerů sloučeniny vzorce (I) připravené v krocích (i) až (v) výše, za získání jednotlivého stereoisomerů.
    • ·
  18. 18. Léčivo vyznačující se tím, že zahrnuje terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce podle kteréhokoliv z nároků 1 až 16 a farmaceuticky přijatelný excipient.
  19. 19. Léčivo podle nároku 18 pro léčení GSK-3P zprostředkovaných nemocí zvolených z Alzheimerovy nemoci, obezity, diabetů, arteriosklerotické kardiovaskulární choroby, polycystického ovariálního syndromu, syndromu X, ischemické choroby, traumatického poškození mozku, bipolární choroby, imunonedostatečností, rakoviny, alergie a astmatu u savců.
  20. 20. Léčivo podle nároku 18 nebo 19, kde nemocí je astma.
  21. 21. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 16 pro léčení GSK-3 β zprostředkovaných nemocí zvolených z Alzheimerovy nemoci, obezity, diabetů, arteriosklerotické kardiovaskulární choroby, polycystického ovariálního syndromu, syndromu X, ischemické choroby, traumatického poškození mozku, bipolární choroby, imuno-nedostatečnosti, rakoviny, alergie a astmatu u savců.
  22. 22. Použití podle nároku 21, kde nemocí je astma.
  23. 23. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 16 pro výrobu léčiv, zahrnujících jednu nebo více sloučenin vzorce I pro léčení GSK-3p zprostředkovaných nemocí zvolených z Alzheimerovy nemoci, obezity, diabetů, arteriosklerotické kardiovaskulární choroby, polycystického ovariálního syndromu, syndromu X, ischemické choroby, traumatického poškození mozku, bipolární choroby, imuno-nedostatečnosti, rakoviny, alergie a astmatu u savců.
  24. 24. Použití podle nároku 23, kde nemocí je astma.
  25. 25. Použití inhibitoru GSK-3 β pro léčení nemoci charakterizované přebytkem CD4+Th2 cytokinů.
  26. 26. Použití podle nároku 25, kde inhibitorem β8Κ-3β je sloučenina podle některého z nároků 1 až 16.
  27. 27. Použití podle nároku 25 nebo 26, kde nemocí je astma, alergie nebo alergická rýma.
  28. 28. Použití podle některého z nároků 25 až 27, kde nemocí je astma.
  29. 29. Použití podle některého z nároků 25 až 28, kde GSK-3p inhibitor je alespoň lOnásobně více selektivní pro GSK-3 β vzhledem k PKC.
  30. 30. Použití inhibitoru GSK-3 β pro léčení nemoci charakterizované přebytkem IgE produkce.
  31. 31. Použití podle nároku 30, kde inhibitor GSK-3 β je sloučenina podle některého z nároků 1 až 16.
  32. 32. Použití podle nároku 30 nebo 31, kde nemocí je astma, alergie nebo alergická rýma.
  33. 33. Použití podle některého z nároků 30 až 32, kde nemocí je astma.
  34. 34. Použití podle některého z nároků 30 až 33, kde GSK-3 β inhibitor je alespoň lOnásobně více selektivní pro GSK-3 β vzhledem k PKC.
  35. 35. Vynález, jak je zde popsán, zejména s odkazem na novou sloučeninu, meziprodukty, použití a postupy.
    • · · • · ·· ·* • · · · · · • · · · ·
    9 9 9 · · • · · · · • · 9999 99
    9 9 • · · ·
    9 99999
    999 99 9 w XooyS55
    1/3
    Obr.l
    ΪΪ-2 il-1 ll-2
    11-1:
    NH,
    NH, [Inhibitor] (μΜ) ·
    ·· ·· ·· ···· · · ♦· · · · ·· · · 4 · · · · · •9 4 · · 9 · 9 9 4 9494 · · 4 · 4 4 4 · ·Μ· ·· 444 ·· 4 fi/
    2/3
CZ2003555A 2000-07-27 2001-07-18 3-indolyl-4-phenyl-1h-pyrrole-2,5-dione derivatives as inhibitors of glycogen synthase kinase-3beta CZ2003555A3 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US22105800P 2000-07-27 2000-07-27

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ2003555A3 true CZ2003555A3 (en) 2004-03-17

Family

ID=22826151

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2003555A CZ2003555A3 (en) 2000-07-27 2001-07-18 3-indolyl-4-phenyl-1h-pyrrole-2,5-dione derivatives as inhibitors of glycogen synthase kinase-3beta

Country Status (32)

Country Link
US (2) US6479490B2 (cs)
EP (1) EP1307447B1 (cs)
JP (1) JP3984157B2 (cs)
KR (1) KR20030017655A (cs)
CN (1) CN1185229C (cs)
AR (1) AR033989A1 (cs)
AT (1) ATE284885T1 (cs)
AU (1) AU2001293702A1 (cs)
BR (1) BR0112965A (cs)
CA (1) CA2417277A1 (cs)
CZ (1) CZ2003555A3 (cs)
DE (1) DE60107857T2 (cs)
EC (1) ECSP034452A (cs)
ES (1) ES2233691T3 (cs)
GT (1) GT200100151A (cs)
HK (1) HK1058670A1 (cs)
HR (1) HRP20030030A2 (cs)
HU (1) HUP0301431A2 (cs)
IL (1) IL153851A0 (cs)
JO (1) JO2293B1 (cs)
MA (1) MA26936A1 (cs)
MX (1) MXPA03000695A (cs)
NO (1) NO20030328D0 (cs)
NZ (1) NZ523462A (cs)
PA (1) PA8523001A1 (cs)
PE (1) PE20020338A1 (cs)
PL (1) PL366701A1 (cs)
RU (1) RU2003104796A (cs)
UY (1) UY26857A1 (cs)
WO (1) WO2002010158A2 (cs)
YU (1) YU4403A (cs)
ZA (1) ZA200300216B (cs)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001013916A1 (fr) * 1999-08-20 2001-03-01 Sagami Chemical Research Center Medicaments inhibant la mort cellulaire
BR0114411A (pt) * 2000-10-02 2006-05-09 Reddy Us Therapeutics Inc métodos e composições para o tratamento de doenças inflamatórias
US6645970B2 (en) 2000-11-07 2003-11-11 Novartis Ag Indolylmaleimide derivatives
MXPA03004037A (es) * 2000-11-07 2003-08-19 Novartis Ag Derivados de indolilmaleimida como inhibidores de proteina de cinasa c.
CA2461144A1 (en) * 2001-09-24 2003-04-03 Bayer Pharmaceuticals Corporation Preparation and use of pyrrole derivatives for treating obesity
CN100409840C (zh) * 2002-01-10 2008-08-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 GSK-3β抑制剂在制备增加骨生成的药物中的应用
KR100974770B1 (ko) 2002-03-05 2010-08-06 일라이 릴리 앤드 캄파니 키나제 억제제로서의 퓨린 유도체
KR20040091113A (ko) 2002-03-08 2004-10-27 일라이 릴리 앤드 캄파니 피롤-2,5-디온 유도체 및 ｇｓｋ-3 억제제로서 그의 용도
SE0302546D0 (sv) 2003-09-24 2003-09-24 Astrazeneca Ab New compounds
SE0200979D0 (sv) * 2002-03-28 2002-03-28 Astrazeneca Ab New compounds
TWI324064B (en) * 2002-04-03 2010-05-01 Novartis Ag Indolylmaleimide derivatives
JP2005531609A (ja) 2002-06-05 2005-10-20 ジヤンセン・フアーマシユーチカ・ナームローゼ・フエンノートシヤツプ キナーゼ阻害剤としてのシスインドリル−マレイミド誘導体
CA2488798A1 (en) 2002-06-05 2003-12-18 Janssen Pharmaceutica N.V. Substituted pyrrolines as kinase inhibitors
GB0303319D0 (en) 2003-02-13 2003-03-19 Novartis Ag Organic compounds
US7250444B2 (en) * 2003-08-11 2007-07-31 Pfizer Inc. Pyrrole-based HMG-CoA reductase inhibitors
US7109436B2 (en) * 2003-08-29 2006-09-19 General Electric Company Laser shock peening target
TWI339206B (en) 2003-09-04 2011-03-21 Vertex Pharma Compositions useful as inhibitors of protein kinases
EP1682103A1 (en) * 2003-10-27 2006-07-26 Novartis AG Indolyl-pyrroledione derivatives for the treatment of neurological and vascular disorders related to beta-amyloid generation and/or aggregation
CA2566392A1 (en) * 2004-05-12 2005-11-17 Bayer Cropscience Gmbh Plant growth regulation
WO2006061212A1 (en) 2004-12-08 2006-06-15 Johannes Gutenberg-Universität Mainz 3-(indolyl)-4-arylmaleimide derivatives and their use as angiogenesis inhibitors
JP4747364B2 (ja) * 2005-04-04 2011-08-17 独立行政法人産業技術総合研究所 紫外線皮膚炎抑止剤およびアトピー性皮膚炎抑止剤
EP1885454A2 (en) 2005-05-04 2008-02-13 DeveloGen Aktiengesellschaft Use of gsk-3 inhibitors for preventing and treating pancreatic autoimmune disorders
EP2258359A3 (en) 2005-08-26 2011-04-06 Braincells, Inc. Neurogenesis by muscarinic receptor modulation with sabcomelin
JP2009506069A (ja) 2005-08-26 2009-02-12 ブレインセルス，インコーポレイティド ムスカリン性受容体調節による神経発生
JP2009512711A (ja) 2005-10-21 2009-03-26 ブレインセルス，インコーポレイティド Ｐｄｅ阻害による神経新生の調節
EP1942879A1 (en) 2005-10-31 2008-07-16 Braincells, Inc. Gaba receptor mediated modulation of neurogenesis
US20100216734A1 (en) 2006-03-08 2010-08-26 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis by nootropic agents
EP2021000A2 (en) 2006-05-09 2009-02-11 Braincells, Inc. Neurogenesis by modulating angiotensin
ES2446269T3 (es) 2006-12-19 2014-03-06 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois 3-Benzofuranil-4-indolil-maleimidas como potentes inhibidores de GSK-3 para trastornos neurodegenerativos
WO2008080824A1 (en) * 2006-12-29 2008-07-10 F. Hoffmann-La Roche Ag Aromatic sulfonated ketals
JP5658664B2 (ja) * 2008-06-25 2015-01-28 フォルム ファーマシューティカルズ、インコーポレイテッド １，２−二置換複素環式化合物
WO2010099217A1 (en) 2009-02-25 2010-09-02 Braincells, Inc. Modulation of neurogenesis using d-cycloserine combinations
EP2343291A1 (en) 2009-12-18 2011-07-13 Johannes Gutenberg-Universität Mainz 3-(Indolyl)- or 3-(Azaindolyl)-4-arylmaleimide compounds and their use in tumor treatment
TWI526421B (zh) 2010-09-08 2016-03-21 住友化學股份有限公司 製造嗒酮化合物的方法及其中間物
EP2474541A1 (en) 2010-12-23 2012-07-11 Johannes- Gutenberg-Universität Mainz Conjugated 3-(indolyl)- and 3-(azaindolyl)-4-arylmaleimide compounds and their use in tumor treatment
KR20130034672A (ko) * 2011-09-28 2013-04-08 김동식 보텍스타입 열교환기
KR101440724B1 (ko) * 2013-03-29 2014-09-18 중앙대학교 산학협력단 글리코겐 신타아제 키나아제-3베타 억제물질을 유효성분으로 포함하는 난소과립세포종양의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강기능성식품 조성물
WO2015155738A2 (en) 2014-04-09 2015-10-15 Christopher Rudd Use of gsk-3 inhibitors or activators which modulate pd-1 or t-bet expression to modulate t cell immunity
TWI677489B (zh) 2014-06-20 2019-11-21 美商基利科學股份有限公司 多環型胺甲醯基吡啶酮化合物之合成
EP3187495A1 (en) 2015-12-30 2017-07-05 Johannes Gutenberg-Universität Mainz 3-(5-fluoroindolyl)-4-arylmaleimide compounds and their use in tumor treatment
WO2018132636A1 (en) * 2017-01-12 2018-07-19 The Research Foundation For The State University Of New York [18f]maleimide-based glycogen synthase kinase-3beta ligands for positron emission tomography imaging and radiosynthesis method
CN112538458A (zh) 2020-11-26 2021-03-23 北京赛尔湃腾科技咨询合伙企业(有限合伙) 用于重编程细胞的方法

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL89167A (en) * 1988-02-10 1994-02-27 Hoffmann La Roche Substituted pyrroles, their manufacture and pharmaceutical compositions containing them
GB8904161D0 (en) 1989-02-23 1989-04-05 Hoffmann La Roche Substituted pyrroles
MC2096A1 (fr) 1989-02-23 1991-02-15 Hoffmann La Roche Pyrroles substitues
GB9123396D0 (en) 1991-11-04 1991-12-18 Hoffmann La Roche A process for the manufacture of substituted maleimides
CA2116460A1 (en) 1993-03-02 1994-09-03 Mitsubishi Chemical Corporation Preventive or therapeutic agents for alzheimer's disease, a screening method of alzheimer's disease and tau-protein kinase i originated from human being
US5721230A (en) 1993-05-10 1998-02-24 Hoffmann-La Roche Inc. Substituted pyrroles
AU678435B2 (en) 1993-05-10 1997-05-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Substituted pyrroles
AU1200497A (en) 1995-12-20 1997-07-14 Medical Research Council Control of protein synthesis, and screening method for agents
AU2819397A (en) 1996-05-07 1997-11-26 Presidents And Fellows Of Harvard College Inhibitors of glycogen synthase kinase-3 and methods for identifying and using the same
SE9603285D0 (sv) 1996-09-10 1996-09-10 Astra Ab New compounds
AU6111699A (en) * 1998-10-08 2000-05-01 Smithkline Beecham Plc Novel method and compounds
GB9828640D0 (en) * 1998-12-23 1999-02-17 Smithkline Beecham Plc Novel method and compounds

Also Published As

Publication number Publication date
ZA200300216B (en) 2004-04-08
HK1058670A1 (en) 2004-05-28
PE20020338A1 (es) 2002-04-23
EP1307447A2 (en) 2003-05-07
ATE284885T1 (de) 2005-01-15
UY26857A1 (es) 2002-01-31
US6479490B2 (en) 2002-11-12
NO20030328L (no) 2003-01-22
JP2004505078A (ja) 2004-02-19
DE60107857T2 (de) 2005-12-08
ECSP034452A (es) 2003-03-10
US20020052397A1 (en) 2002-05-02
MA26936A1 (fr) 2004-12-20
DE60107857D1 (de) 2005-01-20
HUP0301431A2 (hu) 2003-08-28
NO20030328D0 (no) 2003-01-22
AR033989A1 (es) 2004-01-21
WO2002010158A3 (en) 2002-05-16
JO2293B1 (en) 2005-09-12
HRP20030030A2 (en) 2005-02-28
KR20030017655A (ko) 2003-03-03
CA2417277A1 (en) 2002-02-07
MXPA03000695A (es) 2003-06-04
WO2002010158A2 (en) 2002-02-07
CN1185229C (zh) 2005-01-19
CN1444581A (zh) 2003-09-24
ES2233691T3 (es) 2005-06-16
PL366701A1 (en) 2005-02-07
US20020188018A1 (en) 2002-12-12
YU4403A (sh) 2006-05-25
JP3984157B2 (ja) 2007-10-03
EP1307447B1 (en) 2004-12-15
AU2001293702A1 (en) 2002-02-13
IL153851A0 (en) 2003-07-31
NZ523462A (en) 2004-09-24
RU2003104796A (ru) 2004-08-20
PA8523001A1 (es) 2002-10-24
GT200100151A (es) 2002-05-23
BR0112965A (pt) 2003-07-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ2003555A3 (en) 3-indolyl-4-phenyl-1h-pyrrole-2,5-dione derivatives as inhibitors of glycogen synthase kinase-3beta
US20210251992A1 (en) Pyrazole pyrimidine derivative and uses thereof
JP6054869B2 (ja) 複素環化合物
US20090291968A1 (en) Substituted indazole derivatives, their manufacture and use as pharmaceutical agents
EP3625224B1 (en) N-substituted indole derivatives
MX2010013920A (es) Alcoholes alquinilicos como inhibidores de cinasas.
AU2014348422B2 (en) EBNA1 inhibitors and their method of use
JP2000509719A (ja) 置換されたアザビシクロ化合物、ならびにｔｎｆおよびサイクリックａｍｐホスホジエステラーゼ産生の阻害剤としてのそれらの使用
CA2436487A1 (en) Methods of inhibiting kinases
EP1553085A1 (en) Cyclic amine derivatives and their use as drugs
JPH09507066A (ja) プロテインキナーゼｃ阻害剤
EP1689739B1 (en) Azole-based kinase inhibitors
BR112018010291B1 (pt) Composto, composição farmacêutica, e, uso de um composto
EP1465610B1 (en) Use of a gsk-3beta inhibitor in the manufacture of a medicament for increasing bone formation
WO2015011396A1 (fr) Nouveaux derives d&#39;indole et de pyrrole, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
ES2427968T3 (es) Nuevos derivados de indol que tienen un grupo carbamoilo, un grupo ureido y un grupo oxi sustituido
KR20140009106A (ko) 아자인돌 유도체
KR20020064375A (ko) Ｍｃｐ-1 수용체 길항제인 인돌 유도체
EP2140862A2 (en) Use of GAL 3 receptor antagonists for the treatment of depression and /or anxiety and compounds useful in such methods
AU2011336700B2 (en) 4-substituted-cyclohexylamino-4-piperidinyl-acetamide antagonists of CCR2
FR2969611A1 (fr) Nouveaux derives de thiazoles, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de phosphorylation d&#39;akt(pkb)
WO2004014376A1 (en) Gal3 receptor antagonists for the treatment of affective disorders
WO2023130541A1 (zh) 2-吡唑-3-苯并咪唑衍生物及其制备方法和应用
FR2969610A1 (fr) Nouveaux derives de (6-oxo-1,6-dihydro-pyrimidin-2-yl)-indolinamide, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de phosphorylation d&#39;akt(pkb)
FR2969608A1 (fr) Nouveaux derives de (5-halo-6-oxo-1,6-dihydro-pyrimidin-2-yl)-amide, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de phosphorylation d&#39;akt(pkb)