CN1279034C

CN1279034C - Dna－pk抑制剂

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Publication number: CN1279034C
Application number: CNB028159780A
Authority: CN
Inventors: R·J·格里芬; B·T·戈尔丁; D·R·纽厄尔; H·A·卡尔弗特; N·J·柯廷; I·R·哈德卡斯尔; N·M·B·马丁; G·C·M·史密斯; L·J·M·里戈雷奥; X-L·F·科克罗夫特; V·J·M－L·洛; P·沃克曼; F·I·雷诺; B·P·纳特雷
Original assignee: Cancer Research Technology Ltd
Current assignee: Cancer Research Technology Ltd
Priority date: 2001-08-14
Filing date: 2002-08-14
Publication date: 2006-10-11
Anticipated expiration: 2022-08-14
Also published as: US20040192687A1; US7674823B2; CN1543457A; AU2002362385B2; CY1110269T1; MXPA04000804A; JP4332032B2; DK1417196T3; NZ530909A; GB2393653B; JP2005503414A; BR0211889A; EP1417196B1; HK1070368A1; PT1417196E; ES2315377T3; WO2003024949A1; ATE411987T1; PL367081A1; NO20040636L

Abstract

本发明涉及式(I)化合物和其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药在制备用于抑制DNA-PK活性的药物中的用途，其中R¹和R²彼此独立地是氢、取代或未取代的C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，或者可以与它们所连接的氮原子一起形成具有4-8个环原子的取代或未取代的杂环；X和Y选自CR⁴和O、O和CR’⁴以及NR”⁴和N，其中的不饱和键位于环内的适当位置，并且其中R³和R⁴或R’⁴之一是取代或未取代的C_3-20杂芳基或C_5-20芳基，R³和R⁴或R’⁴中的另一个是H，或者R³和R⁴或R”⁴一起是-A-B-，它合在一起表示一个稠合的取代或未取代的芳环。与PI 3-激酶和/或ATM相比，该化合物可选择性地抑制DNA-PK的活性。

Description

DNA-PK抑制剂

本发明涉及用作DNA-PK抑制剂的化合物、其用途及合成方法。

DNA-依赖性蛋白激酶(DNA-PK)是在与DNA缔合作用下激活的核丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。生物化学和遗传学数据揭示了这种激酶是由称作DNA-PKcs的大的催化亚单位和称作Ku的调节组件所组成。已经证实DNA-PK是DNA双链断裂(DSB)修复机和V(D)J重组装置二者的关键组件。此外，最新的研究暗示了DNA-PK组件存在于多种其他过程中，包括染色质结构的调制和端粒的维护(Smith，G.C.M.和Jackson，S.P.，Genes andDev.13：916-934(1999))。

人体DNA常常处于主要来源于为我们提供能量的氧化代谢的副产物的反应性氧中间体的攻击下。反应性氧物质能够造成DNA单链断裂，并且，如果两个这样的断裂产生得非常接近时，DNA双链会断裂(DSBs)。此外，当DNA复制叉遭遇受损模板时也可以引发单-和双-链断裂，而且外源性因素例如电离辐射(IR)和某些抗癌药物(例如博莱霉素)也可以引发单-和双-链断裂。DSBs还作为中间体出现在位点特异性的V(D)J重组中，而该过程对于功能性脊椎动物免疫***的产生来说是至关重要的。如果DNADSBs未得到修复或修复得不正确，则会诱发突变和/或染色体畸变，由此可能导致细胞死亡。为了对抗DNA DSBs带来的严重威胁，真核生物的细胞进化了数种机制来介导其修复。在高级真核生物中，这些机制中的主导机制是DNA非同源末端连接(NHEJ)，也称作不正常重组。DNA-PK在该途径中起关键作用。

有关DNA-PK的生化研究证实它可以被DNA DSBs非常有效地激活，表明它可能在识别DNA损伤中发挥一定的作用。这刺激了关于DNA-PKcs和Ku在DNA修复中的潜在作用的研究，并由此鉴定出了由于DNA-PK组件的突变而具有放射敏感性的细胞系(Smith和Jackson，1999)。DNA-PKcscDNA的克隆显示它相当于～470kDa的多肽，其N-末端～3500个氨基酸残基似乎与其他已描述了特性的蛋白质没有明显的同源性(Hartley，K.O.等，Cell 82：849-856(1995))。更显著地，DNA-PKcs的C-末端～500个氨基酸残基包含属于PI 3-激酶家族的催化结构域。虽然最初提出DNA-PK可能能够象某些充分定性的PI 3-激酶家族的成员一样磷酸化肌醇磷脂类(Toker，A.和Cantley，L.C.，Nature 387：673-676(1997))，但目前的证据表明，DNA-PK具有蛋白而不是脂质的激酶活性(Hartley等，1995；Smith等，1999)。在克隆DNA-PKcs cDNA的同时，对许多其他大的PI 3-激酶样(PIKL)蛋白的基因和cDNAs也进行了鉴定和克隆(Jackson，S.P.，Cancer Surv.28：261-279(1996))。这些蛋白被证实参与了从酵母到人类的生物体中的控制转录、细胞周期和/或染色体组的稳定性。DNA-PKcs似乎局限于高级真核细胞。

除了DNA-PKcs之外，在PIKL家族中特征描述最多的可能便是ATM，在人类神经变性和癌症易患状况共济失调-毛细管扩张症中缺乏这种蛋白(A-T；Lavin，M.F.和Shiloh，Y.，Annu.Rev.Immunol.15：177-202(1997))。ATM与DNA损伤的检测和信号传导密切相关。

先前还发现PI 3-激酶抑制剂LY294002：

能够在体外抑制DNA-PK的功能(Izzard，R.A.等，Cancer Res.59：2581-2586(1999))。LY294002对DNA-PK的IC₅₀(丧失50％酶活性时的浓度)为大约1μM，与PI 3-激酶相同。此外还证实了LY294002能够微弱敏化细胞对IR的作用(Rosenzweig，K.E.等，Clin.Cancer Res.3：1149-1156(1999))。

假设DNA-PK参与DNA的修复过程，并且由于已经证明了LY294002可使培养物中的哺乳动物细胞对放射敏感化，因此应用(特异性的)DNA-PK抑制药物将可以作为提高癌症化疗和放疗效能的药物。DNA-PK抑制剂还可以有效治疗逆转录病毒介导的疾病。例如，已经证实DNA-PK活性的丧失严重抑制了逆转录病毒整合的过程(Daniel R等，Science，284：644-7(1999))。DNA-PK抑制剂还具有作为免疫***调节剂的潜能。DNA-PK还显示可在端粒维护中发挥重要作用，并且因此DNA-PK的抑制剂可以在调节端粒功能中起作用(Goytisolo等，Mol.Cell.Biol.，21：3642-3651(2001)。

本发明人发现了具有DNA-PK抑制作用的化合物；这些化合物还表现出相对于PI 3-激酶家族成员PI 3-激酶和ATM而言对DNA-PK的选择性抑制。

因此，本发明的第一个方面提供了式I化合物和其异构体、盐、溶剂化物、化学保护的形式和前药在制备用于抑制DNA-PK活性的药物中的用途，

其中：

R¹和R²彼此独立地是氢、取代或未取代的C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，或者可以与它们所连接的氮原子一起形成具有4-8个环原于的取代或未取代的杂环；

X和Y选自CR⁴和O、O和CR’⁴以及NR”⁴和N，其中的不饱和键位于环内的适当位置，并且其中R³和R⁴或R’⁴之一是取代或未取代的C_3-20杂芳基或C_5-20芳基，R³和R⁴或R’⁴中的另一个是H，或者R³和R⁴或R”⁴一起是-A-B-，它合在一起表示一个稠合的取代或未取代的芳环；

条件是当X和Y是CR⁴和O、R³和R⁴一起形成稠合的苯环并且R¹和R²与它们所连接的N一起形成吗啉代基团时，则该稠合的苯不带有作为唯一取代基的在8-位的苯基取代基。

因此，X和Y的三种不同的可能性产生了式Ia、Ib和Ic的化合物：

本发明第一方面的一个方面涉及式Ia或Ib的化合物，其中R³和R⁴(或R’⁴)之一是C_3-20杂芳基或C_5-20芳基，并且R³和R⁴(或R’⁴)中的另一个是H。

本发明第一方面的另一个方面涉及式Ia和Ic的化合物，其中R³和R⁴或R”⁴一起是A-B-，它合在一起表示一个稠合的取代或未取代的芳环，其条件如上所述。

优选第一方面的药物相对于PI 3-激酶和/或ATM可以选择性地抑制DNA-PK的活性。选择性是一个重要问题，因为对其他PI 3-激酶家族成员的抑制作用可能会引起与那些酶功能的丧失有关的不良副作用。

本发明的第二方面提供了本发明第一方面所定义的化合物在制备在癌症治疗中用作辅助剂或用于强化用电离放射或化疗药物治疗的肿瘤细胞的药物中的用途。

本发明的第三方面提供了所述化合物在制备用于治疗由逆转录病毒介导的疾病或可以通过抑制DNA-PK而改善的疾病的药物中的用途。

本发明的另一方面提供优选以药物组合物的形式应用于人或动物体的治疗方法中的本文所述的活性化合物。

本发明的另一方面提供一种体外或体内抑制DNA-PK的方法，包括使细胞与有效量的本文所述的活性化合物接触。

本发明的另一方面提供了本文所述的新的化合物。

定义

本文所用的术语“芳环”具有常规的含义，它指环状芳环，也就是说，带有离域π-电子轨道的在环内含有5-7个原子的环状结构。优选地，芳环是符合休克尔4n+2规则的那些，即其中π-电子的数目为4n+2，n代表环原子的数目。优选所述的芳环具有6个原子。在这种情况中，进一步优选除构成该芳环核心部分之外的其它4个原子全部是碳，从而得到具有下面结构通式的化合物：

其中X’和Y’分别是C和O或N和N；并且

其中R⁵、R⁶、R⁷和R⁸优选彼此独立地选自氢、C_1-7烃基、C_3-20杂环基、C_5-20芳基、羟基、C_1-7烃氧基(包括C_1-7烃基-C_1-7烃氧基和C_3-20芳基-C_1-7烃氧基)和酰氧基，或者相邻的取代基对(即R⁵和R⁶、R⁶和R⁷、R⁷和R⁸)与它们所连接的原子一起形成取代或未取代的芳环或碳环。

由-A-B-表示的稠合芳环可以被一个或多个下列基团取代：C_1-7烃基、C_3-20杂环基、C_5-20芳基、羟基、C_1-7烃氧基(包括C_1-7烃基-C_1-7烃氧基和C_3-20芳基-C_1-7烃氧基)和酰氧基；相邻的取代基对可以与它们所连接的原子一起形成取代或未取代的芳环或碳环。

术语碳环是指由5-7个共价连接的碳原子构成的环。该环可以含有一个或多个碳-碳双键。碳环的实例包括环戊烷、环己烷、环庚烷、环戊烯、环己烯和环庚烯。

C_1-7烃基：在此使用的术语“C_1-7烃基”是指通过除去具有1-7个碳原子的C_1-7烃化合物的一个氢原子得到的一价部分，它可以是脂族或脂环族或其组合，并且可以是饱和、部分不饱和或完全不饱和的。

饱和的直链C_1-7烃基的实例包括但不限于，甲基、乙基、正丙基、正丁基和正戊基(戊基)。

饱和的支链C_1-7烃基的实例包括但不限于，异丙基、异丁基、仲丁基、叔丁基和新戊基。

饱和的脂环C_1-7烃基(也称作“C_3-7环烃基”)的实例包括但不限于，例如环丙基、环丁基、环戊基和环己基，以及取代的基团(例如，含有此类基团的基团)，例如甲基环丙基、二甲基环丙基、甲基环丁基、二甲基环丁基、甲基环戊基、二甲基环戊基、甲基环己基、二甲基环己基、环丙基甲基和环己基甲基。

含有一个或多个碳-碳双键的不饱和C_1-7烃基的实例(也称作“C_2-7链烯基”)包括但不限于，乙烯基(-CH＝CH₂)、2-丙烯基(烯丙基、-CH-CH＝CH₂)、异丙烯基(-C(CH₃)＝CH₂)、丁烯基、戊烯基和己烯基。

具有一个或多个碳-碳叁键的不饱和C_1-7烃基的实例(也称作“C_2-7链炔基”)包括但不限于，乙炔基和2-丙炔基(炔丙基)。

含有一个或多个碳-碳双键的不饱和脂环(碳环)C_1-7烃基的实例(也称作“C_3-7环烯基”)包括但不限于，未取代的基团例如环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基和环己烯基，以及取代的基团(例如，含有此类基团的基团)例如环丙烯基甲基和环己烯基甲基。

C_3-20杂环基：在此使用的术语“C_3-20杂环基”是指通过除去C_3-20杂环化合物的环原子上的一个氢原子得到的一价部分，所述化合物具有一个环，或两个或多个环(例如，螺环、稠合、桥连的环)，并且具有3-20个环原子，它们中的1-10个是环杂原子，并且其中至少一个所述的环是杂环。优选地，各环具有3-7个环原子，其中的1-4个是环杂原子。“C_3-20”代表环原子，不论是碳原子还是杂原子。

具有一个氮环原子的C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯烷(四氢吡咯)、吡咯啉(例如，3-吡咯啉、2，5-二氢吡咯)、2H-吡咯或3H-吡咯(异吡咯、异氮杂环戊二烯)、哌啶、二氢吡啶、四氢吡啶和氮杂的那些。

具有一个氧环原子的C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自氧杂环丙烷、氧杂环丁烷、氧杂环戊烷(四氢呋喃)、氧杂环戊烯(二氢呋喃)、烷(四氢吡喃)、二氢吡喃、吡喃(C₆)和氧杂的那些。取代的C_3-20杂环基的实例包括环状的糖，例如，呋喃糖类和吡喃糖类，包括，例如核糖、来苏糖、木糖、半乳糖、蔗糖、果糖和阿糖。

具有一个硫环原子的C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自硫杂环丙烷、硫杂环丁烷、硫杂环戊烷(四氢噻吩)、硫杂环己烷(四氢噻喃)和硫杂环庚烷的那些。

具有两个氧环原子的C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自二氧杂环戊烷、二氧杂环己烷和二氧杂环庚烷的那些。

具有两个氮环原子的C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自咪唑烷、吡唑烷(二氮杂环戊烷)、咪唑啉、吡唑啉(二氢吡唑)和哌嗪的那些。

具有一个氮环原子和一个氧环原子的C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自四氢唑、二氢唑、四氢异唑、二氢异唑、吗啉、四氢嗪、二氢嗪和嗪的那些。

具有一个氧环原子和一个硫环原子的C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自氧硫杂环戊烷和氧硫杂环己烷(噻烷)的那些。

具有一个氮环原子和一个硫环原子C_3-20杂环基的实例包括但不限于，衍生自噻唑啉、噻唑烷和硫代吗啉的那些。

C_3-20杂环基的其他实例包括但不限于，二嗪和噻嗪。

另外带有一个或多个氧代(＝O)基团的杂环基的实例包括但不限于，衍生自下列的那些：

C₅杂环，例如呋喃酮、吡喃酮、吡咯烷酮、吡唑啉酮、咪唑烷酮、噻唑啉酮和异噻唑啉酮；

C₆杂环，例如哌啶酮、哌啶二酮、哌嗪酮、哌嗪二酮、哒嗪酮和嘧啶酮(例如，胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)和巴比土酸；

稠合杂环，例如羟吲哚、羟基嘌呤(例如，鸟嘌呤)、苯并唑啉酮、苯并吡喃酮(例如，香豆素)；

环状酸酐(-C(＝O)-O-C(＝O)-在环内)，包括但不限于马来酸酐、琥珀酸酐和戊二酸酐；

环状碳酸酯(-O-C(＝O)-O-在环内)，例如碳酸亚乙酯和碳酸1，2-亚丙酯；

酰亚胺(-C(＝O)-NR-C(＝O)-在环内)，包括但不限于，琥珀酰亚胺、马来酰亚胺、邻苯二甲酰亚胺和戊二酰亚胺；

内酯(环酯，-O-C(＝O)-在环内)，包括但不限于，β-丙内酯、γ-丁内酯、δ-戊内酯(2-哌啶酮)和∈-己内酯；

内酰胺(环酰胺，-NR-C(＝O)-在环内)，包括但不限于，β-丙内酰胺、γ-丁内酰胺(2-吡咯烷酮)、δ-戊内酰胺和∈-己内酰胺；

环状氨基甲酸酯(-O-C(＝O)-NR-在环内)，例如2-唑烷酮；

环脲(-NR-C(＝O)-NR-在环内)，例如2-咪唑烷酮和嘧啶-2，4-二酮(例如，胸腺嘧啶、尿嘧啶)。

C_5-20芳基：在此使用的术语“C_5-20芳基”是指由C_5-20芳族化合物的芳环原子脱去一个氢原子得到的一价部分，所述化合物具有一个环，或两个或多个环(例如，稠合的)，并且具有5-20个环原子，并且其中至少有一个所述的环是芳环。优选地，各环具有5-7个环原子。

所述的环原子可以全部是碳原子，称作“碳芳基”，在这种情况中该基团一般称作“C_5-20碳芳基”基团。

不含有环杂原子的C_5-20芳基(即C_5-20碳芳基)的实例包括但不限于，衍生自苯(即苯基)(C₆)、萘(C₁₀)、蒽(C₁₄)、菲(C₁₄)、并四苯(C₁₈)和芘(C₁₆)的那些。

含有稠合环、其中一个不是芳环的芳基的实例包括但不限于，衍生自茚和芴的那些。

或者，所述的环原子可以包括一个或多个杂原子，包括但不限于氧、氮和硫，称作“杂芳基”。在这种情况中，该基团一般被称作“C_5-20杂芳基”，其中“C_5-20”指环原子，无论是碳原子还是杂原子。优选地，各环具有5-7个环原子，其中0-4个是环杂原子。

C_5-20杂芳基的实例包括但不限于，衍生自呋喃(氧杂环戊二烯)、噻吩(硫杂环戊二烯)、吡咯(氮杂环戊二烯)、咪唑(1，3-氮杂环戊二烯)、吡唑(1，2-氮杂环戊二烯)、***、唑、异唑、噻唑、异噻唑、二唑和***的C₅杂芳基；和衍生自嗪、吡啶(吖嗪)、哒嗪(1，2-二嗪)、嘧啶(1，3-二嗪；例如胞嘧啶、胸腺嘧啶、尿嘧啶)、吡嗪(1，4-二嗪)、三嗪、四唑和二唑(呋咱)的C₆杂芳基。

C_5-20杂环基(其中一些是C_5-20杂芳基)的实例包括稠合环，包括但不限于，衍生自苯并呋喃、异苯并呋喃、吲哚、异吲哚、嘌呤(例如，腺嘌呤、鸟嘌呤)、苯并噻吩、苯并咪唑的C₉杂环基；衍生自喹啉、异喹啉、苯并二嗪、吡啶并吡啶、喹喔啉的C₁₀杂环基；衍生自咔唑、二苯并噻吩、二苯并呋喃的C₁₃杂环基；衍生自吖啶、夹氧蒽、吩氧硫杂环己二烯(phenoxathiin)、吩嗪、吩嗪、吩噻嗪的C₁₄杂环基。

上述C_1-7烃基、C_3-20杂环基和C_5-20芳基，无论是单独还是作为另一取代基的组成部分，其本身可以是未取代的或被一个或多个选自其自身和下列其他取代基的基团所取代。

卤素：-F、-Cl、-Br和-I。

羟基：-OH。

醚：-OR，其中R是醚取代基，例如，C_1-7烃基(也称作C_1-7烃氧基，如下所述)、C_3-20杂环基(也称作C_3-20杂环氧基)，或C_5-20芳基(也称作C_5-20芳氧基)，优选C_1-7烃基。

C_1-7烃氧基：-OR，其中R是C_1-7烃基。C_1-7烃氧基的实例包括但不限于，-OCH₃(甲氧基)、-OCH₂CH₃(乙氧基)和-OC(CH₃)₃(叔丁氧基)。

氧代(酮基、-酮)：＝O。带有氧代基团(＝O)作为取代基的环状化合物和/或基团的实例包括但不限于，碳环例如环戊酮和环己酮；杂环，例如吡喃酮、吡咯烷酮、吡唑酮、吡唑啉酮、哌啶酮、哌啶二酮、哌嗪二酮和咪唑烷酮；环状酸酐，包括但不限于马来酸酐和琥珀酸酐；环碳酸酯，例如碳酸亚丙酯；酰亚胺，包括但不限于，琥珀酰亚胺和马来酰亚胺；内酯(环酯，-O-C(＝O)-在环内)，包括但不限于，β-丙内酯、γ-丁内酯、δ-戊内酯和∈-己内酯；和内酰胺(环状酰胺，-NH-C(＝O)-在环内)，包括但不限于，β-丙内酰胺、γ-丁内酰胺(2-吡咯烷酮)、δ-戊内酰胺和∈-己内酰胺。

亚氨基(亚胺)：＝NR，其中R是亚氨基取代基，例如，氢、C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选氢或C_1-7烃基。亚氨基的实例包括但不限于，＝NH、＝NMe、＝NEt和＝NPh。

甲酰基(甲醛，甲醛基)：-C(＝O)H。

酰基(酮基)：-C(＝O)R，其中R是酰基取代基，例如，C_1-7烃基(也称为C_1-7烃基酰基或C_1-7烷酰基)、C_3-20杂环基(也称为C_3-20杂环基酰基)或C_5-20芳基(也称为C_5-20芳酰基)，优选C_1-7烃基。酰基的实例包括但不限于，-C(＝O)CH₃(乙酰基)、-C(＝O)CH₂CH₃(丙酰基)、-C(＝O)C(CH₃)₃(丁酰基)和-C(＝O)Ph(苯甲酰基、苯酮)。

羧基(羧酸)：-COOH。

酯(羧酸酯、氧羰基)：-C(＝O)OR，其中R是酯基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。酯基的实例包括但不限于，-C(＝O)OCH₃、-C(＝O)OCH₂CH₃、-C(＝O)OC(CH₃)₃和-C(＝O)OPh。

酰氧基(反酯)：-OC(＝O)R，其中R是酰氧基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。酰氧基的实例包括但不限于，-OC(＝O)CH₃(乙酰氧基)、-OC(＝O)CH₂CH₃、-OC(＝O)C(CH₃)₃、-OC(＝O)Ph和-OC(＝O)CH₂Ph。

氨酰基(氨基甲酰基、氨基羰基、甲酰氨基)：-C(＝O)NR¹R²，其中R¹和R²彼此独立地是关于氨基所定义的氨基取代基。氨酰基的实例包括但不限于，-C(＝O)NH₂、-C(＝O)NHCH₃、-C(＝O)N(CH₃)₂，-C(＝O)NHCH₂CH₃和-C(＝O)N(CH₂CH₃)₂，以及其中R¹和R²与其所连接的氮原子一起形成杂环结构的氨酰基，例如，1-哌啶基羰基、吗啉代羰基、硫代吗啉代羰基和1-哌嗪基羰基。

酰氨基(酰基氨基)：-NR¹C(＝O)R²，其中R¹是酰胺取代基，例如，氢、C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选氢或C_1-7烃基，R²是酰基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选氢或C_1-7烃基。酰氨基的实例包括但不限于，-NHC(＝O)CH₃，-NHC(＝O)CH₂CH₃和-NHC(＝O)Ph。R¹和R²可以一起形成环结构，如同在例如，琥珀酰亚氨基、马来酰亚氨基和苯二酰亚氨基中那样：

琥珀酰亚氨基马来酰亚氨基苯二酰亚氨基

酰基脲基：-N(R¹)C(O)NR²C(O)R³，其中R¹和R²彼此独立地是脲基取代基，例如，氢、C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选氢或C_1-7烃基。R³是上述关于酰基所定义的酰基。酰基脲基的实例包括但不限于，-NHCONHC(O)H、-NHCONMeC(O)H、-NHCONEtC(O)H、-NHCONMeC(O)Me、-NHCONEtC(O)Et、-NMeCONHC(O)Et、-NMeCONHC(O)Me、-NMeCONHC(O)Et、-NMeCONMeC(O)Me、-NMeCONEtC(O)Et和-NMeCONHC(O)Ph。

氨基甲酸酯：-NR¹-C(O)-OR²，其中R¹是关于氨基所定义的氨基取代基并且R²是上述关于酯基所定义的酯基。氨基甲酸酯基的实例包括但不限于，-NH-C(O)-O-Me、-NMe-C(O)-O-Me、-NH-C(O)-O-Et、-NMe-C(O)-O-叔丁基和-NH-C(O)-O-Ph。

硫代氨酰基(硫代氨基甲酰基)：-C(＝S)NR¹R²，其中R¹和R²彼此独立地是关于氨基所定义的氨基取代基。氨酰基的实例包括但不限于，-C(＝S)NH₂、-C(＝S)NHCH₃、-C(＝S)N(CH₃)₂和-C(＝S)NHCH₂CH₃。

四唑基：具有4个氮原子和1个碳原子的5员芳环，

氨基：-NR¹R²，其中R¹和R²彼此独立地是氨基取代基，例如，氢、C_1-7烃基(也称作为C_1-7烃基氨基或二-C_1-7烃基氨基)、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选H或C_1-7烃基，或者，在“环状”氨基的情况中，R¹和R²与其所连接的氮原子一起形成具有4-8个环原子的杂环。氨基的实例包括但不限于，-NH₂、-NHCH₃、-NHC(CH₃)₂、-N(CH₃)₂、-N(CH₂CH₃)2和-NHPh。环状氨基的实例包括但不限于，1-氮杂环丙基、1-氮杂环丁基、1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基、吗啉代和硫代吗啉代。

亚氨基：＝NR，其中R是亚氨基取代基，例如，氢、C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选H或C_1-7烃基

脒：-C(＝NR)NR₂，其中各R是脒取代基，例如，氢、C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选H或C_1-7烃基。脒基的实例是-C(＝NH)NH₂。

联氨羰基(肼基羰基)：-C(O)-NN-R¹，其中R¹是关于氨基所定义的氨基取代基。连氮基的实例包括但不限于，-C(O)-NN-H、-C(O)-NN-Me、-C(O)-NN-Et、-C(O)-NN-Ph和-C(O)-NN-CH₂-Ph。

硝基：-NO₂。

亚硝基：-NO。

叠氮基：-N₃。

氰基(腈，甲腈)：-CN。

异氰基：-NC。

氰氧基：-OCN。

异氰氧基：-NCO。

氰硫基(硫氰酸根合)：-SCN。

异氰硫基(异硫氰酸根合)：-NCS。

巯基(硫氢基)：-SH。

硫醚(硫化物)：-SR，其中R是硫醚取代基，例如，C_1-7烃基(也称为C_1-7烷硫基)、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。C_1-7烷硫基的实例包括但不限于，-SCH₃和-SCH₂CH₃。

二硫化物：-SS-R，其中R是二硫化物取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基(在此也称作C_1-7烃基二硫化物)。C_1-7烃基二硫化物的实例包括但不限于，-SSCH₃和-SSCH₂CH₃。

砜(磺酰基)：-S(＝O)₂R，其中R是砜取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。砜基的实例包括但不限于，-S(＝O)₂CH₃(甲烷磺酰基、甲磺酰基)、-S(＝O)₂CF₃(三氟甲磺酰基)、-S(＝O)₂CH₂CH₃、-S(＝O)₂C₄F₉(九氟丁磺酰基)、-S(＝O)₂CH₂CF₃(三氟乙磺酰基)、-S(＝O)₂Ph(苯基磺酰基)、4-甲基苯基磺酰基(对甲苯磺酰基)、4-溴苯基磺酰基(对溴苯磺酰基)和4-硝基苯基(对硝基苯磺酰基)。

亚磺酰(亚磺酰基、亚砜)：-S(＝O)R，其中R是亚磺酰取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。亚磺酰基的实例包括但不限于，-S(＝O)CH₃和-S(＝O)CH₂CH₃。

磺酰氧基：-OS(＝O)₂R，其中R是磺酰氧基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。磺酰氧基的实例包括但不限于，-OS(＝O)₂CH₃和-OS(＝O)₂CH₂CH₃。

亚磺酰氧基：-OS(＝O)R，其中R是亚磺酰氧基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。亚磺酰氧基的实例包括但不限于，-OS(＝O)CH₃和-OS(＝O)CH₂CH₃。

磺氨基：-NR¹S(＝O)₂OH，其中R¹是关于氨基所定义的氨基取代基。磺氨基的实例包括但不限于，-NHS(＝O)₂OH和-N(CH₃)S(＝O)₂OH。

磺酰氨基：-NR¹S(＝O)₂R，其中R¹是关于氨基所定义的氨基取代基并且R是磺酰氨基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。磺酰氨基的实例包括但不限于，-NHS(＝O)₂CH₃和-N(CH₃)S(＝O)₂C₆H₅。

亚磺酰氨基：-NR¹S(＝O)R，其中R¹是关于氨基所定义的氨基取代基并且R是亚磺酰氨基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。亚磺酰氨基的实例包括但不限于，-NHS(＝O)CH₃和-N(CH₃)S(＝O)C₆H₅。

氨磺酰基：-S(＝O)NR¹R²，其中R¹和R²彼此独立地是关于氨基所定义的氨基取代基。氨磺酰基的实例包括但不限于，-S(＝O)NH₂、-S(＝O)NH(CH₃)、-S(＝O)N(CH₃)₂、-S(＝O)NH(CH₂CH₃)、-S(＝O)N(CH₂CH₃)₂和-S(＝O)NHPh。

磺酰氨基：-NR¹S(＝O)₂R，其中R¹是关于氨基所定义的氨基取代基并且R是磺酰氨基取代基，例如，C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选C_1-7烃基。磺酰氨基的实例包括但不限于，-NHS(＝O)₂CH₃和-N(CH₃)S(＝O)₂C₆H₅。一类特定的磺酰氨基是衍生自磺内酰胺的那些-在这些基团中，R¹和R之一是C_5-20芳基，优选苯基，而R¹和R中的另一个是与C_5-20芳基相连的双齿基团，例如衍生自C_1-7烃基的双齿基团。此类基团的实例包括但不限于：

2，3-二氢-苯并[d]异噻唑-1，1-二氧化物-2-基

1，3-二氢-苯并[c]异噻唑-2，2-二氧化物-1-基

3，4-二氢-2H-苯并[e][1，2]噻嗪-1，1-二氧化物-2-基

氨基亚磷酸酯：-OP(OR¹)-NR²²，其中R¹和R²是氨基亚磷酸酯取代基，例如，-H、(取代或未取代的)C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选-H、C_1-7烃基或C_5-20芳基。氨基亚磷酸酯基的实例包括但不限于-OP(OCH₂CH₃)-N(CH₃)₂、-OP(OCH₂CH₃)-N(i-Pr)₂和-OP(OCH₂CH₂CN)-N(i-Pr)₂。

氨基磷酸酯：-OP(＝O)(OR¹)-NR²²，其中R¹和R²是氨基磷酸酯取代基，例如，-H、(取代或未取代的)C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，优选-H、C_1-7烃基或C_5-20芳基。氨基磷酸酯的实例包括但不限于，-OP(＝O)(OCH₂CH₃)-N(CH₃)₂、-OP(＝O)(OCH₂CH₃)-N(i-Pr)₂和-OP(＝O)(OCH₂CH₂CN)-N(i-Pr)₂。

在许多情况中，取代基本身可以被取代。例如，C_1-7烃氧基可以被例如C_1-7烃基取代(也称作为C_1-7烃基-C_1-7烃氧基)，例如，环己基甲氧基；被C_3-20杂环基取代(也称作为C_3-20杂环基-C_1-7烃氧基)，例如苯二甲酰亚氨基乙氧基；或被C_5-20芳基取代(也称作为C_5-20芳基-C_1-7烃氧基)，例如，苄氧基。

包括的其他形式

以上描述还包括这些取代基的已知的离子、盐、溶剂化物和保护的形式。例如，所提到的羧酸(-COOH)还包括其阴离子(羧酸根)形式(-COO-)、盐或溶剂化物，以及常规的保护形式。同样，所提到的氨基包括氨基的质子化形式(-N⁺HR¹R²)、盐或溶剂化物，例如盐酸盐，以及氨基的常规保护形式。同样地，所提到的羟基还包括其阴离子形式(-O-)、盐或溶剂化物，以及羟基的常规保护形式。

异构体、盐、溶剂化物、保护形式和前药

某些化合物可存在一种或多种特定的几何异构、旋光、对映异构、非对映异构、差向异构、立体异构、互变异构、构像异构或端基异构形式，包括但不限于，顺式-和反式-形式；E-和Z-形式；c-、t-和r-形式；内型-和外型-形式；R-、S-和内消旋-形式；D-和L-形式；d-和l-形式；(+)和(-)形式；酮-、烯醇-和烯醇阴离子-形式；顺-和反-式；顺错-和反错-形式；α-和β-形式；轴向和平伏形式；船式-、椅式-、扭转-、信封-和半椅式-形式；和其组合形式，此后总称为“异构体”(或“异构形式”)。

注意，除了下面讨论的互变异构体之外，不包括在本文所述的术语“异构体”之内的是结构(或组成)异构体(即原子之间的连接不同而不仅仅是原子空间位置不同的异构体)。例如，当提到甲氧基(-OCH₃)时，并不包括其结构异构体羟基甲基(-CH₂OH)。同样地，所提到的邻-氯苯基也不包括其结构异构体间-氯苯基。然而，当提到一类结构时，则可以包括属于该类的各种结构异构形式(例如，C_1-7烃基包括正丙基和异丙基；丁基包括正-、异-、仲-和叔丁基；甲氧基苯基包括邻-、间-和对-甲氧基苯基)。

上述排除不涉及互变异构体，例如，酮-、烯醇-和烯醇阴离子形式，例如，下列互变异构体对：酮/烯醇(如下所示)、亚胺/烯胺、酰胺/亚氨基醇、脒/醚、亚硝基/肟、硫酮/烯硫醇、N-亚硝基/羟基偶氮和硝基/酸式-硝基。

酮烯醇烯醇阴离子

注意术语“异构体”特别包括具有一个或多个同位素取代的化合物。例如，H可以是任何同位素形式，包括¹H、²H(D)和³H(T)；C可以是任何同位素形式，包括¹²C、¹³C和¹⁴C；O可以是任何同位素形式，包括¹⁶O和¹⁸O；等。

除非另有说明，否则所提到的具体化合物包括其所有异构形式，包括其(完全或部分)外消旋及其它的混合物。这些异构体的制备(例如不对称合成)和分离(例如，分级结晶和色谱法)方法或者是现有技术中已知的，或者很容易利用本文教导的方法或已知的方法通过已知方式获得。

除非另有说明，否则所提到的具体化合物还包括其离子、盐、溶剂化物和保护的形式，例如，如下所述。

通常优选或需要制备、提纯和/或处理活性化合物的相应的盐，例如，可药用盐。可药用盐的实例在Berge等，1977，“可药用盐(PharmaceuticallyAcceptable Salts)”，J.Pharm.Sci.，Vol.66，pp.1-19中进行了讨论。

例如，如果该化合物是阴离子或带有可以是阴离子的官能团(例如，-COOH可以是-COO-)，则可以与适当的阳离子形成盐。适当无机阳离子的实例包括但不限于，碱金属离子例如Na⁺和K⁺，碱土金属阳离子例如Ca²⁺和Mg²⁺和其他阳离子例如Al³⁺。适当有机阳离子的实例包括但不限于，铵离子(即，NH₄ ⁺)和取代的铵离子(例如，NH₃R⁺、NH₂R₂ ⁺、NHR₃ ⁺、NR₄ ⁺)。一些适当取代的铵离子的实例是衍生自下列物质的那些：乙胺、二乙胺、二环己基胺、三乙胺、丁胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪、苄胺、苯基苄胺、胆碱、葡甲胺和氨丁三醇，以及氨基酸，例如赖氨酸和精氨酸。常规季铵离子的实例是N(CH₃)₄ ⁺。

如果该化合物是阳离子或带有可以是阳离子的官能团(例如，-NH₂可是-NH₃ ⁺)，则可以与适当的阴离子形成盐。适当无机阴离子的实例包括但不限于，衍生自下列无机酸的那些：盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、亚硫酸、硝酸、亚硝酸、磷酸和亚磷酸。适当有机阴离子的实例包括但不限于，衍生自下列有机酸的那些：乙酸、丙酸、琥珀酸、羟乙酸、硬脂酸、棕榈酸、乳酸、苹果酸、朴酸、酒石酸、柠檬酸、葡糖酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、天冬氨酸、苯甲酸、肉桂酸、丙酮酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、苯基磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、乙烷二磺酸、草酸、泛酸、羟乙磺酸、戊酸、乳糖酸和葡糖酸。适当的聚合物阴离子的实例包括但不限于，衍生自下列聚合物酸的那些：鞣酸、羧甲基纤维素。

通常优选或需要制备、提纯和/或处理所述活性化合物的相应溶剂化物。在此使用的术语“溶剂化物”在一般意义上是指溶质(例如活性化合物、活性化合物的盐)和溶剂的复合物。如果溶剂是水，则该溶剂化物可以称为水合物，例如，一水合物、二水合物、三水合物等。

通常优选或需要制备、提纯和/或处理化学保护的形式的所述活性化合物。在此使用的术语“化学保护的形式”是指其中一个或多个反应性官能团被保护以避免发生不希望的化学反应的化合物，也就是说，是被保护的或保护基团(也称作被掩蔽或掩蔽基团或者被封闭或封闭基团)的形式。通过保护反应性官能团，可以进行涉及其他未保护反应性官能团的反应而不影响被保护的基团；保护基可以在基本上不影响分子的其余部分的条件下脱除，通常在随后的步骤中进行。参见，例如， Protective Groups in Organic Svnthesis(T.Green和P.Wuts，Wiley，1999)。

例如，羟基可以保护成为醚(-OR)或酯(-OC(＝O)R)，例如，成为：叔丁基醚；苄基、二苯甲基(二苯基甲基)或三苯甲基(三苯基甲基)醚；三甲基硅烷基或叔丁基二甲基硅烷基醚；或乙酰基酯(-OC(＝O)CH₃、-OAc)。

例如，醛或酮基可以分别保护为缩醛或缩酮，其中羰基(＞C＝O)通过与例如伯醇反应转化为二醚(＞C(OR)₂)。醛或酮基很容易通过用大大过量的水在酸的存在下水解来再生。

例如，氨基可以保护为例如酰胺或尿烷，例如，成为：甲基酰胺(-NHCO-CH₃)；苄氧基酰胺(-NHCO-OCH₂C₆H₅，-NH-Cbz)；叔丁氧基酰胺(-NHCO-OC(CH₃)₃，-NH-Boc)；2-联苯-2-丙氧基酰胺(-NHCO-OC(CH₃)₂C₆H₄C₆H₅，-NH-Bpoc)；9-芴基甲氧基酰胺(-NH-Fmoc)、6-硝基藜芦基氧基酰胺(-NH-Nvoc)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基酰胺(-NH-Teoc)、2，2，2-三氯乙氧基酰胺(-NH-Troc)、烯丙氧基酰胺(-NH-Alloc)、2-(苯基磺酰基)乙氧基酰胺(-NH-Psec)；或者，在适当的情况中，成为N-氧化物(＞NO$)。

例如，羧酸基团可以保护成为酯，例如，成为：C_1-7烃基酯(例如甲酯；叔丁酯)；C_1-7卤代烃基酯(例如，C_1-7三卤代烃基酯)；三C_1-7烃基甲硅烷基-C_1-7烃基酯；或C_5-20芳基-C_1-7烃基酯(例如苄基酯；硝基苄基酯)；或成为酰胺，例如，成为甲基酰胺。

例如，硫醇基团可以保护成为硫醚(-SR)，例如，成为：苄基硫醚；乙酰氨基甲基醚(-S-CH₂NHC(＝O)CH₃)。

通常优选或需要制备、提纯和/或处理前药形式的所述活性化合物。在此使用的术语“前药”是指当被代谢(例如在体内)时可生成所需活性化合物的化合物。通常，所述的前药是无活性的，或比活性化合物的活性低，但可以提供有利于处理、给药或代谢的性质。

例如，一些前药是活性化合物的酯(例如生理可接受的代谢不稳定的酯)。在代谢过程中，酯基(-C(＝O)OR)断裂生成活性药物。此类酯可以通过酯化反应形成，例如通过母体化合物中的任何羧酸基团(-C(＝O)OH)的酯化反应形成，并且如果需要的话，可将该母体化合物中存在的任何其他反应性基团预先进行保护，然后在需要时脱保护。所述代谢不稳定的酯的实例包括其中R是C_1-7烃基(例如-Me、-Et)；C_1-7氨基烃基(例如氨基乙基；2-(N，N-二乙基氨基)乙基；2-(4-吗啉代)乙基)；和酰氧基-C_1-7烃基(例如酰氧基甲基；酰氧基乙基；例如新戊酰基氧基甲基；乙酰氧基甲基；1-乙酰氧基乙基；1-(1-甲氧基-1-甲基)乙基-羰基氧基乙基；1-(苯甲酰氧基)乙基；异丙氧基-羰基氧基甲基；1-异丙氧基-羰基氧基乙基；环己基-羰基氧基甲基；1-环己基-羰基氧基乙基；环己基氧基-羰基氧基甲基；1-环己基氧基-羰基氧基乙基；(4-四氢吡喃基氧基)羰基氧基甲基；1-(4-四氢吡喃基氧基)羰基氧基乙基；(4-四氢吡喃基)羰基氧基甲基；和1-(4-四氢吡喃基)羰基氧基乙基)的那些。

另外，某些前药可在酶的作用下激活生成活性化合物，或是在进一步的化学反应后生成活性化合物的化合物。例如，所述的前药可以是糖衍生物或其他糖苷结合物，或可以是氨基酸酯衍生物。

选择性抑制

‘选择性抑制’是指对一种酶的抑制作用比对其他一种或多种酶的抑制作用程度更大。通过将化合物抑制一种酶的50％活性时所需要的浓度(IC₅₀)与同一化合物抑制其他酶的50％活性时所需的浓度(IC₅₀)进行比较可以测定出这种选择性(参见下文)。结果用比例表示。如果该比例大于1，则该被测化合物在其抑制作用上具有一定选择性。

本发明的化合物优选对DNA-PK具有比对PI 3-激酶高3、10、20或50倍的选择性。

本发明的化合物优选对DNA-PK具有比对ATM高5、10、50或100倍的选择性。

优选用于测定选择性的IC₅₀是利用本文所述的方法测定的。

附图简述

图1表示式Ib的优选化合物的结构。

图2表示式Ic的优选化合物的结构。

图3表示式Ia的优选化合物的结构。

图4表示式Ia的进一步优选的化合物的结构。

图5表示式Ia的进一步优选的化合物的结构。

进一步的优选

在式I中，当R¹和R²与它们所连接的氮原子一起形成具有4-8个原子的杂环时，这可以构成上述定义的C_4-20杂环基的一部分(除了含有最少4个环原子之外)，它必须含有至少一个氮环原子。优选R¹和R²与它们所连接的氮原子一起形成具有5、6或7个原子、更优选6个环原子的杂环。

含有一个氮原子的单环包括氮杂环丁烷、吡咯烷(四氢吡咯)、吡咯啉(例如，3-吡咯啉、2，5-二氢吡咯)、2H-吡咯或3H-吡咯(异吡咯、异氮杂环戊二烯)、哌啶、二氢吡啶、四氢吡啶和氮杂；含有两个氮原子的单环包括咪唑烷、吡唑烷(二氮杂环戊烷)、咪唑啉、吡唑啉(二氢吡唑)和哌嗪；含一个氮和一个氧的单环包括四氢唑、二氢唑、四氢异唑、二氢异唑、吗啉、四氢嗪、二氢嗪和嗪；含一个氮和一个硫的单环包括噻唑啉、噻唑烷和硫代吗啉。

优选的环是那些除氮以外还含有一个杂原子的环，特别优选的杂原子是氧和硫。因此优选的基团包括吗啉代、硫代吗啉代、噻唑啉基。没有其他杂原子的优选基团包括1-吡咯烷基。

首选的基团是吗啉代和硫代吗啉代。

如上所述，这些杂环基本身可以被取代；一类优选的取代基是C_1-7烃基。当杂环基是吗啉代时，取代基优选是甲基或乙基，并且更优选甲基。唯一的甲基取代基首选在2位。

除了上面列出的单环基团外，还包括具有桥连和交叉连接的环。其中，含有氮和氧原子的此类环的实例是：

它们分别称作8-氧杂-3-氮杂-双环[3.2.1]辛-3-基、6-氧杂-3-氮杂-双环[3.1.0]己-3-基、2-氧杂-5-氮杂-双环[2.2.1]庚-5-基和7-氧杂-3-氮杂-双环[4.1.0]庚-3-基。

本发明第一方面中规定的条件优选排除了其中X和Y是CR⁴和O，R³和R⁴一起形成稠合的苯环，R¹和R²与它们所连接的N一起形成吗啉代基团并且该稠合的苯不带有作为唯一取代基的在8-位的取代基的化合物。另一优选的实施方式排除了其中X和Y是CR4和O，R³和R⁴一起形成稠合的苯环，R¹和R²与它们所连接的N一起形成吗啉代基团并且该稠合的苯不带有苯基取代基作为唯一取代基的化合物。

式Ia化合物的优选方面

优选R¹和R²在式Ia中一起形成吗啉代基团。

在式Ia化合物的一个优选方面，R⁴优选是H。R³优选是C_5-20芳基，更优选C_5-20碳芳基并且特别是取代或未取代的苯基。优选的取代基包括卤素(特别是氟和氯)、C_1-7烃基(特别是C₁烷基或叔丁基)、醚、烃氧基(特别是甲氧基)、硝基、氰基、酰基、甲酰基、酯、酰氧基、羟基、羧基、C_5-20芳基(特别是苯基)、C_3-20杂环基、酰氨基、酰基脲基、硫脲基、氨基甲酸酯、联氨羰基、氨酰基和氨基。

当R³是C_5-20芳基时，优选基团的实例包括取代或未取代的萘、喹啉、吡啶、吲哚、吲唑、吡嗪、吡咯、咪唑、噻吩、噻唑、苯并[b]噻吩、呋喃和苯并呋喃。

R³可以被一个或多个取代基取代，优选被一个取代基取代。优选R³是单取代的苯基。

当R³是除苯基之外的C_5-20芳基时，优选的取代基包括C_1-7烃基、甲酰基和醚(特别是烃氧基)。

当R³是C_3-20芳基时，该取代基可以位于该芳基的任意位置。因此，当R³是取代或未取代的苯基时，该取代基可以位于邻-(2-)、间-(3-)或对-(4-)位。一般优选该取代基位于对-(或4-)位。优选R³是4-取代的苯基。取代基的性质将在下文中讨论。

优选的R³取代基

第一组优选的取代基包括卤素(特别是氟和氯)、C_1-7烃基(特别是叔丁基)和烃氧基(特别是甲氧基)。

优选的此类化合物包括2-(吗啉-4-基)-6-苯基-吡喃-4-酮(化合物285)、2-(4-氯苯基)-6-(吗啉-4-基)-吡喃-4-酮(化合物284)、2-(3-甲氧基苯基)-6-(吗啉-4-基)-吡喃-4-酮(化合物287)、2-(4-叔丁基-苯基)-6-(吗啉-4-基)-吡喃-4-酮(化合物289)、2-(2-甲氧基苯基)-6-(吗啉-4-基)-吡喃-4-酮(化合物286)、2-(4-甲氧基苯基)-6-(吗啉-4-基)-吡喃-4-酮(化合物288)、6-(4-氟苯基)-2-(吗啉-4-基)吡喃-4-酮(化合物292)、6-(3-氟苯基)-2-(吗啉-4-基)吡喃-4-酮(化合物291)和6-(2-氟苯基)-2-(吗啉-4-基)吡喃-4-酮(化合物290)，并且6-(4-氟苯基)-2-(吗啉-4-基)吡喃-4-酮(化合物292)是最优选的。(参见图3)。

优选该取代基是C_1-7烃基、特别是C₁烷基或叔丁基。优选R³是取代的C_1-7烃基(即C_1-7亚烃基)，优选的取代基如下文所述。

第二组优选的取代基包括酰氨基、酰基脲基、硫脲基、氨基甲酸酯、联氨羰基、氨酰基和氨基。

根据上面的定义，优选的酰氨基、酰基脲基、硫脲基、氨基甲酸酯、联氨羰基、氨酰基和氨基取代基的氨基、酰基、酯、酰氧基和酰胺基团优选彼此独立地是H、C_1-7烃基(包括取代的C_1-7烃基，即C_1-7亚烃基)、C_5-20芳基(包括C_5-20芳烷基)、C_3-20杂环或者其中的两个基团形成杂环。优选所述的氨基、酰基、酯、酰氧基和酰胺基团彼此独立地是H、C₁烷基、苯基或含有3-7个环原子的杂环基，或两个或多个基团形成杂环基环。

当第二组优选的取代基的氨基、酰基、酯、酰氧基和酰胺基团是C_5-20芳基时，优选该C_5-20芳基是苯基、苄基、吡啶、嘧啶、嗪、呋喃、噻吩、咪唑或唑。

当第二组优选的取代基的氨基、酰基、酯、酰氧基和酰胺基团是C_3-20杂环基时，它们优选具有3-7个环原子并且优选含有1-4个环杂原子。

当第二组优选的取代基的氨基、酰基、酯、酰氧基和酰胺基团中的两个基团形成含有选自该优选取代基的杂原子的杂环基时，该杂环基优选含有3-7个环成员。优选该杂环基含有1-4个环杂原子。优选的杂环基的实例包括衍生自哌嗪和氮杂、吗啉和硫代吗啉的那些。

进一步的取代

通常，当式Ia的R³是C_5-20芳基或C_5-20碳芳基时，优选所述的C_5-20芳基或C_5-20碳芳基是被取代的。还优选当R³是取代或未取代的苯基时，该取代或未取代的苯基本身被进一步取代。特别优选上述优选的R³取代基被进一步取代(即该C_1-7烃基、醚、烃氧基、酰基、酯、酰氧基、C_5-20芳基、C_3-20杂环基、酰氨基、酰基脲基、硫脲基、氨基甲酸酯、联氨羰基、氨酰基和氨基本身被进一步取代)。进一步的取代可以包括本文所述的任何取代基，但优选是一个或多个卤素(特别是氟或氯)、硝基、氰基(特别是甲基-或乙基氰基)、羟基、酯、醚、烃氧基(特别是甲氧基)、酰氧基、酰基、硫醚、羧基、氨基(特别是NH₂和NMe₂)、C_5-20芳基(特别是苯基、噻吩和呋喃)、硫醚、氨基甲酸酯、C_1-7烃基和C_3-20杂环基(特别是含N-、O-和S-的杂环基，包括四氢呋喃、哌啶和吡咯烷)。因此，例如，R³可以是卤代烷基取代的苯基、氰基烷基取代的苯基或三氟甲氧基取代的苯基。

因此，在一类优选的其中式Ia的R³是C_1-7烃基取代的苯基的化合物中，优选该烃基取代基进一步被卤素、氨基、氨酰基、酰氨基、酯或酰氧基取代(形成C_1-7亚烃基)。

在一类优选的其中R³是被酰氨基、酰基脲基、硫脲基、氨基甲酸酯、联氨羰基、氨酰基或氨基取代的苯基的化合物中，优选这些取代基被进一步取代，优选被卤素(特别是氟或氯)、硝基、氰基(特别是甲基-或乙基氰基)、羟基、酯、醚、酰氧基、酰基、硫醚、羧基、C_5-20芳基、C_1-7烃基和C_3-20杂环基(特别是含N-、O-和S-的杂环基)取代。

在该类优选的式Ia化合物的一组优选的化合物中，R³是氨基甲基取代的苯基，其中的氨基优选按照以上描述被进一步取代。优选该氨基甲基位于苯基的3-或4-位。

在该类优选的式Ia化合物的另一组优选的化合物中，R³是氨酰基取代的苯基，其中的氨酰基优选按照以上描述被进一步取代。优选该氨酰基位于苯基上的3-或4-位。

在该类优选的式Ia化合物的另一组优选的化合物中，R³是酰氨基取代的苯基，其中的酰氨基优选按照以上描述被进一步取代。优选该酰氨基位于苯基上的3-或4-位。

在该类优选的式Ia化合物的另一组优选的化合物中，R³是氨基取代的苯基，其中的氨基优选按照以上描述被进一步取代。优选该氨基位于该苯基上的3-或4-位。

在式Ia化合物的另一优选方面，其中R³和R⁴一起形成-A-B-，它合在一起表示稠合的芳环并且该芳环为苯，优选其5位是未取代的(即R⁵＝H)并且6、7和8位中的一个或两个被取代。优选6、7和8位中只有一个被取代。优选在7-位被取代。优选该取代基选自卤素(特别是溴)；醚(特别是芳烷基醚，特别是其中的芳基进一步被卤素、C_1-7烃基、烃氧基或硝基取代)；未取代的或被C_1-7烃基(特别是甲基)、包括被C_5-20芳基(优选苯基)取代的C_1-7烃基(特别是丙基)取代的C_5-20芳基(特别是萘-1-基和萘-2-基)；未取代的或被酰基取代的C_5-20杂芳基(特别是苯并[b]噻吩-3-基、苯并[b]噻吩-2-基、噻吩-3-基、噻吩-2-基、呋喃-2-基、吲哚-6-基、喹啉-8-基、吩氧硫杂环己二烯-4-基)，特别是5-乙酰基-噻吩-2-基；C_3-20杂环基；氨基；砜氧基(尤其是该砜氧基取代基是卤代烃基、特别是CF₃时)。

在该类式Ia化合物的另一组优选的化合物中，优选该稠合的苯环(即-A-B-)在8-位被C_3-20杂环基取代。优选该杂环基是三环结构。优选该基团含有氧和/或硫杂原子并且基于咔唑或蒽体系。优选硫原子和/或氧原子存在于咔唑或蒽体系的中央环中。

在其中6、7或8取代基是苯基的一组优选化合物中，优选该苯基本身被进一步取代。优选该苯基是单取代的，但也可以是二取代的。优选的取代基包括酯(尤其是其中的酯取代基是芳烷基、特别是苄基，或C_1-7烃基、特别是甲基或乙基)；醚(尤其是其中的醚取代基是C_1-7烃基、特别是甲基或三氟甲基，或芳基烃基、特别是苄基)；氰基；酰基(尤其是其中的酰基取代基是C_1-7烃基、特别是甲基)；C_5-20芳基(特别是苯基)；酰氨基(尤其是其中的酰基取代基是C_1-7烃基、特别是甲基)；卤素(特别是氯)；C_1-7烃基(优选甲基或乙基)，尤其是被羟基、氟、酰氨基(特别是苯二酰亚氨基)取代的C_1-7烃基和被酯取代并且该酯取代基是C_1-7烃基的C_1-7烃基；羟基；氨酰基(特别是其中两个氨基取代基同时是H)；氨基(特别是其中两个氨基取代基同时是H)；和羧基。

在另一组优选的化合物中，所述的5、6和8位未被取代(即R⁵、R⁶和R⁸＝H)并且7位被取代(即R⁷不是H)。更优选地，该取代基(R⁷)选自羟基、C_1-7烃氧基(包括C_1-7烃基-C_1-7烃氧基和C_3-20芳基-C_1-7烃氧基)和酰氧基，并且C_3-20芳基-C_1-7烃氧基是最优选的。在这组中，C_1-7烃氧基优选是乙氧基、尤其是被取代或未取代的芳基(特别是苯基或吡啶基)、取代或未取代的芳氧基(特别是苯氧基、萘氧基)、烃氧基、砜氧基(特别是其中该砜氧基取代基是烃基，例如甲基或乙基，或芳基，例如苯基)取代的乙氧基，或C_1-7烃氧基是O-CH₂-，其中该烃氧基取代基优选是取代或未取代的芳基(特别是苯基或吡啶基)并且该C_3-20芳基优选是取代或未取代的苯基，其中更优选被取代的苯基。

该类型的优选化合物包括7-甲氧基-2-吗啉-4-基-苯并[h]色烯-4-酮(化合物304)、7-羟基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物307)、7-苄氧基-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物337)、7-苯甲酰氧基-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物423)、2-吗啉-4-基-7-(萘-2-基甲氧基)-色烯-4-酮(化合物418)、7-(4-氟-苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物414)、7-(4-溴-苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物416)、7-环己基甲氧基-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物419)、N-[3-(2-吗啉-4-基-4-氧代-4H-色烯-7-基氧基)-丙基]-异吲哚-1，3-二酮(化合物422)、7-(2-氯-苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物417)、7-(4-氯苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物415)、7-(4-氰基-苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物338)、7-(3-氯苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物341)和7-(3-甲基苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物342)。其中特别优选苄氧基-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物337)、7-(4-溴-苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物416)和7-(4-氯苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物415)。(参见图4)。

在式Ia的另一优选方面，其中R³和R⁴一起形成-A-B-，它合在一起表示稠合的芳环并且该芳环是苯，优选存在另一个与该稠合苯环稠合的环，这个附加的稠合环优选是苯或环己烷。这些附加的稠合环可以位于所述稠合环的任意位置。

该类型的优选化合物包括2-(吗啉-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物293)、2-(吗啉-4-基)-苯并[g]色烯-4-酮(化合物301)、7，8，9，10-四氢-苯并[h]-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物297)、2-(硫代吗啉-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物296)、2-吡咯烷-1-基-苯并[h]色烯-4-酮(化合物312)、2-吗啉-4-基-苯并[f]色烯-4-酮(化合物310)、2-(噻唑烷-3-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物330)和2-(2-甲基-吗啉-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物317)，并且首选2-(2-甲基-吗啉-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物317)。(参见图5)。

在其中R³和R⁴一起形成代表稠合环的-A-B-的式Ia化合物中，通常优选位于2位的氨基(即NR¹R²)选自二甲基吗啉代(特别是3，5-二甲基吗啉代)、甲基吗啉代(特别是3-甲基吗啉代)、3，4-二氢-2H-苯并[1，4]嗪-4-基、二(2-羟基乙基)氨基、2-(2-羟基-乙氧基)-乙基氨基或2-(2-溴-苯氧基)-乙基氨基。

式Ib化合物的优选方面

对于式Ib的化合物，R⁴优选是H。R³优选是C_5-20芳基，更优选C_5-20碳芳基，并且特别是取代或未取代的苯基。一般优选该取代基位于对-(或4-)位。优选的取代基包括卤素、C_1-7烃基和烃氧基，更优选卤素(特别是氯)和烃氧基(特别是甲氧基)。

此类的优选化合物是6-(4-甲氧基苯基)-4-吗啉-4-基-吡喃-2-酮(化合物3)和6-(4-氯苯基)-4-吗啉-4-基-吡喃-2-酮(化合物4)。(参见图1)。

式Ic化合物的优选方面

在式Ic化合物的第一个优选方面，R³和R”⁴一起形成代表稠合芳环吡啶的-A-B-，并且该化合物在2-位被取代，优选被氨基取代基取代。优选该氨基是乙基吗啉代(特别是3-乙基吗啉代)、二甲基吗啉代(特别是3-二甲基吗啉代)、2，5-二氢-1H-吡咯-1-基或吡咯烷-1-基。

在式Ic化合物的第二个优选方面，其中R³和R”⁴一起形成-A-B-，它合在一起表示稠合的芳环并且该芳环是吡啶，优选存在另一个苯环与该吡啶稠合(在7和8位)得到嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮。该附加的苯环优选未被取代。

在该优选的方面，优选式Ic的R¹和R²形成吗啉、乙基吗啉(特别是3-乙基吗啉)、二氢吡咯(特别是2，5-二氢-1H-吡咯-1-基或四氢吡咯)。

该类型的优选的化合物是2-吗啉-1-基-嘧啶并-[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物5)、2-((S)-3-羟基-吡咯啉-1-基)-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物12)、2-((2S，6R)-2，6-二甲基-吗啉-4-基)-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物13)和2-硫代吗啉-4-基-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物6)，并且首选2-吗啉-1-基-嘧啶并-[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物5)。(参见图2)。

在式Ic化合物的第二个优选方面中，其中R³和R”⁴一起是-A-B-，它合在一起表示稠合的芳环并且该芳环是吡啶，优选在5、6和8位是未取代的(即R⁵、R⁶和R⁸＝H)，并且在7位被取代(即R⁷不是H)。更优选地，该取代基(R⁷)选自羟基、C_1-7烃氧基(包括C_1-7烃基-C_1-7烃氧基和C_3-20芳基-C_1-7烃氧基)和酰氧基，并且首选C_3-20芳基-C_1-7烃氧基。在该组中，C_1-7烃氧基优选是-O-CH₂-并且该C_3-20芳基优选是取代或未取代的苯基。

首字缩拼词

为了方便，将许多化学基团用公知的缩写表示，包括但不限于，甲基(Me)、乙基(Et)、正丙基(nPr)、异丙基(iPr)、正丁基(nBu)、叔丁基(tBu)、正己基(nHex)、环己基(cHex)、苯基(Ph)、联苯基(biPh)、苄基(Bn)、萘基(naph)、甲氧基(MeO)、乙氧基(EtO)、苯甲酰基(Bz)和乙酰基(Ac)。

为了方便，将许多化合物用公知的缩写表示，包括但不限于，甲醇(MeOH)、乙醇(EtOH)、异丙醇(i-PrOH)、甲基乙基酮(MEK)、***或二乙基醚(Et₂O)、乙酸(AcOH)、二氯甲烷(DCM)、三氟乙酸(TFA)、二甲基甲酰胺(DMF)、四氢呋喃(THF)和二甲基亚砜(DMSO)。

合成路线

本发明第一方面所述的化合物可以通过许多方法合成，其中的一些实例如下所述。

广义地讲，合成策略包括进行环化反应生成中央核心，随后通过偶联反应例如Suzuki反应添加取代基到该核心结构上。

大多数这些合成路线中的关键步骤是中心芳环的形成；这可以通过多种方式实现，如下文所示，并且包括缩合环化。

在许多情况中，适当的取代可以存在于起始原料中，但也给出了对终产物进行进一步衍生化的例子。

合成路线1：4-吗啉-4-基-6-(芳基)-吡喃-2-酮的合成

(a)t-BuOK，CS₂，THF；(b)n-Bu₄NHSO₄，NaOH，EtI，DCM；(c)吗啉，EtOH，回流；

(d)EtI，K₂CO₃，丙酮；(e)溴乙酸乙酯，Zn，THF

(a)3-芳基-3-羟基-二硫代丙烯酸类

将CS₂(1.81ml，30mmol)和苯乙酮衍生物(30mmol)在干燥THF(20ml)中的溶液在30分钟内在N₂下滴加到充分搅拌的叔丁醇钾(6.73g，60mmol)的干燥THF(50ml)溶液中。溶液变为亮红色并观察到有沉淀形成。将该混合物剧烈搅拌过夜，然后倾入水(200ml)中并用***(3×100ml)萃取。将水层用2N H₂SO₄酸化至pH 1-2(Watmann pH试纸)并随后用***(3×100ml)萃取。将有机物用Na₂SO₄干燥并真空蒸发溶剂得到所需化合物。

(b)3-芳基-3-羟基-二硫代丙烯酸乙酯类

将四丁基硫酸氢铵(6.76g，20mmol)和氢氧化钠(21.6g，40mmol)溶解在水(50ml)中。将3-芳基-3-羟基-二硫代丙烯酸(20mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液一次性加入到该溶液内并将该反应混合物剧烈搅拌30分钟。除去水层并将碘乙烷(5ml)加入到二氯甲烷溶液中，随后搅拌1小时。真空除去溶剂并将该残余物加入水(200ml)中。将有机物用***(3×100ml)萃取，用Na₂SO₄干燥并真空蒸发。随后将残余物通过柱色谱纯化(乙酸乙酯∶石油醚40-60°，1∶4)得到所需化合物。

(c)1-芳基-3-吗啉-4-基-3-硫羰基-丙烷-1-酮

将吗啉(1.31ml，15mmol)加入到3-芳基-3-羟基-二硫代丙烯酸乙酯(15mmol)的乙醇(20ml)溶液中。将该反应混合物回流5小时，在室温下冷却后结晶出所需化合物。然后将化合物通过过滤分离。

(d)1-芳基-3-乙硫基-3-吗啉-4-基-丙烯-1-醇

将1-芳基-3-吗啉-4-基-3-硫羰基-丙烷-1-酮(12mmol)溶于干燥丙酮(20ml)中并向该溶液加入K₂CO₃细粉(1.83g，13.2mmol)和碘乙烷(1.07ml，13.2mmol)。然后将该反应混合物回流过夜并真空除去溶剂。将残余物加入水中(50ml)并将有机物用二氯甲烷(3×30ml)萃取，用硫酸钠干燥然后真空蒸发。将残余物通过柱色谱纯化得到所需化合物。

(e)4-吗啉-4-基-6-(芳基)-吡喃-2-酮

将活化的锌(在120℃下加热1小时)(2.6g，0.04克原子)、溴乙酸乙酯(3.18g，20mmol)和少量碘晶体在干燥THF(30ml)中的混悬液在50℃下搅拌加热45分钟。在搅拌下滴加1-芳基-3-乙硫基-3-吗啉-4-基-丙烯酮(10mmol)在干燥THF(50ml)中的溶液并将该混合物回流3小时。然后将该混合物倾入冰冷的3％稀H₂SO₄(100ml)中，将水层用乙酸乙酯(3×50ml)萃取，将合并的提取物用Na₂SO₄干燥并蒸除溶剂。将残余物通过柱色谱纯化(乙酸乙酯∶石油醚40-60，1∶4)得到纯的吡喃-2-酮。

变化方案

如果需要终产物中的氨基是除吗啉代之外的其它基团，则可以在步骤(c)中用适宜的胺代替吗啉。如果使用适当的苯乙酮衍生物作为起始原料，则终产物中的6-芳基可以是杂芳基。

合成路线2：2-氨基嘧啶异喹啉-4-酮的合成

参考文献：Snyder和Robison，J.Amer.Chem.Soc.，74；4910-4914(1952)；Di Braccio，M.等，Eur.J.Med.Chem.；30(1)，27-38(1995)。

(a)丙二酸二乙酯；(b)POCl₃；(c)HNR¹R²，EtOH

(a)嘧啶并[1，2-a]异喹啉-2，4-二酮

将氨基异喹啉(5.16g，35.79mmol)溶解在丙二酸二乙酯(5.43ml，35.79mmol)中。加入乙醇(20ml)，并将该溶液加热至170℃达4小时。通过蒸馏除去乙醇，冷却后，将反应烧瓶中的黑色残余物用乙酸乙酯(10ml)研制。由此形成浅色固体，通过过滤收集该浅色固体并用乙酸乙酯洗涤得到浅褐色固体状的标题化合物(4.43g，24.89mmol，70％收率)。mp＝294-296℃。分析纯，LC-MS：m/z(ES⁺)：213(M⁺)

(b)2-氯-嘧啶并[1，2-a]异喹啉-4-酮

将嘧啶并[1，2-a]异喹啉-2，4-二酮(4.43g，24.89mmol)溶于磷酰氯(20ml)并将该溶液加热回流5小时。冷却后，将该反应混合物小心地倾入冰水(～250ml)中并加入碳酸钠调至pH 7。由此形成褐色沉淀，通过过滤收集沉淀并用水洗涤得到褐色固体。将粗产物进行色谱分离，用DCM洗脱得到浅黄色晶体状标题化合物(5.21g，22.70mmol，91％收率)。mp 197-199℃。分析纯，LC-MS：m/z(ES⁺)：231.5(M⁺)

(c)2-氨基嘧啶异喹啉-4-酮

将2-氯-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮溶于沸腾的乙醇(20ml)，向该溶液中加入适当的胺(4mol当量)。将该溶液在剧烈搅拌下加热回流16小时。随后使该反应混合物冷却至室温，由此缓慢结晶出固体。通过过滤收集该结晶固体并用冷乙醇(30ml)洗涤。真空下干燥该固体得到所需化合物。

变化方案

如果希望在两个稠合环的中央核上带有不同的取代基，可以通过改变起始原料的2-氨基吡啶环上的取代基引入这些取代基，并在适当时使用保护基。

合成路线3：2-氯-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮的合成

a)过氧二碳酸(二-4-叔丁基环己基)酯

b)吗啉，NaHCO₃，15℃

c)高氯酸，90℃

(a)4-氯-4-(2，2，2-三氯-乙基)-氧杂环丁烷-2-酮

将过氧二碳酸(二-4-叔丁基环己基)酯(11.8g)和双烯酮(diketene)(83.5ml)在CCl₄(300ml)中的溶液在120分钟内滴加到回流的CCl₄溶液中，然后继续搅拌1小时。将所得浅黄色溶液冷却并与二氯甲烷共沸。将得到的残余物与己烷一起搅拌(3×150ml)10分钟并经硅藻土垫倾析出液体。合并过滤的液体并真空浓缩得到浅黄色油状的所需化合物(125.0g，52.9％)。

(b)5，5-二氯-1-吗啉-4-基-戊-4-烯-1，3-二酮

将4-氯-4-(2，2，2-三氯-乙基)-氧杂环丁烷-2-酮(62.5g，0.26mmol)和吗啉(24.0g，0.28mol)分别在二氯甲烷(120ml)中的溶液同时加入到NaHCO₃(44.0g，0.52mol)在干燥二氯甲烷(300ml)中的混合物内。将该反应在15℃下保持140分钟并同时搅拌。过滤该反应液，用二氯甲烷(3×100ml)洗涤并将合并的有机层真空浓缩成浆液，然后将该浆液通过短的硅胶垫并且进一步用二氯甲烷(4×100ml)洗涤。将合并的有机层真空浓缩，悬浮在己烷(400ml)中并搅拌1小时，过滤并干燥得到乳白色固体。将该固体悬浮在叔丁基甲基醚(100ml)中，搅拌15分钟，过滤，用丁基甲基醚洗涤并干燥得到白色粉末状所需化合物(47.8g，72％)。m/z(LC-MS，ESP)：252(M⁺+1)。

(c)2-氯-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮

向5，5-二氯-1-吗啉-4-基-戊-4-烯-1，3-二酮(11.3g，44.9mmol)的二烷溶液中加入高氯酸(11.4ml，0.14mol)并将该反应液在90℃和N₂下加热1小时。冷却该反应液，用2M NaOH(75ml)中和并过滤。将水层用二氯甲烷(4×30ml)萃取并将合并的有机层用MgSO₄干燥。将有机层进一步用木炭处理并用硅藻土过滤。将深黄色滤液真空蒸发，将所得固体用己烷(50ml)研制并干燥得到浅黄色粉末状所需化合物(7.3g，75％)。m/z(LC-MS，ESP)：216(M⁺+1)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)：3.3(t，4H)，3.65(t，4H)，5.4(d，1H)，6.25(d，1H)。

变化方案：

如果希望终产物中的氨基是除吗啉代之外的其它基团，则可以在步骤(b)中使用适宜的胺例如二甲基吗啉代替吗啉。

合成路线4：6-芳基-2-吗啉-4-基-吡喃-4-酮和6-杂环-2-吗啉-4-基-吡喃-4-酮的合成

a)芳基/杂环硼酸，Cs₂CO₃，Pd(PPh₃)₄，90℃

(a)6-芳基-2-吗啉-4-基-吡喃-4-酮

在氮气氛下将氯吡喃酮(22mg，0.1mmol)在二烷(0.3ml，通过超声脱气并用N₂饱和)中的溶液加入到芳基硼酸(0.13mmol)和Cs₂CO₃(65mg，0.2mmol)中。随后在氮气氛下向该溶液中加入Pd(PPh₃)₄(5mg，0.005mmol)在二烷(0.2ml，通过超声脱气并用N₂饱和)中的溶液。将该反应液在90℃下加热并剧烈搅拌过夜。将样品用甲醇/二氯甲烷(1∶2；1ml)稀释，经硅胶塞过滤(洗脱质Si 500mg)并通过制备HPLC纯化。

变化方案

当希望6-取代基是杂环而不是芳基时，可以用适当的杂环硼酸代替上述芳基硼酸。

合成路线4a：N-烷基3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酰胺衍生物的合成

a)(3-甲氧基羰基苯基)硼酸，K₂CO₃，Pd(PPh₃)₄，90℃

b)NaOH

c)N，N-二甲基氨基吡啶，氯甲酸乙酯

(a)3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸甲酯

将2-氯-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮(7.98g，37mmol)、(3-甲氧基羰基苯基)硼酸(8.01g，44.5mmol)和粉碎的碳酸钾(11.23g，81.40mmol)悬浮在二烷(50ml)中并脱气(超声5分钟，随后用N₂饱和)。然后加入Pd(PPh₃)₄(2.13g，1.85mmol)并在剧烈搅拌和氮气氛下将该反应混合物在90℃下加热24小时。真空除去溶剂并将残余物悬浮在水(50ml)中，用乙酸乙酯(100ml)萃取。将合并的有机物用饱和盐水洗涤并用硫酸钠干燥。真空除去溶剂并将残余物通过柱色谱纯化(硅胶；二氯甲烷∶甲醇；9∶1)得到白色固体状标题化合物(5.42g，46％)。m/z(LC-MS，ESP)：316(M⁺+1)。

(b)3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸钠盐

将3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸甲酯(5.42g，17.20mmol)溶于甲醇(25ml)并加入氢氧化钠(0.75g，18.90mmol)。然后将该搅拌的溶液在氮气氛下回流3小时。真空除去甲醇并将残余物在***中研制得到褐色固体状标题化合物(4.30g，83.33％)。m/z(LC-MS，ESP)：301(M⁺+1)。

(c)N-烷基3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酰胺衍生物

向搅拌中的3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸钠盐(52mg，0.16mmol)的无水二甲基乙酰胺(1ml)溶液中加入N，N-二甲基氨基吡啶(2mg，催化量)和氯甲酸乙酯(19μl，0.192mmol)，将该溶液搅拌45分钟。然后将所需的胺(0.32mmol)加入到该反应混合物中并搅拌过夜。将化合物通过制备HPLC纯化得到所需化合物。

变化方案

当希望除苯基之外的其它芳基或杂环位于3-位时，在步骤(a)中用适当的(甲氧基羰基芳基/杂环)硼酸替代(3-甲氧基羰基苯基)硼酸。

合成路线4b：N-烷基4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酰胺衍生物的合成

a)(4-甲氧基羰基苯基)硼酸，K₂CO₃，Pd(PPh₃)₄，90℃

b)NaOH

c)N，N-二甲基氨基吡啶，氯甲酸乙酯

(a)4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸甲酯

将2-氯-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮(4.01g，18.60mmol)、(4-甲氧基羰基苯基)硼酸(4.01g，22.32mmol)和粉碎的碳酸钾(5.64g，40.92mmol)悬浮在二烷(20ml)中并脱气(超声5分钟，然后用N₂饱和)。然后加入Pd(PPh₃)₄(0.5g，0.4mmol)并将该反应混合物在剧烈搅拌和氮气氛下在90℃下加热24小时。真空除去溶剂，然后将残余物悬浮在水(50ml)中并用乙酸乙酯(100ml)萃取。合并有机物，用饱和盐水洗涤并用硫酸钠干燥。真空除去溶剂并将残余物通过柱色谱纯化(硅胶；二氯甲烷∶甲醇；9∶1)得到白色固体状标题化合物(3.71g，63％)。m/z(LC-MS，ESP)：316(M⁺+1)。

(b)4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸钠盐

将4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸甲酯(3.00g，9.52mmol)溶于甲醇(20ml)并加入氢氧化钠(0.381g，9.52mmol)。将该搅拌的溶液在氮气下回流3小时。真空除去甲醇并将残余物在***中研制得到褐色固体状标题化合物(3g，97％)。m/z(LC-MS，ESP)：301(M⁺+1)。

(c)N-烷基4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酰胺衍生物

向搅拌中的4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯甲酸钠盐(52mg，0.16mmol)的无水二甲基乙酰胺(1ml)溶液中加入N，N-二甲基氨基吡啶(2mg，催化量)和氯甲酸乙酯(19μl，0.192mmol)，将该溶液搅拌45分钟。然后将所需的胺(0.32mmol)加入到该反应混合物中并搅拌过夜。将化合物通过制备HPLC纯化得到所需化合物。

变化方案

当希望除苯基之外的其它芳基或杂环位于4-位时，在步骤(a)中用适当的(甲氧基羰基芳基/杂环)硼酸替代(4-甲氧基羰基苯基)硼酸。

合成路线4c(i)：(3-氨基甲基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮衍生物的合成

a)3-甲酰基苯基硼酸，K₂CO₃，Pd(PPh₃)₄，80℃

b)胺，三乙酰氧基硼氢化钠，冰醋酸

(a)[3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯基]苯甲醛

将氯吡喃酮(10.75g，50mmol)和3-甲酰基苯基硼酸(9.0g，60mmol)在脱气二烷中的溶液(110ml)搅拌20分钟。然后加入Na₂CO₃(13.8g，100mmol)和四(三苯基膦)钯(2.88g，2.5mmol)。将该反应混合物进一步脱气10分钟并在氮气下加热至80℃达18小时。随后将反应液冷却至室温，真空浓缩并通过快速柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇)得到橙色固体状3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)苯甲醛(6.5g，45％)。m/z(LC-MS，ESP)：286(M⁺+1)。

(b)(3-氨基甲基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮类衍生物

将3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)苯甲醛(0.2mmol)和适当的胺(0.24mmol)溶解在二氯乙烷(2ml)中。加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.28mmol)和冰醋酸(6.0mmol)并在室温下搅拌16小时。随后将该反应混合物通过制备HPLC纯化。

合成路线4c(ii)：(4-氨基甲基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮衍生物的合成

a)4-甲酰基苯基硼酸，K₂CO₃，Pd(PPh₃)₄，80℃

b)胺，三乙酰氧基硼氢化钠，冰醋酸

(a)[4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯基]苯甲醛

将氯吡喃酮(10.75g，50mmol)和4-甲酰基苯基硼酸(9.0g，60mmol)在脱气二烷中的溶液(110ml)搅拌20分钟。然后加入Na₂CO₃(13.8g，100mmol)和四(三苯基膦)钯(2.88g，2.5mmol)。该反应混合物进一步脱气10分钟并在氮气氛下加热至80℃达18小时。随后将该反应液冷却至室温，真空浓缩并通过快速柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇)得到黄色粉末状4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)苯甲醛(6g，42％)。m/z(LC-MS，ESP)：286(M⁺+1)。

(b)(4-氨基甲基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮衍生物

将4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)苯甲醛(0.2mmol)和适当的胺(0.24mmol)溶解在二氯乙烷(2ml)中。加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.28mmol)和冰醋酸(6.0mmol)并在室温下搅拌16小时。将反应混合物通过制备HPLC纯化。

合成路线4d(i)：(3-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮的合成

a)3-(BOC-氨基苯基)硼酸，Na₂CO₃，Pd(PPh₃)₄

b)TFA

(a)[3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯基]氨基甲酸叔丁酯的合成

将氯吡喃酮(1.8g，8.35mmol)和3-(BOC-氨基苯基)硼酸(2.4g，10mmol)在脱气二烷中的溶液(45ml)搅拌20分钟。然后加入Na₂CO₃(2.78g，20.16mmol)和四(三苯基膦)钯(483mg，0.08mmol)。将反应混合物进一步脱气10分钟并在氮气氛下加热至80℃达18小时。使反应液冷却至室温，真空浓缩并通过快速柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇)得到标题化合物(1.51g，48％)。m/z(LC-MS，ESP)：373(M⁺+1)。

(b)(3-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮的合成

将[3-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯基]氨基甲酸叔丁酯(3.4g，9.2mmol)溶解在含25％三氟乙酸的二氯甲烷混合物(30ml)中并在室温下搅拌1小时。将该反应液真空浓缩，用饱和NaHCO₃沉淀，过滤，用二***洗涤并干燥得到白色固体状(3-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮(2.1g，85％)。m/z(LC-MS，ESP)：273(M⁺+1)。

合成路线4d(ii)：(4-氨基苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮的合成

a)4-(BOC-氨基苯基)硼酸，Na₂CO₃，Pd(PPh₃)₄

b)TFA

(a)[4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯基]氨基甲酸叔丁酯的合成

将氯吡喃酮(1g，4.64mmol)和4-(BOC-氨基苯基)硼酸(1.14g，5.57mmol)在脱气二烷中的溶液(10ml)搅拌20分钟。然后加入Na₂CO₃(1.41g，10.21mmol)和四(三苯基膦)钯(268mg，0.05mmol)。将反应混合物进一步脱气10分钟并在氮气氛下加热至80℃达18小时。使反应液冷却至室温，真空浓缩并通过快速柱色谱纯化(乙酸乙酯/甲醇)得到标题化合物(0.9g，52％)。m/z(LC-MS，ESP)：373(M⁺+1)。

(b)(4-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮的合成

将[4-(6-吗啉-4-基-4-氧代-4H-吡喃-2-基)-苯基]氨基甲酸叔丁酯(402mg，1.08mmol)溶解在含25％三氟乙酸的二氯甲烷混合物(5ml)中并在室温下搅拌1小时。将反应液真空浓缩，用饱和NaHCO₃沉淀，过滤，用二***洗涤并干燥得到黄色固体状(4-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮(230mg，79％)。m/z(LC-MS，ESP)：273(M⁺+1)。

合成路线4d(iii)：(4-酰氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮衍生物

a)酰氯/异氰酸酯/异硫氰酸酯，Hünig’s碱

(a)将适当的酰氯(0.24mmol)加入到(4-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮(0.2mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中。然后加入Hünig's碱(0.4mmol)并将该反应液在室温下搅拌16小时。然后将反应混合物通过制备HPLC纯化。

变化方案

可以用异氰酸酯或异硫氰酸酯代替酰氯生成脲基或硫脲基结构。

合成路线4d(iv)：(3-酰氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮衍生物

a)酰氯/异氰酸酯/异硫氰酸酯，Hünig’s碱

(a)将适当的酰氯(0.24mmol)加入到(3-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮(0.2mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液中。随后加入Hünig’s碱(0.4mmol)并将反应液在室温下搅拌16小时。然后将反应混合物通过制备HPLC纯化。

变化方案

可以用异氰酸酯或异硫氰酸酯代替酰氯生成脲基或硫脲基结构。合成路线4d(v)：(3-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮衍生物的合成

a)醛，三乙酰氧基硼氢化钠，冰醋酸

(a)将(3-氨基-苯基)-6-吗啉-4-基-吡喃-4-酮(0.2mmol)和适当的醛(0.24mmol)溶于二氯乙烷(2ml)。然后加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.28mmol)和冰醋酸(6.0mmol)并在室温下搅拌16小时。将反应混合物通过制备HPLC纯化。

合成路线5：2-(4-吗啉基)-6-芳基-4H-吡喃-4-酮的合成

a)Ph₃P＝CHCO₂Me

b)250℃

c)乙酰基吗啉，LDA

d)MeSO₃H

(a)3-(芳基)-3-氧代-2-三苯基正膦基丙酸酯类

将三苯基亚正膦基乙酸甲酯(20mmol)和适当的芳酰氯(10mmol)在无水甲苯(100ml)中的混合物在氮气下回流3小时，冷却至室温并滤出形成的白色沉淀。将滤饼用乙酸乙酯(4×40ml)充分洗涤并将合并的滤液真空蒸发。将油状物通过柱色谱纯化得到所需化合物。

(b)3-(芳基)丙炔酸甲酯类

在kugelrohr蒸馏装置(1托)中使3-(3-芳基)-3-氧代-2-三苯基正膦基丙酸甲酯(9mmol)缓慢升温至250℃。在250℃下收集馏出物20分钟并通过柱色谱纯化得到所需产物。

(c)4-[(2-氧代-4-芳基-3-丁炔基)羰基]吗啉锂盐

氮气氛下，将正丁基锂(2.5M的己烷溶液，5.3ml，13.2mmol)在0℃下滴加到搅拌中的二异丙胺(1.87ml，13.2mmol)的THF(20ml)溶液中。30分钟后，将乙酰基吗啉(1.53ml，13.2mmol)滴加到反应混合物中并在0℃下搅拌1小时。然后将反应液冷却至-78℃，向反应混合物中滴加3-(3-芳基)丙炔酸甲酯(6mmol)的THF(5ml)溶液并使其在-78℃下反应30分钟，然后在0℃反应1小时。将反应混合物用水(15ml)终止反应并将该白色混悬液用二氯甲烷(30ml)萃取2次。合并有机物并减压蒸发得到固体，将该固体用丙酮(10ml)研制。过滤该固体并依次用水(5ml)、丙酮(5ml)和***(5ml)洗涤。然后将所得固体在真空中于40℃下干燥过夜得到所需化合物。

(d)2-(4-吗啉基)-6-芳基-4H-吡喃-4-酮

将4-[(2-氧代-4-芳基-3-丁炔基)羰基]吗啉锂盐(2mmol)在甲磺酸(6ml)中的溶液在氮气氛下室温搅拌3小时。将该混合物倾入饱和碳酸钠溶液(100ml)中并用二氯甲烷(3×50ml)萃取。将合并的有机物用硫酸钠干燥并真空蒸发。将残余物通过柱色谱纯化。

变化方案

如果希望终产物中的氨基是除吗啉代之外的其它基团，则可以在步骤(c)中用适宜的乙酰基胺代替乙酰基吗啉。

合成路线6：2-氨基-色烯-4-酮的合成(第一种方法)

X＝O，S，CH₂

(a)：conc.H₂SO₄，MeOH

(c)：三氟甲磺酸酐

(a)水杨酸酯类

将适当的酸在甲醇(150ml)中的溶液用浓硫酸(3ml)处理。将该溶液加热回流40小时然后冷却至室温。真空蒸发该反应混合物然后重新悬浮在乙酸乙酯(200ml)中。该反应液用50％饱和碳酸氢钠溶液(4×150ml)洗涤。合并水提取物并用乙酸乙酯(150ml)洗涤。合并有机提取物，用盐水洗涤(50ml)，用硫酸钠干燥并真空蒸发得到产物，随后将其用甲醇结晶得到所需化合物。

(b)β-酮基酰胺类

将二异丙基胺(5.1ml，3.0mmol)在THF(30ml)中的溶液冷却至-70℃并缓慢地用2.5M正丁基锂的己烷溶液(14.0ml，35mmol)处理，然后升温至0℃并搅拌15分钟。将该反应液冷却至-10℃并缓慢用N-乙酰基吗啉、N-乙酰基哌啶或N-乙酰基硫代吗啉的THF溶液(25ml)处理，保持温度低于-10℃。将反应混合物在该温度下搅拌90分钟然后用适宜的水杨酸酯在THF(25ml)中的溶液处理，随后加入额外的THF(5ml)。将反应混合物缓慢升至室温并搅拌16小时。用水(5ml)和2M盐酸(50ml)终止反应并将该溶液用DCM(3×80ml)萃取。合并有机提取物，用盐水(50ml)洗涤，用硫酸钠干燥并真空蒸发得到油状残余物。将粗产物在热***中剧烈搅拌，导致沉淀出白色固体。在冰中冷却后，通过过滤收集固体并用冷***洗涤得到所需化合物。

(c)2-氨基-色烯-4-酮

将适当的β-酮基酰胺在DCM(35ml)中的溶液用三氟甲磺酸酐(3.8ml，23mmol)处理并在室温和氮气下搅拌16小时。真空蒸发该混合物并随后重新溶解在甲醇(80ml)中。将该溶液搅拌4小时，用水(80ml)处理并继续搅拌1小时。将该混合物真空蒸发除去甲醇。将该含水混合物用饱和碳酸氢钠处理调至pH 8且随后萃取到DCM(3×150ml)中。将萃取物用硫酸钠干燥并真空蒸发得到固体。将粗产物部分溶解在DCM中并加载到硅胶柱上，用DCM洗脱，然后用含(1％；2％；5％)甲醇的DCM洗脱。将所有含所需产物的馏分合并然后真空蒸发得到橙色固体。将粗产物溶解在热甲醇中，用木炭处理，经硅藻土过滤并用甲醇重结晶得到所需化合物。

变化方案

如果希望终产物中的氨基是除吗啉代之外的其它基团，则可以在步骤(b)中用适宜的乙酰胺代替乙酰基吗啉。

合成路线7a：2-氨基-色烯-4-酮的合成(第2种方法)

Di Braccio，M.等，Farmaco，50(10)，703-711(1995)；Vlahos，C.J.等，J.Biol.Chem.，269(7)，5241-5248(1994)。

(a)CS₂，叔丁醇钾；(b)EtI，K₂CO₃，丙酮；(c)(i)mCPBA，DCM；(ii)HNR¹R²，MeCN；

(d)HNR¹R²，乙二醇，160℃；(e) DBU，DMF，60℃；

(f)(i)mCPBA，DCM；(ii)HNR¹R²，MeCN；

举例说明苯并-[h]-色烯-4-酮的路线

(a)4-羟基-色烯-2-硫酮

将叔丁醇钾(7.20g，64mmol)在甲苯(50ml)中的混悬液冷却至约10℃并用适当的乙酰芳基和二硫化碳(1.20ml，20.0mmol)在甲苯(50ml)中的溶液处理。将所得混合物在室温下搅拌16小时然后用水(500ml)处理。将该混合物用***(2×100ml)洗涤并加入到三颈圆底烧瓶中。该水溶液用10％硫酸处理，使烧瓶经漂白捕集器排气。将所得混悬液搅拌24小时以除去硫化氢。通过过滤收集固体，用水(3×50ml)和冷的汽油(3×50ml)洗涤。用乙酸乙酯/汽油重结晶得到所需化合物。

(b)2-(乙硫基)-色烯-4-酮

将4-羟基-色烯-2-硫酮在丙酮(10ml)中的溶液用碳酸钾和乙基碘处理并加热至回流。将该反应混合物真空蒸发，重新溶解在DCM(20ml)中并用水(20ml)洗涤。水层用另外的DCM(3×20ml)洗涤，合并有机提取物，用硫酸钠干燥并真空蒸发。将残余物用乙酸乙酯/汽油重结晶得到所需化合物。

(c)2-氨基-苯并-色烯-4-酮

将适当的2-(乙硫基)-苯并-色烯-4-酮在DCM(10ml)中的溶液在0℃下用mCPBA在DCM(10ml)中的溶液处理并在室温下搅拌。将该反应混合物冷却至-20℃形成沉淀，分离出该沉淀并洗涤。将其悬浮在乙腈中，用适当的仲胺处理并在室温下搅拌。将该反应混合物真空蒸发并重新溶解在乙酸乙酯(100ml)中。随后将该溶液用50％饱和碳酸氢钠溶液(2×100ml)洗涤，用硫酸钠干燥并真空蒸发。将该固体残余物在***中研制，过滤并收集固体，用甲醇重结晶得到所需化合物。

(d)2-氨基苯色烯-4-酮

将2-乙硫基-苯并色烯-4-酮、适当的胺(10mol当量)和乙二醇(10ml)混合物加热至160℃并搅拌3小时。冷却至室温后，将该反应混合物倾到在冰水(100ml)上并萃取到DCM中。收集有机萃取物，用硫酸钠干燥并通过真空蒸发除去溶剂得到浅色固体状产物。通过用适当的溶剂重结晶提纯该产物。

(e)(苯并-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂

将Merrifield树脂(1％交联，1.2mmol/g)(0.70g，0.84mmol)在无水DMF(4ml)中溶胀。将该混合物温和地振摇15分钟然后用适当的4-羟基-苯并-色烯-2-硫酮(0.50g，2.2mmol)的DMF(3ml)溶液处理。继续振荡15分钟后，将该混合物用1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.4ml，2.7mmol)处理。然后将该反应混合物加热至70℃并温和地振摇24小时。通过过滤收集树脂并用DMF洗涤，然后用甲醇洗涤并最终用DCM洗涤。

(f)苯并-色烯-4-酮库

将适当的(苯并-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂(0.030g，0.036mmol)在无水DMF中溶胀并温和地振摇15分钟。将该反应混合物用制备的胺(0.036mmol)的DCM(0.2ml)溶液处理。将该混合物在室温下振摇24小时，然后加入Amberlite IR120+树脂(50mg)并继续振摇1小时。然后过滤该反应混合物，将树脂用DCM和甲醇洗涤。将滤液真空蒸发得到0.0014g(0.004mmol)粗品所需化合物，其不经进一步纯化直接进行LC-MS分析。

变化方案

如果希望不同的取代基位于两个稠合环的中央核上，则这些取代基可以通过改变水杨酸起始原料环上的取代基来引入，并且在需要时使用保护基(例如参见路线7b)。

取代的吗啉

取代的吗啉类化合物例如2-乙基-吗啉和2，2-二甲基-吗啉利用Bettoni等，Tetrahedron，1980，36，409-415所述的方法制备，参见以下关于化合物317的讨论。

合成路线7b：

7-烷氧基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮类的固相合成

(a)CS₂，叔丁醇钾

DBU，DMF，60℃

(g)烷化剂

(f)(i)mCPBA，DCM

(ii)HNR¹R²，MeCN

步骤(a)、(e)和(f)如同合成路线7a。

(g)(7-(烷氧基氧基)-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂

将(7-(羟基)-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂(0.030g，＜0.036mmol)在无水DMF中溶胀并温和地振摇15分钟。将该混合物用1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(0.2ml，1.3mmol)处理。继续振荡15分钟后，将该混合物用烷化剂(例如苄基溴)处理。将反应液加热至65℃并振荡20小时。通过过滤收集树脂并依次用DMF、甲醇和DCM洗涤。该过程用新的试剂在树脂上反复进行3次。

变化方案

如果希望不同的取代基位于两个稠合环的中央核上，则这些取代基可以通过改变苯乙酮起始原料环上的取代基来引入，例如使用2，5-二羟基苯乙酮代替2，4-二羟基苯乙酮生成6-羟基取代的色烯-4-酮。

合成路线7b(i)：7-羟基取代的色烯-4-酮的衍生化

a)TEA，PPh₃，ROH，DIAD

b)mCPBA，吗啉

(a)(7-芳基氧基-4-氧代-4H-色烯-7-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂

将S-(7-羟基-4-氧代-4H-色烯-7-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂(0.020g，＜0.024mmol)在THF(1ml)中于Advanced Chemtech反应玻璃容器内溶胀并温和地振摇15分钟。在加入各反应物之间轻轻搅拌10分钟，将该容器依次用TEA(0.05ml)、三苯基膦(0.063g)的THF(0.5ml)溶液和适当的醇(0.25mmol)的THF(0.5ml)溶液处理。10分钟后，该容器用DIAD(0.047ml)的THF(0.5ml)溶液处理，在加料之前在干冰/丙酮浴中急冷。将该反应容器轻轻搅拌20小时，排干，将树脂用DCM×2、DMF×1、甲醇×1和DCM×2洗涤。

(b)7-芳基氧基-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮

将树脂结合的色酮(最多0.036mmol)悬浮在DCM(2ml)中并在振荡10分钟后，将该混合物用mCPBA(0.2g，1.1mmol)处理。将混合物在室温下振荡3小时然后过滤。将树脂依次用DCM×2、甲醇×2、DCM×2洗涤并重新悬浮在DCM(2ml)中。振荡15分钟后，该混合物用吗啉(0.005ml，0.05mmol)的DCM(2ml)溶液处理。将该混合物在室温下振荡16小时然后过滤，将树脂用甲醇(2×2ml)洗涤。将滤液真空蒸发得到标题化合物。该产物不经进一步纯化直接用于LC-MS分析。

变化方案

如果希望终产物中的氨基是除吗啉代之外的其它基团，则可以在步骤(b)中用胺代替吗啉。在步骤(a)中采用适当的醇，可以使7-取代基是取代或未取代的烷基、杂环基等而不是芳基。

合成路线7c：2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮衍生物的合成

a)有机硼，K₂CO₃，Pd(PPh₃)₄，90℃

(a)芳基取代的2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮

将有机硼化合物(0.058mmol)、三氟甲磺酸2-吗啉-4-基-4-氧代-4H-色烯基酯(化合物305或306)(20mg，0.053mmol)和粉状碳酸钾(14.6mg，0.106mmol)加入到反应管内，随后向其中吹入氮气并密封。向烧瓶中的二烷中吹入氮气进行脱气并超声5分钟，然后将其加入到上述反应试管(0.5ml)中。向其中加入四(三苯基膦)钯(0)(3.1mg)在脱气二烷(0.3ml)中的溶液，将该反应混合物加热至90℃并在氮气氛下回流18小时。冷却该反应液并经硅胶塞过滤(洗脱质Si 500mg筒)并用30％甲醇/DCM(8ml)洗脱。将该溶液通过LCMS分析并利用制备HPLC纯化。

合成路线8：7-(羟基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮向7-烷氧基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮的进一步衍生化

将7-(羟基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(307)(0.125g，0.50mmol)在无水DMF(5ml)中的溶液用适当的芳基溴处理，随后用40％苄基三甲基氢氧化铵(0.54ml，1.2mmol)的甲醇溶液处理。将该溶液加热至80℃并搅拌16小时。冷却后，该溶液用乙酸乙酯(25ml)和水(10ml)处理。将该混合物剧烈搅拌30分钟然后静置。用移吸管取出乙酸乙酯层并真空蒸发。将粗产物用甲醇重结晶。

合成路线9：7-(羟基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮向7-芳酰基氧基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮的进一步衍生化

将7-羟基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(299)(0.25g，1.0mmol)在DMF(10ml)中的溶液用适当的芳酰氯处理，随后用吡啶(0.10ml，1.2mmol)在0℃下处理。使该溶液升至室温并搅拌16小时。所得混悬液用乙酸乙酯(100ml)稀释并用0.5M盐酸(50ml)、水(50ml)和盐水(50ml)洗涤。将有机提取物用硫酸钠干燥并真空蒸发。将粗产物用乙酸乙酯重结晶。

本发明化合物的用途

本发明提供了活性化合物，具体地讲，活性的4-氨基-吡喃-2-酮类、2-氨基-吡喃-4-酮类、2-氨基-4-酮类和2-氨基-吡啶-异喹啉-4-酮类。

在此使用的术语“活性”是指能够抑制DNA-PK活性的化合物，并且具体包括具有固有活性的化合物(药物)以及该类化合物的前药，所述的前药本身可以具有很小的或没有固有活性。

下面的实施例将描述评估特定化合物的DNA-PK抑制作用的分析方法。

本发明进一步提供了一种抑制细胞中DNA-PK的方法，包括使该细胞与有效量的活性化合物接触，优选是药学可接受的组合物的形式。该方法可以在体外或体内进行。

例如，可以使细胞的样本(例如得自肿瘤)在体外生长并且使活性化合物和具有已知治疗作用的药物联合与所述细胞接触，并且观察该化合物对这些细胞产生的治疗作用的增强。

本发明进一步提供了可以抑制DNA-PK活性的活性化合物以及抑制DNA-PK活性的方法，该方法包括使细胞与有效量的活性化合物在体外或在体内接触。

本发明还提供用于治疗人或动物机体的方法中的活性化合物。该方法可以包括向该个体施用治疗有效量的活性化合物，优选是药物组合物的形式。

本文在治疗病症的上下文中使用的术语“治疗”一般是指治疗和疗法，无论针对的是人体还是动物(例如兽医用途)，其中获得了一定的所需治疗效果，例如，阻止病症的进程，并且包括减慢进展的速度、使进展速度停止、改善病症和治愈病症。治疗还包括预防措施(即预防)。

在此使用的术语“治疗有效量”是指活性化合物或物质、含有该活性化合物的组合物或剂型的量，该量可以有效地产生一定的所需治疗效果，相称地具有合理的有益作用/危险比。

给药

无论是***性地/外周性地或在所需的作用位点，活性化合物或含有该活性化合物的药物组合物均可以通过任何常规给药途径施用给个体，包括但不限于，口服(例如吞服)；局部(包括例如透皮、鼻内、经眼、经颊和舌下)；肺部(例如通过吸入或吹入疗法使用，例如气雾剂，例如经口腔或鼻)；直肠；***；肠胃外，例如，通过注射，包括皮下、真皮内、肌肉内、静脉内、动脉内、心内、鞘内、脊柱内、囊内、囊下、眼眶内、腹膜内、气管内、表皮下、关节内、蛛网膜内和胸骨内；通过植入储库制剂，例如，皮下或肌肉内植入。

所述的个体可以是真核生物、动物、脊椎动物、哺乳动物、啮齿类动物(例如豚鼠、仓鼠、大鼠、小鼠)、鼠科动物(例如小鼠)、犬科动物(例如狗)、猫科动物(例如猫)、马类(例如马)、灵长类动物、类人猿(例如猴或无尾猴)、猴(例如狨、狒狒)、无尾猴(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、长臂猿)或人。

制剂

虽然所述的活性化合物可以单独给药，但优选它作为含有至少一种如上所述的活性化合物和一种或多种药学可接受的载体、辅剂、赋形剂、稀释剂、填充剂、缓冲剂、稳定剂、防腐剂、润滑剂和所属领域技术人员熟知的其他材料以及任选的其他治疗或预防药物的药物组合物(例如制剂)的形式存在。

因此，本发明进一步提供如上定义的药物组合物和制备该药物组合物的方法，该方法包括将至少一种如上定义的活性化合物与一种或多种药学可接受的载体、赋形剂、缓冲剂、辅剂、稳定剂或本文所述的其他材料混合。

在此使用的术语“药学可接受的”是指，在合理的医学判断的范畴内，适合用于与个体(例如人体)的组织相接触而没有过度的毒性、刺激性、变应性反应或其他问题或并发症且具有合理的有益作用/危险比的化合物、物质、组合物和/或剂型。从与该制剂的其他组分相容的意义上，各载体、赋形剂等也必须是“可接受的”。

适宜的载体、赋形剂等可以参见标准的药学书籍，例如， Reminitegton’s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack publishing Company，Easton，Pa.，1990。

该制剂一般可以以单位剂型存在且通过任何制药领域熟知的方法制成。所述的方法包括使该活性化合物与构成一种或多种附加组分的载体混合的步骤。通常，通过使该活性化合物与液体载体或微粉状的固体载体或两者均匀且紧密地混合，并且随后如果必要使产物成形来制备所述的制剂。

制剂可以是液体、溶液、混悬剂、乳剂、酏剂、糖浆剂、片剂、糖锭、颗粒剂、散剂、胶囊剂、囊形片、丸剂、安瓿剂、栓剂、***栓、软膏、凝胶、糊剂、霜剂、喷雾剂、雾剂、泡沫剂、洗剂、油、大药丸、干药糖剂或气雾剂的形式。

适合口服给药(例如吞服)的制剂可以以离散的单位存在，例如各自含有预定量的活性化合物的胶囊、囊形片或片剂；以散剂或颗粒剂的形式存在；以存在于水或非水液体中的溶液或混悬液的形式存在；或以水包油液体乳剂或油包水液体乳剂的形式存在；以大药丸的形式存在；以干药糖剂的形式存在；或以糊剂的形式存在。

片剂可以通过常规的方式制备，例如，压缩或模制，可任选的含有一种或多种辅助组分。压缩的片剂可以通过在适当设备中将自由流动形式(例如粉末或颗粒)的该活性化合物压缩来制备，其中还可任选的混有一种或多种粘合剂(例如聚乙烯吡咯烷酮、明胶、***胶、山梨糖醇、黄芪胶、羟丙甲基纤维素)；填充剂或稀释剂(例如乳糖、微晶纤维素、磷酸氢钙)；润滑剂(例如硬脂酸镁、滑石粉、硅胶)；崩解剂(例如羟乙酸淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠)；表面活性剂或分散剂或湿润剂(例如十二烷基硫酸钠)；和防腐剂(例如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、山梨酸)。模制片剂可以通过在适当设备中模制用惰性液体稀释剂湿润的粉状化合物的混合物来制备。片剂可以任选地进行包衣或刻线，并且可以配制成能够缓释或控释其中的活性化合物的形式，例如，使用不同比例的羟丙甲基纤维素来达到所需的释放性能。片剂可以任选地带有肠溶包衣，以便能够在肠道部分而不是胃中释放。

适合局部给药的制剂(例如透皮、鼻内、经眼、经颊和舌下)可以配制成软膏、霜剂、混悬剂、洗剂、粉剂、溶液、糊剂、凝胶、喷雾剂、气雾剂或油。或者，制剂可以包括贴剂或敷料，例如浸有活性化合物和任选的一种或多种赋形剂或稀释剂的绷带或粘性硬膏剂。

适合局部给药至口腔内的制剂包括在矫味基质(通常是蔗糖和***胶或黄芪胶)内含有活性化合物的糖锭；在惰性基质(例如明胶和甘油，或蔗糖和***胶)内含有活性化合物的锭剂；和在适当液体载体内含有活性化合物的漱口剂。

适合局部给药到眼部的制剂包括滴眼剂，其中将活性化合物溶解或悬浮在适当的载体、尤其是活性化合物的水性溶剂内。

其中的载体是固体的适合对鼻给药的制剂包括具有一定粒度的粗粉，例如，在约20-约500微米的范围内，其以嗅吸的方式给药，即经鼻腔从与鼻子近距离的容器快速吸入粉末。其中的载体是液体的适于以例如鼻喷雾剂、滴鼻剂或通过雾化器给药的气雾剂的形式给药的制剂包括活性化合物的水或油溶液。

适于通过吸入给药的制剂包括那些由加压包装产生的气雾喷雾剂存在的制剂，该制剂使用适当的抛射剂，例如二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他适当气体。

适合经皮肤局部给药的制剂包括软膏、霜剂和乳剂。当配制为软膏时，该活性化合物可以任选地与石蜡或水混溶的软膏基质一起使用。或者，可将活性化合物用水包油霜剂基质配制成霜剂。如果希望，霜剂基质的水相中可以含有，例如，至少约30％w/w的多元醇，即，具有两个或多个羟基的醇，例如丙二醇、丁-1，3-二醇、甘露糖醇、山梨醇、甘油和聚乙二醇及其混合物。局部制剂优选含有可提高活性化合物通过皮肤或其它感染区域吸收或渗透的化合物。此类透皮促进剂的实例包括二甲亚砜和相关类似物。

当配制为局部乳剂时，油相可以任选地合有乳化剂，或者可以含有至少一种乳化剂与脂肪或油或者与脂肪和油两者的混合物。优选同时含有亲水性乳化剂和作为稳定剂的亲脂性乳化剂。还优选包括油和脂肪两者。并且，含有或不含有稳定剂的乳化剂组成了所谓的乳化蜡，该蜡与油和/或脂肪组成所谓的乳化软膏基质，它构成霜剂制剂的油分散相。

适当的乳化剂和乳剂稳定剂包括吐温60、司盘80、鲸蜡硬脂醇、肉豆蔻醇、甘油基一硬脂酸酯和十二烷基硫酸钠。制剂对于适当油或脂肪的选择是基于获得所需的美容特性，因为所述活性化合物在大多数可能用于药物乳剂中的油内的溶解度可能非常低。因此该霜剂应当优选是不油腻、不染色且可洗涤的产品，并且具有可以避免从管或其他容器中泄漏出来的适当稠度。可以使用直链或支链、一-或二元烷基酯例如二-异己二酸酯、硬脂酸异鲸蜡酯、椰子脂肪酸的丙二醇二酯、肉豆蔻酸异丙酯、油酸癸酯、棕榈酸异丙酯、硬脂酸丁酯、棕榈酸2-乙基己酯或称作Crodamol CAP的支链酯的混合物，最后三种是优选的酯。这些物质可以单独使用或合用，这取决于所需的性质。

或者，可以使用高熔点脂质例如白色软石蜡和/或液体石蜡或其他矿物油。

适合直肠给药的制剂可以以栓剂的形式存在，栓剂使用的适当基质包括，例如，可可脂或水杨酸酯。

适合***给药的制剂可以以***栓、棉塞、霜剂、凝胶、糊剂、泡沫剂或喷雾剂的形式存在，其中含有活性化合物以及本领域已知的适宜载体。

适合肠胃外给药的制剂(例如通过注射，包括皮肤、皮下、肌肉内、静脉内和真皮内给药)包括含水和非水的等渗、无热原、无菌注射溶液，其可以含有抗氧剂、缓冲剂、防腐剂、稳定剂、抑菌剂和使该制剂与接受者的血液等渗的溶质；以及可以含有助悬剂和增稠剂的水和非水无菌混悬液；和脂质体或其他微粒体系，它们被设计用来将化合物靶向于血液组分或其它一种或多种器官。适用于此类制剂的适当等渗载体的实例包括氯化钠注射液、林格氏溶液或乳酸化林格氏注射液。通常，活性化合物在该溶液中的浓度是约1ng/ml-约10μg/ml，例如约10ng/ml-约1μg/ml。该制剂可以存在于单位剂量或多剂量的密封容器内，例如，安瓿和小瓶，并且可以储存在冷冻干燥(冻干)条件下，使用之前仅仅需要加入无菌液体载体，例如注射用水即可。即时注射溶液和混悬液可以由无菌粉末、颗粒和片剂制备。制剂可以是设计为使活性化合物靶向于血液组分或一种或多种器官的脂质体或其他微粒体系的形式。

剂量

应理解活性化合物和含有活性化合物的组合物的适当剂量可以随着患者的不同而改变。确定最佳剂量一般包括平衡治疗效益的水平与本发明治疗的任何危险或有害副作用。选择剂量水平应取决于多种因素，包括但不限于，特定化合物的活性、给药途径、给药的时间、化合物的***速率、治疗的持续时间、合用的其他药物、化合物和/或物质，以及患者的年龄、性别、体重、状况、一般健康状况和在先病史。化合物的给药量和给药途径最终由主治医师来决定，尽管通常该剂量应在作用位点达到可获得预期效果并且同时不会引起大的有害或损害性副作用的局部浓度。

体内给药可以在整个治疗过程中以单次给药、连续或间隔给药的方式来实现(例如以适当的时间间隔分次给药)。测定最有效的给药方式和给药剂量的方法是所属领域技术人员熟知的且应随疗法中采用的制剂、治疗的目的、被治疗的靶细胞和被治疗的个体而变化。可以进行一次或多次给药并且由主治医师来选择剂量水平和方式。

通常，活性化合物的适当剂量在约100μg-约250mg/kg个体体重/天的范围内。当所述的活性化合物是盐、酯、前药等时，给药量是基于母体化合物计算的，因此所用的实际重量成比例地增加。

实施例

提供以下实施例仅仅为了举例说明本发明而不是为了限定上述本发明的范围。

当引用分子量(Mw)来证实已经合成出了预期的化合物时，它是用LC-MS检测的质子化的化合物的分子量，并且因此比化合物的实际分子量高1个单位，即Mw+1。

合成详述

路线1

化合物1

(a)3-苯基-3-羟基-二硫代丙烯酸

亮橙色固体(5.9g，75％)，得自(4.67ml，40mmol)苯乙酮；FT-IR(ATR/cm^-1)：3055，1542，1450，1234，1059，909，751，674；¹H NMR(CDCl₃)δ＝7.30(1H，s)；7.35-8.05(5H，m)，15.18(1H，s)

(b)3-苯基-3-羟基-二硫代丙烯酸乙酯

褐色油(3.84g，68％)，得自(4.91g，25mmol)3-苯基-3-羟基-二硫代丙烯酸；FT-IR(ATR/cm^-1)：3062，2970，2923，2550，1395，1225，1042，948，755；¹H NMR(CDCl₃)δ＝1.31(3H，t)，3.20(2H，q)，6.84(1H，s)，7.34-7.83(5H，m)，15.06(1H，s)

(c)1-苯基-3-吗啉-4-基-3-硫羰基-丙烷-1-酮

白色结晶固体(3.26g，80％)，得自(3.64g，16.25mmol)3-苯基-3-羟基-二硫代丙烯酸乙酯；FT-IR(ATR/cm^-1)：3023，2908，2871，1681，1496，1433，1311，1169，1103，953，748；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.59-3.80(6H，m)；4.33(2H，m)；4.72(2H，s)；7.38-7.96(5H，m)

(d)1-苯基-3-乙硫基-3-吗啉-4-基-丙烯酮

褐色油(3.21g，97％)

(e)4-吗啉-4-基-6-(苯基)-吡喃-2-酮(化合物1)

白色固体(0.38g，15％)；mp 161-162℃；FT-IR(ATR/cm^-1)：3049，2956，2901，2862，1977，1628，1537，1436，1109，761，687；¹H NMR(DMSO)δ＝3.63(4H，t，4.5Hz，CH₂N)，3.81(4H，t，4.5Hz，CH₂O)，5.37(1H，d，2Hz，H-3)，7.17(1H，d，2Hz，H-5)，7.61-7.65(3H，m，ArH)，8.03-8.08(2H，m，ArH)；UV：λ_max(MeOH/nm)：291，250；MS：m/z(LC-MS/ESP+)：258(M⁺+1)，211，179，133；计算值C₁₅H₁₅NO₃.0.1EtOAc：C，69.51；H，5.98；N，5.26。实测值：C，69.54；H，5.93；N，4.96。

4-吗啉-4-基-6-(4-(叔丁基)苯基)-吡喃-2-酮(化合物2)

白色针状物(0.61g，19％)；mp 230-232℃；FT-IR(ATR/cm^-1)：3109，3051，2947，2862，1674，1633，1511，1446，1114，941，826，782；¹H NMR(DMSO)δ＝1.42(9H，s，(CH₃)₃C)，3.62(4H，m，CH₂N)，3.79(4H，m，CH₂O)，5.34(1H，bs，H-3)，7.10(1H，bs，H-5)，7.63(2H，d，8.5Hz，ArH)，7.96(2H，d，8.5Hz，ArH)；UV：λ_max(MeOH/nm)：265.5，235.5；MS：m/z(LC-MS/ESP+)：314(M⁺+1)；计算值C₁₉H₂₃NO₃.0.1H₂O：C，72.40；H，7.42；N，4.44；实测值：C，72.50；H，7.48；N，4.18。

4-吗啉-4-基-6-(4-甲氧基苯基)-吡喃-2-酮(化合物3)

白色针状物(0.43g，15％)；mp 212-213℃；FT-IR(ATR/cm^-1)：2969，2926，1681，1619，1505，1442，1240，1180，1113，789；¹H NMR(DMSO)δ＝3.60(4H，t，4.5Hz，CH₂N)；3.79(4H，t，4.5Hz，CH₂O)；3.94(3H，s，MeO)；5.30(1H，d，2Hz，H-3)；7.02(1H，d，2Hz，H-5)；7.16(2H，d，9Hz，ArH)；7.98(2H，d，9Hz，ArH)；UV：λ_max(MeOH/nm)：226，256，301.5；MS：m/z(LC-MS/ESP+)：288(M⁺+1)，157；计算值C₁₆H₁₇NO₄：C，66.89；H，5.96；N，4.88；实测值：C，66.65；H，6.03；N，4.51。

4-吗啉-4-基-6-(4-氯苯基)-吡喃-2-酮(化合物4)

白色针状物(0.31g，21％)，得自(1.55g，5mmol)1-(4-氯-苯基)-3-乙硫基-3-吗啉-4-基-丙烯酮；mp 236-237℃；FT-IR(ATR/cm^-1)：3040，2969，1681，1624，1535，1235，941，785；¹H NMR(DMSO)δ＝3.65(4H，m，CH₂N)；3.83(4H，m，CH₂O)；5.40(1H，m，H-3)；7.22(1H，m，H-5)；7.75(2H，m，ArH)；8.09(2H，m，ArH)；UV：λ_max(MeOH/nm)：296.5，254；MS：m/z(LC-MS/ESP+)：292-294(M⁺+1)；计算值C₁₅H₁₄ClNO₃：C，61.76；H，4.84；N，4.80；实测值：C，61.55；H，4.91；N，4.55。

路线2-步骤(c)

2-吗啉-1-基-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物5)

由2-氯-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(0.230g，1mmol)和吗啉(0.35ml，4mmol)制得白色晶体(0.236g，0.83mmol，83％收率)。FT-IR(KBr圆片)：cm-13070，2983，2945，2911，2864，1701，1641，1574，1546，1522，1488，1427，1402，1286，1225，1116，773。m/z(EI)：281(M⁺)，250，224，195，168，128，101，77。¹H NMR 200MHz，DMSO)：3.82(8H，s，吗啉-H)，5.73(1H，s，H-3)；7.37(1H，d，8Hz，ArH)；7.75(1H，m，ArH)；7.77(1H，d，5Hz，ArH)；7.91(1H，d，5Hz，ArH)；8.62(1H，d，7.5Hz，ArH)；8.88(1H，d，7.5Hz，ArH)

2-(硫代吗啉-4-基)嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物6)

浅黄色晶体(0.255g，0.86mmol，86％收率)。Mp＝240-242℃。UV(max＝354.5，335.5，320，280.5，261.5，232，200nm(甲醇)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.66(4H，m)；4.06(4H，m)；5.62(1H，s)；7.01(1H，d)；7.62(3H，m)；8.60(1H，d)；8.75(1H，m)。ES-MS m/z＝298(M+1)。分析计算值C₁₆H₁₅N₃OS：C，64.62；H，5.08；N，14.13。实测值：C，64.22；H，4.86；N，13.94。

2-(2，5-二甲基-哌啶-1-基)嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物7)

白色晶体(0.126g，0.41mmol，41％收率)。mp 214-216℃。λ_max＝356，336，322，261.5，231.5，200nm(甲醇)。m/z(ES⁺)：308(M⁺+1)，179，133。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ0.89(3H，s)；0.93(3H，s)；1.65(4H，m)；4.42(2H，s)；5.62(1H，s)；6.96(1H，d)；7.61(3H，m)；8.59(1H，d)；8.76(1H，m)。分析计算值C₁₉H₂₁N₃O.0.2CH₃OH；C，73.49；H，7.00；N，13.39。实测值：C，73.92；H，6.77；N，13.56。

2-(4-甲基-哌嗪-1-基)嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物8)

白色固体(0.095g，0.32mmol，32％收率)。mp＝在285℃以上升华。m/z(ES⁺)295(MH⁺)，257，179。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ2.91(3H，s)；3.44(8H，m)；5.95(1H，s)；7.49(1H，d)；7.95(1H，m)；8.02(2H，m)；8.67(1H，d)；8.99(1H，m)。

2-(3-羟基甲基-哌啶-1-基)嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物9)

白色固体(0.157g，0.50mmol，50％收率)。mp 165-166℃。ESMS m/z(ES⁺)310(M+H)，257，179。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)1.75(5H，m)；2.39(1H，m)；3.31(1H，m)；3.59(3H，m)；4.09(2H，m)；5.64(1H，s)；7.01(1H，d)；7.63(3H，m)；8.63(1H，d)；8.77(1H，m)。

2-[(四氢呋喃-2-基甲基)-氨基]嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物10)

白色固体(0.173g，0.58mmol，58％收率)。mp 174-175℃。ESMS m/z＝296(M+H)，257，179。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.81(4H，m)；3.56(2H，d)；3.73(1H，q)；3.86(1H，q)；4.07(1H，m)；5.29(1H，s，NH)；5.43(1H，s)；6.96(1H，d)；7.59(3H，m)；8.57(1H，d)；8.76(1H，d)。

2-[二-(2-羟基-乙基)-氨基]嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物11)

白色固体(0.076g，0.26mmol，26％收率)。mp 211-212℃。ESMS m/z＝300(M+1)，257，179。¹H NMR(200MHz，D₆DMSO)δ3.90(4H，m，)；5.62(1H，s)；7.38(1H，d)；7.81(1H，m)；7.94(1H，d)；8.58(1H，d)；8.85(1H，d)。分析计算值C₁₆H₁₇N₃O₃：C，69.88；H，6.19；N，13.55。实测值：C，69.70；H，6.27；N，13.44

2-(3-羟基-吡咯烷-1-基)嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物12)

淡棕色固体(0.211g，0.75mmol，75％收率)。mp 240-241℃。UVλ_max＝248.5，258.0，273.5，344.5，362.0nm(甲醇)。ESMS m/z＝282(M+1)，257，179，133。¹H NMR(200MHz，d₆DMSO)δ2.18(2H，m)；3.45(2H，m)；3.86(2H，m)；4.52(1H，m)；5.17(1H，s)；7.36(1H，d)；7.80(1H，m)；7.94(2H，d)；8.63(1H，d)；8.86(1H，d)

2-(顺-2，6-二甲基吗啉-4-基)嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物13)

白色晶体(0.088g，0.28mmol，56％收率)。mp 208-209℃。ESMS m/z＝310(M+1)，257，179，101。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.29(6H，d)；2.68(2H，dd)；3.70(2H，m)；4.30(2H，m)；5.63(1H，s)；7.06(1H，d)；7.67(3H，m)；8.65(1H，d)；8.81(1H，d)

2-[苄基-(2-羟基-乙基)-氨基]嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物14)

白色晶体(0.077g，0.22mmol，44％收率)。ESMS m/z＝346(M+1)，257，179，101。¹H NMR(200MHz，d₆DMSO)δ3.77(4H，m)；4.97(2H，m)；5.63(1H，s)；7.41(6H，m)；7.95(3H，m)；8.63(1H，d)；8.84(1H，d)。

2-[(2-羟基-乙基)-甲基-氨基]-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物15)

白色晶体(0.079g，0.29mmol，58％收率)。ESMS m/z＝270(M+1)，257，179，133，101。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ3.15(3H，s)；3.92(4H，m)；5.55(1H，s)；7.00(1H，d)；7.64(3H，m)；8.62(1H，d)；8.73(1H，d)。

2-[(2-羟基-2-苯基-乙基)-甲基-氨基]-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物16)

米色结晶固体(0.115g，0.33mmol，66％收率)。mp 195-196℃。UVλ_max＝354，334.5，320，259，232，200nm(甲醇)。ESMS m/z＝346(M+1)。¹HNMR(200MHz，CDCl₃)δ2.94(3H，s)；3.99(2H，m)；4.60(1H，s)；5.13(1H，m)；5.54(1H，s)；7.04(1H，d)；7.36(5H，m)；7.71(3H，m)；8.65(1H，d)；8.82(1H，m)。分析计算值C₂₁H₁₉N₃O₂.0.15CH₃OH：C，72.48；H，5.65；N，11.98。

实测值：C，72.57；H，5.51；N，11.89

3-[甲基-(4-氧代-4H-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-2-基)-氨基]-丙腈(化合物17)

米色结晶固体(0.067g，0.24mmol，48％收率)。mp 166-167℃。UVλ_max＝352，334，316，200nm(甲醇)。ESMS m/z＝279(M+1)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.80(2H，t)；3.18(3H，s)；4.08(2H，t)；5.58(1H，s)；7.01(1H，d)；7.71(3H，m)；8.68(1H，d)；8.76(1H，m)。分析计算值C₁₆H₁₄N₄O：C，69.05；H，5.07；N，20.13。实测值：C，68.47；H，4.99；N，19.93。

2-(2-噻吩-2-基-乙基氨基)-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物18)

米色结晶固体(0.115g，0.36mmol，72％收率)。mp 162-163℃。UVλ_max＝352，334，318.5，253，229.5，200nm(甲醇)。ESMS m/z＝322(M+1)，301，181。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ3.15(3H，m)；3.56(2H，m)；5.07(1H，s)；5.47(1H，s)；6.73(2H，m)；7.16(2H，m)；7.61(3H，m)；8.60(1H，d)；8.75(1H，m)。分析计算值C₁₈H₁₅N₃OS：C，67.27；H，4.70；N，13.07。实测值：C，66.84；H，4.57；N，13.07。

2-(2，3-二羟基丙基氨基)-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物19)

米色结晶固体(0.045g，0.16mmol，32％收率)。mp 215-216℃。ESMSm/z＝286(M+1)，157，110。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ1.14(2H，m)；3.47(2H，m)；3.78(1H，m)；4.47(1H，t)；4.77(1H，t)；5.01(1H，d)；5.51(1H，s)；7.36(1H，d)；7.80(1H，m)；7.94(2H，m)；8.63(1H，d)；8.86(1H，m)

2-(2-羟基丙基氨基)-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物20)

米色结晶固体(0.072g，0.27mmol，54％收率)。mp 199-200℃。ESMSm/z＝270(M+1)，179，157，133，111。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ1.23(3H，d)；3.55(2H，m)；3.95(2H，t)；4.93(1H，d)；5.50(1H，s)；7.36(1H，d)；7.82(1H，m)；7.95(2H，m)；8.63(1H，d)；8.88(1H，m)

2-[2-羟基-2-(3-羟基-苯基)-乙基氨基]-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物21)

米色结晶固体(0.117g，0.34mmol，68％收率)。mp 159-161℃。UVλ_max＝352.5，333，317，257，231，200nm(甲醇)。ESMS m/z＝348(M+1)，239，222，133。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ4.81(2H，m)；5.52(1H，s)；5.64(1H，d)；6.75(1H，m)；6.96(2H，m)；7.24(1H，t)；7.39(1H，d)；7.82(1H，m)；7.96(2H，m)；8.65(1H，d)；8.89(1H，m)；9.48(1H，br s)。分析计算值C₂₀H₁₇N₃O₃.0.3CH₂Cl₂：C，65.07；H，4.65；N，11.19。实测值：C，65.05；H，4.92；N，11.06。

2-(2-羟基-乙基氨基)-嘧啶并[2，1-a]异喹啉-4-酮(化合物22)

米色结晶固体(0.091g，0.36mmol，72％收率)。mp 218-221℃。UVλ_max＝352，333.5，316，226.5，200nm(甲醇)。ESMS m/z＝256(M+1)，229。¹HNMR(200MHz，CDCl₃)δ3.45(2H，m)；3.71(2H，m)；4.92(1H，t)；5.49(1H，s)；7.39(1H，d)；7.83(1H，m)；7.96(2H，m)；8.64(1H，d)；8.89(1H，m)。分析计算值C₁₄H₁₃N₃O₂：C，65.87；H，5.13；N，16.46。实测值：C，65.40；H，4.96；N，16.12。

其他利用合成路线2合成的化合物的实例如下表所示。

路线3

利用合成路线3和合成路线4合成的化合物的实例如下表所示。结构式上的星号表示取代基与核心结构连接的位置。例如，核心结构为并且其中的定义了结构式为

的化合物

化合物27和28的结构式中的波折线是指向上或向下(轴向或平伏位)的键。因此该结构式代表具有顺式和反式甲基的混合物的二甲基吗啉代基团。

路线4

利用合成路线4合成的化合物的实例如下表所列。

化合物号	R	MwLC-MS	纯度
化合物号	R	MwLC-MS	纯度	48	H	273	85

路线4a

利用合成路线4a合成的化合物的实例如下表所列。

化合物号

R₁

R₂

MwLC-MS

纯度

路线4b

利用合成路线4b合成的化合物的实例如下表所列。

路线4c(i)

按照合成路线4c(i)合成的化合物的实例如下表所列。

路线4c(ii)

按照合成路线4c(ii)合成的化合物的实例如下表所列。

路线4d(iii)

按照合成方法4d(iii)合成的化合物的实例(由按照路线4d(ii)合成的前体开始)如下表所列。

路线4d(iv)

按照合成路线4d(iv)合成的化合物的实例(由按照路线4d(i)合成的前体开始)如下表所列。

路线4d(v)

按照路线4d(v)合成的化合物的实例(由按照路线4d(i)合成的前体开始)如下表所列。

路线5

化合物283

(a)3-(4-氯苯基)-3-氧代-三苯基膦基-丙酸甲酯

通过柱色谱纯化(乙酸乙酯∶石油醚40-60°，3∶2)得到白色固体(3.41g，77.2％)；mp 136°C；IR(KBr/cm^-1)：3074，3056，2940，1662，1314，1247，1105，1077，752，695；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.07(3H，s)，7.18-7.72(19H，m)；MSm/z(EI)：472.0993(M⁺，C₂₈H₂₂O₃PCl的计算值472.0995)，472，361，277，201，163。

(b)3-(4-氯苯基)丙炔甲酯酸

通过柱色谱纯化(乙酸乙酯∶石油醚40-60°，15∶85)得到白色固体(1.17g，88.5％)；mp 90℃；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.77(s，3H)，7.27-7.65(4H，m)；IR(KBr/cm^-1)：3049，3035，2964，2226，1718，1489，1293，1170，823，721；HRMS m/z(EI)：194.0130(M⁺，C₁₀H₇O₂Cl的计算值194.0135)，194，163，136，99，74。

(c)4-[(4-氯苯基)-2-氧代-3-丁炔基]羰基]吗啉锂盐

得到白色固体(0.42g，50％)；mp＞320℃；¹H NMR(d⁶-DMSO)δ＝3.46(4H，m)，3.61(4H，m)，5.06(1H，m)，7.56(4H，s)；IR(KBr/cm^-1)：3407，3091，2961，2200，1571，1506，1230，1116，961，755；HRMS m/z(EI)：291.0445(M⁺，C₁₅H₁₄ClNO₃的计算值291.0662)，291，263，163，136，86。

(d)6-(4-氯苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物284)

通过柱色谱纯化(乙酸乙酯∶石油醚40-60°，15∶85)得到白色固体(0.15g，50％)；mp 250℃；IR(KBr/cm^-1)：3071，2965，1643，1559，1410，1124，899，854；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.41(4H，t)，3.83(4H，t)，5.45(1H，d)，6.51(1H，d)，7.42(2H，d)；7.58(2H，d)；HRMS m/z(EI)：291.0666(M⁺，C₁₅H₁₄O₃NCl的计算值291.0662)，291-293，263-265，205-207，136-138；UV：λ_max(MeOH)＝354.0nm；分析计算值C₁₅H₁₄O₃NCl.0.1H₂O：C，61.38；H，4.88；N，4.77；Cl，12.08。实测值：C，61.58；H，4.99；N，4.34；Cl，12.40。

2-(4-吗啉基)-6-苯基-4H-吡喃-4-酮(化合物285)

浅绿色固体(0.38g，63％)；mp 148-150℃；IR(KBr/cm^-1)：1648，1561，1230，1108，1030，896，775。¹H NMR：δ(d₆-DMSO)：3.55(4H，m，CH₂N)，3.85(4H，m，CH₂O)，5.54(1H，d)，6.75(1H，d)，7.63(3H，m，Ar-H)，8.00(2H，m，Ar-H)；HRMS m/z(EI)：257.1047(M⁺，C₁₅H₁₅NO₃的计算值257.1052)，257，229，200，171，131，111，102，86，77；分析计算值C₁₅H₁₅NO₃H₂O：C，68.53；H，5.71；N，5.33。实测值：C，68.53；H，5.90；N，5.14。

6-(2-甲氧基苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物286)

白色固体(0.297g，23％)；mp 125-127℃；IR(KBr/cm^-1)：3077，3001，2968，1641，1604，1562，1404，1241，1121，1019，862，761；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.34(4H，t)，3.75(4H，t)，3.83(3H，s)，5.39(1H，d)，6.72(1H，d)，6.93-7.01(2H，m)，7.33-7.52(2H，m)；HRMS m/z(EI)：287.1171(M⁺，C₁₆H₁₇O₄N的计算值287.1158)，287，259，244，131，111；UV：λ_max(MeOH)＝358nm；分析计算值C₁₆H₁₇O₄N.0.2H₂O：C，66.06；H，6.03；N，4.81。实测值：C，66.13；H，5.90；N，4.73。

6-(3-甲氧基苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物287)

白色固体(1.33g，99％)；mp 115-117℃；IR(KBr/cm^-1)：3078，2975，1647，1536，1420，1239，1123，879，793；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.41(4H，t)，3.84(7H，m)，5.45(1H，d)，6.53(1H，d)，6.97-7.41(4H，m)；HRMS m/z(EI)：287.1154(M⁺，C₁₆H₁₇O₄N的计算值287.1158)，287，259，200，173，135，102；UV：λ_max(MeOH)＝356nm；分析计算值C₁₆H₁₇O₄N：C，66.67；H，5.93；N，4.62。实测值：C，66.9；H，5.93；N，4.62。

6-(4-甲氧基苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物288)

白色固体(1.29g，96％)；mp220℃；IR(KBr/cm^-1)：3085，2968，1649，1600，1513，1405，1259，1190，835；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.40(4H，t)，3.82(4H，t)，3.84(3H，s)，5.41(1H，d)，6.43(1H，d)，6.95(d，2H)，7.59(d，2H)；HRMS m/z(EI)：287.1158(M⁺，C₁₆H₁₇O₄N的计算值287.1158)，287，287，259，201，132；UV：λ_max(MeOH)＝358nm；分析计算值C₁₆H₁₇O₄N：C，66.67；H，5.93；N，4.62。实测值：C，66.58；H，5.90；N，4.84。

6-(4-叔丁基苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物289)

白色固体(0.94g，75.5％)；mp 156℃；IR(KBr/cm^-1)：3071，3058，2960，1648，1571，1404，1362，1121，900，826；¹H NMR(CDCl₃)δ＝1.28(9H，s)，3.37(4H，t)，3.78(4H，t)，5.39(1H，d)，6.47(1H，d)，7.42(2H，d)，7.54(2H，d)；HRMS m/z(EI)：313.1684(M⁺，C₁₉H₂₃O₃N的计算值313.1678)，313，285，270，256，213，143；UV：λ_max(MeOH)＝358nm；分析计算值C₁₉H₂₃O₃N.0.2H₂O：C，71.99；H，7.44；N，4.42。实测值：C，72.14；H，7.35；N，4.44。

6-(2-氟苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物290)

白色固体(0.67g，76％)；mp 137-138℃；IR：(KBr)/(cm^-1)：3059，3028，2928，1640，1570，1405，1119，756；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.38(4H，t)，3.76(4H，t)，5.40(1H，d)，6.54(1H，d)，7.07-7.23(2H，m)，7.34-7.57(2H，m)；HRMS(EI)m/z 275.0950[M⁺，C₁₅H₁₄O₃NF的计算值275.0958]，275，247，189，161，134，120，86；UV：λ_max(MeOH)＝244.5nm；分析计算值C₁₀H₇O₂F.0.2CH₂Cl₂：C，64.6；H，5.2；N，5.0。实测值：C，64.8；H，5.0；N，4.9。

6-(3-氟苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物291)

白色固体(0.10g，11％)；mp 169-170℃；IR：(KBr)/(cm^-1)：3055，2929，1650，1564，1403，1245，1114，877；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.39(4H，t)，3.76(4H，t)，5.40(1H，d)，6.49(1H，d)，7.08-7.45(4H，m)；HRMS(EI)m/z275.0946[M⁺，C₁₅H₁₄0₃NF的计算值275.0958]，275，247，189，161，120，95；UV：λ_max(MeOH)＝247nm；分析计算值C₁₀H₇O₂F.0.5CH₂Cl₂：C，58.6；H，4.8；N，4.4。实测值：C，58.8；H，4.6；N，4.3。

6-(4-氟苯基)-2-(4-吗啉基)-4H-吡喃-4-酮(化合物292)

白色固体(0.319g，82％)；mp 216-217℃；IR(KBr/cm^-1)：3065，3010，2969，2910，1641，1560，1411，1239，1123，856，784；¹H NMR(CDCl₃)δ＝3.36(4H，t)，3.78(4H，t)，5.39(1H，d)，6.43(1H，d)，7.04-7.16(2H，m)，7.55-7.65(2H，m)；HRMS(EI)m/z 275.0946[M⁺，C₁₅H₁₄O₃NF的计算值275.0958]，275，247，210，182，120，86；UV：λ_max(MeOH)＝247nm；计算值C₁₀H₇O₂F.0.3CH₂Cl₂：C，61.1；H，4.9；N，4.7。实测值：C，61.4；H，4.4；N，4.7。

路线6

化合物293

(a)1-羟基-2-萘甲酸甲酯

由1-羟基-2-萘甲酸(9.4g，50mmol)制备，得到2.85g(14mmol，28％收率)米色固体：mp 78-79℃。IR(KBr)：3051；2953；1662；1635；1438；1336；772cm^-1。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ3.91(3H，s)；7.19(1H，d，J＝9Hz)；7.48(2H，m)；7.68(2H，d，J＝9Hz)；8.33(1H，d，J＝8Hz)；11.88(1H，s)。EIMS m/z＝202(M+)；170；114。

(b)1-(1-羟基萘-2-基)-3-(吗啉-4-基)-丙烷-1，3-二酮。

由1-羟基-2-萘甲酸甲酯(2.28g，11.3mmol)制备，得到2.49g(8.3mmol，74％收率)米色粉末状标题化合物。mp 128-130℃。IR(KBr)1658；1620；1223；1114；804cm^-1。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ3.61(4H，m)；3.72(4H，m)；4.50(2H，s)；7.49(1H，d，8.9Hz)；7.72(1H，dt，J＝1.2Hz，7.5Hz)；7.85(1H，dt，J＝1.2Hz，8.2Hz)；7.92(1H，d，J＝8.9Hz)；8.03(1H，d，8.0Hz)；8.46(1H，d，8.2Hz)；13.72(1H，bs)。EIMS m/z＝299(M+)；212；170；87。

(c)7，8-苯并-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物293)

由1-(1-羟基萘-2-基)-3-(吗啉-4-基)-丙烷-1，3-二酮(2.4g，8.0mmol)制备，得到1.43g(5.1mmol，63％收率)白色晶体状所需化合物。mp 267-269℃。IR(KBr)1641；1626；1605；1509；1562；1420；1240；117；920cm^-1。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ3.74(4H，m)；3.91(4H，m)；5.79(2H，s)；7.88(1H，d，8.9Hz)；8.02(2H，m)；8.16(1H，m)，8.56(1H，m)。EIMS m/z＝281(M+)；224；196；170。

8-苯基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物294)

米色粉末(O.770g，2.51mmol，74％收率)：mp 183-185℃。IR(KBr)：3419；1621；1563；1414；1252；1119；990；755；700cm^-1。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ3.45(4H，m，吗啉)；3.74(4H，m，吗啉)；5.66(1H，s，色烯酮的3-H)；7.57(4H，m)；7.73(3H，m)；8.06(1H，m)。¹³C NMR(50MHz，d⁶-DMSO)644.8；65.5；86.4；123.5；124.4；125.1；128.4；128.8；129.7；130.2；133.5；136.0；150.4；162.5；175.4。EIMS m/z＝307(M+)；292；250；222；196；168；139。分析计算值C₁₉H₁₇NO₃·0.2H₂O：C，73.39；H，5.64；N，4.50。实测值：C，73.36；H，5.21；N，4.22。

2-哌啶-1-基-苯并[h]色烯-4-酮(化合物295)

浅褐色固体(0.034g，0.12mmol，32％收率)。mp 205-207℃。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ1.69(6H，s)；3.56(4H，s)；5.59(1H，s)；7.55(2H，m)；7.83(2H，q)；8.21(1H，d)；8.24(1H，m)。EIMS m/z＝279(M⁺)，224，170，127，114，87。分析计算值C₁₈H₁₇NO₂.0.1CH₂Cl₂：C，75.53；H，6.02；N，4.87。实测值：C，75.81；H，5.80；N，4.82。

2-(硫代吗啉-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物296)

橙色固体(0.39g，1.31mmol，46％收率)。mp 171-173℃。FT-IR 3087，2963，1642，1604，1562cm^-1。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ2.86(4H，m)；4.06(4H，m)；5.80(1H，s)；7.84(2H，m)；8.00(2H，q)；8.12(1H，m)；8.46(1H，m)；EIMS m/z＝297(M⁺)，224，170，127，114，87。分析计算值C₁₇H₁₅NO₂S.0.3CH₃COOC₂H₅：C，67.39；H，5.45；N，4.29。实测值：C，67.22；H，5.14；N，4.14。

化合物297

起始原料的合成

5，6，7，8-四氢-1-羟基-2-萘甲酸。

将5，6，7，8-四氢-1-萘酚(7.42g，50mmol)和碳酸钾(25.5g，185mmol)的混合物加入到位于不锈钢加压反应釜内的玻璃管中。向反应釜内通入CO₂至40巴然后加热至145℃。在3天的反应期间内，压力升高至60巴然后缓慢下降到20巴。冷却该反应高压气体罐且将固体产物溶于水(～500ml)和丙酮(～500ml)。将该混合物真空蒸发除去丙酮，然后用DCM(3×150ml)洗涤。水相用2M盐酸酸化得到白色混悬液。将其用DCM(4×250ml)萃取，然后用硫酸钠干燥并真空蒸发得到粗产物。用含水乙醇重结晶并在高真空下干燥得到8.64g(45mmol，90％收率)浅褐色粉末状标题化合物。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ1.81(4H，m)；2.67(2H，m)；2.81(2H，m)；6.73(1H，d)；7.61(1H，d)；11.78(1H，bs)。EIMS m/z＝192(M+)；174；146

7，8，9，10-四氢苯并[h]-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物297)

米色粉末：mp 220-222℃。IR(KBr)：1628；1592；1561；1246；1116；790cm^-1。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ1.87(4H，m)；2.90(4H，m)；3.59(4H，m)；3.82(4H，m)；5.56(1H，s)；7.17(1H，d)；7.72(1H，d)。EIMS m/z＝285(M+)；270；228；200；175；146。分析计算值C₁₇H₁₉NO₃：C，71.56；H，6.71；N，4.91。实测值：C，71.49；H，6.76；N，4.83。

化合物298

合成该化合物的另一步骤(a)

5-溴-2-羟基苯甲酸甲酯

按照一般方法A由5-溴-2-羟基苯甲酸(3.26g，15mmol)制备，得到2.45g(10.6mmol，71％收率)米色粉末。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ3.89(3H，s，CH₃)；6.81(1H，d，J＝8.8Hz，3-H)；7.46(1H，dd，J＝8.8，2.5Hz，4-H)；7.89(1H，d，J＝2.5Hz，6-H)；10.62(1H，s，OH)。

2-羟基-5-苯基苯甲酸甲酯

将苯基硼酸(1.34g，11.0mmol)和5-溴-2-羟基苯甲酸甲酯(2.42g，10.5mmol)在丙酮(25ml)中的溶液用水(30ml)处理，然后碳酸钾(3.77g，27.3mmol)处理且最后用醋酸钯(II)(0.16g，0.7mmol)处理。加入钯之后，该反应混合物迅速变为深色。将该反应混合物加热至回流并搅拌6小时。冷却该深色混合物后，加入醚(40ml)，剧烈搅拌且倾析。再重复4次这种萃取过程。将醚萃取液用硫酸钠干燥并且在真空中蒸发得到黄色液体。将粗产物溶于汽油并加载到硅胶闪式柱上。将该柱用汽油洗脱，再用含5-10％乙酸乙酯的汽油洗脱。将收集的第二种产物真空蒸发然后用汽油重结晶得到白色结晶状固体(1.35g，5.90mmol，56％收率)。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ4.05(3H，s)；7.20(1H，m)；7.50-7.58(3H，m)；7.74(2H，m)；7.97(1H，m)；8.13(1H，m)；10.67(1H，s，OH)。

2-(吗啉-4-基)-6-苯基色烯-4-酮(化合物298)

米色粉末：mp 218-220℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.66(4H，m)；3.85(4H，m)；5.68(1H，s，3-H)；7.57(3H，m)；7.72(1H，d，8-H)；7.83(2H，m)；8.08(1H，dd，7-H)；8.24(1H，d，5-H)。EIMS m/z＝307(M+)；196；168。IR(KBr)：1611；1558；1428；1245；1119；768cm^-1。分析计算值C₁₉H₁₇NO₃·0.2H₂O：C，73.39；H，5.64；N，4.50。实测值：C，73.41；H，5.45；N，4.28。

7-(2，6-二氯苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物299)

米色粉末。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ3.62(4H，m)；3.82(4H，m)；5.44(2H，s)；5.55(1H，s)；7.13(1H，dd，J＝2.4，8.8Hz)；7.43(1H，d，J＝2.4Hz)；7.57-7.73(3H，m)；7.94(1H，d，J＝8.8Hz)

2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物300)

白色粉末。mp 143℃。IR：(KBr)/(cm^-1)：3067，3035，2960，1620，1555，1410，1252，1122，1068，770。¹H NMR：δ(d₆-DMSO)：3.19(4H，t，J＝4.5，CH₂N)；3.87(4H，t，J＝4.5，CH₂O)；5.67(1H，s，H-4)；7.26(2H，m，Ar-H)；7.49(2H，m，Ar-H)。HRMS m/z(EI)：231.0890(M⁺，C₁₃H₁₃NO₃的计算值231.0895)，214，202，172，145，118，101，89，77。分析计算值C₁₃H₁₃NO₃：C，67.52；H，5.67；N，6.06。实测值：C，67.28；H，5.43；N，5.81。

2-吗啉-苯并<g>-色烯-4-酮(化合物301)

浅褐色固体。mp 219℃。IR(KBr)/(cm^-1)：3048，2906，2869，1598，1569，1464，1424，1356，1252，1118，791。¹H NMR：δ(d₆-DMSO)：3.60(4H，t，J＝4.5，CH₂N)；3.88(4H，t，J＝4.5，CH₂O)；5.54(1H，s，H-4)；7.55(1H，m，Ar-H)；7.74(1H，m，Ar-H)；8.04(1H，m，Ar-H)；8.74(1H，m，Ar-H)。HRMSm/z(EI)：281.1038(M⁺，C₁₇H₁₅NO₃的计算值281.1052)，224，196，170，142，127，114，98。分析计算值C₁₇H₁₅NO₃.0.25H₂O：C，71.43；H，5.25；N，4.90。实测值：C，71.37；H，5.04；N，4.85。

8-甲基-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物302)

橙色固体。mp 148℃。IR：(KBr)/(cm^-1)：3069，2963，2860，1629，1570，1411，1251，1118，778。¹H NMR：δ(d₆-DMSO)：2.51(3H，s，Me)；3.60(4H，t，J＝5，CH₂N)；3.85(4H，t，J＝5，CH₂O)；5.62(1H，s，H-4)；7.37(1H，m，Ar-H)；7.61(1H，m，Ar-H)；7.86(1H，m，Ar-H)。HRMS m/z(EI)：245.1052(M⁺，C₁₄H₁₅NO₃的计算值245.1052)，230，188，160，134，114，106，86，77。分析计算值C₁₄H₁₅NO₃.0.2H₂O：C，67.55；H，6.03；N，5.63。实测值：C，67.65；H，6.06；N，5.16。

8-甲氧基-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物303)

黄色固体。mp 165℃。IR：(KBr)/(cm^-1)：3085，2949，2857，1638，1599，1571，1411，1245，1116，773。¹H NMR：δ(d₆-DMSO)：3.51(4H，t，J＝4.5，CH₂N)；3.81(4H，t，J＝4.5，CH₂O)；3.91(3H，s，MeO)；5.48(1H，s，H-4)；7.06(1H，m，Ar-H)；7.22(1H，m，Ar-H)；7.6(1H，m，Ar-H)。HRMS m/z(EI)：261.0991(M⁺，C₁₄H₁₅NO₄的计算值261.1001)，204，151，122，114，107，92

7-甲氧基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物304)

米色粉末：mp 174-175℃。¹H NMR(200MHz，d⁶ -DMSO)δ3.57(4H，m)；3.81(4H，m)；3.94(3H，s)；5.50(1H，s)；7.03(1H，dd)；7.16(1H，dd)；7.90(1H，d)。¹³C NMR(50MHz，d⁶-DMSO)δ56.17；65.66；86.07；100.65；113.36；116.39；126.15；155.15；162.63；162.95；175.39 ESMS m/z＝261(M+)，204

化合物305和306

起始原料的合成

2，3-二羟基苯甲酸甲酯

由2，3-二羟基苯甲酸(1g，7.25mmol)制备，得到浅褐色固体(0.29g，1.73mmol，23％收率)；mp 81.1-81.9℃；Rf＝0.78(溶剂95％DCM：5％甲醇)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.35(1H，d，Ar4)，7.15(1H，d，Ar6)，6.85(1H，dd，Ar5)，4.00(3H，d，CH₃)。

2-羟基-3-三氟甲磺酰氧基-苯甲酸甲酯的制备

向2，3-二羟基苯甲酸甲酯(4.00g，23.80mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液中加入吡啶(0.96ml，11.9mmol)和二甲基氨基吡啶(0.07g，0.58mmol)。使该混合物冷却至0℃并用注射器滴加三氟甲磺酸酐(4.40ml，26.18mmol)。使该反应混合物升至室温且搅拌60小时。有机层用1M HCl(40ml)洗涤，干燥(Na₂SO₄)并真空浓缩至干。将该固体用乙酸乙酯重结晶得到白色晶体(2.62g，8.73mmol，37％收率)，mp 91.8-92.3℃；Rf＝0.89(溶剂；95％DCM：5％甲醇)；ES+(m/e)300.00(M+1)；HPLC保留时间＝7.47分钟(长时间)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.85(1H，d，Ar4)，7.45(1H，d，Ar6)，6.95(1H，t，Ar5)，4.00(3H，d，CH₃)

2-羟基-4-三氟甲磺酰氧基-苯甲酸甲酯的制备

如同2-羟基-3-三氟甲磺酰氧基-苯甲酸甲酯所述，由2，4-二羟基苯甲酸甲酯制备得到白色结晶固体。ES+(m/e)300.00(M+1)

(b)三氟甲磺酸2-羟基-3-(3-吗啉-4-基-3-氧代-丙酰基)-苯酯

由2-羟基-3-三氟甲磺酰氧基-苯甲酸甲酯(2.10g，7mmol)制备，得到浅褐色固体(1.10g，2.54mmol，36％收率)。ES+(m/e)398.25；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ7.85(1H，d，Ar4)，7.35(1H，d，Ar6)，6.90(1H，dd，Ar5)，4.05(2H，s，CH₂O)，3.50(8H，m，CH₂N，CH₂O)。

(c)三氟甲磺酸2-吗啉-4-基-4-氧代-4H-色烯-8-基酯(化合物305)

由三氟甲磺酸2-羟基-3-(3-吗啉-4-基-3-氧代-丙酰基)-苯基酯(0.91g，2.3mmol)制备，得到白色固体(0.25g，0.662mmol，28.79％收率)。mp177.8-178.9℃。Rf＝0.30(5％MeOH：95％DCM)。ES+(m/e)380.16(M+1)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ3.50(4H，m，CH₂N)；3.78(4H，m，CH₂O)；5.46(1H，s，Ar3)；7.40(2H，m，Ar6，7)；8.09(1H，m，Ar5)。

三氟甲磺酸2-吗啉-4-基-4-氧代-4H-色烯-7-基酯(化合物306)

由三氟甲磺酸3-羟基-4-(3-吗啉-4-基-3-氧代-丙酰基)-苯基酯(1.50g，3.80mmol)制备，得到白色固体(0.69g，1.83mmol，48％收率)。mp 143-145℃；ES+(m/e)＝380.21(M+1)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ3.45(4H，m，CH₂N)；δ3.77(4H，m，CH₂O)；δ5.36(1H，s，CH)；δ7.32(2H，m)；δ8.01(1H，m)。

其他衍生化反应

7-羟基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物307)

在氮气氛下，向7-(2，6-二氯苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(6.60g，16.2mmol)(299)和10％Pd/C(150mg)的混合物中加入甲醇(150ml)。该混悬液在氨气氛下搅拌40小时。用硅藻土过滤除去催化剂，用甲醇洗涤。真空蒸发溶剂得到米色固体。用新制催化剂处理，在氮气氛下重新悬浮在甲醇中并在氮气氛下继续搅拌72小时。经硅藻土过滤除去催化剂，用甲醇洗涤。将滤液真空蒸发并将粗产物用甲醇重结晶得到2.26g(9.1mmol，57％)白色固体状所需化合物。mp＞250℃(分解)。¹H NMR(200MHz，d₆-DMSO)δ3.78(4H，m)；3.86(4H，m)；6.15(1H，s)；7.05-7.13(2H，m)；7.93(1H，d)；11.3(1H，bs)。ESMS m/z＝247(M+)，190，105。

路线7a

利用合成路线7a合成的化合物的实例如下表所列。通过该路线合成的所有化合物的实例均以至少99％的纯度分离得到。

化合物	取代基	MwLC-MS
化合物	取代基	MwLC-MS	308	*-Br	310.24

(a)4-羟基-苯并[f]-色烯-2-硫酮。

从2-羟基-1-乙酰萘(3.72g，20.0mmol)制备，得到1.96g(8.6mmol，13％收率)，为黄色固体。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ6.97(1H，s)；7.73-7.90(3H，m)；8.20(1H，d)；8.40(1H，d)；9.43(1H，d)。EIMS m/z＝228(M+)；209；170；142；69。

4-羟基-苯并-[h]-色烯-2-硫酮

由1-羟基-2-乙酰萘(3.72g，20mmol)制备，得到1.09g(5.32mmol，29％收率)，为橙色晶体。mp 221-223℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ4.21(1H，bs)；6.89(1H，s)；7.91(2H，m)；7.99(2H，m)；8.18(1H，m)；8.56(1H，m)。

6-溴-4-羟基-色烯-2-硫酮

由5-溴-2-羟基苯乙酮(4.30g，20mmol)制备，得到黄色粉末(1.85g，7.20mmol，36％)；ES+(m/e)＝258(M⁺+1)

(b)2-(乙硫基)-苯并[f]-色烯-4-酮。

黄色结晶固体：mp 126-127℃。IR(KBr)1632；1437；815cm^-1。¹HNMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ1.48(3H，t，CH₂CH₃)；3.32(2H，q，CH₂CH₃)；6.62(1H，s，3-H)；7.73-7.91(3H，m)；8.19(1H，d)；8.41(1H，d)；10.01(1H，d)。EIMS m/z＝256(M+)；170；142。分析计算值C₁₅H₁₂O₂S·0.1H₂O：C，69.80；H，4.76。实测值：C，69.77；H，4.53

2-乙硫基-苯并-[h]-色烯-4-酮

浅褐色晶体(0.42g，2.85mmol，62％收率)。mp 116-117℃，¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ1.45(3H，t，J＝7.4Hz)；3.13(2H，q，J＝7.4Hz)；6.36(1H，s)；7.65(4H，m)；8.06(1H，m)；8.41(1H，m)

6-溴-2-乙硫基-色烯-4-酮

由6-溴-4-羟基-色烯-2-硫酮(0.57g，2.21mmol)、乙基碘(0.65ml，8mmol)和碳酸钾(0.35g，2.5mmol)制备得到黄色固体(0.40g，1.40mmol，63％)；ES+(m/e)＝287(M⁺+1)

(c)2-(吗啉-4-基)-苯并[f]-色烯-4-酮(化合物310)。

由2-(乙硫基)-苯并[f]-色烯-4-酮(0.512g，2.0mmol)制备。用甲醇重结晶得到0.238g(0.84mmol，42％收率)米色结晶固体：mp 213-214℃。IR(KBr)：2956；2861；1639；1601；1590；1567；1512；1420；1252；1246；1115；821cm^-1。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.64(4H，m)；3.86(4H，m)；5.78(1H，s，色烯酮3-H)；7.67-7.84(3H，m)；8.14(1H，d)；8.32(1H，d)；10.16(1H，d)。EIMS m/z＝281(M+)；253；224；196；170。

6-溴-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物308)

由6-溴-2-乙硫基-色烯-4-酮(0.375g，1.35mmol)和吗啉(0.54ml，6.25mmol)制备，得到浅黄色固体(.0354g，1.14mmol，84％)；m.p.147-149℃；ES+(m/e)＝310.24(M⁺+1)；(200MHz，CDCl₃)δ3.44(4H，m)；3.77(4H，m)；5.42(1H，s)；7.11(1H，d)；7.57(1H，dd)；8.20(1H，d)

2-(2，6-顺式-二甲基-吗啉-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物309)

米色固体(0.174g，.56mmol，56％)：m.p.211-212.5℃；ES+(m/e)310(M+1)；R_f＝0.30(5％甲醇/DCM)；¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.27(δH，d)；2.74(2H，t)；3.72(2H，m)；3.86(2H，d)；5.56(1H，s)；7.58(2H，m)；7.67(1H，d)；7.86(1H，m)；8.08(1H，d)；8.19(1H，m)

(d)2-哌嗪-1-基-苯并[h]色烯-4-酮(化合物311)

由2-乙硫基-苯并[h]色烯-4-酮(0.384g，1.5mmol)和哌嗪(1.29g，15mmol)制备。用乙酸乙酯重结晶得到米色固体(0.121g，0.43mmol，28％收率)。mp208-209℃。UVλ_max＝317.0，273.0，255.0，216.5nm(甲醇)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ3.01(4H，m)；3.55(4H，m)；5.57(1H，s)；7.56(2H，m)；7.66(1H，d)；7.85(1H，m)；8.08(1H，d)；8.21(1H，m)。EIMS m/z(EI⁺)：280(M⁺)，261，238，225，170，139。分析计算值C₁₇H₁₆N₂O₂.0.3H₂O：C，71.46；H，5.81；N，9.80。实测值：C，71.88；H，5.91；N，9.33。

2-(吡咯烷基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物312)

米色固体(0.104g，0.39mmol，26％收率)。mp 234-236℃。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.05(4H，m)；3.55(4H，m)；5.36(1H，s)；7.55(2H，m)；7.65(1H，d)；7.83(1H，m)；8.10(1H，d)；8.19(1H，m)。EIMS m/z(EI⁺)：265(M⁺)，210，196，170，114，95。分析计算值C₁₇H₁₅NO₂.0.28CH₂Cl₂：C，71.70；H，5.42；N，4.84。实测值：C，71.43；H，5.76；N，4.75。

2-(3-羟基甲基-哌啶-1-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物313)

米色固体(0.131g，0.42mmol，43％收率)。mp 209-210℃。UVλ_max＝319.0，284.0，274.0，254.0，217.0nm(甲醇)。FT-IR 3300，2924，2854，1640，1609，1559，1439cm^-1。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.30(1H，m)；1.79(4H，m)；3.14(2H，m)；3.51(1H，m)；3.65(1H，M)；3.98(1H，m)；4.14(1H，m)；5.64(1H，s)；7.49(2H，m)；7.60(1H，d)；7.77(1H，m)；8.02(1H，d)；8.17(1H，m)。EIMS m/z(EI⁺)：309(M⁺)，292，278，224，196，170，138，82，55。分析计算值C₁₉H₁₉NO₃.0.1H₂O：C，73.34；H，6.32；N，4.50。实测值：C，73.28；H，6.19；N，4.13。

2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物314)

白色固体(0.194g，0.66mmol，67％收率)。mp 184-185℃。UVλ_max＝316.0，272.0，254.5，218.0nm(甲醇)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ2.32(3H，s)；2.54(4H，t)；3.60(4H，t)；5.59(1H，s)；7.56(2H，m)；7.67(1H，d)；7.83(1H，m)；8.08(1H，d)；8.21(1H，m)。EIMS m/z(EI⁺)：294(M⁺)，237，224，210，196，170，139，123，70。分析计算值C₁₈H₁₈N₂O₂.1H₂O.0.1CH₃OH：C，68.85；H，6.52；N，8.88。实测值：C，68.63；H，6.45；N，8.57。

2-(3-羟基-吡咯烷-1-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物315)

白色固体(0.201g，0.72mmol，72％收率)。mp 256-257℃。UVλ_max＝318，283.5，273.0，253.0，215.0nm(甲醇)。¹H NMR(200MHz，DMSO)δ2.18(2H，m)；3.45(4H，m)；4.58(1H，m)；5.32(1H，m)；5.41(1H，s)；7.83(2H，m)；7.93(1H，d)；8.05(1H，d)；8.16(1H，m)；8.45(1H，m)。EIMS m/z(EI⁺)：281(M⁺)，264，236，224，210，196，181，170，139，114，67。分析计算值C₁₇H₁₅NO₃.0.2H₂O：C，71.67；H，5.45；N，4.92实测值：C，71.65；H，5.34；N，4.49。

2-[(四氢呋喃-2-基甲基)-氨基]-苯并[h]色烯-4-酮(化合物316)

米色结晶固体(0.107g，0.36mmol，37％收率)。mp 139-140℃。UVλ＝314.0，280.5，270.5，252.5，216.5nm(甲醇)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.65(1H，m)；1.91(3H，m)；3.14(2H，m)；3.21(1H，m)；3.38(1H，M)；3.81(2H，m)；4.11(1H，m)；5.40(1H，t)；5.47(1H，s)；7.54(2H，m)；7.65(1H，d)；7.82(1H，m)；8.08(1H，d)；8.24(1H，m)。EIMS m/z(EI⁺)：295(M⁺)，272，225，211，196，186，171，158，84，71。分析计算值C₁₈H₁₇NO₃.0.3H₂O：C，71.85；H，5.90；N，4.66。实测值：C，72.12；H，5.80；N，4.33

2-(2-甲基-吗啉-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物317)

2-甲基吗啉的合成

参考文献：Bettoni等，Tetrahedron，1980，36，409-415

(i)1-(2-羟基-乙基氨基)-丙烷-2-醇

在0℃下将环氧丙烷(2.32g，0.04mmol)滴加到乙醇胺(10.0g，0.16mmol)的水(50ml)溶液中，并且将该溶液在室温下搅拌5小时。通过真空蒸发除去水得到无色油，随后将其减压蒸馏得到无色油状的标题化合物(3.61g，30.34mmol，76％)。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.15(3H，d)；2.46(2H，m)；2.71(2H，t)；3.62(2H，t)；3.90(1H，m)；4.10(3H，s)。

(ii)甲苯-4-磺酸2-[(2-羟基-丙基)-(甲苯-4-磺酰基)-氨基]-乙基酯

在0℃下将甲苯磺酰氯(11.60g，60.80mmol)分成小份加入到搅拌中的1-(2-羟基-乙基氨基)-丙烷-2-醇(3.60g，30.25mmol)的无水吡啶溶液中。将反应液在室温下搅拌24小时然后倾到在冰-水(200ml)上。将该混合物萃取到DCM(100ml)中。有机提取物用2N HCl、水洗涤，真空蒸发得到褐色残余物，该残余物不经进一步纯化直接使用。

(iii)2-甲基-4-(甲苯-4-磺酰基)-吗啉

将悬浮在甲醇(15ml)中的氢氧化钠(0.91g，0.02mol)加入到搅拌中的甲苯-4-磺酸2-[(2-羟基-丙基)-(甲苯-4-磺酰基)-氨基]-乙基酯(9.69g，0.02mol)的DCM(15ml)溶液中。1小时后，将水(50ml)加入到该溶液中。收集有机层，用硫酸钠干燥并真空蒸发得到绿色油状残余物。该残余物通过色谱分离纯化(20％乙酸乙酯：汽油)得到标题化合物，为白色固体。(1.70g，6.66mmol，33％)。

(iv)2-甲基吗啉

将2-甲基-4-(甲苯-4-磺酰基)-吗啉(1.65g，6.51mmol)溶解在热戊醇(30ml)中。将该溶液冷却至室温并分小份加入钠(1.49g，65mmol)。将该反应混合物剧烈搅拌且加热至回流3小时。冷却后，加入水(50ml)。分离两层，将水层用***萃取，并将***层再用2N HCl萃取。醇溶液用2N HCl萃取。合并的酸性溶液随后通过加入碳酸氢钠使之呈碱性，然后连续用***萃取。将***真空蒸发得到无色油状标题化合物(0.517g，5.11mmol，79％)。¹HNMR(200MHz，CDCl₃)δ1.15(3H，d)；2.74(5H，m)；3.81(4H，m)。

最终的化合物(化合物317)

米色结晶固体(O.085g，0.29mmol，20％收率)。mp 181-183℃。UVλ＝214.4，217.4(λ_max)，255.0，272.8，281.8，300.8，315.2nm(甲醇)。FT-IR(cm^-1)＝3174，2976，2860，1614，1557，1388，1245，1086，795，747。¹H NMR(200MHz，CDCl₃)δ1.25(3H，d)；2.81(1H，t)；3.16(1H，dt)；3.71(2H，m)；3.83(2H，t)；4.02(1H，m)；5.55(1H，s)；7.55(2H，m)；7.66(1H，d)；7.83(1H，d)；8.06(1H，d)；8.17(1H，d)。ESMS m/e＝296(M+1)。计算值C₁₈H₁₇NO₃.0.1H₂O：C，72.76；H，5.83；N，4.71。实测值：C，72.74；H，5.77；N，4.60。

(f)2-(4-羟基甲基-哌啶-1-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物318)

由(苯并-[h]-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂和4-哌啶甲醇(0.0027g，0.036mmol)制备。所得产物＝0.0039g。m/z(ES⁺)：310(M+1)5％甲醇/DCM，R_f＝0.21

2-[(2-羟基-2-苯基-乙基)-甲基-氨基]苯并[h]色烯-4-酮(化合物319)m/z(ES⁺)：346(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.30

2-(3-二乙基氨基-丙基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物320)m/z(ES⁺)：325(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.19

2-((S)-2-羟基甲基-吡咯烷-1-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物321)m/z(ES⁺)：296(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.29

2-(3-甲氧基-丙基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物322)m/z(ES⁺)：284(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.32

2-(1-苄基-哌啶-4-基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物323)m/z(ES+)：385(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.17

2-(环戊基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物324)m/z(ES⁺)：280(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.33

2-(2，2-二甲氧基-乙基氨基)苯并[h]色烯-4-酮(化合物325)m/z(ES⁺)：300(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.29

2-丁基氨基-苯并[h]色烯-4-酮(化合物326)m/z(ES⁺)：268(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.30

2-(2-三氟甲基-苄基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物327)m/z(ES⁺)：370(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.31

2-(3-羟基-丙基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物328)m/z(ES⁺)：270(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.12

2-(2-羟基-2-苯基-乙基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物329)m/z(ES⁺)：332(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.22

2-(噻唑烷-3-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物330)m/z(ES⁺)：284(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.35

2-(2-羟基-丙基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物331)m/z(ES⁺)：270(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.15

2-[(2-羟基-乙基)甲基-氨基]-苯并[h]色烯-4-酮(化合物332)m/z(ES⁺)：270(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.19

2-(乙基-羟基甲基-氨基)苯并[h]色烯-4-酮(化合物333)m/z(ES⁺)：284(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.25

2-(二丁基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物334)m/z(ES⁺)：324(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.26

2-(2-甲氧基-乙基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物335)m/z(ES⁺)：270(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.10

2-(异丙基氨基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物336)m/z(ES⁺)：254(M+1)；5％甲醇/DCM，R_f＝0.27

路线7b

2-羟基-4-(4-甲氧基苄氧基)-苯乙酮。

将2，4-二羟基苯乙酮(7.30g，48mmol)、碳酸钾(7.30g，53mmol)和碘化钠(0.75g，5.0mmol)在无水乙腈(60ml)中的混合物用4-甲氧基苄基氯(6.5ml，48mmol)处理。将该混合物加热至65℃并搅拌16小时。该混合物用1M盐酸(120ml)处理并萃取到乙酸乙酯(120ml)中。将该乙酸乙酯萃取液用1M盐酸(100ml)和盐水(100ml)洗涤，用硫酸钠干燥并真空蒸发。在***中剧烈搅拌粗产物并过滤得到6.31g(23.4mmol，49％收率)淡棕色粉末状标题化合物。

(a)4-羟基-7-(4-甲氧基苄氧基)-色烯-2-硫酮。

由2-羟基-4-(4-甲氧基苄氧基)-苯乙酮(5.44g，20mmol)制备得到2.04g(6.5mmol，32％收率)，为黄色粉末。

(e)S-(7-(羟基)-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂。

由Merrifield树脂(1％交联，1.2mmol/g)(0.70g，0.84mmol)和4-羟基-7-(4-甲氧基苄氧基)-色烯-2-硫酮(0.70g，2.2mmol)在DMF(3ml)中的溶液制备。

(g，随后是f(i)(ii))

7-(苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物337)

由S-(7-(羟基)-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂(0.030g)制备得到0.0014g(0.004mmol)产物，为粗品残余物。

7-(4-氰基苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物338)

通过LC-MS估计纯度为88％；ESMS m/z＝363(M+1)⁺。

4-(2-(吗啉-4-基)-4-氧代-4H-色烯-7-基氧基甲基)-苯甲酸甲酯(化合物339)

通过LC-MS估计纯度为74％；ESMS m/z＝396(M+1)⁺。

3-(2-(吗啉-4-基)-4-氧代-4H-色烯-7-基氧基甲基)-苯甲酸甲酯(化合物340)

通过LC-MS估计纯度为82％；ESMS m/z＝396(M+1)⁺。

7-(3-氯苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物341)

通过LC-MS估计纯度为90％；ESMS m/z＝374，372(M+1)⁺。

7-(3-甲基苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物342)

通过LC-MS估计纯度为86％；ESMS m/z＝352(M+1)⁺。

利用路线7b的变化方案合成的化合物的实例如下(其中用2，5-二羟基苯乙酮原料代替2，4-二羟基苯乙酮)：

6-羟基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物343)

将S-(6-(羟基)-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂(0.030g，＜0.036mmol)在DCM(2ml)中溶胀。振荡10分钟后，将该混合物用间氯过苯甲酸(0.2g，1.1mmol)处理。将该混合物在室温下振荡3小时然后过滤。将该树脂依次用DCM、甲醇、DCM洗涤且重新悬浮在DCM(2ml)中。振荡15分钟后，该混合物用吗啉(0.005ml，0.05mmol)在DCM(2ml)中的溶液处理。将该混合物在室温下振荡16小时然后过滤，树脂用DCM和甲醇洗涤。将该滤液真空蒸发得到粗的标题化合物。该产物不经进一步纯化就用于LC-MS分析。LC-MS估计的纯度＞95％；ESMS m/z＝248(M+1)⁺。

((g)，随后是(f)(i)(ii))

6-(4-氰基苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物344)

由S-(6-(羟基)-4-氧代-4H-色烯-2-基)-甲硫基聚苯乙烯-二乙烯基苯树脂(0.030g)制备得到粗残余物。通过LC-MS估计纯度为80％；ESMS m/z＝363(M+1)⁺。

N-[3-(2-(吗啉-4-基)-4-氧代-4H-色烯-6-基氧基)-丙基]-邻苯二甲酰亚胺(化合物345)

通过LC-MS估计纯度为66％；ESMS m/z＝435(M+1)⁺。

路线7b(i)

利用合成路线7b(i)得到的化合物的实例如下表所列。

化合物	R	R取代基	MwLC-MS
化合物	R	R取代基	MwLC-MS	346347348349	苯基苯基苯基苯基	4-Br4-t-Bu4-OMe-	432394382352

350351

吡啶-4-基吡啶-2-基

N-O-N-O-

369355

化合物	R	R取代基	MwLC-MS
化合物	R	R取代基	MwLC-MS	352353354355356	苯基苯基萘-2-基苯基乙基	2-Cl4-Cl---	404404418368320

化合物	R	R取代基	MwLC-MS
化合物	R	R取代基	MwLC-MS	357358359360361362	苯基苯基苯基苯基苯基苯基	3-OMe3-N(＝O)O-3-F3，4-二-F4-Me4-t-Bu	368383356374352394

363364365

苯基吡啶-3-基吡啶-4-基

3-BrN-O-N-O-

417355355

化合物	R	R取代基	MwLC-MS
化合物	R	R取代基	MwLC-MS	366367368	苯基乙基甲基	--苯基	416368430

路线7c

利用合成路线7c合成的化合物的实例如下表所列。

路线8

7-(苄氧基)-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物337)

由苄基溴(0.25ml，2.0mmo1)制备。用甲醇重结晶得到0.098g(0.29mmol，58％收率)白色晶体：mp 170-172℃。UVλ_max＝258.0，310.5nm(甲醇)。¹HNMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.59(4H，m)；3.82(4H，m)；5.31(2H，s，CH₂)；5.52(1H，S，3-H)；7.13(1H，dd，J＝2.3，8.7Hz，6-H)；7.28(1H，d，J＝2.3Hz，8-H)；7.45-7.60(5H，m)；7.91(1H，d，J＝8.7Hz，5-H)。ESMS m/z＝338(M+)，179。分析计算值C₂₀H₁₉NO₄：C，71.20；H，5.68；N，4.15。实测值：C，71.15；H，5.63；N，3.85。

7-(4-氟苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物414)

白色晶体：mp 201-203℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.60(4H，m)；3.82(4H，m)；5.29(2H，s，CH₂)；5.52(1H，s，3-H)；7.13(1H，m，6-H)；7.29(1H，m)；7.34(2H，m)；7.64(2H，m，8-H)；7.92(1H，m，5-H)。ESMS m/z＝344(M+)

7-(4-氯苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物415)

白色晶体：分解＞185℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.60(4H，m)；3.82(4H，m)；5.31(2H，s，CH₂)；5.52(1H，s，3-H)；7.13(1H，dd，J＝2.2，8.7Hz，6-H)；7.28(1H，d，J＝2.2Hz，8-H)；7.59-7.71(4H，m)；7.92(1H，d，J＝8.7Hz，5-H)。ESMS m/z＝371，373(M+)

7-(4-溴苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物416)

白色晶体：mp 221-222℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.60(4H，m)；3.82(4H，m)；5.30(2H，s，CH₂)；5.52(1H，s，3-H)；7.13(1H，dd，J＝2.0，8.7Hz，6-H)；7.27(1H，d，J＝2.0Hz，8-H)；7.53(2H，d，J＝8.3Hz)；7.72(2H，d，J＝8.3Hz)；7.92(1H，d，J＝8.7Hz，5-H)。ESMS m/z＝419，417(M+)

7-(2-氯苄氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物417)

白色晶体：mp 167-168℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.61(4H，m)；3.81(4H，m)；5.36(2H，s，CH₂)；5.54(1H，s，3-H)；7.15(1H，dd，J＝2.3，8.7Hz，6-H)；7.35(1H，d，J＝2.3Hz，8-H)；7.50-7.76(4H，m)；7.93(1H，d，J＝8.7Hz，5-H)。ESMS m/z＝373，371(M+)

7-(萘-2-基甲氧基)-2-吗啉-4-基-色烯-4-酮(化合物418)

白色晶体：mp 263-264℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.60(4H，m)；3.81(4H，m)；5.49(2H，s，CH₂)；5.53(1H，s，3-H)；7.19(1H，dd，J＝2.2，8.7Hz，6-H)；7.34(1H，d，J＝2.2Hz，8-H)；7.62-7.73(3H，m)；7.92(1H，d，J＝8.7Hz，5-H)；8.02-8.11(4H，m)。ESMS m/z＝387(M+)

7-环己基甲氧基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物419)

白色晶体：mp 187-188℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ1.16(5H，m，环己基)；1.87(6H，m，环己基)；3.60(4H，m，吗啉)；3.80(4H，m，吗啉)；3.97(2H，s，CH₂)；5.50(1H，s，3-H)；7.12(1H，dd，J＝2.1，8.7Hz，6-H)；7.18(1H，d，J＝2.1Hz，8-H)；7.88(1H，d，J＝8.7Hz，5-H)。MS(ES⁺)m/z＝344(M+)

7-丙氧基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物420)

白色晶体：分解＞115℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ1.08(3H，t，CH₂CH₂CH₃)；1.86(2H，m，CH₂CH₂CH₃)；3.60(4H，m)；3.81(4H，m)；4.12(2H，t，CH₂CH₂CH₃)；5.51(1H，s，3-H)；7.04(1H，dd，J＝2.0，8.7Hz，6-H)；7.18(1H，d，J＝2.0Hz，8-H)；7.89(1H，d，J＝8.7Hz，5-H)。ESMS m/z＝290(M+)

N-[2-(2-(吗啉-4-基)-4-氧代-4H-色烯-7-基氧基)-乙基]-邻苯二甲酰亚胺(化合物421)

白色晶体：分解＞230℃。ESMS m/z＝421(M+)

N-[3-(2-(吗啉-4-基)-4-氧代-4H-色烯-7-基氧基)-丙基]-邻苯二甲酰亚胺(化合物422)

白色晶体：mp 210-211℃。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ2.60(2H，m，NCH₂CH₂CH₂O)；3.58(4H，m，吗啉)；3.81(4H，m，吗啉)；3.89(2H，m，NCH₂CH₂CH₂O)；4.22(2H，m，NCH₂CH₂CH₂O)；5.50(1H，s，3-H)；6.86(1H，dd，J＝2.0，8.6Hz，6-H)；7.03(1H，d，J＝2.0Hz，8-H)；7.83(1H，d，J＝8.6Hz，5-H)；7.95(4H，m，phth-H4)。ESMS m/z＝435(M+)。

路线9

7-苯甲酰氧基-2-(吗啉-4-基)-色烯-4-酮(化合物423)

由苯甲酰氯(0.13ml，1.1ml)制备。用乙酸乙酯重结晶得到0.19g(0.55mmol，55％)白色晶体：mp 204-206℃。分析计算值C₂₀H₁₇NO₅：C，68.37；H，4.88；N，3.99。实测值：C，68.14；H，4.87；N，3.73。UV_max＝258.0，311.0nm(甲醇)。¹H NMR(200MHz，d⁶-DMSO)δ3.64(4H，m)；3.83(4H，m)；5.65(1H，s，3-H)；7.45(1H，m)；7.74(3H，m)；8.87(1H，m)；8.09(1H，m)；8.26(2H，m).MS(ES)m/z＝352(M⁺)；179。

其他合成详述

2-(2，3-二氢-苯并[1，4]嗪-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮(化合物424)

3，4-二氢-2H-苯并[1，4]嗪的合成：

a)N-(叔丁氧基羰基)-2-氨基苯酚

将2-氨基苯酚(0.545g，5mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.86g，10mmol)在无水THF(20ml)中的混合物在室温下搅拌12小时。浓缩和水解之后，将水层用EtOAc(3×30ml)萃取。合并有机层并用MgSO₄干燥，然后减压除去溶剂。将粗产物通过结晶纯化(汽油/醚8/2)。得到白色固体状纯化合物(0.839g，86％收率)。m.p＝145℃；R_f＝0.28(汽油/醚8/2)；LCMS m/z 196([M+1]⁺)；¹H NMR(200MHz，CDCl₃)：δ1.61(9H，s)；6.65(1H，bs)；6.48-7.08(4H，m)；8.16(1H，bs)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ29.9(3C)；83.7；120.3；122.5；122.9；127.1；127.3；148.9；156.7.IR(薄膜)：3280；1688；1146cm^-1。

b)N-(叔丁氧基羰基)-2，3-二氢-苯并[1，4]嗪：

将含有N-(叔丁氧基羰基)-2-氨基苯酚(0.722g，3.69mmol)、碳酸钾(10.2g，73.8mmol)和1，2-二溴丁烷(2.54ml，29.6mmol)的干燥丙酮(100ml)溶液回流18小时。用TLC(汽油/醚8/2)监测反应。冷却后，将该混合物经硅藻土过滤。浓缩和水解后，水层用EtOAc(3×40ml)萃取，用MgSO₄干燥并减压下除去溶剂。将粗产物通过快速柱色谱纯化(汽油/EtOAc 95/5)得到白色固体状标题化合物(0.70g，82％)。m.p＝78-79℃；R_f＝0.44(汽油/醚8/2)；LCMS m/z 236([M+1]⁺)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ1.59(9H，s)；3.87(4H，m)；4.26(4H，m)；6.86-7.02(4H，m)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ27.4(3C)；41.1；64.6(2C)；80.6(2C)；116.0；119.2；122.6；123.4；125.2；144.9；151.6.IR(薄膜)：2975；1696；1494；1143cm^-1。

参考文献：Kubick等，Eur.J.Org.Chem.2001，311-312

c)3，4-二氢-2H-苯并[1，4]嗪：

向含有N-(叔丁氧基羰基)-2，3-二氢-苯并[1，4]嗪(0.438，1.86mmol)的二氯甲烷(10ml)溶液中在0℃下缓慢加入三氟乙酸(1.0ml，7.44mmol)。将反应混合物在该温度下搅拌5小时，然后真空中除去溶剂。将粗产物溶解在EtOAc(15ml)中并依次用10％Na₂CO₃溶液和水洗涤。有机层用MgSO₄干燥并减压下除去溶剂。得到褐色油状标题化合物(0.245g，98％)。R_f＝0.31(汽油/醚5/5)；LCMS m/z 136([M+1]⁺)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ3.43(4H，m)；3.54(1H，s)；4.27(4H，m)；6.60-6.82(4H，m)；¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)：δ43.4；67.7；118.1；119.2；121.3；123.7；136.1；146.6.IR(薄膜)：3375；1498；741cm^-1。

2-(2，3-二氢-苯并[1，4]嗪-4-基)-苯并[h]色烯-4-酮

向含有3，4-二氢-2H-苯并[1，4]嗪(0.324g，1.6mmol)的无水THF(5ml)溶液中在0℃下滴加n-BuLi(1.24ml，3.12mmol，2.5N)并同时将温度保持在0-10℃。0℃下搅拌30分钟后，将砜(0.436g，1.6mmol)加入到THF溶液(10ml)中。使该反应混合物缓慢升至室温并搅拌20小时(TLC，***)。将该混合物倾入10ml的2N HCl(10ml)中并用二氯甲烷(3×20ml)萃取。合并有机层，用MgSO₄干燥并在减压下浓缩。粗产物通过制备HPLC纯化得到黄色固体状标题化合物(2mg)。

LCMS m/z 330([M+1]⁺)；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)：δ4.01(2H，m，CH₂N)，4.35(2H，m，CH₂O)，6.06(1H，s)，6.85-7.05(4H，m，ArH)，7.44-8.28(6H，m，ArH)。

参考文献：Wynberg等，J.Org.Chem.1993，58，5101-5106

生物学实施例

DNA-PK抑制作用

为了评价所述化合物对DNA-PK的体外抑制作用，利用下列试验测定IC₅₀值。

将分离自海拉细胞核提取物的哺乳动物DNA-PK(Gell，D.和JacksonS.P.，Nucleic Acids Res.27：3494-3502(1999))用Z缓冲液(25mM Hepes(Sigma)；12.5mM MgCl₂(Sigma)；50mM KCl(Sigma)；1mM DTT(Sigma)；10％甘油(Sigma)；0.1％NP-40(Sigma)；pH 7.4)在聚丙烯96孔平板中温育并改变抑制剂的加入浓度。所有化合物用DMSO稀释得到介于10-0.001μM的最终试验浓度，并且DMSO在每孔中的终浓度为1％。每孔的总试验体积为40μl。

30℃下温育10分钟后，通过加入体积为10μl的Na-ATP(最终浓度为50μM)、³³P-γATP和30mer双链DNA寡核苷酸(10ng/μl)引发该反应。设计的阳性和阴性反应孔与化合物孔(未知)并存从而计算％酶活性。随后将平板振荡2分钟并在30℃下温育45分钟。

温育后，通过向各孔内加入50μl30％乙酸终止反应。然后将平板振荡5分钟并将各平板的内容物(每孔80μl)转移到含有P81-磷酸纤维素膜(商标)(Whatman，UK)的96孔polyfiltronics过滤平板中。将溶液通过膜抽真空并将各孔的膜用300μl的15％乙酸洗涤4次。然后将各孔的膜风干并向各孔加入20μl闪烁剂。

将该平板转移到TopCount NXT(商标)(Packard，UK)中进行闪烁计数。记录的值是各孔在1分钟的计数时间后每分钟的计数(cpm)。

各化合物的酶活性随后利用下面的公式计算：

结果以IC₅₀值(50％的酶活性被抑制时的浓度)的形式详细记载于下表1中。这些结果是用一系列不同的浓度测定的，一般是从10μM至0.01μM。该IC₅₀值用作确定增加的化合物效力的对比值。LY294002的IC₅₀值为1.5μM。

增效比例

增效比例(ER)是2戈瑞放射后由DNA-PK抑制剂引起的细胞生长抑制作用相对于未处理对照细胞的增效比例。DNA-PK抑制剂是以25微摩尔的固定浓度使用。放射是由Faxitron 43855D X射线***以1戈瑞/分钟的放射剂量率提供。通过下面的公式计算在2戈瑞放射下的增效比例：

利用磺基罗丹明B(SRB)实验(Skehan，P.，Storung，R.，Scudiero，R.，Monks，A.，McMahon，J.，Vistica，D.，Warren，J.T.，Bokesch，H.，Kenny，S.和Boyd，M.R.(1990)，新的用于抗癌药物筛选的比色细胞毒性实验，J.Natl.Cancer Inst.82：1107-1112)评估细胞生长。将400个海拉细胞接种在平底48孔微量滴定平板的容积为200μl的各孔内并且在37℃下温育6小时。将细胞重新置于单纯培养基中或含有终浓度为25μM的DNA-PK抑制剂的培养基中。允许细胞继续生长1小时，然后进行照射或模拟照射。未经DNA-PK抑制剂处理或未辐射的细胞用作对照。用DNA-PK抑制剂单独处理的细胞用来评估该DNA-PK抑制剂的生长抑制作用。

继续静置细胞16小时，此后更换培养基且允许该细胞在37℃下继续生长6天。然后除去培养基并用200μl冰冷的10％(w/v)三氯乙酸固定细胞。平板在4℃保温20分钟然后用水洗涤4次。各孔的细胞进而用200μl在1％乙酸中的0.4％(w/v)SRB中染色20分钟，此后用1％乙酸洗涤4次。室温下使平板干燥2小时。通过向各孔中加入100μl 10mM Tris Base溶解染色细胞上的染料。将平板轻轻振荡并在室温下放置30分钟，然后在564nm下在Microquant微量滴定平板读数器上测定光密度。

结果详细描述在下表2中。LY294002表现出1.09的增效比例。

PI 3-激酶抑制作用

为了评估所述化合物对PI 3-激酶的体外抑制作用，采用下面的实验测定IC₅₀值。

按照文献中的描述(Wymann，M.T等，(1996)“通过共价修饰参与磷酸转移反应的残基Lys-802进行磷酸肌醇3-激酶的Wortmannin钝化”Mol.Cell Biol.16：1722-1733)由Sf 9昆虫细胞利用GSH-琼脂糖亲和色谱法提纯杆状病毒重组体GST融合的PI 3-激酶(p110α/p85α)。将PI 3-激酶(1μl)用反应缓冲液(89μl 50mM Hepes pH7.5，150mM NaCl，0.1mM原钒酸钠，含有20μg的磷脂酰肌醇)稀释且改变所加抑制剂化合物的浓度。将所有化合物在DMSO中稀释达到100-0.1μM的终浓度，并且DMSO的终浓度为1％。在37℃下温育10分钟后，通过加入10μl的50μM Na-ATP，20mMMgCl₂和2.5μCi ³³p-γATP引发反应。反应在37℃下继续保温20分钟，之后加入400μl氯仿/甲醇(1∶1)终止该温育。加入200μl的1M HCl酸化该反应，此后通过在10,000g下离心30秒分离有机相和水相。将有机相转移到新试管内并用150μl的1M盐酸/甲醇(1∶1)洗涤2次，弃去水相。将洗涤后的反应产物置于含有100μl闪烁液的白色96孔平板中且转移到TopCountNXT中进行闪烁计数。在计时1分钟后，记录各反应的每分钟闪烁数。化合物对PI 3-激酶活性的抑制作用按照以上关于DNA-PK试验的描述计算。

利用下面的公式测定选择性：

Δ (DNA - PK / PI 3 - K) = \frac{{IC}_{50} (PI 3 - K)}{{IC}_{50} (DNA - PK)}

结果详细描述在表3中。294的IC₅₀为1.5μM，并且Δ(DNA-PK/PI 3-K)为1。

ATM抑制作用

为了评价所述化合物对ATM的体外抑制作用，利用下面的试验测定IC₅₀值。

用兔多克隆抗血清由海拉细胞核提取物免疫沉淀ATM蛋白得到人ATM蛋白的C-末端～500氨基酸残基。按照Banin，S.等在(1998)“由ATM对DNA损伤产生响应而引起的p53磷酸化作用增强”Science 281：1674-1677中所述方法进行该免疫沉淀。将10μl存在于缓冲液C(50mMHepes，pH 7.4，6mM MgCl₂，150mM NaCl，0.1mM原钒酸钠，4mM MnCl₂，0.1mM二硫苏糖醇，10％甘油)中的免疫沉淀的ATM加入到存在于V型底96孔聚丙烯平板内的32.5μl含1μATM底物GSTp53N66的缓冲液C中。GSTp53N66底物是与谷胱甘肽S-转移酶融合的人野生型p53的氨基末端66个氨基酸残基。ATM在残基丝氨酸15上磷酸化p53(Banin，S.等(1998)“由ATM对DNA损伤产生响应而引起的p53磷酸化作用增强”，Science281：1674-1677)。改变加入抑制剂的浓度。将所有化合物在DMSO中稀释并达到100-1μM的最终试验浓度，并且DMSO的终浓度是1％。在37℃下温育10分钟后，加入5μl的50μM Na-ATP来引发反应。37℃下振荡1小时后，将150μl的磷酸盐缓冲盐水(PBS)加入到该反应中并将平板在1500rpm下离心10分钟。然后将5μl反应液转移到含有45μl PBS的96孔不透明白色平板中以使GSTp53N66底物结合到平板孔中。覆盖平板，在室温下温育1小时并同时振荡，之后弃去内容物。平板通过加入PBS洗涤2次，随后加入含3％(w/v)牛血清白蛋白(BSA)的PBS。将平板在室温下温育1小时并同时振荡，然后弃去内容物并用PBS洗涤2次。向孔内加入50μl在3％BSA/PBS中1∶10,000稀释的初级磷酸丝氨酸-15抗体(CellSignaling Technology，#9284L)以检测ATM激酶引发的p53的丝氨酸15残基的磷酸化。室温下振摇温育1小时后，将各孔用PBS洗涤4次，随后加入抗兔HRP结合的次级抗体(Pierce，31462)并在室温下振摇1小时。然后将各孔用PBS洗涤4次，加入化学发光试剂(NEN Renaissance，NEL105)。将平板短时间振荡，用透明平板盖覆盖并转移到TopCount NXT中进行化学发光计数。计时1秒后，记录各反应的每秒发光数。按照上述DNA-PK试验所述的方法计算化合物对ATM活性的抑制作用。

通过下面的公式测定选择性：

Δ (DNA - PK / ATM) = \frac{{IC}_{50} (ATM)}{{IC}_{50} (DNA - PK)}

结果详细描述在表4中。294的IC₅₀为＞100μM，并且Δ(DNA-PK/ATM)＞67。

所有化合物在DNA-PK抑制中均具有活性，表现出IC₅₀小于约12μM和/或在1μM下的％抑制率大于约22％。

选择的化合物及其IC₅₀值如表1所列。

在DNA-PK抑制中特别有效、具有小于约1μM的IC₅₀和/或在1μM下大于约50的％抑制率的化合物包括：270、271、272、279、267、269、268、59、60、73、131、123、139、74、125、126、127、99、124、140、143、118、105、106、104、146、107、114、163、215、194、166、187、167、157、200、169、170、202、211、173、175、176、178、179、190、192、212、182、214、203、198、205、206、264、242、258、260、247、249、252、253、255、37、31、64、65、32、68、35、36、72、293、301、297、283、287、289、288、304、5、1、292、291、290、3、4、337、418、416、422、415、6、318、338、339、340、341、426、317、366、375、385、403、404、408、409、410、389、394和413。

表1：DNA-PK抑制

化合物编号	IC₅₀(μM)
化合物编号	IC₅₀(μM)	1	1.0
3	0.5	1	1.0
3	0.5	4	0.45
2	2.5	4	0.45
2	2.5	5	0.35
12	10.5	5	0.35
12	10.5	13	8
6	5	13	8
6	5	285	0.8
284	0.35	285	0.8
284	0.35	287	0.4
289	0.45	287	0.4
289	0.45	286	0.3
288	0.35	286	0.3
288	0.35	292	0.25
291	0.3	292	0.25
291	0.3	290	0.4
304	0.8	290	0.4
304	0.8	307	0.9
425	2.0	307	0.9

337	0.65
337	0.65	423	3.0
418	0.45	423	3.0
418	0.45	414	1.5
416	0.6	414	1.5
416	0.6	419	1.0
422	0.5	419	1.0
422	0.5	415	0.5
343	0.7	415	0.5
343	0.7	338	0.95
341	0.65	338	0.95
341	0.65	342	0.8
293	0.4	342	0.8
293	0.4	301	0.4
297	0.5	301	0.4
297	0.5	296	1.2
312	10	296	1.2
312	10	310	0.1
330	20	310	0.1
330	20	317	0.3

表2：增效比例

化合物编号	ER
化合物编号	ER	3	1.5
4	2.0	3	1.5
4	2.0	5	1.63
285	1.62	5	1.63
285	1.62	284	1.72
287	1.61	284	1.72
287	1.61	289	1.87
286	1.5	289	1.87
286	1.5	288	1.69
292	1.16	288	1.69

291	1.26
291	1.26	337	1.12
414	1.69	337	1.12
414	1.69	416	1.32
422	1.68	416	1.32
422	1.68	415	1.86
293	1.7	415	1.86
293	1.7	297	2.12
310	1.73	297	2.12
310	1.73	317	3.62

表3：PI 3-激酶抑制

化合物编号	IC₅₀(μM)	Δ(DNA-PK/PI 3-K)
化合物编号	IC₅₀(μM)	Δ(DNA-PK/PI 3-K)	3	10	20
4	7	16	3	10	20
4	7	16	5	750	＞143
285	30	38	5	750	＞143
285	30	38	283	10	29
289	37	82	283	10	29
289	37	82	288	15	43
292	13	52	288	15	43
292	13	52	414	95	63
422	6	12	414	95	63
422	6	12	415	＞100	＞200
293	20	50	415	＞100	＞200
293	20	50	301	16	40
297	18	36	301	16	40
297	18	36	296	6	5
310	11	110	296	6	5
310	11	110	317	2.5	8

表4：ATM抑制

化合物编号	IC₅₀(μM)	Δ(DNA-PK/ATM)
化合物编号	IC₅₀(μM)	Δ(DNA-PK/ATM)	3	＞50	＞100
4	＞100	＞222	3	＞50	＞100
4	＞100	＞222	2	＞50	＞20
5	＞100	＞286	2	＞50	＞20
5	＞100	＞286	285	＞50	＞63
284	＞100	＞286	285	＞50	＞63
284	＞100	＞286	287	＞50	＞125
289	＞50	＞111	287	＞50	＞125
289	＞50	＞111	286	24	80
288	＞100	＞286	286	24	80
288	＞100	＞286	292	＞100	＞400
291	＞50	＞167	292	＞100	＞400
291	＞50	＞167	290	35	88
304	＞100	＞125	290	35	88
304	＞100	＞125	307	＞100	＞111
337	＞100	＞154	307	＞100	＞111
337	＞100	＞154	423	＞100	＞33
418	＞100	＞222	423	＞100	＞33
418	＞100	＞222	414	＞100	＞67
416	＞100	＞167	414	＞100	＞67
416	＞100	＞167	422	＞100	＞200
415	＞100	＞200	422	＞100	＞200
415	＞100	＞200	293	＞100	＞250
301	＞50	＞125	293	＞100	＞250
301	＞50	＞125	297	45	90
296	＞100	＞83	297	45	90
296	＞100	＞83	310	＞100	＞1000
317	＞100	＞333	310	＞100	＞1000

Claims

1.式Ia化合物或其异构体、盐或化学保护的形式，

其中：

R¹和R²彼此独立地是氢、C_1-7烃基、C_3-20杂环基或C_5-20芳基，或者可以与它们所连接的氮原子一起形成具有4-8个环原子的被C_1-7烃基取代或未取代的杂环；

R³和R⁴与它们所连接的碳原子一起是稠合的苯环，其在8位被三环C_3-20杂环基取代或在6、7或8位被一个被苯基取代的苯基取代。

2.权利要求1所述的化合物，其中R¹和R²与它们所连接的氮原子一起形成吗啉代基团。

3.权利要求1或2所述的化合物，其中的苯环在8位被一个基于咔唑或蒽环系并且在中央环中存在硫和/或氧原子的三环C_3-20杂环基取代。

4.权利要求3所述的化合物，其中所述的三环C_3-20杂环基团衍生自二苯并呋喃或二苯并噻吩。

5.权利要求3所述的化合物，其具有如下结构式：

或

6.权利要求1或2所述的化合物，其具有如下结构式：

7.一种含有权利要求1至6中任一项所定义的化合物和药学可接受的载体或稀释剂的药物组合物。

8.权利要求1至6中任一项所定义的化合物在制备用作癌症治疗中的辅剂或用于在电离辐射或化疗剂治疗中强化肿瘤细胞的药物中的用途。

9.权利要求1至6中任一项所定义的化合物在制备用于治疗由逆转录病毒介导的疾病或可以通过抑制DNA-PK而改善的疾病的药物中的用途。