CN1189175C

CN1189175C - 用于预防和治疗原虫病的组合物和方法

Info

Publication number: CN1189175C
Application number: CNB998133086A
Authority: CN
Inventors: B·宏德雷; R·麦克林; P·迪鲁卡; S·吉布莱奇旦
Original assignee: New Ace Research Co
Current assignee: New Ace Research Co
Priority date: 1998-10-08
Filing date: 1999-10-08
Publication date: 2005-02-16
Anticipated expiration: 2019-10-08
Also published as: US20030096815A1; US6465460B1; WO2000019964A3; NZ510998A; AU766542B2; EP1119255A4; CA2346463A1; WO2000019964A2; AU6297299A; HK1043019B; MXPA01003542A; HK1043019A1; BR9914385A; EP1119255A2; CN1331561A

Abstract

本发明提供了一种特别适合于非肠道给药例如鼻内、肌内、皮下、经皮或静脉内给药的组合物，其中该组合物由用于治疗或预防人和动物体内原虫感染的治疗有效量的至少一种抗原虫药物组成。在一个实施方案中，所述的抗原虫药物是一种以三嗪为基础的抗原虫药，例如三嗪二酮或三嗪三酮诸如地克珠利、托曲珠利、磺酰托曲珠利或其水溶性钠盐。在目前一个优选的实施方案中，以三嗪为基础的抗原虫药是磺酰托曲珠利。本发明还提供了人和动物体内原虫感染的治疗方法。

Description

用于预防和治疗原虫病的组合物和方法

本申请要求1998年10月8日提交的美国临时申请顺序号60/103,543和1998年12月14日提交的美国临时申请顺序号60/112,175的优先权。

发明领域

本发明涉及由人和动物体内原生动物寄生虫导致的疾病的治疗和预防方法。特别地，本发明涉及用于以非肠道方式治疗和预防原虫疾病的新型组合物和方法，所述的原虫疾病例如梨浆虫病、巴贝虫病、Neospora caninum弓形体病、隐孢子虫病(Crytosporidiosis)和马原虫脑脊髓炎。

发明背景

原生动物寄生虫(也称作顶复虫(apicoplexan)寄生虫)在人和动物体内导致不同的临床疾病表现。例如，巴贝虫属的血原虫寄生虫即马巴贝虫(Babesia caballi)和马巴贝虫(Babesia equi)导致使经济遭受严重损失的疾病马梨浆虫病。马梨浆虫病广泛分布于世界各地，不过，它在热带、亚热带和温带地区最为流行(参见RobinsonEdward N.“马医学最新疗法”(Current Therapy In Equine Medicine)第2卷第299-300页(1987)(ISBN：0-7216-1491-4))。

原虫的主要传播方式是通过蜱载体例如明暗眼蜱。急性感染的临床表现的特征在于抑郁、发热、厌食、粘膜黄疸、出血性瘀斑和肢端和腹部水肿。24-48小时内可以发生死亡且发作时的死亡率很高(参见Robinson Edward N.“马医学最新疗法”(Current Therapy In EquineMedicine)第3卷第499-500页(1992)(ISBN：0-7216-3475-3))。

不允许梨浆虫病检测阳性(补体结合试验或间接荧光抗体试验)而未经过疾病治疗或严格指导条件下的马进入美国(参见Brooks，L.“梨浆虫病：奥林匹克问题”-马(“Piroplasmosis：The O1ympicQuestion”，The Horse)43-48页(1996年7月))。目前建议的治疗方案包括应用二丙酸咪多卡(Burroughs Welcome Co.)且这种治疗通常产生包括流涎、坐立不安和胃肠道运动过度在内的不良副作用(参见Kobluk，Calvin N.等“马疾病和临床控制”(The Horse Diseases&Clinical Management)第2卷1084-1885页(1995)(ISBN：第2卷0-7216-5984-5))。此外，尤其是当病原体是马巴贝虫时，使用二丙酸咪多卡的治疗方法已经取得了决定性成功(50％-60％)(参见Reed，Stephen M.“马内科学”(Equine Internal Medicine)第570-571页(1998)(ISBN：0-7216-3524-5))。

因此，在本领域中存在对不产生使用目前治疗方案所观察到的不良副作用的有效抗原虫药和治疗与预防梨浆虫病的方法的需求。

由巴贝虫属种类导致的血中具有的原虫感染的其它实例包括：牛巴贝虫病，例如二联巴贝虫和牛巴贝虫(Babesia bovis)；山羊和绵羊巴贝虫病，例如绵羊巴贝虫和犬巴贝虫病，例如犬巴贝虫和吉氏巴贝虫(参见Smith，Bradford P.“较大动物内科医学”(Large AnimalInternal Medicine)1088-1092页(1990)(ISBN：0-8016-5062-3))，另外参见Bonagura，John D.“Kirk氏最新兽医疗法XII的小动物实施方案”(Kirk’s Current Veterinary Therapy XII Small AnimalPractice)第12卷315-319页(1995)(ISBN：0-7216-5188-7)。同样，在本领域中存在对这类感染的安全、有效和经济的治疗方法的需求。

例如，在人体中，原虫感染可以导致严重的疾病表现。患获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者中常见的后遗症是可产生严重慢性和通常的致命性腹泻的Cryptosporidium parvum感染(隐孢子虫病)。发现该寄生虫在世界范围内广泛存在且生活在牛和家养动物中并***在粪便中。它可以从动物中或通过接触粪便、受污染的水或食品而直接传播给人(参见，例如“过敏性和感染性疾病-与AIDS相关的隐孢子虫病国家研究院”(National Institute of Allergy and InfectiousDiseases-AIDS-related Cryptosporidiosis)，网上发行(www pressrelease)(1991年3月))。

已经进行了许多尝试来寻找对这种疾病的有效治疗方法。已经通过实验尝试将目前用于治疗这类球虫病的兽药领域中的一族药物即以三嗪为基础的抗原虫药(例如三嗪二酮类和三嗪三酮类)、尤其是地克珠利和来曲珠利用于治疗人体内的隐孢子虫病(参见国家药物图书馆AIDSDRUGS数据库(National Library of Medicine，AIDSDRUGSDatabase)DRG-0079(1998年1月22日)和国家药物图书馆AIDSTRIALS数据库(National Library of Medicine，AIDSTRIALS Database)FDA-038B(1990年4月25日))。配制这些化合物用于口服给药且它们因难以吸收而只取得了有限的成功。已经通过给药后的最高血药浓度而在人体中观察到了对这类药物的最佳反应(参见《AIDS治疗信息》(AIDS Treatment News)第111期(1991年9月21日))。

然而，迄今为止，对人体内的隐孢子虫感染仍然没有有效的疗法(参见“加拿大健康-疾病控制实验中心：物质安全性数据资料”(Health Canada，Laboratory Centre For Disease Control：Material Safety Sheet)-48，Cryptosporidum parvum，1997年10月11日@( www.hc-sc.gc.ca/hpb/lcdc/biosafty/msds/msds/48e.html(1999年7月24日))。因此，在本领域中对治疗和预防诸如隐孢子虫病或巴贝虫病这样的原虫感染的安全而有效的非肠道用制剂仍然存在迫切需求。

侵害马种类的马原虫脑脊髓炎(EPM)即一种中枢神经***疾病也主要由原生动物寄生虫即也称作肉孢子虫属Sarcocystis falcatula的Sarcocystis neuroma所导致。马不是这种原生动物的正常宿主(马不属于正常生活周期的部分)且认为它是死亡终结宿主。认为决定性的宿主是负鼠。马科动物通过摄取受诸如负鼠这样的感染的食肉生物的粪便污染的食物或水而感染S.neuroma生物体(参见RobinsonEdward N.《马医学最新疗法》(Current Therapy In Equine Medicine)：Fenger，Clara A“马原虫脑脊髓炎”(Equine ProtozoalMyeloencephalitis)第4卷第329-333页(1997)(ISBN：0-7216-2633-5))。

近来，其它原生动物寄生虫也在EPM、例如Neospora caninum和弓形体种类的发病机制中起病因作用。因此，在本领域中仍然存在对EPM有效疗法的需求，这种疗法表现出对马体内包括上述生物体在内的所有原生动物寄生虫的广谱功效。

EPM的临床症候可以随不同的情况而改变。一般来说，马呈现不对称的神经病症候且实际症状随由大脑、脑干或脊髓中的寄生虫产生的损害的严重性和部位的不同而改变。通常呈现运动失调、不协调和一般性虚弱且可以伴随有肌肉萎缩(通常最值得注意的是在后肢)。可以存在眼部和面部肌肉麻痹、耳下垂、难以吞咽(吞咽困难)、头歪斜、步态改变乃至癫痫发作和虚脱。近来有关EPM病例数量的报导表明这种疾病远比原始认为的更为广泛和严重。

目前还没有得到用于预防这种疾病的疫苗。目前优选的治疗方法的目的在于通过应用磺胺类药和乙胺嘧啶来控制寄生虫感染(参见美国专利号5,747,476)。然而，这些确定的方法已经获得了有限的成功。最近，且由于对这种破坏性疾病的安全而有效疗法的迫切需求，所以已经例如通过FDA紧急进口诸如地克珠利和托曲珠利这样的抗原虫药而探索了新的治疗方法并研究了新的药剂(参见FDACVM出版物：“进口地克珠利专用说明”(Instructions for Personal Use Importationof Diclazuril)(1997年12月16日)；和FDACVM出版物：“专用托曲珠利的进口”(The Inportation of Toltrazuril for Personal Use)(1997)，它们来自美国马从业者协会，Lexington，KY(AAEP))。(另外参见美国专利号5,883,095)。

应注意当前紧急进口地克珠利和托曲珠利并用地克珠利和托曲珠利治疗马是探索性的。为得到FDA的批准，适用于马的这些药物中的一种或多种口服制剂目前处于临床试验中。而尽管某些马的病情确实显著得到了改善，但是许多仅观察到了中等程度的改善(兽医给临床症候的严重性分类所使用的临床评价等级(等级范围是1-5)上的1-2级改善)。用于FDA试验的现有的优选形式的托曲珠利即代谢物托曲珠利砜(Bayer)的测试剂量目前为5mg/kg/天-10mg/kg/天。

无论何处，上述抗原虫药进口和其应用的成本均在约$800-$1,200.00/马的范围且获自该治疗方法的结果可能令人沮丧。几乎没有马经历了从包括上述以三嗪为基础的抗原虫药疗法在内的任意公知的常规疗法中的完全恢复。此外，在该治疗方案中建议的相对较高剂量的药物可以产生并不需要的副作用。这对于应用可抑制叶酸产生的磺胺类药物和乙胺嘧啶的治疗方案来说尤其确切(参见Fenger，ClaraA.“马原虫脑脊髓炎诊断新信息”(Update On the Diagnosis of EquineProtozoal Myeloencephalitis)-ACVIm论坛第13期会刊(Proc.13^thACVIM Forum)597-600页(1995)；和Bertone，Joseph J.“马原虫脑脊髓炎新信息”(Update On Equine ProtozoalMyeloencephalitis)，FDA兽医第XI卷第III期(1996年5月/6月))。

因此，在本领域中存在对提供一种安全而更为有效的以非肠道方式治疗EPM且成本较低的方法的需求。

发明概括

本发明通过提供一种用于治疗和预防人和动物体内原虫感染的特别适合于非肠道给药的组合物而满足了本领域中的这种需求，其中所述的组合物含有至少一种抗原虫药物，所述的非肠道给药例如是鼻内、肌内、皮下、经皮或静脉内给药。在一个实施方案中，所述的抗原虫药是一种以三嗪为基础的抗原虫药，例如三嗪二酮或三嗪三酮诸如地克珠利或托曲珠利。在目前一个优选的实施方案中，以三嗪为基础的抗原虫药是磺酰托曲珠利(sulfonotoltrazuril)。

本发明的组合物可以进一步包括特别适合于非肠道给药的特定途径的制剂中用于抗原虫药物的合适溶剂。当然，对溶剂和其中所溶解的活性剂浓度的选择随药物的选择、非肠道给药的所需途径、所治疗的物种和宿主和给药所需的作用期限例如缓释与负荷剂量的不同而改变。

本发明组合物的非肠道给药降低至口服给药的药物剂量约1/2至1/100，而尤其是降低至口服给药的药物剂量的约1/5。本发明提供的组合物因动物与动物在口服生物利用度方面的差异而消除了药物血浆浓度的可变性、可以应用负荷剂量且由此即刻达到药物的有效血浆浓度、快速达到药物的高血浆浓度而使药物进入诸如CNS中脑脊髓(cerbrospinal)液这样的血管外隔室、为药物的血浆浓度提供更好和更迅速的控制并降低与现存口服制剂相关的副作用的可能性。结果是正如从目前口服给予这些抗原虫药物所建议和所需的较高剂量中所观察到的，治疗成本与不良副作用的可能性显著下降。

特别地，本发明提供了用于人和动物体内任何抗原虫或顶复虫(apicoplexan)寄生虫例如马梨浆虫病、马原虫脑脊髓炎和隐孢子虫病的疗法和/或预防的新型组合物和方法。在一个实施方案中，本发明提供了一种用于抗原虫感染疗法的由以三嗪为基础的抗原虫药物和合适溶剂组成的组合物。本发明优选的实施方案包括一种由用DMSO、DMA或其混合物溶解的地克珠利组成的组合物，将它配制成非肠道给药形式而用于本发明方法所提供的人和动物体内的抗原虫感染的疗法。

本发明另一个优选的实施方案包括一种由用DMSO、DMA或其混合物溶解的托曲珠利、托曲珠利砜、sulfonotoltrazuril或其混合物组成的组合物，将它配制成非肠道给药形式而用于本发明方法所提供的人和动物体内的抗原虫感染的疗法。

本发明另一个优选的实施方案包括一种配制成非肠道或口0服给药的用于人和动物体内抗原虫感染疗法的组合物，它由以三嗪为基础的抗原虫药例如克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利(sulfonotoltrazuril)等的水溶性盐例如钠盐组成。

本发明另外提供了一种用于本发明提供的抗原虫感染疗法的以三嗪为基础的抗原虫药的水溶性剂型的制备方法，所述的以三嗪为基础的抗原虫药例如是克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利。

发明详述

本发明提供了一种用于以非肠道方式治疗人和动物体内原虫(顶复虫(apicoplexan))感染的组合物和方法。原生动物寄生虫可以是公知感染人和动物的任意原虫、包括但不限于：例如巴贝虫属的种类、肉孢子虫属的种类、Neosporum属的种类、隐孢子虫属的种类、弓形体属的种类等。

所关注的是可以将本发明的组合物配制成可用于任意非肠道给药方式。特别关注可以将静脉内、肌内、经皮、鼻内和皮下的给药途径用于给予本发明的组合物。本发明组合物的特殊制剂包括粉剂、凝胶、软膏、霜剂、溶液、混悬剂、缓释制剂、贴剂等。

在一个实施方案中，本发明提供了一种用于治疗人和动物体内原虫感染的特别适合于静脉内、肌内、皮下或鼻内给药的组合物，所述的人和动物体内原虫感染例如是马梨浆虫病、马原虫脑脊髓炎或人隐孢子虫病的感染；其中所述的组合物包括至少一种具有抗原虫活性的化学活性剂。本文提供的组合物包括任意的抗原虫药、而特别是诸如任意类型的以三嗪为基础的抗原虫药这样的抗原虫药(即含有三嗪环例如1、2、4三嗪环或1、3、5三嗪环构型的活性剂(参见，例如“使用分子形态分析进行的抗原虫三嗪类的3D-QSAR研究”-《化学计算机科学信息杂志》(J.Chem.Inf.Comput.Sci.)第35卷771-778(1995)；美国专利号4,837,216和美国专利号4,952,570，将这些文献的内容引入本文作为参考))。

这类活性剂的特殊实例包括但不限于克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利(sulfonotoltrazuril)。例如，用于本文所述组合物和方法的几种以三嗪为基础的化合物的化学结构如下所示：

克拉珠利

地克珠利

来曲珠利

托曲珠利

可以理解的是也可以将其它抗原虫药包括其衍生物、类似物、异构体、盐和这些活性剂的天然代谢物用于以非肠道方式治疗和预防人和动物体内任何原虫感染的组合物中。在目前一个优选的实施方案中，以三嗪为基础的抗原虫药是sulfonotoltrazuril即一种托曲珠利的代谢物。

磺酰托曲珠利(托曲珠利代谢物)含有已经被氧化成磺酰基的托曲珠利的硫基，由此与其二氧磺酰托曲珠利衍生物区分开来。

托曲珠利磺酰托曲珠利

本发明所关注的化学文摘数据库中使用的一种形式的磺酰托曲珠利的化学名是：

1-甲基-3-[3-甲基-4-(4-三氟甲磺酰基-苯氧基)-苯基]-[1，3，5]三嗪烷-2，4，6-三酮。

该化合物的CAS目录号为CAS号69004-04-2。Beilstein登记号为870959。分子式为C₁₈H₁₄F₃N₃O₆S且分子量为457.38g/mol。

特别地，本发明提供了一种以非肠道方式治疗和/或预防EPM的组合物，该组合物应用治疗EPM过程中口服给药所必需的约1/4-约1/100量的抗原虫药物。在本发明的一个实施方案中，所述的组合物适合于鼻内给药且包括约1/10的当前建议剂量。在另一个实施方案中，所述的组合物适合于其它非肠道给药方式(例如静脉内、皮下和肌内)且包括约1/4-约1/100的当前建议的口服剂量，而特别是用于EPM治疗的约1/3-约1/10的当前建议口服剂量。在一个优选的实施方案中，将上述本发明的鼻内和非肠道用组合物配制成下面更具体描述的缓释形式。

例如，用于马体内EPM治疗方案的口服地克珠利(CLINACOX，Pharmacea Upjohn，Canada)的当前建议剂量约为2.5克地克珠利/1000磅马/天(5.5mg/kg)、每日给药一次、持续28天。这相当于约70克地克珠利/马/治疗方案。

相反，用于治疗EPM的由例如地克珠利或托曲珠利等这样的以相似三嗪为基础的活性剂组成的本发明非肠道用组合物的当前优选剂量范围约为0.1mg/kg-约10mg/kg。然而，本领域技术人员可以理解这一范围可以根据特殊制剂、给药途径、所需作用(负荷剂量与缓释)和治疗方案的期限的不同而在约0.01mg/kg-约20mg/kg之间改变。

本发明目前优选的实施方案包括一种适合于非肠道给药的组合物，其中包括抗原虫药和一种合适溶剂，所述的抗原虫药选自但不限于克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、托曲珠利砜和磺酰托曲珠利或其钠盐组成的组。所述的溶剂可以是用于动物和人体内的任意合适的溶剂且当然随所选择的抗原虫药和给药途径的不同而改变。目前优选的溶剂包括但不限于下面更完全列举的DMSO、DMA、乙醇、水等。

可以将优选的组合物用于人和动物体内抗原虫感染的疗法中。例如，目前用于治疗EPM的优选的治疗方案包括对1000lb马给予一种静脉内给药用组合物的步骤，该组合物由溶于合适体积的DMSO、DMA等中的约50mg-约1,500mg、而尤其是约250mg-约1000mg且最优选约500mg(约1.1mg/kg)的地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利组成。合适的溶剂量可以在约2ml-约30ml/单位剂量之间改变，这取决于所选择的抗原虫药和所选择的溶剂。根据本文所述的方法，可以每日给予一次该组合物(SID)、持续约10天-约35天而尤其是约20天-约30天且最优选约28天的期限。另一方面，可以给予该组合物的负荷剂量以便在所述方案的第1天时获得快速临界血浆浓度，随后将剂量维持(参见如下的实施例1)较短的治疗期限、例如约15天-约25天。

在另一个实施方案中，可以特别为例如肌内或皮下、缓释这样的非肠道应用而配制所述的组合物，例如微球体或甲基纤维素制剂，使得单一缓释给药或每周持续给予抗原虫药的缓释制剂成为可能。另一方面，所关注的是单一静脉内负荷剂量、随后是用于维持持续临界血药浓度的缓释肌内或皮下剂量。例如，在EPM中，临界血浆浓度可以在约5μg/ml抗原虫药-约12μg/ml抗原虫药的范围、而尤其是约8μg/ml。

静脉内给药实施例

实施例#1

“MR.OWENS”和地克珠利的单一IV给药：

给药后的天数→

浓度(ng/ml) 时间(天数)

正如上述表1中所述，马MR.OWENS(约1,000lbs)在第1天的0和0+1小时时静脉内接受两次溶于30ml的DMSO的750mg地克珠利粉、总剂量为1,500mg。在下一次给药前在指定的时间点处立即取血样且附图1中的实心圆圈(●-●)代表这些给药后地克珠利的血浆浓度。将用ng/ml计的地克珠利血浆浓度列在纵轴上，而相对应的用天数计的时间列在横轴上。注意：给药后24小时时6,000ng/ml的地克珠利峰值血药浓度以及约48小时的血浆半衰期与预先对马体内地克珠利的血浆半衰期所报导的数据一致。

实施例#2

“DEEP POWDER”和地克珠利的每日重复IV给药：

给药后的天数→

浓度(ng/ml) 时间(天数)

按照0.5mg/lb的剂量对上述表2中的马DEEP POWDER(1160lbs)每日静脉内给予一次溶于DMSO的地克珠利(580mg)、持续8天。上述表2中的实心圆圈(●-●)代表每次给药后24小时时和恰在第2天给药前地克珠利的血浆浓度。注意580mg/1,000lbs/天的剂量如何产生逐步增加的地克珠利血浆浓度，从而产生最终约10,000ng/ml的地克珠利稳态血浆浓度。另外要注意这些数据与预先提交的有关CLINICOX的数据之间的详尽比较，其中每日作为CLINICOX口服给予的约2.5g/1,000lbs地克珠利产生广泛相似的数据。该数据表明IV给予约0.5mg/1,000lbs溶于DMSO的地克珠利所产生的地克珠利血浆浓度与口服方式给予约5倍该剂量的CLINICOX产生的血浆浓度相同，这提示该活性剂的口服生物利用度约为20％或20％以下。

实施例#3

“负荷剂量”作用和预计的治疗有益效果：

给药后的天数→

浓度(ng/ml) 时间(天数)

药代动力学和相加机理提示我们：给予诸如实施例1(MR OWENS)中所述的负荷剂量、随后每日维持诸如实施例2(DEEP POWDER)中所述的剂量应该能够快速达到并维持地克珠利的所需或最佳治疗血浆浓度(约8-10μg/ml血浆)。上述表3表明：如果在第1天给予1,500mg的负荷剂量，随后每日维持对DEEP POWDER给予500mg的剂量，那么在约1,000lb体重MR.OWENS和DEEP POWDER的马中可以获得估计的血浆浓度。在这种方式中，根据这些一般方案和机理，能够在治疗第1天快速达到地克珠利或相关活性剂的总有效血浆浓度并将这些有效浓度维持任何所需的时间期限。

该手段的优点是多方面的：在第一个方面中，在治疗开始的数小时或数分钟内地克珠利或类似活性剂可以达到有效血浆和脑脊液浓度，这可以使治疗期限较短。在第二个方面中，以我们使用CLINICOX的给药实验为基础，通过仅给予约1/5或1/5以下的必须通过口服给予的总药物剂量可以维持所需的血浆浓度，这可以使药物成本基本上得到节约。第三方面，在可以避免口服给药后发现了这种活性剂在马与马之间的生物利用度方面的显著可变性和所得地克珠利血浆浓度方面的可变性，从而使治疗结果更具有预见性和再现性。第四方面，使用这种方法可以快速达到极高的地克珠利血浆浓度，从而使地克珠利同样快速进入CNS并同样快速在CNS中起抗原虫药的作用。第五方面，最终建立治疗这种疾病的地克珠利的最佳血浆浓度和最佳治疗期限以及大部分对EPM的低成本治疗手段。

这种给予地克珠利的IV方法通过精确控制药物浓度和药物快速进入CNS为精确控制药物的血浆浓度和该活性剂的脑脊液浓度而获得该信息提供了一种所必不可少的手段。第六个方面和最终的事实是IV给药使马通过直接肠途径接触较少量的该药物和不接触任何药物可减少涉及马的胃肠道***和其它身体***的不良反应发展的可能性。

实施例#4

MR.OWENS/CLINACOX数据：药代动力学分析和生物利用度计算：

浓度(ng/ml) 时间(小时)

对IV给予该药物后获得的数据进行的药代动力学分析和与预先报导的给予CLINACOX后的药代动力学数据进行的比较(上述表4)表明所估计的CLINACOX的口服生物利用度实际上低于较早估计的20％。在表2中，将来自MR.OWENS的静脉内数据(实心正方形■-■)与预先获得的CLINACOX口服给药数据(实心圆圈●-●)一起绘图并进行如下所述的药代动力学分析。这些数据提示口服给予的CLINACOX的生物利用度约为在上述实验中所述附图展示的13％以下。

实施例#4

MR.OWENS/CLINACOX数据：药代动力学分析和生物利用度计算/接续：

在口服给药后，将120小时时的地克珠利浓度看作逸出值。

曲线下的面积(0-∞的AUC)：将梯形规则用于计算口服药物给药的曲线下的面积。

AUC t_{1} - t_{2} = \frac{C 1 + C 2}{2} (t_{1} - t_{2})

一级反应：

k = \frac{Ln C_{1} - Ln C_{2}}{t_{1} - t_{2}}

k＝0.0164小时^-1

0-∞的AUC(PO)＝98.2μg/ml/小时

在计算过程中不包括IV给药后72小时和96小时的浓度。

曲线下的面积(0-∞的AUC)：Intercept-Slope法

k＝0.021小时^-1

AUC(0-∞的AUC)(IV)：452.4μg/ml/小时

F＝13％

V＝0.35L/kg

Cl＝55.26ml/分钟。

通过HPLC和TLC法没有在尿样中检测到地克珠利的浓度这一事实提示：对于马体内的地克珠利来说，肝脏清除是主要的消除途径。Cl_H＝Q_H.E_H

EH为0.3以下，于是发现地克珠利具有较低的肝脏排出比例。

在本发明另一个优选的实施方案中，可以将上述优选的组合物用于除EPM以外的动物体内抗原虫感染疗法中。例如，目前优选的治疗马体内梨浆虫病的治疗方案包括对1000lb的马给予一种用于静脉内给药的组合物的步骤，该组合物由约50mg-约1,500mg、尤其是约250mg-约1000mg且最优选约500mg(约1.1mg/kg)的溶于合适体积的DMSO、DMA等的地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利组成。溶剂的合适量可以在约2ml-约30ml/单位剂量之间改变，这取决于所选择的抗原虫药和所选择的溶剂。根据本文所述的方法，可以每天给予一次所述的组合物(SID)、持续约1天-约20天、而尤其是约1天-约10天且最优选约4天的期限。另一方面，可以给予负荷剂量的组合物以便在该方案的第1天快速达到临界血浆浓度，随后将剂量维持较短的治疗期限、例如约2天-约10天。在另一个实施方案中，特别可以如下所述将组合物配制成缓释剂型以便能够单一给予抗原虫药或另一方面单一静脉内给予负荷剂量，随后肌内或皮下给予持续临界血药浓度的剂量。

如上所述，克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、托曲珠利砜和磺酰托曲珠利以及其它以三嗪为基础的抗原虫药用于预防和治疗人和动物体内的马原虫脑脊髓炎(EPM)和其它原虫病。这些化合物是疏水性的且极难溶于水。

在本文所述教导前，还没有用于以非肠道方式给予这些活性剂的合适的水溶性制剂。因此，本发明提供了由用于治疗人和动物体内原虫感染的水溶性形式的至少一种抗原虫药组成的组合物和这类组合物的制备方法。在目前一个优选的实施方案中，该组合物由一种或多种以三嗪为基础的抗原虫药的钠盐组成，所述的抗原虫药包括但不限于克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、托曲珠利砜、磺酰托曲珠利或其混合物。

目前用于增加这类药物的水溶性的优选方式是制备其盐形式。克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、托曲珠利砜和磺酰托曲珠利因在如下所示的全部5种化合物中存在有亚胺氢而属于弱酸类。当这种氢被夺取时，所形成的阴离子是共振稳定的。因此，可以使这些酸性化合物与一种碱在典型的酸-碱滴定反应中反应而生成相应的盐和水。例如，如下所述通过使地克珠利与氢氧化钠按1∶1摩尔比反应而形成地克珠利的钠盐。

地克珠利钠盐的合成

成盐的证明：

1.竞争滴定地克珠利所需的氢氧化钠摩尔比为1∶1。

2.所述盐立即溶于水，而地克珠利完全不溶于水。

3.地克珠利是一种白色粉末。地克珠利的钠盐呈棕褐色。

4.进行地克珠利钠盐阴离子形式的和地克珠利自身的质谱分析。所述盐的分子阴离子和母体化合物的预测分子量为404.971。测定的分子量恰好与预测的分子量一致(未列出数据)。

因此，克拉珠利、地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜和磺酰托曲珠利以及其它以三嗪为基础的抗原虫药一般带有酸性亚胺氢，它使得与碱的酸-碱滴定反应生成相应的盐和水。通过下面的实施例5中更完整描述的地克珠利钠盐的合成而证明了这一点。由于得到了本文所提供的教导，所以可以理解还可以使用包括但不限于Ca(OH)₂、KOH、LiOH在内的其它强碱。

实施例5

地克珠利水溶性盐的合成

地克珠利具有极低的水溶性(在pH 6.5下＜1×10^-7)且实际上可以将它看作几乎不溶于水。目前有效治疗马原虫脑脊髓炎(EPM)需要的优选血浆药物浓度约为8μg/ml、持续约25-30天。地克珠利的口服生物利用度极低。因此，需要非肠道用制剂。

增加难溶于水药物的水溶性的方法之一是制备该药物的水溶性盐。由于存在如下所示的亚胺氢而可以将地克珠利看作一种弱酸：

带有箭头指示的酸性亚胺氢的地克珠利的结构

当酸性氢被夺取时，形成的阴离子通过下面的共振而稳定：

地克珠利亚胺阴离子的共振结构

由于地克珠利是一种弱酸，所以可以使它与一种碱反应而生成盐和水。将NaOH选作目前优选的碱并进行酸-碱反应，其中将1克地克珠利悬浮于200ml容量瓶内的50ml乙醇中。向该体系中加入酚酞指示剂以便指示滴定的等当点。给滴定管吸满1M NaOH。从滴定管中将碱缓慢加入所述溶液。当观察到酚酞指示剂的颜色改变(无色变成粉红色)时，终止滴定。在等当点处，观察到地克珠利的乳白色混悬液已经改变成澄清的粉红色溶液。认为这是由于酸转化成盐的结果。通过在设定为75℃的烘箱内蒸发2小时而将该溶液重结晶。

地克珠利钠盐的合成

计算滴定1摩尔地克珠利所需的NaOH的摩尔量表明摩尔比为1∶1，这提示酸-碱反应和由此成盐。

在可能时腈和亚胺官能基可以被碱水解。然而，它可能不会发生，因为腈类和亚胺类的水解要求包括回流几小时在内的更为严格的条件。此外，该反应在乙醇中进行，由此除去了水解反应所需的水。

成盐证明

1.滴定实验强烈提示了酸-碱反应。

2.质谱证明：将使用1，8，9-蒽三酚基质的傅里叶变换基质辅助的激光解吸电离质谱法(MALDI-FTMS)用于测定地克珠利原料和获自地克珠利钠盐的地克珠利游离酸的质谱。预测的地克珠利阴离子(C₁₇H₈C₁₃N₄O₂ ^-)的分子量为404.972。测定的分子量为404.971。在m/z为406.967和408.965处测定由氯产生的同位素峰。在光谱中分子量为333.971处的一串峰相当于失去两个氯原子后形成的分子离子的碎片峰。通过在测定质谱前用乙酸乙酯提取和用乙酸处理而将钠盐转化成游离酸。此外，预测的地克珠利阴离子的分子量为404.972，而测定的分子量404.971，这恰好与预测的分子量一致。还测定了主要来自氯的同位素峰。另外在333.971处观察到的一串峰相当于失去两个氯离子后获得的碎片峰。在获自钠盐的地克珠利游离酸的质谱中观察到了未在地克珠利原始物质的质谱中观察到的分子量395.952处的另外一串峰。认为该峰是未鉴定的分子离子的碎片峰、由杂质或滴定反应的小量副产物产生的峰。通过HPLC的进一步分析确保鉴定了该峰是碎片产物还是杂质。

地克珠利钠盐的pH稳定性

地克珠利的生产者JANSEEN研究基金会(JANSEEN ResearchFoundation)在地克珠利的物化特性方面列出了地克珠利的pKa为5.92。可以预计在pH为该化合物的pKa以上(即pH＞6)时，地克珠利的水溶液可以以溶液形式保持稳定。进行初步研究以便测定钠盐沉淀时的pH。

将地克珠利的钠盐溶于水。它几乎立即进入溶液。该水溶液的pH为12.4。在搅拌的同时向该溶液中逐滴加入1N HCl并记录溶液开始变浑浊时的pH。发现该pH为10.5。这表明地克珠利的pKa不是JANSEEN所证实的5.92，不过它接近于10.5。实际上，对有机化合物pKa的参考值的检验表明亚胺类具有的pKa范围在8.3-9.6。

pH稳定性研究的结果表明必须优选在接近于11的较高pH下配制地克珠利钠盐的含水制剂以便确保药物在溶液中保持稳定。当市场上存在确实因相同原因在较高pH下配制的许多药物，它不会产生问题。

因此，本发明提供了一种用于治疗人和动物体内原虫感染的组合物，该组合物由一种水溶性形式的以三嗪为基础的抗原虫药组成，所述的抗原虫药包括但不限于克拉珠利、地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜和磺酰托曲珠利。在本发明目前优选的一个实施方案中，以三嗪为基础的水溶性抗原虫药是克拉珠利、地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜、磺酰托曲珠利或其混合物的钠盐。

可以将本发明优选的组合物用于人和动物体内抗原虫感染的疗法中。例如，目前用于治疗EPM的优选的治疗方案包括对1000lb的马给予用于静脉内给药的一种组合物的步骤，该组合物由约50mg-约1,500mg、尤其是约250mg-约1000mg且最优选约500mg(约1.1mg/kg)的地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的水溶性钠盐组成，将所述的这些药物溶于合适体积的无菌水中或储存在应用时与合适量注射用无菌水混合的冻干制剂中。用于所述组合物的合适水量可以在约2ml-约30ml/单位剂量之间改变，这取决于所选择的抗原虫药和非肠道给药途径。

根据本文所述的对EPM的治疗方法，可以每天给予一次所述的组合物(SID)、持续约10天-约35天、而尤其是约20天-约30天且最优选约28天的期限。另一方面，可以给予负荷剂量的组合物以便在该方案的第1天快速达到临界血浆浓度，随后将剂量维持较短的治疗期限(参见上述实施例1)、例如约15天-约25天。

另外特别关注的是可以将本文所提供的以三嗪为基础的水溶性形式的抗原虫药用于治疗和预防人和动物体内原虫感染和侵染的合适口服制剂中。本文所提供的组合物的溶解性显著促进了活性抗原虫药的口服生物利用度且因此大体上减少了对非肠道制剂的剂量需求。由于得到了本文所提供的教导，所以本领域技术人员可以使对特定制剂的剂量需求和治疗方案最佳化，这取决于所治疗或预防的疾病情况和动物的种类。

本发明的一个实施方案提供了一种尤其是用于治疗人或动物体内隐孢子虫属种类感染的组合物，该组合物由一种水溶性形式的以三嗪为基础的抗原虫药组成，所述的抗原虫药包括但不限于克拉珠利、地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利。在本发明目前优选的一个实施方案中，以三嗪为基础的水溶性抗原虫药是克拉珠利、地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜、磺酰托曲珠利或其混合物的钠盐且可以在治疗方案中以非肠道方式或口服方式使用它。另外关注的是可以将上述由以三嗪为基础的抗原虫药和合适溶剂例如DMSO或DMA组成的组合物以非肠道方式用于治疗人或动物体内隐孢子虫属种类的感染。

例如，目前用于治疗隐孢子虫属种类感染的优选的治疗方案包括对约200lb的人体受试者给予约10mg-约400mg、尤其是约25mg-约300mg且最优选约200mg(约1.1mg/kg)的地克珠利、托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的水溶性钠盐的步骤，将所述的这些药物溶于合适体积的水中或储存在应用时与合适量注射用无菌水混合的冻干制剂中。用于所述组合物的合适水量可以在约2ml-约10ml/单位剂量之间改变，这取决于所选择的抗原虫药和所选择的给药途径。当然可以理解这些活性剂的水溶性盐的口服制剂可以是液体、半固体或固体剂型诸如丸剂、片剂、酏剂等。

目前对使用乙胺嘧啶和磺胺治疗EPM的建议描述在上述引用的Clara Fenger博士(1995)和Joe Bertone博士的文章中，将这些文献引入本文作为参考。因此，在本发明另一个实施方案中，所述组合物由至少一种如上所述的抗原虫药组成且它还可以包括用于非肠道、例如鼻内制剂的减少量的磺胺和/或乙胺嘧啶。

本领域技术人员可以理解：根据选作治疗剂的化合物的不同，本文所提供的组合物中包含的化合物的增溶方法可以改变且可以以例如在特定化合物物质安全性数据资料(MSDS)中发现的所选化合物的公知化学特性为基础或通过公知的合成方法等方便地确定。特别地，特别适合于鼻内给药的组合物中的活性化合物和制剂的增溶方法是公知的，如美国专利号4,284,648、4,428,883、4,315,925和4,383,993中所述，将这些文献的内容引入本文作为参考。

根据迄今为止通过口服途径治疗的EPM病例的综合结果，特别令人意外的是通过使用不同的给药途径(即鼻内)并降低剂量可以获得更好的结果，尤其是当使用必须对马体内有机组织发挥其作用的抗原虫药时更是如此。此外，尽管上述建议的增溶技术是公知的，但是迄今为止尚未提示可以将这类技术用于增溶诸如地克珠利、托曲珠利和托曲珠利砜这样的以三嗪为基础的抗原虫药以便形成鼻内给药用组合物。鼻内途径要求药物通过鼻粘膜直接吸收并直接通过血脑屏障进入CSF而没有必须的肝脏首过作用。这可以产生使用这种给药途径、甚至使用显著低的药物单位剂量所观察到的令人意外的更好的结果。

例如，本发明的一个实施方案使用一种用于治疗EPM的适合于鼻内给药的组合物，该组合物由治疗有效量的托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利组成，其中所述单位剂量低于在通常需要口服给予各药物时对托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的治疗量所需的单位剂量。在优选的实施方案中，由托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利组成的组合物的治疗有效量约为口服给药所需的托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的治疗有效量的1/4-1/100，而尤其是口服给药所需的托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的治疗有效量的约1/10。目前建议的托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的口服剂量水平为每日口服给予一次5-10mg/kg/单位剂量，使得典型的500kg马每天接受约2.5-约5克的活性组分。

因此，本发明的一个优选的实施方案包括一种由用N-甲基-葡糖胺和水溶解的托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利组成的组合物。例如，如何增溶用于本发明所关注的组合物中的托曲珠利的典型实例是将约10mg的托曲珠利与约100mg的N-甲基-葡糖胺和约10cc的水混合。可以理解：由于得到了托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的公知特性，所以可以将其它溶剂用于制备上述组合物。

在本发明的一个实施方案中，用于鼻内给药的每单位剂量的托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的有效量约为50mg-约1,500mg，而尤其是约100mg-约750mg。在一个实施方案中，每单位剂量的托曲珠利、托曲珠利砜或磺酰托曲珠利的有效量约为500mg。根据治疗或预防EPM所需的剂量的不同(可以使用本领域中公知的方法使其最佳化)，可以为产生单位剂量增溶适当量的托曲珠利或磺酰托曲珠利或可以以多治疗瓶或容器的形式合并所述单位剂量。

同样，本发明的另一个实施方案提供了一种适合于鼻内给药的组合物，该组合物由治疗有效量的地克珠利组成，其中所述单位剂量低于口服给药治疗EPM所需的地克珠利治疗量的单位剂量。在优选的实施方案中，由地克珠利组成的组合物的治疗有效量约为口服给药所需的地克珠利的治疗量的1/4-1/100，而尤其是口服给药所需的地克珠利的治疗量的约1/10。

增溶用于本发明关注的组合物的地克珠利的典型实例是将约10mg的地克珠利与约20mg的烟酰胺、约300mg的丙二醇和约9-10cc的水混合。所关注的是可以将其它溶剂用于制备含有地克珠利的组合物。本领域技术人员可以从公知溶剂中进行选择以便符合特定实施方案，参见，例如《地克珠利Janssen药物安全性信息》(JanssenPharmaceutica Safety Information for Diclazuril)(R-64433)，将该文献的内容引入本文作为参考。

在本发明的一个实施方案中，用于鼻内给药的每单位剂量的地克珠利的有效量约为50mg-约1,000mg，而尤其是约100mg-约750mg。在一个实施方案中，每单位剂量的地克珠利的有效量约为350mg。根据治疗或预防EPM所需的剂量的不同(可以使用本领域中公知的方法使其最佳化)，由此可以为产生单位剂量增溶适当量的地克珠利或可以以多治疗瓶或容器的形式合并所述单位剂量。

因此，本发明的另一个实施方案由此提供了一种适合于鼻内给药的组合物，该组合物由治疗有效量的地克珠利和DMSO组成，其中所述单位剂量低于口服给药治疗EPM所需的地克珠利治疗量的单位剂量。在优选的实施方案中，由地克珠利和DMSO组成的组合物的治疗有效量约为口服给药所需的地克珠利的治疗量的1/4-1/100，而尤其是口服给药所需的地克珠利的治疗量的约1/10。

目前本发明的一个优选的实施方案包括一种适合于鼻内给药的含有溶于DMSO的地克珠利的组合物。将地克珠利放入DMSO溶液并可以进一步与其它药物可接受的载体和赋形剂一起配制而用于鼻内给药以便适合特定治疗方案。用于给药的典型单位剂量约为50mg-约750mg，而尤其是约100mg-约500mg，且优选约250mg。在一个实例中，将500mg的地克珠利溶于10-15cc的DMSO并可以用于鼻内给药。还可以将这种同样的组合物用于通过本文所提供的方法治疗EPM的静脉内给药。

一般来说，以每日为基础，使用例如直接将溶液施用于鼻粘膜的导管和注射器、通过鼻内给予该溶液可以治疗马科动物受试者。根据动物的素质的不同，应在实施该步骤之前使用适当的约束诸如鼻部压板。在适当约束动物后，将导管深入到动物鼻孔至口咽部的程度。将大部分溶液经导管注射在口咽部处的鼻粘膜上，将剩余部分经导管缓慢抽出时注入。对于每日给药来说，如果使用本文所提供的某些治疗方法，那么可以选择鼻孔以便将粘膜刺激降低至最低限度。每次给予的鼻内施用的组合物总体积一般不超过15-20cc且每次给药优选不超过约10cc。

因此，正如下面更具体地描述的，由地克珠利和DMSO组成的上述溶液可以进一步适合于通过本领域中公知的任意许多方法持续释放地克珠利，所述的公知方法包括应用由例如蔗糖乙酸异丁酸酯、甲基纤维素或微颗粒等组成的赋形剂和控释释放***。当然，本文所述的缓释组合物的给药频率和单位剂量的量可以随释放***和特殊制剂释放特性的不同而改变。然而，由于得到了本发明的教导，所以使剂量和治疗方案最佳化对本领域技术人员来说是常规的。

本发明的另一个实施方案包括一种用于治疗EPM的适合于鼻内给药的组合物，该组合物由治疗有效量的抗原虫药硝唑尼特组成，其中所述单位剂量低于口服给予它通常所需的硝唑尼特治疗量所要求的单位剂量(如上述所引用的参考文献中所述)。在优选的实施方案中，由硝唑尼特组成的组合物的治疗有效量约为口服给药所需的硝唑尼特的治疗有效量的1/4-1/100，而尤其是口服给药所需的硝唑尼特的治疗有效量的约1/10。

可以理解还可以将其它硝基噻唑类、其衍生物、类似物、异构体、盐和天然代谢物用于本文所公开的治疗和预防EPM的组合物中。

硝唑尼特的剂量可以根据特殊制剂的不同而在约100mg-约1,500mg之间改变，而对于鼻内用制剂来说，尤其是在约250mg-约1000mg之间改变。

本发明的另一个实施方案提供了一种适合于马鼻内或以其它非肠道方式给药的组合物，该组合物由治疗有效量的乙胺嘧啶和至少一种磺胺组成，其中所述单位剂量低于口服或以其它非肠道方式给药治疗EPM所需的相同联用药物治疗量的单位剂量。在优选的实施方案中，由乙胺嘧啶和所述磺胺组成的组合物的治疗有效量约为口服或以其它非肠道方式给药所需的相同联合用药物的治疗量的1/4-1/100，而尤其是口服或以其它非肠道方式给药所需的相同联用药物的治疗量的约1/10。当然，这些组合物可以含有一种以上的磺胺和乙胺嘧啶以及另外的药物上可接受的赋形剂和佐剂。

另外关注的是适合于非肠道(例如肌内、皮下或静脉内)给药的组合物，它们由至少一种具有抗原虫活性的治疗有效量的化学活性剂组成，例如以三嗪为基础的抗原虫药(三嗪二酮或三嗪三酮，例如地克珠利、托曲珠利或磺酰托曲珠利)或硝基噻唑衍生物，其中所述单位剂量低于口服给药治疗或预防EPM所需的化学活性剂治疗有效量的单位剂量。在优选的实施方案中，由所述抗原虫药组成的组合物的治疗有效量约为口服给药所需的化合物的治疗量的1/4-1/100、而尤其是口服给药所需的化合物的治疗量的约1/10。

本发明还提供了用于治疗和预防马类动物(例如一种马)体内EPM的方法，该方法包括鼻内给予诸如由本发明提供的那些组合物的步骤。使用本领域技术人员一般公知的方法可以完全使单位剂量和治疗方案最佳化。

本发明进一步提供了用于治疗和预防马类动物(例如一种马)体内EPM的方法，该方法包括以非肠道方式例如皮下、肌内、静脉内或经皮方式给予诸如由本发明提供的那些组合物的步骤。使用本领域技术人员一般公知的方法可以完全使单位剂量和治疗方案最佳化。

在本发明的另一个实施方案中，可以将本文所公开的任意抗原虫药且尤其是以三嗪为基础的抗原虫化合物或包括但不限于地克珠利、托曲珠利或托曲珠利砜、磺酰托曲珠利和硝唑尼特在内的硝基噻唑类制成适合于缓释的组合物。该缓释组合物可以包括配制成注射或吸收用的诸如微颗粒(微球体或微囊)、凝胶等这样的任意许多受控释放***。可以通过口服或包括肌内、皮下或静脉内注射在内的任何口服或非肠道途径给予本发明的缓释组合物。同样，所述的缓释组合物可以通过贴剂、局部施用、鼻内或宫内释放等而适合于经粘膜或经皮释放。

用于制备微球体或微囊(微颗粒)的物质可以包括任意的生物相容性且优选可生物降解的聚合物、共聚物或掺合物。合适的聚合物包括多羟基酸类、聚原酸酯类、聚丙酮类(polyactones)、聚碳酸酯类、聚磷腈类(polyphosphazenes)、多糖类、蛋白质、聚酐类、其共聚物及其掺合物。合适的聚(羟酸)包括聚乙醇酸(PGA)、聚乳酸(PLA)及其共聚物。所述微颗粒优选包括聚(D，L-乳酸)和/或聚(D，L-乳酸-乙醇酸)。以诸如制备微颗粒所用的物质这样的因素为基础，可以设计并生产具有数天至数周或数月范围的降解和释放时间的颗粒。当然，可以将所关注的缓释组合物用于治疗或预防EPM的方法中。

使用不破坏活性化合物活性的可用方法可以制备所述微颗粒。使用单乳和复乳溶剂蒸发法、喷雾干燥法、溶剂提取法、溶剂蒸发法、相分离法、单纯和复合凝聚法、界面聚合法和其它本领域技术人员众所周知的方法可以制备微颗粒。

为制备药物释放微球体而开发的方法描述在文献中，例如Doubrow，M.编辑的《药物和制药中的微囊和毫微型颗粒》(Microcapsules and Nanoparticles in Medicine and Pharmacy)，CRC Press，Boca Raton，1992中所述。另外参见美国专利号5,407,609和5,654,008，将这些文献教导的内容引入本文作为微球体制备方法的参考。

本发明受控释放***的优选实施方案的一个特殊实例是一种由上述任意的治疗剂(包括任意的以三嗪为基础的抗原虫药和/或硝唑尼特)和美国专利号5,747,058中所述的蔗糖乙酸异丁酸酯(SAIB)组成的组合物，将该文献的内容引入本文作为参考。根据制剂的不同，可以通过局部(例如经皮或经粘膜)、皮下或肌内给予由抗原虫药和SAIB组成的组合物。

本发明包括的控释制剂的另一个特殊实例是一种由上述任意的治疗剂(包括任意的以三嗪为基础的抗原虫药和/或硝唑尼特)和甲基纤维素(例如Methocel)组成的组合物。可以理解的是可以使用其它包括其它可降解或不可降解的赋形剂的控释制剂，不过优选可降解的赋形剂。根据制剂的不同，可以通过局部(例如经皮或经粘膜)、皮下或肌内给予由抗原虫药和Methocel组成的组合物。

此外，本发明提供了上述用于治疗和预防另一种常见的良种赛马问题的方法的组合物，所述的良种赛马问题是称作喉痹的具有未知病因的疾病。尽管不希望受到理论限制，但是认为喉痹可能是由EPM导致的或因它而恶化。喉痹是一种由认为喉神经损害所导致的打开咽喉杓状软骨的展肌麻痹。杓状软骨不能展开气道并在训练时使受侵染的马发出“吼叫”的声音且马呼吸急促。因此，可以按照本发明治疗或预防喉痹和其它可能与EPM相关的疾病和情况。

本发明的另外目的、优点和其它新特征部分记载在本说明书中且根据上述实验而对本领域技术人员来说是显而易见的或可以通过实施本发明而得知。

上述描述的本发明优选实施方案用于解释和说明的目的。它们并不是所公开的明确形式的本发明的全部或用来限定本发明。能够根据上述教导进行明显的修改或改变。选择和描述实施方案以便为本发明的机理提供最佳解释且其实际应用能够使本领域技术人员在与所关注的特定应用相适合时使用各种实施方案形式和各种修改方案形式的本发明。当按照给它们授予适当、合法和公正的权利的范围解释时，所有这类修改和改变均属于由所附权利要求确定的本发明的范围。

Claims

1.以三嗪为基础的抗原虫药的钠盐用于制备治疗或预防人或动物体内原虫感染的口服给药形式的药物的用途，其中所述的以三嗪为基础的抗原虫药选自克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利、磺酰托曲珠利、托曲珠利砜及其混合物组成的组。

2.权利要求1的用途，其中所述的以三嗪为基础的抗原虫药选自克拉珠利、地克珠利、来曲珠利、托曲珠利及其混合物组成的组。

3.权利要求1的用途，其中所述的以三嗪为基础的抗原虫药是磺酰托曲珠利或托曲珠利砜。

4.权利要求1的用途，其中所述的以三嗪为基础的抗原虫药是地克珠利。

5.权利要求1的用途，其中所述原虫感染选自肉孢子虫病、梨浆虫病、巴贝虫病、弓形体病和隐孢子虫病。

6.权利要求1的用途，其中所述原虫感染是马科动物中的马原虫脑脊髓炎，所述的以三嗪为基础的抗原虫药是地克珠利。

7.权利要求1的用途，其中所述原虫感染是马科动物中的马原虫脑脊髓炎或马梨浆虫病，所述的以三嗪为基础的抗原虫药是磺酰托曲珠利或托曲珠利砜。

8.权利要求1的用途，其中所述原虫感染是马科动物中的马原虫脑脊髓炎或马梨浆虫病，所述的以三嗪为基础的抗原虫药是地克珠利。

9.权利要求1的用途，其中所述原虫感染是人隐孢子虫病。