CN115728404B - 蓝芩口服液对照提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本申请公开了蓝芩口服液对照提取物及其制备方法和应用。所述的蓝芩对照提取物，其来源于：黄芩、黄柏、栀子、板蓝根、胖大海药材的合并提取物或者蓝芩口服液中间提取物，经进一步分离纯化所得。本发明的蓝芩口服液对照提取物性状稳定、均匀，用于混合对照品使用，标识成分信息丰富，检测高效、成本低，可用于蓝芩中药制剂质量检测。
Description
技术领域
本文涉及医药技术，尤指蓝芩口服液对照提取物及其制备方法和应用。
背景技术
蓝芩口服液是扬子江药业集团根据临床验方自主开发而成的纯中药制剂，由板蓝根、黄芩、黄柏、栀子、胖大海五味中药组成，经药理药效研究和临床试验证明具有显著的解热、镇痛、抗炎、抗菌、抗病毒五效合一的作用，主要用于急性咽炎，肺胃实热证所致的咽痛、咽干、咽部灼热等症，对上呼吸道感染等有明显的抗病毒、抗菌消炎作用，尤其在退热、消除咽痛、咳嗽等症状方面，疗效确切。蓝芩口服液因其疗效广，不良反应少，而且使用人群较广，越来越受到社会的重视，发展前景十分广大。
药品的质量是保证临床用药安全有效的前提，评价蓝芩口服液制剂质量的方法是对栀子苷含量进行控制，但这种方法不能从整体上反映中医用药的整体疗效。要控制中成药的质量，需要对物质群整体予以控制；中国专利CN110108825A公开了蓝芩口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱和用途；以蓝芩口服液制备得供试品溶液，以溶解有腺苷、表告依春、盐酸黄柏碱、绿原酸、木兰花碱、栀子苷、苯甲酸、盐酸小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的溶液为对照品溶液，通过高效液相色谱仪测定液相色谱；将得到的液相色谱导入中药色谱指纹图谱相似度评价***分析，经多点校正，数据匹配，分析得到蓝芩口服液指纹图谱。该发明的蓝芩口服液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱能较全面的反映蓝芩口服液的质量信息，从而保证产品质量均一稳定。
发明内容
对照提取物是经过提取制备，含有多种主要有效成分或指标性成分，用于药材(饮片)、提取物、中成药等鉴别或含量测定用的标准物质。经标定后的对照提取物用于色谱峰定位以及含量测定将大大节省单体对照品的使用，降低检测成本，有利于进一步推广。采用中药对照提取物作为对照，可以用于控制产品质量，但是目前已经公开的中药对照提取物主要是中药材的，很少涉及中成药的。造成这种状况的原因可能与中成药的药味较多、成分复杂、药材可能存在相互作用等有关。本申请从复方出发，以多成分为检测指标制备出质量可测，品质稳定的对照提取物，具有较高的应用价值。
本申请提供了一种蓝芩口服液对照提取物及其制备方法和应用，从而实现了对蓝芩口服液质量控制的提高。
一方面，本申请提供了一种蓝芩口服液对照提取物，所述的对照提取物包含京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷，以及5-O-阿魏酰奎尼酸与4-O-阿魏酰奎尼酸中的一种或两种。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和5-O-阿魏酰奎尼酸。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和4-O-阿魏酰奎尼酸。
在另一些实施方式中，所述的对照提取物包含京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷，以及5-O-阿魏酰奎尼酸与4-O-阿魏酰奎尼酸中的一种或两种。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和5-O-阿魏酰奎尼酸。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和4-O-阿魏酰奎尼酸。
在另一些实施方式中，所述的对照提取物包含去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含异栀子苷、6-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷、去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷，以及5-O-阿魏酰奎尼酸与4-O-阿魏酰奎尼酸中的一种或两种。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含异栀子苷、6-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷、去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和5-O-阿魏酰奎尼酸。
在一些实施方式中，所述的对照提取物包含异栀子苷、6-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷、去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和4-O-阿魏酰奎尼酸。
在另一些实施方式中，所述的对照提取物包含异栀子苷、6-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷、去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸。
在上述实施方式中，所述的对照提取物，按干燥品计算，每1g含京尼平龙胆双糖苷不低于26.83mg，栀子苷不低于126.19mg，盐酸黄柏碱不低于2.76mg，4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸之和不低于12.29mg，黄芩苷不低于90.50mg，盐酸小檗碱不低于6.62mg，千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷不得低于12.78mg，以及汉黄芩苷不得低于21.69mg。
在上述实施方式中，所述的对照提取物，按干燥品计算，每1g含京尼平龙胆双糖苷26.83mg至56.88mg，栀子苷126.19mg至261.22mg，盐酸黄柏碱2.76mg至7.50mg，4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸之和为12.29mg至35.36mg，黄芩苷90.50mg至196.05mg，盐酸小檗碱6.62mg至26.10mg，千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷12.78mg至26.14mg，以及汉黄芩苷21.69mg至44.20m。
在上述实施方式中，所述的对照提取物，按照高效液相法(例如中国药典2015年版，通则0512)测定得到所述的对照提取物的特征谱图，在所述特征图谱中应有至少9个、10个、11个、12个、13个或14个特征峰；优选地，有至少14个特征峰。在一些实施方式中，在所述的特征图谱中，所述9个、10个、11个、12个、13个或14个特征峰的相对保留时间在±10％保留之内具有如下数值中：0.170(峰1)、0.191(峰2)、0.209(峰3)、0.296(峰4)、0.314(峰5)、0.365(峰6)、0.395(峰7)、0.521(峰8)、0.538(峰9)、0.875(峰10)、1.000(峰11)、1.091(峰12)、1.197(峰13)、1.274(峰14)。
在上述实施方式中，所述的对照提取物，按照水分测定法(例如中国药典2015年版，通则0832第二法)测定，所述对照提取物的水分不超过4.5％。
在上述实施方式中，所述的对照提取物，按照灰分测定法(例如中国药典2015年版，通则2302)测定，所述对照提取物的总灰分不超过3.5％。在一些实施方式中，所述的对照提取物，按照灰分测定法(例如中国药典2015年版，通则2302)测定，所述对照提取物的酸不溶性灰分不超过0.2％。
在第二方面，本申请提供了蓝芩口服液对照提取物的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：
以黄芩、黄柏、栀子、板蓝根、胖大海药材的合并提取物，或者蓝芩口服液中间提取物，经大孔树脂吸附以及中压色谱分离(MCI)柱纯化，浓缩并干燥得到对照提取物。
在一些实施方案中，本申请提供的蓝芩口服液对照提取物的制备方法包括如下步骤：
步骤S100
按蓝芩口服液处方量称取板蓝根、黄芩、栀子、黄柏、胖大海饮片，加水煎煮三次，合并煎液，滤过，离心，取上清液，浓缩；或者取蓝芩口服液浓缩工艺中间提取物；
步骤S200
取步骤S100得到的浓缩液，加水稀释，摇匀，经大孔吸附树脂精制，分为水和乙醇洗脱；水洗脱部位弃去，合并乙醇洗脱部位，减压浓缩，浓缩液经冷冻干燥制成冻干粉；
步骤S300
取步骤S200得到的冻干粉，以甲醇水溶液溶解，经中压色谱分离柱纯化，并以梯度的甲醇进行洗脱；收集洗脱液，浓缩，合并后冻干，得到对照提取物。
在上述实施方式中，所述步骤S100中，所述蓝芩口服液处方量为板蓝根150－450克，黄芩150－450克，栀子150－450克，黄柏20－200克，胖大海20－200克；任选地，所述蓝芩口服液处方量为板蓝根300克，黄芩240克，栀子300克，黄柏120克，胖大海100克。
在一些实施方式中，所述步骤S100中，所述的加水煎煮三次为：所述步骤S100中，所述的加水煎煮2-4次：每次各1-3小时；和/或，每次加入3-6倍重量比的水；
优选地，第一次2小时，第二次、第三次各1小时；和/或，第一次加入6倍重量比的水，第二次加入4倍重量比的水，第三次加入3倍重量比的水。
在一些实施方式中，所述步骤S100中，所述浓缩后得到的浓缩液的相对密度为1.10-1.12(70℃)。
在一些实施方式中，所述步骤S200中，所述大孔吸附树脂是以二乙烯基苯或修饰的聚苯乙烯为基体，例如HP20、SP207、SP825L、SP825、SP850、SP700、SP70等；在一种实施方式中，所述步骤S200中，所述大孔吸附树脂是SP825L。
在一些实施方式中，所述步骤S200中，所述乙醇的浓度为60％v/v至90％v/v，任选地，为80％v/v。
在一些实施方式中，所述步骤S300中，所述中压色谱分离柱为中压色谱分离凝胶MCI柱，优选填料为聚苯乙烯型或甲基丙烯酸酯型，例如CHP20P、HP20SS、CA08P、CHP2MGY等。在一种实施方式中，所述步骤S300中，所述色谱分离柱的填料为HP20SS。
在一些实施方式中，所述步骤S300中，所述溶解用甲醇水溶液的浓度为5％v/v。
在一些实施方式中，所述步骤S300中，所述不同梯度的甲醇包括5％v/v甲醇、20％v/v甲醇、70％v/v甲醇。
在一些实施方案中，所述步骤S300为：以5％v/v的甲醇溶解(3g冻干粉用5％v/v甲醇30mL超声溶解)，经HP20SS柱纯化，物料比为3g:200mL，依次用5％甲醇两个柱体积(400mL)、10％v/v甲醇两个柱体积(400mL)、20％v/v甲醇3个柱体积洗脱(600mL)，70％v/v甲醇6个柱体积洗脱(1200mL)。分别收集各部位洗脱液，分别浓缩至小体积，合并后冻干，得到对照提取物。
第三方面，本申请提供了根据上述制备方法得到的蓝芩口服液对照提取物。
第四方面，本申请提供了上述蓝芩口服液对照提取物在控制蓝芩口服液质量中用途，所述的用途包括采用上述蓝芩口服液对照提取物在蓝芩口服液制剂指标性成分的高效液相色谱特征图谱中的鉴别方法，该鉴别方法包括：
确定高效液相色谱的色谱条件；
以上述蓝芩口服液对照提取物制备对照提取物溶液；
以蓝芩口服液制剂制备供试品溶液；
分别吸取对照提取物溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
在一些实施方式中，所述的鉴别方法可以包括以黄芩苷制备对照品参照物溶液，并吸取对照品参照物溶液，注入高效液相色谱仪，用以定位；例如，取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含黄芩苷100.0照品的溶液，作为对照品参照物溶液。
在一些实施方案中，所述的鉴别方法，其中，所述色谱的条件为：
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；
以乙腈为流动相A，以0.2％v/v磷酸水溶液为流动相B，进行梯度洗脱；
柱温为30℃；
检测波长230nm。
在一些实施方案中，所述的鉴别方法，其中，所述梯度洗脱的程序为：
在一些实施方案中，所述的鉴别方法，其中，所述对照提取物溶液的制备方法为：取蓝芩口服液对照提取物约0.03g，精密称定，置于锥形瓶中，精密加入10mL 50％甲醇溶液，定容至刻度，超声处理(功率250W，频率45KHZ)30分钟，放冷，补足失重，0.45μm滤膜过滤，取续滤液，即得。
在一些实施方案中，所述的鉴别方法，其中，所述供试品溶液的配制方法为：精密量取蓝芩口服液制剂1mL，置于25mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，0.45μm滤膜过滤，取续滤液，即得。
在一些实施方案中，所述的鉴别方法，其中，所述的测定为：分别精密吸取对照提取物溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。
与现有技术相比，本发明的有益效果：本申请在对照提取物制备工艺开发中采用两步树脂分离工艺，不同于有机溶剂萃取，使用有机溶剂仅为乙醇和甲醇，其分离纯化得到的提取物能够较全面的还原检测条件下色谱峰信息。通过本申请设定的提取纯化工艺获得的对照提取物，能够在对应的中成药产品质量控制应用中，开展多指标鉴别和具有同时多成分测定含量的起对照物的作用。
在本申请对照提取物的研究开发中，按照指标性成分具有含量高、稳定性好、活性强的特点和工艺可操作难易程度，选择本发明的京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、5-O-阿魏酰奎尼酸与4-O-阿魏酰奎尼酸作为蓝芩对照提取物组成成分。这些成分含量相对较高、具有重现性好、容易定量、产业化容易实施等优点，能够更好监控蓝芩口服液的质量，避免原料、工艺上或操作的不稳定因素带来的影响。因此，选择以其作为蓝芩对照提取物组成成分，可以有效地实现稳定可控、重现性好、可操作性强、准确性高等优点，
并且，在工艺过程中的质量传递可溯源性强。
本申请的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本申请而了解。本申请的其他优点可通过在说明书以及附图中所描述的方案来实现和获得。
附图说明
附图用来提供对本申请技术方案的理解，并且构成说明书的一部分，与本申请的实施例一起用于解释本申请的技术方案，并不构成对本申请技术方案的限制。
图1为本申请对照提取物的HPLC图谱；
图2为三批口服制剂的HPLC图谱；
图3为对照提取物和三批口服制剂对比的HPLC图谱；
图4为对照提取物特征HPLC图谱。
具体实施方式
为使本申请的目的、技术方案和优点更加清楚明白，下文中将对本发明的实施例进行详细说明。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互任意组合。
仪器与试药
旋转蒸发仪(上海爱朗仪器有限公司，N-1100)；油浴锅(上海爱朗仪器有限公司，OSB-2100)；真空泵(WELCH，114184)。预冻机(EYELA，PFR-1000)；冻干机(CHRIST,Alpha 1-2LD plus)。电子天平(上海菁海仪器有限公司，YP3002N)。超声波清洗器(SK7210HP，53kHz，消耗功率350W，加热功率390W)，上海科导超声仪器有限公司。
进口树脂2种：1#树脂为HP2-MGL，2#树脂为SEPABEADS SP825L(三菱)，均购自北京绿百草科技发展有限公司。
国产树脂5种：3#树脂为HPD-400，4#树脂为HPD-600，5#树脂为HPD-826，6#树脂为NKA-9，7#树脂为ADS-17，均购自沧州宝恩吸附材料科技有限公司。
反相C18S03230G-A(50μ，三菱)，MCI GEL CHP20P/P120(75-150μ，三菱)，MCIHP20SS(75-150μ，三菱)和MCI SP20SS(63-75μ，三菱)，均购自北京绿百草科技发展有限公司。
甲醇或乙醇均为分析纯，购自国药集团化学试剂有限公司或上海麦克林生化科技有限公司(MACKLIN)。医用乙醇，乙醇含量约为95％，市场购买。水为实验室高纯水。
原药：胖大海(批号2004005)、板蓝根(批号2003017)、黄柏(批号2002001)、栀子(批号2004008)和黄芩(批号2004027)；浓缩液提取物3批，批号依次为：21051262、21051163、21051164，供中试放大试验用；其余浓缩液、清膏和成品制剂，供样品测定用，均由扬子江药业集团有限公司提供(市场上采购，或根据蓝芩口服液工艺制备)。
色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为230nm，柱温30℃。理论板数按黄芩苷峰计算应不低于3000。
Agilent 1260HPLC仪(安捷伦科技有限公司)；Waters2695-2998高效液相色谱仪(美国Waters)；岛津LC-20AT高效液相色谱(日本岛津公司)；电子天平(YP50002，31772，上海越平科学仪器制造有限公司)；冷冻干燥机(Lab-1-50，北京博医康实验仪器有限公司)，XSE105十万分之一分析天平(METTLER)。不同品牌色谱柱，具体信息如下表3-1所示。
表3-1色谱柱信息
纯净水(广州屈臣氏食品饮料有限公司)，磷酸(国药集团化学试剂有限公司)；栀子苷对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，RFS-Z00311802022)，京尼平龙胆双糖苷对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，RFS-J07502101007)，5-O-阿魏酰奎尼酸对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，RFS-DFZY-AWXKN-210312)，盐酸小檗碱对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，RFS-Y03511811015)，汉黄芩苷对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，RFS-H01911809030)，黄芩苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号：110715-201016)，千层纸素A-7-O--201葡萄糖醛酸苷对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，RFS-Q04602005021)，盐酸黄柏碱对照品(成都瑞芬思生物科技有限公司，RFS-Y08601905015)，去乙酰车叶草酸甲酯(中国药品生物制品检定所，批号：111786-200801)，新绿原酸(成都瑞芬思生物科技有限公司，批号：RFS-X01401903029)，隐绿原酸(成都瑞芬思生物科技有限公司，批号：RFS-Y06701903029)。
实施例1
蓝芩口服液(LQ)对照提取物
【处方】板蓝根300克，黄芩240克，栀子300克，黄柏120克，胖大海100克
制法：按比例称取上述处方量取板蓝根、黄芩、栀子、黄柏、胖大海饮片，加水煎煮三次(第一次2小时，第二次、第三次各1小时；和/或，第一次加入6倍重量比的水，第二次加入4倍重量比的水，第三次加入3倍重量比的水)，合并煎液，滤过，离心，取上清液，浓缩至一定密度(70℃，相对密度为1.10-1.12)。
粗分工艺：取250mL浓缩液，加等体积水稀释，摇匀，经大孔树脂(SP825L，5000mL)精制，分为水(3个柱体积，15000mL)和80％v/v乙醇(4个柱体积，20000mL)。水洗脱部位弃去，合并80％v/v乙醇洗脱部位，减压浓缩，浓缩液经冷冻干燥制成冻干粉。
纯化工艺：取本冻干粉，以5％v/v的甲醇溶解(3g冻干粉用5％v/v甲醇30mL超声至溶解)，经MCI(HP20SS)柱纯化，物料比为3g：200mL，依次用5％甲醇两个柱体积(400mL)、10％甲醇两个柱体积(400mL)、20％甲醇3个柱体积洗脱(600mL)，70％甲醇6个柱体积洗脱(1200mL)。分别收集各部位洗脱液，分别浓缩至小体积，合并后冻干，得到蓝芩对照提取物。
实施例2
蓝芩对照提取物制备工艺研究
1.粗分工艺
1.1上样物质的制备
(1)提取批次1
取扬子江药业集团有限公司提供原药，胖大海包煎，栀子破壳，黄柏切成约2cm小段，黄芩，板蓝根切成长约1cm的小段。胖大海100g，板蓝根300g，黄柏120g，黄芩240g，栀子300g。共计：1060g原药。加水煎煮三次，第一次2小时，6倍量水；第二次1小时，4倍量水；第三次1小时，3倍量水。合并煎液，滤过(200目)，得到滤液9200ml，为水提取液(取样)。取其中2000ml水提液冻干，得到提取液冻干粉129.84g(以下简称“冻干粉”)；取其余7200ml浓缩至700ml(70℃，相对密度为1.10-1.12)。取580ml浓缩液，加约920ml医用95乙醇，醇沉24h以上，离心(4000rpm，30min)，取上清液1140ml，减压浓缩至390ml，得到清膏(60℃，1.19)。
1.2上样物质的选择(包括冻干粉循环上样)
以1#和2#树脂为研究对象，比较浓缩液、清膏和冻干粉(取1.1项下的提取批次1)三种形式，确定其中一种为上样方式。
(1)上样方法(小柱子，细柱子，内径约为3.8cm)：
树脂200ml(以95％乙醇浸泡24小时后，自然沉降至体积不变)。装柱，用95％乙醇冲洗6个柱体积(1200ml)，再用水冲洗6个柱体积，摇匀，待自然沉降至树脂体积不变，待水液面与树脂面齐平，上样，用水冲洗2个柱体积后静置过夜，第二天再用水冲洗一个柱体积，合并水洗脱液，摇匀后取样；依次用30％乙醇冲洗3个柱体积，60％乙醇冲洗3个柱体积。
浓缩液上样方法：取浓缩液10ml，倒入树脂柱后搅拌，其余同上。
清膏上样方法：取清膏10ml，倒入树脂柱，无需搅拌，其余同上。
冻干粉上样方法：取冻干粉3.2g，加水20ml，超声20min，其余同上。
冻干粉循环上样方法：取冻干粉3.2g，加水20ml，超声20min，上样后收集第一个柱体积的水洗脱部分，加入柱中，继续冲洗，水洗脱部位总体积为600ml。
(2)测定结果
结果显示，浓缩液、清膏各个洗脱部位(水、30％乙醇、60％乙醇和95％乙醇洗脱部位)经HPLC分析，相同洗脱部位的成分相似。提取液冻干粉在1#树脂上样时出现水溶液泄漏现象。2#树脂则浓缩液、清膏和提取液冻干粉洗脱行为一致。
同时，浓缩液经提取后浓缩而得，操作简便，重现性好，最为适宜。清膏虽洗脱行为一致，由于经过醇沉、静置、浓缩，操作繁琐。提取液冻干粉上样，成本高，步骤繁琐，也存在不能完全复溶的风险，且有的树脂还出现成分泄露现象。最后，选择浓缩液为上样物质。
1.3重复性试验
(1)方法
1#树脂，浓缩液上样，均为搅拌上样，分别比较在树脂量均为200ml(95％乙醇)，柱子内径粗细对洗脱成分的影响。细柱子：内径约为3.8cm；粗柱子：内径约为4.6cm。采用30％+60％乙醇洗脱的方法。
洗脱方法见1.2(1)项下方法。
(2)结果
HPLC检测结果表明，工艺重复性试验1(细柱子)和重复性2(粗柱子)比较，水洗部位两次无差异，30％乙醇洗部位有差异，60％乙醇洗部位有差异，但30％+60％乙醇部位无差异。表明树脂柱粗细对水洗脱部位、30％+60％乙醇总成分和95％乙醇洗脱部位成分无显著性影响。
4大孔树脂1#-7#的选择：
以浓缩液(取1.1项下的提取批次1)为研究对象，比较7种树脂(1#-7#)的不同洗脱行为，以色谱峰信息保留的全面性为指标，优选了1-2种树脂进行粗分研究。
树脂1#和7#浓缩液冻干粉上样后，出现水洗脱液成分泄漏现象。树脂2#由于三种上样物质均无此现象。3#、4#、5#、6#，各洗脱部位得到的特征图谱与1#和2#树脂成分相似，水部位几乎没见目标成分；30％乙醇部位，栀子苷、生物碱和部分黄芩苷类成分洗脱；60％乙醇部位黄芩苷及部分生物碱洗脱；95％乙醇部位未见目标成分。而6#残留物过多，弃用。由于4#的颗粒均匀性和澄清度优于3#和5#树脂。故选择2#树脂(SP-825L)和4#树脂(SP-600)。
2.纯化工艺研究
2.1MCI型号的选择
(1)方法
比较不同型号MCI纯化2#树脂80％乙醇洗脱部位的能力强弱，选择最佳型号的MCI制备LQ对照提取物。MCI HP20SS、GEL CHP20P/P120、SP20SS。
冲柱与平衡(1个柱体积＝200mL)：
1)甲醇冲柱10个柱体积(2000mL)。
2)20％甲醇溶液平衡3个柱体积(600mL)。
3)10％甲醇溶液平衡3个柱体积(600mL)。
4)5％甲醇溶液平衡3个柱体积(600mL)。
5)上样前加入1个柱体积的5％甲醇溶液平衡。
上样
3g冻干粉(30ml的5％甲醇溶解，加入170ml的5％甲醇冲洗，静置吸附8h以上，上样液澄清，弃去)
洗脱
5％甲醇溶液洗脱2个柱体积(400mL)。
10％甲醇溶液洗脱2个柱体积(400mL)。
20％甲醇溶液洗脱3个柱体积(600mL)。
70％甲醇溶液洗脱6个柱体积(1200mL)。
100％甲醇溶液洗脱2个柱体积(400mL)。
洗脱速度(估算值)：V(MCI HP20SS)＝12.5mL/min
V(MCI GEL CHP20P/P120)＝8.0mL/min
V(MCI SP20SS3)＝6.7mL/min
(2)结果
选择2#树脂粗提物，对比HP20SS、CHP20/P120和SP20SS，三种型号的纯化效果，结果显示，三种树脂洗脱行为一致，而以HP20SS流速快，操作最为简便。
实施例3
粗分工艺的放大实验
(1)方法
以浓缩液(取实施例2)为研究对象，选择2#树脂(放大一根，2#-1)和4#树脂(放大两根，4#-1，4#-2)，上样量从浓缩液10ml到250ml；树脂量从200ml扩大到50000ml，均同步扩大25倍。分别比较两种树脂放大试验与小样试验的30％乙醇、60％乙醇和95％乙醇洗脱部位的成分及冻干粉质量。
(2)结果
两种树脂共三根柱子放大结果显示，30％+60％可测成分与小柱测定结果一致，表明该工艺技术参数切实可行；95％部位虽颜色较深，不过冻干粉量极少(仅1.15g，1.35g和1.13g)，可测成分含量低(18.55％，8.04％和1.78％)，且未增加有效可测成分。因此考虑到后期洗脱液回收、冻干等时间和能源消耗成本，该部位属于无效部位，后期不再回收得到冻干粉。
树脂2#和4#放大实验中各部位冻干粉质量和可定量成分测定
2#树脂与4#树脂均有良好的成分富集作用，以2#树脂颗粒均匀、树脂残留物少选用；同时4#树脂虽颗粒均匀度略差，树脂残留物略多，可作为一种替代树脂使用。
醇沉除杂效率：取扬子江药业集团有限公司提供的3批浓缩液(21051262、21051163、21051164)混批样品100ml，折合质量为35g；加95％医用乙醇调醇浓度至60％，4℃静置24h以上，离心(8000rpm，10min，4℃)，得到的沉淀经105℃干燥后为10.35g，沉淀质量占浓缩液质量的29.6％)。
因此大孔树脂的除杂能力(>65％)显著高于醇沉(约30％)。
实施例4
纯化工艺中柱填料的选择
(1)方法
比较MCI(CHP20/P120，粒径75-150μ)和ODS(十八烷基硅烷键合硅胶，粒径50μ)两种细分填料，洗脱行为相似。由于ODS柱填料粒径小，常压下流速过慢，故需要增加加压设备以及压力控制；而MCI柱可在常压下完成成分分离工作。
(2)结果
因此根据洗脱过程的操作方法难易以及对仪器的要求，选择MCI为二次纯化的方法。并且由于所测定成分极性差异较大，从5％部位到70％部位均有，因此确定5％甲醇上样，然后5％甲醇冲洗2个柱体积，10％甲醇冲洗2个柱体积，20％甲醇洗脱3个柱体积，70％加醇洗脱6个柱体积，将5％-70％流份合并浓缩可富集保留较大部位成分。
实施例5
蓝芩口服液(LQ)对照提取物对蓝芩口服液的鉴别方法
照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。
色谱条件与***适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(DM plus C18，柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm)；以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸水溶液为流动相B，按下表的规定进行梯度洗脱，柱温为30℃，检测波长230nm。
参照物溶液的制备取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含黄芩苷100.0照品的溶液，作为对照品参照物溶液。
蓝芩口服液对照提取物溶液的制备取蓝芩口服液对照提取物(实施例1)约0.03g，精密称定，置于锥形瓶中，精密加入10mL 50％甲醇溶液，定容至刻度，超声处理(功率250W，频率45KHZ)30分钟，放冷，补足失重，0.45μm滤膜过滤，取续滤液，即得。
供试品溶液制备精密量取蓝芩口服液制剂(批号分别为19120221、19112721、19112622)1mL，置于25mL容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，0.45μm滤膜过滤，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液、对照提取物溶液和供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，测定，即得。图1为对照提取物的HPLC图谱；图2为三批口服制剂的HPLC图谱；图3为对照提取物和三批口服制剂对比的HPLC图谱。
实施例6
1.特征峰及含量
将实施例5的对照提取物溶液和混合对照品溶液，按照前述的色谱条件进样分析，初步选择14个在各个批次样品中均普遍存在的峰作为特征峰：
1.特征峰1(去乙酰车叶草酸甲酯)2.特征峰2(异栀子苷)3.特征峰3(新绿原酸)4.特征峰4(京尼平龙胆双糖苷)5.特征峰5(隐绿原酸)6.特征峰6(栀子苷)7.特征峰7(黄柏碱)8.特征峰8(4-O-阿魏酰奎尼酸)9.特征峰9(5-O-阿魏酰奎尼酸)10.特征峰10(6-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷)11.特征峰11(黄芩苷)12.特征峰12(小檗碱)13.特征峰13(千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷)14.特征峰14(汉黄芩苷)
综合以上3批蓝芩口服液对照提取物样品相对保留时间，确定蓝芩口服液对照提取物特征图谱鉴别标准：供试品特征图谱中应有14个特征峰，与参照物峰黄芩苷相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％之内。规定值为0.170(峰1)0.191(峰2)、0.209(峰3)、0.296(峰4)、0.314(峰5)、0.365(峰6)、0.395(峰7)、0.521(峰8)、0.538(峰9)、0.875(峰10)、1.000(峰11(S))、1.091(峰12)、1.197(峰13)、1.274(峰14)。结果如图4所示。
以黄芩苷对照品为参照，以其相应的峰为S峰，计算京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、4-O-阿魏酰奎尼酸、5-O-阿魏酰奎尼酸、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-素碱、千葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±10％相对范围之内，并通过对照品分别计算京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷的含量。
3批蓝芩口服液对照提取物(实施例1)样品中京尼平龙胆双糖苷含量范围在42.91-43.75mg/g之间，批内RSD值均小于3％；栀子苷含量范围在193.18-196.24mg/g之间，批内RSD值均小于3％；盐酸黄柏碱含量范围在4.40-4.82mg/g之间，批内RSD值均小于3％；4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸含量范围在17.56-18.74mg/g之间，批内RSD值均小于3％；盐酸小檗碱含量范围在9.45-11.65mg/g之间，批内RSD值均小于3％；千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷含量范围在18.25-18.38mg/g之间，批内RSD值均小于3％；汉黄芩苷含量范围在30.98-31.80mg/g之间，批内RSD值均小于3％；黄芩苷含量范围在149.28-150.81mg/g之间，批内RSD值均小于3％。
本品按干燥品计算，每1g含京尼平龙胆双糖苷(C23H34O15)不得低于30.4mg，含栀子苷(C17H24O10)不得低于91.32mg，含盐酸黄柏碱(C20H24ClNO4)不得低于3.3mg，含4-O-阿魏酰奎尼酸(C17H20O9)和5-O-阿魏酰奎尼酸(C17H20O9)之和不得低于12.7mg，含黄芩苷(C21H18O11)不得低于105.1mg，含盐酸小檗碱(C20H18ClNO4)不得低于7.5mg，含千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(C22H20O11)不得低于12.8mg，含汉黄芩苷(C22H20O11)不得低于21.9mg。
2.检查
2.1性状
(1)本品呈橙黄色至橙红色粉末。
(2)本提取物易溶于水，几乎不溶于甲醇、乙醇。
2.2水分
测定方法：2020年版《中国药典》(四部)0832水分测定法项下第二法(烘干法)。
MCI部位纯化冻干粉水分(n＝2)
根据上表的测定结果，规定水分不得超过4.5％。
2.3灰分
采用2020年版《中国药典》(四部)2302灰分测定法项下总灰分测定法和酸不溶灰分测定法。
表2 MCI冻干粉灰分测定
根据上表的测定结果，规定总灰分分不得过3.5％，酸不溶灰分不得过0.2％。
虽然本申请所揭露的实施方式如上，但所述的内容仅为便于理解本申请而采用的实施方式，并非用以限定本申请。任何本申请所属领域内的技术人员，在不脱离本申请所揭露的精神和范围的前提下，可以在实施的形式及细节上进行任何的修改与变化，但本申请的专利保护范围，仍须以所附的权利要求书所界定的范围为准。
Claims (14)
1.一种蓝芩口服液对照提取物的制备方法，所述的制备方法包括如下步骤：
步骤S100
按蓝芩口服液处方量称取板蓝根、黄芩、栀子、黄柏、胖大海，加水煎煮三次，合并煎液，滤过，浓缩；或者是蓝芩口服液浓缩工艺中间提取物；
步骤S200
取步骤S100得到的浓缩液，加水稀释，摇匀，经大孔吸附树脂精制，分为水和乙醇洗脱；水洗脱部位弃去，合并乙醇洗脱部位，减压浓缩，浓缩液经冷冻干燥制成冻干粉；
所述大孔吸附树脂是以二乙烯基苯或修饰的聚苯乙烯为基体；
所述乙醇的浓度为60％v/v至90％v/v；
步骤S300
取步骤S200得到的冻干粉，以5％v/v甲醇水溶液溶解，经中压色谱分离柱纯化，并以梯度的甲醇进行洗脱，依次用5％甲醇两个柱体积、10％v/v甲醇两个柱体积、20％v/v甲醇3个柱体积洗脱，70％v/v甲醇6个柱体积洗脱；收集洗脱液，浓缩，合并后冻干，得到对照提取物；
所述中压色谱分离柱为中压色谱分离凝胶MCI柱，填料为聚苯乙烯型。
2.权利要求1所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述步骤S100中，所述蓝芩口服液处方量为板蓝根150－450克，黄芩150－450克，栀子150－450克，黄柏20－200克，胖大海20－200克；优选地，所述蓝芩口服液处方量为板蓝根300克，黄芩240克，栀子300克，黄柏120克，胖大海100克。
3.权利要求1所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述步骤S100中，所述的加水煎煮2-4次：每次各1-3小时；和/或，每次加入3-6倍重量比的水。
4.权利要求3所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述步骤S100中，所述的加水煎煮三次为：第一次2小时，第二次、第三次各1小时；和/或，第一次加入6倍重量比的水，第二次加入4倍重量比的水，第三次加入3倍重量比的水。
5.权利要求1中所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述步骤S200中，所述大孔吸附树脂为HP20、SP207、SP825L、SP825、SP850、SP700、SP70、HPD-400、或HPD-600；和/或
所述步骤S200中，所述乙醇的浓度为80％v/v。
6.权利要求5所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述步骤S200中，所述大孔吸附树脂是SP825L。
7.权利要求1中所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述步骤S300中，所述中压色谱分离柱的填料为SP20SS、CHP20P或HP20SS。
8.权利要求1至7中任一项所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述的对照提取物包含京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和5-O-阿魏酰奎尼酸；或
所述的对照提取物包含京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷和4-O-阿魏酰奎尼酸；或
所述的对照提取物包含京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸。
9.权利要求1至7中任一项所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述的对照提取物包含去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷，以及5-O-阿魏酰奎尼酸与4-O-阿魏酰奎尼酸中的一种或两种。
10.权利要求1至7中任一项所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述的对照提取物包含异栀子苷、6-对香豆酰京尼平龙胆双糖苷、去乙酰车叶草酸甲酯、新绿原酸、隐绿原酸、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、盐酸黄柏碱、黄芩苷、盐酸小檗碱、千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷，以及5-O-阿魏酰奎尼酸与4-O-阿魏酰奎尼酸中的一种或两种。
11.权利要求1至7中任一项所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述的对照提取物，按干燥品计算，每1g含京尼平龙胆双糖苷不低于26.83mg，栀子苷不低于126.19mg，盐酸黄柏碱不低于2.76mg，4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸之和不低于12.29mg，黄芩苷不低于90.50mg，盐酸小檗碱不低于6.62mg，千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷不得低于12.78mg，以及汉黄芩苷不得低于21.69mg。
12.权利要求1至7中任一项所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法，其中，所述的对照提取物，按干燥品计算，每1g含京尼平龙胆双糖苷26.83mg至56.88mg，栀子苷126.19mg至261.22mg，盐酸黄柏碱2.76mg至7.50mg，4-O-阿魏酰奎尼酸和5-O-阿魏酰奎尼酸之和为12.29mg至35.36mg，黄芩苷90.50mg至196.05mg，盐酸小檗碱6.62mg至26.10mg，千层纸素A-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷12.78mg至26.14mg，以及汉黄芩苷21.69mg至44.20mg。
13.一种蓝芩口服液对照提取物，其是通过权利要求1至12中任意一项所述的蓝芩口服液对照提取物的制备方法制得的。
14.权利要求13所述的蓝芩口服液对照提取物在控制蓝芩口服液质量中用途。
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Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0913031A (ja) * | 1995-07-03 | 1997-01-14 | Hino Seiyaku Kk | 抗酸化剤 |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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| CN101113156A (zh) * | 2007-07-16 | 2008-01-30 | 石任兵 | 一种栀子苷标准物质及其类似物的制备方法 |
| CN101703599A (zh) * | 2009-11-18 | 2010-05-12 | 杜守颖 | 栀子提取物的检测方法 |
| CN105352910A (zh) * | 2015-11-06 | 2016-02-24 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 一种栀子萃取过程快速检测方法 |
| CN109966476A (zh) * | 2019-04-25 | 2019-07-05 | 延边大学 | 黄芩三种成分协同增强fgf2促细胞增殖的用途 |
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Non-Patent Citations (13)
| Title |
|---|
| HPLC法测定蓝芩口服液中的栀子苷含量;黄淑萍等;中国药事;20051120(第11期);第667-669页 * |
| HPLC波长切换法同时测定黄芩-甘草药对中9种成分含量;彭勍;孟硕;苗兰;林力;刘光宇;张鹏;刘建勋;;中国中医药信息杂志(第05期);第65-69页 * |
| Rapid determination of geniposide in the extraction and concentration processes of lanqin oral solution by near-infrared spectroscopy coupled with chemometric algorithms;Chen, Y等;VIBRATIONAL SPECTROSCOPY;20200116;第107卷;第1-7页 * |
| 不同干燥方式对栀子根中4种环烯醚萜苷类成分的影响;陈鸣等;中药材;第42卷(第07期);第1533-1536页 * |
| 付媛媛 ; 蒋玉兰 ; 单鸣秋 ; 张丽 ; 程建明 ; 陈家进 ; 周勤文 ; .盐黄柏饮片与易黄汤的特征图谱与主要成分测定研究.中草药.2020,(第10期),第2790-2797页. * |
| 付媛媛等. 盐黄柏饮片与易黄汤的特征图谱与主要成分测定研究.中草药.2020,第51卷(第10期),第2790-2797页. * |
| 基于定量指纹图谱技术的蓝芩口服液质量标准研究;基于定量指纹图谱技术的蓝芩口服液质量标准研究;中华中医药杂志;第34卷(第05期);第2094-2100页 * |
| 彭勍 ; 孟硕 ; 苗兰 ; 林力 ; 刘光宇 ; 张鹏 ; 刘建勋 ; .HPLC波长切换法同时测定黄芩-甘草药对中9种成分含量.中国中医药信息杂志.2020,(第05期),第65-69页. * |
| 李碧晟 ; 陶倩 ; .栀子抗炎活性成分的初步考察.李碧晟 * |
| 栀子抗炎活性成分的初步考察;李碧晟;陶倩;;中国药师;第24卷(第07期);第387-392页 * |
| 盐黄柏饮片与易黄汤的特征图谱与主要成分测定研究;付媛媛等;中草药;第51卷(第10期);第2790-2797页 * |
| 陈鸣等.不同干燥方式对栀子根中4种环烯醚萜苷类成分的影响.中药材.2019,第42卷(第07期),第1533-1536页. * |
| 陶倩 ; .2021,第24卷(第07期),第387-392页. * |
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