CN115097046B - 一种分离雷帕霉素及其杂质的方法 - Google Patents

一种分离雷帕霉素及其杂质的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN115097046B
CN115097046B CN202210804009.2A CN202210804009A CN115097046B CN 115097046 B CN115097046 B CN 115097046B CN 202210804009 A CN202210804009 A CN 202210804009A CN 115097046 B CN115097046 B CN 115097046B
Authority
CN
China
Prior art keywords
mobile phase
rapamycin
high performance
performance liquid
liquid chromatography
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210804009.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115097046A (zh
Inventor
胡砾丹
陈浩
盛宗莉
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sinopharm Chuankang Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Sinopharm Chuankang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sinopharm Chuankang Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Sinopharm Chuankang Pharmaceutical Co Ltd
Priority to CN202210804009.2A priority Critical patent/CN115097046B/zh
Publication of CN115097046A publication Critical patent/CN115097046A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115097046B publication Critical patent/CN115097046B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/74—Optical detectors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/30—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature
    • G01N2030/3007—Control of physical parameters of the fluid carrier of temperature same temperature for whole column
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/32—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed
    • G01N2030/324—Control of physical parameters of the fluid carrier of pressure or speed speed, flow rate

Abstract

本发明公开了一种分离雷帕霉素及其杂质的方法，该方法包括采用反相高效液相色谱对待测溶液进行检测，高效液相色谱条件为：流动相：流动相A中甲醇、乙腈和水的体积比为0‑5:15‑20:75‑80；流动相B中甲醇‑乙腈的体积比为40‑50:50‑60；洗脱方式：梯度洗脱。利用该方法能够有效分离雷帕霉素及其主要的工艺杂质，更好地实现对雷帕霉素的质量控制，从而提高了最终产品的品质，保证了其临床用药的安全有效。同时，该分离方法操作简便、成本低和分析时间短，为产品的研发和生产提供了简便、稳定、可靠的分析检测方法。

Description

一种分离雷帕霉素及其杂质的方法
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，具体而言，涉及一种分离雷帕霉素及其杂质的方法。
背景技术
西罗莫司(又名“雷帕霉素”)是科学家于1975年首次从智利复活节岛的土壤中发现的一种由土壤链霉菌分泌的次生代谢物，其化学结构属于“三烯大环内酯类”化合物。起初被作为低毒性的抗真菌药物，1977年发现具有免疫抑制作用，1989年开始将其作为治疗器官移植的排斥反应的新药进行试用，从动物实验及临床应用的效果看，是一种疗效好，低毒，无肾毒性的新型免疫抑制剂。
然而雷帕霉素的化学结构复杂，在发酵过程中可能会产生多个同系物和异构体，主要的工艺杂质包括12-去甲基雷帕霉素、29-O-去甲基雷帕霉素和雷帕霉素七环异构体、28-epi雷帕霉素。因此，将雷帕霉素与其工艺杂质分离具有重要的意义。
各国药典均未收载雷帕霉素相关质量标准。现有文献报道资料采用的HPLC方法如下：
色谱条件1：用十八烷基硅烷键合硅胶(Kromasil C18 250×4.6mm 5μm)为填充剂，以甲醇-乙腈-水(70:15:30)为流动相，流速1.0ml/min，柱温40℃，检测波长277nm。
色谱条件2：用十八烷基硅烷键合硅胶(Kromasil C18 250×4.6mm 5μm)为填充剂，以20mmol/L甲酸铵溶液(用甲酸调pH值至3.8)为流动相A，以乙腈(含1％甲基叔丁基醚)为流动相B，按下表进行梯度洗脱，流速1.5ml/min，柱温35℃，进样盘控温4℃，检测波长277nm，进样量20μl。其梯度洗脱程序为：
采用文献报道的HPLC方法对以上杂质的检测存在缺陷和不足：去甲基雷帕霉素杂质无法分离，与雷帕霉素完全重合；雷帕霉素七环异构体与雷帕霉素重合，不能得到分离。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一种分离雷帕霉素及其杂质的方法，该方法能够准确地将雷帕霉素及其主要工艺杂质分离。
为实现上述发明目的，本发明提供了一种分离雷帕霉素及其杂质的方法，包括采用反相高效液相色谱对待测溶液进行检测，高效液相色谱条件为：
流动相：流动相A中甲醇、乙腈和水的体积比为0-5:15-20:75-80；流动相B中甲醇-乙腈的体积比为40-50:50-60；
洗脱方式：梯度洗脱；
上述梯度洗脱程序为：
0-33min：流动相A体积从40％变化为30％，流动相B体积从60％变化为70％；
33-40min：流动相A体积为30％，流动相B体积为70％；
40-50min：流动相A体积从30％变化为20％，流动相B体积从70％变化为80％；
50.1-60min：流动相A体积为40％，流动相B体积为60％。
进一步地，高效液相色谱中的色谱柱为中谱红RD-C18。
进一步地，C18反相色谱柱的规格为4.6×250mm，3.0μm。
进一步地，高效液相色谱中流动相的流速为0.8-1.2mL/min。
进一步地，高效液相色谱的色谱柱温为：45-55℃。
进一步地，高效液相色谱的进样体积为：10-25μL。
进一步地，待测样品中雷帕霉素浓度为：0.4-1.0mg/mL。
进一步地，高效液相色谱的检测波长为：275-280nm。
进一步地，杂质选自12-去甲基雷帕霉素、29-O-去甲基雷帕霉素和雷帕霉素七环异构体、28-epi雷帕霉素中的至少一种。
进一步地，高效液相色谱中流动相的流速为1.0mL/min；高效液相色谱的色谱柱温为：50℃；高效液相色谱的检测波长为：278nm。
本发明具有以下有益效果：
本发明提供的一种分离雷帕霉素及其杂质的方法能够有效分离雷帕霉素及其主要的工艺杂质(12-去甲基雷帕霉素、29-O-去甲基雷帕霉素和雷帕霉素七环异构体、28-epi雷帕霉素)，其与各杂质的分离度、各杂质间的分离度均大于1.2，能够更好地实现对雷帕霉素的质量控制，从而提高了最终产品的品质，保证了其临床用药的安全有效。同时，该分离方法操作简便、成本低和分析时间短，为产品的研发和生产提供了简便、稳定、可靠的分析检测方法。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为实施例1中的液相色谱图；
图2为对比例1中的液相色谱图；
图3为对比例2中的液相色谱图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
雷帕霉素是发酵产生的一种大环内脂类免疫抑制药，雷帕霉素的化学结构复杂，发酵过程中可能会产生多个同系物和异构体，主要对工艺杂质有12-去甲基雷帕霉素、29-O-去甲基雷帕霉素和雷帕霉素七环异构体、28-epi雷帕霉素，上述杂质的结构式如下：
鉴于已报道的文献资料并不能将上述杂质与雷帕霉素有效分离，本发明的发明人通过改变高效液相色谱的流动相和洗脱程序，特别是改变甲醇的添加比例以及化合物的保留时间可以使雷帕霉素与其工艺杂质的有效分离。
基于此，本发明提供了一种分离雷帕霉素及其杂质的方法，其利用反相高效液相色谱对含有雷帕霉素及其主要的工艺杂质的待测溶液进行检测，其包括如下步骤：
(1)配制流动相：流动相包括流动相A和流动相B，流动相A中包含的甲醇、乙腈和水的体积比为0-5:15-20:75-80；流动相B中包含的甲醇、乙腈的体积比为40-50:50-60。
发明人根据雷帕霉素及其杂质结构式的特点，初步分析不同位的羟基基团可能在甲醇流动相中有不同的保留时间，因此在流动相中增加一定量的甲醇，使其化合物能有效分离。
(2)待测溶液的制备
将待测样品用乙腈溶液配制成浓度为：0.4-1.0mg/mL的待测溶液。
待测样品中采用上述雷帕霉素浓度能够保证各物质的有效分离。
(3)上样检测：将待测溶液注入液相色谱仪中，对含有雷帕霉素及其主要的工艺杂质的待测溶液进行检测。具体地，高效液相色谱检测的条件如下：
色谱柱：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充材料，规格为4.6×250mm，3.0μm。
在一些实施方式中，色谱柱为中谱红RD-C18。
发明人发现采用专用色谱柱中谱红进行分析，其色谱柱的含碳量高，表面极性小，分离度高，对于雷帕霉素及其杂质具有较好的分离能力。
根据流动相的改变，本发明对应地选择合适的洗脱方式并改变洗脱程序以改变化合物的保留时间。
在一些实施方式中，洗脱方式：梯度洗脱。
在一些实施方式中，梯度洗脱程序为：
0-33min：流动相A体积从40％变化为30％，流动相B体积从60％变化为70％；
33-40min：流动相A体积为30％，流动相B体积为70％；
40-50min：流动相A体积从30％变化为20％，流动相B体积从70％变化为80％；
50.1-60min：流动相A体积为40％，流动相B体积为60％。
采用上述方式进行洗脱，有利于雷帕霉素及其杂质的分离，保证检测的准确性。
在一些实施方式中，高效液相色谱中流动相的流速为0.8-1.2mL/min。优选地，高效液相色谱中流动相的流速为1mL/min。
在一些实施方式中，高效液相色谱的色谱柱温为：45-55℃。优选地，高效液相色谱中色谱柱温为：50℃。
在高效液相色谱检测中，柱温不仅会影响色谱柱固定液的寿命，还会影响分离效能和分析时间、化合物保留时间、色谱峰峰形。采用上述柱温，有利于雷帕霉素及其杂质的分离。
在一些实施方式中，检测时，高效液相色谱的进样体积为：10-25μL。优选地，高效液相色谱的进样体积为：10μL。
在一些实施方式中，高效液相色谱的检测波长为：275-280nm。优选地，高效液相色谱的检测波长为：278nm。
采用高效液相色谱分析检测雷帕霉素及其杂质的分离度≥1.50，其具有较好的分离度，进一步说明了本发明提供的检测方法可以实现雷帕霉素及其杂质的分离。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种分离雷帕霉素及其杂质的方法，包括如下步骤：
(1)配制流动相：流动相包括流动相A和流动相B，流动相A中包含的乙腈和水的体积比为20：80；流动相B中包含的甲醇、乙腈的体积比为40：60。
(2)待测溶液的制备
其中，待测样品中雷帕霉素浓度为：1.0mg/mL。
(3)上样检测：将待测溶液注入液相色谱仪中，对含有雷帕霉素及其主要的工艺杂质的待测溶液进行检测。
高效液相色谱检测的条件如下：
色谱柱：中谱红RD-C18，规格为4.6×250mm，3.0μm。
洗脱方式：梯度洗脱；梯度洗脱程序为：
0-33min：流动相A体积从40％变化为30％，流动相B体积从60％变化为70％；
33-40min：流动相A体积为30％，流动相B体积为70％；
40-50min：流动相A体积从30％变化为20％，流动相B体积从70％变化为80％；
50.1-60min：流动相A体积为40％，流动相B体积为60％。
高效液相色谱中流动相的流速为1.0mL/min；色谱柱温为：50℃；进样体积为：10μL；检测波长为：278nm。
液相色谱图，如图1所示；雷帕霉素及其杂质的分离情况如表1所示：
表1分析结果
从表1和图1可以得出，待测溶液中的雷帕霉素及其杂质可以得到有效分离，分离度均大于1.20，峰形良好，理论塔板数大于10000，拖尾因子在0.95-1.15，符合标准。
对比例1
本对比例与实施例1的区别在于本对比例采用的高效液相色谱检测的条件不同，本对比例采用的色谱条件如下：
用十八烷基硅烷键合硅胶(Kromasil C18 250×4.6mm 5μm)为填充剂，以20mmol/L甲酸铵溶液(用甲酸调pH值至3.8)为流动相A，以乙腈(含1％甲基叔丁基醚)为流动相B，按下表进行梯度洗脱，流速1.5ml/min，柱温35℃，进样盘控温4℃，检测波长277nm，进样量20μl。其梯度洗脱程序为：
液相色谱图如图2所示，雷帕霉素及其杂质的分离情况分析结果如表2和：
表2分析结果
从图2和表2的结果来看，雷帕霉素主峰前的两种杂质(12-去甲基雷帕霉素和29-O-去甲基雷帕霉素)不能得到有效分离，理论检出杂质个数应为8个，实际检出杂质个数为4个。
对比例2
本对比例与实施例1的区别在于本对比例采用的高效液相色谱检测的条件不同，本对比例采用的色谱条件如下：
用十八烷基硅烷键合硅胶(Kromasil C18 250×4.6mm 5μm)为填充剂，以甲醇-乙腈-水(70:15:30)为流动相，流速1.0ml/min，柱温40℃，检测波长277nm。
液相色谱图如图3所示，雷帕霉素及其杂质的分离情况分析结果如表3和：
表3分析结果
从本对比例的结果来看，采用等度洗脱方式并不能将雷帕霉素与另外4中杂质都分离，其中12-去甲雷帕霉素与29-O-去甲基雷帕霉素完全重合、28-epi雷帕霉素与雷帕霉素七环异构体完全重合，理论检出杂质个数应为8个，实际检出杂质个数为4个。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种分离雷帕霉素及其杂质的方法，其特征在于，所述方法包括采用反相高效液相色谱对待测溶液进行检测，所述高效液相色谱条件为：
流动相：流动相A中甲醇、乙腈和水的体积比为0-5:15-20: 75-80；流动相B中甲醇-乙腈的体积比为40-50:50-60；
洗脱方式：梯度洗脱；
所述梯度洗脱程序为：
0-33min：流动相A体积从40%变化为30%，流动相B体积从60%变化为70%；
33-40 min：流动相A体积为30%，流动相B体积为70%；
40-50 min：流动相A体积从30%变化为20%，流动相B体积从70%变化为80%；
50.1-60 min：流动相A体积为40%，流动相B体积为60%；
所述高效液相色谱中的色谱柱为中谱红RD-C18；
C18反相色谱柱的规格为4.6×250mm，3.0μm；
所述杂质为12-去甲基雷帕霉素、29-O-去甲基雷帕霉素、雷帕霉素七环异构体和28-epi雷帕霉素。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱中流动相的流速为0.8-1.2mL/min。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的色谱柱温为：45-55℃。
4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的进样体积为：10-25μL。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述待测溶液中雷帕霉素浓度为：0.4-1.0mg/mL。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱的检测波长为：275-280nm。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱中流动相的流速为1.0mL/min；所述高效液相色谱的色谱柱温为：50℃；所述高效液相色谱的检测波长为：278nm。
CN202210804009.2A 2022-07-07 2022-07-07 一种分离雷帕霉素及其杂质的方法 Active CN115097046B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210804009.2A CN115097046B (zh) 2022-07-07 2022-07-07 一种分离雷帕霉素及其杂质的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210804009.2A CN115097046B (zh) 2022-07-07 2022-07-07 一种分离雷帕霉素及其杂质的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115097046A CN115097046A (zh) 2022-09-23
CN115097046B true CN115097046B (zh) 2023-09-26

Family

ID=83296829

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210804009.2A Active CN115097046B (zh) 2022-07-07 2022-07-07 一种分离雷帕霉素及其杂质的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115097046B (zh)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001014387A1 (en) * 1999-08-24 2001-03-01 Ariad Gene Therapeutics, Inc. 28-epirapalogs
CN101522691A (zh) * 2006-11-27 2009-09-02 泰尔茂株式会社 O-烷基化雷帕霉素衍生物的制备方法及o-烷基化雷帕霉素衍生物
CN105301159A (zh) * 2015-10-29 2016-02-03 无锡福祈制药有限公司 一种西罗莫司的高效液相色谱分析方法
CN110146621A (zh) * 2019-06-13 2019-08-20 国药集团致君（深圳）制药有限公司 头孢类抗生素药物中聚合物的含量测定方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7382353B2 (ja) * 2018-06-15 2023-11-16 ヤンセン ファーマシューティカ エヌ．ベー． ラパマイシン類似体およびその使用
CN115209897A (zh) * 2019-12-05 2022-10-18 安纳库利亚治疗公司 雷帕霉素类似物及其用途

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001014387A1 (en) * 1999-08-24 2001-03-01 Ariad Gene Therapeutics, Inc. 28-epirapalogs
CN101522691A (zh) * 2006-11-27 2009-09-02 泰尔茂株式会社 O-烷基化雷帕霉素衍生物的制备方法及o-烷基化雷帕霉素衍生物
CN105301159A (zh) * 2015-10-29 2016-02-03 无锡福祈制药有限公司 一种西罗莫司的高效液相色谱分析方法
CN110146621A (zh) * 2019-06-13 2019-08-20 国药集团致君（深圳）制药有限公司 头孢类抗生素药物中聚合物的含量测定方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
西罗莫司同分异构体Rap—DI的分离与鉴定;杨国新 江丹云 黄捷 余辉 程元荣;中国抗生素杂;第33卷(第2期);第80-83页 *
西罗莫司胶囊有关物质测定方法的改进;赵敬丹;秦峰;闻宏亮;缪天瑶;裘亚;张含智;刘浩;;中国抗生素杂志(第03期);第354-359页 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN115097046A (zh) 2022-09-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109470799B (zh) Fmoc-Arg(Pbf)-OH的纯度及杂质定位检测方法
CN101230080B (zh) 模拟移动床色谱拆分20(S)和20(R)-人参皂苷Rg3对映体
CN115097046B (zh) 一种分离雷帕霉素及其杂质的方法
CN109444318A (zh) 一种用于分析杆菌肽组分的高效液相色谱方法
CN111983091A (zh) 一种复方利多卡因乳膏中丙胺卡因氧化杂质的分离纯化方法
CN104297401B (zh) 草乌中准噶尔乌头碱的hplc-elsd含量测定方法
CN111579675B (zh) 饲料中脂溶性维生素的检测方法
CN116381068A (zh) 一种分离并检测玛巴洛沙韦中有关物质的高效液相色谱法
CN111170945B (zh) 黄蘑菇中天然抗氧化氨基酸衍生物的分离工艺及其应用
CN113388128A (zh) 咪唑二甲酰胺基桥联双β-环糊精固定相及其制备方法和应用
CN113801201A (zh) 一种醋酸卡泊芬净杂质b的制备方法
CN109358140B (zh) 一种利福昔明原料及其制剂组分的检测方法
CN110156810B (zh) 一种莫西菌素的纯化方法
CN111220716A (zh) 一种左乙拉西坦中间体光学纯度测定方法
CN113933416B (zh) 一种注射用硫酸头孢匹罗中杂质的检测方法
CN113624888B (zh) 一种血清和粪便中吲哚乙酸和吲哚丙酸的检测方法
CN112595788B (zh) 一种分离(R)、(S)-1-(α-萘基)缩水甘油基醚的高效液相色谱方法
CN112574062B (zh) 卡比多巴对映异构体的分离制备方法
CN117907506A (zh) 一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法
CN115541755B (zh) 一种硝呋太尔片的质量控制方法
CN117783399A (zh) 一种阿维巴坦中间体6的检测方法
CN109725101A (zh) 盐酸特拉万星原料中有关物质的检测方法
CN108254454B (zh) 一种喷他佐辛有关物质测定方法
RU2067117C1 (ru) Противоопухолевой антибиотический хромофор кедарцидин и способ его получения
CN108250217A (zh) 一种制备免疫抑制剂西罗莫司的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant