CN117907506A - 一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法 - Google Patents
一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117907506A CN117907506A CN202311821089.3A CN202311821089A CN117907506A CN 117907506 A CN117907506 A CN 117907506A CN 202311821089 A CN202311821089 A CN 202311821089A CN 117907506 A CN117907506 A CN 117907506A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- atosiban
- mobile phase
- acid
- organic reagent
- detection method
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title claims abstract description 72
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 48
- SVDWBHHCPXTODI-QIWYXCRTSA-N acetic acid (2S)-N-[(2S)-5-amino-1-[(2-amino-2-oxoethyl)amino]-1-oxopentan-2-yl]-1-[(4R,7S,10S,13S,16R)-7-(2-amino-2-oxoethyl)-13-[(2S)-butan-2-yl]-16-[(4-ethoxyphenyl)methyl]-10-[(1R)-1-hydroxyethyl]-6,9,12,15,18-pentaoxo-1,2-dithia-5,8,11,14,17-pentazacycloicosane-4-carbonyl]pyrrolidine-2-carboxamide Chemical compound CC(O)=O.C1=CC(OCC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CCCN)C(=O)NCC(N)=O)CSSCCC(=O)N1 SVDWBHHCPXTODI-QIWYXCRTSA-N 0.000 title claims abstract description 34
- 229950010486 atosiban acetate Drugs 0.000 title claims abstract description 34
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 38
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 29
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims abstract description 21
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 18
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 claims abstract description 8
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims abstract description 3
- 229960002403 atosiban Drugs 0.000 claims description 109
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 66
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 45
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 38
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N beta-alanine Chemical compound NCCC(O)=O UCMIRNVEIXFBKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 abstract description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 abstract 1
- 238000004704 ultra performance liquid chromatography Methods 0.000 description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 8
- VWXRQYYUEIYXCZ-OBIMUBPZSA-N atosiban Chemical compound C1=CC(OCC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CCCN)C(=O)NCC(N)=O)CSSCCC(=O)N1 VWXRQYYUEIYXCZ-OBIMUBPZSA-N 0.000 description 7
- 108700007535 atosiban Proteins 0.000 description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940054967 vanquish Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明多肽杂质的液相色谱检测方法，属于药物化学技术领域。本发明提供一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法：以有机试剂A、酸和水的混合溶液作为流动相A，以有机试剂B、有机试剂A、酸和水的混合溶液作为流动相B，以C18色谱柱为固定相，检测器为紫外检测器，采用超高效液相色谱梯度洗脱多肽杂质。本方法可以有效检测醋酸阿托西班中的难分离的且在工艺生产及储存期间易产生的杂质，可以作为醋酸阿托西班的有关物质检测的一种正交方法。
Description
技术领域
本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法及其应用。
背景技术
合成多肽药物的杂质谱复杂，包含由保护氨基酸、起始物料、反应试剂引入的杂质，以及工艺路线过程产生的和储存运输过程中降解产生的杂质等。为实现有效检出各潜在杂质，通常需要采用多种不同原理的检测方法如反相HPLC法、离子交换HPLC法、分子排阻HPLC法等。多肽杂质主要包括非对映异构体、缺失肽、***肽、断裂肽、差向肽、替代肽、侧链基团被修饰、二硫键修饰、脱酰胺杂质、氨基乙酰化等杂质，由于多肽杂质的复杂性，某个氨基酸发生变化就会产生一个新杂质，理论杂质很多，并且杂质与主成分差异很小。对于氨基酸个数较多的多肽，很难通过一个方法对所有杂质进行控制，某些特殊杂质需要专门的方法进行控制。
醋酸阿托西班是由9个氨基酸组成的二硫键型的环状多肽，在药品中以醋酸盐的形式存在，通用名为醋酸阿托西班。醋酸阿托西班注射液最早由Ferring公司研发，于2000年在欧洲首次获批上市，2006年进入中国市场。醋酸阿托西班是一种合成多肽，由于合成过程中反应步骤、投料数量等较多，造成合成杂质种类比较多，此外，生产和运输过程中产生的降解杂质也很多，部分杂质因为与主成分阿托西班结构极为相似，这些杂质在生产及储存运输期间都较容易产生且难分离，严重影响药品的安全性及有效性，如果控制不好，有可能产生严重的毒副作用。因此，开发一种安全、可靠、且能同时有效检测和分离醋酸阿托西班原料及制剂杂质的分析方法，不仅能保障产品质量，还具有重大临床价值。
现有技术公开如下技术方案：
CN101696959B公开了一种醋酸阿托西班及其制剂的含量测定和有关物质测定的方法。但是该专利中选用乙腈为流动相B，其最高梯度仅达到40％，无法分离极性大的杂质，特别是本发明中涉及的杂质。
CN109142580A公开了测定醋酸阿托西班有关物质的方法，同样无法分离极性大的杂质及本发明所述杂质。
CN105949283A公开了醋酸阿托西班杂质、制备及检测方法，但无法分离与主成分极性相近的杂质。
发明内容
针对上述现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法，该方法针对醋酸阿托西班杂质的结构特征，提供了一种特殊的杂质分离方法，可用来分离普通酸性体系下与主成分共洗脱的杂质。
本发明还提供了前述检测方法的应用。
为实现上述目的，本发明采取以下技术方案：
本发明是一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法，其特点是：该方法以有机试剂、酸和水的混合溶液作为流动相，以C18色谱柱为固定相，检测器为紫外检测器，采用超高效液相色谱梯度洗脱多肽杂质；所述杂质选自D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班中的至少一种。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述流动相包括流动相A和流动相B，其中流动相A是包括有机试剂A、酸和水组成的混合溶液；流动相B是包括有机试剂A、有机试剂B、酸和水组成的混合溶液。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述酸选自磷酸、三氟乙酸、甲酸、醋酸、硼酸中的至少一种；优选磷酸和三氟乙酸中的至少一种。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述有机试剂A选自乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇中的至少一种；优选甲醇。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述有机试剂B选择乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇中的至少一种；优选乙腈。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述流动相A中有机试剂A、酸、水的的体积比为100：2：900至300：6：700；优选流动相A中有机试剂A、酸、水的的体积比为200：4：800。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述流动相A中甲醇、磷酸、三氟乙酸、水的体积比为100：1：1：900至300：3：3：700；优选流动相A中甲醇、磷酸、三氟乙酸、水的体积比为200：1.5：2.5：800。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述流动相B中有机试剂B、有机试剂A、酸、水的的体积比为400：300：1：300至200：400：6：400；优选流动相B中有机试剂B、有机试剂A、酸、水的的体积比为400：300：4：300。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述流动相B中乙腈、甲醇、磷酸、三氟乙酸、水的体积比为400：300：0.5：0.5：300至200：400：3：3：400；优选流动相B中乙腈、甲醇、磷酸、三氟乙酸、水的体积比为400：300：1.5：2.5：300。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述流动相B的梯度范围为20％-100％，优选32％-100％；
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述梯度洗脱过程中柱温为20℃～60℃，优选50℃。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述梯度洗脱过程中流速为0.1-0.3mL/min，优选0.1mL/min。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述色谱柱为C18色谱柱。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述色谱柱的填充粒径为1.7μm～5μm，优选填充粒径为1.7μm。
进一步地，本发明所述超高效液相色谱检测方法中：所述紫外检测器的波长为220nm。
本发明还提供了一种根据上述检测方法在检测醋酸阿托西班原料或制剂杂质中的应用；所述的应用中，杂质选自D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班，杂质的结构式见下表：
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本方法可以有效检测醋酸阿托西班中难分离的杂质(D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班、Endo-[β-Ala6]-阿托西班)，这些杂质在生产及储存运输期间都较容易产生且难分离，严重影响药品的安全性及有效性，采用本发明技术方案可以同时分离检测这些杂质，在工艺过程或储存运输期间监测控制这些杂质含量，进而保证醋酸阿托西班药品的质量。本方法可以作为醋酸阿托西班原料药有关物质检测的一种正交方法，也可以作为相关制剂(如醋酸阿托西班注射液)主方法的正交方法，有着良好的应用前景。
附图说明
图1：实施例1应用本方法检测包含D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班6个杂质的分离度色谱图；
图2：实施例2应用本方法检测包含D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班6个杂质的分离度色谱图；
图3：实施例3应用本方法检测包含D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班6个杂质的分离度色谱图；
图4：实施例4应用本方法检测包含D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班6个杂质的分离度色谱图。
具体实施方式
为了使本发明的上述目的、特征和有点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明，但本发明的内容并不局限于此。
实施例1，一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法一：
该方法采用超高效液相色谱梯度洗脱多肽杂质。
所述色谱柱为C18反相色谱柱；
所述色谱柱的填充粒径为1.7μm；
所述流动相A的体积比为甲醇：三氟乙酸：水＝240ml：0.5ml：760ml；
所述流动相B的体积比为乙腈：甲醇：三氟乙酸：水＝550ml：150ml：0.5ml：300ml；
所述流动相B的梯度范围为25％～47％；
所述梯度洗脱的过程中柱温为60℃，流速为0.1mL/min；
所述紫外检测器的波长为220nm。
样品：分离度溶液(含阿托西班：0.6mg/ml、D-[Ile3]-阿托西班：0.6μg/ml、D-[Orn8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[Gly9]-阿托西班：0.6μg/ml、[δ-Ava7]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala6]-阿托西班：0.6μg/ml)
所述的一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法在检测鉴定醋酸阿托西班原料药或制剂的生产或存放过程中产生的多肽杂质中的应用。所述杂质选自D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班。
实施例2，一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法二：
该方法采用超高效液相色谱梯度洗脱多肽杂质。
所述色谱柱为C18反相色谱柱；
所述色谱柱的填充粒径为1.7μm；
所述流动相A的体积比为甲醇：三氟乙酸：水＝200ml：1ml：800ml；
所述流动相B的体积比为乙腈：甲醇：三氟乙酸：水＝360ml：200ml：0.8ml：240ml；
所述流动相B的梯度范围为25％～47％；
所述梯度洗脱的过程中柱温为50℃，流速为0.1mL/min；
所述紫外检测器的波长为220nm。
样品：分离度溶液(含阿托西班：0.6mg/ml、D-[Ile3]-阿托西班：0.6μg/ml、D-[Orn8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[Gly9]-阿托西班：0.6μg/ml、[δ-Ava7]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala6]-阿托西班：0.6μg/ml)
所述的一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法在检测鉴定醋酸阿托西班原料药或制剂的生产或存放过程中产生的多肽杂质中的应用。所述杂质选自D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班。
实施例3，一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法三：
该方法采用超高效液相色谱梯度洗脱多肽杂质。
所述色谱柱为C18反相色谱柱；
所述色谱柱的填充粒径为1.7μm；
所述流动相A的体积比为甲醇：三氟乙酸：磷酸：水＝160：2：2：640；
所述流动相B的体积比为乙腈：甲醇：三氟乙酸：磷酸：水＝320：240：2：2：240；
所述流动相B的梯度范围为32～60％；
所述梯度洗脱的过程中柱温为50℃，流速为0.1mL/min；
所述紫外检测器的波长为220nm。
样品：分离度溶液(含阿托西班：0.6mg/ml、D-[Ile3]-阿托西班：0.6μg/ml、D-[Orn8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[Gly9]-阿托西班：0.6μg/ml、[δ-Ava7]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala6]-阿托西班：0.6μg/ml)
所述的一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法在检测鉴定醋酸阿托西班原料药或制剂的生产或存放过程中产生的多肽杂质中的应用。所述杂质选自D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班。
实例4，一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测四：
仪器：赛默飞Vanquish超高效液相色谱仪
色谱柱：C18(2.1mm*150mm，1.7μm)；
检测波长：220nm；
流速：0.1ml/min；
柱温：50℃；
样品：分离度溶液(含阿托西班：0.6mg/ml、D-[Ile3]-阿托西班：0.6μg/ml、D-[Orn8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[Gly9]-阿托西班：0.6μg/ml、[δ-Ava7]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala8]-阿托西班：0.6μg/ml、Endo-[β-Ala6]-阿托西班：0.6μg/ml)
进样量：1μl；
流动相A：甲醇量取200ml、三氟乙酸量取1.5ml、磷酸量取2.5ml和水量取800ml，混匀过滤脱气，即得；
流动相B：乙腈量取400ml、甲醇量取300ml、三氟乙酸量取1.5ml、磷酸量取2.5ml和水量取300ml，混匀过滤脱气，即得；
采集时间：70min
洗脱条件：如下表1
表1梯度洗脱
分离效果：如图1所示，该方法可以同时将杂质D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班与阿托西班分离，6个杂质与主成分的分离度均大于1.2，分离效果良好；6个杂质的检测限为0.02％，灵敏度良好。见表2：
表2超高效液相色谱检测结果
注：“SPC074”为阿托西班。
Claims (10)
1.一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法，其特征在于：该方法以有机试剂、酸和水的混合溶液作为流动相，以C18色谱柱为固定相，检测器为紫外检测器，采用超高效液相色谱梯度洗脱多肽杂质；所述杂质选自D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：流动相包括流动相A和流动相B，其中流动相A是由有机试剂A、酸和水组成的混合溶液；流动相B是由有机试剂A、有机试剂B、酸和水组成的混合溶液。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述酸选自磷酸、三氟乙酸、甲酸、醋酸、硼酸中的至少一种。
4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述有机试剂A选自乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇中的至少一种；所述有机试剂B选择乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇中的至少一种；优选有机试剂A为甲醇、有机试剂B为乙腈。
5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述流动相A中有机试剂A、酸、水的的体积比为100：2：900至300：6：700；优选流动相A中有机试剂A、酸、水的的体积比为200：4：800。
6.根据权利要求2或4所述的检测方法，其特征在于：所述流动相A是由甲醇、磷酸、三氟乙酸、水按体积比为100：1：1：900至300：3：3：700组成；优选流动相A中甲醇、磷酸、三氟乙酸、水的体积比为200：1.5：2.5：800。
7.根据权利要求2或4所示的检测方法，其特征在于：所述流动相B由有机试剂B、有机试剂A、酸、水按体积比为400：300：1：300至200：400：6：400组成；优选流动相B中有机试剂B、有机试剂A、酸、水的体积比为400：300：4：300；或者：所述流动相B中甲醇、乙腈、磷酸、三氟乙酸、水的体积比为400：300：0.5：0.5：300至200：400：3：3：400；优选流动相B中甲醇、乙腈、磷酸、三氟乙酸、水的体积比为400：300：1.5：2.5：300。
8.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述流动相B的梯度范围为20％-100％，优选32％-100％；所述梯度洗脱过程中柱温为20℃～60℃，优选50℃；所述梯度洗脱过程中流速为0.1-0.3mL/min，优选0.1mL/min。
9.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述的梯度洗脱方法是：
10.一种如权利要求1-9中任意一项所述的检测方法在检测醋酸阿托西班原料或制剂杂质中的应用；所述杂质选自D-[Ile3]-阿托西班、D-[Orn8]-阿托西班、Endo-[Gly9]-阿托西班、[δ-Ava7]-阿托西班、Endo-[β-Ala8]-阿托西班和Endo-[β-Ala6]-阿托西班中的至少一种。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311821089.3A CN117907506A (zh) | 2023-12-27 | 2023-12-27 | 一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311821089.3A CN117907506A (zh) | 2023-12-27 | 2023-12-27 | 一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117907506A true CN117907506A (zh) | 2024-04-19 |
Family
ID=90684845
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311821089.3A Pending CN117907506A (zh) | 2023-12-27 | 2023-12-27 | 一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117907506A (zh) |
-
2023
- 2023-12-27 CN CN202311821089.3A patent/CN117907506A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106940355B (zh) | 一种布洛芬、其钠盐及其制剂有关物质的检测方法 | |
| CN109470799B (zh) | Fmoc-Arg(Pbf)-OH的纯度及杂质定位检测方法 | |
| US20220348603A1 (en) | Isomerization feature-based method for purifying punicalagin | |
| Larsent et al. | Reverse phase high pressure liquid chromatography for the separation of peptide hormone diastereoisomers | |
| Song et al. | Isocratic high-performance liquid chromatographic assay of taxol in biological fluids and tissues using automated column switching | |
| CN105467021B (zh) | 一种hplc法分离测定帕立骨化醇原料药及制剂中有关物质的方法 | |
| CN111141850A (zh) | 对乙酰氨基酚原料药有关物质的液相检测分离方法 | |
| CN109444318A (zh) | 一种用于分析杆菌肽组分的高效液相色谱方法 | |
| CN117907506A (zh) | 一种醋酸阿托西班杂质的超高效液相色谱检测方法 | |
| CN106483202B (zh) | 一种分离和测定阿利维a酸与异构体的方法 | |
| CN101865894B (zh) | 一种奈达铂冻干粉针剂的杂质检测方法 | |
| CN111141851A (zh) | 含有阿司匹林的复方制剂有关物质的液相检测分离方法 | |
| CN104345114A (zh) | 一种反相分离衍生化亮氨酸和异亮氨酸的方法 | |
| CN107870211B (zh) | 一种分离测定盐酸帕洛诺司琼的液相色谱方法 | |
| CN116381068A (zh) | 一种分离并检测玛巴洛沙韦中有关物质的高效液相色谱法 | |
| Bogusz et al. | Use of corrected retention indices based on 1-nitroalkane and alkyl arylketone scales for HPLC identification of basic drugs | |
| CN113801201A (zh) | 一种醋酸卡泊芬净杂质b的制备方法 | |
| CN115266995A (zh) | 一种生发肽制剂中有关物质的分析方法 | |
| CN111141849B (zh) | 右美托咪定起始原料的位置异构体的液相检测分离方法 | |
| CN116183752B (zh) | 一种多肽杂质的液相色谱检测方法 | |
| CN115097046B (zh) | 一种分离雷帕霉素及其杂质的方法 | |
| CN117890508A (zh) | 一种替尔泊肽杂质的液相色谱检测方法 | |
| CN111189937A (zh) | 阿司匹林原料药有关物质的液相检测分离方法 | |
| CN111044636A (zh) | 米卡芬净含量的分析方法 | |
| CN113252807B (zh) | 一种缩宫素原料药有关物质的高效液相色谱分离方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |