CN114729388A - 用于获得燕麦基产品的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及具有α‑淀粉酶活性的酶用于获得水解燕麦材料的用途。
Description
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技术领域
本发明涉及具有α-淀粉酶活性的酶用于获得水解燕麦材料的用途。
背景技术
人们对燕麦制成的食品越来越感兴趣。燕麦被认为是健康的，原因有很多：它们是重要的维生素、矿物质、纤维(β-葡聚糖)、抗氧化剂以及必需氨基酸的重要来源。与燕麦摄入相关联的健康益处包括体重减轻、降低血胆固醇水平和降低患心脏病的风险。
食品中包含的燕麦基食品或燕麦基成分包括燕麦基饮料、燕麦基糖浆/浓缩物/提取物，例如，具有至少20％的干固体，发酵的燕麦基产品和燕麦基冰淇淋。
US 4282319披露了用蛋白酶和淀粉酶对全谷物进行酶促改性。
US 4996063披露了用α-淀粉酶对碾磨的燕麦产品进行酶促改性。
US 5686123披露了通过顺序使用不具有葡聚糖酶和蛋白酶活性的β-淀粉酶和同样不具有葡聚糖酶和蛋白酶活性的α-淀粉酶对谷物悬浮液进行酶促改性。
WO 00/22938和WO 02/065855均披露了使用至少一种具有水解α-糖苷键的能力并且不具有葡聚糖酶和蛋白酶作用的水解酶对谷物悬浮液进行酶促改性。水解酶可以选自由β-淀粉酶、α-淀粉酶、淀粉葡糖苷酶和支链淀粉酶组成的组，条件是当酶制剂包含β-淀粉酶或α-淀粉酶时，存在至少一种其他命名的α-糖苷水解酶的混合物。
WO 2011/070057、WO 2011/070083和WO 2011/070086披露了用对膳食纤维不显示水解活性的α-淀粉酶和任选的对膳食纤维也不显示水解活性的淀粉葡糖苷酶对全谷物组分进行酶促改性。
WO 2010/036515披露了使用α-淀粉酶共混物进行淀粉液化和糖化的方法。没有披露具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂的用途。
通常，为了将燕麦仁转化为食品中包含的燕麦基食品、燕麦基饮料或燕麦基成分，必须水解燕麦仁中的淀粉。燕麦淀粉的转化可以包括糊化步骤，其涉及溶解纳克大小淀粉颗粒以形成黏性悬浮液；液化步骤，其涉及淀粉的部分水解并伴随黏度损失；以及可能的糖化步骤，其涉及通过进一步水解产生葡萄糖和麦芽糖。
糊化一般通过加热实现，而液化和可能的糖化常常涉及酶的使用。由于糊化优选使用高温，因此如果液化也可以在高温下进行是有利的。在这种情况下，糊化和液化可以作为一个步骤进行。
当今工业上使用的燕麦基产品的标准生产过程使用细菌内切-α-淀粉酶进行液化。然而，在许多情况下，燕麦仁没有完全水解，从而导致原材料的浪费。
本发明的目的是鉴定用于生产水解燕麦基产品的改进方法，其例如通过使用例如倾析器或离心机优化黏度以获得更好的液相和固相分离而增加产率，同时帮助制造商在最终产品中达到所需的黏度/口感。
在当今工业中，糊化和液化优选在高温下进行，以使燕麦淀粉(直链淀粉和支链淀粉)完全糊化。完全糊化的燕麦淀粉导致更高的产率，因为添加的淀粉酶可以接近底物。
燕麦基产品的标准工业生产过程使用葡糖淀粉酶(也称为淀粉葡糖苷酶或AMG)进行糖化，参见例如Lebensmittel Technik[食品科技]11/2018,第10-13页。使用葡糖淀粉酶进行糖化产生富含葡萄糖的相对甜的产品。为了减少葡萄糖的感知甜度和量，葡糖淀粉酶有时被另一种糖化酶(例如Fungamyl(来自米曲霉(Aspergillus oryzae)的真菌α-淀粉酶))代替。
用于液化和糖化的酶常常在两个不同的温度下应用，例如在约70℃-100℃的液化和在约40℃-65℃的糖化。由于能量消耗、时间、设备和过程的复杂性，这样的温度调节是昂贵的。
本发明的另一个目的是鉴定用于生产不太甜的水解燕麦基产品的改进方法。
发明内容
本发明人已经发现，通过在燕麦液化步骤中组合至少一种耐热细菌内切-α-淀粉酶(例如，获得自地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)或嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillusstearothermophilus))和至少一种具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂(例如，获得自解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的具有β-葡聚糖酶副活性的内切-α-淀粉酶制剂或获得自里氏木霉(Trichoderma reesei)的纤维素分解酶制剂)，可以获得增加的产率和/或改进的黏度。
如果在燕麦液化过程中仅使用来自解淀粉芽孢杆菌的细菌内切-α-淀粉酶制剂，则会产生具有非常低黏度和水样口感的产品。如果仅使用来自地衣芽孢杆菌或嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热细菌内切α-淀粉酶，则会产生具有高黏度和沙质口感的产品。两种酶的组合将使燕麦基产品的生产商能够达到所需的黏度/口感。
因此，本发明提供了一种用于获得水解燕麦材料的方法，该方法包括：
(a)获得燕麦材料在水中的浆液，其中燕麦材料与水的比率为1:3至1:8(w/w)，和
(b)用至少一种耐热细菌内切-α-淀粉酶和至少一种具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂在70℃-90℃的温度下液化该步骤(a)的浆液。
本发明人进一步发现，通过组合液化细菌内切-α-淀粉酶(例如，获得自解淀粉芽孢杆菌的内切-α-淀粉酶)和糖化细菌麦芽糖α-淀粉酶(例如，获得自嗜热脂肪芽孢杆菌的细菌麦芽糖α-淀粉酶)，液化和糖化可以在70℃-90℃的温度下作为一个步骤进行，并且所得产品具有适度的感知甜度和相对于葡萄糖增加的麦芽糖量。
因此，本发明进一步提供了一种用于获得水解燕麦材料的方法，该方法包括：
(a)获得热处理的燕麦材料在水中的浆料，和
(b)用至少一种细菌内切-α-淀粉酶和至少一种细菌麦芽糖α-淀粉酶在一个步骤中在70℃-90℃的温度下液化和糖化步骤(a)的浆液。
具体实施方式
第一方面
在第一方面，本发明提供了一种用于获得水解燕麦材料的方法，该方法包括：
(a)获得燕麦材料在水中的浆液，其中燕麦材料与水的比率为1:3至1:8(w/w)，和
(b)用至少一种耐热细菌内切-α-淀粉酶和至少一种具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂在70℃-90℃的温度下液化步骤(a)的浆液。
燕麦材料可以进行热处理。
燕麦材料可以是燕麦粉(例如热处理的燕麦粉)，或者它可以是经研磨的燕麦仁(例如已经湿磨的去壳和热处理的燕麦仁)，或者它可以是本领域已知的任何其他燕麦材料。
在优选的实施例中，燕麦材料是燕麦粉，优选热处理的燕麦粉。
在步骤(a)中，燕麦材料与水的比率优选为1:4至1:6。
步骤(b)可以进行5-60分钟，优选15-45分钟。
耐热细菌α-淀粉酶优选获得自或者是耐热内切-α-淀粉酶的变体，该变体获得自芽孢杆菌属，优选获得自地衣芽孢杆菌或嗜热脂肪芽孢杆菌。
耐热细菌α-淀粉酶的实例是可从诺维信公司(Novozymes A/S)获得的
Classic或
SC。
本发明上下文中的“耐热”意指酶可以抵抗不可逆的热失活。
耐热细菌内切-α-淀粉酶在20％燕麦粉中在85℃下孵育30分钟，优选在90℃下孵育30分钟后可以保留其活性的至少50％。
特别优选的耐热细菌内切-α-淀粉酶是SEQ ID NO:1的内切-α-淀粉酶。另一种优选的耐热细菌内切-α-淀粉酶是SEQ ID NO:2的内切-α-淀粉酶。
在优选的实施例中，耐热细菌内切-α-淀粉酶与SEQ ID NO:1具有至少70％的序列同一性，例如至少75％、例如至少80％、例如至少85％、例如至少86％、例如至少87％、例如至少88％、例如至少89％、例如至少90％、例如至少91％、例如至少92％、例如至少93％、例如至少94％、例如至少95％、例如至少96％、例如至少97％、例如至少98％、例如至少99％或甚至100％的序列同一性。
在另一个优选的实施例中，耐热细菌内切-α-淀粉酶与SEQ ID NO:2具有至少70％的序列同一性，例如至少75％、例如至少80％、例如至少85％、例如至少86％、例如至少87％、例如至少88％、例如至少89％、例如至少90％、例如至少91％、例如至少92％、例如至少93％、例如至少94％、例如至少95％、例如至少96％、例如至少97％、例如至少98％、例如至少99％或甚至100％的序列同一性。
术语“同一性”是两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性。出于本发明的目的，使用如在EMBOSS包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open SoftwareSuite[欧洲分子生物学开放软件套件],Rice等人,2000,Trends in Genetics[遗传学趋势]16:276-277)(优选地3.0.0版或更新版本)的Needle程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman-Wunsch algorithm)(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的同一性程度。所使用的任选参数是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。将标记为“最长同一性”的尼德尔的输出(使用非简化选项获得)用作同一性百分比并且计算如下：
(相同的残基×100)/(比对长度-比对中的空位总数)
耐热细菌内切-α-淀粉酶可以在10-10,000KNU、优选50-2,000KNU、甚至更优选200-250KNU/kg燕麦粉的范围内添加。
一个Kilo Novoα-淀粉酶单位(KNU)等于1000NU。一个KNU被定义为在标准条件下，将5.26g可溶的淀粉干物质Merck Amylum糊精化的酶量。
具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂可以是，例如，获得自芽孢杆菌属，优选获得自解淀粉芽孢杆菌的具有β-葡聚糖酶副活性的内切-α-淀粉酶的制剂，或者是获得自里氏木霉的纤维素分解酶制剂。
具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂的实例是可从诺维信公司获得的BAN或
在优选的实施例中，具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂是获得自芽孢杆菌属，优选获得自解淀粉芽孢杆菌的具有β-葡聚糖酶副活性的内切-α-淀粉酶的制剂。
这样的内切-α-淀粉酶与SEQ ID NO:3可以具有至少70％的序列同一性，例如至少75％、例如至少80％、例如至少85％、例如至少86％、例如至少87％、例如至少88％、例如至少89％、例如至少90％、例如至少91％、例如至少92％、例如至少93％、例如至少94％、例如至少95％、例如至少96％、例如至少97％、例如至少98％、例如至少99％或甚至100％的序列同一性。
这样的内切-α-淀粉酶的制剂可以包含5-10FBG/KNUβ-葡聚糖酶活性。
一个真菌β-葡聚糖酶单位(FBG)是在如下标准条件下每分钟产生相当于1μmol葡萄糖的还原性碳水化合物的酶量：温度50℃，pH5，5g/Lβ-葡聚糖作为底物，反应时间1200s。
这样的内切-α-淀粉酶的制剂可以包含1-3BGU/KNUβ-葡聚糖酶活性。
一个β-葡聚糖酶单位(BGU)是在还原糖Somoguy Nelson方法的条件下每分钟产生相当于1μmol葡萄糖的还原性碳水化合物的酶量。
在另一个优选的实施例中，具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂是获得自里氏木霉的纤维素分解酶制剂。
具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂可以在每kg燕麦粉1-1,000BGU、优选2-200BGU的范围内添加。
具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂可以在每kg燕麦粉1-5,000FBG，优选3-1,000FBG的范围内添加。
在步骤(b)之后，优选通过与葡糖淀粉酶在40℃-65℃，优选在55℃-60℃孵育5-60分钟，优选10-30分钟来进行糖化步骤。
可以以50-1000AGU/kg燕麦材料的浓度添加葡糖淀粉酶。
一个葡糖淀粉酶单位(AGU)被定义为在以下标准条件下每分钟水解1微摩尔麦芽糖的酶量：37℃、pH 4.3、底物：麦芽糖23.2mM，缓冲液：乙酸盐0.1M，反应时间5分钟。
在用葡糖淀粉酶处理后，酶可以通过热处理失活。例如，将温度提高到95℃并持续10分钟。失活后，可以冷却水解产物。
液相和固相可以例如通过离心分离。
可以使用例如氯化钠(NaCl)、油和调味剂来配制液相。它可能是均质化的。它可能经过UHT或ESL处理并无菌包装。
最终产品可以作为燕麦基饮料出售。可替代地，它可以进一步加工成食品，例如发酵的燕麦基产品或燕麦基冰淇淋，或者它可以用作食品中的成分。
第二方面
在第二方面，本发明提供了一种用于获得水解燕麦材料的方法，该方法包括：
(a)获得燕麦材料在水中的浆料，和
(b)用至少一种细菌内切-α-淀粉酶和至少一种细菌麦芽糖α-淀粉酶在一个步骤中在70℃-90℃的温度下液化和糖化步骤(a)的浆液。
燕麦材料可以进行热处理。
燕麦材料可以是燕麦粉(例如热处理的燕麦粉)，或者它可以是经研磨的燕麦仁(例如已经湿磨的去壳和热处理的燕麦仁)，或者它可以是本领域已知的任何其他燕麦材料。
在优选的实施例中，燕麦材料是燕麦粉，优选热处理的燕麦粉。
在步骤(a)中，燕麦材料与水的比率可以为1:3至1:8(w/w)，优选为1:4至1:6。
步骤(b)可以进行5-60分钟，优选15-45分钟。
细菌内切-α-淀粉酶优选获得自或者是内切-α-淀粉酶的变体，该变体获得自芽孢杆菌属，优选获得自解淀粉芽孢杆菌。
细菌内切-α-淀粉酶的实例是可从诺维信公司获得的BAN。
特别优选的细菌内切-α-淀粉酶是SEQ ID NO:3的内切-α-淀粉酶。
在优选的实施例中，细菌内切-α-淀粉酶与SEQ ID NO:3具有至少70％的序列同一性，例如至少75％、例如至少80％、例如至少85％、例如至少86％、例如至少87％、例如至少88％、例如至少89％、例如至少90％、例如至少91％、例如至少92％、例如至少93％、例如至少94％、例如至少95％、例如至少96％、例如至少97％、例如至少98％、例如至少99％或甚至100％的序列同一性。
细菌内切-α-淀粉酶可以在每kg燕麦粉50-50,000KNU、优选100-10,000KNU、甚至更优选500-2,000KNU的范围内添加。
“麦芽糖α淀粉酶”被理解为一种分类在EC 3.2.1.133下的酶。酶活性不需要底物上的非还原末端，并且主要酶活性导致支链淀粉和直链淀粉降解为麦芽糖和更长的麦芽糖糊精。它能够将直链淀粉和支链淀粉水解为α构型的麦芽糖。
细菌麦芽糖α-淀粉酶优选获得自或者是麦芽糖α-淀粉酶的变体，该变体获得自芽孢杆菌属，优选获得自嗜热脂肪芽孢杆菌。
特别优选的细菌麦芽糖α-淀粉酶是可从诺维信公司获得的
细菌麦芽糖α-淀粉酶可以是耐热的。在80℃下在20％燕麦粉中孵育30分钟后，它可以保留其活性的至少50％。
特别优选的细菌麦芽糖α-淀粉酶是SEQ ID NO:4的麦芽糖α-淀粉酶。
在优选的实施例中，细菌麦芽糖α-淀粉酶与SEQ ID NO:4具有至少70％的序列同一性，例如至少75％、例如至少80％、例如至少85％、例如至少86％、例如至少87％、例如至少88％、例如至少89％、例如至少90％、例如至少91％、例如至少92％、例如至少93％、例如至少94％、例如至少95％、例如至少96％、例如至少97％、例如至少98％、例如至少99％或甚至100％的序列同一性。
细菌麦芽糖α-淀粉酶可以在每kg燕麦粉500-500,000MANU、优选1,000-100,000MANU、甚至更优选5,000-50,000MANU的范围内添加。
一个麦芽糖淀粉酶Novo单位(MANU)是在标准条件下每分钟切割1μmol麦芽三糖的酶量。标准条件为10mg/ml麦芽三糖、37℃、pH 5.0、30分钟反应时间。
在步骤(b)之后，酶可以通过热处理失活。例如，将温度提高到95℃并持续10分钟。失活后，可以冷却水解产物。
获得的水解燕麦材料可以以至少1，优选至少2，更优选至少4(w/w)的比率包含麦芽糖:葡萄糖。
所需的麦芽糖产量和所需的相对甜度将取决于例如特定产品、其销售区域以及消费者偏好。
液相和固相可以例如通过离心分离。
可以使用例如氯化钠(NaCl)、油和调味剂来配制液相。它可能是均质化的。它可能经过UHT或ESL处理并无菌包装。
最终产品可以作为燕麦基饮料出售。可替代地，它可以进一步加工成食品，例如发酵的燕麦基产品或燕麦基冰淇淋，或者它可以用作食品中的成分。
实例
实例1：用来自地衣芽孢杆菌的耐热内切-α-淀粉酶与来自解淀粉芽孢杆菌的内切-α-淀粉酶组合处理燕麦粉
将来自不具有β-葡聚糖酶副活性的地衣芽孢杆菌的耐热内切-α-淀粉酶(称为BLA)(SEQ ID NO:1)和来自具有β-葡聚糖酶副活性的解淀粉芽孢杆菌的内切-α-淀粉酶制剂(称为BAA)(SEQ ID NO:3)以下表1中所示的量添加到水中。将热处理的燕麦粉与包含酶的水以50g燕麦粉与250g水的比率混合。
在下一步中，将水、酶和燕麦的混合物加热至85℃的温度持续30分钟(液化)。然后将水解产物冷却至60℃并以300AGU/kg燕麦粉的浓度添加AMG用于糖化。将水解产物在60℃下保持15分钟，然后通过将温度升高到95℃持续10分钟使酶失活。失活后，将水解产物冷却至<60℃进行离心。通过使用3950RPM的离心机持续5分钟进行液相和固相的分离。测定上清液的量，结果如下表1所示。
表1
*KNU是每kg燕麦粉。BAA包含8.6FBG/KNU和1.8BGU/KNU
如表1中所示，BLA和BAA的组合增加了离心后上清液的总固体含量，并且它们的组合性能优于两种酶单独添加时的性能。此外，当单独使用BLA时，黏度高，这可能产生沙质口感。当单独使用BAA时，黏度低，这可能产生水样的口感。两种酶的组合使得能够获得不太低和不太高的黏度。
任选地，可以使用例如氯化钠(NaCl)、油和调味剂来配制均质化、经过UHT或ESL处理并无菌包装的产品。
实例2：用来自地衣芽孢杆菌的耐热内切-α-淀粉酶与具有β-葡聚糖酶活性的酶的组合处理燕麦粉
将来自不具有β-葡聚糖酶副活性的地衣芽孢杆菌的耐热内切-α-淀粉酶(称为BLA)(SEQ ID NO:1)和来自具有β-葡聚糖酶副活性的解淀粉芽孢杆菌的内切-α-淀粉酶制剂(称为BAA)(SEQ ID NO:3)以下表2中所示的量添加到水中。将热处理的燕麦粉与包含酶的水以50g燕麦粉与250g水的比率混合。
在下一步中，将水、酶和燕麦的混合物加热至85℃的温度持续30分钟(液化)。然后将水解产物冷却至60℃并以300AGU/kg燕麦粉的浓度添加AMG用于糖化。将水解产物在60℃下保持15分钟，然后通过将温度升高到95℃持续10分钟使酶失活。失活后，将水解产物冷却至<60℃进行离心。通过使用3950RPM的离心机持续5分钟进行液相和固相的分离。测定上清液的量，结果如下表2所示。
在进一步的实验中，将BLA与
(获得自里氏木霉的具有β-葡聚糖酶活性的纤维素分解酶制剂)以表2中所示的剂量组合，以表明BLA与BAA组合的效果是由于BAA的β-葡聚糖酶副活性。
以与上述实验相同的方式进行实验，结果如下表2所示。
表2还显示了关于使用来自嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热内切-α-淀粉酶(SEQ ID NO:2)的数据，该酶在没有BAA或Celluclast的情况下不具有β-葡聚糖酶副活性(称为BSA)。
表2所有酶活性单位均为每kg燕麦粉
*BAA包含8.6FBG/KNU和1.8BGU/KNU
如表2所示，
与BLA的组合产生和BAA与BLA的组合相同的产率增加和改进的黏度。单独使用BSA产生与单独使用BLA相当的产率和黏度。
任选地，可以使用例如氯化钠(NaCl)、油和调味剂配制均质化、经过UHT或ESL处理并无菌包装的液相产品。
实例3：用来自解淀粉芽孢杆菌的内切-α-淀粉酶和麦芽糖α-淀粉酶处理燕麦粉
将50g热处理的燕麦粉与250g水(总重量300g)混合。
将来自解淀粉芽孢杆菌的内切-α-淀粉酶(SEQ ID NO:3，称为BAA)和来自嗜热脂芽孢杆菌的麦芽糖α-淀粉酶(SEQ ID NO:4，称为MAA)以下表3中所示的量添加到其中。将混合物加热至80℃持续30分钟(液化和糖化)。
在平行实验中，首先添加BAA，并将混合物在80℃下孵育30分钟(液化)。然后将水解产物冷却至60℃并以300AGU/kg燕麦粉的浓度添加AMG用于糖化。将水解产物在60℃下保持15分钟。
在另一个平行实验中，首先添加BAA，并将混合物在80℃下孵育30分钟(液化)。然后将水解产物冷却至55℃并以2400FAU-F/kg燕麦粉的浓度添加Fungamyl用于糖化。将水解产物在55℃下保持15分钟。
然后将混合物的温度提高到95℃持续15分钟以使酶失活。添加水以达到300g(原始总重量)以补偿水的蒸发。
通过使离心机以3000RPM运行15分钟来分离混合物的固相和液相。
使用赛默飞世尔公司(Thermo Fisher)的高压阴离子交换脉冲安培检测方法测量液相中存在的麦芽糖和葡萄糖的量。
使用“Lehrbuch der Lebensmittelchemie[食品化学教科书]-Springer[施普林格出版社]–Belitz–Grosch-Schieberle”(表4.10；第246页)中指出的甜度系数计算相对甜度。
结果如表3所示。
表3所有酶活性单位均为每kg燕麦粉
如可以看到的，细菌内切-α-淀粉酶与细菌麦芽糖α-淀粉酶的组合允许在一个步骤中进行液化和糖化。
表3进一步显示，与AMG相比，Fungamyl和麦芽糖α-淀粉酶产生更多的麦芽糖和更少的葡萄糖。与葡萄糖相比，麦芽糖具有更低的相对甜度。根据“Lehrbuch derLebensmittelchemie[食品化学教科书]-Springer[施普林格出版社]-Belitz-Grosch-Schieberle”(表4.10，第246页)，麦芽糖的相对甜度为0.46，葡萄糖为0.69。
因此，可以通过使用麦芽糖α-淀粉酶保持糖的总量恒定来生产不太甜的燕麦饮品。
如何计算相对甜度的示例：960KNU的BBA与30,000MANU的MAA组合产生0.6g葡萄糖/100g*0.69+3.7g麦芽糖/100g*0.46＝2.1。
Claims (15)
1.一种用于获得水解燕麦材料的方法，该方法包括：
(a)获得燕麦材料在水中的浆液，其中燕麦材料与水的比率为1:3至1:8(w/w)，和
(b)用至少一种耐热细菌内切-α-淀粉酶和至少一种具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂在70℃-90℃的温度下液化该步骤(a)的浆液。
2.如权利要求1所述的方法，其中该具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂是获得自芽孢杆菌属(Bacillus)，优选获得自解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的具有β-葡聚糖酶副活性的内切-α-淀粉酶的制剂。
3.如权利要求1所述的方法，其中该具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂是获得自里氏木霉(Trichoderma reesei)的纤维素分解酶制剂。
4.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中该具有β-葡聚糖酶活性的酶制剂以每kg燕麦材料1-1,000BGU、优选2-200BGU的剂量添加。
5.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中该耐热细菌内切-α-淀粉酶获得自或者是耐热内切-α-淀粉酶的变体，该变体获得自芽孢杆菌属，优选获得自地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)或嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)。
6.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中该耐热细菌内切-α-淀粉酶与SEQ IDNO:1或2、优选与SEQ ID NO:1具有至少70％的序列同一性。
7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中步骤(b)进行5-60分钟。
8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中在步骤(b)之后，通过与葡糖淀粉酶在40℃-65℃下、优选在55℃-60℃下孵育5-60分钟、优选10-30分钟来进行糖化步骤。
9.一种用于获得水解燕麦材料的方法，该方法包括：
(a)获得热处理的燕麦材料在水中的浆料，和
(b)用至少一种细菌内切-α-淀粉酶和至少一种细菌麦芽糖α-淀粉酶在一个步骤中在70℃-90℃的温度下液化和糖化该步骤(a)的浆液。
10.如权利要求9所述的方法，其中该细菌内切-α-淀粉酶获得自芽孢杆菌属，优选获得自解淀粉芽孢杆菌。
11.如权利要求9-10中任一项所述的方法，其中该细菌内切-α-淀粉酶与SEQ ID NO:3具有至少70％的序列同一性。
12.如权利要求9-11中任一项所述的方法，其中该细菌麦芽糖α-淀粉酶获得自嗜热脂肪芽孢杆菌。
13.如权利要求9-12中任一项所述的方法，其中该细菌麦芽糖α-淀粉酶与SEQ ID NO:4具有至少70％的序列同一性。
14.如权利要求9-13中任一项所述的方法，其中步骤(b)进行5-60分钟。
15.如权利要求9-14中任一项所述的方法，其中在步骤(b)之后获得的该水解燕麦材料以至少1、优选至少2、更优选至少4(w/w)的比率包含麦芽糖:葡萄糖。
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