CN114560951A - 一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子，属于生物技术领域。所述多肽基分子包括调节疏水性，使其具有良好包封化疗药物能力的十二烷基化合物、可自组装形成具有β‑sheet结构的纳米纤维的氨基酸序列和可靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列组合而成；所述疏水性十二烷基化合物包括携带十二烷基链的酯类、羧酸类或者羧酸盐类化合物；所述可自组装形成具有β‑sheet结构纳米纤维的氨基酸序列为KLVFF；所述可靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列为GNRQRWFVVWLG。本发明公开的多肽基分子作为膀胱癌术后载药平台，可实现杀伤残余肿瘤降低复发的目的。

Description

一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子及其应用

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子及其应用。

背景技术

膀胱癌在国内泌尿***肿瘤中发病率位于首位，据2016年发表在CA Cancer JClin上的结果显示，每年有8万余个新发膀胱癌病例，而每年因膀胱癌死亡的人数超过3万人。最令临床医生头疼的就是膀胱癌的高复发性问题，泌尿外科权威杂志EuropeanUrology就指出，膀胱癌的术后5年复发率高达78％。这一无法避免的临床瓶颈对患者健康造成巨大威胁的同时，也给患者带来了巨大的经济负担。正因膀胱癌患者的治疗费用位居所有实体肿瘤之首，膀胱癌因而得名“最贵的肿瘤”。研究指出不完全肿瘤切除造成的肿瘤再生长是膀胱癌复发的主要原因。虽然临床中膀胱癌术后仍进行膀胱灌注治疗，同时新型灌注药物也在不断发展，但膀胱癌患者的复发率仍然居高不下。因此开展多学科交叉融合，针对膀胱灌注给药难点问题，设计构建新型膀胱灌注药物递送平台，降低膀胱癌的发病率与复发率，已经成为临床上迫切需要解决的实际问题。

在临床上，经尿道***电切术(Transurethral Resection of BladderTumor,TURBT)是非肌层浸润性膀胱癌的首要治疗方式。不完全切除的残余肿瘤就潜藏在TURBT术后的创面范围内。因此，不同于正常尿路上皮细胞，术后创面给我们提供了一个现成的、特异的残留瘤周组织环境。这为药物提供靶向平台，靶向后直接杀死潜在的残余肿瘤细胞。尽管靶向手术创面能够使药物对残留肿瘤产生完全的杀伤作用，但在膀胱这种pH值和渗透压不断变化的复杂流体环境中，分子的长期稳定靶向能力是临床应用的主要挑战。

多肽因其生物相容性好，生物活性多样等特性，成为生物材料理想的组成部分。随着超分子化学的发展，多肽的自组装行为逐渐明晰，这拓宽了肽基纳米材料在生物医药领域中的应用。原位构建的自组装多肽网络可用于肿瘤成像，阻断肿瘤的侵袭和转移，同时显示了高度聚集和长效滞留的特性。在自然界中，细菌感染更容易发生在像手术切口或烧伤创面中，这是因为失去了皮肤这样的表面屏障的保护。细菌感染第一步便是粘附宿主细胞。这一过程是由细菌表面的一组特定的细胞外基质黏附分子与宿主细胞上的纤连蛋白(Fibronectin,FN)相互作用从而实现。基于这些发现，通过自组装肽基材料来模拟细菌感染创面过程，为构建理想的药物递送平台提供了机会，即使在膀胱内流动冲洗的环境中，也可以在残留肿瘤部位精确分布和延长滞留时间。但是目前还未发现能够很好用于防治***术后复发的理想多肽。

发明内容

本发明的目的是提供一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，该多肽基分子作为膀胱癌术后载药平台，可实现杀伤残余肿瘤降低复发的目的。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子，包括调节疏水性，使其具有良好包封化疗药物能力的十二烷基化合物、可自组装形成具有β-sheet结构的纳米纤维的氨基酸序列和可靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列组合而成；

所述十二烷基化合物包括携带十二烷基链的酯类、羧酸类或者羧酸盐类化合物；所述可自组装形成具有β-sheet结构纳米纤维的氨基酸序列为KLVFF(SEQ ID NO.1)；所述可靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列为GNRQRWFVVWLG(SEQ ID NO.2)。

优选的是，所述多肽基分子的结构式如下：

本发明还提供所述的多肽基分子在制备抗膀胱癌术后复发药物中的应用。所述多肽基分子通过形成纳米纤维网络，覆盖膀胱术后创面，实现化疗药物在膀胱残余肿瘤处高富集与长滞留，发挥抗残余肿瘤复发的作用。

优选的是，所述肿瘤为可从完整脏器切除的，且癌旁创面组织纤连蛋白特异性高表达的肿瘤。

优选的是，所述多肽基分子作为肿瘤术后载药平台实现杀伤残余肿瘤降低复发的应用。

优选的是，所述的肿瘤包括膀胱癌、肾癌、胶质母细胞瘤、肝癌。

优选的是，所述肿瘤为膀胱癌。

本发明公开了以下技术效果：

本发明公开的一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子(BTN)，由调节疏水性，使其具有良好包封化疗药物能力的十二烷基化合物、可自组装形成具有β-sheet结构的纳米纤维的氨基酸序列和可靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列组合而成。BTN可在手术后创面部位，与暴露的纤连蛋白结合，发生自组装、继而形变，形成稳定水不溶的纳米纤维，其包封了的化疗药物能够富集嵌入纳米纤维网络处。实现化疗药物在残余肿瘤处的富集与长效滞留，避免了被尿液冲刷而排出，实现在残余肿瘤部位长效杀伤残余肿瘤细胞，最终发挥抑制肿瘤复发的作用。

此外，本发明注重临床转化应用的实际问题，采用生物安全性高的多肽为材料设计并构建，因此，BTN具有较强的生物安全性，临床应用潜力大。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为BTN和对照组BTN-C的分子结构式；a：BTN的分子结构模式图；b：BTN-C的分子结构模式图；

图2为BTN在含纤连蛋白的水溶液中可自组装、形变形成疏水性纳米纤维；a：BTN在加入纤连蛋白后0小时、0.5小时、1小时的透射电镜图像；b：BTN-C在加入纤连蛋白后0小时、0.5小时、1小时的透射电镜图像；标尺：100nm；

图3为BTN(a)及BTN-C(b)与纤连蛋白在孵育1小时后，分别于0小时、1小时测得的圆二色光谱图；

图4为BTN对纤连蛋白阳性表达的多细胞球(L929+TGF-β)的靶向与长期滞留能力；a：多细胞球分别与Cy5标记的BTN、BTN-C 37℃孵育1小时的激光共聚焦显微镜(ConfocalLaser Scanning Microscopy,CLSM)图像，标尺：80μM；b：根据CLSM图像统计FN阳性的多细胞球(Multicellular spheroids,MCSs)与Cy5标记的BTN和BTN-C孵育后的平均荧光强度；c：BTN和BTN-C处理的FN阳性多细胞球(L929+TGF-β)的代表CLSM图像，监测5天内的滞留效果。标尺：80μm；d：图c中MCSs图像标准化荧光强度的统计分析；

图5为BTN及BTN-C灌注小鼠膀胱后的靶向情况；a：Cy7标记的BTN灌注膀胱1小时后的免疫荧光图片，反映膀胱组织冷冻切片中的材料与纤连蛋白的共定位情况；b：Cy7标记BTN灌注的膀胱荧光成像以及统计分析；

图6为BTN在小鼠膀胱内滞留情况；a：用Cy7标记的BTN或BTN-C灌注膀胱后，在不同时间点(0、2、4、12、16、24、42、60、72小时)的小鼠活体荧光成像；b：图a的小鼠膀胱标准化的荧光强度；

图7为BTN结合损伤膀胱创面上暴露的纤连蛋白后发生自组装继而形变成水不溶性纳米纤维；a：BTN结合损伤膀胱创面上暴露的纤连蛋白形变的示意图；b，c：膀胱内灌注BTN或BTN-C后的小鼠膀胱的TEM和SEM代表图像；比例尺：TEM:2μm(高倍)，5μm(低倍)；SEM：500nm(高倍)，1μm(低倍)；白色箭头：在膀胱内表面形成的纳米纤维；

图8为BTN及BTN-C的临界胶束浓度(Critical Micelle Concentration，CMC)及药物包载效率；a，b：BTN及BTN-C的临界胶束浓度；c：按照相同的方法和投料比，对BTN和BTN-C包载化疗药DOX，包载药物后的BTN以BTN-C的吸收光谱表现出DOX的特征吸收峰，在分子动力学模拟快照中，黄色、青色和橙色部分分别代表BTN、BTN-C和DOX分子；

图9为膀胱内灌注DOX@BTN和游离DOX后尿液中DOX浓度的实时变化；

图10为在不完全肿瘤切除模型中BTN对残留肿瘤的抑制作用；a：平均的肿瘤生长抑制曲线；b：肿瘤剜除后残留肿瘤腔的FN免疫组化染色，显示FN表达丰富；红线：残余肿瘤腔内表面；黑色箭头：残留肿瘤；标尺：1000μm和200μm；c：四组小鼠的体重变化；

图11为BTN对活体膀胱原位肿瘤的抑制作用；a：原位种植MB49-Luc***的小鼠体内肿瘤生物发光图像；b：肿瘤的生长曲线，由每个时间点的膀胱原位肿瘤的生物发光信号指示；c：四组小鼠的体重变化；d：经过不同组治疗后，MB49-Luc原位膀胱癌小鼠的Kaplan-Meimer生存曲线。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。

应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。

除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。

在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。

关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。

实施例1纤连蛋白靶向多肽的制备及分子结构

1、纤连蛋白靶向多肽BTN(C12-KLVFF-GNRQRWFVVWLG)的制备

可识别并结合纤连蛋白形成水不溶性纳米纤维，所述的纤连蛋白靶向多肽由以下三部分组成：

1)调节疏水性，使其具有良好包封化疗药物能力的十二烷基化合物

2)可自组装成具有β-sheet结构的纳米纤维的氨基酸序列，其氨基酸序列如SEQID NO.1所示；源自β淀粉样蛋白中的KLVFF肽基序列，由于分子间氢键的相互作用，可自组装成具有β-sheet二级结构的水不溶性纳米纤维；

3)靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示(GNRQRWFVVWLG)；可靶向识别纤连蛋白的序列，其在BTN中作为靶头，与靶标纤连蛋白特异性结合。

2、不可形变的对照组多肽BTN-C(C12-KAAGG-GNRQRWFVVWLG)

BTN及BTN-C均通过固相合成法制备。多肽BTN及BTN-C的分子结构模式图如图1所示。

固相合成法，具体为：固相反应器中使用无水的N,N-二甲基甲酰胺(DMF)溶胀载有第一个氨基酸的树脂，时间为4h。溶胀结束后使用脱保护剂(六氢吡啶:无水DMF＝1:4，v/v)脱除氨基酸的N末端的Fmoc保护基团，脱保护试剂处理时间为15min，使用茚三酮试剂(茚三酮:苯酚:抗坏血酸＝1:1:1，v/v/v)显色法来对脱保护过程进行验证。按照序列依次将氨基酸与HBTU(物质的量均过量于载有氨基酸的树脂负载量10倍)溶于偶联剂(N-甲基吗啉:无水DMF＝5:95，v/v)中，溶液在固相反应器中与树脂混合并摇床震荡偶联60min。使用茚三酮显色法对偶联过程进行验证后，再次使用脱保护剂脱除氨基酸上所带有的Fmoc保护基团，这样就完成了单个氨基酸的合成；重复上述步骤直至氨基酸序列到最后一个氨基酸和C12烷基链合成完毕。将合成完成的树脂与裂解液混合，并置于冰水浴中搅拌反应3h。目的是将合成完毕的多肽从树脂上裂解；多肽从树脂上分离后，将上述混合液使用干燥的氮气进行吹扫，以除去三氟乙酸，再将得到的产物用冰的无水***重新沉淀出来，通过离心收集沉淀出的产物，真空干燥过夜后获得白色粉末即为所合成的多肽。

实施例2多肽BTN结合纤连蛋白后发生自组装继而形变成水不溶性纳米纤维

BTN、BTN-C分别溶解在DMSO(4mM)中。将BTN的DMSO母液加入到去离子水中，并快速震荡，得到新制备的BTN纳米颗粒(40μM,H₂O:DMSO＝99:1,v/v)作为初始状态进行后续测试。在BTN和BTN-C(40μM,H₂O:DMSO＝99:1,v/v)溶液中加入纤连蛋白(20nM,H₂O:DMSO＝99:1,v/v)，室温孵育，开始诱导BTN向纳米纤维的形态转变，然后分别于0小时、0.5小时和1小时使用透射电镜观察BTN及BTN-C溶液样品。

结果如图2所示。从该结果可以看出多肽BTN在加入纤连蛋白后可自组装继而形变成疏水性纳米纤维，而BTN-C在加入纤连蛋白后无形变行为。

实施例3多肽BTN结合纤连蛋白后发生二级结构改变，形成β-sheet二级结构

将BTN及BTN-C与纤连蛋白孵育1小时后，分别于0小时、1小时观察圆二色光谱中的二级结构信号变化。

结果如图3所示，从该结果可以看出多肽BTN与纤连蛋白共同孵育1小时后，在圆二色光谱中可表现出典型的β-sheet特征信号，而BTN-C没有表现出典型的β-sheet特征信号。

实施例4多肽BTN对纤连蛋白阳性表达的多细胞球(L929+TGF-β)的靶向和长期滞留能力

将Cy5标记的BTN和BTN-C与纤连蛋白阳性表达的细胞球(L929+TGF-β)孵育1小时后用PBS洗涤，观察对纤连蛋白阳性细胞团的靶向情况；另一方面，将纤连蛋白阳性表达的多细胞球(L929+TGF-β)与Cy5标记的BTN和BTN-C孵育6h，并在第0、1、2、3、4、5天通过共聚焦显微镜观察，并进行荧光强度定量统计。每次观察前对细胞球进行换液。来观察BTN与BTN-C的长效滞留情况。

结果如图4所示，从该结果可以看出多肽BTN可靶向，并长期滞留于纤连蛋白阳性表达的多细胞球。而BTN-C具有对纤连蛋白阳性表达的细胞球的靶向能力，但没有表现出长期滞留能力。

实施例5多肽BTN及BTN-C与膀胱损伤暴露的纤连蛋白在组织冷冻切片中的共定位情况

通过将小鼠麻醉后，仰卧于干净的手术单上，将24-G留置针***小鼠膀胱，见尿液留出证明插管成功，后通过留置针，向小鼠膀胱内注入100μL 0.1N HCl，留置10s，按压膀胱排出盐酸，立即灌注100μL 0.1N KOH溶液进行中和15s，后用PBS进行灌洗，酸损伤小鼠膀胱模型构建完成。

用酸灌注法损伤小鼠膀胱，然后分别灌注Cy7标记的BTN、BTN-C。灌注1h后，处死解剖小鼠，收集膀胱组织，经过固定、封闭、孵育一抗(抗小鼠FN抗体，1:200，Solarbio，北京，中国)，孵育二抗(FITC标记的山羊抗兔IgG)的步骤后，进行免疫荧光染色。验证BTN与膀胱损伤暴露的纤连蛋白的共定位情况。

通过如图5所示。从该结果可看出，BTN的荧光信号可与膀胱损伤暴露的纤连蛋白共定位。优于BTN-C与纤连蛋白的共定位情况。

实施例6多肽BTN在小鼠体内滞留情况；

本实验采用C57BL/6小鼠，将Cy7标记的BTN或BTN-C(200μM与1％DMSO的PBS中，100μL)灌注入小鼠膀胱，在灌注2小时后，进行PBS灌洗以去除未结合的分子，另一方面，将Cy7标记的BTN或BTN-C灌注入麻醉的小鼠膀胱，在小鼠脱离麻醉状态后的0、2、4、12、16、24、42、60、72小时采集膀胱区域IVIS荧光图像。

结果如图6所示，从结果可看出，BTN与BTN-C均能够靶向损伤的小鼠膀胱。BTN在小鼠膀胱内具有良好的长效滞留能力。而BTN-C在小鼠体内没有表现出良好的长效滞留能力。

实施例7多肽BTN结合膀胱手术创面上暴露的纤连蛋白后发生形变、自组装成水不溶性纳米纤维

向损伤后的小鼠膀胱内灌注BTN或BTN-C(200μM与1％DMSO的PBS,100μL)，分别用生物电镜和扫描电镜采集膀胱手术创面的电镜图像。

结果如图7所示，从结果可看出，BTN在小鼠膀胱手术创面上可自组装形变成纳米纤维，而BTN-C在小鼠膀胱手术创面上无形变行为。

实施例8多肽BTN和BTN-C的临界胶束浓度(CMC)及对化疗药物的包载效率；

配制不同浓度的BTN及BTN-C溶液，使用芘荧光探针法检测其临界胶束浓度，确定其包封能力。等质量的BTN或BTN-C多肽与等质量的DOX混合，以保证两种多肽的投料比一致，加入100μL DMSO进行充分溶解，后滴入超声环境中的纯水中；然后用500截断分子量的透析袋透析，4h后，6000g 10min,离心取上清，通过DOX在485nm处的特征紫外吸收峰强，计算BTN及BTN-C的包载效率。

结果如图8所示，从结果可看出BTN及BTN-C均具有DOX包载功能。且在相同投料比下，BTN比BTN-C具有更强的包载效率。

实施例9多肽BTN形成的纳米纤维赋予DOX长效滞留与持续释放的行为

小鼠麻醉后，分别向膀胱内灌注100μL游离DOX(0.5mg/mL，含5％DMSO的水溶液)或DOX@BTN(DOX浓度：0.5mg/mL，水溶液)，分别在灌注后1、4、8、16、24、36、48、60、72小时收集尿液，并通过紫外吸收法测定尿液中释放的DOX。

结果如图9所示，从结果可看出BTN结合纤连蛋白后形变的纳米纤维赋予了DOX长效滞留抗尿冲洗和持续释放的能力。

实施例10多肽BTN对残留肿瘤的抑制情况。

本实验通过构建不完全肿瘤切除模型验证BTN对残余肿瘤的抑制情况，采用C57BL/6小鼠，将MB49-Luc细胞皮下种瘤得到异种移植肿瘤。14天后，肿瘤被剜除，留下可见的微肿瘤病变(约2mm×2mm)作为残余肿瘤，并缝合，遗留残余肿瘤腔。四种药物(PBS、DOX和BCG作为临床对照，DOX@BTN)注射到残余肿瘤腔内，注射量分别为：PBS(100μL)、BCG(3×10⁶CFU/mL,100μL)、游离DOX和DOX@BTN(0.5mg/mL,100μL)；每次治疗后用PBS冲洗。观察残余肿瘤体积大小并且监测治疗期间的小鼠体重变化。

结果如图10所示，从该结果可以看出，多肽BTN可在体抑制膀胱残余肿瘤的生长，但对小鼠体重的变化不产生影响，反应了多肽BTN的生物安全性。

实施例11BTN可以抑制原位膀胱癌复发

本实验采用C57BL/6小鼠，将MB49-Luc细胞植入小鼠膀胱，以形成原位微小***。在肿瘤孵育后的第3天，通过小动物活体成像***(IVIS)每日观察，当发现所有小鼠在膀胱中都显示出可检测到的生物发光信号时，这表明已形成原位微小***病灶，可以用来模拟术后残留肿瘤。随后开始给药(PBS、DOX和BCG作为临床对照，DOX@BTN)，注射量分别为：PBS(100μL)、BCG(3×10⁶CFU/mL,100μL)、游离DOX和DOX@BTN(0.5mg/mL,100μL)；分别在肿瘤植入后不同时间点(第3、5、7、10、10、17、24天)灌注小鼠膀胱，期间监测小鼠体重变化及生存曲线，并用IVIS实时监测小鼠肿瘤的生物发光信号，以记录肿瘤生长。

结果如图11所示，从该结果可以看出，包载DOX的BTN显著抑制了膀胱癌复发。将肿瘤复发率从临床药物DOX组的71％降低到29％

本发明的靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子，由细菌感染粘附受到启发，首先因其具有的两亲性能够形成纳米颗粒结构即Bacteria-inspired TransformableNanoparticles(BTN)。当引入化疗药物阿霉素后，该肽基分子作为载药平台，与阿霉素共组装形成包载DOX的BTN(DOX@BTN)。其中细菌来源的纤连蛋白靶向多片段可特异靶向识别手术后所暴露出的纤连蛋白，在结合力的作用下，启动自组装过程，形变为稳定不溶水的纳米纤维，疏水的DOX分子可以嵌入纤维样结构，实现在残余肿瘤创面处形成富集化疗药物的纤维网络。该纤维网络层，能够稳定牢固靶向于残余肿瘤创面，并且长效驻留于此，发挥长效化疗杀伤的作用，实现残余肿瘤处特异高浓度杀伤。经实验证明，相比于无形变组(C-BTN)，BTN在活体小鼠损伤的膀胱中具有显著的长效滞留效应。在灌注材料后的72小时，膀胱内滞留的BTN是BTN-C的5倍(25±4.5vs 5±1.3)。当对小鼠膀胱分别灌注单纯游离的DOX与包载了DOX的实验组肽基分子后，包载了DOX的BTN组小鼠，在72小时后，膀胱尿液中的DOX是DOX组的8.5倍。证明了其具有使化疗药物长效滞留长效暴露的作用。在药效方面，与临床常用的膀胱灌注制剂(DOX和BCG)，包载DOX的BTN能够显著降低***的复发率，(29％vsBCG：57％，DOX：71％)。因此，本发明的纤连蛋白靶向多肽可通过形成纳米纤维网络，覆盖膀胱术后创面，实现化疗药物在膀胱残余肿瘤处高富集与长滞留，发挥抗残余肿瘤复发的作用。

以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

序列表

<110> 哈尔滨医科大学

<120> 一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子及其应用

<160> 2

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

Lys Leu Val Phe Phe

1 5

<210> 2

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

Gly Asn Arg Gln Arg Trp Phe Val Val Trp Leu Gly

1 5 10

Claims (7)

1.一种靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子，其特征在于，包括调节疏水性，使其具有良好包封化疗药物能力的十二烷基化合物、可自组装形成具有β-sheet结构纳米纤维的氨基酸序列和可靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列组合而成；

所述十二烷基化合物包括携带十二烷基链的酯类、羧酸类或者羧酸盐类化合物；所述可自组装形成具有β-sheet结构纳米纤维的氨基酸序列为KLVFF；所述可靶向识别纤连蛋白的氨基酸序列为GNRQRWFVVWLG。

2.根据权利要求1所述的靶向纤连蛋白启动组装的多肽基分子，其特征在于，所述多肽基分子的结构式如下：

3.根据权利要求1或2所述的多肽基分子在制备抗膀胱癌术后复发药物中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为可从完整脏器切除的，且癌旁创面组织纤连蛋白特异性高表达的肿瘤。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述多肽基分子作为肿瘤术后载药平台实现杀伤残余肿瘤降低复发的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的肿瘤包括膀胱癌、肾癌、胶质母细胞瘤、肝癌。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为膀胱癌。

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