CN114174303A - 作为sting激动剂的大环化合物及其方法和用途 - Google Patents

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A·K·达斯
D·S·沃克
V·M·卡尔哈普雷
S·A·巴斯卡拉
V·蓝达斯
文卡塔·P·帕列
R·K·坎博齐
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Abstract

公开了具有通式(I)或(II)的大环化合物及其互变异构形式、立体异构体、药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物和前药，以及它们与合适药物的组合，相应的合成方法和药物组合物以及本文公开的化合物的用途。

Description

作为STING激动剂的大环化合物及其方法和用途
相关申请的交叉引用
本PCT申请要求以下印度临时专利申请号的权益：2019年7月22日提交的201921029556；2019年12月10日提交的201921051086；和2020年1月29日提交的202021003961，为了所有目的，将它们中的每一个的公开内容通过引用整体并入本文。
发明领域
本发明涉及具有通式(I)的大环化合物及其互变异构形式、立体异构体、药学上可接受的盐、以及它们与合适药物的组合、相应的的合成方法和药物组合物以及本发明的化合物的用途。
通过引用并入
本文提及的所有美国专利、美国专利申请公开、外国专利、外国和PCT公开申请、文章和其他文件、参考文献和出版物，以及由其授予的任何专利中引用的作为参考文献列出的所有那些，均通过引用整体并入本文。所包含的信息是本申请的一部分，其程度就好像所有文本和其他内容在本申请中重复一样，并且将被视为提交时本申请的文本和内容的一部分。
发明背景
以下包括可能有助于理解本发明的信息。这并不是承认本文具体或隐含引用的任何信息、出版物或文件是现有技术或者对于当前描述或要求保护的发明是必不可少的。
干扰素基因刺激因子(STING，也被称为跨膜蛋白173/TMEM173/MPYS/MITA/ERIS)是一种在人体中由TMEM173基因编码的信号分子。STING是具有379个氨基酸的蛋白质，由几个跨膜区组成。STING蛋白在几种内皮细胞和上皮细胞类型以及造血谱系中表达，可包括或不包括：T细胞、包括浆细胞样树突细胞(pDC)在内的树突细胞(DC)和巨噬细胞。STING与细胞中的内质网(ER)相关，并且在控制包括I型干扰素(IFN)和促炎细胞因子在内的许多宿主防御基因的转录中起主要作用。
识别细胞胞质溶胶中的异常DNA种类或环状二核苷酸(CDN)会导致STING的激活。胞质溶胶DNA种类可以在与环状GMP-AMP合酶(cGAS)结合后激活STING信号传导。胞质溶胶DNA与cGAS的结合催化产生一类被称为cGAMP(环状GMP-AMP)的CDN，它包含一个2′,5′-磷酸二酯键和标准的3′,5′键(c[G(2′,5′)pA(3′,5′)p])。cGAMP和其他细菌CDN的结合诱导STING蛋白构象的变化，并促进TANK结合激酶1(TBK1)的结合。STING-TBK1复合物进一步转移到细胞的核周区域，以将TBK1转运到内溶酶体区室，在其中将转录因子如干扰素调节因子3(IRF3)磷酸化。类似地，STAT6和核因子-κB(NF-κB)也在STING激活的下游被激活。然后这些转录因子转移到细胞核中以启动先天免疫基因转录以及I型IFN和其他细胞因子的产生。然后STING迅速降解，这一事件可以避免与持续细胞因子产生相关的问题。(NatureReviews Immunol,2015,15:760-770；Cell Reports,2015,11:1018–1030)。
对小鼠的研究表明，I型IFN信号传导在肿瘤引发的T细胞启动和肿瘤控制中起重要作用(J.Exp.Med.2011,208,1989–2003)。DC中缺乏IFN-α/β受体的小鼠不能排斥免疫原性肿瘤，并且来自这些小鼠的CD8α+DC在抗原交叉呈递给CD8+ T细胞方面存在缺陷。此外，对黑色素瘤患者的转录谱分析表明，含有浸润性激活T细胞的肿瘤的特征在于I型IFN转录签名(Cancer Res.2009,69:3077–3085.)。因此，STING激活可能在肿瘤控制中发挥作用。
PCT国际申请公开号WO2017/011920、WO2017/175147、WO2017/175156、WO2018/234805、WO2018/234807、WO2018/234808、WO2019/023635、WO2019/027857、WO2019/027858和Nature(2018),564(7736):439-443公开了STING调节剂。
发明内容
本文描述和要求保护的发明具有许多属性和实施方案，包括但不限于在本发明内容中阐述或描述或引用的那些。它不旨在是包括一切的，并且本文描述和要求保护的发明不限于本介绍中确定的特征或实施方案或受其限制，本介绍被包括在内仅是出于说明而非限制的目的。
本发明的一个目的是提供化合物、组合物、制剂、试剂盒和方法，用于调节STING蛋白和/或STING蛋白复合物，和/或用于治疗将受益于调节STING蛋白和/或STING蛋白复合物的病症。在一些实施方案中，调节STING蛋白和/或STING蛋白复合物是激活所述STING蛋白和/或STING蛋白复合物。因此，一方面，本发明涉及用于调节STING蛋白和/或STING蛋白复合物的化合物和方法，特别是但不排他地，涉及用于治疗病症的方法，其中调节STING蛋白和/或STING蛋白复合物对于该病症可能是有益的，所述方法包括施用STING蛋白和/或STING蛋白复合物调节剂，例如式I或式II化合物，和/或任何前述化合物的一种或多种类似物或前药。
本文描述了具有STING蛋白和/或STING蛋白复合物调节剂活性的本发明的化合物。
本发明涉及通式(I)化合物及其互变异构形式、立体异构体、药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药
Figure BDA0003484970410000031
其中
G1独立地选自-CH2-或
Figure BDA0003484970410000032
G2是-CH＝CH-；
环A是任选取代的杂环基和任选取代的杂芳基；
B环是芳环；
环C是任选取代的五元杂芳基；
R1独立地选自任选取代的杂芳基、-CONHSO2R3a和-CON(R3)2；
R2独立地选自氢、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C5单环环烷基；
R3独立地选自氢、取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的芳基烷基和
Figure BDA0003484970410000041
其中当两个环B上的R1取代均为-CON(R3)2时，则至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢；
R3a独立地选自任选取代的烷基和任选取代的环烷基；
R3b独立地选自氢或任选取代的烷基；
m是1；
n是0；
o是1；
p选自0、1或2；
当‘烷基’基团被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、氧代(＝O)、烷基、全卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH、-N(H)-SO2-烷基和-OR4的取代基取代；
当‘碳环’或‘环烷基’基团被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、烷基、全卤代烷基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH和-OR4的取代基取代；
当‘杂环’或‘杂环基’被取代时，其被1至4个独立地选自氧代(＝O)、卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、杂环基、-OR4、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a、-SO2R4a、-C(＝O)OH、-C(＝O)N(H)R4、-C(＝O)N(烷基)R4、-N(H)C(＝O)R4a、-N(H)-SO2-烷基、-N(H)R4和-N(烷基)R4的取代基取代；
当‘芳基’基团被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
当‘杂芳基’基团被取代时，它被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
每个R4独立地选自氢、烷基和环烷基；
每个R4a独立地选自烷基和环烷基。
本发明涉及通式(I)化合物及其互变异构形式、立体异构体、药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药。
Figure BDA0003484970410000051
其中，
G1独立地选自-CH2-或
Figure BDA0003484970410000052
G2是-CH＝CH-；
环A是任选取代的杂环基和任选取代的杂芳基；
环B是芳环；
环C是任选取代的五元杂芳基；
R1是-CON(R3)2；
R2独立地选自氢、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C5单环环烷基；
R3独立地选自氢、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基，其中至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢；
m是1；
n是0；
o是1；
p选自0、1或2；
当‘烷基’基团被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、氧代(＝O)、烷基、全卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH、-N(H)-SO2-烷基和-OR4的取代基取代；
当‘碳环’或‘环烷基’基团被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、烷基、全卤代烷基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH和-OR4的取代基取代；
当‘杂环’或‘杂环基’基团被取代时，其被1至4个独立地选自氧代(＝O)、卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、杂环基、-OR4、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a、-SO2R4a、-C(＝O)OH、-C(＝O)N(H)R4、-C(＝O)N(烷基)R4、-N(H)C(＝O)R4a、-N(H)-SO2-烷基、-N(H)R4和-N(烷基)R4的取代基取代；
当‘芳基’基团被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
当‘杂芳基’基团被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
每个R4独立地选自氢、烷基和环烷基；
每个R4a独立地选自烷基和环烷基。
在一些实施方案中，本发明提供了通式(II)化合物及其互变异构形式、立体异构体、药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，
Figure BDA0003484970410000071
其中，
R3m是任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基；
G1独立地选自-CH2-或
Figure BDA0003484970410000072
环A是任选取代的杂环基和任选取代的杂芳基；
R2a、R2b、R2c和R2d独立地选自氢、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C5单环环烷基。
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)、式(II)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中，G1是-CH2-或
Figure BDA0003484970410000073
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)、式(II)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中，G1是-CH2。
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)、式(II)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中，G1是
Figure BDA0003484970410000074
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)、式(II)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中，环A是任选取代的杂环基或任选取代的杂芳基。
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)、式(II)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中，环A选自：
Figure BDA0003484970410000081
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)、式(II)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中R2a、R2b、R2c和R2d独立地选自甲基或乙基。
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中，R1是-CON(R3)2，其中R3独立地选自氢、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基，其中至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢。
根据一些实施方案，本发明涉及式(II)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中R3m选自：
Figure BDA0003484970410000082
根据一些实施方案，本发明涉及式(I)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中R2a、R2b、R2c和R2d独立地选自任选取代的C1-C6烷基；G2是-CH＝CH-；环C是吡唑；环B是芳环；n是0；m是1；p是1或2；o是1；G1是-CH2-或
Figure BDA0003484970410000091
其中环A是任选取代的杂环基或任选取代的杂芳基，并且R1是-CON(R3)2，其中R3是氢、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基，其中至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢。
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)化合物、它们的互变异构形式以及它们所有可能的几何异构体，包括但不限于如下所示的式(A)、式(B)、式(C)、式(D)和式(E)：
Figure BDA0003484970410000092
在一些方面，本文描述的任何R基团都可以包括或排除所列举的选项。
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)和式(II)化合物及其互变异构形式、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药，其中所述化合物选自下文的表1中列出的化合物。
表1.本发明的示例性化合物
Figure BDA0003484970410000101
Figure BDA0003484970410000111
Figure BDA0003484970410000121
Figure BDA0003484970410000131
Figure BDA0003484970410000141
Figure BDA0003484970410000151
Figure BDA0003484970410000161
Figure BDA0003484970410000171
Figure BDA0003484970410000181
Figure BDA0003484970410000191
Figure BDA0003484970410000201
Figure BDA0003484970410000211
Figure BDA0003484970410000221
Figure BDA0003484970410000231
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)、式(II)化合物及其互变异构形式、立体异构体、药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，其中所述化合物选自：
(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物2)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物6)；
(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物8)；
(8S,E)-N4-((1R,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物12)；和
(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物14)。
在一些实施方案中，本发明提供了一种药物组合物，其包含式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，以及至少一种或多种药学上可接受的赋形剂。
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，用于治疗其中激活STING是有益的疾病或状况。
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)、式(II)化合物或药物组合物或其前药或其药学上可接受的盐在制备用于治疗其中激活STING是有益的疾病或状况的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明提供了治疗有需要的受试者的其中激活STING是有益的疾病或状况的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗有需要的受试者的癌症或一种或多种感染性疾病的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗癌症的方法，其中所述癌症可以是一种或多种实体瘤、一种或多种白血病、一种或多种淋巴瘤或其组合。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗一种或多种感染性疾病的方法，其中所述感染性疾病可以包括或排除：病毒感染、细菌感染或其组合。
在一些实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，以及一种或多种另外的疗法。
在一些实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，以及一种或多种另外的疗法，该另外的疗法可以包括或排除：化学疗法、免疫疗法、放射疗法或其组合。
在一些实施方案中，本发明提供了一种疫苗佐剂，其包含式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含(i)式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，和(ii)一种或多种抗原、一种或多种抗原组合物或其组合。
在一些实施方案中，本发明提供了一种疫苗组合物，其包含(i)式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，和(ii)一种或多种抗原、一种或多种抗原组合物或其组合。
附图简要说明
被并入本文并形成说明书一部分的附图说明了本公开的各个方面，并且与该说明一起进一步用于解释这些方面的原理并使相关领域的技术人员能够制作和使用这些方面。附图仅用于说明目的，显示示例性非限制性实施方案，并且不一定按比例绘制。
图1A显示了本发明的代表性化合物(化合物2)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小的影响，表明化合物2减小了肿瘤体积，9名受试者中有7名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物2。
图1B显示了化合物2在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对图1A中相同受试者的体重变化的影响。
图2A显示了本发明的代表性化合物(化合物6)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小的影响，表明化合物6减小了肿瘤体积，9名受试者中有7名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物6。
图2B显示了化合物6在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对图2A中相同受试者的体重变化的影响。
图3A显示了本发明的代表性化合物(化合物8)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小的影响，表明化合物8减小了肿瘤体积，9名受试者中有5名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物8。
图3B显示了化合物8在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对图3A中相同受试者的体重变化的影响。
图4A显示了本发明的代表性化合物(化合物12)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小的影响，表明化合物12减小了肿瘤体积，10名受试者中有8名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝10)施用化合物12。
图4B显示了化合物12在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对图4A中相同受试者的体重变化的影响。
图5A显示了本发明的代表性化合物(化合物14)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小的影响，表明化合物14减小了肿瘤体积，9名受试者中有6名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物14。
图5B显示了化合物14在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对图5A中相同受试者的体重变化的影响。
图6显示了高剂量下的化合物2在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中的作用，其中化合物2在两种不同剂量下减小了肿瘤体积(化合物2的两种剂量的曲线重叠)。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝10)施用化合物2。
图7A显示了用溶媒处理后96小时肿瘤中CD3+CD8+ T细胞浸润的百分比的流式细胞术图。
图7B显示了用本发明的代表性化合物(化合物2)处理后96小时肿瘤中CD3+CD8+ T细胞浸润的百分比的流式细胞术图的代表性数据，表明T细胞浸润的百分比高于溶媒对照的百分比。
发明详述
示例性实施方案的该描述旨在结合附图来阅读，这些附图被认为是整个书面描述的一部分。此外，本文使用的章节标题仅用于组织目的，不应解释为限制所描述的主题。
式中使用的通用术语可以如下定义；然而，所述含义不应被解释为限制术语本身的范围。
本文所用的术语“烷基”是指烷烃衍生的烃基，其在主链中仅包含碳和氢原子，不包含不饱和度，具有1至6个碳原子，并且通过单键连接到分子的其余部分，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1,1-二甲基乙基(叔丁基)等。除非有相反的说明或陈述，否则本文描述或要求保护的所有烷基都可以是直链或支链的、取代的或未取代的。
本文所用的术语“全卤代烷基”是指如上文所定义的烷基，其中所述烷基的所有氢原子均被卤素取代。全卤代烷基的实例有三氟甲基、五氟乙基等。
本文所用的术语“杂芳环”是指具有1-2个选自O、N或S的环杂原子的5-6元单环芳环体系。
本文所用的术语“环烷基”或‘碳环’是指具有3至12个碳原子的非芳族单环或多环体系，其可以包括或排除：环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。除非有相反的说明或陈述，否则本文描述或要求保护的所有环烷基均可以是取代的或未取代的。
本文所用的术语“C3-C5单环环烷基”是指具有3至5个碳原子的取代或未取代的非芳族单环体系，其可以包括或排除：环丙基、环丁基、环戊基等。
本文所用的术语“芳环”是指芳烃环体系。实例包括苯环等。
本文所用的术语“芳基”是指一价单环、双环或三环芳烃环体系。芳基的实例包括苯基、萘基、蒽基、芴基、茚基、薁基等。
除非另外指明，否则术语“芳烷基”是指通过烷基部分连接的烷基-芳基(其中烷基如上所定义)并且烷基部分包含1-6个碳原子且芳基如上所定义。芳烷基的实例包括苄基、乙基苯基、丙基苯基、萘甲基等。
本文所用的术语“杂芳基”是指具有1-4个选自O、N或S的环杂原子且其余环原子为碳(除非另有说明，否则带有适当的氢原子)的5-14元单环、双环或三环体系，其中环***中的至少一个环是芳族的。
除非另外指明，否则术语“杂环”或“杂环基”是指取代或未取代的非芳族单环、双环、三环或桥接/稠合/螺环体系，其具有由碳原子与一个或多个(例如2或3个)独立地选自N、O、S、P(O)(OR4)、P(O)(R4a)或S(O)2的杂原子组成的3-至15-元环。连接点可以是从任何合适的碳或氮。
本文所用的术语“杂芳基烷基”是指通过烷基部分连接的杂芳基，其中烷基具有1至6个碳原子且杂芳基与本文所定义的相同。
本文所用的术语“杂环基烷基”是指通过烷基部分连接的杂环基，其中烷基具有1至6个碳原子且杂环基与本文所定义的相同。
本文所用的术语“氧代”是指连接到母体基团的二价氧(＝O)。例如，与碳连接的氧代形成羰基，在环己烷上取代的氧代形成环己酮。
本文所用的术语“前药”是指经修饰的式(I)或式(II)化合物，其中氨基、羧酸或羟基官能团进一步连接至前体部分。在一些实施方案中，“前体部分(promoiety)”是指充当保护基团的物质，其掩盖活性剂内的官能团，从而将活性剂转化为前药。通常，前体部分将通过键与药物连接，该键在体内通过酶促或非酶促方式裂解，从而将前药转化为其活性形式。在一些实施方案中，前体部分也可以是活性剂。在一些实施方案中，前体部分可以与式I化合物结合。在一些实施方案中，前体部分可以与式II化合物结合。
在一些实施方案中，前体部分可以包括或排除C1-C4羧酸、C1-C4醇、C1-C4醛、C1-C4酮、单个氨基酸或肽。在一些实施方案中，前体部分是单个氨基酸，其任选地在其官能团上被保护。可以通过使用本领域公知的常规酯、酰胺或缩醛形成方法，进行通过将上述前体部分与式(I)或式(II)化合物偶联形成前药的方法。作为一个非限制性实例，式(I)或式(II)化合物上的羧酸官能团可以在EDC的存在下与乙醇反应形成酯。
在一些实施方案中，前体部分是靶向物质。在一些方面，前体部分是细胞膜上的用于流入或流出转运蛋白的底物，例如Gaudana,R.et al.The AAPS Journal,12(3):348-360(2012)中描述的那些，该文献通过引用整体并入本文。例如，前体部分可以是化学连接的生物素或化学连接的D-丝氨酸。
本文所用的术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指通过低能垒可相互转化的不同能量的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子移变异构体)包括通过质子迁移的相互转化，这可以包括或排除：酮-烯醇异构化。价互变异构体包括通过重组一些键合电子的相互转化。
本文所用的术语“几何异构体”是指双键的E或Z几何异构体(例如，顺式或反式)。
本文所述的式和化合物的所有互变异构形式及其可能的几何异构体(包括但不限于式(s)、式(r)和式(t))旨在涵盖在本发明的范围内。
Figure BDA0003484970410000291
本发明的化合物可以具有一个或多个手性中心。每个手性中心处的绝对立体化学可以是“R”或“S”。本发明的化合物包括所有非对映异构体和对映异构体及其混合物。除非另有特别提及，否则对一种立体异构体的提及适用于任何可能的立体异构体。每当未指明立体异构体组成时，应理解包括所有可能的立体异构体。
本文所用的术语“立体异构体”是指由通过相同键键合的相同原子构成但具有不可互换的不同三维结构的化合物。三维结构被称为构型。本文所用的术语“对映异构体”是指两种立体异构体，其分子是彼此不可重叠的镜像。术语“手性中心”是指连接四个不同基团的碳原子。本文所用的术语“非对映异构体”是指不是对映异构体的立体异构体。术语“外消旋体”或“外消旋混合物”是指等份对映异构体的混合物。
本文所用的状态、疾病、病症、状况或综合征的术语“治疗(treating或treatment)”包括：(a)在可能患有或易患状态、疾病、病症、状况或综合征但尚未经历或表现出该状态、疾病、病症、状况或综合征的临床或亚临床症状的受试者中预防或延缓该状态、疾病、病症、状况或综合征发展的临床症状的出现；(b)抑制状态、疾病、病症、状况或综合征，即阻止或减少疾病或其至少一种临床或亚临床症状的发展；c)减轻疾病、病症或状况或其至少一种临床或亚临床症状的严重程度；和/或(d)缓解疾病，即导致状态、病症或状况或其至少一种临床或亚临床症状的消退。
本文所用的术语“受试者”是指哺乳动物，包括但不限于人、牛、马、猫、犬、啮齿动物、灵长类动物或其他动物(例如家养动物或非家养动物)。受试者优选地是人，其可以是男人或女人。受试者还可以指成人或儿童。
本文所用的“治疗有效量”是指当施用至有需要的受试者时足以引起期望效果的化合物的量。“治疗有效量”将根据化合物、疾病及其严重程度、待治疗的受试者的年龄、体重、身体状况和反应而变化。治疗有效量也优选是这样的量，其中物质/分子、激动剂或拮抗剂的治疗有益作用可以超过其任何毒性或有害作用。
本文所用的术语“药物制剂”是指这样的制剂：其形式允许其中所含的活性成分的生物活性有效，且不包含对要施用该制剂的受试者具有不可接受毒性的附加组分。
本文所用的“药学上可接受的载体”是指药物制剂中除活性成分之外的可以安全地施用于受试者的成分。药学上可接受的载体包括但不限于缓冲剂、赋形剂、稳定剂或防腐剂。合适的载体和稀释剂包括缓冲水性溶液、盐水、右旋糖、甘油、等渗盐水溶液，例如磷酸盐缓冲盐水、等渗水等以及它们的组合。在一些实施方案中，载体可以包括丙二醇、二甲基异山梨酯和水，甚至更具体地，磷酸盐缓冲盐水、等渗水、去离子水、单官能醇和对称醇。
本文所用的术语“其中调节STING蛋白和/或STING蛋白复合物可能具有益处的病症”包括疾病、病症或状况的治疗中可能涉及STING蛋白和/或STING蛋白复合物的功能或活性的任何疾病、病症或状况。在一个实施方案中，疾病、病症或状况可以包括或排除癌症或感染性疾病。
术语“包含”与“包括”、“含有”或“特征在于”同义，其是包容性的或开放式的，并且不从药物(或在方法的情况为步骤)中排除另外的未提及的元素或成分。短语“由……组成”不包括未在药物(或在方法的情况为步骤)中指明的任何元素、步骤或成分。短语“基本上由……组成”是指指明的材料和那些不实质影响药物(或在方法的情况为步骤)的基本和新颖特性的材料。
本文所用的术语“肿瘤”是指所有赘生性细胞生长和增殖，无论是恶性的还是良性的，以及所有癌前期和癌性细胞和组织。术语“癌症”、“癌性”、“细胞增殖性病症”、“增殖性病症”和“肿瘤”在本文中提及时并不相互排斥。
本文所用的术语“癌症”和“癌性”是指或描述受试者的生理状况，其通常以不受调节的细胞生长和/或增殖为特征。一些癌症由快速***的细胞组成，而另一些癌症则由***比正常细胞更慢的细胞组成。癌症实例的类型可以包括或排除例如癌(carcinoma)、淋巴瘤(例如，霍奇金和非霍奇金淋巴瘤)、母细胞瘤、肉瘤和白血病。此类癌症的更具体的实例可以包括或排除例如鳞状细胞癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、肺腺癌、肺鳞状癌、腹膜癌、肝细胞癌(hepatocellular cancer)、胃肠癌、胰腺癌、胶质母细胞瘤、***、卵巢癌、肝癌(liver cancer)、膀胱癌、肝细胞癌(hepatoma)、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌、肝癌、***癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌(hepatic carcinoma)、白血病和其他淋巴细胞增生性病症，以及各种类型的头颈癌。
本文所用的短语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的一种或多种药学上可接受的有机或无机盐。示例性的盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸性磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸性柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡糖醛酸盐、蔗糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐(methanesulfonate)(“甲磺酸盐(mesylate)”)、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐(即1,1′-亚甲基-双(2-羟基-3-萘甲酸盐))。药学上可接受的盐可以涉及包含另一种分子，例如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其他抗衡离子。在一些实施方案中，抗衡离子是使母体化合物上的电荷稳定的任何有机或无机部分。此外，药学上可接受的盐在其结构中可以具有多于一个带电原子。其中多个带电原子是药学上可接受的盐的一部分的情况可以具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可以具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。
在一些实施方案中，当本发明的化合物是碱时，通过本领域可用的任何合适的方法制备期望的药学上可接受的盐，例如用以下物质处理游离碱：无机酸，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等；或有机酸，例如乙酸、三氟乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸；吡喃糖苷酸，例如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸；α羟基酸，例如柠檬酸或酒石酸；氨基酸，例如天门冬氨酸或谷氨酸；芳香酸，例如苯甲酸或肉桂酸；磺酸，例如对甲苯磺酸或乙磺酸；等。
在一些实施方案中，当本发明的化合物是酸时，通过任何合适的方法制备期望的药学上可接受的盐，例如用以下物质处理游离酸：无机或有机碱，例如胺(伯、仲或叔胺)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等。合适的盐的说明性实例包括但不限于衍生自氨基酸(例如甘氨酸和精氨酸)、氨、伯胺、仲胺和叔胺以及环状胺(例如哌啶、吗啉和哌嗪)的有机盐，以及衍生自钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。
本文所用的术语“溶剂化物”是指一种或多种溶剂分子与本发明化合物的缔合或复合物。形成溶剂化物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
化合物
大量研究表明，STING途径在肿瘤驻留(tumour-resident)宿主APC中的激活是在体内诱导针对肿瘤衍生抗原的自发CD8+ T细胞应答所必需的(Immunity,2014,41:830–842)。大量证据表明，肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)与多种恶性肿瘤的良好预测相关(J.Transl.Med.2012,10:205)并预测响应于几种免疫治疗策略的积极临床结果(CancerJ.2012,18:153–159)。STING激活部分地有助于化疗剂和放射疗法的抗肿瘤活性(Immunity,2014,41:843–852)。此外，已发现STING激活和信号传导对于通过促进抗肿瘤免疫应答来防止癌症的发展至关重要。因此，STING的激活代表了一种用于癌症治疗的潜在的免疫治疗方法。
研究表明，将修饰的CDN直接肿瘤内注射(I.Tu.)到已确定的B16F10黑色素瘤、CT26结肠癌和4T1乳腺癌中导致快速且显著的肿瘤消退和持久的全身抗肿瘤免疫。因此，用特定激动剂激活TME中的STING途径可能是一种有效的治疗策略，以促进广泛的肿瘤引发的T细胞启动，从而治疗癌症。(J.Immunol.2013,190:5216–5225；Cell Rep.2015,19,11(7):1018-30)。除了CDN，其他类别的化合物也可以激活STING。
与STING的抗癌机制平行，对其下游的STING激活也导致诱导若干抗病毒基因，包括IFN-β和若干干扰素刺激基因(ISG)。鼠科动物胚胎成纤维细胞中STING的消融使它们容易受到负链病毒感染，包括水疱性口炎病毒。第一代小鼠STING激动剂DMXAA在多种体内病毒模型中显示有效，如HBV(乙型肝炎病毒)DNA流体动力学小鼠模型、Chikungunya病毒、H1N1 PR8流感毒株，表明STING激动剂作为抗多种病毒感染的抗病毒剂的用途。(Nature,2008,455:674-678；PLoS Pathog.2015,11:12；Antimicrob.Agents Chemother.2015,59(2):1273-1281；J Leukocyte Biol.2011,89(3):351-357)。
发明人已经认识到，连接的化合物的一个或多个亚单元的修饰可以显著提高生物利用度和药代动力学，因此不对称连接的化合物的施用在STING蛋白激活方面表现出显著进步。此外，发明人已经认识到，在连接的化合物的一个或多个亚单元处包含亲水部分(例如，可离子化和/或高极性)可以增加溶解度和配制的容易性，以有效激活可用于治疗感染性疾病和/或癌症的STING蛋白。
本文公开的化合物及其互变异构形式、立体异构体、前药可以例如通过有机合成中公知的并且为本发明领域普通技术人员熟悉的技术来制备。此外，本文所述的方法可以实现本发明化合物的合成。然而，这些可能不是可以合成本发明中描述的化合物的唯一方法。此外，本文所述的各种合成步骤可以以交替的顺序进行以提供所需的化合物。
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗其中激活STING蛋白和/或STING蛋白复合物是有益的疾病或状况。
方法
在一些实施方案中，本发明提供了式(I)、式(II)化合物或药物组合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗其中STING蛋白和/或STING蛋白复合物的激活是有益的疾病或状况的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗有需要的受试者的疾病或状况的方法，在所述疾病或状况中激活STING蛋白和/或STING蛋白复合物是有益的，该方法包括施用治疗有效量的式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗有需要的受试者的癌症或者一种或多种感染性疾病的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)、式(II)化合物，或其前药，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗癌症的方法，其中癌症可以包括或排除：一种或多种实体瘤、一种或多种白血病、一种或多种淋巴瘤或其组合。
在一些实施方案中，可以用本发明化合物治疗的实体瘤可以包括或排除：乳腺癌、胰腺癌、肺癌、结肠癌、结直肠癌、脑癌、肾癌、睾丸癌、尿道癌、直肠癌、输卵管癌、***癌、***癌、胃癌、皮肤癌、黑色素瘤、肝癌、胃肠道间质瘤、尿路上皮癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、骨癌、口腔癌、卵巢癌、子宫癌、头颈部鳞状细胞癌、子宫内膜癌、胆囊癌、膀胱癌、口咽癌(orophyrangeal cancer)、***癌、胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤或软组织肉瘤、纤维肉瘤、软骨肉瘤、血管瘤、畸胎瘤、脂肪瘤、粘液瘤、纤维瘤、横纹肌瘤、畸胎瘤、胆管癌、尤文氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)。可以用本发明化合物治疗的白血病的实例可以包括或排除：淋巴母细胞性T细胞白血病(Lymphoblastic T cell leukemia)、慢性髓细胞性白血病(Chronic myelogenous leukemia)、急性淋巴母细胞性T细胞白血病(Acute lymphoblastic T cell leukemia)、急性髓细胞性白血病(Acute myelobasticleukemia)、多毛细胞白血病(Hairy-cell leukemia)、慢性中性粒细胞性白血病(Chronicneutrophilic leukemia)、套细胞白血病(Mantle cell leukemia)、急性巨核细胞白血病(Acute megakaryocytic leukemia)、多发性骨髓瘤(Multiple myeloma)、成巨核细胞白血病(Megakaryoblastic leukemia)、红白血病(Erythroleukemia)、浆细胞瘤(Plasmacytoma)、早幼粒细胞白血病(Promyelocytic leukemia)、慢性骨髓单核细胞白血病(Chronic myelomonocytic leukemia)、骨髓增生异常综合征(Myelodysplasticsyndrome)、骨髓纤维化(Myelofibrosis)、慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症(Polycythemia vera)、血小板增多症(Thrombocythemia)、慢性淋巴细胞白血病(Chroniclymphocytic leukemia)、幼淋巴细胞白血病(Prolymphocytic leukemia)、多毛细胞白血病、Waldenstrom巨球蛋白血症(Waldenstrom’s macroglobulinemia)、Castleman病(Castleman’s disease)、慢性中性粒细胞性白血病、免疫母细胞性大细胞白血病(Immunoblastic large cell leukemia)、浆细胞瘤和身体任何其他部位的白血病。可以用本发明化合物治疗的淋巴瘤的实例可以包括或排除：霍奇金病(Hodgkin’s disease)、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma)、滤泡性淋巴瘤(Follicular lymphoma)、套细胞淋巴瘤(Mantle cell lymphoma)、Burkitt淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma)、淋巴母细胞性T细胞淋巴瘤(Lymphoblastic T-cell lymphoma)、边缘区淋巴瘤(Marginal zone lymphoma)、皮肤T细胞淋巴瘤(Cutaneous T cell lymphoma)、CNS淋巴瘤(CNS lymphoma)、小淋巴细胞淋巴瘤(Small lymphocytic lymphoma)、淋巴浆细胞淋巴瘤(Lymphoplasmacyticlymphoma)、弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL)、外周T细胞淋巴瘤(Peripheral T-cell lymphoma)、间变性大细胞淋巴瘤(Anaplastic large celllymphoma)、原发性纵隔淋巴瘤(Primary mediastinal lymphoma)、蕈样真菌病(Mycosisfungoides)、小无裂细胞淋巴瘤(Small non-cleaved cell lymphoma)、淋巴母细胞淋巴瘤(Lymphoblastic lymphoma)、免疫母细胞淋巴瘤(Immunoblastic lymphoma)、原发性渗出性淋巴瘤(Primary effusion lymphoma)和HIV相关(或AIDS相关)的淋巴瘤。可以使用实施例中描述的方法和细胞系对上述实体瘤进行建模。
在一些实施方案中，本发明提供了治疗一种或多种感染性疾病的方法，其中所述感染性疾病可以包括或排除：病毒感染、细菌感染或其组合。可以用本发明化合物治疗的病毒感染的实例可以包括或排除：人免疫缺陷病毒(HIV)、人***瘤病毒(HPV)、丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)、流感(正粘病毒科(Orthomyxoviridae)-其可以包括或排除α流感病毒(甲型流感-所有亚型或血清型)和乙型流感)、冠状病毒(其可以包括或排除SARS-CoV-1和SARS-CoV-2)、甲病毒属、轮状病毒、仙台病毒、牛痘、呼吸道合胞病毒、拉沙病毒(砂粒病毒科(Arenaviridae))、狂犬病病毒(弹状病毒科(Rhabdoviridae))、西尼罗河病毒、登革热病毒、日本脑炎病毒和其他黄病毒科(Flaviviridae)、RNA病毒、DNA病毒，属于以下科的病毒：甲型线形病毒科(Alphaflexiviridae)、星状病毒科(Astroviridae)、αT四病毒科(Alphatetraviridae)、囊泡虫RNA病毒科(Alvernaviridae)、非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)、瓶状病毒科(Ampullaviridae)、腺病毒科(Adenoviridae)、囊泡病毒科(Ascoviridae)、乙型线形病毒科(Betaflexiviridae)、雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)、杆菌状核糖核酸病病毒科(Barnaviridae)、双尾病毒科(Bicaudaviridae)、杆状病毒科(Baculoviridae)长线形病毒科(Closteroviridae)、杯状病毒科(Caliciviridae)、卡尔莫四T病毒科(Carmotetraviridae)、棒状病毒科(Clavaviridae)、覆盖噬菌体科(Corticoviridae)、双顺反子病毒科(Dicistroviridae)、内源病毒科(Endornaviridae)、纤丝病毒科(Filoviridae)、球状病毒科(Globuloviridae)、滴状病毒科(Guttaviridae)、双生病毒科(Geminiviridae)、肥大唾腺炎病毒科(Hytrosaviridae)、光滑病毒科(Leviviridae)、黄症病毒科(Luteoviridae)、脂毛噬菌体科(Lipothrixviridae)、Mesoniviridae、Marnaviridae、转座病毒科(Metaviridae)、贝类疱疹病毒科(Malacoherpesviridae)、罗达病毒科(Nodaviridae)、尼亚米病毒科(Nyamiviridae)、线头病毒科(Nimaviridae)、矮缩病毒科(Nanoviridae)、微核糖核酸病毒科(Piconaviridae)、分体病毒科(Partitiviridae)、微双RNA病毒科(Picobirnaviridae)、副粘病毒科(Paramyxoviridae)、痘病毒科(Poxviridae)、潘多拉病毒科(Pandoraviridae)、多瘤病毒科(Polymaviridae)、藻类DNA病毒科(Phycodnaviridae)、***瘤病毒科(Papillomaviridae)、多分体DNA病毒科(Polydnaviruses)、多瘤病毒科(Polymaviridae)、转置T四病毒科(Permutotetraviridae)、马铃薯Y病毒科(Potyviridae)、反转录病毒科(Retroviridae)、长尾病毒科(Siphoviridae)、球脂状病毒科(Sphaerolipoviridae)、帚状病毒科(Virgaviridae)、披膜病毒科(Togaviridae)、Turriviridae、盖病毒科(Tectiviridae)。
可以用本发明化合物治疗的细菌感染的实例可以包括或排除：由属于布鲁氏杆菌属(Brucella)、梭菌属(Clostridium)、Clostrodium、弯曲杆菌属(Campylobacter)、肠球菌属(Enterococcus)、弗兰西斯菌属(Fransicella)、李斯特菌属(Listeria)、军团菌属(Legionella)、分枝杆菌属(Mycobacteria)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙门氏菌属(Salmonella)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、耶尔森氏菌属(Yersinia)的细菌引起的感染。
在一些实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种另外的疗法。
在一些实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含式(I)、式(II)化合物或其前药，或其药学上可接受的盐，以及一种或多种另外的疗法，所述另外的疗法可以包括或排除化学疗法、免疫疗法、放射疗法或其组合。
化学疗法包括施用一种或多种可与式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐组合使用的其他化疗剂。可以组合使用的化疗剂可以包括或排除：拓扑异构酶II抑制剂、抗肿瘤抗生素、抗代谢物、类视黄醇、抗病毒剂、醋酸阿比特龙、六甲蜜胺、脱水长春碱、阿里他汀、贝沙罗汀、比卡鲁胺、BMS 184476、2,3,4,5,6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、博来霉素、N,N-二甲基-L-缬氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-L-脯氨酰-1-L脯氨酸-叔丁基酰胺、恶液质素、西马多丁、苯丁酸氮芥、环磷酰胺、3’,4’-二脱氢-4’脱氧-8’-去甲长春花碱(3’,4’-didehydro-4’deoxy-8’-norvin-caleukoblastine)、多西紫杉醇、多西他赛、环磷酰胺、卡铂、卡莫司汀、顺铂、念珠藻素(cryptophycin)、环磷酰胺、阿糖胞苷、达卡巴嗪(DTIC)、更生霉素、道诺霉素、地西他滨尾海兔素、多柔比星(阿霉素)、依托泊苷、5-氟尿嘧啶、非那雄胺、氟他胺、羟基脲和羟基脲紫衫烷类(hydroxyureataxanes)、异环磷酰胺、利阿唑、氯尼达明、洛莫司汀(CCNU)、MDV3100、二氯甲基二乙胺(氮芥)、美法仑、米伏布林羟乙基磺酸盐、根瘤菌素、sertenef、链脲霉素、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉烷类、尼鲁米特、奥那司酮、紫杉醇(paclitaxel)、泼尼莫司汀、丙卡巴肼、RPR109881、磷酸雌莫司汀、他莫昔芬、他索纳明、紫杉醇(taxol)、维甲酸、长春碱、长春新碱、硫酸长春地辛和长春氟宁。
化疗剂的更多实例包括：曲妥珠单抗(
Figure BDA0003484970410000371
Genentech)、厄洛替尼(
Figure BDA0003484970410000372
Genentech/OSI Pharm.)、多西他赛(
Figure BDA0003484970410000373
Sanofi-Aventis)、5-FU(氟尿嘧啶，5-氟尿嘧啶，CAS No.51-21-8)、吉西他滨(
Figure BDA0003484970410000374
Lilly)、PD-0325901(CAS No.391210-10-9，Pfizer)、顺铂(顺-二胺,二氯铂(II)，CAS No.15663-27-1)、卡铂(CAS No.41575-94-4)、紫杉醇(
Figure BDA0003484970410000375
Bristol-Myers Squibb Oncology，Princeton，N.J.)、培美曲塞(
Figure BDA0003484970410000376
Eli Lilly)、替莫唑胺(4-甲基-5-氧代-2,3,4,6,8-五氮杂二环[4.3.0]壬-2,7,9-三烯-9-甲酰胺，CAS No.85622-93-1，
Figure BDA0003484970410000377
Figure BDA0003484970410000378
Schering Plough)、他莫昔芬((Z)-2-[4-(1,2-二苯基丁-1-烯基)苯氧基]-N,N-二甲基乙胺，
Figure BDA0003484970410000379
)和多柔比星
Figure BDA00034849704100003710
Akti-1/2、HPPD和雷帕霉素。
化疗剂的更多实例包括：奥沙利铂(
Figure BDA00034849704100003711
Sanofi)、硼替佐米(
Figure BDA0003484970410000381
Millennium Pharm.)、索坦(
Figure BDA0003484970410000382
SU11248，Pfizer)、来曲唑(
Figure BDA0003484970410000383
Novartis)、甲磺酸伊马替尼(
Figure BDA0003484970410000384
Novartis)、XL-518(Mek抑制剂，Exelixis，WO 2007/044515)、ARRY-886(Mek抑制剂，AZD6244，Array BioPharma，AstraZeneca)、SF-1126(PI3K抑制剂，Semafore Pharmaceuticals)、BEZ-235(PI3K抑制剂，Novartis)、XL-147(PI3K抑制剂，Exelixis)、PTK787/ZK 222584(Novartis)、氟维司琼(
Figure BDA0003484970410000385
AstraZeneca)、甲酰四氢叶酸(亚叶酸)、雷帕霉素(西罗莫司，
Figure BDA0003484970410000386
Wyeth)、拉帕替尼(
Figure BDA0003484970410000387
GSK572016，Glaxo Smith Kline)、洛那法尼(SARASARTM，SCH 66336，Schering Plough)、索拉非尼(
Figure BDA0003484970410000388
BAY43-9006，Bayer Labs)、吉非替尼(
Figure BDA0003484970410000389
AstraZeneca)、伊立替康(
Figure BDA00034849704100003810
CPT-11，Pfizer)、替匹法尼(ZARNESTRATM，Johnson&Johnson)、ABRAXANETM(不含Cremophor)、白蛋白工程化的紫杉醇纳米颗粒制剂(American Pharmaceutical Partners，Schaumberg，II)、凡德他尼(rINN，ZD6474，
Figure BDA00034849704100003811
AstraZeneca)、苯丁酸氮芥(chloranmbucil)、AG1478、AG1571(SU 5271；Sugen)、坦罗莫司(
Figure BDA00034849704100003812
Wyeth)、培唑帕尼(GlaxoSmithKline)、坎磷酰胺(
Figure BDA00034849704100003813
Telik)、噻替派和环磷酰胺
Figure BDA00034849704100003814
烷基磺酸酯，例如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮丙啶类，例如苯佐替哌(benzodopa)、卡波醌、美妥替哌(meturedopa)和乌瑞替哌(uredopa)；乙烯亚胺类和六甲蜜胺类，包括六甲蜜胺、三乙烯三聚氰胺、三乙烯磷酰胺、三乙烯硫代磷酰胺和三羟甲基三聚氰胺(trimethylomelamine)；多聚乙酰类(尤其是布拉它辛和拉它辛酮)；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康)；苔藓虫素；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成类似物)；念珠藻素类(尤其是念珠藻素1和念珠藻素8)；尾海兔素；倍癌霉素(包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；软珊瑚醇；水鬼蕉碱(pancratistatin)；匍枝珊瑚醇；海绵抑制素；氮芥类，例如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、二氯甲基二乙胺氧化物盐酸盐、美法仑、新氮芥、苯芥胆甾醇、泼尼莫司汀、曲磷胺、尿嘧啶氮芥；亚硝基脲类，例如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素，例如烯二炔抗生素(例如卡奇霉素、卡奇霉素γ1I、卡奇霉素ωI1(Angew Chem.Intl.Ed.Engl.(1994)33:183-186)；达内霉素、达内霉素A；双膦酸盐，例如氯膦酸盐；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素发色团和相关的色蛋白烯二炔抗生素发色团)、阿克拉霉素类(aclacinomysins)、放线菌素、安曲霉素(authramycin)、重氮丝氨酸、博来霉素类、放线菌素C、carabicin、卡柔比星、嗜癌菌素、色霉素类、更生霉素、道诺霉素、地托比星、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉-多柔比星和脱氧多柔比星)、表柔比星、依索比星、伊达比星、奈莫柔比星、麻西罗霉素、丝裂霉素类例如丝裂霉素C、霉酚酸、诺加霉素、橄榄霉素类、培洛霉素、紫菜霉素、嘌呤霉素、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星、链黑菌素、链脲霉素、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁、佐柔比星；抗代谢物，例如甲氨蝶呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，例如二甲叶酸、甲氨蝶呤、蝶罗呤、三甲曲沙；嘌呤类似物，例如氟达拉滨、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，例如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、双脱氧尿苷、去氧氟尿苷、依诺他滨、氟尿苷；雄激素类，例如卡鲁睾酮、丙酸屈他雄酮、环硫雄醇、美雄烷、睾内酯；抗肾上腺激素类，例如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦；叶酸补充剂，例如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；阿莫司汀；比生群；依达曲沙；地磷酰胺(defofamine)；地美可辛；地吖醌；依氟鸟氨酸(elformithine)；依利醋铵；埃博霉素；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；氯尼达明(lonidainine)；美登素类，例如美登素和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；莫哌达醇；nitraerine；喷司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；
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多糖复合物(JHS Natural Products，Eugene，Oreg.)；雷佐生；根瘤菌素；西佐喃；锗螺胺；细交链孢菌酮酸；三亚胺醌；2,2′,2″-三氯三乙胺；单端孢霉烯类(尤其是T-2毒素、verracurin A、漆斑菌素A和蛇形菌素)；乌拉坦；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；***糖苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替派；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物，例如顺铂和卡铂；长春碱；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨
Figure BDA0003484970410000391
米托蒽醌(novantrone)；替尼泊苷；依达曲沙；道诺霉素；氨基蝶呤；卡培他滨(
Figure BDA0003484970410000392
Roche)；伊班膦酸盐；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；视黄醇类，例如视黄酸；以及上述任一种的药学上可接受的盐、酸和衍生物。
“化疗剂”的定义还包括：(i)用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，例如抗***类和选择性***受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(包括
Figure BDA0003484970410000401
他莫昔芬柠檬酸盐)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、雷洛昔芬(keoxifene)、LY117018、奥那司酮和
Figure BDA0003484970410000402
(柠檬酸托瑞米芬(toremifine citrate))；(ii)抑制芳香酶的芳香酶抑制剂(芳香酶调节肾上腺中的***产生)，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特、
Figure BDA0003484970410000403
(醋酸甲地孕酮)、
Figure BDA0003484970410000404
(依西美坦；Pfizer)、福美坦(formestanie)、法倔唑、
Figure BDA0003484970410000405
(伏氯唑)、
Figure BDA0003484970410000406
(来曲唑；Novartis)和
Figure BDA0003484970410000407
(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素类，例如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及曲沙他滨(一种1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂，例如MEK抑制剂(WO2007/044515)；(v)脂质激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是抑制与异常细胞增殖有关的信号通路中基因表达的那些，例如PKC-α、Raf和H-Ras，例如oblimersen(
Figure BDA0003484970410000408
Genta Inc.)；(vii)核酶类，例如VEGF表达抑制剂(例如
Figure BDA0003484970410000409
)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，例如基因治疗疫苗，例如
Figure BDA00034849704100004010
和
Figure BDA00034849704100004011
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rIL-2；拓扑异构酶1抑制剂，例如
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Figure BDA00034849704100004014
rmRH；(ix)抗血管生成剂，例如贝伐单抗(
Figure BDA00034849704100004015
Genentech)；以及上述任一种的药学上可接受的盐、酸和衍生物。
“化疗剂”的定义中还包括治疗性抗体，例如阿仑单抗(Campath)、贝伐单抗(
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Genentech)；西妥昔单抗(
Figure BDA00034849704100004017
Imclone)；帕尼单抗(
Figure BDA00034849704100004018
Amgen)、利妥昔单抗(
Figure BDA00034849704100004019
Genentech/Biogen Idec)、帕妥珠单抗(OMNITARGTM，2C4，Genentech)、曲妥珠单抗(
Figure BDA00034849704100004020
Genentech)、托西莫单抗(Bexxar，Corixia)和抗体药物缀合物，吉妥珠单抗奥唑米星(
Figure BDA00034849704100004021
Wyeth)。
免疫疗法包括施用一种或多种可以与式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的另外的免疫刺激剂。本文中可以组合使用的免疫刺激剂包括疫苗佐剂，其可以包括或排除：Toll样受体激动剂、T细胞检查点阻滞剂、CTLA4、PD-1、PD-L1、TIM3、OX40、LAG3、B7-H3、GITR、4-1BB、ICOS、CD40和KIR抗体。CTLA-4和PD-1拮抗剂的实例可以包括或排除：易普利姆玛、替西木单抗、尼沃鲁单抗、派姆单抗、CT-011、AMP-224和MDX-1106。
施用
在一些实施方案中，通过适合于待治疗的状况的任何途径施用式(I)或式(II)化合物，包括示例性化合物1-60。合适的途径可以包括或排除口服、肠胃外(包括皮下、肌肉内、静脉内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外)、腹膜内(IP)、透皮、直肠、鼻、局部(topical)(包括口腔和舌下)、***、肺内和鼻内。在一些实施方案中，对于局部治疗，通过肿瘤内施用来施用化合物，包括灌注或以其他方式使肿瘤与抑制剂接触。应当理解，优选的途径可以随着例如接受者的状况而变化。在一些实施方案中，在口服施用化合物的情况下，将化合物与药学上可接受的载体或赋形剂一起配制成丸剂、胶囊剂、片剂等。在一些实施方案中，在肠胃外施用化合物的情况下，将化合物与药学上可接受的肠胃外溶媒一起配制，并且配制成如本文所述的单位剂量可注射形式。
在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物，例如示例性化合物1-60，以及任何前述化合物的类似物或前药通过全身施用，例如通过静脉内、动脉内或腹膜内施用，使得最终循环浓度为约0.001至约150微摩尔，或更高至200、300、400、500、600、700、800、900或1000微摩尔。最终循环浓度可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2.、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、100、110、120、130、140或150微摩尔，或任何两个列举的数字之间的任何浓度，或高于上述浓度，以及所述范围内的任何浓度。考虑到一种或多种活性剂的性质和本文之前讨论的原理，本领域技术人员将理解该一种或多种活性剂的理想剂量。
在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药可以单独使用或者与一种或多种用于治疗特定病症的另外的药剂或组合物组合使用。共同施用可以允许改善一种或多种症状的缓解或改善，减少疾病的持续时间或程度，延迟或减缓疾病的进展，改善、缓和或稳定疾病状态，部分或完全缓解，延长生存期和/或其他有益的治疗结果。这些治疗可以同时施用或以任何顺序依次施用，施用之间有一段时间。本领域技术人员将容易理解同时或依次施用药剂或疗法的方法以及施用之间的可能时间段。这些疗法可以通过相同或不同的途径施用。
在一些实施方案中，根据本发明的治疗可以涉及向受试者施用一种或多种其他药剂。例如，可以施用一种或多种用于促进受试者的一般健康或减少疗法的一种或多种副作用的药剂。例如，考虑到要治疗的疾病，本领域技术人员将容易理解可能有益于施用的各种药剂。在式(I)或式(II)化合物最初与化疗剂共同施用的一些实施方案中，可以在继续施用化疗剂的同时停止或逐渐减少式(I)或式(II)化合物或其前药的施用。
式(I)或式(II)化合物或其前药(例如示例性化合物1-60)和任选的一种或多种其他活性剂(其可以包括或排除化疗剂)的施用可以发生在疾病或病症进展过程中的任何时间，或在病症或者疾病或病症的一种或多种症状发展之前或之后。在一个实施方案中，式(I)或式(II)化合物，例如示例性化合物1-60，每天施用持续延长的时间段，以帮助症状的持续管理。在另一个实施方案中，式(I)或式(II)化合物，例如示例性化合物1-60，每天施用持续延长的时间段，或以预防或延缓疾病或病症的发展。
剂量、药物制剂和试剂盒
本文所用的术语“组合制剂”包括“多部件试剂盒(kit of parts)”或“制品”，意思是如上定义的组合伙伴可以独立地给药或通过使用具有不同量的组合伙伴(a)和(b)的不同的固定组合给药，即同时、分别或依次给药，无论是以药物形式还是以敷料/基质形式或这两者。然后可以例如同时或按时间交错施用试剂盒的各部件，即在不同的时间点并且对于多部件试剂盒的任何部件具有相等或不同的时间间隔。
在一个实施方案中，施用组合制剂，其中向受试者施用(i)式(I)或式(II)化合物或其前药，或其药学上可接受的盐，和(2)如本文所述的化疗剂，其中第一组合物包含治疗有效量的式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，并且第二组合物包含治疗有效量的如本文所述的化疗剂。
提供用于单一、组合、同时、分开、顺序或持续施用的药物组合物。在一个实施方案中，在一个或多个时间以一种或多种期望的剂量施用包含一种或多种式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的组合物。在另一个实施方案中，将包含一种或多种式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的组合物与化疗剂大约同时施用。当两种组合物在不同时间施用时，它们可以在例如相隔30分钟、1小时、1天、1周或1个月或任何两个所述时间段之间的任何时间间隔内给药。剂量可以每天一次(QD)、每天两次(BID)、每天三次(TID)、每天四次(QID)施用，或者以每周剂量施用，例如每周四次(QIW)、每周三次(TIW)、每周两次(BIW)、每周一次(QWK)。它们也可以根据需要(PRN)和每次就寝时间(临睡时)施用。
除非另有明确说明，否则所有关于给药的描述均适用于本发明的化合物，包括式(I)或式(II)化合物。
本发明的式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐可以如本文所述进行给药、施用或配制。
应当理解，所施用的式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的剂量、施用期间和总体施用方案在受试者之间可能不同，这取决于诸如以下的变量：待递送其的靶位点、待治疗受试者的任何症状的严重程度、待治疗的病症的类型、单位剂量的大小、所选择的施用方式以及受试者的年龄、性别和/或一般健康状况以及本领域普通技术人员已知的其他因素。
从细胞培养试验和动物研究中获得的数据可用于制定用于人类的一系列剂量。根据所采用的剂型和所使用施用途径，剂量可以在此范围内变化。对于本发明的方法中使用的任何药剂，可以最初从细胞培养试验中估计治疗有效剂量。可以在细胞培养物或动物模型中配制剂量以达到包括在细胞培养物中测定的IC50(即，实现对症状的最大抑制一半的测试化合物的浓度)的细胞浓度范围。此类信息可用于更准确地确定人体的有用剂量。个体医生可以根据患者的状况选择确切的制剂、施用途径和剂量。(参见，例如Fingl et al.,1975,In:The Pharmacological Basis of Therapeutics,Ch.1,p.1)。可以根据施用量的浓度、所测试动物模型的预期质量(对于成年Wista大鼠，每只大鼠200-300g)来确定剂量，以从施用的浓度(微摩尔)或施用的量(mg)确定以mg/kg为单位的剂量。
本文要求保护可用于治疗本文所述的有需要的受试者的癌症或一种或多种感染性疾病或任何其他疾病或病症的有效剂量的实例。在一些实施方案中，有效治疗癌症的式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的治疗有效量为约0.001至约1.0微克/ml、或约0.001至约0.01mg/ml、或约0.1mg/mL至约100mg/mL，或更高的浓度，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数字之间的任何剂量。剂量可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2.、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/ml，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数字之间的任何剂量。在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的治疗有效量以约0.5至约50mg/mL的浓度存在。在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐以约0.3至约30mg/mL的浓度存在。在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐以约0.1或1.0至约10mg/mL的浓度存在。在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐以约0.1或1.0至约0.3或3.0mg/mL的浓度存在。在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐以约3.0mg/mL的浓度存在。在本文所述的任何实施方案中，载体(溶媒)可以是药学上可接受的载体。
在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐可以以治疗有效剂量施用，该治疗有效剂量为约0.001至约100mg/kg，约0.001至约0.01mg/kg，约0.01至约0.1mg/kg，0.1至约1mg/kg，约1至约10mg/kg或约10至约100mg/kg，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量。在一些方面，剂量可以是0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2.、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100mg/ml，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述数字之间的任何剂量。在一些实施方案中，有效剂量范围为0.093mg/kg至0.375mg/kg。
尽管如上文所例示的用于本发明的每种治疗有效浓度、量或剂量对于式(I)或式(II)化合物都是可用的，但在本发明的一些方面，对于上文所述的每种治疗有效浓度、量或剂量，式(I)或式(II)化合物的前药的剂量可以是任何所述浓度、量或剂量的1/10至1/100，或1/100至1/1000。此外，在一些方面，前药的治疗有效浓度、量或剂量可以为所述浓度、量或剂量的1/10至1/100，或1/100至1/1000，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量。
应当理解，施用可以包括单次日剂量、施用多个离散的分剂量或连续施用，视情况而定。举例而言，单位剂量可以每天施用一次或多于一次，例如每天1、2、3、4、5或6次以达到期望的总日剂量。举例而言，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的单位剂量可以以单次日剂量或多个离散剂量施用，或连续施用以达到以下每日剂量：约0.1至10mg，10至100mg，100至1000mg，1000至2000mg，或2000mg至5000mg，0.1至约2000mg，约0.1至约1000mg，约1至约500mg，约1至约200mg，约1至约100mg，约1至约50mg，或约1至约25mg，或任何两个所述剂量之间的任何范围或任何两个所述剂量之间的任何剂量。
在一个实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的剂量在作用位点处为约0.001微摩尔至0.1微摩尔，0.1微摩尔至最多约200微摩尔，或在循环内更高，以在作用位点处达到那些浓度。剂量可以是(但不限于)以下最终循环浓度：约0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2.、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9、10.0、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490或500微摩尔，或任何两个所述浓度之间的任何范围，或任何两个所述数字之间的任何浓度。
式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐可以以基本上分离的形式存在于药物制剂中。应当理解，产品可以与不会干扰该产品的预期目的的载体或稀释剂混合并且仍被视为基本上分离。本发明的产品也可以是基本上纯化的形式，在这种情况下，它通常将包含约80％、85％或90％，例如至少约88％、至少约90、95或98％，或至少约99％的式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐或制剂的干物质。
药学上可接受的稀释剂、载体和/或赋形剂包括适合于兽医用途以及人类药物用途的那些。考虑到式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的性质，本领域普通技术人员将容易理解合适的载体和/或赋形剂。然而，举例而言，稀释剂、载体和/或赋形剂包括溶液、溶剂、分散介质、延迟剂、聚合物和脂质剂、乳剂等。作为进一步的实例，合适的液体载体，尤其是用于注射溶液的合适的液体载体，包括水、水性盐水溶液、水性葡萄糖溶液等，其中等渗溶液对于静脉内、脊柱内和脑池内施用是优选的，并且溶媒例如脂质体也特别适用于药剂的施用。
此外，如果需要，本发明的药物组合物中还可以存在诸如润湿剂或乳化剂、稳定剂或pH缓冲剂或防腐剂等物质。在一些实施方案中，本发明的药物组合物将包含合适的药学上可接受的缓冲剂，例如乙酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂、硼酸盐缓冲剂及其混合物。在一些实施方案中，可用于本发明的缓冲剂包括硼酸、硼酸钠、磷酸钠，包括一元、二元和三元磷酸盐，例如一水合磷酸二氢钠和七水合磷酸氢二钠，及其混合物。在一些实施方案中，防腐剂可以是稳定化的二氧化氯、阳离子聚合物或季铵化合物。在一些实施方案中，药物组合物还可以包含润湿剂、营养物质、增粘剂、抗氧化剂等，例如乙二胺四乙酸二钠、碱金属六偏磷酸盐、柠檬酸、柠檬酸钠、焦亚硫酸钠、硫代硫酸钠、N-乙酰基半胱氨酸、丁基化的羟基苯甲醚、丁基化的羟基甲苯、聚乙烯醇、泊洛沙姆类、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素、羟乙基甲基纤维素，以及它们的混合物和它们的混合物。在一些实施方案中，本发明的药物制剂将不包括防腐剂。
在一些实施方案中，式(I)或式(II)化合物或其前药(包括示例性化合物1-60)的药物组合物是无菌可注射制剂，例如无菌可注射水性或油性混悬液的形式。在一些实施方案中，根据使用上述那些合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂的方法配制混悬液。无菌可注射制剂也可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬液，例如被制备为冻干粉末的在1,3-丁二醇中的溶液。在一些实施方案中，采用的可接受的溶媒和溶剂可以包括或排除：水、Ringer氏溶液(包括Ringer氏乳酸盐溶液)、Hartmann氏溶液、Tyrode氏溶液和等渗氯化钠溶液。在一些实施方案中，采用无菌不挥发油作为溶剂或悬浮介质。为此目的，采用任何温和的不挥发油，包括合成甘油单酯或甘油二酯。在一些实施方案中，在注射剂的制备中使用诸如油酸的脂肪酸。
考虑到剂型和施用方式，本发明的组合物可以包含任何适当水平的式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐。然而，举例而言，取决于施用方法，用于本发明的组合物可以包含按重量计约0.1％至约99％，优选按重量计约1％至约60％的式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐。
除了标准的稀释剂、载体和/或赋形剂之外，根据本发明的组合物可以与一种或多种另外的成分一起配制，或以这样的方式配制，以例如增强式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐的活性或生物利用度，有助于保护其完整性或增加其半衰期或保质期，能够在施用于受试者时缓慢释放，或提供其他期望的益处。例如，缓释溶媒包括大分子单体、聚(乙二醇)、透明质酸、聚(乙烯基吡咯烷酮)或水凝胶。作为进一步的实例，组合物还可以包括防腐剂、增溶剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、甜味剂、着色剂、调味剂、包衣剂、缓冲剂等。本发明相关领域的技术人员将容易地确定对于特定目的可能期望的其他添加剂。
本文所述的药物组合物可以根据标准技术配制，标准技术可以见于标准参考文献，例如Gennaro AR:Remington:The Science and Practice of Pharmacy,20th ed.,Lippincott,Williams&Wilkins,2000。
感染性疾病的治疗
在一些实施方案中，本发明提供了一种疫苗佐剂，其包含式(I)、式(II)化合物或其前药，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本发明提供了一种疫苗组合物，其包含(i)式(I)、式(II)化合物或其前药，或其药学上可接受的盐，和(ii)一种或多种抗原，一种或多种抗原组合物，或其组合。
可以与本文公开的式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐组合使用的抗原和佐剂包括B7共刺激分子、C-34、白介素-2、干扰素-α、干扰素-γ、GM-CSF、CTLA-4拮抗剂、OX-40激动剂、CD40激动剂、沙格司亭、左旋咪唑、牛痘病毒、卡介苗(BCG)、脂质体、明矾、去毒内毒素、矿物油、表面活性物质，该表面活性物质可以包括或排除：lipolecithin、普兰尼克多元醇、聚阴离子、肽和油或烃乳液。可以添加佐剂(其可以包括或排除：氢氧化铝或磷酸铝)，以增加疫苗触发、增强或延长免疫应答的能力。单独或者与所述组合物组合使用的另外的物质也是潜在的佐剂，所述另外的物质可以包括或排除：细胞因子、趋化因子和细菌核酸序列，如CpG、toll样受体(TLR)9激动剂以及另外的TLR 2、TLR 4、TLR 5、TLR 7、TLR 8、TLR9的激动剂，包括脂蛋白、LPS、单磷酰脂A、脂磷壁酸、咪喹莫特、雷西莫特，以及视黄酸诱导基因I(RIG-I)激动剂，其可以包括或排除：聚I:C(poly I:C)。
在一些实施方案中，本发明提供了一种治疗感染性疾病的方法。如本文所述，如响应于STING激动剂的细胞因子分泌(特别是IFNb)所证明的，实施例中的体外数据证明了使用式(I)或式(II)化合物激活STING信号传导。已知STING激活会导致诱导包括IFN-β在内的几种抗病毒基因，这表明STING激动剂可用作抗多种病毒感染类型的抗病毒剂。如前文所述，通过STING激动剂激活STING可以用于治疗感染性疾病((Nature,2008,455:674-678；PLoS Pathog.2015,11:12；Antimicrob.Agents Chemother.2015,59(2):1273-1281；JLeukocyte Bio.2011,89(3):351-357)。发明人已经认识到，式(I)或式(II)化合物或其前药或或其药学上可接受的盐可以用于治疗病毒感染或细菌感染。可以用本发明化合物治疗的病毒感染的实例可以包括或排除：人免疫缺陷病毒(HIV)、人***瘤病毒(HPV)、丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)、流感(正粘病毒科-其可以包括或排除α流感病毒(甲型流感-所有亚型或血清型)和乙型流感)、冠状病毒(其可以包括或排除SARS-CoV-1和SARS-CoV-2)、甲病毒属、轮状病毒、仙台病毒、牛痘、呼吸道合胞病毒、拉沙病毒(砂粒病毒科)、狂犬病病毒(弹状病毒科)、西尼罗河病毒、登革热病毒、日本脑炎病毒和其他黄病毒科、RNA病毒、DNA病毒、属于以下科的病毒：甲型线形病毒科(Alphaflexiviridae)、星状病毒科(Astroviridae)、αT四病毒科(Alphatetraviridae)、囊泡虫RNA病毒科(Alvernaviridae)、非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)、瓶状病毒科(Ampullaviridae)、腺病毒科(Adenoviridae)、囊泡病毒科(Ascoviridae)、乙型线形病毒科(Betaflexiviridae)、雀麦花叶病毒科(Bromoviridae)、杆菌状核糖核酸病病毒科(Barnaviridae)、双尾病毒科(Bicaudaviridae)、杆状病毒科(Baculoviridae)长线形病毒科(Closteroviridae)、杯状病毒科(Caliciviridae)、卡尔莫四T病毒科(Carmotetraviridae)、棒状病毒科(Clavaviridae)、覆盖噬菌体科(Corticoviridae)、双顺反子病毒科(Dicistroviridae)、内源病毒科(Endornaviridae)、纤丝病毒科(Filoviridae)、球状病毒科(Globuloviridae)、滴状病毒科(Guttaviridae)、双生病毒科(Geminiviridae)、肥大唾腺炎病毒科(Hytrosaviridae)、光滑病毒科(Leviviridae)、黄症病毒科(Luteoviridae)、脂毛噬菌体科(Lipothrixviridae)、Mesoniviridae、Marnaviridae、转座病毒科(Metaviridae)、贝类疱疹病毒科(Malacoherpesviridae)、罗达病毒科(Nodaviridae)、尼亚米病毒科(Nyamiviridae)、线头病毒科(Nimaviridae)、矮缩病毒科(Nanoviridae)、微核糖核酸病毒科(Piconaviridae)、分体病毒科(Partitiviridae)、微双RNA病毒科(Picobirnaviridae)、副粘病毒科(Paramyxoviridae)、痘病毒科(Poxviridae)、潘多拉病毒科(Pandoraviridae)、多瘤病毒科(Polymaviridae)、藻类DNA病毒科(Phycodnaviridae)、***瘤病毒科(Papillomaviridae)、多分体DNA病毒科(Polydnaviruses)、多瘤病毒科(Polymaviridae)、转置T四病毒科(Permutotetraviridae)、马铃薯Y病毒科(Potyviridae)、反转录病毒科(Retroviridae)、长尾病毒科(Siphoviridae)、球脂状病毒科(Sphaerolipoviridae)、帚状病毒科(Virgaviridae)、披膜病毒科(Togaviridae)、Turriviridae、盖病毒科(Tectiviridae)。
可以用式(I)或式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐治疗的细菌感染的实例可以包括或排除：由属于布鲁氏杆菌属(Brucella)、梭菌属(Clostridium)、Clostrodium、弯曲杆菌属(Campylobacter)、肠球菌属(Enterococcus)、弗兰西斯菌属(Fransicella)、李斯特菌属(Listeria)、军团菌属(Legionella)、分枝杆菌属(Mycobacteria)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙门氏菌属(Salmonella)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、耶尔森氏菌属(Yersinia)的细菌引起的感染。在一些实施方案中，本发明提供了一种组合物，其包含式(I)、式(II)化合物或其前药或其药学上可接受的盐，以及一种或多种另外的疗法。
制造和稳定性
在一些实施方案中，本发明的制剂是基本上纯的。基本上纯是指制剂包含小于约10％、5％或1％，优选小于约0.1％的任何杂质。在一些实施方案中，总杂质，包括式(I)或式(II)化合物的代谢物，将不超过15％。在一些实施方案中，总杂质，包括式(I)或式(II)化合物的代谢物，将不超过12％。在一些实施方案中，总杂质，包括式(I)或式(II)化合物的代谢物，将不超过11％。在其他实施方案中，总杂质，包括式(I)或式(II)化合物的代谢物，将不超过10％。
在一些实施方案中，可以使用选自阴离子交换HPLC(AEX-HPLC)或质谱法的方法测量本发明制剂的纯度。质谱法可以包括LC/MS或LC/MS/MS。在一些实施方案中，用于测量杂质的方法可以包括AEX-HPLC和LC/MS两者。
包含本发明的式(I)或式(II)化合物或其前药的无菌组合物是使用无菌加工通过将化合物溶解在制剂溶媒中而制备的。在一个实施方案中，制剂也可以通过过滤灭菌。用于制造本发明制剂的赋形剂是药物产品中广泛使用的并符合药典标准。
一般制备方法
本文所述的式(I)和(II)化合物可以通过本领域已知的技术制备。此外，本文所述的式(I)和(II)化合物可以通过遵循如下方案中描述的反应顺序来制备。此外，在以下方案中，在提及特定的碱、酸、试剂、溶剂、偶联剂等的情况下，应当理解，本领域已知的其他碱、酸、试剂、溶剂、偶联剂等也可以使用并因此包括在本发明的范围内。反应条件例如反应的温度和/或持续时间的变化可以如本领域已知的那样使用，并且也在本发明的范围内。除非另有说明，否则这些方案中描述的式(I)和(II)化合物的所有异构体也涵盖在本发明的范围内。
本文所述的方法可以实现本发明化合物的合成。然而，这些可能不是可以合成本发明中描述的化合物的唯一方法。此外，本文所述的各种合成步骤可以以交替顺序进行以提供期望的化合物。
Figure BDA0003484970410000521
方案1显示了从式(2)化合物制备作为中间体1的化合物(9)[其中环B是苯基，环C、p和R2如前文对式I所定义，m是1，G1是-CH2-，且G2是-CH＝CH-]的方法。
使式(2)化合物在诸如碳酸铯、碳酸钾的碱的存在下，在诸如二甲基甲酰胺、乙腈、THF、丙酮的溶剂中，与3-溴丙-1-醇反应，得到式(3)化合物。
使上一步中得到的式(3)化合物在诸如TEA、DIPEA的碱的存在下，在诸如DCM、THF的溶剂中与甲磺酰氯反应，得到式(4)化合物。
使式(4)化合物与式(10)化合物在诸如碳酸铯、碳酸钾的碱的存在下，在诸如DMF、乙腈的溶剂中反应，得到式(5)化合物。通过使用诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如乙醇、四氢呋喃的溶剂中使式(5)化合物与(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐环化，得到式(6)化合物。
使式(6)化合物与锌和乙酸反应得到式(7)化合物。可以通过使用EDC和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、四氢呋喃的溶剂中进行式(7)化合物与式(11)化合物的偶联，得到式(8)化合物。
可以将上一步中得到的式(8)化合物用诸如氢氧化锂或氢氧化钠的碱处理以水解，得到作为中间体1的式(9)化合物。
Figure BDA0003484970410000531
方案2显示了从式(2)化合物制备作为中间体1的化合物(9)[其中环B是苯基，环C、p和R2如前文对式I所定义，m是1，G1是-CH2-，且G2是-CH＝CH-]的替代方法。
在诸如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾的碱的存在下，在不同组合的甲醇、THF和水的混合物中使式(2)化合物水解，得到式(12)化合物。
在无水硫酸镁和硫酸或者五氧化二磷和硫酸或者乙酰乙酸叔丁酯和催化量硫酸的存在下，在诸如DCM或氯仿的溶剂中使式(12)化合物与叔丁醇反应，得到式(13)的叔丁酯化合物。通过在Mitsunobu方案下使用三苯基膦和诸如偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)或偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)的偶氮二甲酸酯在THF中使其与式(3)化合物反应，或者通过在碳酸铯或碳酸钾的存在下在诸如DMF或乙腈的溶剂中进行苯酚(13)与式(4)的甲磺酸酯的碱介导的烷基化反应，得到式(14)化合物。
通过使用诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如乙醇、四氢呋喃的溶剂中使式(14)化合物与(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐进行大环化，得到式(15)化合物。在连二亚硫酸钠和氢氧化铵的存在下，在THF、乙醇和水的溶剂混合物中，将式(15)化合物还原成胺化合物(16)。可以通过使用EDC和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺或四氢呋喃的碱中进行式(16)化合物与式(11)化合物的偶联，得到式(17)化合物。可以在酸性条件下在三氟乙酸或盐酸存在下对化合物(17)中的叔丁酯进行脱保护，得到化合物(18)。
可以通过使用以下条件，如氯化铵和诸如三乙胺或DIPEA的碱在诸如EDCI、TBTU、HATU的偶联剂的存在下将酸官能团转化为酰胺，或者形成酸与CDI的复合物并与氨反应，由化合物(18)得到式(8)化合物。可以使用方案1中概述的条件将式(8)化合物转化为式(9)化合物或中间体1。
Figure BDA0003484970410000551
方案3显示了从式(9)化合物中间体1制备式(I-A)化合物[其中环B是苯基，环C、p和R2如前文对式I所定义，m是1，G1是-CH2-，G2是-CH＝CH-，并且R1是-CON(R3)2]的方法。
可以通过使用诸如TBTU、EDC的偶联剂和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、二甲亚砜等的溶剂中进行式(9)化合物与伯胺或仲胺的偶联，得到式(I-A)化合物。
当式(I-A)化合物在R3上具有诸如-COOMe、-COOEt或-COOtBu的取代时，可以通过本领域已知的方法通过用诸如氢氧化锂或氢氧化钠的碱处理将其进一步水解，得到相应的酸，或者，可以将其用诸如三氟乙酸或盐酸的酸处理以进行水解。
Figure BDA0003484970410000561
方案4显示了由化合物(2)制备化合物(21)的方法。
在Mitsunobu条件下，在诸如DIAD或DEAD和TPP的试剂的存在下，在诸如二甲基甲酰胺、乙腈、THF的溶剂中使化合物(2)与2-(甲氧基甲氧基)丙烷-1,3-二醇反应，得到式(19A和19B)化合物的对映异构体混合物。通过手性制备型HPLC分离化合物19A和19B，得到纯对映异构体。
在Mitsunobu条件下，在诸如DIAD或DEAD和TPP的试剂的存在下，在诸如二甲基甲酰胺、乙腈、THF的溶剂中使化合物(19A)与化合物(13)反应，得到化合物(20)。
通过甲氧基甲基(MOM)基团的脱保护，使化合物(20)在DCM中与四溴化碳和TPP反应，得到化合物(21)。进行类似的反应由化合物(19B)制备化合物(21)的对映异构体。
或者，在Mitsunobu条件下，在诸如DIAD或DEAD和TPP的试剂的存在下，在诸如二甲基甲酰胺、乙腈、THF的溶剂中使化合物(2)与(S)-环氧乙烷-2-基甲醇反应，得到化合物(22)。在诸如2,6-二甲基吡啶、DIPEA的碱的存在下，在诸如乙醇、甲醇的溶剂中使上一步中得到的化合物(22)与化合物(13)反应，得到化合物(21)。
Figure BDA0003484970410000571
方案5显示了由化合物(21)制备式(30)化合物[其中环B是苯基，环A是杂环，环C、m、G2、p和R2如前文对于式1所定义]的方法。
在诸如2,6-二甲基吡啶的碱存在下用三氟甲磺酸酐处理化合物(21)，得到式(23)化合物。
可以在诸如三乙胺的碱的存在下，在诸如四氢呋喃或氯化溶剂的溶剂中使式(23)化合物与环A反应，得到式(24)化合物。
可以在诸如DIPEA的碱的存在下，在诸如乙醇、甲醇的溶剂中使上一步中得到的式(24)化合物与式(31)化合物反应，得到式(25)化合物。
可以在诸如甲醇的溶剂中使式(25)化合物与连二亚硫酸钠反应，得到式(26)化合物。可以通过使用EDC和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、四氢呋喃的溶剂中进行式(26)化合物与式(11)化合物的偶联，得到式(27)化合物。
将上一步得到的式(27)化合物用诸如TFA或HCl的酸处理进行水解，得到式(28)化合物。
可以在诸如四氢呋喃、二甲基甲酰胺的溶剂中使式(28)化合物与TBTU和氯化铵反应，得到式(29)化合物，其进一步水解得到式(30)化合物。可以进行类似的反应以由化合物(21)的对映异构体制备化合物(30)的对映异构体。
Figure BDA0003484970410000581
方案6显示了从式(30)化合物制备式(I-B)化合物[其中环B是苯基，环A是杂环，环C、p和R2如前文对式I所定义，m是1，G2是-CH＝CH-，且R1是-CON(R3)2]的方法。
可以通过使用诸如TBTU、EDC的偶联剂和诸如三乙胺或二异丙胺的碱，在诸如二甲基甲酰胺、二甲亚砜的溶剂中进行式(30)化合物与伯胺或仲胺的偶联，得到式(I-B)化合物。
当式(I-B)的化合物在R3上具有诸如-COOMe、-COOEt或-COOtBu的取代时，可以通过本领域已知的方法通过用诸如氢氧化锂或氢氧化钠的碱处理而将其进一步水解产生相应的酸，或者用诸如三氟乙酸或盐酸的酸进行水解。可以进行类似的反应由化合物(30)的对映异构体制备化合物(I-B)的对映异构体。
Figure BDA0003484970410000591
方案7显示了由化合物(2)制备式(41)化合物[其中环B是苯基，G1是
Figure BDA0003484970410000592
n＝0，环A是杂环，环C、m、G2、p和R2如前文对于式1所定义]的方法。
在Mitsunobu条件下，在诸如DIAD或DEAD和TPP的试剂的存在下，在诸如二甲基甲酰胺、乙腈、THF的溶剂中使式(2)化合物与式(42)化合物反应，得到式(32)化合物。
可以在诸如氯化溶剂或四氢呋喃的溶剂中使式(32)化合物与HCl的二氧六环溶液反应，以使甲氧基甲基(MOM)基团脱保护，将其在诸如2,6-二甲基吡啶的碱的存在下用三氟甲磺酸酐进一步处理，得到式(34)化合物。
可以在诸如三乙胺的碱的存在下在诸如四氢呋喃或氯化溶剂的溶剂中使式(34)化合物与环A反应，得到式(35)的化合物。或者，可以在Mitsunobu条件下，在诸如DIAD或DEAD和TPP的试剂的存在下，在诸如二甲基甲酰胺、乙腈、THF的溶剂中使式(2)化合物与式(43)化合物反应，得到式(35)化合物。
可以在诸如DIPEA的碱的存在下，在诸如乙醇、甲醇的溶剂中使上一步中得到的式(35)化合物与式(31)化合物反应，得到式(36)化合物。
可以在诸如甲醇的溶剂中使式(36)化合物与连二亚硫酸钠反应，得到式(37)化合物。可以通过使用EDC和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、四氢呋喃的溶剂中进行式(11)化合物与式(37)化合物的偶联，得到式(38)化合物。
可以用诸如氢氧化锂或氢氧化钠的碱处理上一步中得到的式(38)化合物，以水解得到式(39)化合物。
可以在诸如四氢呋喃、二甲基甲酰胺的溶剂中使式(39)化合物与TBTU和氯化铵反应，得到式(40)化合物，将其进一步水解得到式(41)化合物。
Figure BDA0003484970410000601
方案8显示了由式(41)化合物制备式(I-C)化合物([其中m是1，G1是>CH-环A，G2是-CH＝CH-，并且R1是-CON(R3)2，其中一个R3是氢]，其中环C、p和R2如前文所定义)的方法。
可以通过使用诸如TBTU、EDC的偶联剂和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、四氢呋喃的溶剂中进行式(41)化合物与伯胺的偶联，得到式(I-C)化合物。
当式(I-C)化合物在R3上具有诸如-COOMe、-COOEt或-COOtBu的取代时，可以通过本领域已知的方法通过用诸如氢氧化锂或氢氧化钠的碱处理而将其进一步水解以产生相应的酸，或者，用诸如三氟乙酸或盐酸的酸进行水解。
Figure BDA0003484970410000611
方案9显示了由式(38)化合物制备式(I-C)化合物([式I，当m为1时，G1是>CH-环A，G2是-CH＝CH-，并且R1是-CON(R3)2，其中一个R3是氢]，其中环C、p和R2如前文所定义)的方法。
可以用诸如氢氧化锂或氢氧化钠的碱处理式(38)化合物，以水解得到式(44)化合物。
可以通过使用诸如TBTU、EDC的偶联剂和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、四氢呋喃的碱中进行式(44)化合物与伯胺的偶联，得到式(45)化合物。可以在诸如四氢呋喃、二甲基甲酰胺的溶剂中使式(45)化合物与TBTU和氯化铵反应，得到式(I-C)化合物。
当式(I-C)化合物在R3上具有诸如-COOMe、-COOEt或-COOtBu的取代时，可以通过本领域已知的方法通过用诸如氢氧化锂或氢氧化钠的碱处理以进行水解，将其进一步水解以产生相应的酸，或者，用诸如三氟乙酸或盐酸的酸进行水解。
Figure BDA0003484970410000621
方案10显示了由作为中间体1的式(9)化合物制备式(I-D)化合物([式I，当m是1时，G1是-CH2-，G2是-CH＝CH-，且R1是-CONHSO2R3a]，其中环C、p和R2为前文定义的)的方法。
可以通过使用诸如TBTU、EDC的偶联剂和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、四氢呋喃的溶剂中进行式(9)化合物与烷基/环烷基磺酰胺的偶联，得到式(I-D)化合物。
Figure BDA0003484970410000622
方案11显示了由式(10)化合物制备式(I-E)化合物([式I，当m是1时，G1是-CH2-，G2是-CH＝CH-，并且R1是杂芳基(四唑)]，其中环C、p和R2如前文所定义)的方法。
可以在诸如乙腈、THF的溶剂中使式(10)化合物与三氯甲基碳酰氯反应，得到式(46)化合物。
可以在诸如TEA、DIPEA的碱的存在下，在诸如NMP、二甲基甲酰胺的溶剂中使式(46)化合物与式(10)化合物和1,3-二溴丙烷反应，得到式(47)化合物。
通过使用诸如三乙胺或二异丙胺的碱，在诸如乙醇、四氢呋喃的溶剂中使式(47)化合物与(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐进行环化，得到式(48)化合物。
式(48)化合物可以与锌和乙酸反应，得到式(49)化合物。可以通过使用EDC和诸如三乙胺或二异丙胺的碱在诸如二甲基甲酰胺、四氢呋喃的溶剂中进行式(49)化合物与式(11)化合物的偶联，得到式(50)化合物。
在作为溶剂的DMF中用叠氮化钠和氯化铵处理上一步中得到的式(50)化合物，得到式(I-E)化合物。
缩写
DMF：二甲基甲酰胺
DMSO：二甲基亚砜
THF：四氢呋喃
CDI：1,1’-羰基二咪唑
EDC：1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
TBTU：2-(1H-苯并***-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐
HATU：1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1H-1,2,3-***并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸盐
DIPEA：二异丙胺
NMP：N-甲基-2-吡咯烷酮
TEA：三乙胺
KI：碘化钾
DCM：二氯甲烷
Ms：甲磺酰基
Ts：4-甲基苯磺酰基
PMB：4-甲氧基苄基
DEAD：偶氮二甲酸二乙酯
DIAD：偶氮二甲酸二异丙酯
TPP：三苯基膦
Int.：中间体
通过遵循如上文所述的一种或多种反应方案来制备本发明的一些代表性实施例。
通过以下实施例进一步说明本发明，提供这些实施例仅为了举例说明本发明，而并不限制本发明的范围。下文给出的实施例说明了制备相关化合物的合成程序。某些修改和等价物对于本领域技术人员来说将是显而易见的并且旨在包括在本发明的范围内。
本发明化合物的命名是根据ChemDraw Professional 18.0。中间体以及最终化合物的结构由光谱数据确认。
实验
中间体的合成
中间体1：(E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸的合成
Figure BDA0003484970410000641
步骤1：4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸：
Figure BDA0003484970410000651
在室温向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸乙酯(320g，1303mmol)在1L甲醇、1L THF和1L H2O的溶剂混合物中的搅拌溶液中添加氢氧化锂水合物(164g，3909mmol)，并搅拌2小时。通过TLC监测反应，并在完成后，将反应混合物减压浓缩并添加水。通过使用6N HCl将溶液的pH调节至酸性，并用乙酸乙酯萃取粗产物。将有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到呈灰白色固体的产物(收率＝255g，90％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.63(s,1H),11.70(s,1H),7.88(d,J＝1.9Hz,1H),7.77(d,J＝1.9Hz,1H)。LCMS：m/z 216.39(M+H)+。
步骤2：4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸叔丁酯：
Figure BDA0003484970410000652
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸(255g，1172mmol)在3L DCM中的溶液中添加无水MgSO4(635g，5274mmol)并将RB烧瓶密封以防止气体逸出。添加H2SO4(75ml，1407mmol)，然后添加叔丁醇(729ml，7619mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物过滤以除去MgSO4残余物并用DCM稀释滤液。将DCM层用饱和NaHCO3溶液洗涤，然后用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到呈灰白色固体的产物(收率＝200g，62％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.08(d,J＝1.9Hz,1H),7.88(d,J＝1.9Hz,1H),1.62(s,9H)。LCMS：m/z 272.33(M-H)-。
步骤3：4-氯-3-(3-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000653
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸乙酯(200g，814mmol)在2L DMF中的搅拌溶液中添加3-溴丙-1-醇(147g，1059mmol)和K2CO3(225g，1629mmol)并将反应混合物在80℃搅拌1.5小时。在起始物质反应完全后，将反应物质冷却并倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到粗产物。通过用5％EtOAc/己烷洗涤而将粗产物纯化，得到淡黄色固体(收率＝230g，93％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.04(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(d,J＝1.8Hz,1H),4.44(q,J＝7.1Hz,2H),4.34(t,J＝5.9Hz,2H),3.94(t,J＝5.8Hz,2H),2.17(p,J＝5.9Hz,2H),1.43(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤4：4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯：
Figure BDA0003484970410000661
向4-氯-3-(3-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯(200g，659mmol)在3L THF中的搅拌溶液中添加4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸叔丁酯(198g，724mmol)和三苯基膦(242g，922mmol)。向该溶液中滴加DIAD(192ml，988mmol)，并且在添加之后将反应混合物在室温搅拌2小时。在反应完成后，浓缩混合物得到粗产物，将其用乙醇研磨。将沉淀的固体过滤并干燥，得到纯产物，为浅黄色固体(收率＝320g，87％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.08(d,J＝1.8Hz,1H),8.01(d,J＝1.7Hz,1H),7.85(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(d,J＝1.8Hz,1H),4.47(td,J＝6.0,3.3Hz,4H),4.37(q,J＝7.1Hz,2H),2.35(p,J＝6.1Hz,2H),1.56(s,9H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤5：(E)-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯：
Figure BDA0003484970410000662
向4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯(310g，554mmol)在9L乙醇和3L THF的溶剂混合物中的搅拌溶液中添加(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐(127.7g，802mmol)和DIPEA(798mL，4567mmol)。将反应混合物在不锈钢高压釜中在105℃加热36小时。反应完成后，将混合物蒸发至干并添加水。将所得固体过滤并在真空下干燥。将粗产物用5％乙酸乙酯的甲醇溶液研磨并过滤。将固体收集并在真空下干燥，得到期望的产物(收率＝285g，90％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(dt,J＝14.5,6.3Hz,2H),8.25(d,J＝1.9Hz,1H),8.18(d,J＝1.9Hz,1H),7.51(d,J＝2.0Hz,1H),7.47(d,J＝2.0Hz,1H),5.73(d,J＝1.9Hz,2H),4.42-4.32(m,2H),4.21-4.11(m,8H),2.23(t,J＝5.9Hz,2H),1.53(s,9H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)。LCMS：m/z 572.95(M+H)+。
步骤6：(E)-1,13-二氨基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯：
Figure BDA0003484970410000671
将(E)-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯(280g，489mmol)溶解在1.2L THF和0.8LEtOH的溶剂混合物中。将溶液冷却至0℃并向其中添加连二亚硫酸钠(851g，4890mmol)在800mL水中的溶液，然后添加28％氢氧化铵水溶液(1020ml，7335mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌2小时，之后TLC显示反应完成。然后在旋转蒸发仪上浓缩挥发物并用乙酸乙酯稀释残余物。将乙酸乙酯层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到产物(收率＝220g，88％)。LCMS：m/z 512.44(M+H)+。
步骤7：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸12-叔丁酯4-乙酯：
Figure BDA0003484970410000681
在0℃向(E)-1,13-二氨基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯(200g，351mmol)在2.5L DMF中的搅拌溶液中滴加1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(137g，702mmol)在200mL DMF中的溶液。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，然后向反应混合物中添加3-(乙基亚氨基亚甲基氨基)-N,N-二甲基丙-1-胺；盐酸盐(269g，1405mmol)，然后添加DIPEA(368ml，2107mmol)。使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。通过LCMS监测反应进程，并在完成后，减压浓缩反应混合物并添加水。将所得固体沉淀物过滤得到粗产物，将其通过柱色谱法用5％DCM-MeOH作为洗脱液纯化得到产物。为了进一步纯化，将固体用MeOH洗涤，得到纯产物(收率＝170g，58％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.91(d,J＝7.3Hz,2H),7.83(d,J＝1.3Hz,1H),7.81(d,J＝1.3Hz,1H),7.51(d,J＝1.4Hz,1H),7.45(d,J＝1.4Hz,1H),6.54(s,2H),5.48(s,2H),4.87(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.40(q,J＝5.0Hz,4H),4.34(q,J＝7.1Hz,2H),2.32-2.21(m,2H),2.07(s,6H),1.57(s,9H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)。LCMS：m/z 835.05(M+H)+。
步骤8：(E)-4-(乙氧基羰基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸：
Figure BDA0003484970410000682
将(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸12-叔丁酯4-乙酯(160g，192mmol)溶解在1.5L DCM中并添加TFA(517ml，6707mmol)并将溶液在室温搅拌12小时。通过LCMS监测反应，并在完成后，浓缩挥发物并添加***，导致浅黄色固体沉淀。过滤固体得到产物，将其用50％EtOAc:***洗涤，得到纯产物(收率＝143g，96％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.83(d,J＝1.3Hz,1H),7.81(d,J＝1.3Hz,1H),7.54-7.47(m,2H),6.56(s,2H),5.50(s,2H),4.88(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.40(t,J＝5.4Hz,4H),4.34(q,J＝7.1Hz,2H),2.27(t,J＝5.6Hz,2H),2.08(s,6H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)。LCMS：m/z779.16(M+H)+。
步骤9：(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000691
将(E)-4-(乙氧基羰基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸(140g，180mmol)悬浮在1:1DMF和THF的2L溶剂混合物中，并分批添加CDI(117g，719mmol)。随着CDI复合物的形成，反应进行，混合物变得均匀。在60℃1小时后，将反应冷却至室温并添加28％氢氧化铵水溶液(250ml，1798mmol)并将反应混合物在室温搅拌。开始形成稠的灰白色固体沉淀，并在搅拌3小时后，浓缩挥发物，添加水，将所得粗产物过滤并干燥。将粗产物与1:1MeOH:THF加热回流2小时并过滤，然后再次悬浮在DMF中并加热至90℃2小时并过滤，得到纯产物(收率＝125g，89％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(s,1H),12.87(s,1H),8.00(brs,1H),7.84(s,1H),7.70(s,1H),7.52(d,J＝5.7Hz,2H),7.37(brs,1H),6.54(d,J＝5.6Hz,2H),5.50(s,2H),4.88(brs,4H),4.53(d,J＝7.3Hz,4H),4.42(q,J＝5.9Hz,4H),4.34(q,J＝7.1Hz,2H),2.36-2.21(m,2H),2.08(s,6H),1.35(t,J＝7.1Hz,3H),1.27(t,J＝7.1Hz,7H)。LCMS：m/z 778.16(M+H)+。
步骤10：(E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸(中间体1)：
Figure BDA0003484970410000701
向(E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸乙酯(105g,135mmol)在1:1MeOH和THF的2L溶剂混合物中的搅拌溶液中添加氢氧化锂水合物(56.6g，1350mmol)在300mL水中的溶液。添加碱后，混合物变得均匀并在45℃加热24小时。通过LCMS监测反应。完成后，将反应混合物减压浓缩并添加水，并通过使用3N HCl将pH调节至6。将所得固体过滤并用乙腈洗涤，然后用***洗涤，得到(E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸(收率＝100g，99％)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,2H),8.01(brs,1H),7.81(s,1H),7.71(s,1H),7.53(d,J＝8.1Hz,2H),7.37(brs,1H),6.55(s,2H),5.51(s,2H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.42(q,J＝6.3Hz,4H),2.29(t,J＝5.7Hz,2H),2.08(s,6H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)。LCMS：m/z 750.28(M+H)+。
用于制备中间体1的替代方法
步骤-1：4-氯-3-(3-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000711
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸乙酯(15g，61.1mmol)在150mL DMF中的溶液中添加碳酸钾(16.88g，122mmol)，并在室温搅拌悬浮液。15分钟后添加3-溴丙-1-醇(11.03g，79mmol)，升温至100℃，通过TLC监测反应进程。反应完成后，将混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩得到粗产物，将其在柱上纯化得到纯产物，为浅黄色固体。(13g，70％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(d,J＝1.8Hz,1H),4.44(q,J＝7.1Hz,2H),4.34(t,J＝5.9Hz,2H),3.94(t,J＝5.8Hz,2H),2.17(m,2H),1.43(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤-2：4-氯-3-(3-((甲基磺酰基)氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000712
将4-氯-3-(3-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯(13g，42.8mmol)溶解在120mL THF中并将溶液冷却至0℃。向其中添加甲磺酰氯(6.67ml，86mmol)，然后添加三乙胺(23.87ml，171mmol)，并在2小时的期间内使反应混合物升温至室温。通过添加水淬灭反应并用乙酸乙酯萃取。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩，得到粗产物，其纯度足以用于下一步骤并原样使用。(13g，80％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.07(d,J＝1.8Hz,1H),7.79(d,J＝1.8Hz,1H),4.53(t,J＝5.9Hz,2H),4.45(q,J＝7.1Hz,2H),4.32(t,J＝5.8Hz,2H),3.05(s,3H),2.37(m,3H),1.44(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z＝404.1(M+Na)+
步骤-3：3-(3-(5-氨基甲酰基-2-氯-3-硝基苯氧基)丙氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000721
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酰胺(7.2g，33.2mmol)在150mL DMF中的溶液中添加碳酸钾(11.49g，83mmol)，并将悬浮液在室温搅拌。15分钟后添加4-氯-3-(3-((甲基磺酰基)氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯(12.69g，33.2mmol)，并将温度升至100℃，通过TLC监测反应进程。反应完成后，将混合物倒入水中并用乙酸乙酯萃取。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩，得到粗产物，将其用***洗涤，得到呈浅棕色固体的产物。(12.5g，75％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(s,1H),8.10(d,J＝1.7Hz,1H),8.06(d,J＝1.8Hz,1H),7.91(d,J＝1.9Hz,1H),7.86(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(s,1H),4.50-4.42(m,4H),4.37(q,J＝7.1Hz,2H),2.36(m,2H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z＝502.2(M+H)+
步骤-4：(E)-11-氨基甲酰基-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000722
向3-(3-(5-氨基甲酰基-2-氯-3-硝基苯氧基)丙氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酸乙酯(20g，39.8mmol)在300mL乙醇和100mL THF的混合物中的搅拌溶液中添加(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐(8.23g，51.8mmol)和DIPEA(41.7ml，239mmol)，并将反应混合物在高压釜中在120℃搅拌30小时。然后将反应混合物减压浓缩，并将得到的暗红色固体用最小体积的乙醇洗涤，然后用***洗涤，得到产物。(15g，73％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(t,J＝6.7Hz,1H),8.28-8.21(m,2H),8.07(t,J＝6.8Hz,1H),8.01(s,1H),7.63(d,J＝1.9Hz,1H),7.53(d,J＝1.9Hz,1H),7.33(s,1H),5.74(t,J＝2.2Hz,2H),4.29(q,J＝7.1Hz,2H),4.21-4.08(m,8H),2.23(m,2H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z＝515.57(M+H)+
步骤-5：(E)-1,13-二氨基-11-氨基甲酰基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000731
在室温向(E)-11-氨基甲酰基-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酸乙酯(9.5g，18.43mmol)在乙酸(52.8ml，921mmol)中的搅拌溶液中分批添加锌(7.2g，111mmol)粉，并将反应混合物搅拌1小时。通过LCMS监测反应进程，并在起始物质完全转化为产物后，将反应混合物通过硅藻土垫过滤。将在乙酸中含有二胺的滤液蒸出，并将粗产物用***洗涤，然后用10％NaHCO3水溶液洗涤。然后通过与甲苯共沸将二胺干燥用于下一步反应。(7.2g，86％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63(s,1H),7.02(d,J＝1.8Hz,1H),6.98(s,1H),6.92(d,J＝1.9Hz,1H),6.90(d,J＝1.9Hz,1H),6.87(d,J＝1.8Hz,1H),5.53-5.36(m,2H),4.82(s,2H),4.66(s,2H),4.23-4.08(m,6H),2.28-2.16(m,2H),1.29(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z＝456.23(M+H)+
步骤-6：(E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸乙酯：
Figure BDA0003484970410000741
向冷却到0℃的(E)-1,13-二氨基-11-氨基甲酰基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酸乙酯(7.2g，15.81mmol)在100mLDMF中的搅拌溶液中添加1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(6.17g，31.6mmol)。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，然后向反应混合物中添加3-(乙基亚氨基亚甲基氨基)-N,N-二甲基丙-1-胺；盐酸盐(10.61g，55.3mmol)，然后添加DIPEA(16.56ml，95mmol)。添加后，使反应混合物升温至室温并搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，得到粗产物，然后通过用乙腈研磨将其纯化，得到产物，其原样用于下一步。(8.5g，69％)。LCMS：m/z＝778.16(M+H)+
步骤-7：(E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸(中间体1)：
Figure BDA0003484970410000742
将(E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸乙酯(11.5g，14.78mmol)悬浮在200mL MeOH和THF的1:1混合物中，并向其中添加氢氧化锂水合物(3.10g，73.9mmol)在40mL水中的溶液，导致形成澄清溶液。将反应混合物在室温搅拌并通过LCMS监测水解的进程。反应完成后，浓缩挥发物并添加100mL水。将水性部分用***洗涤，然后通过添加3N HCl溶液而酸化，导致酸的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，得到粗产物，然后通过用乙腈研磨而纯化。(8g，72％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.01(s,1H),7.81(s,1H),7.71(s,1H),7.53(d,J＝7.5Hz,2H),7.37(s,1H),6.55(s,2H),5.51(s,2H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.47-4.35(m,4H),2.32-2.24(m,2H),2.08(s,6H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝750.16(M+H)+
2-(1H-四唑-5-基)乙-1-胺(Int.2)的合成
Figure BDA0003484970410000751
步骤-1：3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙腈的合成：
向邻苯二甲酰亚胺钾(7g，37.8mmol)在50mL DMF中的搅拌溶液中添加3-溴丙腈(2.02g，15.12mmol)，并将混合物在80℃加热3小时。完成后，通过添加水淬灭反应并用乙酸乙酯萃取。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩得到粗产物，将其在柱上纯化得到纯产物(收率＝3.15g，96％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.93-7.90(m,2H),7.79-7.77(m,2H),4.04(t,J＝6.9Hz,2H),2.83(t,J＝6.9Hz,2H)。
步骤-2：2-(2-(1H-四唑-5-基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮的合成：
向3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙腈(3.04g，15.22mmol)在50mL二氧六环中的溶液中添加三正丁基叠氮化锡(10.35ml，37.8mmol)，并将混合物在密封管中在80℃加热36小时。完成后，浓缩反应混合物并用乙酸乙酯稀释，将有机层用盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，并将粗产物在柱上纯化(收率＝2.0g，54％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91-7.82(m,4H),3.92(t,J＝6.8Hz,2H),3.25(t,J＝6.8Hz,2H)；LCMS：m/z＝244.2(M+H)+
步骤-3：2-(1H-四唑-5-基)乙-1-胺的合成
将2-(2-(1H-四唑-5-基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(0.8g，3.29mmol)溶解在30mLEtOH中，并向其中添加水合肼(823mg，16.45mmol)，将反应混合物在60℃加热1小时。白色沉淀物开始形成，其量随着反应的进行而增加。然后将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液浓缩得到粗胺，其纯度足以用于下一步并被原样使用(收率＝0.25g,67％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.04(t,J＝8.0Hz,2H),2.90(t,J＝8.0Hz,2H)；LCMS：m/z＝114.07(M+H)+
(1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺三氟乙酸盐(Int.3a)的合成
Figure BDA0003484970410000761
步骤1：((1r,4r)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯的合成
将((1r,4r)-4-氰基环己基)氨基甲酸叔丁酯(3g，13.37mmol)(如Journal ofMedicinal Chemistry,55(15):6866-6880；2012中所述地合成)溶解在40mL DMF中，并添加叠氮化钠(3.48g，53.5mmol)和氯化铵(7.15g，134mmol)，并将混合物在密封管中加热36小时。反应完成后，过滤混合物并浓缩滤液。将残余物溶解在乙酸乙酯中并用盐水洗涤有机层。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩，得到产物(收率＝2.3g，63％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.83(d,J＝7.9Hz,1H),3.30-3.21(m,1H),2.93-2.82(m,1H),2.09-1.99(m,2H),1.96-1.83(m,2H),1.53(m,2H),1.39(s,9H),1.37-1.22(m,2H)；LCMS：m/z＝268.46(M+H)+
步骤2：(1r,4r)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺三氟乙酸盐(Int.3a)的合成：
将((1r,4r)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯(2g，7.48mmol)溶解在40mL CH2Cl2中，并添加三氟乙酸(8.65ml，112mmol)，并将反应混合物在室温搅拌1小时。通过TLC监测完成脱保护后，将反应混合物蒸发至干，将固体用***研磨两次。将固体三氟乙酸盐过滤并用***洗涤(收率＝1.1g，88％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16-7.76(m,3H),3.18-3.02(m,1H),3.02-2.81(m,1H),2.18-1.97(m,4H),1.64-1.39(m,4H)；LCMS：m/z＝168.13(M+H)+
(1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺盐酸盐(Int.3b)的合成
按照与上文中针对步骤2中脱保护所描述的类似的程序，用4N盐酸的二氧六环溶液代替三氟乙酸，由((1r,4r)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)氨基甲酸叔丁酯合成(收率＝93％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.18(brs,3H),3.12-3.00(m,1H),3.00-2.89(m,1H),2.09(m,4H),1.67-1.45(m,4H)；LCMS：m/z＝168.13(M+H)+
(1S,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺(Int.4)的合成
Figure BDA0003484970410000771
按照与针对Int.3a所描述的类似的程序，由((1S,4S)-4-氰基环己基)氨基甲酸叔丁酯(如PCT国际申请公开号WO 2009145719中所述地合成)以三氟乙酸盐的形式合成。(收率＝51％)。LCMS：m/z＝168.13(M+H)+
1-(3-氨基丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(Int.5)的合成
Figure BDA0003484970410000772
步骤-1：1-(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：
将2-(3-羟基丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(600mg，2.92mmol)(如AngewandteChemie,International Edition,57(1):292-295；2018中所述地合成)和1H-吡唑-4-甲酸乙酯(451mg，3.22mmol)溶解在20mL THF，然后添加三苯基膦(997mg，3.80mmol)。滴加偶氮二甲酸二异丙酯(0.853ml，4.39mmol)，添加后将反应混合物在室温搅拌4小时。完成后，通过添加水淬灭反应并用乙酸乙酯萃取。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩得到粗产物，将其在柱上纯化得到纯产物(收率＝400mg，42％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(s,1H),7.90(s,1H),7.89-7.85(m,2H),7.77-7.74(m,2H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),4.21(t,J＝6.8Hz,2H),3.77(t,J＝6.5Hz,2H),2.33(p,J＝6.7Hz,2H),1.36(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z＝328.3(M+H)+
步骤-2：1-(3-氨基丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯：
按照Int.2的步骤3中所述类似的程序，由步骤1中得到的1-(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯合成(收率＝83％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),7.84(s,1H),4.24-4.18(m,4H),2.47(t,J＝6.6Hz,2H),1.84(m,2H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z＝198.2(M+H)+
2-(氨基甲基)烟酸甲酯盐酸盐(Int.6)的合成
按照J.of Heterocyclic Chemistry,1993,30(2):473-476中报道的程序，由2-氰基烟酸甲酯合成。
Figure BDA0003484970410000781
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(dd,J＝4.8,1.7Hz,1H),8.51(s,2H),8.38(dd,J＝7.9,1.7Hz,1H),7.62(dd,J＝7.9,4.8Hz,2H),4.52(q,J＝5.8Hz,2H),3.90(s,3H)。
1-(3-氨基丙基)-1,4-二氢-5H-四唑-5-酮(Int.7)的合成
Figure BDA0003484970410000782
步骤-1：2-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-四唑-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：
将4-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丁酸(1g，4.29mmol)(如European Journal ofMedicinal Chemistry,158:184-200；2018中所述地合成)悬浮在50mL DCM中，并向其中添加几滴DMF。在0℃滴加氯化亚砜(0.47ml，6.43mmol)并将反应混合物在室温搅拌1小时直到完全形成酰基氯。然后浓缩挥发物并将粘性残余物与甲苯共沸以除去任何痕量的过量氯化亚砜。然后将粗酰基氯溶解在叠氮基三甲基硅烷(4.55ml，34.3mmol)中并在密封管中在100℃加热12小时。然后将反应混合物冷却并添加甲醇，导致产物沉淀为白色固体(收率＝400mg,34％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.33(brs,1H),7.94-7.71(m,4H),3.91(t,J＝7.0Hz,2H),3.64(t,J＝7.1Hz,2H),2.09(m,2H)；LCMS：m/z＝274.2(M+H)+
步骤-2：1-(3-氨基丙基)-1,4-二氢-5H-四唑-5-酮：
按照Int.2的步骤3中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-四唑-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成(收率＝66％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.89-3.83(m,2H),2.68-2.63(m,2H),1.89-1.82(m,2H)。
3-(3-氨基丙基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(Int.8)的合成
Figure BDA0003484970410000791
步骤-1：4-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-N-羟基丁脒的合成：
将4-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丁腈(如J.of Organometallic Chemistry,620(1-2):94-105；2001中所述地合成)(4.5g，21.01mmol)溶解在50mL EtOH和10mL水的混合物中。添加盐酸羟胺(3.65g，52.5mmol)和K2CO3(4.35g，31.5mmol)并将反应在80℃加热24小时，之后将反应混合物浓缩并通过柱纯化(收率＝600mg，12％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),7.94-7.81(m,4H),5.36(brs,2H),3.58(t,J＝7.1Hz,2H),2.05-1.95(m,2H),1.86-1.75(m,2H)；LCMS：m/z＝248.33(M+H)+
步骤-2：2-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：
向4-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)-N-羟基丁脒(520mg，2.10mmol)在20ml THF中的溶液中添加CDI(443mg，2.73mmol)，并将反应混合物在80℃加热12小时。反应完成后，浓缩挥发物，将残余物溶解在乙酸乙酯中，将有机层用盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩得到粗产物，其纯度足以用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91-7.81(m,4H),7.78(brs,1H),3.63(t,J＝6.8Hz,2H),2.21-2.14(m,2H),1.91(t,J＝7.4Hz,2H)；LCMS：m/z＝274.21(M+H)+
步骤3：3-(3-氨基丙基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮：
按照Int.2的步骤3中所述类似的程序，由步骤2中得到的2-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。(收率＝40％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.83(t,J＝6.7Hz,2H),2.31(t,J＝6.9Hz,2H),1.75(t,J＝6.8Hz,2H)。
2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)乙-1-胺(Int.9)的合成
Figure BDA0003484970410000801
步骤-1：2-(2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮：
Figure BDA0003484970410000802
在室温将2-(2-溴乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(3g，11.81mmol)(Org.Biomol.Chem.,9(12):4498-4506；2011)、KI(0.39g，2.36mmol)和K2CO3(3.26g，23.61mmol)添加到(1R,5S)-8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐(1.77g,11.81mmol)在30mL DMF中的溶液中。将反应混合物在90℃加热12小时，之后通过添加水淬灭反应并用乙酸乙酯萃取。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩得到粗产物，将其通过柱色谱法纯化(收率＝2.5g，74％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.93-7.83(m,2H),7.77-7.71(m,2H),4.31-4.19(m,2H),3.79(t,J＝6.1Hz,2H),2.71-2.54(m,4H),2.41-2.23(m,2H),1.72-1.66(m,4H)；LCMS：m/z＝287.34(M+H)+
步骤-2：2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)乙-1-胺：
Figure BDA0003484970410000803
向2-(2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)乙基)异吲哚啉-1,3-二酮(1.5g，5.24mmol)在30mL乙醇中的溶液中添加肼(1.64ml，52.4mmol)并将混合物在回流下搅拌1小时。滤出沉淀的白色固体并用乙醇洗涤。将滤液真空浓缩并重新悬浮在乙酸乙酯中并再次过滤以除去痕量的邻苯二甲酰亚胺副产物。滤液浓缩后得到粘性黄色油状产物(收率＝0.82g,73％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.37-4.18(m,2H),2.80-2.69(m,2H),2.63-2.52(m,2H),2.41(dd,J＝6.5,5.2Hz,2H),2.37-2.29(m,2H),1.97-1.92(m,2H),1.92-1.83(m,2H)；GCMS：m/z＝156.18(M.+)
3-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙-1-胺(Int.10)的合成
Figure BDA0003484970410000804
步骤-1：2-(3-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由(1R,5S)-8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(Chem.Eur.J.,2014,20(6):1530-1538)合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90-7.83(m,2H),7.76-7.69(m,2H),4.38-4.22(m,2H),3.86-3.73(m,2H),2.66-2.51(m,2H),2.37(t,J＝6.6Hz,2H),2.32-2.18(m,2H),1.95-1.77(m,6H)；LCMS：m/z＝301.34(M+H)+
步骤-2：3-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(3-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.33-4.23(m,2H),2.77(t,J＝6.8Hz,2H),2.65-2.54(m,2H),2.36(t,J＝6.9Hz,2H),2.29-2.21(m,2H),1.93-1.81(m,5H),1.59(p,J＝6.8Hz,2H)；GCMS：m/z＝170.22(M.+)
4-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丁-1-胺(Int.11)的合成
Figure BDA0003484970410000811
步骤-1：2-(4-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丁基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由(1R,5S)-8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐和2-(4-溴丁基)异吲哚啉-1,3-二酮(ACS Med.Chem.Lett.,2016,7(3):245-249)合成。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.86(dd,J＝5.4,3.1Hz,2H),7.74(dd,J＝5.4,3.0Hz,2H),4.39-4.21(m,2H),3.72(t,J＝7.0Hz,2H),2.43-2.21(m,3H),2.00-1.80(m,3H),1.74(t,J＝7.4Hz,2H),1.70-1.59(m,4H),1.58-1.40(m,2H)；LCMS：m/z＝315.40(M+H)+
步骤-2：4-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丁-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(4-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丁基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.26(dd,J＝4.6,2.3Hz,2H),2.79(t,J＝6.7Hz,2H),2.61-2.53(m,2H),2.33-2.20(m,6H),1.90(dd,J＝9.3,2.0Hz,4H),1.86-1.80(m,2H),1.57-1.45(m,2H)；LCMS：m/z＝185.51(M+H)+
3-(4-氟哌啶-1-基)丙-1-胺(Int.12)的合成
Figure BDA0003484970410000821
步骤-1：2-(3-(4-氟哌啶-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由4-氟哌啶盐酸盐和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.89-7.82(m,2H),7.78-7.69(m,2H),4.69-4.44(m,1H),3.78(t,J＝6.9Hz,2H),2.63-2.48(m,2H),2.43(t,J＝6.9Hz,2H),2.40-2.26(m,2H),1.89(q,J＝6.9Hz,2H),1.81-1.70(m,4H)。LCMS：m/z＝290.59(M+H)+
步骤-2：3-(4-氟哌啶-1-基)丙-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(3-(4-氟哌啶-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.69(dt,J＝50.5,4.4Hz,1H),2.77(t,J＝6.8Hz,2H),2.59(d,J＝7.2Hz,3H),2.47-2.29(m,3H),1.95-1.85(m,4H),1.73-1.59(m,4H)。LCMS：m/z＝160.28(M+H)+
(R)-3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺(Int.13)的合成
Figure BDA0003484970410000822
步骤-1：(R)-2-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由(R)-3-氟吡咯烷盐酸盐和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90-7.78(m,2H),7.77-7.65(m,2H),5.10-5.01(m,1H),3.78(d,J＝7.1Hz,2H),2.89-2.64(m,3H),2.60-2.54(m,2H),2.40(td,J＝8.4,6.2Hz,1H),2.15-1.96(m,2H),1.90(t,J＝6.8Hz,2H)；LCMS：m/z＝277.2(M+H)+
步骤-2：(R)-3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的(R)-2-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.15-5.06(m,1H),3.03-2.92(m,1H),2.90-2.83(m,1H),2.80(t,J＝6.8Hz,2H),2.69-2.65(m,1H),2.58-2.48(m,2H),2.47-2.36(m,1H),2.25-2.14(m,1H),2.13-2.06(m,1H),1.69(dq,J＝8.1,6.8Hz,2H)；LCMS：m/z＝147.3(M+H)+
(S)-3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺(Int.14)的合成
Figure BDA0003484970410000831
步骤-1：(S)-2-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由(S)-3-氟吡咯烷盐酸盐和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90-7.78(m,2H),7.77-7.65(m,2H),5.10-5.01(m,1H),3.78(d,J＝7.1Hz,2H),2.89-2.64(m,3H),2.60-2.54(m,2H),2.40-2.37(m,1H),2.15-1.96(m,2H),1.90(t,J＝6.8Hz,2H)；LCMS：m/z＝277.2(M+H)+
步骤-2：(S)-3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的(S)-2-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.15-5.06(m,1H),3.03-2.92(m,1H),2.90-2.83(m,1H),2.80(t,J＝6.8Hz,2H),2.69-2.55(m,1H),2.58-2.48(m,2H),2.47-2.36(m,1H),2.25-2.14(m,1H),2.13-2.06(m,1H),1.69-1.65(m,2H)；LCMS：m/z＝147.3(M+H)+
3-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)丙-1-胺(Int.15)的合成
Figure BDA0003484970410000832
步骤-1：2-(3-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由4-(甲基磺酰基)哌啶盐酸盐和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88-7.82(m,4H),4.11-3.95(m,1H),3.67-3.57(m,2H),2.97-2.85(m,5H),2.32(t,J＝6.6Hz,2H),1.93-1.66(m,6H),1.36-1.07(m,2H)；LCMS：m/z＝351.34(M+H)+
步骤-2：3-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)丙-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(3-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ3.05-2.86(m,6H),2.66-2.54(m,2H),2.31(t,J＝7.2Hz,2H),2.09-1.82(m,4H),1.63-1.44(m,4H)；LCMS：m/z＝221.45(M+H)+
3-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺(Int.16)的合成
Figure BDA0003484970410000841
步骤-1：2-(3-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由3,3-二氟吡咯烷盐酸盐和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.93-7.82(m,2H),7.79-7.70(m,2H),3.80(t,J＝6.9Hz,2H),2.88(t,J＝13.3Hz,2H),2.71(t,J＝6.9Hz,2H),2.58(t,J＝7.0Hz,2H),2.16(dq,J＝14.7,7.2Hz,2H),1.88(p,J＝6.9Hz,2H)；LCMS：m/z＝295.21(M+H)+
步骤-2：3-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(3-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ2.91(t,J＝13.3Hz,2H),2.84-2.70(m,4H),2.55(t,J＝7.2Hz,2H),2.37-2.21(m,2H),1.70-1.60(m,2H)。
3-(3,3-二甲基吗啉代)丙-1-胺(Int.17)的合成
Figure BDA0003484970410000842
步骤1：2-(3-(3,3-二甲基吗啉代)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮：按照Int.9的步骤1中所述类似的程序，由3,3-二甲基吗啉(Eur.J.Org.Chem.,2011,17:3156–3164)和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91-7.80(m,2H),7.79-7.68(m,2H),3.75-3.70(m,2H),3.32(s,2H),2.77(t,J＝6.7Hz,2H),2.58-2.51(m,2H),2.41(t,J＝6.8Hz,2H),1.57(p,J＝6.8Hz,2H),1.01(s,6H)；LCMS：m/z＝303.1(M+H)+
步骤-2：3-(3,3-二甲基吗啉代)丙-1-胺：按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(3-(3,3-二甲基吗啉代)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮合成。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.75-3.70(m,2H),3.32(s,2H),2.77(t,J＝6.7Hz,2H),2.58-2.51(m,2H),2.41(t,J＝6.8Hz,2H),1.57(p,J＝6.8Hz,2H),1.01(s,6H)；LCMS：m/z＝172.95(M+H)+
(1S,3S)-3-氨基环丁烷-1-甲酸乙酯(Int.18)的合成
Figure BDA0003484970410000851
按照WO2016/115090A1中报道的程序，由(1R,3R)-3-羟基环丁烷-1-甲酸乙酯合成。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.17-4.08(m,2H),3.47-3.29(m,1H),2.67(tdd,J＝9.4,8.5,7.1Hz,1H),2.61-2.48(m,2H),2.02-1.88(m,2H),1.29-1.24(m,4H)。
(1R,3R)-3-氨基环丁烷-1-甲酸乙酯(Int.19)的合成
Figure BDA0003484970410000852
按照WO2016/115090A1中报道的程序，由(1S,3S)-3-羟基环丁烷-1-甲酸乙酯合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.08(q,J＝7.1Hz,2H),3.58(dtd,J＝7.9,6.9,5.8Hz,1H),3.09-3.01(m,1H),2.41-2.31(m,2H),2.10(tdd,J＝9.8,6.9,2.7Hz,2H),1.19(t,J＝7.1Hz,3H)。
1-氰基环丙烷-1-甲酸乙酯(Int.20)的合成
Figure BDA0003484970410000853
步骤-1：1-氰基环丙烷-1-甲酸乙酯的合成：
将1,2-二溴乙烷(19.93g，106mmol)溶解在DMF(30ml)中并冷却至0℃。添加2-氰基乙酸乙酯(10g，88mmol)、K2CO3(61.1g，442mmol)并将所得黄色浆液在120℃搅拌12小时。将所得混合物用乙酸乙酯萃取两次，并将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到粗物质。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ4.27(q,J＝7.2Hz,2H),1.68(dd,J＝3.8,3.1Hz,2H),1.65-1.59(m,2H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤-2：1-(氨基甲基)环丙烷-1-甲酸乙酯的合成
向1-氰基环丙烷-1-甲酸乙酯(1.0g，7.19mmol)在乙醇(体积：50ml)中的溶液中添加铝镍催化剂，Raney型合金，粉末Al-Ni 50/50(0.630g，7.19mmol)(用乙醇洗涤数次)并在Parr振荡器中在H2压力(45psi)下搅拌6小时。将反应混合物通过硅藻土床过滤并减压浓缩，得到粗产物，将其原样使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.06(dq,J＝12.1,7.1Hz,2H),3.37-3.26(m,2H),1.18(q,J＝7.0Hz,3H),1.09(h,J＝4.0Hz,1H),1.04(q,J＝3.8Hz,1H),0.98-0.91(m,1H),0.81(q,J＝3.8Hz,1H)；LCMS：m/z＝144.2(M+H)+
2-(2-氨基乙基)烟酸甲酯二盐酸盐(Int.21)的合成
Figure BDA0003484970410000861
步骤-1：2-(溴甲基)烟酸甲酯：
向2-甲基烟酸甲酯(4.5g，29.8mmol)、NBS(6.36g，35.7mmol)、AIBN(0.49g，2.98mmol)在50mL四氯化碳中的搅拌溶液在90℃在氮气下搅拌16小时。一旦冷却，将反应混合物用25mL水稀释，将水层用二氯甲烷(100mL×2)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并真空浓缩，将所得残余物通过快速色谱法使用18-20％乙酸乙酯的己烷溶液纯化，得到期望的产物，为2-(溴甲基)烟酸甲酯(收率＝3.2g，47％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.73(dd,J＝4.8,1.8Hz,1H),8.30(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.45-7.29(m,1H),5.06(s,2H),4.00(s,3H)。
步骤-2：2-(氰基甲基)烟酸甲酯：
向冷却至0-5℃的2-(溴甲基)烟酸甲酯(3.0g，13.04mmol)在50mL乙腈中的搅拌溶液中添加TBAF(5.11g，19.56mmol)和TMS-CN(2.59g，26.1mmol)，并在氮气下在25-30℃搅拌16小时。通过TLC监测反应进程。完成后，将反应混合物用25mL水稀释，将水层用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。将合并的有机层经硫酸钠干燥并真空浓缩，将所得残余物通过快速色谱法使用20-40％乙酸乙酯的己烷溶液纯化，得到期望的2-(氰基甲基)烟酸甲酯(收率＝1.6g，70％)。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.78(dd,J＝4.8,1.8Hz,1H),8.37(dd,J＝7.9,1.8Hz,1H),7.43(dd,J＝8.0,4.8Hz,1H),4.45(s,2H),3.99(s,3H)。
步骤-3：2-(2-氨基乙基)烟酸甲酯二盐酸盐：
在parr振荡器反应器中，向2-(氰基甲基)烟酸甲酯(0.50g，2.84mmol)在甲醇：DCM(体积：30ml，比例：3:1)中的搅拌溶液中添加Pd/C(0.302g，0.284mmol)和HCl(0.35ml，4.26mmol)，并在parr振荡器中将反应在50psi的氢气压力下搅拌3小时。将反应通过硅藻土床过滤并且将硅藻土床用过量的MeOH洗涤。将滤液减压浓缩，得到2-(2-氨基乙基)烟酸甲酯盐酸盐(收率＝0.5g，81％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79-8.71(m,1H),8.33-8.23(m,1H),7.55-7.45(m,1H),3.92-3.88(m,3H)。
2-(3-氨基丙基)苯甲酸甲酯(Int.22)的合成
Figure BDA0003484970410000871
步骤-1：2-(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)苯甲酸甲酯的合成：
将2-碘苯甲酸甲酯(3.00g，11.45mmol)溶解在20mL DMF中，并通过通入氮气使溶液脱气。向其中添加2-(3-(9-硼杂二环[3.3.1]壬-9-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(3.54g，11.45mmol)(如Angewandte Chemie,International Edition,46(40),7671-7673；2007中所述地合成)在30mL THF中的溶液，然后添加四(三苯基膦)钯(0)(0.66g，0.57mmol)和3MK2CO3在15mL水中的脱气溶液。将反应混合物在80℃加热16小时，然后用乙酸乙酯稀释，将有机层用盐水洗涤。将有机层经Na2SO4干燥，并将粗产物在柱上纯化(收率＝1.2g，32％)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.90-7.85(m,2H),7.75-7.71(m,2H),7.42(td,J＝7.5,1.5Hz,1H),7.31-7.23(m,3H),3.86(s,3H),3.80(t,J＝7.1Hz,2H),3.06-2.96(m,2H),2.10-1.96(m,2H)；LCMS：m/z＝323.84(M+H)+
步骤-2：2-(3-氨基丙基)苯甲酸甲酯的合成：
按照Int.9的步骤2中所述类似的程序，由步骤1中得到的2-(3-(1,3-二氧代异吲哚啉-2-基)丙基)苯甲酸甲酯合成(收率＝150mg，84％)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.47-7.41(m,2H),7.28-7.24(m,2H),3.91(s,3H),3.06-2.99(m,2H),2.78(t,J＝7.0Hz,2H),1.83-1.74(m,2H)；GCMS：m/z＝193.14(M).+
2-(3-(4-乙氧基-4-氧化-1,4-氮杂磷杂环己烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(Int.23)的合成
Figure BDA0003484970410000881
步骤-1：2-(3-(4-乙氧基-4-氧化-1,4-氮杂磷杂环己烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮的合成：
向4-乙氧基-1,4-氮杂磷杂环己烷4-氧化物(1.50g，9.19mmol)(根据WO2008090570中报道的程序制备)在25mL DMF中的溶液中添加碳酸钾(3.18g，22.98mmol)和2-(3-溴丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(3.20g，11.95mmol)，并将反应混合物在25℃搅拌16小时。通过TLC监测反应。完全转化后，将反应混合物浓缩以除去DMF并通过硅胶柱色谱法使用0-5％甲醇的DCM溶液纯化，得到2-(3-(4-乙氧基-4-氧化-1,4-氮杂磷杂环己烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(收率＝2.1g，65％)。LCMS：351.2(M+H)+
步骤-2：1-(3-氨基丙基)-4-乙氧基-1,4-氮杂磷杂环己烷4-氧化物的合成：
向2-(3-(4-乙氧基-4-氧化-1,4-氮杂磷杂环己烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(2.100g，5.99mmol)在30mL乙醇中的溶液中滴加肼一水合物(1.78ml，36.0mmol)，并将反应混合物在25℃搅拌16小时。通过布氏漏斗过滤得到的固体并将滤液浓缩，得到1-(3-氨基丙基)-4-乙氧基-1,4-氮杂磷杂环己烷4-氧化物(1.1g，4.99mmol，83％收率)。LCMS：m/z＝221.4(M+H)+
实施例1：(1S,4S)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物1)
Figure BDA0003484970410000891
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(0.25g，0.33mmol)和(1s,4s)-4-氨基环己烷-1-甲酸甲酯盐酸盐(0.08g，0.42mmol)溶解在10mL DMF中。添加TBTU(0.17g，0.53mmol)然后添加二异丙基乙胺(0.35ml，2.00mmol)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，并将粗产物原样用于下一步骤。LCMS：m/z＝889.19(M+H)+
然后通过将甲酯(0.12g，0.14mmol)溶解在25mL THF-MeOH-H2O(2:2:1)混合物中然后添加LiOH(34mg，0.81mmol)而使其经历酯水解。将反应混合物在室温搅拌过夜，浓缩挥发物，然后添加2N HCl，导致产物酸的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤并通过反相制备色谱法纯化得到呈白色固体的最终产物。(收率＝30mg，25％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)8.29-8.16(m,2H),8.01(brs,1H),7.71(s,1H),7.70(s,1H),7.54(s,1H),7.49(s,1H),7.39(brs,1H),6.55(s,2H),5.50-5.46(m,2H),4.88(brs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.48-4.37(m,4H),4.21-4.00(m,1H),3.94-3.81(m,1H),2.33-2.25(m,2H),2.12-1.96(m,8H),1.74-1.64(m,2H),1.64-1.48(m,4H),1.26(m,6H)；LCMS：m/z＝875.06(M+H)+；HPLC纯度：98.19％
实施例2：(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸钠盐(化合物2)
Figure BDA0003484970410000901
按照针对实施例1的合成所述类似的程序，由中间体1和(1R,4R)-4-氨基环己烷-1-甲酸甲酯盐酸盐合成。
或者，也可以按照下述程序使用不同的偶联剂进行偶联。
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(19g，25.3mmol)和(1R,4R)-4-氨基环己烷-1-甲酸甲酯盐酸盐(6.38g,32.9mmol)溶解在150mL DMSO中。向混合物中添加HOBt(11.64g，76mmol)和EDC(19.43g,101mmol)，然后添加DIPEA(31.0ml，177mmol)，并将反应在室温搅拌18小时。通过LCMS监测反应完成后，将混合物在搅拌下倒入水中，导致粗产物沉淀为固体，将其用乙腈洗涤，然后用***洗涤并干燥。将粗产物经柱纯化以除去极性杂质，然后在悬浮于1L THF-MeOH(1:1)中并加热至70℃持续1小时后进行溶剂处理。冷却至室温后，过滤固体，得到纯化的产物(收率＝15g，67％)。
然后通过将甲酯(15g，16.87mmol)溶解在325mL THF-MeOH-H2O(2:2:1)混合物中然后添加LiOH(5.67g，135mmol)而使其经历酯水解。将反应混合物在室温搅拌过夜，浓缩挥发物，然后添加2N HCl，导致产物酸的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，得到呈白色固体的最终产物。(收率＝13g，88％)。
然后通过将酸(11.7g，13.37mmol)悬浮在300mL甲醇中并添加溶解在60mL水中的碳酸氢钠(1.11g，13.24mmol)，将其转化为其钠盐。将非均相混合物在室温搅拌1小时，此时悬浮液已澄清为乳状溶液。浓缩挥发物并将残余物冻干，得到标题化合物的钠盐(收率＝11g，92％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13(brs,1H),7.94(brs,1H),7.70(m,2H),7.47(s,1H),7.42(s,1H),7.28(brs,1H),6.48(s,2H),5.56-5.38(m,2H),4.88(brs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43-4.36(m,4H),3.81-3.70(m,1H),2.31-2.24(m,2H),2.07(s,6H),2.05-2.00(m,1H),1.97-1.85(m,4H),1.43-1.32(m,4H),1.24(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝875.18(M+H)+；HPLC纯度：99.02％
实施例3：(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺钠盐(化合物3)
Figure BDA0003484970410000911
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(0.35g，0.47mmol)和3-(1H-四唑-5-基)丙-1-胺(如Synth.Commun.,2000,30(9),1587-1591中所述地合成)(0.16g，1.35mmol)溶解在10mL DMF中。添加TBTU(0.22g，0.7mmol)，然后添加二异丙基乙胺(0.33ml，1.86mmol)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，将粗产物通过反相制备色谱法纯化，得到呈灰白色固体的纯产物。然后如实施例2所述将分离的化合物转化为其钠盐(收率＝72mg，19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(brs,1H),9.04(brs,1H),8.01(brs,1H),7.77-7.68(m,2H),7.63-7.48(m,2H),7.36(brs,1H),6.54(s,2H),5.58-5.34(m,2H),4.89(brs,4H),4.57-4.50(m,6H),4.46-4.39(m,2H),3.42-3.38(m,2H),2.75(t,J＝7.1Hz,2H),2.32-2.25(m,2H),2.08(s,6H),1.95-1.84(m,2H),1.26(t,J＝6.5Hz,6H)；LCMS：m/z＝858.93(M+H)+；HPLC纯度：99.74％
实施例4：(E)-N-(2-(1H-四唑-5-基)乙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物4)
Figure BDA0003484970410000921
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(0.35g,0.47mmol)和2-(1H-四唑-5-基)乙-1-胺(0.16g，1.4mmol)(Int.2)溶解在10mL DMF中。添加TBTU(0.22g，0.7mmol)，然后添加二异丙基乙胺(0.33ml，1.86mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，将粗产物通过反相制备色谱法纯化，得到呈灰白色固体的纯产物(收率＝35mg，9％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.90(brs,2H),8.67(t,J＝5.7Hz,1H),8.06-7.96(m,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),7.53(s,1H),7.45(s,1H),7.38(s,1H),6.55(s,2H),5.49(s,2H),4.88(s,4H),4.53(m,4H),4.42(q,J＝6.0Hz,4H),3.65(q,J＝6.7Hz,3H),3.17-3.14(m,2H),2.35-2.26(m,2H),2.08(s,6H),1.29-1.23(m,6H)；LCMS：m/z＝845.05(M+H)+；HPLC纯度：99.78％
实施例-5：(E)-2-(2-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)乙基)苯甲酸钠盐(化合物5)
Figure BDA0003484970410000922
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(4.2g，5.60mmol)和2-(2-氨基乙基)苯甲酸甲酯盐酸盐(如AngewandteChemie,International Edition,56(43),13351-13355；2017中报道地合成)(1.81g,8.40mmol)溶解在20mL DMF中。添加TBTU(5.40g，16.80mmol)，然后添加二异丙基乙胺(3.91ml，22.41mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，将粗产物通过反相制备色谱法纯化，得到甲酯中间体(收率＝1.1g，22％)。LCMS：m/z＝911.06(M+H)+
然后通过将甲酯(1.05g，1.15mmol)溶解在45mL THF-MeOH-H2O(3:3:1)混合物中然后添加LiOH(0.193g，8.07mmol)而使其经历酯水解。将反应混合物在室温搅拌过夜，浓缩挥发物，然后添加2N HCl，导致产物酸的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，得到呈白色固体的最终产物(0.99g，96％)，并按照实施例2中所述的程序转化为其钠盐。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.81(brs,2H),11.45(brs,1H),8.32(brs,1H),7.70(s,1H),7.65-7.54(m,3H),7.54-7.45(m,1H),7.31(brs,1H),7.23-7.14(m,2H),7.13-7.04(m,1H),6.53(s,2H),5.50(brs,2H),4.87(brs,4H),4.56-4.42(m,8H),3.49-3.43(m,2H),3.11-3.01(m,2H),2.36-2.33(m,2H),2.08(s,6H),1.26(t,J＝7.7Hz,6H)；LCMS：m/z＝897.06(M+H)+；HPLC纯度：99.04％
实施例-6：(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺钠盐(化合物6)
Figure BDA0003484970410000931
按照针对实施例1的合成所述类似的程序，由中间体1和(1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺三氟乙酸盐(Int.3a)合成，并按照实施例2中所述的程序转化为其钠盐。(收率＝60mg，14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,2H),8.31(d,J＝7.8Hz,1H),8.01(brs,1H),7.71(s,2H),7.54(d,J＝1.4Hz,1H),7.51(d,J＝1.4Hz,1H),7.39(brs,1H),6.55(s,2H),5.49(s,2H),4.89(s,4H),4.53(d,J＝7.3Hz,4H),4.44(d,J＝5.3Hz,4H),3.96-3.82(m,1H),2.98(t,J＝11.8Hz,1H),2.33-2.27(m,2H),2.17-2.09(m,3H),2.08(s,6H),2.05-1.97(m,2H),1.70-1.52(m,4H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H).)；LCMS：m/z＝899.9(M+H)+；HPLC纯度：99.22％
实施例-7：(E)-N-((1S,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物7)
Figure BDA0003484970410000941
按照针对实施例1的合成所述类似的程序，由中间体1和(1S,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺三氟乙酸盐(Int.4)合成。(收率＝15mg，8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(brs,2H),8.19-8.13(m,1H),8.00(brs,1H),7.71(s,1H),7.68(s,1H),7.53(d,J＝1.4Hz,1H),7.46(d,J＝1.4Hz,1H),7.38(brs,1H),6.54(s,2H),5.47(d,J＝1.9Hz,2H),4.88(s,4H),4.52(d,J＝7.4Hz,4H),4.41(dt,J＝11.5,5.5Hz,4H),4.05-3.88(m,1H),3.06-2.91(m,1H),2.33-2.19(m,4H),2.08(s,6H),1.96-1.85(m,2H),1.79-1.69(m,2H),1.65-1.53(m,2H),1.30-1.24(m,6H)；LCMS：m/z＝899.19(M+H)+；HPLC纯度：98.38％
实施例-8：(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸钠盐(化合物8)
Figure BDA0003484970410000951
按照针对实施例-1的合成所述类似的程序，由中间体1和1-(3-氨基丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(Int.5)合成，并按照实施例2中所述的程序转化为其钠盐。(收率＝650mg，11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(brs,2H),8.55(t,J＝5.4Hz,1H),8.29(s,1H),8.02(s,1H),7.81(s,1H),7.71(d,J＝1.2Hz,1H),7.69(d,J＝1.2Hz,1H),7.53(d,J＝1.3Hz,1H),7.48(d,J＝1.4Hz,1H),7.38(s,1H),6.55(s,2H),5.50(d,J＝1.8Hz,2H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(q,J＝4.9Hz,4H),4.22(t,J＝6.7Hz,2H),3.28-3.23(m,2H),2.55-2.52(m,2H),2.34-2.24(m,2H),2.08(s,6H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝901.19(M+H)+；HPLC纯度：99.36％
实施例-9：(E)-2-((4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)甲基)烟酸(化合物9)
Figure BDA0003484970410000952
按照针对实施例-1的合成所述类似的程序，由中间体1和2-(氨基甲基)烟酸甲酯盐酸盐(Int.6)合成(收率＝12mg，5.2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.91(s,2H),9.04(s,1H),8.68-8.61(m,1H),8.21(dd,J＝7.8,1.8Hz,1H),8.15(s,1H),8.01(s,1H),7.72(d,J＝5.2Hz,2H),7.56(d,J＝13.1Hz,2H),7.46-7.35(m,2H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.92(d,J＝18.5Hz,6H),4.54(d,J＝7.4Hz,4H),4.44(s,4H),2.33-2.28(m,2H),2.08(s,6H),1.28-1.20(m,6H)。LCMS：m/z＝883.93(M+H)+；HPLC纯度：99.04％
实施例-10：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-四唑-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物10)
Figure BDA0003484970410000961
按照针对实施例-1的合成所述类似的程序，由中间体1和1-(3-氨基丙基)-1,4-二氢-5H-四唑-5-酮(Int.7)合成(收率＝16mg，8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.90(brs,2H),8.62(t,J＝5.6Hz,1H),8.01(brs,1H),7.71(s,1H),7.69(s,1H),7.54(d,J＝1.4Hz,1H),7.50(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(t,J＝5.2Hz,4H),3.94(t,J＝7.0Hz,2H),3.40-3.36(m,2H),2.34-2.25(m,2H),2.07(s,6H),1.99(q,J＝7.0Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝875.06(M+H)+；HPLC纯度：99.70％
实施例-11：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物11)
Figure BDA0003484970410000962
按照针对实施例-1的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(3-氨基丙基)-1,2,4-噁二唑-5(4H)-酮(Int.8)合成(收率＝12mg，7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.90(brs,2H),8.63(t,J＝5.6Hz,1H),8.01(brs,1H),7.78-7.68(m,2H),7.53(s,1H),7.49(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(s,4H),4.54(t,J＝7.3Hz,4H),4.44(brs,4H),3.38-3.31(m,2H),2.56-2.53(m,2H),2.34-2.24(m,2H),2.08(s,6H),1.87(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝875.06(M+H)+；HPLC纯度：97.09％
实施例12：(8S,E)-N4-((1R,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺钠盐(化合物12)
Figure BDA0003484970410000971
步骤1：4-氯-3-(3-羟基-2-(甲氧基甲氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯的合成
Figure BDA0003484970410000972
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸乙酯(50g，204mmol)、2-(甲氧基甲氧基)丙烷-1,3-二醇(55.4g，407mmol)、三苯基膦(107g,407mmol)在THF(400ml)中的冷却溶液中滴加DIAD(79ml，407mmol)，并将反应混合物在25℃搅拌2小时。通过TLC监测反应进程，并在完成后减压浓缩，得到粗物质。将粗产物通过柱色谱法纯化，得到期望的产物，为对映异构体的混合物。进一步地，通过手性制备型HPLC通过使用Chiral Pak IG 30X250 mm 5μ将对映异构体分离为峰1(RT：6.47)和峰2(RT：7.22)。
峰1：4-氯-3-(3-羟基-2-(甲氧基甲氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯(对映异构体1，15.5gm，36.9％)
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.06(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(d,J＝1.8Hz,1H),4.90-4.82(m,2H),4.44(q,J＝7.1Hz,2H),4.30(d,J＝5.4Hz,2H),4.14(m,1H),3.93(dd,J＝12.0,3.7Hz,1H),3.85(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H),3.48(s,3H),1.44(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z 362[M+H]+
峰2：4-氯-3-(3-羟基-2-(甲氧基甲氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯(对映异构体2，12.6gm，29.5％)
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.06(d,J＝1.8Hz,1H),7.80(d,J＝1.8Hz,1H),4.90-4.82(m,2H),4.44(q,J＝7.1Hz,2H),4.30(d,J＝5.4Hz,2H),4.14(m,1H),3.93(dd,J＝12.0,3.7Hz,1H),3.85(dd,J＝12.0,5.4Hz,1H),3.48(s,3H),1.44(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z 362[M+H]+
步骤2：4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-(甲氧基甲氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003484970410000981
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸叔丁酯(7.52g，27.5mmol)、4-氯-3-(3-羟基-2-(甲氧基甲氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸乙酯(步骤1的对映异构体1，10.0g，27.5mmol)、三苯基膦(10.82g，41.2mmol)在THF(200ml)中的冷却溶液中滴加DIAD(10.69ml，55.0mmol)，并将反应混合物在25℃搅拌2小时。通过TLC监测反应进程，并且在完成后减压浓缩得到粗物质。将其通过柱色谱法纯化，得到期望的产物(8.89gm，收率：70.2％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.10(d,J＝1.8Hz,1H),8.04(d,J＝1.7Hz,1H),7.90(d,J＝1.8Hz,1H),7.84(d,J＝1.8Hz,1H),4.83(s,2H),4.58(m,2H),4.49(dd,J＝10.4,5.6Hz,2H),4.43(q,J＝4.4Hz,1H),4.38(q,J＝7.1Hz,2H),3.34(s,3H),1.57(s,9H),1.35(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤3：(S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003484970410000991
向4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-(甲氧基甲氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯(步骤2，12g，19.37mmol)、四溴化碳(1.285g，3.87mmol)、三苯基膦(1.016g，3.87mmol)在二氯乙烷(200ml)中的冷却溶液中添加，并将反应混合物在60℃搅拌4小时。通过TLC监测反应进程，并且在完成后将其浓缩并通过柱色谱法纯化，得到期望的产物(7.99gm，收率：72.4％)。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.10(d,J＝1.8Hz,1H),8.00(d,J＝1.8Hz,1H),7.85(d,J＝1.8Hz,1H),7.81(d,J＝1.8Hz,1H),4.60(q,J＝5.1Hz,1H),4.51-4.40(m,6H),1.63(s,9H),1.44(t,J＝7.2Hz,3H)。
通过由(S)-环氧乙烷-2-基甲醇合成来确认(S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯的绝对立体化学
(S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003484970410000992
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸乙酯(2.0g，8.14mmol)、(S)-环氧乙烷-2-基甲醇(0.603g，8.14mmol)、三苯基膦(4.27g，16.29mmol)在THF(150ml)中的冷却溶液中滴加DIAD(3.17ml，16.29mmol)，并将反应在25℃搅拌2小时。通过TLC监测反应进程，并在完成后将其浓缩得到粗物质。将粗产物通过柱色谱法纯化，得到(R)-4-氯-3-硝基-5-(环氧乙烷-2-基甲氧基)苯甲酸乙酯(1.4gm，收率：57％)。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.07(d,J＝1.7Hz,1H),7.83(d,J＝1.8Hz,1H),4.51(dd,J＝11.2,2.6Hz,1H),4.44(q,J＝7.1Hz,2H),4.16(dd,J＝11.2,5.6Hz,1H),3.54-3.42(m,1H),2.99(t,J＝4.5Hz,1H),2.89(dd,J＝4.8,2.6Hz,1H),1.44(t,J＝7.1Hz,3H)。
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸叔丁酯(1.524g，5.57mmol)、(R)-4-氯-3-硝基-5-(环氧乙烷-2-基甲氧基)苯甲酸乙酯(1.4g，4.64mmol)、2,6-二甲基吡啶(1.622ml，13.92mmol)在IPA 100ml中的溶液中添加，并将反应混合物在密封管中在100℃搅拌12小时。用TLC监测反应进程，并在完成后减压浓缩得到粗物质，将其通过柱色谱法纯化，得到(S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯(2.2gm，收率：75％)。
通过用步骤3产物((S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯)运行手性HPLC来确认该产物的绝对立体化学，因为对于这两种产物，手性HPLC(Chiral Pak IG 30X250 mm 5μ)中的RT相同(RT：9.99)，而其(R)对映异构体的RT为11.13。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.10(d,J＝1.8Hz,1H),8.00(d,J＝1.8Hz,1H),7.85(d,J＝1.8Hz,1H),7.81(d,J＝1.8Hz,1H),4.60(q,J＝5.1Hz,1H),4.49-4.39(m,6H),1.63(s,9H),1.45(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤4：(S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003484970410001011
向(S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-羟基丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯(步骤3，8.0g，13.90mmol)、2,6-二甲基吡啶(5.96g，55.6mmol)在二氯甲烷(100ml)中的冷却溶液中添加三氟甲磺酸酐(7.85g，27.8mmol)，并将反应混合物在0℃搅拌4小时。通过TLC监测反应进程，并在完成后将其用二氯甲烷稀释，用1N HCl淬灭，分离两层，将有机层用水洗涤，浓缩并通过柱色谱法纯化(9.8gm，收率：98％)。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.15(d,J＝1.7Hz,1H),8.05(d,J＝1.7Hz,1H),7.83(d,J＝1.8Hz,1H),7.79(d,J＝1.7Hz,1H),5.63(q,J＝4.7Hz,1H),4.67(t,J＝5.3Hz,4H),4.47(q,J＝7.1Hz,2H),1.64(s,9H),1.45(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤5：3-((2R)-2-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)丙氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酸叔丁酯的合成
Figure BDA0003484970410001012
向(1R,5S)-3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐(4.15g，27.7mmol)在THF(100ml)中的冷却溶液中添加三乙胺(7.72ml，55.4mmol)并在0℃搅拌30分钟，然后添加(S)-4-氯-3-(3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)-2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酸叔丁酯(步骤4，9.8g，13.85mmol)并在相同温度下搅拌12小时。通过TLC监测反应进程，并在完成后将其浓缩并通过柱色谱法纯化，得到期望的化合物(6.5gm，收率：70.6％)。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.07(d,J＝1.7Hz,1H),7.97(d,J＝1.7Hz,1H),7.85(s,1H),7.81(s,1H),4.44(q,J＝7.2Hz,6H),3.77(s,2H),3.61(d,J＝10.5Hz,2H),3.40-3.20(m,3H),2.06(s,4H),1.62(s,9H),1.44(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z 669.97[M+H]+
步骤6：(7R,E)-1,13-二氨基-7-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯的合成
Figure BDA0003484970410001021
向密封管中的3-((2R)-2-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-3-(2-氯-5-(乙氧基羰基)-3-硝基苯氧基)丙氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酸叔丁酯(步骤5，6.5g，9.69mmol)在乙醇(80ml)中的溶液中添加(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐(2.159g，13.57mmol)和DIPEA(13.55ml，78mmol)并将反应混合物在105℃搅拌24小时。通过TLC监测反应进程，并在完成后将其冷却至室温，将得到的固体过滤并干燥，得到粗物质，为期望的产物(5.96gm，收率：89.8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60(d,J＝2.0Hz,2H),7.55(d,J＝1.9Hz,2H),5.63(s,2H),4.37(q,J＝6.1,5.5Hz,4H),4.29(q,J＝7.1Hz,5H),4.18(s,1H),4.06(m,2H),3.77(dd,J＝9.8,5.5Hz,2H),3.66-3.58(m,2H),3.50-3.40(m,2H),1.95(d,J＝7.0Hz,2H),1.82(t,J＝6.4Hz,2H),1.53(s,9H),1.31(t,J＝7.1Hz,3H)；LCMS：m/z 684.27[M+H]+
步骤7：(7R,E)-1,13-二氨基-7-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯的合成
Figure BDA0003484970410001031
在0℃向(7R,E)-1,13-二氨基-7-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯(步骤6，6.0g，8.78mmol)在THF(75ml)和乙醇(75ml)中的搅拌悬浮液中添加连二亚硫酸钠(15.28g,88mmol)(在50ml水中的溶液)。在相同温度下添加氢氧化铵(27.3ml，176mmol)。将反应混合物升温至25℃并搅拌3小时。通过LCMS监测反应进程。滤出固体并在真空下从母液中除去有机溶剂。添加水(20ml)并用10％甲醇的乙酸乙酯溶液萃取(3次)。将有机层用硫酸钠干燥并浓缩，得到粗残余物。将固体在***中洗涤，得到标题化合物(5.1gm，收率：93.2％)。
LCMS：m/z 624.09[M+H]+
步骤8：(8R,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸12-叔丁酯4-乙酯的合成
Figure BDA0003484970410001032
在0℃向(7R,E)-1,13-二氨基-7-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸3-叔丁酯11-乙酯(步骤7，5.1g，8.18mmol)在DMF(体积：50ml)中的搅拌溶液中添加1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(2.87g，14.72mmol)在1ml DMF中的溶液，搅拌30分钟，然后在0℃添加EDC(6.27g，32.7mmol)和三乙胺(9.12ml，65.4mmol)并搅拌16小时。通过LCMS监测反应进程。完成后，将混合物减压浓缩，添加水，将固体过滤并干燥得到粗物质，将其通过柱色谱法纯化，使用甲醇的二氯甲烷溶液作为洗脱剂，得到期望的产物(4.0gm，收率：52.8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(d,J＝6.7Hz,2H),7.84(d,J＝1.3Hz,1H),7.82(d,J＝1.3Hz,1H),7.63(d,J＝1.4Hz,1H),7.55(d,J＝1.3Hz,1H),6.49(s,2H),5.33(s,2H),4.95(m,2H),4.87-4.75(m,2H),4.63-4.55(m,2H),4.49(d,J＝6.7Hz,4H),4.37-4.30(m,4H),3.97(m,2H),3.70(d,J＝10.2Hz,2H),3.60(d,J＝4.4Hz,2H),3.52(d,J＝10.3Hz,2H),2.90(d,J＝5.2Hz,1H),2.30(s,6H),1.82(d,J＝7.7Hz,2H),1.56(s,9H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H),1.24(m,6H)。
LCMS：m/z 946.32[M+H]+
步骤9：(8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-4-(乙氧基羰基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸的合成
Figure BDA0003484970410001041
在25℃向(8R,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸12-叔丁酯4-乙酯(步骤8，4.0g，4.23mmol)在DCM(40ml)中的搅拌溶液中添加三氟乙酸(13.03ml，169mmol)并搅拌4小时。通过LCMS监测反应进程。完成后，将混合物减压浓缩并用***洗涤，干燥得到粗物质，将其用于进一步转化(3.75gm，收率：99％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.00(s,2H),10.40-10.25(br s,1H),7.89(d,J＝1.2Hz,1H),7.87(d,J＝1.2Hz,1H),7.75(d,J＝1.3Hz,1H),7.71(s,1H),6.54(s,2H),5.53(s,2H),5.02-4.92(m,4H),4.88-4.76(m,2H),4.51(q,J＝7.6Hz,6H),4.35(q,J＝7.0Hz,3H),4.28(m,1H),4.07-3.98(m,2H),3.86(s,2H),3.69-3.61(m,1H),2.38-2.29(m,2H),2.18(q,J＝7.5,7.0Hz,2H),2.06(s,6H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H),1.26(t,J＝7.1Hz,6H)。
LCMS：m/z 890.06[M+H]+
步骤10：(8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸乙酯的合成
Figure BDA0003484970410001051
将(8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-4-(乙氧基羰基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸(步骤9，3.75g，4.21mmol)溶解在DMF(10ml)中，向其中添加TBTU(1.764g，5.48mmol)和DIPEA(3.68ml，21.07mmol)。添加氯化铵(7.89g，147mmol)并将反应混合物在25℃搅拌2小时。通过LCMS监测反应进程。将反应混合物浓缩至干，然后添加水，将得到的固体过滤并干燥，得到期望的产物(3.70gm，收率：98％)。
LCMS：m/z 889.06[M+H]+
步骤11：(8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸的合成
Figure BDA0003484970410001061
在室温向(8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸乙酯(步骤10，3.70g，4.16mmol)在乙醇(40ml)和THF(：40ml)中的搅拌溶液中添加在水(10ml)中的氢氧化锂水合物(1.746g，41.6mmol)溶液并在50℃搅拌16小时。通过LCMS监测反应进程，将反应减压浓缩并添加水，用1N HCl将pH调至酸性，固体沉淀出来，将其过滤，干燥，得到标题化合物(3.4gm，收率：94.8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20-12.81(m,2H),11.73(s,1H),8.08(s,1H),7.87(d,J＝1.4Hz,1H),7.77(m,3H),7.45(s,1H),7.28-7.13(m,1H),6.53(s,2H),5.46(s,2H),5.12-4.77(m,6H),4.50(m,7H),4.41-4.26(m,2H),3.85-3.55(m,5H),2.33(s,1H),2.15(s,2H),2.05(s,6H),1.81-1.72(m,1H),1.25(t,J＝7.1Hz,6H)。
LCMS：m/z 861.05[M+H]+
步骤12：(8S,E)-N4-((1R,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺钠盐(化合物12)的合成
Figure BDA0003484970410001071
将(8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(步骤11，600mg，0.697mmol)溶解在DMSO(10ml)、EDC(401mg，2.091mmol)和DIPEA(0.609ml,3.48mmol)中，向其中添加(1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺盐酸盐(Int.3b)(284mg，1.394mmol)。添加HOBT(320mg，2.091mmol)并将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过LCMS监测反应。将反应混合物浓缩以除去DIPEA，然后添加水，将得到的固体过滤并干燥，得到粗产物。通过反相制备型HPLC纯化。然后如实施例2中所述将分离的产物转化为其钠盐(0.14gm，收率：19.8％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(s,2H),8.27(m,1H),8.00(s,1H),7.72(m,2H),7.62(s,1H),7.57(s,1H),7.38(s,1H),6.50(s,2H),5.40(s,2H),4.99(d,J＝16.9Hz,2H),4.80(m,2H),4.62(m,2H),4.50(d,J＝7.5Hz,4H),3.94(m,2H),3.87(m,1H),3.69(d,J＝10.2Hz,2H),3.61(m,1H),3.54(d,J＝9.9Hz,2H),2.94(s,2H),2.14-2.07(m,2H),2.04(s,6H),1.97(m,5H),1.82(d,J＝7.2Hz,2H),1.60(m,5H),1.25(m,6H)；LCMS：m/z 1010.21[M+H]+；HPLC纯度：99.89％
实施例13：(8R,E)-N4-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺钠盐(化合物13)
Figure BDA0003484970410001081
按照针对实施例12的合成所述类似的程序，由实施例12的步骤1的产物(对映异构体2)和(1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺盐酸盐(Int.3b)合成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(s,2H),8.27(m,1H),8.00(s,1H),7.72(m,2H),7.62(s,1H),7.57(s,1H),7.38(s,1H),6.50(s,2H),5.40(s,2H),4.99(d,J＝16.9Hz,2H),4.80(m,2H),4.62(m,2H),4.50(d,J＝7.5Hz,4H),3.94(m,2H),3.87(m,1H),3.69(d,J＝10.2Hz,2H),3.61(m,1H),3.54(d,J＝9.9Hz,2H),2.94(s,2H),2.14-2.07(m,2H),2.04(s,6H),1.97(m,5H),1.82(d,J＝7.2Hz,2H),1.60(m,5H),1.25(m,6H)；LCMS：m/z 1010.21[M+H]+；HPLC纯度：99.81％
实施例14：(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸钠盐(化合物14)
Figure BDA0003484970410001082
步骤1：(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸甲酯的合成
Figure BDA0003484970410001091
将(8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(实施例12的步骤11的产物，600mg,0.697mmol)溶解在DMSO(10ml)、EDC(401mg，2.091mmol)和DIPEA(0.609ml，3.48mmol)中，向其中添加(1R,4R)-4-氨基环己烷-1-甲酸甲酯盐酸盐(284mg，1.394mmol)。添加HOBT(320mg，2.091mmol)并将反应混合物在室温下搅拌过夜。通过LCMS监测反应。将反应混合物浓缩以除去DIPEA，然后添加水，将得到的固体过滤并干燥，得到粗物质，将其通过反相制备型HPLC纯化，得到期望的化合物(0.23gm，收率：49.4％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(bs,2H),8.21(m,1H),8.00(s,1H),7.72(d,J＝1.2Hz,1H),7.69(d,J＝1.2Hz,1H),7.62(s,1H),7.54(s,1H),7.37(s,1H),6.49(d,J＝1.5Hz,2H),5.40(d,J＝4.9Hz,2H),4.99(m,2H),4.79(m,2H),4.60(dt,J＝9.8,4.4Hz,2H),4.50(m,4H),3.94(m,2H),3.83-3.73(m,1H),3.69(d,J＝10.1Hz,2H),3.61(m,5H),3.53(d,J＝10.7Hz,2H),2.93(q,J＝5.3Hz,1H),2.30(m,1H),2.04(s,6H),1.99-1.90(m,6H),1.81(d,J＝7.2Hz,2H),1.51-1.36(m,4H),1.25(m,6H)；LCMS：m/z 1000.21[M+H]+
步骤2：(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸钠盐(化合物14)
Figure BDA0003484970410001101
将(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(步骤1，210mg，0.210mmol)溶解在THF(10ml)、甲醇(10ml)和水(5ml)中。添加氢氧化锂水合物(88mg，2.100mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。通过LCMS监测反应。将反应混合物浓缩至干，然后添加水，用稀HCl中和，将固体过滤然后干燥，得到标题化合物。然后如实施例2所述将分离的酸转化为其钠盐(0.15gm，收率：72.4％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.94(s,2H),12.11(s,1H),11.3(br s,1H),8.37(s,1H),8.05(s,1H),7.74(d,J＝1.4Hz,4H),7.46(s,1H),6.52(s,2H),5.41(s,2H),4.99(m,4H),4.81(m,2H),4.50(m,6H),4.25(m,1H),3.78(m,2H),3.69-3.51(m,2H),2.99-2.89(m,1H),2.30(d,J＝6.9Hz,2H),2.17(s,3H),2.09(s,3H),2.04(m,4H),1.97(s,2H),1.95-1.87(m,2H),1.42(m,4H),1.25(m,6H)；LCMS：m/z 986.21[M+H]+；HPLC纯度：99.80％
实施例15：(1R,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸钠盐(化合物15)
Figure BDA0003484970410001111
按照针对实施例12和14的合成所述类似的程序，由实施例12的步骤1的产物(对映异构体2)和(1R,4R)-4-氨基环己烷-1-甲酸甲酯盐酸盐合成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.94(s,2H),12.11(s,1H),11.3(br s,1H),8.37(s,1H),8.05(s,1H),7.74(d,J＝1.4Hz,4H),7.46(s,1H),6.52(s,2H),5.41(s,2H),4.99(m,4H),4.81(m,2H),4.50(m,6H),4.25(m,1H),3.78(m,2H),3.69-3.51(m,2H),2.99-2.89(m,1H),2.30(d,J＝6.9Hz,2H),2.17(s,3H),2.09(s,3H),2.04(m,4H),1.97(s,2H),1.95-1.87(m,2H),1.42(m,4H),1.25(m,6H)；LCMS：m/z 986.21[M+H]+；HPLC纯度：99.75％
实施例16：(8S,E)-N4-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺钠盐(化合物16)
按照针对实施例12的合成所述类似的程序，由实施例12步骤11的产物和3-(1H-四唑-5-基)丙-1-胺合成。
Figure BDA0003484970410001112
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(s,2H),8.57(m,1H),8.00(s,1H),7.71(m,2H),7.62(s,1H),7.56(s,1H),7.38(s,1H),6.49(s,2H),5.42(s,2H),4.99(m,2H),4.85-4.75(m,2H),4.60(d,J＝10.7Hz,2H),4.51(q,J＝7.0Hz,4H),3.94(m,2H),3.68(d,J＝10.1Hz,2H),3.60(s,2H),3.57-3.49(m,2H),2.95(m,4H),2.08(m,2H),2.04(s,6H),1.98(dd,J＝15.1,7.7Hz,4H),1.81(d,J＝7.7Hz,2H),1.25(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z 970.33[M+H]+；HPLC纯度：99.61％
实施例17：(8R,E)-N4-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺钠盐(化合物17)
Figure BDA0003484970410001121
按照针对实施例12的合成所述类似的程序，由实施例12的步骤1的产物(对映异构体2)和3-(1H-四唑-5-基)丙-1-胺合成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(s,2H),8.57(m,1H),8.00(s,1H),7.71(m,2H),7.62(s,1H),7.56(s,1H),7.38(s,1H),6.49(s,2H),5.42(s,2H),4.99(m,2H),4.85-4.75(m,2H),4.60(d,J＝10.7Hz,2H),4.51(q,J＝7.0Hz,4H),3.94(m,2H),3.68(d,J＝10.1Hz,2H),3.60(s,2H),3.57-3.49(m,2H),2.95(m,4H),2.08(m,2H),2.04(s,6H),1.98(dd,J＝15.1,7.7Hz,4H),1.81(d,J＝7.7Hz,2H),1.25(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z 970.33[M+H]+；HPLC纯度：99.90％
实施例18：1-(3-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸钠盐(化合物18)
Figure BDA0003484970410001131
按照针对实施例12和14的合成所述类似的程序，由实施例12的步骤11的产物(对映异构体1)和1-(3-氨基丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯合成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.96(bs,2H),12.32(s,1H),11.19(s,1H),8.72(s,1H),8.35(s,1H),8.05(s,1H),7.83(s,1H),7.75(m,3H),7.47(s,1H),6.52(s,2H),5.42(s,2H),5.11-4.75(m,6H),4.50(m,6H),4.23(m,3H),3.89(m,2H),3.74-3.49(m,3H),3.27(d,J＝7.8Hz,2H),2.94(m,1H),2.30(d,J＝9.6Hz,1H),2.22-1.75(m,11H),1.24(m,6H)；LCMS：m/z 1012.21[M+H]+；HPLC纯度：98.43％
实施例19：1-(3-((8R,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸钠盐(化合物19)
Figure BDA0003484970410001132
按照针对实施例12和14的合成所述类似的程序，由实施例12的步骤1的产物(对映异构体2)和1-(3-氨基丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯合成。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.96(bs,2H),12.32(s,1H),11.19(s,1H),8.72(s,1H),8.35(s,1H),8.05(s,1H),7.83(s,1H),7.75(m,3H),7.47(s,1H),6.52(s,2H),5.42(s,2H),5.11-4.75(m,6H),4.50(m,6H),4.23(m,3H),3.89(m,2H),3.74-3.49(m,3H),3.27(d,J＝7.8Hz,2H),2.94(m,1H),2.30(d,J＝9.6Hz,1H),2.22-1.75(m,11H),1.24(m,6H)；LCMS：m/z 1012.21[M+H]+；HPLC纯度：99.78％
实施例20：(1R,4R)-4-((E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物20)
Figure BDA0003484970410001141
步骤-1：2-((1R,5S)-8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙二酸二乙酯
在室温向2-溴丙二酸二乙酯(5.0g，20.91mmol)在氯仿(50ml)中的搅拌溶液中添加8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛烷盐酸盐(4.69g，31.4mmol)和TEA(14.58ml，105mmol)，将反应混合物在60℃加热12小时。通过使用TLC监测反应。将反应混合物浓缩，得到粗产物，将其通过组合闪式色谱法(combi flash)使用15-20％乙酸乙酯的己烷溶液纯化，得到标题化合物(3.5g，61.7％收率)。
LCMS(ESI)：m/z 272.08(M+H)+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.20(d,J＝2.6Hz,3H),4.15(m,4H),2.70(dd,J＝11.0,2.1Hz,2H),2.61(dt,J＝10.8,1.3Hz,2H),1.92-1.74(m,2H),1.74-1.64(m,2H),1.20(t,J＝7.1Hz,6H)。
步骤-2：2-((1R,5S)-8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙烷-1,3-二醇
Figure BDA0003484970410001151
在0℃将THF(20ml)中的2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙二酸二乙酯(3.50g,12.90mmol)添加到THF(20ml)中的氢化铝锂(2.448g，64.5mmol)溶液中。将所得溶液在25℃搅拌5小时。通过逐滴添加乙酸乙酯25ml和饱和NaCl水溶液淬灭混合物。将得到的固体通过硅藻土垫过滤并将滤液浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱法使用10％甲醇的二氯甲烷溶液纯化，得到标题化合物(1.5g，62.1％收率)。
LCMS(ESI)：m/z 188.14(M+H)+
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ4.16(dq,J＝4.5,2.2Hz,2H),3.44(qd,J＝10.9,6.1Hz,4H),2.69(dd,J＝11.2,2.0Hz,2H),2.44(dt,J＝11.2,1.3Hz,2H),2.36(m,1H),1.86-1.77(m,2H),1.72-1.61(m,2H)。
步骤3：5,5'-((2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)
Figure BDA0003484970410001152
将4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸乙酯(514g，2094mmol)、2-((1R,5S)-8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙烷-1,3-二醇(196g，1047mmol)和三苯基膦(1098g，4187mmol)溶解在6L THF中，并滴加DIAD(0.814L，4187mmol)。添加后，将反应混合物在55℃加热16小时。通过TLC监测反应进程，并在完成后浓缩反应混合物得到粗物质。将该粗品悬浮在乙酸乙酯中并在-78℃搅拌30分钟，然后过滤沉淀的三苯基氧化膦并浓缩滤液。将残余物用乙醇研磨并在-78℃搅拌30分钟，然后将沉淀的纯产物过滤并用冷乙醇洗涤并干燥，得到标题化合物(收率：400g，60％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.10(d,J＝1.8Hz,2H),7.90(d,J＝1.8Hz,2H),4.57-4.46(m,4H),4.38(q,J＝7.1Hz,4H),4.20(t,J＝3.4Hz,2H),3.37(t,J＝5.8Hz,1H),2.86(dd,J＝11.0,2.0Hz,2H),2.64(d,J＝10.6Hz,2H),1.80(t,J＝5.9Hz,2H),1.71-1.59(m,2H),1.35(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS(ESI)：m/z 642.3(M+H)+
步骤4：(E)-7-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯
Figure BDA0003484970410001161
向10升高压釜中的5,5'-((2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(步骤3，400g，623mmol)在乙醇(3700ml)和THF(500mL)的溶剂混合物中的溶液中添加(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐(139g，872mmol)和DIPEA(1087ml，6226mmol)，并将反应混合物在110℃搅拌24小时。通过TLC监测反应进程。将反应混合物冷却至室温，将得到的固体过滤并干燥，得到呈红色固体的产物(收率：360g，88％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(t,J＝6.7Hz,2H),8.26(d,J＝1.9Hz,2H),7.59(d,J＝2.0Hz,2H),5.66(d,J＝1.8Hz,2H),4.40(dd,J＝9.8,5.0Hz,2H),4.34-4.24(m,8H),4.05(dd,J＝15.5,6.7Hz,2H),3.87(dd,J＝9.8,6.0Hz,2H),3.22(t,J＝5.5Hz,1H),2.77(dd,J＝10.9,2.1Hz,2H),2.63(d,J＝10.6Hz,2H),1.93(t,J＝6.0Hz,2H),1.79-1.67(m,2H),1.31(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS(ESI)：m/z 656.10(M+H)+
步骤5：(E)-1,13-二氨基-7-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯
Figure BDA0003484970410001171
在0℃向(E)-7-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯(步骤4，200g，305mmol)在THF(1500ml)和乙醇(500ml)中的搅拌悬浮液中添加连二亚硫酸钠(531g，3050mmol)(在750ml水中的溶液)。在相同温度下添加氢氧化铵(713ml，4576mmol)。将反应混合物升温至25℃并搅拌3小时。通过LCMS监测反应进程。滤出固体并在真空下除去有机溶剂。向反应混合物中添加水并用DCM(4×250ml)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并浓缩得到粗残余物。将固体用***洗涤，得到粗二胺，将其原样用于下一步骤(收率：167g，92％)。
LCMS(ESI)：m/z 596.4(M+H)+
步骤6：(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸二乙酯的合成
Figure BDA0003484970410001172
在0℃向(E)-1,13-二氨基-7-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯(步骤5，143g，240mmol)在DMF(1200ml)中的搅拌溶液中添加100ml DMF中的1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(89g，456mmol)并搅拌30分钟。在0℃添加EDC(138g，720mmol)和TEA(201ml，1440mmol)，此后将反应混合物升温至室温并搅拌18小时。通过LCMS监测反应。完成后，将混合物减压浓缩，添加水，将得到的固体过滤并干燥得到粗物质。然后将其用50％EA的己烷溶液洗涤以去除非极性杂质，然后用10％THF的乙腈溶液洗涤以去除极性杂质，得到纯产物(收率：100g，45％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.93(s,2H),7.84(d,J＝1.2Hz,2H),7.68-7.49(m,2H),6.53(s,2H),5.44(brs,2H),4.87(brs,4H),4.61-4.48(m,10H),4.41-4.23(m,4H),3.04(s,1H),2.87(d,J＝10.5Hz,2H),2.67(m,4H),1.99(s,6H),1.86-1.75(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H),1.18(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS(ESI)：m/z 917.94(M+H)+
步骤7：(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸
向(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸二乙酯(步骤6，100g，109mmol)在甲醇(1000ml)和THF(1000ml)的溶剂混合物中的搅拌溶液中添加溶解在300mL H2O中的氢氧化锂一水合物(36.6g，871mmol)。将反应混合物在50℃加热并搅拌16小时。通过LCMS监测反应进程，并在完成后将反应混合物减压浓缩并添加水。通过使用1N HCl将pH调节至6，并过滤沉淀出的固体。用乙酸乙酯洗涤固体二酸，得到标题化合物(收率：92g，98％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.71(s,2H),7.54(s,2H),6.46(s,2H),5.38(s,2H),4.98-4.76(m,4H),4.52(q,J＝7.0Hz,6H),4.27(d,J＝4.6Hz,2H),4.15(t,J＝8.7Hz,2H),3.07(s,1H),2.87(d,J＝10.4Hz,2H),2.68(d,J＝9.9Hz,2H),2.06(s,6H),2.04-2.01(m,2H),1.74(dd,J＝7.9,3.9Hz,2H),1.24(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS(ESI)：m/z 862.05(M+H)+
步骤8：(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-12-(((1R,4R)-4-(甲氧基羰基)环己基)氨基甲酰基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸
Figure BDA0003484970410001191
向(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸(步骤7，0.6g，0.70mmol)在6mL DMF中的搅拌溶液中依次添加(1R,4R)-4-氨基环己烷-1-甲酸甲酯盐酸盐(0.17g，0.87mmol)、[苯并***-1-基氧基(二甲基氨基)亚甲撑]-二甲基铵；四氟硼酸盐(0.34g，1.04mmol)和DIPEA(0.24mL，1.39mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。通过LCMS监测反应进程，并在完成后，浓缩反应混合物并添加水，导致形成固体，将其过滤并原样用于下一步。
LCMS(ESI)：m/z 1001.21(M+H)+
步骤9：(1R,4R)-4-((E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure BDA0003484970410001192
向(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-12-(((1R,4R)-4-(甲氧基羰基)环己基)氨基甲酰基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(步骤8，0.6g，0.60mmol)溶解在5mL DMF中的搅拌溶液中添加氯化铵(0.16g，3.00mmol)、[苯并***-1-基氧基(二甲基氨基)亚基撑]-二甲基铵；四氟硼酸盐(0.29g，0.90mmol)和DIPEA(0.155g，1.199mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2小时。通过LCMS监测反应进程，并在完成后，浓缩反应混合物并添加水，导致形成固体，将其过滤并通过反相制备色谱法从粗品中纯化所需的产物。
LCMS(ESI)：m/z 1000.33(M+H)+
步骤10：(1R,4R)-4-((E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物20)
Figure BDA0003484970410001201
将纯化后得到的(1R,4R)-4-((E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(步骤9，0.12g，0.12mmol)悬浮在6mL甲醇:THF:H2O(1:1:1)的溶剂混合物中。添加LiOH(0.03g，1.20mmol)并将反应混合物在室温搅拌12小时。水解完成后，浓缩挥发物，添加水以稀释反应混合物。然后将溶液小心地用1N HCl中和。将所得悬浮液离心，将固体收集并干燥，得到(1R,4R)-4-((E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(0.09g，76％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.84(s,2H),8.22(m,1H),8.00(s,1H),7.69(s,1H),7.64(s,1H),7.56(s,1H),7.46(s,1H),7.40(s,1H),6.53(m,2H),5.46(m,2H),4.87(m,4H),4.65-4.44(m,6H),4.29(s,2H),4.19(s,2H),3.75(s,1H),3.08(s,1H),2.92-2.84(m,2H),2.73-2.66(m,2H),2.18(s,1H),2.10-1.89(m,12H),1.77(d,J＝7.3Hz,2H),1.42(m,4H),1.27-1.23(m,6H)；LCMS(ESI)：mm/z 986.21(M+H)+；HPLC纯度：99.19％
实施例21：(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物21)
Figure BDA0003484970410001211
步骤1：(E)-12-((3-(1H-四唑-5-基)丙基)氨基甲酰基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸
Figure BDA0003484970410001212
使用(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸和3-(1H-四唑-5-基)丙-1-胺盐酸盐，按照实施例20的步骤8中详述的程序类似地合成。
LCMS(ESI)：m/z 971.33(M+H)+
步骤2：(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺
Figure BDA0003484970410001221
使用来自步骤1的产物和氯化铵，按照实施例20的步骤9中详述的程序类似地合成，并通过反相制备色谱法纯化。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(d,J＝3.9Hz,2H),8.58(m,1H),8.00(s,1H),7.69(s,1H),7.65(s,1H),7.57(s,1H),7.50(s,1H),7.41(s,1H),6.53(m,2H),5.49(m,2H),4.88(m,4H),4.63-4.44(m,6H),4.29(d,J＝4.9Hz,2H),4.24-4.15(m,2H),3.08(s,1H),2.96(t,J＝7.7Hz,2H),2.88(d,J＝10.4Hz,2H),2.81-2.62(m,2H),2.20-1.92(m,10H),1.75(d,J＝4.2Hz,4H),1.30-1.23(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 970.20(M+H)+；HPLC纯度：96.27％
实施例22：(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物22)
Figure BDA0003484970410001231
步骤1：(E)-12-(((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)氨基甲酰基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸
Figure BDA0003484970410001232
使用(E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸和(1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺盐酸盐(Int.3b)，按照实施例20的步骤8中详述的程序类似地合成。
LCMS(ESI)：m/z 1011.21(M+H)+
步骤2：(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺
Figure BDA0003484970410001241
使用来自步骤1的产物和氯化铵，按照实施例20的步骤9中详述的程序类似地合成，并通过反相制备色谱法纯化。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.95(s,1H),8.31(m,1H),8.01(s,1H),7.70(s,1H),7.66(s,1H),7.57(d,J＝1.3Hz,1H),7.49(s,1H),7.42(s,1H),6.53(m,2H),5.47(m,2H),4.88(m,4H),4.71-4.48(m,6H),4.30(s,2H),4.20(q,J＝10.5Hz,2H),3.98-3.75(m,1H),3.09(s,1H),3.03-2.93(m,1H),2.92-2.83(m,2H),2.71(s,1H),2.70-2.65(m,1H),2.12(d,J＝12.2Hz,2H),2.08-1.99(m,11H),1.76(s,2H),1.62(m,4H),1.29-1.23(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 1010.21(M+H)+；HPLC纯度：97.05％
实施例23：(E)-1-(3-(8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物23)
Figure BDA0003484970410001242
按照实施例20的步骤8、9和10中所述类似的程序，由来自实施例20的步骤7的产物和1-(3-氨基丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(Int.5)合成。(收率：22.0％)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(brs,1H),8.40(s,2H),8.26(s,1H),7.98(brs,1H),7.79(s,1H),7.64(s,1H),7.53(s,1H),7.46(s,1H),6.50(s,2H),5.54-5.31(m,2H),4.88(m,4H),4.63-4.46(m,6H),4.28(s,2H),4.21(t,J＝6.8Hz,4H),3.27(d,J＝6.7Hz,2H),3.14-3.03(m,1H),2.88(d,J＝10.5Hz,2H),2.76-2.65(m,2H),2.08-1.99(m,10H),1.83-1.66(m,2H),1.24(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 1012.21(M+H)+；HPLC纯度：99.29％
实施例24：(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物24)
Figure BDA0003484970410001251
步骤1：5,5'-((2-(甲氧基甲氧基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)的合成
Figure BDA0003484970410001252
向4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酸乙酯(325g，1323mmol)、2-(甲氧基甲氧基)丙烷-1,3-二醇(90g，662mmol)、三苯基膦(694g，2646mmol)在THF(2L)中的冷却溶液中滴加DIAD(0.515l，2646mmol)，并将反应混合物在60℃搅拌16小时。通过TLC监测反应进程。将反应混合物浓缩得到粗物质，向其中添加IPA(200ml)并在室温下搅拌30分钟，然后在-78℃搅拌30分钟，过滤固体，充分干燥得到纯的5,5'-((2-(甲氧基甲氧基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(收率＝230g，59％)。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.08(d,J＝1.7Hz,2H),7.84(d,J＝1.8Hz,2H),4.91(s,2H),4.58-4.40(m,10H),3.48(s,3H),1.44(t,J＝7.1Hz,6H)。
步骤2：5,5'-((2-羟基丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)的合成
Figure BDA0003484970410001261
向5,5'-((2-(甲氧基甲氧基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(步骤1，23.0g，38.9mmol)在DCM(150ml)和乙醇(150ml)中的冷却溶液中添加HCl的二氧六环溶液(97.2ml，388.9mmol)，并将反应混合物在25℃搅拌12小时。通过TLC监测反应进程。将反应混合物浓缩并溶解在DCM(200ml)中，用8％碳酸氢钠溶液和水洗涤，将有机相经硫酸钠干燥，减压蒸馏，得到5,5'-((2-羟基丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(收率＝21.0g 97％)。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.10(d,J＝1.7Hz,2H),7.85(d,J＝1.8Hz,2H),4.61(p,J＝5.1Hz,1H),4.50-4.40(m,7H),3.72(s,3H),1.44(t,J＝7.1Hz,5H)。
步骤3：5,5'-((2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)的合成
Figure BDA0003484970410001271
向5,5'-((2-羟基丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(步骤2，21.0g，38.4mmol)在DCM(200ml)中的冷却溶液中滴加2,6-二甲基吡啶(17.9ml，153.5mmol)、三氟甲磺酸酐(16.2g，57.6mmol)，并将反应混合物在0℃搅拌1小时。通过TLC监测反应进程。将反应混合物在2N HCl水溶液中淬灭，用DCM萃取并用水洗涤，经硫酸钠干燥并减压浓缩，得到5,5'-((2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(收率＝24.0g，92％)。
1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.15(d,J＝1.7Hz,2H),7.83(d,J＝1.7Hz,2H),5.64(p,J＝4.8Hz,1H),4.70-4.66(m,4H),4.47(q,J＝7.1Hz,4H),3.73(s,1H),1.45(t,J＝7.1Hz,6H)。
步骤4：5,5'-((2-吗啉代丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)的合成
Figure BDA0003484970410001272
向吗啉(1.924g，22.08mmol)在THF(300ml)中的冷却溶液中添加TEA(1.847ml，13.25mmol)并在室温下搅拌30分钟。将反应混合物冷却至0℃，然后添加5,5'-((2-(((三氟甲基)磺酰基)氧基)丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(步骤3，7.5g，11.04mmol)在THF(30ml)中的溶液，在25℃搅拌12小时。通过TLC监测反应进程。将反应混合物浓缩并通过柱色谱法纯化，得到期望的产物(收率＝2.8g，41.1％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.10(d,J＝1.8Hz,2H),7.93(d,J＝1.8Hz,2H),4.54(d,J＝5.7Hz,4H),4.38(q,J＝7.1Hz,4H),3.53(t,J＝4.5Hz,4H),3.44(m,1H),2.79(t,J＝4.6Hz,4H),1.35(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS(ESI)：m/z 615.84(M+H)+
步骤5：(E)-7-吗啉代-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯
Figure BDA0003484970410001281
向1升高压釜中的5,5'-((2-吗啉代丙烷-1,3-二基)双(氧基))双(4-氯-3-硝基苯甲酸二乙酯)(步骤4，40.0g，62.6mmol)在乙醇(350ml)和THF(50mL)的溶剂混合物中的溶液中添加(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐(13.9g，87.2mmol)和DIPEA(108ml，622.6mmol)，并将反应混合物在110℃搅拌24小时。通过TLC监测反应进程。将反应混合物冷却至室温，将得到的固体过滤并干燥，得到呈红色固体的产物(收率：36.0g，88％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(m,2H),8.26(d,J＝1.9Hz,2H),7.64(d,J＝2.0Hz,2H),5.73-5.63(m,2H),4.53-4.41(m,2H),4.35-4.24(m,6H),4.11-4.01(m,2H),3.94-3.85(m,2H),3.64(t,J＝4.4Hz,4H),3.32-3.23(m,1H),2.74(t,J＝4.6Hz,4H),1.31(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS(ESI)：m/z 629.96(M+H)+
步骤6：(E)-1,13-二氨基-7-吗啉代-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯
Figure BDA0003484970410001282
在0℃向(E)-7-吗啉代-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯(步骤5，20.0g，30.8mmol)在THF(150ml)和乙醇(50ml)中的搅拌悬浮液中添加连二亚硫酸钠(53.1g，305.0mmol)(在750ml水中的溶液)。在相同温度下添加氢氧化铵(71.3ml，457.6mmol)。将反应混合物升温至25℃并搅拌3小时。通过LCMS监测反应进程。滤出固体并在真空下除去有机溶剂。向反应混合物中添加水并用DCM(2×250ml)萃取。将有机层经硫酸钠干燥并浓缩得到粗残余物。用***洗涤固体，得到粗二胺，将其原样用于下一步骤(收率：16.7g，92％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.31-7.08(m,4H),7.04-7.01(m,2H),7.00-6.92(m,2H),5.52-5.39(m,2H),4.34-4.20(m,8H),3.71-3.61(m,4H),3.57-3.46(m,4H),3.45-3.38(m,1H),2.87-2.67(m,4H),1.31-1.27(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 570.20(M+H)+
步骤7：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸二乙酯
Figure BDA0003484970410001291
在0℃向(E)-1,13-二氨基-7-吗啉代-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3,11-二甲酸二乙酯(步骤6，14.3g，24.5mmol)在DMF(120ml)中的搅拌溶液中添加20ml DMF中的1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-羰基异硫氰酸酯(8.9g，45.6mmol)并搅拌30分钟。在0℃添加EDC(13.8g，72.0mmol)和TEA(20.1ml，144.0mmol)，之后将反应混合物搅拌18小时。通过LCMS监测反应。完成后，将混合物减压浓缩，添加水，将得到的固体过滤并干燥得到粗物质。然后将其用50％EA的己烷溶液洗涤以去除非极性杂质，然后用10％THF的乙腈溶液洗涤以去除极性杂质，得到纯产物(收率：10.0g，45％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(s,2H),7.84(d,J＝1.3Hz,2H),7.69(d,J＝1.4Hz,2H),6.55(s,2H),5.62-5.49(m,2H),4.97-4.82(m,4H),4.70-4.59(m,2H),4.59-4.48(m,4H),4.38-4.24(m,6H),3.76-3.62(m,4H),3.15-3.05(m,1H),2.86-2.75(m,4H),2.08(s,6H),1.35(t,J＝7.1Hz,6H),1.28(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS(ESI)：m/z 892.06(M+H)+
步骤8：(E)-4-(乙氧基羰基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸
Figure BDA0003484970410001301
在室温向(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酸二乙酯(步骤7，1.0g，1.089mmol)在乙醇(20ml)和THF(20ml)中的搅拌溶液中添加溶解在H2O(体积：5ml)中的氢氧化锂水合物(0.183g，4.36mmol)，并在50℃下搅拌16小时。通过LCMS监测反应，将反应减压浓缩，添加水，通过使用1N HCl将pH调节至酸性，固体沉淀出来，将其过滤并干燥，得到(E)-4-(乙氧基羰基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸(600mg，61.9％收率)。
LCMS(ESI)：m/z 864.06(M+H)+
步骤9：(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸乙酯
Figure BDA0003484970410001311
将(E)-4-(乙氧基羰基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酸(步骤8，1.0g，1.124mmol)溶解在DMF(10ml)中，并向其中添加EDC(0.470g，1.461mmol)和DIPEA(0.981ml，5.62mmol)。添加氯化铵(2.104g，39.3mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。通过LCMS监测反应。将反应混合物浓缩至干，然后添加水，将得到的固体过滤并干燥，得到产物(600mg，0.674mmol，60.9％收率)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.97-12.84(m,2H),8.00(s,1H),7.84(d,J＝1.3Hz,1H),7.75-7.65(m,2H),7.62(d,J＝1.4Hz,1H),7.42(s,1H),6.56(s,1H),6.53(s,1H),5.55(s,2H),5.08-4.73(m,4H),4.70-4.47(m,6H),4.41-4.30(m,2H),4.30-4.19(m,2H),3.79-3.60(m,4H),3.15-3.05(m,1H),2.89-2.74(m,4H),2.09-2.04(m,6H),1.35(t,J＝7.1Hz,3H),1.31-1.25(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 863.18(M+H)+
步骤10：(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸
Figure BDA0003484970410001312
在室温向(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸乙酯(步骤9，900mg，1.012mmol)在MeOH(10ml)和THF(10ml)中的搅拌溶液中添加溶解在H2O(体积：5ml)中的氢氧化锂水合物(425mg，10.12mmol)，并在50℃搅拌16小时。通过LCMS监测反应，将反应减压浓缩并添加水，通过使用1N HCl将pH调节至酸性，固体沉淀出来，将其过滤并干燥，得到期望的产物(840mg，收率：86％)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16(s,1H),7.94(s,2H),7.89(d,J＝1.2Hz,1H),7.78(d,J＝1.1Hz,1H),7.49(s,1H),6.54(s,1H),6.52(s,1H),5.44-5.29(m,2H),5.20-5.08(m,2H),5.03-4.84(m,4H),4.57-4.37(m,6H),4.08-4.01(m,4H),3.70-3.47(m,5H),2.05-2.03(m,6H),1.27-1.23(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 835.26(M+H)+
步骤11：(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物24)
Figure BDA0003484970410001321
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(步骤10，600mg，0.697mmol)溶解在DMSO(10ml)、EDC(401mg，2.091mmol)和DIPEA(0.609ml，3.48mmol)中，向其中添加(1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己-1-胺盐酸盐(284mg，1.394mmol)(Int.3b)。添加HOBT(320mg，2.091mmol)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。通过LCMS监测反应。将反应混合物浓缩以除去DIPEA，然后添加水，将得到的固体过滤并干燥，得到粗产物。通过反相制备型HPLC纯化。(收率：21.0％)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(s,2H),8.30(m,1H),8.01(s,1H),7.71(s,1H),7.69(s,1H),7.64(s,1H),7.58(s,1H),7.41(s,1H),6.54(m,2H),5.61-5.46(m,2H),4.98-4.81(m,4H),4.72-4.62(m,2H),4.56-4.47(m,3H),4.28-4.16(m,2H),3.95-3.77(m,2H),3.74-3.60(m,4H),3.20-3.13(m,1H),3.02-2.93(m,1H),2.92-2.77(m,4H),2.22-1.88(m,10H),1.71-1.48(m,4H),1.30-1.20(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 984.08(M+H)+；HPLC纯度：99.36％
实施例25：(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物25)
Figure BDA0003484970410001331
按照实施例24的步骤11中所述类似的程序，由来自实施例24的步骤10的产物和3-(1H-四唑-5-基)丙-1-胺合成。(收率：26.0％)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.01-12.81(m,2H),8.60(m,1H),8.00(s,1H),7.70(m,2H),7.64(s,1H),7.58(s,1H),7.41(s,1H),6.53(s,2H),5.60-5.42(m,2H),5.04-4.81(m,4H),4.72-4.59(m,2H),4.58-4.46(m,4H),4.24-4.13(m,2H),3.73-3.63(m,4H),3.41-3.37(m,2H),3.16(s,1H),3.00-2.91(m,2H),2.90-2.77(m,4H),2.06(s,6H),2.04-1.93(m,4H),1.33-1.25(m,6H)；LCMS(ESI)：m/z 944.20(M+H)+；HPLC纯度：99.22％
实施例26：(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物26)
Figure BDA0003484970410001341
按照实施例14的步骤1和2中所述类似的程序，由实施例24的步骤10的产物和(1R,4R)-4-氨基环己烷-1-甲酸甲酯盐酸盐合成。(收率：24.0％)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(s,1H),8.28-8.08(m,1H),8.00(s,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),7.63(s,1H),7.55(s,1H),7.41(s,1H),6.53(s,2H),5.70-5.34(m,2H),5.05-4.78(m,4H),4.65(t,J＝11.6Hz,2H),4.56-4.37(m,4H),4.30-4.09(m,2H),3.86-3.73(m,1H),3.74-3.62(m,4H),3.21-3.08(m,1H),2.96-2.76(m,4H),2.25-2.11(m,1H),2.07-2.09(m,6H),2.00-1.88(m,4H),1.53-1.32(m,4H),1.31-1.24(m,6H)；LCMS(ESI)m/z960.20(M+H)+；HPLC纯度：99.02％
实施例27：(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物27)
Figure BDA0003484970410001342
按照实施例14的步骤1和2中所述类似的程序，由实施例24的步骤10的产物和1-(3-氨基丙基)-1H-吡唑-4-甲酸乙酯(Int.5)合成。(收率：28.0％)
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(m,1H),8.00(s,1H),7.71(s,1H),7.68(s,1H),7.64(s,1H),7.58(s,1H),7.41(s,1H),6.54(s,2H),5.52(d,J＝4.1Hz,2H),5.00-4.77(m,4H),4.70-4.61(m,2H),4.59-4.44(m,4H),4.30-4.14(m,6H),3.75-3.61(m,4H),3.27-3.22(m,2H),3.21-3.10(m,1H),2.90-2.77(m,4H),2.06(s,8H),1.29-1.25(m,8H)；LCMS(ESI)：m/z 986.21(M+H)+；HPLC纯度：99.26％
实施例28：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(2-吗啉代乙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物28)
Figure BDA0003484970410001351
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(0.2g，0.27mmol)和2-吗啉代乙-1-胺(0.17g，1.33mmol)溶解在5mL DMF中。添加TBTU(0.17g，0.54mmol)，然后添加二异丙基乙胺(0.28ml，1.60mmol)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，将粗产物通过反相制备色谱法纯化，得到纯产物。然后通过以下步骤将其转化为其盐酸盐：与3N甲醇HCl搅拌15分钟，浓缩混合物并用***研磨所得固体，得到盐，为灰白色固体(15mg，6.5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.95(brs,2H),10.67(brs,1H),8.95(t,J＝5.5Hz,1H),8.03(brs,1H),7.74(s,1H),7.71(s,1H),7.66(s,1H),7.54(s,1H),7.39(brs,1H),6.56(s,1H),6.55(s,1H),5.56-5.42(m,2H),4.89(brs,4H),4.55-4.42(m,8H),4.02-3.99(m,2H),3.83(t,J＝12.1Hz,2H),3.74-3.68(m,2H),3.59(d,J＝12.2Hz,2H),3.37-3.31(m,2H),3.19-3.10(m,2H),2.33-2.26(m,2H),2.08(s,6H),1.30-1.25(m,6H)；LCMS：m/z＝862.18(M+H)+；HPLC纯度：98.18％
实施例29：(E)-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-羰基)甘氨酸(化合物29)
Figure BDA0003484970410001361
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(0.3g，0.40mmol)和甘氨酸叔丁酯(0.17g，0.80mmol)溶解在5mL DMF中。添加TBTU(0.19g，0.60mmol)，然后添加二异丙基乙胺(0.28ml，1.60mmol)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，将粗产物通过反相制备色谱法纯化，得到叔丁酯中间体(70mg，20％)。LCMS：m/z＝877.06(M+H)+
向(E)-3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙酸叔丁酯(70mg，0.08mmol)在10mL DCM中的搅拌溶液中添加TFA(0.13ml,1.60mmol)并搅拌1小时。通过LCMS监测叔丁基脱保护后，将反应混合物蒸发至干，将所得固体用***洗涤并干燥，得到最终产物(39mg，61％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.93(brs,2H),8.86(t,J＝5.9Hz,1H),8.01(brs,1H),7.72(s,1H),7.71(s,1H),7.53(s,2H),7.38(brs,1H),6.56(s,2H),5.54-5.48(m,2H),4.89(brs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.47-4.41(m,4H),3.96(d,J＝5.8Hz,2H),2.32-2.24(m,2H),2.08(s,6H),1.30-1.24(m,6H)；LCMS：m/z＝807.04(M+H)+；HPLC纯度：100.0％
实施例30：(E)-N-(2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)乙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物30)
Figure BDA0003484970410001371
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)乙-1-胺(Int 9)合成(收率＝80mg，19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.36(bs,1H),9.07(t,J＝5.3Hz,1H),8.03(bs,1H),7.74(s,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),7.54(s,1H),7.38(bs,1H),6.57(s,1H),6.56(s,1H),5.57-5.43(m,2H),4.89(bs,4H),4.56-4.43(m,10H),3.76-3.68(m,2H),3.53-3.44(m,2H),3.35-3.26(m,2H),3.16(t,J＝10.7Hz,2H),2.32-2.23(m,4H),2.08(s,6H),2.00-1.92(m,2H),1.27(m,6H)；LCMS：m/z＝888.19(M+H)+；HPLC纯度：99.79％
实施例31：(E)-3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙酸(化合物31)
Figure BDA0003484970410001372
按照针对实施例29的合成所述类似的程序，由中间体1和3-氨基丙酸叔丁酯合成(收率＝40mg，61％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.91(brs,2H),8.56(t,J＝5.5Hz,1H),8.01(brs,1H),7.71(s,1H),7.68(s,1H),7.53(s,1H),7.49(s,1H),7.39(brs,1H),6.55(s,2H),5.51-5.48(m,2H),4.88(brs,4H),4.53(q,J＝7.0Hz,4H),4.46-4.40(m,4H),3.50-3.46(m,2H),2.56-2.55(m,2H),2.31-2.25(m,2H),2.08(s,6H),1.29-1.25(m,6H)；LCMS：m/z＝821.05(M+H)+；HPLC纯度：99.18％
实施例32：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-吗啉代丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物32)
Figure BDA0003484970410001381
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-吗啉代丙-1-胺合成(收率＝61mg，14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(brs,2H),10.79(s,1H),8.80(t,J＝5.7Hz,1H),8.02(bs,1H),7.80-7.64(m,2H),7.58(s,1H),7.55(s,1H),7.39(bs,1H),6.57(s,1H),6.56(s,1H),5.59-5.35(m,2H),4.89(bs,4H),4.60-4.46(m,8H),4.01-3.93(m,2H),3.80(t,J＝12.1Hz,2H),3.47-3.33(m,4H),3.21-3.01(m,4H),2.33-2.26(m,2H),2.08(s,6H),2.04-1.95(m,2H),1.27(t,J＝7.1,1.4Hz,6H)；LCMS：m/z＝876.18(M+H)+；HPLC纯度：99.25％
实施例33：(E)-N-(3-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物33)
Figure BDA0003484970410001391
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙-1-胺(Int.10)合成(收率＝60mg，14％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.07(brs,1H),8.80(t,J＝5.8Hz,1H),8.03(brs,1H),7.72-7.70(m,2H),7.57(s,1H),7.54(s,1H),7.39(brs,1H),6.57(s,1H),6.56(s,1H),5.63-5.35(m,2H),4.89(brs,4H),4.61-4.39(m,10H),3.40-3.25(m,4H),3.09(t,J＝10.2Hz,4H),2.33-2.27(m,2H),2.22-2.15(m,2H),2.08(s,6H),2.03-1.89(m,4H),1.27(t,J＝7.1,1.5Hz,6H)；LCMS：m/z＝902.19(M+H)+；HPLC纯度：99.17％
实施例34：(E)-N-(4-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丁基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物34)
Figure BDA0003484970410001392
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和4-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丁-1-胺(Int.11)合成(收率＝20mg，7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(brs,2H),10.11(brs,1H),8.65(t,J＝5.7Hz,1H),8.03(brs,1H),7.72-7.69(m,2H),7.56(s,1H),7.54(s,1H),7.39(brs,1H),6.56(s,2H),5.59-5.39(m,2H),4.89(brs,4H),4.56-4.44(m,10H),3.35-3.27(m,4H),3.11-3.02(m,4H),2.32-2.26(m,2H),2.20-2.14(m,2H),2.08(s,6H),1.97-1.91(m,2H),1.81-1.73(m,2H),1.58-1.49(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝915.57(M+H)+；HPLC纯度：98.36％
实施例35：(E)-(2-(4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)乙基)-L-脯氨酸盐酸盐(化合物35)
Figure BDA0003484970410001401
将(E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酸(中间体1)(0.25g，0.33mmol)和(2-氨基乙基)-L-脯氨酸甲酯(如WO2017202390中所述地合成)(0.11g，0.66mmol)溶解在5mL DMF中。添加TBTU(0.22g，0.70mmol)，然后添加二异丙基乙胺(0.23ml，1.33mmol)并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后减压浓缩DMF并向其中添加水，导致产物的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，将粗产物通过反相制备色谱法纯化，得到甲酯中间体。LCMS：m/z＝904.19(M+H)+
然后通过将甲酯(0.015g，0.017mmol)溶解在2.5mL THF-MeOH-H2O(2:2:1)混合物中，然后添加LiOH(4mg，0.083mmol)，使其经历酯水解。将反应混合物在室温搅拌过夜并浓缩挥发物，然后添加2N HCl，导致产物酸的沉淀。将沉淀物过滤并用水洗涤，得到呈白色固体的最终产物(10mg，65％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(brs,2H),9.08(brs,1H),8.06(brs,1H),7.73-7.70(m,3H),7.56(s,1H),7.39(brs,1H),6.55(s,2H),5.57-5.40(m,2H),4.89(brs,4H),4.64-4.32(m,10H),3.95-3.85(m,1H),3.76-3.54(m,4H),2.32-2.24(m,2H),2.12-2.01(m,10H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝890.06(M+H)+；HPLC纯度：95.03％
实施例36：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物36)
Figure BDA0003484970410001411
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)丙-1-胺(如US 20070293494中所述地合成)合成(收率＝60mg，13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(brs,2H)10.84(brs,1H),8.78(t,J＝5.8Hz,1H),8.03(brs,1H),7.73-7.70(m,2H),7.56(s,1H),7.55(s,1H),7.39(brs,1H),6.57(s,1H),6.56(s,1H),5.57-5.41(m,2H),4.89(brs,4H),4.56-4.51(m,4H),4.46-4.43(m,4H),3.76-3.68(m,2H),3.64-3.56(m,2H),3.42-3.34(m,2H),3.31-3.11(m,6H),3.02(s,3H),2.33-2.26(m,2H),2.08(s,6H),2.03-1.97(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝953.20(M+H)+；HPLC纯度：99.88％
实施例37：(E)-N-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物37)
Figure BDA0003484970410001412
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(4,4-二氟哌啶-1-基)丙-1-胺(如US 20050256153中所述地合成)合成(收率＝65mg，15％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.95(brs,2H),10.66(s,1H),8.74(t,J＝5.8Hz,1H),8.02(brs,1H),7.72-7.70(m,2H),7.55-7.53(m,2H),7.39(brs,1H),6.56(s,1H),6.55(s,1H),5.57-5.40(m,2H),4.89(brs,4H),4.52(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(q,J＝5.8Hz,4H),3.68-3.62(m,2H),3.42-3.34(m,4H),3.26-3.10(m,4H),2.41-2.28(m,4H),2.10-2.06(m,6H),2.04-1.96(m,2H),1.27(td,J＝7.1,1.7Hz,6H)；LCMS：m/z＝910.19(M+H)+；HPLC纯度：99.03％
实施例38：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(4-吗啉代丁基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物38)
Figure BDA0003484970410001421
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和4-吗啉代丁-1-胺(如Eur.J.Med.Chem.,2014,84:200-205中所述地合成)合成(收率＝20mg，8％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.72(brs,1H),8.65(t,J＝5.7Hz,1H),8.04(brs,1H),7.72-7.68(m,2H),7.60-7.50(m,2H),7.39(brs,1H),6.56(s,2H),5.58-5.39(m,2H),4.89(m,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.46-4.43(m,4H),4.01-3.92(m,2H),3.83-3.72(m,2H),3.47-3.37(m,2H),3.37-3.29(m,2H),3.15-3.00(m,4H),2.33-2.21(m,2H),2.08(s,6H),1.76(s,2H),1.65-1.54(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝890.19(M+H)+；HPLC纯度：96.77％
实施例39：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-氟哌啶-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物39)
Figure BDA0003484970410001431
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(4-氟哌啶-1-基)丙-1-胺(Int.12)合成(收率＝15mg，5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.95(brs,2H),10.42(s,1H),8.78(t,J＝5.2Hz,1H),8.03(brs,1H),7.73-7.70(m,2H),7.57(s,1H),7.55(s,1H),7.39(brs,1H),6.56(s,1H),6.55(s,1H)5.61-5.40(m,2H),4.89(brs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.48-4.41(m,4H),3.57-3.49(m,1H),3.47-3.33(m,4H),3.19-3.00(m,4H),2.59–2.55(m,2H),2.34-2.26(m,2H),2.24-2.14(m,2H),2.08(s,6H),2.04-1.95(m,2H),1.31-1.25(m,6H)；LCMS：m/z＝892.19(M+H)+；HPLC纯度：99.79％
实施例-40：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(甲基磺酰基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物40)
Figure BDA0003484970410001432
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和甲磺酰胺合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.97-12.88(m,2H),12.18(brs,1H),8.01(brs,1H),7.79(s,1H),7.71(s,1H),7.64(s,1H),7.53(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.54(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(t,J＝5.3Hz,4H),3.34(s,3H),2.32-2.27(m,2H),2.10-2.06(m,6H),1.27(t,J＝7.2Hz,6H)；LCMS：m/z＝826.92(M+H)+
实施例41：(R,E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物41)
Figure BDA0003484970410001441
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和(R)-3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺(Int.13)合成(收率＝20mg，7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.84(s,2H),8.51(t,J＝5.7Hz,1H),8.01(brs,1H),7.71(s,1H),7.68(s,1H),7.53(s,1H),7.48(d,J＝1.5Hz,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),5.32-5.07(m,1H),4.89(brs,4H),4.54(t,J＝7.1Hz,4H),4.43(d,J＝5.2Hz,4H),3.45-3.35(m,2H),2.88-2.78(m,2H),2.64-2.58(m,1H),2.48-2.45(m,3H),2.32-2.25(m,2H),2.20-2.11(m,1H),2.08(s,6H),1.98-1.78(m,1H),1.77-1.68(m,2H),1.26(d,J＝7.3Hz,6H)；LCMS：m/z＝878.19(M+H)+；HPLC纯度：97.69％
实施例42：(S,E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物42)
Figure BDA0003484970410001451
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和(S)-3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺(Int.14)合成(收率＝18mg，6％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67-8.40(m,1H),8.01(brs,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),7.53(s,1H),7.48(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.49(s,2H),5.30-5.20(m,1H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(d,J＝5.2Hz,4H),3.34-3.31(m,2H),2.90-2.70(m,2H),2.64-2.59(m,1H),2.45-2.40(m,2H),2.32-2.25(m,3H),2.20-2.11(m,1H),2.08(s,6H),1.96-1.78(m,1H),1.74-1.68(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)。LCMS：m/z＝878.19(M+H)+；HPLC纯度：95.28％
实施例43：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(2-(甲基磺酰氨基)乙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物43)
Figure BDA0003484970410001452
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和N-(2-氨基乙基)甲磺酰胺(如Organometallics,2012,31(16):5958-5967中所述地合成)合成(收率＝18mg，5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,2H),8.57(t,J＝5.7Hz,1H),8.00(s,1H),7.71(d,J＝1.2Hz,1H),7.69(s,1H),7.52(d,J＝1.4Hz,1H),7.50(s,1H),7.38(brs,1H),7.19(t,J＝6.0Hz,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.66-4.31(m,8H),3.49-3.37(m,2H),3.21-3.11(m,2H),2.94(s,3H),2.37-2.29(m,2H),2.08(s,6H),1.35-1.20(m,6H)；LCMS：m/z＝870.18(M+H)+；HPLC纯度：96.74％
实施例44：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物44)
Figure BDA0003484970410001461
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)丙-1-胺(Int.15)合成(收率＝9mg，3％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(brs,2H),8.48(t,J＝5.6Hz,1H),8.01(brs,1H),7.69(d,J＝1.2Hz,1H),7.67(s,1H),7.53(d,J＝1.4Hz,1H),7.48(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.66-4.19(m,8H),3.26-3.15(m,3H),3.06-2.99(m,2H),2.92(s,3H),2.41-2.28(m,4H),2.08(s,6H),2.02-1.89(m,4H),1.76-1.55(m,4H),1.31-1.18(m,6H)；LCMS：m/z＝952.20(M+H)+；HPLC纯度：98.13％
实施例45：(E)-N-(3-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物45)
Figure BDA0003484970410001462
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)丙-1-胺(Int.16)合成(收率＝18mg，5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,2H),8.50(t,J＝5.7Hz,1H),8.01(brs,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),7.53(s,1H),7.48(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.69-4.21(m,8H),2.89(t,J＝13.5Hz,2H),2.77-2.65(m,2H),2.48-2.15(m,8H),2.07(s,6H),1.79-1.65(m,2H),1.30-1.18(m,6H)；LCMS：m/z＝896.19(M+H)+；HPLC纯度：96.30％
实施例46：(E)-N-(3-((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物46)
Figure BDA0003484970410001471
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)丙-1-胺(如WO2005058871中所述地合成)合成(收率＝50mg，11％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.87(brs,2H),8.48(t,J＝5.5Hz,1H),8.00(brs,1H),7.71(d,J＝1.3Hz,1H),7.67(d,J＝1.3Hz,1H),7.53(d,J＝1.4Hz,1H),7.47(d,J＝1.5Hz,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.49(s,2H),4.89(brs,4H),4.52(t,J＝7.2Hz,4H),4.43(d,J＝5.6Hz,4H),3.59-3.51(m,2H),2.78(s,1H),2.75(s,1H),2.60-2.55(m,2H),2.32–2.26(m,4H),2.08(s,6H),1.77-1.67(m,2H),1.57(t,J＝10.6Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H),1.05(d,J＝6.2Hz,6H)；LCMS：m/z＝904.31(M+H)+；HPLC纯度：99.10％
实施例47：(E)-N-(3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺盐酸盐(化合物47)
Figure BDA0003484970410001481
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和4-(3-氨基丙基)硫代吗啉1,1-二氧化物(如WO2014104272中所述地合成)合成(收率＝60mg，13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,2H),8.48(t,J＝5.7Hz,1H),8.01(brs,1H),7.71(s,1H),7.67(s,1H),7.53(s,1H),7.47(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(q,J＝5.4Hz,4H),3.12-3.06(m,4H),2.93-2.88(m,4H),2.57-2.54(m,4H),2.32-2.27(m,2H),2.08(s,6H),1.71-1.69(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝925.19(M+H)+；HPLC纯度：99.03％
实施例48：(E)-N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物48)
Figure BDA0003484970410001482
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(1H-咪唑-1-基)丙-1-胺合成(收率＝18mg，5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,2H),8.53(t,J＝5.7Hz,1H),8.01(brs,1H),7.72-7.67(m,3H),7.53(s,1H),7.47(s,1H),7.38(brs,1H),7.24(d,J＝1.3Hz,1H),6.92(d,J＝1.1Hz,1H),6.55(s,2H),5.50(brs,2H),4.89(brs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(q,J＝5.2Hz,4H),4.05(t,J＝6.9Hz,2H),3.28-3.26(m,2H),2.33-2.26(m,2H),2.08(s,6H),1.98(q,J＝6.9Hz,2H),1.31-1.23(m,6H)；LCMS：m/z＝856.93(M+H)+；HPLC纯度：95.10％
实施例49：(S,E)-2-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)-3-(二甲基氨基)丙酸(化合物49)
Figure BDA0003484970410001491
按照针对实施例35的合成所述类似的程序，由中间体1和(S)-2-氨基-3-(二甲基氨基)丙酸甲酯2,2,2-三氟乙酸盐(如EP1366018,2016中所述地合成)合成(收率＝10mg，38％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.92(s,2H),8.36(d,J＝7.2Hz,1H),8.23(s,1H),8.01(s,1H),7.72(dd,J＝4.0,1.2Hz,2H),7.53(dd,J＝4.7,1.3Hz,2H),7.38(s,1H),6.55(s,2H),5.49(d,J＝1.7Hz,2H),4.89(s,4H),4.52-4.40(m,9H),3.07-2.85(m,2H),2.61-2.53(m,6H),2.39-2.22(m,2H),2.07(s,6H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝864.06(M+H)+；HPLC纯度：96.40％
实施例50：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(吡啶-2-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物50)
Figure BDA0003484970410001501
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(吡啶-2-基)丙-1-胺(如MedChemComm,2014,5(1):72-81中所述地合成)合成(收率＝80mg，19％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,2H),8.60-8.52(m,1H),8.51-8.47(m,1H),8.00(brs,1H),7.77-7.67(m,3H),7.53(d,J＝1.2Hz,1H),7.49(d,J＝1.4Hz,1H),7.38(brs,1H),7.31(d,J＝7.8Hz,1H),7.27-7.16(m,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.47-4.40(m,4H),2.87-2.75(m,2H),2.57-2.53(m,2H),2.33-2.27(m,2H),2.08(s,6H),2.01-1.92(m,2H),1.29-1.21(m,6H)；LCMS：m/z＝868.06(M+H)+；HPLC纯度：99.49％
实施例51：(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-(三氟甲基)哌啶-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺甲酸盐(化合物51)
Figure BDA0003484970410001502
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(4-(三氟甲基)哌啶-1-基)丙-1-胺(如US2005/256153中所述地合成)合成(收率＝60mg，13％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.88(s,2H),8.48(t,J＝5.7Hz,1H),8.00(brs,1H),7.71(s,1H),7.67(d,J＝1.2Hz,1H),7.53(d,J＝1.4Hz,1H),7.47(d,J＝1.4Hz,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.54(t,J＝7.1Hz,4H),4.43(q,J＝5.2Hz,4H),3.40-3.35(m,1H),3.34-3.26(m,2H),3.00-2.93(m,2H),2.37(t,J＝7.1Hz,2H),2.32-2.26(m,2H),2.08(s,6H),1.97-1.86(m,2H),1.83-1.66(m,4H),1.50-1.37(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝942.20(M+H)+；HPLC纯度：99.43％
实施例52：(E)-N-(3-(3,3-二甲基吗啉代)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物52)
Figure BDA0003484970410001511
按照针对实施例28的合成所述类似的程序，由中间体1和3-(3,3-二甲基吗啉代)丙-1-胺(Int.17)合成(收率＝6mg，2％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.86(brs,2H),8.43(t,J＝5.5Hz,1H),8.01(brs,1H),7.71(d,J＝1.2Hz,1H),7.66(d,J＝1.2Hz,1H),7.53(d,J＝1.4Hz,1H),7.46(d,J＝1.4Hz,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(q,J＝5.5Hz,4H),3.60(t,J＝4.9Hz,2H),3.36-3.29(m,2H),3.21(s,2H),2.51-2.45(m,2H),2.41-2.37(m,2H),2.32-2.26(m,2H),2.08(s,6H),1.65(p,J＝7.0Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H),0.94(s,6H)；LCMS：m/z＝904.19(M+H)+；HPLC纯度：96.54％
实施例-53：(E)-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-羰基)甘氨酰-L-缬氨酸(化合物53)
Figure BDA0003484970410001521
按照针对实施例-29的合成所述类似的程序，由中间体1和甘氨酰-L-缬氨酸叔丁酯(如Eur.J.Org.Chem.,2017,37:5592-5596中所述地合成)合成。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.91(brs,2H),8.75(t,J＝5.8Hz,1H),8.02(brs,2H),7.71(s,2H),7.54(brs,2H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(brs,4H),4.53(d,J＝7.4Hz,4H),4.43(d,J＝5.2Hz,4H),4.16(t,J＝8.0Hz,1H),4.01-3.88(m,2H),2.42-2.40(m,1H),2.30(t,J＝8.0Hz,2H),2.08(s,6H),1.27(t,J＝7.2Hz,6H),0.89(dd,J＝6.9,1.6Hz,6H)；LCMS：m/z＝906.19(M+H)+
实施例-54：(E)-N,N'-(12-氨基甲酰基-4-(1H-四唑-5-基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-1,15-二基)双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺)(化合物54)
Figure BDA0003484970410001522
步骤1：4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲腈的合成
Figure BDA0003484970410001523
将4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酰胺(2.0g，9.23mmol)添加到25mL乙腈中的三氯甲基碳酰氯(7.31g,36.9mmol)中，并将反应混合物回流12小时。通过TLC监测反应进程。完成后，通过添加水淬灭反应。用EtOAc萃取混合物，将合并的有机溶液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，浓缩并通过柱色谱法纯化。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.14(s,1H),8.08(d,J＝1.8Hz,1H),7.56(d,J＝1.9Hz,1H)。
步骤2：4-氯-3-(3-(2-氯-5-氰基-3-硝基苯氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酰胺的合成
Figure BDA0003484970410001531
将4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲酰胺(500mg,2.31mmol)溶解在20ml微波小瓶中的6mlNMP中，并向其中添加1,3-二溴丙烷(1.4g，6.93mmol)，然后添加DIPEA(1.21ml，6.93mmol)，并在微波中将反应混合物在130℃加热3小时。然后将混合物倒入100ml水中，将水相用EtOAc萃取3次。将合并的有机溶液用盐水洗涤并经Na2SO4干燥，浓缩并通过柱色谱法纯化，得到3-(3-溴丙氧基)-4-氯-5-硝基苯甲酰胺作为中间体。将其溶解在20ml微波小瓶中的6ml NMP中，向其中添加4-氯-3-羟基-5-硝基苯甲腈(458mg，2.31mmol)，然后添加DIPEA(1.21ml，6.93mmol)，并将反应混合物在微波中在130℃加热3小时。然后将混合物倒入100ml水中，将沉淀的产物过滤并干燥。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32-8.23(m,1H),8.08(dd,J＝10.8,1.7Hz,1H),7.91(d,J＝1.8Hz,1H),7.79(s,1H),4.48-4.44(m,2H),3.41-3.25(m,2H),2.20-2.18(m,2H)。
步骤3：(E)-11-氰基-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酰胺的合成
Figure BDA0003484970410001532
将4-氯-3-(3-(2-氯-5-氰基-3-硝基苯氧基)丙氧基)-5-硝基苯甲酰胺(1.1g，2.42mmol)溶解在10mL DMSO中，并添加(E)-丁-2-烯-1,4-二胺二盐酸盐(0.38g，2.42mmol)，然后添加DIPEA(3.38ml，19.33mmol)，并将反应混合物在100℃加热12小时。然后将反应混合物倒入100ml水中，产物以固体形式沉淀出来，将其过滤并干燥。。LCMS：m/z＝469.09(M+H)+
步骤4：(E)-1,13-二氨基-11-氰基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酰胺的合成
Figure BDA0003484970410001541
将(E)-11-氰基-1,13-二硝基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酰胺(1g，4.27mmol)溶解在25THF和10mL MeOH的混合物中，然后在0℃下向其中添加亚硫酸氢钠(7.43g，42.7mmol)在50mL水中的溶液，然后添加氨水溶液(9.24ml，107mmol)。将反应混合物搅拌1小时，根据LCMS判断反应完成后，浓缩挥发物，将残余物用1:1THF和乙酸乙酯的混合物反复萃取。将有机层经Na2SO4干燥并浓缩，得到粗产物，将其原样用于下一步。LCMS：m/z＝409.29(M+H)+
步骤5：(E)-1,15-二氨基-4-氰基-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰胺二氢溴酸盐的合成
Figure BDA0003484970410001542
将(E)-1,13-二氨基-11-氰基-7,8,14,15,18,19-六氢-6H-二苯并[b,j][1,12]二氧杂[4,9]二氮杂环十五烯-3-甲酰胺(700mg，1.714mmol)悬浮在50mL DMF中，并向其中添加溴化氰(1.8g，17.14mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜，悬浮液慢慢变成均匀的绿色溶液。通过LCMS监测反应进程。完成后，减压浓缩DMF，将得到的固体用MeCN-MeOH(7:3)的混合物洗涤并过滤，得到产物，为二氢溴酸盐。LCMS：m/z＝459.29(M+H)+
步骤6：(E)-N,N'-(12-氨基甲酰基-4-氰基-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-1,15-二基)双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺)
Figure BDA0003484970410001551
将(E)-1,15-二氨基-4-氰基-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰胺二氢溴酸盐(150mg，0.24mmol)和1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酸(112mg，0.72mmol)溶解在5ml NMP中，并向其中添加DIPEA(0.34ml，1.93mmol)，然后添加HATU(276mg，0.725mmol)，并将反应混合物在室温搅拌30分钟，然后在微波中在130℃搅拌1小时。反应完成后，将反应混合物倒入冷的饱和盐水溶液中，过滤析出的棕色固体。将固体用乙腈洗涤数次并通过制备型HPLC纯化，得到纯产物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.96(s,2H),8.00(s,1H),7.70(s,1H),7.62-7.31(m,4H),6.56(d,J＝14.8Hz,2H),5.50(s,2H),4.88(s,4H),4.62-4.32(m,9H),2.29(d,J＝10.0Hz,2H),2.08(s,6H),1.32-1.22(m,6H)；LCMS：m/z＝731.65(M+H)+
步骤7：(E)-N,N'-(12-氨基甲酰基-4-(1H-四唑-5-基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-1,15-二基)双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺)
Figure BDA0003484970410001552
将(E)-N,N'-(12-氨基甲酰基-4-氰基-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-1,15-二基)双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺)(170mg，0.233mmol)溶解在密封管中的10mL DMF中。添加叠氮化钠(378mg，5.82mmol)和氯化铵(311mg，5.82mmol)并将反应混合物在120℃加热4小时。反应完成后，蒸馏掉DMF并添加水，导致粗产物的沉淀。将固体过滤并通过反相制备色谱法纯化，得到纯产物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.99-12.85(m,2H),8.01(brs,1H),7.87(s,1H),7.71(s,1H),7.65(s,1H),7.53(s,1H),7.38(brs,1H),6.55(s,2H),5.61-5.45(m,2H),4.90(brs,4H),4.60-4.50(m,4H),4.50-4.32(m,4H),2.37-2.30(m,2H),2.08(s,6H),1.31-1.25(m,6H)；LCMS：m/z＝774.16(M+H)+
实施例-55：(1S,3S)-3-((E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)环丁烷-1-甲酸(化合物55)
Figure BDA0003484970410001561
按照针对实施例35的合成所述类似的程序，由中间体1和(1S,3S)-3-氨基环丁烷-1-甲酸乙酯(Int.18)合成(收率＝25mg，54％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.90(s,2H),8.68(t,J＝7.8Hz,1H),8.01(s,1H),7.71(dd,J＝6.9,1.2Hz,2H),7.53(d,J＝11.0Hz,2H),7.38(s,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(d,J＝8.0Hz,4H),2.46(t,J＝4.8Hz,5H),2.27(dd,J＝20.0,9.5Hz,4H),2.08(s,6H),1.34-1.20(m,6H)。LCMS：m/z＝847.05(M+H)+；HPLC纯度：91.42％
实施例-56：(1R,3R)-3-((E)-4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)环丁烷-1-甲酸(化合物56)
Figure BDA0003484970410001571
按照针对实施例-35的合成所述类似的程序，由中间体1和(1R,3R)-3-氨基环丁烷-1-甲酸乙酯(Int.19)合成(收率＝18mg，7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.85(s,3H),8.69(d,J＝7.4Hz,1H),8.28(s,1H),8.01(s,1H),7.70(dd,J＝12.9,1.2Hz,2H),7.51(dd,J＝18.8,1.4Hz,2H),7.38(s,1H),6.55(s,2H),5.50(s,2H),4.89(s,4H),4.56(dq,J＝21.0,7.5Hz,5H),4.44(s,4H),2.42-2.22(m,5H),2.08(d,J＝6.1Hz,5H),1.31-1.16(m,8H)。LCMS：m/z＝847.05(M+H)+；HPLC纯度：91.06％
实施例-57：(E)-1-((12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)甲基)环丙烷-1-甲酸(化合物57)的合成
Figure BDA0003484970410001572
按照针对实施例-35的合成所述类似的程序，由中间体1和1-氰基环丙烷-1-甲酸乙酯(Int.20)合成(收率＝22mg，17％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(t,J＝5.8Hz,1H),8.02(s,1H),7.69(d,J＝13.6Hz,2H),7.52(d,J＝14.0Hz,2H),7.39(s,1H),6.55(s,2H),5.49(s,2H),4.88(s,4H),4.52(q,J＝7.1Hz,4H),4.43(q,J＝4.5Hz,4H),3.59(d,J＝5.7Hz,2H),2.30(q,J＝5.8Hz,2H),2.07(s,6H),1.26(t,J＝7.1Hz,7H),1.07(q,J＝3.8,3.3Hz,2H),0.96(q,J＝4.3,3.9Hz,2H)。LCMS：m/z＝847.05[M+H]+；HPLC纯度：99.57％
实施例-58：(E)-2-(2-(4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)乙基)烟酸(化合物58)
Figure BDA0003484970410001581
按照针对实施例-35的合成所述类似的程序，由中间体1和2-(2-氨基乙基)烟酸甲酯二盐酸盐(Int.21)合成(收率＝14mg，8.3％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(t,J＝5.7Hz,1H),8.41(d,J＝7.9Hz,1H),8.04(s,1H),7.71(d,J＝1.2Hz,1H),7.59(dd,J＝28.5,1.3Hz,3H),7.47(d,J＝1.4Hz,1H),7.38(s,1H),6.56(s,2H),5.50(d,J＝1.8Hz,2H),4.89(s,3H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.44(d,J＝5.4Hz,4H),3.72(q,J＝6.6Hz,3H),3.49(t,J＝6.9Hz,2H),3.17(s,3H),2.57-2.52(m,11H),2.29(d,J＝6.2Hz,2H),2.08(s,5H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)。LCMS：m/z＝898.90(M+H)+；HPLC纯度：99.20％
实施例-59：(E)-2-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙基)苯甲酸(化合物59)
Figure BDA0003484970410001591
按照针对实施例-35的合成所述类似的程序，由中间体1和2-(3-氨基丙基)苯甲酸甲酯(Int.22)合成(收率＝25mg，16％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.89(brs,3H),8.51(s,1H),8.01(brs,1H),7.89-7.78(m,1H),7.76-7.67(m,2H),7.57-7.44(m,3H),7.43-7.28(m,3H),6.54(s,2H),5.50(s,2H),4.89(s,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.42(brs,4H),3.33-3.25(m,2H),3.00(t,J＝7.8Hz,2H),2.36-2.25(m,2H),2.08(s,6H),1.91-1.75(m,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,6H)；LCMS：m/z＝911.06(M+H)+；HPLC纯度：98.37％
实施例-60：(E)-N-(3-(4-乙氧基-4-氧化-1,4-氮杂磷杂环己烷-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺，盐酸盐(化合物60)
Figure BDA0003484970410001592
按照针对实施例-28的合成所述类似的程序，由中间体1和2-(3-(4-乙氧基-4-氧化-1,4-氮杂磷杂环己烷-1-基)丙基)异吲哚啉-1,3-二酮(Int.23)合成(收率＝12mg，15.7％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.28(s,1H),8.80(t,J＝5.8Hz,1H),8.05(bs,1H),7.71(s,2H),7.61-7.57(m,1H),7.55(s,1H),7.39(bs,1H),6.57(d,J＝1.7Hz,2H),5.57-5.43(m,2H),4.89(bs,4H),4.53(q,J＝7.1Hz,4H),4.45(q,J＝5.3Hz,4H),4.13-3.97(m,2H),3.83-3.59(m,2H),3.59-3.37(m,2H),3.38-3.29(m,2H),3.28-3.11(m,4H),2.34-2.21(m,4H),2.09(s,6H),2.06-1.96(m,2H),1.34-1.21(m,9H)；LCMS：m/z＝92.50(M+H)+；HPLC纯度：98.37％
生物学测定-通过UHPLC测定表观溶解度/扩展的动力学溶解度
测试样品制备：称重约0.5mg测试样品并一式两份转移到96孔板的1mL玻璃插件中。添加5μL DMSO和1ml磷酸盐缓冲液。在37℃的定轨振荡器中平衡24小时。之后，使其冷却至室温并将96孔板离心(以240×10RPM 20分钟)，取上清液物质至收集板中，盖上耐热铝片或取上清液物质直接至HPLC样品瓶中。
一式两份地注入稀释剂作为空白和线性溶液。记录色谱图并绘制浓度(X轴)对面积(y轴)的校准曲线。校准曲线的相关性系数应不小于0.95。如果上述标准通过，则注入测试样品并记录色谱图。如果观察到饱和峰，则适当地用稀释剂稀释测试样品。
计算校准曲线的斜率和截距。从标准曲线中确定样品的溶解度，以μM(微摩尔)表示。
如下表2所示，化合物是可溶的，这是施用(例如静脉内施用)STING激动剂的基本特性。
表2.溶解度数据
Figure BDA0003484970410001601
Figure BDA0003484970410001611
生物学测定-在THP1细胞系中刺激人STING信号传导
使用基于人THP1-BlueTM ISG SEAP的报告细胞系(Invivogen)测试化合物的STING激活潜力。简单地说，将96孔板中的THP1-Blue ISG细胞(100,000个细胞/孔)用不同浓度的测试化合物和参考化合物处理，并在37℃以5％CO2孵育18-20小时。还设置了作为对照的未处理的细胞。孵育后，使用QuantiBlueTM底物试剂(Invivogen)测试细胞上清液的SEAP(分泌的胚胎碱性磷酸酶)活性。通过使用PheraStar/Tecan读数器在620nm波长处测量吸光度来量化蓝色产物的形成。在GraphPad prism 6中对每个数据点的一式两份读数的平均值相对于测试化合物或参考化合物的浓度作图，以计算EC50值。相对于未刺激的细胞对照组估算不同数据点的SEAP诱导的倍数或发光的增加。
化合物2、3、4、5、6、8、11、12、14、16和18显示的EC50值在1至10nM的范围内。
化合物1、7、9、10、17、19、20和22显示的EC50值在11-100nM的范围内。
化合物13、15、21、23、24、25、26和27显示的EC50值为101nM-2.5微摩尔。
对小鼠或人全血中响应于STING激动剂的细胞因子分泌的定量
测试了化合物在小鼠或人全血中诱导细胞因子分泌尤其是IFNβ的能力。使用肝素作为抗凝剂，从C57小鼠中收集小鼠血液。在含有肝素钠的真空采血管中收集人血。用含有2X青霉素-链霉素溶液的无血清RPMI培养基以1:3的比例(四倍)稀释小鼠或人血。将稀释的全血(150μL)接种在U形底的板中，添加50μl在RPMI培养基中制备的测试化合物，用移液管混合两次，然后将板在37℃孵育4小时(小鼠)和5小时(人)。以3μM的最终浓度添加测试化合物。孵育期间结束后，将样品以2500rpm离心5分钟，收集上清液并将其转移至V形底的板中，立即在-80℃保存。分别使用市售的测量小鼠IFNβ(VeriKine小鼠IFNβELISA，PBL assayscience，目录号42400-2)或人IFNβ(VeriKine人IFNβELISA，PBL assay science，目录号41410-2)的试剂盒，处理样品以通过ELISA对IFNβ进行量化。IFNβ水平以pg/mL表示。
在小鼠全血测定中，化合物2、3、4、5、6、8、9、10、11、12、14、16和18在1μM浓度下在4小时时间点显示200-1000pg/mL范围内的IFNβ分泌。
在人全血测定中，化合物2、3、4、5、6、8、9、10、11、12、14、16和18在3μM浓度下在5小时时间点显示200-600pg/mL范围内的IFNβ分泌。
通过静脉内(i.v.)施用的化合物在CT26异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积的影响
5-8周龄组的健康雌性BALB/c小鼠来自研究动物设施(Research AnimalFacility，RAF)。将这些小鼠安置在实验动物室的单独通风笼(IVC)中，并在细胞接种前适应环境至少5天。所有实验活动均在生物安全柜内进行，以确保无菌。在无菌条件下，通过使用配有26G1/2”无菌针头的1mL一次性注射器，用10万个CT26单细胞悬液(结直肠癌模型)接种BALB/c小鼠，生成同种异体移植肿瘤模型。每只小鼠在右侧胁腹区域皮下接种100μL在磷酸盐缓冲盐水(PBS)培养基中的CT26细胞悬浮液。在细胞接种后，将小鼠随机分成不同的组，在各治疗组包括溶媒对照组中，肿瘤体积具有大致相等的平均值和相等的变化(S.E.M.)。
当肿瘤变得可感知时，用游标卡尺测量肿瘤大小。使用以下公式计算肿瘤体积(T.V.)：
肿瘤体积(mm3)＝(L×W2)/2
其中：L-肿瘤的长度，W-肿瘤的宽度
在肿瘤细胞接种后，基于肿瘤体积选择小鼠并随机分成要求数目的组，其在治疗的第1天具有大致相等的平均值和相等的变化。所有研究组均按照第1、4和8天的给药方案通过尾侧静脉以5mL/kg的剂量体积通过静脉途径进行治疗。
每周两次用游标卡尺测量肿瘤大小，并每天记录小鼠的体重。
使用以下公式计算肿瘤生长抑制百分比(％TGI)：
％TGI＝[1-(Tf-Ti)/(Cf-Ci)]×100
其中Tf和Ti分别是最终和初始测试肿瘤体积，Cf和Ci分别是最终和初始对照平均肿瘤体积。
使用以下公式计算肿瘤消退百分比(％TR)：
％TR＝[(初始T.V.-最终T.V.)/(初始T.V.)]×100
其中T.V.＝肿瘤体积
使用以下公式计算体重变化(％)：
体重变化(％)＝[(最终B.Wt.)-(初始B.Wt.)/初始B.Wt.]×100
其中B.Wt.＝体重
图1A和1B分别显示了本发明的代表性化合物(化合物2)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小和体重变化的影响，表明化合物2减小了肿瘤体积，9名受试者中有7名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物2。
图2A和2B分别显示了本发明的代表性化合物(化合物6)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小和体重变化的影响，表明化合物6减小了肿瘤体积，9名受试者中有7名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物6。
图3A和3B分别显示了本发明的代表性化合物(化合物8)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小和体重变化的影响，表明化合物8减小了肿瘤体积，9名受试者中有5名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物8。
图4A和4B分别显示了本发明的代表性化合物(化合物12)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小和体重变化的影响，表明化合物12减小了肿瘤体积，10名受试者中有8名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝10)施用化合物12。
图5A和5B分别显示了本发明的代表性化合物(化合物14)在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中对肿瘤体积减小和体重变化的影响，表明化合物14减小了肿瘤体积，9名受试者中有6名表现出完全的肿瘤消退。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝9)施用化合物14。
图6显示了高剂量下的化合物2在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中的作用，其中化合物2在两种不同剂量下减小了肿瘤体积(化合物2的两种剂量的曲线重叠)。在第1、4和8天以指定剂量向受试者(n＝10)施用化合物2。
此外，当化合物2、6、8、12或14以0.375mpk(mg/kg)给药时，或者当化合物2以1.5mpk(mg/kg)或3mpk(mg/kg)给药时，在CT26异位同种异体移植BALB/c小鼠模型中，超过75％的小鼠在第21天后表现出超过70％的肿瘤消退。此外，即使在3mpk(mg/kg)下，化合物2也保持高功效，而对体重没有显著影响(<10％)。
用化合物2、6、8、12和14治疗后的药代动力学和药效学分析以及肿瘤中免疫细胞浸润的估计
在携带CT26(鼠结直肠癌)肿瘤的小鼠中单剂量静脉内施用后测定小鼠血浆中的血清和肿瘤细胞因子水平以及相应的化合物浓度。简单地说，6-8周龄组的首次接受实验的BALB/c小鼠每只动物皮下接种磷酸盐缓冲盐水(PBS)中的10万个CT-26细胞。在达到150-300mm3的肿瘤体积时，以5mL/kg的剂量体积对动物施用单次静脉内剂量的溶媒、0.375mg/kg的测试化合物(化合物2、化合物6、化合物8、化合物12和化合物14)。在直到给药后24小时的不同时间点采集血液和肿瘤样品。将肿瘤样品匀浆化并制备用于细胞因子估计(ELISA)，并通过LC-MS/MS确定化合物浓度。将血清等分试样和肿瘤样品速冻并储存在-80℃直到进一步分析。使用来自R&D systems的试剂盒(Quantikine小鼠IL-6和TNFα试剂盒)和来自PBLbiosciences的试剂盒(Verikine小鼠IFNβ试剂盒)通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)评价血清和肿瘤样品中的干扰素β(IFNβ)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)。
小鼠血清样品的细胞因子分析：对于IL-6和TNFα估计，将50μL测试样品或内标或对照一式两份地施加到孔中，并在室温下孵育2小时，然后抽吸并用400μL洗涤缓冲液洗涤四次。添加100μL小鼠IL-6或TNFα缀合物溶液，在室温下继续孵育2小时，然后进行4个洗涤循环。每孔添加100μL底物溶液，30分钟后添加终止溶液。在450nm下测量光密度，计算平均值，并在减去各自的空白对照后用于进一步计算。通过利用四参数逻辑(4-PL)曲线拟合将样品的光密度内插到参考标准曲线中来确定细胞因子浓度。将细胞因子浓度用它们各自的稀释因子进行归一化，并以pg/mL表示。对于IFNβ估计，将100μL测试样品或内标或对照一式两份地施加到孔中，并在室温下孵育1小时，然后洗涤3次并添加抗小鼠IFNβ抗体溶液，继续孵育1小时。然后添加辣根过氧化物酶(HRP)溶液并洗涤3次，然后添加TMB底物并在450nm下读取光密度。将光密度减去空白并利用四参数逻辑(4-PL)曲线拟合内插到参考标准中。将细胞因子浓度用它们各自的稀释因子进行归一化，并以pg/mL表示。表4和5显示了对于化合物2、6、8、12和14在不同施用剂量下血清和肿瘤中的细胞因子水平。
来自肿瘤样品的细胞因子分析：在基于珠的匀浆器中将肿瘤样品匀浆化并用补充有1％Triton X-100的缓冲液和蛋白酶抑制剂制备裂解液。通过ELISA估计细胞因子水平并表示为pg/g肿瘤。
血浆和肿瘤样品的生物分析：通过LC-MS/MS方法测定测试化合物的血浆和肿瘤浓度。使用基于珠的匀浆器将肿瘤样品匀浆化。使用蛋白质沉淀法，采用含有各自内标的有机溶液，提取血浆样品和肿瘤匀浆。根据各自的校准曲线确定血浆和肿瘤浓度。表3显示了化合物2在不同施用剂量下在血浆和肿瘤中的浓度。表4显示了化合物6、8、12和14在不同施用剂量下在血浆和肿瘤中的浓度。表5显示了对于化合物2在不同剂量下血清和肿瘤中的细胞因子水平。表6显示了对于化合物6、8、12和14在0.375mpk下血清和肿瘤中的细胞因子水平。
化合物显示在肿瘤中的清除速度比在血浆中慢，这也反映在肿瘤中的细胞因子水平高于血清。此外，即使在24小时，肿瘤中也观察到显著水平的细胞因子。化合物2在肿瘤中显示出持续的水平，并且它还与持续的细胞因子水平相关，从而提供更高的耐受性。
表3.化合物2在不同剂量下在血浆和肿瘤中的浓度
Figure BDA0003484970410001651
Figure BDA0003484970410001661
表4.化合物6、8、12和14在0.375mpk下在血浆和肿瘤中的浓度
Figure BDA0003484970410001662
Figure BDA0003484970410001671
表5.对于化合物2在不同剂量下血清和肿瘤中的细胞因子水平
Figure BDA0003484970410001672
表6.对于化合物6、8、12和14在0.375mpk下血清和肿瘤中的细胞因子水平
Figure BDA0003484970410001673
Figure BDA0003484970410001681
肿瘤中免疫细胞浸润的估计：用0.375mg/kg的测试化合物静脉内治疗携带CT-26肿瘤的Balb/c小鼠，并在治疗开始后24小时和96小时处理血液和肿瘤以分析CD8+、CD3+和CD45+ T细胞。对血液样品进行RBC裂解并通过离心回收细胞。用PBS洗涤后，使用TruStainFcXTM封闭抗体封闭细胞，并用荧光团标记的抗CD45、抗CD3和抗CD8抗体染色。将肿瘤样品切碎并使用新鲜制备的含有脱氧核糖核酸酶(0.05mg/ml)的胶原酶-IV溶液(1mg/ml)在37℃和150-200rpm条件下进行组织消化1-1.5小时。通过100μm筛网过滤制备单细胞悬液并检查细胞活力。如上所述地将细胞用各种抗体染色。在FACS Canto II(BD)上分析不同的T细胞亚群，并在CD45+淋巴细胞种群的初始门控后计算每个种群的百分比。
用化合物2(图7A和7B)、6、8或12以0.375mg/kg的单次静脉内剂量治疗导致在治疗开始后96小时与溶媒治疗组相比％CD3+CD8+ T细胞浸润肿瘤的增加，表7。
例如，图7A显示了用溶媒(DMA(10％):CrEL(10％):PEG300(20％):生理盐水(60％))处理后96小时肿瘤中CD3+CD8+ T细胞浸润的百分比的流式细胞术图。图7B显示了用本发明的代表性化合物(化合物2)处理后96小时肿瘤中CD3+CD8+ T细胞浸润的百分比的流式细胞术图的代表性数据，表明T细胞浸润的百分比高于溶媒对照的百分比。
表7.治疗后96小时肿瘤中的％CD3+CD8+ T细胞浸润
Figure BDA0003484970410001682
Figure BDA0003484970410001691
癌症模型类型的治疗
使用上文第[0608]段中描述的方法，针对多种癌症类型进行了修改，创建了多种癌症肿瘤模型。使用已知方法将癌细胞系同种异体移植到小鼠体内。预期在施用式(I)或式(II)化合物或其前药后小鼠的肿瘤大小将相对于溶剂对照减小。以下细胞类型可以用作各种癌症类型的模型：4-T1和EMT-6(乳腺癌)、B16BL6和B16F10(黑色素瘤)、H22(肝脏)、RM1(***)和Pan02(胰腺癌)。
本文描述和要求保护的本发明具有许多属性和实施方案，包括但不限于在本详细公开中阐述或描述或引用的那些。它不旨在是包括一切的，并且本文描述和要求保护的发明不限于本详细公开中确定的属性或实施方案或受其限制，这些属性或实施方案仅出于说明而非限制的目的而包括在内。本领域普通技术人员将容易地认识到，在不脱离本发明范围的情况下，许多组件和参数可以在一定程度上改变或修改或被已知的等同物替代。应当理解，这些修改和等同物被并入本文，就如同单独阐述一样。本发明还包括在本说明书中单独或共同提及或指示的所有步骤、特征、组合物和化合物，以及任何两个或更多个所述步骤或特征的任何和所有组合。
本文引用或提及的所有专利、出版物、科学文章、网站和其他文件和材料都表明本发明所属领域的技术人员的技能水平，并且每个此类引用的文件和材料均通过引用并入本文，其程度与单独地通过引用的方式以其全文并入或在本文中以其全文进行阐述的程度相同。申请人保留将来从任何此类专利、出版物、科学文章、网站、电子可用信息和其他参考材料或文件的任何和所有材料和信息物理地合并到本说明书中的权利。本说明书中对任何申请、专利和出版物的引用不是，并且不应被视为，承认或任何形式的暗示它们构成有效的现有技术或形成世界上任何国家的公知常识的一部分。
本文所述的具体方法和组合物是优选实施方案的代表并且是示例性的并且不旨在限制本发明的范围。考虑到本说明书，本领域技术人员将想到其他目的、方面和实施方案，并且将它们包括在由权利要求的范围限定的本发明的精神内。对于本领域的技术人员来说，在不背离本发明的范围和精神的情况下，可以对本文公开的发明进行各种替换和修改，这是显而易见的。本文中说明性地描述的发明可以适当地在不存在本文中没有作为必要部分而具体公开的任何一个或多个元素或者一个或多个限制的情况下实施。因此，例如，在本文的每种情况下，以及在本发明的实施方案或实例中，本说明书中的术语“包含”、“基本上由……组成”和“由……组成”中的任何一个可以替换为其他两个术语中的任一个。本文中示例性描述的方法和过程可以适当地以不同的步骤顺序来实施，并且它们不一定限于本文中或权利要求中指示的步骤顺序。此外，本文和所附权利要求中使用的单数形式“一”、“一个”和“该”包括复数参考，除非上下文另有明确规定。在任何情况下，本专利均不得被解释为限于本文具体公开的具体实施例或实施方案或方法。在任何情况下，本专利均不得被解释为受专利商标局的任何审查员或任何其他官员或雇员所作的任何声明的限制，除非该声明在申请人的回应性书面中专门且没有限制或保留地明确采用。此外，提供题目、标题等是为了增强读者对本文件的理解，而不应被视为限制本发明的范围。在此提及的本发明的方面、实施方案或组件的任何实例都被认为是非限制性的。
所使用的术语和表述仅用作描述性术语而非限制性术语，并且无意使用此类术语和表述以排除所示出和描述的特征或其部分的任何等同物，而是应认识到，在所要求保护的本发明的范围内各种修改是可能的。因此，应当理解，虽然已经通过优选实施方案和任选特征而具体公开本发明，但是本领域技术人员可以寻求对本文公开的概念进行修改和变化，并且这些修改和变化被认为是在所附权利要求限定的本发明的范围内。
已在本文中广泛和一般性地描述了本发明。落入一般公开内容的每个较窄的种类和亚组也构成本发明的一部分。这包括本发明的一般性描述，前提条件或负面限制是从一般性描述中删除任何主题，无论本文是否具体列举了删减的材料。
其他实施方案在以下权利要求的范围内。此外，在本发明的特征或方面以马库什组描述的情况下，本领域技术人员将认识到本发明因此也就马库什组的任何个体成员或成员亚组进行了描述。

Claims (26)

1.通式(I)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药
Figure FDA0003484970400000011
其中，
G1独立地选自-CH2-或
Figure FDA0003484970400000012
G2是-CH＝CH-；
环A是任选取代的杂环基和任选取代的杂芳基；
环B是芳环；
环C是任选取代的五元杂芳基；
R1独立地选自任选取代的杂芳基、-CONHSO2R3a和-CON(R3)2；
R2独立地选自氢、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C5单环环烷基；
R3独立地选自氢、取代的烷基、任选取代的环烷基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基、任选取代的芳基烷基和
Figure FDA0003484970400000013
其中当两个环B上的R1取代都是CON(R3)2时，则至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢；
R3a独立地选自任选取代的烷基和任选取代的环烷基；
R3b独立地选自氢或任选取代的烷基；
m是1；
n是0；
o是1；
p选自0、1或2；
当‘烷基’被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、氧代(＝O)、烷基、全卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH、-N(H)-SO2-烷基和-OR4的取代基取代；
当‘碳环’或‘环烷基’被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、烷基、全卤代烷基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH和-OR4的取代基取代；
当‘杂环’或‘杂环基’被取代时，其被1至4个独立地选自氧代(＝O)、卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、杂环基、-OR4、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a、-SO2R4a、-C(＝O)OH、-C(＝O)N(H)R4、-C(＝O)N(烷基)R4、-N(H)C(＝O)R4a、-N(H)-SO2-烷基、-N(H)R4和-N(烷基)R4的取代基取代；
当‘芳基’被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
当‘杂芳基’被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
每个R4独立地选自氢、烷基和环烷基；
每个R4a独立地选自烷基和环烷基。
2.通式(I)化合物、其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药
Figure FDA0003484970400000031
其中，
G1独立地选自-CH2-或
Figure FDA0003484970400000032
G2是-CH＝CH-；
环A是任选取代的杂环基和任选取代的杂芳基；
环B是芳环；
环C是任选取代的五元杂芳基；
R1是-CON(R3)2；
R2独立地选自氢、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C5单环环烷基；
R3独立地选自氢、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基，其中至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢；
m是1；
n是0；
o是1；
p选自0、1或2；
当‘烷基’被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、氧代(＝O)、烷基、全卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH、-N(H)-SO2-烷基和-OR4的取代基取代；
当‘碳环’或‘环烷基’被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、烷基、全卤代烷基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH和-OR4的取代基取代；
当‘杂环’或‘杂环基’被取代时，其被1至4个独立地选自氧代(＝O)、卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、杂环基、-OR4、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a、-SO2R4a、-C(＝O)OH、-C(＝O)N(H)R4、-C(＝O)N(烷基)R4、-N(H)C(＝O)R4a、-N(H)-SO2-烷基、-N(H)R4和-N(烷基)R4的取代基取代；
当‘芳基’被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基,、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
当‘杂芳基’被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
每个R4独立地选自氢、烷基和环烷基；
每个R4a独立地选自烷基和环烷基。
3.通式(II)化合物及其互变异构形式、其立体异构体、其药学上可接受的盐、其水合物、其溶剂化物或其前药A，
Figure FDA0003484970400000041
其中，
R3m是任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基；
G1独立地选自-CH2-或
Figure FDA0003484970400000051
环A是任选取代的杂环基和任选取代的杂芳基；
R2a、R2b、R2c和R2d各自独立地选自氢、任选取代的C1-C6烷基和任选取代的C3-C5单环环烷基；当‘烷基’被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、氧代(＝O)、烷基、全卤代烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH、-N(H)-SO2-烷基和-OR4的取代基取代；
当‘碳环’或‘环烷基’被取代时，其被1至4个独立地选自卤素、烷基、全卤代烷基、杂芳基、杂环基、-N(R4)2、-C(＝O)OH和-OR4的取代基取代；
当‘杂环’或‘杂环基’被取代时，其被1至4个独立地选自氧代(＝O)、卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、杂环基、-OR4、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a、-SO2R4a、-C(＝O)OH、-C(＝O)N(H)R4、-C(＝O)N(烷基)R4、-N(H)C(＝O)R4a、-N(H)-SO2-烷基、-N(H)R4和-N(烷基)R4的取代基取代；
当‘芳基’被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
当‘杂芳基’被取代时，其被1至4个选自卤素、氰基、烷基、全卤代烷基、环烷基、杂环基、-O-烷基、-O-全卤代烷基、-N(烷基)烷基、-N(H)烷基、-SO2-烷基、-N(烷基)C(＝O)烷基、-N(H)C(＝O)烷基、-C(＝O)N(烷基)烷基、-C(＝O)N(H)烷基、-C(＝O)NH2、-SO2N(烷基)烷基、-SO2N(H)烷基、-SO2NH2、-OP(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)2、-P(O)(OR4)R4a和-C(＝O)OH的取代基取代；
每个R4独立地选自氢、烷基和环烷基；
每个R4a独立地选自烷基和环烷基。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中G1是-CH2。
5.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中G1是
Figure FDA0003484970400000052
6.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中环A是任选取代的杂环基或任选取代的杂芳基。
7.根据权利要求6所述的化合物，其中环A是
Figure FDA0003484970400000053
8.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R2是甲基或乙基。
9.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R1是-CON(R3)2，其中R3独立地选自氢、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基，其中至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢。
10.根据权利要求3所述的化合物，其中R3m是
Figure FDA0003484970400000061
11.根据权利要求1或2所述的化合物，其中R2是任选取代的C1-C6烷基；G2是-CH＝CH-；环C是吡唑；环B是芳环；n是0；m是1；p是1或2；o是1；G1是-CH2-或
Figure FDA0003484970400000062
其中环A是任选取代的杂环基或任选取代的杂芳基，且R1是-CON(R3)2，其中R3是氢、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基烷基和任选取代的芳基烷基，其中至少对于一个R1取代，两个R3取代不能同时是氢。
12.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自：
(1S,4S)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物1)；
(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物2)；
(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物3)；
(E)-N-(2-(1H-四唑-5-基)乙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物4)；
(E)-2-(2-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)乙基)苯甲酸(化合物5)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物6)；
(E)-N-((1S,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物7)；
(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物8)；
(E)-2-((12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)甲基)烟酸(化合物9)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-四唑-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物10)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物11)；
(8S,E)-N4-((1R,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物12)；
(8R,E)-N4-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物13)；
(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物14)；
(1R,4R)-4-((8R,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物15)；
(8S,E)-N4-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物16)；
(8R,E)-N4-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物17)；
1-(3-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物18)；
1-(3-((8R,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物19)；
(1R,4R)-4-((E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物20)；
(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物21)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物22)；
(E)-1-(3-(8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物23)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物24)；
(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物25)；
(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物26)；
(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物27)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(2-吗啉代乙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物28)；
(E)-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-羰基)甘氨酸(化合物29)；
(E)-N-(2-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)乙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物30)；
(E)-3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙酸(化合物31)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-吗啉代丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物32)；
(E)-N-(3-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物33)；
(E)-N-(4-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)丁基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物34)；
(E)-(2-(4-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-12-甲酰氨基)乙基)-L-脯氨酸(化合物35)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物36)；
(E)-N-(3-(4,4-二氟哌啶-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物37)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(4-吗啉代丁基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物38)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-氟哌啶-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物39)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(甲基磺酰基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物40)；
(R,E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物41)；
(S,E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(3-氟吡咯烷-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物42)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(2-(甲基磺酰氨基)乙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物43)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-(甲基磺酰基)哌啶-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物44)；
E)-N-(3-(3,3-二氟吡咯烷-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物45)；
(E)-N-(3-((2R,6S)-2,6-二甲基吗啉代)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物46)；
(E)-N-(3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物47)；
(E)-N-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物48)；
(S,E)-2-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)-3-(二甲基氨基)丙酸(化合物49)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(吡啶-2-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物50)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(4-(三氟甲基)哌啶-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物51)；
(E)-N-(3-(3,3-二甲基吗啉代)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物52)；
(E)-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-羰基)甘氨酰-L-缬氨酸(化合物53)；
(E)-N,N'-(12-氨基甲酰基-4-(1H-四唑-5-基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-1,15-二基)双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(化合物54)；
(1S,3S)-3-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环丁烷-1-甲酸(化合物55)；
(1R,3R)-3-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)环丁烷-1-甲酸(化合物56)；
(E)-1-((12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)甲基)环丙烷-1-甲酸(化合物57)；
(E)-2-(2-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)乙基)烟酸(化合物58)；
(E)-2-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4-甲酰氨基)丙基)苯甲酸(化合物59)；
(E)-N-(3-(4-乙氧基-4-氧化-1,4-氮杂磷杂环己烷-1-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c'd']二茚-4,12-二甲酰胺(化合物60)。
13.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中所述化合物选自：
(1S,4S)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物1)；
(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物2)；
(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物3)；
(E)-N-(2-(1H-四唑-5-基)乙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物4)；
(E)-2-(2-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)乙基)苯甲酸(化合物5)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物6)；
(E)-N-((1S,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物7)；
(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物8)；
(E)-2-((12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)甲基)烟酸(化合物9)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1H-四唑-1-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物10)；
(E)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-N-(3-(5-氧代-4,5-二氢-1,2,4-噁二唑-3-基)丙基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物11)；
(8S,E)-N4-((1R,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物12)；
(8R,E)-N4-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物13)；
(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物14)；
(1R,4R)-4-((8R,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物15)；
(8S,E)-N4-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物16)；
(8R,E)-N4-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物17)；
1-(3-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物18)；
1-(3-((8R,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物19)；
(1R,4R)-4-((E)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物20)；
(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物21)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物22)；
(E)-1-(3-(8-(8-氧杂-3-氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物23)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物24)；
(E)-N-(3-(1H-四唑-5-基)丙基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物25)；
(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物26)；
(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8-吗啉代-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物27)。
14.根据权利要求1至11中任一项所述的化合物，其中所述化合物选自：
(1R,4R)-4-((E)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物2)；
(E)-N-((1R,4R)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物6)；
(E)-1-(3-(12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)丙基)-1H-吡唑-4-甲酸(化合物8)；
(8S,E)-N4-((1R,4S)-4-(1H-四唑-5-基)环己基)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4,12-二甲酰胺(化合物12)；
(1S,4R)-4-((8S,E)-8-(3-氧杂-8-氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)-12-氨基甲酰基-1,15-双(1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰氨基)-8,9,16,19-四氢-7H-6,10-二氧杂-2,14,15a,19a-四氮杂环十五[3,2,1-cd:8,9,10-c’d’]二茚-4-甲酰氨基)环己烷-1-甲酸(化合物14)。
15.一种药物组合物，其包含权利要求1至14中任一项所述的式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐和至少一种或多种药学上可接受的赋形剂。
16.权利要求1至14中任一项所述的式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗其中激活STING是有益的疾病或状况的药物中的用途。
17.一种治疗有需要的受试者的其中激活STING是有益的疾病或状况的方法，该方法包括向所述受试者施用治疗有效量的权利要求1至14中任一项所述的式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐。
18.根据权利要求17所述的方法，其中所述疾病或状况是癌症或者一种或多种感染性疾病。
19.根据权利要求17所述的方法，其中所述疾病或状况是癌症，其中所述癌症是一种或多种实体瘤、白血病、淋巴瘤或其组合。
20.根据权利要求17所述的方法，其中所述疾病或状况是一种或多种感染性疾病，其中感染性疾病是病毒感染、细菌感染或其组合。
21.根据权利要求18或19所述的方法，其中所述癌症选自脑癌、肾癌、睾丸癌、尿道癌、直肠癌、输卵管癌、***癌、***癌、胃癌、皮肤癌、肝癌、胃肠道间质瘤、尿路上皮癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、肾上腺癌、骨癌、口腔癌、卵巢癌、子宫癌、头颈部鳞状细胞癌、子宫内膜癌、胆囊癌、肾癌、膀胱癌、口咽癌、***癌、胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤或软组织肉瘤、纤维肉瘤、软骨肉瘤、血管瘤、畸胎瘤、脂肪瘤、粘液瘤、纤维瘤、横纹肌瘤、畸胎瘤、胆管癌、骨髓瘤、尤文氏肉瘤、骨髓瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、Burkitt淋巴瘤、淋巴母细胞性T细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、皮肤T细胞淋巴瘤、CNS淋巴瘤、小淋巴细胞淋巴瘤、淋巴浆细胞淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤(DLBCL)、外周T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤、原发性纵隔淋巴瘤、蕈样真菌病、小无裂细胞淋巴瘤、淋巴母细胞淋巴瘤、免疫母细胞淋巴瘤、原发性渗出性淋巴瘤、HIV相关(或AIDS相关)的淋巴瘤、淋巴母细胞性T细胞白血病、慢性髓细胞性白血病、急性淋巴母细胞性T细胞白血病、淋巴母细胞性T细胞白血病、急性髓细胞性白血病、多毛细胞白血病、慢性中性粒细胞性白血病、套细胞白血病、急性巨核细胞白血病、多发性骨髓瘤、成巨核细胞白血病、红白血病、浆细胞瘤、早幼粒细胞白血病、慢性骨髓单核细胞白血病、骨髓增生异常综合征、骨髓纤维化、慢性髓细胞性白血病、真性红细胞增多症、血小板增多症、慢性淋巴细胞白血病、幼淋巴细胞白血病、多毛细胞白血病、Waldenstrom巨球蛋白血症、Castleman病、慢性中性粒细胞白血病、免疫母细胞性大细胞白血病和浆细胞瘤。
22.根据权利要求18或20所述的方法，其中所述疾病和状况是HIV、HPV、HCV、HBV、甲病毒、轮状病毒或流感感染。
23.根据权利要求17所述的方法，其还包括向所述受试者施用一种或多种另外的疗法。
24.根据权利要求23所述的方法，其中所述另外的疗法是化学疗法、免疫疗法、放射治疗或其组合。
25.根据权利要求1至14中任一项所述的化合物，其用作疫苗佐剂。
26.一种组合物，其包含(i)权利要求1至14中任一项所述的式(I)、式(II)化合物或其药学上可接受的盐，和{ii}一种或多种抗原、一种或多种抗原组合物或其组合。
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