CN112300243A - 一种环肽化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种环肽化合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112300243A
CN112300243A CN202011032764.0A CN202011032764A CN112300243A CN 112300243 A CN112300243 A CN 112300243A CN 202011032764 A CN202011032764 A CN 202011032764A CN 112300243 A CN112300243 A CN 112300243A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cyclic peptide
culture solution
compound
volume
ethyl acetate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202011032764.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN112300243B (zh
Inventor
吴斌
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University ZJU
Original Assignee
Zhejiang University ZJU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University ZJU filed Critical Zhejiang University ZJU
Priority to CN202011032764.0A priority Critical patent/CN112300243B/zh
Publication of CN112300243A publication Critical patent/CN112300243A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN112300243B publication Critical patent/CN112300243B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了一种环肽化合物及其制备方法和应用，属于海洋真菌活性成分分析技术领域。本发明从海洋真菌的发酵培养物中提取、分离获得了两个具有新颖结构的环肽化合物，分子式分别为C20H23N3O6、C20H23N3O5，其制备方法包括：将经活化的篮状菌属真菌CX11接种到培养液中发酵培养；再分离得到菌丝体和发酵液，其中菌丝体加入甲醇中浸提，分离得到浸提液，再用乙酸乙酯或氯仿对浸提液进行萃取；发酵液用乙酸乙酯或氯仿进行萃取，然后萃取液经浓缩、分离纯化后，制得所述环肽化合物。所述环肽化合物具有较好的抗肿瘤和抗菌活性，在制药领域具有良好的开发前景。

Description

一种环肽化合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及海洋真菌活性成分分析技术领域，具体涉及一种结构新颖 的含氧桥环肽化合物及其制备方法和应用。
背景技术
海洋微生物能够耐受海洋特有的如高盐、高压、低氧、低光照等极端 条件，生活环境的特异性导致海洋微生物在物种、基因组成和生态功能上 的多样性。海洋微生物中的海洋真菌是活性次级代谢产物的丰富的来源， 海洋真菌的次级代谢产物70-80％具有生物活性，包括小分子内脂化合物； 真菌毒素；对中枢神经***有抑制活性的新物质；1-十二醇、不饱和烃、 酸、酯；可抑制植物和人的真菌病毒作用于真菌细胞壁合成新靶位的脂肽 类抗生素。
以海洋真菌为原料发现具有特定结构类型的天然产物对于海洋药物 的研发具有重要意义。随着海洋微生物资源获取技术的进步，给海洋微生 物源天然药源化合物的研究带来了前所未有的机遇。
专利文献CN 108485987 A公开了从威海附近海域的底泥中分离一株 对多株病原菌均有抗菌活性的海洋真菌WH4-2，经ITS全序列分析鉴定为 柄篮状菌，该菌具有高效的抗副溶血弧菌活性，且活性物质“含异戊烯基 的二苯并氧杂环庚酮类化合物”的产量较大，有望应用于新型抗副溶血弧 菌的药物开发。
目前关于篮状菌属真菌(Talaromyces)的化学成分研究较少。中科院昆 明植物所2011年从云南红豆杉内生真菌Talaromyces sp.TIBF中分离得到 5α，6α-环氧-24(R)-甲基胆甾-7,22-二烯-3β-醇、醌茜素、苔色酸和间甲基 苯酚，Bok(1999)等在活性跟踪下从Cordyceps sinensis分离得到的5α，6α- 环氧-24(R)-甲基胆甾-7,22-二烯-3β-醇具有较好的抗肿瘤活性(李良群，杨 艳光，曾英，邹澄，赵沛基，广西植物,云南红豆杉内生真菌Talaromyces sp.TIBF的化学成分研究,2011,31(5),pp 699-701)。
课题组前期从海洋植物中分离得到篮状菌属真菌CX11(Talaromyces sp.CX11)，并从中提取得到一种结构新颖且对伪狂犬病毒具有较好抗病毒 活性的杂萜化合物，见专利文献CN 110452247 A。
但是迄今还未查到有文献报道从篮状菌属真菌中分离得到抗肿瘤的 含氧桥环肽化合物。
发明内容
本发明的目的在于从海洋篮状菌属真菌(Talaromyces)中提取获得具 有药用价值的天然活性物质。
为实现上述目的，本发明提供了一种环肽化合物，结构式如式(Ⅰ)所 示：
Figure BDA0002704222820000021
其中R为OH或H。
上述两个化合物是从篮状菌属真菌CX11中分离得到的具有带氧桥的 环酯肽结构的环肽化合物。本文中将R＝OH的环肽化合物记为化合物1， 分子式为C20H23N3O6，R＝H的环肽化合物记为化合物2，分子式为 C20H23N3O5。
本发明还提供了所述环肽化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)将保藏号为CCTCC NO：M 2018338的篮状菌属真菌CX11 (Talaromycespurpureogenus.CX11)活化后接种于培养液中，20-30℃静态 培养10-40天；
以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：淀粉1-5g、麸皮10-20g、 酵母膏3-15g、KH2PO4 1-8g，MgSO4·7H2O 0.1-0.8g，余量为水；
或者，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：马铃薯200-600g、 蛋白胨2-10g、酵母膏1-5g、葡萄糖5-20g、余量为水；培养液初始pH 值为6.0-7.0；
或者，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：蔗糖10-40g、玉 米粉5-20g、NaNO3 1-4g、酵母膏1-4g、KH2PO4 0.2-0.8g、MgSO4·7H2O 0.2-1g、KCl 0.2-1g、FeSO40.001-0.005g，余量为水。
(2)发酵培养结束后，分离得到菌丝体和发酵液；
(3)将菌丝体加入甲醇中浸提，分离得到浸提液，浸提液浓缩后用蒸馏 水混悬，得到水混悬液，然后用乙酸乙酯或氯仿对水混悬液进行萃取，萃 取液经浓缩、分离纯化后，制得环肽化合物；
或者，用乙酸乙酯或氯仿对发酵液进行萃取，萃取液经浓缩、分离纯 化后，制得环肽化合物；
所述分离纯化包括：a、对萃取液进行正相硅胶柱层析分离，依次以 体积比9:1、8：1、7:1、6:1、5:1、4:1、3：1、2:1、1:1、1:3、1:9的石油 醚/乙酸乙酯混合液和乙酸乙酯进行梯度洗脱，收集体积比4:1的石油醚/ 乙酸乙酯混合液洗脱出的馏分；b、收集的馏分再进行反相硅胶柱层析， 依次以体积比1:9、2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:3、8:2、9:1的甲醇/水混合 液进行梯度洗脱，收集6:4馏分；c、反相层析收集的6:4馏分使用SEC 色谱柱LH-20分离，甲醇作为流动相，获得目标馏分，继而用高效液相色 谱分离，流动相为体积比55:45的甲醇/水混合液，流速为10mL/min，保 留时间41分钟的峰为R＝OH的环肽化合物，保留时间46分钟的峰为R＝H 的环肽化合物。
步骤(1)中，对篮状菌属真菌CX11(Talaromyces sp.CX11)进行发酵培 养。
篮状菌属真菌CX11(Talaromyces sp.CX11)为真菌，采用常规的PDA 液体培养基或麦芽汁培养基即可用于发酵培养。为了增加产量，给微生物 生长代谢提供足够的营养成分，优选地，以体积1L计，所述的培养液包 括以下原料：淀粉3g，麸皮14g，酵母膏6g，KH2PO45g，MgSO4·7H2O 0.4g，水为余量；
或者，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：马铃薯400g，蛋 白胨6g，酵母膏2g，葡萄糖10g，水为余量；
或者，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：蔗糖25g，玉米 粉10g，NaNO3 2g，酵母膏2g，KH2PO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，KCl 0.5g， FeSO4 0.001g，水为余量。
所述静态培养方式即不进行摇瓶培养。优选的，发酵培养的温度为 22-26℃。更优选为25℃培养20天。
步骤(2)中，分离获得菌丝体和发酵液，所述的菌丝体和发酵液中均能 提取分离得到所述环肽化合物。
其中，利用菌丝体获取环肽化合物时，将菌丝体置于甲醇中浸泡7-14 天，菌丝体充分破壁，使胞内物质有效溶出。
利用发酵液获取环肽化合物时，将发酵液与硅藻土搅拌后，采用乙酸 乙酯回流进行萃取。
所述的分离纯化为：对萃取液进行正相硅胶柱层析分离，所得馏分再 进行反相硅胶柱层析和高效液相色谱分离。通过多步分离纯化，能获得纯 度较高的环肽化合物。
本发明研究表明，利用上述方法从篮状菌属真菌CX11(Talaromyces sp. CX11)发酵培养物中分离得到的环肽化合物具有较好的抗肿瘤活性和抗菌 活性，因此，本发明还提供了所述的环肽化合物在制备抗肿瘤药物或抗菌 药物中的应用。具体地，所述肿瘤为***；病原菌为金黄色葡萄球菌， 尤其是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。
所述药物以本发明的环肽化合物为主要活性成分，添加药剂学上可接 受的辅料制成，可按照药剂学上记载的制剂制备方法制成制剂。所述的制 剂可以为注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、 糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、***剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹 剂、喷雾剂、滴丸剂、崩解剂、口崩片、微丸等。
本发明具备的有益效果：
(1)本发明利用环肽的极性差异从海洋真菌的发酵培养物中提取、分离 获得了一种具有新颖结构的环肽化合物，该方法操作简便、提取得率高、 产物纯度高，适合规模化生产。
(2)通过体外抗肿瘤试验，表明本发明提供的环肽化合物具有较好的抗 肿瘤活性，针对肿瘤细胞Hela，化合物1的IC50值为21.2μM，化合物2 的IC50值为32.8μM，可用于制备抗肿瘤药物，具有良好的开发前景。
(3)通过体外抗菌试验，表明本发明提供的环肽化合物具有较好的体外 抗菌活性，针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，化合物1的MIC值为4μM， 化合物2的MIC值为4μM，可用于制备抗感染药物，具有良好的开发前 景。
附图说明
图1为本发明两个环肽化合物的结构式。
图2为本发明化合物1的1H NMR图谱(in CD3OD)。
图3为本发明化合物1的13C NMR图谱(in CD3OD)。
图4为本发明化合物2的1H NMR图谱(in CD3OD)。
图5为本发明化合物2的13C NMR图谱(in CD3OD)。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于 此。
菌株篮状菌属真菌CX11(Talaromyces purpureogenus.CX11)分离自浙 江沿海的大型海洋植物，于2018年6月4日保藏于中国典型培养物保藏 中心，保藏地址：中国武汉，武汉大学；保藏号为：CCTCC NO：M 2018338。
实施例1篮状菌属真菌的发酵培养
将经活化的篮状菌属真菌制成孢子悬浮液，再接种到培养液中，于 25℃静态发酵培养20天。
其中，培养液配方为：淀粉3g，麸皮14g，酵母膏6g，KH2PO45g， MgSO4·7H2O 0.4g，水1000mL。
实施例2篮状菌属真菌的发酵培养
将经活化的篮状菌属真菌制成孢子悬浮液，再接种到培养液中，于 24℃静态发酵培养20天。
其中，培养液配方为：马铃薯400g，蛋白胨6g，酵母膏2g，葡萄 糖10g，水1000mL；培养液的初始pH值为6.5。
实施例3篮状菌属真菌的发酵培养
将经活化的篮状菌属真菌制成孢子悬浮液，再接种到培养液中，于 25℃静态发酵培养20天。
其中，培养液配方为：蔗糖25g，玉米粉10g，NaNO3 2g，酵母膏2g， KH2PO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4 0.001g，水1000mL。
实施例4环肽化合物的制备
篮状菌属真菌发酵培养后，取5L发酵培养液，离心取沉淀得到菌丝 体；菌丝体用甲醇浸泡1周，浸泡液经浓缩后用1L蒸馏水混悬，水混悬 液合并，用6L乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯萃取液经浓缩得到浸膏10g；用 硅胶(100目，100g)拌样，进行正相硅胶柱层析分离(200-300目，100g； 硅胶柱尺寸L 50mm，
Figure BDA0002704222820000061
)，依次以体积比9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:3、1:9的石油醚/乙酸乙酯混合液和乙酸乙酯进行梯 度洗脱，每次300mL；TLC检测馏分；收集4:1馏分再用甲醇重结晶得 到主要为化合物1的粗结晶a。母液继续重结晶，得到主要为化合物2的 粗结晶b。粗结晶a和粗结晶b分别再用甲醇重结晶得到纯化合物1和纯 化合物2。
实施例5环肽化合物的制备
篮状菌属真菌发酵培养后，取5L发酵培养液，离心取上清得到发酵 液；发酵液浓缩，用10g硅藻土拌样，1L乙酸乙酯回流，进行正相硅胶 柱层析分离(200-300目，1kg；硅胶柱尺寸L 50mm，
Figure BDA0002704222820000062
)，依次以 体积比9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:3、1:9的石油醚/ 乙酸乙酯混合液和乙酸乙酯进行梯度洗脱，收集4:1馏分；收集的馏分再 进行反相硅胶柱层析，依次以体积比1:9、2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:3、 8:2、9:1的甲醇/水混合液进行梯度洗脱，收集6:4馏分；反相层析6:4馏 分继而使用SEC色谱LH-20(甲醇为溶剂，分离得到7个馏分)，取第3个 馏分继而用高效液相色谱分离，流动相为体积比55:45的甲醇/水混合液， 流速为10mL/min，保留时间41分钟的峰为R＝OH的环肽化合物，保留时 间46分钟的峰为R＝H的环肽化合物。
实施例6环肽化合物的结构鉴定
采用HPLC对制得的化合物进行纯度鉴定，纯度大于98％的样品运用 质谱和核磁共振技术进行结构鉴定，核磁共振用Bruker AVANCE DRX-600 NMR Sectrometer测定，TMS作内标；高分辨质谱FTICRMS用Bruker Apex Spectrometer测定；电喷雾质谱ESI-MS用Bruker Esquire 3000plus Spectrometer测定。
根据化合物的一维NMR分析结果(见表1)和二维NMR分析结果，可 知，化合物1的分子式为C20H23N3O6，化合物2的分子式为C20H23N3O5， 结构如图1所示：
表1环肽化合物的NMR数据
Figure BDA0002704222820000071
实施例7环肽化合物抗肿瘤活性分析
Hela细胞培养于含10％小牛血清、青霉素100IU/mL及链霉素100 g/mL的RP-MI1640培养基中，每3d换液1次，每5d传代1次。细胞 均置于37℃。取对数生长期细胞，以RPMI1640培养基稀释成5×104/mL 单细胞悬液，接种于96孔细胞培养板，每个浓度复种3孔，每孔180μL。 置培养箱温育12h后，药物组每孔加不同浓度供试液20μL，平行设空白 对照组(用等体积的RPMI 1640培养基代替受试药物)，阳性对照组(5-FU) 共培养48h。每孔加入1mg/mL MTT溶液50μL，继续培养4h后，吸尽 上清液，每孔加入二甲基亚砜(DMSO)150μL，充分溶解MTT还原产物。 置酶标仪上于492nm波长处测定各药物组和空白组的光密度(D)，按公式 计算得到药物对肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)，并对药效进行初步的评 价。
IR(％)＝(1-加药组平均D值/对照组平均D值)×100％。
实验结果知，化合物1的IC50值为21.2μM，化合物2的IC50值为32.8μM, 阳性对照5-FU的IC50值为22.9μM，表明该化合物具有较好的抗肿瘤作 用。
实施例8环肽化合物抗菌活性分析
抑菌活性测试采用肉汤稀释法。测试选用了金黄色葡萄球菌[CMCC (B)26003]，使用四环素作为阳性对照药。
在无菌室的无菌操作台进行细菌的培养。取2mL培养液加入到15mL 无菌离心管中，再加入20μL菌液放入培养液中混匀后放入37℃恒温培养 箱中分别培养20-24h。在无菌96孔板中，每个孔加入100μL培养液，加 入2μL测试样品，在培养液中放入适当量的细菌并对其进行稀释后每个 孔加入稀释后的细菌液100μL，并设立空白对照组，用酶标仪在650nm处测其样品和菌液混合液的96孔板吸光度值，将96孔板放入37℃恒温培 养箱中培养20-24h后，再次测定其吸光度值。
经过计算，化合物1的MIC值为4μM，化合物2的MIC值为4μM， 阳性对照四环素的MIC值为4μM。
实施例9含环肽化合物滴丸制剂的制备
取0.5g环肽化合物与10.5g聚乙二醇-6000混合均匀，加热熔融，化 料后移至滴丸滴灌中，药液滴至6～8℃液体石蜡中，除油，制得滴丸300 粒。
实施例10含环肽化合物冻干粉针剂的制备
取环肽化合物0.5g、葡萄糖4.5g、硫代硫酸钠0.9g和蒸馏水1000ml， 上述组分混合均匀后，冷冻干燥，分装400支，即得。

Claims (10)

1.一种环肽化合物，其特征在于，结构式如式(Ⅰ)所示：
Figure FDA0002704222810000011
其中R为OH或H。
2.如权利要求1所述的环肽化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将保藏号为CCTCC NO：M 2018338的篮状菌属真菌CX11(Talaromycespurpureogenus.CX11)活化后接种于培养液中，20-30℃静态培养10-40天；
以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：淀粉1-5g、麸皮10-20g、酵母膏3-15g、KH2PO41-8g，MgSO4·7H2O 0.1-0.8g，余量为水；
或者，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：马铃薯200-600g、蛋白胨2-10g、酵母膏1-5g、葡萄糖5-20g、余量为水；培养液初始pH值为6.0-7.0；
或者，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：蔗糖10-40g、玉米粉5-20g、NaNO3 1-4g、酵母膏1-4g、KH2PO4 0.2-0.8g、MgSO4·7H2O 0.2-1g、KCl 0.2-1g、FeSO4 0.001-0.005g，余量为水；
(2)发酵培养结束后，分离得到菌丝体和发酵液；
(3)将菌丝体加入甲醇中浸提，分离得到浸提液，浸提液浓缩后用蒸馏水混悬，得到水混悬液，然后用乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷或***对水混悬液进行萃取，萃取液经浓缩、分离纯化后，制得环肽化合物；
或者，用乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷或***对发酵液进行萃取，萃取液经浓缩、分离纯化后，制得环肽化合物；
所述分离纯化包括：a、对萃取液进行正相硅胶柱层析分离，依次以体积比9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1、1:3、1:9的石油醚/乙酸乙酯混合液和乙酸乙酯进行梯度洗脱，收集体积比4:1的石油醚/乙酸乙酯混合液洗脱出的馏分；b、收集的馏分再进行反相硅胶柱层析，依次以体积比1:9、2:8、3:7、4:6、5:5、6:4、7:3、8:2、9:1的甲醇/水混合液进行梯度洗脱，收集6:4馏分；c、反相层析收集的6:4馏分使用SEC色谱柱分离，获得目标馏分，继而用高效液相色谱分离，流动相为体积比55:45的甲醇/水混合液，流速为10mL/min，保留时间41分钟的峰为R＝OH的环肽化合物，保留时间46分钟的峰为R＝H的环肽化合物。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：淀粉3g，麸皮14g，酵母膏6g，KH2PO4 5g，MgSO4·7H2O 0.4g，水为余量。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：马铃薯400g，蛋白胨6g，酵母膏2g，葡萄糖10g，水为余量。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，以体积1L计，所述的培养液包括以下原料：蔗糖25g，玉米粉10g，NaNO3 2g，酵母膏2g，KH2PO4 0.5g，MgSO4·7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4 0.001g，水为余量。
6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，发酵培养的条件为25℃培养20天。
7.如权利要求1所述的环肽化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为***。
9.如权利要求1所述的环肽化合物在制备抗菌药物中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，病原菌为金黄色葡萄球菌。
CN202011032764.0A 2020-09-27 2020-09-27 一种环肽化合物及其制备方法和应用 Active CN112300243B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011032764.0A CN112300243B (zh) 2020-09-27 2020-09-27 一种环肽化合物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202011032764.0A CN112300243B (zh) 2020-09-27 2020-09-27 一种环肽化合物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN112300243A true CN112300243A (zh) 2021-02-02
CN112300243B CN112300243B (zh) 2022-03-25

Family

ID=74488522

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011032764.0A Active CN112300243B (zh) 2020-09-27 2020-09-27 一种环肽化合物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112300243B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115043790A (zh) * 2022-07-18 2022-09-13 贵州大学 一种对称杂环化合物、制备方法及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20110250656A1 (en) * 2007-08-28 2011-10-13 Dtu, Technical University Of Denmark Production of monascus-like azaphilone pigment
CN110437247A (zh) * 2018-05-03 2019-11-12 中国医学科学院药物研究所 一种具有保肝护肝作用的混源萜类化合物及其用途
CN110452247A (zh) * 2019-07-31 2019-11-15 浙江大学 一种杂萜化合物及其制备方法和应用
CN110746446A (zh) * 2019-10-17 2020-02-04 中国科学院华南植物园 二聚四氢Xanthone类化合物及其制备方法和应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20110250656A1 (en) * 2007-08-28 2011-10-13 Dtu, Technical University Of Denmark Production of monascus-like azaphilone pigment
CN110437247A (zh) * 2018-05-03 2019-11-12 中国医学科学院药物研究所 一种具有保肝护肝作用的混源萜类化合物及其用途
CN110452247A (zh) * 2019-07-31 2019-11-15 浙江大学 一种杂萜化合物及其制备方法和应用
CN110746446A (zh) * 2019-10-17 2020-02-04 中国科学院华南植物园 二聚四氢Xanthone类化合物及其制备方法和应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CAO, X等: "Polycyclic meroterpenoids, talaromyolides E - K for antiviral activity against pseudorabies virus from the endophytic fungus Talaromyces purpureogenus", 《TETRAHEDRON》 *
陈雪刚: "台湾近海热液体系独特的生物及地球化学特征", 《海洋学报》 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115043790A (zh) * 2022-07-18 2022-09-13 贵州大学 一种对称杂环化合物、制备方法及其应用
CN115043790B (zh) * 2022-07-18 2023-09-26 贵州大学 一种对称杂环化合物、制备方法及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN112300243B (zh) 2022-03-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110452247B (zh) 一种杂萜化合物及其制备方法和应用
CN104478891A (zh) 源于桔青霉的桔霉素类化合物penicitrinol O及其制备方法和应用
CN103865808A (zh) 一种源于桔青霉的青霉烯醇a1的抗肿瘤新用途
CN104402899A (zh) 源于桔青霉的桔霉素类化合物penicitrinol L及其制备方法和应用
CN104447781A (zh) 源于桔青霉的桔霉素类化合物penicitrinol N及其制备方法和应用
CN112300243B (zh) 一种环肽化合物及其制备方法和应用
CN103724290A (zh) 一种环肽化合物clavatustide A及其产生菌、制备方法和应用
CN101153052B (zh) 一组尿苷肽类抗生素和其药学上可接受的盐、及其制备方法和用途
CN109678917A (zh) 艾美克勒霉素及其制备方法和应用
CN111689895B (zh) 两个支链异构化粉蝶霉素类化合物及其在制备抗肾癌药物中的应用
CN103641791B (zh) 一种环肽化合物clavatustide B及其制备方法和应用
CN114213428A (zh) 一种吲哚生物碱化合物及其制备方法和应用
CN102051394A (zh) 一种硫代二酮哌嗪类化合物制备方法及其应用
CN105837590A (zh) 具有抗白色念珠菌活性的化合物及其制备方法和应用
CN115894519B (zh) 一种三肽生物碱化合物及其制备方法和应用
CN105112322A (zh) 灰霉醌a和b及其制备方法和医药用途
CN116199695B (zh) 一类桔霉素衍生物及其制备方法和应用
CN108660169A (zh) 一种发酵制备棘孢菌素类抗生素的方法
CN116874417B (zh) 一种吡啶类生物碱及其在抗肿瘤药物制备中的应用
CN114230578B (zh) 一种二酮吗啉生物碱化合物及其制备方法和应用
CN115287236B (zh) 一类昆虫共生放线菌来源的生物碱化合物的制备方法和用途
CN115433153B (zh) 一对具有抗炎活性的聚酮类化合物及其制备方法和应用
CN103265522B (zh) 一种源于桔绿木霉的内酯衍生物及其应用
CN102477454B (zh) 一种吡喃酮类化合物的制备方法
CN108676013B (zh) 具有自噬激活活性的黄醇酮类化合物、其制备方法及其制药应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant