CN111912926A - 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 - Google Patents
一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111912926A CN111912926A CN202010916104.2A CN202010916104A CN111912926A CN 111912926 A CN111912926 A CN 111912926A CN 202010916104 A CN202010916104 A CN 202010916104A CN 111912926 A CN111912926 A CN 111912926A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- reduced glutathione
- sample
- liquid chromatography
- ultra
- performance liquid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/72—Mass spectrometers
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明提供了一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，属于化学分析检测领域，本发明所述的检测方法包括以下步骤：样品经超纯水超声提取5～30分钟，离心得到待测样品溶液；采用超高效液相色谱‑串联质谱进行检测，外标法定量；所用色谱柱为ACQUITY UPLC BEH C18或ACQUITY UPLC BEH HILIC，流动相的水相为pH3.0，含0.1%甲酸的超纯水，有机相为乙腈或甲醇；电喷雾离子源，正离子多反应监测模式扫描，质谱采集参数为：母离子m/z 308.1，子离子m/z 179.1，162.0，233.1；本发明对现有检测技术存在基质干扰严重以及准确性低等问题进行了改进，具有以下优点：方法重现性好、灵敏度高、准确性好，可定性定量。
Description
技术领域
本发明属于化学分析检测技术领域，具体涉及一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法。
背景技术
谷胱甘肽（Glutathione，GSH）是一种由半胱氨酸、谷氨酸和甘氨酸这三种氨基酸通过肽键缩合而成的三肽化合物，主要有还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）两种类型，其中，还原型谷胱甘肽是主要活性成分。药理学研究表明，谷胱甘肽具有解毒、抗氧化、抗惊厥、抗血栓和抗动脉粥样硬化等作用，在医疗、食品、保健品生产及体育运动和有关生物研究领域有广泛市场。
目前测定植物性食品中谷胱甘肽的方法，主要有荧光分光光度法、可见分光光度法、紫外分光光度法、碘量法和高效液相色谱（HPLC）法等，其中HPLC法为主要测定方法，可用于复杂基质中GSH和GSSG的分离，测定结果比较准确，但不足之处在于灵敏度不高，要求样本中谷胱甘肽的含量较高。
液质联用(LC-MS/MS)又称液相色谱-质谱联用技术，它以液相色谱作为分离***，质谱为检测***。样品在质谱部分和流动相分离，被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。液质联用体现了色谱和质谱优势的互补，将色谱对复杂样品的高分离能力，与质谱具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，可以更准确地进行定性定量。
随着人们生活水平的提高，全谷物及其相关产品因其丰富的营养成分和生理活性物质倍受关注，稻米中含有丰富的谷胱甘肽，其系列产品近年来受到市场的热捧。在测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的相关研究中发现，使用高效液相色谱在检测过程中存在严重的基质干扰，对检测结果的准确性和灵敏性有较大影响。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术中的不足，提供一种准确性好、检测灵敏度高、可进行定性定量的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法。
实现本发明目的的技术方案是：一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，包括如下步骤：
⑴选择对照物质：选择纯度大于98%的还原型谷胱甘肽标准品作为对照物质；
⑵制备标准品溶液：称取还原型谷胱甘肽标准品10mg，用乙腈-水溶液溶解，定容至100mL，充分摇匀，得到浓度为100㎎/L的标准储备液；依次将标准储备液分别配制成1μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L标准工作液，避光保存；
⑶待测样品中还原型谷胱甘肽的提取：准确称取1g粉碎后的待测样品于50 mL离心管中，按一定的料液比加入提取溶剂进行超声提取，于4℃，8000 rpm/min条件下离心5分钟，取上清液过滤，得到待测样品溶液，全程避光操作；
⑷将上述待测样品溶液采用超高效液相色谱-串联质谱仪（UPLC-MS/MS）进行定量分析，具体参数条件如下：
①超高效液相色谱条件：
色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱，规格为：1.7μm，2.1×100 mm或ACQUITY UPLC BEHHILIC柱，规格为1.7μm，2.1×100mm；
流动相：水相为pH3.0，含0.1%甲酸的超纯水，有机相为乙腈或甲醇；
流速：0.2mL/min；
柱温：30℃；
进样量：10μL；
②质谱条件：
电喷雾电离（ESI）源，采用正离子模式，扫描方式为多反应监测模式；
气帘气压力：25kPa；
喷嘴电压：5.5kV；
毛细管温度：550℃；
离子源气体1：50kPa；
离子源气体2：50kPa；
碰撞气压力：Medium。
本发明所述待测样品为稻米相关产品，包括：糙米、精米、胚芽、糠粉、油糠。
本发明步骤⑵中所述的乙腈水溶液为pH3.0，含0.1%甲酸，体积比50：50的乙腈-水溶液。
本发明步骤⑶中所述的超声提取的提取时间为5～30分钟。
本发明步骤⑶中所述的超声提取的料液比为待测样品：提取溶剂=1：10～1：100。
本发明步骤⑶中所述的超声提取采用的提取溶剂为超纯水，所述的料液比为待测样品：提取溶剂=1：10，所述的超声提取的提取时间为5分钟。
本发明步骤⑷所述的流动相中有机相为乙腈或甲醇，水相为含0.1%甲酸的pH3.0的超纯水，所述有机相与水相的比例为50～75：50～25，所述的超高效液相色谱的洗脱方式为等度洗脱。
本发明步骤⑷中所述的定量分析中的待测样品中还原型谷胱甘肽含量的计算公式为：
公式中：X — 还原型谷胱甘肽的含量，单位μg/kg；
Csi — 标准溶液中还原型谷胱甘肽的浓度，单位μg/L；
Ci — 样品上机液中还原型谷胱甘肽的浓度，单位μg/L；
Asi — 标准溶液中还原型谷胱甘肽的峰面积；
Ai — 试样溶液中还原型谷胱甘肽的峰面积；
V1 — 样品定容体积，单位mL；
V2 — 样品体积，单位mL；
m — 样品称样量，单位g；
f — 稀释倍数。
本发明步骤⑷中所述质谱的采集参数为：母离子的质荷比（m/z）为308.1，子离子的质荷比（m/z）分别为179.1、162.0、233.1，其中质荷比（m/z）179.1为定量离子；去簇电压26V，对应的子离子碰撞气能量分别为25V、23V和22V。
采用上述技术方案后，本发明的有益效果在于：本发明的检测方法具有选择性好、灵敏度高、准确性好、可进行定性定量等优点；本发明通过使用UPLC-MS/MS能够快速、高效、准确地对稻米以及相关产品中的还原性谷胱甘肽进行限量测试，能够有效提高还原性谷胱甘肽的检测灵敏度，有效避免基质干扰。
附图说明
图1 是实施例实验2中使用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱标准溶液图谱；
图2 是实施例实验2中使用ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱标准溶液图谱（有机相为乙腈）；
图3 是实施例实验2中使用ACQUITY UPLC BEH HILIC色谱柱标准溶液图谱（有机相为甲醇）；
图4 是实施例实验3中提取溶剂依次为纯水、盐酸、乙醇所得样品溶液图谱；
图5 是实施例实验6还原型谷胱甘肽标准曲线图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，包括以下步骤：
⑴选择对照物质：选择纯度大于98%的还原型谷胱甘肽标准品作为对照物质；
⑵制备标准品溶液：称取还原型谷胱甘肽标准品10mg，用乙腈-水溶液溶解，定容至100mL，充分摇匀，得到浓度为100㎎/L的标准储备液；依次将标准储备液分别配制成1μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L标准工作液，避光保存；
⑶待测样品中还原型谷胱甘肽的提取：准确称取1g粉碎后的待测样品于50mL离心管中，按一定的料液比加入提取溶剂进行超声提取，于4℃，8000 rpm/min条件下离心5分钟，取上清液过滤，得到待测样品溶液，全程避光操作；
⑷将上述待测样品溶液采用超高效液相色谱-串联质谱仪进行定量分析，具体参数条件如下：
①超高效液相色谱条件：
色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱，规格为：1.7μm，2.1×100 mm或ACQUITY UPLC BEHHILIC柱，规格为1.7μm，2.1×100mm；
流动相：水相为pH3.0，含0.1%甲酸的超纯水，有机相为乙腈或甲醇；
流速：0.2mL/min；
柱温：30℃；
进样量：10μL；
②质谱条件：
电喷雾电离（ESI）源，采用正离子模式，扫描方式为多反应监测模式；
气帘气压力：25kPa；
喷嘴电压：5.5kV；
毛细管温度：550℃；
离子源气体1：50kPa；
离子源气体2：50kPa；
碰撞气压力：Medium。
本发明所述待测样品为稻米相关产品，包括：糙米、精米、胚芽、糠粉、油糠。
本发明步骤⑵中所述的乙腈水溶液为pH3.0，含0.1%甲酸，体积比50：50的乙腈-水溶液。
本发明步骤⑶中所述的超声提取的提取时间为5～30分钟。
本发明步骤⑶中所述的超声提取的料液比为待测样品：提取溶剂=1：10～1：100。
本发明步骤⑶中所述的超声提取溶剂为超纯水、乙醇或0.01％～0.1％的盐酸水溶液。
本发明步骤⑷所述的流动相中有机相为乙腈或甲醇，水相为含0.1%甲酸的pH3.0的超纯水，所述有机相与水相的比例为50～75：50～25，所述的超高效液相色谱的洗脱方式为等度洗脱。
本发明步骤⑷中所述的定量分析中的待测样品中还原型谷胱甘肽含量的计算公式为：
公式中：X — 还原型谷胱甘肽的含量，单位μg/kg；
Csi — 标准溶液中还原型谷胱甘肽的浓度，单位μg/L；
Ci — 样品上机液中还原型谷胱甘肽的浓度，单位μg/L；
Asi — 标准溶液中还原型谷胱甘肽的峰面积；
Ai — 试样溶液中还原型谷胱甘肽的峰面积；
V1 — 样品定容体积，单位mL；
V2 — 样品体积，单位mL；
m — 样品称样量，单位g；
f — 稀释倍数；
实际检测过程中由计算机***自动计算结果。
实验例
实验用仪器与试剂：
AB Sciex 3200 QTRAP串联质谱仪（美国AB Sciex公司）；AQUITY UPLC H-Class 超高效液相色谱仪（美国waters公司）；MilliQ去离子水发生器（美国Millipore公司）。
乙腈、甲酸、甲醇、乙醇以及盐酸均为HPLC级别，CNW公司；还原性谷胱甘肽（纯度98%，Acros公司）。
实验1：质谱分析条件优化
标准品溶液制备：称取还原型谷胱甘肽标准品10mg（精确到0.1mg），用乙腈-水（含0.1%甲酸pH3.0）（50：50），溶解，定容至100mL，充分摇匀，得到标准储备液（100mg/L）；将标准储备液分别配制成1μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500 μg/L标准工作液，避光保存。
质谱分析条件：电喷雾电离（ESI）源，采用正离子模式，扫描方式为多反应监测模式；气帘气压力：25kPa；喷嘴电压：5.5kV；毛细管温度：550℃ ；离子源气体1：50kPa；离子源气体2：50kPa；碰撞气压力：Medium。按照上述质谱条件，取浓度为500μg/L 标准工作液10μL注入质谱仪，分别优化碰撞能量（CE）和去簇电压（DP）、碰撞时入口电压（EP）、碰撞时出口电压（CXP）来提高还原型谷胱甘肽的响应强度，得到最优化的质谱采集参数见表Ⅰ：
表Ⅰ 质谱采集参数
实验2：超高效液相色谱条件优化
根据实验1所得的标准溶液以及质谱条件，超高效液相色谱条件为：色谱柱：ACQUITYUPLC BEH C18柱（1.7μm，2.1×100mm）或ACQUITY UPLC BEH HILIC柱（1.7μm，2.1×100mm）；流动相：水相为超纯水（含0.1%甲酸，pH 3.0），有机相为乙腈或甲醇；流速：0.2 mL/min；柱温：30 ℃；进样量：10μL。取上述浓度为500μg/L 标准工作液10μL，注入液相色谱仪，分别考察不同色谱柱和不同流动相配比下，还原型谷胱甘肽的峰形和响应强度，记录色谱图。
实验结果表明，使用ACQUITY UPLC BEH C18柱，采用流动相比例为乙腈：甲酸水（10：90）时，色谱图如图1所示，所得峰形和响应较好。使用ACQUITY UPLC BEH HILIC柱，采用流动相比例为乙腈：甲酸水（50：50）时，色谱图如图2所示，所得峰形和响应最佳；采用流动相比例为甲醇：甲酸水（75：25）时，响应也较好，色谱图如图3所示，所得峰形较宽，存在拖尾迹象。
实验3：样品提取溶剂的选择
待测样品溶液制备：各准确称取1g（精确到0.01g）粉碎后糙米于50mL离心管中，分别加入超纯水、乙醇、0.01%盐酸溶液25mL进行超声提取5min，于4℃，8000rpm/min下离心5min，取上清液过滤膜，得到待测样品溶液（全程避光操作）。
根据实验1所得的标准溶液、质谱条件以及实验2所确定的最佳超高效液相色谱测试条件，取上述待测样品溶液10μL，注入液相色谱质谱仪，记录色谱图。
检测结果如图4所示，用乙醇提取时，杂质干扰较大，峰形和保留时间都存在一定的偏离；超纯水和0.01%盐酸相比，二者提取效果相近，其中超纯水提效果更佳。
实验4：样品提取时间的选择
待测样品溶液制备：准确称取1g（精确到0.01g）粉碎后油糠于50mL离心管中，加入超纯水25mL进行超声提取，于4℃，8000 rpm/min下离心5min，取上清液过滤膜，得到待测样品溶液（全程避光操作）。其中，超声提取时间分别为5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min，每组做两个平行实验。
根据实验1所得的标准溶液、质谱条件以及实验2所确定的最佳超高效液相色谱条件，取上述待测样品溶液10μL，注入液相色谱质谱仪，记录检测结果。
表Ⅱ 油糠样品不同提取时间的检测结果
检测结果如表Ⅱ所示，提取时间5min和10min的结果相似，提取时间30min内的检测结果较为合理。随着提取时间的延长，还原性谷胱甘肽含量逐渐降低，推测其可能的影响因素：⑴随着提取时间的延长，杂质溶出增多，干扰逐渐增大，从而影响出峰；⑵随着提取时间的延长，还原型谷胱甘肽在水相中发生氧化，导致浓度产生变化。
实验5：样品提取过程料液比的选择
待测样品溶液制备：准确称取1g（精确到0.01g）粉碎后胚芽于50 mL离心管中，加入超纯水进行超声提取5 min，于4℃，8000 rpm/min下离心5min，取上清液过滤膜，得到待测样品溶液（全程避光操作）。其中，料液比分别为：1：10、1：25、1：50、1：100，每组做两个平行实验。
根据实验1所得的标准溶液、质谱条件以及实验2所确定的最佳超高效液相色谱条件，取上述待测样品溶液10μL，注入液相色谱质谱仪，记录检测结果。
表Ⅲ 胚芽样品不同提取料液比的检测结果
检测结果如表Ⅲ所示，料液比为1：10和1：25时所检测的浓度相近。当料液比为1：50 和1：100时，样品稀释倍数增大，丰度比存在偏差，不利于定性定量，使得检测结果可能存在一些偏差。
实验6：还原型谷胱甘肽标准曲线与回归方程制作
标准品溶液制备：称取还原型谷胱甘肽标准品10mg（精确到0.1mg），用乙腈-水（含0.1%甲酸pH3.0）（50：50），溶解，定容至100mL，充分摇匀，得到标准储备液（100mg/L）；再依次将标准储备液分别配制成1μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L标准工作液，避光保存。
根据实验1所得的质谱条件以及实验2所确定的最佳高效液相色谱条件，取上述标准工作液各10μL，注入液相色谱质谱仪，记录色谱图。
检测结果如图5所示。对于还原型谷胱甘肽，其线性为：y = 1209.05856x，R＝0.99993（其中x为还原型GSH浓度，y为相应的峰面积）；在0-500μg/L之间呈现良好的线性关系，可用于还原型谷胱甘肽的定量测定。
实验7：不同还原型谷胱甘肽添加浓度的回收率和精密度测定
待测样品溶液制备：分别准确称取1g（精确到0.01g）粉碎后的待测精米、糠粉，和2组不同还原型谷胱甘肽添加浓度（糠粉：5μg/kg，15μg/kg，30μg/kg；精米：1μg/kg，5μg/kg，10μg/kg ）于50mL 离心管中，加入25mL超纯水进行超声提取5min，于 4 ℃，8000rpm/min下离心5min，取上清液过滤膜，得到待测样品溶液（全程避光操作）。
根据实验1所得的标准溶液、质谱条件以及实验2所确定的最佳超高效液相色谱条件，分别取上述待测样品溶液10μL，注入液相色谱质谱仪，记录检测结果。
回收率计算公式为：
回收率 ＝ (加入标品后含量 - 样品含量) / 加入标品量 * 100％。
表Ⅳ 不同样品加标回收率结果
检测结果如表Ⅳ所示，通过加标试验以及加标回收率的计算，标准溶液组分加标平均回收率在95.60-98.40％之间，糠粉和精米样品所得数据相对标准偏差(RSD)分别为1.51％和1.50%，符合实验室质量控制规范—食品理化检测的相关要求。同时也进一步证实了该方法具有较高的回收率和准确率，适用于稻米中还原型谷胱甘肽的测定。
Claims (10)
1.一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
⑴选择对照物质：选择纯度大于98%的还原型谷胱甘肽标准品作为对照物质；
⑵制备标准品溶液：称取还原型谷胱甘肽标准品10mg，用乙腈-水溶液溶解，定容至100mL，充分摇匀，得到浓度为100㎎/L的标准储备液；依次将标准储备液分别配制成1μg/L、10μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L、500μg/L标准工作液，避光保存；
⑶待测样品中还原型谷胱甘肽的提取：准确称取1g粉碎后的待测样品于50mL离心管中，按一定的料液比加入提取溶剂进行超声提取，于4℃，8000rpm/min条件下离心5分钟，取上清液过滤，得到待测样品溶液，全程避光操作；
⑷将上述待测样品溶液采用超高效液相色谱-串联质谱仪进行定量分析，具体参数条件如下：
①超高效液相色谱条件：
色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱，规格为：1.7μm，2.1×100 mm或ACQUITY UPLC BEHHILIC柱，规格为1.7μm，2.1×100mm；
流动相：水相为pH3.0，含0.1%甲酸的超纯水，有机相为乙腈或甲醇；
流速：0.2mL/min；
柱温：30℃；
进样量：10μL；
②质谱条件：
电喷雾电离（ESI）源，采用正离子模式，扫描方式为多反应监测模式；
气帘气压力：25kPa；
喷嘴电压：5.5kV；
毛细管温度：550℃；
离子源气体1：50kPa；
离子源气体2：50kPa；
碰撞气压力：Medium。
2.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于所述待测样品为稻米相关产品，包括：糙米、精米、胚芽、糠粉、油糠。
3.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑵中所述的乙腈水溶液为pH3.0，含0.1%甲酸，体积比50：50的乙腈-水溶液。
4.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑶中所述的超声提取的提取时间为5～30分钟。
5.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑶中所述的超声提取的料液比为待测样品：提取溶剂=1：10～1：100。
6.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑶中所述的超声提取的提取溶剂为超纯水、乙醇或0.01％～0.1％的盐酸水溶液。
7.据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑶中所述的超声提取采用的提取溶剂为超纯水，所述的料液比为待测样品：提取溶剂=1：10，所述的超声提取的提取时间为5分钟。
8.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑷所述的流动相中有机相为乙腈或甲醇，水相为含0.1%甲酸的pH3.0的超纯水，所述有机相与水相的比例为50～75：50～25，所述的超高效液相色谱的洗脱方式为等度洗脱。
9.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑷中所述的定量分析中的待测样品中还原型谷胱甘肽含量的计算公式为：
公式中：X—还原型谷胱甘肽的含量，单位μg/kg；
Csi—标准溶液中还原型谷胱甘肽的浓度，单位μg/L；
Ci—样品上机液中还原型谷胱甘肽的浓度，单位μg/L；
Asi—标准溶液中还原型谷胱甘肽的峰面积；
Ai—试样溶液中还原型谷胱甘肽的峰面积；
V1—样品定容体积，单位mL；
V2—样品体积，单位mL；
m—样品称样量，单位g；
f—稀释倍数。
10.据权利要求1所述的一种超高效液相色谱-串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法，其特征在于步骤⑷中所述质谱的采集参数为：母离子的质荷比m/z为308.1；子离子的质荷比m/z分别为179.1、162.0、233.1，其中质荷比m/z179.1为定量离子；去簇电压26V，对应的子离子碰撞气能量分别为25V、23V和22V。
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310026046.XA CN117007694A (zh) | 2020-09-03 | 2020-09-03 | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 |
| CN202010916104.2A CN111912926A (zh) | 2020-09-03 | 2020-09-03 | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010916104.2A CN111912926A (zh) | 2020-09-03 | 2020-09-03 | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310026046.XA Division CN117007694A (zh) | 2020-09-03 | 2020-09-03 | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111912926A true CN111912926A (zh) | 2020-11-10 |
Family
ID=73266628
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310026046.XA Pending CN117007694A (zh) | 2020-09-03 | 2020-09-03 | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 |
| CN202010916104.2A Pending CN111912926A (zh) | 2020-09-03 | 2020-09-03 | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310026046.XA Pending CN117007694A (zh) | 2020-09-03 | 2020-09-03 | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (2) | CN117007694A (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113008970A (zh) * | 2021-02-25 | 2021-06-22 | 中国食品药品检定研究院 | 科博肽中杂质的鉴定方法及科博肽纯度的检测方法 |
| CN113358808A (zh) * | 2021-07-01 | 2021-09-07 | 佳木斯大学 | 一种利用反相色谱保留指数对极性化合物定性鉴别的方法 |
| CN113552258A (zh) * | 2021-07-21 | 2021-10-26 | 黑龙江省科学院大庆分院 | 一种基于代谢组学技术挖掘工业***激素调控应答基因的方法 |
| CN114354796A (zh) * | 2021-12-30 | 2022-04-15 | 江苏新河农用化工有限公司 | 一种测定丙半胱氨酸含量的hplc检测方法 |
| CN115469043A (zh) * | 2022-09-26 | 2022-12-13 | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 生姜根状茎、地上茎和叶片中游离氨基酸的液相色谱-串联质谱检测方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0650953A (ja) * | 1992-07-29 | 1994-02-25 | Shimadzu Corp | グルタチオン分析方法 |
| CN106526003A (zh) * | 2016-10-14 | 2017-03-22 | 三峡大学 | 一种酵母细胞及酵母抽提物中还原型谷胱甘肽的检测方法 |
| CN106526004A (zh) * | 2016-10-14 | 2017-03-22 | 安琪酵母股份有限公司 | 一种富含谷胱甘肽酵母抽提物中氧化型谷胱甘肽杂质的检测方法 |
| CN106770870A (zh) * | 2016-12-06 | 2017-05-31 | 北京水木源生物科技有限公司 | 一种小麦胚芽中还原性谷胱甘肽含量的检测方法 |
-
2020
- 2020-09-03 CN CN202310026046.XA patent/CN117007694A/zh active Pending
- 2020-09-03 CN CN202010916104.2A patent/CN111912926A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0650953A (ja) * | 1992-07-29 | 1994-02-25 | Shimadzu Corp | グルタチオン分析方法 |
| CN106526003A (zh) * | 2016-10-14 | 2017-03-22 | 三峡大学 | 一种酵母细胞及酵母抽提物中还原型谷胱甘肽的检测方法 |
| CN106526004A (zh) * | 2016-10-14 | 2017-03-22 | 安琪酵母股份有限公司 | 一种富含谷胱甘肽酵母抽提物中氧化型谷胱甘肽杂质的检测方法 |
| CN106770870A (zh) * | 2016-12-06 | 2017-05-31 | 北京水木源生物科技有限公司 | 一种小麦胚芽中还原性谷胱甘肽含量的检测方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| XUENI SUN等: "Quantification and 13C-Tracer analysis of total reduced glutathione by HPLC-QTOFMS/MS", 《ANALYTICA CHIMICA ACTA》 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113008970A (zh) * | 2021-02-25 | 2021-06-22 | 中国食品药品检定研究院 | 科博肽中杂质的鉴定方法及科博肽纯度的检测方法 |
| CN113008970B (zh) * | 2021-02-25 | 2022-07-08 | 中国食品药品检定研究院 | 科博肽中杂质的鉴定方法及科博肽纯度的检测方法 |
| CN113358808A (zh) * | 2021-07-01 | 2021-09-07 | 佳木斯大学 | 一种利用反相色谱保留指数对极性化合物定性鉴别的方法 |
| CN113552258A (zh) * | 2021-07-21 | 2021-10-26 | 黑龙江省科学院大庆分院 | 一种基于代谢组学技术挖掘工业***激素调控应答基因的方法 |
| CN113552258B (zh) * | 2021-07-21 | 2023-11-03 | 黑龙江省科学院大庆分院 | 一种基于代谢组学技术挖掘工业***激素调控应答基因的方法 |
| CN114354796A (zh) * | 2021-12-30 | 2022-04-15 | 江苏新河农用化工有限公司 | 一种测定丙半胱氨酸含量的hplc检测方法 |
| CN115469043A (zh) * | 2022-09-26 | 2022-12-13 | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 生姜根状茎、地上茎和叶片中游离氨基酸的液相色谱-串联质谱检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN117007694A (zh) | 2023-11-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111912926A (zh) | 一种超高效液相色谱—串联质谱法测定稻米中还原型谷胱甘肽含量的方法 | |
| US9063159B2 (en) | LC-MS separation and detection of vitamin D metabolites | |
| Liu et al. | Global characterization of neutral saccharides in crude and processed Radix Rehmanniae by hydrophilic interaction liquid chromatography tandem electrospray ionization time-of-flight mass spectrometry | |
| US11513130B2 (en) | Detection of vitamins A and E by tandem mass spectrometry | |
| Yin et al. | Sensitive analysis of 33 free amino acids in serum, milk, and muscle by ultra-high performance liquid chromatography-quadrupole-orbitrap high resolution mass spectrometry | |
| Wang et al. | A combination of ultrasonic‐assisted extraction with RRLC‐QQQ method for the determination of artemisinin in the Chinese herb Artemisia annua L. | |
| Chen et al. | Determination of ellagic acid in wine by solid-phase extraction–ultra-high performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry | |
| CN108508130B (zh) | 一种超高效合相色谱-串联质谱技术拆分、测定手性农药甲霜灵和烯酰吗啉对映体的方法 | |
| Hua et al. | Development of a method Sin-QuEChERS for the determination of multiple pesticide residues in oilseed samples | |
| CN113607854A (zh) | 同时检测多种维生素的方法和检测试剂盒 | |
| CN113376264A (zh) | 检测样品中的单糖的方法 | |
| Yang et al. | Determination of palonosetron in human plasma by ultra performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetic study | |
| CN115980211A (zh) | 一种定量检测25-羟基维生素d的试剂盒、方法及其应用 | |
| RU2473079C1 (ru) | Способ обнаружения комплекса ксенобиотиков в биологической жидкости при допинговом контроле и устройство для его осуществления | |
| CN113267589B (zh) | 一种头发中16种合成***素类物质及其代谢物的分析方法 | |
| Lin et al. | Use of 4-chloro-3, 5-dinitrobenzotrifluoride (CNBF) derivatization and ultrahigh-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry for the determination of 20 free amino acids in Chinese jujube date | |
| CN108680676B (zh) | 定量检测乳制品中β-受体阻断剂类药物的方法 | |
| JP2011095165A (ja) | 液体クロマトグラフィーを用いたビタミンｕの精製および分析法 | |
| CN107515262B (zh) | 同时测定动物血浆中林可霉素和庆大霉素的液质联用方法 | |
| CN111413439A (zh) | 一种快速亲水相互作用色谱-串联质谱法测定血浆中二甲双胍的方法 | |
| CN104991028B (zh) | Lc‑ms测试物中不挥发性缓冲盐含量的降低方法 | |
| Lee et al. | A convenient HPLC/ELSD method for the quantitative analysis of betaine in Lycium chinense | |
| CN113049705B (zh) | 一种禾谷镰刀菌中T6P和Tre的UPLC-MS/MS检测方法 | |
| CN118010892B (zh) | 一种基于金雀异黄酮含量鉴别人工饲喂蜂王浆的方法 | |
| CN109324139A (zh) | 一种烟叶中玉米素核苷液液萃取-液相色谱-串联质谱的测定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 413200 Xingsheng Avenue Industrial Park No. 1, Nanxian County, Yiyang City, Hunan Province Applicant after: Chen Keming Food Co.,Ltd. Address before: 413200 Xingsheng Avenue Industrial Park No. 1, Nanxian County, Yiyang City, Hunan Province Applicant before: KEMEN NOODLE MANUFACTURING Co.,Ltd. |
|
| CB02 | Change of applicant information | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20201110 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |